CZ278186B6 - Process and apparatus for testing micro-organisms forming low-molecular volatile products - Google Patents

Process and apparatus for testing micro-organisms forming low-molecular volatile products Download PDF

Info

Publication number
CZ278186B6
CZ278186B6 CS913197A CS319791A CZ278186B6 CZ 278186 B6 CZ278186 B6 CZ 278186B6 CS 913197 A CS913197 A CS 913197A CS 319791 A CS319791 A CS 319791A CZ 278186 B6 CZ278186 B6 CZ 278186B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
filter
microorganisms
molecular weight
low molecular
product
Prior art date
Application number
CS913197A
Other languages
English (en)
Inventor
Hans Dr Kulla
Original Assignee
Lonza A G Gamful Vallis
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lonza A G Gamful Vallis filed Critical Lonza A G Gamful Vallis
Publication of CS319791A3 publication Critical patent/CS319791A3/cs
Publication of CZ278186B6 publication Critical patent/CZ278186B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • C12Q1/16—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor using radioactive material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
    • C12M41/36—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of biomass, e.g. colony counters or by turbidity measurements
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/807—Gas detection apparatus

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Description

Zařízení a způsob testování mikroorganismů tvořících nízkomolekulární těkavé produkty.
Oblast techniky
Vynález se týká nového zařízení a. nového způsobu testování (screening) pro průkaz mikroorganismů, které při mikrobiologickém procesu tvoří z radioaktivně značeného substrátu radioaktivně značený nízkomolekulární těkavý produkt látkové přeměny. Prokazují se mikroorganismy, které přeměňují radioaktivně značený substrát na žádoucí produkt, přičemž vzniká radioaktivně značený nízkomolekulární těkavý produkt látkové přeměny.
Dosavadní stav techniky
Obecně je známo, že lze produkty látkové přeměny vzniklé při mikrobiologickém, popřípadě biochemickém procesu prokázat tak, že se k buněčné suspenzi přidá radioaktivně značená sloučenina. Vše se po určitou dobu inkubuje a pak se po oddělení buněk určí vzniklý radioaktivně značený produkt látkové přeměny například pomocí scintilačního měření kapaliny (Firmin, J. L. a Gray D. 0., Biochem, J. , 1976, 158, str. 223 - 229).
Velkou nevýhodou této obecně užívané průkazní metody je její pracnost a časová náročnost. Nadto se tato metoda nehodí pro selekci mikroorganismů s určitými výkony látkové přeměny, protože jsou prokázány všechny vytvořené radioaktivně značené produkty látkové přeměny nezávisle na molekulové hmotnosti.
Dále je známá průkazní metoda pro mikroorganismy ve vzorcích určených k lékařským testům podle evropské patentové přihlášky 124 285. Nedostatek této metody rovněž spočívá v tom, že jsou všechny radioaktivně značené produkty látkové přeměny stanoveny nespecificky vzhledem k molekulové hmotnosti. Tím ani tato metoda neposkytuje způsob testování (screening) mikroorganismů s určitými produkty látkové přeměny.
Podstata vynálezu
Úlohou předloženého vynálezu je vyvinout citlivý způsob testování mikroorganismů, kterým lze kvantitativně stanovit všechny mikroorganismy, které tvoří z určitého substrátu těkavé nízkomolekulární produkty látkové přeměny.
Tato úloha je vyřešena novým zařízením a novým způsobem testování. Na obr. 1 je znázorněno zařízení podle vynálezu. Při způsobu testování se prokazují ty mikroorganismy, které při mikrobiologickém procesu tvoří produkty látkové přeměny. Průkaz se uskuteční tak, že mikroorganismus přemění radioaktivně značený substrát na radioaktivně značený produkt látkové přeměny. Radioaktivně značený produkt látkové přeměny se pak určí stanovením radioaktivity.
Jako radioaktivně značený produkt látkové přeměny se prokazuje těkavý nízkomolekulární produkt látkové přeměny. Jako nízkomolekulární produkty látkové přeměny se označují produkty látkové přeměny o molekulové hmotnosti nepřesahující hodnotu 500. Výhodně nepřesahuje molekulová hmotnost produktů látkové přeměny hodnotu 250.
