CZ280605B6 - V poloze 6 substituovaný tetrahydrobenz(cd)indol, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje - Google Patents

Abstract

V poloze 6 substituovaný tetrahydrobenz/cd/indol obecného vzorce I, kde znamená R.sup.1 .n.H, C.sub.1-4.n.alkyl, C.sub.3-4.n.alkenyl, cyklopropylmethyl, fenylem substituovaný C.sub.1-4.n.alkyl, -C/O/R.sup.4.n., -/CH.sub.2.n./.sub.n.n.S/C.sub.1-4.n.alkyl/ nebo /CH.sub.2.n./.sub.n.n.C/O/NR.sup.5.n.R.sup.6.n., R.sup.2 .n.H, C.sub.1-4.n.alkyl, C.sub.3-4.n.alkenyl nebo cyklopropylmethyl, R.sup.3 .n.H, C.sub.1-4.n.alkyl nebo blokovací skupinu, n 1 až 4 R.sup.5 .n.a R.sup.5 .n.nezávisle H, C.sub.1-4.n.alkoxy nebo fenyl, R.sup.4 .n.H, C.sub.1-4.n.alkyl, C.sub.1-4.n.halogenalkyl, C.sub.1-4.n.alkoxy nebo fenyl, A C=O, CHOH, C=C, R.sup.7 .n.C.sub.1-8.n.alkyl popřípadě substituovaný, popřípadě substituovaný aryl, popřípadě substituovaný aryl-C.sub.1-4.n.alkyl, C.sub.3-7.n.cykloalkylem substituovaný methyl nebo C.sub.3-7.n.cykloalkyl za podmínky, že když A znamená C= znamená R.sup.7.n. C.sub.1-7.n.alkŕ

Description

V poloze 6 substituovaný tetrahydrobenz[cd]indol, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje

Oblast techniky

Vynález se týká syntetické organické chemie a farmaceutické chemie a především tetrahydrobenz[cd]indolů, které jsou užitečné při ošetřování stavů, kdy je třeba řídit v těle serotoninovou funkci.

Dosavadní stav techniky

V několika posledních letech se zjistilo, že neurotransmiter serotonin /5-hydroxytryptamin-5HT/ je spojen přímo nebo nepřímo s četnými fyziologickými fenomény, jako je chut, paměť, tepelná regulace, spánek, sexuální chování, úzkost, deprese, snížení krevního tlaku a halucinogenní chování /Glennon R. A., J. Med. Chem., 30. 1. 1987/.

Zjistilo se, že existují různé typy 5-HT receptorů. Tyto receptory jsou klasifikovány jako 5-HT-^, 5-HT₂ a 5-HT₃ receptory, přičemž se dělí ještě na podtřídy 5-HT_1A, 5-HT_1B, 5-HT_lc a 5-HT_1D. Vazná afinita sloučeniny pro jeden nebo několik 5-HT receptorů může vést k žádoucímu fyziologickému efektu, nebo může minimalizovat nežádoucí jev. Proto je žádoucí připravovat sloučeniny, které se mohou vázat na 5-HT receptory a působit jako serotoninové agonisty nebo antagonisty.

Flaugh v americkém patentovém spise číslo 4 576959 /uděleno 1986/ a v evropské přihlášce vynálezu číslo 0153083 /zveřejněno 1985/ popisuje třídu v poloze 6 substituovaných 4-dialkylamino-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolů, které jsou popisovány jakožto centrální serotoninové agonisty. Leander v americkém patentovém spise číslo 4 745126 /1988/ popisuje způsob ošetřování úzkostných stavů u lidí použitím v poloze 4 substituovaného 1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol-6-karboxamidu.

Nyní se zjistilo, že určité v poloze 6 substituované a zvláště v poloze 6 acylovou skupinou substituované deriváty 4-aminotetrahydrobenz[cd]indolu jsou užitečné pro ošetřování stavů, které mohou být příznivě ovlivňovány modifikací 5-HT_1A receptorové funkce v lidském těle. Kromě toho se zjistilo, že určité instantní sloučeniny mají podstatnou afinitu pro 5-HT_1D receptor a mohou být proto užitečné pro ošetřování stavů, které se mohou příznivě ovlivňovat modifikací 5-ΗΤ^_Α nebo 5-HT^_A a 5-HT_3B receptorové funkce v lidském těle.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je v poloze 6 substituovaný tetrahydrobenz [cd] indol obecného vzorce I

-1CZ 280605 B6 ( I)

kde znamená

R¹ alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, cyklopropylmethylovou skupinu, nebo fenylovou skupinou substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

R² alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo cyklopropylmethylovou skupinu,

R³ atom vodíku nebo blokující skupinu, kterou je skupina benzoylová, tritylová nebo triisopropylsilylová,

A skupinu C=0,

R alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, trifluormethylovou skupinu, fenylovou skupinu popřípadě substituovanou alkoxyskupinou s 1 až 3 atomy uhlíku, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.

Zvláště se vynález týká sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená /a/ R¹ a R² na sobě nezávisle alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, /b/ R³ atom vodíku /c/ A skupinu vzorce C=O a /d/ R alkylovou skupinu s 1 az 8 atomy uhlíku nebo fenylovou skupinu, a její farmaceuticky vhodné soli.

Vynález se také týká farmaceutických prostředků, obsahujících jako účinnou látku sloučeninu obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají shora uvedený význam, a farmaceuticky vhodný excipient.

Vynález se také týká způsobu ovlivňování biologické odezvy

5- HT receptoru podáním účinného množství sloučeniny obecného vzorce I. Vynález se také týká ošetřování chorobných stavů, které vyžadují řízení funkce serotoninu v těle.

Zde používaným výrazem alkyl se vždy míní alkylová skupina s přímým nebo s rozvětveným řetězcem, mající uvedený počet atomů uhlíku. Například alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku se míní skupina methylová, ethylová, n-propylová, isopropylová, n.butylová, sek.-butylová, isobutylová a terč.-butylová. Alkylovou skupinou s 1 až 8 atomy uhlíku se míní skupiny, uvedené pro význam alkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku a dále skupina n-pentylová, 2-methylbutylová, 3-methylbutylová, n-hexylová, 4-methylpentylová, n-heptylová, 3-ethylpentylová, 2-methylhexylová, 2,3-dimethylpentylová, n-oktylová, 3-propylpentylová,

6- methylheptylová a podobné skupiny.

Výrazem alkenylová skupina s 3 až 4 atomy uhlíku se zde vždy míní olefinicky nenasycené alkylové skupiny, jako jsou například skupiny vzorce

-2CZ 280605 B6

-ch₂ch=ch₂, -ch/ch₃/ch=ch₂, -ch₂ch₂ch=ch₂.

Výrazem arylová skupina se zde vždy mini aromatická karbocyklická struktura, mající cyklickou strukturu s jedním nebo se dvěma kruhy s celkovým počtem 6 až 10 atomů uhlíku v cyklické struktuře. Jakožto příklady takové skupiny se uvádí skupina fenylová, naftylová a indonylová.

Výrazem cykloalkylová skupina se zde vždy míní alifatická karbocyklická struktura, mající uvedený počet atomů uhlíku v kruhu. Jakožto příklady cykloalkylové skupiny s 1 až 7 atomy uhlíku se uváděj í skupina cyklopropylová, cyklobutylová, cyklopentylová, cyklohexylová a cykloheptylová skupina.

Výrazem arylalkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu se vždy míní karbocyklická struktura, spojená s alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku; jakožto příklady takových skupin se uvádějí skupina benzylová, fenylethylová, a-methylbenzylová, 3-fenylpropylová, α-naftylmethylová, B-naftylmethylová, 4-fenylbutylová a podobné skupiny. Podobně se výrazem arylalkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu míní aromatická karbocyklická struktura, spojená s alkylovou skupinou s 1 až 3 atomy uhlíku.

Alkylová skupina s 1 až 8 atomy uhlíku, arylová skupina, arylalkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu a arylalkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu mohou být substituovány jedním nebo dvěma substituenty. Jakožto typické substituenty arylových nebo alkylových podílů se uvádějí alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, atom halogenu, hydroxyskupina, thioalkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku a podobné skupiny. Kromě toho může být arylová skupina, arylalkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu substituována také alkylovou skupinou s 1 až 3 atomy uhlíku, nebo trifluormethylovou skupinou.

Touto alkylovou skupinou s 1 až 3 atomy uhlíku se vždy míní skupina methylová, ethylová, n-propylová nebo isopropylová skupina; podobně výrazem alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku se míní methoxyskupina, ethoxyskupina, n-propoxyskupina a isopropoxyskupina. Výrazem atom halogenu se míní atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu; výrazem thioalkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku se vždy míní methylthioskupina, ethylthioskupina, n-propylthioskupina a isopropylthioskupina.

Jakožto příklady substituované alkylové skupiny s 1 až 8 atomy uhlíku se míní příkladně skupina methoxymethylová, trifluormethylová, 6-chlorhexylová, 2-brompropylová, 2-ethoxy-4-jodbutylová, 3-hydroxypentylová a methylthiomethylová skupina.

Jakožto příklady substituované arylové skupiny se uvádějí skupina p-bromfenylová, m-jodfenylová, p-tolylová, o-hydroxyfenylová, B-/4-hydroxy/naftylová, p-/methylthio/fenylová, m-trifluormethylfenylová, 2-chlor-4-methoxyfenylová, α -/5-chlor/naftylová skupina a podobné skupiny.

Jakožto příklady substituované arylalkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu se uvádějí skupina p-chlorbenzylová, o-methoxybenzylová, m-/methylthio/-a-methylbenzylová,

-3CZ 280605 B6

3-/4'-trifluormethylfenyl/propylová, o-jodbenzylová, p-methylbenzylová skupina a podobné skupiny.

Blokovací skupinou se zde míní skupina benzoylová, tritylová nebo triisopropylsilylová. Je však obecně známá zaměnitelnost takových skupin, pokud splňují požadavek, že nenarušují žádanou reakci a lze je po ukončení žádané reakce bez narušení připravované látky opět odstranit. V předmětném případě jde o skupiny, které se mohou vázat na atom dusíku například v aminoskupině a mohou předcházet tomu, aby se atom dusíku zúčastnil na reakci, prováděné na jiné funkční skupině molekuly, které se však z atomu dusíku mohou zase v případě potřeby odstranit. Takové skupiny popsal například T. W. Greene (Protective Groups in Organic Synthesis kapitola 7., John Wiley and Sons, New York, 1981) a J. Bartoň (Protective Groups in Organic Chemistry, kapitola 2., J. F. W. Mc Omie, vyd. Plenům Press, New York, 1973). Jakožto příklady takových skupin se uvádějí skupiny obecného vzorce -COOR, kde znamená R skupinu methylovou, ethylovou, propylovou, isopropylovou, butylovou, terč.-butylovou, terc.-amylovou, vinylovou, allylovou, fenylovou, benzylovou a substituovanou benzylovou, například skupinu p-nitrobenzylovou, o-nitrobenzylovou, 2,4-dichlorbenzylovou, 3,4-dimethoxybenzylovou, a trifenylmethylovou skupinu; skupina acylová popřípadě substituovaná, jako je například skupina formylová, acetylová, chloracetylová, dichloracetylová, trichloracetylová, trifluoracetylová, benzoylová a p-methoxybenzoylová skupina; a další skupiny, jako je například skupina methansulfonylová, p-toluensulfonylová, p-brombenzensulfonylová, p-nitrofenylethylová a p-toluensulfonylaminokarbonylová skupina. Jakožto výhodné blokovací skupiny se uvádějí skupina benzylová /-CH₂C₆H₅/, trifenylmethylová /tritylová/, acylová obecného vzorce C/O/R, nebo skupina obecného vzorce SiR₃, kde znamená R skupinu alkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku, halogenmethylovou, v poloze 2 atomem halogenu substituovanou alkoxyskupinu nebo fenylovou skupinu. Obzvláště výhodnými blokovacími skupinami jsou skupina vzorce -CH₂-CH₂CC1₃ a skupina trifenylmethylová.

Sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I mají alespoň jedno chirální centrum, a proto pro každou existují alespoň dva stereoisomery. Chirální centrum je v poloze 4 sloučeniny obecného vzorce I. Pokud substituční skupina obsahuje chirální centrum, mohou existovat další přídavné stereoisomery. Vynález se týká racemických směsí, jakož také v podstatě čistých steroisomerů obecného vzorce I. Výrazem v podstatě čistý se zde vždy míní, že alespoň přibližně 90 % molových, zvláště alespoň přibližně 95 % molových a především přibližně alespoň 98 % molových žádaného stereoisomeru je obsaženo ve vztahu k ostatním možným stereoisomerům.

Symboly R a S zde používanými se míní, jak je v organické chemii běžné, specifická konfigurace chirálního centra. Symbolem R se míní pravá a týká se konfigurace chirálního centra ve směru hodinových ručiček se zřetelem na priority skupin /vyšší ke druhé nižší/ při sledování vazby ve směru k nižší prioritní skupině. Symbolem S nebo levý se míní konfigurace chirálního centra ve směru proti hodinovým ručičkám se zřetelem na priority skupin /vyšší ke druhé nižší/ při sledování vazby ve směru k nižší prioritní skupině. Priorita skupin je založena na

-4CZ 280605 B6 jejich atomovém čísle. Parciální seznam priorit a pojednání o stereochemii je podrobné v publikaci The Vocabulary of Organic Chemistry /Slovník organické chemie/, Orchin a kol., John Wiley and Sons lne., str. 126.

Jakkoliv jsou všechny sloučeniny obecného vzorce I užitečné pro shora uvedené účely, je použití některých sloučenin obecného vzorce I účelné a výhodné. Výhodnými jsou sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená R¹ a R² vždy alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a zvláště n-propylovou skupinu; R³ atom vodíku; R⁷ alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo cykloalkylovou skupinu s 3 až 7 atomy uhlíku. Jakkoliv jsou účinné sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená A skupinu vzorce -CHOH nebo C=C, jsou takové sloučeniny považovány především jako meziprodukty pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená A skupinu C=O. Další výhodná provedení vynálezu budou ještě uvedena.

Jak shora uvedeno, jsou předmětem vynálezu také farmaceuticky vhodné soli sloučenin obecného vzorce I. Jelikož sloučeninami obecného vzorce I jsou aminy, jsou to ze své povahy zásady, a proto reagují s četnými anorganickými kyselinami a organickými kyselinami za vzniku farmaceuticky vhodných solí. Jakožto anorganické kyseliny se uvádějí kyselina chlorovodíková, dusičná, fosforečná, sírová, bromovodíková, jodovodíková, fosforitá a další podobné kyseliny; jakožto organické kyseliny se uvádějí alifatické monokarboxylové a dikarboxylové kyseliny, aminokyseliny, fenylovou skupinou substituované alkanové kyseliny, kyselina hydroxyalkanoová a hydroxyalkandioová, aromatické kyseliny a alifatické a aromatické sulfonové kyseliny. Jakožto farmaceuticky vhodné soli se uvádějí příkladně sulfáty, pyrosulfáty, hydrogensulfáty, sulfity, hydrogensulfity, nitráty, fosfáty, monohydrogenfosfáty, dihydrogenfosfáty, metafosfáty, pyrofosfáty, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, propionáty, kapryláty, akryláty, formáty, tartráty, isobutyráty, kapráty, heptanoáty, propioláty, oxaláty, malonáty, sukcináty, suberáty, sebakáty, fumaráty, maleáty, mandeláty, butin-1,4-dioáty, hexin-1,6-dioáty, hippuráty, benzoáty, chlorbenzoáty, methylbenzoáty, ftaláty, tereftaláty, benzensulfonáty, toluensulfonát, chlorbenzensulfonáty, xylensulfonáty, fenylacetáty, fenylpropionáty, fenylbutyráty, citráty, laktáty, B-hydroxybutyráty, glykoláty, maláty, naftalen-l-sulfonáty, naftalen-2-sulfonáty a mesyláty.

Jakožto reprezentativní příklady sloučenin obecného vzorce I se uvádějí: 4-/di-n-prpylamino/-6-acetyl-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol, 4-/n-propylamino/-6-/2,2-dimethylpropynoyl/l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol, 4-/diethylamino/-6-propanoyl-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol, 4-/di-n-propylamino/-6-benzoyl-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol, 4-/n-propylamino/-6-/2-methylpropanoyl/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol, l-methyl-4-/di-n-propylamino/-6-benzoyl-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol, l-methyl-4-/n-propylamino/-6-/3-methylbutanoyl/-l,3,4,5-tetrahydrobenz [cd]indol,

-5CZ 280605 B6

4-/di-n-propylamino/-6-/2,2-dimethylpropanoyl/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol,

4-/di-n-propylamino/-6-/2-fenylethanoyl/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol, 4-/N-n-propyl-N-cyklopropylmethyl/amino-6-propanoyl-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol a

4-/di-n-propylamino/-6-/2-methoxyethanoyl/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol.

