CZ302449B6 - Vakcinacní prostredky - Google Patents
Vakcinacní prostredky Download PDFInfo
- Publication number
- CZ302449B6 CZ302449B6 CZ20031093A CZ20031093A CZ302449B6 CZ 302449 B6 CZ302449 B6 CZ 302449B6 CZ 20031093 A CZ20031093 A CZ 20031093A CZ 20031093 A CZ20031093 A CZ 20031093A CZ 302449 B6 CZ302449 B6 CZ 302449B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- cpg
- immunogenic composition
- antigen
- neu
- saponin
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title description 59
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 84
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 76
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 67
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 67
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 67
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 claims abstract description 64
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims abstract description 63
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 40
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims abstract description 38
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 claims abstract description 38
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims abstract description 22
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims abstract description 16
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 14
- 101100314454 Caenorhabditis elegans tra-1 gene Proteins 0.000 claims description 48
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 32
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 32
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 24
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims description 22
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 21
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 claims description 17
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 claims description 12
- 102000000440 Melanoma-associated antigen Human genes 0.000 claims description 10
- 108050008953 Melanoma-associated antigen Proteins 0.000 claims description 10
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 claims description 10
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 claims description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 10
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract description 7
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 58
- CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N cytidylyl-(3'->5')-guanosine Chemical class O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O)[C@@H](CO)O1 CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N 0.000 description 44
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 41
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 33
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 31
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 31
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 27
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 23
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 23
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 21
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 21
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 18
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 18
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 18
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 16
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 16
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 15
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 15
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 14
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 14
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 12
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 12
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DFUSDJMZWQVQSF-XLGIIRLISA-N (2r)-2-methyl-2-[(4r,8r)-4,8,12-trimethyltridecyl]-3,4-dihydrochromen-6-ol Chemical compound OC1=CC=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1 DFUSDJMZWQVQSF-XLGIIRLISA-N 0.000 description 11
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 11
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 9
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 9
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 9
- 230000004044 response Effects 0.000 description 9
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 9
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 description 8
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 7
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 7
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 7
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 7
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 6
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 102100034872 Kallikrein-4 Human genes 0.000 description 6
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 108010024383 kallikrein 4 Proteins 0.000 description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N Digitonin Natural products CC1CCC2(OC1)OC3C(O)C4C5CCC6CC(OC7OC(CO)C(OC8OC(CO)C(O)C(OC9OCC(O)C(O)C9OC%10OC(CO)C(O)C(OC%11OC(CO)C(O)C(O)C%11O)C%10O)C8O)C(O)C7O)C(O)CC6(C)C5CCC4(C)C3C2C QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 5
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 5
- UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N digitonin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)C[C@@H](O)[C@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO7)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@@H](CO)O5)O)C[C@@H]4CC[C@H]3[C@@H]2[C@@H]1O)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N 0.000 description 5
- UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N digitonine Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CC(O)C(OC5C(C(O)C(OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)CO7)O)C(O)C(CO)O6)OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)C(CO)O7)O)C(O)C(CO)O6)O)C(CO)O5)O)CC4CCC3C2C2O)C)C2OC11CCC(C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940011399 escin Drugs 0.000 description 5
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 5
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 5
- 238000012737 microarray-based gene expression Methods 0.000 description 5
- 238000012243 multiplex automated genomic engineering Methods 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 5
- -1 β-hydroxymyristoyl Chemical group 0.000 description 5
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100037840 Dehydrogenase/reductase SDR family member 2, mitochondrial Human genes 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 101710188053 Protein D Proteins 0.000 description 4
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 4
- 101710132893 Resolvase Proteins 0.000 description 4
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 4
- 229930186222 escin Natural products 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 4
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 4
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 4
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 4
- AXNVHPCVMSNXNP-GKTCLTPXSA-N Aescin Natural products O=C(O[C@H]1[C@@H](OC(=O)C)[C@]2(CO)[C@@H](O)C[C@@]3(C)[C@@]4(C)[C@@H]([C@]5(C)[C@H]([C@](CO)(C)[C@@H](O[C@@H]6[C@@H](O[C@H]7[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O7)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]7[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O7)[C@@H](C(=O)O)O6)CC5)CC4)CC=C3[C@@H]2CC1(C)C)/C(=C/C)/C AXNVHPCVMSNXNP-GKTCLTPXSA-N 0.000 description 3
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 241001092142 Molina Species 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 3
- 241001644525 Nastus productus Species 0.000 description 3
- 101100525628 Picea mariana SB62 gene Proteins 0.000 description 3
- 241001454523 Quillaja saponaria Species 0.000 description 3
- 235000009001 Quillaja saponaria Nutrition 0.000 description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 3
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 3
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K dioxido-sulfanylidene-sulfido-$l^{5}-phosphane Chemical compound [O-]P([O-])([S-])=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 3
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 3
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- AXNVHPCVMSNXNP-OXPBSUTMSA-N Aescin Chemical compound O([C@@H]1[C@H](O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@]1(CO)C)C)(C)C[C@@H](O)[C@@]1(CO)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](C(C[C@H]14)(C)C)OC(=O)C(\C)=C/C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AXNVHPCVMSNXNP-OXPBSUTMSA-N 0.000 description 2
- 108700023418 Amidases Proteins 0.000 description 2
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 2
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- 101100328096 Caenorhabditis elegans clec-88 gene Proteins 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 2
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 2
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 2
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 2
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 108091081548 Palindromic sequence Proteins 0.000 description 2
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 2
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 2
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 2
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 2
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 102000005922 amidase Human genes 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 229940093314 beta-escin Drugs 0.000 description 2
- AXNVHPCVMSNXNP-BEJCRFBNSA-N beta-escin Natural products CC=C(/C)C(=O)O[C@H]1[C@H](OC(=O)C)[C@]2(CO)[C@H](O)C[C@@]3(C)C(=CC[C@@H]4[C@@]5(C)CC[C@H](O[C@H]6O[C@@H]([C@H](O[C@H]7O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]7O)[C@H](O)[C@@H]6O[C@@H]8O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]8O)C(=O)O)[C@](C)(CO)[C@@H]5CC[C@@]34C)[C@@H]2CC1(C)C AXNVHPCVMSNXNP-BEJCRFBNSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 2
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 101150093710 clec-87 gene Proteins 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical group 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 2
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 2
- 235000010181 horse chestnut Nutrition 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 108700032552 influenza virus INS1 Proteins 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- KDWFDOFTPHDNJL-TUBOTVQJSA-N odn-2006 Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=O)O[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]2COP(O)(=S)O[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]2COP(O)(=O)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=O)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=O)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=O)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=O)O[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]2COP(O)(=O)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=O)O[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]2COP(O)(=S)O[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]2COP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(S)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)O)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)O)N2C(N=C(N)C=C2)=O)O)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)O)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)O)N2C(N=C(N)C=C2)=O)O)[C@@H](O)C1 KDWFDOFTPHDNJL-TUBOTVQJSA-N 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 2
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- YFESOSRPNPYODN-RSMWSHJLSA-N (2s,3s,4s,5r,6r)-6-[[(4s,6ar,6bs,8r,8ar,9r,10r,14br)-9-acetyloxy-8-hydroxy-4,8a-bis(hydroxymethyl)-4,6a,6b,11,11,14b-hexamethyl-10-[(z)-2-methylbut-2-enoyl]oxy-1,2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,12a,14,14a-tetradecahydropicen-3-yl]oxy]-4-hydroxy-3,5-bis[[(2s,3r,4s, Chemical compound O([C@@H]1[C@H](O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)OC1CC[C@]2(C)C3CC=C4[C@@]([C@@]3(CCC2[C@]1(CO)C)C)(C)C[C@@H](O)[C@@]1(CO)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](C(CC14)(C)C)OC(=O)C(\C)=C/C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O.O([C@@H]1[C@H](O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)OC1CC[C@]2(C)C3CC=C4[C@@]([C@@]3(CCC2[C@]1(CO)C)C)(C)C[C@@H](O)[C@@]1(CO)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](C(CC14)(C)C)OC(=O)C(/C)=C/C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O YFESOSRPNPYODN-RSMWSHJLSA-N 0.000 description 1
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000157282 Aesculus Species 0.000 description 1
- 241000157280 Aesculus hippocastanum Species 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 102100035526 B melanoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 101100193519 Caenorhabditis elegans qui-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 240000006162 Chenopodium quinoa Species 0.000 description 1
- 235000015493 Chenopodium quinoa Nutrition 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 101100481408 Danio rerio tie2 gene Proteins 0.000 description 1
- 240000001879 Digitalis lutea Species 0.000 description 1
- 206010017943 Gastrointestinal conditions Diseases 0.000 description 1
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 description 1
- NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N GnRH Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 1
- 101000874316 Homo sapiens B melanoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000628547 Homo sapiens Metalloreductase STEAP1 Proteins 0.000 description 1
- 101000874141 Homo sapiens Probable ATP-dependent RNA helicase DDX43 Proteins 0.000 description 1
- 101001136592 Homo sapiens Prostate stem cell antigen Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102100026712 Metalloreductase STEAP1 Human genes 0.000 description 1
- MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N Muraminsaeure Natural products OC(=O)C(C)OC1C(N)C(O)OC(CO)C1O MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100369076 Mus musculus Tdgf1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100481410 Mus musculus Tek gene Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 102000036673 PRAME Human genes 0.000 description 1
- 108060006580 PRAME Proteins 0.000 description 1
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 108010013639 Peptidoglycan Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 102100035724 Probable ATP-dependent RNA helicase DDX43 Human genes 0.000 description 1
- 102100036735 Prostate stem cell antigen Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000873 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000004278 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 241000607149 Salmonella sp. Species 0.000 description 1
- 241000219287 Saponaria Species 0.000 description 1
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 1
- 101710180274 Suppressor of RNA-mediated gene silencing Proteins 0.000 description 1
- 102000000763 Survivin Human genes 0.000 description 1
- 108010002687 Survivin Proteins 0.000 description 1
- 102000057032 Tissue Kallikreins Human genes 0.000 description 1
- 108700022175 Tissue Kallikreins Proteins 0.000 description 1
- 206010064390 Tumour invasion Diseases 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013011 aqueous formulation Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000009400 cancer invasion Effects 0.000 description 1
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 101150014604 cpg-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150075908 cpg-4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150024925 cpg-7 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150087279 cpg-8 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150030550 cpg-9 gene Proteins 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 239000007933 dermal patch Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 108700020302 erbB-2 Genes Proteins 0.000 description 1
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 238000003208 gene overexpression Methods 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 1
- 229940035638 gonadotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002130 immunocastration Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037798 influenza B Diseases 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000003866 lung sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 101150082581 lytA gene Proteins 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 210000001989 nasopharynx Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002126 nonhaemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 1
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 1
- CGPPXVAUDMUIPK-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid trihydroxy(sulfanylidene)-lambda5-phosphane Chemical compound OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=S CGPPXVAUDMUIPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 229920001481 poly(stearyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000056 polyoxyethylene ether Polymers 0.000 description 1
- 229940051841 polyoxyethylene ether Drugs 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 150000003248 quinolines Chemical class 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000000601 reactogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006215 rectal suppository Substances 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000010686 shark liver oil Substances 0.000 description 1
- 229940069764 shark liver oil Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 1
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 229940093609 tricaprylin Drugs 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VLPFTAMPNXLGLX-UHFFFAOYSA-N trioctanoin Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC VLPFTAMPNXLGLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 230000001810 trypsinlike Effects 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 239000002691 unilamellar liposome Substances 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940044959 vaginal cream Drugs 0.000 description 1
- 239000000522 vaginal cream Substances 0.000 description 1
- 229940120293 vaginal suppository Drugs 0.000 description 1
- 239000006216 vaginal suppository Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001102—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/001103—Receptors for growth factors
- A61K39/001106—Her-2/neu/ErbB2, Her-3/ErbB3 or Her 4/ErbB4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001184—Cancer testis antigens, e.g. SSX, BAGE, GAGE or SAGE
- A61K39/001186—MAGE
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55577—Saponins; Quil A; QS21; ISCOMS
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55583—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6068—Other bacterial proteins, e.g. OMP
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Popisují se nové pomocné prostredky pro použití s antigeny zhoubného bujení. Adjuvans obsahuje saponin, imunostimulacní oligonukleotid a lipopolysacharid.
Description
Oblast techniky
Popisuje se nový prostředek obsahující kombinaci antigenu zhoubného bujení nebo jeho derivátu a kombinovaný pomocný prostředek obsahující imunostimulační oligonukleotid, lipopoiysacharid a saponin. Antigenem je s výhodou derivát Her-2/neu nebo antigen prostaty. Uvedený prostředek se používá pri léčbě a prevenci lidí, kteří exprimují takové antigeny.
Dosavadní stav techniky
Navzdory velkým investicím, jak z finančních, tak lidských zdrojů, zhoubné bujení zůstává jed15 ním z hlavních důvodů úmrtí. Zhoubné bujení je například příčinou úmrtí číslo jedna u žen ve věku 35 až 74 let. Karcinom prsu je nejběžnější zhoubné bujení u žen a četnost výskytu karcinomu prsu je na vzestupu. Odhaduje se, že u jedné z devíti žen byl diagnostikován karcinom prsu. Standardní přístupy léčby uvedeného onemocnění je kombinace chirurgického zákroku, ozáření a chemoterapie. Tyto zákroky j sou u jistých typů maligních nádorů velmi úspěšné. Avšak, jestliže se zhoubné bujení prsu diagnostikuje pozdě, je velmi často neléčitelné. Je nezbytné vyvinout jiný přístup umožňující včasnou diagnostiku a léčbu.
