CN209098696U

CN209098696U - 一种细胞划痕装置

Info

Publication number: CN209098696U
Application number: CN201821784575.7U
Authority: CN
Inventors: 史宏灿; 雷正文; 卢丹
Original assignee: Yangzhou University
Current assignee: Yangzhou University
Priority date: 2018-10-31
Filing date: 2018-10-31
Publication date: 2019-07-12
Anticipated expiration: 2028-10-31

Abstract

本实用新型公开了一种细胞划痕装置，所述细胞划痕装置由数块平行排列的隔挡片组成，相邻隔挡片之间的距离相等，隔挡片间通过隔挡片顶部与隔挡片垂直设置的数根连接条固定连接，在隔挡片顶部与连接条对应的位置设有凹槽，所述连接条置于凹槽内，在每个隔挡片的下方设有数个通孔。本实用新型公开的细胞划痕装置设计简单、成本低廉、使用方便、无需额外的装置辅助或者增加实验流程且可重复使用，进行划痕实验时，获得的线条清晰美观，实验误差小，符合实验要求，为更加准确的检测肿瘤细胞侵袭能力提供实验基础。

Description

一种细胞划痕装置

技术领域

本实用新型属于细胞培养领域，具体地涉及一种细胞划痕装置。

背景技术

细胞培养是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。现阶段的细胞培养技术日新月异，其中，细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法，实验成本低，可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。细胞划痕实验目前多运用手工绘制直线的方法，即将细胞种植在培养皿中，待细胞长满后添加抗肿瘤药物，再在培养皿中划取若干条直线，去除划痕内的细胞碎片，观察药物作用后的肿瘤细胞在不同的时间点在划痕区域内的侵袭情况，并对肿瘤细胞在划痕内的侵袭面积进行计算，用以评价药物作用后的肿瘤细胞侵袭能力。

但是该传统方法越来越难以满足细胞划痕实验的要求，其缺点表现在以下几个方面：（1）线条弯曲，划痕内容易残留贴壁较紧的肿瘤细胞；（2）手工划痕存在盲目性，容易导致划线不规则而影响实验数据的准确性；（3）手工操作繁琐，有增加细胞污染的可能性；（4）若实验准确性受到质疑，则浪费大量科研人力、物力及财力。近几年来，许多重量级的科研杂志因为手工绘制直线的方法容易影响实验数据的准确性，而拒绝接受有关此类实验的科研论文。从事肿瘤研究的科研人员深刻认识到细胞划痕实验在肿瘤侵袭中重要意义。

因此，亟需设计一种新型的、实用性强且符合实验要求的划痕装置来解决现有技术中存在的问题，这也将有助于肿瘤侵袭性研究的开展。

实用新型内容

针对上述存在的问题，本实用新型旨在提供一种细胞划痕装置，结构简单，使用方便，获得的线条清晰、美观、整齐，为更加准确的检测肿瘤细胞侵袭能力提供实验基础。

为了实现上述目的，本实用新型所采用的技术方案如下：一种细胞划痕装置，所述细胞划痕装置由数块平行排列的隔挡片组成，隔挡片的高度低于培养皿的高度，相邻隔挡片之间的距离相等，隔挡片间通过隔挡片顶部与隔挡片垂直设置的数根连接条固定连接，在隔挡片顶部与连接条对应的位置设有凹槽，所述连接条置于凹槽内，在每个隔挡片的下方设有数个通孔，通孔的具***置可以在隔挡片的端部也可在中部，通孔的形状也不做具体限定，圆形、方形均可，只要使用时能使培养液通过通孔即可适用。

进一步地，所述隔挡片和连接条的生产材质包括玻璃、不锈钢或塑料，此处对配件材质不做具体限制，只要能分别满足隔挡片和连接条的隔离固定功能即可。

进一步地，所述隔挡片与连接条间的固定连接方式包括玻璃胶连接，玻璃胶固定只是连接方式中的一种，其他的连接方式也可以，只要能实现隔挡片与连接条的固定连接即可。

进一步地，所述隔挡片数量为奇数时，中间的隔挡片的长度与培养皿的内圈直径相适配，两侧的隔挡片相对称设置，且隔挡片的长度从中间向两侧依次减小，侧部每块隔挡片的长度与该隔挡片长度延伸方向上培养皿内圈的剖面长度相适应。