Jako substráty se používají radioaktivně značené substráty, které jsou značené například isotopy 14C, 3H, 35S a 32P nebo jinými biorelevantními isotopy. Výhodně jsou substráty značeny isotopy 3H a 14C. Specifická radioaktivita radioaktivně značených substrátů leží obvykle v rozmezí mezi 3,7 . 107 až 7,4 . 1011 Bq/mmolr
Substráty jsou účelně radioaktivně značeny tak, že jako těkavý nízkomolekulární produkt látkové přeměny vzniká bud 3H-značený nebo 14C- značený produkt látkové přeměny. Jako příklad je 3H-značená voda, 14C-značené produkty jako jsou například kysličník uhličitý, ethanol, kyselina mléčná, kyselina octová, kyselina mravenčí, aceton, butanol, butandiol, acetoin nebo jiné produkty látkové přeměny. Hlavně se používají 3H-značené substráty, při kterých vzniká 3H-značená voda a 14C-značené substráty, při kterých vzniká 14CO2.
Radioaktivně značené těkavé sloučeniny látkové přeměny lze prokázat v oboru běžně používanými metodami, jako je například autoradiografie nebo měření scintilace kapaliny. Výhodně se určuje produkt látkové přeměny autoradiografií.
Nedostatky známých způsobů a zařízení do značné míry odstraňuje způsob testování a zařízení podle vynálezu znázorněné na obr. 1. Podstata zařízení pro průkaz mikroorganismů, které vytvářejí při mikrobiologickém procesu produkty látkové přeměny, spočívá v tom, že je tvořeno membránovým filtrem 1, nesoucím rostoucí mikroorganismy 2, na kterém je nanesen semipermeabilní filtr 3 permeabilní pro těkavý produkt látkové přeměny a adsorpční deska 4.
Účelně se kolonie rostoucích mikroorganismů 2 pěstují na membránovém filtru 1, který je umístěn na standardním agarovém mediu, jako například na vrstvené agarové desce(Plate-Count-Agarfirmy Difco Laboratories, USA).
Když kolonie mikroorganismů dosáhnou průměru 0,1 až 5 mm, výhodně 0,5 až 2 mm, převrství se inkubačním roztokem, který obsahuje radioaktivně značený substrát. Ke snížení konvekce v inkubačním roztoku na minimum, se přidá činidlo zvyšující viskozitu, jako je agar. Výhodně se jako'membránový filtr 1 použije hydrofilní sterilní filtr s velikostí pórů 0,01 až 2 μπι. Jako sterilní filtry se například používají nitrát celulózy, acetát celulózy, regenerovaná celulóza, nylon nebo jiné standardně používané sterilní filtry.
Při průkazu 3H2O je účelné před inkubací porostlý membránový filtr 1 zvednout ze ztuhlého živného média a přenést ho, aby se zamezilo nadměrnému zředění 3H2O. Po převrstvení mikroorganismů inkubačním roztokem se umístí hydrofobní nebo hydrofobizovaný semipermeabilní filtr 3. s velikostí pórů účelně od 0,02 až 2 μιη, výhodně 0,02 až 0,2 μιη který je permeabilní pro produkt látkové přeměny.' Výhodně se jako materiál pro semipermeabilní filtr 2 používá buď GoretexR (polytetrafluorethylen PŤFE s velikostí pórů od 0,2 až 0,02 μιη na polyesterové podpůrné tkanině), nebo hydrofobizovaný filtr ze skelných vláken, zejména silanovaný filtr ze skelných vláken, nebo silikonová membrána o tloušťce vrstvy 0,1 až 1 mm. Lze také přiložit semipermeabilní vrstvu tvořenou hydrofóbními práškovými materiály, jako je například Aerosil R972 (firmy Degussa, Německo).
K zamezení smíchání kolonií se účelně vkládá mezi membránový filtr 1 a semipermeabilní filtr 3 podpůrná tkanina 5. Jako podpůrná tkanina se používá například bavlněná tkanina nebo síťovina, jako gáza. Může však být umístěn další membránový filtr. Na semipermeabilní filtr 3 se pak umístí adsorpční deska 4. Pro průkaz 3H2O se s výhodou jako adsorpční deska používá skleněná deska opatřená vrstvou molekulárního síta nebo křemičitého gelu. Pro průkaz 14CO2 se s výhodou používá skleněná deska opatřená vrstvou vápna. Zejména se opatří skleněná deska vrstvou molekulárního síta o velikosti pórů 0,3 až 0,4 nm nebo vrstvou křemičitého gelu, přičemž je tloušťka vrstvy mezi 0,1 a 5 mm. Vhodné jsou rovněž i j iné adsorbenty j ako materiály pro adsorpční desku, j ako j e například sádra nebo kysličník hlinitý.
