CN1671391A - 用于缓解疼痛的新方法及组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种长期缓解受治疗者慢性疼痛的方法，包括在至少三天时间无α－2A受体激活作用的情况下，激活受治疗者的止痛α肾上腺素能受体，从而在无持续的受体激活作用的情况下，维持慢性疼痛的缓解。止痛α肾上腺素能受体可为，例如，α－2B受体。

Description

用于缓解疼痛的新方法及组合物
                         发明背景
                         发明领域
本发明总体涉及疼痛的治疗以及慢性疼痛的长效缓解，具体而言，涉及α肾上腺素能激动剂和α-2A肾上腺素能受体的选择性拮抗剂。
                         背景信息
临床疼痛包括伤害性疼痛和神经性疼痛。各类疼痛的特征是损伤部位及相邻组织的超敏性。虽然伤害性疼痛通常持续时间有限，并且对已有的类***物质的治疗有良好的响应，但神经性疼痛可在引发症治愈后持续很长时间，明显的实例例如截肢后常伴随着“剧痛”。诸如慢性神经痛的慢性疼痛综合症由任何大量的身体损伤引起，包括外科手术、压迫性损伤或外伤、感染性因子、毒药、炎症或代谢病如糖尿病或局部缺血。
不幸的是，诸如慢性神经痛的慢性疼痛通常对已有的药物治疗有抵抗作用。并且，现有的治疗有严重的副作用如认知改变、镇静作用、反胃以及对***的依存症。很多神经痛和其它慢性疼痛病的患者由于年龄大或有其它病症而限制了他们对已有的止痛药治疗所伴随的副作用的耐受。在不产生过度副作用的情况下，现有治疗无法充分缓解神经痛，显而易见的事实是慢性疼痛患者通常意志消沉，有***倾向。
α-2肾上腺素能激动剂，由于不存在呼吸抑制作用和潜在的依存症，正开发成为现有止痛药的另一种选择。该药物在脊柱给药时是有效的镇痛剂。然而，α肾上腺素能激动剂的不良药理性能，特别是镇静作用和低血压，限制了其在口服或其他外周途径中的使用。因此，需要一种有效的镇痛剂，可口服或以其他外周途径给药，并且没有诸如镇静和低血压一类的不良副作用。本发明实现了这一需要并同时提供了所述优点。
本发明还提供一种新的治疗慢性疼痛患者的方法，这些患者到现在一直面临着终身的日常药物治疗以控制他们的疼痛。不幸的是，已有的慢性神经痛的治疗，如三环类抗抑郁药物、抗突发性疾病(anti-seizure)的药物以及局部麻醉注射剂，仅临时缓解症状，且作用不一。目前还没有可用的治疗方法可以逆转过敏性疼痛状况或治愈诸如神经痛等疼痛。目前也没有有效的药物可以做到一个月给药例如一次或几次，其镇痛疗效可以维持数周或数月。因此，人们期望有一种长期缓解慢性疼痛的新方法。本发明实现了这一需要并同时提供了所述优点。
                         发明内容
本发明提供一种通过给药包括有效量的α肾上腺素能激动剂的药用组合物和包括有效量的选择性α-2A拮抗剂的药用组合物以缓解受治疗者疼痛的方法。本发明方法可用于缓解多种疼痛，包括但不限于神经痛如糖尿病神经病变引起的疼痛、内脏疼痛、手术后疼痛、癌症或癌症治疗引起的疼痛、由诸如关节炎或肠道激惹综合征引起的炎症疼痛、头痛和肌肉痛。
多种α肾上腺素能激动剂均可用于本发明，包括pan-α-2激动剂和pan-α-1 pan-α-2激动剂。根据本发明方法，可用于缓解疼痛的α肾上腺素能激动剂包括但不限于可乐定、溴莫尼定、替扎尼定、dexemedetomidine、去甲肾上腺素(norepinephrine)、“化合物1”和“化合物2”，及其所有的可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。
多种选择性α-2A拮抗剂也可用于本发明。所述选择性α-2A拮抗剂包括但不限于4-咪唑(例如“化合物13”)及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物，以及BRL48962或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。在一例实施方案中，本发明的实施采用外周受限(peripherally limited)的选择性α-2A拮抗剂。
根据本发明方法，有多种给药途径对缓解疼痛有效。在一例实施方案中，α肾上腺素能激动剂和选择性α-2A拮抗剂均为外周途径给药。在其它实施方案中，α肾上腺素能激动剂为口服或通过皮下微型泵给药。在另外的实施方案中，α肾上腺素能激动剂为口服或通过皮下微型泵给药，而选择性α-2 A拮抗剂通过任何外周途径给药。但在其它实施方案中，选择性α-2A拮抗剂为口服或通过皮下微型泵给药。如果需要，选择性α-2A拮抗剂可口服或通过皮下微型泵给药，而α肾上腺素能激动剂可通过任何外周途径给药，如口服或通过皮下微型泵。
在一例实施方案中，本发明提供一种通过给药包括有效量的α肾上腺素能激动剂的药用组合物和包括有效量的选择性α-2A拮抗剂的药用组合物以缓解受治疗者疼痛的方法，其中α肾上腺素能激动剂和选择性α-2A拮抗剂均重复或连续给药至少三天。在所述方法中，疼痛的缓解可持续到，例如受治疗者的α肾上腺素能激动剂水平不显著。
本发明还提供一种包括具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的止痛组合物，所述组合物能够产生无伴随镇静作用的外周止痛。在一例实施方案中，止痛组合物产生无伴随镇静作用的外周止痛并且基本没有低血压作用。在另一例实施方案中，本发明提供的一种止痛组合物产生将疼痛降低至少50％的无伴随镇静作用的外周止痛。在另外的实施方案中，需要给药比将疼痛降低至少50％的止痛组合物剂量大至少10倍、100倍或1000倍的止痛组合物以将运动神经或肌肉活性减少20％。在其它实施方案中，本发明提供的一种止痛组合物产生将疼痛降低至少50％的无伴随镇静作用的外周止痛并且基本没有低血压作用。在另一例实施方案中，本发明提供一种包括具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的止痛组合物，所述组合物能够产生无伴随镇静作用的外周止痛，其中激动剂不是硫脲或其衍生物。在另一例实施方案中，本发明提供一种包括具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的止痛组合物，所述组合物能够产生无伴随镇静作用的外周止痛，其中激动剂不是硫脲或4-咪唑或其衍生物。
本发明还提供一种缓解受治疗者疼痛的方法，该方法通过外周给药包括有效量的具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的药用组合物，从而产生无伴随镇静作用的外周止痛。所述外周止痛可将疼痛降低，例如至少50％，并且不伴有镇静作用。在另一例实施方案中，外周止痛发生在基本无低血压作用的情况下。在一例实施方案中，所述方法采用具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂实施，激动剂不为硫脲或其衍生物。在另一例实施方案中，所述方法采用具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂实施，激动剂不为硫脲或4-咪唑或其衍生物。各种类型和病因的疼痛可通过本发明方法缓解。作为非限制性实例，本发明方法可有效缓解神经疼、例如糖尿病神经病变引起的疼痛、内脏疼痛、手术后疼痛、癌症或癌症治疗引起的疼痛、由诸如关节炎或肠道激惹综合征引起的炎症疼痛、头痛和肌肉痛。
多种具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂可用于本发明方法。在一例实施方案中，具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂是具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂。所述激动剂可为，例如硫酮，如“化合物3”或“化合物11”或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。在一例实施方案中，本发明方法采用具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂实施，该激动剂是“化合物3”或其可药用的盐或酯的(-)对映异构体。
可用于本发明的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂还包括，但不限于咪唑啉酮。可用的具有最低限度α-2A激动剂活性的咪唑啉酮α-2B激动剂可为，例如“化合物4”或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。在一例实施方案中，具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是“化合物4”或其可药用的盐、酯或酰胺的(+)对映异构体。在另外的实施方案中，本发明方法采用下述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂之一实施：“化合物5”、“化合物6”、“化合物7”、“化合物8”、“化合物9”或“化合物14”或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂可通过多种途径外周给药，包括但不限于口服或通过皮下微型泵给药。
本发明还提供一种筛选具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂的方法，其步骤为：将α-2A受体与具有止痛活性的α肾上腺素能激动剂接触；以及确定激动剂是否具有α-2A激动剂活性，其中无α-2A激动剂活性表明具有止痛活性的α肾上腺素能激动剂是具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂。
这里还提供一种筛选具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂的方法，其步骤为：将α-2A受体与试剂接触；确定该试剂是否具有α-2A激动剂活性；将α-2B受体与该试剂相接触；以及确定该试剂是否具有α-2B激动剂活性，其中无α-2A激动剂活性，同时存在有α-2B激动剂活性，表明试剂是具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂。
本发明还提供一种筛选具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂的方法，其步骤为：向具有至少野生型水平α-2A受体活性的对照动物外周给药α肾上腺素能激动剂；检测对照动物中止痛作用；向具有较低水平的α-2A受体表达或活性的相应动物外周给药与对照动物用药量相近或更大量的α肾上腺素能激动剂；以及检测具有较低水平的α-2A受体表达或活性的相应动物中止痛作用，其中对照动物中无止痛作用，同时具有较低水平α-2A受体表达或活性的相应动物中有止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂具有过量的α-2A激动剂活性，而其中对照动物中有止痛作用，同时具有较低水平α-2A受体表达或活性的相应动物中有止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂是一种具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂。在本发明的上述方法中，对照动物可为，例如在两个α-2A受体基因座均为野生型。在一例实施方案中，对照动物是野生型动物，例如野生型小鼠。多种相应动物均可用于本发明的筛选方法。在一例实施方案中，本发明用在α-2A受体基因座有纯合点突变的相应动物实施。在另一例实施方案中，本发明用α-2A受体编码序列中有点突变的相应动物实施。该点突变可发生在，例如类似于Asp79的残基中，并且可为，例如Asp79到Asn的突变。在另一例实施方案中，本发明用具有纯合α-2A基因敲除突变的相应动物实现。已获知多套方法可用于本发明方法中止痛作用的检测，包括但不限于，硫前列酮敏化后检测止痛作用。
如果需要，本发明筛选产生无伴随镇静作用外周止痛的有效试剂的方法，其实施可通过(a)向具有至少野生型水平α-2A和α-2B受体活性的对照动物外周给药α肾上腺素能激动剂；(b)检测对照动物中的止痛作用；(c)向具有较低水平的α-2A受体表达或活性的相应动物外周给药与对照动物用药量相近或更大量的α肾上腺素能激动剂；(d)检测具有较低水平的α-2A受体表达或活性的相应动物中的止痛作用；(e)向具有较低水平的α-2B受体表达或活性的相应动物外周给药α肾上腺素能激动剂；并且(f)检测具有较低水平的α-2B受体表达或活性的相应动物中的止痛作用，其中对照动物中无止痛作用，同时具有较低水平α-2A受体表达或活性的相应动物中有止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂具有过量的α-2A激动剂活性，而其中对照动物中有止痛作用，具有较低水平α-2A受体表达或活性的所述相应动物中有止痛作用，同时具有较低水平α-2B受体表达或活性的相应动物中无止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂是一种具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂。
本发明还提供一种筛选具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂的方法，其步骤为：向具有至少野生型水平α-2B受体活性的对照动物外周给药α肾上腺素能激动剂；检测对照动物中止痛作用；向具有较低水平的α-2B受体表达或活性的相应动物外周给药α肾上腺素能激动剂；以及检测具有较低水平的α-2B受体表达或活性的相应动物中止痛作用，其中对照动物中有止痛作用，同时具有较低水平α-2B受体表达或活性的相应动物中无止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂是一种具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂。
本发明的上述方法可用多种对照动物实施，例如在两个α-2B受体基因座均为野生型的对照动物。在一例实施方案中，对照动物是野生型动物。在另一例实施方案中，对照动物为野生型小鼠。相似地，多种相应动物可用于本发明的筛选方法，包括具有杂合α-2B基因敲除突变或纯合α-2B基因敲除突变的相应动物。止痛作用可采用多种方法中的任何一种检测。在一例实施方案中，止痛作用在硫前列酮敏化后检测。
本发明还提供一种长期缓解受治疗者慢性疼痛的方法。该方法的实施通过在至少三天时间无α-2A受体激活作用的情况下，激活受治疗者中的止痛α肾上腺素能受体，从而在无持续的受体激活作用的情况下，维持慢性疼痛的缓解。在一例实施方案中，本发明方法通过在至少三天时间给药包括有效量的具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的药用组合物，从而在受治疗者无显著激动剂水平的情况下维持慢性疼痛的缓解。慢性疼痛的缓解在受治疗者无显著激动剂水平的情况下可维持，例如至少三周。已知本发明方法可用于任何类型的慢性疼痛的长期缓解。作为非限制性实施例，该方法可用于神经痛、内脏疼痛、手术后疼痛、癌症或癌症治疗引起的疼痛、或炎症疼痛的长期缓解。
