CZ111595A3 - Dithiokarbamáty pro ošetřování aterosklerózy a jiných kardiovaskulátních a zánětlivých chorob - Google Patents

Dithiokarbamáty pro ošetřování aterosklerózy a jiných kardiovaskulátních a zánětlivých chorob Download PDF

Info

Publication number
CZ111595A3
CZ111595A3 CZ951115A CZ111595A CZ111595A3 CZ 111595 A3 CZ111595 A3 CZ 111595A3 CZ 951115 A CZ951115 A CZ 951115A CZ 111595 A CZ111595 A CZ 111595A CZ 111595 A3 CZ111595 A3 CZ 111595A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
sodium
dithiocarbamate
formula
dithiocarbamate derivative
group
Prior art date
Application number
CZ951115A
Other languages
English (en)
Inventor
Russel M. Medford
Margaret K. Offermann
Wayne R. Alexander
Original Assignee
Emory University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Emory University filed Critical Emory University
Publication of CZ111595A3 publication Critical patent/CZ111595A3/cs

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/145—Amines having sulfur, e.g. thiurams (>N—C(S)—S—C(S)—N< and >N—C(S)—S—S—C(S)—N<), Sulfinylamines (—N=SO), Sulfonylamines (—N=SO2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/325—Carbamic acids; Thiocarbamic acids; Anhydrides or salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/02—Non-specific cardiovascular stimulants, e.g. drugs for syncope, antihypotensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70503—Immunoglobulin superfamily, e.g. VCAMs, PECAM, LFA-3
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/7056—Selectin superfamily, e.g. LAM-1, GlyCAM, ELAM-1, PADGEM
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/32—Cardiovascular disorders
    • G01N2800/323—Arteriosclerosis, Stenosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Dithiokarbamáty pro ošetřování aterosklerózy a jiných kardiovaskulárních a zánětlivých chorob
Oblast techniky
Tento vynález je z oblasti způsobů a prostředků pro ošetřování aterosklerózy a jiných kardiovaskulárních a zánětlivých chorob.
Dosavadní stav techniky
Adheze leukocytů k endotelu (buněčné výstelce) představuje podstatný a časný příznak u široce rozmanitých zánětlivých stavů včetně aterosklerózy, chorob autoimunity a bakteriálních a virových infekcí. Tento proces je zčásti zprostředkován vyvolanou expresí povrchových adhezních molekul buněčné výstelky, jako je ICAM-1 (intracelulární adhezní molekula-1), VCAM-1 (vaskulární adhezní molekula-1) a ELAM-1 (endothelní leukocytová adhezní molekula-1). Tyto adhezní molekuly se váží k buňkám způsobujícím imunitu, které vyvolávají a šíří protizánětlivou odezvu. Jedna z adhezních molekul, VCAM-1, hraje zvláště důležitou roli při vázání raonocytů. Násobné signály vyvolávají expresi povrchových adhezních molekul buňky.
v,
Ateroskleróza je chronická zánětlivá choroba arteriální intimy, kterou charakterizují ohniska akumulace leukocytů, buněk hladkého svalstva, lipidů a extracelulární základní hmoty. Středovým znakem a jedním z nejdříve stanovitelných příznaků v patogenezi aterosklerotických plátů je adheze jednojaderných leukocytů k odděleným segmentům z arterální buněčné výstelky přes proteiny VCAM-1 na povrchu vaskulární buněčné výstelky. Po připojení k buněčné výstelce se jednojaderné leukocyty přemění na makrofágy zatížené” lipidy nebo pěnové buňky. Ateroskleróza začíná jako vysoce ohniskové poškození ve vaskulární stěně, obvykle v oblasti, kde se normální, laminární tok krve rozděluje, jako se rozděluje při průtoku do cév. Tyto oblasti nízkého střihového napětí jsou charakterizovány abnormální místní akumulací oxidativně modifikovaného lipoproteinu o nízké hustotě (ox-LDL).
Byl vysloven předpoklad, že časné příznaky v patogenezi aterosklerózy jsou zprostředkovány liproteiny o nízké hustotě, které se konvergují látkami reaktivními s kyslíkem na oxidativně modifikované lipoproteiny o nízké hustotě (Steinberg a kol., Beyond cholesterol: Modifications of low density lipoprotein that increase its atherogenicity, N. Engl. J. Med. 320, 915-924 /1989/, Parthasarathy a kol., Probucol inhibits oxidative modification of low density lipoprotein, J. Clin. Invest. 77(2), 641-664 /1986/). Není jasné, proč mechanizmus LDL je oxidován bud' intracelulárně nebo extracelulárně.
Současná terapie kardiovaskulárních chorob a zvláště aterosklerózy neošetřuje příčinu choroby, ale místo toho ošetřuje příznaky choroby nebo méně rizikové faktory spojené s chorobou. Farmaceutické prostředky předepisované pro tyto stavy zahrnují přípravky snižující lipidy, jako je probucol a kyselina nikotinová, aspirin (který zabraňuje slepování krevních destiček), antitrombotické přípravky, jako je kumadin, blokátory vápníkových kanálků, jako je varapamil, dilthiazem a nifedipin,angiotensin konvertující enzymové (ACE) inhibitory, jako je captopril a enalopril, a β-blokátory, jako je propanalol, terbutalol a labetalol. Protože terapeutické přípravky nejsou selektivní, mohou nepříznivě ovlivňovat řadu rozdílných orgánů a mají významné vedlejší účinky. V současnosti tyto přípravy nejsou léčivými látkami, které jsou zaměřeny na inhibici vázání monocytů k povrchovým adhezním molekulám buněk, jako je VCAM-1.
Uvádí se, že kardiovaskulární choroby jsou v současné době hlavní příčinou úmrtí ve Spojených státech amerických a 90 % kardiovaskulárních chorob je nyní diagnostikováno jako aterosklerózao Proto vzniká silná potřeba rozpoznat nové způsoby a získat nové farmaceutické prostředky k jejich ošetřování.
Dithikarbamáty jsou transitní chelátory kovů, které se klinicky používají při otravách těžkými kovy (R. C. Baselt a kol., Comparisons of antidotal efficacy of sodium diethyldithiocarbamate, D-penicillamine and triethylenetetramine upon acute toxicity of nickel carbonyl in rats, Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol., 18(4) , 677-688 /1977/, T. Menne a K. Kaaber, Treatment of pompholyx due to nickel allergy with chelating agents, Contact Dermatitis 4(5), 289-290 /1978/, F. W. Sunderman, Clinical response to therapeutic agents in poisoning from mercury vapor, Ann. Clin. Lab. Sci. 8(4), 259-269 /1978/, F. W. Sunderman, Efficacy of sodium diethyldithiocarbamate (dithiocarb) in acute nickel carbonyl poisoning, Ann. Clin. Lab. Sci. 9(1). 1-10 /1979/, G. R. Gale a kol., Diethyldithiocarbamate in treatment of acute cadmium poisoning, Ann. Clin. Lab. Sci. 11(6) . 476-483 /1981/, Μ. M. Jones a M. G. Cherian, The search for chelate antagonists for chronic cadmium intoxication, Toxicology 62(1). 1-25 /1990/, S. G. Jones a kol., A comparison of diethyldithiocarbamate and EDTA as antidotes for acute cadmium intoxication, Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 38(2). 271-278 /1982/, A. Pages a kol., Dithiocarbamates in heavy methal poisoning: complexes of N,N-di-(1-hydroxyethyl)dithiocarbamate with Zn(II), Cd(II), Hg(II), CH3Hg(II), and C6H5Hg(II), J. Inorg. Biochem.
25(1). 35-42 /1985/, S. K. Tandon a kol., The lead-chelating effects of substituted dithiocarbamates, Biomed. Environ. Sci. 3(3). 299-305 /1990/).
Dithiokarbamáty se také podpůrně používají při chemoterapii cis-platinou, aby se zabránilo renální toxicitě (Μ» Ρ» Hacker a kol., Effect of disulfiram (tetraethylthiuram disulfide) and diethyldithiocarbamate on the bladder toxicity and antitumor activity of cyclophosphamide in mice, Cancer Res. 42(11). 4490-4499 /1982/, Bodenner, Selected protection against cis-diamminedichloroplatinum (II)
- induced toxicity in kidney, gut, and bone marrow by diethyldithiocarbamate, Canc. Res. 46, 2751-2755 /1986/). Cheláty přechodných kovů by měly mít účinek blokující tvorbu hydroxyskupin intracelulární cestou pomocí Haber-WeissFentonovy reakce (M. Saran a kol., Radical reactions in vivo-an overview, Radiat. Environ. Biophys. 29(4) , 249-262 /1990/).
Dikarbamát, který se v současnosti používá při ošetřování závislosti na alkoholu, je disulfiram, co je dimer diethyldithiokarbamátu. Disulfiram inhibuje jaterní aldehyd-dehydrogenázu (K. Inoue a kol., Effect of disulfiram and its reduced metabolite, diethyldithiocarbamate on aldehyde dehydrogenase of human erythrocytes, Life Sci.
30(5). 419-424 /1982/).
Je popsáno, že dithiokarbamáty inhibují replikaci HIV viru a také zvyšují dozrávání specifických subpopulací T buněk. To vedlo ke klinickým zkouškám diethyldithiokarbamátu u pacientů trpících .AIDS (E. Reisinger a kol., Inhibition of HIV progression by dithiocarb, Lancet 335, 679 /1990/.
Podstata vynálezu
Předmět tohoto vynálezu se proto týká způsobu ošetřování aterosklerózy a jiných kardiovaskulárních a zánětlivých chorob.
!
Jiný předmět tohoto vynálezu se týká farmaceutických prostředků pro ošetřování aterosklerozy a jiných kardiovaskulárních a zánětlivých chorob.
Ještě jiný předmět tohoto vynálezu se týká způsobů a prostředků k blokování schopnosti buněk podílet se na expresi genových produktů, o kterých je známo, že jsou odpovědné za ulpívání leukocytů na těchto buňkách, a k aktivaci buněk.
Dále se popisuje shrnutí tohoto vynálezu.
Bylo nalezeno, že dithiokarboxyláty a zvláště dithiokarbamáty blokují vyvolanou expresi povrchové adhezní molekuly buněčné výstelky VCAM-1, a tak jsou vhodné pro ošetřování aterosklerozy, postangioplastické restenózy, koronárních arteriálních chorob, angíny a jiných kardiovaskulárních chorob, stejně jako nekardiovaskulárních zánětlivých chorob, které jsou zprostředkovány VCAM-1.
Je důležité, že určité dithiokarbamáty, jako natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát (dále též PDTC), neblokují významně vyvolanou expresi jiných povrchových adhezních molekul buněčné výstelky, jako je ICAM-1 nebo ELAM-1, a proto nemají nepříznivý účinek na zánětlivé odezvy, které nezprostředkuje VCAM-1. Bylo také nalezeno, že natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát neprojevuje preferenční toxicitu k proliferujícím nebo abnormálně dělícím se buňkám hladkého svalstva. Jiný dithiokarbamát, natrium N-methyl-N-karboxymethyl-N-karbodithioát také inhibuje expresi VCAM-1, aniž by měl významný účinek na ICAM-1, ale neinhibuje preferenční toxicitu pro abnormálně dělící se vaskulární buňky hladkého svalstva. Schopnost jiných aktivních dithiokarbamátů selektivně inhibovat expresi VCAM-1 (aniž by došlo k inhibici exprese ELAM-11 nebo ICAM-1) a projevovat preferenční toxicitu k abnormálně dělícím se buňkám hladkého svalstva, se hodnotí podle zde dále uvedených způsobů.
