CS265224B2 - Process for preparing tissue grow regulator - Google Patents

Abstract

A preparation for tissue growth regulation comprises (a) at least one of, an N-acetyl-D-glycosamine or an oligomer thereof or a deacetylated derivative thereof or a substituted product of these compounds, (b) at least one of biotin or an analogue or derivative of biotin or biologically active residue thereof, and (c) a divalent metal cation together with a pharmaceutically acceptable anion.

Description

Vynález se týká způsobu přípravy přípravku pro řízení růstu tkání u lidi a zvířat. Především se vynález týká způsobu přípravy skupiny fyziologicky účinných přípravků, jejichž alespoň jedna složka promotuje, zatímco jiná složka inhibuje růst jak normálních, tak abnormálních tkání. Přípravky, připravené způsobem podle vynálezu, tak (a) podporují růst normální tkáně к urychlení normálních regeneračních funkcí a (b) potlačují nežádoucí růst tkání jak benigních, jako při fibroze spojené s nadbytečným vytvářením jizev, tak chybných například při rakovinových nebo jiných maligních změnách.The invention relates to a method of preparing a composition for controlling tissue growth in humans and animals. In particular, the invention relates to a process for the preparation of a group of physiologically active formulations whose at least one component promotes, while the other component inhibits the growth of both normal and abnormal tissues. The formulations of the present invention thus (a) promote normal tissue growth to accelerate normal regenerative functions, and (b) suppress unwanted tissue growth, both benign, such as fibrosis associated with excessive scarring, and defective, for example, cancer or other malignant changes.

Bylo vynaloženo mnoho úsilí na omezení růstu rostlin, nic z toho však není použitelné pro živočišné tkáně. Výzkumy požadavků pro růst buněk živočišného původu (včetně lidských buněk) se zaměřují v principu na růst tkáně technikou usnadňující studium růstu buněk izolovaných za laboratorních podmínek. Použilo se různých růstových faktorů к podpoře proliferace buněk běžně za použití extraktů poměrně surové povahy odebraných z celých orgánů například z myší slinné žlázy nebo z krysích jater. Takové růstové faktory nemají použitelnost pro systemické použití v nedotčených živočiších nebo v případě nedotčených lidí. Například riboflavin se považuje za růstový faktor pro krysy, lipoidní kyselina slouží jako růstový faktor pro určité mikroorganismy a biotin slouží jako růstový faktor pro kvasinky a pro určité bakterie. Glycel-histidy1-lysin a růstový hormon podvěsku mozkového jsou dvě chemicky charakterizované čisté látky se vlivem na růst, přičemž glycyl-histidy1-lysin ovlivňuje růst v kultuře izolovaných jaterních buněk a růstový hormon podvěsku mozkového ovlivňuje růst těla jako celku. Žádn z těchto růstových faktorů nebyl označen jako užitečný pro opravu a regeneraci tkáně a zcela se liší od přípravků, připravovaných způsobem podle vynálezu.Much effort has been made to limit the growth of plants, but none of this is applicable to animal tissues. Research on the requirements for the growth of cells of animal origin (including human cells) focuses in principle on tissue growth by a technique facilitating the study of cell growth isolated under laboratory conditions. Various growth factors were used to promote cell proliferation routinely using extracts of relatively crude nature taken from whole organs, for example, from the salivary gland or rat liver. Such growth factors have no utility for systemic use in intact animals or in intact humans. For example, riboflavin is considered a growth factor for rats, lipoid acid serves as a growth factor for certain microorganisms, and biotin serves as a growth factor for yeast and for certain bacteria. Glycel-histidy1-lysine and pituitary growth hormone are two chemically characterized growth-enhancing pure substances, with glycyl-histidy1-lysine affecting growth in isolated liver cell culture and pituitary growth hormone affecting the growth of the body as a whole. None of these growth factors has been reported to be useful for tissue repair and regeneration and is completely different from the formulations prepared by the method of the invention.

U špatně živených pacientů systémové podávání aminokyselin má, jak známo, podpůrný význam při hojení ran avšak pouze při léčení zjištěného nedostatku aminokyselin.In poorly fed patients, systemic administration of amino acids is known to have a supportive role in wound healing but only in the treatment of established amino acid deficiency.

