CZ20003037A3 - Protinádorové látky - Google Patents

Abstract

Protinádorové látky obecného vzorce I nebo II, v nichž jednotlivé obecné symboly mají význam, uvedený u těchto obecných vzorců, jsou sloučeniny s velmi dobrým účinkem proti zhoubným nádorům včetně pevných nádorů a nádorů, odolných proti působení běžně užívaných chemotherapeutických látek. Součást řešení tvoří také farmaceutický prostředek, který uvedené látky obsahuje.

Description

Oblast techniky

Vynález se týká skupiny protinádorových látek a farmaceutických prostředků s jejich obsahem.

Dosavadní stav techniky

U některých zhoubných nádorů, u nichž se k léčení užívá převážně chemotherapie k prodloužení doby života, se již podařilo dosáhnout značných úspěchů. Jde např. o Burkittův lymfom, akutní lymfocytární leukémii a Hodgkinův sarkom a ještě dalších 10 až 15 typů nádoru. Tyto nádory byly popsány např. v publikaci A. Golden a další, Eur. J. Cpncer, 17, 129, 1981 v tabulce 1. Tyto nádory, u nichž byla podstatně prodloužena doba života nemocných a kvalita života v průběhu této doby, však představují pouze malý zlomek různých typů zhoubných nádorů. Mimo to existuje jen velmi malý počet látek, které jsou skutečně vysoce účinné proti pevným nádorům, jako jsou nádory vaječníků, mléčné žlázy, plic apod. Z těchto látek je možno uvést cyklofosfamid, adriamycin, 5-FU, hexamethylmelamin apod. To znamená, že u nemocných s řadou typů zhoubných nádorů přetrvává podstatné riziko relapsu a zvýšené úmrtnosti.

V případě relapsu je možno u některých nemocných znovu dosáhnout remise jiným způsobem léčení. Avšak v tomto případě je obvykle zapotřebí použít vysoké dávky původní chemoterapeutické látky nebo je navíc nutno použít další látky vzhledem k tomu, že se u nádoru vyvíjí alespoň částečná odolnost proti použitým látkám. Současné výzkumy prokazují, že se odolnost může vyvinout současně proti několika účinným látkám včetně těch, které u nemocného ještě nebyly použity. Vznik odolných nádorů může být funkcí hmoty nádoru • ·

a představuje hlavní příčinu neúspěšného léčení. Aby bylo možno překonat tuto odolnost, je možno použít chemitherapii ve vysokých dávkách, popř. spolu s ozářením a allogenní nebo autologní transplantací kostní dřeně. Při použití vysokých dávek chemických látek je možno použít původní látku nebo podávat navíc jiné látky. Je zřejmé, že při vývoji nových látek by měly být objevovány nové látky, u nichž nedochází ke zkřížené odolnosti s fenotypy mdr, jinak nemůže dojít ke zvýšení úspěšnosti léčení a k snadnějšímu léčení u již dříve léčených nemocných.

Protinádorová účinnost nové skupiny přírodních látek, označovaných jako illudiny, byla zkoumána in vitro podle publikace Kelner M. a další, Cancer Res., 47, 3186, 1987. Illudin M byl čištěn a podroben zkouškám na účinnost in vivo v National Cancer Institute Division of Cancer Treatment NCI DCT. Bylo prokázáno, že illudin M statisticky významně zvyšuje délku života u krys s Dunningovou leukémií, má však podstatně nižší therapeutický index v případě pevných nádorů. Velká toxicita uvedených látek nedovolila jakékoliv zkoušky na člověku. V poslední době byly vyvinuty synthetické analogy illudinu se slibnou protinádorovou účinností včetně analogů, které byly popsány v US 5439936 a 5523490.

Je zřejmé, že přes značný pokrok stále existuje potřeba nalézat nové chemotherapeutické látky, schopné vyvolat inhibici nádorového růstu, zvláště v případě pevných nádorů. Současně by měly mít nové látky takový therapeutický index, aby je bylo možno použít při léčení in vivo.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří protinádorové látky obecného vzorce I « · • ·

kde

Ri znamená atom vodíku, hydroxyskupiňu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, atom halogenu, karboxyskupinu, nitroskupinu nebo skupinu -(CH₂)n-(X)-(Y).

n znamená celé číslo 0 až 4,

X znamená oxyskupinu -0-, thioskupinu -S-, -N(R_a)- nebo chybí,

Y znamená C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny, peptidů nebo 1 až 15-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec, popřípadě obsahující 1, 2 nebo 3 neperoxidové oxyskupiny, thioskupiny nebo skupiny -N(R_a)-, přičemž tento řetězec je popřípadě substituován na uhlíkovém atomu 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny oxoskupina =0, hydroxyskupina, karboxyskupina, atom halogenu, merkaptoskupina, nitroskupina, -N(Rb)_c, C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidů a současně je řetězec nasycený nebo nenasycený,

R₂ znamená karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogen C1-C6alkyl, -C(=O)NRdRe, zbytek sacharidu, aminokyseliny, peptidů nebo C1-C6alkyl, substituovaný 1 nebo 2 hydroxyskupinami, C1-C6alkoxyskupinami,

C1-C6alkanoyloxyskupinami, karboxyskupinami, zbytky aminokyselin, peptidů nebo sacharidů nebo skupinami -C(=O)NRdR_e>

R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu,

C1 -C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryi, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, R₅ znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo R₄ a R₅ společně tvoří ethylendioxyskupinu,

R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NR_fR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 až 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupina -C(=O)NR_fR_g,

R_a znamená atom vodíku, C1 -Cěalkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl a

Rb, Rc, Rd, Re, Rf3 Rg nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří Rb a R_c nebo R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina ve významu Y nebo R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

Součást podstaty vynálezu tvoří také ty sloučeniny obecného vzorce I, v němž Ri znamená -(CH2)_n-(X)-(O, kde n znamená celé

číslo 0 až 4, X znamená oxyskupinu, thioskupinu, -N(R_a)- nebo chybí, Y znamená zbytek aminokyseliny, chráněný 1 nebo 2 ochrannými skupinami, zbytek peptidů nebo jeden až 15-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec, popřípadě obsahující 1, 2 nebo 3 neperoxidové oxyskupiny, thioskupiny nebo skupiny -N(R_a)-, tento řetězec je substituován 1, 2 nebo 3 zbytky peptidů a je nasycený nebo nenasycený,

R₂ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu, R4 znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a R5 znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R4 a R₅ společně ethylendioxyskupinu, Rg znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl,

C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidů nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 až 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidů nebo sacharidu nebo skupina -C(=O)NR_fR_g,

R_a znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl a

Rb, Rc, Rd, Re, R_fa R_g nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří Rb a R_c nebo Rd a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina ve významu Y nebo R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina,

nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde R_h a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek. Výhodným významem pro Y je C1-C6alkyl, substituovaný peptidovým zbytkem.

Součást podstaty vynálezu rovněž tvoří sloučeniny obecného vzorce I, v němž Ri znamená atom vodíku, hydroxyskupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, atom halogenu, karboxyskupinu, nitroskupinu nebo -(CH₂)_n-(X)-(Y), n znamená celé číslo 0 až 4, X znamená oxyskupinu, thioskupinu, -N(R_a)- nebo chybí, Y znamená C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo 1 až 15-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhlíkový řetězec, popřípadě obsahující 1, 2 nebo 3 neperoxidové oxyskupiny, thioskupiny nebo skupiny -N(R_a)-, řetězec je popřípadě substituován 1, 2 nebo 3 skupinami ze skupiny oxoskupina, hydroxyskupina, karboxyskupina, atom halogenu, merkaptoskupina, nitroskupina,

-N(R_b)(R_c), C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu, řetězec může být nasycený nebo nenasycený, R₂ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu, R₄ znamená atom vodíku nebo C1 -C6alkyl, R5 znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo R₄ a R5 společně tvoří ethylendioxyskupinu, R6 znamená karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, -C(=O)NR_fR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny C1-C6alkoxyskupina,

C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo -C(=O)NRfR_g, R_a znamená atom vodíku, ·· ·· ► * * | · · ·· • ·

C1-C6alkyl, C1 -C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl a R_b, R_c, Rd, Re, Rf a Rg nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_b a R_c, nebo R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, ne nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina ve významu Y nebo R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl,

C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde R_h a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

Vynález se rovněž týká dimerních sloučenin, které jsou tvořeny dvěma sloučeninami vzorce I, spojenými spojovníkem. Touto skupinou může být například skupina alkylového typu nebo esterového typu. Jako příklady je možno uvést skupiny -(CH₂)p-O-(CH₂)q-, -(CH₂)_r- a -CH₂-S-CH₂C(O)-O-(CH₂)₂-O-C(O)CH₂-S-CH₂-, kde p a q znamenají celá čísla 1 až 8 a r znamená celé číslo 1 až 16, s výhodou 1 až 8. Je zřejmé, že by bylo možno použít i jiné skupiny obdobné délky. Dvě sloučeniny obecného vzorce I je možno spojit např. tak, že se některý ze symbolů Ri, R₃, R4 nebo R₅ nezávisle nahradí na každé z těchto sloučenin bifunkční spojovací skupinou. V případě, že se nahrazuje symbol R1, je touto skupinou s výhodou skupina -CH₂-O-CH₂- nebo -CH₂-S-CH₂C(O)-O-(CH₂)₂-O-C(O)CH₂-S-CH₂-.

Vynález se týká také sloučenin obecného vzorce I kde R1 znamená -(CH₂)_n-(X)-(O, ⁿ znamená celé číslo 1 až 4, s výhodou 1, X znamená oxyskupinu, thioskupinu nebo skupinu -N(R_a)-, s výhodou « · « ♦ * · • ·· · thioskupinu, Y znamená 2 až 15-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhlíkový řetězec, popř. obsahující 1, 2 nebo 3 neperoxidové oxyskupiny, thioskupiny nebo skupiny -N(R_a)-, řetězec je substituován na uhlíkovém atomu 1, 2 nebo 3, substituenty ze skupiny oxoskupina, karboxyskupina, merkaptoskupina, -N(R_b)(R_c), C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminoskupiny nebo peptidu a je nasycený nebo nenasycený, s výhodou Y znamená 2 až 6-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhlíkový řetězec, substituovaný na uhlíkovém atomu 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny oxoskupina, heteroaryl, zbytek aminokyseliny nebo zbytek peptidu, R2 znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu, R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a R₅ znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu, R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo -C(=O)NRfR_g, R_a znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl a R_b, R_c, Rf a R_g nezávisle znamenají atom vodíku C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_b a R_c nebo R_f a R_g společně s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina ve významu Y nebo R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyi, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo φ φ « φ ♦ · φ · φ φφφφ φ φ φ φ « φφφ· φ φ φ φ φ

-N(Rh)(Rj), kde R_h a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolídinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

Vynález se rovněž týká sloučenin obecného vzorce li

kde

R2 znamená C1-C6alkyl,

R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

R4 znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a

R₅ znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupínu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu,

R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyí, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NR_fR_g, • · · • « · • · · ·♦ ··

R₇ znamená karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NR_dR_e, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NR_dR_e,

Rd. Re, Rf a Rg nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyi, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

Sloučeniny podle vynálezu jsou antineoplastické látky, to znamená látky, schopné vyvolat inhibici růstu nádorových buněk in vitro nebo in vivo u savců, například u člověka nebo u domácích zvířat a jsou zvláště účinné proti pevným nádorům a nádorům, odolným proti působení celé řady účinných látek. Uvedenými látkami je tedy možno dosáhnout inhibice růstu uvedených buněk.

Sloučeniny podle vynálezu je možno zacílit na určitý nádor tak, že se tyto látky spojí s reakčním činidlem, schopným se vázat na antigen, spojený s nádorem. Tento antigen se může nacházet přímo v nádoru nebo v oblasti nádorových buněk. Vhodnými reakčními činidly ·· ·· · · • · ··· • · · • · · · ·· ·· ··· Μ· ·· ·· • · • * • · • · ·« ·· jsou v tomto případě polyklonální a monoklonální protilátky. Komplex sloučeniny a reakčního činidla nebo konjugát těchto složek může dále obsahovat spojovací řetězec, například svrchu uvedeného typu pro spojení účinné látky s reakčním činidlem. Součást podstaty vynálezu tedy tvoří také sloučeniny, které jsou tvořeny sloučeninami obecného vzorce I nebo II a reakčním činidlem, např. polyklonální nebo monoklonální protilátkou, schopnou se vázat na antigen, spojený s nádorovou tkání.

Součást vynálezu tvoří také farmaceutické prostředky, např. lékové formy s obsahem jednotlivé dávky jedné nebo většího počtu sloučenin podle vynálezu v kombinaci s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.

Součást podstaty vynálezu tvoří také sloučeniny obecných vzorců I nebo II, jejich dimery a konjugáty, obsahující tyto látky a reakční činidlo, schopné se vázat na antigen, spojený s nádorem, nebo soli těchto látek pro použití k léčebným účelům, s výhodou k léčení zhoubných, například pevných nádorů a použití uvedených látek pro výrobu farmaceutických prostředků pro uvedený účel.

Součást podstaty vynálezu tvoří také způsob výroby uvedených látek a nové meziprodukty, použitelné při výrobě těchto látek. Některé sloučeniny podle vynálezu je možno využít pro výrobu dalších sloučenin podle vynálezu.

Vynález bude dále popsán v souvislosti s přiloženými výkresy.

Přehled obrázků na výkresech

Na obr. 1 jsou znázorněny reprezentativní sloučeniny 1 až 9 podle vynálezu a příslušné meziprodukty 10 a 11.

9

9

9

9

99 • 9 ··

9 9 · · ··

9 9 9 · 9 9

99

Na obr. 2 jsou znázorněny reprezentativní sloučeniny 13 až 16 podle vynálezu.

Na obr. 3 jsou znázorněny reprezentativní sloučeniny 17 a 18 podle vynálezu.

