CS207383B2 - Method of transitory protection of the carboxyle groups in the organic carboxyle acids - Google Patents

Abstract

The esterification of carboxylic acids with .beta.-silyl-ethyl alcohols of the formula (I)-OH!, in which each of R1, R2 and R3 independently represents a hydrocarbon radical and the individual radicals can be linked a single C-C bond,gives corresponding novel esters, the .beta.silylethyl ester group of which can be split off, with liberation of the carboxyl group, by treatment with a salt of hydrofluoric acid, especially a fluoride of a quaternary organic base. Sincc these conditions are very mild and specific, ester groups of this type are suitable as carboxyl protective groups, especially in polyfunctional compounds, such as steroids, prostaglandines, .beta.-lactam compounds and, above all, aminoacids and peptides, in which the other functional groups, including other carboxyl groups, can be protected in a conventional manner.

Description

Vynález se týká způsobu přechodné ochrany karboxylových'skupin v organických karboxylových kyselinách za použití beta-silylethylové skupiny parciálního vzorce I,The invention relates to a process for the temporary protection of carboxyl groups in organic carboxylic acids using the beta-silylethyl group of partial formula I,

R^{* 1 1} R ^{* 1 1}

R^á - Si - CH₉ - CH₉ - (I) ^!3R ^a - Si - CH ₉ - ₉ CH - ^(I)! 3

R^J v němž ’R ^J in which '

R¹, R² a R^ znanennjí n^áá^ele na soté alkylový zbytek cykloalky^vý zbytek: nebo a^ry^lov^ý zbytek, vidy nejvýše s 12 atomy uhlíku, a jednoHivé zbytky mohou být vzájemně spojeny jednoduchou vazbou uhlík-uhlík.R ^1, R ^2, and R ^ n ^ Aw znanennjí ^ ele Sauté alkyl radical ^ cycloalkyl radical above: or and ^r y ^l o ^ý residue modes with a maximum of 12 carbon atoms, and jednoHivé residues can be joined by a single bond carbon- carbon.

Vynález zahrnuje nejen poiuití výše uvedené beta-sily-ethyUové skupiny parciálního vzorce I k přechodné ochraně karboxylových skupin v organických sloučeninách vytvořením přísuušných esterů, ale i opětné odštěpení této chránící -з^п^и^'п^ skupiny po provedení požadovaných přeměn.The invention encompasses not only the use of the aforementioned beta-silyl group of partial formula I to temporarily protect the carboxyl groups in organic compounds by forming the corresponding esters, but also the cleavage of this protecting group after the desired transformations have been carried out.

PPi reakcích polyfunkčních sloučenin (tzv. takových, které ve své mooekule obsahmu! více než jedno reakční centrum stejného nebo různého typu) je v organické chemii často nutné, aby reagovalo pouze jedno reakční centrum (funkční skupina). Ostatní reakční centra lze z účesli na reakci vyloučit pouuitím vhodných chránicích skupin. Za vhodnou je považována taková chránící skupina, která v dostatečné míře prokazuje dvě vlastnosti:In organic chemistry, it is often necessary for only one reaction center (functional group) to react to the reactions of polyfunctional compounds (so-called ones that contain more than one reaction center of the same or different type in their molecule). Other reaction centers can be excluded from the reaction by using suitable protecting groups. A suitable protecting group is sufficient to demonstrate two properties:

1. je dostatečně stálá, takže nepodléhá následovrým reakčním přeměnám:1. Is sufficiently stable so that it is not subject to the following reaction transformations:

2. je dostatečně labilní, takže se nechá lehce a selektivně odštěpit za podmínek, které žádným způsobem neoolivní kvalitu vznňklé látky (ani dalších popřípadě se vyskktujících chránících skupin).2. it is sufficiently labile so that it is easily and selectively cleaved under conditions which do not in any way have a non-polar quality of the flammable substance (or other possibly protecting groups).

Mimoto je také' žádoucí,- aby zavedení takové chránící skupiny proběhlo pokud možno snadno a bez látkových ztrát. AČkooiv se pooPití chránících skupin kcrboxylu a zvláště chránících. skupin odp^^da^cích vynálezu vyskytuje ve vtech oblastech organické chemie, a to zvláště chemie přírodních látek (Jako steroidů,' uhlohydr.átů, alkaloidů, hormonů - nappíklad prostál andi nu - a antibiotik - nappúklad peptidového a zvláště beti-lkktmnového charakteru, jakož L penamové a celkové řady), lze problemaaiku nejlépe znááoornt na příkladě syntéz p^j^ttidů z aíint>Oyssein nebo z kratších peptidových fragmentů. Příklad peptidových syntéz představuje prakticky nejkoípiikovlněptí případ vyUžií, ' nebot zde vždy máme k dispozici větší počet různých funkčních a chránících skupin, přkeemž požadavky na vhodnou chránící skupinu jsou v průměru vyšší, než je tomu u syntéz látek jnného typu, zab^vaicích se stejnou problemH^u. Většinu zkušennosí získaných při práci s peptidy lze snadno přemést na jnné, většinou měně koííiikované chemické látky. i 'IIn addition, it is also desirable that the introduction of such a protecting group is carried out as easily and without material loss as possible. However, the carboxyl protecting groups and especially the protecting groups are used. of the groups according to the invention occurs in all fields of organic chemistry, in particular the chemistry of natural substances (such as steroids, carbohydrates, alkaloids, hormones - for example, an andine prostate) and antibiotics - for example peptide and particularly beta-lactam character. (as well as the penam and overall series), the problem is best understood by way of example by the synthesis of peptides from α-Oyssein or shorter peptide fragments. An example of peptide syntheses is virtually the most convenient case for use, since there are always a number of different functional and protective groups available, while the requirements for a suitable protecting group are on average higher than those of syntheses of other types dealing with the same problem. ^ u. Much of the experience gained in working with peptides can easily be converted to other, mostly less co-chemically modified, chemicals. i 'I

Základním principem každé syntézy poppíšů je tvorba jedné nebo více iepiiaických vazeb, ve kterých je vždy spojena karboxylové skupina jedné aminookyeeiny s aminoskupinou- s, druhé a^inn^o^ksseiíny. PPi praktikkém provedení kondenzací am.nookseein nebo jednodušších ieptiaových fragmentů je třeba dbát především na to, aby při práci s polyfunkčními reckční- * mi složkami vstoupily do reakce pouze požadované funkční skupiny. Ossatní funkční skupiny bu^u íLo^kov^án^{y p}odle ^pot^ře^by chránicfoi skupi-ncmi a bu^ jim 1ι^; otaetc možnost zúčaasnn. se reakce.The basic principle of any synthesis of the present invention is the formation of one or more epiphenylic bonds in which the carboxyl group of one amino acid with an amino group of the other and of the other amino acid is always linked. In the practical implementation of the condensation of amnookseein or simpler Iptia fragments, it is particularly important to ensure that only the desired functional groups enter the reaction when working with polyfunctional reactants. Ossatní functional group Bu ^ ILO in ^the OC ^and n ^yp ccording ^p rt ^{of the} e-chránicfoi Skupi ncmi and bu ^ 1ι ^them; otaetc possibility to participate. with reaction.

Dopoep^{a bpž}n^p pou^vcná chráni-cí s^kupin^y ^rtaxylu splnnu:!. ^pouze zíSástú vý^še zmín^pné všeobecné požadavky na vhodnou chránící skupinu. Pokud jde o stálost, je nejvhodněpší chránící skupinou methhl, nebot v^ytvořený methhyester zůstává neporušený při všech přeměnách, ke kterým dochází u peptidové syntézy. Potíže nastával teprve tehdy, ' tacemi-li v posledním stupni reakce chránící skupinu odšaPit a uvoonít tak skupinu karboxylovou. ,Dopoep ^{and BPZ} used ^n-p-Cl vcná protected with ^the UPIN ^y ^ rtaxylu met:!. ^p nly zíSástú ^TX e ^p not mentioned general requirements for a suitable protecting group. Regarding durability, the protecting group nejvhodněpší methhl because ^{characterized} methhyester formed remains intact during all the transformations that occur in the peptide synthesis. Difficulties arise only when the melting step in the final step of the reaction deprotects the carboxyl group. ,

Toho lze prakticky d^ccíit jen pomocí alkalické hydrolýzy, která však představuje značné nebezpečí zvláště pro ^^όνΡύ^ peppíšícké vazby. Dochází také ke znakné racemizaci, důsledkem jsou ještě další látkové ztráty, ozntka1íií dodatečným oddělováním izomerů. Z těchto důvodů se vycítí této chránící skupiny omeeuje hlavně na syntézy peptidů s krátkým řetězcem, které jsou stavební jednotkou při tvorbě peptidů komíiikcoantpších. Také zde - L když četné peptidy tohoto typu byly tímto způsobem sym^iózo^-rány - hydrolýze často neprobíhá bez závažných praktických p^otíží; sloučeniny, které mmlí být hydrolyzovány, jsou čcsto ve vodě tak nerozpustné, že se po přidání vodného roztoku hydšoOyzupíií alkalické báze oylpčupí ze svých roztoků v organických rozpouštědlech a hydrolýze samotné nepodléhali.In practice, this can only be detected by alkaline hydrolysis, which, however, poses a considerable danger, in particular, to the papermaking bond. Significant racemization also occurs, resulting in further loss of material due to additional isomer separation. For this reason, this protecting group will feel mainly due to the synthesis of short-chain peptides, which are the building blocks in the formation of more mature peptides. Here too, although numerous peptides of this type have been symososally-hydrolysed in this way, hydrolysis often does not proceed without significant practical stresses; The compounds which are to be hydrolyzed are often so insoluble in water that, upon addition of an aqueous solution of alkaline base hydrolysis, they are not excreted from their solutions in organic solvents and are not subject to hydrolysis themselves.

Jiná, obecně užívaná chránící skupina kcrboxyluje tercbutylová skupina. OOdicOdalící t^^buty!ester se krátkým působením kyse^n, napiíklaa kyseliny trifPcooocCooé, snadno # rozštěpí za opětného vzniku volné karboxylové skupiny. Snadná ttppittlnoet tohoto esteru o^e^e^u^je této chránící skupiny jen na ty případy, kdy se nevyskytuje kyselé prostředí. V chemii pepti-dů představuje skupina podobné struktury - Boc-skupinc (terc.buooxykcrbonylová skupina) - jednu z nejča1eěpi používaných skupin k ochraně aminoskupiny. 4 odštěpení pouze jedné tak, aby se zachoval chránící chorále ter druhé skupiny, je prakticky πθρΓ0\^^^1π^ρ. Terč ,bu tylová skupina může proto nalít širší oyuPití v chemii peptidů pou^ze k uhraně k^crbo^xylových skupin ^strcnráta ře^zců nebo tartazxy^^ta taiipin naclráz^í cích se na ko^c^JL dlouhého peptidového řetězce.Another commonly used protecting group for carboxy is a tert-butyl group. The separating tert-butyl ester, short-acting with acid, such as triflic acid, is readily cleaved to give the free carboxyl group again. The easy ester of this ester of this protecting group is only for those cases where no acidic environment is present. In peptide chemistry, a group of similar structure - the Boc-groups (tert-butoxycarbonyl) - is one of the most preferred amino-protecting groups used. 4 cleavage of only one in order to preserve the protective chant ter of the other group is practically πθρ \0 \ ^^^ 1π^ρ. A target group can therefore pour a broader utility in peptide chemistry^that to evil^Crbo^xString groups or strings or tartazoxyl groups are substituted. The peptide was ligated to the cocc of the long peptide chain.

Ohřánnei ta^jin¹ k^rb^ylové skupiny ^kter^á ^otazuje ja^k vy^í sei^tu při ^Št^ppících podmínkách, tak L poměrně dobrou stálost při různých přeměnách iha1aateeietictýih pro chemii popUdů, je beta-aryleplfonyltthylová nebo beta-altylepifonyltthylovZ skupina.Ohřánnei the yin ^ ¹ ^ k ^ rb yl groups ^to otazuje ^Ter ^ I ^ it ^to you sei ^here at ^{T p} peaks conditions and L relatively good stability under various transformations iha1aateeietictýih for chemistry starts, the beta or beta aryleplfonyltthylová altylepifonyltthyl group.

V prvé řadě je tato skupina relativně stálá vůči kyselinám, nechá se však hydrolyticky odštěpit za mírných bazických podmínek. Tato vysoká citlivost vůči bazickému prostředí má z druhé strany za následek vyslovenou tendenci takovéto esterifikované karboxylové skupiny к přeesterifikování, zejména nižšími.alifatickými alkoholy, jako methanolem nebo ethanolem. Protože takovéto přeesterifikování je právě silné katalyzováno bazicitou nějaké volné aminoskupiny, je použití těchto rozpouštědel (která patří však к nejdůležitějším) v tomto případě vyloučeno nebo omezeno jen na kyselé prostředí.In the first instance, this group is relatively acid-stable but is hydrolytically cleaved under mild basic conditions. This high sensitivity to the basic medium, on the other hand, results in a pronounced tendency of such an esterified carboxyl group to be transesterified, in particular by lower aliphatic alcohols such as methanol or ethanol. Since such a transesterification is just strongly catalyzed by the basicity of a free amino group, the use of these solvents (which are among the most important) in this case is avoided or limited to an acidic environment.

S rostoucím počtem skupin, které mají schopnost chránit různé funkční skupiny (například aminoskupiny, hydroxylové skupiny, thiolové skupiny a guanidinové skupiny aminokyselin a peptidú) a které mají schopnost vedle sebe existovat a přitom být selektivně odštěpitelné, vyvstal naléhavý požadavek najít nějakou skupinu těchto vlastností, která by chránila karboxylovou skupinu.With the increasing number of groups that have the ability to protect various functional groups (for example, amino, hydroxyl, thiol, and guanidine groups of amino acids and peptides) and which have the ability to coexist and be selectively cleavable, there is an urgent requirement to find some group of these properties, which would protect the carboxyl group.

Kromě toho bylo, též žádoucí obohatit současnou metodiku organické syntézy o nějakou další chránicí skupinu karboxylu. která by umožnila opatřit jednotlivé karboxylové skupiny di- nebo polybazické karboxylové kyseliny různými chránícími skupinami a učinila je tak přístupnými selektivním přeměnám.In addition, it was also desirable to enrich the current organic synthesis methodology with some additional carboxyl protecting group. which would allow the individual carboxyl groups of the di- or polybasic carboxylic acids to be provided with different protecting groups, making them accessible to selective conversions.

4 4 Jak bylo překvapivě zjištěno, u chránicí skupiny obecného vzorce Surprisingly, it has been found that the protecting group is of the formula tyto I, these AND, výhodné vlastnosti se nacházejí ve zvýšené míře advantageous properties are found to an increased extent R‘ 1 R ‘ 1 o R - O R - 1 Si - CH₂ - CH₂ ~ (I)1 Si - _CH2 - _CH2 ~ (I)

v němžin which

2 32 3

R , R a R mají shora definovaný význam.R, R and R are as defined above.

Takový arylový, c.ykloalkylový nebo alkylový zbytek, který obsahuje nejvýše 12 atomů uhlíku jednoho typu, může být přitom substituován zbytkem typu druhého. Například arylový nebo cykloalkylový zbytek může být nejčastěji substituován alkylovým zbytkem nebo alkylový zbytek může být substituován zbytkem Brýlovým, popřípadě cykloalkylovým. Posledně jmenované uhlovodíkové zbytky lze také nazvat zbytky aralkylovými, popřípadě cykloalkylalkylovými.Such an aryl, C1-cycloalkyl or alkyl radical having at most 12 carbon atoms of one type may be substituted by a radical of the other type. For example, an aryl or cycloalkyl radical may be most often substituted by an alkyl radical or the alkyl radical may be substituted by an eyeglass or cycloalkyl radical. The latter hydrocarbon radicals can also be called aralkyl or cycloalkylalkyl radicals.

