CN1850070A

CN1850070A - 槲皮素固体脂质纳米粒制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN1850070A
Application number: CN 200610044416
Authority: CN
Inventors: 翟光喜; 李厚丽; 娄红祥; 马玉坤
Original assignee: Shandong University
Current assignee: SHANDONG DAYIN MARINE BIOTECHNOLOGICAL PHARM HOLDINGS CO Ltd
Priority date: 2006-03-06
Filing date: 2006-03-06
Publication date: 2006-10-25
Anticipated expiration: 2026-03-06
Also published as: CN100367953C

Abstract

一种槲皮素固体脂质纳米粒制剂及其制备方法，属于医药技术领域。本发明以槲皮素作为原料药，采用固体脂质、乳化剂以及助乳化剂组成的混合物作为药物载体，将槲皮素、固体脂质和乳化剂溶于有机溶剂中构成油相，加入到同温的含有助乳化剂的初水相中乳化，再将其加入到含助乳化剂的低温水相中沉淀，即得槲皮素固体脂质纳米粒混悬液。本发明制备简单，将混悬液通过一定大小粒径的微孔滤膜过滤后，加入冻干保护剂，冷冻干燥，可使纳米粒在载体材料中均匀分散，大大提高了制剂的稳定性，能够更好的促进药物的溶解与吸收。

Description

槲皮素固体脂质纳米粒制剂及其制备方法

(一)技术领域

本发明涉及一种槲皮素固体脂质纳米粒制剂及其制备方法。

(二)背景技术

槲皮素(Quercetin，QT)是一种天然的黄酮类化合物，化学名为五羟基黄酮，异名栎精、槲皮黄素。槲皮素及其衍生物广泛存在于蔬菜、水果、干果、饮料和中草药中，是食品和中草药的一种重要生理活性物质。槲皮素进入体内可以与蛋白质发生相互作用，具有扩张冠状血管，降低血脂，抗血小板聚集，抗癌防癌、抗自由基、抗贫血、抗炎、抗过敏等多种生物活性及药理作用，槲皮素及其衍生物在医药、食品、化妆品等领域具有广泛的应用前景。但是，由于槲皮素几乎不溶于水，脂溶性也很差，限制了其通过生物膜的吸收，使其口服生物利用度较低。因此目前改善槲皮素的口服吸收是扩大槲皮素临床应用，使其进一步规模化生产的瓶颈。

固体脂质纳米粒(solid lipid nanoparticles，SLN)是20世纪90年代发展起来的一种粒径约为10～1000nm的新型纳米粒给药***。其以固态类脂化合物(天然或合成)为载体，将药物包裹于类脂核中制成固态胶粒，因其在制备时使用的载体材料在室温下是固体，使得其既具有聚合物纳米球和纳米囊的物理稳定性高、药物泄漏少、具有缓释性和靶向性、可以灭菌等特点，又兼有脂质体毒性低、易于大规模生产的优点。高温乳化-低温固化法即将药物与脂质、乳化剂溶于有机溶剂中构成油相，将助乳化剂溶于水中构成水相，加热至同温，在机械搅拌下将油相倾入初水相中，继续搅拌将有机溶剂蒸发，所得混合物快速分散于另外的低温水相中，搅拌即得。

(三)发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种槲皮素固体脂质纳米粒制剂及其制备方法。

本发明的槲皮素固体脂质纳米粒制剂，以槲皮素作为原料药，采用固体脂质、乳化剂以及助乳化剂组成的混合物作为药物载体，各组份如下：

槲皮素20～30mg，固体脂质100～250mg，乳化剂100～200mg，含1800～3000mg亲水性助乳化剂的25％～35％乙醇溶液或蒸馏水50～60ml。

上述的固体脂质选自下列之一或它们的组合：单硬脂酸甘油酯、双硬脂酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、山榆酸甘油酯、二十二酸单、双、三甘油酯的混合物、三肉豆蔻酸甘油酯、硬脂酸、棕榈酸、癸酸、胆固醇、石蜡、鲸蜡醇十六三酯、枸椽酸甘油酯。

上述的乳化剂选自下列之一或它们的组合：大豆磷脂、蛋黄磷脂、卵磷脂、泊洛沙姆188、泊洛沙姆182、泊洛沙姆407、泊洛沙姆908、泰洛沙姆、胆酸钠、甘胆酸钠、牛黄胆酸钠、去氧牛黄胆酸钠、十二烷基硫酸钠、十八烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、聚乙二醇类。