Ke zpevnění adsorpční desky je vhodné použít pojivo, jako je například derivát celulózy, škrob, cement, vodní sklo, skelná vlákna nebo jiná pojivá běžná pro přípravu desek pro chromatografii na tenké vrstvě.
Potom se celé zařízení inkubuje 1 až 12 hodin v závislosti na materiálu semipermeabilního filtru 3. při vhodné teplotě od 5 do 110 °C, přičemž lze použít v oboru běžná inkubační media. Přiložením závaží se toto zařízení stlačí například na 5 mm. Délka zařízení může být například 5 cm.
Jestliže se použije silikonové membrány jako semipermeabilní filtr 3, zařízení se inkubuje výhodně 3 hodiny. Jestliže se použije Goretex nebo hydrofobizovaný filtr ze skelných vláken, zařízení se inkubuje výhodné až 1 hodinu. Obvykle je inkubační teplota závislá na teplotních vlastnostech mikroorganismů. Jestliže se například prokazují mesofilní mikroorganismy, je inkubační teplota s výhodou mezi 30 a 37 °C.
Během inkubace přeměňují mikroorganismy radioaktivně značený substrát na žádaný produkt, přičemž se tvoří radioaktivně značený nízkomolekulární těkavý produkt látkové přeměny. Tento těkavý produkt látkové přeměny difunduje semipermeabilním filtrem 3. a adsorbuje se na adsorpční desce 4.
Po inkubaci se adsorpční deska sejme a zpracuje se pro průkaz těkavého produktu látkové přeměny v oboru běžně používanými scintilátory, jako je napříkld Enhance R (firma DuPont, USA). Mohou se použít i jiné scintilační roztoky nebo ty, které jsou popsány B. R. Bochnerem a Β. N. Arnesem v Anal. Biochem. 131, str. 510 - 515 (1984).
Způsob podle vynálezu představuje citlivou metodu pro průkaz mikroorganismů, které přeměňují radioaktivně značený substrát v požadovaný produkt, přičemž vzniká radioaktivně značený nízkomolekulární těkavý produkt látkové přeměny. Tyto mikroorganismy pak mohou být na základě této průkazní metody lépe rozděleny. Na rozdíl od známých postupů pracuje tento postup také s koloniemi mikroorganismů, které rostou na povrchu ztužených živných medií. Kapacita se tím značně zvýší.
Zařízení se používá pro průkaz mikroorganismů, které tvoří nizkomolekulární produkty látkové přeměny. Zejména se zařízení používá pro průkaz těch mikroorganismů, které jsou schopny přeměňovat ve sloučeninách methylové skupiny na odpovídající alkohol, aldehyd nebo na odpovídající karboxylovou kyselinu. Například se zařízení používá pro průkaz mikroorganismů, které jsou schopny oxidovat methylové skupiny 5-methyl-2-chlorpyridinu na odpovídající kyselinu. Radioaktivně značená 3H2O při tom vzniklá se prokazuje na adsorpční desce.
Příklady provedení
Příklad 1
Alcaligenes entrophus (DSM 428, Německá sbírka mikroorganismů a buněčných kultur) a Pseudomonas aeruqinosa (DSM 50071) se pěstují odděleně v živném prostředí (Nutrient-Broth firmy Oxoid, USA) při 30 °C přes noc na třepačce. Pak se 1 díl kultury Pseudomonas smíchá s 999 díly kultury Alcaligenes. 0,1 ml této směsi ve zředění 10~4 se rozprostře na filtr 1, z nitrátu celulózy uloženém na vrstvené agarové desce (Plate-Count-Agar PCA firmy Difco, USA). Filtr 1 z nitrátu celulózy má velikost pórů 0,2 μπι a průměr 5 cm (firma Sartorius, Německo). Buňky dorůstají přes noc asi na 1 000 kolonií o průměru od 0,5 až 1 mm. Filtr nesoucí kolonie se oddělí od media agarové desky (PCA medium firmy Difco, USA) a umístí se do Petriho misky koloniemi navrch. Filtr 1 s koloniemi se provlhčí 0,18. ml radioaktivního roztoku o následujícím složení :
g/1 agar (roztavený) ,5 g/1 trypton (firma Difco, USA)
2,5 g/1 extrakt kvasnic (firma Difco, USA) mM D-[6-3H(N)]-glukóza 3,7.109 Bq/mmol (firma NEN/DuPont, USA).
Okamžitě se na kolonii přiloží druhý filtr z nitrátu celulózy, zvlhčený přiložením na vrstvenou agarovou desku (Plate-CountAgar). Na to se okamžitě přiloží hydrofobní filtr 3. Tento hydrofobní filtr je filtr TE35 (polytetrafluorethylen PTFE na póly esterech, firma Schleicher a Schuell, Německo) o velikosti pórů 0,2 μιη a průměru 8 cm. Okamžitě se přiloží adsorpční deska 4 s adsorpční vrstvou specifickou pro vodu, která se připraví následovně:
