CZ2007571A3 - Prirozené brassinosteroidy pro použití pri léceníhyperproliferace, lécení proliferativních onemocnení a redukci nepríznivých úcinku steroidních disfunkcí u savcu, farmaceutické prostredky je obsahující a jejich použití - Google Patents
Prirozené brassinosteroidy pro použití pri léceníhyperproliferace, lécení proliferativních onemocnení a redukci nepríznivých úcinku steroidních disfunkcí u savcu, farmaceutické prostredky je obsahující a jejich použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2007571A3 CZ2007571A3 CZ20070571A CZ2007571A CZ2007571A3 CZ 2007571 A3 CZ2007571 A3 CZ 2007571A3 CZ 20070571 A CZ20070571 A CZ 20070571A CZ 2007571 A CZ2007571 A CZ 2007571A CZ 2007571 A3 CZ2007571 A3 CZ 2007571A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- cells
- brassinosteroids
- natural
- pharmaceutically acceptable
- effective amount
- Prior art date
Links
- 150000001647 brassinosteroids Chemical class 0.000 title claims abstract description 103
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 title claims description 14
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title claims description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title claims description 9
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 title claims description 6
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 title claims description 6
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 title claims description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 44
- IXVMHGVQKLDRKH-VRESXRICSA-N Brassinolide Natural products O=C1OC[C@@H]2[C@@H]3[C@@](C)([C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)C)C)CC3)CC[C@@H]2[C@]2(C)[C@@H]1C[C@H](O)[C@H](O)C2 IXVMHGVQKLDRKH-VRESXRICSA-N 0.000 claims abstract description 39
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- IXVMHGVQKLDRKH-YEJCTVDLSA-N (22s,23s)-epibrassinolide Chemical compound C1OC(=O)[C@H]2C[C@H](O)[C@H](O)C[C@]2(C)[C@H]2CC[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)C(C)C)CC[C@H]3[C@@H]21 IXVMHGVQKLDRKH-YEJCTVDLSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 230000002411 adverse Effects 0.000 claims abstract description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 192
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 41
- -1 3-oxoteasterone Chemical compound 0.000 claims description 19
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 19
- IXVMHGVQKLDRKH-KNBKMWSGSA-N brassinolide Chemical compound C1OC(=O)[C@H]2C[C@H](O)[C@H](O)C[C@]2(C)[C@H]2CC[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]3[C@@H]21 IXVMHGVQKLDRKH-KNBKMWSGSA-N 0.000 claims description 19
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 19
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims description 14
- WADMTJKRYLAHQV-NKOPCKDMSA-N (2r,3s,5s,8s,9s,10r,13s,14s,17r)-17-[(2s,3r,4r,5s)-5-ethyl-3,4-dihydroxy-6-methylheptan-2-yl]-2,3-dihydroxy-10,13-dimethyl-1,2,3,4,5,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydrocyclopenta[a]phenanthren-6-one Chemical compound C([C@@H]1C(=O)C2)[C@H](O)[C@H](O)C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)CC)[C@@]2(C)CC1 WADMTJKRYLAHQV-NKOPCKDMSA-N 0.000 claims description 13
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 10
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 10
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 10
- IXVMHGVQKLDRKH-QHBHMFGVSA-N 24-Epibrassinolide Natural products C1OC(=O)[C@H]2C[C@H](O)[C@H](O)C[C@]2(C)[C@H]2CC[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C)C(C)C)CC[C@H]3[C@@H]21 IXVMHGVQKLDRKH-QHBHMFGVSA-N 0.000 claims description 9
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 9
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 claims description 8
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 8
- WADMTJKRYLAHQV-XCVJPFFQSA-N 28-Homocastasterone Natural products O=C1[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)C1)C[C@@H](O)[C@@H](O)C2 WADMTJKRYLAHQV-XCVJPFFQSA-N 0.000 claims description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 7
- SBSXXCCMIWEPEE-DWMMZRLUSA-N typhasterol Natural products O=C1[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)C1)CC[C@@H](O)C2 SBSXXCCMIWEPEE-DWMMZRLUSA-N 0.000 claims description 7
- VYUIKSFYFRVQLF-RDIRXGJISA-N 3-Epicastasterone Natural products O=C1[C@@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)C1)C[C@@H](O)[C@H](O)C2 VYUIKSFYFRVQLF-RDIRXGJISA-N 0.000 claims description 6
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- VYUIKSFYFRVQLF-LCILBPPUSA-N Castasterone Natural products O=C1[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)C1)C[C@@H](O)[C@@H](O)C2 VYUIKSFYFRVQLF-LCILBPPUSA-N 0.000 claims description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 5
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 5
- VYUIKSFYFRVQLF-YLNAYWRASA-N castasterone Chemical compound C([C@@H]1C(=O)C2)[C@H](O)[C@H](O)C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 VYUIKSFYFRVQLF-YLNAYWRASA-N 0.000 claims description 5
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 5
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 5
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 claims description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 5
- HAOQPQZVDMAOKT-UHFFFAOYSA-N (2alpha,3alpha,5alpha,22R,23R)-2,3,22,23-Tetrahydroxy-25-methylergost-24(28)en-6-one Chemical compound C1C(=O)C2CC(O)C(O)CC2(C)C2C1C1CCC(C(C(O)C(O)C(=C)C(C)(C)C)C)C1(C)CC2 HAOQPQZVDMAOKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- CYPKCRFYMBXYBU-HXOLDDPBSA-N Dolichosterone Chemical compound C[C@@H]([C@H]1CCC2C1(CCC3C2CC(=O)C4C3(C[C@H]([C@H](C4)O)O)C)C)[C@H]([C@@H](C(=C)C(C)C)O)O CYPKCRFYMBXYBU-HXOLDDPBSA-N 0.000 claims description 4
- IYABWNGZIDDRAK-UHFFFAOYSA-N allene Chemical group C=C=C IYABWNGZIDDRAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 4
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- SBSXXCCMIWEPEE-SELDZKRUSA-N typhasterol Chemical compound C([C@@H]1C(=O)C2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 SBSXXCCMIWEPEE-SELDZKRUSA-N 0.000 claims description 4
- WPHVOXMMNSLJSF-DAWJDVIISA-N 6-deoxotyphasterol Chemical compound C([C@@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 WPHVOXMMNSLJSF-DAWJDVIISA-N 0.000 claims description 3
- WPHVOXMMNSLJSF-PDQCMOIVSA-N 6-deoxotyphasterol Natural products O[C@@H]([C@H](O)[C@@H](C)[C@@H]1[C@@]2(C)[C@@H]([C@H]3[C@H]([C@@]4(C)[C@H](C[C@H](O)CC4)CC3)CC2)CC1)[C@H](C(C)C)C WPHVOXMMNSLJSF-PDQCMOIVSA-N 0.000 claims description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 claims description 3
- SBSXXCCMIWEPEE-UDNJSVTLSA-N Teasterone Natural products O=C1[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)C1)CC[C@H](O)C2 SBSXXCCMIWEPEE-UDNJSVTLSA-N 0.000 claims description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- SBSXXCCMIWEPEE-GZKYLSGOSA-N teasterone Chemical compound C([C@@H]1C(=O)C2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 SBSXXCCMIWEPEE-GZKYLSGOSA-N 0.000 claims description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 3
- WJAMDPDVVOJXLF-AXWGYHJYSA-N (2R,3S,5S,8S,9S,10R,13S,14S,17R)-17-[(2S,3R,4R,5S)-3,4-dihydroxy-5,6,6-trimethylheptan-2-yl]-2,3-dihydroxy-10,13-dimethyl-1,2,3,4,5,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydrocyclopenta[a]phenanthren-6-one Chemical compound C([C@@H]1C(=O)C2)[C@H](O)[C@H](O)C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)C(C)(C)C)C)[C@@]2(C)CC1 WJAMDPDVVOJXLF-AXWGYHJYSA-N 0.000 claims description 2
- WJAMDPDVVOJXLF-AWFMHLACSA-N 25-Methylcastasterone Natural products O=C1[C@@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)(C)C)C)C)CC4)CC3)C1)C[C@@H](O)[C@@H](O)C2 WJAMDPDVVOJXLF-AWFMHLACSA-N 0.000 claims description 2
- HAOQPQZVDMAOKT-YTAKFDLJSA-N 25-Methyldolichosterone Natural products O=C1[C@@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)C(C(C)(C)C)=C)C)CC4)CC3)C1)C[C@@H](O)[C@@H](O)C2 HAOQPQZVDMAOKT-YTAKFDLJSA-N 0.000 claims description 2
- DXUFRIYNOOTWEO-DLVSHCEFSA-N 28-Homodolichosterone Natural products O=C1[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)/C(=C\C)/C(C)C)C)CC4)CC3)C1)C[C@@H](O)[C@@H](O)C2 DXUFRIYNOOTWEO-DLVSHCEFSA-N 0.000 claims description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 claims description 2
- DXUFRIYNOOTWEO-REZTVBANSA-N Homodolichosterone Chemical compound C1C(=O)C2CC(O)C(O)CC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C(O)C(O)C(/C(C)C)=C/C)C1(C)CC2 DXUFRIYNOOTWEO-REZTVBANSA-N 0.000 claims description 2
- DXUFRIYNOOTWEO-UHFFFAOYSA-N Homodolichosterone Natural products C1C(=O)C2CC(O)C(O)CC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C(O)C(O)C(C(C)C)=CC)C1(C)CC2 DXUFRIYNOOTWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 2
- 101150053185 P450 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 230000019552 anatomical structure morphogenesis Effects 0.000 claims description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 claims description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 2
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 claims description 2
- DXUFRIYNOOTWEO-QESCPPJXSA-N homodolichosterone Natural products CC=C(C(C)C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2[C@@H]3CC(=O)[C@H]4C[C@H](O)[C@H](O)C[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C DXUFRIYNOOTWEO-QESCPPJXSA-N 0.000 claims description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims description 2
- SVSARCCKBMZNMR-UHFFFAOYSA-N [1-[2-[methyl-[2-[4-(oxoazaniumylmethylidene)pyridin-1-yl]ethyl]amino]ethyl]pyridin-4-ylidene]methyl-oxoazanium;dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].C1=CC(=C[NH+]=O)C=CN1CCN(C)CCN1C=CC(=C[NH+]=O)C=C1 SVSARCCKBMZNMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- VWEHHIHNZFXYIU-QZDBCIJTSA-N 2-Deoxy-25-Methyldolichosterone Natural products O=C1[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)C(C(C)(C)C)=C)C)CC4)CC3)C1)CC[C@@H](O)C2 VWEHHIHNZFXYIU-QZDBCIJTSA-N 0.000 claims 1
- URNVSZVQLKHKDE-INRNVUQASA-N 3-Dehydro-6-deoxoteasterone Natural products O=C1C[C@H]2[C@](C)([C@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)CC2)CC1 URNVSZVQLKHKDE-INRNVUQASA-N 0.000 claims 1
- URNVSZVQLKHKDE-WAFXAADMSA-N 3-dehydro-6-deoxoteasterone Chemical compound C([C@@H]1CC2)C(=O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 URNVSZVQLKHKDE-WAFXAADMSA-N 0.000 claims 1
- VWEHHIHNZFXYIU-DPQAISHVSA-N 3-epi-2-Deoxy-25-methyldolichosterone Natural products O=C1[C@@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@@H]([C@@H]4[C@@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)C(C(C)(C)C)=C)C)CC4)CC3)C1)CC[C@@H](O)C2 VWEHHIHNZFXYIU-DPQAISHVSA-N 0.000 claims 1
- JSVPGVHCEQDJCZ-PHQFZZKCSA-N Cathasterone Natural products O=C1[C@@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@@H]4[C@](C)([C@H]([C@@H]([C@@H](O)C[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)C1)CC[C@H](O)C2 JSVPGVHCEQDJCZ-PHQFZZKCSA-N 0.000 claims 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims 1
- 208000007466 Male Infertility Diseases 0.000 claims 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 claims 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- JSVPGVHCEQDJCZ-VGEHDTSWSA-N cathasterone Chemical compound C([C@@H]1C(=O)C2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)C[C@@H](C)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 JSVPGVHCEQDJCZ-VGEHDTSWSA-N 0.000 claims 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 claims 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 claims 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 claims 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 claims 1
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 claims 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 claims 1
- 230000009329 sexual behaviour Effects 0.000 claims 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 claims 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 claims 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 abstract description 22
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 abstract description 18
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 abstract description 12
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 abstract description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract description 2
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 42
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 38
- 230000017095 negative regulation of cell growth Effects 0.000 description 28
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 20
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 14
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 14
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 13
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 11
- 229920001223 polyethylene glycol Chemical class 0.000 description 11
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 10
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 10
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002202 Polyethylene glycol Chemical class 0.000 description 9
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 102100029604 Interferon alpha-inducible protein 27, mitochondrial Human genes 0.000 description 8
- 102100040250 Transcription elongation factor A protein-like 1 Human genes 0.000 description 8
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 8
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 8
- 102000003952 Caspase 3 Human genes 0.000 description 7
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 7
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 7
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 7
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 7
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 7
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 7
- HJIKODJJEORHMZ-NNPZUXBVSA-N 28-Homobrassinolide Chemical compound C1OC(=O)[C@H]2C[C@H](O)[C@H](O)C[C@]2(C)[C@H]2CC[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)CC)CC[C@H]3[C@@H]21 HJIKODJJEORHMZ-NNPZUXBVSA-N 0.000 description 6
- WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N BROMODEOXYURIDINE Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 6
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 6
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 102000001307 androgen receptors Human genes 0.000 description 6
- 108010080146 androgen receptors Proteins 0.000 description 6
- 239000002585 base Substances 0.000 description 6
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229950004398 broxuridine Drugs 0.000 description 6
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 6
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 6
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 6
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 6
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 6
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 6
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 5
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 5
- 102000012199 E3 ubiquitin-protein ligase Mdm2 Human genes 0.000 description 5
- 108050002772 E3 ubiquitin-protein ligase Mdm2 Proteins 0.000 description 5
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 5
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 description 5
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 5
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 5
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Substances [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 5
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 5
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 5
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 5
- 102000016736 Cyclin Human genes 0.000 description 4
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 4
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 4
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 4
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 4
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 4
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- VYUIKSFYFRVQLF-QONPFPPSSA-N (2r,3s,5s,8s,9s,10r,13s,14s,17r)-17-[(2s,3r,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5,6-dimethylheptan-2-yl]-2,3-dihydroxy-10,13-dimethyl-1,2,3,4,5,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydrocyclopenta[a]phenanthren-6-one Chemical compound C([C@@H]1C(=O)C2)[C@H](O)[C@H](O)C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 VYUIKSFYFRVQLF-QONPFPPSSA-N 0.000 description 3
- NKDFYOWSKOHCCO-YPVLXUMRSA-N 20-hydroxyecdysone Chemical compound C1[C@@H](O)[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@@](C)(O)[C@H](O)CCC(C)(O)C)CC[C@]33O)C)C3=CC(=O)[C@@H]21 NKDFYOWSKOHCCO-YPVLXUMRSA-N 0.000 description 3
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 3
- 108010008286 DNA nucleotidylexotransferase Proteins 0.000 description 3
- 102100033215 DNA nucleotidylexotransferase Human genes 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 3
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 3
- 102000012338 Poly(ADP-ribose) Polymerases Human genes 0.000 description 3
- 108010061844 Poly(ADP-ribose) Polymerases Proteins 0.000 description 3
- 229920000776 Poly(Adenosine diphosphate-ribose) polymerase Polymers 0.000 description 3
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 3
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 3
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 3
- NKDFYOWSKOHCCO-UHFFFAOYSA-N beta-ecdysone Natural products C1C(O)C(O)CC2(C)C(CCC3(C(C(C)(O)C(O)CCC(C)(O)C)CCC33O)C)C3=CC(=O)C21 NKDFYOWSKOHCCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 229940107161 cholesterol Drugs 0.000 description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 3
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 3
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 3
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 3
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 3
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 description 3
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 description 3
- NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N sitosterol Natural products CC=C(/CCC(C)C1CC2C3=CCC4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1)C(C)C NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 description 3
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 description 3
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 description 3
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OIQOAYVCKAHSEJ-UHFFFAOYSA-N 2-[2,3-bis(2-hydroxyethoxy)propoxy]ethanol;hexadecanoic acid;octadecanoic acid Chemical compound OCCOCC(OCCO)COCCO.CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O OIQOAYVCKAHSEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-1-piperidin-4-ylpyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CC(O)CN1C1CCNCC1 HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XIIAYQZJNBULGD-XWLABEFZSA-N 5α-cholestane Chemical compound C([C@@H]1CC2)CCC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]2(C)CC1 XIIAYQZJNBULGD-XWLABEFZSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000010565 Apoptosis Regulatory Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010063104 Apoptosis Regulatory Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 2