Z arylových zbytků přicházejí v úvahu hlavně například bifenylylové zbytky, a to zejména 4-bife.nylylový zbytek, jakož i především monocyklické zbytky, tzn, takové, které lze odvodit od benzenu a jeho homologů, například o-, m- a p-tolyl, xylyl, ethylfenyl a především fenyl. Z cykloalkylových zbytků je třeba vzít v úvahu hlavně ty, které se odvozují od nasycených tří-až sedmičlenných, především však pěti-nebo šestičlenných monocyklických uhlovodíků, které mohou mít také alkylové substituenty, především methyl a ethyl. Jako příklad těchto typů uhlovodíkových zbytků lze uvést:The aryl radicals which may be used are, for example, biphenylyl radicals, in particular 4-biflynyl radicals, and in particular monocyclic radicals, i.e. those which can be derived from benzene and its homologues, for example o-, m- and p-tolyl. , xylyl, ethylphenyl and especially phenyl. Of the cycloalkyl radicals, those which are derived primarily from saturated 3- to 7-membered, but preferably 5- or 6-membered, monocyclic hydrocarbons, which may also have alkyl substituents, in particular methyl and ethyl, are to be considered. Examples of these types of hydrocarbon residues are:

cyklopropyl, 2,2,3,3-tetramethylcyklopropyl, cykloheptyl, 1-methylcykloheptyl, 3,4-dimethylcyklopentyl, 4,4-dimethylcyklohexyl a všechny perhydro-analoga předtím specificky vyjmenovaných arylových zbytků, zejména cyklohexyl a 4-cyklohexylcyklohexyl. Z alkylových zbytků přicházejí v úvahu zbytky jak s přímým, tak i s rozvětveným řetězcem, a to v prvé řadě ty, které mají 1 až 5 uhlíkových atomů.cyclopropyl, 2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl, cycloheptyl, 1-methylcycloheptyl, 3,4-dimethylcyclopentyl, 4,4-dimethylcyclohexyl and all perhydro analogues of the aforementioned aryl radicals, especially cyclohexyl and 4-cyclohexylcyclohexyl. Among the alkyl radicals, both straight-chain and branched-chain radicals, in particular those having 1 to 5 carbon atoms, are suitable.

Jsou to například ethyl, propyl, izopropyl, izobutyl, sek.butyl, terc.butyl, 2- neboExamples are ethyl, propyl, isopropyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, 2- or

3-methylbutyl, 2- nebo 3-methyl-2-butyl a především butyl a methyl. Jak bylo již výše uvedeno, mohou být substituovány arylovým nebo cykloalkylovým zbytkem a tvořit například benzyl, fenethyl, 1-,2- nebo 3-fenylpropyl, cyklopentylmethyl nebo cyklohexylethyl. Jak je již známo, mohou být takovéto zbytky spojeny navzájem jednoduchou C-C- vazbou.3-methylbutyl, 2- or 3-methyl-2-butyl and especially butyl and methyl. As mentioned above, they may be substituted with an aryl or cycloalkyl radical and form, for example, benzyl, phenethyl, 1-, 2- or 3-phenylpropyl, cyclopentylmethyl or cyclohexylethyl. As already known, such residues can be linked to each other by a single C-C-bond.

12?12?

Obvykle se stává, že se dva ze symbolů R ¹ , R ' a R^J sp^;^u;jí v jeden dvojvazný uhlovodíkový zbytek, který vytváří s' atomem křemíku heterocyklických kruh se 3 až 7, zejmena pak s 5 nebo 6 členy. Nejjaatěji užívané dvojvazne uhlovodíkové zbytky odpovídají strukturou výše zmíněným uhlovodíkovým zbytkům. Příslušné zbytky heterocyklické se potom odvozuji zejména od silolanového, silepanového a perhydrosilinového kruhu, který má na křemíkovém atomu ještě jeden, zvláště některý z výše uvedených alkylových, cykloalkylových nebo arylových zbytků.Usually, it happens that the two of R ^1, R 'and R ^J et al ^, ^ u; her a divalent hydrocarbon radical which forms a' silicon atom heterocyclic ring with 3 to 7, especially 5 or 6 members . The most commonly used divalent hydrocarbon radicals correspond to the above-mentioned hydrocarbon radicals. The respective heterocyclic radicals are then derived, in particular, from a silolane, silepane and perhydrosilino ring which has one more on the silicon atom, in particular one of the abovementioned alkyl, cycloalkyl or aryl radicals.

Celá chránící skupina vzorce (I) je tvořena tak, že neobsahuje žádné asymeerické centrum, jak v celkové struktuře, tak ani v jedno tlivých substituentech.The entire protecting group of formula (I) is formed such that it contains no asymmetric center, either in the overall structure or in the individual substituents.

Jako typické příklady chránících skupin karboxylu odppovíaaících vynálezu mohou být jmenovány:Typical examples of carboxyl protecting groups in accordance with the invention are:

a)and)

2-(tr^i^e^r^y]^í^:Íyfl)ethjrlc^vá skupina nebo2- (trifluoromethyl) ethyl group; or

2-(tricykloalkyltilyl)ethylová skupina, například 2-(^1^-^^130.^1 lethylová skupina, 2-(4-bifeihlhldichklohexyhsilhl)ethhlová skupina, a především 2-(trifeiLhltilyl)ethylová skupina; * bl (2- (tricycloalkyltilyl) ethyl, for example 2 - ((R) - (R) -1,130,11-ethyl, 2- (4-bifluoro-dichloro-hexyl) ethyl, and in particular 2- (trifluorophenyl) ethyl;

2“(diarhlalkhltilhl)ethylová skupina nebo 2-(dichkloalkyhalkyhsilhl)ethhlová skupina, například 2-(difeihlbenzyhsilhl)ethhlová skupina a 2-(dichklohexyhmethhlstiyh)ethhlová skupina;2 '(diarhlalkhltilhl) ethyl or 2- (dichloalkyhalkyhsilhl) ethanol, for example 2- (difeihlbenzyhsilhl) ethanol and 2- (dichklohexyhmethhlstiyh) ethanol;

c)C)

2-(aгyldialkyhstlyl)ethylová skupina nebo 2-(cykloвlkyhdialkyhtilhl)ehhylová skupina, například ’2- (aryldialkyhstlyl) ethyl or 2- (cycloalkylhialkyhtilhl) ethyl, for example '

2-(feiyldibenzyhsilhl) ethylová skupina a 2-(cyklopeniyhdiIneehhhstlhl)et^h^rlová skupina;2- (feiyldibenzyhsilhl) ethyl and 2- (cyklopeniyhdiIneehhhstlhl) et h ^y ^ Nominal group;

d)(d)

2-(1-alkhltilolaihl)ethhlovíí skupina nebo2- (1-Alkylthio) ethyl; or

2-(1-arhltilolarlhl) ethhlová skupina, například 2-(1-meehhhstlolaiyh)ethylová skupina a 2-(1~feiyltilolaiyl)ethylová skupina;2- (1-arphthaloyl) ethanol, for example 2- (1-methylhistloyl) ethyl and 2- (1-phenyltholoyl) ethyl;

e)E)

2-(1-alkhleerhhdrosiliihl)ethylová skupina nebo 2-(1-arhleerhhdrooil·iiLhl) ethylová skupina, například,A 2- (1-alkhlelamino) ethyl group or a 2- (1-alkylthio) ethyl group, for example,

2-(1-meehhhpeehthdootliiyl)ethylová skupina a 2-(1-feihleerhydrooiliiLhl) ethylová skupina;2- (1-methoxyphenylthio-ethyl) ethyl and 2- (1-methylcarbonyl) ethyl;

f)F)

2-(3-alkyhstiyl)ethylová skupina, například *2- (3-alkyhstiyl) ethyl, for example *

2-(benzyhdiщeehhh^stlhl)ethhlová skupina, 2-(fenyhdiiehyhstiyh)ethylová skupina a2- (benzyhdiщeehhh tlhl ^s) ethhlová, 2- (fenyhdiiehyhstiyh) ethyl group and

2-(tribeizyltilhl)ethylová skupina; *2- (tribisylthio) ethyl; *

g) * 2-(triвlkhltilyl)tthyVová skupina, u které jednotlivé alkylové zbytky obsabuuí 1 až 5 uhlíkových atomů, napříkladg) * 2- (tri-phenylthilyl) -thyl, in which the individual alkyl radicals contain 1 to 5 carbon atoms, for example

2-(dimeehlh-terc.butyltilhl)elhhlová skupina, 2-(dibuthlmeehhhsilhl)θlhylová skupina, a především 2-(trimeehlhstlyl)ethylová skupina.2- (dimethyhl-tert-butylthyl) -halo, 2- (dibuthlmeehhhsilhl) -ethyl, and in particular 2- (trimethylhlyl) ethyl.

Pokud jde o stálost a reaktivnost, vyrovná se ' chránící skupina odppovíaaící vynálezu skupině methylové, která až doposud pLatí jako neestálejší chránící skupina karboxylu.In terms of stability and reactivity, the protecting group corresponding to the invention is equal to the methyl group, which hitherto remains the most volatile carboxyl protecting group.

Zůstává nezměna například za podmínek všeobecné kondenzace stavebních jednotek peptidů a za podmínek, které jsou při odštěpování obvyklých chránících skupin. Jde hlavně o podmínky hydrogenace, slabě bázických a kyselých hydrolýz a o podmínky, které jsou při práci s nižšími alkoholy za přítomnosti bází. Tato skupina je svým chováním podobná methylové skupině i při jiných běžných reakcích organické chemie.It remains unchanged, for example, under the conditions of general condensation of the peptide building units and under the conditions which are common in the cleavage of conventional protecting groups. These are mainly the conditions of hydrogenation, weakly basic and acid hydrolyses, and the conditions which are present when working with lower alcohols in the presence of bases. This group is similar in behavior to the methyl group in other conventional organic chemistry reactions.

Chránicí skupina podle vynálezu může být také analogicky jako chránicí methylová skupina odštěpena pomocí alkoholické hydrolýzy. Těmto reakčním podmínkám chybí však ve většině případů požadovaná selektivita. Podle vynálezu se chránicí skupina odštěpí působením soli kyseliny fluorovodíkové, tedy prostředkem, který nereaguje s většinou organických funkčních skupin, zvláště ne s peptidickými vazbami a chránícími skupinami běžnými v chemii peptidů.The protecting group of the invention can also be cleaved analogously to the methyl protecting group by alcoholic hydrolysis. However, these reaction conditions lack the desired selectivity in most cases. According to the invention, the protecting group is cleaved by treatment with a hydrofluoric acid salt, i.e. a composition which does not react with most organic functional groups, especially not with peptide bonds and protecting groups common in peptide chemistry.

Předmětem tohoto vynálezu je způsob přechodné ochrany karboxylových skupin v organických karboxylových kyselinách esterifikací karboxylové skupiny, která má být chráněna, a později odštěpením chránicí skupiny, který spočívá v tom, že se v karboxylové kyselině nebo v jejím reaktivním derivátu esterifikuje alespoň jedna karboxylové skupina beta-silylethylovou skupinou parciálního vzorce I,It is an object of the present invention to provide a process for the temporary protection of carboxyl groups in organic carboxylic acids by esterifying the carboxyl group to be protected and later cleaving the protecting group by esterifying at least one beta- carboxylic acid in the carboxylic acid or its reactive derivative. the silylethyl group of partial formula I,

R¹ ’ ₂ 1R ¹ ' ₂ 1

R - Si - CH_? - CH - (I) hR - Si - CH _? -CH- (I) h

^R v němž ^R in which

33

R , R* a R znamenají nezávisle na sobě alkylový zbytek, cykloalkylový zbytek nebo arylový zbytek, vždy nejvýše s 12 atomy uhlíku, a jednotlivé zbytky mohou být vzájemně spojeny jednoduchou vazbou uhlík-uhlík, a tato hcta-silylethylová skupina se odštěpí působením soli fluorovodíkové kyseliny.R, R * and R are, independently of one another, an alkyl, cycloalkyl or aryl radical having a maximum of 12 carbon atoms, and the individual radicals may be linked to each other by a simple carbon-carbon bond, and this hetero-silylethyl group is cleaved off by hydrogen fluoride acid.

Nejpravděpodobnějším dodatečným vysvětlením, které se naskýtá pro tuto překvapivě selektivní reakci, je vysoká vzájemná afinita fluorového a křemíkového atomu. V důsledku této afinity může odštěpní odpovídající chránicí skupiny podle vynálezu proběhnout podle rovniceThe most likely additional explanation for this surprisingly selective reaction is the high relative affinity of the fluorine and silicon atoms. Due to this affinity, the cleavage of the corresponding protecting group according to the invention can proceed according to the equation

-C0-0-CH_o-CH₉-Ši- + F°--> -C00° + CH_O=CH₉ + F-Ši^{2 2} | ^{2 2} I jejíž rovnováha je posunuta zcela doprava. Podle ní jsou výhodné takové podmínky, při kterých je atom fluoru к dispozici jako prostý fluoridový anion, který neasociuje se žádnou další komponentou, například rozpouštědlem nebo dalšími nedisociovanými molekulami reakční cn Činidel.-C0-0-CH _of CH ₉ -Si- ° F + -> -C00 ° + CH = CH _{O 9} Si + F ^{2 2} | ^{2 2} Even whose balance is shifted to the right. According to her, preference is given to those conditions in which the fluorine atom is available as a free fluoride anion which does not associate with any other component, for example a solvent or other undissociated reagent molecules.

Sůl kyseliny fluorovodíkové, která je používána к vynálezu odpovídajícímu odštěpení л výše definované chránicí skupiny, je takového charakteru, aby co nejsnadněji disociovala na jednoduché fluoridové anionty. Tuto vlastnost mají ve velké míře zvláště soli kyseliny fluorovodíkové s kvartérními organickými bázemi, a je jim proto dávána přednost před jinými reakčními látkami.The hydrofluoric acid salt, which is used in the invention corresponding to the cleavage of the protective group as defined above, is of such a nature that it dissociates as easily as possible into simple fluoride anions. In particular, salts of hydrofluoric acid with quaternary organic bases have this property to a large extent and are therefore preferred over other reactants.

ww

Pokud je odpovídající kvartérní hydroxid dostatečně silnou bází, aby zaručil požadovanou disociaci, hraje zde specifická struktura bazické komponenty jen vedlejší roli. Z praktických důvodů je však dávána přednost trialkylarylamoniumfluoridům a tetraalkylamoniumfluoridům, a to takovým, které lze odvodit od výše obecně i specificky vyjmenovaných arylových a alkylových zbytků. Analogicky se tyto zbytky mohou spojit na odpovídající dvou«nebo třívazné uhlovodíkové zbytky, které potom vytvářejí s atomem dusíku příslušné heterocyklické kvartérní soli, například N,N^-dialkylpyrrolidiniové soli, N,N'-piperidi^ niové soli a azepiniové soli nebe n-alkylchinolizidiniové soli.If the corresponding quaternary hydroxide is a strong enough base to guarantee the desired dissociation, the specific structure of the basic component plays only a minor role. For practical reasons, however, trialkylarylammonium fluorides and tetraalkylammonium fluorides are preferred, which may be derived from the aforementioned generally aryl and alkyl radicals specifically mentioned. Analogously, these radicals can be linked to the corresponding divalent or trivalent hydrocarbon radicals which then form with the nitrogen atom the corresponding heterocyclic quaternary salts, for example N, N'-dialkylpyrrolidinium salts, N, N'-piperidinium salts and azepinium salts or n- alkylquinolizidinium salts.