Fyzikální a fyzikálně chemické způsoby jako používání magnetického pole nebo pulsačních elektrických proudů pro lokalizoavnou stimulaci ran má toliko současný módní význam.Physical and physicochemical methods such as the use of magnetic fields or pulsating electric currents to locally stimulate wounds are of current fashionable significance.

Inhibice pozměněných nebo maligních buněk chemickými prostředky je nyní běžnou praxí a je účinná, přičemž je příznivý poměr citlivosti mezi maligními buňkami nádoru a normálními buňkami postiženého; za chybění jakéhokoliv selektivnějšího způsobu řízení jsou tyto cytotoxické látky v současné době široce používány; avšak jejich toxicita a následný vysoký výskyt vedlejších účinků vedou к mimořádné potřebě vyvinout zlepšenou fysiologickou nebo chemickou kontrolu nežádoucích buněk.Inhibition of altered or malignant cells by chemical means is now common practice and is effective, with a favorable ratio of sensitivity between malignant tumor cells and normal cells of the affected; in the absence of any more selective mode of control, these cytotoxic agents are currently widely used; however, their toxicity and the consequent high incidence of side effects lead to an extraordinary need to develop improved physiological or chemical control of unwanted cells.

Kortison a jeho deriváty jsou účinné při omezování nadměrného vytváření tkáně, ke kterému může docházet při některých typech poškození, v mnoha případech popálenin a po některých zánětlivých onemocnění kloubů. Avšak používání kortisonu zahrnuje značné nebezpečí vedlejších účinků.Cortisone and its derivatives are effective in reducing excessive tissue formation, which can occur in some types of lesions, in many cases of burns and after some inflammatory joint diseases. However, the use of cortisone involves a considerable risk of side effects.

Dřívější práce autorů vynálezu (Nátuře, 199, str. 4 991; 392; 1963) doložily, že výše účinnosti enzymu N-acetyl-D-glukosaminidazy je v úzkém vztahu, který se může označit jako reaktivita к různým chorobným procesům. Tento vztah existuje za tak Širokého okruhu podmínek, že se usuzuje na jeho mnohem významnější úlohu, než jaká je známa pro N-acetyl-D-glukosamin (NAG) a snad pro další N-acetyl-D-glukosaminy. N-acetyl-D-glukosaminové (2-acetamido-2-deoxy-D-glukozové) zbytky jsou siřeji přítomny ve vázané formě v přírodě než D-galaktosamin.Previous work by the inventors (Nature, 199, p. 4,991; 392; 1963) has shown that the potency of the enzyme N-acetyl-D-glucosaminidase is in a close relationship, which may be referred to as reactivity to various disease processes. This relationship exists under such a wide range of conditions that it is considered to play a much more important role than is known for N-acetyl-D-glucosamine (NAG) and perhaps for other N-acetyl-D-glucosamines. N-acetyl-D-glucosamine (2-acetamido-2-deoxy-D-glucose) residues are more widely present in bound form in nature than D-galactosamine.

V práci Processes in Pathology (Procesy v patologii) (Taussig M. J.) publikované v roce 1979 v publikaci Blaskwell Scientific Publications na str. 267 až 270 se v diskusi především zaměřené na aktivitu lektinů odkazuje na N-acety1-D-gluk.osamin při studiu růstu buněk. Připomínají se pokusy vztahující se na použití N-acetyl-D-glukosaminu při studiu růstu buněk. V jednom případě se N-acetyl-D-glukosaminu používá ve formě jeho dimeru di-N-acetylchitobiosy vázané na proteinový nosič se záměrem preimunizace myši proti lethálnímu vlivu transplantovaného tumoru s omezeným úspěchem. Při jiné inhibici růstu nádorových buněk ošetřením monovalentním lektinem к pokrytí povrchu agglutinační místa ,'N-acetyl-D-glukosaminové zbytky) osvědčily reverzibilitu přidáním nadbytku volného N-acetyl-D-glykosaminu.In Processes in Pathology (Taussig MJ) published in 1979 in Blaskwell Scientific Publications at pp. 267-270, in a discussion primarily focused on lectin activity, reference is made to N-acetyl-D-gluc.osamine in the study cell growth. Experiments relating to the use of N-acetyl-D-glucosamine in the study of cell growth are recalled. In one case, N-acetyl-D-glucosamine is used in the form of its protein carrier-bound dimer of di-N-acetylchitobiosis to pre-immunize the mouse against the lethal effect of a transplanted tumor with limited success. In another inhibition of tumor cell growth by treatment with a monovalent lectin to cover the surface of the agglutination site, N-acetyl-D-glucosamine residues) have proven reversibility by addition of excess free N-acetyl-D-glycosamine.