Imunostimulační oligonukleotidy obsahující nemetylované dinukleotidy CpG jsou známy jako adjuvans, když se aplikují systémovým a mukózním způsobem (popisuje se v patentovém doku25 mentu WO 96/02555, EP 468 520 a v publikaci Davis et al., J. Immunol., 1998, 160(2):870 až 876, McCluskie and Davis, J. Immunol., 1998, 161(9):4463 až 6). CpG je zkratka dinukleotidových motivů cytosin-guanosin přítomných v DNA. Pozorovalo se, že frakce DNA BCG mohou mít protinádorový účinek. V dalších studiích se ukázalo, že syntetické oligonukleotidy získané ze sekvencí genu BCG jsou schopné vyvolat imunostimulační účinky (jak in vitro, tak in vivo).
Ukázalo se, že jisté palindromické sekvence zahrnující centrální motiv CG vykazují uvedenou aktivitu. Hlavní úloha motivu CG pri imunostimulaci se popisuje později v publikaci Krieg, Nátuře 374, str. 546, 1995. Detailní analýza ukázala, že motiv CG musí být v kontextu s jistými sekvencemi a že uvedené sekvence se běžně vyskytují v bakteriální DNA, ale nikoliv v DNA obratlovců. Imunostimulační sekvencí je často purin, purin, C, G, pyrimidin, pyrimidin, kde dinukleotidový motiv CG není mety lo ván, ale jiné nemetylované sekvence CpG jsou známy jako imunostimulanty a mohou se použít podle vynálezu.
Palindromické sekvence jsou přítomny jako určité kombinace šesti nukleotidů. Několik těchto motivů, buď jako repetice jednoho motivu, nebo jako kombinace různých motivů, se může vyskytovat v některém oligonukleotidů. Přítomnost jedné nebo více uvedených imunostimulačních sekvencí obsahujících oligonukleotidy může aktivovat různé imunitní subsystémy, které zahrnují přirozené smrtící buňky (které produkují interferon γ a mají cytolytickou aktivitu) a makrofágy (popisuje se v publikaci Wooldrige et al., vol. 89 (no.8), 1977). Neprokázalo se, že jiné sekvence, které obsahují jiný nemetylovaný CpG a které nemají tuto konvenční nukleoti45 dovou sekvenci, j sou imunomodulační.
Jestliže se CpG začlení do vakcinačních prostředků, zavádí se v obecném případě jako volný roztok spolu s volným antigenem (popisuje se v patentovém dokumentu WO 96/02555 a v publikaci McCluskie and Davis, J. Immunol., 1998, 161(9):4463 až 6)) nebo je s antigenem spojen kova50 lentní vazbou (popisuje se v patentovém dokumentu PCT č. WO 98/16247) nebo se připraví společně s nosičem, jako je hydroxid hlinitý (jako v případě hepatitidového povrchového antigenu, což se popisuje v publikaci Davis et al., J. Immunol., 1998, 160(2):870 až 876), Davis et al., J. Immunol,, 1998, 160(2):870 až 876, Brazolot-Millan et al., Proč. Nati. Acad. Sci., USA, 1998, 95(26), 15553 až 8).
-1 CZ 302449 B6
Pomocné prostředky podle vynálezu zahrnují ve výhodných provedeních vynálezu alespoň jedno adjuvans získané z enterobakteriálního tipopolysacharidu.
Je známo, že enterobakteriální lípopolysacharid (LPS) je silný stimulátor imunitního systému, 5 ačkoliv jeho použití jako adjuvans je omezeno jeho toxickými účinky. Netoxický derivát LPS, kterým je monofosforyllipid A (MPL), jenž vznikl odstraněním jaderné sacharidové skupiny a fosfátu z glukozaminu, se popisuje v publikaci Ribi et al., 1986, Immunology and immunopharmacology of bacterial endotoxins, Plenům Publ. Corp., NY, str. 407 až 419 a vykazuje následující strukturu:
Další detoxifikovaná verze MPL vznikla odstraněním acylového řetězce z polohy 3 hlavního řetězce disacharidu a nazývá se 3-O-deacylmonofosforyllipid A (3D-MPL). Tento derivát se může čistit a připravit způsobem popsaným v dokumentu GB 2122204 B. Tento dokument také popisuje přípravu difosforyllipidu A a jeho 3-O-deacylovaných variant. Výhodná forma 3DMPL je emulze, která obsahuje malé částice s průměrem menším než 0,2 pm, přičemž způsob výroby se popisuje v dokumentu WO 94/21 292. Vodné přípravky obsahující monofosforyllipid A a povrchově aktivní činidla se popisují v dokumentu WO 98/43670 A2.
Adjuvans odvozené z bakteriálního 1 ipopolysacharidu za účelem vytvoření kombinace adjuvans podle vynálezu se může čistit a zpracovávat z bakteriálních zdrojů nebo v jiném případě se může syntetizovat. Čištěný monofosforyllipid A se například popisuje v publikaci Ribi et al., 1986, Immunology and immunopharmacology of bacterial endotoxins, Plenům Publ. Corp., NY, 407 až
419 a 3-O-deacylmonofosforyllipid A a 3-O-deacyldifosforyllipid A získaný z mikroorganizmu
Salmonella sp. se popisuje v patentovém dokumentu GB 2 220 211 a US 4 912 094. Jiné čištěné a syntetické polysacharidy se popisují v dokumentu WO 98/01 139, US 6 005 099 a EP 0 729 473 B1 a v publikaci Hilgers et al., 1986, Int. Arch. Allergy. Immunol., 79(4): 392 až 6, Hilgers et al., 1987, Immunology, 60(1):141 až 6 a EP 0 549 074 Bl). Zvláště výhodným bak30 teriálním lipopolysacharidovým adjuvans jsou 3D-MPL a p(l-ó)glukosamindisacharidy popsané v patentovém dokumentu US 6 005 099 a EP 0 729 473 Bl.
Deriváty LPS, které se mohou použít podle vynálezu, jsou ty imunostimulanty, které jsou podobné strukturou imunostimulantům LPS nebo MPL nebo 3D-MPL. Deriváty LPS mohou být acylované monosacharidy, které tvoří část shora v textu uvedené struktury MPL.
Výhodné disacharidové adjuvans je čištěný nebo syntetický lipid A obecného vzorce:
_ 9 .
kde symbol R2 může být vodík nebo dihydrogenfosforečnan. Symbol R3 může být acylový řetězec nebo β-hydroxymyristoyl nebo zbytek 3-acyloxyacyl obecného vzorce c»o
I
CH:
CH—O (CHi)r R4 CHj
O
H kde symbol R4 je io a symboly X a Y mají hodnotu od 0 do přibližně 20.
Kombinace 3D-MPL a pomocné látky saponin, která se získala z kůry stromu Quillaja Saponaria molina, se popisuje v patentovém dokumentu EP 0 761 231 B. WO 95/17 210 popisuje emulzní systém adjuvans založený na skvalenu, α-tokoíerolu a polyoxyetylensorbitanmono15 oleátu (Tween80), který se připravil spolu s imunostimulantem QS21 nebo 3D-MPL.
Saponiny jsou známé jako adjuvans ve vakcinačních prostředcích vhodných pro systémovou aplikaci. Hemolytická aktivita a pomocná aktivita jednotlivých saponinů je středem zájmu oboru (popisuje se například v publikaci Lacaille-Dubois and Wagner). Například přípravek Ouil A (získaný z kůry jihoamerického stromu Quillaja Saponaria Molina) a jeho frakce se popisují v patentovém dokumentu US 5 057 540 a v publikaci „Saponins as vaccine adjuvants,“ Kensil, C. R., Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst., 1996, 12(1 až 2), 1 až 55 a EP 0 362 279 Bl.
Určité struktury, které se nazývají komplexy stimulující imunitu (ISCOMS) a které obsahují frakce Quil A, jsou hemolytické a mohou se použít při výrobě vakcín (popisuje se v patentovém dokumentu Morein, B., EP 0 109 942 Bl). Popisuje se, že tyto struktury vykazují aktivitu pomocného prostředku (EP 0 109 942 Bl, WO 96/11 711).
Hemolytické saponiny QS21 a QS17 (frakce Quil A čištěné HPLC) se popisují jako silné systé30 mové adjuvans a způsob jejich produkce se popisuje v patentovém dokumentu US 5 057 540 aEP 0 362 279 BL V tomto dokumentu se také popisuje použití QS17 (nehemolytické frakce Quil-A), který působí jako silné adjuvans v případě systémových vakcinačních prostředků.
-3CZ 302449 B6
Použití QS21 se dále popisuje v publikaci Kensil et al., 1991, J. Immunology vol. 146, 431 až 437). V patentovém dokumentu WO 99/10 008 se popisují kombinace QS21 a polysorbát nebo cyklodextrin. Systémy adjuvans ve formě částic obsahující frakce QuilA, jako je QS21 a QS7, se popisují v dokumentu WO 96/33 739 a WO 96/11711.
Další saponiny, které se používají v systémových vakcinačních studiích, se získaly z jiných rostlinných druhů, jako je Gypsofila a Saponaria (popisuje se v publikaci Bomford et al, Vaccine 10(9):572 až 577, 1992).
Je také známo, že saponiny se používaly ve studii, kdy se vakcinační prostředek aplikoval mukózně, což vedlo ke kolísavým úspěchům při vyvolání imunitní odezvy. Ukázalo se, že saponin Quí 1 A nevykazuje žádný účinek při vyvolání imunitní odezvy, když se antigen aplikuje intranazálně (popisuje se v publikaci Gizurarson et al., 1994, Vaccine Research 3, 23 až 29). Jiní autoři používají uvedené adjuvans úspěšně (Maharaj et al., Can. J. Microbiol, 1986, 32(5):414 až 20, Chavali and Campbell, Immunobiology, 174(3):347 až 59). ISCOM obsahující saponin Quil A se použil v intragastrickém a v intranazálním vakcinačním prostředku a vykazuje pomocnou aktivitu (popisuje se v publikaci Mel Mowat et al., 1991, Immunology, 72, 317 až 322, Mel Mowar and Donachie, Immunology Today, 12, 383 až 385).
QS2I a netoxická frakce Quil A se také popisuje jako orální nebo intranazální adjuvans (popisuje se v publikaci Sumino et al., J. Virol., 1998, 72(6): 4931 až 9 a v dokumentu WO 98/56 415).
Saponiny se také popisují v publikaci Lacaille-Dubois, M. and Wagner H., 1996 A review of the biological and pharmacological activities of saponins. Phytomedicine 2, 363 až 386. Saponiny jsou steroidy nebo glykosidy triterpenu, které jsou široce zastoupeny v rostlinné říši a v říši mořských živočichů. Saponiny tvoří ve vodě koloidní roztoky, které při míchání pění, a je možné je použít při srážení cholesterolu. Když se saponiny dostanou do blízkosti buněčných membrán, tvoří se v membráně struktury podobné pórům, které způsobují protržení membrány. Tento jev charakterizuje například hemolýza erytrocytů, což je vlastnost některých, ale ne všech saponinů.
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoří imunogenní prostředek, který zahrnuje antigen zhoubného bujení vybraný ze skupiny:
i i i) antigen z rodiny proteinů MÁGE spojený s heterogenním fúzním partnerem i v) derivát antigenu Her-2/neu, kterému chybí funkční transmembránová doména Her-2/neu, a pomocný prostředek obsahující saponin spolu s imunostimulačním oligonukleotidem a lipopolysacharidem ze skupiny
a) monofosforyllipid A,
b) 3-O-deacylovaný monofosforyllipid A a
c) difosforyllipid A.
Je výhodné, aby vakcinační prostředek podle vynálezu dále obsahoval nosič. Ve výhodném provedení vynálezu oligonukleotidy v adjuvans a vakcinační prostředky působí s kombinací saponin/lipopolysacharid při vyvolání imunitní odezvy na specifický antigen vedoucí k zesílení regrese nádoru synergicky. Prostředky jsou silné při vyvolání imunitní odezvy, která je běžně spojena s imunitním systémem typu Thi. Kombinace pomocných látek nejsou vhodné pouze pro imunoprofýlaxi onemocnění, ale také se používají pro imunoterapii onemocnění, jako je zhoubné bujení.
-4CZ 302449 B6
Prostředky obsahují protinádorový antigen a je možné je použít při imunoterapeutické léčbě zhoubného bujení. Pomocné prostředky se například používají dohromady s antigeny sloužícími k potlačení nádoru, jako jsou antigeny spojené s karcinomem prostaty, prsu, plic, pankreasu, s kolorektálním karcinomem, renálním karcinomem nebo smelanomem. Antigeny zahrnují
MÁGE 1,3 a MÁGE 4 nebo jiné antigeny MÁGE, jak se popisují v dokumentu WO 99/40 188, PRÁME, BAGE, Lage (je také znám jako NY Eos 1) SAGE a HAGE (popisuje se v dokumentu WO 99/53 061) nebo GAGE (popisuje se v publikaci Robbins and Kawakami, 1996, Current Opinions in Immunology 8, 628 až 636, Van den Eynde et al., International Journal of Clinical io and Laboratory research (1997), Correale et al., (1997), Journal of the National Cancer Institute 89, 293. Tyto antigeny se exprimují v mnoha typech nádorů, jako je melanom, karcinom plic, sarkom a karcinom močového měchýře.