Nejvíce používané kvartérni fluoridy jsou n^^s^l<^c^ují^c:ú: tetrímethylamonimifluorid, tiimethylethylamonimifluorid, trifethylloopropylímoniiuf luurřd, trifethylbenzylaforiiuifluorrd, trifethylf inylmoniufluorid, 1 ,Ι^^β^^ρϊρθ^^ηίοίΒίΙοοΓί^ 1 ^-^.^у^руггоЫсИпотfluorid, a především tetrabutylímonionfluorid a tttrattУyaгmoniunfluQriU.The most commonly used quaternary fluorides are the following: tetrimethylammonium difluoride, thiomethylethylammonium difluoride, trifluoromethyl-ammonium difluoride, trifluoromethyl-ammonium difluoride, trifluoromethylbenzylaforifluoride, trifluoromethyl-ammonium fluoride, 1, 2, 2, 3, 4, 6, 6, 6 and 6; . ^ у ^ руггоЫсИпотfluoride, and in particular tetrabutylimmonium fluoride and tttrattУyaгmoniunfluQriU.

Déle mohou být také používaný fluoridy anorganické báze, to znamená HuoriU amonný a fluoridy kovů, hlavně lluoridy alkalických kovů, jako lluoriU sodný, lluoriU draselný, a zejména lluoriU česný. K dosažení vysokého UilOiiaě-ího stupně íO^o^]^“ú^<^\^y^ch aniontů také u fluoridu sodného a draselného je výhodné zachycovat kovové kati-onty tvorbou komp^l-exů.In addition, inorganic base fluorides, i.e., ammonium Huori and metal fluorides, in particular alkali metal fluorides such as sodium fluoride, potassium fluoride, and especially cesium fluoride, can also be used. In order to achieve a high degree of anionic degree also in sodium and potassium fluoride, it is advantageous to trap the metal cations by composite formation.

K tomuto účelu se velmi dobře hodí především maakooyykické p^O-yethery a jejich dusíková a sirnú analoga, která jsou také označována jako crowii-ether (srovnej J. J. Су^^пstn a spoO. Chem. Rev. £4» 351-385 /1974/).Particularly well suited for this purpose are the maacooyycic β-O-ethers and their nitrogen and sulfur analogues, which are also referred to as crowi-ether (cf. J &lt; 6 &gt; 1974).

Zde je třeba se zmínit zejména o 18·<™Νη-6ύΐ6^6.. a jeho 1,2,5,ó-di^t^enzo- nebo 1,2,5,6-Uiiyklohtxyl analogách jako ne^výhodnnjších pro tvorbu konyPexníyУ sIouči-í- s draselnými ionty.Particular mention should be made here of 18,5-di-thiophene or 1,2,5,6-cyclohexyl analogs as being more preferred for formation of conjugated potassium ions.

OOdtěpmi podle vynálezu se provádí nejlépe v aprotckkém organickém rozpouštědle. Není vhodná příOoy-ost takových rozpouštědel -iappíklad vody nebo nižších alifaiicýiУ alkoholů, které by mohly solvatovat fluorUdový aniont. Zvláště výhodná jsou organická polární aprotická rozpouštědla, a to taková, jejíchž Uitliktrická konstanta je vyšší než 29 nebo je rovna 29. Jsou to:The process according to the invention is preferably carried out in an aprotic organic solvent. It is not appropriate to include such solvents, for example water or lower aliphatic alcohols, which could solvate the fluoride anion. Particularly preferred are organic polar aprotic solvents, those whose UI is greater than or equal to 29. They are:

a) ^pH^iU UííettylslOfoxiU,(a) pH pH i U ty ty ty ty fox fox fox i,

b) Ν,Ν-Ui alkyl mi-Uy nižších aliaatickýiУ karboxylových kyseti-₎ n^^r^p^LÍkl^e^d Ν,Ν-άίπιΐη^jormamiU a N,N-diyethylecttayiU,b) Ν, Ν-Ui-alkyl mi Uy lower carboxylic aliaatickýiУ _kyseti-) n ^^ r ^ p ^ likly ^ e ^ d Ν, Ν-άίπιΐη jormamiU ^ and N, N-diyethylecttayiU,

c) —.ΛγϊΙι a Hadckých kyselin, nepUk-Lad acckto!trii a proiiimttil,c) —ΛΛϊΙϊΙ and ckckckých kyselin kyselin nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep nep,

U) УexaaakylfolforEmidy, nappíklad hex^nmthhltriřmiU kyseliny fosforeCěé^U) Exaaacylphosphorimides, for example hexamethylphosphoric acid.

Nejvýhodnnjší z těchto rozpouštědel je N,N-(UimetУylfomiaшiU.Most preferred of these solvents is N, N- (dimethylmethylfluoride).

Obbykle se pracuje při laboratorní teplotě nebo teplotě lehce zvýšené, a to zejména ^oU 15 Uo ⁶0 °C. Reakční směs může být však ^podle ^pot^řeb^y z^ac^ěvána v r^ozmezí ce^^ s^vého teplotního rozineeí, tj. oU bodu tuhnuti až po teplotu varu.Obbykle carried out at room temperature or slightly elevated temperature, in ^particular U 15 CS ⁶ 0 ° C. The reaction mixture may, however, be ^p ccording ^p rt ^of EB ^y z ^ c ^ Evan ^CoR zmezí ce ^^ ^S ého rozineeí temperature, i.e. ou freezing point to the boiling point.

Zavedení shora Uelinované chránicí skupiny karboxylové skupiny se Uaří o sobě známým způsobem, napnUa, tím, že se v organické karboxylové kyselině ΐδ^ι^Ι^ jedna nebo více karboxylových skupin, které mmlí být chráněny, působením alkoholu obecného vzorce 1-OH, , , R ^R - Si ^- CH? - CH? - OH (1-0Ю i3 >kUe r' ^až R^ m^í výše uvedený význam -, nebo j^o reak^ ^^pnýmí ^deriv^áty.The introduction of the above-carboxylated protecting group of the carboxyl group is effected in a manner known per se, for example by reacting in the organic carboxylic acid one or more carboxyl groups to be protected with an alcohol of the formula 1-OH, , R ^R - Si ^- CH? - CH? - OH (1-0Ю i3> KUE R ^'to R ^ m ^ i as defined above -, or j ^ o ^ ^^ reaction pnýmí ^d y Eriva ^sulfate.

Reakce schopným derivátem výše UefěnovanéУn 2-lilyleУha-oto je ether isomočooiny, ^b^i^ovaný v ^uaném ^přípa^uě na ^^kovém a^rnu při¹^ ²-^lily^te^yhy^Opv^á угдозд (I) ^se váže ^na kyslík. Z ^moO^cninnvУyh kom^ponent jsou nejvýtodnější zejmén^a N^-d^ubsd^- t^vané mpOcwiny, nap^pík^la^{d N},b^-dicyklCsoyd^mo^viria. Kar^boxyl^ové lupiny, ^kttré m^í být mohou ^být к ^^ozici buď ve v^olⁿé fⁿr^yě^, n^kbⁿ j^ako γ¹¹^^{1 lyУnlny u}e^eiv^át, napekla, anhhyuid, halogen - hlavně chlorid - nebo azid.The reaction of the above derivative capable UefěnovanéУn 2-Oto-lilyleУha ether isomočooiny, ^ b ^ i ^ alkylated in ^at Anema ^P to a beet ^U e ^^ ^ RNU metal and at ¹ ^ ² - ^t e ^{l y} Ily hy ^O HP ^and угдозд ( I) ^{binds to} oxygen. Z oO ^{c m p} ninnvУyh com onent are particularly nejvýtodnější ^and N ^ -d ^ ubsd ^- t ^ Vane mpOcwiny, such ^p and ^d CART ^{l N,} b ^ ^ mo ^ -dicyklCsoyd swirls. Kar ^bo xyl ^memory lupine, ^{a as} m é ^ i may be ^b к yl ^^ ozici either in ^the L e f ^{n n y} y ^e, n ^{to n} b j ^as γ ¹ ^ ^{11 lyУnlny u} e ^e IV ^A t, baked, anhhyuid, halogen - mainly chloride - or azide.

Esterifikace probíhá běžným způsobem reakcí se zmíněným alkoholem nebo jeho reakce schopným derivátem a lze ji podporovat obvyklým způsobem, například působením vodu odnímajícími prostředky, jako jsou molekulární síta. Zvláště užívaná metoda esterifikace, prokazující dobré výsledky, probíhá za velmi mírných reakčních podmínek a využívá se zejména u přírodních aminokyselin a peptidů s krátkým řetězcem. Spočívá v tom, že volná kyselina, která má být chráněna, reaguje běžným způsobem s příslušným alkoholem výše definovaného vzorce (I-OH) v přítomnosti substituovaného karbodiimidu, například N,N'-dicyklohexylkarbo-diimidu.The esterification proceeds in a conventional manner by reaction with said alcohol or a reaction-capable derivative thereof and can be promoted in a conventional manner, for example by treatment with water-removing means such as molecular sieves. A particularly used method of esterification, which shows good results, is carried out under very mild reaction conditions and is mainly used for natural amino acids and short-chain peptides. It consists in reacting the free acid to be protected in a conventional manner with the corresponding alcohol of formula (I-OH) as defined above in the presence of a substituted carbodiimide, for example N, N'-dicyclohexylcarbodiimide.

Substituovaný karbodiimid zde má bez ohledu na reakční mechanismus roli činidla, které odnímá reakci vodu. To se děje tvorbou příslušné substituované močoviny a posouvá se tím zároveň rovnováha esterifikační reakce zcela ve prospěch vznikajícího esteru. Tato esterifikace probíhá zejména v přítomnosti pyridinu nebo jeho homologů, popřípadě v přítomnosti асе Lonitrilů.Substituted carbodiimide plays a role here, irrespective of the reaction mechanism, which removes water from the reaction. This is done by the formation of the corresponding substituted urea and at the same time shifts the equilibrium of the esterification reaction entirely in favor of the ester formed. This esterification takes place in particular in the presence of pyridine or its homologues or in the presence of acetonitriles.

Lze však postupovat i tak.. že se příslušný 2-silylethanol vzorce (I-OH) nejdříve převede na jeden z výše zmíněných reakce schopných derivátů, především na N,N -disubstituovaný ether isomočoviny, například Ν,Ν'-dicyklohexylether isomočoviny, a ten se potom spojí s kyselinou, která má být esterifikována, ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například ethylacetát.However, it is also possible to first convert the corresponding 2-silyl ethanol of formula (I-OH) to one of the abovementioned reaction-capable derivatives, in particular to the N, N -disubstituted isourea ether, for example Ν, Ν'-dicyclohexyl ether of isourea, and it is then combined with the acid to be esterified in a suitable inert solvent such as ethyl acetate.

Příslušná O-( 2-silylethyl'i isomočovina, například 0- (2-R’ , R“ -silylethyl )-N, N --dicyklohexylmoČovina se výhodně získá kondenzací výše uvedeného 2-silylethanolu vzorce (I-OH) s příslušným, v tomto případě na dusíkových atomech substituovaným karbodiimidem, zejména s N,N^-dicyklohexylkarbodiiuiidenmThe corresponding O- (2-silylethyl) isourea, for example O- (2-R ', R'-silylethyl) -N, N-dicyclohexylurea, is preferably obtained by condensation of the above 2-silylethanol of formula (I-OH) with the appropriate, in this case carbodiimide substituted on nitrogen atoms, in particular with N, N-dicyclohexylcarbodiidene

Tato modifikace je v prvé řadě zvláště výhodná u obtížně esteriítikovatelných kyselin, například takových, kde je karboxylové skupina z důvodů stérické zábrany těžko přístupná, nebo u kyselin, které při obvyklé karbodiimidové metodě prokážují sklon к tvorbě vedlejších produktů, jako nitrilů a acylmočovin. Má-li se ester nějaké aminokyseliny s volnou alfa-aminoskupinou připravit vynálezu odpovídajícím postupem, zejména podle karbodiimidové varianty, je vhodné volnou aminoskupinu během esterifikační reakce přechodně chránit a chránící skupinu této aminoskupiny po skončení procesu opět odstranit.This modification is particularly advantageous in the case of difficultly esterifiable acids, for example those where the carboxyl group is difficult to access due to steric hindrance, or in acids which, in the conventional carbodiimide method, tend to produce by-products such as nitriles and acylureas. If the ester of an amino acid having a free alpha-amino group is to be prepared according to the invention in a corresponding manner, in particular according to the carbodiimide variant, it is appropriate to temporarily protect the free amino group during the esterification reaction and to remove the amino-protecting group again.

Zvláště vhodné pro tento postup jsou kondenzační produkty aminokyselin s beta-dikarbonylovými sloučeninami (srovnej například G. L·. Southard a spol., Tetrahedron 27, ¹ 359 /1971/). Vznikají známým způsobem prostým spojením obou složek podle obecné rovnice:Particularly suitable for this process are the condensation products of amino acids with a beta-dicarbonyl compounds (cf. e.g. G. L ·. Southard et al., Tetrahedron 27 ¹ 359/1971 /). They arise in a known manner by simply combining both components according to the general equation:

NH_O -C=CH-COI ² ! INH ₀ -C = CH-COI ² ! AND

-CH-COOH + -CO-CH-CO- —> NH +HgO i-CH-COOH + -CO-CH-CO- > NH + HgO i

IAND

-CHCOOH-CHCOOH

Odštěpení chránící skupiny aminů nastává známým způsobem za mírně acidolytických _э podmínek, například krátkým působením zředěné halogenovodíkové kyseliny, zejména chlorovodíkové, která nenapadá vynálezu odpovídající esterovou skupinu vzorce (I). Jako beta-dikarbonylová složka je vhodný například benzoylaceton a zejména nižší alkylester kyseliny acetoctové, především ethylester acetoctové kyseliny, jehož poměrně snadná těkavost velmi > usnadňuje čištění látky.Deprotection of amines in a known manner under mild acidolytic _э conditions such as a short treatment with dilute hydrohalic acid, especially hydrochloric acid, which does not attack the ester group corresponding to the invention of formula (I). Suitable beta-dicarbonyl components are, for example, benzoylacetone and, in particular, lower alkyl acetic acid esters, in particular ethyl acetate, whose relatively easy volatility greatly facilitates the purification of the substance.

Alkoholy výše charakterizovaného obecného vzorce (I-OH) jsou známé nebo je lze víceméně připravit známými metodami. Rovněž kyseliny, které mají být esterifikováry, jsou známy - zejména v rozsahu chemie peptidů - nebo je lze také připravit již známými postupy. Pokud jde však o všeobecnou použitelnost postupu odpovídajícího vynálezu, nemá na ni specifická struktura karboxylových sloučenin, které mají být chráněny, žádný vliv.Alcohols of the above-described general formula (I-OH) are known or can be more or less prepared by known methods. Also, the acids to be esterified are known - particularly in the range of peptide chemistry - or can also be prepared by known methods. However, the specific structure of the carboxyl compounds to be protected has no effect on the general applicability of the process of the present invention.

Stavba peptidového řetězce vychází použitím postupů odpovídajících vynálezu především od koncových uhlíků aninnoyssein. Postupuje se tak, ie se nechá reagovat aininooysseina nebo pepia s jednou volnou alfa-minoskupinou nebo jednou karboxylovou skupinou chráněnou způsobem odpoovdaaícím vynálezu - to znamená esterifiVo-anvu zbytkem vzorce (I) - s amí nokkaelinou nebo peptidem obsahnuícím chráněnou alfa-minoskupinu a aktivovanou koncovou karboxylovou skupinu.The peptide chain construction is based on aninnoyssein terminal carbons, in particular, using the methods of the invention. This is accomplished by reacting an aino-amino acid or pepia with one free alpha amino or one carboxyl group protected in a manner corresponding to the invention - that is, an ester amino-moiety with the remainder of formula (I) - with amino amino acid or peptide containing protected alpha amino and activated terminal carboxyl group.

