CN211905398U - 一种IgG血型抗体效价快速检测试条 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种IgG血型抗体效价快速检测试条，包括从上游至下游依次接触设置的一加样部、一反应部和一吸水部；加样部从上游至下游依次设有一冲洗加样区、一红细胞加样区和一样本加样区；反应部设有至少一检测点和一对照点，至少一检测点包被固化有抗人IgG抗体，对照点包被固化抗RBC抗体。使用本实用新型时仅需要采用一步法加样本、加红细胞和冲洗液，等待3‑5分钟即可出结果。

Description

一种IgG血型抗体效价快速检测试条

技术领域

本实用新型具体涉及一种IgG血型抗体效价快速检测试条。

背景技术

新生儿溶血病(hemolytic disease of the newborn，HDN)是儿科最常见的急性溶血性疾病之一，是指母婴血型不合，胎儿红细胞对母体产生刺激，孕母体内形成免疫性血型抗体，主要以IgG型抗体为主，此种IgG抗体又可通过胎盘进入胎儿体内，破坏胎儿红细胞引起HDN，严重者也可出现流产、早产、死胎、溶血性黄疸、严重贫血，并可能发展成核黄疽，可造成婴儿早期死亡或使存活者留下不可逆的神经***后遗症，给患儿及其家庭带来极大痛苦。至今发现的人类血型***中ABO血型不合的新生儿溶血病最为多见，其次为Rh血型***，其他血型***导致的HDN较为少见。

中国医师协会发表的《新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验推荐方案》中明确要求孕妇产前需要对血清IgG抗体效价进行监测，特别是IgG抗-A(B)和IgG抗-D，并表明当IgG抗-A(B)效价≥64、抗-D效价≥16时有引起HDN的可能性，作为产前常规检测项目，观察效价的变化，能够预测发生新生儿溶血病及相关危害的可能性，为下一步医疗行为和决策提供依据。

目前临床实验室产前IgG抗体检测均采用抗人球蛋白试验测定法，基本的流程都是：1)样本中IgM抗体去除：待检母体血清(浆)与一定量的二巯基乙醇(2-Me)或二硫苏糖醇(DTT)在37℃孵育1-2小时并不时摇动以灭活IgM抗体，2)样本倍比稀释，3)与标准血型红细胞致敏：倍比稀释样本与一定浓度的A型、B型、D型红细胞悬液混合，在37℃孵育0.5-1小时使IgG抗体与标准红细胞充分致敏，4)去除多余IgG抗体：致敏后的红细胞用生理盐水洗涤3遍，5)抗人球蛋白检测：洗涤后红细胞与一定量抗人球蛋白抗体(抗人IgG抗体)混合离心5-10分钟，最后用显微镜观察凝集判断结果。由于测定过程过于复杂，大型医院基本都采用微柱凝胶卡方法，可以省去红细胞洗涤和显微镜判读结果的步骤，但是整个过程依然耗时长、步骤繁琐、费用高。消耗了检验人员大量的时间和精力，且差错或失准时常发生。

现有技术中，一种测定孕妇IgG抗-A和抗-B血型抗体或人血型反定型的免疫层析试纸条，目的是快速测定人血液IgG类抗-A和抗-B抗体，取代传统的“IgM抗体灭活+抗人球蛋白试验+观察凝集”的测定方式，简化了操作步骤，缩短耗时。但是其仍然存在许多问题和不足，如，1)制作工艺复杂，需要制备人工血型抗原，需要示踪粒子进行标记，2)工艺不成熟，人工血型抗原只是理论化的概念，其实际运用几乎为零，特异性、亲和力和稳定性等都无法考究，3)结果判读不易，结果判读区存在3-100条线，包括阻滞区、检测区、质控区内的繁多包被线等，4)操作仍有不便，当不设阻滞区时，需要预先采用传统化学方法灭活IgM抗体，再测定处理后的样本，5)检测时间比较长，需要十数分钟，因为试条是基于传统的低孔径硝酸纤维膜层析条，且位于硝酸纤维膜上的结果判读区很长，样本经过时间就长，另外示踪粒子标记的物质释放也需要时间，6)检测抗体种类局限，只能测定IgG类抗-A和抗-B抗体，而不能测定IgG抗-D。