- 241000712891 Arenavirus Species 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 2
- OILXMJHPFNGGTO-NRHJOKMGSA-N Brassicasterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@H]([C@@H](/C=C/[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 OILXMJHPFNGGTO-NRHJOKMGSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 208000031637 Erythroblastic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000036566 Erythroleukaemia Diseases 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 2
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 2
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 2
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N N-Pentanol Chemical compound CCCCCO AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091093105 Nuclear DNA Proteins 0.000 description 2
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004264 Petrolatum Substances 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 description 2
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 108010090931 Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000013535 Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2 Human genes 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 108050002653 Retinoblastoma protein Proteins 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 108010085012 Steroid Receptors Proteins 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OILXMJHPFNGGTO-ZRUUVFCLSA-N UNPD197407 Natural products C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)C=C[C@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-ZRUUVFCLSA-N 0.000 description 2
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000021841 acute erythroid leukemia Diseases 0.000 description 2
- 238000006136 alcoholysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229940046836 anti-estrogen Drugs 0.000 description 2
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940076810 beta sitosterol Drugs 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- OILXMJHPFNGGTO-ZAUYPBDWSA-N brassicasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-ZAUYPBDWSA-N 0.000 description 2
- 235000004420 brassicasterol Nutrition 0.000 description 2
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 2
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 2
- UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N cytokinin Natural products C1=NC=2C(NCC=C(CO)C)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004062 cytokinin Substances 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002009 diols Chemical group 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 2
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 2
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 2
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 2
- 229940066842 petrolatum Drugs 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 102000005969 steroid hormone receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical class [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- SZHOJFHSIKHZHA-UHFFFAOYSA-N tridecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC(O)=O SZHOJFHSIKHZHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940100445 wheat starch Drugs 0.000 description 2
- KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N (-)-beta-Sitosterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N 0.000 description 1
- CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-ethyl-5alpha-cholest-22-en-3beta-ol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DYENWMUXSKPFLC-CRZFLPRVSA-N (3r,5s,8s,9s,10r,13s,14s,17r)-17-[(2s,3r,4r,5s)-5-ethyl-3,4-dihydroxy-6-methylheptan-2-yl]-3-hydroxy-10,13-dimethyl-1,2,3,4,5,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydrocyclopenta[a]phenanthren-6-one Chemical compound C([C@@H]1C(=O)C2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)CC)[C@@]2(C)CC1 DYENWMUXSKPFLC-CRZFLPRVSA-N 0.000 description 1
- DDMOUSALMHHKOS-UHFFFAOYSA-N 1,2-dichloro-1,1,2,2-tetrafluoroethane Chemical compound FC(F)(Cl)C(F)(F)Cl DDMOUSALMHHKOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 description 1
- PWVRXSQPCQPQHM-UHFFFAOYSA-N 2-(4-aminophenyl)-1h-indol-6-amine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(N)C=C2N1 PWVRXSQPCQPQHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLLLJCACIRKBDT-UHFFFAOYSA-N 2-phenyl-1H-indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C=C1C1=CC=CC=C1 KLLLJCACIRKBDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 24xi-n-propylcholesterol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CCC)C(C)C)C1(C)CC2 KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DYENWMUXSKPFLC-GCFMSDFCSA-N 28-Homoteasterone Natural products O=C1[C@@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)C1)CC[C@H](O)C2 DYENWMUXSKPFLC-GCFMSDFCSA-N 0.000 description 1
- DYENWMUXSKPFLC-OYBNYXINSA-N 28-Homotyphasterol Natural products O=C1[C@@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)C1)CC[C@@H](O)C2 DYENWMUXSKPFLC-OYBNYXINSA-N 0.000 description 1
- ZLSOONVQLWLPMF-UHFFFAOYSA-M 3-(3,8-diamino-6-phenylphenanthridin-5-ium-5-yl)propyl-diethyl-methylazanium;dibromide Chemical compound [Br-].[Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZLSOONVQLWLPMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OKLNGCVEHOKJIY-UHFFFAOYSA-N 3-butyl-4-methylphenol Chemical compound CCCCC1=CC(O)=CC=C1C OKLNGCVEHOKJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VXBLCLVRWCLEOX-TVMSINTGSA-N 6-Deoxocastasterone Natural products O[C@@H]([C@H](O)[C@@H](C)[C@@H]1[C@@]2(C)[C@H]([C@H]3[C@@H]([C@]4(C)[C@@H](C[C@H](O)[C@H](O)C4)CC3)CC2)CC1)[C@H](C(C)C)C VXBLCLVRWCLEOX-TVMSINTGSA-N 0.000 description 1
- VXBLCLVRWCLEOX-BFYSZXNBSA-N 6-deoxocastasterone Chemical compound C([C@@H]1CC2)[C@H](O)[C@H](O)C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 VXBLCLVRWCLEOX-BFYSZXNBSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 208000000819 Adrenocortical Hyperfunction Diseases 0.000 description 1
- 235000019489 Almond oil Nutrition 0.000 description 1
- 206010056292 Androgen-Insensitivity Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 108700000712 BH3 Interacting Domain Death Agonist Proteins 0.000 description 1
- 102000055105 BH3 Interacting Domain Death Agonist Human genes 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011293 Brassica napus Nutrition 0.000 description 1
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 1
- 238000010599 BrdU assay Methods 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 108010031896 Cell Cycle Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000005483 Cell Cycle Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N Citrostadienol Natural products CC=C(CC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC[C@H]4[C@H](C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)C(C)C LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N 0.000 description 1
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 1
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 208000014311 Cushing syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000003910 Cyclin D Human genes 0.000 description 1
- 108090000259 Cyclin D Proteins 0.000 description 1
- 102100024458 Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A Human genes 0.000 description 1
- 102000003903 Cyclin-dependent kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000266 Cyclin-dependent kinases Proteins 0.000 description 1
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N Dehydro-beta-sitosterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHCYMLUZIRLXAA-SHYZEUOFSA-N Deoxyuridine 5'-triphosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)C[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 AHCYMLUZIRLXAA-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- 208000027877 Disorders of Sex Development Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical class C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004668 G2/M phase Effects 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010020564 Hyperadrenocorticism Diseases 0.000 description 1
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N Leupeptin Natural products CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N Sorbitan monooleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- FGUZFFWTBWJBIL-XWVZOOPGSA-N [(1r)-1-[(2s,3r,4s)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-2-hydroxyethyl] 16-methylheptadecanoate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@H](CO)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O FGUZFFWTBWJBIL-XWVZOOPGSA-N 0.000 description 1
- SMEGJBVQLJJKKX-HOTMZDKISA-N [(2R,3S,4S,5R,6R)-5-acetyloxy-3,4,6-trihydroxyoxan-2-yl]methyl acetate Chemical compound CC(=O)OC[C@@H]1[C@H]([C@@H]([C@H]([C@@H](O1)O)OC(=O)C)O)O SMEGJBVQLJJKKX-HOTMZDKISA-N 0.000 description 1
- 238000002679 ablation Methods 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081735 acetylcellulose Drugs 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- 239000008168 almond oil Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003473 androstanolone Drugs 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000002927 anti-mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000005775 apoptotic pathway Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 108700000711 bcl-X Proteins 0.000 description 1
- 102000055104 bcl-X Human genes 0.000 description 1
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 1
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N beta-Sistosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2C3CC=C4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 1
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 1
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 1
- DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N beta-glycerol phosphate Natural products OCC(CO)OP(O)(O)=O DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHRQXJHBXKYCLZ-UHFFFAOYSA-L beta-glycerolphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CC(CO)OOP([O-])([O-])=O GHRQXJHBXKYCLZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 150000001646 brassinolides Chemical class 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000025084 cell cycle arrest Effects 0.000 description 1
- 230000006369 cell cycle progression Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 230000010001 cellular homeostasis Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 238000002038 chemiluminescence detection Methods 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000011443 conventional therapy Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002875 cyclin dependent kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940043378 cyclin-dependent kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- UMNKXPULIDJLSU-UHFFFAOYSA-N dichlorofluoromethane Chemical compound FC(Cl)Cl UMNKXPULIDJLSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940099364 dichlorofluoromethane Drugs 0.000 description 1
- 229940087091 dichlorotetrafluoroethane Drugs 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-N docosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LLRANSBEYQZKFY-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid;propane-1,2-diol Chemical compound CC(O)CO.CCCCCCCCCCCC(O)=O LLRANSBEYQZKFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000009261 endocrine therapy Methods 0.000 description 1
- 229940034984 endocrine therapy antineoplastic and immunomodulating agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002616 endonucleolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 150000002314 glycerols Chemical class 0.000 description 1
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 1
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 1
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 1
- 159000000011 group IA salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 150000002440 hydroxy compounds Chemical class 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940031704 hydroxypropyl methylcellulose phthalate Drugs 0.000 description 1
- 229920003132 hydroxypropyl methylcellulose phthalate Polymers 0.000 description 1
- 230000003463 hyperproliferative effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940102213 injectable suspension Drugs 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- YAQXGBBDJYBXKL-UHFFFAOYSA-N iron(2+);1,10-phenanthroline;dicyanide Chemical compound [Fe+2].N#[C-].N#[C-].C1=CN=C2C3=NC=CC=C3C=CC2=C1.C1=CN=C2C3=NC=CC=C3C=CC2=C1 YAQXGBBDJYBXKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUGNVMKQXJXZCD-UHFFFAOYSA-N isopropyl palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(C)C XUGNVMKQXJXZCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010026524 kinesin-like protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229940099367 lanolin alcohols Drugs 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N leupeptin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 108010052968 leupeptin Proteins 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N linoleic acid group Chemical group C(CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC)(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 1
- 235000014666 liquid concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001050 lubricating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 229910044991 metal oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004706 metal oxides Chemical class 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229960002900 methylcellulose Drugs 0.000 description 1
- 230000003641 microbiacidal effect Effects 0.000 description 1
- 229940124561 microbicide Drugs 0.000 description 1
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOQYKNQRPGWPLP-UHFFFAOYSA-N n-heptadecyl alcohol Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCO GOQYKNQRPGWPLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 210000004882 non-tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 230000009701 normal cell proliferation Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012053 oil suspension Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid group Chemical group C(CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)(=O)O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- SOQBVABWOPYFQZ-UHFFFAOYSA-N oxygen(2-);titanium(4+) Chemical class [O-2].[O-2].[Ti+4] SOQBVABWOPYFQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N palmitic acid group Chemical group C(CCCCCCCCCCCCCCC)(=O)O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- JLFNLZLINWHATN-UHFFFAOYSA-N pentaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCO JLFNLZLINWHATN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L phthalate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C([O-])=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 1
- 235000002378 plant sterols Nutrition 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229920006316 polyvinylpyrrolidine Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000023603 positive regulation of transcription initiation, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 229940116317 potato starch Drugs 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 235000014483 powder concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005267 prostate cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 230000007026 protein scission Effects 0.000 description 1
- 239000001944 prunus armeniaca kernel oil Substances 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000025915 regulation of apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000009703 regulation of cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000031539 regulation of cell division Effects 0.000 description 1
- 230000021014 regulation of cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004550 regulation of photomorphogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000009711 regulatory function Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 description 1
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 229940100486 rice starch Drugs 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000015500 sitosterol Nutrition 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940080236 sodium cetyl sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- GGHPAKFFUZUEKL-UHFFFAOYSA-M sodium;hexadecyl sulfate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O GGHPAKFFUZUEKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NWZBFJYXRGSRGD-UHFFFAOYSA-M sodium;octadecyl sulfate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O NWZBFJYXRGSRGD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940057429 sorbitan isostearate Drugs 0.000 description 1
- 229950004959 sorbitan oleate Drugs 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 229940012831 stearyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 description 1
- OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N tetratriacontan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- OGIDPMRJRNCKJF-UHFFFAOYSA-N titanium oxide Inorganic materials [Ti]=O OGIDPMRJRNCKJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940099259 vaseline Drugs 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J17/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, having an oxygen-containing hetero ring not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
- C07J17/005—Glycosides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D313/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D313/02—Seven-membered rings
- C07D313/06—Seven-membered rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D313/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D313/02—Seven-membered rings
- C07D313/06—Seven-membered rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D313/10—Seven-membered rings condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with two six-membered rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J73/00—Steroids in which the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton has been modified by substitution of one or two carbon atoms by hetero atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Oncology (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
Rešení se týká prirozených brassinosteroidu a jejich derivátu a farmaceutických prostredku je obsahující pro použití pri lécení savcích bunek, ruzných stavu snížení rustu nebo úplné inhibici proliferacní kapacity bunek. Vynález také zahrnuje zastavení bunecného cyklu pomocí prirozených brassinosteroidu vedoucích k apoptickým zmenám v nádorových bunkách. Dále se predložené rešení týká použití brassinosteroidu pro lécení nepríznivých úcinku hyperproliferace u savcích bunek in vitro a in vivo.
Description
(57) Anotace:
Řešení se týká přirozených brassinosteroidů a jejich derivátů a farmaceutických prostředkuje obsahující pro použití při léčení savčích buněk, různých stavů snížení růstu nebo úplné inhibici proliferační kapacity buněk. Vynález také zahrnuje zastavení buněčného cyklu pomocí přirozených brassinosteroidů vedoucích k apoptickým změnám v nádorových buňkách. Dále se předložené řešení týká použití brassinosteroidů pro léčení nepříznivých účinků hyperproliferace u savčích buněk in vitro a in vivo.