根据本发明方法采用多种具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂中的任何一种均可缓解长期慢性疼痛。长期慢性疼痛的缓解可通过，例如，使用具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂。示例性的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂包括，但不限于诸如“化合物3”或“化合物11”的硫酮或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。在一例实施方案中，上述具有最低限度α-2A激动剂活性的硫酮α-2B激动剂是“化合物3”的(-)对映异构体，或其可药用的盐或酯。示例性的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂还包括，但不限于，诸如“化合物4”的咪唑啉酮或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。在一例实施方案中，所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是“化合物4”的(+)对映异构体，或其可药用的盐或酯。示例性的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂还包括，但不限于诸如“化合物5”、“化合物6”、“化合物7”、“化合物8”和“化合物9”的化合物，及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂可通过多种途径中的任何一种给药，包括，但不限于，所有外周给药路径，例如，口服或通过皮下微型泵给药。
在另外的实施方案中，本发明方法通过在至少三天时间向受治疗者给药包括有效量的α肾上腺素能激动剂的药用组合物和包括有效量的选择性α-2A拮抗剂的药用组合物实施，从而在受治疗者无显著激动剂水平的情况下维持慢性疼痛的缓解。慢性疼痛的缓解可在受治疗者无显著激动剂水平的情况下维持，例如至少三周。多种α肾上腺素能激动剂可用于本发明包括，可乐定、溴莫尼定、替扎尼定、dexemedetomidine、去甲肾上腺素和其它pan-α-2激动剂和pan-α-1 pan-α-2激动剂以及“化合物1”或“化合物2”，及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。类似地，多种选择性α-2A拮抗剂可用于慢性疼痛的长期缓解包括，但不限于“化合物13”及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物以及外周受限的选择性α-2A拮抗剂。
多种给药途径可用于为慢性疼痛的长期缓解提供药用组合物。所述给药途径包括但不限于外周给药，例如，口服或通过皮下微型泵给药。在一例实施方案中，α肾上腺素能激动剂和选择性α-2A拮抗剂均为外周给药。在其它实施方案中，α肾上腺素能激动剂为口服或通过皮下微型泵给药，而选择性α-2A拮抗剂通过任何外周途径给药。但在其它实施方案中，选择性α-2A拮抗剂为口服或通过皮下微型泵给药，而α肾上腺素能激动剂通过外周途径给药，包括但不限于口服或通过皮下微型泵。
                        附图简述
图1表示的是将“化合物1”鞘内注射(1μg)或腹膜内注射(30μg/kg)到硫前列酮敏化的野生型动物或α-2A基因敲除动物中获得的结果。对轻抚的疼痛敏感度，其评分如下所述。(A)鞘内注射到野生型小鼠中。(B)鞘内注射到α-2A基因敲除小鼠中。(C)腹膜内注射到野生型小鼠中。(D)腹膜内注射到α-2A基因敲除小鼠中。星号表示p＜0.05的显著结果。
图2表示的是将“化合物2”腹膜内注射到硫前列酮敏化的野生型小鼠或α-2A基因敲除的小鼠中获得的结果。(A)腹膜内注射100μg/kg“化合物2”到野生型小鼠中。(B)腹膜内注射100μg/kg“化合物2”到α-2A基因敲除小鼠中。星号表示p＜0.05的显著结果。
图3显示外周α-2受体介导α-2A基因敲除小鼠中止痛作用。由腹膜内注射向硫前列酮敏化的α-2A基因敲除小鼠给药单独的或与0.3μg/kg的萝芙素(Rau)一起的100μg/kg的对氨基可乐定(PAC)。星号表示p＜0.05的显著结果。
图4A和4B说明当α-2A受体激活被阻断时，α肾上腺素能激动剂可为有效的野生型动物的外周止痛剂。上述两图表示了各组动物异常疼痛逆转的百分比。(A)向钟氏(Chung)模型大鼠腹膜内给药30μg/kg的可乐定、0.3μg/kg的“化合物13”，或上述两者。(B)向钟氏模型大鼠腹膜内给药100μg/kg的“化合物2”、0.3μg/kg的“化合物13”，或上述两者。星号表示p＜0.05的显著结果。
图4C和4D比较了可乐定和“化合物3”的镇静作用和外周止痛作用。(C)腹膜内给药可乐定后的总活性以及异常疼痛逆转的百分比。(D)腹膜内给药“化合物3”后的总活性以及异常疼痛逆转的百分比。对于赋形剂处理的动物，其活性总数约为2500。星号表示p＜0.05的显著结果。
图5说明具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂，其止痛活性可在没有血浆药水平时持续。(A)通过渗透微型泵向钟氏模型大鼠以指定浓度给药“化合物8”、“化合物9”、溴莫尼定、对氨基可乐定或赋形剂七天。在从渗透微型泵植入的15天时间内测量异常疼痛逆转的百分比。“化合物8”和“化合物9”得到的结果显著，其p＜0.05。(B)通过渗透微型泵向钟氏模型大鼠给药0.1/mg/hr/kg的药品“化合物8”七天。在植入泵后的指定天数中，于同一时间点测量化合物8的血浆浓度(ng/ml)以及异常疼痛逆转的百分比(％MPE)。
图6说明在定量给药“化合物8”几天后，异常疼痛的逆转并不需要当时存在受体激活。在“化合物8”药物治疗开始后的每天测定钟氏模型大鼠中异常疼痛逆转的百分比。(A)通过渗透微型泵用0.1mg/hr/kg的“化合物8”治疗7天。在第三天和第四天，于0.3μg/kg腹膜内给药萝芙素(R)前和30分钟后进行测量。(B)用0.3mg/kg的“化合物8”治疗，口服三天，每天三次。在所示天数的第一次给药之后或之前进行测量。给药完成后，测量持续11天。星号表示p＜0.05的显著结果。
图7A说明pan-α-2激动剂与选择性α-2A拮抗剂一起可产生长期的疼痛缓解。通过渗透微型泵以下述剂量给药5天：溴莫尼定(42μg/kg/hr)；“化合物1”(0.1mg/kg/hr)以及“化合物13”(8μg/kg/hr)。每种化合物和赋形剂均单独给药；溴莫尼定和“化合物1”与“化合物13”一起给药。从给药开始，每天测定异常疼痛逆转的百分比。第五天后溴莫尼定和“化合物13”或“化合物1”和“化合物13”获得的结果显著，其p＜0.05。图7B说明“化合物8”产生班尼特模型(Bennett model)中伤风异常疼痛的长期的疼痛缓解。通过渗透微型泵(在第四天移除)用0.1mg/hr/kg的“化合物8”或盐水治疗动物四天。药物治疗开始后，指定天数中五分钟内(以秒计算)爪子收缩的持续时间如图所示。
图8表示“化合物8”在肠道激惹综合征大鼠模型中产生长期的疼痛缓解。通过渗透微型泵治疗大鼠七天；并在治疗前、治疗中和治疗后用肌电图测量其对一系列结肠直肠扩张(colorectal distension， CRDs)的腹部收缩反射。(A)用50％DMSO赋形剂治疗的正常的大鼠。(B)用0.1mg/hr/kg“化合物8”治疗的正常的大鼠。(C)用50％DMSO赋形剂治疗的敏化的大鼠。(D)用0.1mg/hr/kg“化合物8”治疗的敏化的大鼠。CRD指结肠直肠扩张。
图9表示硫前列酮敏化α-2B基因敲除小鼠中达到的止痛效果。用鞘内赋形剂(DMSO)、鞘内硫前列酮、硫前列酮及腹膜内可乐定或硫前列酮及腹膜内“化合物3”治疗野生型(+/+)、杂合型(+/-)或纯合型(-/-)α-2B基因敲除小鼠。测定了六只小鼠中总疼痛分数。星号表示p＜0.05的显著结果。
图10表示不同口服剂量的“化合物3”、“化合物11”和“化合物4”在钟氏模型大鼠中的外周止痛效果。(A)口服单剂10μg/kg、30μg/kg、100μg/kg或300μg/kg的“化合物3”。(B)口服单剂30μg/kg、100μg/kg、300μg/kg或1000μg/kg的“化合物11”。(C)口服单剂30μg/kg、100μg/kg、300μg/kg或1000μg/kg的“化合物4”。星号表示p＜0.05的显著结果。
图11表示通过渗透微型泵用0.1mg/kg/hour的“化合物3”、“化合物4”或“化合物11”治疗5天后，钟氏模型大鼠中异常疼痛的长期逆转。三种化合物得到的结果均很显著，其p＜0.05。
图12表示“化合物3”和“化合物4”对映异构体的不同的止痛活性。(A)指定腹膜剂量的“化合物3”的对映异构体和母体外消旋化合物(parent racemate)所达到的异常疼痛逆转百分比。(B)指定腹膜剂量的“化合物4”的对映异构体和母体外消旋化合物所达到的异常疼痛逆转百分比。得到的结果显著(p＜0.05)，且观察到止痛效果。
                       具体实施方式
肾上腺素能受体介导对儿茶酚胺、去甲肾上腺素和肾上腺素的生理响应，并且是具有七个跨膜区(transmembrane domain)的G蛋白偶联受体超家族的成员。这些在药理学上被分为α-1、α-2和β肾上腺素能受体等类型的受体涉及多种生理功能，包括心血管和中枢神经***的功能。α肾上腺素能受体介导大多数激动性功能：α-1肾上腺素能受体通常介导效应器官应答，而α-2肾上腺素能受体同时存在于突触后(postsynaptically)和突触前(presynapataically)，可调节神经递质的释放。目前α-2肾上腺素能受体的激动剂已临床应用于治疗高血压、青光眼、痉挛和注意力短缺症及抑制戒毒反应(opiatewithdrawal)，并作为普通麻醉的辅助药物。
目前，α-2肾上腺素能受体依照其药理学和分子特性分为三个亚型：α-2A/D(人体内为α-2A，大鼠中为α-2D)；α-2B和α-2C(Bylund等，Pharmacol.Rev.46：121～136(1994)；以及Hein和Kobilka，Neuropharmacol.34：357～366(1995))。α-2A和α-2B亚型可调节一些血管床中的动脉收缩，而α-2A和α-2C亚型介导交感神经末梢释放去甲肾上腺素的反馈抑制作用。α-2A亚型还介导α-2肾上腺素能激动剂的多种中枢效应(Calzada和Artinano，Pharmaco l.Res.44：195～208(2001)；Hein等，Ann.NY Acad.Science 881：165～271(1999)；以及Karger(Ed.)，α-Adrenoreceptors：MolecularBiology，Biochemistry and Pharmacology(1991))。
虽然具有α-2A激动剂活性的非选择性α肾上腺素能激动剂，例如可乐定和dexmeditomidine已用于多种疼痛的治疗，但是这些药物必须通过脊柱给药以获得可与镇静作用分离的止痛作用。所述pan激动剂的中枢止痛作用由脊柱中背角里表达的α-2A受体介导。本发明基于如下令人惊奇的发现，即与脊柱中α-2A受体的预止痛功能相反，外周α-2A受体介导疼痛。本发明还基于如下经证实的事实，即外周表达的肾上腺素能受体和α-2B受体经激活后可产生外周止痛作用。
如这里所公开的，向野生型动物外周给药诸如pan激动剂可乐定或溴莫尼定等具有α-2A活性的α肾上腺素能激动剂，其产生的与镇静作用分离的止痛作用不显著。然而，在用所述药物外周给药治疗的α-2A基因敲除鼠中却观察到了与镇静作用分离的止痛作用。并且，与镇静作用分离的止痛作用在经诸如“化合物1”或对氨基可乐定(PAC，如实施例IIB和图1D所示)等不易穿过血脑屏障的α肾上腺素能激动剂外周给药后的α-2A基因敲除鼠中也观察到了。所述外周止痛活性没有在野生型动物中观察到(图1C)，表明通过阻止外周α-2A受体的激活发现了α肾上腺素能激动剂的新的止痛活性。
此外，如实施例III所示的，向钟氏大鼠(一种广泛接受的外周神经病模型)外周给药α-2pan激动剂，例如可乐定和选择性α-2A拮抗剂、表1所示的“化合物13”。与单独外周给药可乐定所得的结果相反，外周协同给药可乐定以及选择性α-2A拮抗剂产生与镇静作用分离的止痛效果，从而证实阻断α-2A受体可使基因未改变的动物中的α肾上腺素能激动剂的外周止痛活性显示出来(如图4A所示)。
                表1
各种α肾上腺素能激动剂和拮抗剂的结构
化合物
Figure A0381747200261
实施例III还公开了多种结构类型的具有最低α-2A活性的α肾上腺素能激动剂，例如“化合物3、4、5、6、7和14”，当其通过腹膜内注射给药到钟氏模型大鼠时(如下表2所示)可产生无伴随镇静作用的止痛作用。这些结果表明具有最低α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的止痛活性与前述的α肾上腺素能试剂的止痛活性不同，并且还表明以具有最低α-2A激动剂活性为特征的α肾上腺素能激动剂可用作外周止痛药物。
实施例IV公开的结果还证实具有最低α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂可在给药几天后可产生持续至少六周的长期的疼痛缓解。如这里所公开的，通过皮下渗透微型泵用“化合物8”、“化合物9”、“化合物3”或“化合物4”等结构不同的具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂治疗钟氏模型动物三到七天。药物治疗期间观察到了疼痛的缓解；例如，“化合物8”缓解异常疼痛90～100％，“化合物9”缓解异常疼痛60～80％。此外，各种受测激动剂的止痛效果可在治疗结束后持续一个月，而其它大量受测止痛剂并不具有这种长期的疼痛缓解功能。
这里还公开了，对“化合物8”在不同时间点的血浆浓度取样发现其药物水平在药物治疗开始的10天后已非常低，而在第14天已检测不到任何血浆药物(如图5B所示)，但是疼痛此时得到了很大程度的缓解。此外，还检测了α-2拮抗剂萝芙素在口服或渗透微型泵给药几天后的不同时间点对“化合物8”止痛活性的的抑制能力。值得注意的是，萝芙素可在治疗的第三天抑制“化合物8”的止痛活性，但在第四天却不能(如图6所示)。总而言之，这些结果表明止痛活性的持续时间超出了药物在血液中的停留时间，并且持续给药后，即使不再激活受体或血浆中无任何药物水平，具有最低α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂也可提供长期的疼痛缓解。