Na tomto poli pracovali aktivně také jiní pracovníci; například v začátku šedesátých let Levvy a kolektiv ve výzkumném ústavu Rowett Research Institute doložili, že konverze na lakton glykosidu, který tvoří substrát pro glykosidasu, by mohla specificky inhibovat uvažovanou glykosidasu. Na neštěstí jsou tyto laktony stálé toliko za přísně kontrolovaných Laboratorních podmínek. Pokusy pro jejich terapeutické použití se proto nesledovaly.Other workers also worked actively in this field; for example, in the early 1960s, Levvy et al. at the Rowett Research Institute demonstrated that conversion to the lactone glycoside, which is a substrate for glycosidase, could specifically inhibit the glycosidase under consideration. Unfortunately, these lactones are stable only under strictly controlled laboratory conditions. Experiments for their therapeutic use have therefore not been observed.

Nyní se podle vynálezu s překvapením 2jistilo, že N-acetyl-D-glukosaminy a jejich oligomery a deriváty obou tříd sloučeniny mohou mít důležitý a dosud nepoznaný podíl na procesech léčení a hojení a invaze a proliferace maligních buněk. Koncept inhibice N-acetyl-D-glukosam.inidas a N-acetyl-D-g]ukosaminidasy specificky za fyziologických podmínek otvírá nové možnosti, jak pro řízení léčení a hojení tak pro omezování rakovinového růstu.It has now surprisingly been found according to the invention that N-acetyl-D-glucosamines and their oligomers and derivatives of both classes of compound can play an important and yet unknown role in the processes of treatment and healing and the invasion and proliferation of malignant cells. The concept of inhibition of N-acetyl-D-glucosaminoidase and N-acetyl-D-gososaminidase specifically under physiological conditions opens up new possibilities both for controlling treatment and healing and for limiting cancer growth.

Podle vynálezu se přípravek pro regulaci růstu tkání vyrábí tak, že se připraví roztok obsahující N-acetyl-D-glukosamin nebo jeho oligomer nebo jeho deacetylovaný derivát, biotin 2+ 2+ 2 + 2 + a dvojmocný kovový kation vybraný ze skupiny zahrnující Mg ' , Ca a Mn , s výhodou Mg , spolu s farmaceuticky vhodným aniontem, připravený roztok se udržuje při zvýšené teplotě 50 až 80 °C po dobu tří dnů a pak se kapalina suší vymražováním.According to the invention, a tissue growth regulating composition is produced by preparing a solution comprising N-acetyl-D-glucosamine or an oligomer thereof or a deacetylated derivative thereof, biotin 2+ 2+ 2 + 2 + and a divalent metal cation selected from the group consisting of Mg ' Ca and Mn, preferably Mg, together with a pharmaceutically acceptable anion, the prepared solution is maintained at an elevated temperature of 50 to 80 ° C for three days, and then the liquid is freeze-dried.

Roztok může obsahovat pufrovací soli. Jakožto roztok je přípravek vhodný pro parenterální nebo pro orální podávání.The solution may contain buffer salts. As a solution, the formulation is suitable for parenteral or oral administration.