V požadovaném případě . se chránící skupina koncového dusíku alfa-aminové skupiny odštěpí a již popsaná kondenzace bude pokračovat s další aninoVksseinvu nebo peptidovým fragmentem. Nakonec se chránící skupina vzorce (I) koncového uhlíku odštěpí vdpovída-ícím způsobem podle vynálezu a uvolní se karboxylové skupina. M^li produkt sloužit jako stavební jednotka (peptidový fragment) rozsáhlé peptidové syntézy., pak zůstanou ostatní chránící skupiny zachovány.If required. the terminal nitrogen protecting group of the alpha-amino group is cleaved off and the condensation described above will continue with the next amino acid or peptide fragment. Finally, the terminal carbon protecting group of formula (I) is cleaved in an appropriate manner according to the invention and the carboxyl group is released. If the product serves as a building block (peptide fragment) of extensive peptide synthesis, then the other protecting groups will be retained.

NααooVi tomu, m^li být konečná látka používána jakožto taková, pak se všechny ostatní chránící skupiny odes^ní, a to obvykle ještě před vynálezu vdpovídα-ícím odštěpením chránicí skupiny karboxylu vzorce (I). ₅ If the final compound is to be used as such, then all the other protecting groups are displaced, usually before the invention by appropriate cleavage of the carboxyl protecting group of formula (I). ₅

Vynálezu vdpovϊdi-ϊcí postup lze též p^L^u^í^t u syntézy víceřetézcvvých, zvláště dvouřetězcových p^piíů, nαpoíУl-i takových, kde jsou dva různé peptidové řetězce spojeny cys- * tinovým -S-S- můstkem. V takovém případě je karboxylová skupina, která stojí na konci řetězce, chráněna skupinou vzorce (I), zatímco karboxylová skupina n^cl^ázejjcií se na konci druhého řetězce je opatřena jinou chránící skupinou karboxylowu, n^výhodn^i . nappíklai terc.butylovou skupinou.The invention can also be used in the synthesis of multi-chain, especially double-chain, sequences, such as those where two different peptide chains are linked by a cis -S-S-bridge. In such a case, the carboxyl group which stands at the end of the chain is protected by a group of formula (I), while the carboxyl group n is at the end of the second chain is provided with another carboxyl protecting group, preferably. for example tert-butyl.

Prvně jmenovaná chránící skupina se může vynálezu vdpovVda-ícím způsobem vdiSr-nit a uvolněnou karbvxylvvvu skupinu lze zkondenzovat spolu s volnou alfa-aminokyselinou další aminookseliny nebo peptidu, v daném případě zavedením běiné aktivace takové skupiny. Jestliže kondenzací připojený fragment obsahuje na karboxylové skupině n^c^-^h^zzeící se na konci řetězce opět chránící skupinu vzorce (I), můie se reakční sled opakovat.The former may be appropriately influenced by the invention and the liberated carbonyl group may be coupled together with the free alpha amino acid of another amino acid or peptide, in the present case by introducing the normal activation of such a group. If the condensation-coupled fragment contains a carboxyl group of the group (I) at the end of the chain again protecting the group of formula (I), the reaction sequence may be repeated.

Někdy lze také chránicí skupinu karboxylu druhého řetězu, n-poíУl-i zmíněnou terc.butylovou skupinu, selektivně vditěěOt reakcí v kyselém prostředí, čímž se zachová chránící skupina vzorce (I). Celý tento vynálezu vdpovVíijící postup je sám o sobě východiskem pro další syntézní v-ri-nts a druh pepii-du nebo jeho derivátu, který má být 'syntetizován, nehraje při vybití tohoto postupu žádnou roli.Sometimes, the carboxyl protecting group of the second chain, the n-poly-tert-butyl group, can also be selectively reacted in an acidic environment, thereby preserving the protecting group of formula (I). The present invention as a whole is a starting point for further synthetic synthesis and the type of peptide or derivative to be synthesized has no role in discharging the process.

Výše zmíněná aktivace karboxylové skupiny se děje víceméněznámým způsobem, například převedením na -zíí kyseliny, anhydrid kyseliny, imiiazeVii kyseliny, í.soxí^I.í^í kyseliny nebo na aktivní ester, n-poíУlai kyammihySliser, o-nitrvfenslister, o^-nitrvflnslthivlstlr, 2, ^-^^^г^пу-оз!!', oθeia-hhovfennSelSel, ^-hySiovχssUyinimidiltee, N-hχSiroχStall imidistir, N-hydroxχsOpoerdinesSer.The aforementioned activation of the carboxyl group is carried out in a more or less known manner, for example by converting it to an acid, an acid anhydride, an acid imiase, an oxoic acid or an active ester, a n-polyalkylamine, an o-nitrenesulfate, an o ^- nitrile nitrite. 2, 2, 4, 6, 7, 8, 10, 11, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14, 14 and 14 hours respectively.

Aktivaci niůie též nastat reakcí s k-гbvdiimidem, jako je nаpoíУlai N,N -di-csklohexylУarbodiimii (v daném případě přidáním N-hydroxysukcinimidu nebo 1lhsiroxybeeieVriaevlu substižvo-ané^ho ^halogenem» metylem nebo mettoxylem) nebo N,N'l^y-r^bvny^Sdiimiⁱ-eol. Jato nij^běžnejší metody aktivaci lze uvést metodu Уαrbvdiimiilvvvu, metodu azidovou, metodu anhydrido- * vou, jakož i metodu aktivního esteru.Activation niůie also occur by reaction with K-гbvdiimidem as nаpoíУlai N, N -di-csklohexylУarbodiimii (in this case by adding N-hydroxysuccinimide or 1lhsiroxybeeieVriaevlu substižvo ^Christians-h ^ of halo »methyl or mettoxylem) or N, N'l ^y - r ^b vny ^S diimi ⁱ -eol. Jato NIJ not ^go activation methods include Уαrbvdiimiilvvvu method, the azide method, the method anhydrido- * acid, as well as the active ester method.

Z peptidů je v prvé řpdě třeba znát ty, které se v^í^s^k^Sují v přírodě, jak ve své práci Chemie a biochemie aninnokselin, pepti-dů a proteinů oovOsují K.Ltlbke, E. Schrčder aOf the peptides, it is first necessary to know those which are widely expressed in nature, as in their work Chemistry and Biochemistry of aninnokselins, peptides and proteins by K. Ltlbke, E. Schrder and

G. Kloss - i. a II. díl - Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1975 - a také jejich syntetická analoga, která se od nich oddišují tím, že je v nich vyměněna jedna nebo více aninookselin ^za jiné aninntyssHn^-. ^Je nutn^é znát ^též t,u ^část pepii^» to¹^ t^ří přechod mezi ^mito dvěma zmíněnými skupinami, tj. ·peptidy přírodními a skntitickými. Mezi aminoVkSsiins, kte^ré ^se и ^uved^ených ^ptidů ^ssarSuu^í' ve formě stavtoní jlⁱnvt^ys, patří přede^vší^{m 20} ^d^ch aminokyselin (srovnej například Sci. Američan, October 1960, str. 55) s homology a jejich strukturní a optické isomery. Jsou to například aminokyseliny nižších alkanů nejvýše se 7 uhlíkovými atomy, které se liší od kódových aminokyselin, například alfa-aminomáselná kyselina, norvalin, beta-alanin, gama-aminomáselná kyselina, alfa,beta-diaminopropionová kyselina, hydroxyprolin, norměthionin, fenylglycin, ornithin, citrullin, O-methyltyrosin, N-inethyl tyrosin a jiné nižší N-alkylaminokyseliny. Náleží sem dále racemické kyseliny a D-aminokyseliny, jakož i místo cysteinu a cystinu beta-merkaptopropionová kyselina (desaminocystein), popřípadě její oxidovaná -S-S- forma.G. Kloss - I. and II. Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1975 - and their synthetic analogues, which differ from them by exchanging one or more aninookselins ^with another aninntyssHn ^- . ^J e ^necessarily know ^{whether or not} T, U ^part PepI ^ »^ ¹ a ^ t ^ of manufacture transition between mito by the two groups, i.e. natural and peptides · skntitickými. Among aminoVkSsiins who ^r s ^is и ^uv ed ^e NYCHA ^ PTID ^ ssarSuu ⁱ 'as stavtoní JL ^and NVT ^ys include ^more particularly from ²⁰ ^ d ^ ch amino acids (cf., for example, Sci. American, October 1960, p. 55 ) with homologues and their structural and optical isomers. These are, for example, amino acids of lower alkanes with up to 7 carbon atoms which differ from the code amino acids, for example alpha-aminobutyric acid, norvaline, beta-alanine, gamma-aminobutyric acid, alpha, beta-diaminopropionic acid, hydroxyproline, normethionine, phenylglycine, ornithine , citrullin, O-methyltyrosine, N-ethyl tyrosine and other lower N-alkylamino acids. It also includes racemic acids and D-amino acids, as well as beta-mercaptopropionic acid (desaminocysteine) or its oxidized -SS- form instead of cysteine and cystine.

Není-li jinak uvedeno, rozumějí se peptidovými deriváty a deriváty aminokyselin především ty sloučeniny, u kterých se funkční skupiny (například skupiny aminové, hydroxylové, merkaptanové a guanidinové, jakož i karboxylové skupiny postranních řetězců) vyskytují v chráněné formě.Unless otherwise indicated, peptide and amino acid derivatives are especially those compounds in which the functional groups (e.g., amino, hydroxyl, mercaptan and guanidine groups as well as the side chain carboxyl groups) are present in protected form.

Jako chránicí skupiny aminů lze uvést následující:The following are protection groups for amines:

1. benzyl a tri tyl;1. Benzyl and triethyl;

2. acylskupiny, například formy, trifluoracetyl, ftaloyl, p-toluensulfonyl, alfa-toluensulfonyl, Ο-nitrobenzen-sulfonyl, benzensulfonyl;2. acyl groups, for example, forms, trifluoroacetyl, phthaloyl, p-toluenesulfonyl, alpha-toluenesulfonyl, Ο-nitrobenzenesulfonyl, benzenesulfonyl;

3. především skupiny odvozené od kyseliny uhličité a kyseliny thiouhliči té,3. In particular, groups derived from carbonic acid and thiocarbonic acid;

a) jako jsou v daném případě benzyloxykarbonylové skupiny substituované v aromatickém zbytku halogenovými atomy, nitroskupinami, nižšími alkylovými, popřípadě alkoxylovými skupinami nebo nižšími karbalkoxylovými skupinami, například karbobenzoxy-skupina (= benzyloxykarbonylová skupina), o-brombenzyloxykarbonylová skupina, p-brombenzyloxykarbonylová skupina, nebo p-chlorbenzyloxykarbonylová skupina, 2,4-dichlorbenzyloxykarbonylová skupina, p-nitrobcnzy.l oxykarbonylová skupina, p-methoxybenzyloxykarbonylová skupina, barevné benzyloxykarbonylové skupiny, _tjako například p-fenylazobenzyloxykarbonylová skupina a p-(p'-methoxyrenylazo)benzyloxykarbonylová skupina, dále pak tolyloxykarbonylová skupina, 2-(3,5-dimcthoxyfenyl)-2-propyloxykarbonylc. vá skupina, benzhydryloxykarbonylová skupina, 2-fenyl-2-propyloxykarbonylová skupina, 2-(p-tolyl)-2-propyloxykarbonylová skupina a především 2-a) as in the present case benzyloxycarbonyl groups substituted in the aromatic radical by halogen atoms, nitro groups, lower alkyl or alkoxy groups or lower carbalkoxy groups, for example carbobenzoxy (= benzyloxycarbonyl), o-bromobenzyloxycarbonyl, p-bromobenzyl p-chlorobenzyloxycarbonyl, 2,4-dichlorobenzyloxycarbonyl, p-nitrobenzyl, oxycarbonyl, p-methoxybenzyloxycarbonyl, colored benzyloxycarbonyl, _t such as p-phenylazobenzyloxycarbonyl and p- (p'-methoxyrenyl) tolyloxycarbonyl, 2- (3,5-dimethoxyphenyl) -2-propyloxycarbonylc. benzhydryloxycarbonyl, 2-phenyl-2-propyloxycarbonyl, 2- (p-tolyl) -2-propyloxycarbonyl, and in particular 2-

-(bifenyly!)-2-propyloxykarbony!ová skupina;- (biphenyl) -2-propyloxycarbonyl;

b) také alifatické, popřípadě cykloalifatické oxykarbonylové skupiny, jako například í -methylcyklobutyloxyicarbonylová skupina, alkyloxykarbonylová skupina, cyklopentyloxykařbonylová skupina, terč.amyloxykarbonylová skupina, adamantyloxykarbonylová skupina, isobornyloxykarbonylová skupina a v prvé radě terč.butyloxykarbonylová skupina.b) also aliphatic and optionally cycloaliphatic oxycarbonyl groups such as a 1-methylcyclobutyloxyicarbonyl group, alkyloxycarbonyl group, cyclopentyloxycarbonyl group, tert-amyloxycarbonyl group, adamantyloxycarbonyl group, isobornyloxycarbonyl group and, in the first place, tert-butyl group.

Hydroxylové skupiny, například serinových zbytků, .threoninových zbytků a tyrosinovýcn zbytku, mohou být chráněny esterifikací nebo etherifikací. Pro esterifikaci jsou zejména vhodné zbytky nižších alkoholů, například acetyl, aroylovc zbytky, například benzoyl a především zbytky odvozující se od kyseliny uhličité, jako benzyloxykarbonyl, o-brombenzyloxykarbonyl nebo ethyloxykarbonyl. Vhodné skupiny pro etherifikaci jsou například benzylové zbytky, ni-b.rombenzylové zbytky, 2,ó-dichlorbenzylové zbytky, te trahydropyranylové zbytky nebo terč.butylové zbytky. Dále se pro ochranu hydroxylových skupin hodí skupiny, které popsal Weygand (Chem. Berichte 100 /1967/ 1838-1849). Jsou to 1 - terč,butyloxykarbonylaminové nebo 1-benzyloxykarbonylamino-2,2,2-trifluorethylové skupiny.Hydroxyl groups, for example serine residues, threonine residues and tyrosine residues, can be protected by esterification or etherification. Lower ester alcohols, for example acetyl, aroyl residues, for example benzoyl, and in particular carbonic acid-derived residues such as benzyloxycarbonyl, o-bromobenzyloxycarbonyl or ethyloxycarbonyl are particularly suitable for esterification. Suitable groups for etherification are, for example, benzyl radicals, n-bromobenzyl radicals, 2, 6-dichlorobenzyl radicals, trahydropyranyl radicals or tert-butyl radicals. Further suitable for the protection of hydroxyl groups are those described by Weygand (Chem. Berichte 100/1967 / 1838-1849). They are 1-tert-butyloxycarbonylamino or 1-benzyloxycarbonylamino-2,2,2-trifluoroethyl groups.

Merkaptoskupiny, například cysteinových nebo desaminocysteinových zbytků, mohou být chráněny zbytky aralkylového typu, kde alifatický uhlíkový atom vázaný na síře merkaptanové skupiny má zároveň nejméně jeden arylový zbytek a je součástí cykloalifatického kruhu, nebo má ještě jeden, popřípadě dva další arylové zbytky, jako například:Mercapto groups, for example cysteine or desaminocysteine residues, may be protected by aralkyl type residues wherein the aliphatic carbon atom bound to the sulfur of the mercaptan group simultaneously has at least one aryl residue and is part of the cycloaliphatic ring, or has one or two additional aryl residues, such as:

i-fenylcyklcpentylový zbytek, 1-fenylcyklohexylový zbytek, 1-fenylcykloheptylový zbytek p-methoxyfenylcyklohexylový zbytek, 1,1-difenylethylový zbytek, 1,1 - d i-p-tolyl ethylový. zbytek, a především- trifenylmethylovy zbytek (trityl, trt). К ochraně merkaptánových skupin lze použít také acylaminomethylových skupin, u nichž je acylový zbytek odvozen od alifatické, aralifatické, karboxyklické nebo heterocyklické, v daném případě aromatické karboxylové kyseliny nebo od monoesterů kyseliny uhličité.i-phenylcyclopentyl, 1-phenylcyclohexyl, 1-phenylcycloheptyl p-methoxyphenylcyclohexyl, 1,1-diphenylethyl, 1,1-di-p-tolyl ethyl. a residue, and especially a triphenylmethyl residue (trityl, trt). Acylaminomethyl groups in which the acyl residue is derived from an aliphatic, araliphatic, carboxyclic or heterocyclic, in this case aromatic, carboxylic acid or monoester of carbonic acid may also be used to protect the mercaptan groups.

