CN204405682U - 联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡 - Google Patents

Abstract

本实用新型提供了一种联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡，其包括试纸条和包覆有所述试纸条的外壳，其中所述试纸条包括加样区，同时包被有由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体以及由生物素标记的第二抗体的抗体结合区，具有包被有相间隔的检测带和质控带的检测区，吸水区，和底板，且所述外壳包括设置有加样孔和检测孔的卡盖和与所述卡盖彼此连接的底座。本实用新型的试纸卡具有高灵敏性、使用方便等优点。

Description

联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡

技术领域

本实用新型涉及一种用于免疫检测的试纸卡，具体涉及一种联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡。

背景技术

在临床诊断领域，目前常用的检测目的标志物的方法包括：酶联免疫法、化学发光法、胶乳增强免疫比浊法、胶体金免疫层析法、荧光免疫层析法等。酶联免疫法及化学发光法检测灵敏度高，可实现准确定量，但其耗时过长，而且无法进行单份样本的即时测定。胶乳增强免疫比浊法虽可实现高通量筛选，但由于方法学本身的限制，其检测灵敏度较低，无法对低值样品进行精确测定。胶体金免疫层析法操作简单，无需特殊的仪器设备，但只能实现半定量。在荧光免疫层析法中，传统应用的有机荧光化合物如异硫氰基荧光素、罗丹明类荧光染料等虽在水溶液中具有很高的灵敏度，但其标记抗体或抗原后用于复杂的血清、体液、细胞等生物样品免疫分析测定时，一旦样品中的待检物浓度在低浓度水平时，共存杂质的浓度将大大高于待检物浓度。此时，高浓度的共存杂质产生的背景荧光就会对免疫产物的荧光测定造成严重的干扰，进而显著降低荧光免疫测定的灵敏度，这极大地限制了其在临床诊断领域的应用。

相比较而言，量子点则具有传统的有机荧光染料所不具备的一些独特的光学性质。量子点尺寸介于几个nm至几十nm之间。量子点的发光原理在于，当量子点的尺寸小到一定值时，由于受到量子尺寸效应的影响，原来连续的能级结构变成类似原子的不连续结构。当光照射到量子点上时，量子点吸收光子，价带上的电子吸收能量后受到激发，跃迁至导带，而在价带上则会产生与被激发电子对应的空穴，跃迁到导带上的电子可以再以辐射跃迁的方式重新回到价带，与价带上的空穴复合并发射出光子。

量子点独特的光学性质主要体现在以下几个方面：1、通过改变量子点的尺寸和组成可以实现对量子点发射光谱的调控，从而得到多种不同发光颜色的量子点，并可以使量子点的荧光发射光谱覆盖整个可见光区；2、宽的激发光谱：同一个激发波长的光可以激发不同大小的量子点，不同尺寸的量子点发射出的荧光不同，有利于在同步检测中的应用；3、大的Stokes位移(可达几百nm)以及窄且对称的发射光谱，这一特性使在使用量子点时可以有效地避免光谱重叠；和4、量子点具有良好的光稳定性，其荧光可以保持很长时间而不会发生褪色。

基于量子点独特光学性质使得其适用于低浓度水平，如pg/ml-ng/ml待检物含量的准确测定，但是其检测的线性范围不够宽，在相同的一套检测体系范围内，无法实现高值样品的准确定量。因此，单独使用量子点时，无法兼顾到低端的检测灵敏度以及宽线性范围。而通过联合应用其他与量子点具有相似的激发波长和发射波长的荧光元素或者荧光材料，将有望获得更宽的线性范围，并且可以实现在同一套荧光检测***中进行荧光信号结果的读取，也更有利于在临床的推广及应用。

实用新型内容

技术问题

基于目前缺少适用于临床样品快速、精确、定量检测的方法，特别是目前存在的无法兼顾低端检测灵敏度以及宽线性范围的问题，本实用新型提供了一种联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡。