Dithiokarbamáty, které jsou vhodné přo ošetřování aterosklerózy a jiných kardiovaskulárních a zánětlivých chorob, zahrnují, aniž by na ně byly omezeny, sloučeniny obecných vzorců
R1SC(S)NR2R3 nebo R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3, ve kterých
R1 znamená atom vodíku, farmaceutický přijatelný kation včetně sodného a draselného, aniž by na ně byl omezen a skupinu vzorce NR4R5R6R7, kde R4, r5, r6 a R7 znamenají nezávisle na sobě atom vodíku, přímou, rozvětvenou nebo cyklickou alkylovou skupinu S 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, na které jedna nebo větší počet hydroxyskupin je umístěn na libovolném atomu uhlíku, nebo arylovou skupinu a
R2 a R3 znamenají nezávisle na sobě přímou, rozvětvenou nebo cyklickou alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, skupinu vzorce -(CHOH)n(CH2)n0H, kde n značí číslo 0, 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6,
-(CH2)nCO2R1, -(CH2)nCO2R4 nebo hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo
R2 a R3 tvoří dohromady můstek, jako -(CH2)m-, kde m znamená číslo 3 až 6 a
R4 znamená alkylovou, arylovou, alkarylovou nebo aralkylovou skupinu včetně acetylové, propionylové a butyrylové skupiny.
Aktivní dithiokarboxyláty a zvláště dithiokarbamáty, zahrnuté do tohoto vynálezu, se mohou používat pro ošetřování akutních a chronických zánětlivých chorob zprostředkovaných VCAM-1, včetně revmatizmu, osteoartritidy, astmatu a dermatitidy, na které však výčet není omezen a mohou být prospěšné při ošetřování rozptýlené sklerózy.
Sloučeniny jsou vhodné jak pro prvotní, tak podpůrné lékařské ošetřování kardiovaskulárních chorob. Sloučeniny se mohou používat při podpůrné terapii v kombinaci s přípravky, které se podávají ke snížení rizika onemocnění snížením LDL a sérového cholesterolu. Způsob představuje významnou výhodu při ošetřování kardiovaskulárních chorob, při kterém se jde za současné terapeutické návrhy jednoduše tím, že se brání šíření choroby, a pokud se sloučeniny příslušně používají, poskytuje se možnost lékařsky podrobit léčení aterosklerózu tím, že se brání novému poškození z pokračující choroby a již vzniklé poškození se přivádí k ústupu. Sloučeniny se mohou podávat k ošetřování chorob malých cév, u kterých ošetření není možné provést chirurgicky, nebo angioplastů nebo jiných cévních chorob, u kterých není možné vybrat k léčení chirurgii. Sloučeniny se mohou také používat ke stabilizaci pacientů před revaskularizační terapií.
Aktivní sloučenina nebo směs sloučenin se podává libovolným vhodným způsobem, včetně orálního a intravenozního podání, na které však nejsou omezeny. Obecné rozmezí dávky bude od 0,5 do 500 mg/kg tělesné hmotnosti s rozpisem dávky od jedné každý den do dvakrát denně. Délka dávkování bude v rozmezí od jediné dávky podané pouze jednou až dvakrát za den až po dávku podávanou v průběhu dvou až šesti měsíců.
Sloučeniny se mohou podávat přímo do vaskulární stěny za použití perfusních katetrů s balónkem ve směru k, oblasti koronární nebo k jiné arteriální angioplastické oblasti nebo do těchto oblastí. Jako příklad se uvádí podání 2 až 5 ml fyziologicky přijatelného roztoku, který obsahuje přibližně 1 až 500 μτηοΐ sloučeniny. Směs sloučenin se podává při jednonásobku až pětinásobku atmosférického tlaku. V průběhu následujících šesti měsíců, během období maximálního rizika restenózy, se aktivní sloučeniny podávají jinými vhodnými cestami a podle rozpisu dávek.
Relativně krátké období ošetřování aktivními sloučeninami se používá k tomu, aby se způsobilo zmenšené poškození, které je vyvoláno koronární artériální chorobou, jež nemůže být ošetřena bud' angioplasticky nebo chirurgicky. Příkladem krátkého období ošetřování je dva až šest měsíců, při dávkovém rozmezí od 0,5 do 500 mg/kg tělesné hmotnosti, podávané v rozmezí intervalu od jednou každý den do třikrát denně, přičemž tento příklad nemá být pokládán za omezením možných ošetření.
Aktivní sloučeniny se mohou podávat v období bezprostředně před a po koronární angioplasticitě, jako opatření ke snížení nebo vyloučeni abnormální proliferace a zánětlivé odezvy, která současně vede ke klinicky signifikantní restenóze.
Delší období ošetřování se může používat k zabránění vývoje postupujícího onemocnění u vysoce rizikových pacientů. Dlouhé období ošetřování může trvat léta, s dávkami v rozmezí od 0,5 do 500 mg/kg tělesné hmotnosti, při podávání v intervalu od jednou každý den do třikrát denně.
Aktivní sloučeniny se mohou také podávat v časovém období bezprostředně před a po koronárním angioplastickém ošetření, jako prostředek ke snížení nebo vyloučení abnormální proliferace nebo zánětlivé odezvy, která.současně vede ke klinicky významným restenózám.
Aktivní sloučeniny se mohou podávat současně s jinými léčivy používanými pro ošetřování kardiovaskulárních chorob, včetně přípravků snižujících lipidy, jako je probucol a kyselina nikotinová, inhibitorů shlukování krevních destiček, jako je aspirin, antitrombotických přípravků, jako je kumadin, blokátorů vápníkových kanálků, jako je varapamil, dilthiazem a nifedipin, angiotensin konvertujících enzymových (ACE) inhibitorů, jako je captopril a enalopril, a β-blokátorů, jako je propanalol, terbutalol a labetalol. Sloučeniny se také mohou podávat v kombinaci s nesteroidními protizánětlivými prostředky, jako je ibuprofen, indomethacin, fenoprofen, kyselina mefanamová, kyselina flufenamová nebo sulindac, nebo s kotikosteroidyo
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 je ilustrací autoradiogramu mRNA, získané jak je popsáno dále, hybridizované bud' na 32P-značené lidské VCAM-1 specifické cDNA (obdélník A), E-selektinové (ELAM-1) specifické cDNA (obdélník B) nebo ICAM-1 specifické cDNA (obdélník C). Po předchozím zpracování během 30 minut s 50 μιηοΐ natrium pyrrolidindithiokarbamátu (PDTC) se buňky HUVE (z lidské pupečníkové žíly) vystaví působení 10 jedn./ml IL-lb za nepřetržité přítomnosti 50 μιηοΐ natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu. Souběžná kontrolní stanovení se provádějí stejným způsobem s tím rozdílem, že natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát není přítomen. V uvedených časových intervalech se veškerá RNA izoluje a materiál rozdělený na velikost 20 μg se denaturuje 1,0% agarózovým gelem, obsahujícím formaldehyd, pro elektroforézu a přenese se do nitrocelulózy, hybridizuje jak je popsáno výše a vizualizuje autoradiograficky. Pruh 1-0 hodin, pruhy 2, 4, 6,. 8 - OL-1 samotný pro 2, 4, 8 a 24 hodiny, pruhy 3, 5, 7, 9 - IL-1 s PDTC pro 2, 4, 8 a 24 hodin.
Obr. 2 je ilustrací autoradiogramu mRNA, získané jak je popsáno dále, hybridizované bud' na 32P-značené lidské VCAM-l specifické cDNA (obdélník A), E-selektinové (ELAM-1) specifické cDNA (obdélník B) nebo ICAM-1 specifické cDNA obdélník C). Buňky HUVE se předem zpracují uvedenými koncentracemi natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu, potom se vystaví IL-lb v přítomnosti natrium pyrrolidin-N-dithiokarba mátu na dobu 4 hodin a zkoušejí se na nahromadění VCAM-l na mRNA pomocí Northern filter hybridizačni analýzy. Pruh 1
- kontrolní stanovení, pruh 2 - IL-1 (10 jedn./ml), pruh 3 - IL-lb + natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu (0,05 μιηοΐ), pruh 4 IL-1 LB + natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu (0,5 μιηοΐ), pruh 5 - IL-lb + natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu (5,0 μπιοί), pruh 6 - IL-lb + natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu (50,0 μπιοί), pruh 7 - IL-lb + natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu (100 μπιοί).
Obr. 3 je ilustrací autoradiogramu mRNA, získané jak je popsáno dále, hybridizované bud' na 32P-značené lidské VCAM-l specifické cDNA /obdélník A), E-selektinové (ELAM-1) specifické cDNA (obdélník B) nebo ICAM-1 specifické cDNA (obdélník C). Buňky HUVE se předem zpracují jak je popsáno v souvislosti s obr. 1 s 50 μπιοί natrium pyrrolidin-N-dithio karbamátu, vystaví se na dobu 4 hodin přípravkům uvedeným dále a zkouší se na nahromadění VCAM-l (obdélník A) a ICAM-1 (obdélník B) mRDA. Pruh 1 - TNFa (100 jedn./ml), pruh 2
- TNFa + natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát, pruh 3
- lipopolysacharid (LPS) (100 ng/ml), pruh 4 - LPS + natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát, pruh 5 - poly(I:C) (100 mg/ml), pruh 6 - poly(I:C) + natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát.
Obr. 4 je grafem relativní povrchové exprese,buněk VCAM-1 a ICAM-1 v přítomnosti (tmavý pás) nebo nepřítomnosti (světlý pás) natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu a v přítomnosti většího počtu typů indukujících stimulaci. Soutokové (confluent) buňky HUVE se předem zpracují nebo předem nezpracují (pouze CTL) během 30 minut s 50 μπιοί natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu a potom po uvedené časové období vystaví expozici zmíněných přípravků v přítomnosti nebo nepřítomnosti (pouze CTL) natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu. Exprese povrchových buněk se stanovuje primárním vázáním s VCAM-1 specifickými (4B9) a ICAM-1 specifickými (84H10) myšími monoklonálními protilátkami, s následujícím sekundárním vázáním s protimyším IgG kozy, značeným peroxidázou z křenu selského. Stanovení množství se provádí určením kalorimetrické konverze TMB při 450 nm. Obr. 4 ukazuje, že násobné regulátorové signály vyvolává VCAM-1, však nikoli ICAM-1 obecnou cestou sensitivity dithiokarbamátu v lidské vaskulární buněčné výstelce.
Obr. 5 je grafem relativní exprese povrchových VCAM-1 buněk (optická hustota, O.D., 595 nmol) v buněčné výstelce z pupečníkové žíly člověka, aktivovaných TNFa, proti koncentracím různých antioxidantů. (PDTC je natrium N-pyrrolidindithiokarbamát, DETC je natrium N,N-diethyl-N-karbodithioát, také označovaný jako natrium diethyldithiokarbamát, NAC je N-acetylcystein a DF je desferroximin).