Zvláště vhodné chránicí skupiny tohoto typu jsou aminomethylové skupiny nižších alkanoylů nebo hlavně асеtylaminome thylskupin (Acrti). Merkaptoskupina může však být к dispozici také ve své oxidované formě, například jako cystinový -S-S- můstek nebo jako skupina vzorce -S-S-COOR. (Symbol R v posledním vzorci znamená v daném případě substituovaný uhlovodíkový zbytek nejvýše· s 18 uhlíkovými atomy. Srovnej například německý Offonlegungsschrift (i. i 568 632). Guanidinová skupina, například v argininovém zbytku, může být popřípadě chráněna nitro-nebo p-toluensulfonylovou skupinou (tosyl).Particularly suitable protecting groups of this type are the aminomethyl groups of the lower alkanoyl or, in particular, the aminomethyl groups (Acrti). However, the mercapto group may also be present in its oxidized form, for example as a cystine -S-S- bridge or as a group of the formula -S-S-COOR. (The symbol R in the last formula in this case represents a substituted hydrocarbon radical of up to 18 carbon atoms. Compare, for example, the German Offonlegungsschrift (i. 568 632). The guanidine group, for example in the arginine radical, can optionally be protected by nitro- or p-toluenesulfonyl. (tosyl) group.

Může nastat případ, že se v reagujících sloučeninách vyskytuje více- karboxylových skupin. Tyto mohou být к dispozici v různých chráněných formách, přičemž je umožněno selektivní zpracování každé jednotlivé skupiny. Karboxylové skupiny mohou být například chráněny vytvářením hydrazidů nebo esterifikací. Pro esterifikaci jsou zvláště vhodné například v daném případě substituované •a) nižší alkoholy, jako methanol, ethanol nebo zvláště terč·butanol;It may be the case that polycarboxylic groups are present in the reacting compounds. These may be available in different protected forms, allowing selective processing of each individual group. For example, carboxyl groups can be protected by hydrazide formation or esterification. Particularly suitable for esterification are, for example, the substituted a) lower alcohols, such as methanol, ethanol or, in particular, tert-butanol;

eE

b) nižší arylalkoholy, jako například v daném případě benzylalkoholy nebo benzhydrylalkoholy, substituované nižšími ethylovými skupinami, nižšími alkoxylovýini skupinami a nitroskupinaini, anebo halogenovými atomy. Například p-nitrobenzylalkohol nebo 2,4,6-trimethylbenzy 1.alkohol a také fenoly, zvláště pak thiofenoly, jako fenol, thiofenol nebo thiokresol.(b) lower aryl alcohols, such as in the present case benzyl alcohols or benzhydryl alcohols substituted with lower ethyl groups, lower alkoxy groups and nitro groups, or halogen atoms. For example, p-nitrobenzyl alcohol or 2,4,6-trimethylbenzyl alcohol and also phenols, especially thiophenols such as phenol, thiophenol or thiocresol.

Uvedené typy chránících skupin se většinou hodí pro tento vynálezu odpovídající postup zvláště proto, že při odštěpení, které odpovídá vynálezu, zůstávají neporušené a jejich použití není omezeno na peptídy a jejich deriváty. Účelem předchozího výčtu chránících skupin je spíše ukázat na nejrůznější možnosti jejich použití. Tento výčet není ani zdaleka vyčerpávající, protože za postupu odpovídajícího podmínkám zůstávají neporušené také například volné hydroxylové skupiny, volné i chráněné, jakož i ketalisované oxoskupiny, laktony, laktamv - vzláště beta-iaktamy -, dvojné a trojné vazby etd.These types of protecting groups are generally suitable for the present invention, especially since they remain intact when cleaved according to the invention and their use is not limited to peptides and derivatives thereof. Rather, the purpose of the foregoing listing of protecting groups is to point to a wide variety of uses. This list is far from exhaustive since, for example, free hydroxyl groups, free and protected as well as ketalized oxo groups, lactones, lactams - especially beta-lactams -, etd double and triple bonds, remain intact under the conditions appropriate to the process.

Pokud jde o stálost, chemickou netečnost vůči jiným skupinám a reaktivnost. (s výjimkou odštěpení podle vynálezu), odpovídá karboxylová skupina chráněná vynálezu odpovídajícím způsobem karboxylové skupině esterifikováné nižším lineárním alkoholem, zvláště methanolem nebo ethanolem. Lze ji proto zcela obecně použít místo alkoholem esterifikované karboxylové skupiny, a to zvláště tehdy, je-li možno výhodně uplatnit její vynálezu odpovídající specifickou odštěpítelnost.In terms of stability, chemical inertia towards other groups and reactivity. (except for the cleavage of the invention), the carboxyl group protected by the invention corresponds correspondingly to a carboxyl group esterified with a lower linear alcohol, in particular methanol or ethanol. It can therefore be used in general in place of an alcohol-esterified carboxyl group, in particular if its specific cleavability can be advantageously applied.

V následujících případech, které nám ukazují některé výhodnější způsoby praktického provedení vynálezu, jsou teploty udávány ve °C a používány následující zkratky:In the following cases, which show us some more preferred embodiments of the invention, temperatures are given in ° C and the following abbreviations are used:

Boc = terč.butylkarbonylBoc = tert-butylcarbonyl

A cm = асеtylaminomethy1A cm = асеtylaminomethy1

Trt = trityl (= trifenylmethyl)Trt = trityl (= triphenylmethyl)

Z = karbobenzoxy (= benzyloxykarbonyl) <Z = carbobenzoxy (= benzyloxycarbonyl) <

But = terc.butylBut = tert-butyl

Me - me thylMethyl thyl

Врос - 2-(p-bifenylyl)-2-propyloxykarbonyl .DMF = dimethylformamidN- (2- (p-biphenylyl) -2-propyloxycarbonyl) DMF = dimethylformamide

18-crown-ether-6 = 1,4,7,10,13,16-hexaoxycyklooktadekan18-crown-ether-6 = 1,4,7,10,13,16-hexaoxycyclooctadecane

Systém 100 používaný v chromatografií na tenké vrstvě je směs alkylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 62:21:6:11.System 100 used in thin layer chromatography is a 62: 21: 6: 11 mixture of alkyl acetate, pyridine, acetic acid and water.

Příklad 1Example 1

Benzyloxykarbonylglycin-2-trimethylsilylethylester Z - Gly - O - CH^CH^SiíCH^)Benzyloxycarbonylglycine-2-trimethylsilylethyl ester Z-Gly-O-CH 2 CH 2 Si 2 CH 2)

a) Příprava: Ke směsi 1,97 g benzyloxykarbonylglycinu a 1,77 ml 2-trimethylsilyle t-hanolu v 5 ml pyridinu se za míchání a při teplotě 3° přidá 2,14 g N, N -dicyklohexyl karbodiimidu a reakční směs se nechá při této teplotě stát 15 hodin. Po přidání 0,5 ral ledové kyseliny octové se směs nechá stát ještě 30 minut v chladničce a vyloučená dicyklohexylmočovina se odfiltruje.a) Preparation: To a mixture of 1.97 g of benzyloxycarbonylglycine and 1.77 ml of 2-trimethylsilyl t -anol in 5 ml of pyridine was added, with stirring at 3 °, 2.14 g of N, N-dicyclohexylcarbodiimide and the reaction mixture was left. stand at this temperature for 15 hours. After addition of 0.5 ml of glacial acetic acid, the mixture is allowed to stand for 30 minutes in a refrigerator and the precipitated dicyclohexylurea is filtered off.

Filtrát se zředí ethylesterera kyseliny octové a vytřepe se s kyselinou chlorovodíkovou zředěnou vodou s 5¾ roztokem kyselého uhličitanu sodného. Rozpouštědlo se odpaří a odparek se chromátografuje na 90 g silikagelu se směsí chloridu uhličitého a kyseliny octové (95:5). Výsledkem je bezbarvý olej benzyloxykarbonylglycin-2-trimethylsilylethyleste.ru. Rf - 0,41 na silikagelu v systému toluen - aceton (9-1).Dilute the filtrate with ethyl acetate and shake with dilute hydrochloric acid in water with a 5¾ solution of sodium bicarbonate. The solvent was evaporated and the residue was chromatographed on 90 g of silica gel with carbon tetrachloride / acetic acid (95: 5). The result is a colorless oil of benzyloxycarbonylglycine-2-trimethylsilylethyleste.ru. Rf = 0.41 on silica gel in toluene-acetone (9-1).

b) Odštěpení chránící skupiny narbox.ylu: výše popsaný produkt (31 mg) se nechá reagovat při 30 °C s '1,6 ml (2 ekvivalenty) 0,125 M roztoku tetraethylamoniumfluoridu v dimethylfcrmamidu (obsahujícím 1,4 % vody). Průběh reakce je sledován ohromatograficky na tenké vrstvě. Po 2 hodinách je к dispozici jako jediný prokazatelný produkt benzyloxykarbonylgly·cin.b) Cleavage of the narboxyl protecting group: The product described above (31 mg) was reacted at 30 ° C with 1.6 ml (2 equivalents) of a 0.125 M solution of tetraethylammonium fluoride in dimethylformamide (containing 1.4% water). The course of the reaction is monitored by thin-layer chromatography. After 2 hours, benzyloxycarbonylglycine is available as the only detectable product.

Analogické Štěpení, které však používá 0.i 65 M roztok tetraethylamoniumfluoridu v di~ int!thylformamidu obsahujícím pouze 0,4 % vody, proběhne za 45 minut.An analogous cleavage using a 65 M solution of tetraethylammonium fluoride in di-methylformamide containing only 0.4% water was carried out in 45 minutes.

P ř í к 1 a d 2Example 1 a d 2

К roztoku 47 mg bGnzyloxykarbonylglycin-2^trimethylsilylethylesteru íviz příklad la) v 1,9 ml dimethylformamidu se v přítomnosti 39 mg I8-crown-ether-6 přidá ^:8 mg (2 ekvivalenty) fluoridu draselného a směs se uchovává při 30 °C. Prostřednictvím ohromatografie na tenké vrstvě se stanoví, že odštěpení 2-trimethylsilylethylové skupiny Je po 24 hodinách zcela skončeno a že v reakční směsi je к dispozici Jako Jediný prokazatelný produkt benzyloxykarbonylglycin,To a solution of 47 mg of benzyloxycarbonylglycine-2-trimethylsilylethyl ester in Example 1a) in 1.9 ml of dimethylformamide in the presence of 39 mg of 18-crown-ether-6 is added ^: 8 mg (2 equivalents) of potassium fluoride and stored at 30 ° C. Thin layer chromatography indicated that the cleavage of the 2-trimethylsilylethyl group was complete after 24 hours and that the only detectable product was benzyloxycarbonylglycine,

P i í к 1 a d 3Example 1 a d 3

W-Benzyloxykarbonyl-0 terč.butylthreonin-2-trimethylsilylethylestorN-Benzyloxycarbonyl-O-tert-butylthreonine-2-trimethylsilylethyl ester

a) Příprava: Smísí se 112 g (0,36 mol) N-benzylkarbonyl-O-terc.. buthylthreoninu, 83 ml (1,03 mol, 2,9 ekvivalentu) pyridinu, 68 ml (0,47 mol, 1,3 ekvivalentu) 2-trimethylsilylethanolu (d = 0,82) v 145 ml асеtonitrilu.a) Preparation: Mix 112 g (0.36 mol) of N-benzylcarbonyl-O-tert-butylthreonine, 83 ml (1.03 mol, 2.9 equivalents) of pyridine, 68 ml (0.47 mol, 1), 3 equivalents) of 2-trimethylsilylethanol (d = 0.82) in 145 ml of acetonitrile.

Směs se ochladí na 0 až 5° a po částech se přidá, při dodržování vnitřní teploty pod 5°, 82 g (0,4 mol, 1,1 ekvivalentu) M,N^-dicyklohexylkarbodiimidu a nechá stát přes noc, při teplotě 0 až 5°. Při této teplotě se к reakční směsi přidá 15 g kyseliny štavelové a míchá se další půl hodiny. Vyloučená N,N'’-dicyklohexylmočovina se odsaje a promyje ledově chladným octanem ethylnatým.The mixture is cooled to 0-5 ° and 82 g (0.4 mol, 1.1 equivalents) of N, N -dicyclohexylcarbodiimide are added in portions, keeping the internal temperature below 5 °, and allowed to stand overnight at 0 ° C. to 5 °. 15 g of oxalic acid are added to the reaction mixture at this temperature and stirred for a further half hour. The precipitated N, N '- dicyclohexylurea is aspirated and washed with ice-cold ethyl acetate.

Filtrát se vysuší, promyje se 2N-kyselinou chlorovodíkovou až do zřetelné kyselé reakce a potom kyselým uhličitanem sodným a vodou a za sníženého tlaku se silně zahustí. Vyloučená druhá část dicyklohexylmočoviny se odfiltruje a co možná nejkoncentrovanější roztok se filtruje přes sloupec cca 80 g silikagelu a eluuje octanem ethylnatým. Požadovaný ester se získá ve formě hustého bezbarvého oleje, který má Rf = 0,57, (silikagel, toluen-acetonThe filtrate was dried, washed with 2N-hydrochloric acid until a clear acidic reaction, and then with sodium bicarbonate and water, was concentrated strongly under reduced pressure. The precipitated second portion of dicyclohexylurea is filtered off and the most concentrated solution is filtered through a column of about 80 g of silica gel and eluted with ethyl acetate. The desired ester is obtained in the form of a thick colorless oil having an Rf = 0.57 (silica gel, toluene-acetone).

9:1 ).9: 1).

b) Odštěpení chránící skupiny karboxylu: 41 mg podle bodu a) připraveného esteru se nechá reagovat při 30° s 1,6 ml 0,125 M roztoku tetraethylamoniumfluoridu v dimethylformamidu (obsahujícím 1,4 % vody) a průběh odštěpení se sleduje pomocí tenkovrstvé chromatografie (silikagel, chloroform - kyselina octová 98:2).(b) Cleavage of the carboxyl protecting group: 41 mg of the prepared ester were reacted at 30 ° with 1.6 ml of a 0.125 M solution of tetraethylammonium fluoride in dimethylformamide (containing 1.4% water) and monitored by thin layer chromatography (silica gel). , chloroform-acetic acid 98: 2).

Odštěpení proběhne úplně během 10 min a nejsou pří tom prokazatelné jak Žádné výchozí látky, tak ani vedlejší produkty. Při podobné přeměně, tzn. při alkalickém zmýdelnění Z-Thr(But)-OMe, vytváří se vedle žádaného threoninového derivátu Z-Thr-(But)-OH také jeho D-allo-isomer, který je v celkovém systému velmi dobře prokazatelný, nebol vytváří viditelně oddělenou zónu.The cleavage takes place completely within 10 min and there are no detectable starting materials or by-products. In a similar conversion, ie. in the alkaline saponification of Z-Thr (But) -OMe, in addition to the desired threonine derivative, Z-Thr- (But) -OH, its D-allo-isomer is also very well detectable in the overall system or forms a visibly separated zone.

Provádí-li se odštěpení 2-trimethylsilylethylové skupiny v acetonitrilu namísto dimethylformamidu, proběhne při teplotě 50° asi během 3 hodin. Také v tomto případě je konečný produkt stanovitelný pomocí tenkovrstvé chromatografie. Zároveň je prostý všech vedlejších produktů, které obvykle vznikají při odštěpování methylové skupiny.If the 2-trimethylsilylethyl group is cleaved in acetonitrile instead of dimethylformamide, it proceeds at 50 ° C within about 3 hours. In this case too, the final product is detectable by thin-layer chromatography. At the same time, it is free of all by-products which are usually formed when the methyl group is cleaved off.