Antigeny MÁGE vhodné pro použití podle vynálezu se mohou exprimovat jako fúzní protein se zesilovačem exprese nebo imunologickým fúzním partnerem In. Derivát je fúzní protein obsahující antigen pocházející z rodiny proteinů MÁGE spojený s heterogenním partnerem, kterým je přednostně MÁGE 3. Proteiny se mohou chemicky konjugovat, ale s výhodou se exprimují jako rekombinantní fúzní proteiny, což umožňuje, že se v imunitním systému vyskytují ve větším množství ve srovnání s proteinem, který netvoří fúzi. Tak fúzní partner může propůjčovat epitopy pro buňky T (imunologický fúzní partner), jde s výhodou o epitopy pomocných buněk T, které jsou rozeznávány člověkem nebo pomáhají pri expresi proteinu (zesilovač exprese), která je silnější, než v případě přirozeného rekombínantního proteinu. Je výhodné, aby fuzním partnerem byl imunologický fúzní partner a zesilovač exprese.
Ve výhodném provedení vynálezu se imunologický fúzní partner získal z proteinu D, což je povrchový protein gramnegativní bakterie Haemophilus influenza B (popisuje se v dokumentu WO 91/18 926). Derivát proteinu D s výhodou obsahuje přibližně první třetinu proteinu, zvláště pak prvních 100 až 110 aminokyselin N-konce. Derivát proteinu D je s výhodou lipidován. Prvních 109 zbytků fúzního partnera lipoproteinu D je lokalizováno na N-konci, přičemž vzniká antigen vakcinačního prostředku s dalšími exogenními epitopy buněk T a dochází k zesílení exprese v mikroorganizmu E. coli (tak působí také jako zesilovač exprese). Lipidový konec zajišťuje optimální prezentaci antigenu v buňkách prezentující antigen.
Další fúzní partneři zahrnují nestruktumí protein z viru influenzy NS1 (hemaglutinin). V typic35 kém případě se využívá 81 N-terminálních aminokyselin, ačkoliv se mohou využívat různé fragmenty, které zahrnují epitopy pomocných buněk T,
V jiném provedení vynálezu je imunologickým fúzním partnerem protein LYTA. Používá se Cterminální část molekuly. Protein Lyta se získal z mikroorganizmu Streptococcus pneumoniae.
který syntetizuje N-acetyl-L-alaninamidázu (amidáza Lyta) (kódovanou genem lytA (popisuje se v publikaci Gene, 43 (1986) 265 až 272). Amidáza Lyta je autolyzin, který specificky štěpí jisté vazby v peptidoglykanové kostře. C-terminální oblast proteinu Lyta je odpovědná za afinitu k cholinu nebo k některým cholinovým analogům, jako je DEAE. Této viasínusu se využívá při vývoji plasmidů C-LYTA vhodných pro expresi v mikroorganizmu E. coli. Popisuje se čištění hybridních proteinů, které obsahují fragment C-LYTA na jeho N-konci (popisuje se v publikaci Biotechnology, 10 (1992) 795 až 798). Výhodné provedení využívá opakovanou část molekuly Lyta zjištěnou na konci C, který začíná zbytkem 178. Zvláště výhodná forma obsahuje zbytky 188 až 305.
Imunologické fúzní partnery uvedené shora v textu jsou také výhodné pri napomáhání expresi. Takové fúze se exprimují ve větším výtěžku ve srovnání s přirozenými rekombinantními proteiny MÁGE. Takové konstrukce se popisují v patentovém dokumentu WO 99/40 188.
Jiné antigeny specifické pro nádor jsou vhodné pro použití s adjuvans podle vynálezu a zahrnují, ale nejsou omezeny na gangliosidy specifické pro nádor, jako je GM 2 a GM 3 nebo jejich konju-5CZ 302449 B6 gáty s nosičovými proteiny. Uvedený antigen může být samotný peptid hormonu, jako je celý hormon uvolňující gonadotropin (GnRH, WO 95/20 600), což je peptid obsahující 10 aminokyselin, který se používá při léčbě řady druhů zhoubného bujení nebo při imunokastraci.
Ve výhodném provedení vynálezu se využívají různé antigeny prostaty, jako je antigen specifický pro předstojnou žlázu (PSA), PAP, PSCA (popisuje se v publikaci PNAS 95(4) 1735 až 1749, 1998), PSMA nebo ve výhodném provedení vynálezu se používá antigen známý jako prostáza.
Prostáza je serinová proteáza specifická pro prostatu (podobná trypsinu), která obsahuje 254 aminokyselin s konzervativní serinovou proteázou katalytické triády H-D-S a aminoterminální prepropeptidové sekvence indikující funkci potenciální sekrece (popisuje se v publikaci P. Nelson, Lu Gan, C. Ferguson, P. Moss, R. Gelinas, L. Hood and K. Wand, „Molecular cloning and characterisation of prostase, an androgen-regulated serine protease with prostatě restricted expressíon, Proč. Nati. Acad. Sci, USA (1999) 96, 3114 až 3119). Popisuje se místo putativní gly kosy láce. Předpokládaná struktura je velmi podobná jiným známým serinovým proteázám, které ukazují, že zralý polypeptid se balí do jediné domény. Zralý protein obsahuje 224 aminokyselin s jedním epitopem A2, který je přirozeně zpracováván.
Nukleotidová sekvence prosteázy a dedukovaná polypeptidová sekvence a homology se popisují v publikaci Ferguson, et al. Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1999, 96, 3114 až 3119) a v mezinárodní patentové přihlášce WO 98/12 302 (a také v odpovídajícím patentu US 5 955 306), WO 98/20 117 (a také v odpovídajícím patentu US 5 840 871 a US 5 786 148) (kalikrein specifický pro prostatu) a WO 00/04 149 (P703P).
Vynález popisuje prostředky obsahující fúze prostázového proteinu založeného na proteinu prostázy a jeho homologů (derivátů). Takové deriváty jsou vhodné pro použití jako terapeutické vakcinaění prostředky, které jsou vhodné pro léčbu nádorů prostaty. V typickém případě fragment bude obsahovat alespoň 20, s výhodou 50, výhodněji 100 nepřerušovaných aminokyselin, jak se popisuje ve shora uvedeném patentovém dokumentu a v patentové přihlášce.
V jiném provedení vynálezu se popisuje mutovaný prostázový antigen, kde se mutace vyskytuje v aktivním místě proteinu. Derivát nebo fragmenty a homology prostázového antigenu nesou mutace v aktivním místě proteinu, přičemž podstatně snižují nebo s výhodou eliminují biologickou aktivitu prostázy. Výhodné mutace zahrnují nahrazení histidinových a aspartátových katalytických zbytků serinové proteázy. Ve výhodném provedení vynálezu prostáza zahrnuje mutaci histidin-alanin v aktivním místě, například ve zbytku 72 sekvence prostázy (popisuje se v publikaci Ferguson et al., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1999, 96, 3114 až 3119), Odpovídající mutace v homologních proteinech se popisují v dokumentu WO 00/041 949). Tato mutace například odpovídá poloze 43 vP703P. Tato mutace může vést k podstatnému snížení katalytické účinnosti (vyjádřené enzymatickou specifickou aktivitou) proteinu. Snížení katalytické účinnosti je násobeno s výhodou faktorem 10 , výhodněji alespoň faktorem 10ó. Protein, který obsahuje mutaci histidin-alanin je označen *. V jiném provedení vynálezu mutovaná nebo nemutovaná prostáza je částí fúzního proteinu, který obsahuje prostázu spojenou s nádorem nebo její fragment nebo homolog a heterogenní protein nebo jeho část působící jako fúzní partner. Protein a fúzní partner se může chemicky spojovat, ale s výhodou se exprimuje jako rekombinantní fúzní proteiny v heterogenním expresním systému.
Ve výhodném provedení vynálezu se popisuje prostázový fúzní protein nebo jeho fragment nebo homolog spojený s imunologickým fúzním partnerem, který může poskytovat epitopy pomocných buněk T. Fúzní partner může působit prostřednictvím náhodného pomocného účinku spojeného s vylučováním aktivačních signálů velkým počtem buněk T specifických pro cizorodý protein nebo peptid, čímž se zesiluje vyvolání imunity vůči složce prostázy ve srovnání s proteinem, který netvoří fúzi. S výhodou se vybral heterogenní partner, aby byl rozeznatelný buňkami T u většiny lidí.
-6CZ 302449 B6
V jiném provedení vynálezu se popisuje prostázový protein nebo jeho fragment nebo homolog spojený s fúzním partnerem, který působí jako zesilovač exprese. Tak může fúzní partner napomáhat při expresi prostázy v heterogenním systému, přičemž v expresních systémech je exprese silnější ve srovnání s přirozeným rekotnbinantním proteinem.
Fúzní partner může působit jako imunologický fúzní partner a zesilovač exprese. Vynález dále popisuje fúzní proteiny obsahující mutovanou prostázu specifickou pro nádor nebo její fragmenty spojené s fúzním partnerem. Fúzní partner s výhodou může působit jako imunologický fúzní partner a zesilovač exprese. Ve výhodném provedení vynálezu fúzní partner je nestruktumí protein io z viru influenzy NS1 (hemaglutinin) nebo jeho fragment. V typickém případě se používá 81 Nterminálních aminokyselin, ačkoliv se mohou použít různé fragmenty, které obsahují epitopy pomocných buněk T (popisuje se v publikaci C, Hackett, D. Horowitz, M. Wysocka and
S. Dillon, 1992, J. Gen. Virology, 73, 1339 až 1343). V případě, že NS1 je imunologický fúzní partner dosahuje se silnější exprese. Exprese takových fúzí je silnější ve srovnání s přirozenými rekombinantními prostázovými proteiny.
V nej výhodnějším provedení vynálezu fúzní protein obsahuje 81 N-terminálních aminokyselin nestruktumího proteinu fúzovaného s aminokyselinami C-konce v poloze 5 až 226. Jiní partneři exprese například zahrnují protein D, jeho fragmenty a C-Lyta, který se využívá v souladu s antigeny MÁGE.
Dalším výhodným antigenem prostaty je P501S charakterizovaný sekvencí SEQ. ID. NO: 113, která se popisuje v dokumentu WO 98/37 814. Imunogenní fragmenty ajejich části obsahují alespoň 20, s výhodou 50, výhodněji 100 souvislých aminokyselin, které se popisují ve shora uvede25 né patentové přihlášce (například PS108, popisuje se v dokumentu WO 98/50 567).
Jiné antigeny specifické pro předstojnou žlázu se popisují v dokumentech WO 98/37 418 a WO 00/4 149. Dalším antigenem je STEAP, který se popisuje v publikaci PNAS 96, 14 523 14528 až 7 1999.
Vynález popisuje další antigeny spojené s nádorem, jako je Plu-1 (popisuje se v publikaci J. Biol. Chem. 274 (22) 15 633-15 645, 1999) a HASH-1, HASH-2, cripto (popisuje se v publikaci Salamon, et at., Bioesssays 199, 21, 61 až 70 a v dokumentu US 5 654 140), criptin (popisuje se v dokumentu US 5 981 215). Antigeny zvláště vhodné pro vakcinační prostředky, které se použí35 vají při terapii zhoubného bujení také obsahují tyrozinázu a survivin.
Vynález dále zahrnuje peptidy odvozené od mucinu, jako je Mucl, které se například popisují v patentových dokumentech US 5 744 144, US 5 827 666, US 4 963 484 a WO 88/05 054. Specificky zvažované jsou peptidy odvozené od Mucl, které obsahují alespoň jednu opakující se jed40 notku peptidů Muc 1. Výhodné je, když obsahují alespoň dvě takové repetice ajsou rozeznávány protilátkami SM3 (popisuje se v patentovém dokumentu US 6 054 438). Další peptidy odvozené z mucinu zahrnují peptid pocházející z Muc 5.
Předmětnou věc vynálezu je možné také použít v kombinaci s antigeny karcinomu prsu, jako je
Her-2/neu, mamaglobin (popisuje se v patentovém dokumentu US 5 668 267) nebo se popisují v dokumentech WO 00/52 165, WO 99/33 869, WO 99/19 479, WO 98/45 328. Antigeny Her2/neu se popisují mimo jiné v patentovém dokumentu US 5 801 005. Antigen Her-2/neu s výhodou obsahuje celou extrabuněčnou oblast (tvořenou přibližně aminokyselinou 1 až 645) nebo jejími fragmenty a alespoň imunogenní Částí vnitrobuněčné domény nebo celou vnitrobuněčnou oblastí tvořenou 580 C-terminálními aminokyselinami. Vnitrobuněčná část by měla zvláště obsahovat fosforylační oblast nebo její fragmenty. Takové konstrukce se popisují v patentovém dokumentu WO 00/44 899. Zvláště výhodná konstrukce je známa jako ECD-PD (popisuje se v patentovém dokumentu WO 00/44 899).