• · · · ·· * · · ·· • · ·· ··«··· • · ♦ · · · · · · ··· • · · · · · · *· φ ·* ·· «·· ·« ·« * ί ř
Přirozené brassinosteroidy pro použití při léčení hyperproliferace, léčeníj proliferativních onemocnění a redukci nepříznivých účinků steroidních dysfunkcí u savců, farmaceutické prostředky je obsahující a jejich použití
Oblast techniky jt
Vynález se týká brassinosteroidů a jejich derivátů pro použití při léčení hypeproliferace savčích buněk, léčení proliferativních onemocnění u savců aΊ regulaci nepříznivých efektů steroidních dysfunkcí u savčích buněk a savců.)
Vynález rovněž zahrnuje použití přirozených brassinosteroidů a jejich derivátů v protinádorové terapii.
Dosavadní stav techniky
Tento vynález se týká přirozených brassinosteroidů, farmaceutických přípravků obsahující tyto sloučeniny a jejích využití, především v protinádorové . terapii.
Brassinosteroidy jsou rostlinné hormony steroidní povahy s důležitými regulačními funkcemi ve fyziologických procesech zahrnujících růst, diferenciaci a prodlužování kořene i stonku, rezistenci vůči chorobám a odolnost rostlin vůči stresu a senescenci (Bajguz a spol., Phytochemistry 2003, 62, 1027-1046). Tato skupina rostlinných steroidů zahrnuje více než 70 sloučenin vyskytujících se od nižších po vyšší rostliny. Byly objeveny a izolovány ze semen, plodů, listů, hálek a pylu (Sasse J., v: Brassinosíeroids: Steroidal Planí Hormones·, Springer-Verlag, Tokyo, 1999;
str. 219-262; Khripach a spol., A new class of Planí Hormones, Academie Press; San Diego, 1999, str. 456). Brassinosteroidy jsou strukturně velmi podobné živočišným steroidním hormonům. Stejně jako jejich živočišná analoga regulují expresi četných genů, ovlivňují aktivitu komplexních metabolických drah a přispívají k regulaci dělení a diferenciaci buněk. Jsou rovněž zapojeny v regulaci fotomorfogeneze a buněčného růstu (Clouse, Current Biol. 2002,12,485-487). Právě vysoká biologická aktivita brassinosteroidů přilákala pozornost řady specialistů z oblasti chemie, biologie, farmakologie a zemědělství.
« * · · ···· · · · • · *« ··« · · ♦ • · · · · · · · ♦ · · ♦ « * « « · ♦ · « * « ·· ·· ··· ·· ·· ·
Brassinolíd (1), brassinosteroid s nej vyšší biologickou aktivitou, byl poprvé izolován v roce 1979 z pylu řepky (Brassica napus) (Grove a spol., Nátuře 1979, 281, 216-217). Do dnešní doby byl brassinolíd vzorce 1 identifikován ve všech dosud studovaných rostlinných druzích (Bajguz a spol., Phytochemistry 2003, 62, 1027-1046; Zullo a spol., Braz. J. Plant Physiol. 2002,14,143-181). Barssinolid (1) je přítomný v rostlinných pletivech ve velmi nízkých koncentracích (pmol/g čerstvé váhy) a jeho syntéza je velmi obtížně realizovatelná. Z tohoto důvodu je současný výzkum zaměřen převážně na vývoj stejně účinných ale snadněji dostupných sloučenin. Některé ze synteticky připravených brassinosteroidů byly později nalezeny i v přírodě (Soeno a spol., Biosc. Biotechnol. Biochem. 2000, 64, 702709). Příklad takové sloučeniny, která je poměrně snadno synteticky dostupná v porovnání s brassiniolidem, je jeho 24-epimer, 24-epíbrassinolid (vzorce 6) (Back a spol., J. Org. Chem. 1997, 62, 1179-1182). Tento brassinosteroid je proto nejstudovanější sloučeninou a je nejlepším kandidátem pro praktické využití.
Prozatím byly popsány značně protikladné účinky brassinosteroidů na buněčné dělení u různých rostlinných druhů a kultivovaných buněčných linií. Účinek brassinosteroidů na buněčné dělení byl prokázán jako převážně podpůrný. Nahrazují účinky cytokininů (brassínosteroidy a cytokininy indukují expresi genu cycD3) a podporují buněčné dělení v průběhu časných fází růstu buněčných kultur, což naznačuje, že brassinosteroídy jsou limitujícím faktorem indukce buněčného cyklu (Hu a spol., Plant J. 2000,24, 693-701, Miyazawa a spol. J. Exp. Bot. 2003, 54,2669-2678).
V dnešní době jsou již také známy některé léčebné aplikace brassinosteroidů. Wachsman a spol. (Antivir. Chem. Chemother. 2000, 11, 71-77; Chemother. 2002, 13, 61-66) popsal in vitro antivirální účinek některých přirozených brassinosteroidů (28-homocastasteronu - 9 , 28-homobrassinolidu - 2) a jejich syntetických analog proti několika patogenním virům, např. herpes simplex viru typu 1 (HSV-1), arenaviru a spalničkovému viru (MV). Některá analoga brassinolidu mají 10 až 18krát vyšší účinek než ribavirin (používaný jako srovnávací lék) pro HSV-1 a arenaviiy. Jsou však nutné ještě další studie k přesnému popisu antivirálního mechanismu účinku těchto brassinosteroidů in vitro a korelaci vztahů molekulární struktury a bíoaktivity. Franěk a spol. (Franěk a spol., Coll. Czech Chem. Commun. 2003, 68, 2190-2200) popsali možný účinek 24-epibrassinolidu (6) na kultivované • φφ • · · · * · · · ♦ · ·· • » · φ · · φ · · · ·· ·· ··· «· ♦* « buňky myšího hybridomu. Typické účinky látky 6 byly: a) nárůst hodnoty mitochondriálního membránového potenciálu, b) snížení intracelulámího množství protilátek, c) nárůst počtu buněk v Go/Gi fázi buněčného cyklu a d) více versa snížení počtu buněk v S-fázi, Kromě toho byla hustota živých buněk významně vyšší po aplikaci 24-epibrassinolidu v rozmezí koncentrací 10 až 10' M (Franěk a spol., Coll. Czech Chem. Commun, 2003,68,2190-2200.).
Zjistili jsme, že řada přirozených brassinosteroidů efektivně ínhibuje růst mnoha různých nádorových buněčných linií v mikromolámích koncentracích, přestože mají minimální účinek na normální buňky. Cytotoxická aktivita může alespoň částečně souviset s interakcemi se steroidními receptory. Brassinosteroidy jsou zcela novou skupinou látek, u kterých dosud není zcela objasněn mechanismus jejich účinku na molekulární úrovni. Prokázali jsme však, že aplikace brassinosteroidů indukuje cytotoxicitu a způsobuje inhibici růstu buněk karcinomu prsu a prostaty. Proto mohou být použity jako antimitotické a apoptické léky, především v protinádorové terapii.
Podstatou tohoto vynálezu jsou protinádorové sloučeniny na bázi přirozených brassinosteroidů, které mají vysoký index selektivity a efektivity, tzn. jsou méně toxické avšak účinnější než dříve známá analoga.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou přirozené brassinosteroidy obecného vzorce I
R znamená CH2 nebo O-CH2 skupinu,
R znamená atom vodíku nebo hydroxyl,
R3 znamená hydroxyl,
I * « * ··* · *· ® · ·> «·«·«· • · · · · · · · · · ·· • · · · · · ♦ · ♦· «· ·· ♦·* ♦· ·· ·
R24 znamená alkyl nebo alkenyl vybrané ze skupiny zahrnující methyl, ethyl, propyl, isopropyl, methylen, ethylen a propylen, a
R znamená alkyl vybraný ze skupiny zahrnující methyl a ethyl, a jejich farmaceuticky použitelné soli, pro použití při léčení hyperproliferace savčích buněk aplikací účinného množství uvedených přirozených brassinosteroidů.
Vynález zahrnuje přirozené brassinosteroidy obecného vzorce I a jejich použití k inhibicí buněčné proliferace a indukci apoptosy.
Předmětem vynálezu jsou rovněž přirozené brassinosteroidy obecného vzorce I pro použití při léčení proliferace a indukce apoptosy u savčích buněk, podle kterého se podává terapeuticky účinné množství uvedených brassinosteroidů obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky použitelné soli. Přirozené brassinosteroidy jsou využitelné zejména pro použití při lečem onemocnění, z nichž některé zahrnují buněčnou proliferaci a mezi které patří nádory, Alzheimerova choroba, Huntingtonova choroba, steroidy-indukovaná osteoporóza, poruchy sexuální diferenciace, hyperadrenokorticismus asociovaný s přebytkem sexuálních steroidů, androgen insenzitivni syndrom, glukokortikoid-insenzitivní astma, steroidy-indukovaná katarakta a deficience P450 oxidoreduktasy.
Předmětem vynálezu je rovněž použití přirozených brassinosteroidů obecného vzorce I jako růstových regulátorů při regulací proliferace a morfogeneze živočišných a lidských buněk v tkáňových kulturách.
Předmětem vynálezu jsóU také deriváty brassinosteroidů podle nároku 1 obecného vzorce I pro použití jako léčiva.
Předmětem vynálezu jsou rovněž farmaceutické přípravky, které zahrnují substituované přirozené brassinosteroidy a nebo jejich substituované analogy a farmaceuticky přijatelné nosiče.
Další předmětem vynálezu jsou farmaceutické přípravky, které zahrnují v příměsi jeden nebo více farmaceutických kompozit.
Vynález rovněž zahrnuje deriváty brassinosteroidů ve formě volné sloučeniny obecného vzorce I nebo ve formě farmaceuticky přijatelných solí. Farmaceuticky přijatelná sůl může být sůl takovéto sloučeniny s alkalickým kovem, amoniakem či aminem ve formě racemátu nebo opticky aktivního isomeru, nebo jeho adiční sůl s kyselinou, včetně pomocných látek.
Předmětem vynálezu jsou dále brassinosteroídy nebo jejich deriváty pro použití při léčení hyperproliferativních onemocnění savčích buněk, zahrnující aplikaci efektivního množství přirozených brassinosteroídů nebo jejich derivátů pro potřeby takové ošetření savčích buněk.
Podrobný popis vynálezu
Předmětem vynálezu jsou přirozené brassinosteroídy obecného vzorce I
OH R24
v němž
R znamená CHj nebo O-CH2 skupinu,
R2 znamená atom vodíku nebo hydroxyl,
R3 znamená hydroxyl,
R24 znamená alkyl nebo alkenyl vybraný ze skupiny zahrnující methyl, ethyl, propyl, isopropyl, methylen, ethylen a propylen, a se
R znamená alkyl vybraný ze skupiny zahrnující methyl a ethyl, a jejich farmaceuticky využitelné soli, pro použití při léčení nádorových onemocnění.
Výše uvedené dosud nevymezené generické skupiny mají významy uvedené v následující legendě, přičemž alkyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 uhlíkové atomy, s výhodou vybranou ze skupiny zahrnující methyl, ethyl, propyl, isopropyl, alkenyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 1 až 3 uhlíkové atomy, s výhodou vybranou ze skupiny zahrnující methylen, ethylen, propylen, isopropylen, « «· vodík znamená H a hydroxyl znamená skupinu -OH.
Výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou přirozené brassinosteroidy shora uvedeného obecného vzorce I zahrnující sloučeniny 1 až 47
3-Eplcastasterone
2,3-Diepl-29-methyl· důllchosterone
24-EplbFaeslnollde
10-Hyd roxyeastaste roně
28-Homůtyphasterol
2-Deoxybraeslnoltde
2,3-Dleplcastasterone
J-Epi-1a-hydroxycastaeterone
28-HomoteasterĎfie
2-Epl-25-methyldoUchosterona
2-Deoxy-3S-ntethyl* ddlchosterone
3-Ept-2-deoxy-26-methyl· doUchosterone hoXAJ 33
6-Deoxocastasterone
3-Oehydrrteasterone
24-Eplsecasíerorte
B-Deoxo-28<ior* eastasterone
OH . x#
6-Deoxotyphasterol
3-Epl-ťWeoxo· eastasterone
B-Deoxo-24-epl· eastasterone
e-Deoxo-2(knethyldolichosterone ·
23O-0-D^iucopyranoeyÍ·
25-methyldollehosterone
2304O43lucdpyraňosyl-2-epl' 2S4nethyldollchosterone
3-0-0-D-fllucopyranosylteastercne a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Mimořádně výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou sloučeniny vybrané ze skupiny zahrnující kastasteron, 28-homokastasteron, 24-epibrassinolid, dolichosteron, 2-deoxykastasteron, typhasterol, teasteron, 3-oxoteasteron, kathasteron, 6-deoxotyphasterol, 3-dehydro-6-deoxoteasteron, homotyphasterol, homo10 teasteron, homodolichosteron, 25-methylkastasteron, 25-methyldolichosteron, 2deoxy-25-methyldolichosterona3-epi-2-deoxy-25-methyldolíchosteron.
· · «·*» * ·4 « to ·· ·· · · ♦· « · · ·· ·« · * a ·· « · « · a a a aa «· ·· »·· ·· ·· ·
TERAPEUTICKÁ APLIKACE
Vhodné cesty pro aplikaci jsou orální, rektální, místní (zahrnující okulámí, bukální a sublinguální), vaginální a parenterální (zahrnující subkutánni, intramuskulámí, intravitreózní, nitrožilní, intradermální, intrathekální a epidurální). Preferovaný způsob podání závisí na stavu pacienta, toxicitě sloučeniny a místě infekce, a dalších faktorech známých klinickému odborníkovi.
Terapeutický přípravek obsahuje od 1 do 95 % aktivní látky, přičemž jednorázové dávky obsahují s výhodou od 20 do 90 % aktivní látky a při způsobech aplikace, které nejsou jednorázové, obsahují s výhodou od 5 do 20 % aktivní látky. Jednotkové dávkové formy jsou např. potahované tablety, tablety, ampule, lahvičky, čípky nebo tobolky. Jiné formy aplikace jsou např. masti, krémy, pasty, pěny, tinktury, rtěnky, kapky, spreje, disperze atd. Příkladem jsou tobolky obsahující od 0,05 g do 1,0 g aktivní látky.
Farmaceutické přípravky tohoto vynálezu jsou připravovány známým způsobem, např. běžným mícháním, granulací, potahováním, rozpouštěcími nebo lyofílizačními procesy.
S výhodou jsou používány roztoky aktivních látek a dále také suspenze nebo disperze, zvláště izotonické vodné roztoky, suspenze a disperze, které mohou být připraveny před použitím, např. v případě lyofilizovaných preparátů obsahujících aktivní látku samotnou nebo s nosičem, jako je manitol. Farmaceutické přípravky mohou být sterilizovány anebo obsahují látky neutrální pováhy, např. konzervační přípravky, stabilizátory, zvlhčovadla anebo emulgátory, rozpouštěcí činidla, soli pro regulaci osmotického tlaku anebo pufiy. Jsou připravovány známým způsobem, např. běžným rozpouštěním nebo lyofílízací. Zmíněné roztoky nebo suspense mohou obsahovat látky zvyšující viskozitu, jako např. sodnou sůl karboxymethylcelulosy, dextran, polyvinylpyrrolidon nebo želatinu.
