CN1846775A - 中药肉豆蔻及其提取物的制药新用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及中药肉豆蔻及其提取物在制药领域中的新用途，具体的是中药肉豆蔻及其提取物在制备5α－还原酶抑制剂、***增生治疗药物中的用途，具有疗效显著、价格低廉、使用方便的特点。
Description
技术领域
本发明涉及中药肉豆蔻的新用途，具体的说，是在制备5α-还原酶抑制剂和制备治疗***增生治疗药物中的应用，属于中药领域。
背景技术
良性***增生症(BPH)即***肥大，是老年男性常见疾病，以***增生所致的静力性梗阻和***平滑肌张力增加所致的动力性梗阻为特征，临床表现为膀胱尿液流出阻塞、尿急、尿频、尿液残留，常导致尿道感染甚至诱发肾炎，其发病率随年龄递增，近年来发病数也明显增加，严重地影响患者的体力活动和社交能力，从而影响其生活质量。BPH大多采用手术治疗效果良好，但手术对于老年病人并非毫无危险，BPH手术是一种创伤性和破坏性操作，有死亡危险性，因此以寻求药物治疗以避免手术的风险，而且，随着对***增生症发病机理认识的不断完善，药物已经成为BPH治疗的重要手段。
目前虽然BPH发生的确切机理还没有完全阐明，但5-α还原酶与BHP发生的关系已被广泛接受。5-α还原酶的作用是使睾酮(T)代谢为二氢睾酮(DHT)，与BPH的发生有关。同时研究表明：5α-还原酶是皮肤雄激素代谢的关键酶，近年来发现多种皮肤病与雄激素代谢异常有关，一些5α-还原酶抑制剂已用于雄激素源性脱发以及其他雄激素相关性皮肤病，如痤疮、多毛症等(尹兴平，夏隆庆.5a-还原酶在雄激素代谢中的作用及其抑制剂在皮肤科的应用.国外医学·皮肤性病学分册，2004，30(6)：375～377)。DHT是***雄性激素的活性形式，为***分化、生长发育所必需。但在老年期，***组织保持很高的5-α还原酶活性，使DHT含量升高，因此认为是导致***增生的重要因素。这一学说已经通过一种5-α还原酶抑制剂非那雄胺的研究而得到证实。非那雄胺与5α-还原酶竞争性结合而减少睾酮与5α-还原酶结合，阻断睾酮向DHT转化，使血浆DHT和***内DHT迅速下降，最终使***缩小，并增加尿流率，改善梗阻症状，减少BPH的并发症。近年来，植物来源的药物显示治疗BPH的良好前景，如蓝棕果提取物以及花粉提取物(舍尼通)，均具有抑制5α-还原酶的作用。
肉豆蔻系肉豆蔻科高大常绿乔木植物肉豆蔻Myristica fragrans Houtt的成熟种仁。原产马鲁古群岛，我国台湾、云南、广东引种栽培。据《本草经疏》记载：“肉豆蔻辛味能散能消，温气能和中通畅，其气芬芳，香气先入脾，脾主消化，温和而辛香，故开胃，胃喜暖也。《中药学》认为：肉豆蔻辛、温归脾、胃、大肠经，有涩肠止泻，温中行气的功效，主要用于脾胃虚寒久泻，胃寒胀痛及食少呕吐。现代研究表明肉豆蔻含挥发油、脂肪油、淀粉、蛋白质及没食子酸类的鞣酸性成分。挥发油中含肉豆蔻醚、黄樟醚、榄香脂素、甲基甲香酚及多种萜烯类化合物等。其主要药理作用为：抗微生物、抗氧化、麻醉、镇静以及致幻作用(《中药学》，张廷模主编，北京，高等教育出版社，2002，1)。但迄今尚未见肉豆蔻抑制5α-还原酶、预防或治疗良性***增生以及相关疾病的报道。
发明内容
本发明的技术方案是提供了中药肉豆蔻及其提取物的新用途。本发明还提供了含有肉豆蔻原生药或提取物为活性成分的药物组合物及其制备方法和用途。
本发明提供了中药肉豆蔻在制备5α-还原酶抑制剂药物中的应用和中药肉豆蔻在制备治疗***增生药物中的应用。
所述的中药肉豆蔻来自于肉豆蔻科高大常绿乔木植物肉豆蔻Myristica fragransHoutt的成熟种仁。
所述的肉豆蔻为肉豆蔻原生药粉或水/有机溶剂提取物。
本发明还提供了一种用于制备5α-还原酶抑制剂药物的药物组合物，它是由所述的肉豆蔻原生药粉或其水/有机溶剂提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