Přípravek podle vynálezu se může připravovat v pevné formě pro orální nebo rektální podávání; v tomto případě se formuluje jako tablety, kosočtverečné pastilky nebo čípky. Nebo se může vyrábět ve formě prášku nebo jako zapouzdřené roztoky nebo emulze pro orální podávání nebo pro použití pro další zpracování na přípravky a pro podávání jako vstřikovací roztok. Dále se mohou používat pro místní nanášení ve vhodných neutrálních masťových základech.The composition of the invention may be prepared in solid form for oral or rectal administration; in this case it is formulated as tablets, lozenges or suppositories. Alternatively, it may be manufactured in powder form or as encapsulated solutions or emulsions for oral administration or for further processing into formulations and for administration as an injection solution. They can also be used for topical application in suitable neutral ointment bases.

Způsob výroby ovlivňuje vlastnosti přípravku. Například se směsi mohou aktivovat jejich podrobováním po různou dobu a za různých podmínek zahřívání a sušení nebo částečnému sušení vedoucích к bezprostřednímu získání krystalického a doprovodného materiálu nerozpustného přičemž ostatní materiály zůstávají v roztoku nebo v sirupovité formě. Materiály, doprovázející biotin na jedné straně a materiály zůstávající v roztoku po takovém vysrážení a pak izolované ve formě sirupu nebo ve vysušené formě na druhé straně, mají oddělené biologické aktivity, jak bude dále uvedeno. Biologické účinnosti se může také dosáhnout, jestliže koncentrace biotinu a periody a podmínky zahřívání a sušení nebo parciálního sušení jsou voleny tak, aby se předešlo shora uvedenému vysrážení. Aktivita je pak spojena s materiálem bud zbylým v roztoku nebo produkovaném v sirupu nebo ve vysušené formě z takového roztoku. Tyto různé materiály ovlivňují účinnost N-acetyl-D-glukosaminidasy a jejich dvou hlavních enzymů А а В. V závislosti na přesném způsobu přípravy materiálů se může podporovat nebo inhibovat enzym jako celek nebo jeho А а В isozymy jednotlivě nebo zároveň. Inhibice se může provádět aby byla bud konkurenční nebo nekonkurenční. Proto způsob přípravy může ovlivňovat celkovou hladinu N-acetyl-D-glukosaminidasové aktivity v těle a rovněž měnit proporcionální působení na dva hlavní isoenzymy. Tím, že je tomu tak, přípravek se jeví jako napodobující reakce těla na četné chorobné procesy, například v odezvě na odmítání cizích tkání, na zánět a na malignanci.The method of manufacture affects the properties of the formulation. For example, the compositions may be activated by subjecting them to varying times and under different heating and drying conditions or partial drying resulting in immediate recovery of the crystalline and accompanying material insoluble while the other materials remain in solution or in syrup form. The materials accompanying biotin on the one hand and the materials remaining in solution after such precipitation and then isolated in the form of a syrup or in the dried form on the other hand have separate biological activities, as discussed below. Biological efficacy can also be achieved if the concentration of biotin and the period and the heating and drying or partial drying conditions are selected to avoid the above precipitation. The activity is then associated with the material either remaining in solution or produced in syrup or in dried form from such a solution. These different materials affect the efficacy of N-acetyl-D-glucosaminidase and their two major enzymes А а В. Depending on the precise method of preparation of the materials, the enzyme as a whole or its а isozymes individually or simultaneously may be promoted or inhibited. The inhibition may be performed to be either competitive or non-competitive. Therefore, the preparation process can affect the overall level of N-acetyl-D-glucosaminidase activity in the body and also change the proportional action to the two major isoenzymes. By doing so, the preparation appears to mimic the body's response to numerous disease processes, for example in response to rejection of foreign tissues, inflammation, and malignancy.

Pro usnadnění pochopení se vynález nyní popisuje se zřetelem na jeden glykosamin, N-acetyl-D-glukosamin, pracovníkům v oboru bude však zřejmé, že způsoby přípravy jsou použitelné pro analogické sloučeniny a získané biologické působení se bude měnit v závislosti na enzymu nebo na buněčném systému zkoumaném nebo na‘terapii.For ease of understanding, the invention is now described with respect to one glycosamine, N-acetyl-D-glucosamine, but it will be apparent to those skilled in the art that the methods of preparation are useful for analogous compounds and the biological activity obtained will vary depending on the enzyme or cellular system under investigation or therapy.