Schéma I popisuje způsob přípravy sloučenin obecného vzorce Ί o 7

I podle vynalezu, kde znamená R , R a R shora definované skupiny a Z znamená shora definovanou skupinu, blokující aminoskupinu.

Podle jednoho z uvedených postupů se smíchá 4-amino-6-bromtetrahydrobenz[cd]indol obecného vzorce I s ekvimolárním množstvím až s mírným nadbytkem hydridu draselného v diethyletheru. Reakční složky se zpravidla smíchají při nízké teplotě, zvláště přibližně -20 až přibližně +10 °C, především při teplotě 0 °C. Získaná směs se ochladí na teplotu přibližně -100 až přibližně -60 C, s výhodou na teplotu -78 °C a směs se smíchá s lithiačním činidlem, s výhodou s alespoň dvoumolárním nadbytkem tohoto činidla. Jakožto vhodná lithiační činidla se uvádějí sek.-butyllithium, s výhodou terč.-butyllithium a jiné podobné organolithné sloučeniny. Reakce se provádí s výhodou při teplotě přibližně -100 až přibližné -20 °C, především při teplotě -60 až přibližně -40 °C.

Takto připravený 4-amino-6-lithiumtetrahydrobenz[cd]indol obecného vzorce 2 se pak uvádí do styku se vhodným elektrofilem, jako je sloučenina obecného vzorce

L -C/O/R⁷ kde R má shora uvedený význam a L znamena dobře uvolňovatelnou skupinu, například atom chloru nebo bromu, methoxyskupinu, fenoxyskupinu a podobné skupiny. Zpravidla se roztok sloučeniny obecného vzorce 2 při teplotě přibližně -100 až přibližně -60 °C a s výhodou při teplotě přibližně -80 °C přidává do roztoku tohoto činidla v rozpouštědle obou složek. Pokud se použije nadbytku elektrofilní sloučeniny v reakční směsi, aminoskupina v poloze 1 se také acyluje /to znamená, že Z je acylová skupina vzorce

R C/O/ ve sloučenině obecného vzorce 3a/ a je nutná následná hydrolytická reakce k získání volného indolu obecného vzorce I. K minimalizaci acylace dusíku v poloze 1 se může použít poměru 1 : 1 elektrofilní sloučeniny a lithiovaného indolu /sloučeniny obecného vzorce 2/. Reakce se s výhodou provádí při teplotě přibližně -40 °C až přibližně +10 °C. Žádaná sloučenina se čistí ochlazením reakční směsi, například ledovou vodou, používanou v poměru 1 : 1. Při vyšším poměru, který vede k výrazné acylaci v poloze 1, se produkt hydrolyzuje za použití kyseliny, například kyseliny fosforečné, nebo zásady, například uhličitanu sodného nebo hydroxidu sodného. Směs se pak promyje organickým rozpouštědlem, nemísitelným s vodou. Organická fáze se extrahuje kyselinou; vodné fáze se spojí a alkalizují se; a žádaná sloučenina se extrahuje organickým rozpouštědlem, nemísitelným s vodou. Organické rozpouštědlo se pak zkoncentruje, zpravidla ve vakuu,

-6CZ 280605 B6 a žádaná sloučenina obecného vzorce I se dále čistí popřípadě o sobě známými způsoby.

Při obměněném způsobu se atom dusíku v poloze 1 může blokovat nebo chránit před započetím metalizační reakce. Blokovací skupina /označená symbolem Z/ je například vzorce SiR₃ nebo CH₂/C₆H₅/, kde znamená R alkylovou skupinu s 3 až 4 atomy uhlíku, s výhodou triisopropylovou skupinu nebo fenylovou skupinu /CgH₅/, se s výhodou používá pro indol jako reakční složku a tritylová skupina se s výhodou používá pro indolin jakožto reakční složku. Sloučenina la se pak nechává reagovat s lithiačním prostředkem, jak shora uvedeno pro sloučeninu obecného vzorce 2a. Sloučenina obecného vzorce 2a se pak může acylovat uváděním do styku se vhodnou elektrofilní sloučeninou, jak shora uvedeno. Za vzniklé sloučeniny obecného vzorce 3a se pak odstraní chránící skupina zpracováním fluoridovou solí, pokud Z znamená skupinu obecného vzorce SiR₃, nebo v případě, kdy Z znamená benzylovou skupinu, může se sloučenina obecného vzorce 3a podrobovat hydrogenolýze na katalyzátoru, jako je například palladium, k odstranění benzylové skupiny. Žádaná sloučenina se izoluje za standardních podmínek a čistí se krystalizací z běžných rozpouštědel nebo sloupcovou chromatografií na pevných nosičích, jako jsou silikagel a oxid hlinitý.

Schéma 1

Br

Br

-7CZ 280605 B6

Schéma

odstranění cSSránTcí skupiny

r⁷cho

odstranění chránící

-----------------------------------------------------------'-------------------------------------------skupiny

odstrsnění Chránící skupiny

-8CZ 280605 B6

Obměněný způsob přípravy sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I je na schématu 2 a zahrnuje zpracování 6-lithiového derivátu obecného vzorce 2a 2a /podle schématu 1/ aldehydem obecného vzorce R⁷CHO za vzniku alkoholu obecného vzorce 4 nebo 4a. Oxidace alkoholu se může provádět oxidanty, známými pracovníkům v oboru pro takové účely, jako je pyridiniumchlorchromát, dimethylsulfoxid a oxalylchlorid, vodný roztok kyseliny chromové a kyseliny sírové a jako jsou podobné oxidační prostředky. Odstraněním chránící skupiny z aminoskupiny v poloze 1 se získá volná sloučenina obecného vzorce I.

Při způsobech podle schématu 1 až 8 se může indolinových analogů používat jakožto meziproduktů, přičemž se indol získá následně oxidační reakcí, jak je vyznačeno čárkovanou čárkou mezi uhlíkovými atomy 2 a 2a ve schématech. Oxidace se může provádět v jakémkoliv stupni, který je vhodný, jakkoliv se zpravidla provádí jako poslední stupeň za použití shora uvedených oxidačních činidel. Jak shora uvedeno, jestliže se jakožto reakčních složek používá indolinů podle schématu 1 až 8, znamená Z s výhodou tritylovou skupinu, zatímco znamená s výhodou triisopropylsilylovou skupinu, pokud se jako reakční složky používá indolu.

Alternativně se mohou připravovat alkoholové meziprodukty obecného vzorce 4 a 4a, jak je uvedeno na schématu 3, přidáním organokovového reakčního činidla /obecného vzorce R Μ/, jako například alkyllithia vzorce R⁷Li, nebo Grignardova činidla vzorce R⁷MgX, k aldehydu obecného vzorce 5 a 5a.

Schéma 3

HC=O

HC=O

NR’R²

5a r⁷-m r⁷-m

Aldehydy obecného vzorce 5 a 5a se mohou připravit různými způsoby. Dále uvedené způsoby nejsou míněny jako vyčerpávající přehled a pracovníkům v oboru je zřejmé, že je možno použít i jiných způsobů. Jedním způsobem je reakce 6-lithiového derivátu obecného vzorce 2a 2a s dimethylformamidem, následovaná zpracováním vodou. Jiný způsob je uveden na schématu 4, který zahrnuje způsob přípravy 6-nitrilového derivátu obecného vzoce 6 následovanou redukcí a hydrolýzou.

Hz Pd/C___

CzHjOH

3M H₂SOa

Uvádí se do styku l-benzoyl-6-brom-derivát například se směsí kyanidu médného a jodidu měďného v dimethylformamidu při teplotě přibližně 140 ’C, nebo s kyanidem módným a N-methylpyrrolidonem při teplotě přibližně 200 °C. Získaný 6-nitril obecného vzorce 6 se hydrogenuje v přítomnosti katalyzátoru, jako je například palladium na uhlí, v přítomnosti semikarbazidu za vzniku 6-semikarbazonové sloučeniny obecného vzorce 7. Tato sloučenina obecného vzorce 7 se hydrolyzuje za použití kyseliny sírové za získání aldehydu obecného vzoce 5.

Podle výhodného způsobu přípravy, uvedeného na schématu 5, se uvádí 6-nitrilový derivát obecného vzorce 6 /kde Z znamená blokovací skupinu, například benzylovou skupinu/ do styku s redukčním činidlem [H], jako je diisobutylaluminiumhydrid. Vzniklý aldehyd obecného vzorce 5a se pak uvádí do styku s organokovovou sloučeninou, například s Grignardovým činidlem obecného vzorce R⁷MgBr, za vzniku alkoholu obecného vzorce 4a, který se oxiduje shora popsaným způsobem na 6-acylový derivát, blokovaný v poloze 1 obecného vzorce 3a.

-10CZ 280605 B6

Schéma 5

R⁷MgBr

R⁷MgBr

▼ ZO		v , H OH
r7-cz	NR1R2	R7-a	z\.NR’R2
		iíS
		χ ιοί l
XI	3a	ZN—	jl 4a
Nebo se určité	sloučeniny	obecného vzorce I	mohou přípravo-

vat za použití 6-jodového derivátu obecného vzorce 9, jak je naznačeno na schématu 6 a 7, přičemž R¹, R² a Z maj í shora uvedený význam. Na schématu 6 je uveden způsob, při kterém se připravuje 6-alkinový derivát. Tento způsob vede k 6-acylové sloučenině, ve které methylenová skupina přiléhá ke karbonylové skupině. Při tomto způsobu se dusík v poloze 1 může chránit skupinou /symbolu Z/, jako je například benzoylová skupina, jakkoliv se dává přednost v poloze 1 nechráněnému dusíku, to znamená, že Z představuje atom vodíku. Tato sloučenina obecného vzorce 9 se uvádí do styku s palladiovým katalyzátorem vzorce Pd/PPH₃/₄, kde znamená Ph fenylovou skupinu, a s cínalkinovou sloučeninou obecného vzorce

R^7a - C=c - Sn - CH₃ - ₃ kde znamená R^7a alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, arylalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu, substituovanou arylalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo cykloalkylovou skupinu s 3 až 7 atomy uhlíku. Tato reakce se normálně provádí v rozpouštědle, jako je například toluen, při zvýšené teplotě, například při teplotě přibližně 100 °C. Zpravidla se používá nadbytku cínalkinu spolu s přibližně 0,25 ekvivalenty sloučeniny palladia, vztaženo na sloučeninu obecného vzorce IX. Pak se uvádí do styku 6-alkin obecného vzorce X se síranem rtuťnatým ve vodě za vzniku ketonu obecného vzorce 11. Blokovací skupina v poloze 1 se může odstranit hydrolýzou za použití zásady, jak shora uvedeno v případě sloučeniny obecného vzorce I.

-11CZ 280605 B6

Z/0 R'’-CHjC	NFTR2	,0
R7a-CH2-C !	. NR’R2
HN--- Podle jiného	7	NaOH
způsobu	přípravy,	Z.-N— ’ uvedeného na	schématu 7, se

používá 6-jodového derivátu sloučeniny obecného vzorce 9 pro přípravu určitých 6-acylových sloučenin přímým způsobem. Tato příprava se provádí uváděním do styku 6-jodsloučeniny s trialkylcínalkylkomplexem a oxidem uhelnatým v přítomnosti palladiového katalyzátoru obecného vzorce Pd/PPh₃/₄, kde Ph znamená fenylovou skupinu, jak je popsáno v literatuře pro arylhalogenidy. [A. Schoenberg a R. F. Heck, J. Org. Chem. 39, str. 3327, 1974; a A. Schoenberg, I. Bertoletti a R. F. Heck, J. Org. Chem,. 39, str. 3318, 1974.]. Jakkoliv se při tomto způsobu přípravy může použít jakožto blokovací skupiny Z diethylcarbamoylové skupiny, může se tento přímý způsob provádět i tehdy, když Z znamená atom vodíku.

Schéma 7

-12CZ 280605 B6

Na schématu 8 je vyznačen způsob přípravy, podle kterého se vinylether nechává reagovat s 6-jodderivátem obecného vzorce IX,

O kde R , R a Z mají shora uvedeny význam. Při tomto způsobu se získá 6-/l-alkoxyalkenylový/derivát obecného vzorce 81, který se pak může hydrolyzovat a může se z něj odstranit chránící skupina za získání žádané sloučeniny obecného vzorce I. Nebo se z derivátu obecného vzorce 81 může odstranit chránící skupina, například butyllithiem, a pak se vinylová skupina hydrolyzuje. Při tomto způsobu se aminoskupina v poloze 1 chrání vhodnou skupinou, chránící aminoskupinu, s výhodou benzoylovou skupinou. Tato sloučenina obecného vzorce 9 se pak uvádí do styku s palladiovým katalyzátorem a s žádaným vinyletherem. Jakožto vhodné vinylethery pro tento způsob se uvádějí sloučeniny, kde R^c znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a Q znamená atom vodíku nebo cínalkyl, boralkyl nebo boralkoxy, halogenid zinku nebo halogenid hořčíku, například tributylcín.

Schéma 8

NR’R²

?d-Blacx/?Ph₃ ** V· ?d (??h.₃1 4

		r
A z° h^c-c/·	h^c-c/ RtX NR’R2
oo		11 J í|
HN--J	ZN-	i|
z		n

-13CZ 280605 B6

Jestliže ve shora uvedeném schématu 8 znamená Q halogenid zinku nebo halogenid hořčíku, je výhodné, aby Z znamenal skupinu, * λ jako je tritylova skupina. R a R mohou znamenat na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylovou skupinu, arylalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylovém podílu, substituovanou arylovou skupinu, substituovanou arylalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo cykloalkylovou skupinu s 3 až 7 atomy uhlíku. Používaným palladiovým katalyzátorem může být práškové palladium /palladiová čerň/ nebo sloučenina obecného vzorce Pd/PPh₃/₄, kde Ph znamená fenylovou skupinu. Sloučeniny obecného vzorce Pd/PPh₃/₄ se obecně používá v toluenu při teplotě zpětného toku. Může se používat Pd-černě s trifenylfosfinem v toluenu při teplotě zpětného toku nebo ve směsi acetonitritu a triethylaminu při teplotě přibližně 100 °C. Podobná reakce je popsána v Bull. Chem. Soc. Jpn., 1987, 60, str. 767 až 768.

Při způsobech podle schémat 1 až 8 se může získat směs produktů, která vyžaduje čištění o sobě známými způsoby, například krystalizací nebo chromatografickými způsoby.

Schéma 9 objasňuje způsob přípravy výchozí látky pro reakci podle schématu 1.

Schéma 9

•f

-14CZ 280605 B6

Epoxidy obecného vzorce 13 jsou o sobě známé sloučeniny a mohou se připravovat například z ketonu obecného vzorce 12, který je o sobě znám a je používaným reakčním činidlem. Například Flaugh a kol., J. Med. Chem. 31, str. 1746, 1988; Nichols a kol., Org. Prep. and Proč. Int., 9, str. 277, 1977; a Leanna a kol., Tet. Lett. 30, číslo 30, str. 3835, 1989, popisují zůsoby přípravy různých provedení sloučenin obecného vzorce 13. Pracovníkům v oboru organické chemie je jasné, že existují čtyři stereoisomery obecného vzorce 13:

Sloučeniny obecného vzorce 13a a 13b se zde označují jakožto exo-isomery; podobně se sloučeniny obecného vzorce 13c a 13d označují jako endo-isomery. Leanna a kol., jak shora uvedeno, popisuje způsob přípravy epoxidů obecného vzorce 13, které jsou popřípadě v podstatě v exo formě nebo v podstatě v endo formě. Jakožto výhodná výchozí sloučenina se uvádí sloučenina obecného

O vzorce 13, kde znamena R benzoylovou skupinu; nejvýhodnějši výchozí látkou je směs v podstatě exo-isomerů shora charakterizované sloučeniny obecného vzorce 13.

