CZ20002889A3 - Compounds exhibiting antibacterial activity - Google Patents
Compounds exhibiting antibacterial activity Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20002889A3 CZ20002889A3 CZ20002889A CZ20002889A CZ20002889A3 CZ 20002889 A3 CZ20002889 A3 CZ 20002889A3 CZ 20002889 A CZ20002889 A CZ 20002889A CZ 20002889 A CZ20002889 A CZ 20002889A CZ 20002889 A3 CZ20002889 A3 CZ 20002889A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- group
- carbon atoms
- alkyl
- formula
- compound
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Sloučeniny s antibakteriálními účinky obecného vzorce (I), kde Ri je atom vodíku, nebo alkylová skupina nebo alkylová skupina substituovaná jedním nebo více atomy halogenu; R2 je skupina obecného vzorce R]o- (X)n-(ALK)m-, kde Rio je atom vodíku, nebo alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina, cykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heterocyklylová skupina, přičemž kterákoli z těchto skupin může být nesubstituovaná nebo substituovaná alkylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, merkaptoskupinou, alkythioskupinou, aminoskupinou, atomem halogenu, trifluormethylovou skupinou, kyanoskupinou, nitroskupinou, skupinou -COOH, skupinou -CONH2, skupinou -COORA, skupinou -NHCORA, skupinou -CONHRa, skupinou .NHRA, skupinou -NRARB, nebo skupinou -CONRARB, kde RA a RB jsou nezávisle na sobě alkylové skupiny, a ALK je lineární nebo rozvětvená dvojvazná alkylenová skupina, alkylenová skupina nebo alkinylenová skupina, přičemž řetězce těchto skupin mohou být přerušeny jednou nebo více nesousedícími spojkami, vybranými ze skupiny zahrnující -NH-, -O- a -S-, X je -NH-, - O- nebo -S-, a m a n nabývají nezávisle na sobě hodnot 0 nebo 1; a Aje skupina, jejíž významje definovaný v popisu.Compounds with antibacterial activity of general formula (I) wherein R 1 is hydrogen or alkyl or alkyl a group substituted with one or more halogen atoms; R2 is a group of the formula R 10 - (X) n - (ALK) m -, wherein R 10 is an atom hydrogen, or alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, aryl or a heterocyclyl group, any of these the groups may be unsubstituted or substituted alkyl, alkoxy, hydroxyl a group, a mercapto group, an alkylthio group, amino, halogen, trifluoromethyl a group, cyano, nitro, -COOH, -CONH 2, -COORA, -NHCORA, -CONHRa, -NRA, -NRARB, or -CONRARB wherein RA and RB are independently of one another alkyl groups, and ALK is linear or branched divalent alkylene, alkylene or alkynylene, the chains of which may be be interrupted by one or more non-adjacent links, selected from the group consisting of -NH-, -O- and -S-, X is -NH-, - O- or -S-, and m and n are independently 0 or 1; and A is a group as defined in the specification.
Description
Sloučeniny s antibakteriálními účinkyCompounds with antibacterial effects
Oblast technikyTechnical field
Předmětný vynález se týká použití derivátů N-formylhydroxylaminu jako antíbakteriálních činidel, nové třídy sloučenin tohoto typu a farmaceutických a veterinárních prostředků zahrnujících tyto sloučeniny.The present invention relates to the use of N-formylhydroxylamine derivatives as anti-bacterial agents, a novel class of compounds of this type and pharmaceutical and veterinary compositions comprising these compounds.
Dosavadní stav technikyBACKGROUND OF THE INVENTION
Obecně se bakteriální patogeny rozdělují na grampozitivní a činidel (včetně jedné nebo druhé gramnegativní. antibiotik) má skupině, tedyGenerally, bacterial pathogens are divided into Gram positive and the agents (including one or the other Gram negative antibiotic) have a group, ie
Mnoho antíbakteriálních specifické účinky vůči vůči skupině gramnegativních nebo grampozitivních patogenů. Z tohoto důvodu se antibakteriální činidla účinná proti grampozitivním i gramnegativním patogenům považují obecně za antibakteriální činidla se širokým spektrem účinků.Many anti-bacterial specific effects against a group of gram-negative or gram-positive pathogens. For this reason, antibacterial agents active against both Gram-positive and Gram-negative pathogens are generally considered to be broad-spectrum antibacterial agents.
Je známo mnoho skupin antíbakteriálních činidel, jejichž skupina zahrnuje peniciliny a cefalosporiny, tetracykliny, sulfonamidy, monobaktamy, fluorchinolony a chinolony, aminoglykosidy, glykopeptidy, makrolidy, polymyxiny, linkosamidy, trimethoprim a chloramfenikol. Základní mechanismy účinků uvedených tříd antíbakteriálních činidel se v jednotlivých případech liší.Many classes of antibacterial agents are known and include penicillins and cephalosporins, tetracyclines, sulfonamides, monobactams, fluoroquinolones and quinolones, aminoglycosides, glycopeptides, macrolides, polymyxins, lincosamides, trimethoprim and chloramphenicol. The basic mechanisms of action of these classes of antibacterial agents vary from case to case.
V současné době je stále větším problémem odolnost bakterií proti mnoha známým antibakteriálním činidlům. Proto v této oblasti existuje neustálá poptávka po jiných antíbakteriálních ······ · «· · · ·· • · · · · · · ···· • · · · · ···· _ · · · ·····*·· £ · · ····*·· ···· · ··· ·· ·· ·· činidlech, zejména pak takových, jejichž mechanismus účinku se zásadně liší od známých tříd antibakteriálních činidel.At present, the resistance of bacteria to many known antibacterial agents is an increasing problem. Therefore, there is a constant demand for other anti-bacterial in this area. • Agents, especially those whose mechanism of action is fundamentally different from known classes of antibacterial agents.
Mezi grampozitivními patogeny, jako jsou kmeny z rodu Staphylococcus, Streptococcus, Mycobacteria a Enterococcus, se vyvinuly/vznikly rezistentní kmeny, následkem čehož je obtížné tyto kmeny zničit. Jako příklad takovýchto kmenů je možné uvést Staphylococcus aureus rezistentní na methicillin (MRSA), kmeny Staphylococcus rezistentní na negativní methicilinovou koagulasu (MRCNS), Streptococcus pneumoniae rezistentní na penicilín a Enterococcus faecium rezistentní k více druhům antibakteriálních činidel.Among the Gram-positive pathogens such as strains of the genera Staphylococcus, Streptococcus, Mycobacteria and Enterococcus, resistant strains have developed / developed, making it difficult to destroy these strains. Examples of such strains include methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA), negative methicillin coagulases (MRCNS) resistant Staphylococcus strains, penicillin resistant Streptococcus pneumoniae, and multiple antibacterial agent resistant Enterococcus faecium species.
Patogenní bakterie jsou často rezistentní k aminoglykosidovým, β-laktamovým (penicilinovým a cefalosporinovým) a chloramfenikolovým antibiotikům. Tato rezistence zahrnuje enzymatickou deaktivaci daného antibiotika hydrolýžou nebo tvorbou neaktivních derivátů daného antibiotika. Skupina β-laktamových (pěnícílínových a cefalosporinových) antibiotik je charakteristická přítomností β-laktamového kruhové struktury. Rezistence k této skupině antibiotik v klinických izolátech je nej častěji způsobena enzymem označovaným jako „penicilinasa (β-laktamasa), který produkují rezistentní bakterie a který hydrolyzuje β-laktamový kruh a tím eliminuje jeho antibakteriální účinky.Pathogenic bacteria are often resistant to aminoglycoside, β-lactam (penicillin and cephalosporin) and chloramphenicol antibiotics. This resistance involves enzymatic inactivation of a given antibiotic by hydrolysis or formation of inactive derivatives of the antibiotic. The group of β-lactam (foamytin and cephalosporin) antibiotics is characterized by the presence of β-lactam ring structure. Resistance to this class of antibiotics in clinical isolates is most often caused by an enzyme called 'penicillinase (β-lactamase), which is produced by resistant bacteria and which hydrolyzes the β-lactam ring, thereby eliminating its antibacterial effects.
Nedávno byl popsán objev kmenů Enterococcus rezistentních k vankomycinu (Woodford N. 1998 Glycopeptide-resistant enterococci: a decade of experience. Journal of Medical Microbiology, 47(10):849-62). Kmeny Enterococcus rezistentní k vankomycinu jsou zvlášť nebezpečné tím, že jsou častou příčinou • · • · ♦ · * ·Recently, the discovery of vancomycin-resistant Enterococcus strains has been described (Woodford N. 1998 Glycopeptide-resistant enterococci: a decade of experience. Journal of Medical Microbiology, 47 (10): 849-62). Vancomycin-resistant Enterococcus strains are particularly dangerous because they are a common cause
infekcí vyskytujících se v nemocničních zařízeních a jsou dědičně rezistentní k většině antibiotik. Mechanismus účinku vankomycinu spočívá v jeho navázání ke koncovým zbytkům D-AlaD-Ala buněčných stěn peptidioglykanového prekurzoru. Vysoká rezistence k vankomycinu se označuje jako VanA a je způsobena geny umístěnými na pohyblivém prvku, který mění uvedené koncové zbytky na D-Ala-D-Iac, čímž je snížena jejich afinita k vankomycinu.infections occurring in hospitals and are hereditary resistant to most antibiotics. The mechanism of action of vancomycin is by its binding to terminal residues of the D-AlaD-Ala cell walls of the peptidioglycan precursor. The high resistance to vancomycin is referred to as VanA and is due to genes located on the moving element that convert said terminal residues to D-Ala-D-Iac, thereby reducing their affinity for vancomycin.
Vzhledem k rychlému výskytu bakterií rezistentních k několika skupinám antibiotik je velmi důležité pokračovat ve vývoji antibakteriálních činidel s novými mechanismy účinku, která jsou účinná proti rostoucímu počtu rezistentních bakterií, zejména proti bakteriím Enterococcus rezistentním k vankomycinu a bakteriím rezistentním k β-laktamovým antibiotikům, jako je kmen Staphylococcus aureus rezistentní k methicilinu.Given the rapid incidence of bacteria resistant to several classes of antibiotics, it is very important to continue to develop antibacterial agents with novel mechanisms of action that are effective against a growing number of resistant bacteria, in particular against vancomycin resistant Enterococcus and beta-lactam antibiotic resistant bacteria such as methicillin resistant Staphylococcus aureus strain.
Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION
Podstatou předmětného vynálezu je zjištění, že některé deriváty N-formylhydroxylaminu vykazují antibakteriální aktivitu a otevírají cestu k nové třídě antibakteriálních činidel. Bylo zjištěno, že sloučeniny podle předmětného vynálezu mají antibakteriální účinky vzhledem k širokému rozsahu grampozitivních a gramnegativních organismů. Dále byly získány důkazy, že některé sloučeniny podle předmětného vynálezu mají antibakteriální účinky vzhledem k bakteriím, které jsou rezistentní k běžně používaným antibiotikům, jako jsou vankomycin a β-laktamová antibiotika, jako je například kmen Staphylococcus aureus rezistentní k methicilinu.It is an object of the present invention to find that some N-formylhydroxylamine derivatives exhibit antibacterial activity and open the way to a new class of antibacterial agents. The compounds of the present invention have been found to have antibacterial effects due to the wide range of Gram-positive and Gram-negative organisms. Further, evidence has been obtained that some of the compounds of the present invention have antibacterial effects against bacteria that are resistant to commonly used antibiotics such as vancomycin and β-lactam antibiotics, such as methicillin resistant Staphylococcus aureus.
♦ · · · ♦ · • ♦ ♦ · · • · · · · • · · · · A • · · · · • · · · · ·♦ · A • A A A A A A A A A A A A A A A A A A
Ačkoli by bylo zajímavé stanovit mechanismus účinku sloučenin podle předmětného vynálezu, je to právě schopnost inhibovat růst bakterií, která činí tyto sloučeniny užitečnými. Nicméně se v současné době má za to, že antibakteriální účinek sloučenin podle předmětného vynálezu je alespoň částečně způsoben nítrobuněčnou inhibicí polypeptidové deformylasy (PDF) .Although it would be interesting to determine the mechanism of action of the compounds of the present invention, it is the ability to inhibit the growth of bacteria that makes these compounds useful. However, it is currently believed that the antibacterial effect of the compounds of the present invention is at least in part due to intracellular inhibition of polypeptide deformylase (PDF).
Bakteriální polypeptidové deformylasy (PDF) (EC 3.5.1.31) patří do skupiny metaloenzymů, (jejichž přehled je uveden v publikaci: Meinnel T, Lazennec C, Villoing S, Blanquet S, 1997, Journal of Molecular Biology 267, 749-761), které jsou nezbytné pro životaschopnost bakterií, přičemž jejich funkce spočívá v odstraňování formylové skupiny z N-konce methioninového zbytku proteinů syntetizovaných ribosoraem Mazel a spolupracovníci v publikaci EMBO J.Bacterial polypeptide deformylase (PDF) (EC 3.5.1.31) belongs to the group of metalloenzymes (reviewed in: Meinnel T, Lazennec C, Villoing S, Blanquet S, 1997, Journal of Molecular Biology 267, 749-761), which are essential for the viability of bacteria, the function of which is to remove the formyl group from the N-terminus of the methionine residue of the proteins synthesized by Mazel ribosora and co-workers in EMBO J.
v eubakteriích 13(4):914-923, charakterizaciin eubacteria 13 (4): 914-923, characterization
1994 nedávno polypeptidové popsali postup klonování a deformylasy (PDF) bakterií1994 Recently, polypeptides have described a procedure for cloning and deformylase (PDF) of bacteria
E. coli. Protože polypeptidové deformylasa (PDF) je nezbytná pro růst bakterií a protože neexistuje protějšek k polypeptidové deformylase (PDF), Mazel a spolupracovníci ve shora uvedené publikaci, Rajan a spolupracovníci v publikaciE. coli. Because polypeptide deformylase (PDF) is essential for bacterial growth and because there is no counterpart to polypeptide deformylase (PDF), Mazel and co-workers in the above publication, Rajan and co-workers in the publication
1997 a Becker a Chem. 273(19):11413J. Am. Chem. Soc. 119:12418-12419, spolupracovníci v publikaci J. Biol.1997 and Becker and Chem. 273 (19): 11413. Am. Chem. Soc. 119: 12418-12419, J. Biol.
11416, 1998 navrhli, že polypeptidové deformylasa (PDF) je vynikajícím antibakteriálním cílem.11416, 1998 suggested that polypeptide deformylase (PDF) is an excellent antibacterial target.
V níže uvedených patentech a patentových přihláškách byly popsány a předmětem patentových nároků některé deriváty • ΦΦΦ • ·In the patents and patent applications below, certain derivatives have been described and claimed.
N-formylhydroxylamínu, i když bylo provedeno a popsáno pouze velmi málo příkladů tohoto typu sloučenin:N-formylhydroxylamine, although very few examples of this type of compounds have been performed and described:
Farmaceutické využití připisované v těchto dokumentech derivátům N-formylhydroxylaminu se týká schopnosti těchto sloučenin inhibovat matricové metaloproteinasy (MMP) a v některých případech také schopnosti uvolňovat faktor nádorové nekrózy (TNF) a tím také schopnosti léčit nemoci nebo chorobné stavy způsobené těmito enzymy, jako je rakovina a reumatoidní artritida. V žádném z uvedených dokumentů nebyly popsány antibakteriální účinky derivátů N-formylhydroxylaminu a ani nevyplývaly z textů těchto dokumentů.The pharmaceutical use attributed to N-formylhydroxylamine derivatives in these documents relates to the ability of these compounds to inhibit matrix metalloproteinases (MMPs) and in some cases also the ability to release tumor necrosis factor (TNF) and hence the ability to treat diseases or conditions caused by such enzymes such as cancer. and rheumatoid arthritis. Neither of these documents have been described or implied by the antibacterial effects of N-formylhydroxylamine derivatives.
V patentu Spojených států amerických číslo US 4 738 803 (Roques a spolupracovníci) byly rovněž popsány deriváty N-formylhydroxylaminu, avšak tyto sloučeniny jsou zde popsány jako inhibitory enkefalinasy a jsou zde navrhovány pro použití jakožto antidepresiva a jako látky s účinky proti vysokému tlaku. Ve zveřejněné mezinárodní přihlášce číslo WO 97/38705 • φ φ φ • · • · · ···· * · · · • » · · · ···· • φ · φφφφφ Φ·Φ β® φ · · φ · · · φ φφφφφ φφφ φφ φ · · · (Bristol-Myers Squibb) jsou rovněž popsány některé deriváty N-formylhydroxylaminu jakožto inhibitory enkefalinasy a inhibitory enzymu přeměňujícího angiotensin. Avšak ani v tomto případě ani v .jednom z uvedených dokumentů nebyly popsány antibakteriální účinky derivátů N-formylhydroxylaminu a ani nevyplývaly z textů těchto dokumentů.Roques et al., U.S. Patent No. 4,738,803 also discloses N-formylhydroxylamine derivatives, but these compounds are described herein as enkephalinase inhibitors and are proposed for use as antidepressants and as anti-hypertensive agents. In published international application number WO 97/38705 φ φ · · · β β β β β β β β β β β β β β (Bristol-Myers Squibb) also describes some N-formylhydroxylamine derivatives as enkephalinase inhibitors and inhibitors of the angiotensin converting enzyme. However, neither in this case nor in any of these documents did the antibacterial effects of the N-formylhydroxylamine derivatives be described, nor did they follow from the texts of these documents.
Prvním aspektem předmětného vynálezu je použití sloučenin obecného vzorce (I) nebo jejich z farmaceutického nebo veterinárního hlediska přijatelných solí při výrobě prostředku s antibakteriálními účinky:A first aspect of the present invention is the use of a compound of formula (I) or a pharmaceutically or veterinarily acceptable salt thereof in the manufacture of a composition having antibacterial activity:
Rt O (I) kdeRt O (I) where
Rx je atom vodíku, obsahující od 1 do 6 skupina obsahující substituovaná jedním nebo alkylová skupina atomů uhlíku nebo alkylová 1 až 6 atomů uhlíku nebo více atomy halogenu;R x is a hydrogen atom containing from 1 to 6 a group containing a substituted by one or an alkyl group of carbon atoms or an alkyl of 1 to 6 carbon atoms or more halogen atoms;
Rj je skupina obecného vzorce Rio-(X) n -(ALK) m~, kde je atom vodíku, nebo alkylová skupina obsahující alkenylová 6 atomů obsahuj ící od 1 do 6 atomů uhlíku, skupina obsahující od 2 do uhlíku, alkinylová skupina od 2 do 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heterocyklylová skupina, přičemž kterákoli z těchto . skupin může být nesubstituovaná nebo substituovaná alkylovou skupinou obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkoxylovou skupinou obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, hydroxylovou skupinou, merkaptoskupinou, alkylthioskupinou obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, aminoskupinou, atomem halogenu (jejichž skupina zahrnuje atom fluoru, atom chloru, atom bromu a atom jodu), trifluormethylovou skupinou, kyanoskupinou, nitroskupinou, skupinou -COOH, skupinou -CONH2, skupinou -COORA, skupinou -NHCORA, skupinou -CONHRA, skupinou -NHRa, skupinou -NRARB, nebo skupinou CONRaRb, kde RA a RB jsou nezávisle na sobě alkylové skupiny obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, aR 1 is a group of the formula R 1 - (X) n - (ALK) m -, where hydrogen is, or an alkyl group containing 6 alkenyl atoms containing from 1 to 6 carbon atoms, a group containing from 2 to carbon, an alkynyl group from 2 up to 6 carbon atoms, cycloalkyl, aryl or heterocyclyl, any of which. the groups may be unsubstituted or substituted by an alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, an alkoxy group having from 1 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, a mercapto group, an alkylthio group having from 1 to 6 carbon atoms, an amino group, a halogen atom ( , chlorine, bromine and iodine), trifluoromethyl, cyano, nitro, -COOH, -CONH 2 , -COOR A , -NHCOR A , -CONHR A , -NHR a , -NR A R B , or a CONR and R b group , wherein R A and R B are independently alkyl groups containing from 1 to 6 carbon atoms, and
ALK je lineární nebo rozvětvená dvoj vazná alkylenová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkenylenová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, nebo alkinylenová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, přičemž řetězce těchto skupin mohou být přerušeny jednou nebo více nesousedícími spojkami vybranými ze skupiny zahrnující skupinu -NH-, skupinu -0- a skupinu -S-,ALK is a linear or branched divalent alkylene group having from 1 to 6 carbon atoms, an alkenylene group having from 2 to 6 carbon atoms, or an alkynylene group having from 2 to 6 carbon atoms, which chains may be interrupted by one or more non-adjacent linkers selected from the group consisting of -NH-, -O-, and -S-,
XX
je skupina -NH-, skupina -O- nebo skupina -S-, a man nabývají nezávisle na sobě hodnot 0 nebo 1; ais -NH-, -O- or -S-, and m and n are independently 0 or 1; and
A je (i)skupina obecného vzorce (IA), (IB), (IC) nebo (ID)A is (i) a group of formula (IA), (IB), (IC) or (ID)
kdewhere
R3 je atom vodíku aR 3 is hydrogen and
R4 je postranní řetězec přírodní nebo syntetické α-aminokyseliny, neboR 4 is the side chain of a natural or synthetic α-amino acid, or
R3 a R4 spolu s atomem dusíku a uhlíku, ke kterým jsou vázány, vytvářejí případně substituovaný nasycený heterocyklický kruh obsahující 5 až 8 atomů, přičemž tento kruh je případně spojen s karbocyklickým nebo druhým heterocyklickým kruhem,R 3 and R 4 together with the nitrogen and carbon atom to which they are attached form an optionally substituted saturated heterocyclic ring containing 5 to 8 atoms, which ring is optionally linked to a carbocyclic or second heterocyclic ring,
R5 a R6 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo případně substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku, • »R 5 and R 6 are independently hydrogen or an optionally substituted alkyl group containing from 1 to 8 carbon atoms;
cykloalkylová skupina, arylová skupina, arylovou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, heterocyklická skupina nebo heterocyklickou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, neboa cycloalkyl group, an aryl group, an aryl-substituted alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, a heterocyclic group or a heterocyclic group substituted alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, or
R5 a R6 spolu s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, vytvářejí případně substituovaný nasycený heterocyklický kruh obsahující 3 až 8 atomů, přičemž tento kruh je případně spojen s karbocyklickým nebo druhým heterocyklickým kruhem, aR 5 and R 6 together with the nitrogen atom to which they are attached form an optionally substituted saturated heterocyclic ring of 3 to 8 atoms, which ring is optionally joined to a carbocyclic or second heterocyclic ring, and
R7 je atom vodíku, alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku nebo acylová skupina.R 7 is a hydrogen atom, an alkyl group containing from 1 to 6 carbon atoms, or an acyl group.
Dalším aspektem předmětného vynálezu je způsob léčby bakteriálních infekcí u lidí a ostatních živočichů, který zahrnuje podávání subjektu trpícímu takovýmto druhem infekce antibakteriálně účinné dávky sloučeniny obecného vzorce (I), která byla definována výše.Another aspect of the present invention is a method of treating bacterial infections in humans and other animals comprising administering to a subject suffering from such a type of infection an antibacterially effective dose of a compound of formula (I) as defined above.
Dalším aspektem předmětného vynálezu je způsob likvidace bakteriální kontaminace, který zahrnuje aplikaci antibakteriálně účinného množství shora definované sloučeniny obecného vzorce (I) na místo postižené takovouto kontaminací.Another aspect of the present invention is a method of controlling bacterial contamination, which comprises applying an antibacterially effective amount of a compound of formula (I) as defined above to a site affected by such contamination.
Shora definované sloučeniny obecného vzorce (I) je možné použít jako složky antibakteriálních nebo desinfikujících čisticích materiálů.The compounds of formula (I) as defined above may be used as components of antibacterial or disinfectant cleaning materials.
í±Cs?!Í.:S45fci.Jřae>g«e^.-'^ ,. — ·í ± Cs?! Í. : S45fci.Jáae> gée ^ .- '^,. - ·
«a * a a *«A * and a *
Výhodně se různé aspekty předmětného vynálezu používají proti bakteriím rezistentním k vankomycinu, chinolonu a β-laktamovým antibiotikům a proti infekcím, které tyto bakterie způsobují.Preferably, various aspects of the present invention are used against vancomycin, quinolone and β-lactam antibiotic resistant bacteria and infections caused by these bacteria.
V souladu s teorií, že účinek sloučenin obecného vzorce (I) je založen na inhibici nitrobuněčné polypeptidové deformylasy (PDF), by nejsilnějšího antibakteriálního účinku mohlo být dosaženo použitím .sloučenin, které účinně procházejí stěnami buněk bakterií. Proto se výhodně podle tohoto vynálezu používají takové sloučeniny, které jsou vysoce in vitro aktivní jakožto inhibitory polypeptidové deformylasy (PDF) a které pronikají do buněk bakterií. Je rovněž třeba očekávat, že antibakteriální účinek sloučenin, které jsou in vitro silnými inhibitory polypeptidové deformylasy (PDF) , ale které špatně pronikají do buněk, · může být zlepšen tím, že se tyto sloučeniny použijí ve formě příslušného prekurzoru léčiva, tj. ve formě strukturně modifikovaného analogu, který je přeměněn na základní sloučeninu obecného vzorce (I), například enzymatickou reakcí, po průchodu skrz stěnu buňky bakterie.Consistent with the theory that the effect of the compounds of formula (I) is based on the inhibition of intracellular polypeptide deformylase (PDF), the strongest antibacterial effect could be achieved by using compounds that effectively pass through the cell walls of bacteria. Accordingly, compounds of the invention that are highly in vitro active as polypeptide deformylase inhibitors (PDF) and which penetrate bacterial cells are preferably used in the present invention. It is also to be expected that the antibacterial effect of compounds which are potent inhibitors of polypeptide deformylase (PDF) in vitro but which do not penetrate well into cells can be improved by using these compounds in the form of the appropriate prodrug, i.e. a structurally modified analog that is converted to the parent compound of formula (I), for example by an enzymatic reaction, after passing through the cell wall of the bacterium.
Předmětný vynález se rovněž týká nových sloučenin shora uvedeného obecného vzorce (I) nebo z farmaceutického nebo z veterinárního hlediska přijatelných solí těchto sloučenin, kdeThe present invention also relates to novel compounds of the above formula (I) or to pharmaceutically or veterinarily acceptable salts thereof, wherein:
Ri je atom vodíku, alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku substituovaná jedním nebo více atomy halogenu;R 1 is hydrogen, alkyl of 1 to 6 carbon atoms, or alkyl of 1 to 6 carbon atoms substituted with one or more halogen atoms;
R2 je skupina obecného vzorce Ri0-(ALK) m-, kdeR 2 is a group of formula R 10 - (ALK) m -, wherein
Rio je atom vodíku, nebo alkylová skupina obsahující alkenylová 6 atomů od do 6 atomů uhlíku, skupina obsahující od 2 do uhlíku, alkinylová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heterocyklylová skupina, přičemž kterákoli z těchto skupin může být nesubstituovaná nebo substituovaná alkylovou skupinou obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkoxylovou skupinou obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, hydroxylovou skupinou, merkaptoskupinou, alkylthioskupinou obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, aminoskupinou, atomem halogenu (jejichž skupina zahrnuje atom fluoru, atom chloru, atom bromu a atom jodu), trifluormethylovou skupinou, nitroskupinou, skupinou -COOH, skupinou -CONH2, skupinou -COORA, skupinou -NHCORA, skupinou -CONHRa, skupinou -NHRA, skupinou -NRARB, nebo skupinou -CONRARB, kde RA a RB jsou nezávisle na sobě alkylové skupiny obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, aR 10 is a hydrogen atom or an alkyl group having 6 to 6 carbon atoms, 2 to 6 carbon atoms, a 2 to 6 carbon alkynyl group, a cycloalkyl group, an aryl group or a heterocyclyl group, any of which may be be unsubstituted or substituted by an alkyl group containing from 1 to 6 carbon atoms, an alkoxy group containing from 1 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, a mercapto group, an alkylthio group containing from 1 to 6 carbon atoms, an amino group, a halogen atom ( chloro, bromo and iodo), trifluoromethyl, nitro, -COOH, -CONH 2 , -COOR A , -NHCOR A , -CONHR a , -NHR A , -NR A R B , or a group -CONR A R B , wherein R A and R B are independently alkyl groups containing from 1 to 6 carbon atoms, and
ALK je lineární nebo rozvětvená dvojvazná alkylenová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkenylenová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, nebo alkinylenová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, přičemž řetězce těchto skupin mohou být přerušeny jednou nebo více • 9 9 9 · • · * * ·ALK is a linear or branched divalent alkylene group having from 1 to 6 carbon atoms, an alkenylene group having from 2 to 6 carbon atoms, or an alkynylene group having from 2 to 6 carbon atoms, wherein the chains of these groups may be interrupted by one or more. 9 ·
9 · 9 9 9 99 · 9 9 9 9
9 9 9 9 99
999 ·· «· nesousedícími spojkami vybranými ze skupiny zahrnující skupinu -NH-, skupinu -0- a skupinu -S-, a m jsou 0 nebo 1;Non-adjacent linkers selected from the group consisting of -NH-, -O-, and -S-, and m are 0 or 1;
Ά je skupina shora uvedeného obecného vzorce (IA), (IB), (IC) nebo (ID) kdeSkupina is a group of the above general formula (IA), (IB), (IC) or (ID) wherein
R3 je atom vodíku aR 3 is hydrogen and
R4 je postranní řetězec přírodní nebo syntetické α-aminokyseliny, neboR 4 is the side chain of a natural or synthetic α-amino acid, or
R3 a R4 spolu s atomem dusíku a uhlíku, ke kterým jsou vázány, vytvářejí případně substituovaný nasycený heterocyklický kruh obsahující 5 až 8 atomů, přičemž tento kruh je případně spojen s karbocyklickým nebo druhým heterocyklickým kruhem,R 3 and R 4 together with the nitrogen and carbon atom to which they are attached form an optionally substituted saturated heterocyclic ring containing 5 to 8 atoms, which ring is optionally linked to a carbocyclic or second heterocyclic ring,
R5 a R6 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo případně substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina, arylovou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, nearomatická heterocyklická skupina nebo heterocyklickou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, neboR 5 and R 6 are independently hydrogen or optionally substituted alkyl of 1 to 8 carbon atoms, cycloalkyl, aryl-substituted alkyl of 1 to 6 carbon atoms, non-aromatic heterocyclic group or heterocyclic-substituted alkyl group from 1 to 6 carbon atoms, or
R5 a R6 spolu s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, vytvářejí případně substituovanýR 5 and R 6 together with the nitrogen atom to which they are attached form optionally substituted
· *9 · • · · nasycený heterocyklický kruh obsahující 3 až 8 atomů, přičemž tento kruh je případně spojen s karbocyklíckým nebo druhým heterocyklickým kruhem, aA saturated heterocyclic ring of 3 to 8 atoms, which ring is optionally linked to a carbocyclic or second heterocyclic ring, and
R7 je atom vodíku, alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku nebo acylová skupina.R 7 is a hydrogen atom, an alkyl group containing from 1 to 6 carbon atoms, or an acyl group.
Přičemž, (i) pokud A je skupina obecného vzorce (IA) nebo (IB) a R2 je alkylová skupina obsahující od 2 do 5 atomů uhlíku, R4 není postranní řetězec přírodní α-aminokyseliny nebo postranní řetězec přírodní α-aminokyseliny s ochráněnými funkčními substituenty, acylovanými aminoskupinami a esterifikovanými karboxylovými skupinami;Wherein, (i) when A is a group of formula (IA) or (IB) and R 2 is an alkyl group containing from 2 to 5 carbon atoms, R 4 is not a natural α-amino acid side chain or a natural α-amino acid side chain with protected functional substituents, acylated amino groups and esterified carboxyl groups;
(ii) pokud A je skupina obecného vzorce (IA) nebo (IB), R4 není bicyklícká arylmethylová skupina; a (iii) pokud A je skupina obecného vzorce (IA) a R2 je cyklopropylmethylová skupina, cyklobutylmethylová skupina nebo cyklopentylmethylová skupina a jeden ze substituentů R5 a R6 je atom vodíku, R4 není terč. butylová skupina.(ii) when A is a group of formula (IA) or (IB), R 4 is not a bicyclic arylmethyl group; and (iii) when A is a group of formula (IA) and R 2 is cyclopropylmethyl, cyclobutylmethyl or cyclopentylmethyl and one of R 5 and R 6 is hydrogen, R 4 is not a target. butyl group.
Pojmem „alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku používaným v tomto popisu se rozumí lineární nebo rozvětvený alkylový řetězec, jejíchž skupina zahrnuje například methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu, isopropylovou skupinu, n-butylovou skupinu, isobutylovou skupinu, sek. butylovou skupinu, terč. butylovou skupinu, n-pentylovou skupinu a n-hexylovou skupinu.The term "C 1 -C 6 alkyl" as used herein refers to a linear or branched alkyl chain including, for example, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sec. butyl group, tert. butyl, n-pentyl and n-hexyl.
• 8494• 8494
9 99 9
Pojmem „dvojvazný alkylenový zbytek obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku používaným v tomto popisu se rozumí nasycený uhlovodíkový řetězec obsahující dvě nenasycené valence.The term "divalent alkylene radical containing from 1 to 6 carbon atoms" as used herein refers to a saturated hydrocarbon chain containing two unsaturated valencies.
Pojmem „alkenylová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku používaným v tomto popisu se rozumí lineární nebo rozvětvený alkenylový řetězec obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku a alespoň jednu dvojnou vazbu, která má v případech, kde je to možné, buď E nebo Z stereochemickou konfiguraci. Uvedený pojem zahrnuje například vinylovou skupinu, allylovou skupinu, 1-butenylovou skupinu, 2-butenylovou skupinu a 2-methyl-2propenylovou skupinu.The term "C 2 -C 6 alkenyl" as used herein refers to a linear or branched C 2 -C 6 alkenyl chain and at least one double bond having, where possible, either E or Z stereochemical configuration. The term includes, for example, vinyl, allyl, 1-butenyl, 2-butenyl and 2-methyl-2-propenyl.
Pojmem „dvojvazný alkenylenový zbytek obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku používaným v tomto popisu se rozumí uhlovodíkový řetězec obsahující alespoň jednu dvojnou vazbu a dvě nenasycené valence.The term "divalent alkenylene radical containing from 2 to 6 carbon atoms" as used herein refers to a hydrocarbon chain containing at least one double bond and two unsaturated valencies.
Pojmem „alkinylová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku používaným v tomto popisu se rozumí lineární nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku a jednu trojnou vazbu. Uvedený pojem zahrnuje například ethinylovou skupinu, 1-propinylovou skupinu, 1-butinylovou skupinu, 2-butinylovou skupinu, 2-methyl-2-propinylovou skupinu, 2-pentinylovou skupinu, 3-pentinylovou skupinu, 4-pentinylovou skupinu, 2-hexinylovou skupinu, 3-hexinylovou skupinu, 4-hexinylovou skupinu a 5-hexinylovou skupinu.The term "C 2 -C 6 alkynyl" as used herein refers to a linear or branched hydrocarbon chain containing from 2 to 6 carbon atoms and one triple bond. The term includes, for example, ethynyl, 1-propynyl, 1-butynyl, 2-butynyl, 2-methyl-2-propynyl, 2-pentynyl, 3-pentynyl, 4-pentynyl, 2-hexynyl , 3-hexinyl, 4-hexinyl and 5-hexinyl.
Pojmem „dvojvazný alkinylenový zbytek obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku používaným v tomto popisu se rozumí • * · ·«· • ·The term "divalent alkynylene radical containing from 2 to 6 carbon atoms" as used herein means
9 · φ φ ·9 · φ φ ·
9 9 9 9 ·9 9 9 9 ·
9 · · 9 9 ·9 · ·
9 9 9 9 · • Φ « · Φ φ uhlovodíkový řetězec obsahující alespoň jednu trojnou vazbu a dvě nenasycené valence.A hydrocarbon chain containing at least one triple bond and two unsaturated valencies.
Pojmem „cykloalkylová skupina používaným v tomto popisu se rozumí nasycená alicyklická skupina obsahující od 3 do 8 atomů uhlíku, jejichž skupina zahrnuje například cyklopropylovou skupinu, cyklobutylovou skupinu, cyklopentylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu, cykloheptylovou skupinu a cyklooktylovou skupinu.The term "cycloalkyl" as used herein refers to a saturated alicyclic group containing from 3 to 8 carbon atoms, including, for example, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl and cyclooctyl.
Pojmem „cykloalkenylová skupina používaným v tomto popisu se rozumí nenasycená alicyklická skupina obsahující od 3 do 8 atomů uhlíku, jejichž skupina zahrnuje například cyklopropenylovou skupinu, cyklobutenylovou skupinu, cyklopentylovou skupinu, cyklohexenylovou skupinu, cykloheptenylovou skupinu a cyklooktenylovou skupinu. V případě cykloalkenylových skupin obsahujících od 5 do 8 atomů uhlíku může kruh obsahovat více než jednu dvojnou vazbu.As used herein, the term "cycloalkenyl" refers to an unsaturated alicyclic group containing from 3 to 8 carbon atoms, including, for example, cyclopropenyl, cyclobutenyl, cyclopentyl, cyclohexenyl, cycloheptenyl, and cyclooctenyl. In the case of cycloalkenyl groups containing from 5 to 8 carbon atoms, the ring may contain more than one double bond.
Pojmem „arylová skupina používaným v tomto popisu se rozumí monocyklická, bicyklická nebo tricyklická karbocyklická aromatická skupina nebo skupiny složené ze dvou kovalentně vázaných monocyklických karbocyklických aromatických skupin. Jako ilustrativní příklad takovéto skupiny je možné uvést fenylovou skupinu, bifenylovou skupinu a naftylovou skupinu.The term "aryl" as used herein refers to a monocyclic, bicyclic or tricyclic carbocyclic aromatic group or groups composed of two covalently bonded monocyclic carbocyclic aromatic groups. Illustrative of such a group include phenyl, biphenyl and naphthyl.
Pojmem „heteroarylová skupina používaným v tomto popisu se rozumí pětičlenný nebo šestičlenný aromatický kruh obsahující jeden nebo více heteroatomů, který může být případně spojen s benzylovým nebo pyridylovým kruhem; a skupiny tvořené dvěma kovalentně vázanými pětičlennými nebo šestičlennými aroma•φ φφφφThe term "heteroaryl group" as used herein refers to a 5- or 6-membered aromatic ring containing one or more heteroatoms which may optionally be linked to a benzyl or pyridyl ring; and groups consisting of two covalently bonded five- or six-membered aromas • φ φφφφ
Φ Φ « φ φ φ * φ φ φφφφ φ • ·Φ Φ φ φ · ·
φφ φφ φ ♦ φ * φ φ φ · φ ♦ φ φ φ φ φ * • « φ φ tickými kruhy, z nichž každý .obsahuje jeden nebo více heteroatomů. Jako ilustrativní příklad takovýchto skupin je možné uvést thienylovou skupinu, furylovou skupinu, pyrrolylovou skupinu, imidazolylovou skupinu, benzimidazolylovou skupinu, thiazolylovou skupinu, pyrazolylovou skupinu, isoxazolylovou skupinu, isothiazolylovou skupinu, triazolylo.vou skupinu, thiadiazolylovou skupinu, oxadiazolylovou skupinu, pyridinylovou skupinu, pyridazinylovou skupinu, pyrimidinylovou skupinu, pyrazinylovou skupinu, triazinylovou skupinu, 4-([1,2,3]-thiadiazol-4yl)fenylovou skupinu a 5-isoxazol3-ylthienylovou skupinu.kruhy kruhy kruhy ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými ickými t t ickými t ickými ickými ickými ickými t, each containing one or more heteroatoms. Illustrative of such groups are thienyl, furyl, pyrrolyl, imidazolyl, benzimidazolyl, thiazolyl, pyrazolyl, isoxazolyl, isothiazolyl, triazolyl, thiadiazolyl, oxadiazolyl, pyridinyl, pyridazinyl group, pyrimidinyl, pyrazinyl, triazinyl, 4 - ([1,2,3] -thiadiazol-4yl) phenyl and 5-isoxazol-3-ylthienyl.
Ne zcela přesné pojmy „heterocyklylová skupina nebo „heterocyklická skupina zahrnují shora definovanou „heteroarylovou skupinu a konkrétně se těmito pojmy rozumí pěti- až sedmičlenný aromatický nebo nearomatický heterocyklický kruh obsahující jeden nebo více heteroatomů vybraných ze skupiny zahrnující atom síry, atom dusíku a atom kyslíku, přičemž tento kruh může být případně spojen s benzenovým kruhem. Jako konkrétní příklad takovýchto skupin je možné uvést pyrrolylovou skupinu, furylovou skupinu, thienylovou skupinu, piperidinylovou skupinu, imidazolylovou skupinu, oxazolylovou skupinu, thiazolylovou skupinu, thiadiazolylovou skupinu, pyrazolylovou skupinu, pyridinylovou skupinu, pyrrolidinylovou skupinu, pyrimidinylovou skupinu, morfolinylovou skupinu, piperazinylovou skupinu, indolylovou skupinu, benzimidazolylovou skupinu, maleimidovou skupinu, sukcinimidovou skupinu, ftalímidovou skupinu a 1,3-dioxo-l,3-dihydro-isoindol-2-ylovou skupinu.The term "heterocyclyl" or "heterocyclic group" is not intended to include the above-defined "heteroaryl group" and specifically refers to a 5- to 7-membered aromatic or non-aromatic heterocyclic ring containing one or more heteroatoms selected from the group consisting of sulfur, nitrogen and oxygen, the ring may optionally be joined to a benzene ring. Particular examples of such groups include pyrrolyl, furyl, thienyl, piperidinyl, imidazolyl, oxazolyl, thiazolyl, thiadiazolyl, pyrazolyl, pyridinyl, pyrrolidinyl, pyrimidinyl, morpholinyl, piperazinyl, indolyl, benzimidazolyl, maleimide, succinimide, phthalimide and 1,3-dioxo-1,3-dihydro-isoindol-2-yl groups.
o* ····o * ····
Pojmem „acylová skupina používaným v tomto popisu se rozumí sloučenina obecného vzorceThe term "acyl group" as used herein refers to a compound of formula
R2oC(0) kdeR 2 oC (0) where
R2o je alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkenylové skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující od 3 do 7 atomů uhlíku, fenylová skupina, heterocyklylová skupina, fenylovou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, heterocyklylovou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 7 atomů uhlíku substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, fenylovou skupinou - substituovaná alkenylová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, heterocyklylovou skupinou substituovaná alkenylová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 7 atomů uhlíku substituovaná alkenylová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, přičemž kterákoli z těchto skupin R2o může být substituována.R 20 is alkyl of 1 to 6 carbon atoms, alkenyl of 2 to 6 carbon atoms, cycloalkyl of 3 to 7 carbon atoms, phenyl, heterocyclyl, phenyl-substituted alkyl of 1 to 6 carbon atoms, heterocyclyl substituted alkyl of 1 to 6 carbon atoms, cycloalkyl of 3 to 7 carbon atoms substituted alkyl of 1 to 6 carbon atoms, phenyl-substituted alkenyl of 2 to 6 carbon atoms, heterocyclyl C 2 -C 6 alkenyl substituted C 3 -C 7 cycloalkyl substituted C 2 -C 6 alkenyl, any of which R 2 groups may be substituted.
Pojmem „bicyklické arylmethylová skupina používaným v tomto popisu se rozumí (i) methylová skupina substituovaná monocyklickou arylovou nebo heteroarylovou skupinou, která je dále substituována monocyklickou arylovou nebo heteroarylovou sku-As used herein, the term "bicyclic arylmethyl group" means (i) a methyl group substituted with a monocyclic aryl or heteroaryl group which is further substituted with a monocyclic aryl or heteroaryl group.
• · ···· 4 * 9• · ···· 4 * 9
99 pinou, nebo (ii) methylová skupina substituovaná monocyklickou arylovou nebo heteroarylovou skupinou, ke které je připojená druhá monocyklická arylová nebo heteroarylová skupina; přičemž tento pojem zahrnuje jak nesubstituované, tak substituované bicyklické arylmethylové skupiny. Jako konkrétní příklad takovýchto skupin je možné uvést naftylovou skupinu, indolylovou skupinu, chinolylovou skupinu a isochinolylovou skupinu.Or (ii) a methyl group substituted by a monocyclic aryl or heteroaryl group to which a second monocyclic aryl or heteroaryl group is attached; the term includes both unsubstituted and substituted bicyclic arylmethyl groups. Specific examples of such groups include naphthyl, indolyl, quinolyl and isoquinolyl.