V následujícím popisu znamená atom halogenu atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu. Alkylová skupina, alkoxyskupina, alkenyl a podobně mohou mít přímý nebo rozvětvený řetězec, avšak v případě jednotlivých zbytků, jako je propyl, zahrnuje tento název pouze zbytek s přímým řetězcem, izomer s rozvětveným řetězcem, jako izopropyl je vždy specificky uveden. Aryl znamená fenylový zbytek nebo bicyklický zbytek s uhlíkovým kruhem, kondenzovaný v poloze ortho a obsahující 9 až 10 atomů v kruhu, přičemž alespoň jeden z těchto kruhů je aromatický. Heteroaryl zahrnuje zbytky, spojené atomem uhlíku monocyklického aromatického kruhu s obsahem 5 nebo 6 atomů v kruhu, zbytek obsahuje atomy uhlíku a 1 až 4 neperoxidové atomy kyslíku, síry nebo skupinu N(R_y), kde R_y chybí nebo znamená atom vodíku nebo kyslíku, C1-C4alkyl, fenyl nebo benzyl, může jít také o zbytky bicyklické, heterocyklické skupiny o 8 až 10 atomech uhlíku, kondenzované v poloze ortho a odvozené zvláště od benzenového derivátu nebo derivátu, vzniklého kondenzací propylenové, trimethylenové nebo tetramethylenové dvojvazné skupiny s tímto kruhem.

Pod pojmem „inhibice“ se rozumí snížení rychlosti růstu nádorových buněk a/nebo snížení hmotnosti nádoru. Inhibice také zahrnuje úplnou regresi nádoru. To znamená, že sloučeniny podle vynálezu mohou být cytostatické nebo cytotoxické pro nádorové buňky.

• · • 0 00

000 ·· ··

0 0 • · · • 0 ·

0 0 · • 0 00

Sloučeniny podle vynálezu je možno podávat savcům, kteří trpí nádory, proti nimž jsou sloučeniny podle vynálezu účinné. Uvedené látky jsou účinné in vivo a také in vitro na buněčných liniích lidských nádorů. Jsou vhodné zvláště pro léčení pevných nádorů, pro něž není v současné době k dispozici dostatek chemotherapeutických látek. Sloučeniny podle vynálezu jsou tedy účinné např. proti epidermoidním a myeloidním nádorům v akutní (AML) nebo chronické (CML) formě. Tyto nádory zahrnují také nádory, odlišné od nádorů z malých buněk, nádory jater, nádory v krční oblasti, ledvinách, nádory nadledvinek, žaludku, jícnu, ústní dutiny, sliznic a kůže a také nádory plic, vaječníků, mléčné žlázy, tlustého střeva a melanomy včetně amelanotických podtypů. Mimo to je uvedené látky možno použít také v případě nádorů děložní sliznice, močového měchýře, slinivky břišní, v případě lymfomu, Hodgkinovy nemoci, zhoubných nádorů prostaty, sarkomů a nádorů varlat i v případě nádorů centrálního nervového systému, jako jsou mozkové nádory, neuroblastomy a nádory z krvetvorných buněk, jako jsou leukemie/lymfomy z B-buněk, myelomy, leukemie/lymfomy z T-buněk, leukemie/lymfomy z malých buněk, monocytární leukemie, myelomonocytární leukemie a leukemie z Hairyho buněk. Tyto leukemie/lymfomy mohou být akutní (ALL) nebo chronické (CLL).

Pod pojmem sacharid se rozumí monosacharidy, disacharidy, trisacharidy i polysacharidy. Do tohoto pojmu je tedy zahrnuta glukóza, sacharóza, fruktóza a ribóza a také deoxycukry, jako deoxyribóza a podobně. Sacharidové deriváty je možno snadno připravit způsobem, popsaným v mezinárodních patentových přihláškách WO 96/34005 a v WO 97/03995. Sacharid je možno snadno navázat na zbytek sloučeniny obecného vzorce I nebo II éterovou vazbou.

Pod pojmem aminokyselina se rozumí zbytky přírodních aminokyselin, jako jsou například Aia, Arg, Asn, Asp, Cys, Glu, Gin, φφ • Φ φφ φ φ φ φ φφφφ φ φ φ φ φ φ φφ φφ φ · φ · φ φ φ φ • φ • φ φφφ φφφ φ

φ φ

φ

Gly, His, Hyl, Hyp, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr a Val v D- nebo L-formě a také zbytky aminokyselin, které nemají přírodní původ, jako jsou fosfoserin, fosfothreonin, fosfotyrosin, hydroxyprolin, gamma-karboxyglutamát, kyselina hippurová, kyselina oktahydroindol-2-karboxylová, statin, 1,2,3,4-tetraisochinolin-3-karboxylová kyselina, penicillamin, ornithin, citrulin, alfa-methylalanin, p-benzoylfenylalanin, fenylglycin, propargylglycin, sarkosin a terc.butylglycin. Tento pojem zahrnuje rovněž přírodní i nepřírodní aminokyseliny, opatřené běžnou ochrannou skupinou, např. acetylovou nebo benzyloxykarbonylovou skupinou na aminoskupině nebo opatřené ochrannou skupinou na karboxylové skupině, např. C1-C6alkylovou skupinou, fenylovou nebo benzylesterovou skupinou nebo amidovou skupinou nebo alfa-methylbenzylamidovou skupinou. Další vhodné ochranné skupiny pro aminoskupinu a karboxylovou skupinu, jsou běžně známé a jsou uvedeny například v souhrnné publikaci T. W. Greene, Protecting Groups In Organic Synthesis, Wiley: New York 1981. Aminokyselina může být vázána na zbytek sloučeniny obecného vzorce I svojí karboxylovou skupinou, aminoskupinou nebo jakýmkoliv jiným způsobem, například přes atom síry cysteinu.

Pod pojmem peptid se rozumí sekvence 2 až 25 aminokyselinových zbytků ve svrchu uvedeném významu nebo jakýkoliv peptidový zbytek. Použitá sekvence může být lineární nebo cyklická. Cyklický peptid může být připraven tvorbou disulfidových můstků mezi dvěma cysteinovými zbytky v sekvenci. Peptidový zbytek může být vázán na zbytek molekuly obecného vzorce I, karboxylovou skupinou, aminoskupinou nebo jakýmkoliv jiným vhodným způsobem, například přes atom síry cysteinu. S výhodou obsahuje peptid 3 až 25 a zvláště 5 až 21 zbytků aminokyselin. Peptidové deriváty je možno připravit způsobem, uvedeným v US 4612302, US 4853371 a US 4684620 nebo způsoby, které budou popsány v následujících příkladech. Specificky uváděné peptidové sekvence jsou znázorněny s

0

0« ··

0

0

0

000 000 ·>♦ «

0« «· 0 • ·0 ·

0 0 ·

0 0 · ·· ·· aminoterminálním zakončením na levé straně a karboxylovou skupinou na pravé straně.

Bylo prokázáno, že některé peptidy se mohou specificky vázat na specifické antigeny, spojené s nádorem, způsobem, který je podobný vazbě protilátek na tyto antigeny, jak je uvedeno například v publikaci Arap a další, Science, 1998, 279, 5349, 377-380. Tímto způsobem je možno přednostně uvádět do styku peptid s uvedenou schopností, to znamená se schopností se vázat na specifické receptory na nádorových buňkách směrem k nádorové tkáni.. Na základě této vlastnosti jsou výhodným provedením vynálezu sloučeniny obecného vzorce I nebo II, obsahující zbytek peptidu, schopného specifické vazby na antigen, spojený s nádorem.

Výhodnými peptidy jsou například -Cys-Asp-Cys-Arg-Gly-Asp-Cys-Phe-Cys (sekvence ID NO:1), -Cys-Asp-Gly-Arg-Cys (sekvence ID NO:2), a -Cys-Asp-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (sekvence ID NO:3).

Je zřejmé, že sloučeniny podle vynálezu, které obsahují střed chirality, mohou existovat a mohou být izolovány v opticky aktivních a racemických formách. Některé z uvedených látek mohou být polymorfní. Je zřejmé, že vynález zahrnuje jakékoliv racemické, opticky aktivní, polymorfní nebo stereoizomerní formy sloučenin podle vynálezu nebo směsi těchto látek s popsanými žádoucími vlastnostmi. Je známo připravovat opticky aktivní formy například rozdělením racemické formy překrystalováním, syntézou z opticky aktivních výchozích látek, chirální syntézou nebo chromatografickým dělením při použití chirální stacionární fáze. Dále bude popsáno, jakje možno stanovit protinádorovou účinnost těchto látek pomocí dále popsaného testu A nebo testu B nebo při použití dalších známých zkoušek. Ve výhodným sloučeninách obecného vzorce I je absolutní stereochemie na uhlíkovém atomu, nesoucím substituenty R4 a R5, (R).

• fl flfl « flfl fl fl fl · · • flfl fl • flfl · flfl flfl • · • fl flfl • flfl • fl · ·· • flfl fl flfl · flfl flfl

Specifické hodnoty, uvedené dále pro jednotlivé zbytky nebo substituenty, jsou pouze ilustrativní. Nevylučují tedy použití jiných zbytků ve významu, který byl svrchu uveden pro jednotlivé zbytky nebo substituenty.

Pod pojmem C1-C4alkyl se rozumí methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl nebo sek.butyl, pod pojmem C1-C6alkyl se rozumí methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sek.butyl, pentyl, 3-pentyl, nebo hexyl, C1-C8alkyl může být methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sek.butyl, pentyl, 3-pentyl, hexyl, heptyl nebo oktyl, C3-C6cykloalkyl může být cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl nebo cyklohexyl, C1-C4alkoxyskupina může být methoxyskupina, ethoxyskupina, propoxyskupina, isopropoxyskupina, butoxyskupina, isobutoxyskupina nebo sek.butoxyskupina, C1-C6alkoxyskupina může být methoxyskupina, ethoxyskupina, propoxyskupina, isopropoxyskupina, butoxyskupina, isobutoxyskupina, sek.butoxyskupina, pentoxyskupina,

3- pentoxyskupina nebo hexyloxyskupina, C2-C6alkenyl znamená vinyl, allyl, 1-propenyl, 2-propenyl, 1-butenyl, 2-butenyl, 3-butenyl, 2-methyl-2-propenyl, 1-pentenyl, 2-pentenyl, 3-pentenyl, 4-pentenyl, 3-methyl-2-butenyl, 3-methyl-3-butenyl, 1-hexenyl, 2-hexenyl, 3-hexenyl,

4- hexenyl, 5-hexenyl nebo 4-methyl-3-pentenyl, C1-C6alkanoyl může být acetyl, propanoyl nebo butanoyl, halogen C1-C6alkyl může být jodmethyl, brommethyl, chlormethyl, fluormethyl, trichlormethyl, trifluormethyl, 2-chlorethyl, 2-fluorethyl, 2,2,2-trifluorethyl nebo pentafluorethyl, hydroxyC1-C6alkyl může být hydroxymethyl,

1-hydroxyethyl, 2-hydroxyethyl, 1-hydroxypropyl, 2-hydroxypropyl,

3-hydroxypropyl, 1-hydroxybutyl, 4-hydroxybutyl, 1-hydroxypentyl,

5- hydroxypentyl, 1-hydroxyhexyl nebo 6-hydroxyhexyl,

C1-C6alkoxykarbonyl může být methoxykarbonyl, ethoxykarbonyl, propoxykarbonyl, isopropoxykarbonyl, butoxykarbonyl, ··

-17 ···· .♦·· · · pentoxykarbonyl nebo hexyloxykarbonyl, C1-C6alkylthioskupina může být methylthioskupina, ethylthioskupina, propylthioskupina, isopropylthioskupina, butylthioskupina, isobutylthioskupina, pentylthioskupina nebo hexylthioskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina může být formyloxy-, acetoxy-, propanoyloxy-, butanyoloxy-, isobutanoyloxy-, pentanoyloxy-, nebo hexanoyloxyskupina, aryl může být fenyl, indenyl nebo naftyl a heteroaryl může být furyl, imidazolyl, triazolyl, triazinyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, pyrazolyl, pyrrolyl, pyrazinyl, tetrazolyl, pyridyl nebo jeho N-oxid, thienyl, pyrimidinyl nebo jeho N-oxid, indolyl, isochinolyl nebo jeho N-oxid nebo chinolyl nebo jeho N-oxid.

Specifickým významem pro Ri je hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, aryl, heteroaryl a zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu.

Dalším specifickým významem pro fy je skupina -(CH₂)_n-(X)-(Y), kde n = 0 až 4, X znamená oxyskupinu, thioskupinu, -N(R_a)- nebo chybí a Y znamená zbytek peptidu nebo C1 -C6alkyl, substituovaný zbytkem peptidu.

Dalším specifickým významem pro Ri je atom vodíku, nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, atom halogenu, methoxyskupina nebo ethoxyskupina.

Dalším specifickým významem pro Ri je skupina -(CH₂)_n-(X)-(Y), kde X znamená oxyskupinu, thioskupinu nebo skupinu -N(R_a)- a Y znamená CH₂OC(O)(C1-C4alkyl), CH₂C(O)-(CH₂)₂-O-C(O)CH₂SH, (CH₂)₂-O-(CH₂)₂halogenid, (C1-C4alkyl)-O-(C1-C4alkyl), CH₂CO₂(C1-C4alkyl), CH₂CO₂H, arylC 1 -C5alkyl, zbytek sacharidu nebo aminokyseliny nebo C1-C8alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 hydroxyskupinami nebo atomy halogenu, přičemž jakákoliv arylová

9

8 4

4 444 4

4 4 4 9 9

4 4 4 4

99 884 « 88 44

8 9 4 8 8

8 4 4 4

4 9 4 8 8 « · · · ·

448 84 48 nebo heteroarylová skupina ve významu Y je popřípadě substituována 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, atom halogenu, C1-C4alkyl nebo C1-C4alkoxyskupina.

Dalším specifickým významem pro Rj je skupina -CH2-(X)-(Y), kde X znamená oxyskupinu, thioskupinu nebo -N(R_a)- a Y znamená C1 -C8alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupinu, atom halogenu, karboxyskupina, oxoskupina, merkaptoskupina, skupina -N(Rb)(R_c), C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu, přičemž jakákoliv arylová nebo heteroarylová skupina ve významu Y je popřípadě substituována, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří Rh a Rj spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh.

Dalším specifickým významem pro R-i je skupina -(CH₂)_n-(X)-(Y), kde n = 1 nebo 2, X znamená oxyskupinu, thioskupinu nebo -N(R_a)- a Y znamená C1-C6alkyl nebo C2-C6alkenyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny oxoskupina, hydroxyskupina, karboxyskupina, atom halogenu, merkaptoskupina, nitroskupina, -N(R_b)(Rc), C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu, přičemž jakákoliv arylová nebo heteroarylová skupina ve významu Y, je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl «9 • · • 9 • ·

99«

9

9 9 • 9

99 » 9 9 9

9 9 ·

9 9 9 ·

9 9 9 • 99 99 nebo benzyl nebo tvoří R_h a Rj spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh.