上述的助乳化剂选自下列之一或它们的组合：乙醇、聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯65、聚山梨酯80、聚山梨酯85、异丙醇、1，2-丙二醇、正丁醇、正辛醇、正庚醇、丙三醇、丁酸、聚氧乙烯(400)单月桂酸酯、聚氧乙烯(400)单硬脂酸酯、聚乙二醇400。

本发明的槲皮素固体脂质纳米粒制剂的制备方法如下：

将槲皮素、固体脂质和乳化剂溶于有机溶剂中构成油相，加入到同温的含有助乳化剂的初水相中乳化，再将其加入到含助乳化剂的低温水相中沉淀，即得槲皮素固体脂质纳米粒混悬液。

如将上述槲皮素固体脂质纳米粒混悬液进行微孔滤膜过滤后，再加入冻干保护剂冻干即得冻干制剂。

本发明中槲皮素固体脂质纳米粒制剂的制备方法所使用的有机溶剂选自下列之一或它们的组合：乙酸乙酯、丙酮、氯仿、二氯甲烷、甲醇。

槲皮素固体脂质纳米粒制剂的制备方法更为详细的步骤如下：

1、称取槲皮素、固体脂质加至有机溶剂中，溶解构成油相A。

2、量取25％～35％乙醇溶液或蒸馏水适量，加入助乳化剂构成初水相B。

3、另取25％～35％乙醇溶液或蒸馏水适量，加入同种助乳化剂，构成水相C，冷藏待用。

4、将上述油相A和初水相B水浴加热至70～80℃，在A完全溶解为澄明液体后，搅拌下将A倾入B中，恒温搅拌50～80分钟，使有机溶剂完全挥发，得淡黄色乳剂D。

5、将淡黄色乳剂D倾入步骤3的水相C(置冰浴)中，冰浴条件下搅拌50～80分钟，得乳光明显的淡黄色混悬液E。

6、将淡黄色混悬液E用同水相C相同体系的溶液定容至50ml，即得槲皮素固体脂质纳米粒混悬液。

制备冻干制剂，继续如下步骤：

7、将上述槲皮素固体脂质纳米粒混悬液进行微孔滤膜过滤后，再加入冻干保护剂冻干即得冻干制剂。冻干保护剂可任选，如甘露醇。

为了改善槲皮素的口服吸收，提高其的生物利用度，本发明选择固体脂质、乳化剂以及助乳化剂组成的混合物作为药物载体。所采用的固体脂质、乳化剂、助乳化剂和冻干保护剂均为药剂学上广泛应用的药剂辅料，具有无毒、无刺激性、生物相容性好的的特性。但是由于固体脂质纳米粒特别适于脂溶性较好的药物的制备，而槲皮素属难溶性药物，很难与水溶性或脂溶性的辅料相容，因此制备起来有一定难度。为了能得到较满意的结果，本发明选择的有机溶剂多为溶解性能不同的两种或两种以上溶剂组成的混合溶剂，并在其中加入对槲皮素具有促溶作用的乳化剂，这样既可以提高槲皮素在油相中的溶解度，又使油相与水相有一定的互溶性，有利于制备含药量高的初乳。同时，本发明在水相中也加入了对槲皮素具有一定溶解性能的一种或多种乳化剂或助乳化剂。在形成固体脂质纳米粒的过程中，由于槲皮素的性质使得其易聚集于纳米粒的表面，这时，水相中的乳化剂和助乳化剂能够在纳米粒的表面形成一层乳化膜，将槲皮素包绕其中，阻止药物的析出，使得制备的固体脂质纳米粒具有独特的药物保护作用及控制释放特性。通过处方筛选和优化，当各种辅料配比适当时，以高温乳化-低温固化法能制得较为理想的槲皮素固体脂质纳米粒，包封率为45％～50％，粒径在10～300nm之间，此大小的微粒极易在胃肠道吸收，而且纳米颗粒具有的粘着性可以显著提高药物的生物利用度，增加药物的吸收并减少其不规则吸收。