进一步地，所述隔挡片数量为偶数时，隔挡片相对称设置，隔挡片的长度从中间向两侧依次减小，每块隔挡片的长度与该隔挡片长度延伸方向上培养皿内圈的剖面长度相适应。

一种细胞划痕装置的使用方法，具体使用步骤为：

1）在细胞接种之前，先将细胞划痕装置于高压灭菌器中进行高压消毒，然后存放于超净台中备用；

2）将细胞划痕装置置于培养皿中，确认装置摆放整齐，且对合严密，再将处理过的对数生长期的细胞接种于培养皿中，用吸管将培养皿中的细胞吹打混匀后于培养箱中培养；

3）待细胞生长至密度为50~60%时，进行药物处理，选择性更换培养基，继续置于培养箱中培养；

4）待细胞生长密度为80~90%时，移除细胞划痕装置，然后加入抗肿瘤药物，在移除装置后的不同时间段于显微镜下观察肿瘤细胞经相关药物处理后的侵袭能力，并拍照记录，再根据实验要求对不同时间点细胞侵袭面积进行比较，得出实验结论。

本实用新型的有益效果是：

1. 利用本实用新型公开的细胞划痕装置进行划痕实验，获得的线条清晰、美观、整齐且直径相等，在显微镜下观察效果为：笔直、规则、不同线条之间的直径相同，线条两侧细胞均匀；各条直线之间因距离相等，所用药物浓度、细胞密度相同，实验误差小，符合实验要求；移除装置之后细胞逐步长满划痕区域，为更加准确的检测肿瘤细胞侵袭能力提供实验基础；

2. 细胞划痕装置设计简单，根据培养皿内径的不同选用若干块不同长度的隔挡片组成，价格低廉；使用时操作简单、方便，无需额外的装置辅助或者增加实验流程；

3. 细胞划痕装置经常规高压消毒后无菌保存于超净台中，严格遵守细胞培养流程，细胞污染的机率小，并且可重复使用；

4. 细胞划痕装置使用方便：接种细胞入培养皿之前，将高压消毒后的细胞划痕装置放入培养皿中，再接种细胞入培养皿；待细胞生长至符合实验要求的密度时，移除装置，即可进行显微镜下观察。

附图说明

图1是本实用新型实施例1公开的隔挡片的结构示意图；

图2是本实用新型实施例1公开的细胞划痕装置的结构示意图；

图3是本实用新型实施例3的实验组在移除细胞划痕装置后划痕的示意图；

图4是本实用新型实施例3的实验组在移除细胞划痕装置后0小时的细胞生长图；

图5是本实用新型实施例3的实验组在移除细胞划痕装置后24小时的细胞生长图；

图6是本实用新型实施例3的实验组在移除细胞划痕装置后48小时的细胞生长图；

图7是本实用新型实施例3的对照组划痕后48小时的细胞生长图。

其中，1-隔挡片，2-连接条，3-通孔，4-细胞，5-划痕直线。

具体实施方式

为了使本领域的普通技术人员能更好的理解本实用新型的技术方案，下面结合附图和实施例对本实用新型的技术方案做进一步的描述。

实施例1

本实施例公开的细胞划痕装置用于6孔培养皿，具体结构如图1-2所示，包括5块隔挡片，隔挡片的高度低于培养皿的高度，隔挡片之间相互平行，相邻隔挡片间的间距相等，位于中间的隔挡片最长，其他4块隔挡片在其左右两侧对称设置、长度从中间向两侧依次递减，隔挡片间通过隔挡片顶部与其垂直设置的数根连接条固定连接，在隔挡片顶部与连接条对应的位置设有凹槽，所述连接条置于凹槽内，每块隔挡片前后端的下方位置设有通孔；具体参数为：中间隔挡片长34.5 mm、在其两侧相邻位置的隔挡片长27.6mm，最外侧隔挡片长12.2mm。

实施例2

本实施例公开的细胞划痕装置包括6块隔挡片和3根连接条，每块隔挡片的底部中央位置都开有通孔，用于培养液流通，隔挡片相互平行，隔挡片的高度低于培养皿的高度，相邻隔挡片的间距相等，隔挡片在两侧对称排列、长度从中间向两侧依次递减排列，隔挡片间通过隔挡片顶部与其垂直设置的三根连接条固定连接，在隔挡片顶部与连接条对应的位置设有凹槽，所述连接条置于凹槽内，隔挡片与连接条通过玻璃胶固定。