Olejové suspenze obsahují jako olejovou složku rostlinné, syntetické nebo semisyntetické oleje obvyklé pro injekční účely. Oleje, které zde mohou být použity, jsou zvláště kapalné estery mastných kyselin, které jako kyselou složku obsahují mastnou kyselinu s dlouhým řetězcem s 8 až 22, s výhodou s 12 až 22 atomy uhlíku, např. kyselinu laurovou, tridekanovou, myristovou, pentadekanovou, palmitovou, margarovou, stearovou, arachidonovou a behenovou, nebo odpovídající nenasycené ·· * · * · « · ·· ·««·«« • · ♦ · · · · ··· · · » · · · ··· t » « • · ·· ··· ·· ·· · kyseliny, např. kyselinu olejovou, alaidikovou, eurikovou, brasidovou a linoleovou, případně s přídavkem antioxidantů, např. vitaminu E, β-karotenu nebo 3,5-di-ter/butyl-4-hydroxytoluenu. Alkoholová složka těchto esterů mastných kyselin nemá více než 6 uhlíkových atomů a znamená alkohol s jednou nebo více hydroxylovými skupinami, např. s jednou, dvěma nebo třemi, jako je methanol, ethanol, propanol, butanol nebo pentanol a jejich isomery, s výhodou glykol a glycerol.
Estery mastných kyselin jsou s výhodou např. ethyl-oleát, isopropyl-myristát, isopropyl-palmitát, „Labrafil M 2375“ (trioleát polyoxyethylenglycerolu, Gattefoseé, Paříž), „Labrafil M 1944 CS“ (nenasycené polyglykolylované glyceridy připravené alkoholýzou oleje z meruňkových jader a složené z glyceridů a esterů polyethylenglykolu; Gattefoseé, Paříž), „Labrasol“ (nasycené polyglykolylované glyceridy připravené alkoholýzou TCM a složené z glyceridů a esterů polyethylenglykolu; Gattefoseé, Paříž), „Miglyol 812“ (triglycerid nasycených mastných kyselin s délkou řetězce Cg až C12 od Húls AG, Německo) a zvláště rostlinné oleje, jako bavlníkový olej, mandlový olej, olivový olej, ricinový olej, sezamový olej, sojový olej a olej z podzemnice olejné.
Příprava injekčního přípravku se provádí za sterilních podmínek obvyklým způsobem, např. plněním do ampulí nebo lahviček a uzavíráním obalů.
Např. farmaceutické přípravky pro orální použiti se mohou získat smícháním aktivní látky s jedním nebo více pevnými nosiči, případnou granulací výsledné směsi a, pokud je to požadováno, zpracováním směsi nebo granulí do tablet nebo potahovaných tablet přídavkem dalších neutrálních látek.
Vhodné nosiče jsou zvláště plnidla jako cukry, např. laktosa, sacharosa, manitol nebo sorbitol, celulosové preparáty anebo fosforečnany vápníku, s výhodou fosforečnan vápenatý nebo hydrogenfosforečnan vápenatý, dále pojivá, jako škroby, s výhodou kukuřičný, pšeničný, rýžový nebo bramborový škrob, methylcelulosa, hydroxypropylmethylcelulosa, sodná sůl karboxymethylcelulosy a polyvinylpyrrolidin a, pokud požadováno, desintegrátory, jako výše zmíněné škroby a dále karboxymethylovaný škrob, zesíťovaný polyvinylpyrrolidin, alginová kyselina a její soli, s výhodou alginát sodný. Další použitelné neutrální látky jsou regulátory toku a mazadla, s výhodou kyselina salicylová, talek, kyselina stearová a její soli, jako stearát hořečnatý nebo vápenatý, polyethylenglykol nebo jeho deriváty.
φ Φ Φ · ·· · ♦ φ ·Φ φ · φ« · · φ · ·· φ ·φ φ φ · · · · φφ» φ φ φ φ φ φ φ · ·· φ* ·♦ ··♦ ·♦ φφ ·
Jádra potahovaných tablet mohou být vybavena vhodnými potahy, které mohou být odolné vůči žaludeční šťávě, přičemž používané potahy jsou mezi jinými koncentrované roztoky cukrů, které mohou obsahovat arabskou gumu, talek, polyvinylpyrrolidin, polyethylenglykol a nebo oxid titaničitý, dále potahovací roztoky ve vhodných organických rozpouštědlech nebo směsích rozpouštědel, či pro přípravu potahů odolných vůči žaludeční šťávě roztoky vhodných celulosových preparátů, jako ftalát acetylcelulosy nebo ftalát hydroxypropylmethylcelulosu. Barviva nebo pigmenty jsou přimíchávána do tablet nebo potahovaných tablet např. pro identifikaci nebo charakterizaci různých dávek účinné složky.
Farmaceutické přípravky, které mohou být užívány orálně, jsou také tvrdé tobolky ze želatiny nebo měkké uzavřené tobolky ze želatiny a změkčovadla, jako glycerol nebo sorbitol. Tvrdé tobolky mohou obsahovat aktivní látku ve formě granulí, smíchanou např, s plnidly, jako je kukuřičný škrob, pojivý nebo mazadly, jako talek nebo stearát hořečnatý, a se stabilizátory. V měkkých tobolkách je aktivní látka přednostně rozpuštěna nebo suspendována ve vhodných kapalných látkách neutrální povahy, jako je mazací tuk, parafinový olej nebo kapalný polyethylen glykol či estery mastných kyselin a ethylen nebo propylenglykolu, přičemž je také možno přidat stabilizátory a detergenty, např. typu esterů polyethylensorbitanových mastných kyselin.
Ostatní formy orálního podávání jsou např. sirupy připravované běžným způsobem, které obsahují aktivní složku např. v suspendované formě a v koncentraci okolo 5 až 20 %, s výhodou ókolo 10 % nebo podobných koncentrací, které umožňuji vhodnou individuální dávku, např. když se odměřuje 5 nebo 10 ml. Ostatní formy jsou např. práškové nebo kapalné koncentráty pro přípravu koktejlů, např. v mléce. Takovéto koncentráty mohou být také baleny v množství odpovídajícím jednotkové dávce.
Farmaceutické přípravky, které mohou být používány rektálně, jsou např. čípky, které obsahují kombinaci aktivní látky se základem. Vhodné základy jsou např. přírodní nebo syntetické triglyceridy, parafinové uhlovodíky, polyethylenglykoly nebo vyšší alkoholy.
Přípravky vhodné pro parenterální podání jsou vodné roztoky aktivní složky ve formě rozpustné ve vodě, např. ve vodě rozpustná sůl nebo vodná injekční suspenze, která obsahuje látky zvyšující viskozitu, např. sodnou sůl karboxymethyl11
4 | ♦ « | • | «4 4 · | 4 | 4 | 4 | |
4 | 4 | ♦ · | 4 4 · | 4 | 4 | 4 | |
• | • | • | • 4 | 4 4 « 4 | 4 | 4 | 4 |
• | 4 | • | 4 | 4 4 4 | 4 | 4 | 4 |
* | 4 | 4* | 444 44 | 4 | 4 | 4 |
celulosy, sorbítol nebo dextran, a stabilizátory tam, kde je to vhodné. Aktivní látka může být také přítomna ve formě lyofilizátu společně s neutrálními látkami, kde je to vhodné, a může být rozpuštěna před parenterálm aplikací přidáním vhodných rozpouštědel. Roztoky, které jsou použity pro parenterální aplikaci, mohou být použity např. pro iníuzní roztoky. Preferovaná konzervo vadla jsou s výhodou antioxidanty, jako kyselina askorbová, nebo mikrobicidy, jako je kyselina sorbová či benzoová.
Masti jsou emulze oleje ve vodě, které obsahují ne více než 70 %, ale přednostně 20 až 50 % vody nebo vodné fáze. Tukovou fázi tvoří uhlovodíky, např. vazelína, parafínový olej nebo tvrdé parafiny, které přednostně obsahují vhodné hydroxysloučeniny, jako mastné alkoholy a jejich estery, např. cetylalkohol, nebo alkoholy lanolinu, s výhodou lanolin, pro zlepšení schopnosti vázat vodu. Emulgátory jsou odpovídající lipofilm sloučeniny, jako sorbitanové estery mastných kyselin (Spaný), s výhodou oleát sorbitanu nebo isostearát sorbitanu. Přísady k vodné fázi jsou např. smáčedla, jako polyalkoholy, např. glycerol, propylenglykol, sorbitol a polyethylenglykol, nebo konzervační prostředky či příjemně vonící látky.
Mastné masti jsou nevodné a obsahují jako základ hlavně uhlovodíky, např. parafín, vazelínu nebo parafínový olej, a dále přírodní nebo semisyntetické tuky, např. hydrogenované kokosové triglyceridy mastných kyselin nebo hydrogenované oleje, např. hydrogenovaný ricinový olej nebo podzemnicový olej, a dále částečné glycerolové estery mastných kyselin, např. mono- a distearát glycerolu. Dále obsahují např. mastné alkoholy, emulgátory a přísady zmíněné v souvislosti s mastmi, která zvyšuji příjem vody.
Krémy jsou emulze oleje ve vodě, které obsahují více než 50 % vody. Používané olejové báze jsou mastné alkoholy, např. isopropyl-myristát, lanolin, včelí vosk nebo uhlovodíky, s výhodou vazelína (petrolatum) a parafínový olej. Emulgátory jsou povrchově aktivní sloučeniny s převážně hydrofilními vlastnostmi, jako jsou odpovídající neiontové emulgátory, např. estery mastných kyselin polyalkoholů nebo jejich ethylenoxyadukty, např. polyglycerických mastných kyselin nebo polyethylen-sorbitanové estery či kyselé estery polyglycerických mastných kyselin (Tween), dále polyoxyethylenové etery mastných alkoholů nebo polyoxyethylenové estery mastných kyselin, nebo odpovídající iontové emulgátory, jako jsou alkalické soli sulfátů mastných alkoholů, s výhodou laurylsulfát sodný, φ' · · ··
Φ ♦·· • 4 44 4 • 44* 44 444· ·· ·· 444 4444 φ cetylsulfát sodný nebo stearylsulfát sodný, které jsou obvykle používány v přítomnosti mastných alkoholů, např. cetyl-stearyl-alkoholu nebo stearylalkoholu. Přísady k vodné fázi jsou mimo jiné činidla, která chrám krémy před vyschnutím, např. polyaíkoholy, jako glycerol, sorbitol, propylenglykol a polyethylenglykol, a dále konzervační činidla a příjemně vonící látky.
Pasty jsou krémy nebo masti obsahující práškové složky absorbující sekreci jako jsou oxidy kovů, např. oxidy titanu nebo oxid zinečnatý, a dále talek či křemičitany hliníku, které mají za úkol vázat přítomnou vlhkost nebo sekreci.
Pěny jsou aplikovány z tlakových nádob a jsou to kapalné emulze oleje ve vodě v aerosolové formě, přičemž jako hnací plyny jsou používány halogenované uhlovodíky, jako chlorfluor-(nižší)alkany, např. dichlorfluormethan a dichlortetrafluorethan, nebo přednostně nehalogenované plynné uhlovodíky, vzduch, N2O či oxid uhličitý. Používané olejové fáze jsou stejné jak shora uvedeno pro masti a také jsou používány přísady tam uvedené.
Tinktury a roztoky obvykle obsahují vodně-ethanolický základ, ke kterému jsou přimíchána zvlhčovadla pro snížení odpařování jako jsou polyaíkoholy, např. glycerol, glykoly a polyethylenglykol, dále mazadla, jako jsou estery mastných kyselin a nižších polyethylenglykolů, tj. lipofilní látky rozpustné ve vodné směsi nahrazující tukové látky odstraněné z kůže ethanolem a, pokud je to nutné, i ostatní neutrální látky a přísady.
Tento patent dále poskytuje veterinární přípravky obsahující nejméně jednu aktivní složku společně s veterinárním nosičem. Veterinární nosiče jsou materiály pro aplikací přípravku. Mohou to být látky pevné, kapalné nebo plynné, které jsou inertní nebo přijatelné ve veterinární medicíně a jsou kompatibilní s aktivní složkou. Tyto veterinární přípravky mohou být podávány orálně, parenterálně nebo jakoukoli jinou požadovanou cestou.
Vynález se týká také postupu a způsobu léčení nemocí uvedených výše. Látky mohou být podávány profylakticky nebo terapeuticky jako takové nebo ve formě farmaceutických přípravků, přednostně v množství, které je účinné proti uvedeným nemocem, přičemž u teplokrevných živočichů, např. člověka, vyžadujícího takovéto ošetření, je látka používána zejména ve formě farmaceutického přípravku. Na tělesnou hmotnost okolo 70 kg je aplikována denní dávka látky okolo 0,1 až 50 g, s výhodou 0,5 až 10 g.
φ · ♦ · »4 4 ' ' · · ” ·« t··· ··· · ♦♦ · · · · 4 ♦ 4*444 · · · 4 4 · 4 ·4 ·♦ «· 44» ·· ···
Stručný popis obrázků
Obr.l ukazuje inhibiční účinek 28-homokastasteronu (28-homoCS; 9; A) a 24-epibrassinolidu (24-epiBL; 6; B) na buněčnou viabilitu u nádorových liní RPMI8226 a CEM. Data reprezentují výsledky ze 3 nezávislých experimentů, z nichž byla určena směrodatná odchylka.
Obr. 2 znázorňuje vliv 28-homoCS (9; A) a 24-epiBL (6; B) na viabilitu buněčné linie MCF-7 odvozené od karcinomu mléčné žlázy sledovaný na základě MTT testu buněčné viability. Hodnoty vyjádřené v procentech jsou vztaženy ke kontrolním buňkám. Výsledky byly získány ze tří nezávislých experimentů prováděných v triplikátech, z nichž byla určena směrodatná odchylka. * představuje hodnoty p < 0,05 významně odlišné od kontroly.
Obr. 3 znázorňuje výsledky analýzy buněčného cyklu u linie MDA-MB-468 odvozené od karcinomu mléčné žlázy pomocí průtokové cytometrie. A) - kontrolní neošetřené buňky; B) - buňky ošetřené 28-homoCS; C) - buňky ošetřené 24-epiBL. Oblast Mi reprezentuje buňky v Gi, S, a G2/M fázi buněčného cyklu a oblast M2 představuje apoptické buňky s redukovaným obsahem DNA (subGl frakce buněčného cyklu). V pokusu byly srovnávány histogramy neošetřených kontrolních buněk s histogramy buněk ošetřených testovanými brassinosteroidy, přičemž horizontální osa představuje relativní množství jaderné DNA a vertikální osa vyjadřuje počet buněk.