Zde používaný antigen Her-2/neu se může získat z krysí, myši nebo člověka.
- 7 CZ 302449 B6
Antigen Her-2/neu může být celý antigen Her-2/neu zbavený funkční transmembránové oblasti nebo jejích částí. Výhodné části obsahují extrabuněčnou doménu. Ve výhodném provedení vynálezu se popisuje fúzní protein obsahující extrabuněčnou oblast spojenou s částí vnitrobuněčné oblasti, jak se popisuje v dokumentu WO 00/44 899.
Vynález popisuje prostředky schopné upravovat imunitní reakci vůči produktu exprese onkogenu Her-2/neu (s výhodou vyvolává nebo zesiluje uvedenou imunitu). Tento protein se podílí na mnoha případech maligních nádorů u teplokrevných zvířat, kde není nutné, aby se produkt exprese vyskytoval v nádoru. Například nadměrná exprese genu se může podílet na iniciaci tvorby nádoru nebo jeho časného stádia, ale exprese proteinu se může v podstatě snížit nebo zcela vymizet. Vynález se může použít k vyvolání nebo zesílení účinné imunitní odezvy, aby došlo k přeměně nádoru, kde se vyskytuje Her-2/neu, na nádor, kde se Her-2/neu nevyskytuje. Navíc je možné předejít tvorbě nádorů, kde se vyskytuje Her-2/neu a vyvolat regresi existujících nádorů, které obsahují Her-2/neu.
Zkratka „ECD“ znamená extrabuněčnou oblast, „ICD“ znamená vnitrobuněčnou oblast, „PD“ znamená fosforylační oblast (to znamená, zeje fosforylována), kteráje vnitrobuněčnou oblastí, „APD“ znamená fragment fosforylační oblasti, který leží ve fosforylační oblasti a „KD“ znamená oblast kinázy, která leží ve vnitrobuněčné oblasti. Produkt exprese genu Her-2/neu se nazývá protein Her-2/neu aje také znám jako ρ 185 nebo c-erbB2.
„Fúzní protein Her-2/neu ECD-ICD“, který je znám také jako „fúzní protein ECD-ICD“ nebo „ECD-ICD“ znamená fúzní protein (nebojeho fragmenty), který obsahuje extrabuněčnou oblast (nebo její fragmenty) a vnitrobuněčnou oblast (nebo její fragmenty) proteinu Her-2/neu. Fúzní protein ECD-ICD nezahrnuje podstatnou část transmembránové oblasti Her-2/neu a s výhodou nezahrnuje žádnou transmembránovou oblast Her-2/neu.
Termín „fúzní protein Her-2/neu ECD-ICD“ a „fúzní protein Her-2/neu ECD-PD“ ajejich příbuzné termíny znamená jejich fragmenty, homology a funkční ekvivalenty (společně se nazývají „varianty“), stejně jako ty, ve kterých jedna nebo více aminokyselin podle vynálezu buď (i) vyvolávají, nebo zesilují imunitní odezvu ve srovnání s proteinem Her-2/neu nebo (ii) podstatně neovlivňují vyvolání nebo zesílení imunitní odezvy ve srovnání s proteinem Her-2/neu (varianta například stimuluje odezvu pomocí pomocných buněk T nebo pomocí cytotoxických buněk T nebo stimuluje produkci protilátek). Popisují se specifické nelimitující příklady variant zahrnují fragmenty, homology a funkční ekvivalenty fúzního proteinu Her-2/neu ECD-ICD a fúzního proteinu Her-2/neu ECD-PD. Varianty mohou být „podstatně shodné“ nebo „podstatně podobné“ sfúzním proteinem, který obsahuje složky přirozeného polypeptidů a uchovávají si schopnost stimulovat imunitní odezvu.
Her-2/neu PD obsahuje 268 aminokyselin, vyskytuje se uvnitř buňky a může být fosforylován proteinovými tyrozinovými kinázanii. Tato oblast není shodná s žádnou odpovídající částí receptorů tyrozinové kinázy. Tak specifita a jedinečnost této oblasti ji dělá zvláště výhodnou pro použití jako vakcinačního prostředku vhodného pro zhoubné bujení. Exprese samotné této domény v bakteriálních a savčích buňkách je problematická. Výsledný protein PD je velmi labilní a není vhodný pro produkci ve velkém měřítku. V jednom provedení vynálezu se s výhodou používá fúze obsahující celou nebo část vnitrobuněčné oblasti nebo fosforylační oblast celé extrabuněčné oblasti Her-2/neu nebo její části. Fúzní proteiny ECD-ICD a ECD-PD podle vynálezu jsou rozpustné, vylučují se do kultivačního média a jsou v něm stabilní.
Vakcinační prostředky podle vynálezu je možné použít proti libovolnému zhoubnému bujení, které je charakterizováno nádorem spojeným s expresí antigenu, jako je exprese Her-2/neu. Vedle zesílené exprese vnitrobuněčné oblasti nebo fosforylační oblasti nebo jejich variant, jako je fúzní protein s extrabuněčnou oblastí nebojeho varianty, fúzní proteiny ECD-ICD a ECD-PD se používají pro zdokonalené vakcinační prostředky.
-8CZ 302449 B6
Vynález dále popisuje vakcínační prostředek obsahující pomocný prostředek. Uvedené adjuvans obsahující saponín a imunostimulační oligonukleotid a antigen Her-2/neu, který ztratit svou transmembránovou oblast. Molekula Her-2/neu může být z krys, myší, člověka nebo může jít o hybrid. Molekula Her2 s výhodou obsahuje v podstatě celou extrabuněčnou oblast, „v podstatě celou“ znamená, že z extrabuněčné oblasti není deietováno více než 100 aminokyselin, s výhodou méně než 75 aminokyselin, výhodněji více než 50 aminokyselin. Je výhodné, když je přítomna celá extrabuněčná oblast. Extrabuněčná oblast v lidské konstrukci Her-2/neu podle vynálezu s výhodou obsahuje v podstatě všech 600 N-terminálních aminokyselin, s výhodou všech 630 Nio terminálních aminokyselin, výhodněji všech 650 aminokyselin. Lidský 1CD začíná aminokyselinou v poloze 676 a končí aminokyselinou Val 1255. Fosforylační oblast se nachází v N-terminální oblasti ICD. Je výhodné, když se konstrukce využívané podle vynálezu obsahují fosforylační oblast, ale nezahrnují funkční transmembránovou oblast. Je výhodné, aby transmembránová oblast byla celá detetovaná.
Konstrukce, které jsou zvláště vhodné pro použití podle vynálezu se popisují v dokumentu WO 00/44 899.
Ve výhodném provedení vynálezu se antigen Her-2/neu připravuje dohromady s 3D-MPC, QS21
2o a oligonukleotidem CpG spolu s lipozomem nebo v emulzi olej ve vodě. Takové prostředky tvoří humorální odezvu nebo odezvu zprostředkovanou buňkami. V porovnání s pomocným prostředkem, který obsahuje QS21 a 3D-MPL, prostředek podle vynálezu vyvolává u myší s výhodou silnější odezvu TH1. Prostředky, které obsahují pouze CpG nevyvolávají podstatnou imunitní odezvu zprostředkovanou buňkou.
Prostředky mohou obsahovat antigeny spojené s mechanismy podporující nádor (například angiogeneze, invaze nádoru), jako jsou například tie 2, VEGF.
Výhodné oligonukleotidy vhodné pro použití jako adjuvans nebo vakcínační prostředky podle
3o vynálezu s výhodou obsahují dva nebo více dinukleotidových motivů CpG oddělených alespoň třemi, výhodněji alespoň šesti nebo více nukleotidy. Oligonukleotidy podle vynálezu jsou v typickém případě deoxynukleotidy. Ve výhodném provedení vynálezu intemukleotid v oligonukleotidu je fosforodithioát nebo s výhodou fosforothíoátová vazba, ačkoliv vynález popisuje fosfodiesterové a jiné intemukleotidové vazby, které zahrnují oligonukleotidy se smíchanými intemukleotidovými vazbami. Způsoby přípravy fosforothioátových oligonukleotidů nebo fosforodithioátu se popisují v dokumentu US 5 666 153, US 5 278 302 a WO 95/26 204.
Příklady výhodných oligonukleotidů vykazují následující sekvence. Sekvence s výhodou obsahují fosforothioátové upravené intemukleotidové vazby.
OLIGO I (SEQ ID NO: 1): TCC ATG ACG TTC CTG ACG TT (CpG 1826)
OLIGO 2 (SEQ ID NO:2): TCT CCC AGC GTG CGC CAT (CpG 1758)
OLIGO 3(SEQ ID NO:3): ACC GAT GAC GTC GCC GGT GAC GGC ACC ACG OLIGO 4 (SEQ ID NO:4): TCG TCG TTT TGT CGT TTT GTC GTT (CpG 2006) OLIGO 5 (SEQ ID NO:5): TCC ATG ACG TTC CTG ATG CT (CpG 1668)
Jiné oligonukleotidy CpG mohou obsahovat výhodné shora uvedené sekvence, které vykazují delece nebo adice.
Oligonukleotidy CpG využívané podle vynálezu se mohou syntetizovat libovolným způsobem, který je znám v oboru (popisuje se například v dokumentu EP 468 520). Obyčejně se takové
-9CZ 302449 Β6 oligonukleotidy mohou syntetizovat použitím automatického syntetizéru. Obsahují v typickém případě 10 až 50 bází.
Oligonukleotidy využívané podle vynálezu jsou v typickém případě deoxynukleotidy. Ve výhodném provedení internukleotidová vazba v oligonukleotidů je fosforodithioát nebo výhodněji fosforothioátová vazba, ačkoliv vynález také popisuje fosfod i estery. Také se zvažuje oligonukleotid obsahující různé intemukleotidové vazby, jsou to například smíšené fosforothioátové fosfod Šesterý. Mohou se také použít jiné intemukleotidové vazby, které stabilizují oligonukleotid.
Saponiny, které se mohou použít jako kombinace adjuvans podle vynálezu, zahrnují ty saponiny získané z kůry stromu Quillaja Saponaria Molina, jenž se nazývají Quil A ajejich frakce popsané v dokumentu US 5 057 540 a v publikaci „Saponins as vaccine adjuvants,“ Kensil, C. R., Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst., 1996, 12(1 až 2): 1 až 55 a v dokumentu EP 0 362 279 Bl. Zvláště výhodné frakce QuilA jsou QS212, QS7 aQS17.
(3—escinje další výhodný hemolytický saponin vhodný pro použití jako pomocný prostředek podle vynálezu. Escin se popisuje v publikaci Merck index (12thed., entry 3737) jako směs saponínů, které se vyskytují v semenech stromu koňského kaštanu (lat. Aesculus hippocastanum). Jeho izolace se provádí chromatograficky a čištěním (popisuje se v publikaci Fiedler, ArzneimittelForsch. 4, 213 (1953)) a pomocí pryskyřic vhodných pro výměnu iontů (popisuje se v dokumentu Erbring et al., US 3 238 190). Čištěné frakce escinu vykazují biologickou aktivitu (popisuje se v publikaci Yoshikawa M., et al. (Chem. Pharm. Bull (Tokyo) 1996 Aug., 44(8): 1454 až 1464)). β-escin je také znám jako aescin.
Dalším výhodným hemolytickým saponinem vhodným pro použití podle vynálezu je digitonin. Digitonin se popisuje v publikaci Merck index (12thed., entry 3204), jako saponin, který se získal ze semen Digitalis purpurea a čistil postupem popsaného v publikaci Gisvold et al., J. Ant. Pharm. Assoc., 1934, 23, 664 a Ruhenstroth-Bauer, Physiol. Chem., 1955, 301, 621. Popisuje se jako klinické reakční činidlo pro stanovení cholesterolu.
Kombinace adjuvans podle vynálezu mohou dále obsahovat další nosič, tak že saponin nebo CpG nebo polysacharid se může spojovat s nosičem ve formě částic, přičemž se v kombinaci zesiluje účinek adjuvans. Zvláště výhodné systémové vakcinační prostředky obsahují například molekulu nosiče.
CpG užívaný v kombinacích adjuvans podle vynálezu může být ve volném roztoku nebo může tvořit komplexy s nosiči ve formě částic, jako jsou minerální sole (například sole hliníku nebo vápníku), lipozomy, ISCOM, polymery (polymery tvořené molekulami kyseliny mléčné, polyglykol ické polymery, polyfosfazin, polyaminokyseliny, alginát, chitosan) nebo mikročástice. Uvedené nosiče jsou s výhodou kationické. Vakcinační prostředky podle vynálezu dále obsahují antigen, který může a nemusí být spojen s komplexem CpG-nosič. V tomto případě antigen může být volná suspenze nebo může být spojen s odděleným nosičem.