Pokud není uvedeno jinak, rozumí se v kontextu, ve kterém je použit, pojmem „substituovaný ve spojení s jakoukoli skupinou to, že tato· skupina je substituována až čtyřmi substituenty nezávisle vybranými ze skupiny zahrnující alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, benzylovou skupinu, alkoxylovou skupinu ..obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, fenoxylovou skupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, alkylthioskupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, aminoskupinu, .atom halogenu (jejichž skupina zahrnuje atom fluoru, atom chloru, atom bromu a atom jodu), trifluormethylovou skupinu, nitroskupinu, skupinu -COOH, skupinu -CONH2, skupinu -CORA, skupinu -COORA, skupinu -NHCORA, skupinu -CONHRA, skupinu -NHRa, skupinu -NRARB, nebo skupinu -CONRARB, kde RA a RB jsou nezávisle na sobě alkylové skupiny obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku. V případě, že se pojmem „substituovaný rozumí benzylová skupina, může být její fenylová skupina substituována kteroukoli z uvedených skupin s výjimkou benzylové skupiny.Unless otherwise stated, in the context in which it is used, the term "substituted in conjunction with any group" means that the group is substituted with up to four substituents independently selected from the group consisting of alkyl having 1 to 6 carbon atoms, benzyl an alkoxy group containing from 1 to 6 carbon atoms, a phenoxy group, a hydroxyl group, a mercapto group, an alkylthio group containing from 1 to 6 carbon atoms, an amino group, a halogen atom (which include fluorine, chlorine, bromine and iodine), trifluoromethyl, nitro, -COOH, -CONH 2 , -COR A , -COOR A , -NHCOR A , -CONHR A , -NHR a , -NR A R B , or a -CONR A R B group , wherein R A and R B are independently alkyl groups containing from 1 to 6 carbon atoms. When the term "substituted" refers to a benzyl group, its phenyl group may be substituted by any of these groups except for the benzyl group.
Pojmy „postranní řetězec přírodních α-aminokyselin a „postranní řetězec syntetických α-aminokyselin používanými v tomto ««·· · · • 9The terms "side chain of natural α-amino acids and" side chain of synthetic α-amino acids used in this «« ·· · · • 9
99
99
9999 99999 9
9·9 ·
999999
99
99
99
* * «* * «
99
99
9 popisu se rozumí skupina Rx přírodní nebo aminokyseliny obecného vzorce NH2-CH (Rx) -COOH.9 of the description means a naturally occurring R x group or amino acids of the formula NH 2 -CH (R x ) -COOH.
syntetickésynthetic
Jako příklad postranního řetězce přírodních α-aminokyselin je možné uvést postranní řetězce alaninu, argininu, asparaginu, kyseliny aspartové, cysteinu, cystinu, kyseliny glutamové, histidinu, 5-hydroxylysinu, 4-hydroxyprolinu, isoleucinu, leucinu, lysinu, methioninu, fenylalaninu, prolinu, šeřinu, threoninu, tryptofanu, tyrosinu, valinu, kyseliny a-aminoadipové, kyseliny a-amino-n-máselné, 3,4-dihydroxyfenylalaninu, homoserinu, α-methylserinu, ornithinu, kyseliny pipekolové a tyroxinu.Examples of natural α-amino acid side chains include the side chains of alanine, arginine, asparagine, aspartic acid, cysteine, cystine, glutamic acid, histidine, 5-hydroxylysine, 4-hydroxyproline, isoleucine, leucine, lysine, methionine, phenylalanine, proline , lilac, threonine, tryptophan, tyrosine, valine, α-aminoadipic acid, α-amino-n-butyric acid, 3,4-dihydroxyphenylalanine, homoserine, α-methylserine, ornithine, pipecolic acid and thyroxine.
V případě postranních řetězců přírodních α-aminokyselin, které obsahují funkční substituenty, jako je například aminoskupina, karboxylová skupina, hydroxylová skupina, merkaptoskupina, guanidylová skupina, imidazolylová skupina nebo indolylová skupina, jako je arginin, lysin, kyselina glutamová, kyselina aspartová, tryptofan, histidin, serin, threonin, tyrosin a cystein, mohou být tyto substituenty případně chráněné.In the case of natural α-amino acid side chains containing functional substituents such as amino, carboxyl, hydroxyl, mercapto, guanidyl, imidazolyl or indolyl, such as arginine, lysine, glutamic acid, aspartic acid, tryptophan, histidine, serine, threonine, tyrosine and cysteine may optionally be protected.
Podobně v případě postranních řetězců syntetických a-aminokyselin, které obsahují funkční substituenty, jako je například aminoskupina, karboxylová skupina, hydroxylová skupina, merkaptoskupina, guanidylová skupina, imidazolylová skupina nebo indolylová skupina, mohou být tyto substituenty případně chráněné.Similarly, in the case of synthetic α-amino acid side chains containing functional substituents such as amino, carboxyl, hydroxyl, mercapto, guanidyl, imidazolyl or indolyl, these substituents may optionally be protected.
Pojmem „chráněná používaným ve vztahu k funkčnímu substituentu postranního řetězce přírodní nebo syntetické α-aminokyseliny se rozumí derivát takového substituentu, který ··The term "protected as used in relation to a functional substituent on the side chain of a natural or synthetic α-amino acid" means a derivative of such a substituent which ···
je v podstatě nefunkční. Tento předmět je široce shrnut ve všeobecně používané příručce Protective Groups in Organic Synthesis druhé vydání, Wiley, New York, 1991 (T. W. Greene ais basically inoperable. This subject is broadly summarized in the commonly used Protective Groups in Organic Synthesis Second Edition, Wiley, New York, 1991 (T. W. Greene and
P. G. Wuts). Tak například karboxylovou skupinu je možné převést na ester (například na alkylester obsahující v alkylovém řetězci od 1 do 6 atomů uhlíku), aminoskupiny je možné ' převádět na amidy (například amid obecného vzorce NHCO-alkyl obsahující, v alkylovém řetězci od 1 do 6 atomů uhlíku) nebo karbamáty (například karbamát obecného vzorce NHC(=0)O-alkyl obsahující v alkylovém řetězci od 1 do 6 atomů uhlíku, nebo karbamát vzorce NHC(=0)OCH2Ph), hydroxylové skupiny je -možné přeměnit na ethery (například alkylether obsahující v alkylovém řetězci od .1 do 6 atomů uhlíku nebo ether obecného vzorce 0(alkyl)fenyl, ve kterém alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku) nebo estery (například alkylestery obsahující v alkylovém řetězci 1 až 6 atomů uhlíku) a thiolové skupiny je možné přeměnit na thioethery (například na terč. butylthioether nebo benzylthioether) nebo na thioestery (například na thioalkylestery obsahující v alkylovém řetězci od 1 do 6 atomů uhlíku).PG Wuts). For example, a carboxyl group can be converted to an ester (e.g., an alkyl ester containing from 1 to 6 carbon atoms in the alkyl chain), amino groups can be converted to amides (e.g., an amide of the formula NHCO-alkyl containing, in the alkyl chain from 1 to 6 atoms) or carbamates (e.g. carbamate of formula NHC (= O) O-alkyl containing from 1 to 6 carbon atoms in the alkyl chain, or carbamate of formula NHC (= O) OCH 2 Ph), the hydroxyl groups can be converted to ethers ( for example, an alkyl ether containing from 1 to 6 carbon atoms in the alkyl chain or an ether of formula (O) (alkyl) phenyl in which the alkyl group contains from 1 to 6 carbon atoms) or esters (e.g. alkyl esters containing 1 to 6 carbon atoms in the alkyl chain) and thiol groups can be converted to thioethers (e.g., tert-butylthioether or benzylthioether) or to thioesters (e.g., thioalkyl esters of obs. (having from 1 to 6 carbon atoms in the alkyl chain).
Díky přítomnosti asymetrických atomů uhlíku existuje ve sloučeninách podle předmětného vynálezu několik skutečných nebo potenciálních chirálních center. Přítomnost několika asymetrických atomů uhlíku zvyšuje počet diastereoizomerů s konfigurací R nebo S na každém chirálním centru. Předmětný vynález se týká všech takovýchto diastereoizomerů nebo jejich směsí. Výhodnou stereokonfigurací atomu uhlíku nesoucího substituent R2 jeR; výhodnou stereokonfigurací atomu uhlíku nesoucího substituent R4 (pokud je asymetrický) je S; aDue to the presence of asymmetric carbon atoms, there are several actual or potential chiral centers in the compounds of the present invention. The presence of several asymmetric carbon atoms increases the number of diastereoisomers having the R or S configuration at each chiral center. The present invention relates to all such diastereoisomers or mixtures thereof. The preferred stereoconfiguration of the carbon atom bearing R 2 Jer; the preferred stereoconfiguration of the carbon atom bearing the R 4 substituent (if asymmetric) is S; and
• · · * • · · · · • · · * ·· »· výhodnou stereokonfigurací atomu uhlíku nesoucího substituent Ri (pokud je asymetrický) je R.The preferred stereoconfiguration of the carbon atom bearing the R 1 substituent (if asymmetric) is R.
Ve shora definovaných sloučeninách obecného vzorce (I) používaných podle předmětného vynálezu a v nových sloučeninách podle předmětného vynálezu shora popsaného obecného vzorce (II) (s podmínkami uvedenými na stejném místě):In the compounds of formula (I) defined above and used in the novel compounds of formula (II) described above (with the same conditions):
substituent Ri může být například atom vodíku, methylová skupina nebo trifluormethylová skupina, přičemž výhodně je atomem vodíku;R 1 can be, for example, a hydrogen atom, a methyl group or a trifluoromethyl group, preferably being a hydrogen atom;
substituent R2 může být například případně substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující od 3 do 6 atomů uhlíku, alkinylová skupina obsahující od 3 do 6 atomů uhlíku nebo cykloalkylová skupina;R 2 may, for example, be an optionally substituted alkyl group having from 1 to 8 carbon atoms, an alkenyl group having from 3 to 6 carbon atoms, an alkynyl group having from 3 to 6 carbon atoms, or a cycloalkyl group;
fenylovou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, fenylovou skupinou substituovaná alkenylová skupina obsahující od 3 do 6 atomů uhlíku nebo fenylovou skupinou substituovaná alkinylová skupina obsahující od 3 do 6 atomů uhlíku, přičemž fenylová skupina v těchto skupinách může být případně substituovaná;a phenyl substituted alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, a phenyl substituted alkenyl group having from 3 to 6 carbon atoms, or a phenyl substituted alkynyl group having from 3 to 6 carbon atoms, wherein the phenyl group in these groups may be optionally substituted;
cykloalkylovou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, cykloalkylovou skupinou substituovaná alkenylová skupina obsahující od 3 do 6 atomů uhlíku nebo ·* «««« ··a cycloalkyl substituted alkyl group containing from 1 to 6 carbon atoms, a cycloalkyl substituted alkenyl group containing from 3 to 6 carbon atoms, or
999999
9999
9 9 9 9 99
9 9 9 9 99
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 ·9 99 cykloalkylovou skupinou substituovaná alkinylová skupina obsahující od 3 do 6 atomů uhlíku, přičemž cykloalkylová skupina v těchto skupinách může být případně substituovaná;A cycloalkyl substituted alkynyl group containing from 3 to 6 carbon atoms, wherein the cycloalkyl group in these groups may be optionally substituted;
heterocyklylovou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, heterocyklylovou skupinou substituovaná alkenylová skupina obsahující od 3 do 6 atomů uhlíku nebo heterocyklylovou skupinou substituovaná alkinylová skupina obsahující od 3 do 6 atomů uhlíku, přičemž heterocyklylová skupina v těchto skupinách může být případně substituovaná; nebo skupina obecného vzorce CH3 (CH2) P0 (CH2) q- nebo skupina obecného vzorce CH3 (CH2) PS (CH2) q~, kde p je 0, 1, 2 nebo 3 a q je 1, 2 nebo 3.a heterocyclyl-substituted alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, a heterocyclyl-substituted alkenyl group having from 3 to 6 carbon atoms, or a heterocyclyl-substituted alkynyl group having from 3 to 6 carbon atoms, the heterocyclyl group in these groups being optionally substituted; or a group of formula CH 3 (CH 2) p O (CH 2 ) q - or a group of formula CH 3 (CH 2) p S (CH 2) q - wherein p is 0, 1, 2 or 3 and q is 1, 2 or 3.
Jako konkrétní příklad substituentu R2 je možné uvést methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu, isopropylovou skupinu, n-butylovou skupinu, isobutylovou skupinu, n-pentylovou skupinu, isopentylovou skupinu, 3-methyl-but-l-ylovou skupinu, n-hexylovou skupinu, n-heptylovou skupinu, acetylovou skupinu, n-oktylovou skupinu, methylsulfanylethylovou skupinu, ethylsulfanylmethylovou skupinu, 2-methoxyethylovou skupinu, 2ethoxyethylovou skupinu, 2-ethoxymethylovou skupinu, 3-hydroxypropylovou skupinu, allylovou skupinu, 3-fenylprop-3-en-l-ylovou skupinu, prop-2-in-l-ylovou skupinu, 3-fenylprop-2-in-l-ylovou skupinu, 3-(2-chlorfenyl)pro-244 4444 • 44 ·Particular examples of R2 include methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, n-pentyl, isopentyl, 3-methyl-but-1-yl, n -hexyl, n-heptyl, acetyl, n-octyl, methylsulfanylethyl, ethylsulfanylmethyl, 2-methoxyethyl, 2ethoxyethyl, 2-ethoxymethyl, 3-hydroxypropyl, allyl, 3-phenylprop-3- en-1-yl, prop-2-yn-1-yl, 3-phenylprop-2-yn-1-yl, 3- (2-chlorophenyl) pro-244 4444 • 44 ·
in-l-ylovou skupinu, but-2-in-l-ylovou skupinu, cyklopentylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu, cyklopentylmethylovou skupinu, cyklopentylethylovou skupinu, cyklopentylpropylovou skupinu, cyklohexylmethylovou skupinu, cyklohexylethylovou skupinu, cyklohexylpropylovou skupinu, furan-2-ylmethylovou skupinu, furan-3-methylovou skupinu, tetrahydrofuran-2-ylmethylovou skupinu, piperidinylmethylovou skupinu, fenylpropylovou skupinu, 4-chlorfenylpropylovou skupinu, 4-methylfenylpropylovou skupinu, 4-methoxyfenylpropylovou skupinu, benzylovou skupinu, 4-chlorbenzylovou skupinu, 4-methylbenzylovou skupinu a 4-methoxybenzylovou skupinu.in-1-yl, but-2-in-1-yl, cyclopentyl, cyclohexyl, cyclopentylmethyl, cyclopentylethyl, cyclopentylpropyl, cyclohexylmethyl, cyclohexylethyl, cyclohexylpropyl, furan-2-ylmethyl, furan -3-methyl, tetrahydrofuran-2-ylmethyl, piperidinylmethyl, phenylpropyl, 4-chlorophenylpropyl, 4-methylphenylpropyl, 4-methoxyphenylpropyl, benzyl, 4-chlorobenzyl, 4-methylbenzyl and 4-methoxybenzyl group.
Výhodně je substituentem R2 n-propylová skupina, n-butylová skupina, n-pentylová skupina, benzylová skupina a cyklopentylmethylová skupina.Preferably, R 2 is n-propyl, n-butyl, n-pentyl, benzyl and cyclopentylmethyl.
Výhodným substituentem R3 je atom vodíku.A preferred substituent of R 3 is hydrogen.
Substituentem R4 může být například skupina charakteristická pro přírodní a-aminokyseliny, jako je například benzylová skupina nebo 4-methoxyfenylmethylová skupina, ve které mohou být všechny funkční skupiny chráněny, všechny aminoskupiny mohou být acylovány a všechny karboxylové skupiny mohou být převedeny na odpovídající amidy; nebo skupina obecného vzorce ~[Alk]nR9, kdeR 4 may be, for example, a group characteristic of natural α-amino acids, such as benzyl or 4-methoxyphenylmethyl, in which all functional groups may be protected, all amino groups may be acylated, and all carboxyl groups may be converted to the corresponding amides; or a group of the formula ~ [Alk] n R 9 , wherein
Alk . je alkylenová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku nebo alkenylenová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku případně «Alk. is an alkylene group containing from 1 to 6 carbon atoms or an alkenylene group containing from 2 to 6 carbon atoms optionally
««· ·· ♦* fr « <«« · ·· ♦ * fr «<
» · ·»· ·
♦ · ·♦·· · ·» + • · • ♦ ·· ·· t· přerušené jedním nebo více atomy -0- nebo -Snebo skupinami -N(R12)- [kde Ri2 je atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku], n je 0 nebo 1, a♦ ♦ ·· · · · · »· + • • ♦ ·· ·· · t interrupted by one or more -0- or -Snebo -N (R 12) - [wherein R i2 is hydrogen or alkyl having from 1 to 6 carbon atoms], n is 0 or 1, and
Rg je atom vodíku nebo případně substituovaná fenylová skupina, arylová skupina, heterocyklylová skupina, cykloalkylová skupina nebo cykloalkenylová skupina nebo (pouze v případech, kdy n je 1) může Rg dále být hydroxylová skupina, merkaptoskupina, alkylthioskupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, aminoskupina, atom halogenu, trifluormethylová skupina, nitroskupina, skupina -COOH, skupina -CONH2, skupina -COORA, skupina -NHCORA, skupina -CONHRA, skupina -NHRA, skupina -NRARB, nebo skupina -CONRARB, kde RA a RB jsou nezávisle na sobě alkylové skupiny obsahující od 1. do 6 atomů uhlíku; nebo benzylová skupina substituovaná na benzenovém jádře skupinou obecného vzorce -OCH2COR8, kdeR 8 is hydrogen or optionally substituted phenyl, aryl, heterocyclyl, cycloalkyl or cycloalkenyl or (only when n is 1) R 8 may further be hydroxyl, mercapto, alkylthio containing from 1 to 6 carbon atoms, amino, halogen, trifluoromethyl, nitro, -COOH, -CONH 2 , -COOR A , -NHCOR A , -CONHR A , -NHR A , -NR A R B , or -CONR A R B , wherein R A and R B are independently alkyl groups containing from 1 to 6 carbon atoms; or a benzyl group substituted on the benzene ring by a group of the formula -OCH 2 COR 8 , wherein
R8 je hydroxylová skupina, aminoskupina, alkoxylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, fenylovou skupinou substituovaná alkoxylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkylaminoskupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, dialkylaminoskupina, ve které alkylové skupiny obsahují od 1 do 6 atomů uhlíku, fenylovou skupinou substituovaná alkylaminoskupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku; neboR 8 is hydroxyl, amino, alkoxy of 1 to 6 carbon atoms, phenyl substituted alkoxy of 1 to 6 carbon atoms, alkylamino of 1 to 6 carbon atoms, dialkylamino in which the alkyl groups contain 1 to 6 carbon atoms 6 carbon atoms, a phenyl substituted alkylamino group containing from 1 to 6 carbon atoms; or
• ♦ » • · • · · 9 • t · · • · · · • · » «• 9 • 9 9 t t t t t 9 t
0* ·· heterocyklickou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, ve které může. být heterocyklický kruh nesubstituovaný nebo mono- nebo disubstituovaný substituentem vybraným ze skupiny zahrnující atom halogenu, nitroskupinu nebo karboxylovou skupinu, alkoxylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, kyanoskupinu, alkanoylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, trifluormethylovou skupinou substituovanou alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, hydroxylovou skupinu, formylovou skupinu, aminoskupinu, alkylaminoskupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, dialkylaminoskupinu, ve které alkylové skupiny obsahují od 1 do 6 atomů uhlíku, merkaptoskupinu, alkylthioskupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, hydroxylovou skupinou substituovanou alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, merkaptoskupinou substituovanou alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, nebo alkylfenylmethylovou skupinu, jejíž alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku; nebo skupina obecného vzorce -CRaRbRc, kdeA heterocyclic-substituted alkyl group containing from 1 to 6 carbon atoms in which it may. be a heterocyclic ring unsubstituted or mono- or disubstituted with a substituent selected from the group consisting of halogen, nitro or carboxyl, alkoxy of from 1 to 6 carbon atoms, cyano, alkanoyl of from 1 to 6 carbon atoms, trifluoromethyl substituted alkyl containing from 1 to 6 carbon atoms, hydroxyl group, formyl group, amino group, alkylamino group containing from 1 to 6 carbon atoms, dialkylamino group in which the alkyl groups contain from 1 to 6 carbon atoms, mercapto, alkylthio group containing 1 to 6 carbon atoms, hydroxyl group a substituted alkyl group containing from 1 to 6 carbon atoms, a mercapto substituted alkyl group containing from 1 to 6 carbon atoms, or an alkylphenylmethyl group whose alkyl group contains from 1 to 6 carbon atoms; or a group of the formula -CR and R b R c , wherein
Ra, Rb a Rc jsou nezávisle na sobě atom vodíku, alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, alkinylová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, fenylovou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující od 3 do 8 atomů uhlíku; nebo «« φφφφR a , R b and R c are independently hydrogen, alkyl of 1 to 6 carbon atoms, alkenyl of 2 to 6 carbon atoms, alkynyl of 2 to 6 carbon atoms, phenyl substituted alkyl containing from 1 to 6 carbon atoms, a cycloalkyl group containing from 3 to 8 carbon atoms; or «« φφφφ
Re26Re26
Φ··Φ φφ φφ φφ φ φ φφφφ • φ · φ φ φ φ φφφ φ φ φ • · φφφφ • ·« φφ φφ je atom vodíku aJe · Φ φ φ φ φ φ φ • φ • • • · φ φ φ φ φ φ · · · ·
Ra a Rb jsou nezávisle na sobě fenylová skupina nebo heteroarylová skupina, jako je pyridylová skupina; neboR a and R b are independently phenyl or heteroaryl, such as pyridyl; or
Rc je atom vodíku, alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, alkinylová skupina obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, fenylovou skupinou substituovaná alkylová skupina obsahující od 1 do β atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující od 3 do 8 atomů uhlíku aR c is hydrogen, alkyl of 1 to 6 carbon atoms, alkenyl of 2 to 6 carbon atoms, alkynyl of 2 to 6 carbon atoms, phenyl substituted alkyl of 1 to β carbon atoms, cycloalkyl containing from 3 to 8 carbon atoms and
R.R.
Rb spolu s atomem uhlíku, vázány, tvoří tříčlennou cykloalkylovou skupinu nebo pětičlenný heterocyklický kruh; nebo ke kterému jsou až osmičlennou až šestiRa, Rb a Rc spolu s atomem Uhlíku, ke kterému jsou vázány, tvoří tricyklickou skupinu (například adamantylovou skupinu); neboR b, together with the carbon atom, bonded to form a three-membered cycloalkyl group or a five-membered heterocyclic ring; or which are up to eight šestiR a, R b and R c together with the carbon atoms to which they are attached, form a tricyclic group (for example adamantyl); or
nebo • · · ·or • · · ·
Ra a Rb spolu s atomem uhlíku, ke kterému jsou vázány, tvoří cykloalkylovou skupinu nebo heterocyklickou skupinu, aR a and R b together with the carbon atom to which they are attached form a cycloalkyl group or a heterocyclic group, and
Rc je atom vodíku, hydroxylová skupina, thiolové skupina, atom halogenu, kyanoskupina, karboxylová skupina, perfluoralkylová skupina obsahující v alkylovém řetězci od 1 do 4 atomů uhlíku, skupina -CH2OH, skupina -C02(alkyl), ve které alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku, skupina -O(alkyl), ve které alkylová skupina obsahuje od skupina -0(alkenyl), skupina obsahuje od do 6 atomů uhlíku, ve které alkenylová do 6 atomů uhlíku, skupina -S(alkyl), ve které alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku, skupina -SO(alkyl), ve které alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku, -S02 (alkyl), ve které alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku, skupina -S(alkenyl), ve které alkenylová skupina obsahuje od 2 do 6 atomů uhlíku, skupina -SO(alkenyl), ve které alkenylová skupina obsahuje od 2 do 6 atomů uhlíku, skupina -S02(alkenyl), ve které alkenylová skupina obsahuje od 2 do 6 atomů uhlíku nebo skupina obecného vzorce -Q-W, kdeR c is a hydrogen atom, a hydroxyl group, a thiol group, a halogen atom, a cyano group, a carboxyl group, a perfluoroalkyl group containing from 1 to 4 carbon atoms in the alkyl chain, a -CH 2 OH group, -CO 2 (alkyl) group in which the group contains from 1 to 6 carbon atoms, the group -O (alkyl) in which the alkyl group contains from the group -O (alkenyl), the group contains from up to 6 carbon atoms in which the alkenyl to 6 carbon atoms, the group -S (alkyl) ) in which the alkyl group contains from 1 to 6 carbon atoms, -SO (alkyl) in which the alkyl group contains from 1 to 6 carbon atoms, -SO 2 (alkyl) in which the alkyl group contains from 1 to 6 atoms -S (alkenyl) in which the alkenyl group contains from 2 to 6 carbon atoms, -SO (alkenyl) in which the alkenyl group contains from 2 to 6 carbon atoms, -SO 2 (alkenyl) in which an alkenyl group contains from 2 to 6 carbon atoms or a group of the general formula -QW where
Q je vazba nebo skupina -0-, skupina -S-, skupina -S0-, skupina -S02- aQ is a bond or -O-, -S-, -SO-, -SO 2 - and
W je fenylová skupina, fenylalkylová skupina, cykloalkylová skupina obsahující v cyklickém řetězci od 3 do 8 atomů • · · · • ·· ·· ·· ··· · · ·· · • « · · · · · • · · · · · ·· · • · · · · · · ··· ·· · · ·· uhlíku, cykloalkylalkylová skupina obsahující v cyklickém řetězci od 3 do 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující v cyklickém řetězci od 4 do 8 atomů uhlíku, heteroarylová skupina, nebo heteroarylalkylová skupina, přičemž uvedené substituenty W mohou být případně substituované jedním nebo více substituenty nezávisle vybranými ze skupiny zahrnující hydroxylovou skupinu, atom halogenu, kyanoskupinu, karboxylovou skupinu, skupinu -C02(alkyl), ve které alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku, skupinu -COŇH2, skupinuW is a phenyl group, a phenylalkyl group, a cycloalkyl group containing from 3 to 8 ring atoms in the cyclic chain. Carbon, a cycloalkylalkyl group containing from 3 to 8 carbon atoms in the cyclic chain, a cycloalkenyl group containing from 4 to 8 carbon atoms in the cyclic chain, a heteroaryl group or a heteroarylalkyl group, wherein said W substituents may be optionally substituted with one or more substituents independently selected from the group consisting of hydroxyl, halogen, cyano, carboxyl, -CO 2 (alkyl), wherein the alkyl group contains from 1 to 6 carbon atoms, -CO 2 H 2 ,
-CONH(alkyl), ve které alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku, skupinu -CON(alkyl)2, ve které alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku, skupinu -CHO, skupinu -CH2OH, perfluoralkylovou skupinu obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkoxylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkylthiolovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, skupinu -SO(alkyl), ve které alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku, skupinu -S02(alkyl), ve které alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku, nitroskupinu, aminoskupinu, alkylaminoskupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, dialkylaminoskupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, • · · · • · · · .· : · • ·· · ♦ · •· 9 9 99 alkylamidoskupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkenylovou skupinu obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, alkinylovou skupinu obsahující od 2 do 6 atomů uhlíku, cykloalkylovou skupinu obsahující od 3 do 8 atomů uhlíku, cykloalkenylovou skupinu obsahující od 4 do 8 atomů uhlíku, fenylovou skupinu nebo benzylovou skupinu.-CONH (alkyl) in which the alkyl group contains from 1 to 6 carbon atoms, -CON (alkyl) 2 in which the alkyl group contains from 1 to 6 carbon atoms, -CHO, -CH 2 OH, perfluoroalkyl group having from 1 to 4 carbon atoms, an alkoxy group having from 1 to 6 carbon atoms, an alkylthiol group having from 1 to 6 carbon atoms, a -SO (alkyl) group in which the alkyl group contains from 1 to 6 carbon atoms, a -SO group 2 (alkyl) in which the alkyl group contains from 1 to 6 carbon atoms, a nitro group, an amino group, an alkylamino group containing from 1 to 6 carbon atoms, a dialkylamino group containing from 1 to 6 carbon atoms, 9 9 99 alkylamido having 1 to 6 carbon atoms, alkyl having 1 to 6 carbon atoms, alkenyl having 2 to 6 carbon atoms, alkynyl having 2 to 6 carbon atoms , cycloa an alkyl group having from 3 to 8 carbon atoms, a cycloalkenyl group having from 4 to 8 carbon atoms, a phenyl group or a benzyl group.
Jako konkrétní příklad substituentu R24 je možné uvést methylovou skupinu, ethylovou skupinu, benzylovou skupinu, 4-chlorbenzylovou skupinu, 4-hydroxybenzylovou skupinu, fenylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu, cyklohexylmethylovou skupinu, pyridin-3-ylmethylovou skupinu, terč. butoxymethylovou skupinu, naftylmethylovou skupinu, isobutylovou skupinu, sek. butylovou skupinu, terč. butylovou skupinu, 1-benzylthio-l-methylethylovou skupinu, 1-methylthio-l-methylethylovou skupinu, 1-merkapto-l-methylethylovou skupinu, 1-methoxy-l-methylethylovou skupinu, 1-hydroxy-l-methylethylovou skupinu, 1-fluor-l-methylethylovou skupinu, hydroxymethylovou skupinu, 2-hydroxyethylovou skupinu, 2-karboxyethylovou skupinu, 2-methylkarbamoylethylovou skupinu, 2-karbamoylethylovou skupinu a 4-aminobutylovou skupinu. Výhodně je substituent R4 vybraný ze skupiny zahrnující terč. butylovou skupinu, isobutylovou skupinu, benzylovou skupinu a methylovou skupinu.A particular example of R 4 2 are methyl, ethyl, benzyl, 4-chlorobenzyl, 4-hydroxybenzyl, phenyl, cyclohexyl, cyclohexylmethyl, pyridin-3-ylmethyl, tert. butoxymethyl, naphthylmethyl, isobutyl, sec. butyl, 1-benzylthio-1-methylethyl, 1-methylthio-1-methylethyl, 1-mercapto-1-methylethyl, 1-methoxy-1-methylethyl, 1-hydroxy-1-methylethyl, 1- fluoro-1-methylethyl, hydroxymethyl, 2-hydroxyethyl, 2-carboxyethyl, 2-methylcarbamoylethyl, 2-carbamoylethyl and 4-aminobutyl. Preferably, R 4 is selected from the group consisting of a target. butyl, isobutyl, benzyl and methyl.
• · · · • φ • · • · » · · ♦ φ φ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φφφφ φ φ φ φ φ φ· · Φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ
Substituenty R3 a R4 mohou spolu s atomem dusíku, respektive uhlíku, ke kterým jsou vázány vytvářet případně substituovanou nasycenou heterocyklickou skupinu obsahující 5 až 8 atomů. Substituenty R3 a R4 tak mohou například tvořit spojku mezí atomem dusíku a atomem uhlíku, ke kterým jsou vázány, přičemž touto spojkou může být dvoj vazný zbytek vzorce -(CH2)3-6-, nebo - (CH2) E -O-(CH2) s-, nebo - (CH2) r-S-(CH2) s~, ve kterých jsou ras nezávisle na sobě 1, 2 nebo 3, přičemž součet r+s = 2, 3, 4 nebo 5.R 3 and R 4 together with the nitrogen or carbon atom to which they are attached may form an optionally substituted saturated heterocyclic group containing 5 to 8 atoms. R3 and R4 may, for example to form a coupling between the nitrogen atom and the carbon atom to which they are attached, said clutch may be a divalent radical of formula - (CH 2) 3-6, or - (CH 2) E - O - (CH 2) s -, or - (CH 2) r - S - (CH 2) s - in which r and p are independently 1, 2 or 3, the sum of r + s = 2, 3, 4 or 5.
Substituenty R5 a Rg mohou nezávisle být například atomy vodíku, methylové skupiny, ethylové skupiny, terč. butylové skupiny, cyklopentylové skupiny, cyklohexylové skupiny, 1,1,3,3-tetramethylbutylové skupiny, benzylové skupiny nebo 2-hydroxyethylové skupiny; nebo substituenty R5 a Rg mohou spolu s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány tvořit nasycenou pěti- až osmičlennou monocyklíckou heterocyklickou skupinu obsahující atom dusíku, která je vázána přes atom dusíku a která může případně obsahovat jako součást kruhu skupinu -N(RU)-, kdeThe substituents R 5 and R 8 may independently be, for example, hydrogen atoms, methyl groups, ethyl groups, tert. butyl, cyclopentyl, cyclohexyl, 1,1,3,3-tetramethylbutyl, benzyl or 2-hydroxyethyl groups; or R 5 and R g may be taken together with the nitrogen atom to which they are bonded form a saturated five- to eight-membered monocyclic heterocyclic group containing a nitrogen atom which is bonded via a nitrogen atom and which may optionally comprise as a ring member -N (R U) - where
Ru je atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, benzylová skupina, acylová skupina nebo skupina chránící aminoskupinu, atom kyslíku, atom síry, skupinu SO nebo skupinu SO2, které jsou součástmi kruhu, a/nebo může být substituována na jednom nebo více atomech uhlíku substituentem vybraným ze skupiny zahrnující hydroxylovou skupinu, alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, alkoxylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, • · • · · · ·· ·· ·· • · · · · ·R 11 is hydrogen or C 1 -C 6 alkyl, benzyl, acyl or amino protecting group, oxygen, sulfur, SO or SO 2 which are part of a ring and / or may be substituted on one or more carbon atoms with a substituent selected from the group consisting of hydroxyl, alkyl of 1 to 6 carbon atoms, hydroxyalkyl of 1 to 6 carbon atoms, alkoxy of 1 to 6 carbon atoms, ·· ·· • · · · · ·
9 9 · · · • · 9 · · « ·9 9 · · · · · · · · ·
9 9 9 9 9 ·· ·· ·· oxoskupinu, ketalizovanou oxoskupinu, aminoskupinu, alkylaminoskupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, dialkylaminoskupinu, ve které alkylové skupiny obsahují od 1 do 6 atomů uhlíku, karboxylovou skupinu, alkoxykarbonylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, hydroxymethylovou skupinu, alkoxymethylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, karbamoylovou skupinu, monoalkylkarbamoylovou skupinu, ve které alkylová skupina obsahuje od 1 do 6 atomů uhlíku, dialkylkarbamoylovou skupinu, ve které alkylové skupiny obsahují od 1 do 6 atomů uhlíku nebo hydroxyiminoskupinu.Oxo, ketalized oxo, amino, alkylamino of 1 to 6 carbon atoms, dialkylamino in which the alkyl groups contain 1 to 6 carbon atoms, carboxyl, alkoxycarbonyl containing from 1 to 6 carbon atoms 6 carbon atoms, hydroxymethyl, alkoxymethyl of from 1 to 6 carbon atoms, carbamoyl, monoalkylcarbamoyl in which the alkyl group contains from 1 to 6 carbon atoms, dialkylcarbamoyl in which the alkyl groups contain from 1 to 6 carbon atoms, or hydroxyimino.
Jako konkrétní příklad takovýchto substituovaných nebo nesubstituovaných cyklických skupin je možné uvéstA particular example of such substituted or unsubstituted cyclic groups is
1-pyrrolídínylovou skupinu, 1-piperazinylovou skupinu, skupinu, morfolin-4-ylovou piperidin-l-ylovou skupinu, hexahydro-l-pyridazinylovou skupinu, tetrahydro-1,4thiazin-4-ylovou skupinu, tetrahydro-1,4-thiazin-4-yl-loxidovou skupinu, tetrahydro-1,4-thiazin-4-yl-1,1dioxidovou skupinu, hexahydroazipinovou skupinu nebo oktahydroazocinovou skupinu. Jako příklad substituovaných derivátů uvedených sloučenin je možné uvést 2-(methylkarbamoyl)-1-pyrrolidinylovou skupinu, 2-(hydroxymethyl)1-pyrrolidinylovou skupinu, 4-hydroxypiperidinovou skupinu, 2-(methylkarbamoyl)piperidinovou skupinu, 4-hydroxyiminopíperídinovou skupinu, 4-methoxypiperidinovou skupinu, 4-methylpiperidin-l-ylovou skupinu, 4-benzylpiperidin-l-ylovou skupinu, 4-acetylpiperidin-l-ylovou skupinu, 4-methyl-l-piperazínylovou skupinu, 4-fenyl-lpiperazinylovou skupinu, 1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dekan-8ylovou skupinu, hexahydro-3-(methylkarbamoyl)-2-pyridazi• · • · · · • ·1-pyrrolidinyl, 1-piperazinyl, morpholin-4-yl piperidin-1-yl, hexahydro-1-pyridazinyl, tetrahydro-1,4-thiazin-4-yl, tetrahydro-1,4-thiazine- A 4-yl-oxo group, a tetrahydro-1,4-thiazin-4-yl-1,1-dioxide group, a hexahydroazipine group or an octahydroazocine group. Examples of substituted derivatives of said compounds include 2- (methylcarbamoyl) -1-pyrrolidinyl, 2- (hydroxymethyl) 1-pyrrolidinyl, 4-hydroxypiperidine, 2- (methylcarbamoyl) piperidine, 4-hydroxyiminopiperidine, 4- methoxypiperidine, 4-methylpiperidin-1-yl, 4-benzylpiperidin-1-yl, 4-acetylpiperidin-1-yl, 4-methyl-1-piperazinyl, 4-phenyl-1-piperazinyl, 1,4- dioxa-8-azaspiro [4,5] decan-8-yl, hexahydro-3- (methylcarbamoyl) -2-pyridazi
·· ·· nylovou skupinu a hexahydro-1-(benzyloxykarbonyl)-2pyridazinylovou skupinu, dekahydroizochinolin-2-ylovou skupinu a 1,2,3,4- tetrahydroizochinolin-2-ylovou skupinu.And hexahydro-1- (benzyloxycarbonyl) -2-pyridazinyl, decahydroisoquinolin-2-yl and 1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-2-yl.
Pokud je substituentem A skupina obecného vzorce (ΙΑ), je výhodně substituentem R5 methylová skupina nebo atom vodíku a R5 je methylová skupina.When A is a group of formula (ΙΑ), preferably R 5 is methyl or hydrogen and R 5 is methyl.
Substituentem R7 může být například atom vodíku nebo skupina obecného vzorce R2oC(0)-, kdeThe substituent R 7 can be, for example, a hydrogen atom or a group of the formula R 20 C (O) -, where
R20 je alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, jako je methylová skupina nebo ethylová skupina.R 20 is an alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, such as a methyl group or an ethyl group.
Skupina konkrétních příkladů sloučenin antibakteriální činidla podle předmětného konkrétní příklady uvedené v tomto popisu, nových sloučenin podle předmětného vynálezu užitečných jako vynálezu zahrnuje Skupina výhodných zahrnuj e (lS-dimethylkarbamoylethyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl] hexanové a (lS-dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amid kyseliny 2R (nebo S) -[(formylhydroxyamino)-methyl]-3-cyklopentylpropanové a jejich z farmaceutického nebo veterinárního hlediska přijatelné soli.Particular examples of the antibacterial agent compounds of the present invention, the novel compounds useful herein include the group of 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl] hexanoic acid (1S-dimethylcarbamoylethyl) amide, and 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl] -3-cyclopentylpropanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide and their pharmaceutically or veterinarily acceptable salts.
Nové sloučeniny podle předmětného vynálezu je možné připravit odštěpením skupiny chránící atom kyslíku v N-formyl-Nhydroxyamino sloučeninách obecného vzorce (II):The novel compounds of the present invention can be prepared by cleavage of the oxygen protecting group in the N-formyl-Nhydroxyamino compounds of formula (II):
• · • · · φ φ ·• · · · · φ ·
GR2S R2GR 2S R 2
Ο R7 Ο (II) kdeΟ R 7 kde (II) where
Ri, R2 a A mají stejný význam jako v obecném vzorci (I) a R25 je skupina chránící hydroxylovou skupinu, kterou je možné odštěpit hydrogenolýzou nebo hydrolýzou. Výhodnou skupinou R25 odštěpitelnou hydrogenolýzou je benzylové skupina, zatímco výhodnou skupinou R25 odštěpitelnou kyselou hydrolýzou je terč. butylová skupina a tetrahydropyranylová skupina.R 1, R 2 and A have the same meaning as in formula (I) and R 25 is a hydroxyl protecting group which can be cleaved by hydrogenolysis or hydrolysis. The preferred R 25 is cleavable by hydrogenolysis of the benzyl group, while preferred R 2 5 is cleavable by acid hydrolysis of the tert. butyl and tetrahydropyranyl.
Sloučeniny obecného vzorce (II), ve kterých A je skupina obecného vzorce (ΙΑ), (IB), (IC) nebo (ID) je možné připravit reakcí kyseliny obecného vzorce (III) nebo jejího aktivovaného derivátu s aminem obecného vzorce (IVA), (IVB), (IVC) nebo (IVD)Compounds of formula (II) wherein A is a group of formula (ΙΑ), (IB), (IC) or (ID) may be prepared by reacting an acid of formula (III) or an activated derivative thereof with an amine of formula (IVA) , (IVB), (IVC), or (IVD)
OR75 r2 OR75 r 2
R-ι OR-O
R4 R; r* r4 (IVA) (IVB) (IVC) (IVD) * ·· · kdeR 4 R; r * r 4 (IVA) (IVB) (IVC) (IVD) *
Ri, R2, R3, R4, R5, r6 a R7 mají stejný význam jako v obecném vzorci (I) s tím, že hydroxylová skupina ve skupině obecného vzorce (IVB) a kterýkoli ze substituentů Ri, R2, R3, R4, R5, R6 a R7, který je potenciálně reaktivní při adičních reakcích, mohou být ochráněné proti těmto reakcím aR 1, R 2 , R 3, R 4, R 5, r 6 and R 7 have the same meaning as in formula (I) except that the hydroxyl group in the group of formula (IVB) and any one of R 1, R 2 , R 3, R4, R5, R6 and R7 which are potentially reactive in the coupling reactions can be protected against these reactions, and
R25 má stejný význam jako ve shora uvedeném obecném vzorci (II) a případným odštěpením skupin chránících hydroxylovou skupinu ve skupině obecného vzorce (IVB) a substituenty Ri, R2, R3< R4z Rs, Ro a R7.R 25 has the same meaning as in the above general formula (II) and the optional cleavage of the hydroxyl protecting groups in the group of the general formula (IVB) and the substituents R 1, R 2 , R 3 R 4 from R 5, R 5 and R 7 .
(V)(IN)
Sloučeniny obecného vzorce (III) je možné připravit N-formylací, například pomocí acetanhydridu a kyseliny mravenčí, nebo pomocí 1-formylbenzotriazolu, sloučenin obecného vzorce (V)Compounds of formula (III) may be prepared by N-formylation, for example with acetic anhydride and formic acid, or with 1-formylbenzotriazole, compounds of formula (V)
OR25 HN . i kdeOR 25 HN. i kde
Rx, R2 a R25 mají stejný význam jako v obecném vzorci (II) aR x, R 2 and R 2 5 are as defined in formula (II) and
X je buď pomocná chirální skupina nebo skupina obecného vzorce OR26< kdeX is either an auxiliary chiral group or a group of formula OR 26 wherein
R26 je atom vodíku nebo skupina chránící hydroxylovou skupinu.R 2 6 is hydrogen or a hydroxyl protecting group.
i:and:
V případě, že X je skupina obecného vzorce OR26 nebo pomocná chirální. skupina, je skupina chránící hydroxylovou skupinu nebo pomocná chirální skupina po stupni zahrnujícím formylaci odštěpena za vzniku sloučeniny obecného vzorce (V) . Skupina vhodných pomocných chirálních skupin zahrnuje substituované oxazolídinony, které je možné odštěpit hydrolýzou v přítomnosti zásady.When X is a group of the formula OR 26 or an auxiliary chiral. group, is a hydroxyl protecting group or a chiral auxiliary after cleavage of formylation to cleave to form a compound of formula (V). Suitable chiral auxiliary groups include substituted oxazolidinones which can be cleaved by hydrolysis in the presence of a base.
Při alternativním postupu je sloučeniny obecného vzorce (II) možné připravit N-formylací, například pomocí acetanhydridu a kyseliny mravenčí, nebo pomocí 1-formylbenzotriazolu, sloučenin obecného vzorce (VI) .Alternatively, compounds of formula (II) may be prepared by N-formylation, for example with acetic anhydride and formic acid, or with 1-formylbenzotriazole, compounds of formula (VI).
reakcí kyseliny obecného vzorce (VII) nebo jejího aktivovaného derivátuby reacting an acid of formula (VII) or an activated derivative thereof
OR-C R, i 4- 1 HNOR- C R 4 -4 HN
OHOH
R, 0 (VII) ·· *»·· kdeR, 0 (VII) where
Ri, R2, a R25 mají stejný význam jako v obecném vzorci (II), s aminem shora definovaného obecného vzorce (IVA), (IVB), (IVC) nebo (IVD).Ri, R 2, and R 2 5 are as defined in formula (II) with an amine of the above defined formula (IVA), (IVB), (IVC) or (IVD).
Další možností jak mohou být připraveny sloučeniny obecného vzorce (VI) je redukce oximu obecného vzorce (VIII).Another possibility for compounds of formula (VI) can be prepared is to reduce the oxime of formula (VIII).
(VIII)(VIII)
Skupina redukčních činidel zahrnuje některé hydridy kovů (např. kyanoborohydrid sodný v kyselině octové, triethylsílan nebo boran/pyridin) a vodík v přítomnosti vhodného katalyzátoru.The reducing agents include some metal hydrides (e.g., sodium cyanoborohydride in acetic acid, triethylsilane or borane / pyridine) and hydrogen in the presence of a suitable catalyst.