技术方案

一方面，本实用新型提供了一种联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡，其特征在于，所述试纸卡包括：

i)试纸条，其中所述试纸条包括：

i-1)加样区，

i-2)同时包被有由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体以及由生物素标记的第二抗体的抗体结合区，

i-3)具有包被有相间隔的检测带和质控带的检测区，其中所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体，

i-4)吸水区，和

i-5)底板，其中所述加样区、抗体结合区、检测区和吸水区在所述底板上顺序排列并顺次搭接；以及

ii)包覆所述试纸条的外壳，其中所述外壳包括：

ii-1)设置有加样孔和检测孔的卡盖，其中所述加样孔开口于所述加样区的上侧，以暴露出所述加样区的部分区域，所述检测孔开口于所述检测区的上侧，以暴露出所述检测带和所述质控带的全部区域，和

ii-2)与所述卡盖彼此连接的底座。

在一个实施方式中，所述量子点为微球形式且具有2nm-30nm的粒径范围，且所述量子点选自以下组中：CdTe、CdSe、PbSe、InP和GaN。

在一个实施方式中，所述抗体结合区上进一步包被有微球，其中所述微球负载有所述稀土荧光材料和所述第一抗体。

在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为50nm-400nm。

在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为100nm-300nm。

在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为100nm或300nm。

在一个实施方式中，所述第一抗体和第二抗体识别同种待测蛋白的不同表位，所述蛋白选自以下组中：心肌肌钙蛋白I、N末端脑钠肽前体、心型脂肪酸结合蛋白、降钙素原、C反应蛋白和D-二聚体。

在一个实施方式中，所述检测带和所述质控带之间的间隔在0.1-0.6cm之间。

在一个实施方式中，所述试纸条的宽度在0.2cm-1cm之间。

在一个实施方式中，所述卡盖和所述底座由塑料制成。

有益效果

本实用新型的试纸卡的主要优点包括：联合应用量子点与稀土荧光材料，极好的克服了单独应用量子点或者稀土荧光材料存在的低值灵敏度和检测线性范围无法兼顾的问题；通过引入生物素亲和素级联放大***，进一步提高了检测灵敏度；和试纸卡易于携带和保存，易于实现在相应的荧光检测仪中对试纸条检测结果的分析。

附图说明

图1本实用新型的试纸卡的俯视图。

图2本实用新型的试纸条的侧视图。

图3本实用新型的试纸条的俯视图。

附图标记：

1底座；2卡盖；3加样孔；4检测孔；5检测带暴露位置；6质控带暴露位置；7加样区；8抗体结合区；9检测区；10检测带；11质控带；12吸水区；和13底板。

具体实施方式

下文中将参照附图来更详细地描述示例性实施方式。所述附图用于图示说明本实用新型，而非对其进行限制。在附图中，为了清楚的说明，放大了试纸条部分区域的尺寸及其相对比例。

如图1所示，本实用新型的试纸卡包括底座1和卡盖2，卡盖2上设置有加样孔3和检测孔4，其中检测孔4对应有检测带暴露位置5和质控带暴露位置6。试纸条(未示出)被底座1和卡盖2彼此相互紧扣于试纸卡内部。底座1和卡盖2均可由诸如塑料等材料制成。加样孔3和检测孔4可以为正方形、长方形、椭圆形、圆形等形状。加样孔的长度可为0.1cm至0.5cm，宽度可为0.2cm至0.4cm。检测孔4的长度可为1.0cm至2.3cm，宽度可为0.2cm至0.4cm。本实用新型的试纸卡可通过自动生化仪实现快速大批量的临床样品检测。

图2为本实用新型的试纸卡中试剂条的侧视图。

如图2所示，本实用新型的试纸条包括加样区7、抗体结合区8、检测区9、吸水区12和底板13，其中所述加样区7、抗体结合区8、检测区9和吸水区12在底板13上顺序排列并顺次搭接。

加样区7用于接收样品，其可由选自玻璃纤维素膜或者聚酯膜、棉纤的材料制成，优选由玻璃纤维素膜制成。加样区7可以起到样品过滤的作用。例如，当待检测样品为血浆、血清时，加样区7可以过滤样品中的颗粒性不溶物。加样区7在试剂条的结构中与抗体结合区8搭接。加样区7与抗体结合区8搭接的方式并不受图1所示方式的限制。在一个实施方式中，加样区7搭接在抗体结合区8之上。在一个实施方式中，抗体结合区8搭接在加样区7之上。

抗体结合区8位于加样区7和检测区9之间，并与两者彼此搭接。抗体结合区8与加样区7和检测区9搭接的方式并不受图1所示方式的限制。抗体结合区8用于布置与待测样品中特定蛋白反应的抗体。在一个实施方式中，所述待测样品中的特定蛋白选自以下蛋白组成的组中：心肌肌钙蛋白I、心型脂肪酸结合蛋白、降钙素原、N末端脑钠肽前体、C反应蛋白和D-二聚体。在一个优选实施方式中，所述特定蛋白为心肌肌钙蛋白I。