Saponiny tvořící část vynálezu se mohou oddělit ve formě micel nebo mohou být ve formě velkých uspořádaných struktur, jako je ISCOM (popisuje se v dokumentu EP 0 109 942 Bl) nebo ve formě lipozomů (popisuje se v dokumentu WO 96/33 739), když se připravují spolu s cholesterolem a lipidem nebo ve formě lipozomů (popisuje se v dokumentu WO 96/33 739), když se připravují spolu s cholesterolem a lipidem nebo ve formě emulze olej ve vodě (popisuje se v dokumentu WO 95/17 210). Saponiny se mohou s výhodou spojovat se solí kovu, jako je hydroxid hlinitý nebo fosforečnan hlinitý (popisuje se v dokumentu WO 98/15 287). V jiném případě se saponin může spojovat s určitým adjuvans, jako je chitosan. Saponin se může vyskytovat v suché formě, jako je prášek. Konečná forma vakcinačního prostředku, ve které se aplikují na povrch sliznice, je ve své podstatě hemolytická. Saponin může být nebo nemusí být fyzicky spojen s antigenem buď pomocí přímé vazby, nebo společnou interakcí se stejnou molekulou nosiče (popisuje se v dokumentu Velké Británie 9 822 712.7, WO 98/16247).
-10CZ 302449 B6
CpG, saponin a lipopolysacharid v adjuvans nebo ve vakcinačním prostředku podle vynálezu se mohou samy separovat nebo naopak spojovat. CpG a saponin může být ve volné suspenzi nebo se může spojovat prostřednictvím nosiče. Výhodný je nosič ve formě částic, jako je hydroxid hli5 nitý nebo kationický liposom nebo ISCOM.
Výhodná kombinace adjuvans podle vynálezu se skládá z jednoho nebo více oligonukleotidů CpG, které obsahují alespoň 3, s výhodou alespoň 6, nukleotidů mezi dvěma sousedními motivy CG spolu s QS21 a určitým nosičem se vybraly ze skupiny obsahující emulzi olej ve vodě nebo io DQ. Je výhodné, když lipopolysacharid je derivát difosforyllipidu nebo monofosforyllipidu.
Výhodný je 3-O-deacylmonofosforyllipid A. Pomocný prostředek s výhodou obsahuje CpG
2006 (SEQ ID NO: 4) nebo CpG 1758 (SEQ ID NO: 2) nebo CpG 1826 (SEQ ID NO: 1) smíchaný s QS21 a s nosičem ve formě částic vybraným ze skupiny obsahující emulzi olej ve vodě nebo DQ. Zvláště výhodné vakcinační prostředky například obsahují uvedené pomocné prostředky a antigen. Výhodný vakcinační prostředek podle vynálezu se používá při vyvolání systémové imunitní odezvy po aplikaci jedinci systémovým způsobem.
Pomocné prostředky podle vynálezu mohou obsahovat emulzi založenou na oleji. Pomocné prostředky založené na olejové emulzi jsou známy po mnoho let. Spadají sem práce spojené s Freun20 dovým úplným nebo neúplným adjuvans, která obsahují emulzi s minerálním olejem. V této době se věnovalo hodně času k vytvoření stabilních a dobře tolerovatelných alternativ uvedených silných, reaktogenních pomocných prostředků.
Popisuje se řada emulzních systémů, které jsou tvořeny jednou nebo více fázemi. Adjuvans obsahující emulzi olej ve vodě je možné použít jako adjuvantní prostředek (popisuje se v dokumentu EP 0 399 843 B). Popisují se také prostředky obsahující emulze olej ve vodě a jiná aktivní činidla, které je možné použít jako adjuvans v případě vakcinačních prostředků (popisuje se v dokumentu WO 95/17 210, WO 98/56 414, WO 99/12 565, WO 99/1 241). Popisují se další pomocné prostředky obsahující olejovou emulzi, jako je voda v oleji (dokument US 5 422 109,
EPO 480 982 B2) a emulze voda voleji ve vodě (popisuje se v dokumentu US 5 424 067, EPO 480 981 B).
Pomocný prostředek obsahující olejovou emulzi vhodný pro použití podle vynálezu může být přirozený nebo syntetický a může být minerální nebo organický. Příklady minerálních a organic35 kých olejů jsou pro odborníka zřejmé.
Aby prostředek obsahující olej ve vodě byl pro člověka vhodný, olejová fáze emulzního systému zahrnuje metabolizovatelný olej. Význam termínu metabolizovatelný olej je dobře znám v oboru. Termín „metabolizovatelný“ znamená, že je možné ho změnit působením metabolizmu (popisuje se v publikaci Dorlanďs iIlustrated medical dictionary, W. B. Sander company, 25th edition (1974)). Vhodným olejem je libovolný rostlinný olej, rybí olej, zvířecí nebo syntetický olej, který není toxický pro příjemce aje schopen být přeměněn metabolízmem. Běžnými zdroji rostlinného oleje jsou ořechy (jako je arašídový olej), semena a zrní. Vynález dále popisuje syntetické oleje, které mohou zahrnovat běžně dostupné oleje, jako je NEOBEE® a jiné. Skvalen (2,6, 10, 15, 19,
23-hexamethyl-2,6,10, 14, 18, 22-tetrakosahexaen) je nesaturovaný olej, který se nachází ve velkém množství v oleji z jater žraloka a v malém množství v olivovém oleji, v oleji z moučných červů, v oleji z rýžových otrub a v kasinkách. Tento olej je zvláště vhodný při použití podle vynálezu. Skvalen je metabolizovatelný olej, protože je meziproduktem bíosyntézy cholesterolu (Merck index, 10. vydání, č. 8619).
Zvláště výhodnými olejovými emulzemi jsou emulze olej ve vodě a zvláště pak skvalen ve vodních emulzích.
Příklady výhodných systémů emulzí se popisují v patentových dokumentech WO 95/17 210 a WO 99/11 241, které popisují adjuvans ve formě emulze založené na skvalenu, α-tokoferolu a
- II CZ 302449 Β6 přípravku Tween 80. Mohou se také připravit s imunostimulanty QS21 a/nebo 3D-MPL. V dokumentu WO 99/12 565 se popisuje zlepšení uvedených skvalenových emulzí s přidáním sterolu do olejové fáze. Za účelem stabilizace emulze (popisuje se v dokumentu WO 98/56 414) se do olejové fáze může přidat triglycerid, jako je trikaprylin (C27H5()O6).
Velikost olejových kapiček, které se vyskytují ve stabilní emulzi olej ve vodě je s výhodou menší než 1 gm. Uvedená velikost může být v rozmezí 30 až 600 nm, s výhodou přibližně 30 až 500 nm. Nej výhodnější je, když průměr je 150 až 500 nm a zvláště výhodné jsou kapénky s průměrem 150 nm měřeno fotonovou korelační spektrofotometru. 80% olejových kapének je ve výhodném rozmezí velikostí, výhodněji více než 90% a nejvýhodněji více než 95 % olejových kapének se pohybuje v definovaném rozmezí velikosti. Množství složek přítomných v olejových emulzích podle vynálezu tvoří běžně 2 az 10 % oleje, jako je skvalen, 2 až 10% alfatokoferolu a 0,3 až 3 % povrchově aktivního činidla, jako je polyoxyetylen-sorbitanmonooleát. Je výhodné, aby poměr olej (s výhodou skvalen) ku α-tokoferolu se rovnal nebo byl menší než I, přičemž vzniká více stabilní emulze. EmulgaČní činidlo, jako je přípravek Tween 80 a Spán 85, se mohou také vyskytovat v množství přibližně 1 %. V některých případech může být výhodné, že vakcinační prostředky podle vynálezu mohou dále obsahovat stabilizační činidlo.
Způsob přípravy emulzí olej ve vodě je dobře znám v oboru. Způsob běžně zahrnuje míšení olejové fáze s povrchově aktivním činidlem, jako je PBS/TWEEN80™. Pak následuje homogenizace za použití homogenizéru. Odborníkovi je zřejmé, že způsob, který zahrnuje krok dvojnásobného průchodu směsi injekční jehlou, je vhodný pro homogenizaci malých objemů kapaliny. Stejně je možné přizpůsobit emulgační postup v mikrofluídizéru (zařízení mukrofluidika Ml 10S, maximálně 50 průchodů, v čase 2 minuty maximální tlak na vstupuje 6 barů (0,6 MPa) (tlak na výstupu je přibližně 850 barů (85 MPa)) pro produkci menších nebo větších objemů emulze. Této adaptace je možné dosáhnout běžným experimentem, který zahrnuje sledování výsledné emulze dokud se nedosáhne přípravku, kde olejové kapénky mají požadovaný průměr.
Kombinace adjuvans podle vynálezu se může použít jako systémové nebo mukózní adjuvans. Vynález popisuje systémové vakcinační prostředky, které se aplikují systémovým nebo parenterálním způsobem. To znamená intramuskulámě, intradermálně, transdermálně, subkutánně, intraperitoneálně nebo intravenózně. Výhodný způsob aplikace je transdermálním způsobem například pomocí kožních náplastí.
Systémové vakcinační prostředky podle vynálezu se mohou použít při ochraně nebo léčbě savců náchylných nebo trpících onemocněním intramuskulamím, intraperitoneálním, intradermálním, transdermálním, intravenózním nebo subkutánním způsobem. Způsoby systémové aplikace vakcinačních prostředků mohou zahrnovat běžné injekční stříkačky a jehly nebo zařízení navržené pro balistické zavedení pevných vakcín (popisuje se v publikaci WO 99/27 961) nebo tlakové vstřikovače kapalin, které nemají jehly (popisuje se v patentovém dokumentu US 4 596 556, US 5 993 412) nebo transdermální náplasti (popisuje se v patentovém dokumentu WO 97/48 440, WO 98/28 037). Vynález je možné také použít k zesílení imunogennosti antigenů aplikovaných na kůži (transdermální nebo transkutánní zavedení, popisuje se v patentových dokumentech WO 98/20 734, WO 98/28 037). Vynález dále popisuje aplikátory pro systémovou aplikaci, které jsou předem naplněny vakcinačním prostředkem nebo adjuvans podle vynálezu. Vynález dále popisuje aplikátor pro systémovou aplikaci, který je předem naplněn vakcinačním prostředkem nebo adjuvans podle vynálezu. V souladu s tím se dále popisuje způsob vyvolání imunitní odezvy jedince. Tento způsob zahrnuje aplikaci vakcinačního prostředku podle vynálezu jedinci, přičemž vakcinační prostředek se aplikuje parenterálním nebo systémovým způsobem. Výhodné způsoby vyvolání imunitní odezvy zahrnují aplikaci vakcinačního prostředku proti derivátu Her-2/neu spolu se saponinem odvozeným z Quil A, jako je QS21, a nosičem, jakoje emulze olej ve vodě, lipozom obsahující cholesterol nebo alum.
Systémové vakcinační prostředky podle vynálezu se mohou použít při ochraně nebo léčbě savců náchylných nebo trpících onemocněním aplikací mukózním způsobem, jako je orální způsob/za- 12CZ 302449 B6 žívacím traktem nebo nazálním způsobem. Alternativní mukózní způsob je intravaginální a intrarektální způsob. Výhodný mukózní způsob je aplikace nazálním způsobem, který se nazývá intranazální vakcinace. Způsoby intranazální vakcinace jsou dobře známy v oboru a zahrnují aplikaci kapének, spreje a suchého prášku do nasofaryngu imunizovaného jedince, Vynález popi5 suje vakcínační prostředky ve zmlžované formě a ve formě aerosolu. Vynález dále popisuje střevní prostředky, jako jsou kapsule a granule rezistentní vůči podmínkám v zažívacím traktu vhodné pro orální aplikaci, čípky vhodné pro rektální nebo vaginální aplikaci.
Pomocné prostředky podle vynálezu reprezentují třídu mukózních pomocných prostředků vhodio ných pro aplikaci člověku, přičemž je možné, že systémová vakcinace se nahradí mukózní vakcinaci. Ve výhodném provedení vynálezu čisté saponiny, jako je Quil A nebo jeho deriváty zahrnující QS21, escin, digitonin nebo saponiny Gosophila nebo Chenopodium quinoa v kombinaci s imunostimulačním oligonukleotidem se mohou použít jako adjuvans v případě mukózní aplikace antigenů, aby se dosáhlo systémové imunitní odezvy.
Pomocné prostředky podle vynálezu se používají při přípravě vakcinačních prostředků, které se mohou aplikovat systémovým nebo mukózním způsobem. V případě, že se vakcínační prostředky aplikují mukózní aplikací, pomocné prostředky obsahují hemolytický saponin.
V případě mukózní aplikace prostředek podle vynálezu s výhodou obsahuje hemolytický saponin. Hemolytický saponin nebo saponinové přípravky podle vynálezu se stanovují následujícím testem.
1. Čerstvá krev, která pochází z morčat, se promyla třikrát fyziologickým roztokem pufrova25 ným fosforečnanem (PBS) za použití stolní centrifugy. Po resuspendování do počátečního objemu se krev dále 1 Okřát zředila v PBS.
2. Objem 50 μΐ této suspenze krve se přidal do 800 μΙ PBS, které obsahuje dvojnásobné ředění povrchově aktivního činidla nebo saponinu.
3. Po osmi hodinách je možné hemotýzu hodnotit vizuálně nebo měřením optické hustoty supematantu. Přítomnost červeného supematantu, který absorbuje světlo při vlnové délce 570 nm, indikuje přítomnost herno lýzy.