Při jiném postupu je možné připravit sloučeninu obecného vzorce (II), kde substituenty Rx a R2 mají stejný význam jako ve sloučenině obecného vzorce (I), R25 je výše definovaná chránící skupina hydroxylové skupiny a A je skupina obecného vzorce (ΙΑ) , kde substituenty R3, R4, R5 mají stejný význam jako v obecném vzorci (IA) a substituent R6 je atom vodíku, čtyřsložkovou Ugiho reakcí karboxylové kyseliny obecného vzorce (III), aminu obecného vzorce (IX), aldehydu obecného vzorce (X) a isonitrilu obecného vzorce (XI)Alternatively, a compound of formula (II) may be prepared wherein R 1 and R 2 have the same meaning as in the compound of formula (I), R 25 is a hydroxyl protecting group as defined above and A is a group of formula (ΙΑ), wherein R 3 , R 4 , R 5 have the same meaning as in formula (IA) and R 6 is hydrogen, a four-component Ugi reaction of a carboxylic acid of formula (III), an amine of formula (IX), an aldehyde of formula (X) ) and isonitrile of formula (XI)
kde R3, R4 a R5 mají shora definovaný význam.wherein R 3, R 4 and R 5 are as defined above.
• · * · · · • ·• • •
Sloučeninu obecného vzorce oximu obecného vzorce (XI) (V) je možné připravit redukcíThe oxime compound of formula (XI) (V) may be prepared by reduction
(XI) kde(XI) where
Rx, R2 a R2s mají shora definovaný význam aR 1 , R 2 and R 2 are as defined above and
X je buď shora definovaná skupina obecného vzorce OR26 nebo pomocná chirální skupina.Either X is above defined group of formula OR 6, or two chiral auxiliary.
Skupina vhodných redukčních činidel zahrnuje některé hydridy kovů (např. kyanoborohydrid sodný v kyselině octové, triethylsilan nebo boran/pyridin) a vodík v přítomnosti vhodného katalyzátoru. Po redukci v případě, že substituentem X je pomocná chirální skupina, je případně možné provést konverzi této skupiny na skupinu obecného vzorce OR26.Suitable reducing agents include certain metal hydrides (e.g., sodium cyanoborohydride in acetic acid, triethylsilane or borane / pyridine) and hydrogen in the presence of a suitable catalyst. After reduction in case the substituent X is a chiral auxiliary group, it is optionally possible to convert this group to a group of the formula OR 2 6th
Sloučeninu obecného vzorce (XI) je možné připravit reakcí β-ketokarbonylové sloučeniny obecného vzorce (XII)A compound of formula (XI) may be prepared by reacting a β-ketocarbonyl compound of formula (XII)
(XII) kde Ri, R2 a X mají shora definovaný význam, s hydroxylaminem s ochráněným atomem kyslíku.(XII) wherein R 1, R 2 and X are as defined above, with an oxygen-protected hydroxylamine.
• ·• ·
Φ ·Φ ·
• Φ φφφφ « » φ φ φ φ ♦ · β-Ketokarbonylové sloučeniny obecného vzorce (XII) je možné připravit v racemické formě formylací nebo acylací karbonylové sloučeniny obecného vzorce (XIII)The β-Ketocarbonyl compounds of formula (XII) may be prepared in racemic form by formylation or acylation of a carbonyl compound of formula (XIII).
(XIII) kde R2 a X mají shora definovaný význam, pomocí sloučeniny obecného vzorce (XIV)(XIII) wherein R 2 and X are as defined above, using a compound of formula (XIV)
0.0.
(XIV) kde Ri má shora definovaný význam a Z je odstupující skupina, jako je atom halogenu nebo alkoxylová skupina, v přítomnosti zásady.(XIV) wherein R 1 is as defined above and Z is a leaving group such as a halogen atom or an alkoxy group in the presence of a base.
Dalším způsobem přípravy sloučeniny obecného vzorce (V) je Michaelova adice derivátu hydroxylaminu na a,β-nenasycené karbonylové sloučeniny obecného vzorce (XV)Another method of preparing a compound of formula (V) is by Michael addition of a hydroxylamine derivative to the α, β-unsaturated carbonyl compound of formula (XV)
R.R.
‘2‘2
R.R.
(XV) ·· ··♦·(XV) ·· ·· ·
kde Rx, R2 a X mají shora definovaný význam. V případě, že substituentem X je chirální skupina, je po Michaelově adicí případně možné provést konverzi této skupiny na skupinu obecného vzorce OR2g. Uvedenou a,β-nenasycenou karbonylovou sloučeninu obecného vzorce (XV) je možné připravit standardními způsoby.wherein R 1 , R 2 and X are as defined above. If the substituent X is a chiral group, it may optionally be possible to convert this group to a group of the formula OR 2 g after Michael addition. The α, β-unsaturated carbonyl compound of formula (XV) may be prepared by standard methods.
Skupina solí sloučenin podle předmětného vynálezu zahrnuje fyziologicky přijatelné adiční solí kyselin, jako jsou například sulfonáty, sukcínáty, hydrochloridy, hydrobromidy, sírany, methanp-toluensulfonáty, fosfáty, acetáty, citráty, laktáty, vínany, fumaráty a maleáty. Je rovněž možné vytvářet soli pomocí zásad, jako jsou například sodné, draselné, hořečnaté a vápenaté soli.The group of salts of the compounds of the present invention includes physiologically acceptable acid addition salts such as sulfonates, succinates, hydrochlorides, hydrobromides, sulfates, methanes-toluenesulfonates, phosphates, acetates, citrates, lactates, tartrates, fumarates and maleates. It is also possible to form salts with bases such as sodium, potassium, magnesium and calcium salts.
Prostředky podle předmětného vynálezu je možné připravovat pro jejich podávání jakýmkoli způsobem, který je v souladu s farmakokinetickými vlastnostmi dané/daných aktivní/aktivních složky/složek.The compositions of the present invention may be formulated for administration by any route consistent with the pharmacokinetic properties of the active ingredient (s).
Orálně podávatelné prostředky mohou mít formu tablet, kapslí, prášků, granulí, pastilek, kapalných nebo gelových přípravků, jako jsou orální, topické nebo sterilní parenterální roztoky nebo suspenze. Tablety a kapsle pro orální podávání mohou mít formu kompaktních dávkovačích jednotek a mohou obsahovat běžně používané pomocné látky, jako jsou pojidla, například sirup, arabskou gumu, želatinu, sorbitol, tragakant nebo polyvinylpyrrolidon; plniva, například laktosu, cukr, kukuřičný škrob, fosforečnan vápenatý, sorbitol nebo glycin; tabletující lubrikant, například stearát hořečnatý, mastek, polyethylenglykol nebo oxid křemičitý; desintegrační činidla, například ·· »♦·· « ♦ · • · • ♦ • · 999 9 9 bramborový škrob nebo přijatelná smáčecí činidla, jako je sodná sůl laurylsulfátu. Tablety mohou být případně potaženy, přičemž se používají ve farmaceutické praxi všeobecně známé způsoby potahování tablet. Kapalné přípravky pro orální podávání mohou mít podobu například vodných nebo olejových suspenzí, roztoků, emulzí, sirupů nebo léčivých nápojů, nebo mohou být připraveny ve formě suchého produktu, který se před vlastním použitím vehikulu, rozdělává ve vodě nebo jiném vhodném Uvedené kapalné přípravky mohou obsahovat běžně používané přísady, jako jsou suspendační činidla, například sorbitol, sirup, methylcelulosu, glukosový sirup, želatinu, ztužené jedlé tuky; emulgační činidla, například lecithin, monooleát , sorbitanu , nebo arabskou gumu;, nevodná vehikula (jejichž skupina může zahrnovat jedlé oleje), například mandlový olej, frakcíonalizovaný kokosový olej, olejovité estery, jako jsou estery odvozené od glycerinu, propylenglykolu, nebo ethylakoholu; konzervační činidla, například methyl nebo propyl-p-hydroxybenzoát nebo kyselinu sorbovou a v případě potřeby i ochucovací a barvicí činidla.Orally administrable compositions may take the form of tablets, capsules, powders, granules, lozenges, liquid or gel formulations, such as oral, topical or sterile parenteral solutions or suspensions. Tablets and capsules for oral administration may take the form of compact dosage units and may contain commonly used excipients such as binding agents, for example syrup, acacia, gelatin, sorbitol, tragacanth or polyvinylpyrrolidone; fillers such as lactose, sugar, corn starch, calcium phosphate, sorbitol or glycine; a tableting lubricant such as magnesium stearate, talc, polyethylene glycol or silica; disintegrating agents, for example, potato starch or acceptable wetting agents, such as sodium lauryl sulfate. The tablets may optionally be coated, using methods well known in the pharmaceutical art for coating tablets. Liquid preparations for oral administration may take the form of, for example, aqueous or oily suspensions, solutions, emulsions, syrups or elixirs, or may be prepared in the form of a dry product which is dispersed in water or other suitable form prior to use. commonly used additives such as suspending agents, for example sorbitol, syrup, methylcellulose, glucose syrup, gelatin, hardened edible fats; emulsifying agents such as lecithin, monooleate, sorbitan, or acacia; non-aqueous vehicles (which may include edible oils) such as almond oil, fractionated coconut oil, oily esters such as esters derived from glycerin, propylene glycol, or ethyl alcohol; preservatives, for example methyl or propyl p-hydroxybenzoate or sorbic acid and, if desired, flavoring and coloring agents.
Pro topickou aplikaci na kůži je možné aktivní složku(y) zabudovat do struktury krému, pleťového mléka nebo masti. Krémové nebo masťové směsi, které mohou být použity pro výrobu léčiv podle předmětného vynálezu jsou v dané oblasti dobře známé běžně používané směsi, jako jsou například směsi popsané ve standardních učebnicích nebo lékopisech, jako je publikace British Pharmacopoeia.For topical application to the skin, the active ingredient (s) may be incorporated into a cream, lotion or ointment structure. Cream or ointment compositions that can be used to produce the medicaments of the present invention are well known in the art, such as those described in standard textbooks or pharmacopoeias such as British Pharmacopoeia.
Aktivní složka(y) podle tohoto vynálezu podávat parenterálně ve sterilním médiu, je rovněž mozneThe active ingredient (s) of the invention may be administered parenterally in a sterile medium, as is also possible
V závislostí na použitém vehikulu a koncentraci, muže být léčivo v daném *· ·*·· • * · ·· · · • · · * · 9Depending on the vehicle and concentration used, the drug may be at a given level.
9 99 9
999 99 • ♦ · • ♦ > 9998 99 • ♦ · • ♦> 9
9 9 ♦· ·· vehikulu buď suspendováno nebo zcela rozpuštěno. V uvedeném vehikulu mohou být dále výhodně rozpuštěny pomocné látky, jako jsou lokální anestetika, konzervační činidla a pufrovací činidla. Sloučeniny podle předmětného vynálezu je rovněž možné podávat ve formě nitrožilní infuze.9 9 ♦ · ·· vehicle either suspended or completely dissolved. Advantageously, adjuvants such as local anesthetics, preservatives and buffering agents may also be dissolved in said vehicle. The compounds of the present invention may also be administered by intravenous infusion.
Bezpečné a účinné dávky pro různé skupiny pacientů a různé chorobné stavy je možné určit klinickými testy tak, jak to vyžaduje běžná praxe v této oblasti. Je zřejmé, že konkrétní výše dávky pro kteréhokoli konkrétního pacienta je závislá na mnoha faktorech, jejichž skupina zahrnuje aktivitu dané použité sloučeniny, věk pacienta, tělesnou hmotnost pacienta, celkový zdravotní stav pacienta, pohlaví.pacienta, předepsanou dietu, dobu podávání, způsob podávání, rychlost vylučování, kombinaci léčiv a závažnosti konkrétního onemocnění, které- je léčeno.Safe and effective dosages for different patient groups and different disease states can be determined by clinical trials as required by conventional practice in this field. Obviously, the particular dose level for any particular patient is dependent on many factors, the group comprising activity of the compound used, the patient's age, the patient's body weight, the general health of the patient, the sex of the patient, the prescribed diet, time of administration, the rate of excretion, the combination of drugs, and the severity of the particular disease being treated.
Zjištění, že sloučeniny s inhibičním účinkem na polypeptidové deformylasy (PDF) mohou inhibovat nebo zabránit růstu bakterií otvírá novou cestu k identifikaci nových antibakteriálních činidel pomocí hromadného in vitro testování těchto sloučenin se zaměřením na jejich aktivitu inhibice polypeptidové deformylasy (PDF) a následného potvrzení antibakteriálních vlastností těchto sloučenin pomocí studií zaměřených na inhibici růstu bakterií. Toto zjištění rovněž umožňuje (i) použít sloučeniny s inhibičním účinkem na polypeptidové deformylasy (PDF) jako antibakteriální činidla a (ii) způsob léčby bakteriální infekce nebo kontaminace zahrnující aplikaci nebo podávání sloučeniny, která vykazuje uvedenou aktivitu inhibice bakteriální polypeptidové deformylasy (PDF).The discovery that compounds with polypeptide deformylase inhibitory activity (PDF) can inhibit or prevent bacterial growth opens a new way to identify new antibacterial agents by mass in vitro testing of these compounds for their activity in inhibiting polypeptide deformylase (PDF) and subsequently confirming antibacterial properties of these compounds through studies aimed at inhibiting bacterial growth. This finding also makes it possible to (i) use compounds having an inhibitory effect on polypeptide deformylase (PDF) as antibacterial agents and (ii) a method of treating a bacterial infection or contamination comprising administering or administering a compound exhibiting said bacterial polypeptide deformylase inhibition activity (PDF).
·· φφφφ • Φ ·· Φφ·· φφφφ • Φ ·· Φφ
Φ Φ Φ ·Φ Φ Φ ·
Φ Φ Φ ΦΦ Φ Φ Φ
Φ Φ Φ ΦΦ Φ Φ Φ
Φ Φ Φ * ·· ΦΦΦ Φ Φ * ·· ΦΦ
Dalším aspektem předmětného vynálezu tedy je způsob identifikace antibakteriálních sloučenin, který zahrnuje hromadné in vitro testování sloučenin se zaměřením na jejich aktivitu inhibice polypeptidové deformylasy (PDF), vybrání těch sloučenin, které vykazují uvedenou aktivitu, a jejich další testování se zaměřením na jejich schopnost inhibovat růst bakterií. Testování schopnosti inhibovat růst bakterií je možné provádět pomocí klasických studií inhibice růstu bakterií, které se provádějí buď kultivací na desce nebo v kultivačním médiu, jako jsou studie popsané v níže uvedeném oddílu Biologické příklady.Accordingly, a further aspect of the present invention is a method for identifying antibacterial compounds which comprises bulk in vitro testing of compounds for their activity in inhibiting polypeptide deformylase (PDF), selecting those compounds that exhibit said activity, and further testing for their ability to inhibit growth bacteria. Testing of the ability to inhibit bacterial growth can be carried out using classical bacterial growth inhibition studies, which are performed either by plate culture or in culture medium, such as those described in the Biological Examples section below.
Vhodný hromadný in vitro test se zaměřením na aktivitu inhibice polypeptidové deformylasy (PDF) může zahrnovat smíchání polypeptidové deformylasy (PDF), substrátu polypeptidové deformylasy (PDF), výhodně označeného detekovatelným indikátorem, a testované sloučeniny a vyhodnocení po vhodně zvolené době, zda v důsledku přítomnosti dané testované sloučeniny došlo nebo nedošlo k inhibici schopnosti polypeptidové deformylasy (PDF) deformylovat uvedený substrát.A suitable bulk in vitro assay focusing on polypeptide deformylase inhibition activity (PDF) may include mixing the polypeptide deformylase (PDF), the polypeptide deformylase substrate (PDF), preferably labeled with a detectable indicator, and the test compound and evaluation after a suitably selected time for example, the ability of the polypeptide deformylase (PDF) to deformy said substrate has been inhibited.
Při výhodném provedení předmětného vynálezu je deformylovaný substrát detekován pomocí fluorogenového indikátoru, jako je fluorescamin. Po odstranění formylové skupiny z N-konce methioninu substrátu polypeptidové deformylasy (PDF) dojde k reakci volné aminoskupiny s fluorescaminem za vzniku fluorescenčního produktu.In a preferred embodiment of the present invention, the deformed substrate is detected by a fluorogenic indicator such as fluorescamine. After removal of the formyl group from the N-terminus of the methionine of the polypeptide deformylase substrate (PDF), the free amino group reacts with fluorescamine to form a fluorescent product.
Jiný způsob hromadného testovaní zahrnuje hodnocení, zda protein exprimovaný bakteriemi, které exprimují endogenní (nebo rekombinantně exprimovanou) polypeptidovou deformylasu ·· 0000 • 0 0 • 0 0 · ·Another method of bulk testing involves assessing whether a protein expressed by bacteria that express endogenous (or recombinantly expressed) polypeptide deformylase ·· 0000 • 0 0 • 0 0 · ·
0 • •0« 00 • • 0 «0
00 • 0 0 0 0 0« •00 0 0 000 • 0 0 0 0 0 0
0 0 · · *0 000 0 · · * 0 00
0 0 00 0 0
0 0 0 • 0 0 0 • 0 0 0 •0 00 (PDF), při kultivaci v přítomnosti testované sloučeniny poskytuje vhodný substrát pro N-koncové sekvenování nebo zda poskytuje menší množství substrátu než protein exprimovaný stejnými bakteriemi kultivovanými bez přítomnosti testované sloučeniny. Takovýto způsob může být založen na stejném postupu jaký byl použit v níže uvedených Biologických příkladech.0 0 0 • 0 0 0 • 0 0 0 • 0 00 (PDF), when cultured in the presence of a test compound, provides a suitable substrate for N-terminal sequencing or provides less substrate than a protein expressed by the same bacteria cultured in the absence of the test compound. Such a method may be based on the same procedure as used in the Biological Examples below.
Odborník v dané oblasti je schopen vyvinout bez jakéhokoli vynálezeckého úsilí další způsoby hromadného testování sloučenin se zaměřením na jejich aktivitu inhibice polypeptidové deformylasy (PDF).One of skill in the art is able to develop, without any inventive effort, other methods for mass testing of compounds with a view to their activity in inhibiting polypeptide deformylase (PDF).
Přírodní antibiotický aktinonin (viz. například .publikace J. C. S. Perkin 1, 1975, 819) je derivát hydroxamové kyseliny vzorce (A)The natural antibiotic actinonin (see, for example, J. C. S. Perkin 1, 1975, 819) is a hydroxamic acid derivative of formula (A)
různé strukturní (viz. například of the Chemicalvarious structures (see for example
1975; Broughton a Society, Perkin1975; Broughton and Society, Perkin
Kromě vlastního aktioninu byly popsány analogy aktioninu s antibakteriálními účinky publikace Devlin a spolupracovníci: Journal Society, Perkin Transactions 1, (9):830-841, spolupracovníci: Journal of the ChemicalIn addition to actinin itself, actinin analogs with antibacterial effects have been described by Devlin and collaborators: Journal Society, Perkin Transactions 1, (9): 830-841, collaborators: Journal of the Chemical
Transactions 1, (9):857-860, 1975).Transactions 1, (9): 857-860, 1975).
·· ······ ····
Až do současnosti nebyl znám mechanismus antibakteriálního účinku aktioninu, avšak při výzkumu spojeným s předmětným vynálezem bylo zjištěno, že aktionin inhibuje aktivitu bakteriální polypeptidové deformylasy (PDF).To date, the mechanism of the antibacterial action of actionin has not been known, but research in connection with the present invention has found that actionin inhibits bacterial polypeptide deformylase activity (PDF).
Skupina sloučenin matlystatinového typu má mnoho společných strukturních podobností s aktioninem. V obou případech se jedná o peptídové sloučeniny s funkčními skupinami odvozenými od kyseliny hydroxamové, ke kterým je vázán atom kovu (Ogita aThe class of matlystatin-type compounds has many common structural similarities with actionin. Both are peptide compounds with functional groups derived from hydroxamic acid to which a metal atom (Ogita and
tiny a jejich blízké strukturní analogy jsou charakteristické tím, že v jejich struktuře je. přítomná dvojvazná piperazin1,6-diylová skupina, tj. skupinaTiny and their close structural analogs are characterized by their structure. a divalent piperazine-1,6-diyl group, i.e. a group
Vzhledem k těsné strukturní podobnosti skupiny sloučenin matlystatinového typu s aktioninem je možné ze zjištění, že aktionin inhibuje polypeptidovou deformylasu (PDF) odvozovat, že tato skupina sloučenin by rovněž mohla inhibovat polypeptidovou deformylasu (PDF).Due to the close structural similarity of the class of matlystatin type compounds to actionin, it can be inferred from the finding that actionin inhibits polypeptide deformylase (PDF) that this group of compounds could also inhibit polypeptide deformylase (PDF).
Dalším aspektem předmětného vynálezu je použití sloučenin vykazujících aktivitu vzhledem k bakteriální polypeptidové ·· φφφφ • ♦ · • φ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ • φ • Φ φ · φ φ φ φ • · » φ φ φ φφ deformylase (PDF) při přípravě antibakteriálního prostředku nebo činidla s tím, že (i) touto sloučeninou není sloučenina obecného vzorce (XI)Another aspect of the present invention is the use of compounds exhibiting bacterial polypeptide activity with respect to deformylase (PDF), and a bacterial polypeptide activity (PDF). in the preparation of an antibacterial agent or agent, wherein (i) the compound is not a compound of formula (XI)
RCO-CH(W)-NH-CO-CH(Y)-CH2-CO-NH-OH (XI) kde (a) R je cyklická aminoskupina,RCO-CH (W) -NH-CO-CH (Y) -CH 2 -CO-NH-OH (XI) wherein (a) R is a cyclic amino group,
W je atom vodíku, methylová skupina, isopropylová skupina, isobutylová skupina nebo benzylové skupina aW is hydrogen, methyl, isopropyl, isobutyl or benzyl; and
Y je atom vodíku, alkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, fenylová skupina, benzylové skupina, 4-chlorfenylmethylová skupina, 4-nítrofenylmethylová skupina nebo 4-aminofenylmethylová skupina; nebo (b) R je 2-pyridylaminoskupina nebo 2-thiazolyl-Y is a hydrogen atom, an alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, a phenyl group, a benzyl group, a 4-chlorophenylmethyl group, a 4-nitrophenylmethyl group or a 4-aminophenylmethyl group; or (b) R is 2-pyridylamino or 2-thiazolyl-
obecného vzorce (XII)of formula (XII)
(XII) •v ··*· • · * • · * · • <(XII) v · v....
··· »··· »
• · * · • · » * * «» « • · · · ·* »«· * »» * * * * • • • •
Dalším aspektem předmětného vynálezu je způsob léčby bakteriální infekce nebo způsob likvidace bakteriální kontaminace zahrnující podávání nebo aplikaci antibakteriálně účinného množství sloučeniny, která vykazuje aktivitu vzhledem k bakteriální polypeptidové deformylase, pacientovi trpícímu takovouto infekcí, respektive na místo takovéto kontaminace, přičemž musí být splněny podmínky uvedené v bezprostředně následujícím odstavci.Another aspect of the present invention is a method of treating a bacterial infection or a method of controlling bacterial contamination comprising administering or administering an antibacterially effective amount of a compound having bacterial polypeptide deformylase activity to a patient suffering from such infection or to the site of such contamination. immediately following paragraph.
Uvedené vynálezu podmínky vylučují z tohoto aspektu předmětného aktionin a jeho antibakteriálně účinné analogy popsané v publikacích Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1, (9):830-841, 1975 (Devlin a spolupracovníci) aThe present invention excludes from this aspect the present actionin and its antibacterially active analogs described in the Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1, (9): 830-841, 1975 (Devlin et al.) And
Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1, (9):857-860, 1975 (Broughton a spolupracovníci) a sloučeniny matlystatinového typu popsané v publikacích J. Antibiotics, (Ogita a spolupracovníci), J. Antibiotics, (Tanzawa a spolupracovníci), J. Antibiotics,Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1, (9): 857-860, 1975 (Broughton et al.) And matlystatin type compounds described in J. Antibiotics, (Ogita et al.), J. Antibiotics, (Tanzawa et al.) J. Antibiotics
47(12):1473-1480 (Haruyama a spolupracovníci) a J. Antibiotics, 47(12):1481-1492 (Tamaki a spolupracovníci).47 (12): 1473-1480 (Haruyama et al.) And J. Antibiotics, 47 (12): 1481-1492 (Tamaki et al.).
45(11):1723-1732 45(11):1733-173745 (11): 1723-1732. 45 (11): 1733-1737
Příklady provedení vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Následující příklady ilustrují provedení předmětného vynálezu.The following examples illustrate embodiments of the present invention.
N-methylamid L-terc. leucinu a N,N-dimethylamid L-terc. leucinu a ostatní deriváty aminokyselin byly připraveny způsoby dobře známými z odborné literatury.L-tert-N-methylamide. leucine and N, N-dimethylamide L-tert. leucine and other amino acid derivatives were prepared by methods well known in the literature.
V následujícím popisu jsou použity tyto zkratky:The following abbreviations are used in the following description:
DMFDMF
EDCEDC
HOAtHOAt
HOBtHOBt
HPLCHPLC
LRMSLRMS
TLCTLC
N,N-dimethylformamid hydrochlorid N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu l-hydroxy-7-aza-benzotriazolN-N-dimethylformamide hydrochloride N-ethyl-N '- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide 1-hydroxy-7-aza-benzotriazole
1-hydroxybenzotriazol vysokoúčinná kapalinová chromatografíe hmotnostní spektroskopie s nízkým rozlišením chromatografíe na tenké vrstvě 1H a 13C NMR spektra byla měřena na přístroji Bruker AC 250E při frekvenci 250,1, respektive 62,9 megahertz. Hmotnostní spektra byla' měřena na přístroji Perkin Elmer Sciex API 165 jak pomocí režimu s pozitivními ionty, tak režimu s negativními ionty. Infračervená spektra byla měřena na přístroji Perkin Elmer PE 1600 FTIR.1-Hydroxybenzotriazole High Performance Liquid Chromatography Low resolution mass spectroscopy 1 H and 13 C NMR spectra were measured on a Bruker AC 250E at 250.1 and 62.9 megahertz, respectively. Mass spectra were measured on a Perkin Elmer Sciex API 165 using both the positive ion mode and the negative ion mode. Infrared spectra were measured on a Perkin Elmer PE 1600 FTIR instrument.
Příklad 1 (2,2-Dimethyl-lS-methylkarbamoylpropyl)amid kyselinyExample 1 Acid (2,2-Dimethyl-1S-methylcarbamoylpropyl) amide
2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanové2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexane
Uvedený produkt byl připraven postupem znázorněným na reakčním schématu 1 a detailně popsaného v následujících odstavcích:The product was prepared as shown in Reaction Scheme 1 and described in detail in the following paragraphs:
Reakční činidla a podmínky: A. piperidin, HCHO, EtOH, 80 °C, přes noc; B. H2N0Bzl, 80 °C, přes noc; C. HCOOH, Ac20; D. Pentafluorfenol, EDO, CH2C12; E. H-terc. LeuNHMe, DMF, 35 °C; F. H2, 10 % Pd/C, EtOAc/EtOH.Reagents and conditions: A. piperidine, HCHO, EtOH, 80 ° C, overnight; B. H 2 NOBzl, 80 ° C, overnight; C. HCOOH, Ac 2 O; D. pentafluorophenol EDO, CH 2 C1 2; E. H-tert. LeuNHMe, DMF, 35 ° C .; F. H 2 , 10% Pd / C, EtOAc / EtOH.
SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) • · • ·SUBSTITUTE SHEET (RULE 26)
Stupeň A: Kyselina 2-butylakrylová gramů (156 milimolů) kyseliny butylmalonové bylo rozpuštěno ve 250 mililitrech ethanolu a ke vzniklému roztoku bylo postupně přidáno 15,45 mililitru (156 milimolů) 37 procentního roztoku formaldehydu a 47 mililitrů (624 milimolů) piperidinu. Vzniklá směs byla míchána přes noc pod zpětným chladičem při teplotě 80 °C. Ze směsi byly při sníženém tlaku odstraněna rozpouštědla a zbytek byl rozpuštěn v 1 molární kyselině chlorovodíkové a extrahován 3 x 30 mililitry dichlormethanu. Spojené organické extrakty byly promyty solankou, sušeny nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrovány a odpařeny, čímž bylo získáno 25 gramů požadovaného produktu ve formě žlutého oleje, který obsahoval zbytky rozpouštědla.Step A: 2-Butylacrylic acid grams (156 millimoles) of butyl malonic acid was dissolved in 250 milliliters of ethanol, and 15.45 milliliters (156 millimoles) of 37 percent formaldehyde solution and 47 milliliters (624 millimoles) of piperidine were added successively. The resulting mixture was stirred at 80 ° C overnight. The solvents were removed under reduced pressure and the residue was dissolved in 1 molar hydrochloric acid and extracted with 3 x 30 mL dichloromethane. The combined organic extracts were washed with brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and evaporated to give 25 grams of the desired product as a yellow oil containing solvent residues.
'h NMR: δ (CDC13) , 10,04 (1H, brs), 6,22 (1H, s) , 5,57 (1H, d, J=l,3 Hz), 2,30 (2H, t, J=6, 9 Hz), 1,38 (4H, m) , 0,91 (3H, t, J=7,2 Hz) .1 H NMR: δ (CDCl 3 ), 10.04 (1H, brs), 6.22 (1H, s), 5.57 (1H, d, J = 1.3 Hz), 2.30 (2H, t, J = 6.9 Hz), 1.38 (4H, m), 0.91 (3H, t, J = 7.2 Hz).
Stupeň B: Kyselina 2RS-(benzyloxyaminomethyl)-hexanováStep B: 2RS- (Benzyloxyaminomethyl) -hexanoic acid
Směs 3,43 gramu (27,1 milimolu) kyseliny 2-butylakrylové a 5 gramů (40,65 milimolu) O-benzylhydroxylaminu byla zahřívána přes noc na teplotu 80 °C. Poté byla směs ochlazena na teplotu místností, zředěna 40 mililitry ethylacetátu a promyta 3 x 20 mililitry 1 molární kyseliny chlorovodíkové, x 20 mililitry nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 2 x 20 mililitry solanky, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a odpařena. Bylo získáno 2,62 gramů (39 procent) požadovaného produktu ve formě pevné bílé látky.A mixture of 3.43 g (27.1 mmol) of 2-butylacrylic acid and 5 g (40.65 mmol) of O-benzylhydroxylamine was heated at 80 ° C overnight. The mixture was cooled to room temperature, diluted with 40 mL of ethyl acetate and washed with 3 x 20 mL of 1 molar hydrochloric acid, x 20 mL of saturated sodium bicarbonate solution and 2 x 20 mL of brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and evaporated. 2.62 g (39 percent) of the desired product are obtained as a white solid.
• · · · 4 · • · · · · · • 4 · · 4 · * · · · · ·4 · 4 · 4 · 4 · * · · · · · · · · · · · ·
4 · 4 4 4 ·· ·4 ·· mililitry 20 mililitry 20 mililitry 2Η NMR: δ (CDC13) , 8,05 (1Η, brs) , 7,35 (5Η, m) , 5,00 (2Η, m) ,4 · 4 4 4 ·· · 4 ·· milliliters 20 milliliters 20 milliliters 2 Η NMR: δ (CDCl 3 ), 8.05 (1Η, brs), 7.35 (5Η, m), 5.00 (2Η, m),
3,28 (2Η, m), 2,98 (1Η, m) , 1,31 (6Η, m) , 0,88 (3Η, t,3.28 (2Η, m), 2.98 (1Η, m), 1.31 (6Η, m), 0.88 (3Η, t,
J=5,0 Hz) .J = 5.0 Hz).
Stupeň C: kyselina 2RS-[(benzyloxyformylamino)-methyl]hexanováStep C: 2RS - [(Benzyloxyformylamino) methyl] hexanoic acid
2,62 gramu (10,51 milimolů) kyseliny 2RS-(benzyloxyaminomethyl)-hexanové bylo rozpuštěno ve 4 mililitrech (105 milimolů) kyseliny mravenči a 1,9 mililitru (21,02 mílimolu) acetanhydridu a vzniklá byla míchána přes noc při teplotě místností. Poté byla směs zředěna ethylacetátu, promyta 2 x 20 mililitry vody, nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a solanky, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a odpařena. Bylo získáno 2,9 gramů (99 procent) požadovaného produktu ve formě žlutého oleje.2.62 grams (10.51 millimoles) of 2RS- (benzyloxyaminomethyl) -hexanoic acid was dissolved in 4 milliliters (105 millimoles) of formic acid and 1.9 milliliters (21.02 millimoles) of acetic anhydride and stirred overnight at room temperature. . The mixture was then diluted with ethyl acetate, washed with 2 x 20 mL water, saturated sodium bicarbonate solution and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and evaporated. 2.9 g (99 percent) of the desired product were obtained as a yellow oil.
’Ή NMR: 5(CDCl3, rotamery) , 8,21 (0,5H, s), 8,14 (0,5H, s), 7,37 (5H, m) , 4,98 (2H, m) , 3,86 (1H, m) , 3,27 (0,5H, dd, J=6,0, 14,0 Hz), 2,93 (0,5H, m) , 2,77 (1H, m) , 1,50 (2H, m) ,1 H NMR: δ (CDCl 3, rotamers), 8.21 (0.5H, s), 8.14 (0.5H, s), 7.37 (5H, m), 4.98 (2H, m) 3.86 (1H, m), 3.27 (0.5H, dd, J = 6.0, 14.0 Hz), 2.93 (0.5H, m), 2.77 (1H, m 1.50 (2H, m),
1,30 (4H, m), 0,88 (3H, m).1.30 (4H, m); 0.88 (3H, m).
Stupeň D: Pentafluorfenylester kyseliny 2RS-[(benzyloxyformylamíno)-methyl]-hexanovéStep D: 2RS - [(Benzyloxyformylamino) -methyl] -hexanoic acid pentafluorophenyl ester
30,72 gramu (110 milimolů) kyseliny 2RS-[(benzyloxyformylamino)-methyl]-hexanové a 26,31 gramu (143 milimolů) pentafluorfenolu bylo rozpuštěno ve 150 mililitrech dichlormethanu a vzniklý roztok byl během přidávání 25,3 gramu (131 milimolů) hydrochloridu N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu míchán a chlazen v ledové lázni. Následně byla reakční směs ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána přes noc. Roztok byl postupně promyt 2 x 50 mililitry 1 molární kyseliny chlorovodíkové, 2 x 50 mililitry 0,5 molárního roztoku uhličitanu sodného a 50 mililitry solanky, sušen nad bezvodým síranem hořečnatým a přefiltrován. Po odpaření filtrátu při sníženém tlaku byl získaný zbytek přečištěn mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu eluovaným dichlormethanem. Bylo získáno 15,0 gramů (31 procent) požadovaného produktu ve formě bezbarvého oleje.30.72 grams (110 millimoles) of 2RS - [(benzyloxyformylamino) -methyl] -hexanoic acid and 26.31 grams (143 millimoles) of pentafluorophenol were dissolved in 150 milliliters of dichloromethane and the resulting solution was added 25.3 grams (131 millimoles) during the addition. of N-ethyl-N '- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride stirred and cooled in an ice bath. Subsequently, the reaction mixture was allowed to warm to room temperature and stirred overnight. The solution was washed successively with 2 x 50 ml of 1 molar hydrochloric acid, 2 x 50 ml of 0.5 molar sodium carbonate solution and 50 ml of brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and filtered. After evaporation of the filtrate under reduced pressure, the obtained residue was purified by silica gel flash column chromatography eluting with dichloromethane. 15.0 g (31%) of the desired product were obtained as a colorless oil.
2Η NMR: 5(CDC13, rotamery) , 8,17 (1H, brs) , 7,37 (5H, m) , 4,954,70 (2H, brm), 4,10-3,75 (2H, brm), 3,10 (1H, brs), 1,88-1,55 (2'H, m), 1,39 (4H, m), 0,92 (3H, t, J=7,0 Hz). 2 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 8.17 (1H, brs), 7.37 (5H, m), 4.954.70 (2H, brm), 4.10-3.75 (2H, brm) ), 3.10 (1H, brs), 1.88-1.55 (2'H, m), 1.39 (4H, m), 0.92 (3H, t, J = 7.0 Hz) .
Stupeň E: (2,2-Dimethyl-l-methylkarbamoylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(benzyloxyformylamino)—methyl]-hexanové gramů (11 milimolů) pentafluorfenylesteru kyseliny 2RS-[(benzyloxyformylamino)-methyl]-hexanové a 1,62 gramu (11 milimolů) N-methylamin terč. leucinu bylo rozpuštěno v 60 mililitrech N,N-dimethylformamidu (DMF) a vzniklá směs byla míchána přes noc při teplotě 35 °C, odstraněno při sníženém tlaku v dichlormethanu. Roztok byl roztokem uhličitanu sodného,Step E: 2R (or S) - [(Benzyloxyformylamino) -methyl] -hexanoic acid (2,2-Dimethyl-1-methylcarbamoylpropyl) -amide 2RS - [(benzyloxyformylamino) -methyl] -hexanoic acid pentafluorophenyl ester a 1.62 g (11 millimoles) of N-methylamine target; The leucine was dissolved in 60 ml of N, N-dimethylformamide (DMF) and the resulting mixture was stirred overnight at 35 ° C, removed under reduced pressure in dichloromethane. The solution was a sodium carbonate solution,
Rozpouštědlo bylo a zbytek byl znovu rozpuštěn postupně promyt 0,5 molárním 1 molární kyselinou chlorovodíkovou a solankou, sušen nad bezvodým síranem hořečnatým a přefiltrován. Získané dva diastereoizomerní produkty byly od sebe odděleny mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu s gradientovou elucí ethylacetátem obsahujícím postupně od 30 procent do 0 procent hexanu.The solvent was and the residue redissolved successively washed with 0.5 molar 1 molar hydrochloric acid and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and filtered. The two diastereoisomeric products were separated from each other by flash chromatography on a silica gel column eluting with a gradient of ethyl acetate containing from 30 percent to 0 percent hexane.
Diastereoizomer A (větší Rf) : 2Η NMR: δ(CDCI3, rotamery), 8,12, 7,87 (1H, 2brs), 7,27 (5H, m) , 6,26 (1H, d, J=8,7 Hz), 5,78 • · · · (1H, brs), 4,91-4,60 (2H, brm), 4,15 (1H, d, J=9,2 Hz), 3,75 (2H, brm), 2,79 (3H, d, J=4,8 Hz), 2,56 (1H, m) , 1,60-1,35 (2H, brm), 1,24 (4H, m), 0,96 (9H, s), 0,86 (3H, t, J=6,7 Hz);Diastereoisomer A (greater Rf): 2 H NMR: δ (CDCl 3, rotamers), 8.12, 7.87 (1H, 2brs), 7.27 (5H, m), 6.26 (1H, d, J = 8.7 Hz), 5.78 (1H, brs), 4.91-4.60 (2H, brm), 4.15 (1H, d, J = 9.2 Hz), 3, 75 (2H, brm), 2.79 (3H, d, J = 4.8Hz), 2.56 (1H, m), 1.60-1.35 (2H, brm), 1.24 (4H) m), 0.96 (9H, s), 0.86 (3H, t, J = 6.7 Hz);
Diastereoizomer B (menší Rf) : XH NMR: δ (CDC13, rotamery), 8,16, 7,88 (1H, 2brs), 7,27 (5H, m) , 6,28 (1H, d, J=8,9Hz), 5,705,44 (1H, brs), 4,98-4,61 (2H, brm), 4,14 (1H, d, J=9,2 Hz),Diastereoisomer B (smaller Rf) X H NMR: δ (CDC1 3, rotamers), 8.16, 7.88 (1H, 2br s), 7.27 (5H, m), 6.28 (1H, d, J = 8.9 Hz), 5.705.44 (1H, brs), 4.98-4.61 (2H, brm), 4.14 (1H, d, J = 9.2 Hz),
3,78-3,62 (2H, brm), 2,85-2,60 (3H, brm), 2,47 (1H, m), 1,721,25 (6H, brm), 0,98 (9H, s), 0,88 (3H, t, J=6,7 Hz).3.78-3.62 (2H, brm), 2.85-2.60 (3H, brm), 2.47 (1H, m), 1.721.25 (6H, brm), 0.98 (9H, s), 0.88 (3H, t, J = 6.7 Hz).
Stupeň F: (2,2-Dimethyl-lS-methylkarbamoylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanovéStep F: 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexanoic acid (2,2-dimethyl-1S-methylcarbamoylpropyl) amide
1,0 gram (2,5 milimolů) (2,2-dimethyl-l-methylkarbamoylpropyl)amidu kyseliny 2-[(benzyloxyformylamino)-methyl]-hexanové (diastereoizomerů A) bylo rozpuštěno ve směsi 20 mililitrů ethylacetátu a 1 mililitru ethanolu a vzniklý roztok byl umístěn pod argonovou atmosféru. Ke směsi bylo přidáno 10 procentní palladium na aktivním uhlí a skrz suspenzi byl ponechán probublávat mírný proud vodíku. Po 40 minutách bylo analytickou chromatografii na tenké vrstvě (TLC) zjištěno, že byla spotřebována veškerá výchozí látka za vzniku polárnější sloučeniny pozitivně reagující na chlorid železitý. Před odfiltrováním katalyzátoru ze směsi byl systém propláchnut argonem. Filtrát byl odpařen do sucha a bylo získáno 810 miligramů požadovaného produktu ve formě bílé pěny, která obsahovala zbytky rozpouštědla.1.0 g (2.5 millimoles) of 2 - [(benzyloxyformylamino) -methyl] -hexanoic acid (2,2-dimethyl-1-methylcarbamoylpropyl) -amide (diastereoisomer A) was dissolved in a mixture of 20 ml of ethyl acetate and 1 ml of ethanol and the resulting solution was placed under an argon atmosphere. To the mixture was added 10 percent palladium on charcoal and a slight stream of hydrogen was bubbled through the slurry. After 40 minutes, analytical thin layer chromatography (TLC) revealed that all of the starting material was consumed to give a more polar compound reacting positively to ferric chloride. The system was purged with argon before filtering the catalyst from the mixture. The filtrate was evaporated to dryness to give 810 mg of the desired product as a white foam containing solvent residues.
XH NMR: 5((CD3)2SO, rotamery), 9,81, 9,41 (1H, 2brs), 7,82-7,60 (3H, m) , 4,04 (1H, d, J=9,3 Hz), 3,50-3,02 (2H, m), 2,87-2,60 (1H, m) , 2,41 (3H, d, J=4,5 Hz), 1,39-0,93 (6H, m) , 0,75 (9H, 1 H NMR: δ ((CD 3 ) 2 SO, rotamers), 9.81, 9.41 (1H, 2brs), 7.82-7.60 (3H, m), 4.04 (1H, d, J = 9.3 Hz), 3.50-3.02 (2H, m), 2.87-2.60 (1H, m), 2.41 (3H, d, J = 4.5 Hz), 1.39-0.93 (6H, m), 0.75 (9H,
s), 0,67 (3H, t, J=5,7 Hz).s), 0.67 (3H, t, J = 5.7 Hz).
• · · · · ·• · · · · ·
IČ (tableta KBr),· vmax 3309, 2959, 2873, 1646, 1540 cm1.IR (KBr disc) · v max 3309, 2959, 2873, 1646, 1540 cm 1st
Podobným způsobem byl odchráněn 1,0 gram (2,5 milimolu) (2,2-dimethyl-l-methylkarbamoylpropyl)amidu kyseliny 2-[(benzyloxyformylamino)-methyl]-hexanové (diastereoizomer B) za vzniku 740 miligramů (97 procent) diastereoizomeru B požadovaného produktu.In a similar manner, 1.0 g (2.5 millimoles) of 2 - [(benzyloxyformylamino) methyl] -hexanoic acid (2,2-dimethyl-1-methylcarbamoylpropyl) amide (diastereoisomer B) was deprotected to give 740 mg (97 percent). diastereoisomer B of the desired product.
1H NMR: č((CD3)2SO, rotamery) , 9,75, 9,30 (1H, 2brs) , 7,81-7,42 (3H, m) , 4,04 (1H, d, J=9,5 Hz), 3,53-3,02 (2H, m) , 2,80-2,55 (1H, m) , 2,41 (3H, d, J=4,5Hz), 1,33-0,82 (6H, m) , 0,72 (9H, 1 H NMR: δ ((CD 3 ) 2 SO, rotamers), 9.75, 9.30 (1H, 2brs), 7.81-7.42 (3H, m), 4.04 (1H, d, J = 9.5 Hz), 3.53-3.02 (2H, m), 2.80-2.55 (1H, m), 2.41 (3H, d, J = 4.5Hz), 1 33-0.82 (6H, m), 0.72 (9H, m)
s) , 0, 67 (3H, t, J=6,7 Hz) .s), 0.67 (3H, t, J = 6.7 Hz).
13C NMR: 5((CD3)2SO), 172,6, 170,4, 161,7, 157,0, 59,8 , 34,0, 13 C NMR: δ ((CD 3 ) 2 SO), 172.6, 170.4, 161.7, 157.0, 59.8, 34.0,
29,4, 28,6, 26,7, 25,2, 22,1, 14,1.29.4, 28.6, 26.7, 25.2, 22.1, 14.1.
IČ (tableta KBr), vmax 3312, 2959, 1640, 1541, 1369, 1240 cm1.IR (KBr tablet), νm x 3312, 2959, 1640, 1541, 1369, 1240 cm -1 .