Příklad 4Example 4

Bpoc-beu-Val-Cys(Trt)-Gly-0-CH₂CH₂Si(CH₃)₃ Bpoc-beu-Val-Cys (Trt) -Gly-0-CH ₂ CH ₂ Si (CH ₃ ) ₃

a) Příprava: К roztoku 890 mg tetrapeptidu (Bpoc-Leu-Val-Cys/Trt/-Gly-OH) ve 2 ml pyridinu se postupně přidá za stálého míchání 0,75 ml 2-trimethylsilylethanolu a 420 mg N,N^Z-dicyklohexylkarbodiimidu. Po 2 hodinách se к reakční směsi přidá 60 ml ehteru (při laboratorní teplotě) a směs se nechá stát při 0°, aby došlo ke krystalizací produktu. Vyloučená výše uvedená sloučenina - tetrapeptidester - se odfiltruje a'dobře promyje etherem.(a) Preparation: To a solution of 890 mg of tetrapeptide (Bpoc-Leu-Val-Cys / Trt / -Gly-OH) in 2 ml of pyridine is gradually added, with stirring, 0.75 ml of 2-trimethylsilylethanol and 420 mg of N, N ^Z - dicyclohexylcarbodiimide. After 2 hours, 60 mL of ether (room temperature) was added to the reaction mixture and the mixture was allowed to stand at 0 ° to crystallize the product. The precipitated title compound - tetrapeptidester - is filtered off and washed well with ether.

Rf = 0,73 (silikagel, chloroform, methanol 8:2).Rf = 0.73 (silica gel, chloroform, methanol 8: 2).

b) Odštěpení chránicí skupiny karboxylu: Odštěpení chránící skupiny v tetrapeptidovém esteru (3,3 mg) získaném přípravou podle bodu a) se děje v 0,1 ml (5 ekvivalentů) 0,125 M roztoku tetraethylamoniumfluoridu v dimethylformamidu (obsahujícím 0,4 % vody). Při reakční teplotě 30° je reakce během 5 min zcela ukončena. Získanou látku, která je prostá vedlejších produktů, lze stanovit tenkovrstvou chromatografií (viz předcházející příklady).b) Cleavage of the carboxyl protecting group: The cleavage of the protecting group in the tetrapeptide ester (3.3 mg) obtained by the preparation of a) is carried out in 0.1 ml (5 equivalents) of a 0.125 M solution of tetraethylammonium fluoride in dimethylformamide (containing 0.4% water). . At a reaction temperature of 30 ° the reaction is complete in 5 min. The by-product-free substance can be determined by thin-layer chromatography (see previous examples).

Příklad 5Example 5

N-Terc. bu coxykarbony 1 -S-асе tyl aminome thyl cystein-2- trimethylsilyleth.ylester Boc-Cys(Acm) -0-CH₉-CHpSi(CH₃)₃ N-Tert. Bu coxykarbony 1 -S-асе butyl methyl cysteine aminomethyl-2- trimethylsilyleth.ylester Boc-Cys (Acm) -0-CH -CHpSi ₉ (CH3) ₃

a) Příprava: Ke směsi 1,40 g Boc-Cys(Acm)-0H, 0,9 ml 2-trimethylsilyleLhanolu a 1,08 g N,N*-dicyklohexylkarbodiimidu, chlazené ledem, se přidá 2,5 ml pyridinu a míchá se 6 hod. při 0°. Reakční směs se zředí trochou ethylesteru kyseliny octové a nechá se reagovat s 65 uig kyseliny štavelové, aby se rozrušil nadbytečný karbodiimid. Po 30 min se vyloučená dicyklohexylmočovina odfiltruje, filtrát se vytřepe nejdříve se zředěnou kyselinou solnou a potom s 5% roztokem kyselého uhličitanu sodného a vysuší se. Po úplném odpaření rozpouštědla se žádaný ester získá ve formě tuhé pryskyřice. Rf - 0,54, (silikagel, chloroform - methanol 9:1)-a) Preparation: To a mixture of 1.40 g of Boc-Cys (Acm) -OH, 0.9 ml of 2-trimethylsilyl-ethanol and 1.08 g of ice-cooled N, N'-dicyclohexylcarbodiimide was added 2.5 ml of pyridine and stirred with 6 hours at 0 °. The reaction mixture was diluted with a little ethyl acetate and treated with 65 µg oxalic acid to destroy excess carbodiimide. After 30 minutes, the precipitated dicyclohexylurea is filtered off, the filtrate is shaken first with dilute hydrochloric acid and then with 5% sodium bicarbonate solution and dried. Upon complete evaporation of the solvent, the desired ester is obtained as a solid resin. Rf = 0.54 (silica gel, chloroform-methanol 9: 1) -

b) Odštěpení chránicí skupiny karboxylu: Reakcí esteru (3,9 mg) s 0,12 ml 0,165 M roztoku Letraethylamoniumfluoridu (2 ekvivalenty) v dimethylformamidu při teplotě 30° se získá během 30 až 40 min jako jediná látka Boc-Cys(Acm)-OH. Průběh reakce je sledován (jak je popsáno u předešlých případů) pomocí tenkovrstvé chromatografie. Tentýž výsledek se získá, nahradí-li se dimethylformamid stejným objemem dimethylsulfoxldu.b) Cleavage of the carboxyl protecting group: Reaction of the ester (3.9 mg) with 0.12 mL of a 0.165 M solution of Letraethylammonium Fluoride (2 equivalents) in dimethylformamide at 30 ° afforded Boc-Cys (Acm) over 30-40 min. -OH. The progress of the reaction is monitored (as described in the previous cases) by thin layer chromatography. The same result is obtained by replacing dimethylformamide with an equal volume of dimethylsulfoxide.

c) Selektivní odštěpení Boc skupiny: Ester připravený podle bodu a) se smísí s 3 ekvivalenty 1,2-N roztoku chlorovodíku ve směsi 2,2,2-trifluorethanol - voda (9:1). Při teplotě 22° se po 20 min získá jako jediný produkt H-Cys(Acm)-O-CHgCHpSi(CH )^ ve formě svého hydrochloridu. Rf = 0,51 (silikagel, systém 100).c) Selective cleavage of the Boc group: The ester prepared according to a) is mixed with 3 equivalents of a 1,2-N solution of hydrogen chloride in 2,2,2-trifluoroethanol-water (9: 1). At 22 °, the only product H-Cys (Acm) -O-CH 2 CH 2 Si (CH) 2 is obtained after 20 min as its hydrochloride. Rf = 0.51 (silica gel, system 100).

Příklad 6Example 6

Boc-Ala-Gly-Cys( Trt)-O-CHgCHgSi (CH^Boc-Ala-Gly-Cys (Trt) -O-CHgCHgSi (CH3)

a) Příprava;(a) Preparation;

^{aa) N},N^z-Dicyklohexyl-⁰-⁽2-trioethylsilylethy^•isomočovína ^{aa) N,} N -Dicyklohexyl- ^{from 0} - ^(2-isourea trioethylsilylethy ^ •

Směs 780 mg (3,79 mod) N,N*-dicyklohexylkarbodiimidu, 0,6 ml (4,17 mmmo, 1^-ekvivalent^ 2-^trimet^yy^lsily^yhanoL·; a 60 mg chloridu módného se míchá ^po dobu 105 min ^při toboratorní teplotě. Směs se zředí 3 ml petroletheru a fittrute se přes sloupec neutrálního kysličníku hlinitého (za opětného promyyí petroletherem). Po odpaření rozpouštědla se získá v názvu uvedený derivát isoročoviny jako slabě nazelenalý olej. Malé mi^o^sv! látky deetílováno v límcové baňce při cca ^{1250 11,}7 ^pa (^teploto toznd.A mixture of 780 mg (3.79 mod) of N, N'-dicyclohexylcarbodiimide, 0.6 ml (4.17 mmmo, ^ 1 ^ 2- -ekvivalent trimethylphenylsulfonyl ^{y t} y ^l ^ yhanoL · force, and 60 mg sodium chloride, fashion-stirred ^p the period of 105 min ^p s toboratorní temperature. the mixture is diluted with 3 ml of petroleum ether and fittrute through a column of neutral alumina (for re promyyí petroleum ether). After evaporation of the solvent, the title compound isoročoviny as a slightly greenish oil. a small I ^ o ^ St! deetílováno substances Kugelrohr at approximately ^{1250 11} 7 ^P (^ toznd temperature.

ab) N,S-Di tri ·tylcyiteio-2-trimethhlsSlylesterand b) the N, S-Di triethylcyio-2-trimethylsilyl ester

Trt - СууСТЧ) - 0 - CH₂CH_?Si (CH3 ),Trt - СууСТЧ) - 0 - CH ₂ CH _? Si (CH3),

Směs 1,53 ^{g (}2,53 mnrto N^í-^s-dirityCcyittinr a ⁸²⁰ m^{g (2,}53 mnoto ^N,^N'-^dicyklohexyl-O-to-trimeethlsslyle1Уу1)i!ooiny, připravené podle bodu aa), v 2,5 ml octanu ethylnatoho se ^béhem ²⁰ todín za!^í^řív^á na 50°. ^po ochlazení se vyloutoná dic^tohexylmotovtoa odϋΗηφ a filirát se zpracovává cУrcmatoo;riaicky na 40 g siliragelr. Eluování se provádí nejdříve směsí ^bjAtoj^ cylylohexan - octan ethylnatý ⁽9;Ό a potom se používá směsí s vtoším podílem octanu etУylnrtéУc. Jednndivé frakce získané teokovrstvou chromorolraaií se spoj a vakuově zbaví rozpouštědla. Poradovaný N,S-dittiill-cyitein-2-trioeehylsilyltiУylester je ve formě bílé pěny. Rf - 0,7 (si^^gel, cyklohexan - octan ethylnatý 14).A mixture of 1.53 ^{g (2.53} mnrto n ⁱ - ^sd irityCcyittinr ⁸²⁰ m, and ^{g (2,} 53 mnoto ^{N, N} '- ^d icyklohexyl-o-trimeethlsslyle1Уу1) i! Ooiny prepared under aa), in 2 5 ml of ethyl acetate ethylnatoho ^b uring Todina for ^20! ^ i ^{Ri and} 50 °. ^p o cooling vyloutoná DIC ^ tohexylmotovtoa odϋΗηφ filirát and is processed cУrcmatoo; riaicky siliragelr on 40 g. The elution is first carried out with a mixture of ethylbutylcyclohexane-ethyl acetate ⁽ 9%) and then a mixture of the greater part of ethyl acetate is used and the single fractions obtained by the theoretic chromorolysis are pooled and the solvent is removed in vacuo. The tri-ethylsilylthiyl ester is in the form of a white foam, Rf = 0.7 (silica gel, cyclohexane-ethyl acetate 14).

ac) S-Ttítllcyiteio-²-irioethyls·íllletУylesierand c) S-Tertiarycyiteio- ² -thioethylsilyl ethyl ester

H-Cy s·Tt t)-O-CH₂ C H_?sS(0Η_β)H-Cy (tt) -O-CH ₂ CH _? sS (0Η _β )

Roztok 1,41 g iiirtlytesterr /'viz bod гЬ)/ v 5 ml se smísí s 25 ml vodného ²,²,²-trffrooetУr^aollr (10 obj. % vody) a pummlu se k němu přidá 1,2N - chlorovodík ve směsi ²,²,2-trifrloetУraollr a vody (9:1, obj./obj„), dokud hodnota pH nezůstane stabtoně na 3,5. ReakCni směs se zředí ttro.butylrkkohoeem, odpaří se ve vakuu, rozpustí se v tero.butyl^^ho/ru a suší Ιι^Ι-ΙΙε^!. Požadovaný S-tritylester se získá ve formě hydrochloridu. Rf = 0,7 (silikE^geL, chloroform - reehanol 9:1).A solution of 1.41 g iiirtlytesterr / 'see section гЬ) / 5 ml was treated with 25 ml of aqueous ^{2, 2, 2 and} -trffrooetУr ollr (10 vol.% Water) and pummlu added thereto 1.2 N - HCl in of a mixture of ² , ² , 2-trifluoromethanol and water (9: 1, v / v) until the pH remains stabton at 3.5. The reaction mixture was diluted with tert-butylcyclohexene, evaporated in vacuo, dissolved in tert-butyl and dried. The desired S-trityl ester is obtained as the hydrochloride. Rf = 0.7 (silica gel: CHCl3 / CH3 OH 9: 1).

ad) Boc-Ato-Gly-Cys(Trr)-О-С^ссу-о(CH3)3(ad) Boc-Ato-Gly-Cys (Trr) -O-S-3 (CH3) 3

Celkový produkt předešlého stupně se rozpustí, s 989 mg N-buroxykkrrbontoranolglycinpeotrcУlorfeoyltsierr (Boc-Ato-Gly-O-C^CC^) v 10 ml' dimethylforraridu, přidá se 0,252 ml N-ttУyloocfclínr a směs se nechá stát přes noc při laboratorní teplotě.The total product of the preceding step was dissolved, with 989 mg of N-buroxycarbontoranol glycine pentafluorophenyl chloride (Boc-Ato-Gly-O-CH2Cl2) in 10 ml of dimethylforraride, 0.252 ml of N-thyloocycline was added and the mixture was allowed to stand overnight at room temperature.

Redakční směs se zředí ethytocetáeeo, promyje se postupně zředěnou kyselinou solnou a zředěným roztokem rhli0irarш sodného, vysuší se a rozpouštědlo se vakuově odpaaí. Zbytek se cУrlInartogafuje na sLlk^í^galu. Vym/váním s chlorooocreer se nejdříve odstraní veddejší produkty a následovně promováni soc^č^zl chloroform - methanol ' (98:2, obj^/obj.) poskytne požadovanou sloučeninu. Rf = 0,9 (silkkagel, octan ethylnatý - pyyidin - voda 65:20:15).The editorial mixture was diluted with ethyl acetate, washed successively with dilute hydrochloric acid and dilute sodium bicarbonate solution, dried and the solvent was evaporated in vacuo. The residue was chromatographed on a small scale. By exchanging with chloroocreer, the by-products are first removed and then salified with chloroform-methanol (98: 2, v / v) to give the desired compound. Rf = 0.9 (silica gel, ethyl acetate-pyridine-water 65:20:15).

b) Odštěpení chránící, skupiny karboxylu; K 34 mg chráněných tripeptioových esterůb) Cleavage of the carboxyl protecting group; To 34 mg protected tripeptioesters

Boc-AAa-Gly-CysClrt)-O-CH^CHgSií^3)3 se přidá 0,65 O. 0,15 M roztoku tet^wh^^lroonίuríiluOt ridu v dimethyHromaridu a nechá se v klidu 10 h za teploty laboratoře. Roztok se vlije do 6 ml 0,01N vodného roztoku kyseeiny solné a vyloučená látka se izoluje odstředěním. Pročistí se vyplavením ve vodě a opět se odstředí. Vznóklý peptid s volnou karboxyllvlu skupinou (Boc-Ala-Gly-Cys/TrtOOH) má Rf = 0,35 (silkaagel, octan ethylnatý - pyridin - vodaBoc-AAa-Gly-CysClrt-O-CH 2 CH 3 Si 3 (0.33) was added 0.65 O. 0.15 M solution of tetrafluoromethyluride in dimethyl bromide and allowed to stand for 10 h at room temperature. The solution is poured into 6 ml of a 0.01N aqueous hydrochloric acid solution and the precipitate is collected by centrifugation. Purify by leaching in water and centrifuge again. The raised carboxyl-free peptide (Boc-Ala-Gly-Cys / TrtOOH) has an Rf = 0.35 (silica, ethyl acetate-pyridine-water)

65:20:15) a je podle tenkovrstvé cУromotoo;gaaie prostý výchozích látek (Rf = 0,7 v témže systémT .65:20:15) and is free of starting materials (Rf = 0.7 in the same systemT) according to the thin film cУromotoo;

Příklad 7Example 7

N-Benzyloxykarbonylglycylfenylalanin-2-trimethylsilylethylesterN-Benzyloxycarbonylglycylphenylalanine-2-trimethylsilylethyl ester

Z-Gly-Phe-O-CH₂CH₂Si(CH^)₃ Z-Gly-Phe-O-CH ₂ CH ₂ Si (CH 2) ₃

a) Příprava:(a) Preparation:

aa) N-( 1-ethoxykarbonyl-1-propen-2-yl)fenylalanin-2-trimethylsilylethylester, C₂H₅OCO-CH=C(CH₃)-Phe-O-CH₂CH₂S1(CH₃)₃ aa) N- (1-ethoxycarbonyl-1-propen-2-yl) phenylalanine-2-trimethylsilylethyl ester, C ₂ H ₅ OCO-CH = C (CH ₃ ) -Phe-O-CH ₂ CH ₂ S 1 (CH ₃ ) ₃

К suspenzi 8,25 g L-fenylalaninu v 5 ml vody a 80 ml ethanolu se postupně přidá 10 ml dicyklohexylaminu a 6,9 ml ethylesteru kyseliny acetoctové a směs se po dobu 1 h zahřívá na 65° až do vzniku čirého roztoku a ten se vakuovým odpařením přivede ke krystaliz-aci. Zbytek se dvakrát vakuově zahustí vždy s 50 ml pyridinu a zředí se 40 ml acetonitrilu. Za stálého chlazení se к roztoku postupně pomalu přidává 9 ml 5,5 N chlorovodíku v dioxanu, 10 ml 2-trimethylsilylethanolu a 12,3 g N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a nechá se stát přes noc při teplotě 5°.To a suspension of 8.25 g of L-phenylalanine in 5 ml of water and 80 ml of ethanol, 10 ml of dicyclohexylamine and 6.9 ml of ethyl acetate are gradually added, and the mixture is heated at 65 ° for 1 h until a clear solution is formed. evaporation by vacuum evaporation leads to crystallization. The residue is concentrated in vacuo twice with 50 ml of pyridine and diluted with 40 ml of acetonitrile. While cooling, 9 ml of 5.5 N hydrogen chloride in dioxane, 10 ml of 2-trimethylsilylethanol and 12.3 g of N, N'-dicyclohexylcarbodiimide are slowly added slowly to the solution and allowed to stand overnight at 5 °.