其中，所述的肉豆蔻有机溶剂提取物为甲醇、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、***、石油醚等有机溶剂中的一种或任意两种或者多种溶剂以任意比例组成的混合溶剂的提取物。
以上述中药肉豆蔻或其提取物，与药学上可接受的辅助添加剂成分混合后，按相应的常规药物制剂方法，可以制备5α-还原酶抑制剂、预防和/或治疗***增生的药物。例如，与在口服制剂中可以被接受的崩解剂、赋形剂、润滑剂、粘合剂、填充剂等常用辅助添加成分混合后，按常规的操作方法和过程，可以制成为片剂、丸剂、胶囊剂或多种相应的缓释剂、控释剂等固体口服制剂形式的药物；与常规的增溶剂、乳化剂、润饰剂、起泡或消泡剂等表面活性剂、稀释剂、防腐剂、稳定剂、矫味剂、增稠剂等混合后，按相应的常规方法，可以制备成为水剂、糖浆、口服液等液体制剂形式的口服药物；与常规的悬浮剂、稳定剂、分散剂或调节溶液渗透压的试剂混合，按相应的常规方法，配置成注射液。
进一步的，本发明提供了该药物组合物的制备方法，其中肉豆蔻提取物的制备包括以下步骤：
a)肉豆蔻用水或30～95％的乙醇回流提取1～3次，溶媒量分别为6～8倍，提取时间为1～3小时，合并提取液，浓缩干燥得样品A；
b)A溶于水，用石油醚、***、乙酸乙酯或正丁醇萃取，减压回收溶剂得水提取物和相应的有机溶剂提取物。
本发明还提供了该药物组合物在制备5α-还原酶抑制剂药物中的应用。
本发明还提供了该药物组合物在制备治疗***增生药物中的应用。
按照本发明，可以将上述含有中药肉豆蔻或其提取物，或中药肉豆蔻及其提取物与其它具有预防和/或治疗***增生作用的西药或中药活性成分配伍组成的复方制剂，按照常规的制剂技术，制备成口服制剂或注射剂。
本发明从中药肉豆蔻中提取得到肉豆蔻提取物，试验证明其具有抑制5α-还原酶活性的作用，对雄性大鼠的***增生具有明显的治疗作用。可用于制备5α-还原酶抑制剂、治疗和/或预防***增生的药物制剂，如口服制剂或注射剂。具有疗效显著、价格低廉、服用方便的特点。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以作出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
实施例1肉豆蔻原生药粉的胶囊的制备
取中药肉豆蔻Myristica fragrans Houtt的干燥成熟种仁，按常规方法粉碎，过筛，制成粒度为60～80目的肉豆蔻细粉，细粉装入胶囊，灭菌，分装即成。
实施例2肉豆蔻提取物的制备
称取肉豆蔻1000g，用90％乙醇回流提取三次，溶媒量分别为8倍、6倍、6倍，提取时间分别为2小时、1小时、1小时。合并提取液，回收至无醇味。50℃减压干燥得样品A。称取样品A 50g，用150ml蒸馏水溶解。水溶液分别用3倍体积的石油醚、***、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收溶剂得样品B(石油醚相)、C(***相)、D(乙酸乙酯相)、E(正丁醇相)、F(水相)。
实施例3片剂的制备
片剂的组成：肉豆蔻提取物A 0.5g
HPMCLV100 30g
乳糖 69g
硬脂酸镁 0.5g
共 100g
将肉豆蔻提取物A、HPMCLV100、乳糖混匀，以75％乙醇为粘合剂制湿颗粒，过22目筛，50℃干燥3小时，22目筛整粒，加入硬脂酸镁混匀压片，制成1000片，每片0.1g。口服，一日3次，每次2片。
实施例4胶囊剂的制备
胶囊组成：肉豆蔻提取物B 0.5g
淀粉 99g
硬脂酸镁 0.5g
共 100g
将肉豆蔻提取物B、淀粉、硬脂酸镁混匀，装胶囊，共1000粒，每粒0.1g。口服，一日3次，每次2粒。
实施例5注射剂的制备
注射液组成：肉豆蔻提取物C 0.5g
吐温80 10ml
氯化钠 8g
肉豆蔻提取物C，加入10％碳酸钠调PH值至7.0～7.5，冷藏过滤，加入吐温80，加注射用水至1000ml，滤过，分装，灌封，100℃流通蒸汽灭菌，30min即得。