N-acetyl-D-glukosamin sám má stimulační působení na chránicí buňky v těle a zdá se, že přípravek, připravovaný způsobem podle vynálezu, představuje nové a selektivní prostředky к ovlivnění tělového imunního mechanismu. Účinné složky se mohou podávat ústy nebo vstřikováním bud samotné nebo včleněné do fyziologicky vhodných tekutin nebo pevných látek nebo do jakýchkoliv jiných farmaceuticky vhodných nosičů nebo adjuvantů. Jakkoliv není záměrem vázat působení prostředku na jakoukoliv teorii, úlohou aktivních složek může být selektivní blokování nebo neblokování aktivních míst v účasti enzymů na růstu tkání nebo buněk.N-acetyl-D-glucosamine itself has a stimulating effect on protective cells in the body, and the formulation prepared by the method of the invention appears to provide novel and selective means for influencing the body's immune mechanism. The active ingredients may be administered orally or by injection, either alone or incorporated into physiologically acceptable liquids or solids, or into any other pharmaceutically acceptable carrier or adjuvant. While not intending to be bound by any theory, the role of the active ingredients may be to selectively block or not block the active sites from the involvement of enzymes in tissue or cell growth.

Tak může docházet к působení na místa povrchu buněk zodpovědná pro funkce takových buněčných specificit nebo pro transport živin a hormonů. Je známo, že taková místa abnormálně fungují v rakovinových buňkách a jsou rovněž ovlivňována viry a snad jinými infekcemi.Thus, cell surface sites responsible for the functions of such cell specificities or for the transport of nutrients and hormones may occur. Such sites are known to function abnormally in cancer cells and are also affected by viruses and possibly other infections.

Přípravek, připravený způsobem podle vynálezu, je použitelný (a) pro omezení proliferace, růstu a agresivností maligních buněk; (b) pro regulaci hladiny aktivity buněk zahrnuté v opravě tkání po poškození nebo zánětu s podporou uzdravování, přičemž zároveň kontroluje jakýkoliv sklon jednoho hlediska hojení к potlačení jiného, například kontroluje nadprodukci kolagenu fibroblasty vedoucí к vytváření hypertropní jizvy s následujícím kosmetickým nebo funkčním poškozením a (c) stimuluje hojení, kde je netečný, jako například v pokročilém věku v případech trpících velmi váznou infekcí.The composition prepared by the method of the invention is useful (a) for limiting the proliferation, growth and aggressiveness of malignant cells; (b) for regulating the level of cell activity involved in repairing tissues after injury-assisted or inflammatory inflammation, while controlling any tendency of one aspect of healing to suppress another, e.g. c) stimulates healing where it is inert, such as in old age in cases of very severe infection.

Vynález nyní blíže objasňuje následující příklady a hodnoty naznačující výhodné způsoby přípravy a biologické působení pozorované u přípravků připravených způsobem podle vynálezu.The invention will now be further elucidated by the following examples and values indicating the preferred methods of preparation and biological activity observed in the formulations prepared by the process of the invention.