Dalším specifickým významem pro Ri je -CH₂-(zbytek cysteinu, vázaný přes atom síry)-R_x, kde R_x znamená zbytek aminokyseliny nebo peptidu s obsahem 2 až 24 zbytků aminokyselin.

Dalším specifickým významem pro Rf je -CH₂-(zbytek N-acylcysteinu, vázaný přes atom síry)-R_x, kde R_x znamená zbytek aminokyseliny nebo peptidu s obsahem 2 až 24 zbytků aminokyselin.

Dalším specifickým významem pro Rt je -CH₂-(glutathion, vázaný přes atom síry).

Dalším specifickým významem pro Rt je 3-[(R)-alfa-methylbenzylaminokarbonyl]-2-(acylamino)ethylthiomethyl. Ethylová skupina v poloze 2 má s výhodou (S)-konfiguraci cysteinu.

Výhodným významem pro Rt je atom vodíku, methyl, hydroxymethyl, methoxymethyl nebo acetoxymethyl.

Specifickým významem pro R₂ je hydroxymethyl, methoxymethyl nebo acetoxymethyl.

Dalším specifickým významem pro R₂ je karboxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl nebo -C(=O)NRdR_e.

Dalším specifickým významem pro R₂ je C1-C6alkyl, substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo -C(=O)NRdR_e· • · · · · • · · · · · • · · · · · • · · · · ·· ·· ·· ·

Dalším specifickým významem pro R₂je -CH₂-(zbytek cysteinu, vázaný přes atom síry)-R_x, kde R_x znamená zbytek aminokyseliny nebo peptidů s obsahem 2 až 24 zbytků aminokyselin.

Dalším specifickým významem pro R₂ je -CH2-(zbytek N-acylcysteinu, vázaný přes atom síry)-R_x, kde R_x znamená zbytek aminokyseliny nebo peptidů s obsahem 2 až 24 zbytků aminokyselin.

Dalším specifickým významem pro R₂ je -CH₂-(glutathion, vázaný přes atom síry).

Specifickým významem pro R₃ je atom vodíku.

Specifickým významem pro R4 je methyl.

Specifickým významem pro R5 je hydroxyskupina.

Specifickým významem pro R₆ je atom vodíku.

Dalším specifickým významem pro Reje karboxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl nebo -C(=O)NRfR_g.

Dalším specifickým významem pro Reje C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidů nebo sacharidu nebo -C(=O)NR_fR_g.

Dalším specifickým významem pro R₆ je -CH₂-(zbytek cysteinu, vázaný přes atom síry)-R_x, kde R_x znamená zbytek aminokyseliny nebo peptidů s obsahem 2 až 24 zbytků aminokyselin.

Dalším specifickým významem pro R₆ je -CH₂-(zbytek

N-acylcysteinu, vázaný přes atom síry)-R_x, kde R_x znamená zbytek aminokyseliny nebo peptidu s obsahem 2 až 24 zbytků aminokyselin.

Výhodným významem pro Reje methyl nebo hydroxymethyl.

Specifickým významem pro Ryje C1-C6alkyl, substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo -C(=O)NR_dR_e.

Specifickým významem pro R₇ je také hydroxymethyl.

Specifickým významem pro R_x je peptid s obsahem 4 až 20 zbytků aminokyselin.

Dalším specifickým významem pro R_x je -Leu-Gly-Phe, -Phe-Leu-Gly, -Leu-Leu-Phe, -Gly-Phe, nebo -Leu.

Dalším specifickým významem pro R_x je -Asp-Cys-Arg-Gly-Asp-Cys-Phe-Cys (SEQ ID NO:4), -Asp-Gly-Arg-Cys (SEQ ID NO:5) nebo -Asp-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (SEQ ID NO:6).

Specifickou sloučeninou podle vynálezu je například sloučenina obecného vzorce I, v němž R₂ znamená C1-C6alkyl, substituovaný hydroxyskupinou, C1-C6alkoxyskupinou, C1-C6alkanoyloxyskupinou nebo karboxyskupinou, R₃ znamená atom vodíku,

C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu, R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, Rs znamená hydroxyskupinu, a R6 znamená C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný hydroxyskupinou, • · oo ···· · · · ·<

C1-C6alkoxyskupinou, C1-C6alkanoyloxyskupinou nebo karboxyskupinou a farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

Dalším specifickou sloučeninou podle vynálezu může být sloučenina obecného vzorce I, v němž Rf znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný hydroxyskupinou, atomem halogenu, methoxyskupinou, ethoxyskupinou nebo acetoxyskupinou,

R₂ znamená hydroxymethyl, methoxymethyl nebo acetoxymethyl, R₃ znamená atom vodíku, R₄ znamená methyl, R₅ znamená hydroxyskupinu a R6 znamená methyl nebo hydroxymethyl, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

Dalším specifickou sloučeninou podle vynálezu je sloučenina obecného vzorce I, v němž Ri znamená -(CH₂)_n-(X)-(Y), n = 0 až 4, X znamená oxyskupinu, thioskupinu, -N(R_a)-, nebo chybí, Y znamená zbytek aminokyseliny s 1 nebo 2 ochrannými skupinami a R₂ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

Další specifickou sloučeninou podle vynálezu je sloučenina obecného vzorce I, kde Ri znamená -CH₂-(zbytek N-acylcysteinu, vázaný přes atom síry), (S)-2-[(R)-alfa-methylbenzylaminokarbonyl]-2-(acylamino)ethylthiomethyl nebo (R)-2-[(R)-alfa-methylbenzylaminokarbonyl]-2-(acylamino)ethylthiomethyl a R₂ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

Specifickou sloučeninou obecného vzorce I je sloučenina vzorce

O

9

·· ·· • 9 9 • · · · 9 • · · 9 9

*..··..· nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

Specifickou sloučeninou obecného vzorce II je sloučenina vzorce

nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

Výhodnou sloučeninou podle vynálezu je sloučenina obecného vzorce I, v němž R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a Rs znamená hydroxyskupinu nebo acetoxyskupinu, přičemž absolutní stereochemie na atomu uhlíku, který nese substituenty R₄ a Rs, je (R), jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

Sloučeniny podle vynálezu je možno připravit postupy, které budou dále popsány, přičemž v jednotlivých postupech mají substituenty svrchu uvedený význam, není-li výslovně uveden pro některé substituenty jiný specifický význam.

Sloučeniny podle vynálezu, to znamená sloučeniny obecného vzorce I a II a jejich soli je možno odvodit od illudinu S, hydroxymethylacylfulvenu HMAF (to znamená sloučeniny obecného vzorce I, v němž Ri znamená CH₂OH, R₂ znamená methyl, R₃ znamená atom vodíku, R₄ znamená methyl, Rs znamená OH a Rs znamená methyl) a fulvenu (to znamená sloučeniny obecného vzorce I, v němž Ri znamená atom vodíku, R₂ znamená methyl, R₃ znamená atom vodíku, R₄ znamená methyl, R₅ znamená OH a R6 znamená

44 • 4 4 4

4 4 4

4 4 4

4 4 4

4 4 4 methyl), při výrobě sloučenin podle vynálezu se užívá známých postupů, uvedených například ve WO 91/04754 a WO 94/18151.

Sloučeninu vzorce I, v němž R₂ znamená hydroxymethyl, je možno připravit oxidací odpovídající sloučeniny vzorce I, v němž R₂ znamená methyl. Oxidaci je možno snadno uskutečnit působením oxidu seleničitého a terc.butylhydroperoxidu za podmínek, obdobných podmínkám, popsaným v příkladu 1.

Sloučeninu obecného vzorce I, v němž R-ι znamená hydroxymethyl, je možno připravit z odpovídající sloučeniny vzorce I, v němž Ri je atom vodíku, působením paraformaldehydu a kyseliny sírové. Reakce dobře probíhá za podmínek, popsaných v příkladu 2.

Sloučeninu vzorce I, v němž R₂ znamená acetoxymethyl je možno získat acylací odpovídající sloučeniny vzorce I, v němž R₂ znamená hydroxymethyl. Acylaci je možno uskutečnit anhydridem kyseliny octové za podmínek, uvedených v příkladu 3.

Sloučeninu vzorce I, v němž R₂ znamená methoxymethyl, je možno připravit reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I, v němž R₂ je hydroxymethyl, působením methyljodidu a oxidu stříbrného. Reakci je možno uskutečnit za podmínek, uvedených v příkladu 7.

Sloučeninu vzorce I, v němž Rf znamená methoxymethyl, je možno připravit reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I, v němž Ri je hydroxymethyl s metanolem a kyselinou sírovou. Reakce dobře probíhá za podmínek, popsaných v příkladu 8, část (a).

Sloučeninu vzorce I, v němž Rf znamená -CH₂-(zbytek cysteinu, vázaný přes atom síry) je možno získat reakcí odpovídající sloučeniny • · ·· • · · · • · « · · ·

• · vzorce I, v němž Ri je hydroxymethyl, s cysteinem. Reakci lze uskutečnit za podmínek, uvedených v příkladu 10.

Sloučeninu vzorce I, v němž Ri znamená -CH₂-(zbytek N-acylcysteinu, vázaný přes atom síry) je možno připravit reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I, v němž Ri znamená hydroxymethyl, s N-acylcysteinem. Reakci je možno snadno provést za podmínek, uvedených v příkladu 11.

Sloučeninu obecného vzorce I, v němž Ri znamená 2-[(R)-alfa-methylbenzylaminokarbonyl]-2-(acylamino)ethylthiomethyl, je možno připravit reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I, v němž Ri znamená -CH₂-(zbytek N-acylcysteinu, vázaný přes atom síry), s alfa-methylbenzylaminem. Reakce dobře probíhá za podmínek, uvedených v příkladu 12.

Sloučeninu vzorce I, v němž Ri znamená -CH₂-(zbytek glutathionu, vázaný přes atom síry) je možno připravit reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I, v němž R-ι znamená hydroxymethyl, s glutathionem. Reakce snadno probíhá za podmínek, uvedených v příkladu 14.

Sloučeninu obecného vzorce I, v němž Ri znamená -CH₂-(zbytek cysteinu, vázaný přes atom síry)-R_x nebo CH₂-(zbytek N-acylcysteinu, vázaný přes atom síry)-R_x je možno připravit tak, že se nechá reagovat odpovídající sloučenina vzorce I, v němž Ri znamená -CH₂-(zbytek cysteinu, vázaný přes atom síry) nebo CH₂-(zbytek N-acylcysteinu, vázaný přes atom síry) s příslušnou aminokyselinou nebo peptidem, odpovídajícím R_x. Reakce snadno probíhá za podmínek, uvedených v příkladu 15.

• 9 • · 9 · · ♦ · · 9 9 é · ··· ·

9 9 9 9 9 • 999 9

99 999

Sloučeninu obecného vzorce II je možno připravit z illudinu S způsobem, uvedených v příkladu 17.

Sloučeniny podle vynálezu je také možno připravit při použití postupů a meziproduktů uvedených v publikacích T. McMorris a další, Tetrahedron, 1997, 53, 44, 14579-14590, T. McMorris a další, J. Org. Chem. 1997, 62, 3015-3018, T. McMorris a další, Chem. Comm. 1997, 315-316, T. McMorris a další, Experientia, 1996, 52, 75-80 a také v patentových spisech US 5439942, US 5439936, US 5523490, US 5536176, WO 91/04754, WO 94/18151 a WO 98/03458. Některé sloučeniny obecných vzorců I a II je možno použít pro přípravu jiných sloučenin obecného vzorce I nebo II.

V případě, že získané látky jsou dostatečně bazické nebo kyselé pro tvorbu stálých netoxických solí s kyselinami nebo bázemi, může být vhodné podávat tyto látky ve formě solí. Jako příklady farmaceuticky přijatelných solí je možno uvést adiční soli s organickými kyselinami, vytvářejícími fyziologicky přijatelný anion, jako je tosylát, methansulfonát, acetát, citrát, malonát, tartrát, sukcinát, benzoát, alfa-ketoglutarát a alfa-glycerofosfát. Z anorganických solí je možno uvést hydrochloridy, sulfáty, nitráty, hydrogenkarbonáty a karbonáty.

Farmaceuticky přijatelné soli je možno připravit při použití běžných známých postupů, například reakcí dostatečně bazické sloučeniny, například aminu s vhodnou kyselinou, vytvářející fyziologicky přijatelný anion. V případě karboxylových kyselin je možno vytvářet soli s alkalickými kovy, například soli sodné, draselné nebo lithné nebo soli s kovy alkalických zemin, například soli vápenaté.

Sloučeniny podle vynálezu je možno zpracovávat na farmaceutické prostředky a v této formě je podávat savcům, například * φφφφ φφ φφφφ * φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φφφφ φφφ φ· φφ člověku v dávkách, upravených podle zvoleného způsobu podání, například perorálně nebo parenterálně, nitrožilně, nitrosvalově, místně nebo podkožně.

Sloučeniny podle vynálezu je možno podávat systemicky, například perorálně v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem, například inertním ředidlem nebo vstřebatelným poživatelným nosičem. Tyto materiály mohou být podávány v kapslích z tvrdé nebo měkké želatiny, mohou být lisovány na tablety nebo mohou být přimíšeny do stravy nemocného. V případě perorálního podání se účinná látka obvykle mísí s jedním nebo větším počtem pomocných látek a pak se užívá ve formě tablet, tablet pro vstřebávání ústní sliznici, kapslí, elixírů, suspenzí, sirupů, oplatek a podobně. Uvedené prostředky by měly obsahovat nejméně 0,1 % účinné látky. Obsah účinné látky v těchto prostředcích je však možno měnit a obvykle se pohybuje v rozmezí 2 až 60 % hmotnostních v jednotlivých lékových formách. Množství účinné látky by mělo vždy být takové, aby bylo dosaženo účinné koncentrace v krevním oběhu.