Obr. 6 je grafem relativní exprese povrchových VCAM-1 buněk (optická hustota 595 nmol) v buněčné výstelce z pupečníkové žíly člověka, aktivovaných TNFa, v přítomnosti specifického množství antioxidantu. (PDTC je natrium N-pyrrolidindithiokarbamát, DiDTC je natrium N,N-diethyl-N-karbodithioát, SarDTC je natrium N-methyl-N-karboxymethyl-N-karbodithioát, IDADTC je trinatrium N,N-di(karboxymethyl)-N-karbodithioát, MGDTC je natrium N-methyl-D-glukamin-N-karbodithioát, MeOBGDTC je natrium N-(4-methoxybenzyl)-D-glucamin-N-karbodithioát, DEDTC je natrium N,N-diethyl-N-karbodithioát, Di-PDTC je natrium N,N-diisopropyl-N-karbodithioát a NAC je N-acetylcystein )·.
Obr. 7 je grafem procentuálního obsahu buněk Molt-4 vázajících se k buňkám HUVE bud' ne stimul ováným nebo stimulovaným TNFa v množství 100 jedn./ml po dobu 6 hodin v přítomnosti nebo nepřítomnosti natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu.
Obr. 8 ilustruje chemickou strukturu těchto dithiokarbamátů:
natrium N-pyrrolidin-N-karbodithioát, natrium N-methyl-N-karboxymethyl-N-karbodithioát, trinatrium N,N-di(karboxymethyl)-N-karbodithioát, natrium N-methyl-D-glukamin-N-karbodithioát, natrium N,N-diethyl-N-karbodithioát (natrium diethyldithiokarbamát), natrium N,N-diisopropyl-N-karbodithioát a natrium N-(4-methoxybenzyl)-D-glucamin-N-karboditioát.
Nyní se uvádí detailní popis vynálezu.
Výraz alkyl, pokud se zde používá a není jinak upřesněn, se týká nasycené přímé, rozvětvené nebo cyklické uhlovodíkové skupiny s 1 až 10 atomy uhlíku a jednotlivě zahrnuje methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, terč.-butyl, pentyl, cyklopentyl, isopentyl, neopentyl, hexyl, isohexyl, cyklohexyl, 3-methylpentyl, 2,2-dimethylbutyl a 2,3-dimethylbutyl.
Výraz alkenyl, pokud se zde používá a není jinak upřesněn, se týká přímé, rozvětvené nebo cyklické uhlovodíkové skupiny se 2 až 10 atomy uhlíku, která obsahuje alespoň jednu dvojnou vazbu.
Výraz alkinyl, pokud se zde používá a není jinak upřesněn, se týká přímé nebo rozvětvené uhlovodíkové skupiny se 2 až 10 atomy uhlíku, která obsahuje alespoň jednu trojnou vazbu.
Výraz aralkyl se vztahuje k arylové skupině s alespoň jedním alkylovým substituentem.
Výraz alkaryl se vztahuje k alkylové skupině, která má alespoň jeden arylový substituent.
Výraz halogen(alkyl, alkenyl nebo alkinyl) se týká alkylové, alkenylové nebo alkinylové skupiny, ve které alespoň jeden z atomů vodíku ve skupině je nahrazen atomem halogenu.
Výraz aryl, pokud se zde používá a není jinak upřesněn, se týká fenylové skupiny nebo substituované fenylové skupiny, ve kterých fenylový kruh obsahuje alespoň jeden z těchto substituentů; hydroxyskupina, karboxyskupina nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, CO2(alkylová) skupina, alkoxyskupina, alkylová skupina nebo glukaminový zbytek.
Výraz alkoxyskupina, pokud se zde používá a není jinak upřesněn, se týká části o struktuře -0-alkyl.
Výraz halogen, který se zde používá, zahrnuje atom fluoru, chloru, bromu a jodu.
Výraz hydroxyalkyl, který se zde používá, se týká alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, ve které alespoň jeden z atomů vodíku, připojený k libovolnému z atomů uhlíku, je nahrazen hydroxyskupinou.
Výraz thiolový antioxidant se vztahuje ke sloučenině obsahující síru, která zabraňuje oxidaci.
Výraz farmaceuticky přijatelný derivát se vztahuje k derivátu aktivní sloučeniny, která je po podání příjemci schopna přímo nebo nepřímo poskytnout základní sloučeninu, která má sama aktivitu.
I. Aktivní sloučeniny
Bylo nalezeno, že dithiokarboxyláty jsou vhodné pro ošetřování aterosklerozy a jiných kardiovaskulárních a zánětlivých chorob. Dithiokarboxyláty včetně dithiokarbamátů se mohou používat k blokování schopnosti buněk, včetně buněčné výstelky, způsobit expresi VCAM-1, co je genový produkt, o kterém je známo, že je odpovědný za přilnavost leukocytů k buňkám. Skutečnost, že dithiokarboxyláty včetně dithiokarbamátů inhibují genovou expresi VCAM-Í, významně podporuje důležitost oxidace jako počátečního signálu při změněných interakcích vaskulárních-zánětlivých buněk.
Zvláštní molekulární mechanizmus, kterým dithiokarboxyláty působí při inhibici genové exprese VCAM-1, není znám.
Alespoň jedna ze sloučenin, natrium pyrrolidindithiokarbamát (PDTC), inhibuje genovou expresi VCAM-1 při koncentraci nižší než 1,0 μπιοί. Tato sloučenina tak projevuje preferenční toxicitu k proliferujícím nebo abnormálně dělícím se vaskulárním buňkám hladkého svalstva. Bylo nalezeno, že natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát neblokuje významně expresi ELAM-1 nebo ICAM-1, a proto ošetřováni touto sloučeninou nemá nepříznivě působící stránky na zánětlivou odezvu zprostředkovanou ELAM-1 nebo ICAM-1. Tak se obecně vyhne potlačení imunity. Tím se může vyhnout systémovým komplikacím z obecného potlačení adhezních molekul u řady jiných typů buněk, známých k jejich expresi.
Dithiokarboxyláty jsou sloučeniny struktury obecného vzorce
A-SC(S)-B, které jsou členy obecné skupiny sloučenin známých jako thiolové antioxidanty, a které se jinak uvádějí ve vztahu s karbodithioly nebo karbodithioláty. Zdá se, že část vzorce SC(S) je podstatná pro terapeutický účinek a že A a B mohou být libovolné skupiny, které nemají nepříznivý účinek na účinnost nebo toxicitu sloučeniny. A a B mohou být zvoleny odborníkem v oboru k propůjčení požadovaných charakteristických vlastností sloučenině, včetně velikosti, náboje, toxicity a stupně stability (počítaje v to stabilitu v kyselém prostředí, jako je v žaludku, nebo v bázickém prostředí, jako je v intestinálním traktu). Výběr A a B bude mít také důležitý účinek na distribuci ve tkáni na farmakokinetické vlastnosti sloučeniny. Obecně je pro ošetřování kardiovaskulárních chorob žádoucí, aby se sloučenina hromadila nebo umísťovala ve vrstvě blízké tepně, která obsahuje vaskulární buněčnou výstelku. Sloučeniny se výhodně vylučují vyměšováním z ledvin.
Jako ničím neomezené příklady A a B se mohou nezávisle na sobě uvést alkylová, alkenylová, alkinylová, alkarylová, aralkylová, halogenalkylová, halogenalkenylová, halogenalki16 nylová, arylová a alkarylová skupina, atom vodíku, alkoxyalkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části a 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, alkylthioalkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylthiočásti a 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, substituovaná alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku (kde substituentem je nezávisle na sobě hydroxyskupina, karbonyl nebo zbytek karboxylové kyseliny, které jsou umístěny na libovolném ze všech 10 atomů uhlíku), dále skupina vzorce NR2R3, -(CHOH)nCH2OH, kde n značí číslo 0, 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6, skupina vzorce -(CH2)n C02Rl' včetně acetylu, propionylu a butyrylu, hydroxyalkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku (kde alespoň jedna hydroxylové skupina je umístěna na libovolném z atomů uhlíku) a A může být farmaceuticky přijatelný kation včetně sodíku, draslíku nebo skupiny vzorce NR4R5R6R7, na které výčet není omezen.
Při jiném provedení se může podávat dimer obecného vzorce
B-C(S)S-SC(S)-B.
Dithiokarboxyláty se mají volit pro použiti při ošetřování aterosklerózy a jiných kardiovaskulárních a zánětlivých chorob tak, aby měly vlastní lipofilicitu k umístění v postiženém místě. Sloučenina se nedostává do oblastí s nízkou přeměnou, jako do místa ukládání tuku. Při výhodném ošetřování kardiovaskulárních chorob, farmakokinetické vlastnosti sloučeniny by neměly být výrazně zhoršovány selháním srdce v důsledku jeho překrvení nebo nedostatečnosti ledvin.
Dithikarboxyláty musí být fyziologicky přijatelné. Obecně jsou přijatelné sloučeniny s terapeutickým indexem alespoň 2 a výhodně alespoň 5 nebo 10. Terapeutický index je definován jako poměr EC50/IC50, kde symbol EC50 znamená koncentraci sloučeniny, která inhibuje expresi VCAM-1 o 50 % a symbol IC^q označuje koncentraci sloučeniny, která je toxická pro 50 % cílových buněk. Buněčná toxicita se může měřit přímým spočítáním buněk, exkluzí trypanovou modří nebo studiemi měnící se metabolické aktivity, tak jako vpravením 3H-thymidinu, jak je známo odborníkovi v oboru. Terapeutický index natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu ve tkáňové kultuře je nad 100, jak -se změří na základě buněčné toxicity dělené schopností inhibovat expresi VCAM-1, při aktivaci TNFa, u buněk HUVE (pupečníková žíla člověka). Počáteční studie na rychle se dělících buňkách typu HT-18 gliomu člověka dokládají, že nenastává toxicita při koncentracích stonásobně větších než je terapeutická koncentrace. Disulfiram, orálně podávána forma diethyldithiokarbamátu, používaný pro ošetřování závislosti na alkohol, obecně nevyvolává velkou klinickou toxicitu, pokud se vhodně podává.
Je několik dithiokarbamátů, které jsou známé jako látky toxické pro geny. Tyto sloučeniny nespadají do rozsahu tohoto vynálezu, který je omezen na podávání fyziologicky přijatelných látek. Jako příklad dithiokarbamátů toxického pro geny se uvádí dimethyldithiokarbamát zinku, známý jako fungicidní prostředek. Dále anticholinesterázové vlastnosti určitých dithiokarbamátů mohou vést k neurotoxickému poškození (D. Miller, Neurotoxicity of the pesticidal carbamates, Neurobehay. Toxicol. Teratol. 4(6). 779-787 /1982/).
Výraz dithiokarboxylát, jak se zde používá, jmenovitě zahrnuje, třebaže na ně není omezen, dithiokarbamáty obecného vzorce
Rl-SCtSjNR^3 a R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3, ve kterých
R1 znamená atom vodíku nebo farmaceutický přijatelný kation včetně sodného a draselného, aniž by na ně byl omezen, nebo skupinu vzorce NR4R5R6R7, kde R4, R5, R6 a R7 znamenají nezávisle na sobě atom vodíku, přímou, rozvětvenou nebo cyklickou alkylovou skupinu s· 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, na které jedna nebo větší počet hydroxyskupin je umístěn na libovolném z atomů uhlíku, nebo znamená arylovou skupinu a
R2 a R3 znamenají nezávisle na sobě přímou, rozvětvenou nebo cyklickou alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku nebo skupinu vzorce -(CHOH)n(CH2)nOH, kde n značí číslo 0, 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6, skupinu vzorce -(CH2)nCO2R1, -(CH2)nCO2R4, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo
R2 a R3 tvoří dohromady můstek, jako -(CH2)m-, kde m znamená číslo 3 až 6 a
R4 znamená alkylovou, arylovou, alkarylovou nebo aralkylovou skupinu včetně acetylové, propionylové a butyrylové skupiny.