Obr. 4 znázorňuje Western blot analýzu proteinů (p53, MDM-2, pl6, p21, p27, cyklin Dj, pRb-P) uplatňujících se při regulaci buněčného cyklu u mammámích (A) a prostatických (B) nádorových linií. Exprese proteinů u buněk ošetřených 28homocastasteronem (9) (28-homoCS 6; 28-homoCS 12; 28-homoCS 24) a 24epibrassinolidem (6) (24-epÍBL 6; 24-epiBL 12; 24-epiBL 24) v koncentraci IC50 po dobu 6, 12 a 24 hodin byla porovnávána s proteinovou expresí neošetřených kontrolních buněk(C 6 - kontrola, 6 h; C 12 - kontrola, 12 h; C 24 - kontrola, 24 h). Exprese proteinů mcm-7 nebo α-tubulinu byla použita jako vnitřní kontrola množství proteinů vzorku.
Obr. 5 znázorňuje detekci zlomů v jádrech apoptických buněk metodou TUNEL u prostatických nádorových buněk LNCaP po jejich ošetření 28-homoCS
• · Φ · • φ ·Φ | ΦΦ · • Φ | • φ Φ • · Φ |
« · · · | Φ · · | φ φ Φ |
•Φ ·· | Φ» | • Φ Φ |
nebo 24-epiBL v koncentraci IC30 po dobu 24 hodin vzhledem ke kontrolním neošetřeným buňkám.
Obr. 6 reprezentuje výsledky Western blot analýzy zaměřené na expresi proteinů (Bcl-2, Bc1-Xl, Bax, Bid, kaspasy-3) zapojených do regulace apoptosy u mammámích (A) a prostatických (B) nádorových linií. Exprese proteinů u buněk ošetřených 28-homocastasteronem (9) (28-homoCS 6; 28-homoCS 12; 28-homoCS 24) a 24-epibrassinolidem (6) (24-epiBL 6; 24-epiBL 12; 24-epiBL 24) v koncentraci IC50 po dobu 6,12 a 24 hodin byla porovnávána s proteinovou expresí neošetřených kontrolních buněk (C 6 - kontrola, 6 h; C 12 - kontrola, 12 h; C 24 - kontrola, 24 h). Exprese proteinů mcm-7 nebo a-tubulinu byla použitá jako vnitřní kontrola množství proteinů vzorku.
Následující příklady slouží pouze pro ilustraci použití brassinosteroidů, aniž by se tím jakkoliv omezoval tento vynález.
PŘÍKLADY PROVEDENÍ VYNÁLEZU
Obecný postup
Zásobní roztoky testovaných látek (10 pmol/l) byly připraveny rozpuštěním ekvivalentního množství látky v dimethylsulfoxidu. Kultivační média (DMEM, RPMI 1640, F-12), fetální telecí sérum, L-glutamin, penicilín a streptomycin byly zakoupeny u firmy Sigma (MO, USA), 3-(4,5-dimethyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazolium-bromid (MTT) u firmy Serva Electrophoresis (Heidelberg, Germany) a Calcein AM u firmy PAA Laboratories GmbH (Pasching, Austria). Myší monoklonální protilátka proti bromdeoxyuridinu (BrdU) byla získána od firmy
DakoCytomation (Glostrup, Denmark). Calcein AM byl získán od PAA Laboratories GmbH (Rakousko). Všechny použité buněčné linie (T-lymfoblastická leukemická buněčná linie CEM, buněčné linie odvozené od karcinomu mléčné žlázy
MCF-7 (estrogen-senzitivní) a MDA-MB-468 (estrogen-nesenzitivní), buněčné linie
LNCaP (androgen-senzitivní) a DU-145 (androgen-nesenzitivní) odvozené od karcinomu prostaty, buněčná linie plicního adenokarcínomu (A 549), lidská
* | • ·. | ·· ♦ · | ♦ 9 | 9 |
* · | • · | |||
« · | • · | 9 · · | 9 · | • |
· | «* | • |
erythroleukemie K562, buňky lidského mnohočetného myelomu RPMI 8226, buňky cervikálního karcinomu HELA, buňky G361 lidského maligního melanomu, buněčná linie plicního adenokarcinomu (A 549), buněčná linie lidského osteosarkomu (HOS) a normální lidské fibroblasty (BJ) byly získány z registru Američan Type Culture Collection (Manassas, VA, USA. Buňky linie MCF7 byly pěstovány v F-12 médiu (Sigma, MO, USA). LNCaP byly kultivovány v médiu RPMI 1640(GIBCO, USA). Všechny ostatní buňky byly kultivovány v DMEM kultivačním médiu (Sigma, MO, USA). Všechny používaná média byla doplněna 10% teplne.inaktivovaného fetálního telecího séra, 2 mmol/L L-glutaminu, 1% penicilin/streptomycinu. Buněčné linie byly udržovány ve standardních kultivačních podmínkách při 37°C, v atmosféře 5%CO2 a vlhké atmosféře.. Buněčné linie byly pasážovány standardní trypsinizační procedurou (Sigma, USA) dvakrát až třikrát týdně.
PŘÍKLAD 1
Testování in vitro cytotoxické aktivity
Buněčná suspenze o koncentraci přibližně 1,25 x 105 buněk/ml byla přenesena do 96-jamkových mikrotitračních destiček a po 12h stabilizaci byly přidány testované brassinosteroídy o různé koncentraci. Brassinosteroidy byly rozpuštěny v DMSO. Kontrolní buňky byly ošetřeny pouze pomocí DMSO. Finální koncentrace DMSO nepřesáhla v reakčním prostředí 1 %. Jednotlivé koncentrace testovaných látek byly přidány v čase nula jako 20μ1 alikvotní podíl do jamek mikrotitračních destiček. Obvykle se sloučeniny vyhodnocovaly v šesti koncentracích v čtyřnásobné ředící řadě. Při rutinním testování byla nej vyšší koncentrace v jamce 50μΜ, změny této koncentrace závisí na dané látce. Inkubace buněk s testovanými deriváty trvala 96 hodin při 37 °C, 100% vlhkosti a v atmosféře CO2. Na konci inkubační periody byly buňky analyzovány po přidání roztoku Calceinu AM (Molecular Probes) a inkubace probíhala další 1 hodinu. Fluorescence (OD) byla měřena pomocí Fluoroscan Ascent (Microsystems). Přežití nádorových buněk (IC50) bylo spočítáno podle následujícího vztahu: IC50 ” (ODjamky • · • ♦ f· ·*· • · ·· · • · ·· ·· ·· s léčivem /střední ODkontroiní jamky) x 100 %· Každá sloučenina byla testována ve třech pokusech, test byl opakován alespoň třikrát. Hodnota IC50, která odpovídá koncentraci látky, kdy je usmrceno 50 % nádorových buněk, byla vypočtena ze získaných křivek závislosti na dávce.
Byl sledován vliv brassinosteroidů na životaschopnost normálních a rakovinových buněčných linií rozdílného histopathologického původu. Lidská Tlymfoblastická leukemická buněčná linie CEM, buněčné linie prsního karcinomu MCF-7, buněčná linie plicňího adenokarcinomu A 549, lidská erythroleukemie K562, buněčná linie odvozená od mnohočetného myelomu RPMI 8226, buňky cervikálního karcinomu HeLa, buňky G361 lidského maligního melanomu, buněčná linie lidského osteosarkomu HOS a normální lidské fibroblasty BJ byly použity pro rutinní screening cytotoxických vlastností brassinosteroidů a jim příbuzných steroidů. Buňky byly vystaveny 6 koncentracím ve Čtyřnásobných ředících řadách pro každou látku po dobu 72 h pro určení množství přeživších buněk. Hodnoty IC50 získané pomocí Calcein AM testu jsou prezentovány v tabulce č. 1.
Tabulka 1
IC50 (pmol/L) hodnocené pomocí Calcelin AM testu přežívajících buněk. Data reprezentují průměr ± SD ze 3 nezávislých experimentů prováděných v triplikátech, z nichž byla určena směrodatná odchylka.
Brassinosteroidy č. | Sloučenina. =. (ICjo; gmol/l) | CEM | Buněčné linie | BJ | |
RPMI 8226 | G361 | ||||
Cholesterol | >50 | 38 ±2,9 | >50 | >50 | |
β-Ekdyson | >50 | >50 | >50 | >50 | |
5a-Cholestane | >50 | >50 | >50 | >50 | |
Brasicasterol | >50 | >50 | >50 | >50 | |
Stigmasterol | >50 | 32 ± 0,6 | >50 | >50 | |
Sitosterol | >50 | 32 ±1,6 | >50 | >50 | |
1 | Brassinolid | >50 | >50 | >50 | >50 |
2 | 28-Homobrassinolid | 48 ±1,3 | >50 | >50 | >50 |
22S,23S-2S- Homobrassinolid | 35 ±2,2 | 31 ±7,3 | >50 | >50 | |
6 | 24-Epibrassín.oIíd | 44 ±2,2 | >50 | >50 | >50 |
22S,23S-24- | >50 | >50 | >50 | >50 |
• | • 9~ | 9 | a· | ||||||
9 | 9 | 99 | a | 9 | a | • 9 | 9 | ||
9 | 9 | 9 | 9 1? | 9 | 9 | 9 | « 9 | 9 | |
9 | 9 | • | a | • | • | 9 | * | 9 | |
99 | *9 | • 9a | 9* | 9 |
Epibrassinolid
Kastasteron | 16 ±5,3 | 33 ±1,3 | >50 | >50 |
28-Homokastasteron | 13 ±2,8 | 26 ±1,4 | >50 | >50 |
22S,23S-28- | ||||
Homokastasteron | 24 ±1,5 | 25 ±4,7 | 45 ± 2,2 | >50 |
24-Epikastasteron | >50 | >50 | >50 | >50 |
22S,23S-24- | ||||
Epikastasteron | 49 ±1,8 | >50 | >50 | >50 |
Ošetření sloučeninami 9 a 6 mělo za následek na dávce závislé snížení životaschopnosti buněk linií CEM a RPMI 8226, ačkoliv na různé úrovni (Obr. 1). Látka 9 byla nejúčinnější na buněčné linii CEM (ICjo: 13 pmol/l, zatímco její 22S,23S-isomer byl nejúčinnější na nádorové linii RPMI 8226 (IC50: 25 pmol/l). Navíc byla pozorována i zvýšená cytotoxicita po aplikaci kastasteronu a jeho SShomologu. Brassinolid (1), který je obvykle nejúčinnější brassinosteroid v rostlinných biotestech, nebyl cytotoxicky aktivní nebo prokazoval téměř nulovou cytotoxíckou aktivitu, zatímco synteticky připravený analog 22S,23S-28homobrassinolid vykazoval cytotoxíckou aktivitu v rozmezí IC50: 31-35 gmol/l. Nebrassinosteroidní rostlinné steroly, jako cholesterol, stigmasterol, brassicasterol, 5a-cholestan, β-ekdyson a β-sitosterol, byly v rozmezí testovaných koncentrací (ařž k 50 pmol/l) neúčinné; cholesterol, stigmasterol a β-sitosterol vykazovaly minimální protinádorovou aktivitu (IC50 > 30 pmol/l) pouze na linii RPMI 8226. Na buněčných liniích K 562, A 549, HeLa a HOS byly všechny testované sloučeniny neaktivní. Překvapujícím zjištěním bylo, že nemaligní buněčná linie, lidské fibroblasty BJ, byla vůči cytotoxickému působení brassinosteroidů rezistentní. Tyto výsledky naznačují rozdílnou odpověď v působení steroidů na nádorové a nenádorové buněčné linie. Do dnešní doby je známo jen několik přírodních látek, které by selektivně působily pouze na nádorové buňky bez ošetření buněk normálních. Tato studie také přinesla první důkaz brassinosteroidů jako protirakovinových sloučenin s antiproliferačnimi vlastnostmi. Doposud je znám pouze pozitivní, efekt sloučeniny 6 na růst myších hybridomových linií v rozmezí koncentrací 10' -10 mol/1.
Jak vyplývá ze studia vztahů mezi chemickou strukturou a biologickou aktivitou, mezi cytotoxicky nejaktivnější brassinosteroidy patří látka 9. Změna skupiny 6-oxo-7-oxalakton na. funkční skupinu 6-oxo vede k výraznému zvýšení • · · · <·« · * · Φ · · · ·»«··· φ · · · 4·· · * Φ
ΦΦ ·· ··· ·· ·· Φ růstové inhibiční aktivity. Proto je sloučenina 9 asi 3krát účinnější než 28homobrassinolid 2. Flexibilnější konformace v poloze 24R na postranním řetězci u 24-epikastasteronu (13) při srovnání s kastasteronem (8). jak vyplývá ze studií NMR, je kritickou vlastností pro snížení protinádorových účinků. Konformace 24R 5 na postranním řetězci je také rozhodující pro snížení cytotoxícké aktivity brassinosteroidů. Ethylová skupina na uhlíku C24 na postranním řetězci u 9 a 2 je poněkud efektivnější než odpovídající analogy s methylovou skupinou na C24. Z minimální inhibiční aktivity β-ekdysonu obsahujícího 2p,3P,22a-funkčm uspořádaní lze usoudit, že 3a-hydroxylová skupina, 2a,3a-vicinální dioly nebo 3a,4a-vicinální 10 dioly budou důležité pro protínádorovou aktivitu brassinosteroidů.
PŘÍKLAD 2
Vliv nových sloučenin na mammámí a prostatické nádorové linie
Nejnadějnější a snadno dostupné brassinosteroidní analogy se zajímavými protinádorovými účinky byly vybrány k dalším experimentům na buněčných linií MCF 7 (estrogen-senzitivní) a MDA-MB-468 (estrogen-nesenzitivní) odvozených od karcinomu mléčné žlázy a u buněčných linií LNCaP (androgen-senzitivní) a DU20 145 (androgen-nesenzitivní) odvozených od karcinomu prostaty.
Karcinom prostaty u lidí představuje mnohastupňový proces, který je Žpóčátku u většiny nádorů prostaty závislý na androgenech a většina pacientů úspěšně odpovídá na terapeutickou androgenní blokádu. U části nemocných nádory po určité době mohou přecházet do stádia růstu na androgenech nezávislého. Tyto 25 androgen-independentní nádory prostaty jsou potom rezistentní na konvenční terapii. Zatímco androgen-dependentní nádorové buňky podléhají během androgenové ablace apoptické buněčné smrti, androgen-independentní buňky mají schopnost obejít apoptické dráhy během androgenové deprivace, aniž by došlo k narušení této dráhy. Vývoj a progrese karcinomu prostaty souvisí s akumulací změn genů 30 podílejících se na udržení normální buněčné proliferace a homeostázy. Podobný model hormonální responsibility představují estrogen-senzitivní nebo estrogennesenzitivní nádory mléčné žlázy. Na studium vzniku a vývoje těchto nádorů je ···· ·· · · · · · • · ·· «·*··« • · · · « ♦ · « * · • · ·♦ ····· · · v dnešní době zaměřeno intenzívni výzkumné úsilí, které by přineslo nové přístupy v terapii nádorových onemocnění.