这里公开的其它结果显示具有最低α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂在班尼特局部坐骨神经结扎的模型和肠道激惹综合征的动物模型中也可产生长期的疼痛缓解(如实施例IV，图7B和图8所示)，这表明观察到的长期的止痛作用并不仅仅对神经痛有效。这些结果说明具有最低α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂可用于治疗多种类型的急性和慢性疼痛包括，但不限于神经痛、内脏疼痛、炎症疼痛、手术后疼痛和癌症疼痛。
基于上述发现，本发明提供一种通过刺激(agonizing)除α-2A受体之外的外周α肾上腺素能受体以缓解受治疗者疼痛的方法。在一例实施方案中，本发明提供一种通过刺激α-2B受体以缓解受治疗者疼痛的方法。本发明还提供一种通过给药包括有效量的α肾上腺素能激动剂的药用组合物和包括有效量的选择性α-2A拮抗剂的药用组合物以缓解受治疗者疼痛的方法。所述方法可用于缓解多种疼痛，包括但不限于神经痛如糖尿病神经病变引起的疼痛、内脏疼痛、手术后疼痛、癌症或癌症治疗引起的疼痛、由诸如关节炎或肠道激惹综合征引起的炎症疼痛、头痛和肌肉痛。
多种α肾上腺素能激动剂均可用于本发明，包括pan-α-2激动剂和pan-α-1 pan-α-2激动剂以及α-2B激动剂。根据本发明方法，可用于缓解疼痛的α肾上腺素能激动剂包括但不限于可乐定、溴莫尼定、替扎尼定、dexemedetomidine、去甲肾上腺素、“化合物1”和“化合物2”，及其所有的可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。
多种选择性α-2A拮抗剂也可用于本发明。所述选择性α-2A拮抗剂包括但不限于“化合物13”及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物，以及BRL48962和BRL44408及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物(Young等，Eur.J.Pharmacol.168：381～386(1989))。在一例实施方案中，本发明的实施采用外周受限的选择性α-2A拮抗剂。
根据本发明方法，有多种给药途径对缓解疼痛有效。在一例实施方案中，α肾上腺素能激动剂和选择性α-2A拮抗剂均为外周途径给药。在其它实施方案中，α肾上腺素能激动剂为口服或通过皮下微型泵给药。在另外的实施方案中，α肾上腺素能激动剂为口服或通过皮下微型泵给药，而选择性α-2A拮抗剂通过任何外周途径给药。但在其它实施方案中，选择性α-2A拮抗剂为口服或通过皮下微型泵给药。如果需要，选择性α-2A拮抗剂可口服或通过皮下微型泵给药，而α肾上腺素能激动剂可通过任何外周途径给药，如口服或通过皮下微型泵。
本发明还提供一种通过给药包括有效量的α肾上腺素能激动剂的药用组合物和包括有效量的选择性α-2A拮抗剂的药用组合物以缓解受治疗者疼痛的方法，其中α肾上腺素能激动剂和选择性α-2A拮抗剂均重复或连续给药至少三天。在所述方法中，疼痛的缓解可持续到，例如受治疗者的α肾上腺素能激动剂水平不显著。
本发明提供依靠向受治疗者给药一种或多种药用组合物的方法。这里所用的术语“受治疗者”指任何可能经受疼痛的动物，例如人或其它哺乳动物，例如灵长类动物、马、牛、狗或猫。
本发明方法用于治疗急性和慢性疼痛，并且作为非限制性的实例有由神经、内脏或炎症引起的疼痛。在具体的实施方案中，本发明方法用于治疗神经痛、内脏疼痛、手术后疼痛、癌症或癌症治疗引起的疼痛及炎症疼痛。
急性和慢性疼痛均可采用本发明的方法治疗，并且术语“疼痛”包括极性和慢性疼痛。这里所用的术语“急性疼痛”指由伤害例如切伤、压伤、烧伤或诸如暴露于红辣椒中的活性组分辣椒素等化学刺激引起的直接，通常为高阀值(threshold)的疼痛。这里所用的术语“慢性疼痛”指不同于急性疼痛的疼痛，包括但不限于神经痛、内脏疼痛、炎症疼痛、头痛、肌肉痛和牵涉性痛。已知慢性疼痛持续的时间相对较长，例如几年并可为持续性的或间歇性的。
在一例实施方案中，本发明方法用于治疗“神经痛”。这里所用的术语“神经痛”指由神经损伤引起的疼痛。神经痛不同于伤害性疼痛，后者是由牵连到小的皮肤神经或肌肉或***中的小神经的急性组织损伤引起的疼痛。与神经痛相反，包括伤害性机制的疼痛通常仅持续到组织的修复期并一般通过现有的止痛剂或镇静剂缓解(Myers，Regional Anesthesia 20：173～184(1995))。
神经痛通常持续时间长或为慢性的，并可在急性组织损伤发生后持续数天或数月。神经痛可包括持续的自发性疼痛以及异常疼痛或痛觉过敏，异常疼痛是对一般非疼痛性刺激有疼痛响应，痛觉过敏是对一般的细小疼痛刺激如针刺的增强响应。神经痛通常对镇静剂治疗有抵抗作用(Myers，supra，1995)。
本发明方法可用于缓解由外伤、损伤或外周神经、脊髓背根神经节、脊髓、脑干、丘脑或皮层的疾病(不限于所述因素)引起的神经痛。可用本发明方法治疗的神经痛的实例包括诸如疱疹后神经痛、传入神经阻滞疼痛和糖尿病性神经病等神经痛。已知本发明方法可用于缓解神经痛而不管其病因如何。作为实例，本发明方法可用于缓解由诸如神经瘤等外周神经疾病、神经压迫、神经压伤或拉伤、不完全神经横断(incomplete nerve transsection)、单一神经病变或多发性神经病变引起的神经痛。作为进一步的实例，本发明方法可用于缓解由诸如脊髓背根神经节压迫等疾病、脊髓炎症、脊髓的挫伤、肿瘤或对切以及脑干、丘脑或皮层的肿瘤或外伤引起的神经痛。
如上所述，本发明方法可缓解由单一神经病变或多发性神经病变引起的神经痛。神经病是外周神经***中的功能障碍或病态变化，临床上具有感官或运动神经元异常的特征。术语单一神经病变表示单根外周神经受到影响，而术语多发性神经病变表示多根外周神经受到影响。神经病的病因可为已知或未知的。已知的病因包括疾病的并发症或中毒状态，例如引起神经病的最常见的代谢紊乱—糖尿病、或辐射、缺血、血管炎。可用本发明方法治疗的多发性神经病变可由，但不限于脊髓灰质炎后综合症(post-polio syndrome)、糖尿病、酒精、淀粉状蛋白、毒素、HIV、甲状腺功能减退、***、维生素缺乏、化学疗法、ddC或弥漫性体血管角质瘤引起。已知本发明方法可用于缓解已知或未知病因的这些或其它神经病引起的疼痛。
作为其它的非限制性实例，本发明方法可用于治疗慢性肠胃炎包括克隆氏症、溃疡性结肠炎、胃炎、肠道激惹综合征以及由诸如癌症或癌症治疗(例如，化疗或放射疗法)引起的疼痛等慢性内脏疼痛。类似地，本发明方法可用于治疗由例如关节炎(如风湿性关节炎、痛风性关节炎或骨关节炎)、脊椎炎或诸如红斑狼疮的自身免疫性疾病引起的慢性炎症疼痛。本发明方法还可用于治疗头痛、肌肉痛和滥用药物或停止服药引起的疼痛以及其它各种已知或未知病因的疼痛。
本发明的几种方法部分依赖于“α肾上腺素能激动剂”，这里所用的上述术语表示在一种或多种α-2肾上腺素能受体中具有比溴莫尼定大25％功效，或在一种或多种α-1肾上腺素能受体中具有比脱羟肾上腺素大25％功效的化合物。所述化合物对于一种或多种α肾上腺素能受体可以是选择性的或非选择性的。因此，术语α肾上腺素能激动剂包括但不限于诸如去甲肾上腺素等在所有α-1和α-2受体中具有激动剂活性的“pan-α-1 pan-α-2激动剂”、pan-α-2激动剂、α-2选择性激动剂、α-2B激动剂以及单个α肾上腺素能受特异性的激动剂。在具体的实施方案中，本发明方法采用的α肾上腺素能激动剂在一种或多种α-2肾上腺素能受体中具有比溴莫尼定大30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或200％的功效。在其它的实施方案中，本发明方法采用的α肾上腺素能激动剂在一种或多种α-1肾上腺素能受体中具有比脱羟肾上腺素大30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或200％的功效。在另一例实施方案中，本发明方法依赖于一种缺乏显著α-2A拮抗剂活性的α肾上腺素能激动剂。
功效又被称为内在活性，是化合物所能达到的最大受体激活的度量，其测定可采用任何现有的α肾上腺素能受体激活的检测方法，例如下述的cAMP或受体选择与扩增技术(RSAT)检测方法。功效用最大药效与每个受体亚型的标准激动剂的最佳效果的百分比值表示。溴莫尼定(UK14304)通常用作α-2A、α-2B和α-2C受体的标准激动剂，在这里定义α-2受体功效时，也采用其作为标准。脱羟肾上腺素是α-1A、α-1B和α-1D受体的公认标准激动剂，在这里定义α-1受体功效时，也采用其作为标准(Messier等，supra，1995；Conklin等，supra，1993)。
如本发明所公开的，α-2B激动剂可用于缓解疼痛或慢性疼痛的长期缓解。这里所用的术语“α-2B激动剂”表示一种在α-2B肾上腺素能受体中具有比溴莫尼定大25％功效的化合物。该术语被理解为包括对α-2B受体(与其它α肾上腺素能受体相比)有选择性或无选择性的激动剂。因此，术语“α-2B激动剂”包括pan-α-2激动剂和pan-α-1 pan-α-2激动剂以及对α-2B受体有选择性或特异性的激动剂，如下所述。在具体的实施方案中，本发明方法采用的α-2B激动剂在α-2B肾上腺素能受体中具有比溴莫尼定大30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或200％的功效。示例性的α-2B激动剂包括可乐定、溴莫尼定、“化合物1”、“化合物2”、“化合物3”到“化合物12”和“化合物14”，以及这些化合物所有可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。在另一例实施方案中，本发明方法依赖于一种缺乏显著α-2A拮抗剂活性的α-2B激动剂。
这里所用的术语“pan-α-2激动剂”表示在各种α-2A、α-2B和α-2C肾上腺素能受体中具有比溴莫尼定大25％功效的化合物，且包括pan-α-1 pan-α-2激动剂。本领域已知有多种pan-α-2激动剂，包括可乐定、溴莫尼定、替扎尼定、dexemedetomidine和去甲肾上腺素。pan-α-2激动剂在α-2A、α-2B和α-2C受体中均具有比溴莫尼定大至少25％的功效；在具体的实施方案中，本发明方法的实施所采用的pan-α-2激动剂在α-2A、α-2B和α-2C肾上腺素能受体中具有比溴莫尼定大30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或200％的功效。已知pan-α-2激动剂的功效在不同的α-2受体中可不相同；作为实例，pan-α-2激动剂的功效在α-2A受体中可大于2 5％，在α-2B受体中可大于80％，而在α-2C受体中可大于40％。
这里所用的术语“pan-α-1 pan-α-2激动剂”表示一种在所有α-1受体中具有比脱羟肾上腺素大25％的功效，并且在所有α-2肾上腺素能受体中具有比溴莫尼定大25％功效的化合物。在具体实施方案中，本发明方法所依赖的pan-α-1 pan-α-2激动剂在所有α-1受体及α-2受体中分别具有比脱羟肾上腺素或溴莫尼定大30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或200％的功效。
如这里所公开的，选择性α-2A拮抗剂与α肾上腺素能激动剂一起给药以缓解疼痛或长期缓解慢性疼痛。这里所用的术语“选择性α-2A拮抗剂”表示一种化合物，其(1)在α-2A中具有比溴莫尼定小25％的功效；(2)在α-2A中的Ki小于100nM；并且(3)在α-2B中的Ki比α-2A中的大至少10倍或其在α-2B中具有比溴莫尼定大25％的功效。根据上述定义，本领域技术人员应理解诸如萝芙素的非选择性拮抗剂未包括在该术语的范围内。这里提供的示例性的选择性α-2A拮抗剂有“化合物13”、BRL 48962和BRL 44408。所述化合物可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物也可用于本发明。选择性α-2A拮抗剂可为外周受限的化合物。该化合物不易穿过血脑屏障，因此在外周给药中，排除在中枢神经***以外。
除了α-2A拮抗剂活性外，如果化合物满足上述三个准则，“选择性α-2A拮抗剂”还可在一个或多个肾上腺素能受体或其它受体中具有激动剂活性或拮抗剂活性。作为一个实例，具有α-2C拮抗剂活性的化合物具有α-2C中Ki小于100nM且α-2C中功效比溴莫尼定小25％的特征，并且还具有以下特征(1)在α-2A中的功效比溴莫尼定小25％，在α-2A中的Ki小于100nM，并且(3)在α-2B中的Ki比α-2A中的大至少10倍，则该化合物包括在这里所定义的术语“选择性α-2A拮抗剂”之中。类似地，除了α-2A拮抗剂活性，还表现出α-2B或其它激动剂活性的化合物也包括在术语“选择性α-2A拮抗剂”中。作为一个实例，“化合物13”表现出α-2B激动剂活性，其特征在于该化合物在α-2B中具有溴莫尼定约40％的功效，因此满足标准(3)，而且其(1)在α-2A中具有溴莫尼定5％的功效并且(2)α-2A中的Ki为约0.08，从而落在这里所用的术语“选择性α-2A拮抗剂”的定义范围内。在具体实施方案中，本发明方法的实施所采用的选择性α-2A拮抗剂，其Ki小于80nM、60nM、40nM、20nM、10nM、1nM或0.1nM。在其它实施方案中，本发明方法的实施所采用的选择性α-2A拮抗剂，其在α-2B中的Ki比α-2A中的大20倍、30倍。40倍、50倍、100倍、200倍、500倍或1000倍。在其它的实施方案中，本发明方法的实施所采用的选择性α-2A拮抗剂在α-2B中具有比溴莫尼定大30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、或200％的功效。
在一例实施方案中，本发明依赖于具有最低限度α-2B拮抗剂活性的选择性α-2A拮抗剂。这里所用的术语“具有最低限度α-2B拮抗剂活性的选择性α-2A拮抗剂”表示如上定义的选择性α-2A拮抗剂，并且其在α-2B中的Ki大于100nM。非限制性的实例有α-2B中的Ki可大于200nM、300nM、400nM、500nM、1000nM、2000nM、3000nM、4000nM或5000nM的拮抗剂。
在本发明方法中，特异性α-2A拮抗剂也可用于阻止α-2A受体的激活。这里所用的术语“特异性α-2A拮抗剂”表示一种化合物，其(1)在α-2A中具有比溴莫尼定小25％的功效；(2)α-2A中的Ki小于100nM；并且(3)在除了α-2A的各个α肾上腺素能受体中，具有比α-2A中的Ki大至少10倍的Ki，或具有比溴莫尼定或脱羟肾上腺素大25％的功效。