实施例6复方片剂或胶囊的制备
用肉豆蔻提取物制备复方制剂，取肉豆蔻提取物D 0.5g，姜黄提取物200g，按常规方法，加入辅料，制成片剂或胶囊。每片或粒200mg，用于患者，口服，一日3次，每次1片或1粒，一月为一疗程。
以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。
试验例1肉豆蔻提取物对***癌细胞5α-还原酶活性的抑制作用
***癌细胞(DU145，表达5α-还原酶)按常规方法维持培养在含10％小牛血清，100ug/ml链霉素，100U/ml青霉素的1640培养基中，次日以2×104/孔接种于24孔板中，37℃5％CO2饱和湿度培养箱中培养24小时，换新鲜培养基，每孔加入0.1mM睾酮并分别加入待测样品，以蓝棕果(Sabalberry extract，德国马博士大药厂)为阳性对照药物，继续培养2小时，收集细胞培养上清，用EIA试剂盒定量检测二氢睾酮，测定450nm条件下的吸光值，根据标准测定值计算二氢睾酮量，以此确定睾酮的转换以及样品对睾酮转换的抑制，结果见表1：
表1肉豆蔻对***癌细胞中睾酮转换的抑制作用(样品浓度：100μg/ml)
| 样品名称 | DHT(pg/ml) | 样品名称 | DHT(pg/ml) |
| 细胞对照细胞+睾酮蓝棕果AB | 71987.38276.03431.93383.27 | CDEF | 179.32464.29449.31479.45 |
表1结果显示，细胞+睾酮组DHT浓度较细胞对照组显著升高，各药物组DHT浓度均较细胞+睾酮组明显降低，表明肉豆蔻提取物A、B、C、D、E、F均有抑制***癌细胞5α-还原酶活性的作用，其中肉豆蔻提取物C对5α-还原酶抑制作用最强，作用强于对照药物蓝棕果。
试验例2肉豆蔻提取物对大鼠***组织5α-还原酶活性的抑制作用
取大鼠***组织，加入匀浆缓冲液(1∶5体积)，匀浆缓冲液的组成为：0.88M蔗糖，1.5mM CaCl2，组织匀浆液经高速离心(10000×g，15min，4℃)，取上清与待测样品或阳性药物(非那雄胺：Merck Sharp & Dohme(U.K)Ltd生产，规格：5mg×10粒/盒，批号：235820)反应10分钟，加入0.05mM睾酮、0.02mM NADPH，在450nm条件下测定吸光值，并计算抑制率：抑制率(％)＝(A0-A1)/A0×100，结果见表2：
表2肉豆蔻对***组织5α-还原酶活性的抑制作用(样品浓度：100μg/ml)
| 样品名称 | 抑制率(％) | 样品名称 | 抑制率(％) |
| 细胞对照匀浆液+睾酮非那雄胺AB | --1006780.75 | CDEF | 93.7263.2469.3169.45 |
表2结果显示，各药物组对***组织5α-还原酶活性均表现出抑制作用，表明肉豆蔻提取物A、B、C、D、E、F均有抑制***组织5α-还原酶活性的作用，其中肉豆蔻提取物C对5α-还原酶抑制作用最强，抑制率达到93.72％，作用略弱于对照药物非那雄胺(100％抑制)。
试验例3肉豆蔻提取物C治疗大鼠***增生的作用
选取正常雄性SD大鼠56只，随机分为七组，每组8只，即正常组(灌胃给予等体积生理盐水)，去势组(摘除双侧睾丸)，去势+睾酮组(摘除双侧睾丸，注射丙酸***2mg/kg)，肉豆蔻高、中、低剂量组(去势+睾酮并灌胃给予肉豆蔻C提取物)，阳性药物组(去势+睾酮并灌胃给予舍尼通(10片×1板/盒，每片含水溶性花粉提取物P5 70mg，脂溶性花粉提取物EA10 4mg，南京美瑞制药有限公司生产))。给药45天后眼眶后静脉丛取血，分离血清测定DHT浓度，检测方法及计算参照EIA试剂盒说明进行；取血后脱颈处死大鼠，剥离***周围组织，取出***腹叶，称取湿重后放置低温匀浆，离心收集上清，检测组织中的DHT和T浓度，检测方法及计算参照EIA试剂盒说明进行，结果见表3。
表3肉豆蔻提取物C对***增生大鼠血清、组织DHT水平的影响(n＝8，X±SD)