g práškového molekulárního síta 0,4 nm (velikost zrn 2 až 3 μιη) (firma Aldrich, Německo) se promyje v 7 ml vody a přidá se 0,1 g skelných vláken. Skelná vlákna se připraví rozetřením GF/D-filtru (GF/D: skelný filtr druhu D firmy Whatman, USA). Směs se zbaví plynu ve vakuu. Kašovitá hmota se nalije na zdrsněnou skleněnou desku o velikosti 6 x 6 cm, a suší se 1 hodinu při 70 ’C a pak 4 hodiny při 150 eC se aktivuje ve vysokém vakuu. Výsledná tloušťka vrstvy je přibližně 2 mm. Desky se uchovávají nad oxidem fosforečným.
Celé zařízení se stlačí na přibližně 5 mm nasazením závaží o hmotnosti 450 g. Potom se zařízení inkubuje 1 hodinu při 30 °C Potom se sejme deska s molekulárním sítem a okamžitě postříká s EnhanceR (firma Dupont, USA). V návaznosti na to se pořídí autoradiografie podle předpisu (R. A. Laskey, Detekce radioizotopů při fluorografii a zvýšení intenzity testování; firma Amersham, Velká Británie, Review 23, 1984) s dobou expozice 2 dny. Jednotlivě se vyskytující kolonie Pseudomonas se zobrazují jako černé skvrny o průměru 5 mm, přičemž převažující pozadí kolonií Alcaligenes není viditelné. Pseudomonas spotřebuje tritiovanou glukózu a produkuje 3H2O, přičemž Alcaligenes neumí použít glukózu pro látkovou přeměnu.
Příklad 2
Postupuje se shodně s příkladem 1 s následujícími modifikacemi. Radioaktivní inkubační medium: místo 3H-glukózy se použije D-[14C(U)]-glukóza (firma NEN/DuPont, USA). Hydrofobní filtr 2: skelnovlákenný filtr GF/A (firma Whatman, USA) se pražením při 160 °C vysuší a hydrofobizuje s Repel-silanem (firma LKB, Švédsko). Výsledná velikost pórů je 1,4 μιη a tloušťka vrstvy 0,27 mm.
Pro CC>2 specifická adsorpční deska se připraví takto:
Prodyšné vápenné pecičky (firma Dráger, Švýcarsko) se rozdrtí a smíchají s vodou v těstovitou hmotu, která se nanese na skleněnou desku 6 x 6 cm ve vrstvě přibližně 2 mm. Pak se vše suší několik dní nad pecičkami hydroxidu sodného v exikátoru. Jinak se postupuje shodně jako v příkladu 1. Kolonie Pseudomonas spotřebovávající glukózu vytvářejí 14CO2 a zobrazují se jako černé skvrny o průměru 5 mm. Kolonie Alcaligenes, které jsou inaktivní vůči glukóze, zůstáváj í neviditelné.
Příklad 3
Postupuje se shodně s příkladem 1 s následujícími modifikacemi. Jako agarové medium se nepoužije vrstvená agarová deska (Plate-Count-Agar), ale použije se bezuhlíkaté minerální medium (H. Kulla a spol.; Arch. Microbiol. 135, str. 1-7, 1983).
Přiložený—membránový filtr 1 z regenerované celulózy (firma Sartorius, Německo) se přímo naočkuje rozmístěním biomasy z aerobního stupně čističky. Jako zdroj uhlíku a energie slouží xylen, který byl v exikátoru nad plynnou fází. Po týdnu jsou viditelné kolonie o průměru od 1 do 2 mm.
Radioaktivní inkubační roztok:
Výše uvedené minerální medium s 0,5 % agaru (roztaveného) mM 2-chlor-5-(methyl-3 * *H)-pyridinu. 3,7 . 1011 Bq/mmol.
Hydrofobní filtr 3.: silikonová membrána o tloušťce 0,17 mm se připraví ze Svlgardu 186 (firma Dow Corning, USA). Mezi kolonie a silikonovou membránu se vloží jako podpůrná tkanina 5 vrstva běžné lékařské gázy. Doba inkubace: 3 hodiny.
Adsorpční deska 4 specifická pro vodu: hotová PSC - deska křemičitého gelu 60 bez indikátoru fluorescence o tloušťce 2 mm (firma Měrek, Německo). Dále se postupuje shodně jako v příkladu
1. Kolonie, které mohou oxidovat methylovou skupinu v 2-chlor-5-methylpyridinu, se zobrazují jako černé skvrny a lze je izolovat z celulózového filtru tradičními mikrobiologickými metodami.
Průmyslová využitelnost
Způsob podle vynálezu představuje citlivou metodu pro průkaz mikroorganismů, které přeměňují radioaktivně značený substrát v požadovaný produkt, a které na základě této průkazní metody mohou být lépe rozděleny. Na rozdíl od známých postupů pracuje tento postup také s koloniemi mikroorganismů, které rostou na povrchu ztužených živných medií. Celková kapacita se tím značně zvýší.

