CN1857397A - 从铜污染土壤的修复植物海州香薷中提取总黄酮的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及从铜污染土壤的修复植物海州香薷中提取总黄酮的方法，步骤如下：收获种植在铜污染土壤的盛花期海州香薷全草、花枝或种子干燥、粉碎后，过40目筛，收集过筛下的粉末；用体积浓度为40％～60％的乙醇－水混合溶剂回流浸提，或者在室温下用超声提取，获取提取液；减压回收提取液中的乙醇后，用蒸馏水稀释，除去水不溶性杂质，再用石油醚萃取，除去脂溶性杂质，然后母液用乙酸乙酯萃取，除去乙酸乙酯萃取层，再用正丁醇萃取，浓缩正丁醇萃取层，得到总黄酮。本发明以修复铜污染土壤的铜耐性/富集植物海州香薷为原料提取总黄酮，工艺简单，利于高效资源化利用我国铜污染土壤的植物修复材料，降低植物修复成本，加快植物修复进程。
Description
技术领域
本发明涉及从铜污染土壤的修复植物海州香薷中提取总黄酮的方法。
背景技术
生物类黄酮具有清除自由基和抗氧化的能力，其作用机理在于它阻止了自由基在体内产生。生物类黄酮可以通过抗自由基作用直接抑制癌细胞生长及抗致癌因子达到抗癌、防癌作用。黄酮类物质还可以保护细胞免受致癌因子损害。而且，黄酮类物质可以防止低密度脂蛋白发生脂质过氧化反应，降低病人血浆中的低密度脂蛋白被氧化的易感系数，提高血浆中低密度脂蛋白的抗氧化、抗凝聚、抗滞留能力，可用来治疗各种因血脂高、脂质氧化所引起的疾病。
海州香薷是唇形科香薷属植物，在东南亚地区多作为民间药草使用。有发汗解暑，和中祠湿之功效，主治胸痞腹痛，呕吐腹泻，水肿脚气等。近年来，铜耐性/富集植物海州香薷广泛用于铜污染土壤的植物修复。在铜污染土壤种植海州香薷，能够降低污染土壤中有效态铜含量，恢复土壤农耕。随着海州香薷植物修复铜污染土壤的大规模田间示范和应用推广，植物修复材料的产后处置和资源化是个急需解决的环境问题。研究表明铜耐性/富集植物海州香薷能够及时清除铜离子产生的氧自由基，保护细胞膜完整性。但如何从铜污染土壤的修复植物海州香薷中提取总黄酮，还未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供从铜污染土壤的修复植物海州香薷中提取总黄酮的方法，该方法以修复铜污染土壤的铜耐性/富集植物海州香薷全草、花枝或种子为原料提取总黄酮，既可在医药成分方面开发利用，又可实现植物修复材料的产后资源化高效利用，提高其经济价值。
本发明所提供的从铜污染土壤的修复植物海州香薷中提取总黄酮的方法，包括以下步骤：
(1)收获种植在铜污染土壤的盛花期海州香薷全草、花枝或种子，干燥、粉碎后，过40目筛，收集过筛下的粉末；
(2)粉碎过筛后的粉末用体积浓度为40％～60％的乙醇-水混合溶剂回流浸提，或者在室温下用超声提取，获取提取液，粉碎过筛后的粉末与乙醇-水混合溶剂的体积重量比为1∶10～1∶20；
(3)减压回收提取液中的乙醇后，用蒸馏水稀释，除去水不溶性杂质，再用石油醚萃取，除去脂溶性杂质，然后母液用乙酸乙酯萃取，除去乙酸乙酯萃取层，再用正丁醇萃取，浓缩正丁醇萃取层。得到总黄酮。
本发明以修复铜污染土壤的铜耐性/富集植物海州香薷为原料提取总黄酮，提高了铜耐性/富集植物海州香薷的附加值，工艺简单，总黄酮溶出量可达到5.6～11.8％(分光光度法测定)，利于高效资源化利用我国铜污染土壤的植物修复材料，降低植物修复成本，加快植物修复进程。
具体实施方式
以下结合实例对本发明作进一步描述。
实施例1：
盛花期收获种植在铜污染土壤的海州香薷花枝，烘干，粉碎后，过40目筛。称取干粉50g，用体积浓度为60％的乙醇-水溶液500毫升，回流浸提4小时，冷却，抽滤，滤渣继续用同一种溶液提取，反复3次，冷却，抽滤，合并滤液。乙醇回收，得到海州香薷总黄酮粗提物，分光光度计测总黄酮含量为11.6％。继续用蒸馏水稀释总黄酮粗提物，除去水不溶性杂质，再用石油醚萃取2次，每次提取液与石油醚以体积比为1∶10，至石油醚层无色后，除去脂溶性杂质；然后母液用乙酸乙酯萃取2次，每次提取液与乙酸乙酯以体积比为1∶10，至乙酸乙酯层无色后，除去乙酸乙酯萃取层；最后母液用正丁醇萃取1次，提取液与正丁醇以体积比为1∶10，减压浓缩正丁醇萃取层，冷冻干燥得到总黄酮6.2克。
实施例2：
盛花期收获种植在铜污染土壤的海州香薷花枝，烘干，粉碎后，过40目筛。称取干粉50g，用体积浓度为50％的乙醇-水溶液700毫升，回流浸提4小时，冷却，抽滤，滤渣继续用同一种溶液提取，反复3次，冷却，抽滤，合并滤液。乙醇回收，得到海州香薷总黄酮粗提物，分光光度计测总黄酮含量为9.8％。继续用蒸馏水稀释总黄酮粗提物，除去水不溶性杂质，再用石油醚萃取2次，每次提取液与石油醚以体积比为1∶10，至石油醚层无色后，除去脂溶性杂质；然后母液用乙酸乙酯萃取2次，每次提取液与乙酸乙酯以体积比为1∶10，至乙酸乙酯层无色后，除去乙酸乙酯萃取层；最后母液用正丁醇萃取1次，提取液与正丁醇以体积比为1∶10，减压浓缩正丁醇萃取层，冷冻干燥得到总黄酮5.4克。
实施例3：
盛花期收获种植在铜污染土壤的海州香薷花枝，烘干，粉碎后，过40目筛。称取干粉50g，用体积浓度为40％的乙醇-水溶液650毫升，回流浸提4小时，冷却，抽滤，滤渣继续用同一种溶液提取，反复3次，冷却，抽滤，合并滤液。乙醇回收，得到海州香薷总黄酮粗提物，分光光度计测总黄酮含量为7.8％。继续用蒸馏水稀释总黄酮粗提物，除去水不溶性杂质，再用石油醚萃取2次，每次提取液与石油醚以体积比为1∶10，至石油醚层无色后，除去脂溶性杂质；然后母液用乙酸乙酯萃取2次，每次提取液与乙酸乙酯以体积比为1∶10，至乙酸乙酯层无色后，除去乙酸乙酯萃取层；最后母液用正丁醇萃取1次，提取液与正丁醇以体积比为1∶10，减压浓缩正丁醇萃取层，冷冻干燥得到总黄酮4.1克。
实施例4：
盛花期收获种植在铜污染土壤的海州香薷花枝，风干，粉碎后，过40目筛。称取干粉50g，在室温下用体积浓度为60％的乙醇-水溶液1000毫升，超声波提取2小时，获取提取液，冷却，过滤，滤液回收乙醇，得到海州香薷总黄酮粗提物，分光光度计测总黄酮含量为8.8％。继续用蒸馏水稀释总黄酮粗提物，除去水不溶性杂质，再用石油醚萃取2次，每次提取液与石油醚以体积比为1∶10，至石油醚层无色后，除去脂溶性杂质；然后母液用乙酸乙酯萃取2次，每次提取液与乙酸乙酯以体积比为1∶10，至乙酸乙酯层无色后，除去乙酸乙酯萃取层；最后母液用正丁醇萃取1次，提取液与正丁醇以体积比为1∶10，减压浓缩正丁醇萃取层，冷冻干燥得到总黄酮5.2克。
实施例5：
盛花期收获种植在铜污染土壤的海州香薷种子，风干，粉碎后，过40目筛。称取干粉50g，在室温下用体积浓度为60％的乙醇-水溶液800毫升，超声波提取2小时，获取提取液，冷却，过滤。滤液回收乙醇，得到海州香薷总黄酮粗提物，分光光度计测总黄酮含量为8.2％。继续用蒸馏水稀释总黄酮粗提物，除去水不溶性杂质，再用石油醚萃取2次，每次提取液与石油醚以体积比为1∶10，至石油醚层无色后，除去脂溶性杂质；然后母液用乙酸乙酯萃取2次，每次提取液与乙酸乙酯以体积比为1∶10，至乙酸乙酯层无色后，除去乙酸乙酯萃取层；最后母液用正丁醇萃取1次，提取液与正丁醇以体积比为1∶10，减压浓缩正丁醇萃取层，冷冻干燥得到总黄酮4.6克。
实施例6：
盛花期收获种植在铜污染土壤的海州香薷全草，风干，粉碎后，过40目筛。称取干粉50g，在室温下用体积浓度为60％的乙醇-水溶液8500毫升，超声波提取2小时，获取提取液，冷却，过滤。滤液回收乙醇，得到海州香薷总黄酮粗提物，分光光度计测总黄酮含量为5.2％。继续用蒸馏水稀释总黄酮粗提物，除去水不溶性杂质，再用石油醚萃取2次，每次提取液与石油醚以体积比为1∶10，至石油醚层无色后，除去脂溶性杂质；然后母液用乙酸乙酯萃取2次，每次提取液与乙酸乙酯以体积比为1∶10，至乙酸乙酯层无色后，除去乙酸乙酯萃取层；最后母液用正丁醇萃取1次，提取液与正丁醇以体积比为1∶10，减压浓缩正丁醇萃取层，冷冻干燥得到总黄酮2.7克。
Claims (1)
1、从铜污染土壤的修复植物海州香薷中提取总黄酮的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)收获种植在铜污染土壤的盛花期海州香薷全草、花枝或种子，干燥、粉碎后，过40目筛，收集过筛下的粉末；
(2)粉碎过筛后的粉末用体积浓度为40％～60％的乙醇-水混合溶剂回流浸提，或者在室温下用超声提取，获取提取液，粉碎过筛后的粉末与水-乙醇混合溶剂的体积重量比为1∶10～1∶20；
(3)减压回收提取液中的乙醇后，用蒸馏水稀释，除去水不溶性杂质，再用石油醚萃取，除去脂溶性杂质，然后母液用乙酸乙酯萃取，除去乙酸乙酯萃取层，再用正丁醇萃取，浓缩正丁醇萃取层，得到总黄酮。
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