Buněčná viabilita byla v tomto případě sledována pomocí MTT testu za použití 3-(4,5-dimethylthiozol-2-yl)-2,5-difenyltetrazolium-bromidu (MTT) k určení koncentrací IC50 studovaných látek, jak bylo popsáno dříve. Buňky byly vysety v počtu 4,5.103 (MCF-7, DU-145) nebo 5.103 (MDA-MB-468, LNCaP) buněk na jamku v médiu prostém steroidů do 96-jamkových mikrotitračních destiček. Buňky rostly 24 h (MCF-7, MDA-MB-468, DU-145) popřípadě 48 h (u buněk LNCaP). Buňky (konfluence 70 až 80 %) byly ošetřeny brassinosteroidy po dobu 6,12 a 24 h v kultivačním médiu. Buňky, které byly použity jako kontroly, byly inkubovány jen s maximálním možným množstvím steroidního rozpouštědla DMSO. Koncentrace vedoucí k 50% inhibicí buněčného růstu (IC50) byla určena po 24 h pomocí měření MTT reduktasové aktivity. Absorbance byla změřena pomocí ELISA readeru Labsystem Multiscan RC při 570 nm. Viabilita ošetřených buněk testovanými brassinosteroidy byla vztažena ke kontrolním buňkám představující 100% víabilitu. Experiment byl proveden v triplikátech a nejméně čtyřikrát nezávisle zopakován.
Tabulka 2
Koncentrace IC50 (pmol/l) látek 9 a 6 byly stanoveny MTT testem cytotoxicity. Výsledky byly získány ze tří nezávislých experimentů prováděných v triplikátech, z nichž byla určena směrodatná odchylka (SD)
Buněčná linie | IC50 (μηποί/ΐ) | |
9 | 6 | |
MCF-7 | 40 ±1,5 | 60 ±1,8 |
MDA-MB-468 | 65 ±2,8 | 68 ± 2,5 |
LNCaP | 45 ±2,3 | 60 ±3,1 |
DU-145 | 45 ±2,8 | 65 ± 0,9 |
K vyhodnocení vlivu vybraných brassinosteroidů (9 a 6) na víabilitu hormonálně senzitivních a nesenzitivních nádorových buněčných linií (MCF-7, MDA-MB-468, LNCaP a DU-145) jsme použili MTT test cytotoxicity. Cytotoxické koncentrace byly stanoveny pro všechny analoga na 4 nádorových buněčných linií. Brassinosteroid 9 inhiboval buněčný růst v závislosti na aplikovaném množství ve • · 4 4 4 · · · 4 44 • 4 · · ·»···· • · · · · · · · 4«
4· ·* »4» *44·* všech nádorových buněčných liniích podobně jako 6. Buňky MCF-7 byly k působení 9 nejcitlivější v porovnání s dalšími třemi buněčnými liniemi. Brassinosteroid 6 vykazuje cytotoxický účinek při vyšších koncentracích (Obr. 2). Na základě MTT testu jsme našli koncentrace obou brassinosteroidů, které 5 způsobovaly 50% inhibici růstu buněk (IC50) po 24 h (Tab. 2). Zajímavé je, že zde byly malé rozdíly mezi účinností 9 a 6 na různých buněčných liniích, přičemž se hodnoty ICÍO shodně pohybovaly kolem 43,3±2,4 gmol/l, případně 61,7±1,7 pmol/l. Výjimkou byly mammámí estrogen-necitlivé buňky MDA-MB-468, které byly k aplikaci obou brassinosteroidů rezistentnější (9IC50 : 65±2,8 pmoUl, 6IC50: 68±2,5 10 pmol/l).
PŘÍKLAD 3
Buněčná proliferace na základě bromdeoxyuridm inkorporačního testu
Ke zjištění, zda ínhibice buněčné viability je dána sníženou proliferací buněk, jsme měřili syntézu DNA za přítomnosti brassinosteroidů. Efekt brassinosteroidů 6 nebo 9 na buněčnou proliferací a replikaci DNA nádorových buněk byl měřen pomocí BrdU inkorporačního testu. Tato metoda je založena na 20 schopnosti modifikované nukleotidové báze BrdU začlenit se do DNA v místě thymidinu během S-fáze buněčného cyklu pomocí primární monoklonální protilátky proti BrdU (Gratzner, Science. 1982, 218, 474-475). Buňky (v koňflúenči 60 až 70 %) adherované na krycích sklech byly v 60mm kultivačních miskách ošetřeny brassinosteroidy (IC50) po dobu 6, 12 a 24 h. BrdU (0,1 mmol/1) byl přidán do 25 kultivačního média s buňkami na dobu 4 h v CO2 inkubátoru při 37 °C. Poté byly buňky třikrát promyty ve fosfátovém pufru a fixovány vychlazenou směsí aceton:methanol (1:1, obj./obj.) 10 minut. Buňky byly denaturovány kyselinou chlorovodíkovou (1:5; Lachema, Česká republika) a inkubovány se specifickou protilátkou proti BrdU (ředěnou 1:100 ve fosfátovém pufru; klon Bu20a, 30 DakoCytomation, Dánsko) po 60 min ve tmě. Poté byly buňky třikrát promyty ve fosfátovém pufru (10 mM, pH7,4) a inkubovány skozí anti-myší sekundární protilátkou značenou FITC (Sigma, MO, USA) po dobu 60 min ve tmě. Buňky byly opět 3x promyty ve fosfátovém pufru a následně inkubovány s 4'-6-diamidino-221 fenylindolem (DAPI; 50 pg/mL; Sigma, MO, USA) 10 min ve tmě. Krycí sklíčka s buňkami byla opláchnuta v deionizované vodě a ponořena do vodného média Mowiol (Calbiochem, CA, USA) naředěného v roztoku glycerolu a fosfátového pufru (1:3, obj./obj.) určeného pro fluorescenci. Buňky byly vizualizovány pomocí mikroskopu a byl spočítán počet BrdU pozitivních buněk (buňky v S fázi buněčného cyklu) a vztažen k celkovému počtu všech buněčných jader v nejméně 25 polích.
Tabulka 3
Buněčná proliferace stanovená na základě detekce inkorporace BrdU. Buňky MCF7, MDA-MB-468, LNCaP a DU-145 byly ošetřeny brassinosteroidy 9 nebo 6 v koncentraci IC50 po dobu 6/12/24 h a srovnávány s buňkami kontrolními (K). Výsledky představují procenta (%) BrdU pozitivních buněk. Výsledky byly získány ze tří nezávislých experimentů, z nichž byla určena směrodatná odchylka. * představuje p < 0,05 signifikantně odlišné od kontroly.
Kontrola / BRs (1C5O) | Buněčná linie | |||
MCF-7 | MDA-MB-468 | LNCaP | DU-145 | |
K(6 h) | 50 ± 3,6 | 64 ±1,5 | 44 ± 6,0 | 51 ±3,8 |
?(6h) | 46 ± 2,5 | 55 ± 5,0 | •25 ±3,0* | 41 ±4,5 |
6(6 h) | 42 ±3,2 | 53 ±4,4* | 36 ±5,5 | 32 ±3,8* |
K (12 h) | 53 ±3,5 | 58 ± 3,0 | 52 ± 7,6 | 54 ±4,2 |
9(12 h) | 31 ±3,8* | 48 ± 4,6 | 28 ± 4,6* | 36 ± 4,4* |
6(1211) | 40 ±7,1 | 55 ± 3,5 | 31 ±2,0* | 27 ±5,3* |
K (24 h) | 69 ±4,5 | 64 ±5,6 | 59 ± 8,0 | 56 ± 6,5 |
9(24 h) | 29 ± 4,0* | 28 ±4,6* | 27 ±2,1* | 38 ±4,0* |
6 (24 h) | 36 ±5,5* | 43 ±3,6* | 29 ±4.7* | 16 ±1,5* |
Buňky mammámích a prostatických nádorových linií byly ošetřeny látkami 9 a 6 v koncentracích IC50 po dobu 6,12 a 24 h a porovnány s buňkami kontrolními. Oba brassinosteroidy inhibovaly u všech linií buněčnou proliferaci jak v závislosti na koncentraci látky, tak na čase působení (Tab. 3). Ošetření brassinosteroidy snížilo procenta BrdU pozitivních buněk. Aplikace sloučeniny 9 (IC50 pro 24 h) vedla k výraznému poklesu počtu proliferujících buněk MCF-7 (z 69±4,5 % u kontrolních buněk na 29±4,0 % u buněk ošetřených látkou 9) (Tab. 3). Tyto výsledky naznačují, že brassinosteroidy mají schopnost redukovat buněčný růst u některých mammárních a prostatických nádorových linií. Zůstává stále nejasné, zda hormon-depen22 • · · · ·· to · to to· • ••to · to to ··to • · · toto toto to · to·· • · · · «·· * to· ·* ·· ··· ·· ·· · dentní buněčné linie jsou citlivější k aplikaci látek nebo zda je cytotoxický účinek brassinosteroidů ošetřen jejich interakcí se steroidními receptory. Poznatky o korelaci estrogenového receptoru (ER) u nádorů a pozitivní odpovědí na endokrinní terapii by mohly přispět k vývoji estrogenových antagonistů.
.5
PŘÍKLAD 4
Brassinosteroidy regulují buněčný cyklus
U buněčné linie MCF-7 odvozené od karcinomu mléčné žlázy, která se řadí mezi nejčastěji používaný experimentální buněčný model, bylo zjištěno, že typicky růstově inhibiční odpověď na antiestrogeny vede k typickému poklesu buněk syntetizujících DNA (S-fáze) po ošetření antiestrogenem. Tento pokles buněk v Sfázi je doprovázen zvýšeným zastoupením buněk v Go/Gi fázi buněčného cyklu. Je známo, že aktivita androgenového receptoru (AR), která obvykle nastává vazbou ligandu k receptoru, může být rovněž regulována změnami buněčné signalizace. Již dříve bylo popsáno, že aktivace AR nezávislá na ligandu může být u nádorových buněk prostaty zprostředkována různými růstovými faktory. Jelikož AR může být aktivován i za nepřítomnosti daných hormonů, zdá se, že podmínky aktivace mohou být omezenější, než je tomu u ER. Při experimentech hraje rozhodující význam použití fyziologických dávek ligandu (dihydrotestosteron; DHT), jelikož buňky LNCaP mohou proliferovat pouze v koncentraci DHT 10'θ M a nižší. Vyšší dávky proliferaci inhibují. Na rozdíl od proliferace, transaktivace cílových genů přímo regulovaných AR (např. PSA, prostatický specifický gen) byla po ošetření buněk 25 DHT v koncentraci ΙΟ’10 M a vyšší stimulována. Jedním zmožných vysvětlení výrazných cytotoxických účinků brassinosteroidů 9 a 6 by mohl být vliv na steroidní receptory ER a AR u buněčných linií hormonálně dependentních (MCF-7, LNCaP) v porovnání s buněčnými liniemi hormonálně independentnich (MDA-MB-468 a
DU-145). Naším cílem bylo zjistit vliv brassinosteroidů na průběh buněčného cyklu u různých nádorových buněčných linií. Na základě průtokové cytometrie bylo sledováno procentuální zastoupení buněk ve fázích cyklu včetně detekce subGi buněčné frakce. Kontrolní a ošetřené buňky byly dvakrát promyty vychlazeným fosfátovým pufrem, centrifugovány při 360 x g a teplotě 4 °C po dobu 10 min a následně fixovány ledovým ethanolem (70%; obj./obj.) za pomalého míchání. Obsah DNA byl stanoven po obarvení buněčných jader propidiumbromidem. Buňky byly analyzovány průtokovým cytometrem FACS Calibur (Becton Dickinson Bioscience, USA).
Tabulka 4
Distribuce buněčného cyklu u buněk MCF-7, MDA-MB-468, LNCaP a DU-145 analyzovaná průtokovou cytometrií. Histogramy buněk ošetřených brassinosteroidy byly srovnávány s histogramy buněk kontrolních. Data představují procentuální zastoupení buněk subGi frakce a v jednotlivých fázích buněčného cyklu Gj, S, G2/M
Buněčná linie | Kontrola/BRs . (IC10;24h) | Apoptická subGi | Distribuce buněčného cyklu | ||
Gi | S | G/M | |||
MCF-7 | K | 17% | 60% | 14 % | 26% |
9 | 15% | 80% | 11% | 9% | |
6 | 13% | 81% | 7% | 12% | |
MDA-MB- 468 | K | 10% | 52% | 31% | 17% |
9 | 35% | 74% | 17% | 9% | |
6 | 75% | 88% | 10% | 2% | |
LNCaP | K | 8% | 70% | 14% | 16% |
9 | 18% | 94% | 2% | 4% | |
6 | 47% | 86% | 5% | 9% | |
DU-145 | K | 20% | 62% | 15% | 23% |
9 - | 28% ' | 46 % | 8 % ' | ' 46% | |
6 | 24% | 53% | 8% | 39% |
Průtoková cytometrie prokázala blokaci buněčného cyklu v Gi fázi u buněk MCF-7, MDA-MB-468 and LNCaP ošetřených brassinosteroidy 9 nebo 6 (Tab. 4). U všech buněčných linií brassinosteroidy snížily procentuální zastoupení buněk v Sfázi buněčného cyklu. Po ošetření buněk DU-145 testovanými brassinosteroidy byl zaznamenán nárůst buněk v G?/M fázi za současného poklesu buněk v ostatních fázích buněčného cyklu (Tab. 4).
• 4 • · • ··
PŘÍKLAD 5
Vliv brassinosteroidů 9 a 6 na expresi proteinů buněčného cyklu
Sledovali jsme účinek brassinosteroidů 9 a 6 na expresi inhibitorů cyklindependentních kinas (cdk) p21Wafl/Cipl a p27Kipl, které představují klíčové regulátory progrese buněčného cyklu a inhibují aktivity cyklin/cdk. Po ošetření buněk MCF-7 látkou 9 po 6 h byl zjištěn nárůst exprese p21Wafl/c,pl ap27Klpl, zatímco u buněk MDA-MB-468 nebyly zjištěny žádné signifikantní změny. Po ošetření buněk MCF7 látkou 6 zůstala exprese p21Wafl/Cipl nezměněna, exprese p27Kipl byla po 6 a 12 h expozici látky 6 snížena. Po 12 a 24h ošetření buněk MDA-MB-468 látkou 6 došlo . k signifikantnímu zvýšení hladiny inhibitoru cdk p21Wafl/C,pl (Obr. 4A). Oproti tomu exprese proteinu p27Kipl byla u těchto buněk ve všech časových intervalech snížena. U buněk LNCaP jsme zaznamenali snížení hladiny p21Wafl/C,pl p0 12 h a zvýšení hladiny p27Kipl po 24 h vlivem látky 9 í 6. Dále toto ošetření brassinosteroidy vedlo u buněk LNCaP k poklesu exprese p21Wafl/Clpl po 6 a 24 h a p27Klpl po 6 a 12h. Oba typy brassinosteroidů vedly u buněk DU-145 ke zvýšeni exprese p21Wafl/Clpl and p27Kipl po 12 a 24 h (Obr. 4B).
Exprese proteinu p53 byla u buněk MCF-7 mírně zvýšena po 6h působení látky 9 i 6 za současného snížení exprese MDM-2, regulátoru degradace p53, ve všech sledovaných časových intervalech. U buněk MDA-MB-468 zůstala hladina proteinů p53 i MDM-2 po ošetření oběma typy brassinosteroidů nezměněna (Obr. 4A). U buněk LNCaP byl zjištěn pokles exprese p53 po ošetření buněk brassinosteroidy 9 i 6 12h a 24h po aplikaci, zatímco u buněk DU-145 nebyly změny exprese p53 prokázány. Exprese MDM-2 byla u buněk LNCaP ošetřených látkou 9 zvýšena (6 h) a po ošetření látkou 6 nezměněna. U buněk DU-145 ošetřených brassinosteroidy 9 i 6 došlo ke snížení hladiny MDM-2 ve všech časových intervalech (Obr. 4B).