Aminoalkoholy obecného vzorce 14 se připravují reakcí epoxiQ du obecného vzorce 13 s aminem obecného vzorce R NH₂, kde znamená R⁸ atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, substituovanou jednou nebo třemi skupinami, vybranými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, nitroskupinu nebo fenylovou skupinu. Takové aminy jsou dobře dostupné. Otevření epoxidového kruhu postupuje v podstatě regiospecifíčky s aminoskupinou v poloze 5 a s hydroxylovou skupinou v poloze 4. Reakce je také stereospecifická v tom smyslu, že se stereoisomery obecného vzorce 14a předpovídatelně vytvářejí z odpovídajících stereoisomerů obecného vzorce 13a-d.

NHR⁸

Stereoselektivní syntéza aminoalkoholu obecného vzorce 14 a tedy všech následujících meziproduktů a produktů podle schématu 9 se může provádět za použití v podstatě čistého enantiomeru aminu obecného vzorce R NH₂, kde skupina symbolu R ma alespoň jedno

-15CZ 280605 B6 chirální centrum. Obzvláště výhodným aminem je /+/ nebo /-/ 1-fenylethylamin. Diastereomery získaného aminoalkoholu se pak mohou oddělovat četnými o sobě známými způsoby, například chromatograf ií nebo krystalizací. Jakožto vhodná rozpouštědla pro překrystalování se uvádějí příkladně diethylether, butanol a směsi hexanu a ethylacetátu. Alternativním způsobem dosahování stereospecifické syntézy je konverze všech diastereomerů obecného vzorce 14 na odpovídající diastereomery obecného vzorce 15, načež se diastereomery obecného vzorce 15 odděluji; tato alternativní metoda bude ještě podrobně popsána. Pokud není nutná stereoselektivní syntéza, není nutné ani oddělování stereoisomerů aminoalkoholu obecného vzorce 13 a amin obecného vzorce R⁸NH₂ nemusí být opticky aktivní.

Obzvláště účinný stereoselektivní způsob přípravy vysoce výhodné sloučeniny obecného vzorce 14, l-benzoyl-4-hydroxy-5-/l-fenylethyl/amino-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu, zahrnuj e reakci směsi v podstatě exo-isomerů odpovídajícího epoxidu obecného vzorce 13 nebo směsi v podstatě endo-isomerů odpovídajícího epoxidu obecného vzorce 13 s enantiomerem 1-fenethylaminem, v podstatě čistým, v butanolu jakožto rozpouštědle a následnou selektivní krystalizací jednoho nebo dvou isomerů aminoalkoholu. Reakční teplota je s výhodou přibližně 50 až přibližně 150 °C a především přibližně 80 až 100 °C.

Po úplném proběhnutí reakce, což se zjistí například chromatograf ií v tenké vrstvě nebo kapalinovou chromatografií, žádaný aminoalkohol vykrystaluje při teplotě přibližně -20 až přibližně +40 ’C; výhodnou teplotou pro rekrystalizaci je přibližně 0 až přibližně 15 °C. Tento způsob je tedy hodnotný a oddělování stereoisomerů probíhá účinně v jednom stupni. Vhodnou volbou epoxidových isomerů, exo formy nebo endo formy, a enantiomeru 1-fenylethylaminu, R nebo S, se může určit, které ze stereoisomerů sloučeniny obecného vzorce 14 se vysráží z reakční směsi. Například výhodný stereoisomer l-benzoyl-4-hydroxy-5-/l-fenylethyl/amino-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indol, ve formě /2a-S, 4-R, 5-R/isomeru se může selektivně připravit reakcí exo-epoxidů s S-l-fenylethylaminem.

Četné způsoby pro přípravu aziridinů, například obecného vzorce 15, z aminoalkoholů, například obecného vzorce 14, jsou o sobě známy. Jakožto dva příklady se uvádí použití diethylazodikarboxylátu a trifenylfosfinu /0. Mitsunobu, Synthesis, leden 1981, str. 1/ a použiti bromu a trifenylfosfinu /J. P. Freemer a P. J. Mondron, Synthesis, prosinec, 1974, str. 894/.

Obzvláště účinný alternativní způsob se zřetelem na shora uvedené způsoby zahrnuje zpracování sloučeniny obecného vzorce 14 terciárním aminem v inertním rozpouštědle, následované přidáním methansulfonylchloridu. Stereoisomery obecného vzorce 15a až 15d aziridinů obecného vzorce 15 se získají z odpovídajících stereoisomerů obecného vzorce 14a až 14d s podržením konfigurace na každém chirálním centru v substituentech R³ nebo R⁸, shora definovaných, jakož také v poloze 2a:

-16CZ 280605 B6

Jakožto vhodné aminy se uvádějí aminy obecného vzorce /R⁹/N, kde znamená R⁹ na sobě nezávisle alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku. Vhodnými rozpouštědly pro tuto reakci jsou chlorované uhlovodíky, například methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan a dichlorethan; aromatické uhlovodíky, například benzen, toluen a xyleny; a ethery, například tetrahydrofuran, diethylether, methyl-terc.-butylether. Reakce se může provádět při teplotě přibližně -35 až přibližně +45 °C. Podle výhodného provedení se aminoalkohol zpracovává triethylaminem v methylenchloridu při teplotě přibližně -20 až přibližně 0 °C, pak se reakční směs zahřeje na teplotu přibližně 15 až přibližně 35 °C pro ukončení reakce. Popřípadě se produkt, aziridin obecného vzorce 15, může nechat krystalovat za vhodného rozpouštědla, jako je například acetonitril nebo isopropanol po zpracování vodou. V případě, kdy R⁸ obsahuje alespoň jedno chirální centrum v podstatě jediné stereokonfiguraci, mohou se jednotlivé stereoisomery aziridinu obecného vzorce 15 navzájem oddělit například chromatografii nebo krystalizaci, čímž jde o stereospecifickou syntézu aziridinu obecného vzorce 15 a následných produktů.

Aziridinový kruh se může otevřít za vzniku sekundárního aminu obecného vzorce 16 jakožto meziproduktu. Četné způsoby otevření aziridinů jsou obecně známy. Přísně se však dbá toho, aby použitý způsob otevření kruhu aziridinu za vzniku sekundárního aminu obecného vzorce 16 byl v podstatě regiospecifický, to znamená, že se aziridin musí otevřít za vzniku v podstatě 4-aminosloučeniny spíše než 5-aminosloučeniny. Jedním z takových způsobů je katalytická hydrogenolýza, kterou popsal Y. Sugi a S. Mitsui, Bull. Chem. Soc. Jap., 43, str. 1489 až 1494, 1970. Jakožto vhodných katalyzátorů se zpravidla používá hydrogenačních katalyzátorů nebo katalyzátorů pro hydrogenolýzu, jako jsou katalyzátory na bázi ušlechtilých kovů; výhodným katalyzátorem je palladium. Jakožto vhodná rozpouštědla pro tuto reakci se uvádějí uhlovodíky, například benzen, toluen, xyleny, ethylbenzen a terč.-butylbenzen; alkoholy, například methanol, ethanol a isopropanol; a směsi rozpouštědel, například směs kyseliny octové s uvedenými alkoholy. Jakožto výhodná rozpouštědla pro přípravu sloučeniny obecného o Q vzorce 16, kde znamená R benzoylovou skupinu a R 1-fenylethylovou skupinu, se uvádí ledová kyselina octová nebo směs methanolu a kyseliny fosforečné. Zdrojem vodíku může být plyn, obsahující vodík, dodávaný pod tlakem 0,1 MPa nebo vyšším, nebo zdrojem vodíku mohou být sloučeniny, které jsou donory vodíku v katalytické přenosové hydrogenolyzní reakci, jako je kyselina mravenčí nebo hydrazin. Výhodným zdrojem vodíku je plyn, obsahující vodík, a zaváděný pod tlakem 0,1 až 1,0 MPa. Reakční teplota má být

-17CZ 280605 B6 přibližně -20 až přibližně +80 °C; výhodná teplota pro hydrogenolýzu aziridinu obecného vzorce 15, kde znamená R³ benzoylovou skupinu a R⁸ 1-fenylethylovou skupinu, je přibližné -20 až přibližně 0 °C.

Konverze sloučeniny obecného vzorce 15 na sloučeninu obecného vzorce 16 postupuje bez narušení stereochemické konfigurace chirálních center v poloze 2a nebo 4 sloučeniny obecného vzorce 16, nebo chirálních center jakýchkoliv případných substituentu.

Popřípadě se sloučenina obecného vzorce 16 může izolovat o sobě známými způsoby, jako je například krystalizace. Sekundární amin v poloze 4 obecného vzorce 16 se může převádět na primární amin obecného vzorce 17 četnými způsoby o sobě známými z organické chemie, nebo se sekundární amin jako takový může izolovat. Výhodné je však převádět sekundární amin obecného vzorce 16 na primární amin obecného vzorce 17 bez izolace sekundárního aminu jednoduchým pokračováním reakce hydrogenolýzy bez přerušení reakce přípravy sloučeniny obecného vzorce 16. Pro takovouto reakci jsou výhodnými rozpouštědly a katalyzátory stejná rozpouštědla a katalyzátory, jakých se používá pro přípravu sekundárních aminů obecného vzorce 16. Může být žádoucí provádět hydrogenolýzu sekundárního aminu obecného vzorce 16 za odlišné teploty a tlaku, než hydrogenolýzu aziridinu obecného vzorce 15. Pro hydrogenolýzu výhodné sloučeniny obecného vzorce 16, kde znamena R benzoylovou

Q skupinu a R 1-fenylethylovou skupinu, je výhodnou teplotou přibližně 50 až přibližně 60 °C a výhodným tlakem přibližně 0,1 až 2,0 MPa. Za těchto podmínek hydrogenolýza sloučeniny obecného vzorce 16 na sloučeninu obecného vzorce 17 postupuje bez narušení stereochemické konfigurace chirálního centra v poloze 4.

Izolace sloučeniny obecného vzorce 17 je možná o sobě známými způsoby, například krystalizací. Popřípadě se sloučenina obecného vzorce 17 může dále čistit například překrystalováním.

Sloučenina obecného vzorce 17 se může halogenovat pro přípravu například derivátu obecného vzorce 18, který má v poloze 6 atom bromu nebo atom jodu. Izolace sloučeniny obecného vzorce 17 se může provádět za použití jodu a ortoperkyseliny jodu v přítomnosti kyseliny, například kyseliny sírové nebo trifluoroctové, v rozpouštědle, jako je například kyselina octová. Jiný způsob jodování zahrnuje použití N-jodsukcinimidu v přítomnosti kyseliny trifluoroctové. 6-Bromderivát se může připravovat za použití bromu v kyselině octové nebo za použití N-bromsukcinimidu.

Příprava indolu oxidací indolinu se může provádět způsobem, vyznačeným ve schématu 9, to znamená jako poslední stupeň pro přípravu sloučeniny obecného vzorce 19, nebo se může provádět dříve než v posledním stupni. Jakožto vhodné oxidační prostředky se uvádějí oxid manganičitý, palladium na uhlí, dimethylsulfoxid, oxalylchlorid a podobná činidla.

Pracovníkům v oboru jsou zřejmé možné obměny shora uvedených postupů, které mohou být žádoucí nebo nutné pro provádění způsobu přípravy sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu. Takové obměny do rozsahu vynálezu patří.

-18CZ 280605 B6

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou připravovat ze vhodných sloučenin obecného vzorce 19, ať již jsou tyto sloučeniny obecného vzorce 19 ve formě směsi stereoisomerů, nebo jsou v podstatě čistými enantiomery, za použití reakčních činidel a způsobů v oboru známých. Výhodným meziproduktem pro sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu je 6-bromderivát sloučeniny obecného vzorce 19, jakkoliv je výhodným 6-jodderivát, pokud se používá karbonylační reakce podle schématu 7. S výhodou znamená R³ jakožto blokovací skupinu benzoylovou skupinu. Popřípadě se mohou zavést aminoblokující skupiny na aminosubstituent v poloze 4 za použití způsobů, které popsal Green a Bartoň ve shora uvedených citacích. Popřípadě se mohou zavádět alkylové skupiny na aminosubstituent v poloze 4 za použití běžných reakcí, například reakce aminu v poloze 4 se vhodným halogenidem, jak popisuje Morrison a Boyd v kapitole 22 publikace Organic Chemistry, třetí vydání, Allyn a Bacon, Boston, 1973. Popřípadě se benzoylová skupina může oddělit z polohy 1 za použití o sobě známých způsobů a popřípadě se může nahradit jinou skupinou, chránící aminoskupinu. Skupiny chránící aminoskupinu a alkylové skupiny se mohou zavádět popřípadě před hromováním nebo po brómování.

4-Amino-6-bromtetrahydrobenz[cd]indol jakožto výchozí látka pro přípravu sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu se může snadno připravovat jinými způsoby, jak se popisuje v americkém patentovém spise číslo 4 576959 a v evropské zveřejněné přihlášce vynálezu číslo 015083 /Flaugh/.

Přípravu sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu blíže objasňují následující příklady praktického provedení, které však vynález nijak neomezují.

Jednotlivých výrazů a zkratek se používá v jejich normálním významu, pokud není jinak uvedeno. Například N znamená normální nebo normalitu; mmol milimol; g gram; ml mililitr; M znamená molární; min znamená minutu; Me znamená methyl; Pr propyl, Et ethyl, THF tetrahydrofuran, EtOAc ethylacetát; tt znamená teplotu tání; TLC chromatografii v tenké vrstvě; h hodinu; NMR nukleární magnetickou rezonanci; IČ infračervenou spektroskopii; UV ultrafialovou spektroskopii a m.s znamená hmotovou spektrometrii.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Příprava /±/-6-/2,2-dimethylpropanoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

A. Příprava /±/-6-brom-l-triisopropylsilyl-4-/di-n-propylamino/-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Do suspenze 1,25 g /7,50 mmol/ hydridu draselného /24% disperze v minerálním oleji/ v 50 ml tetrahydrofuranu se při teplotě 0 °C vnese roztok 2,0 g /5,97 mmol/ 6-brom-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu ve 2 ml tetrahydrofuranu. Míchá se po dobu 40 minut, načež se přidá 1,90 ml /7,18 mmol/

-19CZ 280605 B6 triisopropylsilyltriflátu. V míchání se pokračuje po dobu další jedné hodiny. Směs se pak vlije do chladného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a produkt se extrahuje do dichlormethanu. Tento roztok se promyje roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem sodným. Po odpaření dichlormethanu zbyde hnědý olej, který se chromatografuje na 50 g silikagelu za použití toluenu a pak systému 1 : 3 ethylacetát/toluen. Silylovaný produkt ze sloupce se izoluje jakožto světle hnědý olej ve kvantitativním výtěžku. Produkt při stání pomalu krystaluje.

B. Příprava /±/-6-/2,2-dimethylpropanoyl/-l-triisopropylsilyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Roztok 0,50 g /1,02 mmol/ uvedené 1-silylované sloučeniny v 20 ml diethyletheru se míchá při teplotě -65 °C za přidávání 1,50 ml /2,31 mmol/ 1,54 M terč.-butyllithia /v pentanu/. Míchá se při teplotě -70 °C po dobu 30 minut, načež se rychle přidá 0,50 ml /4,00 mmol/ 2,2-dimethylpropionylchloridu. Směs se nechá ohřát na teplotu -10 °C. Pak se protřepe s 50 ml studeného roztoku hydrogenuhličitanu sodného v průběhu několika minut a produkt se extrahuje diethyletherem. Tento extrakt se promyje roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem sodným. Odpařením diethyletheru se získá olej, který se chromatografuje na 9 g silikagelu za použití jakožto elučního prostředku 1 : 19 EtOAc/toluen a pak systému 1 : 9 EtOAc/toluen. Produktem ze sloupce je viskózní olej o hmotnosti 0,375 g /74 % teorie/.

C. Roztok 0,345 g /0,70 mmol/ shora uvedeného ketonu v 7,0 ml tetrahydrofuranu při teplotě 0 °C se zpracovává 1,5 ml 1M tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu. Míchá se po dobu 30 minut, načež se roztok vlije do 25 ml vody, obsahující 0,5 g kyseliny vinné. Tento roztok se promyje dichlormethanem, načež se promývací roztok extrahuje čerstvým zředěným roztokem kyseliny vinné. Spojené vodné roztoky se alkalizují 5 N roztokem hydroxidu sodného a produkt se extrahuje dichlormethanem. Po vysušení extraktu síranem sodným se rozpouštědlo odpaří a zbylý olej se chromatografuje na 7 g silikagelu za použití systému 1 : 9 ethylacetát/toluen. Produkt ze sloupce se krystalizuje za triturování hexanem. Překrystalováním z hexanu se získá 0,175 g /88 % teorie/ /±/-6-/2,2-dimethylpropanoyl/-4-/di-n-propylamino/-l, 3, 4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu o teplotě tání 92 °C.