4. Výsledky jsou vyjádřené jako koncentrace prvního ředění saponinu, při kterém nedochází k hemolýze.
Pro účely vynálezu je saponinový pomocný prostředek hemolytický v případě, že lyžuje erytrocyty v koncentraci nižší než 0,1%. V podstatě čisté vzorky QuilA, QS21, QS7, digitonin a β40 escin jsou hemolytické saponiny, jak se definovalo v tomto textu. Saponiny podle vynálezu vykazují hemolytickou aktivitu přibližně v koncentraci 0,5 až 0,00001 %, výhodněji při koncentraci 0,05 až 0,00001 %, dokonce ještě výhodněji v koncentraci 0,005 až 0,00001 % a nejvýhodnější je koncentrace 0,001 až 0,0004 %. V ideálním případě uvedené saponiny vykazují hemolytickou aktivitu podobnou (to znamená desetinásobný rozdíl), jako vykazuje QS21.
Vakcínační prostředky podle vynálezu se mohou také aplikovat orálním způsobem. V takových případech farmaceuticky přijatelný excipient může zahrnovat alkalické pufry nebo střevní kapsuje nebo mikrogranule. Vakcínační prostředky podle vynálezu se mohou také aplikovat vaginálním způsobem. V takových případech farmaceuticky přijatelné pomocné látky mohou také zahr50 novat emulgační činidla, polymery, jako je přípravek CARBOPOL^ a další známé stabilizátory vaginálních krémů a čípků. Vakcínační prostředky podle vynálezu se mohou aplikovat rektálním způsobem. V takových případech pomocné látky mohou také zahrnovat vosky a polymery, které jsou známy v oboru a využívají se při přípravě rektálních čípků.
- 13CZ 302449 B6
Vynález dále popisuje přípravu pomocných prostředků, které obsahují více jak jeden saponin. Kombinace alespoň dvou následujících skupin, které obsahují QS21, QS7, Quil A, β-escin nebo digitonín. Prostředky podle vynálezu mohou zahrnovat kombinace více než jednoho imunostimulačního oligonukleotidů.
V jiném případě se prostředky mohou kombinovat s vakcinačními nosiči, které obsahují chitosan nebo jiné póly kationické polymery, polymery tvořené molekulami kyseliny mléčné a polylaktidko-glykolidové částice, polymerové matrice založené na poly-N-acetylglukozaminu, částice složené z polysacharidů nebo chemicky upravených póly sacharidů, liposomy a částice založené na lipidech, částice tvořené monoesterem glycerolu atd. Saponiny se mohou také připravovat společně s cholesterolem za vzniku částic, jako jsou liposomy nebo ISCOM. Dále se saponiny mohou připravovat spolu s polyoxyethylenetherem nebo polyoxyethylenesterem za vzniku roztoku, který neobsahuje částice nebo za vzniku suspenze nebo za vzniku určitých struktur, jako je paucilamelámí liposom nebo ISCOM. Saponiny se mohou také připravovat spolu s pomocnými látkami, jako je Carbopol®, aby vzrostla viskozita, nebo spolu se suchým práškem, jako je pomocná látka laktóza.
Zvláště výhodné pomocné prostředky jsou kombinace 3D-MPL a QS21 (popisuje se v dokumentu EP 0 671 948 Bl), emulze olej ve vodě obsahující 3D-MPL a QS21 (popisuje se v dokumentu WO 95/17 210, WO 98/56 414) nebo 3D-MPL připravený spolu s jinými nosiči (popisuje se v dokumentu EP 0 689 454 Bl) v kombinaci s oligonukleotidy CpG. Množství CpG nebo imunostimulačních oligonukleotidů v adjuvans nebo ve vakcinačních prostředcích podle vynálezu je v obecném případě malé, ale závisí na vakcinačním prostředku. Pohybuje se v rozmezí 1 až 1000 pg v jedné dávce, s výhodou 1 až 500 pg v jedné dávce a nejvýhodněji 1 až 100 pg v jedné dávce.
Množství saponinu vhodné pro použití v pomocném prostředku podle vynálezu může být l až 1000 pg, s výhodou 1 až 500 pg, výhodněji 1 až 250 pg v jedné dávce a nej výhodnější je 1 až 100 pg v jedné dávce. Poměr CpGisaponinu (hmotnost/hmotnost) je proto v rozmezí 1:1000 až 1000:1 a bude v typickém případě v rozmezí 1:100 až 100:1 a s výhodou v rozmezí 1:10 až 1:1 nebo 1:1 až 10:1 a nej výhodněji 1:1,4:1 nebo 10:1.
Prostředky podle vynálezu se mohou použít pro účely profylaxe a terapie. Vynález popisuje použití kombinace saponinu a molekuly CpG při výrobě vakcinačního prostředku vhodného pro profylaxi a léčbu virové, bakteriální a parazitické infekce, alergie, zhoubného bujení a jiných poruch, které nejsou chronické. Vynález dále popisuje způsob léčby savce náchylného nebo trpícího infekčním onemocněním nebo zhoubným bujením nebo alergií nebo autoimunitním onemocněním. Vynález dále popisuje kombinaci vakcinačního prostředku a adjuvans, která obsahuje saponin a CpG, jak se popisuje v případě použití pro přípravu léčebného prostředku. Vakcinační prostředek se v obecném případě popisuje v publikaci New Trends and Development in Vaccines, Voliér etal., University Park Press, Baltimore, Maiyland, USA 1978.
Vynález dále popisuje způsob prevence onemocnění u jedince, jako je to v případě karcinomu prostaty, prsu, kolorektálního karcinomu, karcinomu plic, karcinomu pankreasu, renálního karcinomu a melanomu. Tento způsob zahrnuje aplikaci prostředku systémovým způsobem.
V jiném případě vynález popisuje mukózní vakcinační prostředek, který zahrnuje antigen a hemolytický saponin. Popisuje se způsob léčby jedince náchylného nebo trpícího onemocněním, který zahrnuje aplikaci prostředku na povrch sliznice jedince.
Dále se popisuje způsob vyvolání specifické imunitní odezvy na systémový antigen u savců, který zahrnuje aplikaci prostředku na povrch sliznice uvedeného savce. Vakcinační prostředek obsahuje antigen a hemolytický saponin. Dále se popisuje způsob výroby vakcinačního prostředku nebo adjuvans, který obsahuje saponin a molekulu CpG a antigen.
- 14CZ 302449 B6
Příklady vhodných farmaceuticky přijatelných pomocných látek vhodných pro použití v kombinacích podle vynálezu zahrnují vodu, fyziologický roztok pufrovaný fosforečnanem, izotonické pufrované roztoky.
Přehled obrázků na výkresech
Obrázek č. 3 zobrazuje výsledky růstu nádoru myší ze skupiny l, 2, 4, 5 a 6. Na obrázku č. 4 jsou zobrazeny výsledky růstu nádoru u myší ve skupinách 1, 5, 6, 7 a 11. Na obrázku č. 5 jsou io výsledky získané u myší ve skupinách 1, 5, 6, 8, 9 a 10. Vakcinační prostředky, které vyvolaly úplnou regresi nádoru byly ty, které obsahují jak imunostimulační oligonukleotid, tak saponin.
Na obrázku č. 6 a 7 je zobrazena lymfoproliferace splenocytů in vitro po inkubaci s imunogenem v koncentraci 5 pg/ml (ECD-PD) nebo s extrabuněčnou (ECD) nebo intrabuněčnou oblastí (1CD) nebo Her-2/neu.
Obrázky č. 8 a 9 zobrazují humorální imunitní odezvu na imunogen (ECD-PD) vyjádřenou jako íg. Hodnoty se získaly měřením testem ELISA (obrázek č. 8) nebo rozšířením izotypu IgG při těchto odezvách (obrázek č. 9).
Na obrázku č. 10 a 11 je zobrazena lymfoproliferace splenocytů po druhé vakcinaci a 14 dní po čtvrté vakcinaci po inkubaci in vitro s imunogenem v koncentraci 3 pg/ml (NS1-P703P) nebo s P703P exprimovaném v mikroorganizmu pichia (15 pg/ml) s nespecifickým fúzním proteinem NSl-OspA.
Obrázky č. 12 a 13 zobrazují humorální imunitní odezvu na imunogen (NS1-P703P) vyjádřenou jako celkové Ig. Hodnoty se získaly měřením testem ELISA a vyjádřily se jako střední hodnoty titrů (obrázek č. 10) nebo rozptylem izotypu IgG při těchto odezvách (obrázek č. 11.).
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1:
- ECD-PD se připravil v buňkách CHO způsobem popsaným v dokumentu WO 00/44 899. Přípravky se testovaly na myších a králících.
- Přípravky se porovnávaly s řadou kontrol.
SBAS1+SBAS7:
ECD-PD se připravil s oligonukleotidem CpG 2006 a 3D-MPL, QS21 ve formě liposomů.
Přípravek SBASI
Přípravek SBAS1 obsahuje QS21 v liposomech a 3D-MPL spojený s liposomy a připravil se způsobem popsaným v dokumentu EP 0 822 831.
Přípravek SBAS1 a SBAS7
Ke shora v textu popsanému přípravku se přidal oligonukleotid CpG 2006. Antigen se před použitím smíchal s pomocným prostředkem.
- 15CZ 302449 B6
Přípravky založené na SBAS7 a SBAS2 (myš)
V případě jedné dávky 50 μΙ vakcinačního prostředku se protein ECD-PD (25 pg) ředil lOx 5 koncentrovaným PBS s hodnotou pH 6,8 a vodou. Pak se přidala emulze olej ve vodě, která obsahuje SB62. Tato emulze obsahuje 5% skvalen, 5% tokoferol, 2% Tween 80. Velikost částice je 180 nm.
Příprava emulze SB62 (2x koncentrované) io
Tween 80 se rozpustil ve fyziologickém roztoku pufrovaném fosforečnanem (PBS) za vzniku 2% roztoku v PBS. Aby vzniklo 100 ml dvakrát koncentrované emulze, smíchalo se na vortexu 5 g alfa-tokoferolu LD a 5 ml skvalenu. Za stálého míchání se přidalo 90 ml roztoku PBS/Tween. Výsledná emulze se nechala projít stříkačkou a nakonec se mikrofluidizovala za použití mikroi5 fiuidízéru Ml 1OS. Výsledné kapénky oleje mají velikost přibližně 180 nm. Pak se přidalo 10 μg
3D-MPL, 10 pg QS21. Pak se přidalo 50 pg CpG ODN 2006 a o 30 minut později se přidal thiomersal jako konzervační činidlo v koncentraci 50 pg/ml. Všechny inkubace proběhly při teplotě místnosti za stálého míchání.
Přípravky SBAS se připravily způsobem popsaným shora v textu, s výjimkou, že se nepřidal oligonukleotid CpG.
SBAS7 je oligonukleotid CpG 2006.
Přípravky založené na SBAS2 a SBAS7 (králík)
V případě jedné dávky 500 μΙ vakcinačního prostředku se protein ECD-PD (100 pg) ředil lOx koncentrovaným PBS s hodnotou pH 6,8 a vodou. Pak se přidala emulze 250 μΙ SB62, 100 pg 3D-MPL, 100pg QS2I a 500 pg CpG ODN 2006. Po 30 minutách se přidal thiomersal v konin centraci 50 pg/ml jako konzervační Činidlo. Všechny inkubace se provedly při teplotě místnosti za stálého míchání.
Příklad 2: Experimenty zavedení nádoru.
Skupině myší F1 (C57 x Balb) (8 myší ve skupině) se injekcí zavedla 1/10 dávky lidského antigenu (25 pg) v den 0, 14 a 42 a v den 56 se zavedly podkožně buňky TC1 exprimující Her2 (2xl06 buněk TC1 Her2 najedno zvíře).
Buňky TC1 zjedné poloviny sleziny zvířete se shromáždily v den 56 a zvířata se nechala vykrvácet.
Jak je zobrazeno na obrázku č. 1 přidání oligonukleotidu CpG k přípravku 3D-MPL/QS21 synergicky zesiluje regresi nádoru a pouze aplikací těchto přípravků dochází k úplné regresi nádoru u myší.
Příklad 3: Imunogennost ECD-PD v různých adjuvans u králíků.
Šest skupin, kdy každá obsahuje 4 králíky, se imunizovaly v den 0, 21 a 42 se 100 pg ECD-PD v AS02, AS01, AS05, AS06 (CpG 2006 absorbované na alum), AS07 a AS02B a AS07.
- 16CZ 302449 B6
Sérologie se analyzovala 14 dní post III a v tabulce č. 1 je zobrazeno, že prostředky podle vynálezu byly lepší ve srovnání s testovanými prostředky při vyvolání vysokého titru proti látkové odezvy.
Tabulka č. 1
pre | 14 postili | |
AS02B | 50 | 96 923 |
AS01B | 173 | 196 637 |
AS 5 | 144 | 76 221 |
AS 6 | 142 | 74 180 |
AS07A | 480 | 3 904 |
AS02B+AS07A | 94 | 362 713 |
Příklad 4: Imunogennost Her-2/neu, ECD-/PD u dospělých opic Rhesus
Dospělé opice Rhesus se imunizovaly ECD-PD za použití různých pomocných prostředků.
AS02B QS21, 3 D-MPL, v emulzi olej ve vodě
AS01 QS21,3D-MPLv liposomech
AS05 QS21 v liposomech
AS06 CpG 2006 v alum
AS07 CpG 2006
AS02B+AS07detaily se popisují v příkladu 1.
Vakcinace vyvolává vyšší proti látkovou odezvu u přípravků podle vynálezu (AS)2+AS07. Zobrazeno na obrázku č. 1.