实用新型内容

本实用新型的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种IgG血型抗体效价快速检测试条。

本实用新型的技术方案如下：

一种IgG血型抗体效价快速检测试条，其特征在于：包括从上游至下游依次接触设置的一加样部、一反应部和一吸水部；加样部从上游至下游依次设有一冲洗加样区、一红细胞加样区和一样本加样区；反应部设有至少一检测点和一对照点，至少一检测点包被固化有抗人IgG抗体，对照点包被固化抗RBC抗体；

上述抗人IgG抗体可与随冲洗液带动而来的样本中的相应的IgG血型抗体特异性免疫结合，该IgG血型抗体可再与随冲洗液带动而来的标准红细胞悬液中的红细胞结合而形成抗人IgG抗体/IgG血型抗体/红细胞复合物，并聚集于检测点；上述抗RBC抗体可与标随冲洗液带动而来的准红细胞悬液中的红细胞结合，使该红细胞聚集于对照点。

本实用新型的有益效果是：

1、本实用新型中样本在在毛细作用下，先流经反应部，样本中的IgG血型抗体与预先包被的固相的抗人IgG抗体特异性免疫结合，而样本中的IgM血型抗体直接流经反应部进入吸水部，后经过的红细胞再被IgG血型抗体截留形成抗人IgG抗体/IgG血型抗体/红细胞复合物而聚集显色，能有效摒除样本中IgM血型抗体干扰，无需预先化学灭活IgM抗体，安全无毒无臭(二巯基乙醇和二硫苏糖醇均有毒臭)。

2、使用本实用新型时仅需要采用一步法加样本、加红细胞和冲洗液，等待3-5分钟即可出结果。

3、本实用新型直接使用红细胞作为指示剂，红细胞的红色作为指示色更鲜艳，更好判读，根据选用不同的标准血型红细胞，本实用新型可以检测各类血型***IgG抗体，不仅能够检测IgG抗-A(B)，还能检测IgG抗-D，及其它血型***IgG抗体。

4、本实用新型的检测试条储存携带方便、室温保存(2-30℃)、有效期长(24个月)，无需辅助设备，所需的样本量极少(5-10μL)。

5、本实用新型灵敏度高且特异性好，比现有金标准产品抗人球蛋白检测微柱凝胶卡灵敏度高1-2个梯度，并可采用的红细胞为国家注册上市的标准红细胞，非未经国家认证的人工合成抗原。

附图说明

图1为本实用新型实施例1的部分立体结构分解示意图。

图2为本实用新型实施例1的上壳体的结构示意图。

具体实施方式

以下通过具体实施方式结合附图对本实用新型的技术方案进行进一步的说明和描述。

在本实用新型的一个优选实施方案中，还包括第一密封带、第二密封带和第三密封带，第一密封带粘贴于冲洗加样区和红细胞加样区之间，第二密封带粘贴于红细胞加样区和样本加样区之间，第三密封带粘贴覆盖加样部和反应部的交界处。

进一步优选的，所述第一至第三密封带为带有粘胶的PP带、PE带、ABS带或PET带。

在本实用新型的一个优选实施方案中，所述加样部在加样部与反应部的接触处覆盖于反应部之上。

在本实用新型的一个优选实施方案中，所述吸水部在吸水部与反应部的接触处覆盖于反应部之上。

在本实用新型的一个优选实施方案中，还包括一基板和一上盖，所述加样部、反应部和吸水部均设于基板之上，上盖盖设于基板之上并覆盖所述加样部、反应部和吸水部。优选的，上述基板的材质为聚酯，上述上盖的材质包括PS、ABS和PET中的至少一种。