Analýza pro C₂₂H₃₂N₂O

Vypočteno: C 77,60 %, H 9,47 %, N 8,23 %, nalezeno: C 77,89 %, H 9,37 %, N 8,17 %,

NMR: /300 MHz, CDC1₃/ 8 0,89 /t, 6H, CH₃ NPr/, 1,31 /s, 9H, CCH₃ But/, 1,45 /sextet, 4H, CH₂Me/, 2,53 /t, 4H, CH₂Et/, 2,79 /dd, 1H, 3a-H/, 2,94 /mult, 2H, 5-CH₂/, 2,95 /dd, 1H, 3β-Η/, 3,21 /mult, 1H, 4β-Η/, 6,87 /s, 1H, 2-H/, 7,09 /d, 1H, 8-H/, 7,19 /d, 1H, 7-H/, 7,91 /s, 1H, 1-H/.

-20CZ 280605 B6

Příklad 2

Příprava /±/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

A. Příprava /±/-6-kyano-l-triisopropylsilyl-4-/di-n-propylamino/-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Do suspenze 1,00 g /6,00 mmol/ hydridu draselného /24% disperze v minerálním oleji/ v 25 ml tetrahydrofuranu při teplotě 0 °C se přidá 0,90 g /3,20 mmol/ 6-kyano-4-/di-n-propylamino/-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu. Míchá se po dobu 30 minut, načež se přidá 1,00 ml /3,72 mmol/ triisopropylsilyltriflátu. Směs se pak míchá při teplotě místnosti po dobu 15 hodin. Směs se pak vlije do studené vody a produkt se extrahuje do dichlormethanu. Tento extrakt se promyje roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem sodným. Odpařením dichlormethanu se získá hnědý olej, který se chromatografuje na 15 g silikagelu za použiti jako elučního činidla postupné systému 1 : 1 hexan/toluen, toluen a nakonec 1 : 19 ethylacetát/toluen. Silylovaný produkt ze sloupce je světle hnědý olej o hmotnosti 0,85 g /61 % teorie/. Produkt při stání pomalu krystaluje.

B. Příprava /±/-6-acetyl-l-triisopropylsilyl-4-/di-n-propylamino/-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Roztok 0,30 g /0,69 mmol/ shora uvedeného nitrilu v 10 ml benzenu se zpracovává 2,0 ml 1,0 M methylmagnesiumbromidu v diethyletheru. Po ochlazení se nadbytek Grignardova činidla rozloží třískami ledu. Směs se pak míchá po dobu jedné hodiny s 10 ml nasyceného chloridu amonného. Benzenová vrstva se oddělí a vodná vrstva se extrahuje čerstvým benzenem. Spojené organické roztoky se vysuší síranem sodným a odpaří se za získání viskózního oleje. Chromatografií tohoto oleje na 5,0 g silikagelu za použití jako elučního činidla systému 1 : 9 ethylacetát/toluen a pak systému 1 : 1 ethylacetát/toluen se získá 0,29 g /93 % teorie/ 6-acetylové sloučeniny ve formě bledě žlutého oleje, který při stání pomalu krystaluje.

C. Roztok 0,10 g /0,22 mmol/ shora uvedeného ketonu v 2,5 ml tetrahydrofuranu při teplotě 0 °C se zpracovává 0,5 ml 1M tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu. Míchá se po dobu 30 minut, načež se roztok vlije do 10 ml vody, obsahující 0,2 g kyseliny vinné. Roztok se promyje dichlormethanem a promývací roztoky se extrahují čerstvě destilovaným roztokem kyseliny vinné. Spojené vodné roztoky se alkalizují IN roztokem hydroxidu sodného a produkt se extrahuje dichlormethanem. Extrakt se vysuší síranem sodným, rozpouštědlo se pak odpaří a tak se získá krystalický zbytek. Překrystalováním ze systému toluen/hexan se získá 0,045 g /68 % teorie /±/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,5,6-tetrahydrobenz[cd]indolu o teplotě tání 148,5 až 150 “C.

Analýza pro C₁₉H₂₆N₂O vypočteno: C 76,47 %, H 8,78 %, N 9,39 %, nalezeno: C 76,24 %, H 8,85 %, N 9,58 %.

-21CZ 280605 B6

NMR: /300 MHz, CDC1₃/ δ 0,90 /t, 6H, CCH₃ NPr/, 1,48 /sextet, 4H, CH₂Me/, 1,57 /s, 3H, COCH₃/, 2,58 /sextet, 4H, CH₂Et/, 2,78 /dd, 1H, 3a-H/, 2,97 /dd, 1H, 3β-Η/, 3,07 /dd, 1H, 5a-H/, 3,20 /mult, 1H, 4β-Η/, 3,71 /dd, 1H, 5β-Η/, 6,89 /s, 1H, 2-H/, 7,15 /d, 1H, 8-H/, 7,66 /d, 1H, 7-H/, 8,00 /s, 1H, 1-H/.

Příklad 3

Příprava /+/-6-propanoyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Roztok 0,52 g /1,19 mmol/ /+/-6-kyano-l-triisopropylsilyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu v 25 ml benzenu se zpracovává 0,83 ml /1,66 mmol/ 2,0 M ethylmagnesiumbromidu v diethyletheru, jako je uvedeno v příkladu 2, odstavec B. Chromatografie 1-silylovaného produktu na silikagelu za použití systému 1 : 9 ethylacetát/toluen poskytuje 0,40 g /72 % teorie/ produktu ve formě světlého oleje. Zpracováním tohoto oleje v 15 ml tetrahydrofuranu 1,2 ml 1 M tetrabutylamoniumfluoridu /v tetrahydrofuranu/ jako podle příkladu 2, odstavec C se získá po chromatografii na silikagelu /za použití jako elučního činidla systému 3 : 7 ethylacetát/toluen/ a překrystalováním ze systému toluen/hexan 0,157 g /59 % teorie/ /±/-6-propynoyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu o teplotě tání 149 až 150 C.

Analýza pro C₂₀H_2gN₂O vypočteno: C 76,88 %, H 9,03 %, N 8,96 %, nalezeno: C 76,60 %, H 9,27 %, N 8,96 %.

NMR: /300 MHz, CDC1₃/ δ 0,91 /t, 6H, CH₃ NPr/, 1,25 /t, 3H, CH₃ EtCO/, 1,48 /sextet, 4H, CH₂Me NPr/, 2,58 /sextet, 4H, CH₂Et NPr/, 2,78 /dd, 1H, 3a-H/, 3,00 /mult, 3H, 3β-Η a CH₂Me EtCO/, 3,08 /dd, 1H, 5 α-Η/, 3,20 /mult, 1H, 4 β-Η/, 3,70 /dd, 1H, 5 β-Η/, 6,90 /s, 1H, 2-H/, 7,16 /d, 1H, 8-H/, 7,68 /d, 1H, 7-H/,

8,01 /s, 1H, 1-H/

Příklad 4

Příprava /+/-6-butanoyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol

Roztok 0,53 g /1,21 mmol/ /+/-6-kyano-l-triisopropylsilyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu ve 25 ml benzenu se zpracovává 0,61 ml /1,70 mmol/ 2,8 M propylmagnesiumchloridu v diethyletheru jako podle příkladu 2, odstavec B. Chromatografii 1-silylovaného produktu na silikagelu za použití jakožto elučního činidla systému 1 : 9 ethylacetát/toluen se získá

0,38 g /65 % teorie/ produktu ve formě světlého oleje. Zpracováním tohoto oleje v 15 ml tetrahydrofuranu 1,3 ml 1M roztokem tetrabutylamoniumf luoridu v tetrahydrofuranu jako podle příkladu 2, odstavec C se získá po chromatografii na silikagelu /za použi-22CZ 280605 B6 tí jakožto elučního činidla systému 3 : 7 ethylacetát/toluen/ a po překrystalování ze systému toluen/hexan 0,149 g /58 % teorie/ /±/-6-butanoyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[ cd ] -

indolu o teplotě tání	151	až	153	°C.
Analýza pro c20H28N2°
vypočteno: C 77,26 %,	H	9	, 26	%,	Ν 8,58 %,
nalezeno: C 77,09 %,	H	9	,39	%,	N 8,44 %.
NMR: /300 MHz, CDC1	3/	δ	0	,91	/t, 6H, CCH3 NPr/, 1,03 /t, 3H,

CCH₃PrC0/, 1,48 /sextet, 4H, CH₂Me NPr/, 1,80 /sextet, 2H, CH₂Me PrCO/, 2,59 /sextet, 4H, CH₂Et NPr/, 2,78 /dd, 1H, 3a-H/, 2,97 /mult, 3H, 3β-Η/ a CH₂Et PrCO/, 3,08 /dd, 1H, 3a-H/, 3,20 /mult,. 1H, 4β-Η/, 3,68 /dd, 1H, 5β-Η/, 6,90 /s, 1H, 2-H/, 7,16 /d, 1H, 8-H/, 7,67 /d, 1H, 7-H/, 8,03 /s, 1H, 1-H/

Příklad 5

Příprava /+/-6-/2-methylpropanoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Roztok 0,52 g /1,19 mmol/ /+/-6-kyano-l-triisopropylsilyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu ve 25 ml benzenu se zpracovává 0,85 ml /1,70 mmol/ 2,0 M isopropylmagnesiumchloridu v diethyletheru, jako je popsáno v příkladu 2, odstavec B. Chromatografií v poloze 1 silylovaného produktu na silikagelu za použití jako elučního činidla systému 1 : 9 ethylacetát/toluen se získá 0,40 g /70 % teorie/ produktu ve formě oleje. Zpracováním 0,39 g tohoto oleje v 15 ml tetrahydrofuranu 1,3 ml 1 M roztoku tetrabutylamoniumfluoridu /v tetrahydrofuranu/ jako podle příkladu 2, odstavec C se získá po chromatografii na silikagelu za použití systému 3 : 7 ethylacetát/toluen a překrystalováním ze systému toluen/hexan 0,106 g /40 % teorie/ /+/-6-/2-methylpropanoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cdjindolu o teplotě tání 127,5 až 128 ’C.

Analýza pro C₂₁H₃₀N₂O/ vypočteno: C 77,26 %, H 9,26 %, N 8,58 %, nalezeno: C 77,03 %, H 9,02 %, N 8,53 %.

NMR: /300 MHz, DMSO-dg/ δ 0,87 /t, 6H, CCH₃ NPr/, 1,07 /d, 3H,

CCH₃ i-PrCO/, 1,12 /d, 3H, CCH₃ i-PrCO/, 1,41 /sextet, 4H, CH₂Me NPr/, 2,51 /mult, 4H, CH₂Et NPr/, 2,70 /dd, 1H, 3a-H/, 2,87 /dd, 1H, 3β-Η/, 2,95 /dd, 1H, 5a-H/, 3,03 /mult, 1H, 4β-Η/, 3,43 /d, 1H, 5β-Η/, 3,57 /septet, 1H, CHMe₂/, 7,04 /s, 1H, 2-H/, 7,18 /d, 1H, 8-H/, 7,60 /d, 1H, 7-H/, 10,92 /s, 1H, 1-H/ Příklad 6

Příprava /+/-6-benzoyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz [cd]indolu

-23CZ 280605 B6

Použitím 0,48 ml /4,14 mmol/ benzoylchloridu místo dimethylpropanoylchloridu se provádí acylace podle odstavce B příkladu 1. Chromatografií na silikagelu za použití toluenu a následně systému 1 : 9 ethylacetátu a toluenu se získá v poloze 1 silylovaný produkt ve formě oleje. Zpracováním tohoto oleje v 15 ml tetrahydrofuranu 2,5 ml roztoku 1M tetrabutylamoniumfluoridu /v tetrahydrofuranu/ podle příkladu 2, odstavec C, se získá po chromatografii na silikagelu /systém 3 : 7 ethylacetát/toluen/ a překrystalování ze systému toluen/hexan 0,046 g /1 % teorie/ /+/-6-benzoyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu o teplotě tání 149,5 až 150,5 °C.

Analýza pro C₂₄H₂₈N₂O vypočteno: C 79,96 %, H 7,83 %, N 7,77 %, nalezeno: C 79,77 %, H 7,79 %, N 8,02 %.

NMR: /300 MHz, CDC1₃/ δ 0,87 /t, 6H, CCH₃/, 1,44 /sextet, 4H, CH₂Me/, 2,50 /t, 4H, CH₂Et/, 2,82 /dd, 1H, 3d-H/, 3,00 /mult> 2H, 3β-Η a 5a-H/, 3,22 /mult, 1H, 4β-Η/, 3,28 /dd, 1H, 5β-Η/, 6,93 /s, 1H, 2—H/, 7,14 /d, 1H, 8-H/, 7,36 /d, 1H, 7-H/, 7,46 /t, 2H, Ph/, 7,56 /t, 1H, Ph/, 7,82 /d, 2H, Ph/, 8,02 /s, 1H, 1-H/.

Příklad 7

Příprava /4R/-/+-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetradrobenz[cd]indolu

A. Směs l-benzoyl-4,5-/endo/epoxy-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[ cd] indolu /21 g, 0,076 mol/ a /+/-R-l-fenethylaminu /18 g, 0,15 mol/ ve 400 ml n-butanolu se vaří pod zpětným chladičem v prostředí dusíku po dobu 16 hodin. Reakční směs se pak zkoncentruje ve vakuu, čímž se získá 30 g oleje jakožto rovná směs dvou diastereomerních aminoalkoholů.

Směs aminoalkoholů se pak rozpustí ve 300 ml dichlormethanu a Et₃N /30 g, 0,225 mol/ se přidá najednou v prostředí.dusíku. Reakční směs se ochladí na teplotu -10 °C a pak se pomalu po kapkách přidá MsCl /12,9 g 0,011 mol/. Rychlost přidávání smí být taková, aby se udržela reakční teplota -10 až +5 C. Po ukončeném přidávání MsCl se reakční směs míchá po dobu dalších 30 minut při teplotě -5 °C a pak po dobu 30 minut při teplotě okolí. Do reakční směsi se přidá 200 ml vody a směs se míchá. Dichlormethanový roztok se oddělí a promyje se postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje se do sucha, čímž se získá směs dvou diastereomerních aziridinů. Směs se pak rozdělí preparativní chromatografií HPLC /na silikagelu/ /za použití gradientu hexany/ethylacetát/. První diastereomer aziridinů, který se eluuje, se označuje jako isomer 1; 6,6 g o teplotě tání 162 až 163 °C z isopropanolu. Druhý diastereomer, který se eluuje, se označuje jako isomer 2; 7,4 g o teplotě tání 144 až 145 °C z isopropylalkoholu.

-24CZ 280605 B6

B. /2aR,4R/-4-amino-l-benzoyl-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indol

Roztok aziridinového isomeru 1 /9,4 g, 0,025 mol/ v 90 ml ledové kyseliny octové se hydrogenuje na tlaku 412 kPa a při teplotě 60 °C v přítomnosti 5% palladia na uhlí po dobu 16 hodin. Reakční směs se zfiltruje a filtrát se odpaří, čímž zbyde olej. Zbytek se rozpustí v IN kyselině chlorovodíkové a kyselá směs se extrahuje jednou ethylacetátem. Kyselý roztok se alkalizuje přidáním koncentrovaného hydroxidu amonného. Zásaditá směs se extrahuje dichlormethanem. Dichlormethanový roztok se promyje solankovým roztokem a vysuší se /síranem hořečnatým/. Organický roztok se odpaří k suchu, čímž se získá 2aR,4R-4-amino-l-benzoyl-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indol; 5,2 g ve formě oleje.

C. /2aR,4R/-4-amino-l-benzoyl-6-brom-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indol

Roztok /2aR,4F/-4-amino-l-benzoyl-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz [ cd] indolu /5,2 g, 0,019 mol/ a octanu sodného /6,2 g, 0,076 mol/ ve 40 ml ledové kyseliny octové a 10 ml MeOH se ochladí na teplotu 10 ’C. Do reakční směsi se přidá po kapkách roztok bromu /3 g, 0,019 mol/ v 10 ml ledové kyseliny octové. Reakční teplota se udržuje na 10 °C v průběhu přidávání bromu. Reakční směs se potom míchá při teplotě okolí po dobu jedné hodiny. Rozpouštědla se odpaří a zbytek se rozpustí ve vodě. Kyselý roztok se alkalizuje studeným vodným 50% roztokem hydroxidu sodného. Zásaditá směs se extrahuje dvakrát dichlormethanem. Organický roztok se promyje solankou, vysuší se /síranem hořečnatým/ a zkoncentruje se ve vakuu za získání 6,8 g /2aR,4R/-6-bromsloučeniny ve formě oleje.