Tablety, pilulky, kapsle a podobně mohou obsahovat různé pomocné látky, například pojivá, jako jsou tragakanthová guma, akacie, kukuřičný škrob nebo želatina, látky pro zvýšení objemu, jako hydrogensofát vápenatý, desintegrační činidlo jako jsou kukuřičný škrob, bramborový škrob, alginová kyselina a podobně, kluzné látky, jako jsou stearan hořečnatý a sladidla, jako sacharózu, fruktózu, laktózu nebo aspartam nebo také látky pro úpravu chuti, jako mátovou silici nebo třešňovou příchuť. V případě, že použitou lékovou formou je kapsle, může tato kapsle obsahovat kromě materiálů svrchu uvedeného typu také kapalný nosič, například rostlinný olej nebo polyethylenglykol. Různé další materiály mohou být použity jako povlaky nebo k jiné modifikaci fyzikálních vlastností pevné lékové formy. Například tablety, pilulky nebo kapsle je možno opatřit ·· ·· • · 9

9 9·· • · ·

9 9 • 9 99 • · ·· 99 ·· ·· · 9 9 9 • · · · · · · ······ • * · · · 9 ··· 999 · 9 99 povlakem želatiny, vosku, šelaku, cukru, a podobně. Sirupy nebo elixíry mohou obsahovat účinnou látku, sacharózu nebo fruktózu jako sladidlo, methyl- a propylparabeny jako konzervační prostředek a mimo to barvivo a látku pro úpravu chuti, například třešňovou pomerančovou příchuť. Je samozřejmé, že jakýkoliv materiál, použitý pro výrobu lékové formy, by měl být farmaceuticky přijatelný a v podstatě netoxický v použitém množství. Mimo to může být účinná látka upravena na prostředek se zpomaleným nebo opožděným uvolněním této látky.

Účinné látky je možno podávat také nitrožilně nebo intraperitoneálně ve formě infuze nebo injekce. Roztoky účinné látky nebo její soli je možno připravit ve vodě, popřípadě ve směsi s netoxickým smáčedlem. Disperze je možno také připravit v glycerolu, kapalných polyethylenglykolech, triacetinu a směsích těchto materiálů a také v olejích. Za běžných podmínek skladování a použití budou tyto prostředky obsahovat konzervační látky k zábraně růstu mikroorganismů.

Farmaceutické lékové formy pro podání ve formě injekce nebo infuze zahrnují sterilní vodné roztoky nebo disperze nebo sterilní prášky, obsahující účinnou látku a určené pro přípravu sterilních roztoků nebo disperzí těsně před použitím, účinná látka může být popřípadě zapouzdřena v liposomech. Ve všech případech musí být výsledná léková forma sterilní, tekutá a stálá za podmínek výroby a skladování. Kapalným nosičem může být rozpouštědlo nebo kapalné disperzní prostředí, jako voda, ethanol nebo polyol, např. glycerol, propylenglykol, kapalné polyethylenglykoly a podobně, použít je možno také rostlinné oleje, netoxické glycerylestery a směsi těchto látek. Tekutost je možno upravovat například tvorbou liposomů a udržováním požadované velikosti částic v případě disperze nebo také použitím smáčedla. Jako konzervační prostředky je možno použít

09 · · 90 ·· • 9 · 9 · 8 8 8 8 9 9

9 9 98 9 9 9 9 9 9

9 9 8 8 9 9 9 9 8 8 9

9 9 9 * 9 9 0 0 9 • 9 99 999 099 Μ 09 různé antibakteriální a antifungální látky, jako jsou parabeny, chlorbutanol, fenol, kyselina sorbová, thimerosal a podobně. V řadě případů bude výhodné přidávat látky pro zajištění požadovaného osmotického tlaku, jako jsou cukry, pufry, nebo chlorid sodný. Prodloužené vstřebávání injekčních prostředků je možno zajistit zařazením látek, které oddalují vstřebávání, jako jsou monostearanhlinitý a želatina.

Sterilní injekční roztoky se připravují smísením účinné látky s požadovaným množstvím příslušného rozpouštědla a popřípadě svrchu uvedených pomocných látek podle potřeby, směs se pak sterilizuje filtrací. V případě sterilních prášků se postupuje tak, že se sterilní injekční roztoky vysuší ve vakuu a lyofilizují, čímž se získá účinná látka ve formě prášku, obsahující další složky, které byly přítomny v sušeném roztoku.

Pro místní podání je možno sloučeniny podle vynálezu podávat v čisté formě v případě, že běží o kapaliny. Obvykle se však nanášejí ve formě prostředků, které obsahují dermatologicky přijatelný nosič, pevný nebo kapalný.

Z pevných nosičů je možno uvést jemně práškové pevné látky, jako jsou mastek, hlinky, mikrokrystalická celulóza, oxid křemičitý, oxid hlinitý a podobně. Použitelným kapalným nosičem může být voda, alkoholy nebo glykoly nebo směsi vody, alkoholu nebo glykolu, v těchto látkách je možno účinné složky rozpouštět nebo dispergovat v účinných koncentracích, popřípadě ve směsi s netoxickými smáčedly. Jako pomocné látky je možno použít například vonné látky a antimikrobiální látky. Výsledné kapalné prostředky je možno nanášet pomocí vaty, použít k impregnaci obvazů nebo nanášet ve formě postřiku, například ve formě aerosolu.

99 • 9

99 » · · • 9 9 9· • 9 9 • 9 9 ·

99 • · ♦ · 99 • 9 • 9

9

999 999

9 ·

9 9

9 9 • 9 9

V kapalném nosiči je možno použít také zahušťovadla, jako jsou synthetické polymery, mastné kyseliny a jejich soli a estery, mastné alkoholy, modifikované celulózy nebo modifikované anorganické materiály, čímž se získají roztíratelné pasty, gely, mazání, mýdla a podobně pro přímou aplikaci na pokožku uživatele. Příklady vhodných dermatologických prostředků, s jejichž pomocí je možno nanášet sloučeninu podle vynálezu na pokožku, jsou obecně známé a byly popsány například v US 4608392 (Jacquet a další), US 4992478 (Geria), US 4559157 (Smith a další) a US 4820508 (Wortzman).

Vhodné dávky sloučenin podle vynálezu je možno stanovit korelací mezi jejich účinností in vitro a účinností in vivo na živočišném modelu, například na myších nebo psech, jde o známé zkoušky, vyvinuté pro analogy illudinu a popsané v US 5439936 a US 5523409 mimo to byla popsána i zkouška na účinnost u vyšších savců včetně dětí a dospělých lidí v US 4938949 (Borch a další).

Léčebně účinné množství sloučenin podle vynálezu se mění s léčeným subjektem a s nádorem, který má být léčen. Bylo zjištěno, že je možno podávat poměrně vysoké dávky reprezentativních sloučenin podle vynálezu vzhledem ke snížené toxicitě ve srovnání s toxicitou illudinu S a M. Například maximální snášená dávka illudinu S je přibližně 250 mikrogramů/kg, kdežto sloučenina 2 může být chronicky podávána v dávce 25 miligramů/kg, aniž by došlo k projevům toxicity. Dávka 30 až 112000 mikrogramů/kg hmotnosti, je zvláště vhodná pro nitrožilní podání, kdežto pro intraperitoneální podání je účinná dávka 300 až 112000 mikrogramů/kg hmotnosti. Je zřejmé, že použité množství účinné látky se může měnit v závislosti na způsoby podání. Množství použité sloučeniny nebo její soli nebo derivátů, se bude měnit také podle použité látky, podle způsobu podání, v závislosti na povaze léčeného onemocnění a na věku a celkovém stavu nemocného, výslednou dávku musí vždy určit ošetřující lékař.

0* 00

0 0

0 0 0 0

0 0

0 0 0

00

0« 00 00 0· 0*00

0 0 0 0 0

0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

000 000 00 00

Sloučeniny podle vynálezu je vhodné podávat v lékových formách s obsahem jednotlivé dávky, například 5 až 1000 mg, s výhodou 10 až 750 mg a zvláště 50 až 500 mg.

V ideálním případě by měla být účinná látka podávána k dosažení maximálních koncentrací účinné látky v plasmě v rozmezí 0.5 až 75 mikroM, s výhodou 1 až 50 a zvláště 2 až 30 mikroM. Toho je možno dosáhnout například nitrožilní injekcí roztoku účinné látky s koncentrací 0,05 až 5 %, popřípadě ve fyziologickém roztoku chloridu sodného nebo perorálním podáním 1 až 100 mg účinné látky. Žádoucí koncentrace v krevním oběhu mohou být udržovány kontinuální infuzí účinné látky v množství 0,01 až 5,0 mg/kg/h nebo přerušovanou infuzí s obsahem 0,4 až 15 mg/kg účinné látky.

Požadovanou dávku je možno podávat najednou nebo rozděleně v průběhu dne v příslušných intervalech, může jít o 2, 3, 4 nebo větší počet dílčích dávek v průběhu dne.

Cytotoxické a protinádorové vlastnosti účinných látek je možno stanovit při použití běžně známých farmakologických modelů nebo při použití dále uvedených testů A a B.

Test A: Zkouška in vitro

Aby bylo možno zjistit cytotoxické účinky, byly přidávány různé koncentrace sloučenin podle vynálezu ke kultuře buněk MV522 (buněčná linie lidského plicního karcinomu), HL60 (buňky myeloidní leukémie) a 8392 (buňky leukémie/lymfomu z B buněk. Po dobu 48 hodin a pak stanoven buněčný růst a životnost buněk vylučováním trypanové modři. Je také možno postupovat tak, že se buňky nanesou v kapalné kultuře na plotny s 96 vyhloubeními a vystaví působení φ φ φ φ • · φ • φ φφφ φ φ φ • φ · φ φφ φφ

ΦΦ ΦΦ ·· *· ΦΦΦΦ

Φ Φ ΦΦΦΦ

Φ ΦΦΦΦΦΦ

Φ Φ ΦΦΦΦ

ΦΦΦ ΦΦΦ ΦΦ ΦΦ různých koncentrací účinné látky na 2 hodiny, pak se přidá ³H-thymidin na dobu 1 až 2 hodiny a materiál se přenese na filtrační papír.

Filtrační papíry se přidají do lahviček s obsahem scintilační kapaliny a měří se radioaktivita pomocí počítače beta-záření.

V následující tabulce 1 jsou uvedeny výsledky testu A, pro reprezentativní sloučeniny podle vynálezu. Hodnoty jsou uvedeny jako průměr ± standardní odchylka, jednotkami jsou nanomoly/l, výraz NT znamená, že pokus nebyl proveden.

Tabulka 1

	2 h, IC50 (nm/l)
Sloučenina	MV522	HL60	8392
1	2640 ± 360	NT	37000 ± 2300
2	11300 ±1500	NT	NT
3	19600 ± 9700	15600 ± 4600	62000 ± 3600
4	20400 ± 6300	>40000	NT
5	24000 ± 6100	38,400 ± 9000	NT
6	NT	NT	NT
7	7700 ± 3500	6000 ± 1200	NT
8	>80000	>80000	NT
9	>50000	49800 ± 20000	NT -
13	10000 ±1800	NT	NT
14	3050 ± 550	NT	NT
15	NT	NT	NT

Test B: Zkouška in vivo

K provedení zkoušky in vivo bylo použito několik reprezentativních sloučenin podle vynálezu. Jako kontrolní látka byla použita protinádorová látka mitomycin C. Účinné látky byly podávány od 10. dne po naočkování denně intraperitoneálně po 5 po sobě • · · 0 0

0 0 0 0 0

0 000 0

0 0 0 0 0

0 0 0 0

00 000 ·

00

0 0 0

0 0 0

0 0 0 • 0 0 0

00 následujících dnů. Zvířata byla sledována tři týdny od začátku léčení. Hodnoty MTD bylo dosaženo pro kontrolní látku mitomycin C, avšak nikoliv pro sloučeniny 1 nebo 2.

Myší samice kmene BALB/c nu/nu ve stáří 4 týdnů s hmotností 18 až 22 g byly získány od Simonsen lne. (Gilroy CA) a udržovány v athymické myší kolonii na University of California, San Diego CA v nepřítomnosti patogenních organismů v klecích s filtry HEPA. Zvířatům byla podávána sterilizovaná potrava a voda podle libosti. Zvířata byla umístěna po 5 v klecích z plastické hmoty, větranými přes polyesterové filtry. Personál, který zacházel se zvířaty užíval čisté sterilizované pláště, rukavice, obličejové masky, pokrývky hlavy i boty. Všechny pokusy byly prováděny podle pokynů NIH „Guide for Care and Use of Animals“ podle University Institutional Animal Care and Use Committee (Protocol 3-006-2).

Buněčná linie plicního karcinomu MV522 byla odvozena podle Kelner a další, Anticancer Res., 15: 867-872 a 873-878, 1995 a udržována v prostředí RPMI 1640 bez obsahu antibiotik (Mediatech, Herndon, VA), doplněném 10 % fetálního telecího séra a 2 mM glutaminu v inkubátoru se zvlhčenou atmosférou oxidu uhličitého, udržovaném na teplotě 37 °C.

Myši byly náhodně rozděleny do skupin po pěti zvířatech při počátečních pokusech a do skupin po 16 až 20 zvířatech pro potvrzení účinnosti analogu. Každé zvíře bylo označeno na uchu a sledováno jednotlivě v průběhu celého pokusu. Myším bylo ve formě injekce podáno v oblasti ramene 10 milionů buněk MV522 při jednom očkování. Po deseti dnech byly podkožní nádory velké přibližně 3x3 mm a zvířatům byla podána účinná látka. Pak byl sledován vliv účinné látky na prodloužení života.

• · · · • · · · • * ··*

9 · * 9

9 9 9

9 9 9 '9 • ♦

99

9 9 * • 9 9 9

9 9 9 9

9 9 9

99

Přestože buněčná linie MV522 vyvolává u myší uhynutí metastázami, byl sledován také růst primárního nádoru od prvního dne léčení v intervalech jednotlivých týdnů. Velikost nádorů byla měřena ve dvou na sebe kolmých směrech. Hmotnost nádoru byla stanovena podle rovnice hmotnost = (šířka)² x délka/2. Relativní hmotnost RW byla vypočítána ke standardizaci variability velikosti nádorů u pokusných skupin na počátku léčení při použití vzorce RW = Wt/Wi, kde Wi je hmotnost nádoru u daného zvířete na počátku léčení a Wt je hmotnost nádoru po určité době od začátku léčení. Zvířata byla po určité době usmrcena a orgány byly sledovány na přítomnost metastáz.