本发明还提供依赖于具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能的组合物以及方法。具体而言，本发明提供一种包括具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的止痛组合物，所述组合物能够产生无伴随镇静作用的外周止痛。在一例实施方案中，止痛组合物产生无伴随镇静作用的外周止痛并且基本没有低血压作用。在另一例实施方案中，本发明提供的一种止痛组合物产生将疼痛降低至少50％的无伴随镇静作用的外周止痛。在另外的实施方案中，需要给药比将疼痛降低至少50％的止痛组合物剂量大至少10倍、100倍或1000倍的止痛组合物以将运动神经或肌肉活性减少20％。在其它实施方案中，本发明提供的一种止痛组合物产生将疼痛降低至少50％的无伴随镇静作用的外周止痛并且基本没有低血压作用。在另一例实施方案中，本发明提供一种包括具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的止痛组合物，所述组合物能够产生无伴随镇静作用的外周止痛，其中激动剂不是硫脲或其衍生物。在另一例实施方案中，本发明提供一种包括具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的止痛组合物，所述组合物能够产生无伴随镇静作用的外周止痛，其中激动剂不是硫脲或4-咪唑或其衍生物。
本发明还提供一种缓解受治疗者疼痛的方法，该方法通过外周给药包括有效量的具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的药用组合物，从而产生无伴随镇静作用的外周止痛。所述外周止痛可将疼痛降低，例如至少50％，并且不伴有镇静作用。在另一例实施方案中，外周止痛发生在基本无低血压作用的情况下。在一例实施方案中，所述方法采用具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂实施，激动剂不为硫脲或其衍生物。在另一例实施方案中，所述方法采用具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂实施，激动剂不为硫脲或4-咪唑或其衍生物。各种类型和病因的疼痛均可通过本发明方法缓解。作为非限制性实例，本发明方法可有效缓解神经疼、例如糖尿病神经病变引起的疼痛、内脏疼痛、手术后疼痛、癌症或癌症治疗引起的疼痛、由诸如关节炎或肠道激惹综合征引起的炎症疼痛、头痛和肌肉痛。
多种具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂可用于本发明方法。在一例实施方案中，具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂是具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂。所述激动剂可为，例如硫酮，如“化合物3”或“化合物11”或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。在一例实施方案中，本发明方法采用具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂实施，该激动剂是“化合物3”或其可药用的盐或酯的(-)对映异构体。
可用于本发明的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂还包括，但不限于咪唑啉酮。可用的具有最低限度α-2A激动剂活性的咪唑啉酮α-2B激动剂可为，例如“化合物4”或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。在一例实施方案中，具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是“化合物4”或其可药用的盐、酯或酰胺的(+)对映异构体。在另外的实施方案中，本发明方法采用下述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂之一实施：“化合物5”、“化合物6”、“化合物7”、“化合物8”、“化合物9”或“化合物14”或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂可通过多种途径外周给药，包括但不限于口服或通过皮下微型泵给药。
这里所用的术语“外周止痛”表示外周给药后达到疼痛降低。如下所述的，外周给药指将药剂引入受治疗者的中枢神经***以外，并且包括除了直接给药到脊柱或脑以外的任何给药途径。外周止痛可将疼痛降低，例如至少30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％。
本发明的组合物产生无伴随镇静作用的外周止痛作用。这里所说的镇静作用是一个表示运动神经或肌肉活性降低的术语。这里所用的术语“无伴随镇静作用”表示一次或多次给药时产生的外周止痛所伴随的运动神经或肌肉活性的降低相对很小。具体而言，如果一种药物通过外周给药时，使运动神经或肌肉活性下降20％所需的剂量比将疼痛降低至少50％所需的剂量大至少3倍，则该药物产生“无伴随镇静作用的外周止痛”。在具体的实施方案中，使运动神经或肌肉活性下降20％所需的剂量比将疼痛降低至少50％所需的剂量大至少4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、25倍、50倍、100倍、200倍、500倍、1000倍、2000倍或5000倍。本领域已知有方法测定疼痛降低的程度以及外周给药所伴随的镇静作用的程度，所述方法将在下面描述。
这里所用的术语“具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂”指如上定义的α肾上腺素能激动剂，其特征还有(1)在α-2A肾上腺素能受体中具有比溴莫尼定小25％的功效，并且(2)能在基因未改变的动物中产生无伴随镇静作用的外周止痛。已知功效的测量可采用任何检测激动剂活性的标准方法，例如下述的cAMP或RSAT检测方法。“化合物3、4、5、6、7、8、9、10、11和12”及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物在这里作为示例性的具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂提供；所述化合物属于上述表1所示的不同的结构类别。可用于本发明的具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂包括下述的在一种或多种α-1受体中具有活性的α肾上腺素能激动剂，具有最低限度α-2A活性的特异性α-2B/C激动剂以及具有最低限度α-2A活性的特异性α-2C激动剂。
通过筛选α肾上腺素能激动剂可以很容易的鉴别具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂，例如，通过筛选那些在不同的体外或体内检测中对功能活性而言表现出在α-2A中的功效小于25％的α肾上腺素能激动剂。具体而言，可在野生型和α-2A基因敲除鼠中检测所述激动剂的无伴随镇静作用的外周止痛作用，例如，采用硫前列酮敏化疼痛的公认模型。如下所述，虽然在α-2A基因敲除鼠中观察到了无伴随镇静作用的外周止痛，但具有超过最低限度α-2A激动剂活性的激动剂可被排除，归入无法在野生型硫前列酮敏化的动物中产生无伴随镇静作用的外周止痛的化合物。在具体的实施方案中，本发明方法采用具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂实施，该激动剂在基因未改变的动物中所产生的无伴随镇静作用的止痛作用将疼痛降低至少50％或至少60％、70％、80％、90％或100％。
这里所用的术语“具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂”表示一种化合物，其特征为(1)在α-2B受体中具有比溴莫尼定大25％的功效；(2)在α-2B中的效能小于1000nM或在α-2B中的效能比在α-2A中的效能大至少100倍；(3)在α-2A受体中具有比溴莫尼定小25％的功效；并且(4)能在基因未改变的动物中产生无伴随镇静作用的外周止痛。这里提供的示例性的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂有“化合物3、4、5、6、7、8、9、10、11、12和14”及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物；这些作为示例性的化合物能在基因未改变的动物中产生无伴随镇静作用的外周止痛。在具体的实施方案中，可用于本发明的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂在α-2B中具有比溴莫尼定大30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或200％的功效。在另外的实施方案中，具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂在α-2A中具有比溴莫尼定小20％、15％、10％、5％、2％或1％的功效。在其它的实施方案中，具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂，其在α-2B中的功效小于900nM、800nM、700nM、600nM、500nM、400nM、300nM、200nM、100nM、50nM、10nM或1nM。在另外的实施方案中，具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂，其在α-2B中的效能比在α-2A中的效能大至少200倍、300倍、400倍、500倍、1000倍或10,000倍。在其它实施方案中，本发明方法所依赖的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂能在基因未改变的动物中产生将疼痛降低至少50％或至少60％、70％、80％、90％或100％的无伴随镇静作用的外周止痛。
这里所用的术语“具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B/C激动剂”表示一种化合物，其特征为(1)在α-2B或α-2C受体或两者中具有比溴莫尼定大25％的功效；(2)在α-2B或α-2C受体或两者中的效能小于1000nM或在α-2B或α-2C受体或两者中的效能比在α-2A受体中的效能大至少100倍；(3)在α-2A受体中具有比溴莫尼定小25％的功效；并且(4)能在基因未改变的动物中产生无伴随镇静作用的外周止痛。
这里所用的术语“具有最低限度α-2A活性的特异性α-2B激动剂”表示一种化合物，其特征为(1)在α-2B受体中具有比溴莫尼定大25％的功效；(2)在α-2B中的效能小于1000nM或在α-2B中的效能比在α-2A中的效能大至少100倍；(3)在α-2A和α-2C中具有比溴莫尼定小25％的功效或小50倍的效能；(4)在所有α-1受体中具有比脱羟肾上腺素小25％的功效或小50倍的效能；并且(5)能在基因未改变的动物中产生无伴随镇静作用的外周止痛。
类似地，这里所用的术语“具有最低限度α-2A活性的特异性α-2C激动剂”表示一种化合物，其特征为(1)在α-2C受体中具有比溴莫尼定大25％的功效；(2)在α-2C中的效能小于1000nM或在α-2C中的效能比在α-2A中的效能大至少100倍；(3)在α-2A和α-2B中具有比溴莫尼定小25％的功效或小50倍的效能；(4)在所有α-1受体中具有比脱羟肾上腺素小25％的功效或小50倍的效能；并且(5)能在基因未改变的动物中产生无伴随镇静作用的外周止痛。
激动剂和拮抗剂的活性，包括选择性和特异性，可采用任何常规检测方法鉴定，包括但不限于受体选择和扩增技术(RSAT)检测方法(Messier等，Pharmacol.Toxicol.76：308～11(1995)；Conklin等，Nature363：274～6(1993))；环腺苷酸检测方法(Shimizu等，J.Neurochem.16：1609～1619(1969))；以及细胞传感器微生理(cytosensor microphysiometry)检测方法(Neve等，J.Biol.Chem.267：25784～25753(1992))。所述检测方法的实施通常采用仅天然表达单个α肾上腺素能受体亚型的细胞，或表达单个重组α肾上腺素能受体亚型的转染细胞。肾上腺素能受体可为人类受体或其具有相似药理的同系物。如这里所公开的，RSAT检测方法的实施采用由人类α-2A(c10基因)、鼠α-2B(RNG基因)、人类α-2C(c4基因)、牛α-1A、仓鼠α-1B以及大鼠α-1D瞬时转染的细胞。
RSAT检测方法测量导致汇合细胞混合群体中含受体细胞选择性增殖的接触抑制的受体介导的缺失。细胞数量的增加用适当的诸如β-半乳糖苷酶等可检测的标志基因估算，如果需要，可采用高处理量或超高处理量的检测模式。激活G蛋白Gq的受体引起增殖响应。α肾上腺素能受体通常与Gi偶联，它在与含Gi受体识别域的杂合Gq蛋白Gq/i5共表达(coexpress)时激活RSAT响应。
作为一个实例，RSAT检测可基本按如下方式进行：将NIH-3T3细胞以2×106的密度接种到15cm的皿中，并置于含10％小牛血清的DMEM培养基(Dulbecco’s modified Eagle’s medium，杜尔贝科改性伊格尔培养基)中培养。一天后，用磷酸钙沉淀使上述细胞与编码p-SV-β-半乳糖苷酶的哺乳动物表达质粒(5～10μg)、受体(1～2μg)以及G蛋白(1～2μg)共转染。还可包括诸如40μg鲑精DNA的载体DNA以提高共转染效率。在第二天添加新鲜的培养基；并于一至两天后收获细胞，将其等分为50份检测试样冷冻。解冻转染细胞，并将100μl该细胞加入100μl待测化合物的等分试样中，并于例如96孔微量板中检测不同浓度的上述样品三次。在37℃培养72～96小时。用磷酸盐缓冲的盐水洗涤后，检测β-半乳糖苷酶活性，其检测方法包括：加入200μl产色底物(3.5mM邻硝基苯基-β-右旋半乳糖苷/0.5％NP-40的磷酸盐缓冲的盐水)，于30℃培养过夜，并在420nm处测量光密度。吸光度可衡量酶的活性，它由细胞数量决定并反映受体介导的细胞增殖。测定各种受体中的EC50及各种药物的最大作用(功效)。
本发明还提供一种长期缓解受治疗者慢性疼痛的方法。该方法的实施通过在至少三天时间无α-2A受体激活作用的情况下，激活受治疗者中的止痛α肾上腺素能受体，从而在无持续的受体激活作用的情况下，维持慢性疼痛的缓解。在一例实施方案中，本发明方法通过在至少三天时间给药包括有效量的具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的药用组合物，从而在受治疗者无显著激动剂水平的情况下维持慢性疼痛的缓解。慢性疼痛的缓解在受治疗者无显著激动剂水平的情况下可维持，例如至少三周。已知本发明方法可用于任何类型的慢性疼痛的长期缓解。作为非限制性实施例，该方法可用于神经痛、内脏疼痛、手术后疼痛、癌症或癌症治疗引起的疼痛、或炎症疼痛的长期缓解。