进一步优选的，所述上盖设有依次对应所述冲洗加样区、红细胞加样区、样本加样区和反应部的加冲洗液孔、加红细胞孔、加样本孔和观察窗。

在本实用新型的一个优选实施方案中，所述加样部的材质为具有导水性和亲水性的多孔高分子材料(优选玻璃纤维)，所述吸水部的材质为棉浆纸。

在本实用新型的一个优选实施方案中，所述反应部的材质为硝酸纤维素膜、醋酸纤维素膜、聚乙烯膜或尼龙膜。

进一步优选的，所述反应部的材质为毛细管流速为40-90sec/4cm宽的有背衬的硝酸纤维膜。

实施例1

如图1和2所示，一种IgG血型抗体效价快速检测试条，包括从上游至下游依次接触设置的一加样部11、一反应部12和一吸水部13，还包括第一密封带110、第二密封带120和第三密封带130；加样部11的材质为具有导水性和亲水性的多孔高分子材料(优选玻璃纤维)，吸水部13的材质为棉浆纸，反应部12的材质为硝酸纤维素膜、醋酸纤维素膜、聚乙烯膜或尼龙膜，进一步优选为毛细管流速为40-90sec/4cm宽的有背衬的硝酸纤维膜。

加样部11在加样部11与反应部12的接触处覆盖于反应部12之上，吸水部13在吸水部13与反应部12的接触处覆盖于反应部12之上；第一至第三密封带130为带有粘胶的PP带、PE带、ABS带或PET带。

加样部11从上游至下游依次设有一冲洗加样区111、一红细胞加样区112和一样本加样区113，第一密封带110粘贴于冲洗加样区111和红细胞加样区112之间，第二密封带120粘贴于红细胞加样区112和样本加样区113之间，第三密封带130粘贴覆盖加样部11和反应部12的交界处。

反应部12设有至少一检测点121和一对照点122，至少一检测点121包被固化有抗人IgG抗体，对照点122包被固化抗RBC抗体。优选的，该检测点121和对照点122沿所述检测试条1的宽度方向呈一直线排列，避免在毛细流向上相互干扰。

该检测试条1还包括一基板17和一上盖18，所述加样部11、反应部12和吸水部13均设于基板17之上，上盖18盖设于基板17之上并覆盖所述加样部11、反应部12和吸水部13。所述上盖18设有依次对应所述冲洗加样区111、红细胞加样区112、样本加样区113和反应部12的加冲洗液孔181、加红细胞孔182、加样本孔183和观察窗184。优选的，上述基板17的材质为聚酯，上述上盖18的材质包括PS、ABS和PET中的至少一种。

上述抗人IgG抗体可与随冲洗液带动而来的样本中的相应的IgG血型抗体特异性免疫结合，该IgG血型抗体再与随冲洗液带动而来的标准红细胞悬液中的红细胞结合而形成抗人IgG抗体/IgG血型抗体/红细胞复合物，并聚集于检测点121；上述抗RBC抗体可与随冲洗液带动而来的标准红细胞悬液中的红细胞结合，使该红细胞聚集于对照点122。

上述检测试条1的构造简单，三层搭接，使用三密封带将各功能区分隔，促使样本、红细胞、冲洗液先后有序流经反应部12；卡套设计，界面简洁，且只有至少一检测点121和一对照点122，结果判读容易，无需示繁杂的示踪粒子制备和标记工艺，也不需要红细胞抗原提取制备。

实施例2

用实施例1的IgG血型抗体效价快速检测试条来鉴定孕妇血清(浆)中IgG抗-A(B)、抗-D，具体包括如下步骤：

(1)加样：添加待检孕妇血清(浆)5μL在加样本孔183；

(2)加标准红细胞悬液：添加5μLAB&RhD型10％(v/v)红细胞悬液在加红细胞孔182；

(3)加冲洗液：添加100μL冲洗液在加冲洗液孔181；

(4)结果判读：3min后判读，检测点121和对照点122均显红色，为阳性反应，说明孕妇血清(浆)中含IgG抗-A、抗-B或抗-D中的一种、两种或三种。若只是对照点122显红色，检测点121不显色，为阴性反应，说明孕妇血清(浆)中无IgG抗-A、抗-B和抗-D。