Vyloučená sraženina se odsaje a promyje octanem ethylnatým. Filtrát se za chlazení .ledem vytřepává s 5% roztokem kyseliny citrónové až do vzniku kyselé reakce a potom ještě s roztokem kyselého uhličitanu sodného a s vodou. Po vysušení síranem sodným se roztok vakuově zahustí a zbytek rozpuštěný v systému hexan - octan ethylnatý (1:9) se filtruje přes desetinásobné množství silikagelu. Získá se chráněny fenylalaninový ester ve formě hustého oleje.. Rf - 0,6 (silikagel, cyklohexan -- octan ethylnatý 1:4).The precipitate formed is filtered off with suction and washed with ethyl acetate. The filtrate is shaken with ice-cold 5% citric acid solution until cooling, followed by sodium bicarbonate solution and water. After drying over sodium sulfate, the solution was concentrated in vacuo and the residue dissolved in hexane-ethyl acetate (1: 9) was filtered through a 10-fold amount of silica gel. Rf = 0.6 (silica gel, cyclohexane / ethyl acetate 1: 4).

ab) Fenylalanin-2-trimethylsilylethylesterand b) Phenylalanine-2-trimethylsilylethyl ester

Phe-O-CH₂CH₂Si(CH₃)₄ Phe-O-CH ₂ CH ₂ Si (CH ₃ ) ₄

К roztoku látky získané podle bodu aa) v 140 ml etheru se přidá 14,3 ml 5,9 N chlorovodíku v dioxanu a po 5 min se směs extrahuje s 200 ml vody. Vodný roztok se dvakrát protřepává vždy s 20 ml etheru a tyto spojené etherové fáze se opětně extrahují s 20 ml vody. Tato druhá část vodného roztoku se spojí s první a spojený vodný roztok se upraví kyselým uhličitanem sodným na alkalickou reakci a extrahuje octanem e thy lna tým,.To a solution of (aa) in 140 ml of ether was added 14.3 ml of 5.9N hydrogen chloride in dioxane and after 5 minutes the mixture was extracted with 200 ml of water. The aqueous solution was shaken twice with 20 ml of ether each time and the combined ether phases were re-extracted with 20 ml of water. This second portion of the aqueous solution is combined with the first and the combined aqueous solution is made alkaline with sodium bicarbonate and extracted with ethyl acetate.

Organická fáze se promyje vodou, vysuší a okyselí se 7 ml 4,6 N roztokem chlorovodíku v dioxanu. Rozpouštědlo se vakuově oddestiluje, zbytek se ještě jednou odpaří s etherem a vytřepe se mezi vodu a ether. Vodný roztok se vakuově zahustí a zbývající voda se odstraní lyof ilizací.. Požadovaný fenylalaninový ester je ve formě hydrochloridu jako bílý prášek. Rf = 0,52 (silikagel, acetonitril - voda 9:1).The organic phase is washed with water, dried and acidified with 7 ml of a 4.6 N solution of hydrogen chloride in dioxane. The solvent was distilled off in vacuo, the residue was re-evaporated with ether and partitioned between water and ether. The aqueous solution is concentrated in vacuo and the remaining water is removed by lyophilization. The desired phenylalanine ester is in the form of the hydrochloride as a white powder. Rf = 0.52 (silica gel, acetonitrile-water 9: 1).

ac) N-Benzyloxykarbonylglycylfenylalanin-2-trimethylsilylethylesterac) N-Benzyloxycarbonylglycylphenylalanine-2-trimethylsilylethyl ester

К roztoku 6,04 g podle bodu ab) připravené látky a 7,8 g Z-glycin-2,4,5-trichlorfenyl esteru v 10 ml dimethylformamidu se přidá 2,8 ml N-methylmorfolinu a hustá suspenze se přes noc míchá při laboratorní teplotě. Po zředění octanem ethylnatým se reakční směs promyje 5x roztokem uhličitanu sodného a 2x 1 N kyselinou solnou, vysuší se a vakuovým odpařením zbaví rozpouštědla. Získaný olej se chromátografuje na 500 g silikagelu. Nejdříve se v první fázi promývá systémem octan ethylantý - hexan (1:4, obj./obj.), a potom se systémy obsahujícími zvětšující se podíl octanu ethylnatého. Jednotlivé frakce tenkovrstvé chromatografie, které obsahují čistý produkt, se spojí a oprostí od rozpouštědla, přičemž žádaný Z-Gly-Phe-O-CH₂CH₂Si(CH₃)₃ je ve formě bezbarvé pryskyřice. Rf = 0,35 (silikagel, toluen - aceton 8:2).To a solution of 6.04 g of (ab) of the prepared substance and 7.8 g of Z-glycine-2,4,5-trichlorophenyl ester in 10 ml of dimethylformamide, 2.8 ml of N-methylmorpholine are added and the thick suspension is stirred overnight at room temperature. at room temperature. After dilution with ethyl acetate, the reaction mixture is washed 5 times with sodium carbonate solution and 2 times with 1N hydrochloric acid, dried and the solvent is evaporated off under vacuum. The oil obtained is chromatographed on 500 g of silica gel. First, wash with ethyl acetate-hexane (1: 4, v / v), and then with systems containing an increasing proportion of ethyl acetate. The individual thin-layer chromatography fractions containing the pure product are combined and freed from the solvent, the desired Z-Gly-Phe-O-CH ₂ CH ₂ Si (CH ₃ ) ₃ being in the form of a colorless resin. Rf = 0.35 (silica gel, toluene-acetone 8: 2).

b) Odštěpení chránicí skupiny karb^xylu: 46 g dipeptidesteru připraveného podle bodu a) se nechá reagovat při 30° s 1,43 ml 0,15 M roztoku tetraethylamoniumfluoridu v dimethylformamidu. Štěpení esteru je sledováno tenkovrstvou chromatografií (silikagel, chloroform - methanol - kyselina octová - voda 90:10:0,5:1). Po 15 min není již prokazatelná žádná výchozí látka a chromatogram ukazuje přítomnost pouze N-benzyloxykarbonylglycylfenylalaninu (Z-Gly-Phe-OH), jehož Rf = 0,15.(b) Cleavage of the carbonyl protecting group: 46 g of the dipeptidester prepared in (a) were reacted at 30 ° with 1.43 ml of a 0.15 M solution of tetraethylammonium fluoride in dimethylformamide. The ester cleavage is monitored by thin layer chromatography (silica gel, chloroform-methanol-acetic acid-water 90: 10: 0.5: 1). After 15 min no starting material is detectable and the chromatogram shows the presence of only N-benzyloxycarbonylglycylphenylalanine (Z-Gly-Phe-OH), Rf = 0.15.

Příklad 8Example 8

2-‘Primethylsilylethylester kyseliny 4-metoxykarbonylmáselné (methyl-^-trimethylsilylethyl/glutarát)4-Methoxycarbonylbutyrate 2-rimPrimethylsilylethyl ester (methyl-4-trimethylsilylethyl / glutarate)

MeO-CO--(CH₂) ₄-CO-O-CH₂CH₂Si(CH₃) ₃ MeO-CO - (CH ₂ ) ₄ -CO-O-CH ₂ CH ₂ Si (CH ₃ ) ₃

a) Příprava: Směs 2,28 g anhydridu kyseliny glutarové a 2,88 ml trimethyls?.lylethanolu se nechá stát 2,5 h. při 90°· Po ochlazení se reakční směs zředí octanem ethy.1 natým a několikrát extrahuje roztokem kyselého uhličitanu sodného, dokud vodné extrakty neprokazují hodnotu pH 8-9. Vodné extrakty se spojí, okyselí se 1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1-2 a extrahuji octanem <r·, hyi.ua tým. Organický roztok se vysuší a v rozpouštědle se odpaří ..a) Preparation: A mixture of 2.28 g of glutaric anhydride and 2.88 ml of trimethylsilyl ethanol was allowed to stand for 2.5 h at 90 °. After cooling, the reaction mixture was diluted with ethyl acetate and extracted several times with an acidic carbonate solution. sodium hydroxide until the aqueous extracts showed a pH of 8-9. The aqueous extracts were combined, acidified to pH 1-2 with 1 N hydrochloric acid, and extracted with ethyl acetate and the team. The organic solution was dried and evaporated in a solvent.

Zbývající surový mono-( H-trime thylsilyl )glutarát /НОСО-(OH?) -,-С0-0-СН_эСН_э3.1 (CH^) který je olejoví tého charakteru, se rozpouští v 30 ml etheru а к vzniklému roztoku se přidává až do vzniku stálého žlutého zabarvení roztok diazomethanu v etheru. Po 30 min se ether- odpaří a zbylý olej se destiluje při 6,5 Pa a teplotě vodní lázně 85°. Výsledkem je směsný diester ve formě bezbarvého oleje. Rf - 0,5 (silikagel, toluen - aceton : 1 . detekce jodem).The remaining crude mono- (H-trimethylsilyl) glutarate / НОСО- (OH?) -, - О0-0-СН _э СН _э 3.1 (CH ^), which is of an oily nature, is dissolved in 30 ml of ether and to the resulting solution A solution of diazomethane in ether is added until a yellow color is obtained. After 30 min, the ether was evaporated and the residual oil was distilled at 6.5 Pa and a water bath temperature of 85 °. The result is a mixed diester as a colorless oil. Rf = 0.5 (silica gel, toluene-acetone: 1st iodine detection).

b) Odštěpení 2-triniothylsi L.yle thy 1. esterové skupiny; 14 mg směsného diesteru připraveného podle bodu a) so nechá stát při 30° v 0,92 ml 0,15 M roztoku tetraethyLamoniumfluoridu v dimethylformamidu. ďiž po 9 min není chromatografií v tenká vrstvě prokazatelné Žádná z výchozích látek a jako jediný produkt rezultuje monomethy'1 ester kyseliny glutarové. Rf = 0,4 (si.likagel, chloroform - methanol - kyselina octová - voda 90 ’ 10:0,5 ' 1 , detekce bromkrezolovou zelení)., 6e identický s původním vzorkem,b) Cleavage of the 2-trinopropylethylsilyl ester group; 14 mg of the mixed diester prepared in (a) are allowed to stand at 30 DEG in 0.92 ml of a 0.15 M solution of tetraethylammonium fluoride in dimethylformamide. after 9 min, no starting material is detectable by thin layer chromatography and the only product resulting is glutaric acid monomethyl ester. Rf = 0.4 (silica gel, chloroform - methanol - acetic acid - water 90 '10: 0,5' 1, detection of bromocresol green), 6e identical to the original sample,

Příklad 9Example 9

-Trime thyl s ily 1 c thy 1 e ster к у sel. lny 7-kyanace tyl amine cef al o s porano ve a; Příprava: К roztoku 305 mg kyseliny 7-kyanacelylcefalosporar.ové (obsahující jako o-Trime thyl with ily 1 c thy 1 e ster к у sel. other 7-cyanation tyl amine cef al o s porano ve; Preparation: To a solution of 305 mg of 7-cyanacelylcephalosporaric acid (containing o

nečistotu cca 20% /У'-isomerů) v 0,17 m.! 2-trimethylsilyleth.anolu a 0,8 ml směsi, асе loni tri lu a pyridinu (4:1, obj./obj.) se přidá při 0° 211 mg dicyklohexylkarbodiimidu. Po 3 hodinách sc vyloučená d i cyk.lohex.yl močovina odsaje, filtrát se zředí octanem ethylnatým, postupné se promyje nejdříve pufracním roztokem citranu sodného (pH = 6) a pak zředěnou kyselinou solnou, vysuší se a odpařením ve vakuu so zbaví rozpouštědla. Získaný odparek obsahuje hlavně’ požadovaný shora uvedený ester, Který má Rf - 0,4 (sil.ikagel. toluen - octan ethylnatý 6:4, detekce v UV nebo jodem) a malý podíl příslušného Z>‘--isomeru o Rf - 0,3 v tomtéž systému.20% (''-isomers) in 0.17 m. 2-trimethylsilylethanol and 0.8 ml of a mixture of trisulphine and pyridine (4: 1, v / v) were added at 0 ° 211 mg of dicyclohexylcarbodiimide. After 3 hours, the dicyclohexyl urea precipitate is filtered off with suction, the filtrate is diluted with ethyl acetate, washed successively with sodium citrate buffer (pH = 6) and then with dilute hydrochloric acid, dried and evaporated in vacuo to remove the solvent. The residue obtained contains mainly the desired ester mentioned above, which has an Rf-0.4 (silica gel, toluene-ethyl acetate 6: 4, detection in UV or iodine) and a small proportion of the corresponding Z> isomer of Rf-0 , 3 in the same system.

b) Odštěpení chránicí skupiny karboxylu: 44 mg esteru připraveného podle bodu a) se nechá reagovat pri teplotě 3-0° s 1,2 ml 0,165 M roztoku tetraethylamoniumfluoridu v dimethylformamidu. Odštěpeni skupiny je sledováno chromatograficky na tenké vrstvě. Ho 30 minutách není prokazatelná žádná z výchozích látek.(b) Cleavage of the carboxyl protecting group: 44 mg of the ester prepared according to (a) is reacted at 3-0 ° with 1.2 ml of a 0.165 M solution of tetraethylammonium fluoride in dimethylformamide. The cleavage of the group is monitored by thin layer chromatography. After 30 minutes no starting material was detectable.