Claims (11)

1. Zařízení pro průkaz mikroorganismů, které vytvářejí při mikrobiologickém procesu produkty látkové přeměny, vyznačující se tím, že je tvořeno membránovým filtrem (1) nesoucím rostoucí mikroorganismy (2), na kterém je nanesen semipermeabilní filtr (3) permeabilní pro produkt látkové přeměny a adsorpční deska (4) .
2. Zařízení podle nároku 1, vyznačující se tím, že jako membránový filtr (1) je nanesen hydrofilní sterilní filtr o velikosti pórů od 0,01 až 2 μιη.
3. Zařízení podle alespoň jednoho z nároků 1 a 2, vyznačující se tím, že jako semipermeabilní filtr (3) je nanesen hydrofobní nebo hydrof ob i z ováný materiál o velikosti pórů od 0,02 až 2 μπι.
4. Zařízení podle nároku 3, vyznačující se tím, že jako semipermeabilní filtr (3) je nanesen hydrofobní nebo hydrofobizovaný materiál o velikosti pórů od 0,02 až 0,2 μιη.
5. Zařízení podle alespoň jednoho z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že je mezi membránový filtr (1) a semipermeabilní filtr (3) vložena podpůrná tkanina (5).
6. Zařízení podle alespoň jednoho z nároků 1 až 5, vyznačující se tím, že jako materiál pro adsorpční desku (4) je naneseno bud molekulární síto, křemičitý gel, vápno, sádra nebo oxid hlinitý.
7. Použití zařízení podle jednoho z nároků 1 až 6 pro průkaz mikroorganismů, které tvoří nízkomolekulární těkavý produkt látkové přeměny.
8. Použití zařízení podle nároku 7 pro průkaz mikroorganismů, které jsou schopny přeměňovat methylované sloučeniny na odpovídající alkohol, aldehyd nebo na odpovídající karboxylovou kyselinu.
9. Způsob testování pro průkaz mikroorganismů, vyznačující se tím, že se zařízením podle jednoho z nároků 1 až 6 prokazují mikroorganismy, které tvoří při mikrobiologickém procesu nízkomolekulární těkavé produkty látkové přeměny, přičemž se průkaz uskutečňuje tak, že se radioaktivně značený substrát přeměňuje pomocí mikroorganismu na radioaktivně značený nízkomolekulární těkavý produkt látkové přeměny a pak se určí radioaktivně značený nízkomolekulární těkavý produkt látkové přeměny.
10. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že se jako produkt látkové přeměny prokazuje bud izotopem vodíku 3H nebo izotopem uhlíku 14C značený produkt látkové přeměny.
11. Způsob podle jednoho z nároků 9 a 10, vyznačující se tím, že se produkt látkové přeměny určí pomocí autoradiografie. 1
CS913197A 1990-10-23 1991-10-22 Process and apparatus for testing micro-organisms forming low-molecular volatile products CZ278186B6 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH339190 1990-10-23