大鼠在体小肠吸收试验：将50ml恒温(37±0.5)℃的供试液加入循环装置的烧杯中，供试液(1)：Krobs-Ringer试液配制的槲皮素表面活性剂胶束溶液(含槲皮素40mg)100ml+2mg酚红，供试液(2)：Krobs-Ringer试液配制的槲皮素固体脂质纳米粒混悬液(含槲皮素40mg)100ml+2mg酚红。将禁食一夜的雄性大鼠麻醉后，打开腹腔，自十二指肠上部及结肠下部各***直径0.5cm的玻璃插管，扎紧，用37℃生理盐水冲净肠内容物，将插管接上蠕动泵，使供试液在肠道中进行循环，定时去样并补加酚红溶液(每ml Krobs-Ringer试液含酚红20μg)。测定样液中槲皮素的含量，计算槲皮素的吸收量。结果表明：槲皮素表面活性剂胶束溶液小肠吸收量为(27.4±2.8)％，槲皮素固体脂质纳米粒混悬液(处方如实施例4)小肠吸收量为(58.7±1.3)％，固体脂质纳米粒的吸收明显优于胶束溶液。

槲皮素固体脂质纳米粒混悬液制备简单，将其通过一定大小粒径的微孔滤膜过滤后，加入冻干保护剂，冷冻干燥，可使纳米粒在载体材料中均匀分散，大大提高了制剂的稳定性，能够更好的促进药物的溶解与吸收。

(四)附图说明

图1是本发明实施例4的槲皮素固体脂质纳米粒电镜照片，放大36000倍。

(五)具体实施方式

实施例1：

精密称取槲皮素20mg，硬脂酸200mg，卵磷脂100mg，加至20ml 1∶1配比的氯仿与丙酮的混合溶剂中，溶解构成油相A。量取20ml 30％乙醇溶液，加入0.8g泊洛沙姆188构成体系B。另取30ml 30％的乙醇溶液，加入1.2g泊洛沙姆188构成水相C，冷藏待用。A、B水浴加热至70℃，在A完全溶解为澄明液体后，搅拌下将A倾入B中，恒温搅拌1h，使有机溶剂完全挥发，得淡黄色乳剂D。将D倾入C(置冰浴)中，冰浴条件下搅拌1h，得乳光明显的淡黄色混悬液E，将E用同C相同体系的溶液定容至50ml，即得槲皮素固体脂质纳米粒混悬液。

实施例2：

精密称取槲皮素30mg，硬脂酸200mg，胆酸钠100mg，加20ml 1∶1配比的氯仿与乙醇的混合溶剂中，溶解构成油相A。量取20ml蒸馏水，加入聚山梨酯80 1g构成体系B。另取30ml蒸馏水，加入聚山梨酯802g，构成水相C，冷藏待用。A、B水浴加热至70℃，在A完全溶解为澄明液体后，搅拌下将A倾入B中，恒温搅拌1h，使有机溶剂完全挥发，得淡黄色乳剂D。将D倾入C(置冰浴)中，冰浴条件下搅拌1h，得乳光明显的淡黄色混悬液E，将E用同C相同体系的溶液定容至50ml，即得槲皮素固体脂质纳米粒混悬液。

实施例3：

精密称取槲皮素20mg，单硬脂酸甘油酯100mg，大豆磷脂200mg，加至20ml 1∶1配比的氯仿与甲醇的混合溶剂中，溶解构成油相A。量取20ml 25％乙醇溶液，加入泊洛沙姆1880.8g构成体系B。另取30ml20％的乙醇溶液，加入泊洛沙姆188 1.6g，构成水相C，冷藏待用。A、B水浴加热至90℃，在A完全溶解为澄明液体后，搅拌下将A倾入B中，恒温搅拌1h，使有机溶剂完全挥发，得淡黄色乳剂D。将D倾入C(置冰浴)中，冰浴条件下搅拌1h，得乳光明显的淡黄色混悬液E，将E用同C相同体系的溶液定容至50ml，即得槲皮素固体脂质纳米粒混悬液。

实施例4：

精密称取槲皮素20mg，硬脂酸150mg，卵磷脂200mg，加至20ml 1∶1配比的氯仿与丙酮的混合溶剂中，溶解构成油相A。量取20ml 35％乙醇溶液，加入聚山梨酯80 0.6g构成体系B。另取30ml 35％的乙醇溶液，加入聚山梨酯80 1.2g，构成水相C，冷藏待用。A、B水浴加热至75～80℃，在A完全溶解为澄明液体后，搅拌下将A倾入B中，恒温搅拌1h，使有机溶剂完全挥发，得淡黄色乳剂D。将D倾入C(置冰浴)中，冰浴条件下搅拌1h，得乳光明显的淡黄色混悬液E，将E用同C相同体系的溶液定容至50ml，即得槲皮素固体脂质纳米粒混悬液。