Příklad 2 (2,2-Dimethyl-lS-terc. butylkarbamoylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanovéExample 2 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexanoic acid (2,2-dimethyl-1S-tert-butylcarbamoylpropyl) amide
Uvedený produkt byl připraven postupem analogickým k postupu popsanému v příkladu 1 s tím, že ve stupni E byl místo N-methylamidu L-terc. leucinu použit N-terc. butylamid L-terc. leucinu. Připravené diastereoizomery nebylo možné ve • · · · • * 9 9 9 9 · 9 9 9 9The product was prepared in a manner analogous to that described in Example 1 except that, in step E, N-methylamide was replaced with L-tert. leucine N-tert. butylamide L-tert. leucine. Prepared diastereoisomers were not possible in 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
Ε.Λ ······«··..Ε.Λ ······ «·· ..
-'Tt · « ······« • ·· · · ·«··* · · ·· stupni E oddělit mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu s elucí ethylacetátem a byly hydrogenolýzou převedeny na směs diastereoizomerů požadovaného derivátu N-formylhydroxylaminu. vzniklý produkt měl podobu pevné bílé látky.Step E was separated by flash chromatography on a silica gel column eluting with ethyl acetate and converted to a mixture of diastereoisomers of the desired N-formylhydroxylamine derivative by hydrogenolysis. the resulting product was a white solid.
1364, 1226 cm-1.1364, 1226 cm -1 .
Příklad 3 (lS-Methyl-2-morfolín-4-yl-2-oxo-ethyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanovéExample 3 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexanoic acid (1S-methyl-2-morpholin-4-yl-2-oxo-ethyl) -amide
Roztok 445 miligramů (1 milimol) pentafluorfenylesteru kyseliny 2RS-[(benzyloxyformylamino)-methyl]-hexanové (připravené ve stupni D příkladu 1) v 5 mililitrech N,N-dimethylformamidu (DMF) byl přidán ke 158 miligramům (1 milimolu) L-alanin-N-morfolinamidu ve varné trubici a vzniklá směs byla přes noc míchána při teplotě 35 °C. N, N-dimethylformamid (DMF) byl odstraněn ve vakuu a zbytek byl znovu rozpuštěn ve 2 mililitrech dichlormethanu a aby došlo k odstranění pentafluorfenolu, byl ponechán projít skrz čisticí patronu (Isolut-NH2) a eluován 4 mililitry dichlormethanu. Ze směsi byl • · • · • φ φ φ φ φ • · · · • · Φ· • φφ · při sníženém tlaku odstraněn dichlormethan a získaný zbytek byl znovu rozpuštěn ve směsi tvořené 2 mililitry kyseliny mravenčí a 2 mililitry ethylacetátu. Následně bylo k roztoku přidáno 200 miligramů 10 procentního palladia na aktivním uhlí a vzniklá místnosti.A solution of 445 mg (1 mmol) of 2RS - [(benzyloxyformylamino) -methyl] -hexanoic acid pentafluorophenyl ester (prepared in Step D of Example 1) in 5 ml of N, N-dimethylformamide (DMF) was added to 158 mg (1 mmol) of L- of alanine-N-morpholinamide in a boiling tube and the resulting mixture was stirred at 35 ° C overnight. The N, N-dimethylformamide (DMF) was removed in vacuo and the residue was redissolved in 2 mL of dichloromethane and passed through a purification cartridge (Isolut-NH 2 ) and eluted with 4 mL of dichloromethane to remove pentafluorophenol. Dichloromethane was removed from the mixture under reduced pressure and the residue was redissolved in a mixture of 2 ml of formic acid and 2 ml of ethyl acetate. Subsequently, 200 milligrams of 10 percent palladium on charcoal was added to the solution and the resulting rooms were added.
suspenze byla 2 hodiny míchána při teplotě Filtrací přes celit byl odstraněn katalyzátor, který byl důkladně promyt methanolem a rozpouštědla byla odstraněna ve vakuu. Vzniklé sloučeniny byly přečištěny vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) s reverzními fázemi (s gradientovou elucí vodou obsahující postupně od 10 do 90 procent acetonitrilu).The suspension was stirred at temperature for 2 hours. The catalyst was removed by filtration through celite, which was washed well with methanol and the solvents were removed in vacuo. The resulting compounds were purified by reverse phase high performance liquid chromatography (HPLC) (gradient elution with water containing from 10 to 90 percent acetonitrile sequentially).
LRMS: 328 [M-H].LRMS: 328 (MH).
Sloučeniny připravené v příkladech 4 až 12 byly připraveny analogicky k postupu popsanému v příkladu 3 s tím, že místo L-alanin-N-morfolinamidu byly použity příslušné aminy. V případech, kdy byly připraveny oba diastereoizomery, byl jako diastereoizomer A označen ten z diastereoizomerů, k jehož eluci docházelo rychleji a jehož aktivita proti polypeptidové deformylase (PDF) při in vitro testech byla větší. V některých případech byl konečný produkt vyroben pouze z rychleji eluovaného diastereoizomerů.The compounds prepared in Examples 4 to 12 were prepared in analogy to the procedure described in Example 3 except that the appropriate amines were used instead of L-alanine-N-morpholinamide. In cases where both diastereoisomers were prepared, diastereoisomer A was designated as one of the diastereoisomers which eluted more rapidly and whose activity against polypeptide deformylase (PDF) was greater in in vitro assays. In some cases, the end product was made only from the faster eluting diastereoisomers.
dd, J=8,9, 13,0 Hz), 3,23 (1H, m), 3,14 (3H, s), 2,95 (3H, s)dd, J = 8.9, 13.0 Hz), 3.23 (1H, m), 3.14 (3H, s), 2.95 (3H, s)
2,83 (0,5H, m) , 2,74 (0,5H, m) , 1,57 (2H, m) , 1,33 (7H, m) ,2.83 (0.5H, m), 2.74 (0.5H, m), 1.57 (2H, m), 1.33 (7H, m),
0,92 (3H, m). LRMS: 288 [M+H], 286 [M-H].0.92 (3 H, m). LRMS: 288 [M + H], 286 [M-H] < + >.
m) , 1,33 (7H, m) , 0,93 (3H, t, -J=6,7 Hz). LRMS: 310 [M+Na],m), 1.33 (7H, m), 0.93 (3H, t, J = 6.7 Hz). LRMS: 310 [M + Na] < + >
286 [M-H].286 [M- H].
Příklad 5 (lS-Hydroxymethyl-3-methylbutyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanovéExample 5 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexanoic acid (1S-hydroxymethyl-3-methylbutyl) amide
·· ···· • · · · · · • · · · • · · · · • · · ··· ···· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·
9999 9 999 ·9 99 • 9 9 9 9 • · · · ·9999 9,999 · 9,999 · 9 9 9 9 • · · · ·
9 9 9 9 9 • 9 9 9 99 9 9 9 • 9 9 9 9
99 9999 99
Diastereoizomer A: 1H NMR: 5(CD3OD), 4,07 (1H, m) , 3,55 (1H,Diastereoisomer A: 1 H NMR: δ (CD 3 OD), 4.07 (1H, m), 3.55 (1H,
m) , 3,45 (2H, m) , 3,20 (1H, m) , 2,85 (0,5H, m) , 2,80 (0,5H, m) , 1,60 (3H, m) , 1,35 (6H, m), 0,93 (9H, m) . LRMS: 289 [M+H], 287 [M-H].m), 3.45 (2H, m), 3.20 (1H, m), 2.85 (0.5H, m), 2.80 (0.5H, m), 1.60 (3H, m) 1.35 (6H, m), 0.93 (9H, m). LRMS: 289 [M + H], 287 [M-H] < - >.
Diastereoizomer B: 1H NMR: 5.(CD3OD) , 4,07 (1H, m) , 3,59 (1H, m) , 3,45 (2H, m) , 3,24 (1H, m) , 2,70 (1H, m) 1,62 (3H, m) , 1,35 (6H, m) , 0,93 (9H, m) . LRMS: 311 [M+Na], 289 [M+H],Diastereoisomer B: 1 H NMR: δ (CD 3 OD), 4.07 (1H, m), 3.59 (1H, m), 3.45 (2H, m), 3.24 (1H, m) 2.70 (1H, m), 1.62 (3H, m), 1.35 (6H, m), 0.93 (9H, m). LRMS: 311 [M + Na] +, 289 [M + H] +,
287 [M-H].287 [M- H].
Příklad 6 (1S-Hydroxymethy1-2-fenylethyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanovéExample 6 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexanoic acid (1S-hydroxymethyl-2-phenylethyl) amide
Diastereoizomer A: 1H NMR: δ (CD3OD) , 7,24 (5H, m) , 4,15 (1H,Diastereoisomer A: 1 H NMR: δ (CD 3 OD), 7.24 (5H, m), 4.15 (1H,
Diastereoizomer B: LRMS: 345 [M+Na], 323 [M+H], 321 [M-H].Diastereoisomer B: LRMS: 345 [M + Na], 323 [M + H], 321 [M-H] < + >.
Příklad 7 • 00 0 0 • ·· 00 00 • · · · 0 0 0 0Example 7 00 00 0 00 00 00 0 0 0 0 0
0 0 · · · 0 • · 0 0 0 0 0 0 00 0 · · · 0 · · 0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 · · 0 • 00 00 00 00 (2,2-Dimethyl-lS-pyridin-2-yl-karbamoyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanové0 0 0 · · 0 • 00 00 00 00 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexanoic acid (2,2-dimethyl-1S-pyridin-2-yl-carbamoyl) amide
φ *· φφ φφ φφφ φ φ φφ φ φφφ φ φ φ φ φ φφ φφφ φφ φ φφφ φφφφ φφφ ·« φφ φφφ · · · · φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ
Příklad 8 φφ ·»Φ· φ φ · φ φ .* ϊ φφφφ φ (lS-Dimethylkarbamoyl-2-methylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanovéExample 8 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2-methylpropyl) amide
Diastereoizomer A: bezbarvý olej. LRMS: 338 [M+Na], 319 [M-H]Diastereoisomer A: colorless oil. LRMS: 338 [M + Na], 319 [M-H].
Příklad 9 (lS-Dimethylkarbamoyl-2-fenylethyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanové·Example 9 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2-phenylethyl) amide
Diastereoizomer A: bezbarvý olej Diastereoizomer B: bezbarvý olejDiastereoisomer A: colorless oil Diastereoisomer B: colorless oil
LRMS: 386 LRMS: 386 [M+Na], [M+Na],LRMS: 386 [M + Na], [M + Na],
362 [M-H] 362 [M-H]362 [M-H]
Příklad 10 φφ • · φExample 10 φφ • · φ
φφφφ φ φ φ φ φ φφφφφφφ φ φ φ φ φ φφφ
• Φ φ• Φ φ
• • φ φ φφ • Φ φ · · • Φ <4>• • φ φ 4 4 4 · · 4 <4>
• Φ Φ• Φ Φ
Φ Φ ΦΦ Φ Φ
ΦΦ (lS-Dimethylkarbamoyl-3-methylbutyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanové2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexanoic acid l (1S-dimethylcarbamoyl-3-methylbutyl) amide
Diastereoizomer A: bezbarvý olej. LRMS: 352 [M+Na]., 328 [M-H].Diastereoisomer A: colorless oil. LRMS: 352 [M + Na] < + >, 328 [M-H].
Příklad 11 (3-Methyl-lS-pyrrolidin-l-karbonylbutyl)amid kyselinyExample 11 Acid (3-methyl-1S-pyrrolidine-1-carbonylbutyl) amide
2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanové2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexane
Diastereoizomer A: bezbarvý olej. LRMS: 354 [M-H].Diastereoisomer A: colorless oil. LRMS: 354 [M-H] < - >.
Příklad 12 • · « ·Example 12 • · «·
Dimethylamid kyseliny 1-{2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)methyl]-hexanoyl}-pyrrolidin-2S-karboxylové1- {2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl] -hexanoyl} -pyrrolidine-2S-carboxylic acid dimethylamide
Diastereoizomer A: bezbarvý olej. LRMS: 336 [M+Na], 312 [M-H]. Diastereoizomer A: bezbarvý olej. LRMS: 336 [M+Na], 312 [M-H].Diastereoisomer A: colorless oil. LRMS: 336 [M + Na], 312 [M-H] < - >. Diastereoisomer A: colorless oil. LRMS: 336 [M + Na], 312 [M-H] < - >.
Příklad 13 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl]-hexanovéExample 13 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) -methyl] -hexanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Způsob IMethod I
Uvedený produkt byl připraven postupem znázorněným na reakčním schématu 2 a detailně popsaného v následujících odstavcích:The product was prepared as shown in Reaction Scheme 2 and described in detail in the following paragraphs:
• · · · • ·· · • · · · · ·· · • · · · · · · ·· * · · » · ·· · · · · · · · · · · · · · · · · ·
SUBSTITUTE SHEET (RULE 2óJ • · ··· · · · · £0 · · · ····«··· ·—> · · ···*··· ···· · ··· «· ·· ··SUBSTITUTE SHEET (RULE 2óJ) £ 0 · £ 0 · -> -> ··· * ··· ···· · ··· · ··
Stupeň A: Ethylester kyseliny 2RS-formyl-heptanovéStep A: 2RS-Formyl-heptanoic acid ethyl ester
4,38 gramu (0,191 milimolů) kovového sodíku bylo nakrájeno na malé kousky a pod proudem argonu přidáno do dvouhrdlé baňky s kulatým dnem, která byla předem vysušena v sušicí peci. Do baňky bylo přidáno 100 mililitrů bezvodého diethyletheru a směs byla míchána a ochlazena na teplotu 0 °C. Baňka byla opatřena zpětným chladičem a ke směsi bylo přikapáno4.38 grams (0.191 millimoles) of sodium metal was cut into small pieces and added under a stream of argon to a two-necked round-bottom flask which had been previously dried in a drying oven. To the flask was added 100 mL of anhydrous diethyl ether, and the mixture was stirred and cooled to 0 ° C. The flask was equipped with a reflux condenser and added dropwise to the mixture
I, 03 mililitru (17,3 milimolů) ethanolu. Během 20 minut byla ke směsi přikapávací nálevkou přikapána směs 15,41 gramu (0,208 milimolů) ethylformiátu a 25 gramů (0,173 milimolů) ethylkaproátu. Výsledná oranžová suspenze (ve které byl stále viditelný kovový sodík) byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána přes noc. Výsledná hustá oranžová suspenze (ve které již nebyl viditelný kovový sodík) byla ochlazena na teplotu 0 °C a zředěna 100 mililitry ledově studené vody. Směs byla převedena do dělicí nálevky, vodná vrstva byla oddělena, promyta diethyletherem, ochlazena na teplotu 0 °C a okyselena 200 mililitry 1 molární kyseliny chlorovodíkové. Vzniklá emulze byla extrahována ethylacetátem a organická vrstva byla oddělena, promyta solankou, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a přefiltrována. Získaný filtrát byl zahuštěn při sníženém tlaku a bylo získáno 11,09 gramu žlutého oleje, jehož hlavní složkou byl požadovaný produkt, který byl použit přímo bez dalšího přečištění ve stupni B.1.0 milliliters (17.3 millimoles) of ethanol. A mixture of 15.41 grams (0.208 millimoles) of ethyl formate and 25 grams (0.173 millimoles) of ethylcaproate was added dropwise via addition funnel over 20 minutes. The resulting orange suspension (in which sodium metal was still visible) was allowed to warm to room temperature and stirred overnight. The resulting thick orange suspension (in which sodium metal was no longer visible) was cooled to 0 ° C and diluted with 100 mL of ice-cold water. The mixture was transferred to a separatory funnel, the aqueous layer was separated, washed with diethyl ether, cooled to 0 ° C, and acidified with 200 mL of 1 molar hydrochloric acid. The resulting emulsion was extracted with ethyl acetate and the organic layer was separated, washed with brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure to give 11.09 g of a yellow oil, the major component being the desired product, which was used directly without further purification in Step B.
Stupeň B: Ethylester kyseliny 2RS-(benzyloxyiminomethyl)heptanovéStep B: 2RS- (Benzyloxyiminomethyl) heptanoic acid ethyl ester
II, 0 gramů (63,9 milimolů) surového produktu Claisenovy reakce získaného ve stupni A bylo rozpuštěno ve 100 mililitrech • ·II, 0 grams (63.9 millimoles) of the crude Claisen reaction product obtained in Step A was dissolved in 100 milliliters.
ethanolu a 10 mililitrech vody a během přidávání 6,2 gramu (76,6 milimolu) acetátu sodného a 12,23 gramu (76,6 milimolu) hydrochloridu O-benzylhydroxylaminu byla směs ochlazena na teplotu 0 °C. Směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána přes noc. Vzniklá suspenze byla přefiltrována a získaný filtrát byl zahuštěn při sníženém tlaku. Získaná žlutá pasta byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla promyta 1 molárni kyselinou chlorovodíkovou a solankou, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a odpařena za zisku žlutého oleje. Požadovaný produkt byl získán mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu s gradientovou elucí hexanem, který obsahoval postupně od 10 procent do 25 procent ethylacetátu. Bylo získáno 9,19 gramu (52 procent).ethanol and 10 mL of water, and while adding 6.2 g (76.6 mmol) of sodium acetate and 12.23 g (76.6 mmol) of O-benzylhydroxylamine hydrochloride, the mixture was cooled to 0 ° C. The mixture was allowed to warm to room temperature and stirred overnight. The resulting suspension was filtered and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The resulting yellow paste was partitioned between ethyl acetate and water. The organic layer was washed with 1 molar hydrochloric acid and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and evaporated to give a yellow oil. The desired product was obtained by flash column chromatography on silica gel eluting with hexane containing from 10 percent to 25 percent ethyl acetate sequentially. 9.19 g (52 percent) were obtained.
1H NMR: č(CDCl3, směs syn- a anti-izomeru) , 7,46 (0,6H, d, 1 H NMR: δ (CDCl 3 , mixture of syn- and anti-isomer), 7.46 (0.6H, d,
J=8,0 Hz), 7, 38-7,28 (5H, m) , 6,79 (0,4H, d, J=7,l Hz), 5,11 (0,8H, s), 5,08 (1,2H, s), 4,16 (1,2H, q, J=7,0 Hz), 4,13 (0,6H, q, J=7,0 Hz), 3,91 (0,4H, q, J=7,2 Hz), 3,21 (0,6H, td, J=8,0 a 6,1 Hz), 1,90-1, 48 (2H, m) , 1,37-1,20 (7H, m) , 0,87 (3H, t, J=7,0 Hz) .J = 8.0 Hz), 7.38-7.28 (5H, m), 6.79 (0.4H, d, J = 7.1 Hz), 5.11 (0.8H, s), 5.08 (1.2H, s), 4.16 (1.2H, q, J = 7.0 Hz), 4.13 (0.6H, q, J = 7.0 Hz), 3.91 (0.4H, q, J = 7.2 Hz), 3.21 (0.6H, td, J = 8.0 and 6.1 Hz), 1.90-1.48 (2H, m), 1.37-1.20 (7H, m), 0.87 (3H, t, J = 7.0 Hz).
Stupeň C: Kyselina 2RS-(benzyloxyiminomethyl)-heptanováStep C: 2RS- (Benzyloxyiminomethyl) -heptanoic acid
7,0 gramů (25,24 milimolu) ethylesteru kyseliny 2RS-(benzyloxyiminomethyl) -heptanové bylo rozpuštěno ve 125 mililitrech methanolu a roztok byl ochlazen na teplotu 0 °C. K roztoku7.0 grams (25.24 mmol) of 2RS- (benzyloxyiminomethyl) -heptanoic acid ethyl ester was dissolved in 125 ml of methanol and the solution was cooled to 0 ° C. To the solution
6'mililitrů vzniku světle bylo během minut po částech přidáno (26 milimolů) 1 molárního hydroxidu sodného za žluté emulze. Směs byla naředěna dalším methanolem až do jejího úplného vyčeření a vzniklý roztok byl ponechán 90 minut míchat při teplotě 0 °C a po uplynutí této doby byl míchán dalších 5 hodin pří teplotě místnosti, kdy analýzouSix milliliters of light formation was added portionwise (26 millimoles) of 1 molar sodium hydroxide in portions over minutes in yellow emulsions. The mixture was diluted with additional methanol until clear, and the resulting solution was allowed to stir at 0 ° C for 90 minutes, after which it was stirred for an additional 5 hours at room temperature, where
chromatografií na tenké vrstvě (TLC) bylo zjištěno, že došlo ke zreagování veškerého výchozího materiálu. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku a získaný zbytek byl rozdělen mezi vodu a ethylacetát. Vodná vrstva byla ochlazena na teplotu 0 °C a okyselena 1 molární kyselinou chlorovodíkovou. Takto vzniklá emulze byla dvakrát extrahována ethylacetátem a spojené organické vrstvy byly promyty solankou, sušeny nad bezvodým síranem hořečnatým a přefiltrovány. Získaný filtrát byl zahuštěn při sníženém tlaku a bylo získáno 5,12 gramu (82 procent) produktu ve formě žlutého oleje, který byl použit ve stupni D bez dalšího přečištění.TLC showed that all of the starting material had reacted. The solvent was removed under reduced pressure and the residue was partitioned between water and ethyl acetate. The aqueous layer was cooled to 0 ° C and acidified with 1 molar hydrochloric acid. The resulting emulsion was extracted twice with ethyl acetate and the combined organic layers were washed with brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure to give 5.12 g (82 percent) of the product as a yellow oil, which was used in Step D without further purification.
1,48-1,24 (4H, m), 0, 94-0, 84 (3H, m) .1.48-1.24 (4H, m); 0.94-0.84 (3H, m).
Stupeň D: (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2RS-(benzyloxyiminomethyl)-heptanovéStep D: 2RS- (Benzyloxyiminomethyl) -heptanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Směs 5,16 gramu (20,7 milimolu) kyseliny 2RS-(benzyloxyiminomethyl )-heptanové, 3,60 gramu (22,77 milimolu) N,N-dimethylamidu terč. leucinu a 4,76 gramu (24,84 milimolu) hydrochloridu N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu (EDC) v 75 mililitrech N,N-dimethylformamidu (DMF) byla míchána a ochlazena na teplotu 0 °C. Ke směsi bylo přidáno 250 miligramů (katalytické množství) l-hydroxy-7-azabenzotriazolu (HOAt) a vzniklá jasně žlutá směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána přes noc. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku a zbylý olej byl rozdělen mezi ethylacetát a 1 molární kyselinu chlorovodíkovou.A mixture of 5.16 g (20.7 mmoles) of 2RS- (benzyloxyiminomethyl) -heptanoic acid, 3.60 g (22.77 mmoles) of N, N-dimethylamide tert. leucine and 4.76 g (24.84 mmol) of N-ethyl-N '- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC) in 75 ml of N, N-dimethylformamide (DMF) were stirred and cooled to 0 ° C. 250 mg (catalytic amount) of 1-hydroxy-7-azabenzotriazole (HOAt) was added and the resulting bright yellow mixture was allowed to warm to room temperature and stirred overnight. The solvent was removed under reduced pressure and the residual oil was partitioned between ethyl acetate and 1 molar hydrochloric acid.
• · · · · · • · ♦ · · # • · · · · · * · · · · · · • · · · · · • · · · · ·• # · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·
Organická vrstva byla promyta solankou, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a odpařena do sucha při sníženém tlaku. Přečištěním získaného zbytku mžikovou chromatografii na sloupci silikagelu s gradientovou elucí hexanem, který obsahoval postupně od 33 procent do 66 procent ethylacetátu, bylo získáno 6,84 gramu (85 procent) požadovaného produktu ve formě bezbarvého oleje.The organic layer was washed with brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure. Purification of the residue by flash column chromatography on silica gel eluting with hexane, successively containing from 33 percent to 66 percent ethyl acetate, afforded 6.84 g (85 percent) of the desired product as a colorless oil.
1H NMR: 5(CDCl3, směs syn- a anti-izomeru), 7,45 (0,6H, 2d) , 1 H NMR: δ (CDCl 3, mixture of syn- and anti-isomer), 7.45 (0.6H, 2d),
7,40-7,26 (5H, m) , 6,72 (0,4H, 2d) , 6,58 (1H, m) , 5,20-4,69 (3H, m) , 3,82 (0,4H, m) , 3,16-3,10 (3H, m) , 3,05 (0,6H, m) , 2, 99-2,92 (3H, m), 1, 90-1,54 (2H, mj , 1,39-1,17 (4H, m) , 0,97 (2,7H, s) , 0,96 (1,8H, s), 0,94 (2,7H, s), 0,92 (1,8H, s)7.40-7.26 (5H, m), 6.72 (0.4H, 2d), 6.58 (1H, m), 5.20-4.69 (3H, m), 3.82 ( 0.4H, m), 3.16-3.10 (3H, m), 3.05 (0.6H, m), 2.99-2.92 (3H, m), 1.90-1, 54 (2H, m / z, 1.39-1.17 (4H, m), 0.97 (2.7H, s), 0.96 (1.8H, s), 0.94 (2.7H, s) ), 0.92 (1.8H, s)
0,92-0,82 (3H, m) .0.92-0.82 (3 H, m).
Stupeň E: (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-(benzyloxyaminomethyl)-heptanovéStep E: 2R (or S) - (Benzyloxyaminomethyl) -heptanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
K roztoku 5,0 gramů (12,84 milimolu) (IS-dimethylkarbamoyl2,2-dimethylpropyl)amidu kyseliny 2RS-(benzyloxyiminomethyl)heptanové ve 40 mililitrech kyseliny octové bylo najednou přidáno 2,02 gramu (32,0 milimolů) kyanoborohydridu sodného. Během jedné hodiny došlo k úplnému rozpuštění reakčního činidla, přičemž docházelo k mírné efervescenci, a vzniklý bezbarvý roztok byl ponechán míchat přes noc. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením při sníženém tlaku a azeotropickou kodestilací s toluenem. Zbylý olej byl rozdělen mezi diethylether a 1 molární roztok uhličitanu sodného (POZOR!docházelo k vývinu plynu). Organická vrstva byla promyta 70 mililitry solanky, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a odpařena do sucha při sníženém tlaku. Dva diastereoizomery požadovaného produktu byly přečištěny a • · 9 99 9 • ·· 99 99To a solution of 2RS- (benzyloxyiminomethyl) heptanoic acid (IS-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) -amide (5.0 g, 12.84 mmol) in 40 mL of acetic acid was added 2.02 g (32.0 mmol) of sodium cyanoborohydride in one portion. Within one hour, the reagent was completely dissolved, with slight effervescence, and the resulting colorless solution was allowed to stir overnight. The solvent was removed by evaporation under reduced pressure and azeotropic codestilation with toluene. The residual oil was partitioned between diethyl ether and 1 molar sodium carbonate solution (CAUTION! Gas evolution occurred). The organic layer was washed with 70 mL of brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure. The two diastereoisomers of the desired product were purified and 99 99
9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
999 9 9 9 9 99 odděleny mžikovou chromatografii na sloupci silikagelu s gradientovou elucí ethylacetátem, který obsahoval postupně od 50 procent do 0 procent hexanu).999 9 9 9 9 99 separated by flash chromatography on a silica gel column eluting with a gradient of ethyl acetate containing from 50 percent to 0 percent hexane).
Diastereoizomer A (rychleji vymývaný): bezbarvý olej,Diastereoisomer A (faster eluting): colorless oil,
Diastereoizomer B (pomaleji vymývaný): bezbarvý olej,Diastereoisomer B (slow elution): colorless oil,
1,44 gramu (46 procent).1.44 grams (46 percent).
3Η NMR: 5(CDC13), 7,40-7,27 (5H, m) , 6,70 (1H, brd, J=9,0 Hz), 3 H NMR: δ (CDCl 3 ), 7.40-7.27 (5H, m), 6.70 (1H, brd, J = 9.0 Hz),
5,99 (1H, brs), 4,85 (1H, d, J=9,0 Hz), 4,71 (2H, d, J=l,6 Hz), 3,16 (3H, s), 3,06-2,97 (2H, m) , 2,95 (3H, s), 2,57 (1H, m) , 1,74-1,21 (6H, m) , 1,00 (9H, s) , 0,88 (3H, brt, J=6,7 Hz) .5.99 (1H, brs), 4.85 (1H, d, J = 9.0 Hz), 4.71 (2H, d, J = 1.6 Hz), 3.16 (3H, s), 3.06-2.97 (2H, m), 2.95 (3H, s), 2.57 (1H, m), 1.74-1.21 (6H, m), 1.00 (9H, s), 0.88 (3H, brt, J = 6.7 Hz).
Stupeň F: (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[ (berízyloxyformylamino) methyl ]-heptanovéStep F: 2R (or S) - [(Berezyloxyformylamino) methyl] -heptanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
2,02 gramu (5,13 milimolu) (lS-dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amidu kyseliny 2-(benzyloxyaminomethyl)-heptanové (diastereoizomeru A) bylo rozpuštěno v 50 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) a převedeno do argonové atmosféry. K roztoku bylo přidáno 0,83 gramu (5,65 milimolu) N-formylbenzotriazolu (A. R. Katritzki a spolupracovníci Synthesis 1995, 503) a směs byla míchána 4 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odpařeno při sníženém tlaku a zbylý olej byl rozdělen mezi dichlormethan a 1 molární roztok hydroxidu sodného. Organická vrstva byla promyta dalším podílem ······ · · · ·· · · • · · · · ♦ · ♦ · · · • · ··· ♦ · · · • · · ········ • · ······· ···· · ··« ·· 99 99 hydroxidu sodného a solankou, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a odpařena do sucha při sníženém tlaku. Přečištěním zbytku mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu eluovaném hexanem obsahujícím 33 procent ethylacetátu bylo získáno 1,60 gramu (74 procent) požadovaného produktu.2.02 g (5.13 mmol) of 2- (benzyloxyaminomethyl) -heptanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) -amide (diastereoisomer A) was dissolved in 50 ml of anhydrous tetrahydrofuran (THF) and transferred to an argon atmosphere. 0.83 g (5.65 millimoles) of N-formylbenzotriazole (A. R. Katritzki and co-workers of Synthesis 1995, 503) was added to the solution, and the mixture was stirred at room temperature for 4 hours. The solvent was evaporated under reduced pressure and the residual oil was partitioned between dichloromethane and 1 molar sodium hydroxide solution. The organic layer was washed with an additional portion of water. 99 99 sodium hydroxide and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure. Purification of the residue by silica gel flash column chromatography eluting with hexane containing 33 percent ethyl acetate gave 1.60 g (74 percent) of the desired product.
1H NMR: č(CDC13, rotamery), 8,00 (1H, brm), 7,47-7,29 (5H, m) , 6,25 (1H, brd, J=9,3 Hz), 5,08-4,74 (2H, brm), 4,87 (1H, d, 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 8.00 (1H, brm), 7.47-7.29 (5H, m), 6.25 (1H, brd, J = 9.3 Hz), 5.08-4.74 (2 H, brm), 4.87 (1 H, d,
J=9,4 Hz), 3, 89-3,52 (2H, brm), 3,13 (3H, s), 2,94 (3H, s), 2,54 (1H, m) , 1,67-1,11 (6H, m) , 0,95 (9H, s), 0,85 (3H, t,J = 9.4 Hz), 3.89-3.52 (2H, brm), 3.13 (3H, s), 2.94 (3H, s), 2.54 (1H, m), 1, 67-1.11 (6H, m), 0.95 (9H, s), 0.85 (3H, t,
J=6,9 Hz).J = 6.9 Hz).
(1S-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amid kyseliny 2R (nebo S)-[(benzyloxyformylamino)methyl]-heptanové (diastereoizomer B) byl připraven podobným způsobem z pomaleji vymývaného diastereoizomeru připraveného ve stupni E.2R (or S) - [(Benzyloxyformylamino) methyl] -heptanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide (diastereoisomer B) was prepared in a similar manner from the slower eluting diastereoisomer prepared in Step E.
Bylo získáno 0,38 gramu (41 procent).0.38 g (41 percent) was obtained.
XH NMR: 5(CDC13, rotamery), 8,00 (1H, brm), 7,47-7,28 (5H, brm), 6,29 (1H, brd, J=9,3 Hz), 5,01-4,63 (2H, brm), 4,88 (1H, d, J=9,3 Hz), 3,82-3,51 (1,5H, brm), 3,20-2,78 (6,5H, brm), 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 8.00 (1H, brm), 7.47-7.28 (5H, brm), 6.29 (1H, brd, J = 9.3 Hz), 5.01-4.63 (2H, brm), 4.88 (1H, d, J = 9.3 Hz), 3.82-3.51 (1.5H, brm), 3.20-2, 78 (6.5H, brm),
2,50 (1H, brm), 1,76-1,17 (6H, brm), 0,97 (9H, s), 0,85 (3H, brt, J=6,7 Hz).2.50 (1H, brm), 1.76-1.17 (6H, brm), 0.97 (9H, s), 0.85 (3H, brt, J = 6.7 Hz).
Stupeň G: (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)methyl]-hexanovéStep G: 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl] -hexanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
1,43 gramu (3,41 milimolu) (lS-dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amidu kyseliny 2-[ (benzyloxyformylamino)methyl]heptanové (diastereoizomeru Ά) bylo rozpuštěno v 50 mililitrech methanolu a převedeno do argonové atmosféry. K roztoku byla přidána suspenze 100 miligramů (katalytické množství) 10 procentního palladia na aktivním uhlí ve 2 mililitrech • · ···· • · · · · · · · · · * »9 9 9» »99» • 9 9 9 9 9 9 9 9 9 91.43 g (3.41 mmol) of 2 - [(benzyloxyformylamino) methyl] heptanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) -amide (diastereoisomer Ά) was dissolved in 50 ml of methanol and transferred to an argon atmosphere. To the solution was added a suspension of 100 milligrams (catalytic amount) of 10 percent palladium on activated carbon in 2 milliliters. 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9999 9 99» ·· ·· ·· ethylacetátu a vzniklá směs byla intenzivně míchána dokud neustalo uvolňování vodíku z roztoku. Po 10 minutách byla směs převedena do vodíkové atmosféry a ponechána míchat 3 hodiny. Po uplynutí této doby bylo analytickou chromatografii na tenké vrstvě (TLC) prokázáno, že došlo ke zreagování veškeré výchozí látky. Systém byl propláchnut argonem a ze směsi byl filtrací odstraněn katalyzátor. Získaný filtrát byl zahuštěn pří sníženém tlaku, čímž bylo získáno 1,11 gramu (99 procent) požadovaného produktu ve formě bezbarvé hygroskopické pěny.9999 9 99 ethyl acetate and the resulting mixture was stirred vigorously until hydrogen evolution ceased. After 10 minutes, the mixture was transferred to a hydrogen atmosphere and allowed to stir for 3 hours. After this time, analytical thin layer chromatography (TLC) showed that all of the starting material had reacted. The system was purged with argon and the catalyst was removed by filtration. The filtrate was concentrated under reduced pressure to give 1.11 g (99 percent) of the desired product as a colorless hygroscopic foam.
XH NMR: 5(CDC13, rotamery), 8,41 (0,35H, s) , 7,83 (0,65H, brs), 6,80 (0,35H, brd, J=8,9 Hz), 6,62 (0,65H, brd, J=9,4 Hz), 4,91 (0,65H, brd,. J=9,4 Hz), 4,88 (0,35H, brd, J=8,9 Hz), 4,04 (1H, dd, J=14,7 a 7,4 Hz), 3,82 (0,65H, dd, J=14,0 a 9,7 Hz), 3,56 (0,35H, dd, J=14,7 a 3,3 Hz), 3,48 (0,65H, dd, J=14,0 a 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 8.41 (0.35H, s), 7.83 (0.65H, brs), 6.80 (0.35H, brd, J = 8.9 Hz) ), 6.62 (0.65H, brd, J = 9.4 Hz), 4.91 (0.65H, brd, J = 9.4 Hz), 4.88 (0.35H, brd, J = 8.9 Hz), 4.04 (1H, dd, J = 14.7 and 7.4 Hz), 3.82 (0.65H, dd, J = 14.0 and 9.7 Hz), 3 56 (0.35H, dd, J = 14.7 and 3.3 Hz), 3.48 (0.65H, dd, J = 14.0 and
4,0 Hz) 3,16 (l,05H, s) , 3,15 (1,95H, s), 2,98 (l,05H, s), 2,96 (1, 95H, s) , 2,90-2,74 (0,65H, brm), 2,74-2,61 (0,35H, brm) , 1,73-1,17 (6H, brm), 0,99 (3,15H, s) , 0,95 (5,85H, s), 0,87 (3H, brt, J=6,7 Hz).4.0 Hz) 3.16 (1.0H, s), 3.15 (1.95H, s), 2.98 (1.0H, s), 2.96 (1.95H, s), 2 90-2.74 (0.65H, brm), 2.74-2.61 (0.35H, brm), 1.73-1.17 (6H, brm), 0.99 (3.15H, s), 0.95 (5.85H, s), 0.87 (3H, brt, J = 6.7 Hz).
13C NMR: 5(CDC13), 174,6, 171,2, 162,2, 157,2, 60, 1, 54,5, 13 C NMR: δ (CDCl 3 ), 174.6, 171.2, 162.2, 157.2, 60, 1, 54.5,
54,3, 52,3, 48,4, 44, 8, 44,3, 35, 6, 35,4, 29, 6, 29, 0, 26, 3, 20,8, 20,2, 14,0, 13,7.54.3, 52.3, 48.4, 44, 8, 44.3, 35, 6, 35.4, 29, 6, 29, 0, 26, 3, 20.8, 20.2, 14, O, 13.7.
LRMS: 352 [M+Na], 328 [M-H].LRMS: 352 [M + Na] +, 328 [M-H].
(lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amid kyselinyAcid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
2-[(formylhydroxyamino)methyl]-hexanové (diastereoizomer B) byl připraven podobným způsobem z diastereoizomeru B získaného ve stupni E.2 - [(formylhydroxyamino) methyl] -hexanoic (diastereoisomer B) was prepared in a similar manner from diastereoisomer B obtained in step E.
·· φφφφ·· φφφφ
ΦΦ φ φ φ φ φφφφ φ φ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φφφφ φ φ φ φ φφ brs), 2,98 (3Η, brs), 2,91-2,54 (1Η, m) , 1,79-1,23 (6H, m) ,ΦΦ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ br br φ s s s s s br br br br br br br br br br br br br s s s , 79-1.23 (6 H, m),
1,08-0,83 (12H, m).1.08-0.83 (12 H, m).
13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 174, 9, 173,3, 56,3, 54, 8, 51, 6, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 174, 9, 173.3, 56.3, 54, 8, 51, 6,
50.3, 45,5, 45,1, 38,6, 38,4, 36,2, 36,0, 35,3, 34,4, 29,5,50.3, 45.5, 45.1, 38.6, 38.4, 36.2, 36.0, 35.3, 34.4, 29.5,
29.4, 29,3, 29,2, 26,6, 26,5, 22,6, 22,5, 13,9.29.4, 29.3, 29.2, 26.6, 26.5, 22.6, 22.5, 13.9.
LRMS: 352 [M+Na], 328 [M-H].LRMS: 352 [M + Na] +, 328 [M-H].
Způsob IIMethod II
Sloučeninu podle příkladu 13 bylo možné připravit rovněž alternativní asymetrickou syntézou, která je znázorněna na schématu 3 a podrobně popsána v následujících odstavcích.The compound of Example 13 could also be prepared by an alternative asymmetric synthesis as shown in Scheme 3 and described in detail in the following paragraphs.
9 9 99 9 9
9 9 99 9 9
9 9 99 9 9
9 9 9 99
9 9 99 9 9
9999
Schéma 3Scheme 3
9 9 ·9 9 ·
• 9• 9
99
9999 9 «* »»··9999 8 «*» »··
9999
9 ·9 ·
9 99 9
9 99 9
9 99 9
999 99999 99
IAND
I o •H Λ -P H i—I I ro aI o • H Λ -P H i — I I a
V oV o
>>
>41 a Ό 41 i—I 01 '(U β> 41 and Ό 41 i — I 01 '(U β
ϋ oϋ o
JJ ωJJ ω
« o > O qJ w ω HO o qJ w ω H
O. K . o ><1) \ £ ΌO. K. o> <1) \ £ Ό
X! Oj 41X! Oj 41
Ή x.Ή x.
1 S M '03 33 . β 1 SM '03 33. β
I (U oI (U o
I i O ·' kI i O · k
c £ c £
I oiI oi
- r > >M -P i a « : ° v O I -H w a- r>> M -P i a: ° v O I -H w a
HH
OO
CdCD
P ca . o XP ca. o X
Ol ·§Ol · §
4) rH4) rH
HH
I . XI. X
° A >c 4)° A> c 4)
O.O.
PP
W mW m
i r-1i r-1
N βN β
ΛΛ
X ·« *♦··X · * ··
V w ’ • · · ♦ · • · · · · • · · · · « • · · * 9 »9 99 1 kyseliny n-butylmalonové přidáno 12,76 mililitru mililitru (538 milimolů) Roztok byl během 1 hodiny >ěhem této doby došlo keIn W '♦ • · · · · • • · · · · · · · «* • · 9» 9 99 1 n-butylmalonic acid is added 12.76 ml ml (538 millimoles) solution over 1 hour> uring this time occurred
Stupeň A: Kyselina 2-butylakrylováStep A: 2-Butylacrylic acid
K roztoku 17,2 gramu (107 milimolů) ve 200 mililitrech ethanolu bylo (129 milimolů) piperidinu a 40,3 37 procentního roztoku formaldehydu. zahřát na teplotu 80 °C, přičemž i vzniku sraženiny a jejímu postupnému rozpuštění. Reakční směs byla míchána při teplotě 80 °C přes noc a následně ochlazena na teplotu místnosti. Rozpouštědla byla odstraněna při sníženém tlaku a získaný zbytek byl rozpuštěn veTo a solution of 17.2 g (107 millimoles) in 200 milliliters of ethanol was (129 millimoles) piperidine and 40.3 37 percent formaldehyde solution. heated to 80 ° C, whereupon the formation of precipitate and its gradual dissolution. The reaction mixture was stirred at 80 ° C overnight and then cooled to room temperature. The solvents were removed under reduced pressure and the obtained residue was dissolved in ethyl acetate
200 mililitrech ethylacetátu, postupně promyt 1 molární kyselinou chlorovodíkovou a solankou, sušen nad bezvodým síranem hořečnatým a přefiltován. Získaný filtrát byl zahuštěn a bylo získáno 13,37 gramu (97 procent) produktu ve formě čirého oleje.200 mL of ethyl acetate, washed successively with 1 molar hydrochloric acid and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and filtered. The filtrate was concentrated to give 13.37 grams (97 percent) of the product as a clear oil.
3H NMR δ (CDC13), 6,29 (1H, s), 5,65 (1H, s), 2,34-2,28 (2H, 3 H NMR δ (CDCl 3 ), 6.29 (1H, s), 5.65 (1H, s), 2.34-2.28 (2H,
m) , 1,54-1,26 (4H, m), 0,94 (3H, t, J=7,l Hz).m), 1.54-1.26 (4H, m), 0.94 (3H, t, J = 7.1 Hz).
Stupeň B. 4S-Benzyl-3-(2-butylakryloyl)-5,5-dimethyloxazolídin-2-onStep B. 4S-Benzyl-3- (2-butylacryloyl) -5,5-dimethyloxazolidin-2-one
21,5 gramu (168 milimolů) kyseliny 2-butylakrylové bylo rozpuštěno v 500 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a ochlazeno v argonové atmosféře na teplotu -78 °C. K roztoku bylo přidáno 30 mililitrů (218 milimolů) triethylaminu a 21 mililitrů (168 milimolů) pivaloylchioridu, přičemž přidávání probíhalo takovou rychlostí, aby teplota směsi nepřesáhla -60 °C. Směs byla 30 minut míchána při teplotě -78 °C, ponechána ohřát na teplotu místnosti a po dvou hodinách byla ochlazena zpět na teplotu -78 °C.21.5 grams (168 millimoles) of 2-butyl acrylic acid were dissolved in 500 milliliters of dry tetrahydrofuran (THF) and cooled under argon to -78 ° C. To the solution was added 30 mL (218 millimoles) of triethylamine and 21 milliliters (168 millimoles) of pivaloyl chloride at a rate such that the temperature of the mixture did not exceed -60 ° C. The mixture was stirred at -78 ° C for 30 minutes, allowed to warm to room temperature and after two hours was cooled back to -78 ° C.