Zvláštní příklady vhodných dithiokarbamátů ilustrovaných na obr. 8 zahrnují natrium pýrrolidin-N-karbodithioát, natrium N-methyl-N-karboxymethyl-N-karbodithioát, trinatrium N,N-di(karboxymethyl)-N-karbodithioát, natrium N-methyl-D-glukamin-N-karbodithioát, natrium Ν,Ν-diethyl-N-karbodithio át (natrium diethyldithiokarbamát) a natrium N,N-diisopropyl-N-karbodithioát.
Aktivní dithiokarboxyláty a zvláště dithiokarbamáty jsou bud' obchodně dostupné nebo se mohou vyrobit za, použití známých způsobů.
Při molekulární hladině natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu se také ukazuje, že tato sloučenina inhibuje aktivaci transkripčního regulátorového faktoru Nf-kB v odezvu na určitou cytokinovou a necytokinovou stimulaci (R. Schreck a kol., Reactive oxygen intermediates as apparently widely ušed messengers in the activation of the NF-kappa B transcription factor and HIV-1, EMBO J. 10(8). 2247-2258 /1991/, R. Schreck a kol., Dithiokarbamates as potent inhibitors of nuclear factor B activation in intact cells,
J. Exp. Med. 175. 1181-1194 /1992/). Avšak zkouškou posunu mobility gelu z jaderných extraktů buněk HUVE s různými zvyšujícími se projevy podobnými kB bylo nalezeno, že buněčná výstelka aktivuje genovou expresi VCAM-1 zřejmě novým transkripčním regulátorovým faktorem, který není Nf-kB. To naznačuje, že natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát může regulovat genovou expresi buněčné výstelky svým účinkem na nový transkripční regulátorový protein. Bylo také doloženo, že exprese VCAM-1 je vyvolána větším počtem faktorů v kultivovaných buňkách Kaposiho sarkomu, co může být důležité při jejich patogenezi. Natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát blokuje expresi VCAM-1 -v buňkách Kaposiho sarkomu, které jsou aktivovány TNF, IL-1 a poly(I:C).
Bylo také nalezeno, že buňky hladkého svalstva produkují rozpustnou formu VCAM-1, která může být vylučována buňkami, a která může působit jako přírodní antihistamin.
II. Biologická aktivita
Schopnost dithiokarboxylátů inhibovat expresi VCAM-1 se může měřit různými způsoby, včetně metod uvedených podrobně dále v příkladech 1 až 7. Kvůli příkladům 1 až 3, a 7 se popisuje ohodnocení biologického účinku natrium pyrrolidin-N-karbodithioátu (také označovaného jako PDTC). Tyto příklady nejsou zamýšleny jako omezení rozsahu vynálezu, který specificky zahrnuje použití libovolné z výše popsaných sloučenin pro ošetřování aterosklerózy a jiných typů zánětu a kardiovaskulárních chorob, zprostředkovaných VCAM-1.
Natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát může být snadno nahrazen libovolnou ze sloučenin popsaných výše a ohodnocen podobným způsobem.
Příklady 4 a 5 poskytují srovnávací hodnoty týkající se schopnosti řady dithiokarbamátů inhibovat genovou expresi VCAM-1. Příklady uvedené dále podávají obraz o tom, že nárokované dithiokarbamáty specificky blokují schopnost VCAM-1 podrobit se expresi vaskulární buněčnou výstelkou v odezvu na řadu signálů, o kterých je známo, že jsou aktivní při ateroskleróze a odezvě na zánět.
Experimentální postupy
Buněčné kultury
Buňky HUVE, izolované z pupečníkové žíly člověka, se kanylují, propláchnou Hankovým roztokem k odstranění krve a potom inkubují s 1% kolagenázou za teploty 37 °C po dobu 15 minut. Po odstranění kolagenázy se buňky kultivují v prostředí M199, doplněném 20% fetálním telecím šerem (HyClone), 16 ug/ml heparinu (ESI Pharmaceuticals, Cherry Hill, New Jersey, USA), 50 μg/ml růstového doplňku buněčné výstelky (Collaborative Research Incorporated, Bedford, Massachsetts, USA), 25 mmol Hepes pufru, 2 mmol L-glutaminu,
100 μς/πιΐ penicilinu a 100 μg/ml streptomycinu, a nechají růst na deskách tkáňové kultury povlečených 0,1 % želatiny, za teploty 37 °C. Buňky se podrobí pasáži při soutoku štěpením 1:4. Buňky se použijí v prvních 8 pasážích.
Inkubace s cytokiny a jinými reakčními činidly
Soutokové buňky HUVE se promyjí fyziologickým roztokem pufrovaným fosfátem a potom se dodají do čerstvého prostředí. Natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát se přidává na uvedených koncentracích, jak se provede předchozí zpracování 30 minut před přidáním cytokinů. Cytokiny a jiné indukující látky se přímo přidávají do prostředí v uvedených časech a koncentracích, které jsou udány při každém experimentu. Lidský rekombinant IL-lb je genetický jed od firmy Upjohn Company (Kalamazoo, MI, USA). TNFa se získává od firmy Bohringer Ingelheim (NSR). Bakteriální lipopolysacharid (LPS), kyselina polyinosinová, kyselina polycitidilová (Póly I:C) a pyrrolidindithiokarbamát (natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát) se opatřují u firmy Sigma Chemical (St. Louis, Montana, USA). Všechny další reakční činidla mají jakost pro reagencie.
Izolace RNA
Celková buněčná RNA se izoluje jednoduchou extrakcí za použití kyselé směsi guanidiumthiokyanátu, fenolu a chloroformu. Buňky se propláchnou fyziologickým roztokem pufrovaným fosfátem a potom lýzují. 2 ml guanidiumisothiokyanátu. Roztok se okyselí 0,2 ml octanu sodného (hodnota pH 4,0) a potom se extrahuje 2 ml fenolu a 0,4 ml směsi chloroformu a isoamylalkoholu v poměru 24 : 1. RNA se podrobí dvěma preparacím ethanolem předtím, než se použije pro analýzu skvrn Northern.
Analýza skvrn Northern μ9 celkové buněčné RNA se frakcionuje podle velkosti za použití 1% agarózového gelu obsahujícího formaldehyd, v přítomnosti 1 μg/ml ethidiumbromidu. RNA se přenese na nitrocelulózový filtr a kovalentňé váže , ultrafialovým zářením za použití zařízení Stratlinker UV Crosslinker (Stratagene, La Jolla, Kalifornie, USA).
Hybridizace se provádí za teploty 42 °C po dobu 18 hodin v 5x SSC (lx = 150 mmol chloridu sodného, 15 mmol citrátu sodného), 1% dodecylsulfátu sodném, 5x Denhardtově roztoku, 50% formaldehydu, 10% dextransulfátu a 100 μg/ml DNA ze spermatu lososa, denaturovaného střihem. Přibližně 1 χ 106 až 2 χ ΙΟ6 μιη/ιηΐ značeného zkušebního vzorku (o specifické aktivitě menší než 108 cpm/^g DNA) se použije na hybridizaci. Potom se provede hybridizace a filtráty se promyjí s konečnou ostrostí 0,2 x SSC za teploty 55 °C. Nitrocelulóza se stripuje za použití vroucí vody před rehybridizací s jiným zkušením vzorkem. Autoradiograf se provádí při zesilujícím stínění za teploty -70 °C.
Zkušební vzorky
Vzorky DNA značené 32P se zhotoví za použití primerové oligonukleotidové metody s nahodilým uspořádáním. Zkušebním vzorkem ICAM-1 je fragment Eco Rl z lidské cDNA. Zkušebním vzorkem ELAM-1 je fragment 1,85 kb Hind III z lidské cDNA. Zkušebním vzorkem VCAM-1 je fragment Hind III-Xho I z lidské cDNA sestávající z nukleotidu 132 až 1814.
Zkouška enzymu vázaného na imonusorbent (ELISA)
Buňky HUVE se umístí na desky tkáňové kultury s 96 jamkami 48 až 72 hodiny před zkouškou. Do každé jamky se přidají primární protilátky v prostředí M199 s 5% fetálního telecího sera a vše se inkubuje za teploty 37 °C po dobu 1 hodiny. Buňky se potom promyjí a inkubují po dobu 1 hodiny s antimyším IgG kozy, konjugovaným peroxidázou (Bio Rad), při zředění v poměru 1 : 500 v M199 s 5% fetálního telecího sera. Buňky se potom promyjí a vázání protilátky se stanoví přídavkem 100 μΐ roztoku, který obsahuje 10 mg/ml 3,3,5,5'-tetramethylbenzidinu (Sigma) s obsahem 0,003 % peroxidu vodíku. Reakce se zastaví přídavkem 25 μΐ 8-normální kyseliny sírové. Desky se· odečtou na vyhodnocovacím zařízení ELISA (Bio Rad) při optické hustotě O.D. odpovídající 420 nmol, po slepém odečtení na řádky vybarvené pouze s druhým stupněm protilátky. Údaje představují střední hodnoty z trojnásobných měření.
Protilátky
Monoklonální protilátka (MAb) 4B9, vhodná pro zjištění vaskulární adhezní molekuly-1 (VCAM-1) buněk, je velkorysým darem Dr. Johna Harlana z University of Washington, USA. MAb E9A1F1, vhodná pro zjištění adhezní molekuly buněčné výstelky (ELAM-1), je šlechetný dar Dr. Swerlicka z Emory University. Hybridomy produkující MAb 84H10, které zjištují intermolekulární adhezní molekuly-1 (ICAM-1) rostou běžným způsobem v laboratoři původců tohoto vynálezu. Protilátky se používají jako supernatantová tkáňová kultura.
Příklady provedeni vynálezu
Příklad 1
Natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát blokuje indukci VCAM-1 buněk HUVE zprostředkovanou IL-lb, ale ne ICAM-1 nebo ELAM-1, nahromadění mRNA
Ke stanovení, zda oxidační stav buněčné výstelky může urychlit basální nebo indukovanou expresi buněčných adhezních molekulárních genů, se lidská vaskulární buněčná výstelka vystaví indukujícímu cytokinu, IL-lb (10 jedn./ml) v přítomnosti nebo nepřítomnosti thiolovaného antioxidantu chaletizujícího kov a pyrrolidindithiokarbamátu (natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát, 50 μιηοΐ) až na dobu 24 hodin.