Při srovnání byly použity křivky pro přežívání zvířat podle Kaplana a Meiera. Pro srovnání relativní hmotnosti nádorů mezi jednotlivými skupinami zvířat byla použita běžná analýza ANOVA a po ní mnohočetný srovnávací test podle Tukey-Kramera podle publikace Kelner a další, Anticancer Res., 15: 867-872 a 873 a 878, 1995. Hodnoty byly statisticky významné při (p) < 0,05.

Údaje z testu B pro reprezentativní sloučeniny podle vynálezu jsou uvedeny v tabulce 2. Bylo použito 8 zvířat v kontrolní skupině a vždy 4 zvířata pro každou pokusnou skupinu. Uvedené hodnoty znamenají relativní hmotnost nádoru, to znamená, Wt/Wi (ve dni 10 byla tato hodnota 1,0). Účinné látky byly podávány intraperitoneálně ve dnech 10, 11, 12, 13 a 14 (QD x 5 dnů).

• · · · ·· 44

4 9 9 9 9 9 4 4 4 9

9 444 9 9 4 4 4 4 • 9 9 4 9 · 4 4 4 4 4 4

9 4 4 4 9 · « « · ·· 94 444 444 94 49

Tabulka 2

Sloučenina	Den 17	Den 24	Den 31
Kontrola (fyziologický roztok NaCl)	4,3 ± 0,7	7,0 ± 1,3	11,8 ± 3,0
1 (14 mg/kg)	1,4 ± 0,7	7,0 ± 1,3	11,8 ± 3,0
2 (35 mg/kg)	2,1 ± 0,2	3,3 ± 0,3	4,0 ± 0,9
13 (32 mg/kg)	2,3 ±0,5	4,1 ± 0,8	4,7 ± 1,5
14 (28 mg/kg)	3,2 ± 0,6	4,1 ± 0,8	6,0 ± 1,8

Údaje z tabulek 1 a 2 ukazují, že reprezentativní sloučeniny podle vynálezu jsou účinné cytotoxické a protinádorové látky.

Vynález bude dále osvětlen následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu. V příkladové části jsou teploty tání uvedeny bez opravy, ¹H a ¹³C NMR spektra byla měřena při 300 a 75 MHz, hmotové spektrum s vysokou rozlišovací schopností bylo stanoveno na University of Minnesota Mass Spectrometry Service Laboratory, Chromatografie byla prováděna na silikagelu Davisil s velikostí Částic 230 až 425 mesh (Fisher Scientific) při použití směsi ethylacetátu a hexanů jako elučního činidla, analytická chromatografie na tenké vrstvě TLC byla prováděna na silikagelových plotnách Whatman 4420 222, reakce byly běžně sledovány pomocí TLC. Illudin S, hydroxymethylacylfulven HMAF a fulven byly připraveny svrchu uvedenými postupy, například podle mezinárodních patentových přihlášek WO 91/04754 a WO 94/18151.

Příklady provedení vvnálezu

Příklad 1

Sloučenina 1 (sloučenina vzorce I, kde Ri je atom vodíku, R₂ je hydroxymethyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, Rs je hydroxyskupina a R₆ je methyl.

• · flfl • flfl · • flfl flfl fl flfl flfl • flfl fl • fl flfl · • fl flfl • flfl · • flfl · • · · · · • flfl ·

K míchanému roztoku 6,9 g, 32 mmol acylfulvenu v 7,0 ml ethylacetátu EtOAc se přidá 1,75 g, 15,7 mmol 99% oxidu seleničitého a 6 ml, 60 mmol 90% terc.butylhydroperoxidu s hustotou 0,901. Směs se míchá 24 hodin při teplotě místnosti a pak se dělí mezi EtOAc a 3 x 3 ml nasyceného sulfitu sodného, načež se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného. Organické extrakty se vysuší síranem hořečnatým a surový produkt se chromatografuje, čímž se ve výtěžku 12 % získá 922,5 mg výsledné látky ve formě žlutooranžové gumy a mimo to se ve výtěžku 84 % získá 5,8 g acylfulvenu.

¹H NMR (CDCIs) : 0,76 (ddd, 1H), 1.14 (ddd, 1H), 1.27 (ddd, 1H), 1.36 (s, 3H), 1.54 (ddd, 1H), 2.03 (s, 3H), 4.02 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 6.67 (s, 1H), 7,29 (s, 1H).

¹³C NMR (CDCI₃) : 197.9, 161.5, 146.0, 140.2, 132.9, 127.0, 119.8,

76.6, 59.9, 37.5, 27.7, 17.0, 14.7, 9.9.

MS m/e 232 (M⁺), UV max. vlnová délka (EtOH) 327.2 nm (e 7631).

Příklad 2

Sloučenina 2 (sloučenina vzorce I, kde R-ι je hydroxymethyl, R2 je hydroxymethyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, R₅ je hydroxyskupina a R₆ je methyl.

36,3 g paraformaldehydu se přidá k 275 ml 1,5 M roztoku kyseliny sírové a 300 ml Μβ2<30. Směs se míchá a zahřívá k rozpuštění pevné látky. Pak se roztok zchladí na 0 °C a k roztoku se přidá 922,50 mg, 3,98 mmol sloučeniny 1 a roztok se míchá a současně se nechá zteplat na teplotu místnosti. Po 24 hodinách se oranžovožlutá směs extrahuje 2 x 300 ml EtOAc, extrakty se spojí, promyjí se 30 ml hydrogenkarbonátu sodného a pak nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický extrakt se vysuší síranem hořečnatým. Odstraněním rozpouštědla a chromatrografií odparku na silikagelu při použití směsi ethylacetátu a hexanu jako elučního činidla

4 44

4 4

4 44«

4 4 • 4 4 4 4 •4 44 444

4 4 4 • 4 4

4 4

4 4

4 4 4 >4 «4 se ve výtěžku 34 % získá 357,3 mg výsledného produktu ve formě tmavě žlutooranžové gumy.

¹H NMR (CDCb) : 0-79 (ddd, 1H), 1.16 (ddd, 1H), 1.26 (ddd, 1H), 1,38 (s, 3H), 1.41 (ddd, 1H), 2.20 (s, 3H), 3.90 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.74 (s, 2H), 7,25 (s, 1H).

MS m/e 262 (M⁺), UV max. vlnová délka EtOH 330.0 nm (e 5011).

Příklad 3

Sloučenina 3 (sloučenina vzorce I, kde Rf je atom vodíku, R₂ je acetoxymethyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, R₅ je hydroxyskupina a R₆ je methyl.

K míchanému roztoku 76,0 mg, 0,328 mmol sloučeniny 1 ve 2 ml anhydridu kyseliny octové se při teplotě místnosti přidá 126,2 mg, 1,54 mmol bezvodého acetátu sodného. Směs se míchá 24 hodin při teplotě místnosti a pak se zfiltruje k odstranění NaOAc. Roztok se 4 hodiny uloží za sníženého tlaku, načež se surový produkt dělí mezi EtOAc a nasycený roztok hydrogenkarbonátu sodného, promyje se nasyceným roztokem chloridu sodného a suší síranem hořečnatým. Po odpaření se surový produkt chromatografuje na silikagelu při použití směsi ethylacetátu a hexanu, čímž se ve výtěžku 56 % získá 50 mg výsledného produktu ve formě žluté gumy.

¹H NMR (CDCb) : 0.77 (ddd, 1H), 1.16 (ddd, 1H), 1.34 (ddd,

1H), 1.38 (s, 3H), 1.58 (ddd, 1H), 2.06 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 4.99 (s, 2H), 6.69 (s, 1H), 7.27 (s, 1H).

¹³C NMR (CDCb) : 197.9, 170.8, 163.6, 140.5, 140.0, 132.8, 126.7,

121.9, 76.7, 61.3, 37.9, 27.8, 20.9, 17.3, 15.3, 10.3.

• · ··· · · · · · · • · · · * * ······ • · · · 4» 4» «·· · ·· ·· ··· ··· ftt »·

Příklad 4

Sloučenina 4 (sloučenina vzorce I, v němž Rf je acetoxymethyl, R₂ je hydroxymethyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, R₅ je hydroxyskupina a Rg je methyl)

K míchanému roztoku 430 mg, 1,49 mmol sloučeniny 10 ve 3 ml EtOAc se přidá 186 mg, 1,67 mmol 99% oxidu seleničitého a pak ještě 0,40 ml, 4,0 mmol 90% terc.butylhydroperoxidu s hustotou 0,901.

Směs se míchá 4 dny při teplotě místnosti a pak se dělí mezi EtOAc a 3 x 3 ml nasyceného sulfitu sodného, promyje se nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem hořečnatým. Po odpaření se surový produkt chromatografuje, čímž se ve výtěžku 2 % získá 8,5 mg výsledného produktu ve formě žluté gumy.

¹H NMR (CDCI₃) : 0.79 (ddd, 1H), 1.17 (ddd, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.43 (ddd, 1H), 1.52 (ddd, 1H), 2.09 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 3.93 (s, 1H), 4.65 (q, 2H), 5.21 (q, 2H), 7.32 (s, 1H).

MS m/e 304 (M⁺), UV max. vlnová délka EtOH 330.6 nm (e 5950).

Meziprodukt vzorce 10 je možno připravit následujícím způsobem, a. Sloučenina 10

Bezvodý octan sodný se přidá k 6 ml míchaného roztoku 1,4 g,

5,7 mmol HMAF v anhydridu kyseliny octové při teplotě místnosti. Po 18 hodinách se směs zfiltruje a výsledný roztok se uloží na 4 hodiny za sníženého tlaku. Výsledný materiál se dělí mezi etylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného, pak se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného a výsledný etylacetátový roztok se suší síranem hořečnatým. Pak se roztok odpaří a čistí chromatografií na silikagelu při použití směsi ethylacetátu a hexanu jako elučního činidla, čímž se ve výtěžku 85 % získá 1,4 g sloučeniny 10 ve formě žlutooranžové gumy.

¹H NMR (CDCI₃) : 0.74 (ddd, 1H), 1.11 (ddd, 1H), 1.36 (s, 3H), 1.51 (ddd, 1H), 2.04 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 3.90 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 7.11 (s, 1H).

Příklad 5

Sloučenina 5 (sloučenina vzorce I, v němž Rt je acetoxymethyl, R₂je acetoxymethyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, R₅ je hydroxyskupina a R6 je methyl)

K míchanému roztoku 2 mg, 0,0066 mmol sloučeniny 4 v 15 mikrolitrech methylenchloridu a 135 mikrolitrech anhydridů kyseliny octové se přidá 1 mg, 0,038 mmol octanu sodného. Reakční směs se míchá 4 hodiny při teplotě místnosti, načež se pevný podíl odfiltruje. Směs se uloží za sníženého tlaku k odstranění anhydridů kyseliny octové. Surový produkt se pak dělí mezi ethylacetát a nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného, promyje se nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší síranem hořečnatým. Po odpaření se odparek chromatografuje na silikagelu při použití směsi ethylacetátu a hexanu, čímž se ve výtěžku 40 % získá 0,9 mg produktu ve formě žluté gumy. ¹H NMR (CDCls) : 0.79 (ddd, 1H), 1.15 (ddd, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.40 (ddd, 1H), 1.58 (ddd, 1H), 2.09 (s, 3H), 2.093 (s, 3H), 2.10 (s, 3H),

3.89 (s, 1H), 5.08 (s, 2H), 5.17 (s, 2H), 7.25 (s, 1H).

MS m/e 346 (M⁺), UV max. vlnová délka EtOH 332.1 nm (e 8378).

Příklad 6

Sloučenina 6 (sloučenina vzorce I, v němž R-ι je hydroxymethyl, R₂ je acetoxymethyl, R₃je atom vodíku, R₄ je methyl, R₅ je hydroxyskupina a R6 je methyl)

K míchanému roztoku 76,0 mg, 0,290 mmol sloučeniny 2 v

1,5 ml anhydridů kyseliny octové se přidá 45,3 mg, 0,552 mmol octanu sodného. Reakční směs se míchá 75 minut při teplotě místnosti a pak ·· ·· · · ·· ·· ··· ·· ·· · · · « ····· · · ···· • · · · · · ······

A ···· · · ····

4U ·· ·· ··· ··· ·· ·· se pevný podíl odfiltruje. Směs se dělí mezi ethylacetát a nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného, promyje se nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem hořečnatým. Pak se extrakt odpaří za sníženého tlaku a odparek se chromatografuje na silikagelu při použití směsi ethylacetátu a hexanu, čímž se získá 6,9 mg sloučeniny 4 ve formě žluté gumy, 10,0 mg sloučeniny 2 ve formě žlutooranžové gumy, menší množství dalších 3 produktů včetně sloučeniny 5 a mimo to se ve výtěžku 11,3 % získá 10,0 mg výsledného produktu ve formě žluté gumy.

¹H NMR (CDCb) : 0.81 (ddd, 1H), 1.17 (ddd, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.60 (ddd, 1H), 2.06 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 3.89 (s, 1H), 4.74 (m, 2H), 5.03 (m, 2H), 7.23 (1H).

MS m/e 304 (M⁺), UV max. vlnová délka EtOH 331.3 nm (e 5921).

Příklad 7

Sloučenina vzorce 7 (sloučenina vzorce I, v němž Ri je atom vodíku,

R₂ je methoxymethyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, R5 je hydroxyskupina a R₆ je methyl)

K míchanému roztoku 300 mg, 1,29 mmol sloučeniny 1 v 10 ml CH₃ CN se přidá 1 ml CH3I a 110 mg, 0,475 mmol Ag₂O. Směs se míchá 3 dny při teplotě místnosti a pak se zfiltruje a odpaří. Odparek se chromatografuje na silikagelu při použití směsi ethylacetátu a hexanu, čímž se získá 133 mg sloučeniny 1 a mimo to se ve výtěžku 17 % získá 53 mg výsledného produktu jako tmavě oranžové gumy. ¹NMR (CDCb) : 0.76 (ddd, 1H), 1.13 (ddd, 1H), 1.34 (ddd, 1H), 1.38 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 3.41 (s, 3H), 3.96 (s, 1H), 4.35 (s, 2H), 6.66 (s,

1H), 7.28 (s, 1H).

¹³C NMR (CDCb) : 197.8, 161.8, 143.3, 140.2, 133.1, 126.7, 120.9,

76.6, 69.6, 58.3, 37.6, 27.8, 17.1, 14.9, 10.0.