D. /2aR,4R/-1-benzoyl-6-brom-4/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indol

Reakční směs /2aR, 4R/-4-amino-l-benzoyl-6-brom-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu /6,8 g, 0,019 mol/, uhličitanu draselného /8,28 g, 0,06 mol/ a n-propyljodidu /10,2 g, 0,06 mol/ ve 200 ml CH₃CN se míchá při teplotě zpětného toku po dobu 16 hodin. Reakční směs se zfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a roztok se extrahuje zředěnou kyselinou chlorovodíkovou. Kyselý roztok se alkalizuje koncentrovaným hydroxidem amonným. Zásaditá směs se extrahuje ethylacetátem. Organický roztok se promyje solankovým roztokem a vysuší se /síranem hořečnatým/. Ethylacetát se odpaří, čímž se jako zbytek získá olej. Chromatografií /na silikagelu a za použití ethylacetátu/ se získá produkt v množství 2,4 g.

E. /2aR,4R/-l-benzoyl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indol

Do roztoku /2aR,4R/-l-benzoyl-6-brom-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu /2,4 g, 5 mmol/ ve 100 ml dimethylformamidu se přidá CuCN /1,34 g, 15 mmol/ a jodid mědný /2,85, 15 mmol/. Reakční směs se míchá pod zpětným chladičem v prostředí dusíku po dobu 16 hodin. Reakční směs se vlije do 500 ml vody. Sraženina se oddělí a promyje se několikrát vodou. Sraženina se suspenduje ve zředěném hydroxidu amonném a supenduje

-25CZ 280605 B6 se s ethylacetátem. Veškerá směs se zfiltruje celitovou vrstvou. Ethylacetátový roztok se oddělí a promyje se solankou. Ethylacetátový roztok se vysuší /síranem horečnatým/ a zkoncentruje se k suchu, čímž se získá nitril ve formě oleje.

F. /2aR,4R/-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indol

Do míchaného roztoku 1,7 g /4,4 mmol/ /2aR,4R/-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu ve 25 ml tetrahydrofuranu, ochlazenému na teplotu -78 °C v prostředí dusíku se přidá 5,5 ml /8,8 mmol/ 1,6 M roztoku n-butyllithia v hexanu. Reakční směs se míchá při teplotě -78 C po dobu 30 minut a pak se nechá ohřát na teplotu -20 °C. Do reakční směsi se vnese 20 ml IN kyseliny chlorovodíkové. Směs se extrahuje jednou ethyletherem. Kyselý roztok se alkalizuje přidáním studeného 5 N roztoku hydroxidu sodného. Zásaditá směs se extrahuje dvakrát dichlormethanem. Spojené organické roztoky se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného. Dichlormethanový roztok se vysuší síranem hořečnatým a odpařením se získá produkt ve formě oleje v množství 1,3 g. Chromatografií tohoto oleje na silikagelu za použití ethylacetátu jakožto elučního činidla se získá 1 g /80 % teorie/ produktu ve formě oleje.

G. /2aR,4R/-l-trityl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indol

Do roztoku /2aR,4R/-l-trityl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu /1 g, 3,5 mmol/ a EtgN /354 mg, 3,5 mmol/ v 50 ml methylenchloridu se vnese roztok trifenylmethylchloridu /tritylchloridu/ /0,98 g, 3,5 mmol/ v 10 ml methylenchloridu po kapkách při teplotě zpětného toku. Reakční směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě zpětného toku. Reakční směs se extrahuje vodou a studenou IN kyselinou chlorovodíkovou. Organický roztok se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasycenou solankou. Organický roztok se vysuší /síranem hořečnatým/ a odpaří se k suchu ve vakuu. Zbytek se suspenduje s teplými hexany, ochladí se a zfiltruje se k odstranění nerozpuštěných podílů. Filtrát se zkoncentruje za vzniku oleje. Olej se chromatografuje /na silikagelu za použití 20 % ethylacetátu v hexanech/, čímž se získá 1,5 g /2aR,4R/-l-trityl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu.

H. /2aR,4R/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz [cd]indol

Roztok 1,6 g /3 mmol/ /2aR,4R/-l-trityl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu ve 100 ml tetrahydrofuranu se zpracovává 20 ml 2,0 M magnesiumbromidu v diethyletheru. Reakční směs se ochladí a nadbytek Grignardova činidla se rozloží přidáním nasyceného roztoku chloridu amonného. Reakční směs se extrahuje ethylacetátem. Organický roztok se odpaří za získání oleje. Olej se rozpustí ve 25 ml 5N kyseliny chlorovodíkové a roztok se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Kyselý roztok se alkalizuje přidáním nadbytku koncentrovaného roztoku hydroxidu amonného. Zásaditá směs se extrahuje dvakrát ethylacetátem. Spojené organické roztoky se promyjí jed

-26CZ 280605 B6 nou nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem hořečnatým. Ethylacetátový roztok se odpaří, čímž se získá 0,9 g oleje. Chromatografií tohoto oleje na silikagelu za použití ethylacetátu jakožto elučniho činidla se získá 600 mg produktu. Překrystalováním z hexanů se získá 228 mg /-/ketonu. Jeho teplota tání je 85 až 86 °C; [a]_D je -4,94 /methanol/

I. Příprava tetrahydrobenz[cd]indolu

Roztok 0,11 g /0,37 mmol/ /2aS,4R/-/+/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu a 0,12 g /1 mmol/ indolu v 5,0 ml tetrahydrofuranu se míchá při teplotě 0 °C za přidávání 0,075 g /0,21 mmol/ anhydridu benzenselenové kyseliny. Roztok se míchá při teplotě 25 °C po dobu 4 hodin. Roztok se pak vlije do zředěného roztoku kyseliny vinné a promyje se dichlormethanem. Vodný roztok se alkalizuje IN roztokem hydroxidu sodného a extrahuje se dichlormethanem. NMR spektrum oleje, získaného odpařením dichlormethanu, dokládá, že oxidace postoupila toliko z přibližně 30 %. Zpracování anhydridem benzenselenové kyseliny se opakuje. Chromatografií v tenké vrstvě zjištěno malé množství stále ještě zbylé výchozí látky. Zpracování anhydridem benzenselenové kyseliny se opakuje po třetí s polovinou oxidačního činidla. Surový produkt se chromátografuje na 3 g silikagelu za použití jakožto elučniho činidla systému 1 : 9 ethylacetát/toluen, následovaného systémem 1 : 4 ethylacetát/toluen a pak se překrystaluje ze systému toluen/hexan. Získá se 0,033 g /30 % teorie/ vyčištěného produktu o teplotě tání 135,5 až 136 °C.

Analýza pro C₁₉H₂₆N₂O vypočteno: C 76,47 %, H 8,78 %, N 9,39 %, nalezeno: C 76,31 %, H 8,97 %, N 9,40 %.

NMR identické s racemátem [a] +118° /c = 5 mg/ml, methanol/

Přiklad 8

Příprava /4S/-/-/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetra-hydrobenz[cd]indolu

Roztok přibližně 0,15 g /0,50 mmol/ /2aR,4S/-/-/-6-acetyl-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu v 10 ml dichlormethanu se zpracovává zvukem /50 až 55 kHz/ v přítomnosti 1,0 g oxidu manganičitého po dobu 5 hodin. Oxidační prostředek se odstraní zfiltrováním přes celit a působení zvukem se opakuje s 1,0 g čerstvého oxidu manganičitého. Získaný surový produkt po odfiltrování a odstranění rozpouštědla se potom chromátogafuje na 3 g silikagelu za použití jakožto elučniho činidla systému 1 : 9 ethylacetát/toluen a překrystalovává se ze systému toluen/hexan. Vyčištěný /4S/-/-/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz [cd] indol o hmotnosti 0,020 g /13 % teorie/ má teplotu tání 133 až 134,5 °C.

Analýza pro Ci₉h₂₆n₂o vypočteno: C 76,47 % H, 8,78 %, N 9,39 %, nalezeno: C 76,30 %, H 9,05 %, N 9,39 %.

-27CZ 280605 B6

NMR: identické s racemátem [α]θ -121° /c = 10 mg/ml, methanol/

Příklad 9

Příprava /4R/-/+/-6-/2-methylpropanoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,-

3.4.5- tetrahydrobenz[cd]indolu

Roztok 0,50 g /1,52 mmol/ /2aS,4R/-/±/-6-/2-methylpropanoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu v 50 ml hexanu se podrobuje zpracování zvukem /50 až 55 kHz/ v přítomnosti 2,0 g oxidu manganičitého po dobu 6,5 hodin. Získaný surový produkt po zfiltrování a po odstranění rozpouštědla se chromatografuje na 3 g silikagelu za použití jakožto elučního činidla systému 3 : 7 ethylacetát/toluen a pak se překrystalovává ze systému toluen/hexan. Získá se 0,120 g /24 % teorie/ vyčištěného /4R/-/±/-6-/2-methylpropanoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu o teplotě tání 148 až 150 °C.

Analýza pro C21^H30^N2° vypočteno: C 77,26 %, H 9,26 %, N 8,58 %, nalezeno: C 77,15 %, H 9,28 %, N 8,69 %.

NMR: identické s racemátem [a]p + 87° /c = 1, methanol/

Příklad 10

Příprava /4R/-/±/-6-benzoyl-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz [cd]indolu

Roztok 0,15 g /0,41 mmol/ /2aS,4R/-/+/-6-benzoyl-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu v 15 ml hexanu se zpracovává zvukem /50 až 55 kHz/ v přítomnosti 0,60 g oxidu manganičitého po dobu 4,5 hodin. Pak se přidá dalších 0,15 g oxidu manganičitého a ve zpracování zvukem se pokračuje po dobu dalších dvou hodin. Surový získaný produkt po filtraci a odstranění rozpouštědla se chromátografuje na 3 g silikagelu za použití jakožto elučního činidla systému 3 : 7 ethylacetát/toluen a pak se překrystaluje ze systému toluen/hexan. Získá se 0,050 g /34 % teorie/ vyčištěného /4R/-/+/-6-benzoyl-4-/di-n-propylamino/-l,3, -

4.5- tetrahydrobenz[cd]indolu o teplotě tání 132,5 až 134 °C.

Analýza pro C₂₄H_2gN₂O vypočteno: C 79,96 %, H 7,83 %, N 7,77 %, nalezeno: C 79,81 %, H 7,68 %, N 7,60 %.

NMR: identické s racemátem, [α]θ + 122° /c = 1, methanol/ Příklad 11

Příprava /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-jod-4-[/ln-propyl-3-fenyl/amino]-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

-28CZ 280605 B6

Do směsí /-//2aR,4S/-4-amino-l-benzoyl-6-jod-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu /4 g, 0,01 mol/ a hydrocinamaldehydu /1,47 g, 0,011 mol/ ve 100 ml methanolu se přidá 691 mg /0,011 mol/ kyanoborhydridu sodného. Hodnota pH vzniklého roztoku se nastaví na 7 octovou kyselinou a výsledný roztok se pak míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Po 16 hodinách se přidá 5N roztok hydroxidu sodného až do zásadité reakce reakčního roztoku, který se zkoncentruje ve vakuu. Koncentrovaný roztok se extrahuje dvakrát ethylacetátem. Ethylacetátové extrakty se spojí a opět se extrahují 5N chlorovodíkovou kyselinou a následně vodou. Kyselý a vodný extrakt se spojí a alkalizují se koncentrovaným roztokem hydroxidu amonného. Výsledný roztok se extrahuje dvakrát ethylacetátem. Ethylacetátové extrakty se opět spojí a výsledný roztok se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se k suchu ve vakuu, čímž se získá /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-jod-4-[/ln-propyl-3-fenyl/amino]-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indol ve formě oleje.

Chromatografie tohoto oleje na silikagelu za použiti ethylacetátu jakožto elučního činidla poskytuje 2,5 g vyčištěného /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-jod-4-[/ln-propy1-3-fenyl/amino]-1,2,2a,3,45-hexanhydrobenz[cd]indolu.

Příklad 12

Příprava /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-jod-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/amino]-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do roztoku 2,5 g /4,8 mmol/ sloučeniny podle příkladu 11 ve 100 ml acetonitrilu se přidá 1,38 g /0,01 mol/ uhličitanu draselného a 1,7 g /0,01 mol/ n-propyljodidu. Výsledný roztok se míchá při teplotě zpětného toku po dobu 16 hodin. Po 16 hodinách se reakční roztok zfiltruje a odpaří se ve vakuu k suchu. Získaný zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje se nasycenou solankou a vysuší se síranem hořečnatým. Vysušený roztok se odpaří k suchu ve vakuu, čímž se získá olej. Chromatografií tohoto oleje na silikagelu za eluování systémem 3:2 ethylacetát/hexan se získají 2,4 g /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-jodo-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/amino]-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu ve formě oleje.

Příklad 13

Příprava /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-kyano-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/amino]-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do roztoku 2,4 g /4,3 mmol/ sloučeniny podle příkladu 12 v 70 ml dimethylformamidu se přidá 1,16 g /13 mmol/ kyanidu mědi a 2,47 g /13 mmol/ jodidu mědného. Výsledný roztok se míchá v prostředí dusíku za teploty zpětného toku po dobu 16 hodin. Po 16 hodinách se reakční směs nalije do 500 ml vody. Získaná sraženina se oddělí filtrací a promyje se několikrát další vodou. Sraženina se suspenduje ve zředěném roztoku hydroxidu amonného a přidá se ethylacetát. Výsledná suspenze se zfiltruje přes vrstvu celitu. Filtrát se rozdělí na oganickou a vodnou vrstvu a organická vrstva se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného,

-29CZ 280605 B6 vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu k suchu k získání surového /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-kyano-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/amino]-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu ve formě oleje. Chromatografie tohoto oleje na silikagelu za eluování systémem 3:2 ethylacetát/hexan jakožto elučním činidlem poskytuje 1,5 g vyčištěného /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-kyano-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/amino]-1,2,2a,3,4,5-hexa-hydrobenz[cd]indolu rovněž ve formě oleje.

Příklad 14

Příprava /-//2aR,4S/-6-kyano-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/-amino]-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do studeného /-78 ’C/ roztoku 1,5 g /3,2 mmol/ sloučeniny podle příkladu 13 v prostředí dusíku v 70 'ml tetrahydrofuranu se přidá 4,0 ml (6,4 mmol) 1,6 M roztoku n-butyllithia v hexanu. Výsledný roztok se míchá při teplotě -78 ’C 30 minut a pak se nechá pomalu ohřát na teplotu -20 °C. Jakmile dosáhne teplota reakčního roztoku -20 °C, přidá se 20 ml IN kyseliny chlorovodíkové. Výsledný roztok se pak extrahuje diethyletherem k odstranění nečistot. Vyčištěný roztok se alkalizuje studeným 5N roztokem hydroxidu sodného a dvakrát se extrahuje methylenchloridem. Methylenchloridové extrakty se spojí a promyjí se nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu k suchu, čímž se získá /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-kyano-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/amino]-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[ cd]-indol ve formě oleje. Tento olej se čistí chromatografií na silikagelu za eluování systémem 3:2 ethylacetát/hexan, čímž se získá 0,9 g /-//2aR,4S/-6-kyano-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/-amino]-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu rovněž ve formě oleje.

Příklad 15

Příprava /-//2aR,4S/-l-trityl-6-kyano-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/-amino]-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do roztoku 0,9 g /2,5 mmol/ sloučeniny podle příkladu 14 a 253 mg /2,5 mmol/ triethylaminu v 50 ml methylenchloridu se přidá po kapkách roztok 700 mg /2,5 mmol/ tritylchloridu ve 20 ml methylenchloridu. Výsledný roztok se míchá při teplotě místnosti 16 hodin. Po 16 hodinách se reakční roztok extrahuje vodou a studeným IN roztokem kyseliny chlorovodíkové k odstranění nečistot. Vyčištěný methylenchloridový roztok se pak promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu k suchu. Získaný zbytek se suspenduje v teplých hexanech, suspenze se ochladí a pak zfiltruje k odstranění nerozpustných podílů. Filtrát se zkoncentruje ve vakuu, čímž se získá 1,4 g /-//2aR,4S/-l-trityl-6-kyano-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/-amino]-1,2,2a-

3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu ve formě pěny.