Jak je znázorněno na obr. 1, samotný IL-lb (pruhy 2, 4, 6 a 8) indukuje s očekávanou rychlostí a s přechodnou indukcí VCAM-l (obdélník· A), E-selektin (ELAM-1, obdélník B) a ICAM-1 (obdélník C) nahromadění mRNA, přičemž všechny píky se dosahují za 4 hodiny. Avšak v přítomnosti natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu, IL-lb indukce VCAM-l nahromadění mRNA se výrazně inhibuje nad 90 % (obdélník A, pruhy 3, 5, 7 a 9). V protikladu k tomu, třebaže IL-lb zprostředkovaná indukce ELAM-1 je slabě inhibována za 2 a 24 hodiny (srovnej pruhy 2 a 3 a dále 8 a 9 na obdélníku Β), natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát neinhibuje indukci za 4 a 8 hodin (pruhy 5 a 7 na obdélníku B). IL-lb zprostředkovaná indukce z ICAM-1 nahromadění mRNA není nepříznivě ovlivněna (obdélník B, pruhy 3, 5, 7 a 9). Ve skutečnosti se pozoruje mírné zvětšení IL-lb indukce z ICAM-1 nahromadění mRNA (přibližně o 30 %) (srovnej pruhy 4 a 5 na obdélníku B). Ekvivalentní množství nitrocelulózou přenesené RNA na pruh je potvrzeno obarvením ethidiumbromidem a vizuálním sledováním.
Analýza hodnot dávka-odezva se provádí ke stanovení, zda natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát inhibuje indukci exprese VCAM-l genu pomocí IL-lb v dávce závislé na způsobu. Jak je znázorněno na obr. 2, natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát inhibuje IL-lb zprostředkovanou indukci exprese VCAM-l genu se strmou křivkou dávka-odezva (obr. 2, obdélník A), s vypočítanou hodnotou EC50 přibližně 10 μιηοΐ, zatímco natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát neinhibuje indukci ELAM-1 exprese při těchto koncentracích, zprostředkovanou IL-lb (obr. 2, obdélník B). IL-lb zprostředkovaná indukce
ICAM-1 nahromadění mRNA je zvýšena natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátem při koncentracích vyšších než 0,5 μιηοΐ (obr.
2, srovnej pruh 2 a pruhy 4 až 7 na obdélníku C).
Tyto údaje dokládají, že IL-lb používá dithiokarboxylát a zvláště sensitivní stupeň s dithiokarbamátem, jako část svého signalizačního mechanizmu pro indukci exprese VCAM-1 genu. Tyto údaje také ukazují, že tento sensitivní stupeň s dithiokarbamátem nehraje významnou úlohu při indukci exprese ELAM-1 nebo ICAM-1 genu, která je zprostředkována IL-lb.
Příklad 2
Natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát blokuje indukci VCAM-1 buněk HUVE nahromadění mRNA vícenásobným stimulováním
Ke stanovení, zda jiné dobře popsané aktivátory exprese VCAM-1 genu také používají sensitivní stupeň s natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátem, se testují tři oddělené skupiny aktivátorů: indukující přípravek zprostředkovaný jiným klasickým receptorem (faktor tumorové nekrózy, TNFa), indukující látka zprostředkovaná nereceptorem (lipopolysacharid, LPS) a nedávno popsaná nová indukující látka (dvojitě stočená RNA, poly(I:C)). Ve všech třech případech natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát výrazně inhibuje indukci VCAM-1 nahromadění mRNA v buňkách HUVE po 4 hodinách (obr. 3, obdélník A). Ačkoliv exprese ELAM-1 genu zprostředkovaná TNFa je v určitém rozsahu potlačena (obr. 3, pruh 1 a 2, obdélník B), z ELAM-1 nahromadění mRNA zprostředkované LPS a poly(I:C) je bez nepříznivého ovlivnění (obr.
3, pruhy 3 až 6, obdélník B). Indukce ICAM-1 nahromadění mRNA je bez nepříznivého ovlivnění (obr. 3, obdélník C). Tyto hodnoty ukazují, že strukturně odlišné indukující prostředky, působící odlišnými způsoby, se podílejí na obecném regulačním stupni specificky pro indukci exprese VCAM-1 genu.
Příklad 3
Natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát blokuje povrchovou expresi VCAM-1 buněk HUVE indukovanou při vícenásobném stimulování
Ke stanovení, zda podobně jako mRNA, indukce povrchové proteinové exprese VCAM-1 buněčné výstelky by také byla inhibována natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátem, se použije monoklonálních protilátek při zkoušce ELISA, ke kvantitativnímu stanovení indukce buněčného povrchu VCAM-1 a ICAM-1 v kultivovaných buňkách HUVE. Jak je znázorněno na obr. 4, větší počet souborů aktivujících přípravků v nepřítomnosti natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu (-PDTC) indukuje rychlé a krátkodobé nahromadění VCAM-1 (horní levý obdélník) na povrchu buněk, při dosažení vrcholu za 6 hodin. V přítomnosti natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu (+PDTC, horní pravý obdélník) se indukce povrchové exprese VCAM-1 buněk všemi testovanými přípravky výrazně inhibuje (80 až 90 %). Naopak indukovaná exprese buněčného povrchu ICAM-1 je bez nepříznivého ovlivnění za identických podmínek (spodní levé a pravé obdélníky).
Tyto údaje ukazují, že podobně jako nahromadění mRNA, exprese VCAM-1 povrchových buněk se selektivně inhibuje dithiokarbamáty, a že větší počet souborů aktivujících přípravků používá podobný sensitivní mechanizmus dithiokarmabátů k indukci exprese VCAM-1 genu.
Příklad 4
Poměrná účinnost antioxidantů při blokování TNFa indukce VCAM-1
Ke stanovení, jestli strukturně podobné nebo odlišné antioxidanty by mohly inhibovat expresi VCAM-1 genu a s jakou silou, se buňky HUVE vystaví působení TNFa po dobu 6 hodin v přítomnosti nebo nepřítomnosti 5 rozdílných antioxidantů v odlišných koncentracích. Jak je uvedeno na obr. 5, jak diethyldithiokarbamát (DETC), tak N-acetylcystein (NAC) inhibují expresi VCAM-1 při koncentracích 5 a 30 μπιοί.
Naproti tomu natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát (PDTC) je účinný mezi 5 a 50 μιηοΐ. Chelatizační činidlo pro kovové železo, desferroximin, nemá účinek při testovaných koncentracích.
Příklad 5
Natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát inhibuje TNFa indukci adheze zprostředkovanou VCAM-l/VLA-4
Schopnost různých antioxidantů inhibovat TNFa indukci VCAM-1 v buňkách HUVE se hodnotí způsobem uvedeným v příkladu
4. Obr. 6 je grafem relativní povrchové exprese VCAM-1 buněk (optická hustota, O.D., 595 nmol) v TNFa aktivovaných buňkách HUVE proti daným koncentracím
PDTC (natrium N-pyrrolidindithiokarbamát),
DiDTC (natrium N,N-diethyl-N-karbodithioát),
SarDTC (natrium N-methyl-N-karboxymethyl-N-karbodithioát), IDADTC (trinatriům N,N-di(karboxymethyl)-N-karbodithioát), MGDTC (natrium N-me thy 1,-D-glukamin-N-karbodithioát),
MeOBGDTC (natrium N-(4-methoxybenzyl)-D-glukamin-N-karbodithioát,
DEDTC (natrium N,N-diethyl-N-karbodithioát),
Di-PDTC (natrium N,N-diisopropyl-N-karbodithioát) a
NAC (N-acetylcystein).
Nejméně účinné sloučeniny jsou natrium N-(4-methoxy28 benzyl)-D-glukamin-N-karbodithioát a N-acetylcystein.
Příklad 6
Natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát inhibuje TNFa indukci adheze zprostředkovanou VCAM-l/VLA-4
Ke stanovení, zda natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátem způsobená inhibice VCAM-l regulace je spojena s funkčními důsledky, stanoví se vázání buněk Molt-4 na buňky HUVE bud' nestimulované nebo stimulované 100 jedn./ml TNFa po dobu 6 hodin v přítomnosti nebo nepřítomnosti natrium pyrrolidin-Ndithiokarbamátu. U buněk Molt-4 se předtím ukázalo, že jsou vázány k aktivovaným buňkám HUVE prostřednictvím mechanizmu závislého na VCAM-l. Jak ukazuje obr. 6, procentuální množství buněk Molt-4 vázajících se na buňky HUVE klesá, pokud je v prostředí přítomen natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát .
Příklad 7
Natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát inhibuje monocyt vázající se k hrudní aortě králíků krmených cholesterolem
Pokus se provádí ke stanovení, zda thiolový antioxidant natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát by byl účinný při blokování první složky aterosklerózy vázající monocyt na experimentálním zvířecím modelu. Jeden dospělý bílý králík kmene New Zealand, o hmotnosti 3,5 kg, obdrží intravenozní injekci natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu (20 mg/kg, při koncentraci 20 mg/ml v PBS) jednou denně po dobu 5 dnů. Injekce se podávají prozatímně uloženou kanylou do žíly v okrajové oblasti ucha, která se udržuje přístupná prouděním heparinizovaného fyziologického roztoku. Roztok natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu se míchá čerstvý denně nebo ob den (skladován při ochraně před světlem za teploty 4 °C) a filtruje (póry filtru 0,45 mm) bezprostředně před použitím. Po první injekci, kdy se provede umístění kanyly, se léčivá látky podává králíkovi při vědomí, bez zřejmého neklidu nebo jiných příznaků nemoci. Při injekci v druhý den, králík dostává žrádlo obsahující 1 % hmotnostních cholesterolu a v tom se pokračuje během zbývající části experimentu.
V pátý den se zvíře milosrdně usmrtí a hrudní aorta se vyřízne a fixuje. Po příslušné preparaci se vzorek zobrazí na nižším stupni skanovacího elektronového mikroskopu ISI DS-130, který je vybaven emitorem LaB. Za použití zobrazení s dvojitým stínítkem a transparentní mřížky na stínítku CRT, se 64 sousedícími polemí, se pří 620-násobném zvětšení stanoví, že pokrývá oblast přibližně 1,3 mm2. V každém poli se spočítají a zaznamenají leukocyty (WBC) a erytrocyty (RBC), u kterých došlo k adhezi.
Údaje ze vzorku oblouku jsou tyto: 5 WBC a -25 RBC na
1,3 mm2. Tato úroveň WBC adheze je obdobná jako u kontrolních zvířat krmených běžným žrádlem (v oblouku se pozoruje přibližně 7 případů na oblast a hrudní vzorky ze 2 negativních kontrolních experimentů). Pozitivní kontrolní králíci, krmení 1 % cholesterolu po dobu 4 dnů, avšak bez podávání antioxidantu, projevují přibližně pětinásobné zvýšenou adhezi, odpovídající 38 WBC/1,3 mm2. Značné množství většinou mrtvé tkáně velikosti buněk se pozoruje přilnuté ke každému vzorku oblouku. Není jasné, zda tento materiál vznikl uměle z preparace nebo zda byl přítomen in vivo a pokud by tomu tak bylo, zda toto souvisí s podáváním natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu. Tato studie svědčíí o tom, že infuze natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamátu může účinně blokovat počáteční adhezi monocytů ke výstelce aorty.
III. Farmaceutické prostředky
Lidé a jiní živí tvorové, zvláště savci, trpící kardiovaskulárními chorobami a jinými zánětlivými stavy zprostředkovanými VCAM-1, se mohou ošetřovat tím, že se pacientovi podá účinné množství alespoň jedné z výše vymezených sloučenin nebo jejich farmaceuticky přijatelných derivátů nebo solí, ve farmaceuticky přijatelné nosné látce nebo ředidlu. Aktivní materiály se mohou podávat libovolnou vhodnou cestou, například orálně, parenterálně, intravenózně, intradermálně nebo subkutánně.