在本实用新型的试剂条的一个实施方式中，抗体结合区8上同时包被有由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体和以及由生物素标记的第二抗体。在本实用新型的试剂条中，所述第一抗体和第二抗体分别特异性针对待测蛋白的不同表位，即所述第一抗体和第二抗体分别结合特定蛋白的不同表位。

在本实用新型中，术语“标记”包括采用化学或物理方法使抗待测蛋白的第一抗体与量子点和稀土荧光材料直接连接。然而，标记也可以通过其它方式完成，例如稀土荧光材料和抗待测蛋白的第一抗体可通过例如同时包埋或负载在微球上的方式达到“标记”的目的。因此，在一个实施方式中，抗体结合区8上可进一步具有微球(未示出)，所述微球上同时包埋或负载有稀土荧光材料和抗待测蛋白的第一抗体。在一个实施方式中，包埋或负载在所述微球上的稀土荧光材料和抗待测蛋白的第一抗体之间可以具有化学连接，例如以稀土荧光材料标记的抗待测蛋白的第一抗体的形式存在于所述微球上。在另一个实施方式中，包埋或负载在所述微球上的稀土荧光材料和抗待测蛋白的第一抗体之间可以不具有化学连接，即所述微球上包埋或负载有彼此间无化学连接的稀土荧光材料和抗待测蛋白的第一抗体。

在一个实施方式中，所述微球可以为聚合物微球，例如聚苯乙烯微球。在一个实施方式中，微球的粒径大小范围在50nm-400nm之间，优选在100nm-300nm之间，更优选为100nm或300nm。

制备稀土荧光微球的方法是现有技术已知的，包括但不限于：包埋法，即在聚合物微球的聚合反应过程中加入稀土材料配合物；键合法，即使稀土元素离子与聚合物侧链上的官能团发生配位反应得到稀土荧光微球；以及溶胀法和包覆法。后两种方法均是在单分散的微球(如：聚苯乙烯微球)的基础上，将稀土材料配合物渗透或包覆在微球的内部或表面，通过控制反应条件，可实现最终制备出单分散性好、荧光强度高、荧光稳定性好的聚合物微球。

量子点直径通常在2nm-30nm之间，呈现微球形。量子点的电子和空穴被量子限域，连续能带结构变成具有分子特性的分立能级结构，所以量子点在受激后可以发射荧光。采用量子点来标记抗体可以极大的提高检测的精确度和灵敏度。单独量子点标记的抗体虽然灵敏度高，但单独量子点标记体现为高值检测不准确。单独稀土荧光材料标记的抗体虽然具备良好的线性范围，但是灵敏度有待改进，体现为低值检测不准确。

本实用新型通过联用量子点和稀土荧光材料，量子点标记物有利于低值的检测以达到灵敏度的要求，而稀土荧光材料标记物使得检测的线性范围可覆盖高值区域。

在一个实施方式中，所述量子点具有2nm-30nm的粒径。在一个优选实施方式中，所述量子点具有2nm-20nm的粒径。在一个优选实施方式中，所述量子点具有5nm-20nm的粒径。在一个实施方式中，所述量子点为II-VI族量子点(如CdTe、CdSe等)。在另一个实施方式中，所述量子点为III-V族量子点(如InP、GaN等)。在又一个实施方式中，所述量子点为IV-VI族量子点(如PbSe等)。

在一个实施方式中，所述稀土荧光材料为含有铕(Eu)离子、铽(Tb)离子、钐(Sm)离子、钕(Nd)离子、镝(Dy)离子等各种镧系元素的荧光材料中的一种或者几种。在一个实施方式中，稀土荧光材料为含有铕(Eu)离子、铽(Tb)离子、钐(Sm)离子、钕(Nd)离子、镝(Dy)离子等各种镧系元素的稀土荧光材料中的一种或者几种负载到微球上形成的稀土荧光微球。将稀土荧光材料负载到微球上可进一步提高荧光的稳定性。