Příklad 1Example 1

Způsob přípravy (a) přípravku pro použití při stimulaci hojení a (b) přípravku pro omezování maligních buněk (a) Rozpustí se ve vodě 3,23 g N-acetyl-D-glukosaminu, 200 mg biotinu, 375 mg kaliumdihydroqenfosfátu a 1,8 g sulfátu horečnatého к získání 100 ml roztoku, který se udržuje na teplotě 55 °C v uzavřené nádobě po dobu 72 hodin. Obsah se pak ochladí a udržuje se právě nad teplotou tuhnutí. V průběhu dalších 24 hodin se oddělí hlavní krystalický nános. Odstraní se odstředěním a pevný podíl se promyje vodou nebo ethanolem. Pevný podíl nemá žádné významné inhibiční působení na N-acetyl-D-glukosaminidasu, výrazně však ovlivňuje, podporuje působení na jeho B-isoenzym. Pevný podíl je nerozpustný ve vodě, je však rozpustný v lipidech. Po ošetření pacientů s oblastmi odolávajícími hojení pevným podílem se pozoruje rychlá regenerace pokožkových buněk. Shora uvedeným postupem se tedy získají prostředky stimulující hojení.Process for preparing (a) a preparation for use in stimulating healing and (b) a malignant cell suppressant (a) Dissolve in water 3.23 g of N-acetyl-D-glucosamine, 200 mg of biotin, 375 mg of potassium dihydrogen phosphate and 1.8 g of magnesium sulfate to obtain 100 ml of a solution which is maintained at 55 ° C in a sealed vessel for 72 hours. The contents are then cooled and kept just above the freezing point. Within a further 24 hours, the main crystalline deposit is separated. Remove by centrifugation and wash the solid with water or ethanol. The solid has no significant inhibitory action on N-acetyl-D-glucosaminidase, but has a significant effect, promoting the action on its B-isoenzyme. The solid is insoluble in water, but is soluble in lipids. Rapid treatment of skin cells is observed after treatment of patients with areas resistant to solid wound healing. Thus, the above-described process provides healing stimulants.

(b) Supernatant, zbylý po oddělení pevného materiálu, jak shora popsáno, se vrátí do uzavřené nádoby a inkubuje se. Pak se usuší vymražováním. Vzniklý materiál vykazuje specificky nekonkurenční typ inhibice jak A tak В isozymů N-acetyl-D-glukosaminidasy. Jestliže se přidá do tkáňových kultur maligních buněk, jako Landschutzových buněk nebo Hela buněk, produkuje řadu jevů závisejících na dávce, včetně destrukce buněčného normálního antiadhezivního mechanismu a inhibice růstu. Vede rovněž к fragmentaci buněk a tak ke vzniku mnoha neživých subcelulárních fragmentů. Při podání pacientům s terminální malignancí omezuje agresivitu maligního procesu a zvyšuje přežití bez jiné terapie mající prognózu danou normálními způsoby.(b) The supernatant remaining after separation of the solid material as described above is returned to a sealed container and incubated. It is then freeze-dried. The resulting material exhibits a specifically non-competitive type of inhibition of both the A and N isozymes of N-acetyl-D-glucosaminidase. When added to tissue cultures of malignant cells, such as Landschutz cells or Hela cells, it produces a number of dose-dependent events, including destruction of the cellular normal anti-adhesion mechanism and growth inhibition. It also leads to cell fragmentation and thus to the formation of many inanimate subcellular fragments. When administered to patients with terminal malignancy, it reduces the aggressiveness of the malignant process and increases survival without other therapy having a prognosis given by normal methods.

Příklad 2Example 2

Způsob přípravy přípravku pro regulaci hladiny aktivity buněk zahrnutých do obnovy tkáně po poškození nebo zánětuA method of preparing a composition for regulating the level of activity of cells involved in tissue recovery after damage or inflammation

Ve vodě se rozpustí 3,2 g N-acetyl-D-glukosaminu, 10 mg biotinu, 375 mg kaliumdihydrogenfosfátu a 1,8 g sulfátu horečnatého к získání 100 ml roztoku, který se vnese do uzavřené nádoby a udržuje se na teplotě 70 az 80 °C po dobu 72 hodin. Vzniklý roztok se ochladí a suší se vymražováním. Získaný materiál vykazuje nekonkurenční specifickou inhibici A isozymu N-acetyl-D-glukosaminidasy a různý stupeň konkurenční inhibice toliko В isozymu.Dissolve 3.2 g of N-acetyl-D-glucosamine, 10 mg of biotin, 375 mg of potassium dihydrogen phosphate and 1.8 g of magnesium sulfate in water to obtain a 100 ml solution which is placed in a sealed vessel and maintained at 70-80 ° C. ° C for 72 hours. The resulting solution was cooled and freeze-dried. The material obtained exhibits a non-competitive specific inhibition of the A-isozyme N-acetyl-D-glucosaminidase and a different degree of competitive inhibition only in the isozyme.