实施例3

以培养肺癌细胞A549接种于6孔板进行细胞划痕实验为例：

实验组：

1、A549细胞接种之前，先将实施例1中公开的细胞划痕装置于高压灭菌器中进行高压消毒，然后存放于超净台中备用；

2、将处于对数生长期的A549细胞弃去培养基，以1×PBS（磷酸缓冲盐溶液）冲洗2次，0.25%胰酶消化3~5分钟，将细胞从培养皿底消化下来，吸管将其吸入15 mL离心管中，以室温、500 rpm离心、5分钟收集细胞进行细胞计数；

3、将细胞划痕装置置于6孔板中，确认装置摆放整齐，且对合严密，再将1~2×10⁵个A549细胞接种于6孔板中（根据不同的实验要求调整），用吸管将培养皿中的细胞吹打混匀后于37℃+5%CO2的培养箱中培养；

4、待细胞生长至密度为50~60%时，进行药物处理，更换培养基或无须更换培养基（根据不同实验要求调整），继续置于培养箱中培养；

5、待细胞生长密度为80~90%时，移除细胞划痕装置，可见培养皿底清晰、整齐、美观、直径相等的划痕线条，如图3所示，4是培养皿中的细胞，5是细胞划痕装置移除后培养皿中呈现的划痕直线；然后加入抗肿瘤药物，在移除装置后0小时、6小时、12小时、24小时、36小时、48小时（根据不同的实验要求调整）于显微镜下观察肿瘤细胞经相关药物处理后的侵袭能力，并拍照记录，再根据实验要求对不同时间点细胞侵袭面积进行比较，得出实验结论。

对照组不使用细胞划痕装置，采用传统的手工绘制直线法划痕，其他步骤与上述方法相同。

实验组移除装置后0小时的细胞生长情况如图4，可见划痕整齐、清晰、宽窄均匀，划痕两侧未见明显细胞损伤，划痕内未见明显细胞侵入；实验组移除装置后24小时的细胞生长情况如图5，可见加药后肿瘤细胞开始向划痕内侵袭或转移；实验组移除装置后48小时的细胞生长情况如图6，可见划痕内肿瘤细胞已经长满；对照组划痕后48小时的细胞生长情况如图7，可见划痕内细胞未见明显生长。

因此，使用本实用新型的细胞划痕装置，当培养皿中的细胞生长至相应密度时，移除装置，显微镜下观察板中可见清晰、笔直的线条，且线条两侧细胞均匀，之后细胞逐步长满划痕区域，为更加准确的检测肿瘤细胞侵袭能力提供实验基础。

以上显示和描述了本实用新型的基本原理、主要特征及优点。但是以上所述仅为本实用新型的具体实施例，本实用新型的技术特征并不局限于此，任何本领域的技术人员在不脱离本实用新型的技术方案下得出的其他实施方式均应涵盖在本实用新型的专利范围之中。

Claims

1.一种细胞划痕装置，其特征在于，所述细胞划痕装置由数块平行排列的隔挡片组成，隔挡片的高度低于培养皿的高度，相邻隔挡片之间的距离相等，隔挡片间通过隔挡片顶部与隔挡片垂直设置的数根连接条固定连接，在隔挡片顶部与连接条对应的位置设有凹槽，所述连接条置于凹槽内，在每个隔挡片的下方设有数个通孔。

2.如权利要求1所述的一种细胞划痕装置，其特征在于，所述隔挡片和连接条的生产材质包括玻璃、不锈钢和塑料。

3.如权利要求2所述的一种细胞划痕装置，其特征在于，所述隔挡片与连接条间的固定连接方式包括玻璃胶连接。

4.如权利要求3所述的一种细胞划痕装置，其特征在于，所述隔挡片数量为奇数，中间的隔挡片的长度与培养皿的内圈直径相适配，两侧的隔挡片相对称设置，且隔挡片的长度从中间向两侧依次减小，侧部每块隔挡片的长度与该隔挡片长度延伸方向上培养皿内圈的剖面长度相适应。

5.如权利要求3所述的一种细胞划痕装置，其特征在于，所述隔挡片数量为偶数，隔挡片相对称设置，隔挡片的长度从中间向两侧依次减小，每块隔挡片的长度与该隔挡片长度延伸方向上培养皿内圈的剖面长度相适应。