Příklad 16

Příprava /-//2aR,4S/-6-acetyl-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/amino]-l,2,2a, 3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do roztoku 1,4 g /2,3 mmol/ sloučeniny z příkladu 15 ve 100 ml tetrahydrofuranu se přidá 20 ml 2,0M methylbromidu hořečnatého v roztoku diethyletheru. Výsledná reakční směs se zahřeje na teplotu zpětného toku a míchá se při teplotě zpětného toku po dobu 16 hodin. Po 16 hodinách se reakční roztok ochladí a pak se reakce ukončí přidáním roztoku nasyceného chloridu amonného. Roztok se po ukončené reakci extrahuje ethylacetátem a odpaří se k suchu ve vakuu, čímž se získá olej. Tento olej se rozpustí v 50 ml roztoku 5N kyseliny chlorovodíkové (za míchání po dobu 30 minut při teplotě místnosti). Kyselý roztok se alkalizuje koncentrovaným roztokem hydroxidu amonného a extrahuje se /dvakrát/ ethylacetátem. Ethylacetátové extrakty se spojí, promyjí se nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a zkoncentrují se ve vakuu k suchu, čímž se získá olej. Chromatograf ií tohoto oleje na silikagelu za eluování systémem 1:1 ethylacetát/hexan se získá 500 mg /-//2aR,4S/-6-acetyl-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/-amino]-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indol ve formě oleje.

Příklad 17

Příprava /-//4R/-6-acetyl-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/-amino]-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Směs 500 mg /1,3 mmol/ sloučeniny z příkladu 16 a 2 g oxidu manganičitého ve 100 ml methylenchloridu se prozvučuje čtyři hodiny za udržování zahříváním na teplotě zpětného toku. Po 4 hodinách se reakční směs zfiltruje přes celitovou vrstvu a výsledný filtrát se odpaří k suchu ve vakuu. Výsledný zbytek se chromatografuje /bleskový sloupec, silikagel, systém 1:1 ethylacetát/hexan/, čímž se získá 100 mg (-)(4R)-6-acetyl-4-[(n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl)-amino]-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu. Rekrystalizací z hexanu se získá 55 mg vyčištěného /-//4R/-6-acetyl-4-[/n-propyl-l-n-propyl-3-fenyl/-amino]-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu.

*

Teplota tání 102 až 103 °C.

MS /FD/ 374

Analýza pro ^c25^H30^N2^O: vypočteno: C 80,18 %, H 8,07 %, N 7,48 %, nalezeno: C 80,42 %, H 8,25 %, N 7,58 %.

Příklad 18

Příprava /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-jod-4-fenethylamino-l, 2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do směsi /-//2aR,4S/-4-amino-l-benzoyl-6-jod-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu /4 g, 0,01 mol/ a fenylacetaldehydu /1,32 g, 0,011 mol/ ve 100 ml methanolu se přidá 691 mg

-31CZ 280605 B6 (0,011 mol) kyanoborhydridu sodného. Hodnota pH výsledného roztoku se nastaví na 7 octovou kyselinou a výsledný roztok se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Po 16 hodinách se reakční směs alkalizuje 5N roztokem hydroxidu sodného a roztok se zkoncentru je ve vakuu. Koncentrovaný roztok se pak extrahuje dvakrát ethylacetátem. Ethylacetátové roztoky se spojí a extrahují se 5N roztokem kyseliny chlorovodíkové s následnou extrakcí vodou. Kyselý a vodný extrakt se spojí a alkalizují se koncentrovaným roztokem hydroxidu amonného. Výsledný roztok se extrahuje dvakrát ethylacetátem. Ethylacetátové extrakty se znovu spojí a výsledný roztok se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a pak se odpaří k suchu ve vakuu, čímž se získá surový /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-jod-4-fenethylamino-l,2,2a,3,-

4,5-hexahydrobenz[cd]indolu ve formě oleje. Chromatografií tohoto oleje na silikagelu za eluování ethylacetátem se získá 4,2 g /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-jod-4-fenethylamino-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz [cd] indolu ve formě oleje.

Příklad 19

Příprava /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-jod-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do roztoku 4,2 g /8,3 mmol/ sloučeniny podle 18 ve 100 ml acetonitrilu se přidá 2,76 g /0,02 mol/ uhličitanu draselného a 3,4 g /0,02 mol/ n-propyljodidu. Výsledná reakční směs se míchá při teplotě zpětného toku po dobu 16 hodin. Po 16 hodinách se reakční roztok zfiltruje a odpaří se k suchu ve vakuu. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu, čímž se získá roztok, který se promyje nasycenou solankou a vysuší se síranem hořečnatým. Vysušený roztok se odpaří k suchu ve vakuu, čímž se získá olej. Chromatografie (silikagel, jako eluční činidlo ethylacetát) tohoto oleje poskytuje 3,1 g /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-jod-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu ve formě oleje.

Příklad 20

Příprava /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-kyano-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do roztoku 3,1 g (5,6 mmol) sloučeniny podle příkladu 19 v 70 ml dimethylformamidu se přidá 1,52 g /17 mmol/ kyanidu mědi a 3,23 g /17 mmol/ jodidu měďného. Výsledná reakční směs se míchá při teplotě zpětného toku po dobu 16 hodin v prostředí dusíku. Po 16 hodinách se reakční roztok vlije do 500 ml vody. Výsledná sraženina se oddělí filtrací a promyje se několikrát další vodou. Sraženina se suspenduje v roztoku zředěného chloridu amonného a přidá se ethylacetát. Výsledná suspenze se pak zfiltruje přes celitovou vrstvu. Filtrát se rozdělí na organickou a vodnou vrstvu a organická vrstva se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se pak ve vakuu k suchu za získání /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-kyano-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu ve formě oleje.

-32CZ 280605 B6

Příklad 21

Příprava /-//2aR,4S/-6-kyano-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-i,2,2a,3,4 ,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do studeného /-78 °C/ rotoku 3,1 g /5,6 mmol/ sloučeniny podle příkladu 20 se v prostředí dusíku ve 100 ml tetrahydrofuranu přidá 6,9 ml /11 mmol/ 1,6 M roztoku n-butyllithia v hexanu. Výsledný roztok se míchá při teplotě -78 °C po dobu 30 minut a nechá se pomalu ohřát na teplotu -20 °C. Jakmile dosáhne teplota reakčního roztoku -20 °C, přidá se 20 ml IN roztoku kyseliny chlorovodíkové. Výsledný roztok se extrahuje diethyletherem k odstranění nečistot. Vyčištěný roztok se alkalizuje studeným 5N roztokem hydroxidu sodného a pak se dvakrát extrahuje methylenchloridem. Methylenchloridové extrakty se spojí a promyjí se nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a pak se zkoncentrují ve vakuu k suchu, čímž se získá olej jako zbytek. Chromatografií tohoto oleje na silikagelu za eluování systémem 1:1 ethylacetát/hexan se získá 1,1 g /-//2aR,4S/-6-kyano-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-l,2,2a-3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu.

Příklad 22

Příprava /-//2aR,4S/-l-trityl-6-kyano-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do roztoku 1,1 g /3,1 mmol/ sloučeniny podle příkladu 21 a 313 mg /3,1 mmol/ triethylaminu v 50 ml methylenchloridu se po kapkách přidá roztok 865 mg /3,1 mmol/ tritylchloridu ve 20 ml methylenchloridu. Výsledná reakční se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Po 16 hodinách se reakční roztok extrahuje vodou a studeným IN roztokem kyseliny chlorovodíkové k odstranění nečistot. Vyčištěný methylenchloridový roztok se pak promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se k suchu ve vakuu, čímž se získá zbytek. Tento zbytek se suspenduje v teplých hexanech a výsledná suspenze se ochladí a zfiltruje se k odstranění nerozpustných podílů. Filtrát se odpaří ve vakuu, čímž se získá 1,7 g /-//2aR,4S/-l-trityl-6-kyano-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu ve formě oleje.

Příklad 23

Příprava /-//2aR,4S/-6-acetyl-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-1,2-2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu

Do roztoku 1,7 g /2,9 mmol/ sloučeniny podle příkladu 22 v 700 ml tetrahydrofuranu se přidá 20 ml roztoku 2,0 M methylmagnesiumbromidu v diethyletheru. Výsledná reakční směs se zahřeje na teplotu zpětného toku a míchá se při teplotě zpětného toku po dobu 16 hodin. Po 16 hodinách se reakční roztok ochladí a pak se reakce ukončí přidáním nasyceného roztoku chloridu amonného. Roztok se extrahuje ethylacetátem a odpaří se k suchu ve vakuu k získání oleje. Tento olej se rozpustí v 50 ml 5N roztoku kyse-33CZ 280605 B6 líny chlorovodíkové /při míchání po dobu 30 minut při teplotě místnosti/. Kyselý roztok se alkalizuje koncentrovaným roztokem hydroxidu amonného a pak se extrahuje /dvakrát/ ethylacetátem. Ethylacetátové extrakty se spojí, promyjí se nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se k suchu ve vakuu za získání oleje. Chromatografií tohoto oleje na silikagelu za použití systému 1/1 ethylacetát/hexan jakožto eluentu se získá 600 mg /-//2aR,4S/-6-acetyl-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu ve formě oleje.

Příklad 24

Příprava /-//4R/-6-acetyl-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Směs 600 mg /1,7 mmol/ sloučeniny podle příkladu 23 a 2 g oxidu manganičitého v 100 ml methylenchloridu se prozvučuje po dobu čtyř hodin za udržování ohříváním na teplotě zpětního toku. Po čtyřech hodinách se reakční směs zfiltruje přes celitovou vrstvu a získaný filtrát se odpaří k suchu ve vakuu. Zbytek se chromátografuje /bleskový sloupec, silikagel, systém 1/1 ethylacetát/hexan/ za získání 200 mg /-//4R/-6-acetyl-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu. Překrystalováním z hexanu se získá 58 mg vyčištěného /-//4R/-6-acetyl-4-[/n-propyl//fenethyl/amino]-1,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu.

Teplota tání 97 až 98 °C.

Analýza pro C24H23N2O:

vypočteno: C 79,96 %, H 7,83 %, N 7,77 %, nalezeno: C 80,21 %, H 7,60 %, N 7,97 %.

Příklad 25

Příprava /-//2aR,4S/-6-/2-methoxybenzoyl/-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hedxahydrobenz[cd]indolu

Do studeného /-78 ”C/ roztoku /-//2aR,4S/-l-trityl-6-brom-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu /2,9 g, 5,0 mmol/ v 50 ml tetrahydrofuranu se přidá 3,75 ml /6,0 mmol/ 1,6 M roztoku n-butyllithia. Výsledný roztok se míchá při -78 °C po dobu jedné hodiny a pak se přidá najednou roztok 3,6 g (18,0 mmol) 2-methoxy-N-methyl-N-methoxybenzamidu ve 20 ml tetrahydrofuranu. Výsledný roztok se míchá po dobu jedné hodiny při teplotě místnosti. Po jednohodinovém míchání se přidá 50 ml 5N roztoku kyseliny chlorovodíkové a výsledný kyselý roztok se míchá po dobu jedné hodiny a zředí se vodou. Tento zředěný roztok se extrahuje ethylacetátem a alkalizuje se koncentrovaným roztokem hydroxidu amonného. Zásaditý roztok se extrahuje ethylacetátem. Ethylacetátový extrakt se promyje nasyceným roztokem solanky, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu k suchu, čímž se získají 2,0 g oleje. Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla ethylacetátu se získá 1,2 g /-//2aR,4S/-6-/2-methoxy-34CZ 280605 B6 benzoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hedxahydrobenz[ cd ] indolu.

Příklad 26

Příprava /-//4R/-6-/2-methoxybenzoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,3,45-tetrahydrobenz[cd]indolu

Směs 1000 mg /2,6 mmol/ sloučeniny podle příkladu 26 a 3 g oxidu manganičitého ve 80 ml methylenchloridu se prozvučuje po dobu čtyř hodin za udržování zahříváním na teplotě zpětného toku. Po čtyřech hodinách se reakční směs zfiltruje přes celitovou vrstvu a výsledný filtrát se odpaří k suchu ve vakuu. Zbytek se chromatografuje /bleskový sloupec, silikagel, systém 7/3 ethylacetát/hexan/ za získání 500 mg /-//4R/-6-/2-methoxybenzoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu. Překrystalováním z hexanu se získá 175 mg vyčištěného /-//4R/-6-/2-methoxybenzoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu.

Teplota tání 122 až 123 ’C.

MS(FD) 390

Analýza pro vypočteno: C 76,89 %, H 7,74 %, N 7,17 %, nalezeno: C 77,09 %, H 7,73 %, N 7,21 %.

Příklad 27

Příprava /-//4R/-6-/2,2,2-trifluoracetyl/-4-/di-n-propylamino/-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Do studeného /-78 °C/ roztoku 2,31 g /4,7 mmol/ /-//4R/-1-triisopropylsilyl-6-brom-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu v 50 ml tetrahydrofuranu se přidá po kapkách v průběhu pěti minut 7,4 ml /10,34 mmol/ 1,4 M roztoku terc.-butyllithia v pentanu. Výsledný roztok se míchá při teplotě -78 °C po dobu jedné hodiny a pak se kanýluje do studeného /-78 °C/ roztoku ethyltrifluoracetátu (5,6 ml, 47,0 mmol) ve 150 ml tetrahydrofuranu. Výsledný roztok se míchá po dobu 40 minut při teplotě -78 °C a reakce se ukonči přidáním 20 ml nasyceného vodného roztoku chloridu amonného. Po ukončení reakce se roztok zahřeje na teplotu místnosti a zkoncentruje se ve vakuu za vzniku pasty. Tato pasta se rozpustí ve směsi 1/1 dichlormethanu a vody. Vodná vrstva se oddělí od vrstvy organické a extrahuje se dvakrát dichlormethanem. Veškeré dichlomethanové roztoky se spojí, promyjí se nasyceným roztokem solanky, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu k suchu za získání hnědého oleje. Tento olej se rozpustí v 60 ml tetrahydrofuranu a výsledný roztok se ochladí na teplotu 0 °C. Po ochlazení na teplotu 0 °C se v průběhu 5 minut přidá 1,0 M roztok tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu. Po dalším 15 minutovém míchání se reakční roztok zředí 60 ml vody a extrahuje se třikrát dichlormethanem. Extrakty se spojí, promyjí se nasyceným roztokem solanky, vysuší se síranem hořečnatým a zkoncentrují se ve vakuu za získání 1,6 g

-35CZ 280605 B6 žluté pevné látky. Bleskovou chromatografií na silikagelu za eluování systémem 20 % ethylacetátu/hexan plus 0,5% vodný hydroxid amonný/ se získá /-//4R/-6-/2,2,2-trifluoroacetyl/-4-/di-n-propylamino/- -1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol ve formě žluté pevné látky. Překrystalováním ze systému ethylacetát/hexanu se získá 0,98 g vyčištěného /-//4R/-6-/2,2,2-trifluoroacetyl/-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu ve formě žlutých krystalů.

Teplota tání 125 až 127 °C.

MS(FD) 352.

[a]_D = -129,2° /c = 1,0 CHC1₃/.

Příklad 28

Příprava /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-brom-4-[/dicyklopropylmethyl/amino]-1,2,2a,3,4,5-hedxahydrobenz[cd]indolu

Do studeného /0 °C/ roztoku 10,0 g /28,0 mmol/ /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-brom-4-amino-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz[cd]indolu v 500 ml methanolu se přidá 4,6 ml /61,6 mmol/ cyklopropankarboxaldehydu, /1,76 g, 28,0 mmol/ kyanoborhydridu sodného a 8,0 ml /140,0 mmol/ ledové kyseliny octové. Výsledný roztok se nechá míchat při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Po šestnácti hodinách se roztok odpaří k suchu ve vakuu. Zbytek se rozpustí ve vodě a hodnota pH vodného roztoku se nastaví na 12 5N roztokem hydroxidu sodného. Zásaditý roztok se extrahuje třikrát dichlormethanem. Extrakty se spojí, promyjí se nasyceným roztokem solanky, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu k suchu, čímž se získá 11,0 g /-//2aR,4S/-l-benzoyl-6-brom-4-[/dicyklopropylmethyl/amino]-1,2,2a,3,4,5-hedxahydrobenz[cd]indolu ve formě oranžové pěny.

MS(FD) 464.