Další analýza ukazuje protilátkovou odezvu, která je polyklonální, a demonstruje inhibiční aktivitu růstu in vitro lidské buněčné linie karcinomu prsu (SKBR3), které nadměrně exprimují molekulu Her-2/neu. Herceptin, což je monoklonální protilátka vhodná pro léčbu nádorů, které exprimují Her-2/neu, je schopna inhibovat růst uvedené buněčné linie.
Lr protilátek vytvořených po aktivní vakcinaci vakcinačním prostředkem se testovala jejich funkce.
Příklad 5: Imunizace myší antigenem ECD-PD
Tento experiment se navrhl za účelem zkoumání rozmezí pomocných prostředků s antigenem, který je fúzí extrabuněčné oblasti Her-2/neu spojenou s fosforylační oblastí (ECD-PD), která se produkovala v buňkách CHO podle způsobu popsaného v dokumentu WO 00/44 899.
- 17CZ 302449 B6
skupina | antigen (25 pg) | adjuvans |
1 | ECD-PD | žádné (fyziologický roztok pufrovaný fosforečnanem (PBS)) |
2 | ECD-PD | liposomy s QS21 a 3D-MPL v membráně |
3 | ECD-PD | emulze olej ve vodě obsahující tokol s QS21 a 3D-MPL |
4 | ECD-PD | CpG |
5 | ECD-PD | liposomy s QS21 a 3D-MPL v membráně + CpG |
6 | ECD-PD | emulze olej ve vodě obsahuj ící tokol s QS21 a 3D-MPL + CpG |
7 | ECD-PD | 3D-MPL + CpG |
8 | ECD-PD | QS21 + CpG |
9 | ECD-PD | emulze olej ve vodě obsahuj ící tokol + CpG |
10 | ECD-PD | liposomy s QS21 v membráně + CpG |
11 | ECD-PD | liposomy s 3D-MPL v membráně + CpG |
V emulzích olej ve vodě, které obsahují tokol a použily se ve shora uvedených skupinách, se používá D,L-tokoferol (CAS č. 10191^41-0, chemický název (2RS, 4'RS, 8'RS)-2,5,7,8tetramethy 1-2-(4',8', 12-trímethyltridecyl)-6-chromanol), který je běžně dostupný u firmy ROCHE(lm). Jestliže je v emulzi olej ve vodě přítomen tokol, je v koncentraci 2,5 % (objem) a je v kombinaci se skvalenem, který jev koncentraci 2,5 % (objem). Oba oleje se smíchaly a přidal se polyoxyethylensorbitanmonooleát (Tween80(tm)) pak došlo k mikrofluidizaci za použití mikroio fluidizačního stroje Ml 10S, dochází maximálně k 50 průchodům po dobu 2 minuty při maximálním tlaku na vstupu 0,6 MPa (tlak na výstupu je přibližně 85 MPa) (popisuje se v dokumentu WO 95/17 210). Skupiny 3, 6 a 9 jsou založené na shora uvedené emulzi s tokolem, přičemž se přidá vodný roztok QS21, 3D-MPL nebo CpG.
QS21 a 3D-MPL, jestliže je přítomen v libovolných vakcinačních skupinách, je zahrnut v množství 5 gg/dávku. CpG (OL1GO4 (SEQ ID NO: 4) TCG TCG TTT TGT CGT TTT GTC GTT) se přidal v dávce 50 gg.
Adjuvans používané pro skupiny 2, 5, 10 se připravily postupy popsanými v dokumentu
EP 0 822 831 Bl. Skupina 11 obsahovala 3D-MPL v membráně liposomu. 3D-MPL, dioleoylfosfatidylcholin a cholesterol se smíchaly a mikrofluidizovaly za vzniku unilamelámího lipozomu (jak se popisuje v publikaci EP 0 822 831 Bl, nepoužívá se QS21).
Adjuvans používané ve skupině 4, 7 a 8 byly vodné suspenze nebo roztok.
- 18CZ 302449 B6
Postup vakcinace
Skupiny myší B6F1 se vakcinovaly čtyřikrát intramuskulámě v rozmezí 14 dní (objem dávky je 5 50 μΐ). 14 dní po 4. vakcinaci se myším aplikovalo podkožně 2x106 nádorových buněk TC1, které exprimují Her-2/neu.
Nádorové buněčné linie Her-2/neu-TCl se produkovaly transdukcí buněk TC1 retrovirovým genem, který kóduje Her-2/neu. Po selekci blastocydinem se izolovaly rezistentní klony a testoio vala se jejich schopnost exprimovat Her-2/neu testem FACS. Vybral se klon s nejvyšší expresí
Her-2/neu. Zjistilo se, že dávka 2x106 vykazuje podobnou kinetiku růstu, jako buňky TC1 a u kontrolních zvířat 100 % dochází ke vzniku nádoru. Velikost jednotlivých nádorů se měřila dvakrát a exprimovala se jako průměr ve skupině.
Výsledky
Obrázek č. 3 zobrazuje výsledky růstu nádoru myší ze skupiny 1, 2, 4, 5 a 6. Na obrázku č. 4 jsou zobrazeny výsledky růstu nádoru u myší ve skupinách 1, 5, 6, 7 a 11. Na obrázku č. 5 jsou výsledky získaných u myší ve skupinách 1, 5, 6, 8, 9 a 10. Vakcinační prostředky, které vyvolaly úplnou regresi nádoru byly ty, které obsahují jak imunosti mu lační oligonukleotid tak saponin.
Na obrázku č. 6 a 7 je zobrazena lymfoproliferace splenocytů in vitro po inkubaci s imunogenem v koncentraci 5 pg/ml (ECD-PD) nebo s extrabuněčnou (ECD) nebo intrabuněčnou oblastí (ICD) nebo Her-2/neu.
Obrázky č. 8 a 9 zobrazují humorální imunitní odezvu na imunogen (ECD-PD) vyjádřenou jako
Ig. Hodnoty se získaly měřením testem ELISA (obrázek č, 8) nebo distribuci izotypu IgG při těchto odezvách (obrázek č. 9).
Závěr
Po 3 injekcích vyvolání protilátek odpovídá
AS02B+AS07A>ASOIB>AS02B=±AS06=AS05>AS07A,
Obecný závěr
Testované adjuvans (ASI, AS2, AS7) vykazuje podobný účinek. Avšak kombinace ASI a AS7 nebo AS2 a AS7 jsou účinnější adjuvans. CMI je jasně prokázána po čtvrté vakcinaci u zvířat, kterým se aplikovalo kombinované adjuvans, které obsahuje celé molekuly ECD-PD nebo zvláště ECD a ICD. Přípravky podle vynálezu jsou velmi účinné při vyvolání regrese nádoru.
Příklad 6: Imunizace myší antigenem P703P
Tento experiment se navrhl tak, aby se zkoumalo rozmezí pomocných prostředků s antigenem, kteréjsou fúzí antigenu prostázy (popisuje se v publikaci Ferguson et al., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1999, 96, 3114 az 3119) a N-terminálního fragmentu aminokyselin 1 až 81 NS1.
- 19CZ 302449 B6
skupina | antigen (25 pg) | adjuvans |
1 | P703P-NS1 | žádný (fyziologický roztok pufrovaný fosforečnaneRm (PBS)) |
2 | P703P-NS1 | CpG |
3 | P703P-NS1 | liposomy s QS21 v membráně + CpG |
4 | P703P-NS1 | liposomy s QS21 a 3D-MPL v membráně + CpG |
5 | P703P-NS1 | emulze olej ve vodě obsahující tokol s QS21 a 3D-MPL + CpG |
6 | P703P-NS1 | emulze olej ve vodě obsahující tokol + CpG |
V emulzích olej ve vodě, které obsahují tokol a použily se ve shora uvedených skupinách, se používá D,L-tokoferol (CAS č. 10191^11-0, chemický název (2RS, 4'RS, 8'RS>-2,5,7,8tetramethy 1-2-(4',8', 12-trimethyltridecyl)-6-chromanol), který je běžně dostupný u firmy ROCHE . Jestliže je v emulzi olej ve vodě přítomen tokol, je v koncentraci 2,5 % (objem) v kombinaci se skvalenem, který je v koncentraci 2,5 % (objem). Oba oleje se smíchaly a přidal io se polyoxyethylensorbitanmonooleát (Tween80™) pak došlo k mikrofluidizaci za použití mikrofluidizačního stroje Ml 10S, dochází maximálně k 50 průchodům po dobu 2 minuty při maximálním tlaku na vstupu 0,6 MPa (tlak na vystupuje přibližně 85 MPa) (popisuje se v dokumentu WO 95/17 210). Skupiny 5 a 6 jsou založené na shora uvedené emulzi s tokolem, přičemž se přidá vodný roztok QS21, 3D-MPL nebo CpG.
QS21 a 3D-MPL, jestliže je přítomen v libovolných vakcinačních skupinách, je zahrnut v množství 5 pg/dávku. CpG (OLIGO4 (SEQ ID NO: 4): TCG TCG TTT TGT CGT TTT TGC GTT) se přidal v dávce 50 pg.
Adjuvans používané pro skupiny 3 a 4 se připravily postupy popsanými v dokumentu EP0822 83I Bl.
Postup vakcinace
Skupiny myší B6F1 se vakcinovaly čtyřikrát intramuskulárně v rozmezí 14 dní (objem dávky je 50 pl).
Výsledky
Na obrázku č. 10 a 11 je zobrazena lymfoproliferace splenocytů po druhé vakcinaci a 14 dní po čtvrté vakcinaci po in vitro inkubaci s imunogenem v koncentraci 3 pg/ml (NS1-P703P) nebo s P703P exprímovaném v mikroorganizmu pichia (15 pg/ml) s nespecifickým fúzním proteinem NSl-OspA.
Obrázky Č. 12 a 13 zobrazují humorální imunitní odezvu na imunogen (NS1-P703P) vyjádřenou jako celkové Ig. Hodnoty se získaly měřením testem ELISA a vyjádřily se jako střední hodnoty titrů (obrázek č. 10) nebo distribuci izotypu IgG při těchto odezvách (obrázek c. 11).
Claims (5)
- PATENTOVÉ NÁROKY5 1. Imunogenní prostředek, vyznačující se tím, že zahrnuje antigen zhoubného bujení vybraný ze skupiny:i) antigen z rodiny proteinů MÁGE spojený s heterogenním fúzním partnerem io i i) derivát antigenu Her-2/neu, kterému chybí funkční transmembránová doména Her-2/neu, a pomocný prostředek obsahující saponin spolu s imunostimulačním oligonukleotidem a lipopolysacharidem ze skupiny i 5 a) monofosforyllipid A,b) 3- 0—deacylováný monofosforyllipid A ac) difosforyllipid A.
- 2. Imunogenní prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že saponinem je20 QS21.