•Φ φφφφ• Φ φφφφ
ΦΦ φφ φφ φ φ φφφφ φ φ φφφφ φ φφφφφ · • « φφφφ φ 44 ΦΦ ΦΦ«Φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ 44 44 44
V jiné baňce byl rozpuštěn 4S-benzyl-5, 5-dimethyl-oxazolidin2-on v 500 mililitrech suchého tětrahýdrofuranu (THF) a roztok byl v argonové atmosféře ochlazen na teplotu -78 °C. K roztoku bylo pomalu přidáno 83 mililitrů 2,4 molárního roztoku n-butyllithia ve směsi hexanů (200 milimolů) a směs byla 30 minut míchána při teplotě místnosti. Vzniklý anion byl kapilárou přidán do první reakční nádoby. Směs byla ponechána ohřát' na teplotu místnosti a míchán přes noc. Reakční směs byla rozložena 200 mililitry 1 molárního roztoku hydrogenuhličitanu draselného a při sníženém tlaku byla odstraněna rozpouštědla. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla promyta solankou, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a zahuštěna tlaku, čímž byl získán oranžový olej, ve analytickou- chromatografii na tenké vrstvě (TLC) prokázána vedle požadovaného produktu také přítomnost nezreagovaného 30 gramů surového produktu bylo a promyto skrz vrstvu oxidu křemičitého, čímž bylo získáno 25,3 gramu čistého produktu ve formě žlutého oleje.In another flask, 4S-benzyl-5,5-dimethyl-oxazolidin-2-one was dissolved in 500 mL of dry tetrahydrofuran (THF) and the solution was cooled to -78 ° C under an argon atmosphere. 83 ml of a 2.4 molar solution of n-butyllithium in a mixture of hexanes (200 mmoles) was added slowly and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. The resulting anion was added by capillary to the first reaction vessel. The mixture was allowed to warm to room temperature and stirred overnight. The reaction mixture was quenched with 200 mL of a 1 molar potassium bicarbonate solution and the solvents were removed under reduced pressure. The residue was partitioned between ethyl acetate and water. The organic layer was washed with brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and concentrated to give an orange oil. TLC analysis of the TLC indicated the presence of unreacted 30 grams of crude product and was washed through the oxide layer. silica to give 25.3 g of pure product as a yellow oil.
1HNMR δ (CDC13) , 7,31-7,19 (5H, m) , 5,41 (2H, s) , 4,51 (1H, dd, J=9,7 a 4,2 Hz), 3,32 (1H, dd, J=14,2 a 4,2 Hz), 2,82 (1H, dd, J=14,2 a 9,7 Hz) 2,40-2,34 (2H, m) , 1, 48-1,32 (4H, m) , 1,43 (3H, s), 1,27 (3H, s) , 0,91 (3H, t, J=7,l Hz). Propláchnutím uvedené vrstvy oxidu křemičitanu methanolem bylo možné zpět izolovat pomocné chirální činidlo. 1 H NMR δ (CDCl 3 ), 7.31-7.19 (5H, m), 5.41 (2H, s), 4.51 (1H, dd, J = 9.7 and 4.2 Hz), 3.32 (1H, dd, J = 14.2 and 4.2 Hz), 2.82 (1H, dd, J = 14.2 and 9.7 Hz) 2.40-2.34 (2H, m 1, 48-1.32 (4H, m), 1.43 (3H, s), 1.27 (3H, s), 0.91 (3H, t, J = 7.1 Hz). By flushing the silica layer with methanol, it was possible to recover the chiral auxiliary agent.
pri snizenem kterém byla pomocného chirálního činidla, rozpuštěno v dichlormethanu ·· ··<· » ·* »* ·♦ ·· · » · ♦ · · • · · · · · · • ♦ » · * ·· · • « β · · · · »«· ♦ · · · ·*in which the auxiliary chiral reagent has been dissolved in dichloromethane, and dissolved in dichloromethane. · · · «* *
Stupeň C: 4S-Benzyl-3-[2-(benzyloxyaminomethyl)-hexanoyl]5,5-dimethyl-oxazolidin-2-on ve formě soli s kyselinou p-toluensulfonovouStep C: 4S-Benzyl-3- [2- (benzyloxyaminomethyl) -hexanoyl] 5,5-dimethyl-oxazolidin-2-one in p-toluenesulfonic acid salt form
19,8 gramu (62,8 milimolu) 4S-benzyl-3-(2-butylakryloyl)-5,5dimethyl-oxazolidin-2-onu bylo smícháno s 15,4 gramu (126 milimolů) O-benzylhydroxylaminu a mícháno přes noc při teplotě místnosti. Směs byla rozpuštěna v ethylacetátu a vzniklý roztok byl promyt 1 molární kyselinou chlorovodíkovou, 1 molárním roztokem uhličitanu sodného a solankou, sušen nad bezvodým síranem hořečnatým a přefiltrován. Filtrát byl zahuštěn při sníženém tlaku a bylo získáno 25,3 gramu světle -žlutého oleje, který podle analýzy nukleární magnetickou rezonancí (NMR) a vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) obsahoval19.8 grams (62.8 millimoles) of 4S-benzyl-3- (2-butylacryloyl) -5,5-dimethyl-oxazolidin-2-one was mixed with 15.4 grams (126 millimoles) of O-benzylhydroxylamine and stirred overnight at room temperature. The mixture was dissolved in ethyl acetate and the solution was washed with 1 molar hydrochloric acid, 1 molar sodium carbonate solution and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure to give 25.3 g of a pale-yellow oil which, according to nuclear magnetic resonance (NMR) analysis and high performance liquid chromatography (HPLC) analysis, contained
4S-benzyl-3- [2- (benzyloxyaminomethyl) -hexanoyl] -5,5-dimethyloxazolidin-2-on (přibližně 82 procent d. e.) spolu se stopami výchozích látek. Získaný produkt byl smíchán s další šarží (26,9 gramu, 76 procent d. e.) a rozpuštěn v 200 mililitrech ethylacetátu. K roztoku bylo přidáno 22,7 gramu (119 milimolů) kyseliny p-toluensulfonové a směs byla ochlazena na teplotu 0 °C. Po usazení a vyškrábání bylo ' získáno 25,2 gramu (34 procent jediného diastereoizomeru) produktu ve formě bílé krystalické látky.4S-Benzyl-3- [2- (benzyloxyaminomethyl) -hexanoyl] -5,5-dimethyloxazolidin-2-one (approximately 82 percent d. E.) Along with traces of starting materials. The obtained product was mixed with another batch (26.9 g, 76 percent d. E.) And dissolved in 200 mL of ethyl acetate. 22.7 g (119 millimoles) of p-toluenesulfonic acid was added to the solution, and the mixture was cooled to 0 ° C. After settling and scratching, 25.2 g (34 percent of a single diastereoisomer) of the product was obtained as a white crystalline solid.
• φ φ «• φ φ «
φφφφ » φφ φφ *· φφφ φ φ φφ φ • φ φ φφφφφ φ · · · · · · · · •
9 ΦΦΦ ΦΦ · φ φ Φ ΦΦΦΦ9 ΦΦΦ ΦΦ · φ φ Φ ΦΦΦΦ
ΦΦΦ ΦΦ Φ* Φ*Φ ΦΦ Φ
Stupeň D: Kyselina 2R-(benzyloxyaminomethyl)-hexanováStep D: 2R- (Benzyloxyaminomethyl) -hexanoic acid
25,2 gramu (40,2 milimolu) 4S-benzyl-3-[2R-(benzyloxyaminomethyl) -hexanoyl] -5, 5-dimethyl-oxazolidin-2-onu ve formě soli s kyselinou p-toluensulfonovou bylo rozděleno mezi ethylacetát a 1 molární roztok uhličitanu sodného. Organická vrstva byla vysušena · nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a odpařena při sníženém tlaku. Zbylý olej byl rozpuštěn ve 150 mililitrech tetrahydrofuranu (THF) a 50 mililitrech vody, ochlazen na teplotu 0 °C a k tomuto roztoku bylo přidáno 1,86 gramu (44,2 milimolu) hydroxidu lithného. Roztok byl míchán 30 minut při teplotě 0 °C a následně přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs byla okyselena 1 molárním roztokem kyseliny citrónové na pH 4 a byla odstraněna rozpouštědla. Zbytek byl rozdělen molární roztok uhličitanu sodného byla okyselena 1 molárním roztokem kyseliny citrónové na .pH 4 a třikrát extrahována ethylacetátem. Spojené organické vrstvy byly sušeny nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrovány a zahuštěny, čímž bylo získáno 7,4 gramu (73 procent) požadovaného produktu ve formě bezbarvého oleje.25.2 g (40.2 mmol) of 4S-benzyl-3- [2R- (benzyloxyaminomethyl) -hexanoyl] -5,5-dimethyl-oxazolidin-2-one in the form of the p-toluenesulfonic acid salt was partitioned between ethyl acetate and 1 molar sodium carbonate solution. The organic layer was dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and evaporated under reduced pressure. The residual oil was dissolved in 150 mL tetrahydrofuran (THF) and 50 mL water, cooled to 0 ° C, and 1.86 g (44.2 mmol) of lithium hydroxide was added. The solution was stirred at 0 ° C for 30 minutes and then at room temperature overnight. The reaction mixture was acidified with 1 molar citric acid solution to pH 4 and the solvents were removed. The residue was partitioned with a molar solution of sodium carbonate, acidified with 1 molar citric acid solution to pH 4 and extracted three times with ethyl acetate. The combined organic layers were dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and concentrated to give 7.4 g (73 percent) of the desired product as a colorless oil.
XH NMR δ (CDCI3) , 8,42 (2H, brs), 7,34-7,25 (5H, m) , 4,76-4,66 (2H, m) , 3,20-3,01 (2H, m) , 2,73 (1H, m) , 1,70-1,44 (2H, m) , 1 H NMR δ (CDCl 3), 8.42 (2H, brs), 7.34-7.25 (5H, m), 4.76-4.66 (2H, m), 3.20-3.01 (2H, m), 2.73 (1H, m), 1.70-1.44 (2H, m),
1,34-1,22 (4H, m), 0,92-0,86 (3H, m).1.34-1.22 (4H, m), 0.92-0.86 (3H, m).
mezi dichlormethan abetween dichloromethane and
Zásaditá vodná vrstvaAlkaline aqueous layer
Stupeň E: (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethyl-l-propyl)amid kyseliny 2R-(benzyloxyaminomethyl)-hexanovéStep E: 2R- (Benzyloxyaminomethyl) -hexanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethyl-1-propyl) amide
7,98 gramu (31,8 milimolu) kyseliny 2R-(benzyloxyaminomethyl)hexanové bylo rozpuštěno ve 150 mililitrech N,N-dimethylformamidu (DMF) a roztok byl ochlazen na teplotu 0 °C.7.98 g (31.8 mmol) of 2R- (benzyloxyaminomethyl) hexanoic acid was dissolved in 150 ml of N, N-dimethylformamide (DMF) and the solution was cooled to 0 ° C.
·· 4 44 4·· 4 45 4
• 4 4 4 • 4 4 4• 4 4 4
4 4 4 4 • 4 4 4 • 4 4»4 4 4 4 • •
K roztoku bylo přidáno 6,1 gramu (31,8 milimolu) hydrochloridu N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu (EDC) a 430 miligramů (3,2 milimoly) 1-hydroxybenzotriazolu (HOBt) a směs byla míchána 15 minut. Poté bylo ke směsi přidáno 5,53 gramu (34 milimolů) N,N-dimethylamidu terč. leucinu a směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána přes noc. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku,, zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu a postupně promyt 1 molární kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysušen a přefiltrován. Po odstranění rozpouštědla bylo získáno 8,7 gramu (69 procent) produktu ve formě žlutého oleje, který'byl použit bez dalšího přečištění ve stupni F.6.1 grams (31.8 millimoles) of N-ethyl-N '- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) hydrochloride and 430 milligrams (3.2 millimoles) of 1-hydroxybenzotriazole (HOBt) were added and the mixture was stirred Fifteen minutes. Then, 5.53 g (34 millimoles) of N, N-dimethylamide tert. leucine and the mixture was allowed to warm to room temperature and stirred overnight. The solvent was removed under reduced pressure, the residue was dissolved in ethyl acetate and washed successively with 1 molar hydrochloric acid, saturated sodium bicarbonate solution and brine, dried and filtered. Removal of the solvent gave 8.7 g (69 percent) of a yellow oil which was used without further purification in Step F.
Stupeň F: (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethyl-l-propyl)amid kyseliny 2R-[(benzyloxyformylamino)-methyl)]-hexanovéStep F: 2R - [(Benzyloxyformylamino) methyl]] - hexanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethyl-1-propyl) amide
7,8 gramu (19,9 milimolu) (lS-dimethylkarbamoyl-2,2-dimethyll-propyl )amidu kyseliny 2R-(benzyloxyaminomethyl)-hexanové bylo rozpuštěno ve 100 mililitrech tetrahydrofuranu (THF) a k tomuto roztoku bylo přidáno 3,08 gramu (21,0 milimolů) 1-formyl-benzotriazolu. Reakční směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Poté bylo při sníženém tlaku odstraněno rozpouštědlo a získaný zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu, promyt 2 molárním roztokem hydroxidu sodného a solankou. Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a odpařena do sucha při sníženém tlaku. Produkt ·· ··*· • · · φ • <7.8 g (19.9 mmol) of 2R- (benzyloxyaminomethyl) -hexanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethyl-propyl) -amide was dissolved in 100 ml of tetrahydrofuran (THF) and 3.08 g of this solution was added. (21.0 millimoles) of 1-formyl-benzotriazole. The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The solvent was then removed under reduced pressure and the residue was dissolved in ethyl acetate, washed with 2M sodium hydroxide solution and brine. The organic layer was dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure. Product ·· ·· · · · · φ • <
• · · • · «··· · 4 ·· «· ·· • · · · · · • · · · « t • · * · * · 4• · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·
4 4 4 4 4 ·* 44 44 byl krystalizován ze směsi ether-hexan a bylo získáno 4,83 gramu (57 procent ve dvou podílech).44 44 was crystallized from ether-hexane to give 4.83 g (57 percent in two fractions).
XH NMR: δ(CDC13, rotamery), 8,12 (0,6H, brs), 7,89 (0,4H, brs), 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 8.12 (0.6H, brs), 7.89 (0.4H, brs),
stereochemickou konfiguraci.stereochemical configuration.
Stupeň G: (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethyl-l-propyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéStep G: 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethyl-1-propyl) amide
4,72gramu (11,3 milimolu) (lS-dimethylkarbamoyl-2,2-dimethyll-propyl ) amidu kyseliny 2R-[(benzyloxyformylamino)-methyl)]hexanové bylo rozpuštěno v 80 mililitrech ethanolu a převedeno do argonové atmosféry. K roztoku byla přidána suspenze 940 miligramů 10 procentního palladia na aktivním uhlí ve 2 mililitrech ethylacetátu a vzniklá směs byla intenzivně míchána dokud neustalo uvolňování vodíku z roztoku. Po 30 minutách byla směs převedena do vodíkové atmosféry a ponechána míchat přes noc při teplotě místnosti. Systém byl propláchnut argonem a ze směsi byl filtrací odstraněn katalyzátor. Získaný filtrát byl zahuštěn při sníženém tlaku, čímž bylo získáno 3,65 gramu (98 procent) požadovaného produktu ve formě bezbarvé pěny, která stáním zkrystalizovala.4.72 g (11.3 mmol) of 2R - [(benzyloxyformylamino) methyl] hexanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethyl-propyl) -amide were dissolved in 80 ml of ethanol and transferred to an argon atmosphere. A suspension of 940 mg of 10 percent palladium on charcoal in 2 mL of ethyl acetate was added to the solution, and the resulting mixture was stirred vigorously until hydrogen evolution ceased. After 30 minutes, the mixture was transferred to a hydrogen atmosphere and allowed to stir overnight at room temperature. The system was purged with argon and the catalyst was removed by filtration. The filtrate was concentrated under reduced pressure to give 3.65 g (98 percent) of the desired product as a colorless foam which crystallized on standing.
NMR: 5(CDC13, rotamery), 9,32 (0,4H, brs), 8,41 (0,4H, s), 7,88 (0,6H, brs), 7,27 (0,6H, s) , 6,75 (0,4H, brd, J=8,8 Hz), 6,58 (0,6H, brd, J=9,3 Hz), 4,89 (1H, m), 4,04 (0,4H, m) , 3,82NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 9.32 (0.4H, brs), 8.41 (0.4H, s), 7.88 (0.6H, brs), 7.27 (0.6H, br) (s), 6.75 (0.4H, brd, J = 8.8 Hz), 6.58 (0.6H, brd, J = 9.3 Hz), 4.89 (1H, m), 4 0.04 (0.4H, m), 3.82
26,9, 23,0, 14,3.26.9, 23.0, 14.3.
LRMS: 352 [M+Na], 328 [M-H],LRMS: 352 [M + Na] +, 328 [M-H],
Sloučeniny připravené v příkladech 14 až 27 byly připraveny analogicky k postupu popsanému v příkladu 13, způsob I s tím, že místo éthylkaproátu byly použity příslušné estery. V případech, kdy byly připraveny oba diastereoizomery, byl jako diastereoizomer A označen ten z diastereoizomerů, k jehož eluci.docházelo rychleji a jehož aktivita proti polypeptidové deformylase (PDF) v in vitro testech byla větší. V některých případech byl konečný produkt vyroben pouze z rychleji eluovaného diastereoizomeru.The compounds prepared in Examples 14 to 27 were prepared analogously to the procedure described in Example 13, Method I except that the appropriate esters were used instead of ethyl caproate. Where both diastereoisomers were prepared, diastereoisomer A was designated as one of the diastereoisomers that eluted faster and whose activity against polypeptide deformylase (PDF) was greater in in vitro assays. In some cases, the final product was only made from the faster eluting diastereoisomer.
Příklad 14 (IS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyselinyExample 14 Acid (IS-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-3cyklopentylpropionové2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - 3-cyclopentylpropionic
OO
IAND
HH
O • · · · * ·O • · · ·
9.9.
·· ·· • · · · :H NMR: δ (CDC13,• ·· ·· · · · H NMR: δ (CDC1 3
3,81 (0,6H, brdci, J=14,0, 9,7 Hz), 3,50 (1H, m) , 3,16 (1,2H,3.81 (0.6H, brdci, J = 14.0, 9.7 Hz), 3.50 (1H, m), 3.16 (1.2H,
s), 3,14 (1,8H, s), 2,97 (1,2H, s), 2,95 (1,8H, s), 2,80 (1H, m) 1,87-1,32 (9H, m) , 1,16-0,95 (2H, m) , 0,99 (3,6H, s) , 0,95 (5,4H, s) .s), 3.14 (1.8H, s), 2.97 (1.2H, s), 2.95 (1.8H, s), 2.80 (1H, m) 1.87-1, 32 (9H, m), 1.16-0.95 (2H, m), 0.99 (3.6H, s), 0.95 (5.4H, s).
13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers),
48.6, 45,4, 44,2, 38,5, 38,<48.6, 45.4, 44.2, 38.5, 38, <
35.6, 35,5, 32,7, 32, 6, 26, 5,35.6, 35.5, 32.7, 32.6, 26.5,
LRMS: 378 [M+Na], 354 [M-H]. Diastereoizomer B. Bezbarvá rotamery), 9,30 (0,6H, brs) ,LRMS: 378 [M + Na], 354 [M-H] < - >. Diastereoisomer B. Colorless rotamers), 9.30 (0.6H, brs),
6, 52 (0, 4H, brd, J=8,7 Hz) , (0,4H, brd, J=9, 5 Hz), 4,63 (2H, m), 3,25-2,95 (6H, 3brs)6.52 (0.4H, brd, J = 8.7 Hz), (0.4H, brd, J = 9.5 Hz), 4.63 (2H, m), 3.25-2.95 ( 6H, 3brs)
m), 1,30 (1H, m), 1,20-1,00 ( 13C NMR: 5(CDC13, rotamery),m), 1.30 (1H, m), 1.20-1.00 ( 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers),
172,9, 171,3, 55,0, 54,5, 52,0, , 37,9, 37,6, 36, 4, 36,3, 35,8,172.9, 171.3, 55.0, 54.5, 52.0,, 37.9, 37.6, 36, 4, 36.3, 35.8,
26,4, 25,1.26.4, 25.1.
sklovitá látka. *Η NMR: δ (CDC13, 8,41 (0,6H, s), 7,75 (0,4H, s),glassy substance. * Η NMR: δ (CDCl 3 , 8.41 (0.6H, s), 7.75 (0.4H, s),
80.·80. ·
Příklad 15 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)'amid kyseliny 2R (nebo S) -[(formylhydroxyamino)-methyl)]-heptanovéExample 15 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - heptanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Diastereoizomer A. Tmavě oranžový olej. XH NMR: 5(CDC13, rotamery),. 8,32 (0,33H, s) , 7,76 (0,67H, brs), 6, 78 (0,33H, brd, J=9,l Hz), 6,68 (0,67H, brd, J=9,l Hz), 4,87-4,79 (1H,Diastereoisomer A. Dark orange oil. 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers). 8.32 (0.33H, s), 7.76 (0.67H, brs), 6.78 (0.33H, brd, J = 9.1 Hz), 6.68 (0.67H, brd, J = 9.1 Hz), 4.87-4.79 (1H,
m) , 3, 96 (0,33H, brdd, J=14,6, 7,6 Hz), 3,74 (0,67H, brdd, J=13,9, 9,7 Hz), 3,51-3,36 (1H, m) , 3,09 (1H, s), 3,08 (2H,m), 3.96 (0.33H, brdd, J = 14.6, 7.6 Hz), 3.74 (0.67H, brdd, J = 13.9, 9.7 Hz), 3.51 -3.36 (1H, m), 3.09 (1H, s), 3.08 (2H,
s), 2,90 (1H, s), 2,89 (2H, s), 2,86-2,55 (1H, m) , 1,53-1,19 (8H, brm), 0,92 (3H, s), 0,88 (6H, s), 0,79 (3H, m) .s), 2.90 (1H, s), 2.89 (2H, s), 2.86-2.55 (1H, m), 1.53-1.19 (8H, brm), 0.92 (3H, s), 0.88 (6H, s), 0.79 (3H, m).
13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 174,3 172,0, 170,5, 170,4 , 54,0, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 174.3 172.0, 170.5, 170.4, 54.0,
53,5, 53,4, 50,8, 49,7, 47,4, 44,9, 43,8, 37,5, 37,4, 34,8,53.5, 53.4, 50.8, 49.7, 47.4, 44.9, 43.8, 37.5, 37.4, 34.8,
34,7, 34,6, 30,6, 29,2, 29,1, 25,8, 25,5, 21,4, 12, 9.34.7, 34.6, 30.6, 29.2, 29.1, 25.8, 25.5, 21.4, 12, 9.
LRMS: 344 [M+H], 342 [M-H].LRMS: 344 [M + H], 342 [M-H] < - >.
Diastereoizomer B. Tmavě oranžový olej. 1H NMR: δ(CDCI3, rotamery), 8,36 (0,5H, s) , 7,74 (0,5H, s) , 6,69 (O.,5H, brs),Diastereoisomer B. Dark orange oil. 1 H NMR: δ (CDCl 3, rotamers), 8.36 (0.5H, s), 7.74 (0.5H, s), 6.69 (O., 5H, brs),
6,57 (0,5H, brd, J=7,6 Hz), 4,89 (0,5H, brs), 4,70 (0,5H, d,6.57 (0.5H, brd, J = 7.6 Hz), 4.89 (0.5H, brs), 4.70 (0.5H, d,
J=7,8 Hz), 3,76-3,40 (2H, m), 3,21 (1,5H, s), 3,16 (1,5H, s), 2,98 (3H, s) , 2,81 (1H, brs), 2,72-2,60 (1H, m) , 1,67 (2H, · ··· · • · • · • · · · 0 · 0 · • · · · · · · · 000 00 0 0 0 0 0 0 0 0J = 7.8 Hz), 3.76-3.40 (2H, m), 3.21 (1.5H, s), 3.16 (1.5H, s), 2.98 (3H, s) ), 2.81 (1H, brs), 2.72-2.60 (1H, m), 1.67 (2H, · ··· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 000 00 0 0 0 0 0 0 0 0
000 00 00 00000 00 00 00
(1S-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-pentanové2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - pentanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Diastereoizomer A. Bílá hygroskopická pěna. XH NMR: 5(CDC13, rotamery), 8, 40 (0,33H, s), 7, 83 (0,67H, brs), 6,88 (0,33H, brd, J=8,6Hz), 6, 69 (0, 67H, brd, J=9,2Hz), 4,90 (1H, t) ,Diastereoisomer A. White hygroscopic foam. 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 8, 40 (0.33H, s), 7.83 (0.67H, brs), 6.88 (0.33H, brd, J = 8.6Hz) 6.96 (0.67H, brd, J = 9.2Hz), 4.90 (1H, t),
4,06 (0,33H, brdd, J=14,5, 7,4 Hz), 3,82 (0,67H, brdd, J=13,7,4.06 (0.33H, brdd, J = 14.5, 7.4 Hz), 3.82 (0.67H, brdd, J = 13.7,
9,8 Hz), 3,57-3, 44 (1H, m) , 3,16 (1H, s), 3,15 (2H, s), 2,98 (1H, s), 2,96 (2H, s), 2,87-2,63 (1H, m) , 1, 64-1,26 (4H, brm), 0,98 (3H, s), 0,94 (6H, s), 0,90 (3H, t, J=7,3 Hz).9.8 Hz), 3.57-3.44 (1H, m), 3.16 (1H, s), 3.15 (2H, s), 2.98 (1H, s), 2.96 (1H, s) 2H, s), 2.87-2.63 (1H, m), 1.64-1.26 (4H, brm), 0.98 (3H, s), 0.94 (6H, s), 0 90 (3H, t, J = 7.3Hz).
13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 175,8, 173,2, 172,0, 55,4, 54,9, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 175.8, 173.2, 172.0, 55.4, 54.9,
52,2, 48,7, 46,2, 45,0, 38,9, 38,9, 36,3, 36,1, 36,1, 32,7,52.2, 48.7, 46.2, 45.0, 38.9, 38.9, 36.3, 36.1, 36.1, 32.7,
32,6, 27,0, 26, 9, 20,9, 20,8, 14,4.32.6, 27.0, 26, 9, 20.9, 20.8, 14.4.
9 9 99 99
9 9 99 9 9
9 9 9 9 9 · • · · · · · · ·· 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
999 9 9 9· 9 9999 9 9 9 · 9 9
LRMS: 338 [M+Na], 314 [M-H].LRMS: 338 [M + Na], 314 [M-H] < - >.
Příklad 17 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-4-metylpentanovéExample 17 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - 4-methylpentanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Diastereoizomer rotamery), 8,41 J=8,6 Hz) , 6,55Diastereoisomer rotamers), 8.41 J = 8.6 Hz), 6.55
3,95 (0,4H, m) ,3.95 (0.4H, m),
A. Bílá hygroskopická pěna. 1H NMR: č(CDCl3, (0,4H, s), 7,83 (0,6H, s) , 6,65 (0,4H, d, (0,6H, d, J=9,0 Hz), 4,91-4,83 (1H, m), 4,033,84-3,74 (0,6H, m) ,A. White hygroscopic foam. 1 H NMR: δ (CDCl 3 , (0.4H, s), 7.83 (0.6H, s), 6.65 (0.4H, d, (0.6H, d, J = 9.0) Hz), 4.91-4.83 (1H, m), 4.033.84-3.74 (0.6H, m),
3,62-3,43 (1H, m), 3,16 (1H, s), 3,13 (2H, s), 2,98 (1H, s), 2,96 (2H, s), 2,89-2,79 (0,6H, m), 2,76-2,71 (0,4H, m) , 1, 69-1, 34 (1,8, m) , 1,29-1,20 (1,2H, m) , 1,0 (3,6H, s), 0,95 (5,4, s) , 0,93-0,88 (6H, m) .3.62-3.43 (1 H, m), 3.16 (1 H, s), 3.13 (2 H, s), 2.98 (1 H, s), 2.96 (2 H, s), 2 , 89-2.79 (0.6H, m), 2.76-2.71 (0.4H, m), 1.69-1, 34 (1.8, m), 1.29-1, 20 (1.2H, m), 1.0 (3.6H, s), 0.95 (5.4, s), 0.93-0.88 (6H, m).
13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 175,8, 173,3, 172,0, 171,7, 55,5, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 175.8, 173.3, 172.0, 171.7, 55.5,
55,0, 52,4, 49,1, 44,3, 43,2, 39,5, 39,4, 38,9, 38,8, 36,3,55.0, 52.4, 49.1, 44.3, 43.2, 39.5, 39.4, 38.9, 38.8, 36.3,
36, 1, 27,0, 26, 9, 26, 3, 26, 0, '23,1, 23, 0, 22,8.36, 1, 27.0, 26, 9, 26, 3, 26, 0, 23, 1, 23, 0, 22.8.
LRMS: 352 [M+Na], 328 [M-H].LRMS: 352 [M + Na] +, 328 [M-H].
• 9 9 9 9 99 9 9 9
9 9 .·’9 9 ·
999 · · « · · · · · ·999 · · · · · · · · · ·
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 · • · · · · · · ··· 99 9· 999 9 9 9 9 9 99 99 99
Příklad 18 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amid kyselinyExample 18 Acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
3-cyklohexyl-2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl) ] propionové3-Cyclohexyl-2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl] propionic acid
DiastereoizomerDiastereoisomer
A. Pevná bílá látka. 1H NMR:A. White solid. 1 H NMR:
7,82 (0,75H, s), 6,93 (0, rotamery), 8,38 (0,25H, s\7.82 (0.75H, s), 6.93 (0, rotamers), 8.38 (0.25H, s);
J=8,9Hz), 6,74 (0,75H, d, J=8,9Hz), 4,90 (1H, d, J= 4,02 (0,25H, dd, J=9,7, 14,1 Hz), 3,78 (0,75H, dd, 14,1 Hz), 3,46 (1H, m), 3,15 (3H, s), 2,96 (3H, s), 2 m), 1,65 (6H, m) , 1,20 (5H, m) , 0,98 (9H, s), 0,87 (2H, 13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 176, 4, 174,2, 172,4,J = 8.9Hz, 6.74 (0.75H, d, J = 8.9Hz), 4.90 (1H, d, J = 4.02 (0.25H, dd, J = 9.7), 14.1 Hz), 3.78 (0.75H, dd, 14.1 Hz), 3.46 (1H, m), 3.15 (3H, s), 2.96 (3H, s), 2 m), 1.65 (6H, m), 1.20 (5H, m), 0.98 (9H, s), 0.87 (2H, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 176, 4, 174.2, 172.4,
53,4, 49,9, 44,0, 43,3, 39,6, 39,4, 38,7, 38,5,53.4, 49.9, 44.0, 43.3, 39.6, 39.4, 38.7, 38.5,
36,6, 34,8, 34,5, 27,5, 27,4, 27,2.36.6, 34.8, 34.5, 27.5, 27.4, 27.2.
LRMS: 370 [M+H], 368 [M-H].LRMS: 370 [M + H], 368 [M-H] < - >.
56, C 36, S δ (CDC13, ,25H, d, 9,4 Hz),56, C 36, S δ (CDCl 3 , 25H, d, 9.4 Hz),
J=9,7, ř92 (1H,J = 9.7, ø 92 (1H,
m) .m).
, 55,6, , 36,7, ···· • · ··· · ·, 55.6,, 36.7, ···· · · ··· · ·
·· ·· • · · · • * · ··· ·· • · · ·
9 9 9 99
9999
Příklad 19 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-cyklopentyl-3-[(formylhydroxyamino)-methyl)] propionovéExample 19 2R (or S) -cyclopentyl-3 - [(formylhydroxyamino) methyl] propionic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Diastereoizomer A. Bílá pěna. XH NMR: δ (CD3OD, rotamery), (0,33H, s), 7,79 (0,66H, s), 4,89 (1H, s), 3,87 (1H, m) , (1H, m) , 3,19 (3H, s) , 2,93 (3H, s), 2,82 (0,66H, s), (0,33H, s), 1,89 (2H, m) , 1,56 (5H, m) , 1,24 (2H, m) , (9H, s) .Diastereoisomer A. White foam. 1 H NMR: δ (CD 3 OD, rotamers), (0.33H, s), 7.79 (0.66H, s), 4.89 (1H, s), 3.87 (1H, m), (1H, m), 3.19 (3H, s), 2.93 (3H, s), 2.82 (0.66H, s), (0.33H, s), 1.89 (2H, m) 1.56 (5H, m), 1.24 (2H, m), (9H, s).
13C NMR: 5(CD3OD, rotamery), 176,0, 56,7, 53,2, 51,1, 13 C NMR: δ (CD 3 OD, rotamers), 176.0, 56.7, 53.2, 51.1,
39,2, 36,5, 36,4, 32,0, 27,4, 26,4, 26,2.39.2, 36.5, 36.4, 32.0, 27.4, 26.4, 26.2.
IČ (odrazový disk) vmax 3318, 2953, 1663, 1628, 1529,IR (reflection disc) at max 3318, 2953, 1663, 1628, 1529,
1229, 1142, 1087, 877 cm'1.1229, 1142, 1087, 877 cm -1 .
LRMS: 364 [M+Na], 340 [M-H].LRMS: 364 [M + Na], 340 [M-H] < - >.
8,228.22
3,503.50
2,652.65
0,980.98
42,7,42.7,
1367, ·· ··♦· * »· ··1367, ·· ···
-- ·· · · · ♦ · * » · · · · ·♦··- ·· · ♦ · * »* *
Η S ♦ · · · · · · · · » · υ » « ··· ·0·· ··*· · ·♦· ·« »· *·Η S ♦ · · υ υ υ 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Příklad 20 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-oktanovéExample 20 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - octanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Diastereoizomer A. ’Ή NMR: 5(CDCl3, rotamery) ,Diastereoisomer A. NMR: δ (CDCl3, rotamers),
8,40 (0,4H, s),8.40 (0.4H, s),
1,59-1,25 (10H, m), 1,14-0,95 (9H, m), 0,89-0,77 (3H, m) . 13C NMR: 5(CDCl3, rotamery), 175,2, 172, 9, 171,6, 171, 4,1.59-1.25 (10H, m), 1.14-0.95 (9H, m), 0.89-0.77 (3H, m). 13 C NMR: δ (CDCl 3, rotamers), 175.2, 172.9, 171.6, 171.4,
54,5, 54,3, 52,0, 48,4, 46,1, 45,7, 45,1, 44,7, 39,7,54.5, 54.3, 52.0, 48.4, 46.1, 45.7, 45.1, 44.7, 39.7,
38,4, 35,8, 35,6, 35,6, 31,7, 31,5, 30,2, 30,1, 29,1,38.4, 35.8, 35.6, 35.6, 31.7, 31.5, 30.2, 30.1, 29.1,
27,0, 26,4, 22,4, 14,0.27.0, 26.4, 22.4, 14.0.
LRMS: 380 [M+Na],LRMS: 380 [M + Na] < + >
358 [M-H].358 [M- H].
54,9,54,9,
38,5,38,5,
29,1, ·· ««»· ···· f ·» ·· *« ·· · · · · · ·29.1, ··· «« »· ···· f · · * *« ««
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
999 99 99 99999 99 99 99
Příklad 21 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-nonanovéExample 21 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - nonanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Diastereoizomer A. Pevná hnědá látka. 1H NMR: δ (CDCI3, rotamery), 9,30 (0,4H, s), 8,41 (0,6H, s), 7,83 (0,4H, s),Diastereoisomer A. Brown solid. 1 H NMR: δ (CDCl 3, rotamers), 9.30 (0.4H, s), 8.41 (0.6H, s), 7.83 (0.4H, s),
6,66 (0,4H, d, J=8,9 Hz), 6,52 (0,6H, d, J=9,7 Hz) 4,92-4,84 (1H, m), 4, 06-3,97 (0,4H, m) , 3,87-3,77 (0,6H, m) , 3,63-3,45 (1H, m), 3,16 (1,2H, s), 3,14 (1,8H, s), 2,98 (1,2H, s), 2,96 (1,8H, s), 2,86-2,74 (0,6H, m), 2,66-2, 63 (0,4H, m) , 1,95-1,25 (12H, m), 1,00-0,95 (9H, m), 0,90-0,84 (3H, m) .6.66 (0.4H, d, J = 8.9 Hz), 6.52 (0.6H, d, J = 9.7 Hz) 4.92-4.84 (1H, m), 4, 06-3.97 (0.4H, m), 3.87-3.77 (0.6H, m), 3.63-3.45 (1H, m), 3.16 (1.2H, s) ), 3.14 (1.8H, s), 2.98 (1.2H, s), 2.96 (1.8H, s), 2.86-2.74 (0.6H, m), 2.66-2, 63 (0.4H, m), 1.95-1.25 (12H, m), 1.00-0.95 (9H, m), 0.90-0.84 (3H) , m).
13C NMR: 5(CDCl3, rotamery), 175,5, 172,8, 171,4, 162,2, 156,1,· 13 C NMR: δ (CDCl 3, rotamers), 175.5, 172.8, 171.4, 162.2, 156.1, ·
55,1, 54,5, 51,3, 50,8, 48,4, 46,3, 44,9, 38,4, 38,4, 35,8,55.1, 54.5, 51.3, 50.8, 48.4, 46.3, 44.9, 38.4, 38.4, 35.8,
35,7, 33,9, 31,7, 30,3, 30,2, 29,4, 29,0, 27,1, 26, 5, 26, 5,35.7, 33.9, 31.7, 30.3, 30.2, 29.4, 29.0, 27.1, 26.5, 26.5,
24,9, 22,6, 14,0.24.9, 22.6, 14.0.
LRMS: 394 [M+Na], 372 [M+H], 370 [M-H].LRMS: 394 [M + H], 372 [M + H], 370 [M-H].
• 0• 0
Příklad 22 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-děkanovéExample 22 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - decanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Diastereoizomer A. Bezbarvý olej.Diastereoisomer A. Colorless oil.
LRMS: 408 [M+Na], 386 [M+H], 384 [M-H].LRMS: 408 [M + Na] +, 386 [M + H] +, 384 [M-H] +.
Příklad 23 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-5-methylhexanovéExample 23 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - 5-methylhexanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
N ’ .* • · · · · · • · · · · · • · · · · · • · · · · · · • · · · · · • » · · · ♦ ·N '. * · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·
Diastereoizomer A. Bezbarvý olej .Diastereoisomer A. Colorless oil.
9,31 (0,4H, s), 8,40 (0,4H, s), 8,9.31 (0.4H, s), 8.40 (0.4H, s), 8,
J=7,5 Hz), 6,60 (0,6H, d, J=8,0 Hz) 4,89 (1H, m), 4,04 (0,4H, m) , 3,83 (0,6H, m) , 3,52 (1H, m) , 3,16 (1,2H, s), 3,15 (1,8H, s), 2,98 (1,2H, s), 2,96 (1,8H, s), 2,70 (1H, m) , 1,58-1,14 (5H, m), 1,00-0, 95 (9H, m) , 0,87-0,84 (6H, m).J = 7.5 Hz), 6.60 (0.6H, d, J = 8.0 Hz) 4.89 (1H, m), 4.04 (0.4H, m), 3.83 (0 6H, m), 3.52 (1H, m), 3.16 (1.2H, s), 3.15 (1.8H, s), 2.98 (1.2H, s), 2, 96 (1.8H, s), 2.70 (1H, m), 1.58-1.14 (5H, m), 1.00-0, 95 (9H, m), 0.87-0, 84 (6 H, m).
13C NMR: δ (CDCI3, rotamery), 172,9, 171,5, 162,2, 156,3, 55,1, 13 C NMR: δ (CDCl 3, rotamers), 172.9, 171.5, 162.2, 156.3, 55.1,
54,6, 51,4, 48,5, 46,4, 45,0, 38,5, 38,4, 36,2, 35,9, 35,6,54.6, 51.4, 48.5, 46.4, 45.0, 38.5, 38.4, 36.2, 35.9, 35.6,
29, 7, 28,1, 28,0, 27,9, 26,7, 26, 6, 26,5, 22,4.29, 7, 28.1, 28.0, 27.9, 26.7, 26, 6, 26.5, 22.4.
LRMS: 366 [M+Na], 344 [M+H], 342 [M-H].LRMS: 366 [M + H], 344 [M + H], 342 [M-H].
Příklad 24Example 24
H NMR: 5(CDC13, rotamery), 17 (0.6H, s). 6,77 (0,4H, d.1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 17 (0.6H, s). 6.77 (0.4H, d.
(lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-propanové2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - propanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
• · · · · « • · I • « • · • · • · · · · • · · · · · • · · · · · • · · · · · • · · · · · · • · · * · · • · · · · · ·· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·
Diastereoizomer B. Ή NMR: 5(CDC13, rotamery), 9,47 (0,4H, brs), 8,41 (0,4H, s), 7,86 (0,6H, s), 6,96 (0,4H, brs), 6,74 (0,6H, d, J=7,3 Hz) 4,91 (1H, m) , 3,99 (0,4H, dd, J=14,2,Diastereoisomer B. 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 9.47 (0.4H, brs), 8.41 (0.4H, s), 7.86 (0.6H, s), 6.96 (0.4H, brs), 6.74 (0.6H, d, J = 7.3 Hz) 4.91 (1H, m), 3.99 (0.4H, dd, J = 14.2,
7,6 Hz), 3,83 (0,6H, dd, J=13,8, 9,0 Hz), 3,50 (1,H, m) , 3,16 (1,2H, s), 3,15 (1,8H, s), 2,97 (3H, s), 2,90 (1H, m) , 1,21 (1,2H, d, J=6,8 Hz), 1,15 (1,8H, d, J=6,5 Hz) 0,99 (3,6H, s),7.6 Hz), 3.83 (0.6H, dd, J = 13.8, 9.0 Hz), 3.50 (1, H, m), 3.16 (1.2H, s), 3.15 (1.8H, s), 2.97 (3H, s), 2.90 (1H, m), 1.21 (1.2H, d, J = 6.8 Hz), 1.15 (1.8H, d, J = 6.5Hz) 0.99 (3.6H, s),
0,95 (5,4H, s).0.95 (5.4H, s).
LRMS: 310 [M+Na], 286 [M-H].LRMS: 310 [M + Na] +, 286 [M-H].
Příklad 25 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl) ]-3-methylmáselnéExample 25 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - 3-methylbutyric acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Diastereoizomer A. 1H NMR: 5(CDCl3, rotamery), 9,33 (0,4H, s),Diastereoisomer A. 1 H NMR: δ (CDCl 3, rotamers), 9.33 (0.4H, s),
8,38 (0,4H, s), 7,81 (0,6H, s), 6,86 (0,4H, brs), 6,58 (0,6H,8.38 (0.4H, s), 7.81 (0.6H, s), 6.86 (0.4H, brs), 6.58 (0.6H, s,
LRMS: 338 [M+Na], 314 [M-H].LRMS: 338 [M + Na], 314 [M-H] < - >.
• · · · .· :• · · · · ·
• » · · • · · · · « • · · · · · • · · · · · · • · · · · · • · · · ··• »· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·
Příklad 26 (1S-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyselinyExample 26 Acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-3-fenylpropionyl propionové2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - 3-phenylpropionyl propionic
N'N '
Diastereoizomer A. Bezbarvá sklovitá látka. 1H NMR: 5(CDC13, rotamery), 9,33 (0,3H, brs), 8,95 (0,7H, brs), 8,43 (0,3H, brs), 7,83 (0,7H, brs), 7,27-7,10 (5H, m) , 6,65 (0,3H, brs), 6,45 (0,7H, brd, J=8,2 Hz), 4,80-4,70 (1H, m) , 4,22-4,10 (0,3H, m) , 3,89 (0,7H, dd, J=13,7, 9,6 Hz), 3,63-3,47 (1H, m) , 3,20-2,69 (3H, m) , 3,04 (3H, brs), 2,86 (3H, brs), 0,87 (9H, brs) .Diastereoisomer A. Colorless glass. 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 9.33 (0.3H, brs), 8.95 (0.7H, brs), 8.43 (0.3H, brs), 7.83 (0 7H, brs), 7.27-7.10 (5H, m), 6.65 (0.3H, brs), 6.45 (0.7H, brd, J = 8.2 Hz), 4, 80-4.70 (1H, m), 4.22-4.10 (0.3H, m), 3.89 (0.7H, dd, J = 13.7, 9.6 Hz), 3, 63-3.47 (1 H, m), 3.20-2.69 (3 H, m), 3.04 (3 H, brs), 2.86 (3 H, brs), 0.87 (9 H, brs) .
13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 137,9, 137,7, 128,8, 128,5, 126, 6, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 137.9, 137.7, 128.8, 128.5, 126.6,
54,9, 54,5, 51,3, 48,3, 47,3, 46,6, 38,3, 38,2, 36, 2, 36,1,54.9, 54.5, 51.3, 48.3, 47.3, 46.6, 38.3, 38.2, 36, 2, 36.1,
35,8, 35,7, 35,6, 35,5, 26,4.35.8, 35.7, 35.6, 35.5, 26.4.
LRMS: 386 [M+Na], 362 [M-H].LRMS: 386 [M + Na], 362 [M-H] < - >.
Příklad 27 (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R (nebo S)-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-3-(4-methoxyfenyl) propionovéExample 27 2R (or S) - [(formylhydroxyamino) methyl]] - 3- (4-methoxyphenyl) propionic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
Diastereoizomer A. LRMS: 416 [M+Na], 394 [M+H], 392 [M-H].Diastereoisomer A. LRMS: 416 [M + Na], 394 [M + H], 392 [M-H].
Sloučeniny připravené v příkladech 28 až 31 byly připraveny analogicky k postupu popsanému v příkladu 13, způsob II s tím, že místo N,N-dimethylamidu terč. leucinu byly ve stupni E použity příslušné amidy nebo benzylestery aminokyselin.The compounds prepared in Examples 28 to 31 were prepared in analogy to the procedure described in Example 13, Method II, substituting a target for N, N-dimethylamide. In step E, the appropriate amino acid amides or benzyl esters were used in step E.