检测区9位于抗体结合区8和吸水区12之间，并与两者彼此搭接。检测区9与抗体结合区8和吸水区12搭接的方式并不受图1所示方式的限制。检测区9上包被有检测带10和质控带11。检测带10上固定有亲和素，质控带11上固定有抗鼠IgG的抗体。检测带10和质控带11彼此相间隔，其之间的距离可以在0.05cm至0.8cm之间。在一个实施方式中，检测带和质控带之间的间隔在0.1cm至0.6cm之间，优选在0.3cm至0.5cm之间。在应用本实用新型的试剂卡检测特定蛋白的过程中，同时采用了双抗体夹心法和生物素-亲和素级联放大***，这进一步提高了检测灵敏度，保证了特定蛋白检测时对灵敏度的要求。

吸水区12可由选自由棉绒、玻纤的材料制成，优选由棉绒制成。

试纸条的整体长度在8cm至10cm之间，整体宽度在0.2cm至0.5cm之间，优选在0.2cm至0.3cm之间，最优选为0.3cm。本实用新型的试纸条在提供灵敏度和检测线性范围的同时，通过降低试纸条的长度和/或宽度可降低抗体的用量，大大节约了生产成本。

图3是本实用新型的试纸条的俯视图的侧视示意图。

如图3所示，本实用新型的试纸条包括在底板13上顺序排列并顺次搭接加样区7、抗体结合区8、检测区9和吸水区12。底板13可以比加样区7、抗体结合区8、检测区9和吸水区12顺次搭接后的长度和宽度更宽和/或更长。在一个优选实施方式中，底板13与加样区7、抗体结合区8、检测区9和吸水区12顺次搭接后的长度和宽度一致。对图3中与图1和图2相同的内容不再进行重复描述。

本实用新型的试纸卡具有至少以下诸多优点：量子点和稀土荧光材料的联用以及双抗体夹心法和生物素-亲和素技术的使用大大提高了检测检测灵敏度并改进了线性范围；和试剂卡设计易于携带、保存及在荧光检测仪中读数，且结构简单，所用材料来源广泛，价格低廉，很适用于临床上的大规模推广应用。

实施例

以下实施例用于说明本实用新型，但不应理解为限于在此阐述的实施例。此外，以下实施例中仅以检测心肌肌钙蛋白I为例来说明本实用新型的试纸卡。

下述实施例中，所述心肌肌钙蛋白I第一抗体、心肌肌钙蛋白I第二抗体、抗鼠IgG抗体、亲和素、生物素、量子点、稀土铕荧光微球、氧化铕(Eu₂O₃)、4,4'-二(1,1',2,2',3,3'-七氟-4',6'-己二酮-6'-基)-氯磺酰-邻三联苯(BHHCT)、2-(N-***啉)乙磺酸(MES)、碳二亚胺(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、二甲基甲酰胺(DMF)、N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)、吡啶、牛血清白蛋白(BSA)、Tween-20、海藻糖、Superdex200填料、玻璃纤维素膜、聚酯膜、硝酸纤维素膜、高强度吸水纸均为市售产品。

所述联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸条和试纸卡的制备方法为：

1)加样区的制备

将玻璃纤维素膜或者聚酯膜放入预处理液(含有1％BSA和0.1％Tween-20的0.1M，pH8.0-8.6的硼酸-硼砂缓冲液或者含有1％BSA和0.1％Tween-20的0.05M，pH7.4-8.2的Tris-HCl缓冲液)中浸泡处理3-5小时后，于35-39℃鼓风干燥箱中烘干3-5小时。

2)抗体结合区的制备

A、抗体结合区的预处理

将玻璃纤维素膜或者聚酯膜放入预处理液(含有1％BSA和0.1％Tween-20的0.1M，pH8.0-8.6的硼酸-硼砂缓冲液或者含有1％BSA和0.1％Tween-20的0.05M，pH7.4-8.2的Tris-HCl缓冲液)中浸泡处理3-5小时后，于35-39℃鼓风干燥箱中烘干3-5小时。

B、量子点标记抗体的制备

使用0.05M，pH4.5-5.0的2-(N-***啉)乙磺酸(MES)活化缓冲液洗涤经修饰表面含有羧基基团的量子点，加入碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)使二者终浓度均为15-60mmol，室温反应20-30分钟，充分洗涤量子点，用0.05M，pH8.0-8.6的硼酸-硼砂缓冲液复溶后加入相同缓冲液透析过的心肌肌钙蛋白I第一抗体，使第一抗体与量子点的质量比为1：5至1：25，室温反应2小时后，加入含有10％BSA的0.02M，pH7.2-7.6的磷酸盐缓冲液室温封闭30分钟，充分洗涤量子点，用含有1％BSA和0.1％Tween-20的0.05M，pH7.4-8.2的Tris-HCl缓冲液的保存液复溶至原体积。