- 3. Imunogenní prostředek podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že imunostimulační oligonukleotid obsahuje alespoň dva motivy CpG.25
- 4. Imunogenní prostředek podle kteréhokoliv z nároků laž3, vyznačující se tím, že se imunostimulační oligonukleotid volí ze skupiny
SEQ ID NO 1 - TCC ATG ACG TTC CTG ACG TT (CpG 1826) SEQ ID NO 2 - TCT CCC AGC GTG CGC CAT (CpG 1758) SEQ ID NO 3 - ACC GAT GAC GTC GCC GGT GAC GGC ACC ACG SEQ ID NO 4 - TCG TCG TTT TGT CGT TTT GTC GTT (CpG 2006) SEQ ID NO 5 - TCC ATG ACG TTC CTG ATG CT (CpG 1668). 30 5. Imunogenní prostředek podle kteréhokoliv z nároků laž4, vyznačující se tím, že saponin byl zpracován na formu imunostimulačního komplexu ISCOM nebo na liposomy.6. Imunogenní prostředek podle kteréhokoliv z nároků laŽ4, vyznačující se tím, že saponin je přítomen jako emulze typu olej ve vodě.7. Imunogenní prostředek podle kteréhokoliv z nároků lažó, vyznačující se tím, že obsahuje všechny extrabuněčné oblasti Her-2/neu.8. Imunogenní prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že navíc obsahuje 40 fosforylační oblast Her-2/neu.9. Použití imunogenního prostředku podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8 pro výrobu léčiva pro léčení nebo profylaxi nádorů.-21 CZ 302449 B610. Způsob výroby imunogenní ho prostředku podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8, vyznaču jící se t í m , že se smísí antigen zhoubného bujení ze skupiny - 5 i) antigen z rodiny proteinů MÁGE spojený s heterogenním fúzním partnerem íi) derivát antigenu Her-2/neu, kterému chybí funkční transmembránová doména I ler-2/neu, se saponinem, imunostimulacním oligonukleotidem a lipopolysacharidem ze skupiny io a) monofosforyllipid A,b) 3-O-deacylovaný monofosforyllipid A ac) difosforyllipid A.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB0025573A GB0025573D0 (en) | 2000-10-18 | 2000-10-18 | Vaccine |
US09/690,921 US6544518B1 (en) | 1999-04-19 | 2000-10-18 | Vaccines |
GB0025574A GB0025574D0 (en) | 2000-10-18 | 2000-10-18 | Vaccine |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ20031093A3 CZ20031093A3 (cs) | 2003-08-13 |
CZ302449B6 true CZ302449B6 (cs) | 2011-05-25 |
Family
ID=27255945
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ20031093A CZ302449B6 (cs) | 2000-10-18 | 2001-10-16 | Vakcinacní prostredky |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
EP (2) | EP1889630B1 (cs) |
JP (1) | JP2004511527A (cs) |
KR (1) | KR100860893B1 (cs) |
CN (1) | CN100548373C (cs) |
AU (2) | AU4433702A (cs) |
BR (1) | BR0114786A (cs) |
CA (1) | CA2425358C (cs) |
CZ (1) | CZ302449B6 (cs) |
DK (1) | DK1326638T3 (cs) |
ES (1) | ES2295229T3 (cs) |
HU (1) | HU229642B1 (cs) |
IL (1) | IL155282A0 (cs) |
MX (1) | MXPA03003408A (cs) |
NO (1) | NO335919B1 (cs) |
NZ (1) | NZ525320A (cs) |
PL (1) | PL208755B1 (cs) |
SI (1) | SI1326638T1 (cs) |
WO (1) | WO2002032450A2 (cs) |
Families Citing this family (40)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE69929444T2 (de) | 1998-08-10 | 2006-09-28 | Antigenics Inc., Woburn | Cpg-zusammensetzungen, saponin-adjuvantien und verfahren zu deren verwendung |
US7776343B1 (en) | 1999-02-17 | 2010-08-17 | Csl Limited | Immunogenic complexes and methods relating thereto |
CN1599623B (zh) | 2001-09-14 | 2011-05-11 | 赛托斯生物技术公司 | 免疫刺激物向病毒样颗粒内的包装:制备方法与用途 |
CA2471092A1 (en) | 2001-12-21 | 2003-07-10 | Antigenics Inc. | Compositions comprising immunoreactive reagents and saponins, and methods of use thereof |
KR100456681B1 (ko) | 2002-05-22 | 2004-11-10 | 주식회사 대웅 | 박테리아의 염색체 dna 파쇄물과 비독성리포폴리사카라이드를 포함하는 면역강화 및 조절 조성물 |
AU2003242742B2 (en) * | 2002-06-20 | 2009-04-30 | Cytos Biotechnology Ag | Packaged virus-like particles for use as adjuvants: method of preparation and use |
AU2003260748A1 (en) * | 2002-08-30 | 2004-03-19 | Glaxo Group Limited | Il-14 vaccine for the treatment of asthma and atopic disorders |
SG122973A1 (en) | 2003-10-30 | 2006-06-29 | Coley Pharm Gmbh | C-class oligonucleotide analogs with enhanced immunostimulatory potency |
EP1781325A2 (en) * | 2004-07-18 | 2007-05-09 | CSL Limited | Immuno stimulating complex and oligonucleotide formulations for inducing enhanced interferon-gamma responses |
WO2006050116A1 (en) * | 2004-11-02 | 2006-05-11 | Biomedical Research Models, Inc. | Methods of cancer treatment/prevention using cancer cell-specific surface antigens |
GB0504436D0 (en) * | 2005-03-03 | 2005-04-06 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
US11707520B2 (en) | 2005-11-03 | 2023-07-25 | Seqirus UK Limited | Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture |
CA2628152C (en) | 2005-11-04 | 2016-02-02 | Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. | Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture |
EP2468300B1 (en) | 2006-09-26 | 2017-12-20 | Infectious Disease Research Institute | Vaccine composition containing synthetic adjuvant |
US20090181078A1 (en) | 2006-09-26 | 2009-07-16 | Infectious Disease Research Institute | Vaccine composition containing synthetic adjuvant |
CA2744987C (en) | 2008-12-02 | 2018-01-16 | Chiralgen, Ltd. | Method for the synthesis of phosphorus atom modified nucleic acids |
DK2396032T3 (en) | 2009-02-10 | 2016-12-19 | Seqirus Uk Ltd | Influenza vaccines with reduced amounts of squalene |
CN102481312B (zh) | 2009-06-05 | 2015-07-15 | 传染性疾病研究院 | 合成的吡喃葡萄糖脂佐剂 |
BR112012000828A8 (pt) | 2009-07-06 | 2017-10-10 | Ontorii Inc | Novas pró-drogas de ácido nucleico e métodos de uso das mesmas |
EP2575876B1 (en) | 2010-05-26 | 2017-12-06 | Selecta Biosciences, Inc. | Multivalent synthetic nanocarrier vaccines |
WO2012039448A1 (ja) | 2010-09-24 | 2012-03-29 | 株式会社キラルジェン | 不斉補助基 |
EA027236B1 (ru) | 2011-04-08 | 2017-07-31 | Иммьюн Дизайн Корп. | Иммуногенные композиции и способы применения таких композиций для индукции гуморального и клеточного иммунного ответа |
US9605019B2 (en) | 2011-07-19 | 2017-03-28 | Wave Life Sciences Ltd. | Methods for the synthesis of functionalized nucleic acids |
MX2014001142A (es) | 2011-07-29 | 2014-02-27 | Selecta Biosciences Inc | Nanoportadores sinteticos que generan respuestas inmunitarias humorales y de linfocitos t citotoxicos (ctl). |
EP2751570A4 (en) * | 2011-08-31 | 2015-08-12 | Oncocyte Corp | METHOD AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT AND DIAGNOSIS OF CANCER |
EP3388835B1 (en) | 2012-05-16 | 2020-04-01 | Immune Design Corp. | Vaccines for hsv-2 |
KR101835401B1 (ko) * | 2012-07-13 | 2018-03-08 | 신 니뽄 바이오메디칼 라보라토리즈, 엘티디. | 키랄 핵산 어쥬번트 |
AU2013288048A1 (en) | 2012-07-13 | 2015-01-22 | Wave Life Sciences Ltd. | Asymmetric auxiliary group |
KR20220139425A (ko) | 2012-07-13 | 2022-10-14 | 웨이브 라이프 사이언시스 리미티드 | 키랄 제어 |
AU2013358892B2 (en) * | 2012-12-13 | 2018-06-21 | Aduro Biotech, Inc. | Compositions comprising cyclic purine dinucleotides having defined stereochemistries and methods for their preparation and use |
EP2777711A1 (en) * | 2013-03-11 | 2014-09-17 | Icon Genetics GmbH | Her2/Neu cancer vaccine |
CN105209047B (zh) | 2013-04-18 | 2020-08-18 | 免疫设计股份有限公司 | 用于癌症治疗的gla单一疗法 |
SG10201708821RA (en) | 2013-04-29 | 2017-12-28 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Compositions and methods for altering second messenger signaling |
AP2015008700A0 (en) | 2013-05-18 | 2015-08-31 | Univ California | Compositions and methods for activating "stimulator of interferon gene"-dependent signalling |
US9463198B2 (en) | 2013-06-04 | 2016-10-11 | Infectious Disease Research Institute | Compositions and methods for reducing or preventing metastasis |
CN109675026A (zh) * | 2013-09-19 | 2019-04-26 | 硕腾服务有限责任公司 | 油基佐剂 |
WO2015108048A1 (ja) | 2014-01-15 | 2015-07-23 | 株式会社新日本科学 | 抗腫瘍作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗腫瘍剤 |
US10322173B2 (en) | 2014-01-15 | 2019-06-18 | Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. | Chiral nucleic acid adjuvant having anti-allergic activity, and anti-allergic agent |
EP3095461A4 (en) | 2014-01-15 | 2017-08-23 | Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. | Chiral nucleic acid adjuvant having immunity induction activity, and immunity induction activator |
PT3094728T (pt) | 2014-01-16 | 2022-05-19 | Wave Life Sciences Ltd | Desenho quiral |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999061056A2 (en) * | 1998-05-22 | 1999-12-02 | Loeb Health Research Institute At The Ottawa Hospital | Methods and products for inducing mucosal immunity |
WO2000009159A1 (en) * | 1998-08-10 | 2000-02-24 | Aquila Biopharmaceuticals, Inc. | Compositions of cpg and saponin adjuvants and methods thereof |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SE8205892D0 (sv) * | 1982-10-18 | 1982-10-18 | Bror Morein | Immunogent membranproteinkomplex, sett for framstellning och anvendning derav som immunstimulerande medel och sasom vaccin |
UA56132C2 (uk) * | 1995-04-25 | 2003-05-15 | Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. | Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини |
DK1659178T3 (da) * | 1998-02-05 | 2010-07-12 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Fremgangsmåde til oprensning eller fremstilling af et MAGE-protein |
CN1201004C (zh) * | 1999-01-29 | 2005-05-11 | 考丽克萨有限公司 | HER-2/neu融合蛋白 |
WO2000062800A2 (en) * | 1999-04-19 | 2000-10-26 | Smithkline Beecham Biologicals Sa | Adjuvant composition comprising saponin and an immunostimulatory oligonucleotide |
AU781812B2 (en) * | 2000-01-13 | 2005-06-16 | Antigenics, Inc. | Innate immunity-stimulating compositions of CPG and saponin and methods thereof |
EP1985702A3 (en) * | 2000-12-08 | 2010-08-18 | Coley Pharmaceutical GmbH | CPG-like nucleic acids and methods of use thereof |
-
2001
- 2001-10-16 ES ES01987671T patent/ES2295229T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-16 CN CNB018206611A patent/CN100548373C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-10-16 PL PL365598A patent/PL208755B1/pl unknown
- 2001-10-16 CZ CZ20031093A patent/CZ302449B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-10-16 NZ NZ525320A patent/NZ525320A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-10-16 WO PCT/EP2001/011984 patent/WO2002032450A2/en active IP Right Grant
- 2001-10-16 EP EP07121675A patent/EP1889630B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-16 AU AU4433702A patent/AU4433702A/xx active Pending
- 2001-10-16 CA CA2425358A patent/CA2425358C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-10-16 EP EP01987671A patent/EP1326638B9/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-16 SI SI200130800T patent/SI1326638T1/sl unknown
- 2001-10-16 AU AU2002244337A patent/AU2002244337B2/en not_active Ceased
- 2001-10-16 HU HU0402067A patent/HU229642B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2001-10-16 DK DK01987671T patent/DK1326638T3/da active
- 2001-10-16 MX MXPA03003408A patent/MXPA03003408A/es active IP Right Grant
- 2001-10-16 IL IL15528201A patent/IL155282A0/xx unknown
- 2001-10-16 KR KR1020077026150A patent/KR100860893B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-10-16 BR BR0114786-2A patent/BR0114786A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-10-16 JP JP2002535687A patent/JP2004511527A/ja active Pending
-
2003
- 2003-04-11 NO NO20031705A patent/NO335919B1/no not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999061056A2 (en) * | 1998-05-22 | 1999-12-02 | Loeb Health Research Institute At The Ottawa Hospital | Methods and products for inducing mucosal immunity |
WO2000009159A1 (en) * | 1998-08-10 | 2000-02-24 | Aquila Biopharmaceuticals, Inc. | Compositions of cpg and saponin adjuvants and methods thereof |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1326638B9 (en) | 2008-02-20 |
BR0114786A (pt) | 2003-08-12 |
EP1326638A2 (en) | 2003-07-16 |
ES2295229T3 (es) | 2008-04-16 |
CN100548373C (zh) | 2009-10-14 |
AU2002244337B2 (en) | 2005-08-11 |
KR100860893B1 (ko) | 2008-09-29 |
PL208755B1 (pl) | 2011-06-30 |
CA2425358A1 (en) | 2002-04-25 |
HUP0402067A3 (en) | 2012-09-28 |
AU4433702A (en) | 2002-04-29 |
EP1889630B1 (en) | 2011-11-23 |
HUP0402067A2 (hu) | 2005-01-28 |
WO2002032450A3 (en) | 2002-10-10 |
IL155282A0 (en) | 2003-11-23 |
PL365598A1 (en) | 2005-01-10 |
EP1889630A1 (en) | 2008-02-20 |
NO20031705D0 (no) | 2003-04-11 |
KR20070114230A (ko) | 2007-11-29 |
JP2004511527A (ja) | 2004-04-15 |
CA2425358C (en) | 2012-08-21 |
SI1326638T1 (sl) | 2008-04-30 |
MXPA03003408A (es) | 2005-06-30 |
EP1326638B1 (en) | 2007-11-28 |
NO20031705L (no) | 2003-06-14 |
NO335919B1 (no) | 2015-03-23 |
DK1326638T3 (da) | 2008-03-25 |
HU229642B1 (en) | 2014-03-28 |
CN1481255A (zh) | 2004-03-10 |
WO2002032450A2 (en) | 2002-04-25 |
CZ20031093A3 (cs) | 2003-08-13 |
NZ525320A (en) | 2004-10-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA2425358C (en) | A vaccine composition comprising qs21, mpl, a cpg oligonucleotide and a cancer antigen | |
AU2002244337A1 (en) | Vaccines | |
US6544518B1 (en) | Vaccines | |
JP2008285487A (ja) | ワクチン | |
NZ550967A (en) | MAGE-3 and NY-ESO-1 based polyvalent vaccine for cancer immunotherapy | |
AU2005313439A1 (en) | Combination of tyrosine kinase inhibitor and HER-2/neu for cancer therapy | |
JP2011241222A (ja) | ワクチン | |
ZA200302885B (en) | Vaccines. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20161016 |