实施例3

用实施例1的IgG血型抗体效价快速检测试条来鉴定孕妇血清(浆)中IgG抗-A(B)效价，具体包括如下步骤：

(1)样本稀释：将待检孕妇血清(浆)用生理盐水或10mM PBS进行倍比稀释成1∶32、1：64、1：128、1：256等；

(2)加样：添加稀释后样本5μL在加样本孔183；

(3)加标准红细胞：添加5μLA(B)型10％(v/v)红细胞悬液在加红细胞孔182；

(4)加冲洗液：添加100μL冲洗液在加冲洗液孔181；

(5)结果判读：3分钟后判读，检测点121和对照点122均显红色，为阳性反应，阳性结果的最高稀释度的倒数为所测样本IgG抗-A(B)的效价。

实施例4

用实施例1的IgG血型抗体效价快速检测试条来鉴定孕妇血清(浆)中IgG抗D效价，具体包括如下步骤：

(1)样本稀释：将待检孕妇血清(浆)用生理盐水或10mM PBS进行倍比稀释成1∶8、1∶16、1∶32、1∶64等；

(2)加样：添加稀释后样本5μL在加样本孔183；

(3)加标准红细胞：添加5μL O&RhD型10％(v/v)红细胞悬液在加红细胞孔182；

(4)加冲洗液：添加100μL冲洗液在加冲洗液孔181；

(5)结果判读：3分钟后判读，检测点121和对照点122均显红色，为阳性反应，阳性结果的最高稀释度的倒数为所测样本IgG抗-D的效价。

以上所述，仅为本实用新型的较佳实施例而已，故不能依此限定本实用新型实施的范围，即依本实用新型专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本实用新型涵盖的范围内。

Claims (6)

1.一种IgG血型抗体效价快速检测试条，其特征在于：包括从上游至下游依次接触设置的一加样部、一反应部和一吸水部；加样部从上游至下游依次设有一冲洗加样区、一红细胞加样区和一样本加样区；反应部设有至少一检测点和一对照点，至少一检测点包被固化有抗人IgG抗体，对照点包被固化抗RBC抗体；

上述抗人IgG抗体可与随冲洗液带动而来的样本中的相应的IgG血型抗体特异性免疫结合，该IgG血型抗体可再与随冲洗液带动而来的标准红细胞悬液中的红细胞结合而形成抗人IgG抗体/IgG血型抗体/红细胞复合物，并聚集于检测点；上述抗RBC抗体可与标随冲洗液带动而来的准红细胞悬液中的红细胞结合，使该红细胞聚集于对照点。

2.如权利要求1所述的一种IgG血型抗体效价快速检测试条，其特征在于：还包括第一密封带、第二密封带和第三密封带，第一密封带粘贴于冲洗加样区和红细胞加样区之间，第二密封带粘贴于红细胞加样区和样本加样区之间，第三密封带粘贴覆盖加样部和反应部的交界处。

3.如权利要求1所述的一种IgG血型抗体效价快速检测试条，其特征在于：所述加样部在加样部与反应部的接触处覆盖于反应部之上。

4.如权利要求1所述的一种IgG血型抗体效价快速检测试条，其特征在于：所述吸水部在吸水部与反应部的接触处覆盖于反应部之上。

5.如权利要求1所述的一种IgG血型抗体效价快速检测试条，其特征在于：还包括一基板和一上盖，所述加样部、反应部和吸水部均设于基板之上，上盖盖设于基板之上并覆盖所述加样部、反应部和吸水部。

6.如权利要求5所述的一种IgG血型抗体效价快速检测试条，其特征在于：所述上盖设有依次对应所述冲洗加样区、红细胞加样区、样本加样区和反应部的加冲洗液孔、加红细胞孔、加样本孔和观察窗。

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