根据本发明方法采用多种具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂中的任何一种均可缓解长期慢性疼痛。长期慢性疼痛的缓解可通过，例如，使用具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂。示例性的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂包括，但不限于诸如“化合物3”和“化合物11”的硫酮及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。在一例实施方案中，上述具有最低限度α-2A激动剂活性的硫酮α-2B激动剂是“化合物3”的(-)对映异构体，或其可药用的盐或酯。示例性的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂还包括，但不限于，诸如“化合物4”的咪唑啉酮或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。在一例实施方案中，所述具有最低限度α-2A激动剂活性的咪唑啉酮α-2B激动剂是“化合物4”的(+)对映异构体，或其可药用的盐或酯。示例性的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂还包括，但不限于“化合物5”、“化合物6”、“化合物7”、“化合物8”和“化合物9”，及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。在本发明方法中，具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂可通过大量途径中的任何一种给药，包括但不限于，外周给药路径，例如，口服或通过皮下微型泵给药。
本发明还提供一种长期缓解受治疗者慢性疼痛的方法，包括在至少三天时间向受治疗者给药包括有效量的α肾上腺素能激动剂的药用组合物和包括有效量的选择性α-2A拮抗剂的药用组合物，从而在受治疗者无显著激动剂水平的情况下维持慢性疼痛的缓解。慢性疼痛的缓解可在受治疗者无显著激动剂水平的情况下维持，例如至少三周。多种α肾上腺素能激动剂可用于本发明包括，可乐定、溴莫尼定、替扎尼定、dexemedetomidine、去甲肾上腺素和其它pan-α-2激动剂和pan-α-1 pan-α-2激动剂以及“化合物1”或“化合物2”，及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。类似地，多种选择性α-2A拮抗剂可用于慢性疼痛的长期缓解包括，但不限于“化合物13”及其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。已知多种给药途径可用于为慢性疼痛的长期缓解提供药用组合物，如下面将讨论的。所述给药途径包括但不限于外周给药，例如，口服或通过皮下微型泵给药。
本发明方法提供慢性疼痛的长期缓解。这里所用的术语“长期缓解”指疼痛的显著降低可在最后一次给药药用组合物后维持至少十天。在具体的实施方案中，缓解可在最后一次给药药用组合物后维持至少14天、至少21天、至少28天、至少60天或至少90天。在另外的实施方案中，本发明提供慢性疼痛的长期缓解的方法，其中疼痛降低至少50％，并可在最后一次给药药用组合物后维持至少10天、至少14天、至少21天、至少28天、至少60天或至少90天。在其它的实施方案中，本发明提供慢性疼痛的长期缓解的方法，其中疼痛降低至少80％，并可在最后一次给药药用组合物后维持至少10天、至少14天、至少21天、至少28天、至少60天或至少90天。在另外的实施方案中，本发明提供慢性疼痛的长期缓解的方法，其中疼痛降低至少90％，并可在最后一次给药药用组合物后维持至少10天、至少14天、至少21天、至少28天、至少60天或至少90天。
长期缓解慢性疼痛的方法通过在至少三天时间给药具有最低限度α-2A活性的α肾上腺素能激动剂实施。激动剂可在至少三天时间重复给药或连续给药，例如至少三天、四天、五天、六天、七天、八天、九天或十天时间。作为非限制性实施例，具有最低限度α-2A活性的α肾上腺素能激动剂可在三天内每天给药三次，或在四天内每天给药三次，例如在三天内每天口服三次，或在四天内每天口服三次。作为其它实施例，具有最低限度α-2A活性的α肾上腺素能激动剂可连续给药，例如在三天、四天、五天、六天或七天时间通过植入的输注泵或采用长效释放剂(extended release formulation)静脉内给药。
已知缓释剂可用于本发明方法中慢性疼痛的长期缓解。还已知当采用重复给药时，给药频率部分地由激动剂的半衰期决定。如果需要，本发明方法可通过给药单剂量、或双剂量或三剂量的具有长半衰期的激动剂实施，例如半衰期为至少24小时、36小时、48小时或72小时。
已知本发明方法可将不同的给药方式结合起来。作为实例，可将第一天的连续静脉内给药与第二天和第三天的重复口服给药结合起来以在至少三天时间在不激活α-2A受体的情况下激活止痛性的α肾上腺素能受体，从而在所述受治疗者内无显著激动剂水平的情况下，维持慢性疼痛的缓解。已知给药频率和持续时间部分地由所需缓解以及激动剂的半衰期决定，并且多种给药途径可用于本发明方法，如下详叙。
本发明还包括表示特定激动剂或拮抗剂的分子式所衍生的可药用的盐、酯和酰胺。适用于本发明的可药用的激动剂和拮抗剂的盐包括但不限于酸加合盐，可通过例如将激动剂或拮抗剂的溶液与适宜的酸溶液混合形成，所述酸有例如盐酸、硫酸、反丁烯二酸、马来酸、琥珀酸、醋酸、安息香酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸或磷酸。当激动剂或拮抗剂载有酸性部分时，其适宜的可药用的盐可包括诸如钠盐或钾盐的碱金属盐、诸如钙盐或镁盐的碱土金属盐、以及诸如季铵盐的由适宜的有机配合物形成的盐。代表性的可药用的盐包括，但不限于醋酸盐、苯磺酸盐、安息香酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、乙二胺四乙酸钙、右旋樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、棒酸盐、柠檬酸盐、二盐酸化物、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯月桂硫酸盐、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、对α羟乙酰氨基苯砷酸盐、己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)、羟基胺(hydrabamine)、溴酸化物、盐酸化物、羟萘酸盐、碘化物、异硫氰酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月硅酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、溴化甲烷、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、粘液酸盐(mucate)、萘磺酸盐、硝酸盐、N-甲基葡糖胺盐、油酸盐、双羟萘酸盐、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、硫酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱盐、甲苯磺酸盐、三乙基碘化物和戊酸盐。
对用于本发明的激动剂和拮抗剂的官能团可进行改性以提高化合物的药理效用。所述改性在熟练药剂师的知识范围内并包括，但不限于指定激动剂或拮抗剂的酯、酰胺、醚、N-氧化物及药物前体。可提高激动剂或拮抗剂活性的改性实例包括，例如酯化作用，如形成C1到C6烷基酯，优选C1到C4烷基酯，其中烷基为直链或支链。其它可用的酯包括，例如C5到C7环烷基酯以及诸如苄基酯的芳香烷基酯。所述酯可采用有机化学领域已知的常规方法由这里所述的化合物制备。
其它可药用的改性包括酰胺的形成。可用的酰胺改性包括，例如那些由氨衍生的酰胺；主要是C1到C6二烷基伯胺，其中烷基为直链或支链；以及具有多种取代基的芳胺。当为仲胺时，胺也可为五元环或六元环的形式。制备这些或那些酰胺的方法已为本领域所熟知。
已知当用于本发明的激动剂或拮抗剂具有至少一个手性中心时，激动剂或拮抗剂可作为化学相异的对映异构体存在。此外，当激动剂或拮抗剂具有两个或更多的手性中心时，化合物作为非对映异构体存在。所有上述异构体及其混合物包括在指定激动剂或拮抗剂的范围内。类似地，当激动剂或拮抗剂所具有的结构排列使其结构以互变异构体存在时，所述互变异构体也包括在指定激动剂或拮抗剂的范围内。此外，当激动剂或拮抗剂为晶体形式时，则可作为多晶型物存在；当有溶剂存在时，激动剂可形成溶剂化物，例如与水或普通的有机溶剂。所述多晶型物、水合物及其它溶剂化物也包括在这里定义的指定激动剂或拮抗剂的范围内。
可用于本发明的激动剂或拮抗剂通常包括在药用组合物中给药。如果需要，组合物在某些情况下可与一种或多种其它疗效的物质或止痛物质，在相同或不同的药用组合物中通过相同或不同的给药途径一起给药。作为一个实例，具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂可与诸如卡巴番定(Gabapentin)的止痛剂一起给药。作为另一个实例，具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂可与一种或多种癌症化疗剂一起在静脉内合剂(chemotherapeuticagent)中给药。
可用于本发明的药用组合物包括活性激动剂或拮抗剂并且如果需要，还可包括赋形剂，例如可药用的载体或稀释剂，即给药到受治疗者时基本无长期或永久有害作用的任何载体或稀释剂。所述赋形剂通常与活性化合物相混合，或可稀释或封装活性化合物。载体可为用作活性化合物赋形剂或载体的固体、半固体或液体试剂。可药用的载体及稀释剂的实例包括，但不限于水，如蒸馏水或去离子水、盐水以及其它水介质。已知活性组分在理想载体或稀释剂中可为可溶性的或作为悬浮物释放。
药用组合物如果需要，还可包括一种或多种试剂，例如乳化剂、润湿剂、甜味剂或调味剂、张力调节剂(tonicity adjuster)、防腐剂、缓冲剂或抗氧化剂。可用于药用组合物的张力调节剂包括盐，例如氯化钠、氯化钾、甘露醇或甘油及其它可药用的张力调节剂。可用于本发明药用组合物的防腐剂包括，但不限于苯扎氯胺、氯丁醇、硫柳汞、苯汞基乙酸酯以及苯汞基硝酸盐。多种可用于制备药用组合物时调节pH值的缓冲剂及方法包括，但不限于醋酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂以及硼酸盐缓冲剂。类似地，本领域已知的可用于本发明药用组合物的抗氧化剂包括，例如偏亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、乙酰半胱氨酸、丁基化羟基茴香醚和丁基化羟基甲苯。药理学领域已知的这些和其它物质可包括在用于本发明的药用组合物中。
本发明的激动剂和拮抗剂以有效量给药。所述有效量通常指达到所需疗效所需的最低剂量，可为例如将疼痛引起的不适降低到可容忍水平大致所需的量。上述剂量通常在0.1～1000mg/天的范围内并且可为，例如，0.1～500mg/天、0.5～500mg/天、0.5～100mg/天、0.5～50mg/天、0.5～20mg/天、0.5～10mg/天或0.5～5mg/天的范围内，其实际给药量由医师考虑相关情况后确定，包括疼痛的严重程度、患者的年龄和体重、患者的一般身体状况，引起疼痛的原因以及给药途径。栓剂和长效释放剂也可用于本发明，包括，例如皮肤贴剂、涂抹于皮肤上面或下部的制剂以及用于肌肉注射的制剂。
用于本发明方法的药用组合物可采用多种方式给药到受治疗者，其给药方式取决于，例如，待治疗疼痛的类型、组合物将包括的激动剂或拮抗剂以及受治疗者的病史、危险因子和症状。适用于本发明方法的给药途径包括全身给药和局部给药。作为非限制性实施例，用于缓解疼痛或长期缓解慢性疼痛的药用组合物，其给药方式可包括口服或通过皮下泵；皮肤药膏；静脉内、皮下或肌肉注射；局部滴剂、乳膏、凝胶或药膏；作为植入的或注射长效释放剂；通过皮下微型泵或其它植入装置；通过鞘内泵或鞘内注射；或通过硬膜外注射。
在具体的实施方案中，本发明方法通过外周给药含激动剂的药用组合物、含拮抗剂的药用组合物或所述两者实施。作为一个实例，含α肾上腺素能激动剂的药用组合物以及含选择性α-2A拮抗剂的药用组合物中的一者或两者可外周给药。这里所用的术语“外周给药”指将药剂引入受治疗者的中枢神经***以外。外周给药包括除了直接给药到脊柱或脑以外的任何给药途径。因此，鞘内给药和硬膜外给药以及颅侧注射或移植显然不在术语“外部给药”的范围内。另外，需清楚的是某些止痛剂可穿过脑血屏障，从而在外周给药后分布于整个中枢及外周神经***中。
外周给药可为局部或全身性的。局部给药导致释放到局部给药部位或其周围的药用组合物显著多于远离给药部位的区域。全身给药导致药用组合物主要释放到受治疗者的整个外周神经***中，并且根据组合物的性能可导致释放到中枢神经***中。
可用于本发明方法的外周给药途径包括，但不限于口服、局部给药、静脉内或其它方式的注射、以及植入微型泵或其它长效释放装置或剂型。用于本发明的药用组合物可外周给药，例如，以诸如片剂、口服液、胶囊、粉剂或其类似物等任何可接受的形式口服；通过静脉内、腹膜内、肌肉、皮下或肠胃外(parenteral)注射；通过皮肤扩散或电泳；以诸如滴剂、乳膏、凝胶或药膏等任何可接受的形式局部给药；以及通过微型泵或其它植入长效释放装置或剂型。
在某些实施方案中，本发明通过给药含有效量α肾上腺素能激动剂的药用组合物以及含有效量选择性α-2A拮抗剂的药用组合物实施。在所述“联合”治疗中，已知激动剂和拮抗剂可在相同或不同的药用组合物中以相同或不同的给药途径单独释放或同时释放。作为一个实例，激动剂和拮抗剂可口服给药，其中激动剂每天给药两次，拮抗剂每天给药一次。作为另一个实例，激动剂可硬膜外给药而拮抗剂口服给药。作为另外的实例，激动剂和拮抗剂可在静脉内合剂中同时给药。
本发明还提供一种筛选具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂的方法，其步骤为：将α-2A受体与具有止痛活性的α肾上腺素能激动剂接触；以及确定激动剂是否具有α-2A激动剂活性，其中无α-2A激动剂活性表明具有止痛活性的α肾上腺素能激动剂是具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂。
这里还提供一种筛选具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂的方法，其步骤为：将α-2A受体与试剂接触；确定该试剂是否具有α-2A激动剂活性；将α-2B受体与该试剂相接触；以及确定该试剂是否具有α-2B激动剂活性，其中无α-2A激动剂活性，同时存在有α-2B激动剂活性，表明试剂是具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂。