Když se zde používá výrazu farmaceuticky přijatelné soli nebo komplexy, tento výraz týká se solí nebo komplexů, které uchovávají požadovanou biologickou aktivitu výše charakterizovaných sloučenin a mají minimální nežádoucí toxikologické účinky. Neomezujícími příklady takových solí jsou (a) adiční soli s kyselinami, vzniklé z anorganických kyselin (například kyseliny chlorovodíkové, kyseliny bromovodíkové, kyseliny sírové, kyseliny fosforečné, kyseliny dusičné a podobně) a soli vzniklé z organických kyselin (například kyseliny octové, kyseliny oxalové, kyseliny vinné, kyseliny jantarové, kyseliny jablečné, kyseliny askorbové, kyseliny benzoové, kyseliny tříslové, kyseliny pamoové, kyseliny alginové, kyseliny polyglutamové, kyseliny naftalensulfonové, kyseliny naftalendisulfonové, kyseliny polygalakturonové, (b) adiční soli s bázemi, vzniklé z polyvalentních kovových kationů, jako je zinek, vápník, bismut, baryum, hořčík, hliník, měd', kobalt, nikl, kadmium, sodík, draslík a podobně, nebo z organických kationů, vzniklých z N,N-dibenzylethylendiaminu, D-glukosaminu, amonia, tetraethylamonia nebo ethylendiaminu nebo (c) kombinací (a) a (b), například zinečnaté soli kyseliny tříšlové a podobně.
Aktivní sloučenina je obsažena ve farmaceuticky přijatelné nosné látce nebo ředidle v množství dostačujícím k dodání terapeuticky účinného množství pacientovi, aniž by se způsobila řada toxických účinků u ošetřovaného pacienta. Výhodná dávka účinné sloučeniny pro všechny výše zmíněné stavy je v rozmezí od přibližně 0,5 do 500 mg/kg, výhodně od 1 do 100 mg/kg za den. Účinné dávkové rozmezí farmaceuticky přijatelných derivátů se může vypočítat na základě hmotnosti základní sloučeniny, která má být uvolněna. Jestliže derivát projevuje sám aktivitu, účinná dávka se může stanovit jako je uvedeno výše, za použití hmotnosti derivátu nebo jiným způsobem známým odborníkovi v oboru.
Sloučenina se obvykle podává v libovolné vhodné formě dávkové jednotky, včetně jednotky s obsahem 1 až 3000 mg aktivní látky, účelně 5 až 500 mg aktivní látky na formu dávkové jednotky, na které však možnosti nejsou omezeny. Orální dávka od 25 do 250 mg je obvykle vhodná.
Aktivní složka by se měla podávat k dosažení vrcholných koncentrací aktivní látky v plasmě od přibližně 0,1 do 100 μιηοΐ, výhodně od přibližně 1 do 10 μιηοΐ. Toho se může dosáhnout například intravenózní injekcí roztoku nebo prostředku aktivní složky, popřípadě ve fyziologickém roztoku nebo vodném prostředí nebo podáním sousta s obsahem aktivní složky.
Koncentrace aktivní sloučeniny v léčivém prostředku bude záviset na absorpci, distribuci, inaktivaci a rychlosti vylučování léčivé látky, stejně jako na jiných okolnostech známých odborníkovi v oboru. Je třeba poznamenat, že hodnota dávky se bude také měnit s obtížností stavu určeného ke zmírnění. Dále je třeba vzít v úvahu, že pro libovolného zvláštního pacienta se specifický režim dávkování může upravit během času podle individuálních potřeb a profesionálního úsudku osoby podávající nebo dohlížející na podání prostředku, a že koncentrační rozmezí se uvádí pouze jako příklady a není zamýšleno jako omezení rozsahu praktického provedení nárokovaných prostředků. Aktivní složka se může podávat najednou nebo rozdělena na řadu menších dávek, určených k podání v pozměněných časových intervalech.
Orální prostředky budou obecně zahrnovat inertní ředidlo nebo poživatelnou nosnou látku. Mohou být zahrnuty do želatinových kapslí nebo slisovány do tablet. Za účelem orálního terapeutického podání se aktivní sloučenina může uvést do těsného styku s pomocnými látkami a používat ve formě tablet, trochet nebo kapslí. Farmaceuticky snášenlivé pojivové prostředky a/nebo pomocné látky se mohou zahrnout jako část prostředku.
Tablety, pilulky, kapsle, trochety a podobné formy mohou obsahovat libovolné z dále uvedených složek nebo sloučenin podobné povahy:
pojivá jako je mikrobiologická celulóza, guma, tragant nebo želatina, excipienty (pomocné látky) jako je škrob nebo laktóza, desintegrační přípravky, jako je kyselina alginová, Primogel nebo kukuřičný škrob, maziva, jako je stearát hořečnatý nebo Sterotes-, látky umožňující klouzání, jako je koloidní oxid křemičitý, sladidla jako je sacharóza nebo sacharin, nebo aromatizační přípravky, jako je mentol, methylsalycilát nebo pomerančové ochucovadlo.
Pokud jednotkovou dávkovou formou je kapsle, může kromě látek výše uvedeného typu obsahovat kapalné nosné látky, jako mastné oleje. Mimo to dávkové jednotkové formy mohou obsahovat různé jiné materiály, které modifikují fyzikální formu jednotkové dávky, například obsahují povlaky z cukru, šelaku nebo jiných poživatelných přípravků.
Aktivní sloučenina nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo derivát se mohou podávat jako složka elixíru, suspenze, sirup, oplatka, žvýkací guma a podobně. Sirup může obsahovat, kromě aktivních sloučenin, cukr jako sladidlo a některé konzervační prostředky, barviva a aromatizační přípravky.
Aktivní sloučenina nebo její farmaceuticky přijatelné deriváty nebo soli se mohou také podávat s jinými aktivními látkami, které nepoškozují požadovaný účinek, nebo s látkami, které doplňují požadovaný účinek, jako jsou antibiotika, antifungální přípravky, protizánětlivé prostředky nebo protivirově účinné sloučeniny. Aktivní sloučeniny se mohou podávat s přípravky snižujícími lipidy, jako je probucol nebo kyseliny nikotinová, inhibitory shlukování krevních destiček, jako je aspirin, antitrombotickými přípravky jako je kumadin, blokátory vápníkových kanálků, jako je varapamil, dilthiazem a nifedipin, angiotensin konvertujícími enzymovovým (ACE) inhibitory, jako je captopril a analopril, a β-blokátory^ jako je propanalol, terbutalol a labetalol. Sloučeniny se také mohou podávat v kombinaci s nesteroidními protizánětlivými prostředky, jako je ibuprofen, indomethacin, aspirin, fenoprofen, kyselina mefanamová, kyselina flufenamová a sulindac.. Sloučenina se může také podávat s kortikosteroidy.
Roztoky nebo suspenze používané pro parenterální, intradermální, subkutánní nebo lokální podání mohou zahrnovat tyto složky:
sterilní ředidlo, jako voda pro injekce, fyziologický roztok, ztužené oleje, polyethylenglykoly, glycerin, propylenglykol nebo jiná syntetická rozpouštědla, antibakteriální přípravy, jako je benzylalkohol nebo methyIparabeny, antioxidanty, jako je kyselina askorbová nebo hydrogensiřičitan sodný, chelatizační činidla, jako je kyselina ethylendiamintetraoctová, pufry, jako jsou octany, citráty nebo fosfáty a prostředky pro úpravu toxicity, jako je chlorid sodný nebo dextróza.
Parenterální prostředky mohou být vneseny do ampulí, injekčních stříkaček k okamžitému použití nebo do lékovek pro větší počet dávek, zhotovených ze skla nebo plastické hmoty.
Pokud se provádí intravenozní podání, výhodné nosné látky jsou fyziologický roztok nebo fyziologický roztok pufrovaný fosfátem (PBS).
Aktivní sloučenina se také může podávat přes transdermální náplast. Způsoby výroby transdermálních náplastí jsou známy odborníkovi v oboru, viz například L. Brown a R. Lanter, Transdermal delivery of drugs, Ann. Rev. Med. 39, 221-229 /1988/.
Při jiném provedení se aktivní sloučeniny budou připravovat s nosnými látkami, které budou chránit sloučeninu proti rychlému vylučování z těla, jako prostředky s řízeným uvolňováním, včetně implantátů z mikroenkapsulovaných uvolňovacích systémů. Mohou se používat biologicky degradovatelné, biologicky snášenlivé polymery, jako ethylenvinylacetát, polyanhydridy, kyselina polyglykolová, kolagen, polyorthoestery a kyselina polymléčná. Způsoby výroby takových prostředků budou zřejmé odborníkovi v oboru. Tyto materiály se také mohou získat na trhu od firem Alza Corporation a Nova Pharmaceuticals, Inc.
Liposomálními suspenzemi mohou být také farmaceuticky přijatelné nosné látky. Ty se mohou připravovat způsoby známými odborníkovi v oboru, viz například US patent č.
522 811. Tak například liposomové prostředky se mohou připravovat rozpuštěním vhodného lipidu nebo vodných lipidů (jako je stearoylfosfatidylethanolamin, stearoylfosfatidylcholin, arachadoylfosfatidylcholin a cholesterol) v anorganickém rozpoštědle, které se potom odpaří a zanechá po sobě tenký film vysušeného lipidu na povrchu zásobníku. Do zásobníku se poté vnese vodný roztok aktivní sloučeniny nebo jejího monofosfátového, difosfátového a/nebo trifosfátového derivátu. Obsah zásobníku se potom rychle rozvíří rukou a dojde k uvolnění volného lipidového materiálu ze stran zásobníku a k dispergování lipidových agregátů, čímž se vytvoří liposomální suspenze.
Modifikace a variace tohoto vynálezu budou zřejmé odborníkovi z oboru z předchozíího podrobného popisu vynálezu. Takové modifikace a variace jsou určeny k zahrnutí do rozsahu připojených patentových nároků.

Claims (20)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Použití derivátu dithiokarbamátu obecného vzorce I
    ASCiSlB (I) kde znamená
    A atom vodíku nebo farmaceuticky vhodný kat ion,
    B skupinu NR2R3, kde znamená
    R2 a R3 na sobě nezávisle skupinu -íCH0H1níCH3)nOH, kde znamená nO, 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6,
    -(CH3)nCO2A, -(CH2)nC02R4, kde znamená
    R4 skupinu alkylovou, arylovou, alkarylovou nebo aralkylovou, hydroxyalkylovou s 1 aš 6 atomů uhlíku v alkylové skupině nebo podílu, nebo
    R2 a R3 na sobě nezávisle alkylovou skupinu s 1 aš 10 atomů uhlíku nebo spolu dohromady můstek, pro výrobu léčiva pro ošetřování kardiovaskulárních chorob lidí .
  2. 2. Poušití podle nároku 1 derivátu dithiokarbamátu obecného vzorce I vybraného ze souboru zahrnujícího natrium pyrrol idiη-N-thiokarbodithioát, natrium N-methyl-N-karboxymethy1-N-karbodithioát, natrium N-methyl-D-glukamin-N-karbodithioát a natr i um N,N-di i sopropy1 -N-karbodi thi oát.
    • ·
    - 37
  3. 3. Použití podle nároku 1 derivátu dithiokarbamátů obecného vzorce T, kde znamená můstek skupinu -(ΌΗ^)»-, kde znamená m 3 až 6.