• · • ·

Příklad 8

Sloučenina 8 (sloučenina vzorce I, v němž Rj je methoxymethyl, R2 je hydroxymethyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, R₅ je hydroxyskupina a R₆ je methyl)

K míchanému roztoku 830 mg, 3,19 mmol sloučeniny 11 v 10 ml ethylacetátu se přidá 150 mg, 1,35 mmol 99% oxidu seleničitého a pak ještě 1 ml, 10.0 mmol terc.butylhydroperoxidu s hustotou 0,901. Reakční směs se míchá 5 dnů při teplotě místnosti a pak se dělí mezi diethylether a nasycený sulfid sodný, promyje se nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší síranem hořečnatým. Po odpaření se surový materiál chromatografuje, čímž se ve výtěžku 5 % získá 47,2 mg výsledného produktu ve formě tmavě oranžové gumy.

¹H NMR (CDCI₃) : 0.74 (ddd, 1H), 1.08 (ddd, 1H), 1.32 (s, 3H), 1.33 (ddd, 1H), 1.47 (ddd, 1H), 2.08 (s, 3H), 3.14 (brs, 1H), 3.35 (s, 3H),

4.41 (q, 2H), 4.51 (br s, 2H), 7.28 (s, 1H).

a. Sloučenina 11

Sloučenina 11, použitá v tomto příkladu jako meziprodukt, je sloučenina vzorce I, v němž R1 je methoxymethyl, R2 je methyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, R₅ je hydroxyskupina a R₆ je methyl a je možno ji připravit následujícím způsobem.

K míchanému roztoku 320 mg, 1,3 mmol HMAF ve 3 ml Me₃CO se přidají 3 ml methanolu a 3 ml 1 M roztoku kyseliny sírové. Reakční směs se míchá 24 hodin při teplotě místnosti a pak se extrahuje diethyletherem. Extrakty se spojí, promyjí se nasyceným hydrogenuhličitanem sodným a pak nasyceným chloridem sodným, načež se vysuší síranem hořečnatým. Po odpaření se odparek chromatografuje na silikagelu při použití na směsi ethylacetátu a hexanu, čímž se ve výtěžku 86 % získá 290 mg sloučeniny 50 ve formě tmavě oranžové gumy.

¹H NMR (CDCI₃) : 0.62 (ddd, 1H), 0.98 (ddd, 1H), 1.24 (ddd, 1H), 1.27 s, 3H), 1.37 (ddd, 1H), 2.00 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 3.91 (br s, 1H), 4.29 (q, 2H), 7.0 (s, 1H).

¹³C NMR (CDCb) : 197.6, 159,7, 142,6, 138.8, 134.3, 129.7, 126.6,

75.9, 65.3, 57.3, 37.3, 27.3, 15.7, 13.9, 12.9, 9.1.

Příklad 9

Sloučenina 9 (sloučenina vzorce I, v němž Ri je methoxymethyl, R₂ je methoxymethyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, R₅ je hydroxyskupina a Re je methyi)

K míchanému roztoku 240 mg, 0,87 mmol sloučeniny 8 v 15 ml CH₃CN se přidá 1,5 ml CH₃I a 150 mg, 0,647 mmol Ag₂O. Reakční směs se míchá 48 hodin při teplotě místnosti, načež se zfiltruje a odpaří. Odparek se chromatografuje na silikagelu při použití směsi ethylacetátu a hexanu, čímž se ve výtěžku 10 % získá 25 mg výsledného produktu ve formě žlutooranžové gumy.

¹H NMR (CDCb) : 0.76 (ddd, 1H), 1.11 (ddd, 1H), 1.37 (s, 3H), 1.40 (ddd, 1H), 1.53 (ddd, 1H), 2.13 (s, 3H), 3.36 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 3.91 (s, 1H), 4.37 (q, 2H), 4.43 (q, 2H), 7.27 (s, 1H).

¹³C NMR (CDCb) : 198.0, 163.4, 142.8, 139.1, 132.6, 132.0, 127.2,

76.6, 67.2, 65.5, 58.3, 57.8, 38.1, 27.5, 16.3, 14.8, 9.8.

Příklad 10

Sloučenina 12 [sloučenina vzorce I, v němž Ri je -CH₂-(cystein, vázaný přes atom síry), R₂ je methyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, Rs je hydroxyskupina a R6 je methyl]

K roztoku HMAF ve směsi acetonu a 1 M roztoku kyseliny sírové v poměru 1:1 se přidá ekvivalentní množství cysteinu. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Pak se přidá velké množství ethylacetátu a voda se odstraní síranem hořečnatým. Přidá se také

Φ Φ 4

Φ Φ

Φ Φ pevný hydrogenuhličitan sodný k neutralizaci kyseliny sírové. Roztok se zfiltruje, odpaří a odparek se chromatografuje, čímž se získá sloučenina 102 ve formě žluté gumy.

¹H NMR (CDCb) : 0.78 (m, 1H), 0.89 (m, 1H), 1.06 (m, 1H), 1.31 (s, 3H), 1.43 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.91 - 4.02 (m, 8H), 7.04 (s, 1H).

Příklad 11

Sloučenina 13 [sloučenina vzorce I, v němž Rj je -CH₂-(N-acylcystein, vázanýjDřes atom síry), R₂je methyl, R₃je atom vodíku, R₄ je methyl, R₅ je hydroxyskupina a R6 je methyl]

K roztoku 36 mg, 0,146 mmol HMAF ve 3 ml směsi 1 M roztoku kyseliny sírové a acetonu v poměru 1:1 se při teplotě místnosti přidá

22,4 mg, 0,137 mmol N-acetylcysteinu.

Směs se míchá 22 hodin a pak se extrahuje ethylacetátem. Organické extrakty se promyjí nasyceným hydrogenuhličitanem sodným a pak nasyceným chloridem sodným, načež se vysuší síranem hořečnatým. Po odpaření se surový produkt chromatografuje při použití směsi ethylacetátu a hexanu s přidáním 2 až 5 % kyseliny octové, čímž se ve výtěžku 85 % získá 45,5 mg sloučeniny 103 ve formě žluté gumy.

¹H NMR (CDCls) : 0.72 (m, 1H), 1.09 (m, 1H), 1.23 (m, 1H), 1.36 (s, 3H), 1.47 (m, 1H), 2.07 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.97 (m,

1H), 3.14 (m, 1H), 3.82 (dd, 3.82), 4.80 (m, 2H), 6.56 (d, J = 7.2 Hz),

7.10 (s,1H).

MS m/e 391 (M⁺), 373, 229, 185, HRMS pro C₂₀H₂₅NO₅S vypočteno 391,1455, nalezeno 391,1452.

Příklad 12

Sloučenina 14 (sloučenina vzorce I, v němž Ri znamená (S)-2-[(R)44 • · ·· ·· · · ··

-alfa-methylbenzylaminokarbonyl]-2-(acylamino)ethylthiomethyí, R₂ je methyl, R₃ je atom vodíku, R4 je methyl, R₅je hydroxyskupina a Rs je methyl)

K roztoku 40 mg, 0,102 mmol sloučeniny 13 v 1 ml methylenchloridu se přidá 20 mg, 0,132 mmol N-hydroxybenzotriazolu, 20 mikrolitrů, 0,12 mmol Ν,Ν-diisopropylkarbodiimidu a 12 mikrolitrů, 0,093 mmol (d)-(+)-alfa-methylbenzylaminu. Směs se míchá 1,5 hodiny při teplotě místnosti a pak se dělí mezi ethylacetát a vodu. Organický extrakt se vysuší síranem hořečnatým. Po odpaření se surový produkt chromatografuje, čímž se ve výtěžku 73 % získá 33,6 mg sloučeniny 14 ve formě žluté gumy.

¹H NMR (CDCI3) : 0.70 (m, 1H), 1.07 (m, 1H), 1.29 (m, 1H), 1.35 (s, 3H), 1.48 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.51 (m, 1H), 1.93 (s, 3H), 2.09 (s, 3H),

2.10 (s, 3H), 2.91 (m, 2H), 3.84 (dd, 2H), 4.61 (m, 1H), 5.03 (m, 1H), 6.64 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 7.26 (m, 5H).

¹³C NMR (CDCb) : 197.5, 170.4, 169.2, 159.7, 142.6, 142.00, 138.3,

134.9, 129.8, 128.7, 127.4, 126.4, 125.9, 77.4, 52.5, 49.3, 37.7, 34.4,

29.8,27.6, 23.1, 22.1, 16.3, 14.3, 13.1, 9.5.

HRMS pro C28H₃₄N2O₄S vypočteno 494,2241 a nalezeno 494,2225.

Příklad 13

Sloučenina 15 (sloučenina vzorce I, v němž Ri znamená (R)-2-[(R)alfa-methylbenzylaminokarbonyl]-2-(acylamino)ethylthiomethyl, R₂ je methyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, R₅ je hydroxyskupina a R₆ je methyl)

Při chromatografií z příkladu 12 bylo také získáno ve výtěžku 13 % celkem 5,3 mg sloučeniny 15 ve formě žluté gumy, ¹H NMR (CDCI₃) : 0.70 (m, 1H), 1.07 (m, 1H), 1.32 (m, 1H), 1.34 (s, 3H), 1.45 (m, 1H), 1.48 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 2.03 (s, 3H), 2.05 (s, 6H),

2.76 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 3.73 (dd, 2H), 4.50 (m, 1H), 5.03 (m, 1H), ·· ·· • 9 ·· ··

9

9 99

6.46 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 7.31 (m, 5H)

HRMS pro C28H34N2O4S vypočteno 494,2241, nalezeno 494,2238.

Příklad 14

Sloučenina 16 [sloučenina vzorce I, v němž Rf znamená -CH₂-(glutathion, vázaný přes atom síry), R₂je methyl, R₃ je atom vodíku,

R₄ je methyl, R5 je hydroxyskupina a R₆ je methyl]

Sloučeninu 16 je možno připravit způsobem podle příkladu 10 s tím rozdílem, že se derivát cysteinu nahradí derivátem glutathionu.

Příklad 15

Obecný postup pro přípravu sloučenin, v nichž R1 znamená -CH₂-(cystein, vázaný přes atom síry)-peptid, -CH₂-(cystein, vázaný přes atom síry)-aminokyselina, -CH₂-(N-acylcystein, vázaný přes atom síry)-peptid nebo -CH₂-(N-acylcystein, vázaný přes atom síry)-aminokyselina.

Při použití syntézy peptidů na pevné fázi je možno známým způsobem kombinovat aminokyseliny Leu, Phe a Gly tak, že se získají následující tripeptidy a dipeptidy, vázané na pevnou pryskyřici.

-Leu-Leu-Leu	-Leu-Leu-Phe	-Leu-Leu-Gly
-Leu-Phe-Leu	-Leu-Phe-Phe	-Leu-Phe-Gly
-Leu-Gly-Leu	-Leu-Gly-Phe	-Leu-Gly-Gly
-Phe-Leu-Leu	-Leu-Leu-Phe	-Phe-Leu-Gly
-Phe-Phe-Leu	-Phe-Phe-Phe	-Phe-Phe-Gly
-Phe-Gly-Leu	-Phe-Gly-Phe	-Phe-Gly-Gly
-Gly-Leu-Leu	-Gly-Leu-Phe	-Gly-Leu-Gly
-Gly-Phe-Leu	-Gly-Phe-Phe	-Gly-Phe-Gly
-Gly-Gly-Leu	-Gly-Gly-Phe	-Gly-Gly-Gly

-Leu-Leu	-Leu-Phe	-Leu-Gly
-Phe-Leu	-Phe-Phe	-Phe-Gly
-Gly-Leu	-Giy-Phe	-Gly-Gly

Jako pevná fáze pro tyto reakce byla použita kyselá pryskyřice s následující strukturou, kde P znamená polystyrendivinylbenzenovou pryskyřici

První, N-(9-fluorenylmethoxykarbonylovou) skupinou chráněná aminokyselina byla na pryskyřici navázána tvorbou vazby mezi C-terminálním zakončením a hydroxylovou skupinou pryskyřice při použití směsi DIPC (diisopropylkarbodiimid) a DMAP (4-dimethylaminopyridin). Výtěžek v procentech byl po vazbě vypočítán a v případě, že byl nižší než 90 %, byla vazba opakována tak dlouho, až byl výtěžek v procentech vyšší než 90 %. Pak byla ochranná skupina Fmoc z první aminokyseliny odstraněna působením 20% piperidinu v 1-methyl-2-pyrrolidinonu, NMP. K ověření výsledku odstranění ochranné skupiny byl použit Kaiserův test. Ke vzorku byla přidána 3 Kaiserova reakční činidla, ninhydrin, fenol a kyanid draselný za vzniku světle žlutavého roztoku. Směs byla zahřívána 3 minuty na 100 °C a v případě, že se barva roztoku změnila na tmavě purpurovou, bylo možno považovat skupinu Fmoc za odstraněnou. Další aminoskupina byla navázána tvorbou peptidové vazby při použití směsi DIPC/HOBT (1-hydroxybenzotriazol). Jako rozpouštědlo pro odstranění ochranné skupiny byl užit NMP a také k promývání a k vysušení byl užit dichlormethan. Pak byl opět použit Kaiserův test, v

9

9 «

9 99

9 9

9 9 ♦ « 9 9 *

9 9 9

9 9 9

9 99 případě, že nedošlo ke změně barvy, byla vazba úspěšná. Vazná reakce byla opakována s dalšími aminokyselinami. Sloučenina 13 byla navázána na poslední aminokyselinu nebo na peptid při použití dichlormethanu jako rozpouštědla. Pro navázání sloučeniny 13 nebyl jako rozpouštědlo použit NMP vzhledem k tomu, že tato látka vyvolává inverzi středu chirality v cysteinu a vzniká racemická směs. Mimo to při vazné reakci se sloučeninou 13 nebyl použit HOBT vzhledem k tomu, že také tato látka může způsobit tvorbu směsi produktů. Pak byl peptid z pryskyřice odštěpen působením 10% kyseliny octové v dichlormethanu. Produkty byly podrobeny zkouškám v ultrafialovém světle a pomocí hmotové spektrometrie. HMAF má dvě absorbční maxima v ultrafialovém světle při vlnové délce 210 a 330 nm, takže přítomnost produktů bylo možno potvrdit přítomností těchto dvou pásů. Hmotová spektroskopie byla rovněž použita k potvrzení přítomnosti požadovaných produktů.