Ošetření obou mammámích nádorových linií látkou 24-epiBL 6 (6/12/24 h) vedla ke snížení exprese cyklinu Dp Exprese obou fosforylovaných a defosforylovaných forem retinoblastomového proteinu (Rb) byla u buněk MCF-7 a MDA-MB-468 po aplikaci brassinosteroidů 9 a 6 snížena (Obr. 4A). U buněk LNCaP ošetřených oběma typy BRs byla hladina cyklinu D] snížena, zatímco u « · ·· •A ··
A · 9· « · A· ·* ♦♦ · A* • · ·A • 9 9 99 • A AA
999·
buněk DU-145 nebyla hladina tohoto cyklinu ovlivněna. Exprese proteinu Rb byla u buněk LNCaP léčených BRs mírně snížena, U buněk DU-145 nebyly žádné změny zaznamenány (Obr. 4B).
PŘÍKLAD 6
Detekce apoptosy u nádorových buněk
Detekce apoptosy pomocí průtokové cytometrie. Některé studie uvádějí, že indukce apoptosy může být závislá na buněčném cyklu. Proto jsme se v následujících experimentech zaměřili na,možnost, zda jsou brassinosteroidy 9 nebo 6 schopny indukovat apoptosu karcinomu buněk mléčné žlázy a prostaty prostřednictvím blokace buněčného cyklu. Z tohoto důvodu byla provedena analýza buněčného cyklu průtokovou cytometrií, která je založena na detekci endonukleolytické degradace DNA vedoucí k extrakci nízkomolekulámí DNA z buněk. Průtoková cytometrie, používaná jako konvenční technika k detekci specifické formy buněčné smrti, umožňuje výskyt subGi maxima v hypodiploidní oblasti buněčného cyklu DNA histogramů. Analýzy prokázaly, že oba typy brassinosteroidů zvyšovaly u buněk MDA-MB-468 (Obr. 3), LNCaP a mírně i u buněk DU-145 procenta subGi buněčné frakce v porovnání s kontrolními buňkami (Tab. 4). U buněk MCF-7 nebylo subGj maximum obsahující apoptické buňky zaznamenáno. Brassinosteroidy zprostředkovaná apoptická buněčná smrt je významným zjištěním,' jelikož molekulární analýzy využívané u lidských nádorů odhalily, že regulátory buněčného cyklu jsou často mutovány u většiny maligních onemocnění.
Detekce apoptického indexu metodou TdT-Mediated dUTP nick end labeling (TUNEL), K detekci apoptických buněk byla použita metoda TUNEL, Buňky rostoucí na krycích sklech v 60mm Petriho kultivačních miskách byly kultivovány se sloučeninou 9 a 6 (IC50) po dobu 6, 12 a 24 h. Po časové periodě ošetření byly následně buňky opláchnuty roztokem PBS a fixovány na sklíčkách po dobu 10 min chlazenou směsí aceton:methanol (1:1, obj./obj.). Fragmentace jaderné DNA indukovaná apoptosou byla detekována na základě vazby terminálm deoxynukleotidyl-transferasy (TdT) metodou TUNEL dle protokolu výrobce (In Šitu
* · • 4 | * 9 »4 | ·» 4 4 4 4 4 | 4 4 4 4 4 |
* · | * 4 | • 4 4 | • 4 4 |
44 | 44 | ♦ •4 «4 | 4» 4 |
Cell Death Detection Kit; Roche Diagnostics, Mannheim, Německo). Po dalším trojnásobném oplachu buněk v PBS byla jádra dobarvena 4',6-diamino-2fenylindolem (DAPI; 50 pg/ml; Sigma, St. Louis, MO, USA) po dobu 10 min ve tmě. Poté byla krycí sklíčka opláchnuta v deionizované vodě a přiložena na skla pomocí hydrofilního média Mowiolu (Calbiochem, Fremont, CA, USA) naředěného v roztoku glycerolu a PBS (1:3, obj./obj.) určeného pro fluorescenci. Ošetřené buňky byly vizualizovány fluorescenční mikroskopií a srovnávány s buňkami kontrolními. Na základě metody TUNEL byla zjištěna apoptosa buněk všech buněčných linií. Ošetření buněk brassinosteroidy ve všech časových intervalech (IC50; 6/12/24 h) vedlo k mírnému, ale ne příliš signifikantnímu zvýšení TUNEL pozitivních buněk (Tab. 5). Výrazné zvýšení procentuálního zastoupení apoptických TUNEL pozitivních buněk bylo zaznamenáno u buněk LNCaP po ošetření látkou 9 (IC50 po 24 h) na 25,8 % a látkou 6 (IC50 po 24 h) na 21,9 % vzhledem ke kontrolním buňkám. Obrázek 5 znázorňuje účinek látky 9 a 6 u buněk LNCaP vzhledem ke kontrolním buňkám.
Tabulka 5
Detekce DNA zlomů v jádrech apoptických buněk stanovená na základě metody TUNEL. Buňky MCF-7, MDA-MB-468, LNCaP a DU-145 byly po dobu 6,12 a 24 h ošetřovány sloučeninou 9 a 6 v IC50 koncentraci a detekovány metodou TUNEL ve srovnání s kontrolními neošetřenými buňkami. Buňky byly promyty v PBS a fixovány na krycí skla s vychlazenou směsí aceton/methanol (1:1, obj./obj.), jak bylo popsáno výše. K (6 h), K (12 h), K (24 h) -kontrolní neošetřené buňky 6,12 a 24 h; 9 (6 h), 9 (12 h), 9 (24 h) - vzorky buněk Ošetřené sloučeninou 9’(ICso; po dobu 6,12 a 24 h); 6 (6 h), 6 (12 h), 6 (24 h) - vzorky buněk ošetřené sloučeninou 6 (IC50; po dobu 6, 12 a 24 h). Data udávají procentuální zastoupení TUNEL pozitivních buněk ze tří nezávislých pokusů. Výsledky představují průměr + SD. * představuje p < 0,05 signifikantně odlišné od kontroly.
Kontrola! BRs (IC50) | MCF-7 | Buněčná linie | DU-145 | |
MDA-MB-468 | LNCaP | |||
K(6h) | 0,0 ± 0,0 | 0,0 ±0,0 | 0,3 ±0,6 | 0,0 ±0,0 |
9 (6 h) | 10,6 ±1,5* | 1,7 ±0,6 | 7,3 ±2,1* | 6,0 ±2,0* |
6 (6 h) | 2,7 ±1,2* | 4,7 ±0,6* | 10,7 ±4,0* | 4,7 ±2,5* |
K(12h) | 0,0 ±0,0 | 0,0 ± 0,0 | 0,6 ± 0,6 | 0,0 ±0,0 |
9 (12 h) | 13,7 ±3,8* | 2,3 ± 0,6 | 15,7 ±2,5* | 7,5 ±4,0* |
6 (12 h) | 8,3 ±3,1* | 16,7 ±4,7* | 12,2 ±5,1* | 5,6 ±2,0* |
K (24 h) | 0,3 ± 0,6 | 0,0 ± 0,0 | 0,6 ± 0,6 | 0,0 ± 0,0 |
9 (24 h) | 13,7 ±2,6* | 4,3 ±0,6* | 25,8 ±2,5* | 8,0 ±4,0* |
6 (24 h) | 11,7 ±3,8* | 18,3 ±3,0* | 21,9 ±3,0* | 5,1 ±5,6* |
PŘÍKLAD 7
Western blot analýza pro- a anti-apoptických proteinů
Pro přípravu vzorků byly buňky nasazeny v počtu 1,6.104 buněk/cm2 (LNCaP), 1,4.104 buněk/cm2 (DU-145, MDA-MB-468 a MCF-7) do lOOmm kultivačních Petriho misek a po dosažení konfluence 70 až 80 % byly ošetřeny testovanými sloučeninami 9 a 6 v koncentraci IC50 stanovené na základě MTT testu, který byl popsán výše. Kontrolní buňky byly připraveny inkubací s příslušným objemem DMSO jako vehikulem. Po 6, 12 a 24 h byly buňky opláchnuly vychlazeným PBS a uvolněny z misek škrabáním do extrakčního puíru (50 mM HEPES, pH 7,5; 150 mM NaCl; 1 mM EDTA; 2,5 mM EGTA; 10 % glycerolu; 0,1 % Tweenu 20) s proteasovými a fosfatásovými inhibitory (aprotinin 2,5 μΐ/ml; leupeptin 2,5 μΐ/ml;: fenylmethansulfonylfluorid aprotíninu 25 μΐ/ml, lOmM βglycerolfosfát; 0,1 mM NaýVOi a 1 mM dithiotreitol).. Lysáty byly posbírány do mikrocentrifugačmch zkumavek a pak inkubovány na ledu 1 h. Buňky byly v protein extrakčním pufru- inkubovány 60 min za občasného třepání při 4 °C. Po centrifugaci (45 000 x g, 4 °C, 30 min) byl supematant odebrán, rozdělen na alikvoty a zmražen při -80 °C. V supematantu byla změřena celková koncentrace proteinů Bredfordovou metodou dle protokolu výrobce (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA).
Při Western blot analýzách bylo naneseno alikvoty proteinů (1530ug/jamku) na 10%, případně na 12% SDS-PAGE gelu. Elektroforeticky separované proteiny byly přeneseny na nitrocelulózovou membránu (Amersham Biosciences, Rakousko) pomocí „semi-dry“ metody. Pro určení molekulové hmotnosti byl použit barevný molekulový hmotnostní standard (Rainbow™, Amersham Biosciences, Rakousko). Nespecifická vazebná místa byla blokována inkubací blotu 2h v 5% roztoku sušeného mzkotučného mléka v PBS. Poté byla provedena inkubace membrány přes noc při 4 °C s příslušnou primární protilátkou, která detekuje zájmové protein a nakonec promyta vychlazeným v PBS s 0,1 % Tweenem20) po dobu 1 h„ Poté byly membrány inkubovány s naředěnou sekundární kozí anti-myší IgG protilátkou konjugovaná s křenovou peroxidasou (ředění 1:6000, Santa Cruz Biotechnology, CA, USA) nebo kozí anti-králíčí IgG protilátkou konjugovaná s křenovou peroxidázou (ředění 1:2000, DakoCytomation, Glostrup, Denmark) po dobu 45 min při 4°C. Závěrečně byla membrána promyta vychlazeným v PBS s 0,1 % Tweenem 20) po dobu 1 h. Proteiny byly detekovány chemiluminiscenčmm detekčním systémem (Amersham Biosciences, Vídeň, Rakousko) dle protokolu výrobce. Srovnatelnost proteinů přenesených na membránu byla potvrzena barvením pomocí Ponceau S (Sigma, St. Louis, MO, USA) a detekcí pomocí protilátek proti α-tubulinu (Sigma, USA) nebo mcm-7 (Santa Cruz, USA). Experimenty byly třikrát zopakovány. Exprese proteinů u buněk ošetřených a s kontrolních byly srovnávány.
Na základě Western blot analýzy byly sledovány změny exprese proteinů uplatňujících se během apoptózy u buněčných linií prsu a prostaty. Ke zjištění změn během 24 h ošetření byly odebírány buňky ošetřené brassínosteroidy po dobu 6,12 a 24 h v koncentracích IC50 stanovených dle MTT testu. Změny exprese proteinů regulujících apoptickou buněčnou smrt po ošetření buněk brassínosteroidy znázorňuje Obr. 6. Western blot analýzou nebyly u mammámích nádorových buněk MCF-7 a MDA-MB-468 zjištěny signifikantní změny v expresi apoptických proteinů po ošetření buněk testovanými brassínosteroidy (Obr. 6A). Exprese‘antiapoptického proteinu Bcl-2 u buněk LNCaP aDU-145 klesla po 6, 12 i 24 h působení 9 a po 6 a 24 h aplikaci 6, zatímco při sledovaní exprese dalšího antiapoptického proteinu Bcl-XL nebyla zjištěna žádná změna po ošetření studovanými brassínosteroidy ve všech Časových intervalech (Obr. 6B). Exprese pro-apoptického proteinu Bax byla zvýšena u buněk LNCaP ošetřených 9, zejména po 6 a 12 h působení, a snížena exprese pro-apoptického neštěpeného proteinu Bíd po 6 a 12 h ošetření oběma typy BRs. Tento pokles exprese proteinu Bid může představovat jeho štěpení vlivem brassinosteroidů. U buněk DU-145 nebyla exprese proapoptických proteinů Bax a Bid změněna. Po ošetření buněk LNCaP látkou 9 jsme detekovali štěpné aktivní fragmenty kaspasy-3 po 6, 12 a 24h aplikací. Ošetření buněk LNCaP sloučeninou 6 po 24 h rovněž vedlo k aktivaci kaspasy-3. Na druhé
* | - · | ·· * a | a a | « | |||
• · | ta | a a a | a | a | a | ||
* | • | a a | • a a | • a | a | a | |
• | * | • | * | a a a | ♦ | a | a |
• a | ·· | • t · ·· | v· | a |
straně u linie DU-145 nebyla žádná změna kaspasy-3 zjištěna. Positivní exprese poly-(ADP-ribosa)-polymerasy (PARP) byla zjištěna pozitivní exprese u kontrolních buněk prostatických nádorových linií, ovšem brassinosteroidy neměly žádný efekt na expresi ani na jeho degradaci ve všech časových intervalech 6/12/24 h (Obr. 6B).
V této studii jsme zjistili, že ošetření sloučeninou 9 vyvolalo výrazný pokles hladiny anti-apoptického proteinu Bcl-2 a nárůst pro-apoptického proteinu Bax u buněčné linie LNCaP. Dále bylo u těchto buněk zjištěno štěpení pro-kaspasy-3 na její aktivní formu ve všech časových intervalech po ošetření látkou 9 a po 24 h aplikace u látky 6. Toto zjištění svědčí o iniciaci apoptických změn u buněk LNCaP. Již dříve bylo popsáno, že v efektorové fázi apoptosy hraje důležitou roli aktivace kaspasové kaskády (Budihardjo a spol., Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 15, 269-290, 1999). Kaspasa-3 představuje exekuční proteasu, která se podílí na štěpení proteinů PARP a následné DNA degradace a apoptické smrti (Allen a spol., Cell. Mol. Life Sci. 54, 427-445,1998; Cain a spol., Biochimie 84, 203-214, 2002). Tyto výsledky naznačují, že brassinosteroidy 9 a 6 mohou u buněčných linií odvozených od karcinomu prostaty podpořit apoptosu cestou aktivace kaspasy-3 a modulací proteinů rodiny Bcl-2.
U mammámích nádorových buněčných linií Western blot analýza nepotvrdila signifikantní změny v expresi proteinů rodiny Bcl-2 ani aktivaci kaspasy-3 po ošetření brassinosteroidy 9 a 6.