Příklad 29

Příprava /-//4R/-6-brom-4-[dicyklopropylmethyl/amino]-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Do míchaného roztoku 11,0 g sloučeniny podle příkladu 28 ve 120 ml ethanolu se přidá 48 ml 5N roztoku hydroxidu sodného. Výsledný roztok se zahříváním udržuje po dobu čtyř hodin na teplotě zpětného toku. Po čtyřech hodinách se reakční roztok zkoncentruje ve vakuu za získání pasty, která se rozpustí v systému 1/1 dichlormethan/voda za získání dvoufázového roztoku. Vodná fáze se od organické fáze oddělí a extrahuje se třikrát dichlormethanem. Dichlormethanové roztoky se spojí a promyjí se nasyceným roztokem solanky, vysuší se síranem sodným a odpaří se ve vakuu, čímž se získá 8,05 g červeného oleje. Tento olej se rozpustí ve 180 ml dichlormethanu a výsledný roztok se zpracuje 20,5 g (236,3 mmol) aktivovaného oxidu manganičitého. Výsledná suspenze se míchá v prostředí dusíku po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Po 18 hodinách se reakční směs zředí 500 ml systému 1/1 ethalacetát/dichlormethan. Výsledná směs se zfiltruje vrstvou celitu a filtrát se odpaří k suchu ve vakuu, čímž se získá temně červený olej.

-36CZ 280605 B6

Blesková chromatografie na silikagelu /za eluování systémem 20 % ethylacetátu/hexan plus 0,5% vodný hydroxid amonný/ poskytuje 4,67 g /-//4R/-6-brom-4-[/dicyklopropylmethyl/amino]-l,3,4,5,-tetrahydrobenz[cd]indolu ve formě lehkého červeného oleje. MS(FD) 358.

Příklad 30

Příprava /-//4R/-l-triisopropylsilyl-6-brom-4-[/dicyklopropyl-methyl/amino]-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Do studené /0 °C/ míchané suspenze 661 mg /16,49 mmol/ oleje, prostého hydridu draselného, v 60 ml tetrahydrofuranu se přidá roztok 4,6 g sloučeniny z příkladu 29 v 15 ml tetrahydrofuranu. Po jednohodinovém míchání reakční směsi při teplotě místnosti se po kapkách přidá 4,1 ml /15,23 mmol/ triisopropylsilylu. Výsledná směs se míchá při teplotě 0 C po dobu jedné hodiny a pak, se nalije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Výsledný roztok se extrahuje třikrát dichlormethanem. Extrakty se zkombinují, promyjí se nasyceným roztokem solanky, vysuší se síranem sodným a odpaří se ve vakuu k suchu za získání 6,6 g hnědého oleje. Blesková chromatografie na silikagelu /za eluování systémem 30 % ethylacetátu/hexan plus 0,5% vodný hydroxid amonný/ poskytuje 5,18 g /-//4R/-l-triisopropylsilyl-6-brom-4-[/dicyklo-propylmethyl/amino]-1,2,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu ve formě světle hnědého oleje.

MS(FD) 514.

Příklad 31

Příprava /-//4R/-6-/2,2,2-trifluoracetyl/-4-[/dicyklopropylmethy1/amino]-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu

Do studeného /-78 °C/ míchaného roztoku 5,18 g /10,05 mmol/ sloučeniny z příkladu 30 ve 110 ml tetrahydrofuranu se přidá po kapkách v průběhu 10 minut 15,8 ml /22,1 mmol/ 1,4 M roztoku terč.-butyllithia v pentanu. Výsledný roztok se míchá při teplotě -78 °C po dobu 45 minut a pak se kanyluje do studeného /-78 °C/ roztoku 120 ml /100,5 mmol/ ethyltrifluoracetátu ve 150 ml tetrahydrofuranu. Po ukončení přísady ethyltrifluoracetátu se roztok míchá po dobu jedné hodiny při teplotě -78 ’C a reakce se ukonči přidáním 10 ml vody. Reakční roztok se zahřeje na teplotu místnosti a zkoncentruje se ve vakuu za vzniku pasty. Tato pasta se rozpustí v systému 1/1 dichlormethanu a vody. Vodná vrstva se oddělí od vrstvy organické a extrahuje se dvakrát dichlormethanem. Veškeré dichlormethanové roztoky se spojí, promyjí se nasyceným roztokem solanky, vysuší se síranem sodným a odpaří se ve vakuu k suchu za získání hnědého oleje. Olej se rozpustí ve 100 ml tetrahydrofuranu a výsledný roztok se ochladí na teplotu 0 °C. Do studeného roztoku se v průběhu 5 minut přidá 20,1 ml /20,1 mmol/ 1,0 M roztoku tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu. Výsledný roztok se míchá po dobu 15 minut při teplotě 0 °C, zředí se vodou a extrahuje se třikrát dichlormethanem. Extrakty se spojí, promyjí nasyceným roztokem solanky, vysuší se síranem sodným a zkoncentrují se ve vakuu za získání 5,1 g viskózního hnědého oleje. Bleskovou chromatografií na silikagelu (za eluování systé

-37CZ 280605 B6 mem 30 % ethylacetátu/hexan plus 0,5% vodný hydroxid amonný) se získá 2,21 g /-//4R/-6-/2,2,2-trifluoracetyl/-4-[/dicyklopropylmethyl/amino]-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu ve formě žluté pevné látky. Překrystalováním ze systému ethylacetát/hexanu se získají 2,0 g čistého /-//4R/-6-/2,2,2-trifluoracetyl/-4-[/di-cyklopropylmethyl/amino]-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indolu.

Teplota tání: 127 až 128 °C.

MS(FD) 378.

[a]_D = -135,3°.

Sloučeniny obecného vzorce I mají selektivní afinitu pro 5 HT receptory v mozku s mnohem menší afinitou pro jiné receptory. Pro svoji schopnost selektivně se vázat na 5 HT receptory jsou sloučeniny obecného vzorce I užitečné pro ošetřování chorobných stavů, při kterých je příznivá změna funkce 5ΗΤ_χΑ receptoru avšak bez vedlejšího působení, které by mohlo být spojeno s méně selektivní sloučeninou. Určité sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu jsou užitečné pro ošetřování chorobných stavů, pro které je příznivé měnit tyto receptory. Ovlivňování určitého receptoru může zahrnovat podporu /agonist/ nebo inhibici /antagonist/ funkce serotoninu. Jakožto chorobné stavy se uvádějí úzkost, deprese, nadbytečná žaludeční sekrece, vysoký tlak, sexuální dysfunkce, narušení chuti, alkoholismus a kouření, soudnost a senilní demence. Pro ošetřování uvedených stavů se používá účinného množství sloučeniny podle vynálezu obecného vzoce I.

Zjistilo se, že účinnost sloučenin obecného vzorce I nijak neovlivňuje skutečnost, je-li aminoskupina v poloze 1 blokována. To zanemná, že sloučeniny mají při biologických testech stejný účinek v případě, kdy jde o nesubstituovanou aminoskupinu (symbol R³ znamená atom vodíku) nebo o blokovanou aminoskupinu (symbol R³ nahrazen jakoukoliv blokující skupinu, uváděnou například ve známých publikacích (kapitola 5 z publikace Protective Groups in Organic Synthesis [Chránící skupiny v organické syntéze], John Wiley and Sons, New York, 1981 a kapitola 2 z publikace Protective Groups in Organic Chemistry [Chránící skupiny v organické chemii] J. F. W. Mc Omie, vyd., Plenům Press, New York, 1973).

Výrazem farmaceuticky účinné množství, zde používaným, se vždy míní množství sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu, které je schopné snižovat nepříznivé symptomy určitého onemocnění. Příslušnou dávku sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu, podávanou nemocnému, ovlivňují příslušné okolnosti, jako je typ podávané sloučeniny, způsob podávání, stav ošetřovaného jedince a podobné skutečnosti. Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu se mohou podávat různým způsobem včetně orálního, rektálního, transdermálního, subkutánního, intravenozního, intramuskulárního nebo intranasálního podání. Zpravidla jedna dávka pro profylaktické ošetření však obsahuje přibližně 0,01 mg/kg až přibližné 50 mg/kg účinné látky při orálním podávání. Výhodná orální dávka obsahuje účinné látky 0,01 až přibližně 3,0 mg/kg, a především přibližně 0,1 až přibližně 1,0 mg/kg. Pokud se sloučenina obecného vzorce I podává orálně, může být nutné podávat sloučeninu obecného vzorce I vícekrát za den, například vždy po přibližné

-38CZ 280605 B6 hodinách. V případě intravenózního podávání je množství účinné látky přibližně 10 ^g/kg až přibližně 300 μg/kg, s výhodou přibližně 20 μg/kg až přibližně 50 μg/kg.

Následující příklady dokládají schopnost sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu vzájemně reagovat se serotoninovými IA a/nebo ID receptory. Afinity sloučenin na centrální 5-vazbě popsal Taylor a kol. /J. Pharmacol. Exp. Ther., 236, str. 118 až 125, 1986/. Blány pro zkoušky vázání se připravují ze samečku krysy Sprague-Dawley /o hmotnosti 150 až 250 g/. Živočiši se usmrtí odříznutím hlavičky, mozky se rychle ochladí a rozříznou pro získání hippocampů, Hippocampů se ihned používá, nebo se uloží ve zmrazeném stavu /-70 °C/ až po den použití. Blány se připravují homogenizací tkáně ve 40 objemech ledově chladného pufru Tris-HCl /50 mM, hodnota pH 7,4 při 22 °C/ za použití Techmar Tissumozer /65 po 15 s/ a homogenát se odstřečťuje po dobu 10 minut při 39 800 x g. Získaná peleta se opět suspenduje v témže pufru a odstředění a opětné suspendování se opakuje třikrát k promytí blány - membrány. Mezi druhým a třetím promytím se resuspendovaná membrána inkubuje po dobu 10 minut při teplotě 37 °C k usnadnění odstranění endogenních ligand. Hotová peleta se opět suspenduje v 67 mM Tris-HCl o hodnotě pH 7,4 na koncentraci 2 mg mokré hmotnosti původní tkáně na 200 μΐ. Homogenizát se skladuje ve zmrazeném stavu /-70 °C/ až do dne provádění zkoušky. Každá trubka pro zkoušku vázání má konečný objem 800 μΐ a obsahuje: Tris-HCl /50 mM/, pargylin /10 μΜ/, chlorid vápenatý /3 mM/, [³H]8-OH-DPAT /1,0 nM/, hodnocenou sloučeninu ve vhodném zředění a resuspenzi membrány v množství, ekvivalentním 2 mg mokré hmotnosti původní tkáně, přičemž konečná hodnota pH je 7,4. Zkušební zkumavka se inkubuje po dobu 10 minut při teplotě 37 °C a obsah se pak rychle zfiltruje filtry GF/B /předběžně upravenými 0,5 % polyethyleniminu/, načež se provede čtyřikrát promytí 1 ml ledově chladného pufru. Radioaktivita filtrů se kvantifikuje kapalinovou scintilační spektrometrii a definuje se specifické vázání [³H]8-OH-DPAT na 5-HT_1A, jakožto rozdíl mezi [³H]8-OH-DPAT, vázaným v přítomnosti a v nepřítomnosti 10 μΜ 5-HT.

Afinita určité sloučeniny k 5-HT_1A receptoru se vyjadřuje jako IC₅₀ hodnota, to je koncentrace, požadovaná k inhibici 50% vázání. Hodnoty IC₅₀ se stanovují z 12 bodových křivek za použití nelineární regrese /SYSTAT, SYSTAT, INC., Evanston, IL/. Výsledky tohoto stanovení jsou uvedeny v tabulce I.

Afinity sloučenin k centrálním 5-HT_3D vázacím polohám se stanovují modifikovaným způsobem, který popsal Houring a Peroutka /J. Neurosci., 7, str. 894 až 903, 1987/. Hovězí mozky, získané z Pel-Freeze Biologicals, a caudate nuclei se rozřeží a zmrazí na teplotu -70 ’C až do doby přípravy membrány pro provedení zkoušky. V této chvíli se tkáň homogenizuje ve 40 objemech ledově chladného pufru Tris-HCl /50 mM, hodnota pH 7,4 při teplotě 22 °C/ za použití Techmar Tissumizeru /65 za 15 s/ a homogenizát se odstředuje po dobu 10 minut při 39 800 g. Vzniklá peleta se opět suspenduje v témže pufru a proces odstřelování a opětného suspendování se opakuje třikrát k promytí membrány. Mezi druhé

-39CZ 280605 B6 a třetí promytí se zařazuje inkubace supendovaných membrán po dobu 10 minut při teplotě 37 °C k usnadnění odstranění endogenní 5-HT. Konečná peleta se opět suspenduje v pufru Tris na koncentraci 25 mg původní mokré tkáně na ml pro použití ke zkoušce vázání. Každá zkumavka pro zkoušku vázání má konečný objem 800 μΐ a obsahuje Tris-HCl /50 mM/, pargylin /10 μΜ/, askorbát /5,7 mM/, chlorid vápenatý /3 mM/, 8-OH-DPTA /100 nM k maskování 5-HT_1A receptorů/, mesulergin /100 nM k maskování 5-HT_lc receptorů/, [³H]5-HT /1,7 až 1,9 nM/, vhodná ředidla drog zkoušených a ekvivalent suspenze membrány, odpovídající 5 mg mokré hmotnosti původní tkáně, přičemž konečná hodnota pH je 7,4. Zkušební zkumavka se inkubuje po dobu 10 minut při teplotě 37 °C a obsahy se pak rychle zfiltrují filtry GF/B /předběžné upravenými 0,5% polyethyleniminem/, načež se čtyřikrát promyjí 1 ml ledově chladného pufru. Radioaktivita, zadržená na filtru, se kvantifikuje kapalinovou scintilační spektrometrií a specifikuje se vázání [³H] na 5-HTid polohy jakožto rozdíl mezi vázáním [³H]5-HT v přítomnosti a v nepřítomnosti 10 μΜ 5-HT.

Afinity sloučenin na 5-HT_1D receptor se vyjadřují jakožto hodnota IC₅₀, to je koncentrace potřebná k inhibici 50% vázání. Hodnoty se stanovují z 12 bodových křivek za použití nelineární regrese /SYSTAT, SYSTAT, lne., Evanston, IL/. Výsledky tohoto

stanovení jsou	uvedeny v	tabulce I.
Tabulka I
Příklad číslo	5-HTiA/X/	5-HT1D /1Z
1	0,50	2,01
2	0,20	18,37
7	0,22	7,46
8	0,12	96,37
9	0,16	1,27
10	0,22	1,81
/1/ IC50 v nanomolech na	litr
Při jiné	zkoušce se určité sloučeniny podle	jednotlivých
příkladů hodnotí ke stanovení schopnosti ovlivňovat 5-hydroxy-

indoly serotonin a 5-hydroxyindoloctovou kyselinu /5HIAA/ a serumkortikosteron in vivo. Samečkovi albínu krysy se subkutánně vstřikuje vodný roztok zkoušené sloučeniny. Hodnota pH roztoku se upravuje, pokud je potřeba rozpustit sloučeninu. Podobně se vstřikuje kontrolní roztok bez zkoušené sloučeniny kontrolním zvířatům. Za hodinu se krysám uřízne hlavička. Krev se shromáždi a nechá se shlukovat. Po odstředění se sérum zmrazí a skladuje se před analýzou. Celý mozek se vyjme a zmrazí se na suchém ledu pro uskladnění před analýzou. Spektrofluorometričky se měří koncentrace sérum kortikosteronu za použití způsobu, který popsal Sólem a Brinck-Johnson Evaluation of a Method for Determination of Free Corticosteroids in Minuté Quantities of Mouše Plasma /Hodnocení způsobů pro stanovení volných kortikosteroidů v nepatrných množstvích myší plazmy/, Scand. J. Clin. Lab. Invest., Suppl. 80, str. 1 až 14, 1965. Koncentrace hydroxyindoloctové ky-40CZ 280605 B6 seliny /5HIAA/ v celém mozku se stanovuje kapalinovou chromatograf ií s elektrochemickou detekcí, jak popisuje Fuller a Perry Effects of Buspirone and its Metabolite, l-/2-pyrimidinyl/piperazine, on Brain Monoamines and Their Metabolites in Rats /Vlivy buspironu a jeho metabolitu, l-/2-pyrimidinyl/piperazinu na mozkové monoaminy a jejich metabolity v případě krys/, J. Pharmacol. Exp. Ther., 248, str. 50 až 56, 1989. Výsledky této zkoušky jsou uvedeny v tabulce II.