本发明还提供一种筛选具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂的方法，其步骤为：向具有至少野生型水平α-2A受体活性的对照动物外周给药α肾上腺素能激动剂；检测对照动物中止痛作用；向具有较低水平的α-2A受体表达或活性的相应动物外周给药与对照动物用药量相近或更大量的α肾上腺素能激动剂；以及检测具有较低水平的α-2A受体表达或活性的相应动物中止痛作用，其中对照动物中无止痛作用，同时具有较低水平α-2A受体表达或活性的相应动物中有止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂具有过量的α-2A激动剂活性，而其中对照动物中有止痛作用，同时具有较低水平α-2A受体表达或活性的相应动物中有止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂是一种具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂。在本发明的上述方法中，对照动物可为，例如在两个α-2A受体基因座均为野生型。在一例实施方案中，对照动物是野生型动物，例如野生型小鼠。多种相应动物均可用于本发明的筛选方法。在一例实施方案中，本发明用在α-2A受体基因座有纯合点突变的相应动物实施。在另一例实施方案中，本发明用α-2A受体编码序列中有点突变的相应动物实施。该点突变可发生在，例如类似于Asp79的残基中，并且可为，例如Asp79到Asn的突变。在另一例实施方案中，本发明用具有纯合α-2A基因敲除突变的相应动物实现。已知多套方法可用于本发明方法中止痛作用的检测，包括但不限于，硫前列酮敏化后检测止痛作用。
如果需要，本发明筛选产生无伴随镇静作用外周止痛的有效试剂的方法，其实施可通过(a)向具有至少野生型水平α-2A和α-2B受体活性的对照动物外周给药α肾上腺素能激动剂；(b)检测对照动物中的止痛作用；(c)向具有较低水平的α-2A受体表达或活性的相应动物外周给药与对照动物用药量相近或更大量的α肾上腺素能激动剂；(d)检测具有较低水平的α-2A受体表达或活性的相应动物中的止痛作用；(e)向具有较低水平的α-2B受体表达或活性的相应动物外周给药α肾上腺素能激动剂；并且(f)检测具有较低水平的α-2B受体表达或活性的相应动物中的止痛作用，其中对照动物中无止痛作用，同时具有较低水平α-2A受体表达或活性的相应动物中有止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂具有过量的α-2A激动剂活性，而其中对照动物中有止痛作用，具有较低水平α-2A受体表达或活性的所述相应动物中有止痛作用，同时具有较低水平α-2B受体表达或活性的相应动物中无止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂是一种具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂。
本发明还提供一种筛选具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂的方法，其步骤为：向具有至少野生型水平α-2B受体活性的对照动物外周给药α肾上腺素能激动剂；检测对照动物中止痛作用；向具有较低水平的α-2B受体表达或活性的相应动物外周给药α肾上腺素能激动剂；以及检测具有较低水平的α-2B受体表达或活性的相应动物中止痛作用，其中对照动物中有止痛作用，同时具有较低水平α-2B受体表达或活性的相应动物中无止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂是一种具有外周止痛作用同时没有伴随镇静作用的有效试剂。
本发明的上述方法可用多种对照动物实施，例如在两个α-2B受体基因座均为野生型的对照动物。在一例实施方案中，对照动物是野生型动物。在另一例实施方案中，对照动物为野生型小鼠。类似地，多种相应动物可用于本发明的筛选方法，包括具有杂合α-2B基因敲除突变或纯合α-2B基因敲除突变的相应动物。止痛作用可采用多种方法中的任何一种检测。在一例实施方案中，止痛作用在硫前列酮敏化后检测。
这里所用的术语“对照动物”指任何能体验疼痛的动物。例如，对照动物可表达野生型水平的内源α-2A受体或可表达α-2A受体转基因以及内源α-2A。当对照动物在两个α-2A受体基因座均为“野生型”时，该动物具有天然存在并以自然界中常见水平表达的α-2A受体序列。类似地，当对照动物在两个α-2B受体基因座均为“野生型”时，该动物具有天然存在并以自然界中常见水平表达的α-2B受体序列。
这里所用的术语“野生型动物”指诸如小鼠或大鼠等未经分子遗传学改变的动物。“野生型动物”可为自然界中的野生动物或者也可为具有充分鉴定的遗传***的纯系动物或其它实验室品系(strain)。
这里所用的术语“相应动物”指与对照动物同种的，具有较低水平α-2A受体表达或活性的，或具有较低水平α-2B受体表达或活性的动物。相应动物除了一个或多个α-2A受体基因座或一个或多个α-2B受体基因座通常与对照动物基因相同。作为非限制性实施例，相应动物可完全缺乏两个α-2A基因中的一个或两个，或两个α-2B基因中的一个或两个；也可在α-2A或α-2B受体编码序列中有缺失、***或点突变，并在5′或3′调节序列中有缺失、***或点突变，从而减少或消除α-2A或α-2B表达；或表达野生型水平的具有较低活性的α-2A受体或α-2B受体，例如具有Asp79到Asn突变的鼠科α-2A受体，从而破坏约80％的受体活性。因此，在一例实施方案中，本发明筛选方法的实施采用具有较低水平α-2A受体表达或活性的相应动物，所述表达或活性的降低源于在类似于Asp79的残基中的纯合点突变；所述“类似”残基指出现在鼠科α-2A受体同系物中同一相对位置上的天冬酰胺残基。由α-2A和α-2B基因敲除小鼠品系以及具有纯合点突变的品系所导致的较低水平α-2A受体表达或活性已为本领域所熟知或可通过标准方法制备(Hein等，Ann.NY Acad.Science 881：265～271(1999)；以及Kable等，J.Pharm.Exper.Therapeutics 293：1～7(2000))。
本发明的筛选方法部分依赖于外周给药α肾上腺素能激动剂到对照动物以及具有较低水平α-2A受体表达或活性的相应动物或具有较低水平α-2B受体表达或活性的相应动物或上述两种相应动物。已知向对照动物给药以及向一个或多个相应动物给药可同时或以任何顺序进行。类似地，已知检测止痛作用的两个或多个步骤可同时或以任何顺序进行。进行止痛作用的检测可采用任何已建立的或可重复的疼痛模型，包括但不限于那些在这里作为示例性的模型。已知对照动物和相应动物中止痛作用的检测在相同或相似的条件下进行。
下述实施例用于解释但不限制本发明。
                       实施例I
          α肾上腺素能激动剂和拮抗剂的制备
本实施例描述多种α肾上腺素能激动剂的合成，包括诸如具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂等具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂，以及选择性α-2A拮抗剂的合成。
A. 化合物1的合成
B. 化合物2的合成
C. 化合物3的合成
Figure A0381747200491
D. 化合物4的合成
E.化合物5的合成       P61～64
Figure A0381747200493
F.化合物6的合成
G.化合物7的合成
Figure A0381747200501
H.化合物8的合成
I.化合物9的合成
J.化合物10的合成
Figure A0381747200504
K.化合物11的合成
Figure A0381747200511
L.化合物12的合成
M.化合物13的合成
Figure A0381747200513
N. 化合物14的合成
Figure A0381747200521
在室温下将2-溴-5-氟苄基溴化物(3.0g，11mmol，1.0当量)溶于二甲基亚砜(100ml)中。向溶液中加入叠氮化钠(2.8g，44mmol，4.0当量)并回流加热反应混合物一天。用水冷却溶液，然后用乙酸乙酯萃取。合并有机萃取相，盐水洗涤后用硫酸钠干燥并真空浓缩。采用柱色谱法(10∶1的己烷/乙酸乙酯)净化分离得到叠氮化物(0.85g，34％)。将叠氮化物(0.85g，3.7mmol，1.0当量)溶于四氢呋喃(25ml)和水(5.0ml)中。向溶液中先后加入KOH(0.20g，3.6mmol，0.97当量)和三苯基膦(1.1g，4.4mmol，1.2当量)。反应混合物在室温下搅拌过夜。用盐酸(浓缩)冷却反应物并用乙酸乙酯萃取。合并水层并用氢氧化钠(粒状)调至碱性(pH到约14)。用乙酸乙酯萃取水层，合并有机相，盐水洗涤后用硫酸钠干燥并真空浓缩，从而得到橙色油状物的粗胺(0.36g，46％)。
将2-溴-5-氟苄基胺(0.35g，1.7mmol，1.0当量)溶于四氢呋喃(20ml)中并在室温下搅拌过夜。在真空中除去溶剂并用水(30ml)溶解浓缩物。溶液回流加热过夜，然后冷却至室温。向溶液中加入氢氧化钠(粒状)直至pH达到～14。用乙酸乙酯萃取溶液，合并有机相，盐水洗涤并用硫酸钠干燥。溶液真空浓缩。浓缩液用柱色谱法(30∶1的用氨水饱和的氯仿/甲醇)净化。分离出的产品为白色固体。H NMR(300MHz，CDCl3w/TMS)：δ7.46～7.50(m，1H)，7.16～7.19(m，1H)，6.83～6.90(m，1H)，4.43(s，2H)，4.31(t，2H，J＝8.5Hz)，3.79(t，2H，J＝8.8Hz)。
                         实施例II
采用α肾上腺素能激动剂外周治疗α2-A受体基因敲除鼠中的疼痛
本实施例表明当在无α-2A受体激活时外周给药的α肾上腺素能激动剂是有效的止痛剂。
A. 外周给药的α肾上腺素能激动剂是α-2A基因敲除鼠中有效的止痛 剂
采用硫前列酮敏化疼痛的鼠模型检测α-2A受体缺乏(“基因敲除”)小鼠中的非特异性α肾上腺素能激动剂(Hein等，supra，1999)，所述模型中的异常疼痛由向有意识的鼠中鞘内给药选择性***素E2受体激动剂引起，基本如Minami等，Pain 57：217～223(1994)所述。在上述模型中，用画笔敲打肋腹引起的疼痛响应次数在脊柱给药硫前列酮及鞘内或腹膜内给药药物或对照载体的15分钟后，于35分钟内达到八次。硫前列酮引起12～13分(总分为16分)的“疼痛”。
与以前的临床数据一致的是，在野生型小鼠中鞘内注射可乐定、溴莫尼定(UK14304)或引起强烈反应的α肾上腺素能激动剂“化合物1”可产生显著的与无镇静作用的止痛作用。此外，向α-2A基因敲除鼠中鞘内注射可乐定、溴莫尼定或“化合物1”不产生止痛作用，这与脊柱给药α肾上腺素能激动剂的治疗靶标是在脊柱的背角中表达的α-2A受体是一致的。图1A和1B表示的是在野生型小鼠和α-2A基因敲除小鼠中鞘内给药1μg“化合物1”获得的结果。该结果表明由非选择性α肾上腺素能激动剂产生的中枢介导止痛作用需要α-2A受体。
与鞘内注射得到的结果相反，腹膜内注射30μg/kg的“化合物1”以及可乐定或溴莫尼定未在野生型小鼠中产生无镇静作用的止痛作用。然而，在α-2A基因敲除鼠中，采用可乐定、UK14304或“化合物1”的外周(腹膜内)治疗产生显著的无镇静作用的止痛作用。如图1 C和1D，表示当采用外周给药时，“化合物1”仅在α-2A基因敲除小鼠，而未在野生型动物中产生止痛作用。这些结果表明，当在无α-2A受体激活时，外周给药的α肾上腺素能激动剂可产生无显著镇静作用的止痛作用。
野生型小鼠和α-2A基因敲除鼠还采用100μg/kg的α肾上腺素能激动剂和“化合物2”治疗，与可乐定、溴莫尼定、“化合物1”及PAC不同的是，“化合物2”只有很小的α-1活性，并且在体外检测中仅微弱激活(具有溴莫尼定40％相对功效)α-2A受体。与可乐定相同的是，“化合物2”易于穿过血脑屏障。在野生型小鼠中，腹膜内给药的“化合物2”无止痛作用，但在α-2A基因敲除鼠中，当其以相同途径给药时完全具有止痛作用(如图2)。这些结果表明当α-2A受体激活被阻断时，多种具有不同α-1和α-2受体活性以及生物利用度的α肾上腺素能激动剂可为有效的外周止痛剂。
如上面所公开的，由α肾上腺素能激动剂激活α-2A受体屏蔽了这些分子的外周止痛活性。为测试屏蔽作用是否有赖于脊柱或外周的局部α-2A受体，向小鼠鞘内或腹膜内注射“化合物1”，“化合物1”是一种引起强烈反应，并且不易穿过血脑屏障的α肾上腺素能激动剂。如上面指出的，在野生型小鼠中产生显著止痛作用的是鞘内注射，而不是腹膜内注射，但在α-2A基因敲除鼠中则正好相反：产生止痛作用的是腹膜内注射，而不是鞘内注射。类似地，另一种产生强烈反应且不易穿过血脑屏障的α肾上腺素能激动剂即对氨基可乐定(PAC)，当外周给药100μg/kg时，也可在α-2A基因敲除鼠中产生止痛作用。这些结果表明诸如pan激动剂的非选择性α肾上腺素能激动剂的新止痛活性通过阻断外周α-2A受体的激活而被显现。
野生型小鼠和α-2A基因敲除小鼠中异常疼痛的检测基本按照Yaksh和Harty，J.Pharmacology Exp.Ther.244：501～507(1998)的方法进行。简言之，将小鼠分为5～6只动物一组。向对照小鼠给药5ul的DMSO，而向治疗动物注射5ul的含各种剂量的指定药剂的DMSO。鞘内注射后，将各小鼠置于地板上有木屑的单独的13×8.5×13cm的树脂玻璃箱中观察。在50分钟内，每5分钟估算其异常疼痛一次，并在15～50分钟的期限内记录其响应八次。异常疼痛的估算通过用小画笔轻轻敲打小鼠的肋腹进行，其评分如下：0，没有响应；1，轻声尖叫并企图逃离敲打探针；以及2，敲打探针引起大声尖叫，撕咬探针并努力逃窜。将各动物的八个分数相加，并算出每组的平均值以给出平均总分。
B.外周α-2受体介导α-2A基因敲除鼠中止痛作用
在α-2A基因敲除鼠中，检测非选择性α-2拮抗剂和萝芙素对由对氨基可乐定(PAC)所产生的外周止痛作用的影响能力。通过腹膜内注射100μg/kg的PAC治疗硫前列酮敏化的α-2A基因敲除小鼠。如上所述，PAC在α-2A基因敲除小鼠中产生显著的止痛作用。然而，PAC的止痛作用由腹膜内注射的萝芙素(0.3μg/kg)阻断，如图3所示。这些结果表明外周α-2受体介导α-2A基因敲除小鼠中的止痛作用。
通过在暗室中估算探索行为(exploratory behavior)分析其镇静作用，如下所示。称量小鼠的体重，以指定剂量通过鞘内注射5μl或腹膜内注射1ml/kg给药待测化合物。在注射后的5～30分钟，即测量止痛作用相应的指定时间点，通过将小鼠置于数字通讯分析测试室(digicom analyzer chamber)(Omnitech Electronic；Clumbus，OH)中自动测定动物的活性。数字通讯分析测试室的箱体中有相互交叉的光电池光束，它们随着动物的移动而被打断；通过提高地板水平为小鼠调节测试室。计算机对总的动物移动的分析持续5分钟。由于习得行为(learned behavior)可影响数据，因此任何给定动物在该分析方法中使用的次数不超过两次。所有动物在研究间隔内休息至少两周。
                     实施例III
通过在基因未改变的动物中外周给药α肾上腺素能激动剂缓解疼痛
本实施例表明α肾上腺素能激动剂可在具有野生型α肾上腺素能受体的动物中通过外周给药产生显著的止痛作用，其运动神经或肌肉活性的减少小于20％。
A.选择性α-2A拮抗剂可与外周给药的α肾上腺素能激动剂一起使用 产生止痛作用