C、稀土荧光材料标记抗体的制备(1)

用6M HCl溶解Eu₂O₃，并用超纯水定容至终浓度1mg/ml，再用0.05MpH8.0NH₄HCO₃溶液稀释500倍。将BHHCT用无水乙醇溶解至终浓度10mg/ml。使用0.05-0.2M，pH9.0-9.5的碳酸盐标记缓冲液对心肌肌钙蛋白I第一抗体透析4-6次，或者超滤离心方式洗涤4-6次，调整浓度至0.25mg/ml。将BHHCT无水乙醇溶液以体积比1：200的比例加入第一抗体溶液中，室温避光持续混匀反应1-3小时。用0.05M pH8.0NH₄HCO₃溶液脱盐。使用Superdex200填料在1*30cm柱中纯化结合物，用0.1％BSA溶液平衡1-3小时，用0.05M Tris-HCl洗脱，流速为1ml/min。根据280nm吸光度收集蛋白峰，用0.22μm滤器除菌过滤。再用0.05M Tris-HCl稀释20倍，之后加入Eu³⁺的NH₄HCO₃溶液，按照体积比为1：5至1：15的比例添加，室温避光持续混匀反应1-2小时。用0.05M Tris-HCl以超滤离心方式清洗并浓缩至抗体浓度大于5mg/ml，备用。

D、稀土荧光材料标记抗体的制备(2)

使用0.05M，pH4.5-5.0的2-(N-***啉)乙磺酸(MES)活化缓冲液洗涤的稀土铕荧光微球，加入碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)使二者终浓度均为15-60mmol，室温反应20-30分钟，充分洗涤稀土铕荧光微球，用0.05M，pH8.0-8.6的硼酸-硼砂缓冲液复溶后加入透析过的第一抗体，使心肌肌钙蛋白I第一抗体与荧光微球的质量比为1：8至1：60，室温反应2小时后，加入含有10％BSA的0.02M，pH7.2-7.6的磷酸盐缓冲液室温封闭30分钟，充分洗涤稀土铕荧光微球，用含有1％BSA和0.1％Tween-20的0.05M，pH7.4-8.2的Tris-HCl缓冲液的保存液复溶至原体积。

E、量子点标记抗体及稀土荧光材料标记抗体的混合

将本部分步骤B中制备的量子点标记抗体与步骤C或者步骤D中制备的稀土荧光材料标记抗体按抗体浓度为1：5至5：1的比例进行混匀，即制备获得联合量子点标记抗体与稀土荧光材料标记抗体的双标记混合物。

F、生物素化抗体的制备

将心肌肌钙蛋白I第二抗体以0.02M，pH7.2-7.6的磷酸盐缓冲液4℃透析过夜，调整浓度为5mg/ml-10mg/ml。

生物素的预活化：准确称取300mg生物素溶解于8ml的二甲基甲酰胺(DMF)中，室温条件下加入183mg的N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，304mg的N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)及0.1ml的吡啶，将反应混合物在室温下搅拌24小时。过滤除去反应产生的尿素，滤液浓缩后通过硅胶柱色谱纯化，在异丙醇中重结晶得到的白色固体即为预活化的生物素。

用二甲基甲酰胺(DMF)溶解预活化的生物素，使其终浓度为0.05M，并加入到透析过的第二抗体中，使得第二抗体与生物素的摩尔比为1：10-1：25，室温反应1小时，以0.02M，pH7.2-7.6的磷酸盐缓冲液4℃透析过夜。

G、抗体结合区的制备

将本部分步骤E制备获得的量子点标记抗体与稀土荧光材料标记抗体的双标记混合物与步骤F制备获得的生物素化抗体充分混匀，使用定量喷膜仪以2μl/cm-8μl/cm均匀喷涂于上述步骤A中预处理过的玻璃纤维素膜或者聚酯膜上，于35-39℃鼓风干燥箱中烘干2-4小时，加入干燥剂封存备用。

3)检测区的制备

A、检测带的制备：使用包被液(含有0.1-10％海藻糖的0.01-0.02M，pH7.4-8.2的Tris-HCl缓冲液)将亲和素稀释到1mg/ml-5mg/ml的浓度，使用定量喷膜仪以1.2μl/cm均匀喷涂于硝酸纤维素膜上，于35-39℃鼓风干燥箱中烘干2-4小时。