| 组别 | 剂量mg/kg | 血清DHT(pg/ml) | 组织T(ng/ml) | 组织DHT(pg/ml) | ***湿重(mg) |
| 正常去势去势+睾酮舍尼通肉豆蔻高肉豆蔻中肉豆蔻低 | --2100400200100 | 1057.32±389.92218.26±258.35*1352.17±107.12673.24±203.31*632.21±149.34*715.82±229.37889.63±313.45 | 102.73±32.410.83±0.16*26.56±15.3233.65±22.0426.76±6.8437.93±11.8838.24±13.08 | 1043.90±279.872.45±1.41***961.44±158.67474.24±151.03**432.76±132.58**534.47±154.57*632.75±191.77 | 587.43±151.3918.23±8.91**933.72±301.75512.44±107.83*477.35±124.87*573.54±104.05*759.00±228.79 |
注：与去势+睾酮组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
表3结果显示，与去势+睾酮组比较，肉豆蔻提取物C各剂量组均有降低血清DHT、组织DHT和***湿重的作用趋势，且作用强度随浓度的增加而增强；其中高剂量组有显著降低血清DHT(P＜0.05)、组织DHT(P＜0.01)和***湿重(P＜0.05)作用，其作用强度与舍尼通相近；中剂量组对组织DHT和***湿重有显著的降低作用(P＜0.05)。
上述药效学试验，虽然是实施例2制备的肉豆蔻提取物C的药效试验，但不同剂量组给药试验结果表明了本发明药物提取物治疗***增生的量效关系，说明本发明药物具有明显的治疗***增生的作用，且其作用随给药剂量的增加而增强，可用于制备治疗和/或预防***增生的药物制剂，疗效显著，且质量稳定，可控性强。
Claims (10)
1、中药肉豆蔻在制备5α-还原酶抑制剂药物中的用途。
2、根据权利要求1所述的中药肉豆蔻在制备5α-还原酶抑制剂药物中的用途，其特征在于：所述5α-还原酶抑制剂药物是治疗***增生的药物。
3、根据权利要求1或2所述的用途，所述的中药肉豆蔻为肉豆蔻科高大常绿乔木植物肉豆蔻Myristica fragrans Houtt.的成熟种仁。
4、根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述的中药肉豆蔻为肉豆蔻原生药粉或肉豆蔻的水或有机溶剂提取物。
5、一种用于制备5α-还原酶抑制剂的药物组合物，它由肉豆蔻原生药粉或其水/有机溶剂提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成的制剂。
6、根据权利要求5所述的用于制备5α-还原酶抑制剂的药物组合物，其特征在于：所述的肉豆蔻有机溶剂提取物为甲醇、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、***、石油醚等有机溶剂中的一种或多种溶剂组成的混合溶剂的提取物。
7、根据权利要求5所述的制备5α-还原酶抑制剂的药物组合物，其特征在于：所述的制剂是口服制剂或注射剂。
8、一种制备权利要求5所述的药物组合物的方法，其中肉豆蔻提取物的制备包括以下步骤：
a)肉豆蔻用水或30～95％的乙醇回流提取，溶媒量为6～8倍，提取时间为1～3小时，合并提取液，浓缩干燥得样品A；
b)将A溶于水，用石油醚、***、乙酸乙酯或正丁醇萃取，减压回收溶剂得水提取物和相应的有机溶剂提取物。
9、权利要求5～8任一项所述的药物组合物在制备5α-还原酶抑制剂药物中的用途。
10、权利要求5～8任一项所述的药物组合物在制备治疗***增生药物中的用途。
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