Při použití tohoto obecného postupu byla sloučenina 13 navázána na 36 svrchu uvedených tripeptidů a dipeptidů a také na aminokyselinu Leu, Phe a Gly jednotlivě, čímž bylo získáno 39 sloučenin podle vynálezu. N-acetylovou skupinu je možno z těchto látek odstranit při použití obdobných podmínek jako v příkladu 11, čímž se získá dalších 39 sloučenin podle vynálezu. Ve sloučenině obecného vzorce I, může tedy R_x s výhodou znamenat Leu, Phe, Gly nebo kterýkoliv ze svrchu uvedených tripeptidů a dipeptidů.

Příklad 16

Sloučenina 17 (sloučenina vzorce I, v němž Ri je (S)-2-(2-karboxypyrrolidin-1-ylkarbonyl)propylthiomethyl, R2 je methyl, R3 je atom vodíku, R4 je methyl, R5 je hydroxyskupina a R6 je methyl)

Sloučeninu 17 je možno připravit obdobným způsobem jako sloučeninu z příkladu 10 s tím rozdílem, že se cystein nahradí 1-(3• ·

94

4 4 4 • 4 4 4

4 4 4 9 • 4 4 4 ·· * · · • 4 9 94

4 4 4 • 4 9 4

44 • 4 44

-merkapto-2-methyl-1-oxopropyl)-L-prolinem, to znamená captoprilem.

Příklad 17

Sloučenina 18 (sloučenina vzorce II, v němž R₂ je methyl, R₃ je atom vodíku, R₄ je methyl, R5 je hydroxyskupina, Reje methyl a R7 hydroxymethyl.

178,5 mg illudinu S se rozpustí ve 2,0 ml anhydridu kyseliny octové a přidá se 96 mg octanu sodného. Po 24 hodinách se získá směs monoacetátu a diacetátu. 171 mg monoacetátu se rozpustí v dichlormethanu a přidá se 695 mg pyridiniumdichromanu. Směs se míchá 21 hodin při teplotě místnosti. Po zpracování směsi se získá 118 mg dehydroilludin S-monoacetátu, který se rozpustí v 5 ml acetonu a 3 ml 1 M kyseliny sírové, po 12 hodinách stání se získá 66 mg sloučeniny 18.

¹H NMR (CDCb) : 0.63 (1H), 1.13 (1H), 1.23 (4H), 1.38 (4H), 2.05 (3H), 3.62 (1H), 3.76 (1H), 6.82 (1H).

Příklad 18

Dále budou uvedeny reprezentativní farmaceutické lékové formy, obsahující sloučeniny vzorce I nebo II (sloučenina X) a určené pro léčebné nebo preventivní použití u člověka.

(i) tableta 1 mg/tableta sloučenina X 100,0 laktóza 77,5 polyvinylpyrrolidon 15,0 sodná sůl zesítěné karmelózy 12,0 mikrokrystalická celulóza 92,5 stearan hořečnatý 3,0

300

99

9 9 9

9 9 9

9 9 9

9 9 9

9 9 9

99 • ·9

9 9 99 • 9 9 9 • 9 9 9

9 9

(ii) tableta 2	mg/tableta
sloučenina X	20,0
mikrokrystalická celulóza	410,0
škrob	50,0
sodná sůl glykolátu škrobu	15,0
stearan hořečnatý	L0 500
(iii) kapsle	mg/kapsle
sloučenina X	10,0
koloidní oxid křemičitý	1,5
laktóza	465,5
předem gelatinizovaný škrob	120,0
stearan hořečnatý	3,0
- · · · „	600,0
(iv) injekce 1 (1 mg/ml)	mg/ml
sloučenina X (volná)	1,0
hydrogenfosfát sodný	12,0
dihydrogenfosfát sodný	0,7
chlorid sodný 1,0 N hydroxid sodný,	4,5
úprava pH na 7,0 až 7,5	podle potřeby
voda pro injekční podání	do 1 ml

(v) injekce 2 (10 mg/ml)	mg/ml
sloučenina X (volná)	10,0
dihydrogenfosfát sodný	0,3
hydrogenfosfát sodný	1,1
polyethylenglykol 400	200,0
0,1 N hydroxid sodný

• · ·· fl flfl • flfl flfl • · · • · · • fl flfl fl · fl • flflfl fl · • fl flfl • · I • · <

úprava pH na 7,0 - 7,5	podle potřeby
voda pro injekční podání	do 1 ml
(vi) aerosol	mg/nádobka
sloučenina X	20,0
kyselina olejová	10,0
trichlorfluormethan	5.000,0
dichlordifluormethan	10.000,0
dichlortetrafluorethan	5.000,0

Svrchu uvedené typy prostředků je možno připravit běžnými postupy.

Vynález byl popsán v souvislosti s různými specifickými a výhodnými provedeními, je však zřejmé, že by bylo možno uskutečnit ještě řadu variací a modifikací, které by rovněž spadaly do rozsahu předmětu vynálezu.

Claims (51)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Protinádorové látky obecného vzorce I kde

   Ri znamená atom vodíku, hydroxyskupiňu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, atom halogenu, karboxyskupinu, nitroskupinu nebo skupinu -(CH2)n-(X)-(Y), n znamená celé číslo 0 až 4,

   X znamená oxyskupinu -0-, thioskupinu -S-, -N(R_a)- nebo chybí,

   Y znamená C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny, peptidů nebo 1 až 15-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec, popřípadě obsahující 1, 2 nebo 3 neperoxidové oxyskupiny, thioskupiny nebo skupiny -N(R_a)-, přičemž tento řetězec je popřípadě substituován na uhlíkovém atomu 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny oxoskupina =0, hydroxyskupina, karboxyskupina, atom halogenu, merkaptoskupina, nitroskupina, -N(Rb)c, C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidů a současně je řetězec nasycený nebo nenasycený,

   R₂ znamená karboxyskupinu, C1-C6a!kanoyl

   Φ 0 00 0 ·

   0 0 0 0 0 0 0

   0 0 0 00 0 0

   0 0 0 0 0 0 0 • 0 0 0 0 0 ·♦ ·· 000 000

   C1-C6alkoxykarbonyl, halogen Cí-C6alkyl, -C(=O)NR_dR_e, zbytek sacharidu, aminokyseliny, peptidu nebo C1-C6alkyl, substituovaný 1 nebo 2 hydroxyskupinami, C1-C6alkoxyskupinami,

   C1-C6alkanoyloxyskupinami, karboxyskupinami, zbytky aminokyselin, peptidů nebo sacharidů nebo skupinami -C(=O)NR_dR_e,

   R₃ znamená atom vodíku, C1 -C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

   R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, R₅ znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo R₄ a Rs společně tvoří ethylendioxyskupinu,

   R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 až 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupina -C(=O)NR_fR_g,

   R_a znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl a

   Rb, Rc, Ra, Re, Rfa Rg nezávisle znamenají atom vodíku,

   C1 -C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_b a R_c nebo R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina ve významu Y nebo R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde R_h a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu • · • · • · • · s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
2. 2. Protinádorové látky obecného vzorce I

   R(I) v němž Ri znamená -(CH₂)n-(X)-(Y), kde n znamená celé číslo 0 až 4, X znamená oxyskupinu, thioskupinu, -N(R_a)- nebo chybí, Y znamená zbytek aminokyseliny, chráněný 1 nebo 2 ochrannými skupinami, zbytek peptidu nebo jeden až 15-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec, popřípadě obsahující 1, 2 nebo 3 neperoxidové oxyskupiny, thioskupiny nebo skupiny-N(R_a)-, tento řetězec je substituován 1, 2 nebo 3 zbytky peptidu a je nasycený nebo nenasycený,

   R₂ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyi, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu, R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a R₅ znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R5 společně ethylendioxyskupinu, R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl,

   C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6a!kyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 až 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, ·· ·* • · • ··· • · · ·

   9 9 ·

   C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidů nebo sacharidu nebo skupina -C(=O)NR_fR_g,

   R_a znamená atom vodíku, C1 -C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl a

   Rb, Rc, Ra, Re, Rfa R_g nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyi, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří Rb a R_c nebo R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou Vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh,.

   přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina ve významu Y nebo R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6aikyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkanoyl.oxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde R_h a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1 -C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
3. 3. Protinádorové látky obecného vzorce I

   • 9 · • 9 9 99 • · 9 · • * 9 · ·· ··

   99 9· • 9 « · • 9 9 · • · · · • 9 9 9 • 9 99 v němž Ri znamená atom vodíku, hydroxyskupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, atom halogenu, karboxyskupinu, nitroskupinu nebo (CH₂)_n-(X)-(Y), ⁿ znamená celé číslo 0 až 4, X znamená oxyskupinu, thioskupinu, -N(R_a)- nebo chybí, Y znamená

   C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryi, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo 1 až 15-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhlíkový řetězec, popřípadě obsahující 1, 2 nebo 3 neperoxidové oxyskupiny, thioskupiny nebo skupiny -N(R_a)-, řetězec je popřípadě substituován 1, 2 nebo 3 skupinami ze skupiny oxoskupina, hydroxyskupina, karboxyskupina, atom halogenu, merkaptoskupina, nitroskupina,

   -N(R_b)(R_c), C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryi, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu, řetězec může být nasycený nebo nenasycený, R₂ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, R3 znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryi, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu, R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, R₅ znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo R₄aR₅ společně tvoří ethylendioxyskupinu, R6 znamená karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, -C(=O)NR_fR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny C1-C6alkoxyskupina,

   C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo -C(=O)NRfR_g, R_a znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl a R_b, R_c, Rd, Re, Rf a Rg nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_b a R_c, nebo R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, ne nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina ve významu Y nebo R3 je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, ·· ·* • 9 9 9

   9 9 9 ·

   9 9 9 9 9

   9 9 9 · ·· 99

   9 9 9 ·· »· • · · ·

   C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde R_h a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
4. 4. Protinádorové látky podle nároků 1, 2 nebo 3, v nichž Rf znamená -(CH2)_n-(X)-(Y), n = 0 až 4, X znamená oxyskupinu, thioskupinu, -N(R_a)- nebo chybí a Y znamená zbytek peptidu nebo C1-C6alkyl, substituovaný zbytkem peptidu.
5. 5. Protinádorové látky podle nároku 1 nebo 3, v nichž Rf znamená hydroxyskupinu, atom halogenu, karboxyskupinu, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu.
6. 6. Protinádorové látky podle nároku 1 nebo 3, v nichž Rf znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, atom halogenu, methoxyskupina nebo ethoxyskupina.
7. 7. Protinádorové látky podle nároku 1 nebo 3, v nichž Rf znamená -(CH₂)_n-(X)-(Y), n = 1 nebo 2, X znamená oxyskupinu, thioskupinu nebo -N(R_a)- a Y znamená C1-C6alkyl nebo C2-C6alkenyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 skupinami ze skupiny hydroxyskupina, karboxyskupina, atom halogenu, merkaptoskupina, nitroskupina, N(Rb)(R_c), C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl nebo zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina ve významu Y je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, • 4 • 444 • · · · • · ·

   444

   4»· • 4 ·· • 4 4

   4 4 4

   4 4 4

   4 4 4

   4 4 4

   C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde R_h a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh,
8. 8. Protinádorové látky podle nároku 1, 2 nebo 3, v nichž Rf znamená CH₂(zbytek cysteinu, vázaný přes atom síry)-R_x, kde R_x je zbytek aminokyseliny nebo peptidů, obsahující 2 až 24 aminokyselin.
9. 9. Protinádorové látky podle nároku 8, v nichž R_x znamená -Asp-Cys-Arg-Gly-Asp-Cys-Phe-Cys (SEQ ID NO:4), -Asp-Gly-Arg-Cys (SEQ ID NO:5) nebo -Asp-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (SEQ ID NO:6).
10. 10. Protinádorové látky podle nároku 8, v nichž R_x znamená zbytek peptidů, obsahující 4 až 20 zbytků aminokyselin.
11. 11. Protinádorové látky podle nároku 1 nebo 3, v nichž Ri znamená -CH₂(zbytek cysteinu, vázaný přes atom síry) nebo -CH₂(zbytek Nacylcysteinu, vázaný přes atom síry).
12. 12. Protinádorové látky podle nároku 1, 2 nebo 3, v nichž R-t znamená 2-[(R)~alfa-methylbenzylaminokarbonyl]-2(acylamino)ethylthiomethyl.
13. 13. Protinádorové látky podle nároku 1,2 nebo 3, v nichž Ri znamená -CH₂-(zbytek glutathionu, vázaný přes atom síry).