• · · · · ·• · · · · ·
Příklad 28 • · · · · · • · ♦ · · · • · · · · · φ • · · · · · • · · · · ·Example 28 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·
Kyselina 2S-{2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanoylamino}3-fenylpropionová2S- {2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoylamino} 3-phenylpropionic acid
13C NMR: 5(CD3OD, rotamery), 176, 1, 175, 7, 174,7, 174,5, 138, 6, 13 C NMR: δ (CD 3 OD, rotamers), 176, 1, 175, 7, 174.7, 174.5, 138.6,
138,5, 130,3, 129,5, 129,4, 127,7, 55,0, 53,3, 49,8, 45,4,138.5, 130.3, 129.5, 129.4, 127.7, 55.0, 53.3, 49.8, 45.4,
38,4, 38,3, 31,0, 30,8, 30,1, 23,7, 14,2.38.4, 38.3, 31.0, 30.8, 30.1, 23.7, 14.2.
IČ (odrazový disk) vmax 2932, 2359, 1727, 1660, 1551, 1454,IR (reflection disk) at max 2932, 2359, 1727, 1660, 1551, 1454,
1381, 1221, 882, 701 cm“1.1381, 1221, 882, 701 cm 1 .
LRMS: 359 [M+Na], 335 [M-H], • · · · • ·LRMS: 359 [M + Na], 335 [M-H].
Příklad 29Example 29
Kyselina 2S - { 2R- [ ( formylhydroxyamino) -methyl) ] -hexanoylamino } 3,3-dimethyl máselná2S - {2R - [(Formylhydroxyamino) -methyl)] -hexanoylamino} 3,3-dimethyl butyric acid
Bílá pěna (0,7H, s), 1,54-1,33White foam (0.7H, s), 1.54-1.33
1H NMR: δ (CD3OD, rotamery), 4,31 (1H, s), 3,83-3,29 (2H, (6H, m) , 1,03 (3H, s), 1,01 1 H NMR: δ (CD 3 OD, rotamers), 4.31 (1H, s), 3.83-3.29 (2H, (6H, m), 1.03 (3H, s), 1.01
m) .m).
13C NMR: 5(CD3OD, rotamery), 174,9, 172,9, 13 C NMR: δ (CD 3 OD, rotamers), 174.9, 172.9,
44,0, 33,6, 30,1, 29,1, 26,2, 22,6, 13,1.44.0, 33.6, 30.1, 29.1, 26.2, 22.6, 13.1.
IČ (odrazový disk) vmax 2959, 2359-, 1644,IR (reflection disc) in max 2959, 2359-, 1644,
881, 704 cm'1.881, 704 cm -1 .
LRMS: 325 [M+Na], 301 [M-H].LRMS: 325 [M + Na], 301 [M-H] < - >.
8,25 (0,3H, s), 7,828.25 (0.3H, s), 7.82
m) , 3,10-2,89 (1H, m) , (6H, s), 0,92-0,87 (3H,m), 3.10-2.89 (1 H, m), (6H, s), 0.92-0.87 (3H,
61,0, 52,4, 44,2,61.0, 52.4, 44.2,
1537, 1371, 1218,1537, 1371, 1218,
Příklad 30 {1- [ (2S-Hydroxymethylpyrrolidin-l-karbamoyl] -2,2-dimethylpropyl}amid kyseliny 2S-[2R-(formylhydroxyamino)-methyl)]hexanovéExample 30 2S- [2R- (Formylhydroxyamino) -methyl)] Hexanoic Acid {1 - [(2S-Hydroxymethylpyrrolidine-1-carbamoyl] -2,2-dimethylpropyl} amide
HH
O « * ♦ · 9 9O «* ♦ · 9 9
Bezbarvý olej. XH NMR: 5(CD3OD, rotamery), 8,26 (0,4H, s), 7,84 (0,6H, s), 4,62 (0,4H, d, J=8,2 Hz), 4,39 (0,6H, d, J=8,2 Hz), 4,12 (1H, m) , 3,91-3,37 (6H, brm), 2,93 (0,6H, m) , 2,78 (0,4H, m) , 1,93 (5H, m) , 1,45 (2H, m) , 1,39 (3H, m) , 0,97 (3H, brs), 0,95 (3H, brs), 0,89 (3H, t, J=6,7 Hz).Colorless oil. 1 H NMR: δ (CD 3 OD, rotamers), 8.26 (0.4H, s), 7.84 (0.6H, s), 4.62 (0.4H, d, J = 8.2) Hz), 4.39 (0.6H, d, J = 8.2 Hz), 4.12 (1H, m), 3.91-3.37 (6H, brm), 2.93 (0.6H , m), 2.78 (0.4H, m), 1.93 (5H, m), 1.45 (2H, m), 1.39 (3H, m), 0.97 (3H, brs) 0.95 (3H, brs), 0.89 (3H, t, J = 6.7 Hz).
13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 174,8, 172, 9, 65,3, 65,1, 59,6, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 174.8, 172, 9, 65.3, 65.1, 59.6,
59, 5, 55,9, 55,7, 51,9, 47,8, 44,7, 44,0, 31,5, 30,5, 29,3,59, 5, 55.9, 55.7, 51.9, 47.8, 44.7, 44.0, 31.5, 30.5, 29.3,
28,7, 28,1, 27,3, 23,8, 22,0, 21,2, 18,7, 18,3, 17,6, 14,7,28.7, 28.1, 27.3, 23.8, 22.0, 21.2, 18.7, 18.3, 17.6, 14.7,
13,3.13.3.
LRMS: 394 [M+Na], 372 [M+H], 370 [M-H].LRMS: 394 [M + H], 372 [M + H], 370 [M-H].
Přiklad 31 {1-[(2-Hydroxyethyl)methyIkarbamoyl]-2,2-dimethylpropyl}amid kyseliny 2S-[2R-(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 31 2S- [2R- (Formyl-hydroxy-amino) -methyl] -hexanoic acid {1 - [(2-hydroxy-ethyl) -methyl-carbamoyl] -2,2-dimethyl-propyl} -amide
Bílá pěna. 2H NMR: δ (CD3OD, rotamery), 8,25 (0,25H, s), (0,125H, s), 7,82 (0,625H, s), 4,88 (1H, m) , 3,83-3,54 brm), 3,41 (2H, m) , 3,25 (2H, s), 2,96 (2H, s a m) , 1,49White foam. 1 H NMR: δ (CD 3 OD, rotamers), 8.25 (0.25H, s), (0.125H, s), 7.82 (0.625H, s), 4.88 (1H, m), 3.83-3.54 brm), 3.41 (2H, m), 3.25 (2H, s), 2.96 (2H, sam), 1.49
m) , 1,23 (4H, m), 1,00 (6H, s), 0,99 (3H, s), 0,88 (3H, m) 13C NMR: 5(CD3OD, rotamery), 173, 6, 164,4, 61,1, 61, 0, 56,5, 54,2, 53, 9, 52,2, 41,8, 38,9, 36,9, 36, 3, 35,3,m), 1.23 (4H, m), 1.00 (6H, s), 0.99 (3H, s), 0.88 (3H, m) 13 C NMR: δ (CD 3 OD, rotamers) , 173, 6, 164.4, 61.1, 61, 0, 56.5, 54.2, 53, 9, 52.2, 41.8, 38.9, 36.9, 36, 3, 35 , 3,
30,8, 27,5, 24,1, 14,7.30.8, 27.5, 24.1, 14.7.
8,03 (4H, (2H,8.03 (4 H, (2H,
56,9, 31, 6, • 000 • · 0 0 056,9, 31, 6, 000 • 0 0 0
0 0 0 0 00 0 0 0 0
0 0 0 0 •0 0 00 0 0 0 • 0 0 0
LRMS: 382 [M+Na], 358 [M-H].LRMS: 382 [M + Na], 358 [M-H] < - >.
Sloučeniny připravené v příkladech 32 až 59 byly připraveny analogicky k postupu popsanému v příkladu 7, způsob II s tím, že místo N,N-dimethylamidu terč. leucinu byly ve stupni E použity příslušné amidy nebo benzylestery aminokyselin. V některých příkladech byl ve stupni E použit l-,hydroxy-7-azabenzotriazol (HOAt) a hydrogenolytické odštěpení chránící skupiny ve stupni G bylo prováděno za podmínek katalýzy fázovým přenosem (cyklohexen, paladium na aktivním uhlí v ethanolu).The compounds prepared in Examples 32 to 59 were prepared in analogy to the procedure described in Example 7, Method II except that instead of N, N-dimethylamide there was a target. In step E, the appropriate amino acid amides or benzyl esters were used in step E. In some examples, 1-, hydroxy-7-azabenzotriazole (HOAt) was used in step E and the hydrogenolytic deprotection of step G was carried out under phase transfer catalysis conditions (cyclohexene, palladium on activated carbon in ethanol).
Příklad 32 (IR-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amid kyselinyExample 32 Acid (IR-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
2R- [ (formylhydroxyamino) -methyl) ] -hexanové2R - [(formylhydroxyamino) methyl]] hexane
Bezbarvý olej. LRMS: 330 [M+H], 328 [M-H].Colorless oil. LRMS: 330 [M + H], 328 [M-H] < - >.
Příklad 33 • ♦♦Φ • ·· ·· ·· • · · · · ♦ · · • · · 9 9 9 9Example 33 9 Φ 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
Φ Φ Φ · φ · φ ·Φ Φ · φ · φ ·
Φ Φ Φ · · Φ 9Φ Φ Φ · · Φ 9
ΦΦΦ 99 99 99 (lS-Dimethylkarbamoyl-2S-methylbutyl) amid kyseliny 2R- [(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéΦΦΦ 99 99 99 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2S-methylbutyl) amide
Bílá pěna. LRMSWhite foam. LRMS
352 [M+Na], 328352 [M + Na] +, 328
M-H] .M-H].
Příklad 34 (lS-Dimethylkarbamoyl-2-methoxy-2-methylpropyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 34 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2-methoxy-2-methylpropyl) amide
Z racemického β-hydroxymethylvalínu. Diastereoizomer A Bezbarvý olej. LRMS: 368 [M+Na], 346 [M+H], 344 [M-H] Diastereoizomer B. LRMS: 368 [M+Na], 346 [M+H], 344 [M-H].From racemic β-hydroxymethylvaline. Diastereoisomer A Colorless oil. LRMS: 368 [M + Na], 346 [M + H], 344 [M-H] Diastereoisomer B. LRMS: 368 [M + Na], 346 [M + H], 344 [M-H].
Příklad 35 • 99 99 99Example 35 • 99 99 99
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
999 99 99 99 (lS-Dimethylkarbamoyl-2-hydroxy-2-methylpropyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanové999 99 99 99 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2-hydroxy-2-methylpropyl) amide
Bezbarvý olej. LRMS: 354 [M+Na], 330 [M-H].Colorless oil. LRMS: 354 [M + Na] +, 330 [M-H].
Příklad 36 [2-(4-Chlorfenyl)-lS-dimethylkarbamoylethyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 36 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [2- (4-chlorophenyl) -1S-dimethylcarbamoylethyl) amide
Bezbarvý olej. LRMS: 330 [M+H], 328 [M-H].Colorless oil. LRMS: 330 [M + H], 328 [M-H] < - >.
Příklad 37 •0 0· 00 • 00Example 37 • 0 0 · 00 • 00
0 0 00 0 0
0 0 [lS-Dimethylkarbamoyl-2-(4-hydroxyfenyl)-ethyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanové0R 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [1S-Dimethylcarbamoyl-2- (4-hydroxyphenyl) ethyl] amide
Bezbarvý olejColorless oil
LRMS: 402 [M+H], 380 [M-H].LRMS: 402 [M + H], 380 [M-H] < - >.
Příklad 38 [lS-Dimethylkarbamoyl-2-naftalen-2-yl-ethyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 38 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [1S-dimethylcarbamoyl-2-naphthalen-2-yl-ethyl] -amide
•Φ *♦·♦• Φ * ♦ · ♦
Bezbarvý olej. LRMS: 414 [M+H], 412 [M-H].Colorless oil. LRMS: 414 [M + H], 412 [M-H].
Příklad 39 [2-(cyklohexyl)-IS-dimethylkarbamoylethyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 39 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [2- (cyclohexyl) -IS-dimethylcarbamoylethyl) amide
Bílá pěna. LRMS: 392 [M+Na], 370 [M+H].White foam. LRMS: 392 [M + Na], 370 [M + H] < + >.
Příklad 40 [lS-Dimethylkarbamoyl-fenylmethyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 40 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [1S-dimethylcarbamoyl-phenylmethyl) -amide
Bezbarvý olej. LRMS: 350 [M+H], 348 [M-H].Colorless oil. LRMS: 350 [M + H], 348 [M-H] < - >.
• 9 **··9 ** ··
100 • ·· *4 99100 • ·· * 99
9 9 9 · ·· *9 9 9 · ··
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 99 9 9 999 99
Příklad 41Example 41
Dimethylamid kyseliny 2-{2R-[(formylhydroxyamino)-methyl] hexanoyl)-1,2,3,4-tetrahydro-isochinolin-3S-karboxylové2- {2R - [(Formylhydroxyamino) methyl] hexanoyl) -1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3S-carboxylic acid dimethylamide
LRMS: 398 [M+Na], 376 [M+H], 374 [M-H].LRMS: 398 [M + H], 376 [M + H], 374 [M-H].
Příklad 42 [4-Amino-lS-dimethylkarbamoylbutyl)amid kyseliny 2R-[(for mylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 42 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [4-amino-1S-dimethylcarbamoylbutyl) amide
Bezbarvý olej. LRMS: 345 [M+H], 343 [M-H].Colorless oil. LRMS: 345 [M + H], 343 [M-H] < - >.
·* 0000· * 0000
00 « *0 000 «* 0 0
0 0 00 0 0
0 0 00 0 0
0 0 00 0 0
0000
Příklad 43Example 43
101 [lS-Dimethylkarbamoyl-2-hydroxyethyl) amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino) -methyl)]-hexanové101 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [1S-dimethylcarbamoyl-2-hydroxyethyl) amide
Bezbarvý olej. LRMS: 326 [M+Na], 302 [M-H].Colorless oil. LRMS: 326 [M + Na] +, 302 [M-H].
Příklad 44Example 44
N-Hydroxy-N [2R- (4-methylpiperazin-l-karbonyl) hexyl] formamidN-Hydroxy-N [2R- (4-methylpiperazine-1-carbonyl) hexyl] formamide
LRMS: 272 [M+H].LRMS: 272 [M + H] < + >.
102 ·· ···<· ·· ·· ·· • · · * · · • · · · · ♦ • · · · * * · • · · · · c • ·· ·· ··102 · c <c c c c c c c c c c c c c c c c c c c c c c
Příklad 45Example 45
N-Hydroxy-N [2R- (4-morfolin-4-karbonyl) hexyl] formamidN-Hydroxy-N [2R- (4-morpholine-4-carbonyl) hexyl] formamide
LRMS: 281 [M+Na], 259 [M+H], 257 [M-H].LRMS: 281 [M + H], 259 [M + H], 257 [M-H].
Příklad 46Example 46
N-Hydroxy-N [2R- (2S-hydroxymethylpyrrolidin-l-karbonyl)hexyl]formamidN-Hydroxy-N [2R- (2S-hydroxymethylpyrrolidine-1-carbonyl) hexyl] formamide
LRMS: 271 [M-H].LRMS: 271 [M-H] < - >.
Příklad 47 (lS-Hydroxymethyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R-[(for mylhydroxyamino)-methyl)]-hexanové »·«·Example 47 2R - [(Methylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid (1S-hydroxymethyl-2,2-dimethylpropyl) amide
9 a ·· 9 ·9 a ·· 9 ·
9 9 9 99
103· ♦ · · · ·103 · ♦ · · · ·
J- e · a · ·J- e · a · ·
9999 9 999 999999 99 999 99
99 • * · · • 9 9 9 * 9 9 999 • 9 9 9 9 9 9
9 9 9 λ 9 999 9 9 9 9
LRMS: 289 [M+H], 287 [M-H].LRMS: 289 [M + H], 287 [M-H] < - >.
Příklad 48 (lS-Methoxymethyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R-[(for mylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 48 2R - [(Methylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid (1S-methoxymethyl-2,2-dimethylpropyl) amide
LRMS: 303 [M+H], 301 [M-H].LRMS: 303 [M + H], 301 [M-H] < - >.
104 ·· • * φ104 ·· • * φ
···· • ΦΦΦ φ···· • ΦΦΦ φ
• φφ ·· · · • φ φ • · φ » φ φ ·• φφ ·· · · · φ φ · · φ »φ φ ·
ΦΦΦ φ» •Φ φφ φφ φ · φ « φ « • · · • φ φ • 4ΦΦΦ φ • φ φ 4 φ φ 4 • 4 4
Příklad 49 [1S-(4-Benzylpiperidin-l-karbonyl)-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 49 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [1S- (4-Benzylpiperidine-1-carbonyl) -2,2-dimethylpropyl) amide
LRMS: 458 [M-H],LRMS: 458 [M-H].
Příklad 50 [1S-(Benzyl-fenethylkarbamoyl)-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 50 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [1S- (Benzyl-phenethylcarbamoyl) -2,2-dimethylpropyl) -amide
LRMS: 496 [M+H], 494 [M-H],LRMS: 496 [M + H], 494 [M-H] < - >
Příklad 51 [2,2-Dimethyl-lS-(pyrrolidin-l-karbonyl) propyl)amid kyselinyExample 51 Acid [2,2-Dimethyl-1S- (pyrrolidine-1-carbonyl) -propyl] -amide
2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanové2R - [(formylhydroxyamino) methyl]] hexane
106 • · · ·106 • · · ·
LRMS: 356 [M+H], 354 [M-H].LRMS: 356 [M + H], 354 [M-H] < - >.
Příklad 52 [2,2-Dimethyl-lS-(morfolin-4-karbony1)propyl]amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 52 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [2,2-dimethyl-1S- (morpholine-4-carbonyl) propyl] amide
LRMS: 372 [M+H], 370 [M-H].LRMS: 372 [M + H], 370 [M- H].
» · « · · ·»·
Příklad 53Example 53
10.6 [2,2-Dimethyl-lS- (4-methylpiperazin-l-karbonyl) propyl] amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino) -methyl)]-hexanové10.6 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [2,2-dimethyl-1S- (4-methylpiperazine-1-carbonyl) propyl] amide
LRMS: 385 [M+H], 383 [M-H],LRMS: 385 [M + H], 383 [M-H] < - >
Příklad 54 [2,2-Dimethyl-lS- (4-methylpiperidin-1-karbony 1) propyl] amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino) -methyl)]-hexanovéExample 54 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid [2,2-dimethyl-1S- (4-methylpiperidine-1-carbonyl) propyl] amide
LRMS: 384 [M+H], 382 [M-H] φ · · ·LRMS: 384 [M + H], 382 [M-H] < + >
Příklad 55 (lS-Cyklohexylkabamoyl-2,2-dimethylpropyl) amid kyselinyExample 55 Acid (1S-Cyclohexylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanové φ φ · * φ · • φ · · φ « • φφφ φ · φ φ φ φφφφ • Φ φφφφ2R - [(formylhydroxyamino) -methyl)] - hexane φ · · · · · «·« · φ · φ · φ · φφφφφ
LRMS: 398 [M+H], 396 [M-H],LRMS: 398 [M + H], 396 [M-H].
Příklad 56 (1S- (4-Acetylpiperidin-l-karbonyl) -2,2-dimethylpropyl) amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]-hexanovéExample 56 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] - hexanoic acid (1S- (4-acetylpiperidine-1-carbonyl) -2,2-dimethylpropyl) amide
LRMS: 412 [M+H], 410 [M-H].LRMS: 412 [M + H], 410 [M-H] < - >.
• · · · · · ι · · · · ιι £
Příklad 57Example 57
Methylester kyseliny l-(2S-{2R-[(fcrmylhydroxyamino)methyl)]hexanoylamino } -3,3-dimethylbutyryl) -piperidin-4-karboxylové1- (2S- {2R - [(Methylhydroxyamino) methyl)] hexanoylamino} -3,3-dimethylbutyryl) -piperidine-4-carboxylic acid methyl ester
LRMS: 442 [M+H], 440 [M-H].LRMS: 442 [M + H], 440 [M- H].
Příklad 58 [2,2-Dimethyl-lS- (oktahydrochinolin-l-karbonyl) propyl) amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl) ] -hexanovéExample 58 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl]] -hexanoic acid [2,2-dimethyl-1S- (octahydroquinoline-1-carbonyl) propyl) amide
LRMS: 424 [M+H], 422 [M-H]LRMS: 424 [M + H], 422 [M-H].
Příklad 59Example 59
1(15 : · • ·· [1S-(3,4-Dihydro-2H-chinolín-l-karbonyl)-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)-methyl)]hexanové2R - [(formylhydroxyamino) methyl]] hexanoic acid 1 (15: • • [1S- (3,4-Dihydro-2H-quinoline-1-carbonyl) -2,2-dimethylpropyl) amide
LRMS: 416 [M-H].LRMS: 416 [M-H] < - >.
Příklad 60Example 60
2S-{3-Ethylsulfanylmethyl-2R-[(formylhydroxyamino)methyl)]propionylamino}-3,3,N,N-tetrámethylbutyramid2S- {3-Ethylsulfanylmethyl-2R - [(formylhydroxyamino) methyl]] propionylamino} -3,3, N, N-tetrámethylbutyramide
Postup syntézy uvedené sloučeniny je znázorněn na schématu 4 a detailně popsán v následujících odstavcích.The procedure for synthesizing the compound is shown in Scheme 4 and described in detail in the following paragraphs.
< A >3<A> 3
4) a4) a
P wP w
° A >c° A> c
4) a4) a
P cn o λ >cP cn o λ> c
4) a4) a
P tnP tn
Reakční činidla a podmínky: A. 3-lithio-4-benzyl-oxazolidin-2-on, THF, -78 °C; B. LiN(SiME3)2, THF, -78 C a následně AcCl; C. HCl. H2NOBzl, NaOAc, vodný ethanol; D. NaCNBH3, AcOH, teplota místnosti; E. HCOBt, THF; F. LiOH, vodný THF, °C; G. H-Tle-NMe2, HOAt, EDC, DMF; G. H2, Pd/C, MeOH a následné rozdělení diastereoizomerů (HPLC).Reagents and Conditions: A. 3-Lithio-4-benzyl-oxazolidin-2-one, THF, -78 ° C; B. LiN (SiME 3 ) 2 , THF, -78 ° C followed by AcCl; C. HCl. H 2 NOBzl, NaOAc, aqueous ethanol; D. NaCNBH 3 , AcOH, room temperature; E. HCOBt, THF; F. LiOH, aqueous THF, ° C; G. H-Tle-NMe 2 , HOAt, EDC, DMF; G. H 2 , Pd / C, MeOH and subsequent separation of diastereoisomers (HPLC).
..•.•.•.ν^Λ·ΛψΑ>νψνΜΜύ>κ·:·χ<»:·χ<€·^·κ<ί4Μ·>ί«·Λ<^.·>.. •. •. •. ^>>> Ψ · χ::::: »^ ί ^ ^ ^ · ^
SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) • · 9 99 9 » * · • · íué. :SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) • 9 99 9 :
99 99 9·99 99 9 ·
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
999 99 9 9 99998 99 9 9 99
Stupeň A: Kyselina 2-ethylsulfanylmethylakrylováStep A: 2-Ethylsulfanylmethylacrylic acid
Směs 5,2 gramu (50 milimolů) kyseliny malonové, 3,3 gramu (110 milimolů) paraformaldehydu, 9,95 mililitru (50 milimolů) dicyklohexylaminu a 4,06 mililitru (55 milimolů) ethanthiolu ve 120 mililitrech dioxanu byla 2 hodiny zahřívána na teplotu 70 °C. Rozpouštědla byla odstraněna při sníženém tlaku, zbytek byl znovu rozpuštěn v ethylacetátu a získaný roztok byl extrahován 4 x 20 mililitry nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Spojené vodné vrstvy byly promyty 20 mililitry ethylacetátu, okyseleny 1 molární kyselinou chlorovodíkovou a vzniklá suspenze byla extrahována do dichlormethanu. Získaný roztok byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrován a odpařen, čímž bylo získánoA mixture of 5.2 grams (50 millimoles) of malonic acid, 3.3 grams (110 millimoles) of paraformaldehyde, 9.95 milliliters (50 millimoles) of dicyclohexylamine and 4.06 milliliters (55 millimoles) of ethanethiol in 120 milliliters of dioxane was heated at reflux for 2 hours. temperature 70 ° C. The solvents were removed under reduced pressure, the residue was redissolved in ethyl acetate, and the resulting solution was extracted with 4 x 20 mL of saturated aqueous sodium bicarbonate. The combined aqueous layers were washed with 20 mL of ethyl acetate, acidified with 1 molar hydrochloric acid, and the resulting suspension was extracted into dichloromethane. The obtained solution was dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and evaporated to give
3.76 gramu (52 procent) požadovaného produktu ve formě pevné bílé látky. 1HNMR: 5(CDC13), 9,89 (1H, brs), 6,35 (1H, s) ,3.76 g (52 percent) of the desired product as a white solid. 1 HNMR: δ (CDCl 3 ), 9.89 (1H, brs), 6.35 (1H, s),
5.77 (1H, s), 3,39 (2H, s) , 2,49 (2H, dd, J=7,4, 14,5 Hz), 1,25 (3H, t, J=5,2 Hz) .5.77 (1H, s), 3.39 (2H, s), 2.49 (2H, dd, J = 7.4, 14.5 Hz), 1.25 (3H, t, J = 5.2 Hz) ).
Stupeň B: 4S-Benzyl-3-(2-ethylsulfanylmethylakryloyl)-5,5-dimethyl-oxazolidin-2-onStep B: 4S-Benzyl-3- (2-ethylsulfanylmethyl-acryloyl) -5,5-dimethyl-oxazolidin-2-one
3,76 gramu (25,8 milimolu) kyseliny 2-ethylsulfanylmethylakrylové bylo rozpuštěno v 75 mililitrech suchého tetrahydrofuranu a ochlazeno v argonové atmosféře na teplotu -78 °C. K roztoku bylo přidáno 4,6 mililitru (33,5 milimolu) triethylaminu a 3,17 mililitru (25,8 milimolu) pivaloylchloridu, přičemž rychlost přidávání byla taková, aby teplota nepřevýšila -60 °C. Směs byla 30 minut míchána při teplotě -78 °C, ohřátá na dvě hodiny na teplotu místnosti a znovu ochlazena na teplotu -78 °C.3.76 g (25.8 mmoles) of 2-ethylsulfanylmethylacrylic acid were dissolved in 75 ml of dry tetrahydrofuran and cooled to -78 ° C under argon. 4.6 ml (33.5 mmol) of triethylamine and 3.17 ml (25.8 mmol) of pivaloyl chloride were added to the solution at a rate such that the temperature did not exceed -60 ° C. The mixture was stirred at -78 ° C for 30 minutes, warmed to room temperature for two hours and recooled to -78 ° C.
• ·• ·
1«..1 «..
#· ·· ·· ♦ · ♦ ♦ * ♦ • · · · · · • · · · · · · « · · · · ·# · ·· ·· ♦ · ♦ ♦ * ♦ · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·
99 · · 9 999 · · 9 9
V jiné baňce byl 4S-benzyl-5,5-dimethyl-oxazolidin-2-on rozpuštěn v 75 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a ochlazen v argonové atmosféře na teplotu -78 °C. K roztoku bylo pomalu přidáno 12,9 mililitru 2,4 molárního roztoku n-butyllithia ve směsi hexanů (30,9 milimolů) a směs byla 30 minut míchána při teplotě místnosti. Vzniklý anion byl kapilárou přidán do první nádoby, směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána přes noc při této teplotě. Reakční směs byla rozložena 20 mililitry nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a rozpouštědla byla odstraněna při sníženém tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a vodu a organická vrstva byla postupně promyta nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, 1 molární kyselinou chlorovodíkovou a solankou, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a zahuštěna při sníženém tlaku, přečištěn mžikovou chromatografií na sloupciIn another flask, 4S-benzyl-5,5-dimethyl-oxazolidin-2-one was dissolved in 75 mL of dry tetrahydrofuran (THF) and cooled to -78 ° C under argon. To the solution was slowly added 12.9 mL of a 2.4 molar solution of n-butyllithium in a mixture of hexanes (30.9 millimoles) and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. The resulting anion was added by capillary to the first vessel, the mixture was allowed to warm to room temperature and stirred overnight at this temperature. The reaction mixture was quenched with 20 mL of saturated sodium bicarbonate solution and the solvents were removed under reduced pressure. The residue was partitioned between ethyl acetate and water and the organic layer was washed successively with saturated sodium bicarbonate solution, 1 molar hydrochloric acid and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure, purified by flash column chromatography.
Zbytek byl silikagelu s elucí hexanem obsahujícím 20 procent ethylacetátu. Bylo získáno 6,5 gramu (76 procent) produktu ve formě žlutého oleje. 3H NMR: δ(CDC13) , 7,29 (5H, m), 5,58 (1H, s) , 5,49 (1H,The residue was silica gel eluting with hexane containing 20 percent ethyl acetate. 6.5 g (76%) of the product were obtained as a yellow oil. 3 H-NMR: δ (CDC1 3), 7.29 (5H, m), 5.58 (1H, s), 5.49 (1H,
s), 4,54 (1H, dd, J=3,9, 9,7 Hz), 3,52 (2H, dd, J=15,8,s), 4.54 (1H, dd, J = 3.9, 9.7 Hz), 3.52 (2H, dd, J = 15.8,
3,1 Hz), 3,38 (1H, dd, J=3,9 14,5 Hz), 2,84 (1H, dd, J=4,6,3.1 Hz), 3.38 (1H, dd, J = 3.9 14.5 Hz), 2.84 (1H, dd, J = 4.6,
14,3 Hz), 2,52 (2H, dd, J=7,2, 14,6 Hz), 1,42 (3H, s) , 1,29 (3H, s), 1,22 (3H,. t, J=7,5Hz).14.3 Hz), 2.52 (2H, dd, J = 7.2, 14.6 Hz), 1.42 (3H, s), 1.29 (3H, s), 1.22 (3H, (t, J = 7.5 Hz).
LRMS: 356 [M+Na], 334 [M+H].LRMS: 356 [M + Na], 334 [M + H] < + >.
• ·• ·
·· ·· 9999
9 9 9 9 ·9 9 9 9 ·
9 9 9 9 ·9 9 9 9 ·
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 ·9 9 9 ·99 9 9 9 9
Stupeň C: 4S-Benzyl-3-[(2R-terc. butoxyamínomethyl)-3-ethylsulfanylmethylpropíonyl]-5,5-dimethyl-oxazolidin-2-onStep C: 4S-Benzyl-3 - [(2R-tert-butoxyaminomethyl) -3-ethylsulfanylmethylpropionyl] -5,5-dimethyl-oxazolidin-2-one
2.1 gramu (6,3 milimolu) 4S-benzyl-3-(2-ethylsulfanylmethylakryloyl)-5,5-dimethyl-oxazolidin-2-onu bylo rozpuštěno v 10 mililitrech ethanolu a k roztoku bylo postupně přidáno 0,95 gramu (7,56 milimolu) O-terc. butylhydroxylaminu a2.1 g (6.3 millimoles) of 4S-benzyl-3- (2-ethylsulfanylmethylacryloyl) -5,5-dimethyl-oxazolidin-2-one was dissolved in 10 ml of ethanol and 0.95 g (7.56 g) was gradually added milimol) O-tert. butylhydroxylamine and
1.1 mililitru (7,87 milimolu) triethylaminu. Směs byla míchána přes noc při teplotě 30 °C. Rozpouštědla byla odstraněna při sníženém tlaku a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu. Získaný organický roztok byl postupně promyt 1 molární kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysušen nad bezvodým síranem hořečnatým a přefiltrován. Filtrát byl zahuštěn při sníženém tlaku a bylo získáno 2,42 gramu (91 procent) požadovaného produktu ve formě světle' žlutého oleje, který podle vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) obsahoval pouze jeden diastereoizomer.1.1 ml (7.87 mmol) of triethylamine. The mixture was stirred overnight at 30 ° C. The solvents were removed under reduced pressure and the residue was dissolved in ethyl acetate. The obtained organic solution was washed successively with 1 molar hydrochloric acid, saturated sodium bicarbonate solution and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure to give 2.42 g (91 percent) of the desired product as a pale yellow oil which contained only one diastereoisomer according to high performance liquid chromatography (HPLC).
s) .s).
LRMS: 423 [M+H].LRMS: 423 [M + H] < + >.
Stupeň D: Kyselina 2R-(terc. butoxyamínomethyl)-3-ethylsulfanylmethylpropionováStep D: 2R- (tert-butoxyaminomethyl) -3-ethylsulfanylmethylpropionic acid
Roztok 2,42 gramu (5,72 milimolu) 4S-benzyl-3-[(2R-terc. butoxyaminomethyl)-3-ethylsulfanylmethylpropionyl]-5,5-dimethyloxazolidin-2-onu ve 40 mililitrech tetrahydrofuranu (THF) byl ochlazen na teplotu 0 °C a bylo k němu přidáno 10 mililitrů φφ φφ ·φ • · · · φ · φ φ · · · · φ · · · · φ · φ · ΦΦΦ· • · ♦ φ · · · • Φ φφφφA solution of 2.42 g (5.72 mmol) of 4S-benzyl-3 - [(2R-tert-butoxyaminomethyl) -3-ethylsulfanylmethylpropionyl] -5,5-dimethyloxazolidin-2-one in 40 mL of tetrahydrofuran (THF) was cooled to temperature of 0 ° C and to it was added 10 milliliters.
1U..1U ..
vodného roztoku obsahujícího 288 miligramů (6,86 milimolu) hydroxidu lithného. Směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána při této teplotě po dobu 5 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku a zbytek byl rozdělen mezi vodu a ethylacetát. Vodná vrstva byla odstraněna a ethylacetátová vrstva byla postupně promyta vodou a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Spojené vodné vrstvy byly před okyselením 1 molární kyselinou chlorovodíkovou promyty 20 mililitry ethylacetátu. Vzniklá emulze byla extrahována 3 x 20 mililitry dichlormethanu a spojené organické vrstvy byly vysušeny nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrovány a odpařeny. Bylo získáno 0,68 gramu (50 procent) požadovaného produktu ve formě bezbarvého oleje. Ή NMR: č(CDC13), 8,03 (2H, brs), 3,21 (2H, d, J=6,lHz), 2,89 (2H, m) , 2,75 (1H, m) , 2,57 (2H, dd, J=7,4, 14,8 Hz), 1,26 (3H, t, J=7, 4 Hz) , 1,18 (9H, s) .aqueous solution containing 288 milligrams (6.86 millimoles) of lithium hydroxide. The mixture was allowed to warm to room temperature and stirred at this temperature for 5 hours. The solvent was removed under reduced pressure and the residue was partitioned between water and ethyl acetate. The aqueous layer was removed and the ethyl acetate layer was washed successively with water and saturated sodium bicarbonate solution. The combined aqueous layers were washed with 20 mL of ethyl acetate before acidifying with 1 molar hydrochloric acid. The resulting emulsion was extracted with 3 x 20 mL dichloromethane and the combined organic layers were dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and evaporated. 0.68 g (50 percent) of the desired product was obtained as a colorless oil. Ή NMR: δ (CDCl 3 ), 8.03 (2H, brs), 3.21 (2H, d, J = 6.1Hz), 2.89 (2H, m), 2.75 (1H, m) 2.57 (2H, dd, J = 7.4, 14.8 Hz), 1.26 (3H, t, J = 7.4 Hz), 1.18 (9H, s).
LRMS: 236 [M+H], 234 [M-H].LRMS: 236 [M + H], 234 [M-H] < - >.
Stupeň E: Roztok 2S-[2R-(terč. butoxyaminomethyl)-3-ethylsulfanylmethylpropionylamino]-3,3-N,N-tetramethylbutyramiduStep E: 2S- [2R- (tert-butoxyaminomethyl) -3-ethylsulfanylmethylpropionylamino] -3,3-N, N-tetramethylbutyramide solution
340 miligramů (1,44 milimolu) kyseliny 2R-(terc. butoxyaminomethyl ) -3-ethylsulfanylmethylpropíonové bylo rozpuštěno v mililitrech N, N-dimethylformamidu (DMF) přidáno 272 miligramů (1,73 milimolu) a ke směsi bylo N,N-dimethylamidu terč. leucinu, 19,6 miligramu (0,14 milimolu) l-hydroxy-7-azabenzotriazolu hydrochloridu (EDC). Reakční (HOAt) a 331 miligramů (1,73 milimolu) N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku a zbytek byl rozpuštěn v dichlormethanu. Organický roztok byl • · 999 ·340 mg (1.44 mmol) of 2R- (tert-butoxyaminomethyl) -3-ethylsulfanylmethylpropionic acid was dissolved in milliliters of N, N-dimethylformamide (DMF) and 272 mg (1.73 mmol) were added and N, N-dimethylamide was added to the mixture. target. leucine, 19.6 mg (0.14 mmol) of 1-hydroxy-7-azabenzotriazole hydrochloride (EDC). The reaction (HOAt) and 331 mg (1.73 mmol) of the N-ethyl-N '- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide mixture were stirred overnight at room temperature. The solvent was removed under reduced pressure and the residue was dissolved in dichloromethane. The organic solution was • · 999 ·
«· « Φ • · · φ • · ·· Φ φ φ φ
Φ · · • Φ · postupně promyt 1 molární kyselinou chlorovodíkovou, 1 molárním roztokem uhličitanu sodného a solankou, vysušen nad bezvodým síranem hořečnatým a přefiltrován. Filtrát byl zahuštěn při sníženém tlaku a bylo získáno 440 miligramů (82 procent) produktu ve formě bezbarvého oleje. NMR:Wash successively with 1 molar hydrochloric acid, 1 molar sodium carbonate solution and brine, dry over anhydrous magnesium sulphate and filter. The filtrate was concentrated under reduced pressure to give 440 mg (82 percent) of the product as a colorless oil. NMR:
(9H, s).(9H, s).
LRMS: 398 [M+Na], 376 [M+l].LRMS: 398 [M + Na], 376 [M + 1].
Stupeň F: 2S-{2R-[(terč. Butoxyformylamino) methyl ]-3-ethylsulfanylmethylpropionylamino} - 3, 3-N,N-tetrámethylbutyramidStep F: 2S- {2R - [(tert-Butoxyformylamino) methyl] -3-ethylsulfanylmethylpropionylamino} -3,3-N, N-tetra-methylbutyramide
220 miligramů (0,58 milimolů) rozteku 2S-[2R-(terč. butoxyaminomethyl) -3-ethylsulfanylmethylpropionylamino] -3,3-N,N-tetramethylbutyramidu v 5 mililitrech dichlormethanu bylo smícháno s 0,1 mililitru anhydridu kyseliny mravenčí a směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědla byla odstraněna při sníženém tlaku a zbytek byl přečištěn mžikovou chromatografii na sloupci silikagelu s elucí hexanem obsahujícím 50 procent ethylacetátu a bylo získáno 120 miligramů (52 procent) produktu ve formě bezbarvého oleje. ΧΗ NMR: 5(CDC13, rotamery), 8,31 (1H, brs), 6,56 (1H, d, J=9,l Hz),220 mg (0.58 mmol) of a solution of 2S- [2R- (tert-butoxyaminomethyl) -3-ethylsulfanylmethylpropionylamino] -3,3-N, N-tetramethylbutyramide in 5 ml of dichloromethane was mixed with 0.1 ml of formic anhydride and the mixture was stirred overnight at room temperature. The solvents were removed under reduced pressure and the residue was purified by silica gel flash column chromatography eluting with hexane containing 50 percent ethyl acetate to give 120 mg (52 percent) of the product as a colorless oil. Χ Η NMR: 5 (CDC1 3, rotamers), 8.31 (1H, brs), 6.56 (1H, d, J = 9 Hz)
4,94 (0,33H, d, J=9,4 Hz), 4,88 (0, 67H, d, J=9,2 Hz), 4,08 (0,67H, brm), 3,83 (1,34H, brm), 3,13 (3H, s), 2,95 (3H,· s), 2,80 (2H, m) , 2,61 (1H, dd, J=6,8, 14,0 Hz), 2,49 (2H, dd, J=7,4, 14,7 Hz), 1,29 (9H, s), 1,25 (3H, t, J=7,2 Hz), 0,99 (3H, s) .4.94 (0.33H, d, J = 9.4 Hz), 4.88 (0.67H, d, J = 9.2 Hz), 4.08 (0.67H, brm), 3.83 (1.34H, brm), 3.13 (3H, s), 2.95 (3H, s), 2.80 (2H, m), 2.61 (1H, dd, J = 6.8, 14.0 Hz), 2.49 (2H, dd, J = 7.4, 14.7 Hz), 1.29 (9H, s), 1.25 (3H, t, J = 7.2 Hz) 0.99 (3H, s).
LRMS: 426 [M+Na], 404 [M+H].LRMS: 426 [M + Na], 404 [M + H] < + >.
lis’ ·· n • · * · • · · · • · ♦ · • * · · ·· **lis ´ ·· n · * · · · • • * · ** **
Stupeň G: 2S-{ 3-Ethylsulfanylmethyl-2R-[( formylhydroxyamino) methyl] -propionylamino}-3,3-N, N-tetramethylbutyramidStep G: 2S- {3-Ethylsulfanylmethyl-2R - [(formylhydroxyamino) methyl] -propionylamino} -3,3-N, N-tetramethylbutyramide
120 miligramů (0.3 milimolu) roztoku 2S-{2R-[(terč. butoxyf ormylamino) methyl ] -3-ethylsulf anylmethylpropionylamino } - 3,3N,N-tetramethylbutyramidu v 1 mililitru deuterovaného chloroformu bylo smícháno se 4 mililitry kyseliny trifluoroctové (TFA) a směs byla ponechána stát přes noc při teplotě 4 °C. Rozpouštědla byla odstraněna při sníženém tlaku a zbytky kyseliny trifluoroctové (TFA) byly odstraněny azeotropickou destilací s toluenem. Zbytek byl přečištěn preparativní vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) a bylo získáno 40 miligramů (38 procent) produktu ve formě bezbarvého oleje, který byl podle vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC)120 mg (0.3 millimole) of a solution of 2S- {2R - [(tert-butoxyformylamino) methyl] -3-ethylsulfanylmethylpropionylamino} -3,3N, N-tetramethylbutyramide in 1 ml of deuterated chloroform was mixed with 4 ml of trifluoroacetic acid (TFA). and the mixture was allowed to stand overnight at 4 ° C. The solvents were removed under reduced pressure and the trifluoroacetic acid (TFA) residues were removed by azeotropic distillation with toluene. The residue was purified by preparative high performance liquid chromatography (HPLC) to give 40 mg (38 percent) of the product as a colorless oil which was found to be high performance liquid chromatography (HPLC).
13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 173,3, 171, 6, 171,2, 55,2, 54,8, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 173.3, 171.6, 171.2, 55.2, 54.8,
51,1, 48,5, 45,2, 44,4, 38,5, 38,4, 35,9, 35,8, 35,7, 31,7,51.1, 48.5, 45.2, 44.4, 38.5, 38.4, 35.9, 35.8, 35.7, 31.7,
31,4, 26,7, 26, 6, 26, 5, 14, 6.31.4, 26.7, 26.6, 26.5, 14.6.
LRMS: 370 [M+Na], 348 [M+H], 346 [M-H].LRMS: 370 [M + Na] +, 348 [M + H] +, 346 [M-H] +.
Sloučenina v příkladu 61 byla připravena podobným způsobem s tím, že ve stupni A byl místo ethanthiolu použit piperidin.The compound of Example 61 was prepared in a similar manner except that piperidine was used in step A instead of ethanethiol.
117* • Φ φφφφ φ φφ φφ φφ φφ φ φ φ φ · · φφφ φφφφ •φ φφφ φφ φ φφφ φφφ* φφφ φφ «φ φφ117 * • Φ φ φ φ φ φ φ φ φ · · · · · · · • • • • • • φ φ φ φ
Příklad 61Example 61
- {2-[(Formylhydroxyamino)methyl]-3-piperidin-1-yl-propionylamino}-3, 3-N,N-tetramethylbutyramid- {2 - [(Formylhydroxyamino) methyl] -3-piperidin-1-yl-propionylamino} -3,3-N, N-tetramethylbutyramide
Pevná bílá látka (podle HPLC směs diastereoizomerů v poměruWhite solid (mixture of diastereoisomers in HPLC ratio according to HPLC)
38,8, 36,2, 36,1, 27,0, 25,6, 24,3. LRMS: 371 [M+H], 369 [M-H],38.8, 36.2, 36.1, 27.0, 25.6, 24.3. LRMS: 371 [M + H], 369 [M-H],
Sloučeniny připravené v příkladech 62 až 65 byly připraveny analogicky k postupu popsanému v příkladu 7, způsob II s tím, že místo O-benzylhydroxylaminu byl ve stupni B použit 0-terc. butylhydroxylamin a místo N,N-dimethylamidu terč. leucinu byly ve stupni E použity příslušné aminy nebo amidy nebo benzylestery aminokyselin. Konečné odštěpení chránící skupiny bylo provedeno acidolýzou kyselinou trifluoroctvou (viz příklad 60 výše).The compounds prepared in Examples 62 to 65 were prepared in analogy to the procedure described in Example 7, Method II except that O-tert was used in step B instead of O-benzylhydroxylamine. butylhydroxylamine and the target of N, N-dimethylamide; In step E, the appropriate amines or amides or benzyl esters of amino acids were used. Final deprotection was accomplished by acidolysis with trifluoroacetic acid (see Example 60 above).