Příklad 10Example 10

N-Benzyloxykarbonyl-O-terč.butylthreonin-2-(dibutylmethy.Isilyl)ethylester (CH₂)₃ CH₃ N-Benzyloxycarbonyl-O-tert-butylthreonine-2- (dibutylmethylsilyl) ethyl ester (CH ₂ ) ₃ CH ₃

Z-ThríButJ-O-CHgCHg-Si —-CH-j (CH₂)₃ CH₃ Z-TrBut-O-CH ₂ CH ₃ -Si-CH-j (CH ₂ ) ₃ CH ₃

a) Příprava; .(a) Preparation; .

aa) 2-(Dibutyl.-methyl-3iIyl )ethanolaa) 2- (Dibutyl-methyl-3-yl) ethanol

K tyhtricéému roztoku bu-tylmagnesiumbromidu (připavteného obvyklým způsobem z 58 g hořčíkových hobUin a 226 ml UutylUromidu) se přidá po kapkách roztok 70 g 2-(metyh--diihloriil-l)ethylaittátu (J. 1. Speier a spc>b., J. Am. · Chem. Soc. £2, 974 /1957/) v 60 ml etheru a ^uěhem 2 hodin zahřív^á na 50°. Reakční směs se vlije na led, okyselí se k^yselinou cHor⁰vodíkovou a vyextrahuje etherem. Spojené etherické extrakty se zbaví rozpouštědla a vakuové defilují. Fra^kce^, defilující při ¹⁰⁵ až 1^0° ^2,3 ^kPa^, se ješté ječlnou rektifikuje na Vigreuxovi* toloně Čímž se ziis^ 2-^(či^Uut^yl·retУ^l-1il^y1)etl^aiol^, bod ^varu 69 ^až 70° ^při 13 Pa.A solution of 70 g of 2- (methyl-dihloriil-1) ethylaittate (J. Speier et al.) Was added dropwise to a tyrtric solution of butyl magnesium bromide (added 58 ml of magnesium turnings and 226 ml Uutyl uride in the usual manner). J. Am. · Chem. Soc., £ 2, 974/1957 /) in 60 mL of ether and ^uěh em heated for 2 hours ^to 50 °. The reaction mixture was poured onto ice, acidified to ^{y 0} bismethylenesalicylic Chor hydrogen and extracted with ether. The combined ether extracts were freed from solvent and vacuum distilled. FRA ^{to CE,} when marching ^105-1 ^ 0 ² Pa ^{to 3,} with ^an even ječlnou rectified using a Vigreux * Tolona ziis Thereby, 2- ^{(C U} ut l · ^{s l} retУ -1il ^{y1) and} ETL ^IOLs point ^va ru 69 ^and 70 ° ^P 13 Pa s.

aU) N-butzylobykarbouyl-0- Leec.buty-thrtonin-2-(čiUuj^y-eeth^yl·-ill- ^Ι-Ι^^θau) N-0- butzylobykarbouyl Leec.buty thrtonin-2- (čiUuj -eeth ^{y y} ^ l · -ill--Ι Ι ^^ θ

Ke směsi 1,19 g N-UenzyУobyУkrbubn--O-teri.Uut^ylthrtbninu (Z~Thr/But/-OH), 1,01 g podle bodu aa) připraeeného 2-(čiUutyl_mmet^l-i^s;i^-) ethanolu, 0,93 mg pyridinu a 1 ,6 ml acetonitri-Lu se při^dá za chlazení ⁸⁷⁵ m^g N,N^fc^lohex^^r^diim^u a nechá se stát ^{20 h p}ři tep.btě 0 a^{ž 5<}°. V^ouČerrá N,K^ůi^k^hex^nibfoviLnr se odsaje, filtrát se zře^dí octrnem ethylnatým, promyje se zředěnou kyselinou solnou a zředěným rozOokem kyselého ulhičitanu sodného, vysuší se a vakuové zbaví rozpouštědla. Zbytek se rozpustí ve směsi octanu ethyL-natého a hexanu (1:7, ob^^ohU·), přenese se na sloupec silklagelu a promývá se směsmi rbz^pouštědeJ.^{, kt}erá obsahuj^í stouppjíů ^po^bíl octanu eth^nate^. Čistý výše uvedený ester je ve formě bezbarvého oleje. Rf = 0,62 (siLik^e^geL, toluen - aceton 9:1)To a mixture of 1.19 g of N-UenzyУobyУkrbubn - O-teri.Uut lthrtbninu ^y (Z-Thr / but / -OH) 1.01 g under aa) připraeeného 2- (čiUutyl_mmet ^ where ^ s i ^ - ) ethanol, 0.93 mg of pyridine and 1, 6 ml of acetonitrile ^there was added under cooling ⁸⁷⁵ m ^g of N, N ^ k ^ ^^ r ^ lohex diim ^ u and let stand ^{20 hp} tep.btě s is 0 and ^{Z 5 <} °. In ouČerrá ^ N ^ K ^ ui ^ k ^ hex nibfoviLnr is suctioned off, the filtrate was dilute ^d I octrnem acetate, washed with dilute hydrochloric acid and dilute rozOokem ulhičitanu acidic solution, dried and the solvent vacuum. The residue was dissolved in ethyl acetate / hexane (1: 7, v / v), transferred to a silica gel column and washed with mixtures ^of solvents. ^{, Kt} ERA comprising stouppjíů ^{d b r} clay acetate eth ^ ^ nate. The pure ester mentioned above is in the form of a colorless oil. Rf = 0.62 (silica gel, toluene-acetone 9: 1)

U) Odštěpení chránicí skupiny karboxylu: 19,4 mg esteru · připraveného podle bodu a) se nechá reagovat ^při te^plbtě 30° s 0,52⁵ ml ^0,15 M roztob ^yttraeth^ylarbiiurfluori^ču v dimeth^ylformrmidu. OOdtěpemí se sleduje (jak je popsáno v příkladu 3b) prostřednictvím tenkbvrstvé Úpln^é bdš^yěpení ^b^hne asi ^pb ³⁰ mi^ ^př^ceemž je výs¹^^ tenkovrstvé ilrbmRrУbgQait analýzy zcela identický s příkazem 3b).U) Deprotection carboxylate ester 19.4 mg · prepared under a) is reacted with ^p s ^p te LBTE 30 ° with ⁵ ml of 0.52 M ^0.15 roztob ^y ttraeth ^yl arbiiurfluori ^Cu in dimethylhexyl ^y lformrmidu. OOdtěpemí was monitored (as described in Example 3b) through tenkbvrstvé BDS ^YEP complete ^e ^ b ^ measurement HNE about ³⁰ mi ^P B ^ ^p R ^ce is higher EMZ ¹ ^^ thin ilrbmRrУbgQait analysis completely identical with the command 3b).

Příklad 11Example 11

N-BenizloxykarUbny1-0-ttrc . Uut^yl-tlrebnii-²-triteiyLiil^ylttl-l esterN-Benizloxycarbonyl-O-ttrc. UUT ^yl-2 tlrebnii- -triteiyLiil ^lttle-y l ester

Z-Thr(But) -O-CHgCH„Si () 3 c d 07 .3Z-Thr (But) -O-CH 2 CH 2 Si () 3 c d 07.3

r) Příprava: 559 ^l N-betiz-1oyУkrbunyi-0-tetc-.buj^ylylrtoiinu v 0,585 pyridinu ar) Preparation 559 .mu.l N-betiz 1oyУkrbunyi ^{TetC-0-y-.buj} lylrtoiinu in pyridine and 0.585

3,5 ml a^cetonittlu reaguje analogickým způsobem jako u příkladu 10 se 715 mg Č-t^rifeny!silymhanblu ^(H. Gilmrn a spo⁰., ^J. Am. ^Chem. ^S°c. 81 , 4 07^959/3 a ⁴⁴¹ mg ^N,'^N-d^dcyklolexylkrrUbdiiIniču a je i analogickým způsobem dále zpracováváno. ССюош^огаГИ surové látky· přes 50 g silílagelu se směsí chloridu uhličitého a octanu ethylnrtéhb (95:5, O^U«/oU;j.) se získá uvedený ester ve formě bezbarvého oleje. Rf = 0,4 (skl.k^e^ge., toluen - aceton 955).3.5 ml of N cetonittlu reacted in an analogous manner as in Example 10, 715 mg of C-t ^ Rifen! Silymhanblu ^(H. Gilmrn and SPO ^{0th, J.} Am. ^Ch em. ^S ° C. 81 4 07 959 ^ (3) and ⁴⁴¹ mg of ^N , ^{N- dd} cyclolexyl carboxylic acid, and is further processed in an analogous manner: Crude oil over 50 g of silica gel with a mixture of carbon tetrachloride and ethyl acetate (95: 5, 0.1% by weight); j.), the ester was obtained as a colorless oil, Rf = 0.4 (glass, toluene-acetone 955).

b) Od^ěpení chránící skupiny krrUbxylu: 48 mg esteru připrveeného postupem podle bod^{u a}) se nechá r^govat ^při 30° s 1,05 ml ^0,153 ^M roztoku ^tttr.aethy^lmbiiumflubri^ču v ^dim^el^^^^lj^ytrmrmidu. Jak je již popsáno u příkladu 3b), také zde se průběh odštěpení sleduje tenko^itst^vou ihroInrtoggarií. Odštěpení je skončeno během 20 až 30 mn a výsledek je souhlasný 3 výsledky přídkladů 3b) a 10b).b) From deprotection ^ ePen krrUbxylu: 48 mg of the ester according to the procedure připrveeného point ^ua) is allowed to discriminate between r ^ ^p s 30 ° with 1.05 ml ^{of 0,} 153 ^M solution of ^t ttr.aethy mbiiumflubri ^{l No} UV ^d ^ im ^ el ^ ^ tr tr tr tr.. As already described in Example 3b), the cleavage process is also monitored by thin-film chromatography. The cleavage is completed within 20 to 30 mn and the result is consistent with the 3 results of Examples 3b) and 10b).

Claims (14)

1. Způsob přechodné ochrany karboxylových skupin v organických karboxylových kyselinách esterifikací karboxylové skupiny, která má být chráněna, a pozdějším odštěpením chránicí skupiny, vyznačující se tím, že se v karboxylové kyselině nebo v jejím reaktivním derivátu esterifikuje alespoň jedna karboxylová skupina beta-silylethylovou skupinou parciálního vzorce 1,1. A process for the temporary protection of carboxyl groups in organic carboxylic acids by esterifying the carboxyl group to be protected and later removing the protecting group, characterized in that at least one carboxyl group by a beta-silylethyl group is esterified in a carboxylic acid or a reactive derivative thereof by a partial group. formula 1, R¹ R ¹ R² - Si - CH₂ - CH₂ - (I) v němžR ² - Si - _CH2 - _CH2 - (I) wherein R¹, R² a r3 znamenají nezávisle na sobě alkylový zbytek, cykloalkylový zbytek nebo arylový j zbytek, vždy nejvýše s 12 эtorny uhlíku, a jednotlivé zbytky mohou být vzájemně spojeny jednoduchou vazbou uhlík-uhlík, a tato beta-silylethylóvá skupina se odštěpí působením soli fluorovodíkové kyseliny.R @ ¹ , R @ ² and R @ 3 are each independently an alkyl, cycloalkyl or aryl radical, each having a maximum of 12 carbon atoms, and the individual radicals can be joined together by a simple carbon-carbon bond, and this beta-silylethyl group is cleaved hydrofluoric acid salts. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že alkylovým zbytkem v parciálním vzorci I je alkylový zbytek s 1 až 5 atomy uhlíku.2. The process according to claim 1, wherein the alkyl radical in partial formula I is an alkyl radical having 1 to 5 carbon atoms. 12 312 3 3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že symboly R , R a R v parciálním vzor-3. A method according to claim 1, wherein the symbols R, R and R in the partial pattern are as follows. 1 2 ci I znamenají methylovou nebo fenylovou skupinu, nebo R a R znamenají každý butylovou skupinu a R^ znamená methylovou skupinu.R 1 and R 2 are each methyl or phenyl, or R and R are each butyl and R 2 is methyl. 4. Žpůsob podle jednoho z bodů 1 až 3> vyznačující se tím, že příslušná karboxylová kyselina se odvozuje od derivátů steroidů, prostaglandinů nebo beta-laktamů.Method according to one of Claims 1 to 3, characterized in that the respective carboxylic acid is derived from derivatives of steroids, prostaglandins or beta-lactams. 5. Způsob podle jednoho z bodů 1 až 3, vyznačující se tím, že příslušná karboxylová kyselina se odvozuje od peptidu nebo aminokyseliny nebo jejich derivátu.5. A method according to any one of claims 1 to 3, wherein the respective carboxylic acid is derived from a peptide or amino acid or a derivative thereof. 6. Způsob podle jednoho z bodů 1 až 5. vyznačující se tím, že se. esterifikace příslušné volné karboxylové kyseliny nebo jejího reaktivního derivátu provádí působením alkoholu vzorce I-OH,Method according to one of Claims 1 to 5, characterized in that:. esterification of the respective free carboxylic acid or reactive derivative thereof by treatment with an alcohol of formula I-OH, R ₂ IR ₂ I R - Si - CH_O - CH„ - OH (I-OH)R - Si - _O CH - CH "- OH (I-OH) R^J v němžR ^J in which 1 2 31 2 3 R , R a R mají shora uvedený význam, > nebo působením jeho reaktivního derivátu.R, R and R are as defined above, or by treatment with a reactive derivative thereof. ♦♦ 7. Způsob podle bodu 6, vyznačující se tím, že se na karboxylovou kyselinu ve volné formě působí alkoholem vzorce I-OH v přítomnosti substituovaného karbodiimidu, například • N,N^z-dicyklohexylkarbodiimidu.7. A process according to claim 6, wherein the carboxylic acid in free form is treated with an alcohol of formula I-OH in the presence of a substituted carbodiimide, for example N, N ^from dicyclohexylcarbodiimide. 8. Způsob podle bodu 6, vyznačující se tím, že se jako reaktivního derivátu používá . etheru alkoholu vzorce I-OH s popřípadě na atomu dusíku substituovanou isomočovinou, například s N,N*-dicyklohexylisomoČovinou.8. The process of claim 6 wherein the reactive derivative is used. an ether of an alcohol of formula I-OH with an optionally substituted isourea on the nitrogen atom, for example with N, N * -dicyclohexylisourea. 9. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se к odštěpení chránicí skupiny nechá reagovat ester se solí fluorovodíkové kyseliny, která je disociovatelná na jednoduché fluoridové anionty.9. The process of claim 1 wherein the ester is reacted with a hydrofluoric acid salt which is dissociable to form a simple fluoride anion to remove the protecting group. 10. Způsob podle bodu 9, vyznačující se tím, že se к reakci používá fluoridu kvartérní organické báze, například tetraalkylamoniumfluoridu nebo trialkylarylamoniumfluoridu, v němž alkylová, popřípadě arylové zbytky mohou být spojeny jednoduchou vazbou uhlík-uhlík.Process according to Claim 9, characterized in that a quaternary organic base fluoride, for example tetraalkylammonium fluoride or trialkylarylammonium fluoride, is used in the reaction, in which the alkyl or aryl radicals may be joined by a single carbon-carbon bond. 11. Způsob podle bodu 10, vyznačující se tím, že se к reakci používá tetraethylamoniumfluoridu nebo tetrabutylamoniumfluoridu.11. A process according to claim 10, wherein tetraethylammonium fluoride or tetrabutylammonium fluoride is used in the reaction. 12. Způsob podle bodu 9, vyznačující se tím, že se к redukci používá fluoridu alkalického kovu.12. The process of claim 9 wherein the reduction is an alkali metal fluoride. 13. Způsob podle bodu 12, vyznačující se tím, že se к reakci používá fluoridu sodného nebo fluoridu draselného v přítomnosti komplexotvorné látky, jako korunového etheru.13. A process according to claim 12, wherein sodium or potassium fluoride is used in the reaction in the presence of a complexing agent such as a crown ether. 14. Způsob podle jednoho z bodů 9 až 13, vyznačující se tím, že se odštěpení chrániči skupiny provádí v aprotickém polárním rozpouštědle.Process according to one of Claims 9 to 13, characterized in that the deprotection is carried out in an aprotic polar solvent.