钟氏大鼠神经结扎模型是一种公认的外周神经痛模型。在钟氏模型中，左脊柱神经L-5和L-6的部分结扎产生对轻抚受影响左脚的长期超敏反应。该超敏反应与患有灼痛神经病症(neuropathiccondition of causalgia)的人类所经历的疼痛相似。
通过鞘内注射向钟氏大鼠给药时，pan-α-2激动剂可乐定产生显著的与镇静作用分离的止痛作用，而腹膜内给药仅产生不明显的无镇静作用的止痛作用。此外，还检测了不易穿过血脑屏障的化合物—“化合物1”和PAC在钟氏大鼠模型中的活性。和预料的一样，上述两种化合物以不产生镇静作用的剂量外周给药时均无显著的止痛作用。
可乐定与选择性α-2A拮抗剂“化合物13”的协同给药使腹膜内给药的可乐定的止痛剂量响应转移到左侧；当可乐定与0.3μg/kg的“化合物13”一起给药时，仅需30μg/kg就能产生显著的异常疼痛的逆转(如图4A所示)。该浓度的可乐定可使活性降低，但与无“化合物13”时逆转异常疼痛的100μg/kg的剂量相比，几乎不产生镇静作用。类似地，“化合物2”以100μg/kg单独外周给药到钟氏大鼠时也不产生止痛作用，但在与0.3μg/kg α-2A拮抗剂“化合物13”协同给药时可产生显著的止痛作用，如图4B所示；在该浓度未观察到显著的镇静作用。将上述结果结合起来考虑，表明选择性α-2A拮抗剂可与α肾上腺素能激动剂一起给药以显现α肾上腺素能激动剂新的独立于α-2A受体的外周止痛性能。
具有一定α-2A激动剂活性的α-2B/C选择性激动剂外周给药到钟氏大鼠时不能产生显著的与镇静作用分离的止痛作用。如上面所公开的，硫酮“化合物2”具有微弱的α-2A激动剂活性，但其在无α-2A拮抗剂时外周给药则无止痛活性。该结果表明α肾上腺素能激动剂的外周止痛活性有赖于极低水平的α-2A受体激活。
约20分钟的钟氏大鼠外科手术基本按如下方法进行。将重100～120克的雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠用异氟烷麻醉。把毛刮净并用聚烯吡酮磺准备好手术部位后，从胸椎XIII向下到骶骨切开，并使肌肉从L4到S2水平的脊椎骨(左侧)上分离。找到L6脊椎骨，用小骨钳仔细横切除去，使得可目视辨别L4～L6脊柱神经。隔离L5～L6脊柱神经并用6-0丝线紧紧结扎起来；确定止血完全后缝合伤口。在切开区域涂抹少量抗生素药膏后，将动物转移到调热-温灯下的塑料恢复笼中。手术后不采用任何局部***治疗动物。
钟氏模型大鼠中疼痛的估算采用轻度触觉刺激(弗雷氏毛VonFrey Hair)影响经手术的爪进行，方法如下。通过采用恰好足够使其弯曲的力将弗雷氏毛以上下方式附到经手术的爪脚底板上以建立50％的疼痛阀值。如果爪收缩敏捷，则记录此积极响应。采用Dixon等，Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.20：441～462(1980)中的方法测定50％的爪收缩阀值。比较给药后阀值与给药前阀值，并以15.1克的正常阀值为基础计算触觉敏感性的逆转百分比。其结果表述为％异常疼痛逆转，该值反映了相对于正常鼠(100％)的疼痛阀值的逆转百分比。
用未动手术的雄性SD大鼠估算镇静作用。称量大鼠的体重，并以指定剂量通过鞘内注射或腹膜内注射给药化合物。在注射后5～30分钟的指定时间点，通过将大鼠置于数字通讯分析测试室(OmnitechElectronic)中自动测定动物的活性。总活性的分析方法如上所述。
B.具有最低限度α-2A活性的多种结构类别的α-2B/C选择性化合物 经外周给药缓解疼痛
外周给药具有最低限度α-2A激动剂活性的多种结构类别的α肾上腺素能激动剂并检测其在钟氏大鼠模型中缓解疼痛的能力。表2是采用硫酮“化合物3”、咪唑啉酮“化合物4”、噻唑“化合物5”、恶唑“化合物6”、硫脲“化合物7”以及4-咪唑“化合物14”所获得的结果。这些化合物虽然结构各异，但均为具有最低α-2A激动剂活性的α2-B/C选择性α肾上腺素能激动剂。作为实施例，“化合物14”为一种具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B选择性激动剂，但却同时具有显著的α-1激动剂活性。
如表2所示，上述各种化合物在以不显现显著镇静作用的剂量外周给药时产生了止痛活性。相反地，多种具有α-2A活性的α肾上腺素能激动剂经检测并未在腹膜内注射给药时产生与镇静作用分离的止痛作用。这些结果证实具有最低限度α-2A活性的多种结构类别的α肾上腺素能激动剂具有能产生无伴随镇静作用的外周介导止痛作用的特征。
                                                                        表2钟氏大鼠模型中最高异常疼痛的逆转
      化合物 最高异常疼痛的逆转(剂量) 镇静作用(1mg/kg)
    “化合物3” 81％+/-10％(300μg/kg) NS*
    “化合物4” 80％+/-6.5％(100μg/kg) NS*
    “化合物5” 77％+/-8.3％(30μg/kg) NS*
    “化合物6” 92％+/-5.2％(100μg/kg) NS*
    “化合物7” 60％+/-8.0％(3μg/kg) NS*
    “化合物14” 77％+/-6.2％(100μg/kg) NS*
                                                                  *无显著效果
通过采用单剂腹膜内给药20μg/kg～100μg/kg的可乐定及1～1000μg/kg的“化合物3”，对可乐定以及“化合物3”的镇静和止痛剂量的响应曲线进行充分比较。测定异常疼痛逆转的百分比及总活性的降低，方法如上所述。如图4C所示，可乐定镇静作用发生的剂量比产生止痛作用的剂量低。具体而言，可乐定以产生显著止痛作用的100μg/kg给药时具有很强的镇静作用。这些结果表明可乐定外周给药所产生的止痛作用无法与镇静作用分离。相反地，图4D的结果表明“化合物3”产生显著的无镇静作用的止痛作用。特别地，在比产生强异常疼痛逆转的剂量大100倍的剂量下未出现镇静作用。这些结果表明具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B肾上腺素能激动剂可产生无伴随镇静作用的80％的异常疼痛的逆转。
总而言之，这些结果表明无显著止痛活性的非选择性α肾上腺素能激动剂在与阻止α-2A受体激活的药剂一起全身给药后，可转变为产生无伴随镇静作用的止痛作用的非常有效的药剂。这些结果还表明仅有最低α-2A受体激动剂活性的选择性α-2激动剂的止痛作用与前述的α肾上腺素能药剂的止痛作用不同。
                        实施例IV
                    慢性疼痛的长期缓解
本实施例表明具有最低限度α-2A活性的α肾上腺素能激动剂介导慢性疼痛表型的长期逆转。
A.钟氏模型大鼠中长期的疼痛遡转
检测结构不同的α肾上腺素能激动剂于长期给药后，在钟氏模型大鼠中所产生的长期缓解慢性疼痛的能力。具体而言，采用皮下渗透微型泵向钟氏模型动物给药七天，包括载体对照或0.1mg/kg/小时的下述具有最低限度α2-A活性的α肾上腺素能激动剂：“化合物8”、“化合物9”、“化合物3”或“化合物4”。在药物治疗期间观察疼痛的缓解；例如，“化合物8”缓解异常疼痛90～100％，而“化合物9”缓解异常疼痛60～80％，如图5A所示。值得关注的是，这些化合物以及“化合物3”和“化合物4”的止痛作用在治疗后持续一个月以上。经治疗的动物表现出治愈的行为迹象，与未治疗的或载体治疗的大鼠不同的是，它们不再保护经手术的爪，并将其平放在笼子的底部。
口服给药三天后也观察到疼痛长期的缓解。在连续三天的8a.m.到6p.m.之间，通过口服管饲法向钟氏模型大鼠给药0.3mg/kg的“化合物8”三次。获得70％～80％的异常疼痛的逆转，并且在接下来的为期三个多星期的测试中，异常疼痛未见增加。这些结果显示，与单剂腹膜内给药或口服给药诸如“化合物8”的α-2B/C激动剂所获得的短期的疼痛缓解相反，重复给药具有最低限度α2-A激动剂活性的α-2B/C选择性激动剂获得长期的止痛作用。
进行钟氏手术，其疼痛的估算如上所述。通过渗透微型泵给药的药物按如下方式释放。将ALZET(Cupertino，CA)微型泵(#1007D型)植入大鼠背部皮下的肩胛骨间。手术前用测试液体注满泵，手术在无菌条件下进行并使用已消毒的手术器械。用异氟烷麻醉大鼠并过其肌肉在肩胛骨间沿中线切开后，皮下囊即暴露出来。将微型泵植入暴露的囊中，用U形骨钉缝合伤口并使动物在暖光下恢复。
ALZET渗透微型泵(1007D型)可容纳100μl的总体积并在指定大鼠中于指定时间段内以0.5μl每小时的速度释放药物。药物以指定速度给药，通常为100μg/hr/kg，并且溶于50％的DMSO中，其在泵中的浓度依动物的重量而定。泵在植入后的七天移除。
B.止痛作用的持续时间长于药物在血浆中的保留时间
为确定持续的异常疼痛的逆转是否因为药物继续存在于动物体内，采用皮下渗透微型泵用0.1mg/kg/小时的“化合物8”治疗大鼠七天。在泵植入后的第3天、第6天、第8天、第10天和第14天取样并通过液相色谱-串联质谱仪(LC-MS/MS)测定“化合物8”的血浆浓度。如图5所示，在第10天检测到最低的药物水平，并且在第14天血浆中已无残留药物。这些结果表明长期给药后，即使血浆中无药物水平，也可获得疼痛的缓解。
C.长期给药后止痛作用不需要受体激活作用
用“化合物8”通过渗透微型泵治疗七天或口服管饲法持续治疗三天的钟氏模型大鼠表现出长期的异常疼痛的缓解。在不同时间点检测α-2拮抗剂萝芙素阻止抗异常疼痛作用的能力。令人关注的是，如图6A所示，0.3μg/kg i.p.的萝芙素在治疗的第三天注射时，会阻止“化合物8”的止痛活性，但在第四天则不会。
类似地，口服给药0.3mg/kg的“化合物8”三天，每天三次。在最后一次给药后14小时的早晨进行止痛作用的估算。在第二天和第三天，于早晨第一次给药“化合物8”前检测时，钟氏模型大鼠表现出完全的触觉异常疼痛。然而，如图6B所示，在第四天的早晨，异常疼痛显著降低，并且未在测试期限内再次出现。
这些结果表明给药具有最低限度α-2A活性的α肾上腺素能激动剂后的数天，不再需要药物维持止痛活性。这些结果还表明足够引起长期止痛作用的受体激活可为连续的或间断的。
D.长期的疼痛缓解不是止痛剂的共性
检测了多种缓解急性疼痛的药物在钟氏大鼠中对疼痛的长期缓解作用。具体而言，向钟氏模型大鼠以急剧缓解模型中触觉异常疼痛的剂量给药抗痉挛药物卡巴番定(3mg/kg，口服，每日三次，三天)、抗镇静药物阿米替林(0.1mg/kg/小时，输注微型泵，七天)、以及两种具有α-2A活性的非选择性α肾上腺素能激动剂，溴莫尼定(0.04mg/kg/小时，输注微型泵，七天)和“化合物1”(0.1mg/kg/小时，输注微型泵，七天)。在上述所有情况下，异常疼痛均于治疗停止前后完全反复。
然而，如图7A所示，当溴莫尼定或“化合物1”与0.2mg/kg/天的α-2A选择性激动剂“化合物13”协同给药时，在给药期间观察到更高的止痛作用，并且该止痛作用持续到给药完成以后。这些结果表明与选择性α-2A拮抗剂一起给药的具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂或非选择性α肾上腺素能激动剂可在长期给药后产生长期的止痛作用，而上述效果是具有α-2A激动剂活性的类似化合物所无法达到的。
E.班尼特部分坐骨神经结扎模型中长期的疼痛缓解
在神经痛的第二大鼠神经损伤模型，即班尼特部分坐骨神经结扎模型中测试α-2B/C选择性激动剂“化合物8”。上述大鼠模型产生与人类相似的具有痛觉紊乱的外周单神经病变(Bennett和Xie，Pain33：87～107(1988))。在班尼特模型中，神经损伤由散系在触觉神经上的束紧结扎线产生，从而导致神经末梢对压缩有疼痛感。异常疼痛和痛觉过敏由压伤以及自发性疼痛感产生(Bennett和Xie，Supra，1988)。具体而言，冷痛即冷刺激产生的疼痛感是痛觉改变的一种表现：与对照动物相反，班尼特模型动物常常将手术后的爪抬离寒冷的地板。
通过渗透微型泵给药“化合物8”四天。如图7B所示，冷痛在四天的治疗期及泵移除后三个多星期的测试期内均完全缓解。这些结果表明诸如“化合物8”的具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2肾上腺素能激动剂具有适用于不同类型神经痛的止痛性能。
约20分钟的班尼特手术按如下方式进行。雄性SD大鼠(约250～300克)用异氟烷/氧气吸入法麻醉。将毛刮净并涂抹聚烯吡酮磺准备好手术部位后，在骨盆带中线左侧轻轻切开。左侧髋关节的近尾部和腹部可见到肌肉群微弱的分离(separation)，在该肌肉群分离的正下方切一小口(约10～25mm)。将肌肉直接分开直至看到平行于股骨长度方向的触觉神经。用四根结扎线(6/0，丝质)松散地系住触觉神经，结扎线间的间隔为约1mm，然后仔细地将7～10mm长的触觉神经从下层组织中清除。结扎线系紧的程度使神经直径略微收缩并阻碍但不阻止血液的流动。清除多余的缝合材料，使肌肉群合在一起，并用缝合夹使皮肤切口愈合，该缝合夹在手术后10～14天除去。手术后不对动物进行任何局部麻醉。
通过渗透微型泵实现慢性药物给药，所述微型泵在上述班尼特手术后的一周植入大鼠的背部皮下。手术七天后对班尼特动物中疼痛的响应进行估算，方法如下。为估算对热刺激的响应，将大鼠置于明亮的塑料室(18cm×29cm×12.5cm)下冷硬的(0～4℃)金属地板上，所述环境对普通动物无害，记录5分钟内经手术的爪抬离寒冷地板的次数。试验当天，在不麻醉的情况下向大鼠给药测试药物(在1～1000μg/kg的剂量内以1ml/kg的IP或PO给药)。在某些情况下，用于随后三个多月试验的动物需在研究间隔休息至少三天。
F.肠道激惹综合征模型中长期的疼痛缓解
本实施例表明诸如“化合物8”的具有最低限度α-2活性的α-2肾上腺素能激动剂可在慢性内脏超敏反应的鼠模型中缓解疼痛。
慢性内脏超敏反应的公认模型在Al-Chaer等，Gastroenterology119：1276～85(2000)有描述。简而言之，通过在新生雄性SD大鼠出生后的8～21天向结肠囊反复充气使结肠囊膨胀到20～80mmHg的压力范围内，从而使新生雄性SD大鼠的结肠敏化。三个月后，通过肌电图(EMG)记录下的腹壁肌肉的情况衡量成年大鼠对分级结肠扩张(CRD)的腹部收缩反射(AWR)响应。敏化大鼠同时表现出异常疼痛和痛觉过敏，表明敏化大鼠对通常无疼痛水平的囊充气(20mmHg)以及疼痛性刺激(40～80mmHg)有过激响应，这与人类肠道激惹综合征患者的内脏疼痛症状相似。未敏化的动物对20mmHg的囊充气几乎没有响应，而对80mmHg的CRD表现出EMG强度单位为1的适度响应。各水平的CRD每四分钟持续进行20秒，共重复5次。
将皮下微型泵植入包括8～10只正常和敏化成年SD大鼠(约3个月大)的试验组中，以在7天时间以100ug/kg/小时释放50％的DMSO或溶有“化合物8”的50％的DMSO。通过在泵植入前，皮下输注的第二天和第五天，以及泵移除后的两天、一周、两周和四周记录腹部EMG，测量对分级系列的结肠扩张(20、40、60、80mmHg)的腹部收缩反射。