• · · « φ φ • ·• · · φ · ·
118* • ΦΦ φ • φφ φφ φφ φ φ φ φ φ · φφφ «φφφ φφ φφφ φφ φ φφφ φφφφ φφφ φφ φφ φφ118 * ΦΦ ΦΦ φ φ φ φ φ · · · «φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ
Příklad 62 (lR-Dimethylkarbamoyl-2-methyl-2-methylsulfanylpropyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)methyl]-hexanovéExample 62 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl] -hexanoic acid (1R-Dimethylcarbamoyl-2-methyl-2-methylsulfanylpropyl) amide
Bezbarvý olej. 1H NMR: 5(CDC13, rotamery), 8,4 (0,5H, s), 7,85 (0,5H, s) , 7,11 (0,5H, d, J=9,l Hz), 6,93 (0,5H, d, J=9,l Hz), 5,15 (1H, d, J=9,4 Hz), 3,90 (0,5H, m) , 3,73 (0,5H, m) , 3,64 (0,5H, d, J=14,3 Hz), 3,48 (0,5H, dd, J=14,0, 3,9 Hz) 3,22 (3H, s), 2,97 (3H, s) , 2,83 (0,5H, m) , 2,70 (0,5H, m) , 2,07 (1,5H, m) , 2,04 (1,5H, m) , 1,58 (1H, m) , 1,36 (4H, m) , 1,32 (3H, s), 1,28 (3H, s), 0,86 (3H, t, J=6,6 Hz).Colorless oil. 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 8.4 (0.5H, s), 7.85 (0.5H, s), 7.11 (0.5H, d, J = 9.1 Hz) 6.93 (0.5H, d, J = 9.1 Hz), 5.15 (1H, d, J = 9.4 Hz), 3.90 (0.5H, m), 3.73 (0.5H, m), 3.64 (0.5H, d, J = 14.3 Hz), 3.48 (0.5H, dd, J = 14.0, 3.9 Hz) 3.22 (3H, s), 2.97 (3H, s), 2.83 (0.5H, m), 2.70 (0.5H, m), 2.07 (1.5H, m), 2, Δ (1.5H, m), 1.58 (1H, m), 1.36 (4H, m), 1.32 (3H, s), 1.28 (3H, s), 0.86 (3H) , t, J = 6.6 Hz).
13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 175,4 173,5, 170,8, 63, 6, 53,2, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 175.4 173.5, 170.8, 63.6, 53.2,
53,1, 52,5, 49, 5, 47, 5, 46,1, 44,9, 41, 6, 37,5, 36,5, 36, 4,53.1, 52.5, 49, 5, 47, 5, 46.1, 44.9, 41, 6, 37.5, 36.5, 36, 4,
35,4, 30,2, 29,8, 28,0, 14,3, 12,0, 11,9.35.4, 30.2, 29.8, 28.0, 14.3, 12.0, 11.9.
LRMS: 362 [M+H], 360 [M-H], ·· ····LRMS: 362 [M + H], 360 [M + H], ·· ····
112.. :112 ..:
• Μ ·· Β· • · · Β · · Β ·• Μ ·· Β · · · Β · Β ·
Β Β * · · Β ·· Β ·
Β · · · · · Β · · • Β Β · Β Β »Β · · • Β Β Β Β Β »
ΙΜ ·· ·· ·*ΙΜ ·· ·· ·
Příklad 63 (2-Benzylsulfanyl-lR-dimethylkarbamoyl-2-methylpropyl)amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)methyl]-hexanovéExample 63 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl] -hexanoic acid (2-benzylsulfanyl-1R-dimethylcarbamoyl-2-methylpropyl) amide
Bílá pěna. 1H NMR: 5(CDC13, rotamery), 8,37 (0,33H, s) , 7,81 (0,66H, s), 7,31 (5H, m) , 7,06 (0,33H, d, J=8,8 Hz), 6,89 (0,66H, d, J=9,3 Hz), 5,20 (1H, d, J=9,3 Hz), 3,94 (0,33H, dd, J=8,3, 14,6 Hz), 3,78 (2,66H, m), 3,61 (0,33H, dd, J=3,5, 14,4 Hz), 3,42 (0,66H, dd, J=5,1, 14,9 Hz) 3,21 (3H, s) , 3,03 (3H, s), 2,82 (0,66H, m), 2,69 (0,33H, m) , 1,61 (1H, m) , 1,42 (1H, m), 1,37 (3H, s), 1,32 (3H, s), 1,26 (4H, m) 0,86 (3H, t, J=6,6 Hz).White foam. 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 8.37 (0.33H, s), 7.81 (0.66H, s), 7.31 (5H, m), 7.06 (0.33H) δ d, J = 8.8 Hz), 6.89 (0.66H, d, J = 9.3 Hz), 5.20 (1H, d, J = 9.3 Hz), 3.94 (0 33H, dd, J = 8.3, 14.6 Hz), 3.78 (2.66H, m), 3.61 (0.33H, dd, J = 3.5, 14.4 Hz), 3.42 (0.66H, dd, J = 5.1, 14.9 Hz) 3.21 (3H, s), 3.03 (3H, s), 2.82 (0.66H, m), 2.69 (0.33H, m), 1.61 (1H, m), 1.42 (1H, m), 1.37 (3H, s), 1.32 (3H, s), 1.26 (4H, m) 0.86 (3H, t, J = 6.6Hz).
0«··0 «··
0 0 i2<r’ :0 0 i2 <r ’:
0 0 0 · «0 00 000 0 0
0 0 0 0 00 0 0 0 0
0 0 0 0 00 0 0 0 0
0 0 0 0 0 ·0 0 0 0 0 ·
0 0 0 0 · «0 0·0 0 0 0 ·
Příklad 64 [2-Benzylsulfanyl-2-methyl-IR-(morfolin-4-karbony1)propyl]amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)methyl]-hexanovéExample 64 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl] -hexanoic acid [2-benzylsulfanyl-2-methyl-1R- (morpholine-4-carbonyl) propyl] amide
8,37 (0,5H, m) 2,64 (0,5H, m) , 1,61 (1H, m) , 1,41 (1H, m) , 1,36 (3H, s), 1,33 (3H, s), 1,29 (4H, m), 0,87 (3H, t, J=6,8 Hz).8.37 (0.5H, m) 2.64 (0.5H, m), 1.61 (1H, m), 1.41 (1H, m), 1.36 (3H, s), 1, 33 (3H, s), 1.29 (4H, m), 0.87 (3H, t, J = 6.8 Hz).
13C NMR: 5(CDC13, rotamery), 175,5, 173,4, 169,4, 137,8, 129,5, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 175.5, 173.4, 169.4, 137.8, 129.5,
129.3, 129,1, 129,0, 127,8, 127,5, 67,1, 67,0, 53,3, 53,2, 51, 99, 49, 6, 49,5, 49,2, 47,9, 46, 5, 45,0, 43,2, 43,0 34,0,129.3, 129.1, 129.0, 127.8, 127.5, 67.1, 67.0, 53.3, 53.2, 51, 99, 49, 6, 49.5, 49.2, 47.9, 46.5, 45.0, 43.2, 43.0 34.0,
30.3, 30,2, 29,7, 26,8, 26,5, 25, 9, 25,8, 22, 9, 14, 3.30.3, 30.2, 29.7, 26.8, 26.5, 25, 9, 25.8, 22, 9, 14, 3.
LRMS: 502 [M+Na], 480 . [M+H], 478 [M-H].LRMS: 502 [M + Na] +, 480. [M + H], 478 [M-H] < - >.
Příklad 65 [2-Benzylsulfanyl-2-methyl-lR-(nebo S) (4-methylpiperidin-lkarbonyl)propyl]amid kyseliny 2R-[ (formylhydroxyamino)methyl]hexanové »· ···· • · i2j·’ »·· * · • ·· *'· «· · · · · · · « · * φ · · ·>Example 65 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl] hexanoic acid [2-benzylsulfanyl-2-methyl-1R- (or S) (4-methylpiperidine-1-carbonyl) propyl] amide * •.........
• · · * · · « · • · · · « · « «·· ·· ♦> ··· * * «· · · · · · ·
Diastereoizomer A. Pevná bílá látka.Diastereoisomer A. White solid.
LRMS: 514 [M+Na], 492 [M+H], 490 [M-H].LRMS: 514 [M + H], 492 [M + H], 490 [M-H].
Diastereoizomer B. Bezbarvý gel.Diastereoisomer B. Colorless gel.
LRMS: 514 [M+Na], 492 [M+H], 490 [M-H].LRMS: 514 [M + H], 492 [M + H], 490 [M-H].
Sloučeniny připravené v příkladech 66 až 68 byly připraveny analogicky k postupu popsanému v příkladu 7, způsob II s tím, že ve stupni A byla kyselina butylmalonová zaměněna za odpovídající kyselinu malonovou, místo O-benzylhydroxylaminu byl ve stupni C použit 0-terc. butylhydroxylamin. Stereoselektivita při Michaelově adici byla v jednotlivých případech různá. Konečné odštěpení chránící skupiny bylo převedeno acidolýzou kyselinou trifluoroctvou (viz příklad 60 výše) .The compounds prepared in Examples 66-68 were prepared in analogy to the procedure described in Example 7, Method II except that in step A the butyl malonate was replaced with the corresponding malonic acid, instead of O-benzylhydroxylamine in step C, O-tert. butylhydroxylamine. Stereoselectivity in Michael addition varied from case to case. Final cleavage of the protecting group was accomplished by acidolysis with trifluoroacetic acid (see Example 60 above).
··
122»*122 »*
9999 *9999 *
9999
9 99 9
9 99 9
9 99 9
9 99 9
999 99999 99
99 • · *99 • · *
9 99 9
9 9 99 9 9
9 99 9
9999
Příklad 66 [lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl]amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)methyl]-hexanovéExample 66 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl] -hexanoic acid [1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl] amide
Jediný diastereoizomer. H NMR: 5(CDC13, rotamery), (0,25H, s), 7,84 (0,75H, s), 7,05 (0,35H, d, J=9,0Hz), (0,65H, d, J-9,3 Hz), 5,70 (1H, m) , 5, 03-5,24 (2H, m) , (1H, dd, J=9,4, 6,7 Hz), 3,98 (0,5H, m) 3,81 (0,5H, m) , (1H, m) , 3,14 (3H, s), 2,97 (1,3H, s), 2,96 (1,7H, s) 2,92 (1H, m) , 2,16-2,50 (2H, m) 0,98 (4,5H, s), 0,94Single diastereoisomer. 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), (0.25H, s), 7.84 (0.75H, s), 7.05 (0.35H, d, J = 9.0Hz), (0, 65H, d, J = 9.3 Hz), 5.70 (1H, m), 5.0.03-5.24 (2H, m), (1H, dd, J = 9.4, 6.7 Hz) 3.98 (0.5H, m), 3.81 (0.5H, m), (1H, m), 3.14 (3H, s), 2.97 (1.3H, s), 2, 96 (1.7H, s) 2.92 (1H, m), 2.16-2.50 (2H, m) 0.98 (4.5H, s), 0.94
8,40 6, 74 4,88 3,558.40 6, 74 4.88 3.55
2,75(4,5H,2.75 (4.5H,
LRMS: 336 [M+Na], 312 [M-H]LRMS: 336 [M + Na] +, 312 [M-H]
Příklad 67 [IS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl]amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)methyl]-hex-5-enovéExample 67 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl] -hex-5-enoic acid [IS-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl] amide
HH
O ·· ·· ·· • · · · · · · · ·O ·· ·· ·· · · · · · · · · · ·
Diastereoizomer A. Bezbarvý olej. -’Ή NMR: 6(CDC13, rotamery),Diastereoisomer A. Colorless oil. - 1 H NMR: δ (CDCl 3 , rotamers),
LRMS: 350 [M+Na], 326 [M-H].LRMS: 350 [M + Na], 326 [M-H] < - >.
Diastereoizomer B. Bezbarvý olej. NMR: 5(CDC13, rotamery), 8,41 (0,5H, s) , 7,75 (0,5H, s) , 6,58 (0,5H, d, J=9,l Hz), 6,36 (0,5H, d, J=9, 1 Hz), 5,75 (1H, m) , 5,01 (2H, m) , 4,86 (0,5H, d, J=9,5 Hz), 4,64 (0,5H, d, J=7,5 Hz), 3,42-3,82 (2H, m) ,Diastereoisomer B. Colorless oil. NMR: δ (CDCl 3 , rotamers), 8.41 (0.5H, s), 7.75 (0.5H, s), 6.58 (0.5H, d, J = 9.1 Hz), 6.36 (0.5H, d, J = 9.1 Hz), 5.75 (1H, m), 5.01 (2H, m), 4.86 (0.5H, d, J = 9, 5 Hz), 4.64 (0.5H, d, J = 7.5 Hz), 3.42-3.82 (2H, m),
3,22 (1,5H, s), 3,07 (1,5H, s), 2,99 (3H, s), 2,87 (0,5H, m)3.22 (1.5H, s), 3.07 (1.5H, s), 2.99 (3H, s), 2.87 (0.5H, m)
2,66 (0,5H, m), 2,13 (2H, m), 1,81 (1H, m) , 1,49 (1H, m), 1,02 (4,5H, s), 1,00 (4,5H, s).2.66 (0.5H, m), 2.13 (2H, m), 1.81 (1H, m), 1.49 (1H, m), 1.02 (4.5H, s), 1 00 (4.5H, s).
LRMS: 350 [M+Na], 326 [M-H].LRMS: 350 [M + Na], 326 [M-H] < - >.
Příklad 68 [lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl]amid kyseliny 2R-[(formylhydroxyamino)methyl]-hex-4-inovéExample 68 2R - [(Formylhydroxyamino) methyl] -hex-4-ynoic acid [1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl] amide
HH
OO
(4,5H, s) .(4.5H, s).
LRMS: 348 [M+Na], 324 [M-H].LRMS: 348 [M + Na] +, 324 [M-H].
Příklad 69 [lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl] amid kyseliny 2R-[1R (nebo S)-(formylhydroxyamino)methyl]-hexanovéExample 69 2R- [1R (or S) - (Formylhydroxyamino) methyl] -hexanoic acid [1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl] amide
Postup přípravy uvedené sloučeniny je znázorněn na schématu 5 a jeho detailní popis je obsažen v následujících odstavcích:The procedure for the preparation of the compound is shown in Scheme 5 and a detailed description is given in the following paragraphs:
φ φ • φ φ φφ φ • φ φ φ
·· «····· «···
φφφ φ φφφφ φ φ
Schéma 5Scheme 5
IAND
ΓΟ £ΓΟ £
«X«X
S .ρ '> ω c Ό . ΟS .ρ '> ω c Ό. Ο
>ι υ X χ> ι υ X χ
4)4)
Λ .Λ.
CmCm
CJ Q υ ω CJ Q υ ω
SUBSTITUTE SHEET fRLřLF *AÍ • · • 0SUBSTITUTE SHEET fRLøLF * AÍ • · • 0
126 • · 0 · · · · 0 0 0 0 0126 • 0 0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 00 0 0 0 0
0 0 0· 0 ·0 0 0 · 0 ·
Stupeň A: 4-Benzyl-3-hexanoyl-oxazolidin-2-onStep A: 4-Benzyl-3-hexanoyl-oxazolidin-2-one
14,5 gramu (81,7 milimolu) 4S-benzyl-oxazolidin-2-onu bylo v argonové atmosféře rozpuštěno v 75 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Roztok byl ochlazen v ledové lázni a bylo k němu pomalu přidáno 56 mililitrů 1,6 molárního roztoku n-butyllithia ve směsi hexanů (89,2 milimolu). Vzniklá lithná sůl vykrystalovala z roztoku ve formě pevné hmoty a byla ponechána ohřát přes noc na teplotu místnost:i ti. Výsledná, oranžová suspenze byla znovu ochlazena v ledové lázni a za neustálého chlazení k ní bylo přidáno TOlitru (74,3 milimolu)' studeného roztoku hexaňoylchloridu v 50 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a poté míchána 3 hodiny. Reakční směs byla rozložena přidáním 5 mililitrů 1 molárního roztoku uhličitanu sodného a při sníženém tlaku byla odstraněna rozpouštědla. Zbytek byl rozdělen mezi 100 mililitrů 1 molárního roztoku uhličitanu sodného a 150 mililitrů ethylacetátu. Organická vrstva byla odstraněna a vodná vrstva byla dále extrahována ethylacetátem. Spojené organické vrstvy byly postupně promyty vodou, 1 molárním roztokem uhličitanu sodného a solankou, vysušeny nad bezvodým síranem hořečnatým a přefiltrovány. Po zahuštění filtrátu byl získán oranžový olej, jehož přečištěním mžikovou chromatografii bylo získáno 10,21 gramu (50 procent) požadovaného produktu ve formě žlutého oleje. M NMR: 5(CDC13), 7,38-7,24 (3H, m) , 7,24-7,16 (2H, m) , 4,68 (1H, m), 4,24-4,12 (2H, m), 3,30 (1H, dd,14.5 g (81.7 mmol) of 4S-benzyl-oxazolidin-2-one was dissolved in 75 ml of dry tetrahydrofuran (THF) under argon. The solution was cooled in an ice bath and 56 mL of a 1.6 molar solution of n-butyllithium in hexanes (89.2 millimoles) was slowly added. The resulting lithium salt crystallized from the solution as a solid and was allowed to warm to room temperature overnight. The resulting orange suspension was re-cooled in an ice bath, and TO1 (74.3 mmol) of cold hexanesoyl chloride in 50 mL dry tetrahydrofuran (THF) was added with cooling. The mixture was allowed to warm to room temperature and then stirred for 3 hours. The reaction was quenched by the addition of 5 mL of 1 molar sodium carbonate solution and the solvents were removed under reduced pressure. The residue was partitioned between 100 mL of 1 molar sodium carbonate solution and 150 mL of ethyl acetate. The organic layer was removed and the aqueous layer was further extracted with ethyl acetate. The combined organic layers were washed successively with water, 1 molar sodium carbonate solution and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and filtered. Concentration of the filtrate gave an orange oil, which was purified by flash chromatography to give 10.21 g (50 percent) of the desired product as a yellow oil. 1 H NMR: δ (CDCl 3 ), 7.38-7.24 (3H, m), 7.24-7.16 (2H, m), 4.68 (1H, m), 4.24-4, 12 (2H, m), 3.30 (1H, dd,
J=13,4, 3,2 Hz), 3,02-2,86 (2H, m) , 2,77 (1H, dd, J-13,4,J = 13.4, 3.2 Hz), 3.02-2.86 (2H, m), 2.77 (1H, dd, J-13.4,
9,6 Hz), 1,77-1,63 (2H, m) , 1, 44-1,30 (4H, m) , 0,92 (3H, brt,9.6 Hz), 1.77-1.63 (2H, m), 1.44-1.30 (4H, m), 0.92 (3H, brt,
J=6,9 Hz) .J = 6.9 Hz).
·»·· ·· · · · · · · » · · • · · · · · · · ·· »·· ·· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·
-1 O**7 9 · ♦ ········ lz /· · ······· ···· * ··· ·· ·· ··-1 O ** 7 9 · ♦ ········ lz / · · ······· ···· * ··· ·· ·· ··
Stupeň B: 1-(4S-Benzyl-2-oxo-oxazolidin-3-yl)-2R-butylbutan1,3-dionStep B: 1- (4S-Benzyl-2-oxo-oxazolidin-3-yl) -2R-butylbutane-1,3-dione
10,2 gramu (37,1 milimolu) 4-benzyl-3-hexanoyl-oxazolidin-2onu bylo v argonové atmosféře rozpuštěno ve 150 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a ochlazeno na teplotu -78 °C. Během několika minut bylo k roztoku kapilárou přidáno 41 mililitrů 1 molárniho roztoku lithiumhexamethyldisilazidu v tetrahydrofuranu (THF) (41 milimolů) a výsledný zelený roztok byl míchán 2 hodiny při teplotě -78 °C. Následně bylo pomalu přidáno 3,3 mililitru (46,3 milimolu) acetylchloridu a směs byla míchána 3,5 hodiny. Reakční směs byla rozložena rychlým přidáním roztoku 3,0 gramů (14 milimolů) kyseliny citrónové v 15 mililitrech vody. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku a zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a vodu, promyt solankou, sušen nad bezvodým síranem horečnatým a přefiltrován. Zahuštěním filtrátu bylo získáno 12,11 gramu produktu ve formě žlutého oleje, který obsahoval zbytky10.2 g (37.1 mmol) of 4-benzyl-3-hexanoyl-oxazolidin-2-one were dissolved in 150 ml of dry tetrahydrofuran (THF) under argon and cooled to -78 ° C. Within a few minutes, 41 ml of a 1 molar solution of lithium hexamethyldisilazide in tetrahydrofuran (THF) (41 mmoles) was added to the capillary solution, and the resulting green solution was stirred at -78 ° C for 2 hours. Acetyl chloride (3.3 mL, 46.3 mmol) was added slowly and the mixture was stirred for 3.5 hours. The reaction mixture was quenched by the rapid addition of a solution of 3.0 grams (14 millimoles) of citric acid in 15 milliliters of water. The solvent was removed under reduced pressure and the residue was partitioned between ethyl acetate and water, washed with brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and filtered. Concentration of the filtrate afforded 12.11 g of the product as a yellow oil containing residues
(3H, m).(3 H, m).
Stupeň C: 1-(4S-Benzyl-2-oxo-oxazolindin-3-yl) -2R-butylbutan1,3-dion-3-(O-benzyloxim)Step C: 1- (4S-Benzyl-2-oxo-oxazolindin-3-yl) -2R-butylbutane-1,3-dione-3- (O-benzyloxime)
K roztoku 12,11 gramu (38,15 milimolu) l-(4S-benzyl-2-oxooxazolidin-3-yl)-2R-butylbutan-l,3-dionu v 10 mililitrech vody a 90 mililitrech ethanolu bylo přidáno 3,75 gramu (45,78 milimolu) octanu sodného a 7,31 gramu (45,78 milimolu)To a solution of 1- (4S-benzyl-2-oxooxazolidin-3-yl) -2R-butylbutan-1,3-dione (12.11 g, 38.15 mmol) in 10 mL of water and 90 mL of ethanol was added 3.75 grams (45.78 millimoles) of sodium acetate and 7.31 grams (45.78 millimoles)
128 φ · φφφφ128 φ · φφφφ
ΦΦ I • ♦ ♦ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φΦΦ I • ♦ ♦ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ
Φ * 4 hydrochloridu O-benzylhydroxylaminu. Vzniklá suspenze byla ponechána míchat přes noc při teplotě místnosti,Φ * 4 O-benzylhydroxylamine hydrochloride. The resulting suspension was allowed to stir overnight at room temperature,
Produkt (7,3 gramu, 45 procent, jediný oximový izomer) krystalizoval přímo z reakční směsi a byl odfiltrován, promyt vodným ethanolem (1:1) a usušen ve vakuu. Dále bylo acidobazickou extrakcí matečného louhu a následnou sloupcovou chromatografii získáno 5,31 gramu (33 procent) produktu ve formě žlutého oleje, který obsahoval směs oximových izomerů. 1H NMR (hlavní oximový izomer): 5(CDC13), 7,34-7,20 (8H, m) , 7,12-7,07 (2H,The product (7.3 g, 45 percent, single oxime isomer) crystallized directly from the reaction mixture and was filtered off, washed with aqueous ethanol (1: 1) and dried in vacuo. Further, acid-base extraction of the mother liquor and subsequent column chromatography yielded 5.31 g (33 percent) of the product as a yellow oil containing a mixture of oxime isomers. 1 H NMR (major oxime isomer): δ (CDCl 3 ), 7.34-7.20 (8H, m), 7.12-7.07 (2H,
m) , 5,14-5,02 (2H, m) , 4,53 (1H, m) , 4,13 (1H, dd, J=9,4,m), 5.14-5.02 (2H, m), 4.53 (1H, m), 4.13 (1H, dd, J = 9.4,
4,0 Hz), 4,04 (1H, brt, J=8,4 Hz), 3,91 (1H, dd, J=9,0,4.0 Hz), 4.04 (1H, brt, J = 8.4 Hz), 3.91 (1H, dd, J = 9.0,
2,7 Hz), 3,16 (1H, dd, J=13,4, 2,9 Hz), 2,09 (3H, s), 1,97 (1H, m) ,. 1,75 (1H, dd, J=13,4, 10,8 Hz), 1,67 (1H, m) , 1,451,22 (4H, m) a 0,91 (3H, brt, J=6,9 Hz).2.7 Hz), 3.16 (1H, dd, J = 13.4, 2.9 Hz), 2.09 (3H, s), 1.97 (1H, m),. 1.75 (1H, dd, J = 13.4, 10.8 Hz), 1.67 (1H, m), 1.451.22 (4H, m) and 0.91 (3H, brt, J = 6, 9 Hz).
Stupeň D: 4S-Benzyl-3-[2R-(IR (nebo S)-benzyloxyaminoethyl)hexanoyl]-oxazolidin-2-onStep D: 4S-Benzyl-3- [2R- (IR (or S) -benzyloxyaminoethyl) hexanoyl] -oxazolidin-2-one
5,31 gramu (12,5 milimolu) směsi oximů ze stupně C bylo rozpuštěno ve 30 mililitrech kyseliny octové, ochlazeno v ledové lázni a k roztoku bylo najednou přidáno 0,8 gramu (12,5 milimolu) kyanoborohydridu sodného. Po odeznění efervescence, k níž docházelo po dobu několika minut, bylo znovu najednou přidáno dalších 0,8 gramu (12,5 milimolu) kyanoborohydridu sodného. Reakční směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána přes noc. Kyselina octová byla odpařena při sníženém tlaku a zbytek byl azeotropicky kodestilován s toluenem. Zbylý olej byl rozpuštěn v ethylacetátu, promyt vodou, 1 molárním roztokem uhličitanu sodného a solankou, vysušen nad bezvodým síranem hořečnatým a přefiltrován. Filtrát byl odpařen a byl získán světle žlutý • · · ·5.31 grams (12.5 millimoles) of the oxime mixture from Step C was dissolved in 30 milliliters of acetic acid, cooled in an ice bath, and 0.8 grams (12.5 millimoles) of sodium cyanoborohydride was added in one portion. After effervescence had subsided for a few minutes, another 0.8 grams (12.5 millimoles) of sodium cyanoborohydride was added all at once. The reaction mixture was allowed to warm to room temperature and stirred overnight. The acetic acid was evaporated under reduced pressure and the residue azeotroped with toluene. The residual oil was dissolved in ethyl acetate, washed with water, 1 molar sodium carbonate solution and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and filtered. The filtrate was evaporated to give a pale yellow.
129 • · · * · · « · · · · · • · · · · · · • » · · · · olej, jehož přečištěním mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu s elucí hexanem, který obsahoval postupně od 10 do 25 procent ethylacetátu, bylo získáno 3,43 gramu (64 procent) produktu. XH NMR: 5(CDC13, směs α-diastereoizomerů), 7,36-7,17 (10H, m) , 5,80 (0, 45H, brs), 5,55 (0,55H, brd, J=8,9 Hz),129 oil, which was purified by flash chromatography on a silica gel column eluted with hexane containing from 10 to 25 percent ethyl acetate, in succession, to give an oil. 3.43 g (64 percent) of the product was obtained. 1 H NMR: δ (CDCl 3 , α-diastereoisomer mixture), 7.36-7.17 (10H, m), 5.80 (0.45H, brs), 5.55 (0.55H, brd, J) = 8.9 Hz),
4,72-4,59 (3H, m) , 4,20-4,05 (2H, m) , 3, 97 (0,45H, m) , 3,82 (0,55H, ' m) , 3,47-3,22 (2H, m) , 2,45 (1H, m) , 1, 90-1, 48 (2H,4.72-4.59 (3H, m), 4.20-4.05 (2H, m), 3.97 (0.45H, m), 3.82 (0.55H, m), 3 47-3.22 (2H, m); 2.45 (1H, m); 1.90-1.48 (2H, m);
m), 1,40-1,14 (7H, m) , 0,95-0,84 (3H, m) .m), 1.40-1.14 (7H, m), 0.95-0.84 (3H, m).
Stupeň E: N-[2R-(4S-Benzyl-2-oxo-oxazolidin-3-karbonyl)IR (nebo S)-methylhexyl]-N-benzyloxyformamidStep E: N- [2R- (4S-Benzyl-2-oxo-oxazolidine-3-carbonyl) IR (or S) -methylhexyl] -N-benzyloxyformamide
3,08 gramu (7,3 milimolu) 4S-benzyl-3-[2R-(IR (nebo, S)-benzyloxyaminoethyl)hexanoyl]-oxazolidin-2-onu bylo rozpuštěno v suchém tetrahydrofuranu (THF) a ponecháno reagovat s 1,60 gramu (10,9 milimolu) N-formylbenzotriazolu. reakční směs byla míchána 4 hodiny při teplotě místnosti a poté bylo při sníženém tlaku odstraněno rozpouštědlo. Zbylý olej byl rozdělen mezi 40 mililitrů dichlormethanu a 30 mililitrů 1 molárního roztoku hydroxidu sodného. Organická vrstva byla oddělena, promyta dalším podílem hydroxidu sodného, solankou, vysušena nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrována a odpařena. Přečištěním mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu s elucí hexanem, který obsahoval postupně od 20 do 50 procent ethylacetátu, bylo získáno 2,50 gramu (76 procent) požadovaného produktu ve formě pevné světle žluté látky. XH NMR: 5(CDC13, směs α-diastereoizomerů a rotamerů), 8,22 (1H, brm) , 7,54-7,13 (10H, m) , 5,22-3,92 (7H, brm) , 3,30 (1H, m) , 2,48 (1H, brm), 1,85-1,13 (9H, brm), 0,93-0,83 (3H, m) .3.08 g (7.3 mmol) of 4S-benzyl-3- [2R- (IR (or, S) -benzyloxyaminoethyl) hexanoyl] -oxazolidin-2-one was dissolved in dry tetrahydrofuran (THF) and allowed to react with 1 60 g (10.9 millimoles) of N-formylbenzotriazole. the reaction mixture was stirred at room temperature for 4 hours and then the solvent was removed under reduced pressure. The residual oil was partitioned between 40 ml of dichloromethane and 30 ml of 1 molar sodium hydroxide solution. The organic layer was separated, washed with more sodium hydroxide, brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and evaporated. Purification by silica gel flash column chromatography eluting with 20 to 50 percent ethyl acetate sequentially afforded 2.50 g (76 percent) of the desired product as a pale yellow solid. 1 H NMR: δ (CDCl 3 , mixture of α-diastereoisomers and rotamers), 8.22 (1H, brm), 7.54-7.13 (10H, m), 5.22-3.92 (7H, brm) 3.30 (1H, m), 2.48 (1H, brm), 1.85-1.13 (9H, brm), 0.93-0.83 (3H, m).
• · · · • * • « · ·• · · ·
130 .·’ f ’ • ·· · · · φ * · · • ♦ · · • » · · • · · · • * · ·130. f f f f f f f f f f
Stupeň F: Kyselina 2R-[1R (nebo S)-(benzyloxyformylamino)ethyl]-hexanováStep F: 2R- [1R (or S) - (Benzyloxyformylamino) ethyl] -hexanoic acid
1,50 gramu (3,31 milimolu) N- [2R- (4S-benzyl-2-oxo-oxazolidin3-karbonyl)-IR (nebo S)-methylhexyl]-N-benzyloxyformamidu bylo rozpuštěno v 25 mililitrech tetrahydrofuranu (THF) a 5 mililitrech vody a získaný roztok byl ochlazen v ledové lázni. Následně bylo k roztoku v rychlém sledu postupně přidáno 13,26 milimolu peroxidu vodíku ve formě 27 procentního (hmotn.) roztoku a 167 miligramů (3,98 milimolu) hydroxidu lithného. Reakční směs ' byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána další 3 hodiny. Roztok byl znovu ochlazen a bylo k němu přidáno 0,92 gramu (13,3 milimolu) dusitanu sodného. Po 10 minutách byla při sníženém tlaku odstraněna většina rozpouštědla a zbylá bílá pasta byla rozdělena mezí 25 mililitrů ethylacetátu a 30 mililitrů 1 molárního roztoku uhličitanu sodného. Organická vrstva byla promyta dalším podílem roztoku uhličitanu sodného a spojené vodné extrakty byly promyty ethylacetátem. Vodná vrstva byla ochlazena a okyselena 1 molární kyselinou chlorovodíkovou a dvakrát extrahována ethylacetátem. Spojené organické vrstvy byly promyty solankou, sušeny nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrovány. Bylo získáno 839 miligramů (86 procent) požadovaného produktu ve formě zeleného oleje. 3Η NMR: ó(CDCl3, směs α-diastereoizomerů a rotamerů), 8,40-7,64 (2H, brm),1.50 g (3.31 mmol) of N- [2R- (4S-benzyl-2-oxo-oxazolidine-3-carbonyl) -IR (or S) -methylhexyl] -N-benzyloxyformamide was dissolved in 25 ml of tetrahydrofuran (THF) and 5 ml of water and the resulting solution was cooled in an ice bath. Subsequently, 13.26 millimoles of hydrogen peroxide as a 27 percent by weight solution and 167 milligrams (3.98 millimoles) of lithium hydroxide were gradually added to the solution in rapid succession. The reaction mixture was allowed to warm to room temperature and stirred for an additional 3 hours. The solution was cooled again and 0.92 g (13.3 mmol) of sodium nitrite was added. After 10 minutes, most of the solvent was removed under reduced pressure and the remaining white paste was partitioned between 25 mL of ethyl acetate and 30 mL of 1 molar sodium carbonate solution. The organic layer was washed with an additional portion of sodium carbonate solution and the combined aqueous extracts were washed with ethyl acetate. The aqueous layer was cooled and acidified with 1 molar hydrochloric acid and extracted twice with ethyl acetate. The combined organic layers were washed with brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered. 839 mg (86%) of the desired product was obtained as a green oil. 3 Η NMR: δ (CDCl 3 , mixture of α-diastereoisomers and rotamers), 8.40-7.64 (2H, brm),
7,48-7,27 (5H, m) , 5,23-4,80 (2H, m) , 4,16 (1H, brm), 2,79 (1H, m), 1,67-1,47 (2H, m) , 1,47-1,18 (7H, m), 0,95-0,82 (3H,7.48-7.27 (5H, m), 5.23-4.80 (2H, m), 4.16 (1H, brm), 2.79 (1H, m), 1.67-1, 47 (2H, m), 1.47-1.18 (7H, m), 0.95-0.82 (3H,
m) .m).
•* »*»·• * »
131131
Stupeň G: (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R-[1R (nebo S)-(benzyloxyformylamino)ethyl]-hexanovéStep G: 2R- [1R (or S) - (Benzyloxyformylamino) ethyl] -hexanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
839 gramu (2,86 milimolu) kyseliny 2R-[1R (nebo S)-(benzyloxyformylamino)ethyl]-hexanové bylo spolu s 498 miligramy (3,15 milimolu) N,N-dimethylamídu terč. leucinu a s 658 miligramy (3,43 milimolu) hydrochloridu N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu (EDC) rozpuštěno v 15 mililitrech N,N-dimethylformamidu (DMF) a k roztoku bylo přidáno 60 miligramů (katalytické množství) l-hydroxy-7-aza-benzotriazolu (HOAt). Roztok byl několik dní ponechán míchat při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku a zbylý· olej byl rozdělen mezi ethylacetát a 75 jnililitrů 1 molární kyseliny chlorovodíkové. Organická vrstva byla postupně promyta 1 molární kyselinou chlorovodíkovou, 1 molárním roztokem uhličitanu sodného a solankou, vysušena nad bezvodým síranem hořečnatým a odpařena, čímž bylo získáno 1,08 gramu (82 procent) produktu ve formě žluté pěny. NMR: 5(CDCl3, směs α-diastereoizomerů a rotamerů) , 8,13 (1H, brm),839 g (2.86 mmol) of 2R- [1R (or S) - (benzyloxyformylamino) ethyl] -hexanoic acid together with 498 mg (3.15 mmol) of N, N-dimethylamide were targeted. leucine and with 658 mg (3.43 mmol) of N-ethyl-N '- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC) dissolved in 15 ml of N, N-dimethylformamide (DMF) and 60 mg (catalytic amount) of 1 was added to the solution. -hydroxy-7-aza-benzotriazole (HOAt). The solution was allowed to stir at room temperature for several days. The solvent was removed under reduced pressure and the residual oil was partitioned between ethyl acetate and 75 ml of 1 molar hydrochloric acid. The organic layer was washed sequentially with 1 molar hydrochloric acid, 1 molar sodium carbonate solution and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and evaporated to give 1.08 g (82 percent) of the product as a yellow foam. NMR: δ (CDCl 3, mixture of α-diastereoisomers and rotamers), 8.13 (1H, brm),
s) , 0,95 (5,4H, s)s), 0.95 (5.4H, s)
Stupeň H: (lS-Dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amid kyseliny 2R-[1R (nebo S)-(formylhydroxyamino)ethyl]-hexanovéStep H: 2R- [1R (or S) - (Formylhydroxyamino) ethyl] -hexanoic acid (1S-Dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) amide
200 miligramů (0,46 milimolu) (lS-dimethylkarbamoyl-2,2-dimethylpropyl)amidu kyseliny 2R-[1R (nebo S)-(benzyloxyformylamino) ethyl] -hexanové bylo rozpuštěno v 15 mililitrech methanolu a převedeno pod argonovou atmosféru. K roztoku byla »· ··*·200 mg (0.46 mmol) of 2R- [1R (or S) - (benzyloxyformylamino) ethyl] -hexanoic acid (1S-dimethylcarbamoyl-2,2-dimethylpropyl) -amide was dissolved in 15 ml of methanol and transferred under argon. The solution was »· ·· * ·
132132
Φ· ·· ·· > · Φ Φ Φ 1 » Φ Φ Φ Φ <Φ · · · Φ Φ Φ Φ Φ Φ Φ Φ 1
I ΦΦΦ Φ Φ ( > φ · · · « φφ φ ♦ φφ přidána suspenze 20 miligramů 10 procentního . palladia na aktivním uhlí v ethylacetátu a směs byla míchána tři hodiny v argonové atmosféře. Katalyzátor byl odstraněn filtrací a odpařením filtrátu bylo získáno 163 miligramů (kvantitativní výtěžek) produktu ve formě bezbarvého oleje. Získané dva diastereoizomerní produkty byly od sebe odděleny preparatívní vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii (HPLC).A suspension of 20 milligrams of 10 percent palladium on charcoal in ethyl acetate was added and the mixture was stirred under argon for three hours. The catalyst was removed by filtration and the filtrate was evaporated to give 163 milligrams ( quantitative yield of the product as a colorless oil The two diastereomeric products obtained were separated from each other by preparative high performance liquid chromatography (HPLC).
Díastereoížomer A (27 miligramů): 1H NMR: 6(CDC13, převážně jeden rotamer), 8,67 (0,9H, brs), 8,33 (O,1H, brs), 7,92 (1H, s) , 6,74 (O,1H, brm), 6,54 (0,9H, d, J=9,4 Hz), 4,93 (0,9H, d, J=9,4 Hz), 4,64 (O,1H, brm), 3,89 (1H, qd, J=6,6, 2,6 Hz),Diastereoisomer A (27 milligrams): 1 H NMR: δ (CDCl 3 , predominantly one rotamer), 8.67 (0.9H, brs), 8.33 (0, 1H, brs), 7.92 (1H, s) 6.74 (O, 1H, brm), 6.54 (0.9H, d, J = 9.4 Hz), 4.93 (0.9H, d, J = 9.4 Hz), 4 64 (0, 1H, brm), 3.89 (1H, qd, J = 6.6, 2.6 Hz),
3,16 (3H, s)·, 2,96 (3H, s) , 2,62-2,48 (1H, m) , 1,52-1,06 (6H, m) , 1,35 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,00 (9H, s), 0,82 (3H, t, J=6,9 Hz).3.16 (3H, s), 2.96 (3H, s), 2.62-2.48 (1H, m), 1.52-1.06 (6H, m), 1.35 (3H) d, J = 6.6 Hz), 1.00 (9H, s), 0.82 (3H, t, J = 6.9 Hz).
13C NMR: 5(CDC13) 173,0, 171, 3, 57,2, 54,4, 50,4, 38,4, 35,6, 13 C NMR: δ (CDCl 3 ) 173.0, 171, 3, 57.2, 54.4, 50.4, 38.4, 35.6,
29, 9, 29,1, 26,'6, 22,5, 17,2, 13,9.29, 9, 29.1, 26, 6, 22.5, 17.2, 13.9.
LRMS: 366 [M+Na], 342 [M-H].LRMS: 366 [M + Na], 342 [M-H] < - >.
Diastereoizomer B (42 miligramů): 1H NMR:Diastereoisomer B (42 mg): 1 H NMR:
rotamerů) , 9,15 (0,6H, s) , 8,60 (0,4H, brs),rotamers), 9.15 (0.6H, s), 8.60 (0.4H, brs),
7,84 (0,4H, s), 6,83 (0,6H, d, J=9,2 Hz), d(CDCl3, směs 8,42 (0,6H, s),7.84 (0.4H, s), 6.83 (0.6H, d, J = 9.2 Hz), d (CDCl 3 , 8.42 (0.6H, s),
6,55 (0,4H, d,6.55 (0.4H, d,
1,31 (1,8H, d,1.31 (1.8H, d,
0,85 (1,8H, t,0.85 (1.8H, t,
J=9,4 Hz), 4,91 (0,6H, d, J=9,2 Hz), 4,89 (0,4H, d, J=9,4 Hz), 4,69 (0,6H, qd, J=7,0, 4,3 Hz), 3,92 (0,4H, dq, J=9,l,J = 9.4 Hz), 4.91 (0.6H, d, J = 9.2 Hz), 4.89 (0.4H, d, J = 9.4 Hz), 4.69 (0, 6H, qd, J = 7.0, 4.3 Hz), 3.92 (0.4H, dq, J = 9.1,
6,8 Hz), 3,15 (3H, s) , 2,97 (1,8H, s) , 2,95 (1,2H, s) , 2,59 (0,4H, td, J=9,8, 4,3 Hz), 2,39 (0,6H, td, J=7,4, 4,3 Hz), 1, 92-1, 07 (6H, m) , 1,37 (1,2H, d, J=6,8 Hz)6.8 Hz), 3.15 (3H, s), 2.97 (1.8H, s), 2.95 (1.2H, s), 2.59 (0.4H, td, J = 9) Δ, 4.3 Hz), 2.39 (0.6H, td, J = 7.4, 4.3 Hz), 1.92-1.07 (6H, m), 1.37 (1, 2H, d, J = 6.8Hz)
J=7,0 Hz) 1,01 (5,4H, s), 0,96 (3,6H, s),J = 7.0 Hz) 1.01 (5.4H, s), 0.96 (3.6H, s),
J=7,2 Hz), 0,83 (1,2H, t, J=7,2 Hz).J = 7.2 Hz), 0.83 (1.2H, t, J = 7.2 Hz).
13C NMR: 5(CDC13, směs rotamerů) 175,7, 173,2, 171,3, 170,7, 13 C NMR: δ (CDCl 3 , mixture of rotamers) 175.7, 173.2, 171.3, 170.7,
56.7, 55,0, 54,4, 53,2, 50,8, 49,9, 38,3, 35,7, 35,6, 35,5,56.7, 55.0, 54.4, 53.2, 50.8, 49.9, 38.3, 35.7, 35.6, 35.5,
35,4, 30,3, 29,5, 29,3, 26,5, 26,4, 22,5, 22,4, 16,0, 15,4,35.4, 30.3, 29.5, 29.3, 26.5, 26.4, 22.5, 22.4, 16.0, 15.4,
13.8.13.8.
133 .·* ··*·133.
LRMS: 366 [M+Na], 342 [M-H].LRMS: 366 [M + Na], 342 [M-H] < - >.
Příklad 70Example 70
N-Cyklohexyl-2- { 2 - [ (formylhydroxyamino)methyl] -3fenylpropionylamino}-3,3-dimethylbutyramidN-Cyclohexyl-2- {2 - [(formylhydroxyamino) methyl] -3-phenylpropionylamino} -3,3-dimethylbutyramide
mililitr 1 molárního zásobního roztoku amoniaku v methanolu (1 milímol) byl smíchán ve varné trubici s 1 mililitrem 1 molárního zásobního roztoku trimethylacetaldehydu v methanolu (1 milimol) a směs byla ponechána stát 1 hodinu. Následně byl ke směsi postupně přidán 1 mililitr 1 molárního roztoku cykohexylisokyanidu v methanolu (1 milimol) a 2 mililitry 0,5 molárního roztoku kyseliny 2RS-[(benzyloxyformylamino)methyl]-hexanové v methanolu (1 milimol). Reakční směs byla míchána 2 dny při teplotě místnosti. Pomocí zařízení Savant Speedvac bylo odstraněno rozpouštědlo a reakční směs byla krystalizována ze směsi ethylacetát-hexan, čímž bylo získáno 93 miligramů (18 procent) 2-{2-[(benzyloxyformylamino)methyl]-3-fenylpropionylamino}-N-cyklohexyl-3,3-dimethylbutyramidu ve formě pevné bílé látky, z něhož byla hydrogenolýzou katalyzovanou 10 procentním palladiem na aktivním uhlí ve směsi methanol-ethylacetát odštěpena chránícímilliliter of a 1 molar ammonia stock solution in methanol (1 milliliter) was mixed in a boiling tube with 1 milliliter of a 1 molar stock solution of trimethylacetaldehyde in methanol (1 millimole) and allowed to stand for 1 hour. Subsequently, 1 ml of a 1 molar solution of cycohexyl isocyanide in methanol (1 ml) and 2 ml of a 0.5 molar solution of 2RS - [(benzyloxyformylamino) methyl] -hexanoic acid in methanol (1 ml) were added sequentially. The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 days. The solvent was removed by Savant Speedvac and the reaction mixture was crystallized from ethyl acetate-hexane to give 93 mg (18 percent) of 2- {2 - [(benzyloxyformylamino) methyl] -3-phenylpropionylamino} -N-cyclohexyl-3, 3-dimethylbutyramide as a white solid, from which 10% palladium-on-carbon-catalyzed hydrogenolysis was cleaved off to protect the methanol-ethyl acetate mixture
9999 • * 09999 • * 0
134 ·’ ·' ’134 · ´ · '’
00
000 0 0 skupina za vzniku 75 miligramů (99 produktu ve formě pevné bílé látky.000.0 0 group to give 75 mg (99 product as a white solid).