    • · • · • · · · • · · · • · · · • · · • · · ··
14. 14. Protinádorové látky podle nároku 1 nebo 3, v nichž Ri znamená atom vodíku, methyl, hydroxymethyl, methoxymethyl nebo acetoxymethyl.
15. 15. Protinádorové látky podle nároku 1, v nichž R₂ znamená hydroxymethyl, methoxymethyl nebo acetoxymethyl.
16. 16. Protinádorové látky podle nároku 1, v nichž R₂ znamená karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl nebo -C(=O)NR_dR_e.
17. 17. Protinádorové látky podle nároku 1, v nichž R₂ znamená C1-C6alkyl, substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo -C(=O)NR_dR_e.
18. 18. Protinádorové látky podle nároku 1, 2 nebo 3, v nichž R₄ znamená methyl.
19. 19. Protinádorové látky podle nároku 1, 2 nebo 3 v nichž Rs znamená hýdroxyskupinu.
20. 20. Protinádorové látky podle nároku 1 nebo 2, v nichž R6 znamená atom vodíku.
21. 21. Protinádorové látky podle nároku 1, 2 nebo 3, v nichž R6 znamená karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl nebo -C(=O)NR_fR_g.
22. 22. Protinádorové látky podle nároku 1 nebo 2, v nichž R6 znamená C1-C6 alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 hydroxyskupinami,

    C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkanoyloxyskupinu, karboxyskupinu, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo -C(=O)NRfR_g.
23. 23. Protinádorové látky podle nároku 1 nebo 2, v nichž R₆ znamená methyl nebo hydroxymethyl.
24. 24. Protinádorové látky podle nároku 1, v nichž R₂ znamená C1-C6alkyl, substituovaný hydroxyskupinou, C1-C6alkoxyskupinou, C1-C6alkanoyloxyskupinou nebo karboxyskupinou, R3 je atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkylthioskupina, aryl, heteroaryl, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina, R₄ je atom vodíku nebo C1 -C6alkyl, R5 znamená hydroxyskupinu, a R₆ je

    C1 -C6alkyl, popřípadě substituovaný hydroxyskupinou,

    C1-C6alkoxyskupinou, C1-C6 alkanoyloxyskupinou nebo karboxyskupinou a farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
25. 25. Protinádorové látky podle nároku 1, v nichž R1 je atom vodíku nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný hydroxyskupinou, atomem halogenu, methoxyskupinou, ethoxyskupinou nebo acetoxyskupinou, R₂ znamená hydroxymethyl, methoxymethyl nebo acetoxymethyl, R3 je atom vodíku, R₄je methyl, R₅ je hydroxyskupina a Rsje methyl nebo hydroxymethyl, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
26. 26. Protinádorové látky podle nároku 2, v nichž R1 znamená -(CH₂)_n-(X)-(Y), n = O až 4, X znamená oxyskupinu, thioskupinu, -N(R_a)- nebo chybí a Y znamená zbytek aminokyseliny, opatřený jednou nebo dřeva ochrannými skupinami.
27. 27. Protinádorové látky podle nároku 2, v nichž R1 znamená -CH₂(zbytek N-acylcysteinu, vázaný přes atom síry), (S)-2-[(R)-alfa-methylbenzylaminokarbonyl]-2-(acylamino)ethylthiomethyl, nebo (R)-2-[(R)-alfa-methylbenzylaminokarbonyl]-2• · · · • · • · ·♦ ♦ 9 • ·

    -(acylamino)ethylthiomethyl.
28. 28. Dimerní sloučenina, tvořená dvěma protinádorovými látkami podle nároku 1, spojenými vazným řetězcem.
29. 29. Protinádorové látky obecného vzorce I kde Ri znamená -(CH2)_n-(X)-(Y), n znamená celé číslo 1 až 4, s výhodou 1, X znamená oxyskupinu, thioskupinu nebo skupinu -N(R_a)-, s výhodou thioskupinu, Y znamená 2 až 15-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhlíkový řetězec, popř. obsahující 1, 2 nebo 3 neperoxidové oxyskupiny, thioskupiny nebo skupiny -N(R_a)-, řetězec je substituován na uhlíkovém atomu 1, 2 nebo 3, substituenty ze skupiny oxoskupina, karboxyskupina, merkaptoskupina, -N(Rb)(R_c), C3C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminoskupiny nebo peptidů a je nasycený nebo nenasycený, s výhodou Y znamená 2 až

    6-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhiíkový řetězec, substituovaný na uhlíkovém atomu 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny oxoskupina, heteroaryl, zbytek aminokyseliny nebo zbytek peptidů, R2 znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl, R₃ znamená atom vodíku, C1C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu, R₄ znamená atom vodíku • · ·· • · · nebo C1-C6alkyl a R5 znamená hydroxyskupihu, C1-C6álkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R5 společně ethylendioxyskupinu, R6 znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo -C(=O)NRfR_g, R_a znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl a Rb, R_c, Rf a Rg nezávisle znamenají atom vodíku C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří Rb a R_c nebo Rf a Rg společně s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolídinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemžjakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina ve významu Y nebo R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alky(, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyi, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolídinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
30. 30. Protinádorová látka podle nároku 29, kterou je nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

    • ······ • · · · · · ··· ··· ·· ··
31. 31. Protinádorové látka obecného vzorce II

    R₂ znamená C1-C6alkyl,

    R₃ znamená atom vodíku, C1 -C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

    R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a

    R₅ znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu,

    R6 znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6aikyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NR_fRg,

    Rz znamená karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NR_dR_e, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NRdR_e, • · • · ·· ·· • · · · • · · · • · · · • · · · • · ··

    R_d, R_e, Rf a R_g nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
32. 32. Protinádorově látky podle nároku 32, v nichž R7 znamená C1C6alkyl, substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo -C(=O)NR_dR_e.
33. 33. Protinádorově látky podle nároku 32, v nichž R7 znamená hydroxymethyl.
34. 34. Protinádorově látka podle nároku 32, kterou je nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

    φ φ
35. 35. Protinádorová látka, tvořená sloučeninou podle nároku 1, 2, 3, 29 nebo 32 a reakčním činidlem, schopným se vázat na antigen, spojený s nádorem.
36. 36. Protinádorová látka obecného vzorce I kde znamená -(CH₂)_n-(X)-(Y), n = 1 až 4,

    X znamená oxyskupinu, thioskupinu nebo -N(R_a)-,

    Y znamená zbytek peptidu nebo C1 -C6alkyl, substituovaný zbytkem peptidu,

    R₂ znamená C1-C6alkyl,

    R₃ znamená atom vodíku, C1 -C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

    R₄ znamená atom vodíku nebo C1 -C6alkyl a

    Rs znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo

    C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu,

    R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, ♦ · 9 9 « · 9

    9 9 9 99

    99 99 • ♦ ♦ 9

    9 9 9 9 • 9 9 9 • 9 9 9

    9 9 99

    C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidů nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidů nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NR_fR_g,

    Rd, Re, Rf θ Rg nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří Rd a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1 -C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
37. 37. Protinádorové látky obecného vzorce I kde

    Ri znamená -(ΟΗ₂)_Π-(Χ)-(Υ) n = 1 až 4, ·· 00 • 0 ·· ·· • · 0

    0 0 0

    0 · ·

    0 0 ·

    00 00

    X znamená oxyskupinu, thioskupinu nebo -N(R_a)-,

    Y znamená C2-C6alkenyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny oxoskupina, hydroxyskupina, karboxyskupina, atom halogenu, merkaptoskupina, nitroskupina, -N(R_b)(R_c), C3-C6cykloalkyl, aryl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu,

    R₂ znamená C1-C6alkyl,

    R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

    R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a

    Rs znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo

    C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu,

    R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NR_fR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1 -C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NR_fR_g,

    R_d, R_e, Rf a R_g nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo ·· ·· • · · · • · · · • · · ·

    4 · · · ·· ··

    -N(Rh)(Rj), kde R_h a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6aikyl, C1-C6aikanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
38. 38. Protinádorové látky podle nároku 1, obecného vzorce I kde

    R-i znamená -CH2-(zbytek cysteinu, vázaný přes atom síry)-R_x, kde R_x znamená zbytek aminokyseliny nebo peptidu s obsahem 2 až 24 zbytků aminokyselin,

    R₂ znamená C1-C6alkyl,

    R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

    R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a

    R₅ znamená hydroxyskupinu, C1-C6aikoxyskupinu nebo

    C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu,

    R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoy(oxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NR_fR_g,

    R_d, R_e, Rf a R_g nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl,

    00 00

    0 0

    00 00 • · · • 0 0 0·

    0 0 0 Φ • 0 0 0

    00 00

    0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

    0 00

    C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyi, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
39. 39. Protinádorové látky podle nároku 1, obecného vzorce I kde Ri znamená -CH₂-(zbytek N-acylcysteinu, vázaný přes atom síry)R_x, kde R_x znamená zbytek aminokyseliny nebo peptidu s obsahem 2 až 24 zbytků aminokyselin,

    R₂ znamená C1 -C6alkyl,

    R₃ znamená atom vodíku, C1 -C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6aikylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

    R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyi a

    R₅ znamená hýdroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo • 9 9«

    9 9

    9 999 •9 9 9

    9 9 9

    9 9 9 9 9 9 9 9

    C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu,

    R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl,

    C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina,

    C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, *’*>·*.

    zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupinu

    -C(=O)NR_fR_g,

    Rd, Re, Rf a Rg nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl,

    C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R<j a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina,

    C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1 -C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
40. 40. Protinádorové látky podle nároku 1, obecného vzorce I (I)

    9 9

    9 9

    9 9

    99 99 • · · • 9 · ·· • · · · · • 9 9 · kde

    Ri znamená -CH2-(zbytek glutathionu, vázaný přes atom síry),

    R2 znamená C1-C6alkyl,

    R₃ znamená atom vodíku, C1 -C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

    R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a

    Rs znamená hydroxyskupiňu, C1-C6alkoxyskupinu nebo

    C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu,

    R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidů nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidů nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NR_fR_g,

    R_d, R_e, Rf a R_g nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R₃ je popřípadě substituována 1,2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1 -C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

    9 ·

    99 ti • 9 · • 9 9 99

    9 9 9 9 • 9 9 9

    99 ··

    99 99

    9 9 9 9

    9 9

    99 99
41. 41. Protinádorové látky podle nároku 1, obecného vzorce I kde

    Rt znamená 2-[(R)-alfa-methylbenzylaminokarbonyl]-2(acylamino)ethylthiomethyl,

    R₂ znamená C1-C6alkyl,

    R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryi, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

    R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a

    R₅ znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu,

    R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyi, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NR_fR_g,

    Rd, Re, Rf 3 Rg nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, φφ φφ φ · φ φ φ φ φ φ • φ φ φ φ φ φ φ φ φ · φ φ φφφ φφφ φφ ·· φ · φ φ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φφ φφ přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
42. 42. Protinádorové látky podle nároku 1, obecného vzorce I, kde

    Ri znamená-(CH₂)_n-(X)-(Y), n = 1 až 4,

    X znamená oxyskupinu, thioskupinu nebo -N(R_a)-,

    Y znamená rozvětvený nebo nerozvětvený uhlíkový řetězec o 2 až 15 atomech uhlíku, substituovaný na uhlíkovém atomu 1 nebo 2 substituenty ze skupiny karboxyskupina, C3-C6cykloalkyl, heteroaryl, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu, přičemž uvedený řetězec je nasycený nebo nenasycený,

    R₂ znamená C1-C6alkyl,

    R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

    R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a

    Rs znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo

    C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu,

    R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NR_fR_g,

    Rd, Re, Rf.a Rg nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
43. 43. Protinádorově látky podle nároku 1, obecného vzorce I • fl • · • ··· • · · fl • · · • · ·· ·* • flfl · • flfl · • fl · · fl • flfl · kde

    Ri znamená -(CH2)n-(X)-(O.

    n = 1,

    X znamená thioskupinu,

    Y znamená 2 až 6-členný rozvětvený nebo nerozvětvený uhlíkový řetězec, substituovaný na uhlíkovém atomu 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny oxoskupina, heteroaryl nebo zbytek peptidu,

    R₂ znamená C1-C6alkyl,

    R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

    R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyl a

    Rs znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo

    C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a R₅ společně ethylendioxyskupinu,

    R6 znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, halogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo.skupinu -C(=O)NR_fR_g,

    R_d, R_e, Rf a R_g nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemž jakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R3 je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1 -C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo

    -N(Rh)(Rj), kde Rh a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
44. 44. Protinádorové látky podle nároku 1, obecného vzorce I kde

    Ri znamená hydroxyskupinu, karboxyskupinu, aryl, heteroaryl nebo zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu,

    R₂ znamená C1-C6alkyl,

    R₃ znamená atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupinu, C1-C6alkylthioskupinu, aryl, heteroaryl, aryloxyskupinu nebo heteroaryloxyskupinu,

    R₄ znamená atom vodíku nebo C1-C6alkyi a

    R₅ znamená hydroxyskupinu, C1-C6alkoxyskupinu nebo C1-C6alkanoyloxyskupinu nebo tvoří R₄ a Rs společně ethylendioxyskupinu,

    R₆ znamená atom vodíku, karboxyskupinu, C1-C6alkanoyl, C1-C6alkoxykarbonyl, haiogenC1-C6alkyl, -C(=O)NRfR_g, zbytek sacharidu, aminokyseliny nebo peptidu nebo C1-C6alkyl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny hydroxyskupina, C1-C6alkoxyskupina, C1-G6alkanoyloxyskupina, karboxyskupina, zbytek aminokyseliny, peptidu nebo sacharidu nebo skupinu -C(=O)NR_fR_g,

    Rd, Re, Rf a R_g nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří R_d a R_e nebo Rf a R_g spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolídinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, přičemžjakákoliv arylová, heteroarylová skupina, aryloxyskupina nebo heteroaryloxyskupina R₃ je popřípadě substituována 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny C1-C6alkyl, C1-C6alkoxyskupina, C1-C6alkanoyl, C1-6alkanoyloxyskupina, C1-C6alkoxykarbonyl, hydroxyC1-C6alkyl, halogenC1-C6alkyl, hydroxyskupina, atom halogenu, karboxyskupina, merkaptoskupina, nitroskupina nebo -N(Rh)(Rj), kde R_h a Rj nezávisle znamenají atom vodíku, C1-C6alkyl, C1-C6alkanoyl, fenyl nebo benzyl nebo tvoří spolu s atomem dusíku, na nějž jsou vázány pyrrolídinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
45. 45. Farmaceutický prostředek, v y z n a č u j í c í se tím, že jako svou účinnou složku obsahuje protinádorové látky podle některého z nároku 1, 2, 3, 29, 30, 31, 34, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43 nebo 44 v kombinaci s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.
46. 46. Protinádorové látky podle nároků 1, 2, 3, 29, 30, 31, 34, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43 nebo 44 pro použití k léčebným účelům.
47. 47. Protinádorová látka podle nároku 46 pro použití k léčení zhoubných nádorů.
48. 48. Použití protinádorových látek podle nároků 1, 2, 3, 29, 30, 31,

    34, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43 nebo 44 pro výrobu farmaceutického prostředku k léčení zhoubných nádorů.
49. 49. Použití podle nároku 48, při němž zhoubným nádorem je pevný nádor.

    • 9
50. 50. Způsob inhibice nádorových buněk, v y z na č u j í c í se t í m, že se tyto buňky uvedou in vitro nebo in vivo do styku s účinným množstvím protinádorových látek podle některého z nároků 1, 2, 3, 29, 30, 31, 34, 36, 37, 38, 39, 40, 41,42, 43 nebo 44.
51. 51. Způsob léčení zhoubných nádorů, vyznačující se t í m, že se podává účinné množství protinádorových látek podle některého z nároků 1, 2, 3, 29, 30, 31, 34, 36, 37, 38, 39, 40, 41,42, 43 nebo 44.