取上述制得的混悬液适量，0.8μm微孔滤膜过滤，按1份加入40份甘露醇的比例，溶解后冻干，制成冻干粉。

取混悬液适量，滴加于铜网上，用2％磷钨酸溶液(pH4.47)进行负染，自然干燥后在透射电镜(TEM)下观察，为圆整的类球形实体粒子，表面光滑，粒径在10～300nm之间，平均粒径为217.3nm。根据粒子的大小与形态可以判定该制剂为固体脂质纳米粒。

Claims

1、槲皮素固体脂质纳米粒制剂，其特征在于，以槲皮素作为原料药，采用固体脂质、乳化剂以及助乳化剂组成的混合物作为药物载体，各组份如下：

2、如权利要求1所述的槲皮素固体脂质纳米粒制剂，其特征在于，所述的固体脂质选自下列之一或它们的组合：单硬脂酸甘油酯、双硬脂酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、山榆酸甘油酯、二十二酸单、双、三甘油酯的混合物、三肉豆蔻酸甘油酯、硬脂酸、棕榈酸、癸酸、胆固醇、石蜡、鲸蜡醇十六三酯、枸椽酸甘油酯。

3、如权利要求1所述的槲皮素固体脂质纳米粒制剂，其特征在于，所述的乳化剂选自下列之一或它们的组合：大豆磷脂、蛋黄磷脂、卵磷脂、泊洛沙姆188、泊洛沙姆182、泊洛沙姆407、泊洛沙姆908、泰洛沙姆、胆酸钠、甘胆酸钠、牛黄胆酸钠、去氧牛黄胆酸钠、十二烷基硫酸钠、十八烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、聚乙二醇类。

4、如权利要求1所述的槲皮素固体脂质纳米粒制剂，其特征在于，所述的助乳化剂选自下列之一或它们的组合：乙醇、聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯65、聚山梨酯80、聚山梨酯85、异丙醇、1，2-丙二醇、正丁醇、正辛醇、正庚醇、丙三醇、丁酸、聚氧乙烯400单月桂酸酯、聚氧乙烯400单硬脂酸酯、聚乙二醇400。

5、权利要求1槲皮素固体脂质纳米粒制剂的制备方法，将槲皮素、固体脂质和乳化剂溶于有机溶剂中构成油相，加入到同温的含有助乳化剂的初水相中乳化，再将其加入到含助乳化剂的低温水相中沉淀，即得槲皮素固体脂质纳米粒混悬液。

6、如权利要求5所述的槲皮素固体脂质纳米粒制剂的制备方法，其特征在于将所得槲皮素固体脂质纳米粒混悬液进行微孔滤膜过滤后，再加入冻干保护剂冻干即得冻干制剂。

7、如权利要求5所述的槲皮素固体脂质纳米粒制剂的制备方法，其特征在于所述的有机溶剂选自下列之一或它们的组合：乙酸乙酯、丙酮、氯仿、二氯甲烷、甲醇。

8、如权利要求5所述的槲皮素固体脂质纳米粒制剂的制备方法，其特征在于具体操作步骤如下：

(1)称取槲皮素、固体脂质加至有机溶剂中，溶解构成油相A，

(2)量取25％～35％乙醇溶液或蒸馏水适量，加入助乳化剂初水相B，

(3)另取25％～35％乙醇溶液或蒸馏水适量，加入同种助乳化剂，构成水相C，冷藏待用，

(4)将上述油相A和初水相B水浴加热至70～80℃，在A完全溶解为澄明液体后，搅拌下将A倾入B中，恒温搅拌50～80分钟，使有机溶剂完全挥发，得淡黄色乳剂D，

(5)将淡黄色乳剂D倾入步骤3的水相C中，冰浴条件下搅拌50～80分钟，得乳光明显的淡黄色混悬液E，

(6)将淡黄色混悬液E用同水相C相同体系的溶液定容至50ml，即得槲皮素固体脂质纳米粒混悬液。