LRMS: 440 [M+Na], 418 [M+H], 416 [M-H].LRMS: 440 [M + H], 418 [M + H], 416 [M-H].
Sloučeniny v příkladech 71 až 77 bylyThe compounds in Examples 71-77 were
99 0« 99100 0 «100
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
9 · 9 9 9 99 · 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 99 9 9 9 9
999 99 99 99 procent) požadovaného připraveny obdobně ke shora popsané č.tyřsložkové Ugiho kondenzaci. Všechny produkty byly podle stanovení vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) získány ve více než 85 procentní čistotě.999 99 99 99 percent) of the desired preparation prepared similarly to the above described four-component Ugi condensation. All products were obtained in more than 85% purity as determined by high performance liquid chromatography (HPLC).
Příklad 71Example 71
Cyklohexylamid kyseliny 2-{2-[(formylhydroxyamino)methyl]-3fenylpropionylamino}-3,3-dimethylhexanové2- {2 - [(Formylhydroxyamino) methyl] -3-phenylpropionylamino} -3,3-dimethylhexanoic acid cyclohexylamide
φφ φφ φφφφφφ φφ φφφφ
135 • φ φ •135 • φ φ •
φ φφφφ φ φφ φφφ φφφ φφφ • φ φ φφ φφ φ · 9 9 * Φ • Φφ φ φ φ • • • • • • • • • · · ·
Příklad 72Example 72
Fenylmethylamid kyseliny 2-{2-[(formylhydroxyamino)methyl]-3fenylpropionylamino}-3,3-dimethylhexanové2- {2 - [(formylhydroxyamino) methyl] -3-phenylpropionylamino} -3,3-dimethylhexanoic acid phenylmethylamide
Bylo získáno 77 miligramů pevné bílé látky. 1H NMR: δ (CD3OD) , 7,82 (1H, s), 7,35-7,11 (10H, m), 4,38-4,19 (3H, m), 3,85 (1H, m) , 3,52 (1H, m), 2, 97-2, 63 (3H, m) , 1,37-1,11 (4H, m), 0,930,78 (9H, m).77 mg of a white solid were obtained. 1 H NMR: δ (CD 3 OD), 7.82 (1H, s), 7.35-7.11 (10H, m), 4.38-4.19 (3H, m), 3.85 ( 1H, m), 3.52 (1H, m), 2.97-2.63 (3H, m), 1.37-1.11 (4H, m), 0.930.78 (9H, m).
LRMS: 476 [M+Na], 454 [M+H].LRMS: 476 [M + Na], 454 [M + H] < + >.
Příklad 73 terč. Butylamid kyseliny 2-{2-[(formylhydroxyamino)methyl]-3fenylpropionylamino}— 3,3-dimethylmáselnéExample 73 2- {2 - [(formylhydroxyamino) methyl] -3-phenylpropionylamino} -3,3-dimethylbutyric acid butylamide
řír
HH
O ·«« ·About · «« ·
136 • · · '·136 • · · · ·
4 94 9
44
44444 4 · · · · * φ Φ φ Φ · Φ φ Φ Φ φ · · ·44444 4 · · · · · Φ · · · · · · ·
Φ Φ ΦΦΦΦ ΦΦ Φ · Φ ΦΦ Φ ΦΦΦΦ ΦΦ Φ Φ
Bylo získáno. 47 miligramů pevné bílé látky. TH NMR: 5(CD3OD), 7,82 (1H, s), 7,45 (1H, m) , 7,30-7,09 (5H, m) , 4,12 (1H, d, J=7,2 Hz), 3,89 (1H, m), 3,41 (1H, m), 3,15 (1H, m) , 2,97-2,68 (2H, m), 1,28 (9H, s) .It was obtained. 47 mg of a white solid. 1 H NMR: δ (CD 3 OD), 7.82 (1H, s), 7.45 (1H, m), 7.30-7.09 (5H, m), 4.12 (1H, d, J = 7.2 Hz), 3.89 (1H, m), 3.41 (1H, m), 3.15 (1H, m), 2.97-2.68 (2H, m), 1, 28 (9 H, s).
LRMS: 414 [M+Na], 392 [M+H], 390 [M-H],LRMS: 414 [M + Na], 392 [M + H], 390 [M-H] < - >
Příklad 74 (1,1,3,3-Tetramethyl)butyramid kyseliny 2-{2-[(formylhydroxyamino) methyl]-3-fenylpropionylamino}-3,3-dimethylhexanovéExample 74 2- {2 - [(Formylhydroxyamino) methyl] -3-phenylpropionylamino} -3,3-dimethylhexanoic acid (1,1,3,3-tetramethyl) butyramide
Bylo získáno 65 miligramů pevné bílé látky. 1H NMR: 7,79 (1H, s), 7,42-7,21 (1H, m), 7,20-7,10 (5H, m), d, J=9,l Hz), 3,86 (1H, m), 3,51 (1H, m), 3,23 (1H,65 mg of a white solid was obtained. 1 H NMR: 7.79 (1H, s), 7.42-7.21 (1H, m), 7.20-7.10 (5H, m), d, J = 9.1 Hz), 3 86 (1H, m); 3.51 (1H, m); 3.23 (1H, m,
2,56 (2H, m), 1,50-1,15 (12H, m) , 1,02-0,83 (18H, m) . LRMS: 498 [M+Na], 476 [M+H], 474 [M-H].2.56 (2H, m), 1.50-1.15 (12H, m), 1.02-0.83 (18H, m). LRMS: 498 [M + Na] +, 476 [M + H] +, 474 [M-H] +.
δ (CD3OD) ,δ (CD 3 OD)
4,23 (1H,4.23 (1 H,
m), 3,00137 • 00m), 3.00137 • 00
0 0 0 0 0 0 0 00 0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 00 0 0 0
0 0 «0 ·0 0 «0 ·
0 0 0 00 0 0 0
Příklad 75Example 75
N- (Cyklohexyl-cyklohexylkarbamoylmethyl) -2- [ (formylhydroxyamino )methyl]-3-fenylpropionamidN- (Cyclohexyl-cyclohexylcarbamoylmethyl) -2 - [(formylhydroxyamino) methyl] -3-phenylpropionamide
Bylo získáno 98 miligramů pevné bílé 7,38-7,08 (5H, m) , 4,01 (1H, m) , 3,8198 mg of white solid 7.38-7.08 (5H, m), 4.01 (1H, m), 3.81 were obtained.
m) , 3,15 (1H, m) , 2,98-2,65 (2H, m)m), 3.15 (1 H, m), 2.98-2.65 (2 H, m)
1,45-0,83 (11H, brm).1.45-0.83 (11 H, brm).
LRMS: 466 [M+Na], 444 [M+H], 442 [M-H] látky. XH NMR: δ (CD3OD) , (1H, m), 3,68-3,35 (2H, , 1,88-1,49 (10H, brm),LRMS: 466 [M + Na], 444 [M + H], 442 [MH]. 1 H NMR: δ (CD 3 OD), (1H, m), 3.68-3.35 (2H, 1.88-1.49 (10H, brm)),
Příklad 76Example 76
N-(Cyklohexyl-fenylmethylkarbamoylmethyl) -2-[(formylhydroxyamino) methyl]-3-fenylpropionamidN- (Cyclohexylphenylmethylcarbamoylmethyl) -2 - [(formylhydroxyamino) methyl] -3-phenylpropionamide
H φ ·H φ ·
138 .·*138. *
ΦΦΦΦ • · φφφφ •Φ φφ φφ φ φ φφφφ φ φ · φ φ φ φ φφφ · φ · φ φ φφφφ φφ φφ φφΦΦΦΦ · φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ
Bylo získáno 34 miligramů pevné bílé látky. NMR: 5(CD3OD), 7,35-7,10 (10H, m) , 4,44-4,23 (2H, m) , 4,05 (1H, m) , 3,87-3,35 (2H, m) , 3,09 (1H, m) , 2,85-2,72 (2H, m) , 1,65-1,46 (4H, m) ,34 mg of a white solid were obtained. NMR: δ (CD 3 OD), 7.35-7.10 (10H, m), 4.44-4.23 (2H, m), 4.05 (1H, m), 3.87-3, 35 (2H, m), 3.09 (1H, m), 2.85-2.72 (2H, m), 1.65-1.46 (4H, m),
1,38-0,93 (5H, brm), 0,75-0,51 (2H, brm).1.38-0.93 (5H, brm), 0.75-0.51 (2H, brm).
LRMS: 474 [M+Na], 450 [M-H].LRMS: 474 [M + Na], 450 [M-H] < - >.
Příklad 77Example 77
N-[(Cyklohexyl-1,1,3,3-tetramethylbutylkarbamoyl)-methyl]-2[(formylhydroxyamino)methyl]-3-fenylpropionamidN - [(Cyclohexyl-1,1,3,3-tetramethylbutylcarbamoyl) -methyl] -2 - [(formylhydroxyamino) methyl] -3-phenylpropionamide
139 ·· 99 ·· • · 9 9 9 9139 ····· · · 9 9 9 9
9 9 9 9 99
9 9 · · · ♦ • · · · 9 99 9
99 99 9999 99 99
Biologický příklad ABiological Example
Demonstrace antibakteríálního účinku sloučeniny 1 (z příkladu 1) a sloučeniny 2 (z přikladu β) .Demonstration of the antibacterial effect of compound 1 (from Example 1) and compound 2 (from Example β).
a) .a).
Minimální inhibiční koncentrace (MIC) inhibitorů kmene E coli DH5a (Genotyp: F-<ř80d/acZAM15 (JacIZYA-argF) U169 deoR recAl endAl hsdRll (rf, mf}phoA supE44Á ~ thi-1 gyrA96 reiAl) získaného od společnosti GibcoBRL Life Technologies, Enterobacter cloacae (American Type Culture Collection číslo 13047), Klebsiella pneumoniae (American Type Culture Collection číslo 13883) nebo Staphylococcus capitis (American Type Culture Collection číslo 35661) byly stanoveny podle níže popsaného postupu. Byly připraveny zásobní roztoky testovaných sloučenin (sloučeniny 1 a 2 z příkladu 1, respektive 2 (v obou případech se jednalo o izomer A)) a tří standardních laboratorních antibiotik, kterými byly karbenicilin (Sigma, katalogové číslo C3416), kanamycin (Sigma, katalogové číslo K4000) ' a chloramfenikol (Sigma, katalogové číslo C1919), přičemž tyto zásobní roztoky byly připraveny rozpuštěním jednotlivých sloučenin v dimethylsulfoxidu a jejich koncentrace byla 10 milimolů/litr. Pro stanovení minimální inhibiční koncentrace bylo použity dvojnásobně zředěné roztoky v živném médiu 2xYT (které obsahovalo 16 gramů/litr typtonu, 10 gramů/litr kvasničného extraktu, 5 gramů/litr chloridu sodného a které bylo získáno od společnosti BIO 101 inc, 1070 Joshua Way, Vista, CA92083, USA), takže bylo získáno 0,05 mililitru média obsahujícího danou sloučeninu/jímku. Inokula byla připravena z kultur kultivovaných přes noc při teplotě 37 °C v živném médiu 2xYT. Hustoty buněk bylyMinimum Inhibitory Concentration (MIC) of inhibitors of strain E coli DH5α (Genotype: F- <ř80d / acZAM15 (JacIZYA-argF) U169 deoR recAl endAl hsdRll (rf, mf} phoA supE44A-thi-1 gyrA96 reiAl) obtained from GibcoBRL Life Technologies Enterobacter cloacae (American Type Culture Collection No. 13047), Klebsiella pneumoniae (American Type Culture Collection No. 13883), or Staphylococcus capitis (American Type Culture Collection No. 35661) were determined according to the procedure described below. 2 of Example 1 and 2 (both of them isomer A)) and three standard laboratory antibiotics, namely carbenicillin (Sigma, catalog number C3416), kanamycin (Sigma, catalog number K4000) and chloramphenicol (Sigma, catalog no. No. C1919), these stock solutions were prepared by dissolving the individual compounds in dimethylsulfoxide and concentrating them To determine the minimum inhibitory concentration, doubly diluted solutions in 2xYT nutrient medium (containing 16 grams / liter of typtone, 10 grams / liter of yeast extract, 5 grams / liter of sodium chloride) were obtained from BIO. 101 inc, 1070 Joshua Way, Vista, CA92083, USA) to yield 0.05 milliliters of media containing the compound / well. The inoculum was prepared from overnight cultures at 37 ° C in 2xYT nutrient medium. Cell densities were
0» »0000 »» 000
140140
0« ·· • · · 0 * 0 • · · 0 0 0 • 9 9 9 9 9 · · · · 0 00 0 0 0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 vztahovány k absorbanci při vlnové délce 660 nanometrů (A.6eo) =0,1 ; přípravky se standardizovanou optickou hustotou byly zředěny v poměru 1:1000 živným médiem 2xYT; a každá jímka byla inokulována 0,05 mililitru zředěných bakterií. Mikrotitrová plata byla inkubována při teplotě 37 °C po dobu 18 hodin ve zvlhčovaném inkubátoru. Minimální inhibiční koncentrace (MIC) (v mikromolech/litr)byla zaznamenávána jako nejnižší koncentrace léčiva, při které docházelo k viditelné inhibici růstu.0 0 0 0 0 related to absorbance at 660 nanometers (A.6eo) = 0.1; standardized optical density formulations were diluted 1: 1000 with 2xYT nutrient medium; and each well was inoculated with 0.05 ml of diluted bacteria. The microtiter plates were incubated at 37 ° C for 18 hours in a humidified incubator. The minimum inhibitory concentration (MIC) (in micromoles / liter) was recorded as the lowest drug concentration at which there was a visible inhibition of growth.
Tabulka 1Table 1
b) .b).
Minimální inhibiční koncentrace (MIC) inhibitorů kmene Mycobacterium ranae (American Type Culture Collection číslo 110), Pseudomonas aeruginosa (American Type Culture Collection číslo 9027), Klebsiella pneumoniae (American Type Culture Collection číslo 10031), Helicobacter pylori (American Type Culture Collection číslo 43504), klinických izolátů Staphylococcus pneumoniae, rezistentního k aminoglykosidům aMinimum Inhibitory Concentration (MIC) Inhibitors of Mycobacterium ranae (American Type Culture Collection No. 110), Pseudomonas aeruginosa (American Type Culture Collection No. 9027), Klebsiella pneumoniae (American Type Culture Collection No. 10031), Helicobacter pylori (American Type Culture Collection No. 43504) ), aminoglycoside - resistant Staphylococcus pneumoniae clinical isolates and
• 0 • 0• 0 • 0
00
00
0 ·0 ·
I 0I 0
141 • 00 erythromycinu, a Staphylococcus aureus (American Type Culture Collection číslo 33591), rezistentního k methicilinu (MR), byly stanoveny podle níže popsaného postupu. Byly připraveny zásobní roztoky testovaných sloučenin (sloučeniny 1 a 2 z příkladu 1, respektive 2 (v obou případech se jednalo o ízomer A)) a tří standardních laboratorních antibiotik, kterými byly gentamycin (G) , ampicilin (A) a erythromycin (E), přičemž tyto zásobní .roztoky byly připraveny rozpuštěním jednotlivých sloučenin v dimethylsulfoxidu a jejich koncentrace byla 10 miligramů/mililitr. Při stanovení byl použit stejný způsob jako v příkladu a) s tím, že média Mycobacterium ranae bylo 'použito se živným médiem Brain Heart Infasion (vyráběným společností GIBCO) a inkubováno 48 hodin při teplotě 37 °C, Staphylococcus aureus (MR), Klebsiella pneumoniae a Pseudomonas aeruginosa byly použity se živným médiem Nutrient Broth (vyráběným společností DIFCO) a inkubovány 20 hodin při teplotě 37 °C, Helicobacter pylori byl použit s agarovou bází Columbia (vyráběnou společností OXOID) , která obsahovala 7 procent ovčí krve a inkubován 72 hodin při teplotě 35 °C, Streptococcus pneumoniae byl požit s tryptickým sójovým živným médiem (vyráběným společností DIFCO), které obsahovalo 7 procent telecího séra, a inkubován 48 hodin při teplotě 37 °C. Minimální ínhibiční koncentrace (MIC) (v mikrogramech/milílítr) byla zaznamenávána jako nejnižší koncentrace léčiva, při které docházelo k viditelné inhibici růstu.The erythromycin, and methicillin (MR) resistant Staphylococcus aureus (American Type Culture Collection No. 33591) were determined according to the procedure described below. Stock solutions of the test compounds (compounds 1 and 2 of Examples 1 and 2, respectively, (both isomer A)) and three standard laboratory antibiotics, gentamycin (G), ampicillin (A) and erythromycin (E), were prepared. the stock solutions were prepared by dissolving the individual compounds in dimethylsulfoxide at a concentration of 10 mg / ml. The assay was performed in the same manner as in Example a) except that Mycobacterium ranae media was used with Brain Heart Infasion (manufactured by GIBCO) and incubated for 48 hours at 37 ° C, Staphylococcus aureus (MR), Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa were used with Nutrient Broth (manufactured by DIFCO) and incubated for 20 hours at 37 ° C, Helicobacter pylori was used with Columbia agar base (manufactured by OXOID) containing 7 percent sheep blood and incubated for 72 hours at At 35 ° C, Streptococcus pneumoniae was ingested with tryptic soy nutrient medium (manufactured by DIFCO) containing 7 percent calf serum and incubated for 48 hours at 37 ° C. The minimum inhibitory concentration (MIC) (in micrograms / milliliter) was recorded as the lowest drug concentration at which there was a visible growth inhibition.
Pozitivní kontrolní vehikulum (1 procentní dimethylsulfoxid; bez testovaného činidla) způsobovalo růst všech mikroorganismů.Positive control vehicle (1% dimethylsulfoxide; no test reagent) caused growth of all microorganisms.
142142
4· ···· ···· « 4· 44 ·4 ·· · 4 « 4 4 44 · ········ · 4 · 44 · 4 ·· · 4 «4 4 4
4 4 · 4 4 44 4 4
4 4 4 4 4 4 4 • 44 4 · 4 4 • 4« 44 44 444 4 4 4 4 4 4 • 44 4 · 4 4 • 4
Při negativním slepém pokusu (s vyloučením mikroorganismů; +testovacího činidla) nebyl pozorován růst mikroorganismů.In a negative blank (no microorganisms; + test reagent) no growth of microorganisms was observed.
Tabulka 2Table 2
nd = nestanovenond = not specified
Při dalším experimentu byla stanovována minimální inhibiční koncentrace sloučeniny 1 a produktu připraveného v příkladu </3 (sloučeniny 3) proti grampozitivním a gramnegativním bakteriím, přičemž byla použita metoda Microdilution Broth Method podle standardu schváleného National Committee for Clinical Laboratory Standards (Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically-4. vydání ISBN 1-56238-309-4)In another experiment, the minimum inhibitory concentration of Compound 1 and the product prepared in Example </ 3 (Compound 3) against Gram-positive and Gram-negative bacteria was determined using the Microdilution Broth Method according to a standard approved by the National Committee for Clinical Laboratory Standards (Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility). Tests for Bacteria That Grow Aerobically 4th edition ISBN 1-56238-309-4)
143'143 '
Aktivita proti grampozítívním bakteriímActivity against Gram-positive bacteria
• · · · • ·• · · · ·
144144
Aktivita proti gramnegativním bakteriímActivity against Gram-negative bacteria
Aktivity sloučeniny 3 a produktu z příkladu 14 (sloučeniny 4) proti multírezistentnímu klinickému izolátu Enterococcus faecalis stanovené způsobem používaným pro okamžité zpracování výsledků jsou uvedeny v následující tabulce, která obsahuje rovněž srovnávací údaje zjištěné stejným způsobem pro známá antibakteriální činidla:The activities of compound 3 and the product of Example 14 (compound 4) against the multidrug resistant clinical isolate Enterococcus faecalis determined by the method used for the immediate processing of the results are shown in the following table, which also contains comparative data found in the same manner for known antibacterial agents:
• · « · • ·• · «·
Enterococcus faecalis:Enterococcus faecalis:
Aktivita proti multírezístentnímu klinickému izolátu Enterococcus faecalis - dokončení:Activity against multi-site clinical isolate Enterococcus faecalis - completion:
146/146 /
Biologický příklad BBiological Example
i)and)
Klonování genu Escherichia coli PDFEscherichia coli gene cloning PDF
Gen E. coli PDF byl klonován v pET24a(+) (označeném jako pET24-PDF) a byl použit pro přenos buněk BL21 DE3 získaných od společnosti Novagen lne. (Madison, Wisconsin, USA) . Klony byly rozděleny při 37 °C na agarová plata YT (která obsahovala 8 gramů/litr typtonu, 5 gramů/litr kvasničného extraktu, 5 gramů/litr chloridu sodného, 15 gramů/litr agaru) a byla obohacena 30 míkrogramy/mililitr kanamycinu.The E. coli PDF gene was cloned in pET24a (+) (designated pET24-PDF) and was used to transfer BL21 DE3 cells obtained from Novagen Inc. (Madison, Wisconsin, USA). The clones were split at 37 ° C on YT agar plates (which contained 8 grams / liter of typtone, 5 grams / liter of yeast extract, 5 grams / liter of sodium chloride, 15 grams / liter of agar) and enriched with 30 µg / ml kanamycin.
ii)(ii)
Exprese PDF mililitrů kultury buněk BL21 DE3 hostících pET24-PDF, které byly kultivovány přesExpression of PDF milliliters of culture of BL21 DE3 cells hosting pET24-PDF that were cultured via
500 mililitrů 16 gramů/litr 5 gramů/litr gramů/mililitr naočkování obsahovalo extraktu, 30 mikroinkubována noc, bylo použito pro živného média 2xYT (které typtonu, 10 gramů/litr kvasničného chloridu sodného) obsahujícího kanamycinu. Uvedená směs byla třepáním ve dvoulitrové zakryté lahvi při teplotě 37 °C do dosažení optické hustoty OD60oO,6. Poté byla kultura indukována přidáním isopropyl-p-D-thiogalaktopyranosy (IPTG), jejíž výsledná koncentrace v médiu byla 1,0 milimol/litr. Indukce byla ponechána probíhat další 3 hodiny při teplotě 37 °C, buňky byly izolovány odstředěním a buněčné pelety byly promyty 250 mililitry solného roztoku pufrovaného fosforečnanem (PBS) a skladovány při teplotě -70 °C.500 milliliters 16 grams / liter 5 grams / liter grams / milliliter inoculation contained extract, 30 microincubated overnight, was used for 2xYT nutrient medium (which typtone, 10 grams / liter yeast sodium chloride) containing kanamycin. Said mixture was shaken in a two liter covered bottle at 37 ° C until an optical density of OD 60 Oo, the sixth Then, the culture was induced by the addition of isopropyl-β-D-thiogalactopyranose (IPTG), the final concentration of which in the medium was 1.0 millimol / liter. The induction was allowed to proceed for a further 3 hours at 37 ° C, the cells were collected by centrifugation, and the cell pellets were washed with 250 ml phosphate buffered saline (PBS) and stored at -70 ° C.
• · • ·· ·• · • ·· ·
147147
iii) Příprava rozpustné proteinové frakceiii) Preparation of soluble protein fraction
Buňky z jednolitrové exprese byly znovu suspendovány v 2 x 25 mililitrech ledově studeného solného roztoku pufrovaného fosforečnananem. Buněčná suspenze byla sonikována na ledu pomocí zařízení MSE Soniprep 150 opatřeného médiovou sondou, při vlnové délce 20-25 mikrometrů v 6 x 20 sekundových pulzech. Výsledná suspenze byla následně vyčeřena odstředěním při 20 000 xg po dobu 15 minut. Vyčeřená kapalina byla následně použita pro další čištění uvedeného enzymu.Cells from one liter expression were resuspended in 2 x 25 ml of ice-cold phosphate buffered saline. The cell suspension was sonicated on ice using a MSE Soniprep 150 equipped with a media probe at a wavelength of 20-25 micrometers in 6 x 20 second pulses. The resulting suspension was then clarified by centrifugation at 20,000 xg for 15 minutes. The clarified liquid was then used to further purify said enzyme.
iv) Čištění PDFiv) PDF cleaning
Lyzát E. coli z 1 litrové kultivace v solném roztoku pufrovaného fosforečnananem (PBS) byl přidán k '2 molárnímu roztoku síranu amonného. Fenyl sefarosová kolona o objemu 15 mililitrů byla ekvilibrována pří teplotě 4 °C směsí PBS/2 molární roztok síranu amonného a na kolonu byl nanesen uvedený lyzát, který byl následně promyt pufrem.použitým pro ekvilibraci kolony. Kolona byla vymývána uvedenou směsí, ve které klesala koncentrace síranu amonného z 2 molů/litr na 0 molů/litr, přičemž celkový objem směsi použité pro vymývání činil desetinásobek objemu kolony. Byly odebírány frakce o objemu 5 mililitrů, které byly analyzovány pomocí SDS-PAGE. Frakce obsahující jako hlavní složku 20kDa PDF byly slity dohromady a zahuštěny pomocí membrány 3kDa na objem 5 mililitrů. Tato frakce byla následně nanesena na kolonu Superdex 75 (chromatografické dělení podle velikosti molekul) ekvilibrovanou PBS. Koncentrovaný roztok PDF byl vymýván rychlostí 1 mililitr/minutu při teplotě 4 °C a byly odebírány 5 mililitrové frakce, které byly analyzovány pomocí SDS-PAGE.E. coli lysate from 1 liter culture in phosphate buffered saline (PBS) was added to a 2 molar ammonium sulfate solution. A 15 ml phenyl phenyl sepharose column was equilibrated at 4 ° C with PBS / 2M ammonium sulfate and the column was loaded with the lysate, which was then washed with the buffer used to equilibrate the column. The column was eluted with said mixture, in which the concentration of ammonium sulfate decreased from 2 moles / liter to 0 moles / liter, the total volume of the mixture used for elution being ten times the volume of the column. Fractions of 5 ml were collected and analyzed by SDS-PAGE. Fractions containing 20kDa PDF as the major component were pooled and concentrated using a 3kDa membrane to a volume of 5 milliliters. This fraction was then loaded onto a Superdex 75 (molecular size chromatographic) column equilibrated with PBS. The concentrated PDF solution was eluted at 1 ml / min at 4 ° C and 5 ml fractions were collected and analyzed by SDS-PAGE.
• ·· · • · • · · 0 * ·• ·· · 0 · ·
0 0 · · ·0 0 · · ·
0 0 0 0 0 00 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 • 0 0 0 ·00 0 0 0 0 • 0 0 0 · 0
Nejčistší frakce byly opět slity dohromady a skladovány při teplotě -70 °C.The purest fractions were pooled again and stored at -70 ° C.
(v) Testy PDF in vitro(v) PDF in vitro tests
Test byl prováděn v jediném 96 jímkovém platu, přičemž výsledná směs, jejíž objem byl 100 mikrolitrů, obsahovala:The test was performed in a single 96 well plate, the resulting mixture having a volume of 100 microliters containing:
mikrolitrů PDF (4 mikrolitry/mililitr) mikrolitrů směsi zahrnující 100 milimolární roztok Hepes o pH 7,0 + 1 molární roztok chloridu draselného + 0,05 % roztok Brij mikrolitrů sériově naředěné testované sloučeniny ve 20 procentním dimethylsulfoxidu (DMSO) mikrolitrů formyl-Met-Ala-Ser (8 mikromolů/litr)microliters PDF (4 microliters / milliliter) microliters of a mixture comprising 100 millimolar Hepes pH 7.0 + 1 molar potassium chloride solution + 0.05% Brij solution of microliters of serially diluted test compound in 20 percent dimethylsulfoxide (DMSO) microliters formyl-Met- Ala-Ser (8 micromoles / liter)
Doba inkubace činila 30 minut při teplotě 37 °C. Volná aminoskupina deformylovaného produktu (kterým byl Met-Ala-Ser) byla detekována fluorescaminem, tak že ke směsi bylo přidáno:The incubation time was 30 minutes at 37 ° C. The free amino group of the deformylated product (which was Met-Ala-Ser) was detected with fluorescamine by adding to the mixture:
mikrolitrů 0,2 molárního borátu o pH 9,5 50 mikrolitrů fluorescaminu (ve formě roztoku o koncentraci 150 mikrogramů/mililitr v suchém dioxanu) .microliters of 0.2 molar borate, pH 9.5, 50 microliters of fluorescamine (in the form of a solution of 150 microgram / ml in dry dioxane).
Fluorescence byla kvantifikována na snímači plata SLT Fluorstar při excitační vlnové délce 390 nanometrů a emisní vlnové délce 485 nanometrů. Standardními porovnávacími reakcemi byla reakce bez inhibitoru, kterou byla získána hodnota odpovídající nulové inhibici a reakce bez přítomnosti enzymu a inhibitoru, kterou byla získána hodnota odpovídajícíFluorescence was quantified on an SLT Fluorstar plate reader at an excitation wavelength of 390 nanometers and an emission wavelength of 485 nanometers. The standard comparative reactions were an inhibitor-free reaction to obtain a value corresponding to zero inhibition and a reaction in the absence of enzyme and an inhibitor to a value corresponding to
99
100 procentní inhibici. Data byla analyzována převodem jednotek fluorescence na procenta inhibice a ze zjištěných údajů byl sestaven graf závislosti procenta inhibice na koncentraci. Data byla dosazena do sigmoidní rovnice y = A+( (B-A) / (1+( (C/x) D) ) ) kde100 percent inhibition. Data were analyzed by converting fluorescence units to percent inhibition and a plot of percent inhibition versus concentration was constructed. Data were substituted into sigmoid equation y = A + ((BA) / (1+ ((C / x) D ))) where
A je hodnota odpovídající nulové inhibici,A is the value corresponding to zero inhibition,
B je hodnota odpovídající 100 procentní inhibici aB is a value corresponding to 100 percent inhibition of a
C je hodnota IC50C is the IC 50 value
D je směrniceD is the Directive
Hodnota IC50 je koncentrace inhibitoru (v nanomolech/litr) potřebná pro snížení aktivity enzymu na 50 procent.The IC 50 value is the concentration of inhibitor (in nanomoles / liter) required to reduce the enzyme activity to 50 percent.
Bylo zjištěno, že sloučeniny podle předmětného vynálezu inhibují in vitro bakteriální PDF. Dále bylo zjištěno, že aktinonin (Sigma, katalogové číslo A-6671) rovněž inhibuje ín vitro bakteriální PDF.The compounds of the present invention have been found to inhibit bacterial PDF in vitro. Furthermore, it has been found that actinonin (Sigma, Catalog Number A-6671) also inhibits bacterial PDF in vitro.
Biologický příklad CBiological Example C
Demonstrace, že sloučenina 2 inhibuje PDF in vivoDemonstration that compound 2 inhibits PDF in vivo
Blokování transformylační reakce tRNAi-Met je příčinou rezistence ke sloučenině 2 (diasteromeru/izomeru A)Blocking of the tRNAi-Met transformylation reaction causes resistance to compound 2 (diasteromer / isomer A)
Trimethoprim specificky inhibuje reduktasu dihydrofolátu, čímž potlačuje všechny tetrahydrofolátové (THF) deriváty, včetně formyltetrahydrofolátu (fTHF), který je substrátem • ·· ·Trimethoprim specifically inhibits dihydrofolate reductase, thereby suppressing all tetrahydrofolate (THF) derivatives, including formyltetrahydrofolate (fTHF), which is a substrate • ·· ·
150,* ♦ t * • · · • · · · • · · methionyl-tRNA formyltransferasy (EC 2.1.29). Pokud se do bohatého média obohaceného o thimidin, dodávají z vnějšku všechny nezbytné metabolity, jejichž biosyntéza zahrnuje tetrahydrofolátové (THF) deriváty, jako jsou například pantothenát, methionin, glycin, purinové nukleotidy a thymidin, ve formě prekurzorových sloučenin, potom růstem bakterií v tomto (0,3 milimolu/litr) bohatém médiu obohaceném o thymidin a trimethoprim (100 mikrogramů/mililitr) může docházet k syntéze všech chemických složek normálních >iz publikace Baumstark a 129:457-471, 1971). Namísto buněk s výjimkou f-Met-tRNAi spolupracovníci J. Bacteriol. f-Met-tRNAi ' se do syntézy zapojuje Met-tRNAi, což vede k vytvoření polypeptidu neobsahujících formylovou skupinu na jejich N-koncích, a to nezávisle na působení deformylasy. Jak bylo předpokládáno, bylo zjištěno, že buňky DH5a kultivované v médiu LB (které obsahovalo 10 gramů/litr typtonu, 5 gramů/litr kvasničného extraktu, 10 gramů/litr chloridu sodného a jehož pH bylo 7,5) obohaceném o trimethoprim a thymidin, jsou rezistentní ke sloučenině 2 (diastereoizomeru A) . Prokázáním, že buňky, ve kterých dochází k normálnímu deformylačnímu procesu na exprimovaných proteinech, jsou inhibovány sloučeninou 2A, zatímco neformylované proteiny vzniklé při kultivaci buněk za shora popsaných podmínek nejsou sloučeninou 2A inhibovány bylo prokázáno, že mechanismus účinku sloučeniny 2A spočívá pravděpodobně v inhibici deformylační reakce, ke které dochází působením polypeptidové deformylasy (PDF).150, ♦ t * methionyl-tRNA formyltransferase (EC 2.1.29). When the rich medium enriched in thimidine is supplied externally, all the necessary metabolites whose biosynthesis includes tetrahydrofolate (THF) derivatives, such as pantothenate, methionine, glycine, purine nucleotides and thymidine, in the form of precursor compounds, are then grown by bacteria in this ( 0.3 millimoles / liter) rich medium enriched in thymidine and trimethoprim (100 micrograms / milliliter) can synthesize all chemical components (normal (Baumstark et al., 129: 457-471, 1971)). Instead of cells except f-Met-tRNAi, J. Bacteriol. f-Met-tRNAi 'is involved in the synthesis of Met-tRNAi, resulting in the formation of non-formyl group-containing polypeptides at their N-termini, independently of the action of deformylase. As expected, DH5α cells cultured in LB medium (containing 10 grams / liter of typtone, 5 grams / liter of yeast extract, 10 grams / liter of sodium chloride and having a pH of 7.5) were found to be enriched with trimethoprim and thymidine, they are resistant to compound 2 (diastereoisomer A). By demonstrating that cells in which the normal deformylation process occurs on the expressed proteins are inhibited by 2A, while unformated proteins produced by culturing cells under the conditions described above are not inhibited by 2A, it has been shown that the mechanism of action of 2A is likely to inhibit the deformylation reaction. that occurs under the action of polypeptide deformylase (PDF).
φφ φφ • φ <φφ φφ • φ <
Φ Φ <Φ Φ <
Φ Φ <Φ Φ <
Φ Φ φ 11 Φ φ 1
151/ φ φφ151 / φ φφ
Tabulka 3Table 3
Vystaveni bakterii působeni sloučeniny 2A vede k akumulaci proteinů blokovaných na N-konciBacterial exposure to compound 2A results in the accumulation of N-terminally blocked proteins
Pokud sloučeniny podle předmětného vynálezu skutečně inhibuji polypeptídovou deformylasu (PDF) in vivo, potom by následkem vystavení bakterií působení sloučeniny 2A (připravené v příkladu 2, diastereoizomer A) byla akumulace N-formylmethoninu na N-konci nově syntetizovaných proteinů. Takovéto proteiny by byly blokované na N-koncích a bylo by nemožné je použít jako substráty pro Edmanovo sekvenování na N-koncích.If the compounds of the present invention actually inhibit polypeptide deformylase (PDF) in vivo, then exposure of bacteria to compound 2A (prepared in Example 2, diastereoisomer A) would result in the accumulation of N-formylmethonin at the N-terminus of the newly synthesized proteins. Such proteins would be blocked at the N-termini and would be impossible to use as substrates for Edman sequencing at the N-termini.
Pro ověření této hypotézy byl požadovaný protein exprimován v přítomnosti nebo bez přítomnosti testované sloučeniny. Protein byl izolován, přečištěn a následně podroben sekvenování Edmanovým odbouráváním proteinů, jehož způsob je odborníkovi v dané oblasti techniky dostatečně znám.To verify this hypothesis, the desired protein was expressed in the presence or absence of the test compound. The protein was isolated, purified and subsequently subjected to sequencing by Edman protein degradation, the method of which is well known to those skilled in the art.
Bakteriální buňky transformované exprimovaným vektorem umožňujícím expresi lidské kalpainové malé regulační podjednotky, byly kultivovány do dosažení optické hustoty OD6oo 0,6 a následně vystaveny po dobu 2,5 hodiny působení isopropyl-p-D-thiogalaktopyranosy (IPTG) pro indukci exprese ·· '··«Bacterial cells transformed with an expressed vector allowing expression of the human calpain small regulatory subunit were cultured to an OD of 6 to 0.6 and then exposed for 2.5 hours to isopropyl-β-D-thiogalactopyranose (IPTG) to induce expression. · «
152.152.
·· ·· 9··· ·· 9 ·
9 9 9 9 ·9 9 9 9 ·
9 9 9 9 99
9 9 9 · 9 99 9 9
9 9 9 9 99
99 99 99 heterologických proteinů v přítomnosti 200 mikromolů/litr sloučeniny 2A, v přítomnosti 240 mikromolů/litr karbenicilinu, nebo v přítomnosti kontrolního vehikula. Proteinové extrakty byly odděleny pomocí SDS-PAGE, kalpainové podjednotky byly eluovány a proteinová sekvence byla stanovena Edmanovým odbouráváním pomocí automatického sekvenátoru proteinu ABI. Byla sekvenována stejná množství proteinu, přičemž bylo zjištěno, že výtěžek proteinu ošetřeného sloučeninou 2A byl podstatně snížen o 85 procent ve srovnání se vzorky ošetřenými vehikulem a karbenicilinem.99 99 99 heterologous proteins in the presence of 200 micromoles / liter of compound 2A, in the presence of 240 micromoles / liter of carbenicillin, or in the presence of a vehicle control. Protein extracts were separated by SDS-PAGE, calpain subunits were eluted, and the protein sequence was determined by Edman degradation using an automatic ABI protein sequencer. Equal amounts of protein were sequenced, and it was found that the yield of protein treated with Compound 2A was significantly reduced by 85 percent compared to vehicle and carbenicillin treated samples.
Kalpainové ' malé regulační podjednotky byly klonovány z messenger RNA získané z biopsie žaludečního nádoru pomocí sady pro izolaci mRNA Micro Fast Track® verze 2.2 (katalogové číslo K1520-02) . Kopie DNA z této mRNA byla syntetizována pomocí syntézního systému Promega Riboclone® cDNA M-MLV-RT(H-), Notl (Promega, katalogové číslo C1660) podle pokynů výrobce. Dvě základní oligonukletidové struktury určené pro použití při polymerasové řetězové reakci (PCR) byly syntetizovány společností Applied Biosystems, lne., divize Customs Services na základě publikované sekvence kalpainové malé podjednotky (EMBL přírůstkové číslo X04106).The calpain's small regulatory subunits were cloned from messenger RNA obtained from gastric tumor biopsy using the Micro Fast Track® mRNA isolation kit version 2.2 (catalog number K1520-02). A copy of the DNA from this mRNA was synthesized using the Promega Riboclone® cDNA M-MLV-RT (H-), Notl (Promega Catalog No. C1660) synthesis system according to the manufacturer's instructions. Two basic oligonucleotide structures for use in the polymerase chain reaction (PCR) were synthesized by Applied Biosystems, Inc., a division of Customs Services, based on the published calpain small subunit sequence (EMBL accession number X04106).
Následně byl klonován kalpainový fragment HindlII/Xhol do Hindlll a Xhol exprimovaného vektoru pET24d(+) získaného od společnosti Novagen, lne (Madison, Wisconsin, USA), přičemž bylo postupováno standardním způsobem. Slítá směs byla použita pro transformaci vhodných buněk DH5a (získaných od společnosti Life Technologies, Grand Island, NY, USA, katalogové číslo 18265-017). Kolonie byly selektovány kultivací přes noc při teplotě 37 °C na platech YT obohacených o 30 mikrogra153.· • #0 00 00Subsequently, the calpain HindIII / XhoI fragment was cloned into the HindIII and XhoI expressed pET24d (+) vector obtained from Novagen, Inc (Madison, Wisconsin, USA) following standard procedures. The mesh mixture was used to transform suitable DH5α cells (obtained from Life Technologies, Grand Island, NY, USA, catalog number 18265-017). Colonies were selected by overnight cultivation at 37 ° C on YT plates enriched with 30 microgra153.
000 0 0 00 ·000 0 0 00 ·
0 0 0 0 0 ·0 0 0 0 0 ·
000 00 0 • 0 0 0 ·00000 00 0 • 0 0 0 · 00
000 00 00 00 mů/mililitr kanamycinu. Plasmidová DNA byla připravena pomocí minipreparační sady Promega Plus SV a klony obsahující inzerovanou kalpainovou strukturu byly identifikovány pomocí standardních postupů. Sekvence DNA byla potvrzena shora popsaným cyklickým sekvenováním PE Applied Bíosystems.000 00 00 00 can / ml of kanamycin. Plasmid DNA was prepared using the Promega Plus SV miniprep kit, and clones containing the inserted calpain structure were identified using standard procedures. The DNA sequence was confirmed by the PE Applied Biosystems cycling sequencing described above.
Pro transformaci buněk BL21 DE3 (získaných od společnosti Novagen lne., Madison, Wisconsin, USA) byl použit kmen E. coli klonovaný v pET24d(+) (označený pET24-CANS). Klony byly selektovány při teplotě 37 °C na agarových platech YT (která obsahovala 8 gramů/litr typtonu, 5 gramů/litr kvasničného extraktu, 5 gramů/litr chloridu sodného, 15 gramů/litr agaru) obohacených 30 -mikrogramy/mililitr kanamycinu.E. coli strain cloned in pET24d (+) (designated pET24-CANS) was used to transform BL21 DE3 cells (obtained from Novagen Inc, Madison, Wisconsin, USA). Clones were selected at 37 ° C on YT agar plates (containing 8 grams / liter of typtone, 5 grams / liter of yeast extract, 5 grams / liter of sodium chloride, 15 grams / liter of agar) enriched with 30 µg / ml kanamycin.
Claims (29)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20002889A CZ20002889A3 (en) | 1999-02-05 | 1999-02-05 | Compounds exhibiting antibacterial activity |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20002889A CZ20002889A3 (en) | 1999-02-05 | 1999-02-05 | Compounds exhibiting antibacterial activity |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20002889A3 true CZ20002889A3 (en) | 2001-01-17 |
Family
ID=5471555
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20002889A CZ20002889A3 (en) | 1999-02-05 | 1999-02-05 | Compounds exhibiting antibacterial activity |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ20002889A3 (en) |
-
1999
- 1999-02-05 CZ CZ20002889A patent/CZ20002889A3/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7323448B2 (en) | Antibacterial agents | |
| JP3297053B2 (en) | Metalloproteinase inhibitors | |
| MX2008011128A (en) | N-formyl hydroxylamine compounds. | |
| EA027451B1 (en) | Kynurenine-3-monooxygenase inhibitors, pharmaceutical compositions and use thereof | |
| US20090203629A1 (en) | Inhibitors of cathepsin b | |
| SK15242003A3 (en) | N-formyl hydroxylamine compounds as inhibitors of PDF | |
| US6908911B1 (en) | Antibacterial agents | |
| EP1140058B1 (en) | N-formyl hydroxylamine derivatives as antibacterial agents | |
| CZ20002889A3 (en) | Compounds exhibiting antibacterial activity | |
| RU2246941C2 (en) | Antibacterial agents | |
| US20060089363A1 (en) | Antibacterial agents | |
| US7323596B2 (en) | Antimicrobial agents | |
| AU2002300119B2 (en) | Antibacterial agents | |
| US20110207783A1 (en) | Renin inhibitors | |
| US8071625B2 (en) | Certain chemical entities, compositions, and methods | |
| RU2269525C2 (en) | Antibacterial agent | |
| MXPA00007709A (en) | Antibacterial agents | |
| NZ521033A (en) | N-alkylamide substituted hydroxamic acid derivatives useful as antibacterial agents | |
| AU718890B2 (en) | Cytostatic hydroxamic acid derivatives |