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS319791A3 CS319791A3 (en) 1992-05-13
CZ278186B6 true CZ278186B6 (en) 1993-09-15

Family

ID=4254968

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS913197A CZ278186B6 (en) 1990-10-23 1991-10-22 Process and apparatus for testing micro-organisms forming low-molecular volatile products

Country Status (6)

Country Link
US (2) US5348861A (cs)
EP (1) EP0482619B1 (cs)
JP (1) JPH053796A (cs)
AT (1) ATE123312T1 (cs)
CZ (1) CZ278186B6 (cs)
DE (1) DE59105619D1 (cs)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6306347B1 (en) * 1998-01-21 2001-10-23 Bayer Corporation Optical sensor and method of operation
US6455007B1 (en) * 2000-06-13 2002-09-24 Symyx Technologies, Inc. Apparatus and method for testing compositions in contact with a porous medium
CA2706436A1 (en) 2007-11-20 2009-09-03 3M Innovative Properties Company Environmental sampling articles and methods
CN101952457B (zh) 2007-12-21 2013-08-21 3M创新有限公司 流体样品分析的微生物***和方法
US8518663B2 (en) 2009-04-27 2013-08-27 The Charles Stark Draper Laboratory, Inc. Rapid detection of volatile organic compounds for identification of Mycobacterium tuberculosis in a sample
DE102009037345A1 (de) * 2009-06-16 2010-12-23 Sartorius Stedim Biotech Gmbh Behälter mit einem Sensoradapter
WO2011082305A1 (en) 2009-12-30 2011-07-07 3M Innovative Properties Company Microbial detection article
WO2012012172A2 (en) 2010-06-30 2012-01-26 3M Innovative Properties Company Filter plate article having a water-absorbent filter assembly
US8906645B2 (en) 2010-12-29 2014-12-09 3M Innovative Properties Company Microbial detection article having a water-absorbent filter assembly
DE102014116050B3 (de) * 2014-11-04 2016-02-25 Universität Potsdam Vorrichtung und Verfahren zur Identifizierung von Mikroorganismen