  4. 4. Použití podle nároku 1 derivátu dithiokarbamátů obecného vzorce I
    ASCÍS1B kde znamená
    A farmaceuticky vhodný kation,
    B skupinu NR2R3, kde znamená
    R2 a R3 na sobě nezávisle skupinu propylovou, isopropylovou, butylovou, isobuty1ovou, terč.-butylovou, pentylovou, cyklopentylovou, isopentylovou nebo hexylovou.
  5. 5. Použití derivátu dithiokarbamátů podle nároku 1, kterým je natrium pyrrolidiη-N-di thi okarbamát.
  6. 6. Použití podle nároku 1, 3 nebo 4 derivátu dithiokarbamátu obecného vzorce I, přičemž farmaceuticky vhodný kation je vybrán ze souboru zahrnujícího sodík, draslík a skupinu obecného vzorce NR4R5R6R7, kde znamená R4, R5, R6 a R7 nezávisle na sobě atom vodíku, přímou, rozvětvenou nebo cyklickou alkylovou skupinu s až 6 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, přičemž na kterémkoliv atomu uhlíku je alespoň jedna hydroxylová skupina nebo arylovou sku·· ·· • · · * • · · · · • ·
    - 38 pinu.
  7. 7. Použití podle nároku 1 aě 6 derivátu dithiokarbamátů obecného vzorce I pro výrobu léčiva pro ošetřování kardiovaskulárních chorob lidí jako je atberoskleróza.
  8. 8. Použití podle nároku 1 až 6 derivátu dithiokarbamátů obecného vzorce I pro výrobu léčiva pro ošetřování kardiovaskulárních chorob lidí jako je postangioplastická restenóza.
  9. 9. Použití podle nároku 1 až 6 derivátu dithiokarbamátů obecného vzorce I pro výrobu léčiva pro ošetřování kardiovaskulárních chorob lidí jako je koronární arteriální choroba.
  10. 10. Použití podle nároku 1 až 6 derivátu dithiokarbamátů obecného vzorce I pro výrobu léčiva pro ošetřování kardiovaskulárních chorob lidí jako je angína pectoris.
  11. 11. Použití podle nároku 1 až 10 derivátu dithiokarbamátů obecného vzorce I pro výrobu léčiva pro ošetřování kardiovaskulárních chorob lidí pro podávání v dávce od 0,5 do 500 mg/kg télesné hmotnosti.
  12. 12. Použití podle nároku 1 až 10 derivátu dithiokarbamátů obecného vzorce T pro výrobu léčiva pro ošetřování kardiovaskulárních chorob lidí pro podávání perfuzní kanylou, opatře• * • · · ·
    - 39 nou balónkem.
  13. 13. Použití podle nároku 1 až 12 derivátu dithiokarbamátů obecného vzorce I pro výrobu léčiva podávaného v kombinaci s farmaceutickým prostředkem ze souboru zahrnujícího prostředek snižující lipidy, inhibitor shlukování krevních destiček, antitrombotický přípravek, b lokátor vápníkových kanálků, angiotensin konvertující enzymový (ACE) inhibitor, betablokátor, nestereoidní proti:aánět 1 ívý prostředek a kortikostero i d.
  14. 14. Použití drivátu dithiokarbamátů obecného vzorce I
    ASCfSlB kde znamená
    A atom vodíku nebo farmaceuticky vhodný kat ion,
    B skupinu NR2R3, kde znamená
    R2 a R3 na sobě nezávisle skupinu -íCH0H1n(CH21n0H, kde znamená η O, 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6,
    -ÍCH2lnCO2A, -(CH2lnCO2R4, kde znamená
    R4 skupinu alkylovou, arylovou, alkarylovou nebo aralkylovou, hydroxyalkylovou s 1 až 6 atomů uhlíku v alkylové skupině nebo podílu, nebo
    R2 a R3 na sobě nezávisle alkylovou skupinu s 1 až 10 atomň uhlíku nebo spolu dohromady můstek, • ·· ··· · φ • · · ·· ·· • · · * pro výrobu léčiva pro ošetřování nekardiovaskulárních zánět1 ivých chorob, které jsou zprostředkovány VCAM-1.
  15. 15. Použití podle nároku 14 derivátu dithiokarbamátu obecného vzorce I vybraného ze souboru zahrnujícího natrium pyrrolidin-N-thiokarbodithioát, natrium N-methyl-N-karboxymethyl-N-karbodithioát, natrium N-methyl-D-glukali η-N-karbodithioát a natrium N,N-di i sopropyl-N-karhodi thi oát.
  16. 16. Použití podle nároku 15 derivátu dithiokarbamátu obecného vzorce T, kterým je natrium pyrrolidiη-N-thiokarbodithioát.
    podle nároku 14 derivátu dithiokarbamátu obeckde znamená můstek kde znamená m 3 podle nároku 14 derivátu dithiokarbamátu obecASCí S)B
    A f armaceut i cky vhodný kat i on.
    B skupinu NR2R3, kde znamená
    R2 a R3 na sobě nezávisle skupinu propylovou, isopropylovou, butylovou, isobutylovou, terč.-butylovou, pentylovou, cyklopentylovou, isopentylovou nebo hexy 1ovou.
  17. 17. Použití nébo vzorce I, až 6.
  18. 18. Použ i t i nébo vzorce kde znamená
    - 41 • · » <
    ** • · « ·· ··
  19. 19. Použití podle nároku 17 derivátu dithiokarbamátu obecného vzorce I. kterým je natrium pyrrolidin-N-dithiokarbamát.
  20. 20. Použití derivátu dithiokarbamátu podle nároku 14, 17 nebo 18 derivátu dithiokarbamátu obecného vzorce I, přičemž farmaceuticky vhodný kation je vybrán ze souboru zahrnujícího sodík, draslík a skupinu obecného vzorce NR4R5R6R7, kde znamená R4, R5, R6 a R7 nezávisle na sobě atom vodíku, přímou, rozvětvenou nebo cyklickou alkylovou skupinu s až 6 atomy uhlíku, hydroxya1kylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, přičemž na kterémkoliv atomu uhlíku je alespoň jedna hydroxylová skupina nebo arylovou skupinu.
CZ951115A 1992-10-30 1993-11-01 Dithiokarbamáty pro ošetřování aterosklerózy a jiných kardiovaskulátních a zánětlivých chorob CZ111595A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/969,934 US5380747A (en) 1992-10-30 1992-10-30 Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ111595A3 true CZ111595A3 (cs) 1998-07-15

Family

ID=25516198

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ951115A CZ111595A3 (cs) 1992-10-30 1993-11-01 Dithiokarbamáty pro ošetřování aterosklerózy a jiných kardiovaskulátních a zánětlivých chorob

Country Status (19)

Country Link
US (2) US5380747A (cs)
EP (1) EP0666741B1 (cs)
JP (1) JP3254486B2 (cs)
AT (1) ATE183089T1 (cs)
AU (1) AU692426B2 (cs)
BG (1) BG62682B1 (cs)
BR (1) BR9307337A (cs)
CA (1) CA2147881C (cs)
CZ (1) CZ111595A3 (cs)
DE (1) DE69326014T2 (cs)
DK (1) DK0666741T3 (cs)
ES (1) ES2136186T3 (cs)
GR (1) GR3031368T3 (cs)
HU (1) HUT73440A (cs)
NO (1) NO951616L (cs)
NZ (1) NZ258683A (cs)
PL (1) PL179113B1 (cs)
SK (1) SK56095A3 (cs)
WO (1) WO1994009772A1 (cs)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5380747A (en) * 1992-10-30 1995-01-10 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5807884A (en) * 1992-10-30 1998-09-15 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5783596A (en) * 1992-10-30 1998-07-21 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5739115A (en) * 1993-10-07 1998-04-14 Glycomed Incorporated Sulfated maltooligosaccharides with heparin-like properties
US5677291A (en) * 1993-12-10 1997-10-14 Hoechst Marion Roussel, Inc. Method of lowering serum cholesterol levels with 2,6-di-alkyl-4-silyl-phenols
DE69535063T2 (de) * 1994-11-30 2006-12-21 Nippon Chemiphar Co. Ltd. Denaturierter low-density lipoprotein (ldl) rezeptor
US20020040008A1 (en) * 1995-01-24 2002-04-04 Wagner Denisa D. Method for treating and preventing atherosclerosis
US5741815A (en) * 1995-06-02 1998-04-21 Lai; Ching-San Methods for in vivo reduction of nitric oxide levels and compositions useful therefor
US6469057B1 (en) * 1995-06-02 2002-10-22 Mcw Research Foundation, Inc. Methods for in vivo reduction of free radical levels and compositions useful therefor
US5792787A (en) * 1995-06-07 1998-08-11 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5747528A (en) * 1996-02-21 1998-05-05 Warner-Lambert Company Chroman derivatives as anti-oxidants
IL126744A0 (en) * 1996-04-30 1999-08-17 Hoechst Marion Roussel Inc Method of inhibiting vascular cell adhesion molecule-1 and treating chronic inflammatory diseases with 2,6-Di-alkyl-4-silyl-phenols
US5795876A (en) * 1996-04-30 1998-08-18 Hoechst Marion Rousssel, Inc. Method of inhibiting vascular cell adhesion molecule-1 and treating chronic inflammatory diseases with 2, 6-di-alkyl-4-silyl-phenols
US5608095A (en) * 1996-04-30 1997-03-04 Hoechst Marion Roussel, Inc. Alkyl-4-silyl-phenols and esters thereof as antiatherosclerotic agents
US5782740A (en) * 1996-08-29 1998-07-21 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Radiation dose delivery catheter with reinforcing mandrel
US5922761A (en) * 1996-09-06 1999-07-13 Medinox, Inc. Methods for in vivo reduction of iron levels and compositions useful therefor
CA2237191A1 (en) * 1996-09-20 1998-03-26 Atherogenics, Inc. Diagnostics for and mediators of inflammatory disorders
US6114572A (en) * 1996-11-20 2000-09-05 Hoechst Marion Roussel, Inc. Substituted phenols and thiophenols useful as antioxidant agents
US6670398B2 (en) * 1997-05-14 2003-12-30 Atherogenics, Inc. Compounds and methods for treating transplant rejection
EA200800375A1 (ru) * 1997-05-14 2008-06-30 Атеродженикс, Инк. Соединения и способы ингибирования экспрессии vcam-1
US6210312B1 (en) 1997-05-20 2001-04-03 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Catheter and guide wire assembly for delivery of a radiation source
US6121463A (en) * 1997-06-24 2000-09-19 Hoechst Marion Roussel, Inc. Alkyl-4-silylheterocyclic phenols and thiophenols useful as antioxidant agents
US6133467A (en) * 1997-06-25 2000-10-17 Hoechst Marion Roussel, Inc. 2,6-di-t-butyl-4-[(dimethyl-4-methoxyphenylsilyl)-methyl-oxy]phenol and 2,6-di-t-butyl-4-[(dimethyl-2-methoxy-phenylsilyl)methyloxy]phenol
AU8282798A (en) * 1997-07-01 1999-01-25 Atherogenics, Inc. Antioxidant enhancement of therapy for hyperproliferative conditions
AU2662899A (en) * 1998-02-13 1999-08-30 Medinox, Inc. Methods for the controlled delivery of carbon disulfide for the treatment of inflammatory conditions
US6224535B1 (en) 1998-02-17 2001-05-01 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Radiation centering catheters
US6093743A (en) * 1998-06-23 2000-07-25 Medinox Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
US6596770B2 (en) 2000-05-05 2003-07-22 Medinox, Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
US20030181495A1 (en) * 1998-06-23 2003-09-25 Medinox, Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
AU4722099A (en) * 1998-06-26 2000-01-17 University Of Washington Inhibition of NF-kappaB mediated tissue injury using dithiocarbamate derivatives