Tabulka II

Příklad číslo dávka mg/kg

Serotonin nmol/g

5HIAA nmol/g

Sérum kertikosteron mikrog/100 ml

kontrola	2,97	+	0,27	1,55	+	0,09	3,8	+	0,6
příklad 1
0,03	3,15	+	0,13	1,58	+	0,05	8,2	+	3,2
0,3	3,45	+	0,10	1,31	+	0,03(a)	36,0	+	4,8(a)
3,0	3,38	+	0,08	1,23	+	0,04(a)	44,2	+	l,5(a)
kontrola	2,07	+	0,08	1,62	+	0,05	3,4	+	0,5
příklad 2
(0,03)	2,60	+	0,09(a)	1,27	+	0,01(a)	33,4	+	3,7(a)
(0,3)	2,54	+	0,14(a)	1,10	+	0,06(a)	39,1	+	l,l(a)
(3)	3,25	+	0,01(a)	2,04	+	0,02(a)	13,8	+	0,6(a)
kontrola	2,81	+	0,15	2,18	+	0,05	3,4	+	0,2
příklad 2
(0,0003)	2,71	+	0,06	2,21	+	0,05	3,8	+	0,5
(0,003)	2,64	+	0,11	1,79	+	0,10(a)	3,6	+	0,1
(0,03)	3,23	+	0,11	1,95	+	0,04(a)	36,7	±	l,2(a)
kontrola	2,08	+	0,06	2,06	+	0,08	4,6	+	1,0
příklad 7
(0,03)	2,47	+	0,07(a)	1,43	+	0,02(a)	41,8	+	l,7(a)
(0,3)	2,59	+	0,14(a)	1,37	+	0,07(a)	41,5	+	5,3(a)
(3(b))
kontrola	2,72	+	0,10	1,81	+	0,05	3,4	+	0,2
příklad 7
(0,0003)	2,68	+	0,11	1,93	+	0,07	4,1	+	0,6
(0,003)	2,74	+	0,07	1,80	+	0,05	3,6	+	0,1
(0,03)	3,00	+	0,10	1,34	+	0,07(a)	21,8	+	2,l(a)
kontrola	2,08	+	0,06	2,06	+	0,08	4,6	+	1,0
příklad 8
(0,03)	2,58	+	0,15(a)	1,31	+	0,06(a)	47,0	+	2,4(a)
(0,3)	2,78	+	0,13(a)	1,36	+	0,04(a)	47,3	+	2,3(a)
(3)	2,63	+	0,12(a)	1,35	+	0,04(a)	45,4	+	l,3(a)
kontrola	2,72	+	0,10	1,81	+	0,05	3,4	+	0,2
příklad 8
(0,0003)	2,91	+	0,12	1,91	+	0,08	3,4	+	0,2
(0,003)	2,65	+	0,13	1,47	+	0,04(a)	3,8	+	0,2
(0,03)	3,30	+	0,09(a)	1,59	+	0,10	40,3	+	l,8(a)

-41CZ 280605 B6

kontrola(c)	2,55	+	0,12	1,53	+	0,04		—
příklad 8(c)
(0,1)	2,77	±	0,07	1,67	+	0,04(a)		-
(0,3)	2,47	+	0,07	1,60	+	0,07		—
(1)	2,86	+	0,07	1,74	+	0,05(a)		-
(3)	2,68	+	0,11	1,31	+	0,08(a)		-
kontrola	2,07	+	0,08	1,62	+	0,05	3,4	+	0,5
příklad 9
(0,03)	2,56	+	0,07(a)	1,38	+	0,02(a)	7,7	+	l,8(a)
(0,3)	2,94	+	0,13(a)	1,22	+	0,04(a)	40,8	+	2,0(a)
(3)	2,65	+	0,07(a)	1,38	+	0,08(a)	30,8	+	4,5(a)
kontrola	2,81	+	0,15	2,18	+	0,05	3,4	+	0,2
příklad 9
(0,0003)	2,76	+	0,10	2,44	+	0,06(a)	4,1	+	0,5
(0,003)	2,94	+	0,11	2,23	+	0,09	6,0	+	1,3
(0,03)	3,08	+	0,11	1,82	+	0,08(a)	9,1	+	l,2(a)

/a/ výrazný rozdíl od kontrolní skupiny /P menší než 0,05/, /b/ krysy ošetřené 3 mg/kg, usmrcené v průběhu jedné hodiny, /c/ podáno orálně 5 hodin před usmrcením.

Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu se s výhodou pro podávání zpracovávají na farmaceutické prostředky. Vynález se proto také týká farmaceutických prostředků, které obsahují sloučeninu obecného vzorce I podle vynálezu a farmaceuticky vhodný excipient pro tuto sloučeninu obecného vzorce I.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu se připravují o sobě známými způsoby ze snadno dostupných složek. Při výrobě prostředku podle vynálezu se účinná složka zpravidla mísí s excipientem, ředí se excipientem nebo se uzavírá v nosiči, kterým může být kapsle, sáček, papír nebo jiný obal. Pokud je excipient současně ředidlem, může být pevný, polopevný nebo kapalný a působí jakožto nosič, pojidlo nebo prostředí pro účinnou látku obecného vzorce

I. Prostředek podle vynálezu může mít tedy formu tablet, pilulek, prášků, kosočtverečků, sáčků, váčků, elixíru, suspenzí, emulzí, roztoků, sirupů, aerosolů /v pevném nebo v kapalném prostředí/, mastí, obsahujících například hmotnostně až 10 % účinné látky, měkkých a tvrdých želatinových kapslí, čípků, sterilních vstřikovatelných roztoků a sterilních prášků.

Jakožto příklady vhodných excipientů se uvádějí laktóza, dextróza, sacharóza, sorbitol, mannitol, škroby, klovatina akacia, fosforečnan vápenatý, algináty, tragakanth, želatina, křemičitan vápenatý, mikrokrystalická celulóza, polyvinylpyrrolidon, celulóza, voda, sirup, methylcelulóza. Prostředky mohou také obsahovat mazadla, jako je například mastek, stearát hořečnatý a minerální olej, smáčedla, emulgační a suspenzační přísady, konzervační činidla, jako jsou například methylhydroxybenzoát a propylhydroxybenzoát, sladidla nebo ochucovací přísady. Prostředky podle vynálezu se mohou formulovat tak, aby měly rychlé působení, prodloužené nebo odložené působení účinné látky po podání nemocnému, za použití o sobě známých způsobů.

Prostředky se s výhodou vyrábějí v jednotkové dávkovači formě, přičemž každá dávka obsahuje přibližně 0,5 až přibližné 50 mg,

-42CZ 280605 B6 zpravidla 1 až přibližně 10 mg účinné látky. Výrazem účinná dávka se zde vždy míní fyzikálně oddělené jednotky, vhodné pro podávání lidem i jiným savcům, přičemž každá dávka obsahuje předem stanovené množství účinné látky, vypočtené pro dosažení žádoucího terapeutického působení, spolu se vhodným nosičem.

Následující prostředky vynález opět objasňují, nijak ho však neomezuj í.

Prostředek 1

Tvrdé želatinové kapsle se připravují za použití následujících složek:

/+/-6-/2,2-dimethylpropanoyl/-4-/di-n-propylamino/-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol škrob, sušený stearát hořečnatý celkem

Množství/mg/kapsle

425

460 mg

Shora uvedené složky se smísí a plní se do tvrdých želatinových kapslí v množství 460 mg.

Prostředek 2

Tableta se připravuje za použití následujících složek:

/+/-6-acetyl-/di-n-propylamino/-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol celulóza, mikrokrystalické oxid křemičitý, sublimovaný kyselina stearové

Množství /mg/tableta/

625 celkem

5 mg

Uvedené složky se smísí a slisují se na tablety vždy o hmotnosti 665 mg.

Příklad farmaceutického prostředku 3

Suchý, práškovitý inhalační prostředek se připraví za použití následujících složek:

Hmotnost /%/

4-/diethylamino/-6-propanoyl-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol laktóza celkem

5,00

95,00

100,00

Účinná látka se smísí s laktózou a směs se vnese do práškového inhalačního přístroje.

-43CZ 280605 B6

Příklad farmaceutického prostředku 4

Tablety, obsahující vždy 60 mg účinné látky, se připravují z následujících složek:

Množství /mg/tableta/

4-/di-n-propylamino/-6-/2-methylpropanoyl-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol, vinanová sůl 60,0 škrob 45,0 celulóza, mikrokrystalická 35,0 polyvinylpyrrolidon (10% roztok ve vodě) 4,0 natriumkarboxymethylovaný škrob 4,5 stearát hořečnatý 0,5 mastek 1,0 celkem 150,0

Účinná látka, škrob a celulóza se vedou sítem No. 20 mesh U.S. (průměr ok 850 mikrometrů) a důkladné se promísí. Se získaným práškem se smísí roztok polyvinylpyrrolidonu a směs se vede sítem No. 4 mesh U.S. (průměr ok 4750 mikrometrů). Takto získané granule se suší při teplotě 50 až 60 °C a vedou sítem No. 16 mesh U.S. (průměr ok 1180 mikrometrů). Natriumkarboxymethylovaný škrob, stearát hořečnatý a mastek se vedou sítem No. 30 mesh U.S. (průměr ok 600 mikrometrů), přidají se do granulí, promísí se a směs se lisuje na tablety vždy o hmotnosti 150 mg.

Příklad farmaceutického prostředku 5

Kapsle, obsahující vždy 20 mg účinné látky, se připravují z následujících složek:

Množství (mg/kapsle) 4-/di-n-propylamino/-6-/3-methylbutanoyl/-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol 20 škrob 169 stearát hořečnatý 1 celkem 190

Účinná látka, škrob a stearát hořečnatý se smísí, vedou se sítem No. 20 mesh U.S. (průměr ok 850 mikrometrů) a plní se do tvrdých želatinových kapslí v množství vždy 190 mg.

Příklad farmaceutického prostředku 6

Čípky, obsahující vždy 225 mg účinné látky, se připravují z následujících složek:

4-/di-n-propylamino/-6-benzoyl-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol glyceridy nasycených mastných kyselin do

Množství (mg)

225

2000

Účinná látka se vede sítem No. 60 mesh U.S. (průměr ok 250 mikrometrů) a suspenduje se v glyceridech nasycených mastných kyselin, předem roztavených za použití minimálně nutného tepla.

-44CZ 280605 B6

Směs se lije do formy na čípky o nominální kapacitě 2,0 g a nechá se ochladit.

Příklad farmaceutického prostředku 7

Suspenze, obsahující vždy 50 mg účinné látky v 5,0 ml, se připravuje z následujících složek:

l-methyl-4-/n-propylamino/-6-/3-methylbutanoyl/-

-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol	50,00 mg
xanthanová klovatina	4,00 mg
natriumkarboxymethylcelulóza /11 %/
mikrokrystalické celulóza /89 %/	50,00 mg
sacharóza	1,75 g
natriumbenzoát	10,00 mg
chuťová přísada	q.v.
barvivo	q.v.
čištěná voda do	5,0 ml

Účinná látka, sacharóza a xanthanová klovatina se smísí a vedou se sítem No. 10 mesh U.S. (průměr ok 2000 mikrometrů) a smísí se s předem připraveným roztokem mikrokrystalické celulózy a natriumkarboxymethylcelulózy ve vodě. Za míchání se přidá natriumbenzoát, chuťová přísada a barvivo, zředěné trochou vody. Pak se přidá dostatečné množství vody k dosažení požadovaného objemu.

Farmaceutický prostředek 8

Kapsle, obsahující vždy 150 mg účinné z následujících složek:	látky, se připravuje
4-/di-n-propylamino/-6-/2-methoxyethynoyl/-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol škrob stearát hořečnatý	50,00 mg 507 mg 3 mg

celkem

560 mg

Účinná látka, celulóza, škrob a stearát hořečnatý se smísí, vedou se sítem No. 20 mesh U.S. (průměr ok 850 mikrometrů) a plní se do tvrdých želatinových kapslí v množství vždy 560 mg.

Průmyslová využitelnost

V poloze 6 substituovaný tetrahydrobenz[cd]indol je vhodný pro ošetřování chorobných stavů, které lze příznivě ovlivnit modifikací 5HT A receptorové funkce.

Claims (13)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. V poloze 6 vzorce I substituovaný tetrahydrobenz[cd]indol obecného (I) kde znamená

   R¹ alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, cyklopropylmethylovou skupinu, nebo fenylovou skupinu substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

   R alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo cyklopropylmethylovou skupinu,

   R atom vodíku nebo blokující skupina, kterou je skupina tritylová nebo triisopropylsilylová nebo benzoylová,

   A skupinu C=O,

   R alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, trifluormethylovou skupinu, fenylovou skupinu popřípadě substituovanou alkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.
2. 2. V poloze 6 substituovaný tetrahydrobenz[cd]indol podle nároku

   1 obecného vzorce I, kde znamená

   Ί 2

   R a R na sobě nezávisle alkylovou skupinu s 1 az 4 atomy uhlíku nebo cyklopropylmethylovou skupinu,

   R³ atom vodíku a ostatní symboly mají v nároku 1 uvedený význam, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.
3. 3. V poloze 6 substituovaný tetrahydrobenz[cd]indol podle nároku

   2 obecného vzorce I, kde znamená

   R alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, trifluormethylovou skupinu nebo fenylovou skupinu a ostatní symboly mají v nároku 2 uvedený význam, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.
4. 4. V poloze 6 substituovaný tetrahydrobenz[cd]indol podle nároku

   2 obecného vzorce I, kde znamená

   R^{4 * * 7} alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylovou skupinu nebo fenylovou skupinu a

   -46CZ 280605 B6 ostatní symboly mají v nároku 2 uvedený význam, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.
5. 5. V poloze 6 susbtituovaný tetrahydrobenz[cd]indol podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená

   R¹ a R² na sobě nezávisle alkylovou skupinu s 2 až 3 atomy uhlíku,

   R³ atom vodíku a

   R⁷ alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku a A má v nároku 1 uvedený význam, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.
6. 6. V poloze 6 substituovaný tetrahydrobenz[cd]indol podle nároku 1 obecného vzorce I, volený ze souboru, zahrnujícího

   4-(di-n-propylamino)-6-acetyl-l,3,4,5-tertahydrobenz[cd]indol, 4-(di-n-propylamino)-6-(2,2-dimethylpropanoyl)-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol,

   4-(di-n-propylamino)-6-benzoyl-l,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol, 4-(di-n-propylamino)-6-(2,2,2-trifluoracetyl)-1,3,4,5-tetrahydrobenz[cd]indol a jejich farmaceuticky vhodné soli.
7. 7. Stereoisomer v poloze 6 substituovaného tetrahydrobenz[cd]indolu podle nároků 1 až 6, obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 až 5 uvedený význam, a jejich farmaceuticky vhodné soli.
8. 8. Stereoisomer v poloze 6 substituovaného tetrahydrobenz[cd]indolu podle nároku 7 obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 7 uvedený význam s konfigurací S v poloze 4, a jeho farmaceuticky vhodné soli.
9. 9. Stereoisomer v poloze 6 substituovaného tetrahydrobenz[cd]indolu podle nároku 7 obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 7 uvedený význam s konfigurací R v poloze 4, a jeho farmaceuticky vhodné soli.
10. 10. Způsob přípravy v poloze 6 substituovaného tetrahydrobenz[cd]- _x o indolu podle nároků 1 až 9, obecného vzorce I, kde znamena R atom vodíku, vyznačující se tím, že se odstraňuje blokující skupina ze sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená R³ skupinu, blokující aminoskupinu, uvedenou v nároku 1.
11. 11. Způsob přípravy v poloze 6 substituovaného tetrahydrobenz[cd]indolu podle nároků 1 až 9, obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají význam, uvedený v nároku 1 až 5, vyznačující se tím, že se oxiduje sloučenina obecného kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 až 5 uvedený význam.
12. 12. Farmaceutický prostředek k ošetřování stavů, vyžadujících regulaci serotoninové funkce v těle, vyznačující se tím, že jako účinnou látku obsahuje v poloze 6 substituovaný tetrahydrobenz[cd]indol podle nároků 1 až 9, obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 až 5 uvedený význam, nebo jeho farmaceuticky vhodné soli spolu s jedním nebo s několika farmaceuticky vhodnými excipienty.
13. 13. Použití v poloze 6 substituovaného tetrahydrobenz[cd]indolu podle nároků 1 až 9 pro přípravu farmaceutického prostředku podle nároku 12.