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2308087A1 (de) * 1973-02-19 1974-08-22 Kellner Maximilian Dipl Braur Fermentationsverfahren
DE2932694C2 (de) * 1979-08-11 1982-11-04 Eberhard Dr. 4930 Detmold Breuker Vorrichtung zum Erkennen von Mikroorganismen
EP0138938A1 (en) * 1983-03-31 1985-05-02 Robert Edward Silman Method and device for detecting microorganisms

Also Published As

Publication number Publication date
ATE123312T1 (de) 1995-06-15
US5348884A (en) 1994-09-20
CS319791A3 (en) 1992-05-13
EP0482619A1 (de) 1992-04-29
US5348861A (en) 1994-09-20
DE59105619D1 (de) 1995-07-06
JPH053796A (ja) 1993-01-14
EP0482619B1 (de) 1995-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ278186B6 (en) Process and apparatus for testing micro-organisms forming low-molecular volatile products
EP0097904B1 (en) Method and device for rapid diagnosis of dental caries
Zinder et al. Non-aceticlastic methanogenesis from acetate: acetate oxidation by a thermophilic syntrophic coculture
Goodwin et al. Physiological adaptations of anaerobic bacteria to low pH: metabolic control of proton motive force in Sarcina ventriculi
Franzblau Oxidation of palmitic acid by Mycobacterium leprae in an axenic medium
JPS62171686A (ja) 生物集団複合体の製造方法
CA2186728A1 (en) A rapid microbiological test for the detection of antibacterial compounds
US9260739B2 (en) Method for the detection of acid production by cariogenic bacteria
EP2837690A2 (en) Method for simultaneous detection, recovery, identification and counting of microorganisms and devices for the implementation of said method
US5854013A (en) Method of determining the presence or absence of a nonparaffinophilic microorganism in a specimen
Riedel et al. Microbial sensors for determination of aromatics and their chloro derivatives. Part III: Determination of chlorinated phenols using a biosensor containing Trichosporon beigelii (cutaneum)
Bellion et al. The biosynthesis of the thiazole moiety of thiamine in Salmonella typhimurium
CN101477105A (zh) 高盐工业废水bod的快速测定方法
Uffen Growth properties of Rhodospirillum rubrum mutants and fermentation of pyruvate in anaerobic, dark conditions
YAMANAKA et al. Isolation and identification of myxobacteria from soils and plant materials, with special reference to DNA base composition, quinone system, and cellular fatty acid composition, and with a description of a new species, Myxococcus flavescens
Ney et al. Quantitative microbiological analysis of bacterial community shifts in a high-rate anaerobic bioreactor treating sulfite evaporator condensate
EP0124285A2 (en) Method and device for detecting microorganisms
Fujimura et al. Growth of yeast cells immobilized with porous swelling carriers produced by radiation polymerization
EP0374905A1 (en) Culture medium device and method of preparing the same
Lopreside et al. Live cell immobilization
Shah et al. Modified rapid radiometric method for detection of Mycobacterium tuberculosis from sputum samples
Salerno et al. Sterol uptake in the yeast, Saccharomyces cerevisiae
Wollersheim et al. Enrichment of acetate-, propionate-, and butyrate-degrading co-cultures from the biofilm of an anaerobic fluidized bed reactor
Liu et al. Bacteria-based sensor for monitoring glycerol
US5721112A (en) Method of determining the presence or absence of a nonparaffinophilic microoganism in a specimen and an associated apparatus