Přidání materiálu do kultur fibroblastů vyvolává na velikosti dávky závislou přibližně 50 % inhibici fibroblastové proliferace bez usmrcení buněk. Při podání závodním koním s čerstvou ránou vede ke snížení otoku a usnadňuje návrat do zdravého stavu. Při studiu dlouhodobé terapie se prostředek podával ve 47 případech 35 koním trpícím hlavně poškozením flexorové šlachy přední nohy, což vede často к trvalé neschopnosti, někdy do takové míry, že je nutná porážka. Všech 35 koní se vrátilo na závodiště, obvykle ve zdratovním stavu jako před zraněním.Addition of the material to fibroblast cultures induces a dose-dependent approximately 50% inhibition of fibroblast proliferation without cell killing. When administered to racing horses with a fresh wound, it reduces swelling and makes it easier to return to a healthy state. In the study of long-term therapy, the composition was administered in 47 cases to 35 horses suffering mainly from damage to the flexor tendon of the foreleg, which often leads to permanent disability, sometimes to the extent that slaughter is required. All 35 horses returned to the racetrack, usually in a prone state as before injury.

Systémové použití u lidí se může očekávat, jsou však třeba další doklady netoxičnosti. Avšak topické použití účinné látky v neutrálním máslovém základu za kontroly konzultanta plastické chirurgie vykázalo schopnost řídit nadměrné vytváření jizvové tkáně.Systemic use in humans can be expected, but additional evidence of non-toxicity is required. However, the topical use of the active ingredient in a neutral butter base under the control of a plastic surgery consultant has shown the ability to control excessive scar tissue formation.

Claims (7)

PŘEDMĚT VYNÁLEZUSUBJECT OF THE INVENTION 1. Způsob výroby přípravku pro regulaci růstu tkáně, vyznačený tím, že se připraví roztok obsahující N-acety1-D-glukosamin nebo jeho oligomer nebo jeho deacetylovaný derivát,A process for the preparation of a tissue growth regulating composition comprising preparing a solution comprising N-acetyl-D-glucosamine or an oligomer thereof or a deacetylated derivative thereof, 2+ 2+ 2+ biotin a dvojmocný kovový kation vybraný ze skupiny zahrnující Mg , Ca a Mn spolu s farmaceuticky vhodným aniontem, připravený roztok se udržuje při zvýšené teplotě 50 až 80 °C po dobu tří dnů a pak se kapalina suší vymražováním.2+ 2+ 2+ biotin and a divalent metal cation selected from the group consisting of Mg, Ca and Mn together with a pharmaceutically acceptable anion, the prepared solution is maintained at an elevated temperature of 50-80 ° C for three days, and then the liquid is freeze-dried. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se roztok před sušením vymražováním ochladí na teplotu právě nad teplotou tuhnutí roztoku a vytvořený krystalický podíl se oddělí jakožto další účinná látka pro regulaci růstu tkání.2. A process according to claim 1, characterized in that the solution is cooled to a temperature just above the freezing point of the solution prior to freeze-drying and the crystalline fraction formed is separated as another active substance for controlling tissue growth. 3. Způsob podle bodu 2, vyznačený tím, že se kapalina zbylá po oddělení krystalického podílu inkubuje před vymražovacím sušením pro získání prostředku к regulaci růstu tkání.3. A method according to claim 2, characterized in that the liquid remaining after separation of the crystalline fraction is incubated prior to freeze-drying to obtain a tissue growth regulating agent. 4. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se roztok udržuje na teplotě 50 až 60 °C.4. The method of claim 1, wherein the solution is maintained at a temperature of 50-60 ° C. 5. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se roztok udržuje na teplotě 70 až 80 °C.5. The method of claim 1, wherein the solution is maintained at a temperature of 70-80 ° C. 6. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se ochlazený roztok odstředí po stání v ochlazeném stavu po dobu až 24 hodin к získání krystalického podílu.6. The process of claim 1, wherein the cooled solution is centrifuged after standing in the cooled state for up to 24 hours to obtain a crystalline fraction. 7. způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že roztok obsahuje jako dvojmocný kovový kation Mg²⁺.7. The process of claim 1, wherein the solution contains Mg2 ⁺ as a divalent metal cation.