WO2000009118A1 (en) * 1998-08-13 2000-02-24 The Wistar Institute Methods for reducing atherosclerotic plaques
US6589987B2 (en) 1998-09-08 2003-07-08 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using tetraethyl thiuram disulfide
US6706759B1 (en) * 1998-09-08 2004-03-16 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using dithiocarbamate derivatives
US6548540B2 (en) * 1998-09-08 2003-04-15 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using dithiocarbamate derivatives
US7816403B2 (en) * 1998-09-08 2010-10-19 University Of Utah Research Foundation Method of inhibiting ATF/CREB and cancer cell growth and pharmaceutical compositions for same
US6887712B1 (en) 1998-11-09 2005-05-03 Atherogenics, Inc. Methods and compositions to lower plasma cholesterol levels
US6372187B1 (en) 1998-12-07 2002-04-16 Mcdermott Technology, Inc. Alkaline sorbent injection for mercury control
US6284199B1 (en) * 1999-03-31 2001-09-04 Mcdermott Technology, Inc. Apparatus for control of mercury
US6855859B2 (en) * 1999-03-31 2005-02-15 The Babcock & Wilcox Company Method for controlling elemental mercury emissions
US6734192B1 (en) * 1999-08-23 2004-05-11 Mp-1 Inc. Treatment of viral infections
US6605031B1 (en) 1999-09-22 2003-08-12 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Stepped centering balloon for optimal radiation delivery
US6582417B1 (en) 1999-09-22 2003-06-24 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Methods and apparatuses for radiation treatment
US20030130185A1 (en) * 2000-09-29 2003-07-10 David Bar-Or Metal-binding compounds and uses therefor
US7632803B2 (en) * 1999-10-01 2009-12-15 Dmi Life Sciences, Inc. Metal-binding compounds and uses therefor
US7592304B2 (en) * 1999-10-01 2009-09-22 Dmi Life Sciences, Inc. Metal-binding compounds and uses therefor
US20030158111A1 (en) * 1999-10-01 2003-08-21 David Bar-Or Methods and products for oral care
CA2385551A1 (en) 1999-10-01 2001-04-12 Dmi Biosciences, Inc. Metal-binding compounds and uses therefor
US6274627B1 (en) 1999-10-12 2001-08-14 Medinox, Inc. Conjugates of dithiocarbamate disulfides with pharmacologically active agents and uses therefor
CA2396165C (en) * 2000-01-14 2011-01-04 John F. Hunt Airway alkalinization as therapy for airway diseases
US7994449B2 (en) 2000-02-16 2011-08-09 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Square-wave laser bonding
US7163504B1 (en) 2000-02-16 2007-01-16 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Multi-lumen fluted balloon radiation centering catheter
US6710086B1 (en) 2000-02-25 2004-03-23 Medinox, Inc. Protected forms of pharmacologically active agents and uses therefor
CA2403490A1 (en) 2000-03-21 2001-10-25 Atherogenics, Inc. N-substituted dithiocarbamates for the treatment of biological disorders
CA2428753C (en) 2000-11-17 2013-05-21 Idenix (Cayman) Limited Methods for inhibiting the transmission of hiv using topically applied substituted 6-benzyl-4-oxopyrimidines
US7481790B2 (en) * 2000-12-27 2009-01-27 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Vessel enlargement by arteriogenic factor delivery
US20020168396A1 (en) * 2001-02-22 2002-11-14 Ramanan Ramaswami Vasodilator impregnated devices and methods
EP1471931A4 (en) * 2001-08-24 2006-06-14 Maine Medical Ct Res Inst NON-TRADITIONAL EXPORT OF COPPER-DEPENDENT PRO-INFLAMMATORY CYTOKINES AND METHODS, COMPOSITIONS, AND KITS THEREOF
US20030144219A1 (en) 2001-11-15 2003-07-31 Phinney Stephen Dodge Formulations and methods for treatment or amelioration of inflammatory conditions
RU2004121898A (ru) * 2001-12-19 2006-01-20 Атеродженикс, Инк. (Us) Производные халкона и их применение для лечения заболеваний
US7642252B2 (en) * 2002-07-22 2010-01-05 Chemgenex Pharmaceuticals, Inc. Angiogenesis inhibition by cephalotaxine alkaloids, derivatives, compositions and uses thereof
DE10252772A1 (de) * 2002-11-13 2004-05-27 Beiersdorf Ag Verwendung von einem oder mehreren Diethyldithiocarbamaten zur Herstellung von kosmetischen oder dermatologischen Zubereitungen zur Prophylaxe und Behandlung von entzündlichen Hautzuständen und/oder zum Hautschutz bei empfindlich determinierter und trockener Haut
AU2003303239A1 (en) * 2002-12-19 2004-07-14 Atherogenics, Inc. Process of making chalcone derivatives
MXPA05007548A (es) * 2003-01-13 2005-10-20 Atherogenics Inc Procedimiento para preparar esteres y eteres de probucol y derivados del mismo.
US7173129B2 (en) * 2003-06-06 2007-02-06 Athero Genics, Inc. Sulfonamide-substituted chalcone derivatives and their use to treat diseases
US20060025481A1 (en) * 2004-02-09 2006-02-02 Strange Matthew L Process for preparation of probucol derivatives and polymorphic forms thereof
US7294736B2 (en) * 2004-04-09 2007-11-13 Cambrex Charles City, Inc. Process for preparation of probucol derivatives
WO2006004903A2 (en) * 2004-06-28 2006-01-12 Atherogenics, Inc. 1,2-bis-(substituted-phenyl)-2-propen-1-ones and pharmaceutical compositions thereof
US7345191B2 (en) * 2005-02-26 2008-03-18 Cambrex Charles City, Inc. Process for preparation of probucol derivatives
AU2008230861A1 (en) * 2007-03-26 2008-10-02 Salutria Pharmaceuticals, Llc Methods and compositions of derivatives of probucol for the treatment of diabetes
US20080280985A1 (en) * 2007-03-27 2008-11-13 Scott Robert A D Methods and Compositions Using Certain Phenolic Derivatives for the Treatment of Diabetes
EP2146690B1 (en) * 2007-04-13 2018-03-21 Teva Pharmaceuticals International GmbH Oral cephalotaxine dosage forms
EP2139465B1 (en) * 2007-05-03 2012-09-26 Ramot at Tel-Aviv University Ltd. Composition comprising s-allylmercapto-n-acetylcysteine (assnac) for up-regulation of cellular glutathione level
EP2167681B1 (en) * 2007-07-03 2013-01-16 Joslin Diabetes Center, Inc. Treatment of cardiovascular disease with salicylates

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3875170A (en) * 1971-05-25 1975-04-01 Banyu Pharma Co Ltd Pyridine bis (dithiocarbamate) derivatives
US4025527A (en) * 1973-07-13 1977-05-24 Smith Kline & French Laboratories Limited Certain thiazoles and oxazoles
GB1542840A (en) * 1975-02-03 1979-03-28 Smith Kline French Lab Heterocyclic dithiocarbamates and isothioureas
US4670471A (en) * 1981-11-03 1987-06-02 Clark Lealand L Treatment for inflammatory skin disease
US4522811A (en) * 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
GB8421039D0 (en) * 1984-08-17 1984-09-19 Wyeth John & Brother Ltd Heterocyclic compounds
IL79289A (en) * 1985-07-05 1992-01-15 Whitehead Biomedical Inst Introduction and expression of foreign genetic material into keratinocytes using a recombinant retrovirus
US4980286A (en) * 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
US4870101A (en) * 1987-03-17 1989-09-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting interleukin-1 release
EP0284879A3 (en) * 1987-03-17 1990-10-17 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting interleukin-1 release
US5035878A (en) * 1988-09-12 1991-07-30 University Of Rochester Use of dithiocarbamates to counteract myelosuppression
US5166133A (en) * 1991-04-17 1992-11-24 Cetus Corporation Method for inhibing adhesion of white blood cells to endothelial cells
JPH07501204A (ja) * 1991-06-28 1995-02-09 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 局所的オリゴヌクレオチド療法
FR2679452B1 (fr) * 1991-07-22 1993-11-12 Cis Bio International Produit radiopharmaceutique ayant notamment un tropisme cerebral, comportant un complexe nitruro d'un metal de transition, et son procede de preparation.
US5206264A (en) * 1991-11-04 1993-04-27 Cypros Pharmaceutical Corporation Use of disulfiram to prevent cardiovascular damage
US5306724A (en) * 1992-08-17 1994-04-26 Clintec Nutrition Company Method for preventing and treating atherosclerosis
US5380747A (en) * 1992-10-30 1995-01-10 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5807884A (en) * 1992-10-30 1998-09-15 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases

Also Published As

Publication number Publication date
AU692426B2 (en) 1998-06-11
HUT73440A (en) 1996-07-29
DE69326014D1 (de) 1999-09-16
NO951616D0 (no) 1995-04-27
US5380747A (en) 1995-01-10
WO1994009772A1 (en) 1994-05-11
JPH08506798A (ja) 1996-07-23
PL308673A1 (en) 1995-08-21
BG99604A (bg) 1996-02-28
PL179113B1 (pl) 2000-07-31
ES2136186T3 (es) 1999-11-16
CA2147881A1 (en) 1994-05-11
JP3254486B2 (ja) 2002-02-04
CA2147881C (en) 1999-09-07
DE69326014T2 (de) 1999-12-23
AU5665394A (en) 1994-05-24
SK56095A3 (en) 1996-06-05
US5877203A (en) 1999-03-02
DK0666741T3 (da) 1999-12-06
HU9501229D0 (en) 1995-06-28
EP0666741A1 (en) 1995-08-16
NZ258683A (en) 1999-08-30
GR3031368T3 (en) 2000-01-31
BR9307337A (pt) 1999-05-25
EP0666741B1 (en) 1999-08-11
ATE183089T1 (de) 1999-08-15
NO951616L (no) 1995-04-27
BG62682B1 (bg) 2000-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ111595A3 (cs) Dithiokarbamáty pro ošetřování aterosklerózy a jiných kardiovaskulátních a zánětlivých chorob
US5807884A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5783596A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5792787A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
KR101823275B1 (ko) 전립선 암종의 치료를 위한 병용 요법
CZ301313B6 (cs) Lécivo pro lécení zánetlivého onemocnení
KR20010020611A (ko) 항산화제에 의한 과증식질병 치료의 향상
US20180214402A1 (en) Compositions and methods for treating cancer
WO1999051223A1 (en) Benzoquinoid ansamycins for the treatment of cardiac arrest and stroke
US20070003558A1 (en) Methods for the treatment of multiple myeloma
US20230014055A1 (en) Treatment of Immune-Related Disorders, Kidney Disorders, Liver Disorders, Hemolytic Disorders, and Oxidative Stress-Associated Disorders Using NRH, NARH and Reduced Derivatives Thereof
AU3795199A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
WO2002036133A1 (en) New use

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic