CN1857350A - 一种增强免疫功能的药物或保健品及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药制品或保健品领域，特别涉及一种能增强免疫功能的药物或保健品及其制备方法。一种增强免疫功能的药物或保健品，包括地龙提取物和刺五加提取物。所述药物或保健品还包括辅料淀粉、甘露醇、硬脂酸镁。所述药物或保健品各组分的重量百分含量为：地龙提取物10~80％，刺五加提取物10~70％，淀粉5~30％，甘露醇4~20％，硬脂酸镁1~10％。

Description

一种增强免疫功能的药物或保健品及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药制品或保健品领域，特别涉及一种能增强免疫功能的药物或保健品及其制备方法。

背景技术

免疫是人体的一种生理功能；人体依靠这种功能识别“自己”和“非己”的成分，从而破坏和排斥进入体内的抗原物质，如病原体等，或人体本身所产生的损伤细胞和肿瘤细胞等，以此来维持人体内部环境的平衡和稳定。由此可见，免疫的主要功能有：防御感染、自身稳定和免疫监视。预防感染，使人体能够抵抗病原体等的侵袭，防止疾病的产生，从而维护人体的健康；自身稳定，使人体能够及时清除体内的衰老、死亡和损伤细胞；免疫监视，使人体能够随时识别和清除体内产生的异常细胞(如肿瘤细胞)。然而，随着人们生活水平的提高，生活结构的变化、年龄的增长、睡眠的不足、饮食习惯的调整和精神的压力的逐步增加，使我们的身体的负荷不断增加，自身防疫能力却是在逐渐下降；同时，随着环境的恶化，各种病毒、细菌确越来越繁多和具有攻击力；为了保持一个健康的体魄，我们除了需要培养自身的免疫力外，我们还有必要通过增强免疫力的药物进行必要的补充，特别是对免疫力低下的人群。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能增强免疫功能的药物或保健品。

本发明的另一目的在于提供一种制备上述药物或保健品的方法。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

一种增强免疫功能的药物或保健品，其活性成分包括地龙提取物和刺五加提取物。

所述药物或保健品还包括辅料淀粉、甘露醇、硬脂酸镁。

所述药物或保健品各组分的重量百分含量为：

地龙提取物            10～80％

刺五加提取物          10～70％

淀粉                  5～30％

甘露醇                4～20％

硬脂酸镁              1～10％

所述药物或保健品中所述地龙提取物有效成分为地龙多肽；刺五加提取物有效成分为总皂苷。

一种制备上述药物或保健品的方法，其包括如下过程，

将地龙提取物和刺五加提取物分别粉碎、过筛；

将甘露醇和硬脂酸镁混合；

将地龙提取物、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸镁的混合物与淀粉混合制粒；然后制成所需剂型。

地龙(earthworm)俗称“蚯蚓”，“曲膳”，别名“地龙子”，系环节动物。是生物进化过程中最先具有免疫记忆和识别的动物之一。其味咸性寒，归肝、脾、膀胱经。具有清热定惊，通络，平喘，利尿之功效。从地龙体内提取了多种具有生物活性的肽类，即地龙肽(lumbricus peptide，LP)，它是地龙体内小分子多肽的总称，大量的文献表明地龙提取物具有增强免疫功能的作用。

通过如下实验研究证明地龙肽具有增强免疫功能的作用：

1.不同剂量的地龙肽能增强小鼠Mφ细胞毒活性，LP 3个剂量组Mφ的细胞毒活性均有所增强，与正常对照组相比较，0.1，1和10mg/l LP组Mφ的细胞毒活性明显增强(P＜0.01)

2.地龙肽对小鼠Mφ，脾细胞分泌TNF-α的影响，与正常对照组相比较，0.1，0.5mg/l LP组Mφ经LPS诱生后分泌TNF-α的水平明显增加(P＜0.01)、与环磷酰胺组相比较，环磷酰胺+LP组Mφ自发及经LPS诱生后分泌TNF-α的水平均明显增加(P＜0.01)。

3.地龙肽对小鼠脾细胞分泌IL-2的影响，与正常对照组相比较，0.1g/l LP组脾细胞自发及经ConA诱生分泌IL-2的量均明显增加(P＜0.01)；1g/l和0.5g/l LP组IL-2的自发分泌也增加(分别为P＜0.01和P＜0.05)。经LPS诱生后，分泌IL-2的水平虽有所增加，但与正常对照组相比较无显著差异(P＞0.05)。环磷酰胺+LP组与环磷酰胺组相比较，脾细胞自发及经ConA诱生后分泌IL-2的水平均明显升高(P＜0.01)

4.地龙肽各组分对NK细胞活性的影响，地龙肽在浓度为0.1、0.5和1mg/l时，均可显著提高NK细胞的活性(P＜0.001)，且浓度越大效果越明显，地龙肽可明显拮抗环磷酰胺的抑制作用(P＜0.05)。

5.地龙肽对小鼠正常Mφ和正常脾细胞分泌NO的影响，NO是由Mφ内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)催化L精氨酸与氧分子反应生成的。NO在活化的Mφ细胞杀伤肿瘤细胞的效应中起着重要的作用，NO是一种新发现的抗肿瘤分子，0.1g/l LP可使Mφ和脾细胞分泌NO的水平明显提高(p＜0.01)。

6.地龙肽能使实验组小白鼠脾指数和胸腺指数明显升高(P＜0.05)说明实验组小白鼠的免疫功能显著增强。结果显示小鼠廓清指数与吞噬指数明显升高(P＜0.01)说明LP增强小鼠免疫功能明显强于黄芪冲剂。小鼠半数溶血素测定结果明显升高，说明小鼠的体液免疫功能也有显著增强(P＜0.05)。

另外，蚯蚓内有大量脂肪酸、核酸及其衍生物游离氨基酸，还有微量元素磷、钙、铁、钾、锌、铜以及多种维生素，可作为人体理想的营养来源。特别是它的蛋白质含量十分丰富，远高于鸡蛋和一般肉类，其中有人体必需的8种氨基酸。在美国、日本、大洋洲和非洲都有将蚯蚓作为食品来食用的习惯。日本是目前蚯蚓的最大消费国，也是最大的蚯蚓进口国。日本食品工业运用现代技术开发研制出蚯蚓粉保健食品。经测定这种蚯蚓保健品，含有蛋白质58.5％，脂肪6.3％，亚油酸110毫克，维生素B11.3毫克，维生素B23.3毫克，灰分5.9％等多种营养成分。试验结果表明，这种保健食品具有调节身体疲劳状况，降低血液过高的胆固醇，降低血压以及预防神经痛和便泌等效果。蚯蚓还可提取氨基酸，作为轻工业的原料，生产出美肤化妆品及各种食品及保健食品。按照现代医药学理论以地龙多肽物质为主要原料开发具有免疫调节作用的保健食品是可行的。

刺五加提取物为五加科植物刺五加的根及根茎的提取物。性味与归经：味辛、微苦，性温，归脾、肾、心经。功能与主治：补肾强腰，益气安神，活血通络。主治肾虚体弱，腰膝酸软，小儿行迟，脾虚乏力，气虚浮肿，食欲不振，失眠多梦，健忘，胸痹疼痛，风寒湿痹，跌打肿痛。

化学成分：根含刺五加甙A、B、B₁、C、D、E。根茎含具免疫促进作用的碱溶性刺五加多糖AS-II、AS-III及水溶性刺五加多糖PES-A、PES-B。

刺五加提取物的药理作用：

1、对非特异性刺激的作用

(1)抗疲劳作用(2)耐缺氧作用(3)抗高低温及抗放射作用(4)抗应激作用(5)解毒作用

2、对免疫功能的影响

(1)对单核-巨噬细胞***吞噬功能的影响给小鼠或豚鼠每日灌胃刺五加醇提水溶液50g(生药)/kg1次，连续14日、15日，明显增加单核、吞噬细胞和腹腔巨噬细胞吞噬能力。

(2)对淋巴细胞功能的影响给小鼠每日每只灌胃刺五加提取物0.02ml，连续9日，明显阻止因游泳疲劳所致的T、B淋巴细胞、杀伤细胞、非特异性免疫功能下降。

刺五加多糖使小鼠脾脏细胞数及肠系膜***细胞数明显增加，且对环磷酰胺所致的细胞数目减少有显著拮抗效应。刺五加多糖能使小鼠脾脏白髓总体积和***皮质总体积明显增加，且能显著对抗环磷酰胺减少脾脏白髓总体积和***皮质总体积的作用。作为免疫调节剂，刺五加多糖可促进淋巴细胞增殖，使之代谢活跃，功能增强，以此形态学改变为基础，促进了机体的免疫功能。刺五加多糖的延缓衰老、抗肿瘤等作用可能与其对免疫***的作用密不可分。

刺五加多糖在体外具有诱导小鼠脾细胞产生IL-2的作用，提示多糖增强机体免疫的机理可能与诱导机体产生IL-2有关。IL-2是一种极为重要的淋巴因子，具有诱导Th细胞和Tc细胞增殖，刺激B细胞产生抗体，活化巨噬细胞，增强NK细胞和LAK活性的作用。

巨噬细胞是单核巨噬细胞***中作用最强的一类细胞，也是抗肿瘤的效应细胞。刺五加浸膏及醇提物具有明显增强巨噬细胞的吞噬作用，对应激状态下小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能进行研究，结果表明，起作用的主要成分为刺五加苷。从应激学角度来说，由于刺五加的适应原样作用使得应激状态下的小鼠肾上腺皮质激素的分泌控制在适量水平，进而促进单核巨噬细胞***的吞噬功能。从而提高免疫功能，改善机体健康状况。

(3)对抗体形成的影响给LACA系及C57BL/6纯系小鼠每日腹腔注射刺五加多糖注射剂12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg1次，给药9日后，25-100mg/kg加五加多糖明显增加小鼠分泌IgG和IgM的抗体分泌细胞(PFC)，提示增强特异性体液免疫功能。

(4)对干扰素的影响用含10μg/ml的刺五加多糖的培养基，将诱发细胞预处理24-48小时后，用150U/ml干扰素启动2小时，结果证明刺五加多糖显著提高细胞产生干扰素的能力。

(5)有升高白细胞的作用。

上述结果提示刺五加提取物对免疫功能的影响是多方面的。

下面通过具体的药理实验进一步说明本发明的功效。

龙肽免疫胶囊增强免疫力功能动物试验报告

1实验动物

SPF级昆明种雌性小鼠，18-22g，实验动物生产许可证号：SCXK(鄂)2003-0005；实验动物使用许可证号：SYXK(鄂)2003-0014。动物饲养室温度为22-26℃，湿度为47-67％。

2样品检验及依据

一种由地龙提取物、刺五加提取物、淀粉、甘露醇、硬脂酸镁等原辅料制作的被命名为龙肽免疫胶囊的硬胶囊剂，按《保健食品检验与评价技术规范》2003年版(功能学评价程序)中保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定的相关规定进行检验。

3剂量分组

按人群推荐日摄入量0.05g/kg BW扩大10、20、30倍设立低、中、高三个剂量组，即0.5、1.0、1.5g/kg BW，共分四个实验组，每实验组包括空白对照组、低、中、高剂量组，各剂量组实验动物数为10只。免疫实验一组进行迟发型***反应和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验；免疫实验二组进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定；免疫实验三组进行淋巴器官/体重比值测定和碳廓清实验；免疫实验四组进行血清溶血素的测定和抗体生成细胞检测。小鼠连续灌胃30天后开始试验。各实验组均按0.20ml/10g BW容量经口灌胃给予。

4试验方法与结果

4.1方法

4.1.1 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验

方法：无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液平皿中，用镊子轻轻将脾磨碎，制成单个细胞悬液。经200目筛网过滤，用Hank’s液洗2次，每次离心10min(1000r/min)。然后将细胞悬浮于1mL的完全培养液中，用台酚兰染色计数活细胞数(应在95％以上)，调整细胞浓度为3×10⁶个/mL。将每一份脾细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1mL，一孔加75μLConA液(相当于7.5μg/mL)，另一孔作为对照，置5％CO₂，37℃孵箱中培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7mL，加入0.7mL不含小牛血清的RPMl1640培养液，同时加入MTT(5mg/mL)50μL/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1mL酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。然后分装到96孔培养板中，每个孔作3个平行孔(100μL/孔)，用酶标仪以570nm波长测定光密度值。

4.1.2二硝基氟苯(DNFB)诱导迟发型***反应(DTH)

方法：耳肿胀法。用1％DNFB(以1∶1的丙酮麻油溶液配制)致敏小鼠后，第5天再用DNFB攻击右耳，24h后处死动物剪下左右耳壳用打孔器取下直经8mm的耳片，称重，以左右耳的重量之差来表示DTH的程度。

4.1.3血清溶血素的测定

方法：血凝法。取羊血，用生理盐水洗涤3次，每次离心(2000r/min)10min。将压积SRBC用生理盐水配成2％(v/v)的细胞悬液，每只鼠腹腔注射0.2mL进行免疫。4～5天后，摘除眼球取血于离心管内，放置约1h，将凝固血与管壁剥离，使血清充分析出，2000r/min离心10min，收集血清。

凝集反应：用生理盐水将血清倍比稀释，将不同稀释度的血清分别置于微量血凝实验板内，每孔100μL，再加入100μL 0.5％(v/v)SRBC悬液，混匀，放入湿润的平盘内并加盖，于37℃温箱孵育3h，观察血球凝集程度。根据血清凝聚程度的级别计算出抗体积数。

4.1.4腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验

方法：半体内法。制备20％的鸡红细胞悬液；每只鼠腹腔注射1mL该悬液，30min后处死动物，将其仰位固定于鼠板上，开腹，经腹腔注入生理盐水2mL，转动鼠板1min，然后，吸出腹腔洗液1mL，平均分滴于2片载玻片上，37℃温育30min；育毕用生理盐水漂洗，晾干，以1∶1的丙酮甲醇溶液固定，4％Giemsa-磷酸缓冲液染色3min，再用蒸馏水漂洗晾干。油镜下计数100个巨噬细胞，按下式计算吞噬率和吞噬指数：

4.1.5小鼠碳廓清试验

方法：按体重从小鼠尾静脉注入稀释的印度墨汁(10mL/kg)，待墨汁注入，立即计时注入墨汁后2、10min，分别从内眦静脉丛取血20μL，并立即将其加到2mL0.1％ Na₂CO₃溶液中。各吸0.1mL于96孔酶标板中，用酶标仪在600nm波长处测光密度值(OD)，以Na₂CO₃溶液作空白对照。

将小鼠处死，取肝脏和脾脏，用滤纸吸干脏器表面血污，分别称重。

以吞噬指数表示小鼠碳廓清的能力。按下式计算吞噬指数a。受试样品组的吞噬指数显著高于对照组，可判定该项实验结果阳性。

$K=\frac{{\mathrm{LgOD}}_1-{\mathrm{lgOD}}_2}{t_2-t_1}$

4.1.6抗体生成细胞检测

取脱纤维的羊血，用生理盐水洗涤3次，每次离心(2000r/min)10min，每只鼠经腹腔注射2％(v/v)SRBC 0.2mL。将SRBC免疫4～5天后的小鼠颈椎脱臼处死，取出脾脏，放在盛装有Hank’s液的小平皿内，轻轻磨碎脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤，离心(1000/min)10min，用Hank’s液洗2遍，最后将细胞悬浮在5mL RPMI1640培养液中，计数细胞，并将细胞浓度调整为5×10⁶个/mL。

空斑的测定：将表层培养基(1g琼脂糖加双蒸水至100mL)加热溶解后，放入45～50℃水浴保温，与等量pH7.2～7.4、2倍浓度的Hank’s液混合，分装小试管，每管0.5mL，再向管内加50μL10％SRBC(v/v，用SA缓冲液配制)，20μL脾细胞悬液(5×10⁶个/mL)，迅速混匀，倾倒于己刷琼脂糖薄层的玻片上，做平行片，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中孵育1.5h，然后用SA缓冲液稀释的补体(1∶8)加入玻片架凹槽内，继续温育1.5h后，计数溶血空斑数。

4.1.7 NK细胞活性测定

方法：乳酸脱氢酶(LDH)测定法。

靶细胞的传代(YAC-1细胞)：

实验前24h将靶细胞进行传代培养。用前以Hank’s液洗3次，用RPMI1640完全培养调整细胞浓度为4×10⁵个/mL。

脾细胞悬液的制备(效应细胞)：

无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，用镊子轻轻将脾磨碎，制成单细胞悬液。经200目筛网过滤，用Hank’s液洗2次，每次离心10min(1000r/min)。弃上清将细胞弹起，加入0.5mL灭菌水20秒，裂解红细胞后再加入0.5mL2倍Hank’s液及8mLHanks液，1000r/min，10min离心，用1mL含10％小牛血清的RPMI1640完全培养液重悬，用1％冰醋酸稀释后计数(活细胞数应在95％以上)，用台酚兰染色计数活细胞数(应在95％以上)，最后用RPMI 1640完全培养液调整细胞浓度为2×10⁷个/mL。

NK细胞活性检测：

取靶细胞和效应细胞各100μL(效靶比50∶1)，加入U型96孔培养板中：靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μL，靶细胞最大释放孔加靶细胞和1％NP40各100μL；上述各项均设三个平行孔，于37℃、5％CO₂培养箱中培养4h，然后将96孔培养板以1500r/min离心5min，每孔吸取上清100μL置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μL，根据室温不同反应3～10min，每孔加入1mol/L的HCl30μL，在酶标仪490nm处测定光密度值(OD)。

按下式计算NK细胞活性，受试样品组的NK细胞活性显著高于对照组的NK细胞活性，即可判定该项实验结果阳性。

4.2结果

4.2.1试验前后动物体重结果：见表1、表2、表3、表4各组动物间体重无明显差异。

表1  实验一组试验前后动物体重记录( x±SD)

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	体重(克)		增重(克)
						试验前	试验后
			空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5				10101010	20.0±1.019.5±0.919.9±1.019.7±1.0	32.2±0.832.0±1.032.3±0.732.4±0.8	12.2±0.812.5±0.712.4±0.912.7±1.0

表2  实验二组试验前后动物体重记录( x±SD)

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	体重(克)		增重(克)
						试验前	试验后
			空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5				10101010	19.7±1.220.2±1.019.8±0.919.7±1.0	32.2±0.932.5±0.832.3±0.732.4±0.7	12.5±1.212.3±1.112.5±0.712.7±1.0

表3  实验三组试验前后动物体重记录( x±SD)

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	体重(克)		增重(克)
						试验前	试验后
			空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5				10101010	19.9±1.020.1±1.119.8±1.020.1±0.9	32.4±0.832.6±0.732.7±0.632.8±0.8	12.4±0.812.5±0.812.9±1.212.7±1.1

表4  实验四组试验前后动物体重记录( x±SD)

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	体重(克)		增重(克)
						试验前	试验后
			空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5				10101010	20.3±1.019.6±0.819.5±1.019.8±0.6	32.5±0.932.0±0.732.3±0.932.3±0.7	12.2±0.912.4±1.112.8±1.112.5±1.0

4.2.2对动物淋巴器官/体重比值的影响：见表5。各组动物间胸腺/体重比值和脾脏/体重比值无明显差异(P＞0.05、P＞0.05)。

表5  龙肽免疫胶囊对动物淋巴器官/体重比值的影响( x±SD)

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	胸腺/体重比值(×103)	P值	脾脏/体重比值(×103)	P值
							空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5	10101010	2.90±0.262.88±0.272.87±0.212.86±0.23	-0.8400.7970.713	3.70±0.213.74±0.213.73±0.193.72±0.25	-0.7270.7600.913

4.2.3脾淋巴细胞转化实验结果：见表6。从表6可见，与空白对照组比较，龙肽免疫胶囊高剂量组显著性增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力P＜0.05)。

4.2.4迟发型***反应实验结果：见表6。从表6可见：与空白对照组比较，龙肽免疫胶囊高剂量组显著性增强小鼠对DNFB诱发的DTH反应(p＜0.05)。

表6  龙肽免疫胶囊对小鼠细胞免疫功能影响

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	ConA诱导脾淋巴细胞增殖OD差值	P值	DNFB诱导DTH左右耳重量差(mg)	P值
							空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5	10101010	0.054±0.0190.069±0.0200.072±0.0230.080±0.017	-0.2430.1160.016	12.63±2.7415.10±2.4115.43±3.0916.24±3.13	-0.1490.0890.021

4.2.5血清溶血素测定实验结果：见表7。从表7可见，与空白对照组比较，龙肽免疫胶囊高剂量组可显著性升高血清溶血素含量(P＜0.05)。

4.2.6腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验结果：见表8。从表8可见，与空白对照组比较，龙肽免疫胶囊高剂量组明显提高吞噬率、吞噬指数(P＜0.05、P＜0.05)。

表7  龙肽免疫胶囊对小鼠体液免疫功能的影响

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	血清溶血素(抗体积数)	P值
					空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5	101010l0	81.2±11.993.8±18.996.4±13.7103.2±18.3	-0.2040.1010.011

表8  龙肽免疫胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	吞噬百分率(％)	P值	吞噬指数	P值
							空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5	10101010	25.500±2.17327.200±1.87427.600±2.06628.800±2.658	-0.2090.1270.011	0.345±0.0250.363±0.0290.370±0.0220.378±0.028	-0.3000.0990.021

4.2.7碳廓清实验结果：见表9。从表9可见，与空白对照组比较，龙肽免疫胶囊高剂量组可显著性提高小鼠碳廓清吞噬指数(P＜0.05)。

表9  龙肽免疫胶囊对小鼠碳廓清功能的影响

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	吞噬指数a	P值
					空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5	10101010	4.63±0.995.38±0.895.51±0.925.75±0.61	-0.1550.0760.018

4.2.8抗体生成细胞检测实验结果：见表10。从表10见，与空白对照组比较，龙肽免疫胶囊高剂量组能明显增强抗体生成细胞能力(P＜0.05)。

表10  龙肽免疫胶囊对抗体生成细胞功能的影响

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	溶血空斑数(/106脾细胞)	P值
					空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5	10101010	261.4±20.64276.5±26.82279.6±21.60291.9±17.12	-0.2960.1700.010

4.2.9 NK细胞活性实验结果：见表11。从表11可见，与空白对照组比较，龙肽免疫胶囊各剂量组均不能增强小鼠NK细胞活性(P＞0.05)。

表11  龙肽免疫胶囊对小鼠NK细胞活性的影响

组别	剂量(g/kg BW)	动物数(只)	细胞活性(％)	P值
					空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组	0.00.51.01.5	10101010	14.56±2.7816.24±3.1916.49±2.4716.90±2.02	-0.3710.2470.125

5结论

人群推荐日摄入量0.05g/kg BW扩大10、20、30倍设立低、中、高三个剂量组，即0.5、1.0、1.5/kg BW，另设空白对照组。采用SPF级昆明种小鼠，连续经口灌胃给予，30天后开始实验。实验结果以P≤0.05判断为显著性差异，结果显示：1)各剂量组与空白对照组比较，小鼠体重、淋巴器官/体重比值差异均无显著性；2)高剂量组能明显增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力；3)高剂量组能明显增强二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型***反应；4)高剂量组能明显升高小鼠血清溶血素含量；5)高剂量组能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能；6)高剂量组能明显增强小鼠碳廓清能力；7)高剂量组能明显增强抗体生成细胞能力；8)各剂量组均不能增强小鼠NK细胞活性。按照增强免疫力功能作用评价程序规定，该受试物具有增强免疫力功能作用。

具体实施方式：

实施例一

取地龙提取物10份(其有效成分为地龙多肽)和刺五加提取物70(有效成分为总皂苷)分别粉碎、过筛；

取甘露醇5份和硬脂酸镁10份混合；

将上述份量的地龙提取物、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸镁的混合物与淀粉5份在常温常压下混合制粒。然后进行胶囊填充，制成胶囊。

实施例二

取地龙提取物80份和刺五加提取物10分别粉碎、过筛；

取甘露醇4份和硬脂酸镁1份混合；

将上述份量的地龙提取物、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸镁的混合物与淀粉5份在常温常压下混合制粒。然后压片，得片剂。

实施例三

取地龙提取物25份和刺五加提取物25分别粉碎、过筛；

取甘露醇20份和硬脂酸镁10份混合；

将上述份量的地龙提取物、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸镁的混合物与淀粉30份在常温常压下混合制粒。然后进行胶囊填充，制成胶囊。

实施例四

取地龙提取物40份和刺五加提取物10分别粉碎、过筛；

取甘露醇20份和硬脂酸镁10份混合；

将上述份量的地龙提取物、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸镁的混合物与淀粉30份在常温常压下混合制粒。然后进行胶囊填充，制成胶囊。

实施例五

取地龙提取物40份和刺五加提取物40分别粉碎、过筛；

取甘露醇4份和硬脂酸镁10份混合；

将上述份量的地龙提取物、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸镁的混合物与淀粉6份在常温常压下混合制粒。

Claims (10)

1、一种增强免疫功能的药物或保健品，其特征在于，其活性成分包括地龙提取物和刺五加提取物。

2、根据权利要求1所述的一种增强免疫功能的药物或保健品，其特征在于，所述各组分的重量百分含量为：地龙提取物    10～80％，

                        刺五加提取物  10～70％。

3、根据权利要求1或2所述的一种增强免疫功能的药物或保健品，其特征在于，所述药物或保健品还包括辅料淀粉、甘露醇、硬脂酸镁。

4、根据权利要求3所述的一种增强免疫功能的药物或保健品，其特征在于，所述辅料各组分的重量百分含量为：

淀粉            5～30％

甘露醇          4～20％

硬脂酸镁        1～10％

5、根据权利要求1或2所述的一种增强免疫功能的药物或保健品，其特征在于，所述地龙提取物有效成分为地龙多肽。

6、根据权利要求1或2所述的一种增强免疫功能的药物或保健品，其特征在于，所述刺五加提取物有效成分为总皂苷。

7、根据权利要求1或2所述的一种增强免疫功能的药物或保健品，其特征在于，所述药物或保健品可以制成药物学上可接受的任何固体制剂。

8、根据权利要求7所述的一种增强免疫功能的药物或保健品，其特征在于，所述固体制剂为胶囊。

9、一种制备权利要求1-8中任意一个所述的增强免疫功能的药物或保健品的方法，其包括如下过程：将地龙提取物和刺五加提取物分别粉碎、过筛；将甘露醇和硬脂酸镁混合；将地龙提取物、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸镁的混合物与淀粉混合制粒；然后制成所需剂型。

10、根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所制成的剂型为片剂或颗粒剂或胶囊剂。