B、质控带的制备：使用包被液(含有0.1-10％海藻糖的0.01-0.02M，pH7.4-8.2的Tris-HCl缓冲液)将抗小鼠IgG稀释到0.5mg/ml-3mg/ml的浓度，使用定量喷膜仪以0.8μl/cm均匀喷涂于硝酸纤维素膜上，于35-39℃鼓风干燥箱中烘干2-4小时。

C、检测区的制备：用封闭液(含有1-10％BSA和1-10％海藻糖的0.01-0.02M，pH7.4-8.2的Tris-HCl缓冲液)将含有检测带和质控带的硝酸纤维素膜封闭1-2小时，取出后置35-39℃鼓风干燥箱中烘干2-4小时，封袋备用。

4)试纸条的组装

在湿度小于30％，温度20-30℃条件下进行试纸条的组装。底板选用PVC材料，在底板同一面的方向顺次连接且相邻部位部分重叠的加样区、抗体结合区、检测区及吸水区。在检测区粘覆底板时，检测带的位置靠近抗体结合区，质控带的位置靠近吸水区。吸水区为高强度吸水纸。组装好后裁剪成试纸条。

5)试纸卡的组装

在湿度小于30％，温度20-30℃条件下进行试纸卡的组装。将上述试纸条置于塑料底座的中间位置，使试纸条的底板与塑料底座相连，并扣合塑料卡盖。卡盖上设置有加样孔和检测孔，加样孔开口于加样区的上侧，暴露出加样区的部分区域，检测孔开口于所述检测区的上侧，暴露出检测带和质控带的全部区域。

6)校准品及待检样品的测定

将100μl的标准品或者待检样品加入到试纸卡的加样孔，进行免疫层析反应，10-15分钟后将试纸卡置于专门的荧光检测仪中，通过读取荧光信号的大小进行定量测定。

以上实施例仅是为了清楚地说明所做的举例，并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上可以做出其他的改进和润饰，这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申的显而易见的改进和润饰仍处在本实用新型的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡，其特征在于，所述试纸卡包括：

i)试纸条，其中所述试纸条包括：

i-1)加样区，

i-2)同时包被有由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体以及由生物素标记的第二抗体的抗体结合区，

i-3)具有包被有相间隔的检测带和质控带的检测区，其中所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体，

i-4)吸水区，和

i-5)底板，其中所述加样区、抗体结合区、检测区和吸水区在所述底板上顺序排列并顺次搭接；以及

ii)包覆所述试纸条的外壳，其中所述外壳包括：

ii-1)设置有加样孔和检测孔的卡盖，其中所述加样孔开口于所述加样区的上侧，以暴露出所述加样区的部分区域，所述检测孔开口于所述检测区的上侧，以暴露出所述检测带和所述质控带的全部区域，和

ii-2)与所述卡盖彼此连接的底座。

2.如权利要求1的试纸卡，其特征在于，所述量子点为微球形式且具有2nm-30nm的粒径范围，且所述量子点选自以下组中：CdTe、CdSe、PbSe、InP和GaN。

3.如权利要求1或2的试纸卡，其特征在于，所述抗体结合区上进一步包被有微球，其中所述微球负载有所述稀土荧光材料和所述第一抗体。

4.如权利要求3的试纸卡，其特征在于，所述微球的粒径大小为50nm-400nm。

5.如权利要求4的试纸卡，其特征在于，所述微球的粒径大小为100nm-300nm。

6.如权利要求5的试纸卡，其特征在于，所述微球的粒径大小为100nm或300nm。

7.如权利要求1的试纸卡，其特征在于，所述第一抗体和第二抗体识别同种待测蛋白的不同表位，所述蛋白选自以下组中：心肌肌钙蛋白I、N末端脑钠肽前体、心型脂肪酸结合蛋白、降钙素原、C反应蛋白和D-二聚体。

8.如权利要求1的试纸卡，其特征在于，所述检测带和所述质控带之间的间隔在0.1-0.6cm之间。

9.如权利要求1的试纸卡，其特征在于，所述试纸条的宽度在0.2cm-1cm之间。

10.如权利要求1的试纸卡，其特征在于，所述卡盖和所述底座由塑料制成。