PŘÍKLAD 8 = r
Suché tobolky
5000 tobolek, každá obsahující jako aktivní složku 0,25 g jedné ze sloučenin obecného vzorce I uvedených shora v předcházejících příkladech, se připraví následujícím postupem:
Složení
Aktivní složka 1250 g
Talek 180 g
Pšeničný škrob 120 g
Magnesium stearát 80 g
Laktosa 20 g
Postup přípravy: Rozemleté složky jsou protlačeny přes síto s velikostí ok 0,6 mm. Dávka 0,33 g směsi je přenesena do želatinové tobolky pomocí přístroje na plnění tobolek.
PŘÍKLAD 9
Měkké tobolky
5000 měkkých želatinových tobolek, každá z nich obsahující jako aktivní složku 0,05 g jedné zé sloučenin obecného vzorce I uvedených shora v předcházejících příkladech, se připraví následujícím postupem:
Složení
Aktivní složka 250 g
Lauroglykol 2 litry
Postup přípravy: Prášková aktivní látka je suspendována v Lauroglykolu® (laurát propylenglykolu, Gattefoseé S. A., Saint Priest, Francie) a rozemele se ve vlhkém pulverizátoru na velikost částic asi 1 až 3 mm. Dávka o hmotnosti 0,419 g směsi je potom přenesena do měkkých želatinových tobolek pomocí přístroje na plnění tobolek.
PŘÍKLAD 10
Měkké tobolky
5000 měkkých želatinových tobolek, každá z nich obsahující jako aktivní složku 0,05 g jedné ze sloučenin obecného vzorce I uvedené shora v předcházejících příkladech, se připraví následujícím postupem:
Složení
Aktivní složka 250 g
PEG400 1 litr
Tween 80 1 litr
Postup přípravy: Prášková aktivní složka je suspendována v PEG 400 (polyethylenglykol o molekulové hmotnosti mezi 380 a 420, Sigma, Fluka, Aldrich, USA) a Tweenu® 80 (monolaurát polyoxyethylensorbitanu, Atlas Chem. Ind., Inc., USA, dodává Sigma, Fluka, Aldrich, USA) a rozetřena ve vlhkém pulverizátoru na částice o velikosti 1 až 3 mm. Dávka o hmotnosti 0,43 g směsi je potom přenesena do měkkých želatinových tobolek pomocí přístroje na plnění tobolek.
Claims (15)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Přirozené brassinosteroidy obecného vzorce I v němžR znamená CH2 nebo 0-0¾ skupinu,R2 znamená atom vodíku nebo hydroxyl,R3 znamená hydroxyl,R24 znamená alkyl nebo alkenyl vybrané ze skupiny zahrnující methyl, ethyl, propyl, isopropyl, methylen, ethylen a propylen, aR25 znamená alkyl vybraný ze skupiny zahrnující methyl a ethyl, a jejich farmaceuticky použitelné soli, pro použití při léčení hyperproliferace savčích buněk vyznačující se tím, že se savčím buňkám aplikuje účinné množství uvedených přirozených brassinosteroidů.
- 2. Přirozené brassinosteroidy podle nároku 1 obecného vzorce I pro použití při léčení proliferativních onemocnění savců, vyznačující se tím, že se podává terapeuticky efektivní množství přirozených brassinosteroidů savčím hyperproliferujícím buňkám, které toto podání potřebují, při čemž přirozené brassinosteroidy jsou vybrány ze skupiny zahrnující následující sloučeniny: kastasteron, 28-homokastasteron, 24-epibrassinolid, dolichosteron, 2deoxykastasteron, typhasterol, teasteron, 3-oxoteasteron, kathasteron, 6deoxotyphasterol, 3-dehydro-6-deoxoteasteron, homotyphasterol, • φ φ φ φ · » · «*· ·· *« · homoteasteron, homodolichosteron, 25-methylkastasteron, 25methyldolichosteron, 2-deoxy-25- methyldolichosteron a 3-epi-2-deoxy-25methyldolichosteron.
- 3. Přirozené brassinosteroidy podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 a 2, vyznačující se tím, že R2, R3, R24, a R25 mají nezávisle na sobě (R) nebo (S) konfiguraci.
- 4. Přirozené brassinosteroidy podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli pro použití při inhibici proliferace savčích buněk, vyznačující se tím, že se podává terapeuticky efektivní množství uvedených přirozených brassinosteroidů spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.
- 5. Přirozené brassinosteroidy obecného vzorce I pro použití jako růstové regulátory ve zvířecích a lidských buněčných tkáňových kulturách pro regulaci jejich proliferace a morfogeneze.
- 6. Přirozené brassinosteroidy obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až3 nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli pro použití při léčení rakoviny, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání terapeuticky efektivního množství· v kombinaci s běžně používanými cytostatiky, jako je mitoxantron, cis-platina, methotrexát, taxol nebo doxorubicih. =
- 7. Přirozené brassinosteroidy obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli pro použití při indukci apoptosy v savčích buňkách, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání terapeuticky efektivního množství při spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.
- 8. Přirozené deriváty brassinosteroidů podle kteréhokoliv· 7 nároků 1 až 3 obecného vzorce I pro použití při léčení rakoviny, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání terapeuticky efektivního množství derivátů brassinosteroidů podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.' • ' · *
- 9. Přirozené brassinosteroidy podle nároku 8 pro použití při léčení, vyznačující se tím, že rakovina znamená rakovinu prsu, dělohy nebo prostaty.
- 10. Přirozené brassinosteroidy obecného vzorce IR znamená CH2 nebo O-CH2 skupina,R2 znamená atom vodíku nebo hydroxyl,R3 znamená hydroxyl,R24 znamená alkyl nebo alkenyl vybrané ze skupiny sestávající z methylu, ethylu, propylu, isopropylu, methylenu, ethylenu a propylenu,.aR25 znamená alkyl vybraný ze skupiny sestávající z methylu a ethylu, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, pro použití při regulaci nepříznivých účinků steroidních dysfunkcí v savčích buňkách, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání terapeuticky efektivního množství shora uvedených přirozených brassinosteroidů obecného vzorce I savčím buňkám.
- 11. Přirozené brassinosteroidy podle nároku 10, v němž R2, R3, R24, a R25 mají nezávisle na sobě (R) nebo (S) konfiguraci.
- 12. Přirozené brassinosteroidy podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 nebo farmaceuticky přijatelné soli takových sloučenin pro použití při regulaci
▼▼ ▼ TV ▼ v 9 * « ·· ♦ 4 * • « 4 ·· • ♦ · 1 β « • * • • * • t · · • • • • • • • ♦ ♦ 4 • • ·« >« ·· • nepříznivých účinků steroidnich dysfunkcí u savců, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání terapeuticky efektivního množství uvedených sloučenin spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem - 13. Přirozené brassinosteroídy podle nároku 12, v němž steroidní disfunkce znamená osteoporózu, defekty metabolismu cholesterolu, Huntingtonovu nemoc, Alzheimerovu nemoc, steroidy indukovaná katarakta, deficienci P450 oxidoreduktasy, mužskou neplodnost a poruchy sexuálního chování a diferenciace.
- 14. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje efektivní množství přirozených brassinosteroidů obecného vzorce I podle nároků 1 až 3 a 10 až 11.
- 15. Farmaceutický prostředek podle nároku 14 pro použití při léčení savčích buněk a lidí.
Priority Applications (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CZ20070571A CZ302293B6 (cs) | 2007-08-22 | 2007-08-22 | Prirozené brassinosteroidy pro použití pri lécení hyperproliferace, lécení proliferativních onemocnení a redukci nepríznivých úcinku steroidních dysfunkcí u savcu, farmaceutické prostredky je obsahující a jejich použití |
EP08801032A EP2222690A2 (en) | 2007-08-22 | 2008-08-20 | Natural brassinosteroids for use for treating hyperproliferation, treating proliferative diseases and reducing adverse effects of steroid dysfunction in mammals, pharmaceutical composition and its use |
PCT/CZ2008/000097 WO2009024103A2 (en) | 2007-08-22 | 2008-08-20 | Natural brassinosteroids for use for treating hyperproliferation, treating proliferative diseases and reducing adverse effects of steroid dysfunction in mammals, pharmaceutical composition and its use |
US12/679,793 US20100204460A1 (en) | 2007-08-22 | 2008-08-20 | Natural brassinosteroids for use for treating hyperproliferation, treating proliferative diseases and reducing adverse effects of steroid dysfunction in mammals, pharmaceutical composition and its use |
IL204194A IL204194A0 (en) | 2007-08-22 | 2010-02-25 | Natural brassinosteroids for use for treating hyperproliferation, treating proliferative diseases and reducing adverse effects of steroid dysfunction in mammals, pharmaceutical composition and its use |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CZ20070571A CZ302293B6 (cs) | 2007-08-22 | 2007-08-22 | Prirozené brassinosteroidy pro použití pri lécení hyperproliferace, lécení proliferativních onemocnení a redukci nepríznivých úcinku steroidních dysfunkcí u savcu, farmaceutické prostredky je obsahující a jejich použití |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ2007571A3 true CZ2007571A3 (cs) | 2009-03-04 |
CZ302293B6 CZ302293B6 (cs) | 2011-02-09 |
Family
ID=40378732
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ20070571A CZ302293B6 (cs) | 2007-08-22 | 2007-08-22 | Prirozené brassinosteroidy pro použití pri lécení hyperproliferace, lécení proliferativních onemocnení a redukci nepríznivých úcinku steroidních dysfunkcí u savcu, farmaceutické prostredky je obsahující a jejich použití |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20100204460A1 (cs) |
EP (1) | EP2222690A2 (cs) |
CZ (1) | CZ302293B6 (cs) |
IL (1) | IL204194A0 (cs) |
WO (1) | WO2009024103A2 (cs) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IL195746A (en) * | 2008-12-04 | 2012-01-31 | Herbs Of Kedem Ltd | Brasinosteroids used to treat prostate hyperplasia and androgenic baldness |
CN103251630B (zh) * | 2013-03-19 | 2015-07-29 | 成都旗美生物科技有限公司 | 天然芸苔素内酯的医用和保健用药物 |
CN103301136B (zh) * | 2013-05-21 | 2015-04-15 | 成都旗美生物科技有限公司 | 柚皮素的联合医用和保健用药物 |
CN105037471B (zh) * | 2014-05-02 | 2018-03-23 | 扬州蓝色生物医药科技有限公司 | 一种甾体类抗病毒剂 |
WO2021045717A1 (en) * | 2019-09-05 | 2021-03-11 | T.C. Istanbul Kultur Universitesi | A pharmaceutical composition containing epibrassinolide (ebr) |
WO2021045718A1 (en) * | 2019-09-05 | 2021-03-11 | T.C. Istanbul Kultur Universitesi | A pharmaceutical composition containing epibrassinolide (ebr) and roscovitine (rosc) |
US20210251229A1 (en) * | 2020-02-14 | 2021-08-19 | Suntton Company Limited | Plant regulator compositions |
CZ309819B6 (cs) * | 2020-10-23 | 2023-11-08 | Univerzita Palackého v Olomouci | Sterolové deriváty, přípravky obsahující tyto deriváty a jejich použití |
CN116768955A (zh) * | 2022-03-09 | 2023-09-19 | 中国科学院上海药物研究所 | 一类葫芦素b衍生物及其制备方法和用途 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5824346A (en) * | 1996-08-22 | 1998-10-20 | Schering Corporation | Combination therapy for advanced cancer |
-
2007
- 2007-08-22 CZ CZ20070571A patent/CZ302293B6/cs not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-08-20 EP EP08801032A patent/EP2222690A2/en not_active Ceased
- 2008-08-20 US US12/679,793 patent/US20100204460A1/en not_active Abandoned
- 2008-08-20 WO PCT/CZ2008/000097 patent/WO2009024103A2/en active Application Filing
-
2010
- 2010-02-25 IL IL204194A patent/IL204194A0/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CZ302293B6 (cs) | 2011-02-09 |
EP2222690A2 (en) | 2010-09-01 |
US20100204460A1 (en) | 2010-08-12 |
WO2009024103A2 (en) | 2009-02-26 |
WO2009024103A3 (en) | 2009-07-16 |
IL204194A0 (en) | 2011-07-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CZ2007571A3 (cs) | Prirozené brassinosteroidy pro použití pri léceníhyperproliferace, lécení proliferativních onemocnení a redukci nepríznivých úcinku steroidních disfunkcí u savcu, farmaceutické prostredky je obsahující a jejich použití | |
JP5308160B2 (ja) | 前立腺疾病及び皮膚癌におけるイソチオシアネート系化合物の使用 | |
JP5998137B2 (ja) | 前立腺癌を処置するための併用療法 | |
AU2015252859B2 (en) | Bone-selective osteogenic oxysterol bisphosphonate analogs | |
EP1585526A2 (fr) | Nouvelle utilisation de la mifepristone et de ses derives comme modulateurs de la voie de signalisation des proteines hedgehog et ses applications | |
CA2274779A1 (en) | Aminosterol ester compounds | |
JP2004515498A (ja) | Abca−1を上昇させる化合物 | |
UA101192C2 (uk) | Спосіб лікування раку молочної залози | |
Palermo et al. | Natural products inspired modulators of cancer stem cells-specific signaling pathways Notch and Hedgehog | |
WO2018157232A1 (en) | Pharmaceutical compositions 'and combinations comprising inhibitors of the androgen receptor a1wd uses thereof | |
US20070225256A1 (en) | Compound | |
CN101247803A (zh) | 应用类固醇硫酸酯酶抑制剂抑制雄烯二酮和/或睾酮的合成 | |
NO328733B1 (no) | Fosfolipidkomplekser av proantocyanidin A2, farmasoytisk sammensetning inneholdende kompleksene og anvendelse derav | |
US20040248971A1 (en) | Use of vitamin e succinate and antiandrogen combination | |
WO2008148269A1 (fr) | Médicament anti-tumoral contenant des dérivés d'acide bétulinique | |
JPWO2004035089A1 (ja) | ホルモン依存性癌の治療剤 | |
US8519007B2 (en) | Use certain diterpene compounds in the treatment of androgen receptor-associated diseases | |
JP2004524325A (ja) | 良性及び/または悪性腫瘍の治療のためのステロイド誘導体の使用 | |
EP0850647B1 (fr) | Application de composés stéroides substitués en ll pour la fabrication de médicaments ayant une activité estrogène dissociée | |
RU2589266C1 (ru) | Фармацевтическая композиция для лечения злокачественных новообразований предстательной железы | |
CZ2009725A3 (cs) | Deriváty cholestanu pro použití jako protinádorová a antiangiogenní léciva a farmaceutické prípravky tyto látky obsahující | |
US20090203721A1 (en) | Use of siramesine in the treatment of cancer | |
TWI463985B (zh) | 單離自金剛纂之化合物於癌症和/或血小板數量低下之治療用途 | |
US20110178052A1 (en) | 9-alpha estratriene derivatives as er-beta selective ligands for the prevention and treatment of intestinal cancer | |
TW200902028A (en) | Combination of progesterone-receptor antagonist together with an aromatase inhibitor for use in BRCA mediated diseases |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20170822 |