如图8A和8B所示，未敏化对照大鼠用50％的DMSO载体(图8A)或“化合物8”(图8B)治疗后，其EMG响应与治疗前的水平相比，未发生显著改变；EMG强度在约0～约1.5的范围内。相反地，敏化大鼠中的EMG响应大很多，其强度在约1～3.5的范围内(如图8C和8D)；该敏化大鼠中较大的疼痛响应在用载体治疗后未降低，如图8C所示。相反地，在用“化合物8”治疗期间及以后，敏化大鼠中较大的EMG响应完全缓解。如图8D所示，疼痛降低到0～1.5，这与未敏化大鼠中的水平一致。此外，结肠的异常疼痛以及痛觉过敏在测试期间，即药物治疗停止后的4周未再出现。
这些结果表明具有最低限度α2-A活性的α-2肾上腺素能激动剂可用于诸如肠道激惹综合征疼痛等结肠疼痛的长期缓解。这些结果还表明观察到的止痛作用不只对外周神经痛有效，并且具有最低限度α2-A活性的α-2肾上腺素能激动剂或与选择性α2-A拮抗剂一起给药的α-2肾上腺素能激动剂，可用于治疗多种类型的急性和慢性疼痛，例如神经痛、内脏疼痛、炎症疼痛、手术后疼痛和癌症疼痛。
                    实施例V
外周α肾上腺素能激动剂的止痛活性由α-2B受体介导
本实施例表明外周α肾上腺素能激动剂的止痛活性可由α-2B受体的激活介导。
在野生型小鼠中，腹膜内给药可乐定(500μg/kg)缓解硫前列酮引起的触觉异常疼痛，但同时产生伴随镇静作用。相反地，腹膜内给药具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂“化合物3”(100μg/kg)则在缓解硫前列酮引起的触觉异常疼痛的同时不产生伴随镇静作用。采用最小的弗雷氏毛以1.65克力测定上述剂量的可乐定和“化合物3”在α-2B杂合(-/+)和纯合(-/-)基因敲除小鼠中的止痛作用。在上述力的作用下，最小的弗雷氏毛在未治疗的α-2B基因敲除小鼠或其野生型同窝出生的小鼠中未引起疼痛响应。异常疼痛的估算及评分如上所述。
如图9所示，可乐定能缓解杂合型及纯合型α-2B基因敲除品系中的异常疼痛，这和其在野生型小鼠中的效果没有差别；并且止痛作用也伴有镇静作用。相反地，“化合物3”在杂合型或纯合型α-2B基因敲除小鼠(图9)中无止痛作用。采用其它化合物也得到了相似的结果。具体而言，与可乐定相同的是，α肾上腺素能pan激动剂—溴莫尼定在α-2B基因敲除小鼠中有止痛作用，而“化合物8”，一种具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂在杂合型或纯合型α-2B基因敲除小鼠中则未表现出止痛活性。
这些结果表明具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的止痛机理与α肾上腺素能pan激动剂的止痛机理不同。这些结果还表明外周α肾上腺素能止痛活性由α-2B受体激活介导。
                       实施例VI
      α-2B和α-2B/C选择性α肾上腺素能激动剂的特征
本实施例描述“化合物3、11和4”的受体亚型选择性、口服止痛活性以及无镇静作用和心血管副作用。
A.化合物“3、11和4”的受体亚型选择性
如表3所示，“化合物3、11和4”对α-2肾上腺素能受体均有选择性，而在α-1受体中的活性很小或没有活性。此外，上述各种化合物是α-2B/C选择性化合物，并且在体外RSAT检测中未在α-2A受体内显示出可观察到的活性。“化合物4”对α-2B受体有选择性，其在α-2B受体中的活性比在α-2C受体中的活性大10倍。“化合物3”是α-2B受体特异性的，因为其具有在α-2B受体中的活性比α-2C受体中的大100倍的特征。
                                                                     表3α肾上腺素能受体的选择性
                                     RSAT活性(nM)/％功效
  化合物/类别     2A     2B     2C     1A     1B     1D
  “化合物3”硫酮/外消旋 NA     24(90％) ＞2000 ＞2000 NA ＞2000
  “化合物11”硫酮 NA     42(80％)     247(0.3) 1713 NA ＞2000
  “化合物4”咪唑啉酮 NA     15(100％)     202(0.5) NA NA ＞2000
                             NA＝无活性(EC50≥10,000)
B.化合物“3、11和4”的口服止痛活性
如上所述，向钟氏模型大鼠口服给药各种浓度的“化合物3、11和4”。如图10A所示，30μg/kg的口服“化合物3”产生70～100％的异常疼痛的逆转。止痛作用在不超过20分钟的时间很快观察到。并且，当作为口服单剂给药时，其效果非常短暂，止痛作用在给药后的2小时基本消失。图10B显示在钟氏大鼠模型中口服的“化合物11”也可缓解疼痛。0.1mg/kg的剂量足以将异常疼痛降低约60～90％。并且单口服给药后2小时，止痛作用也消失了。如图10C所示，“化合物4”在缓解疼痛时表现出线性剂量响应：30μg/kg的剂量足以产生止痛作用，并且以0.3mg/kg的“化合物4”给药，逆转约60～80％的异常疼痛。以1mg/kg给药时，异常疼痛逆转的程度更大，并且疼痛缓解持续的时间也更长。然而，即使以最高剂量给药(图10C)，四小时后也基本观察不到疼痛的缓解。这些结果证实具有最低限度α-2A活性的α肾上腺素能激动剂在口服给药时可作为止痛剂。
C.化合物3、11和4”的长期疼痛缓解
通过渗透微型泵给药“化合物3、11和4”五天。药物给药在第五天停止，并同时移除微型泵。在约1个月内检测异常疼痛。如图11所示，三种化合物均获得约80％的异常疼痛的逆转。并且，“化合物11和4”的止痛作用在整个四周的测试期内基本维持在相同水平。这些结果表明“化合物3、11和4”是长期疼痛缓解的有效止痛剂，并且还证实，长期给药后，具有最低限度α-2A活性的α肾上腺素能激动剂可用于治疗慢性疼痛。
D.“化合物3、11和4”的副作用
以1mg/kg腹膜内给药“化合物3、11和4”，所述剂量高于产生最高异常疼痛逆转所需的剂量(如表2)。按照上述方法检测镇静作用。此外，检测这些化合物以0.5mg/kg静脉内给药或3mg/kg口服给药时在猴中的心血管副作用，并检测“化合物3”在大鼠中的心血管副作用。通过测试以0.1mg/kg的剂量腹膜内协同给药的可乐定对镇静作用的逆转估算3mg/kg剂量所缺乏的α-2拮抗剂活性。
如表4所示，“化合物3、11和4”以高于达到60～90％异常疼痛逆转所需剂量的指定剂量给药时，未观察到显著的镇静作用或心血管副作用。
                                                                       表4镇静作用和心血管副作用
化合物 大鼠的镇静作用(i.p.) 镇静作用的逆转(i.p.) 猴的心血管(BP，HR) 鼠的心血管(BP，HR)
化合物3 NS*1mg/kg NS3mg/kg     NS 0.5mg/kgiv   NS 3mg/kgi/a
化合物11 NS1mg/kg NS3mg/kg     NS 0.5mg/kgivNS 3mg/kg po -
化合物4 NS1mg/kg NS3mg/kg     NS 3mg/kg po        -
                                                         *无显著作用
在重约4kg的六只猕猴中检测指定给药剂量的心血管作用，化合物通过静脉内或腹膜内给药。称量猕猴的体重，并向其注射浓度约为0.1ml/kg的静脉内定量给药溶液或1.0ml/kg的腹膜内定量给药溶液。静脉内注射通过头臂静脉进行。在给药前及给药后的0.5、1、2、4和6小时用BP 100S自动血压计(Nippon Colin，日本)测量血压和心率。在大鼠中测定心血管作用，方法如Altman等，Mol.Pharm.56：154～161(1999)所述。
这些结果表明具有最低限度α-2A活性的α肾上腺素能激动剂的止痛作用可在无显著镇静作用或心血管副作用的情况下获得。
                       实施例VII
           “化合物3和4”的对映异构体的止痛活性
本实施例表明具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的对映异构体可表现出不同的止痛活性。
“化合物3和化合物4”的对映异构体的制备如上述实施例I所示，并分别称为“化合物10”和“化合物12”。检测两种对映异构体和母体外消旋化合物在向钟氏模型大鼠腹膜内给药后的止痛活性。如图12A所示，“化合物3”的(-)对映异构体(称为“化合物10”)产生异常疼痛的逆转，而(+)对映异构体则没有产生。(-)对映异构体在缓解疼痛时与母体外消旋混合物一样有效。
类似地，图12B显示不同浓度的各种对映异构体和母体激动剂化合物4通过腹膜内给药在钟氏模型大鼠中获得的异常疼痛逆转的百分比。如图所示，所有测试剂量的(+)对映异构体(称为化合物12)在降低异常疼痛时与母体化合物至少一样有效。
这些结果表明α-2B/2C选择性激动剂的对映异构体可表现出不同的止痛活性并且还表明“化合物3”的(-)对映异构体和“化合物4”的(+)对映异构体均为有效的止痛剂。
上面以圆括号或其它方式提供的所有期刊文章、参考文献和专利引用，不论先前申明与否，均以援引方式完整纳入本申请。
虽然已结合上面提供的实施例描述了本发明，但应理解在不偏离本发明精神的情况下，可对其进行各种改进。相应地，本发明仅受权利要求的限制。

Claims (114)

1.一种缓解受治疗者疼痛的方法，包括
向所述受治疗者给药包括有效量的α肾上腺素能激动剂的药用组合物和包括有效量的选择性α-2A拮抗剂的药用组合物。
2.根据权利要求1的方法，其特征在于所述疼痛是神经痛。
3.根据权利要求2的方法，其特征在于所述疼痛由糖尿病神经病变引起。
4.根据权利要求1的方法，其特征在于所述疼痛是内脏疼痛。
5.根据权利要求1的方法，其特征在于所述疼痛是手术后疼痛。
6.根据权利要求1的方法，其特征在于所述疼痛由癌症或癌症治疗引起。
7.根据权利要求1的方法，其特征在于所述疼痛是炎症疼痛。
8.根据权利要求7的方法，其特征在于所述疼痛是关节疼痛。
9.根据权利要求7的方法，其特征在于所述疼痛是肠道激惹综合征疼痛。
10.根据权利要求1的方法，其特征在于所述疼痛是头痛。
11.根据权利要求1的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂是pan-α-2激动剂。
12.根据权利要求11的方法，其特征在于所述pan-α-2激动剂是pan-α-1 pan-α-2激动剂。
13.根据权利要求1的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂是一种化合物，选自可乐定、溴莫尼定、替扎尼定、dexemedetomidine、去甲肾上腺素、由分子式
Figure A038174720002C1
[“分子式1”]表示的化合物，由分子式
[“分子式2”]表示的化合物及其所有可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。
14.根据权利要求1、11、12或13的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂是4-咪唑或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
15.根据权利要求14的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂是分子式
[“分子式13”]表示的化合物或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
16.根据权利要求1的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂是BRL48962或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
17.根据权利要求1的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂是外周受限的。
18.根据权利要求1的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂和所述选择性α-2A拮抗剂通过外周给药。
19.根据权利要求1或权利要求18的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂通过口服给药。
20.根据权利要求1或权利要求18的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂通过口服给药。
21.根据权利要求1或权利要求18的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂通过皮下微型泵给药。
22.根据权利要求1或权利要求18的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂通过皮下微型泵给药。
23.根据权利要求1的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂和所述选择性α-2A拮抗剂在至少三天时间重复或连续给药。
24.根据权利要求23的方法，其特征在于疼痛的缓解可在所述受治疗者中无显著α肾上腺素能激动剂水平时持续。
25.一种止痛组合物，包括具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂，所述激动剂具有产生无伴随镇静作用的外周止痛作用的能力。
26.根据权利要求25的止痛组合物，其特征在于所述外周止痛作用足以将疼痛降低至少50％且无伴随镇静作用。
27.根据权利要求26的止痛组合物，其特征在于需要比将疼痛降低至少50％所需的剂量大至少10倍的剂量以将运动神经或肌肉活性减少20％。
28.根据权利要求27的止痛组合物，其特征在于需要比将疼痛降低至少50％所需的剂量大至少100倍的剂量以将运动神经或肌肉活性减少20％。
29.根据权利要求28的止痛组合物，其特征在于需要比将疼痛降低至少50％所需的剂量大至少1000倍的剂量以将运动神经或肌肉活性减少20％。
30.根据权利要求25或权利要求26的止痛组合物，其特征在于基本无低血压作用。
31.根据权利要求25或权利要求26的止痛组合物，其特征在于所述激动剂不是硫脲或其衍生物。
32.根据权利要求25或权利要求26的止痛组合物，其特征在于所述激动剂不是硫脲或4-咪唑或其衍生物。
33.一种缓解受治疗者疼痛的方法，包括向所述受治疗者外周给药包括有效量的具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的药用组合物，从而产生无伴随镇静作用的外周止痛。
34.根据权利要求33的方法，其特征在于所述外周止痛足以将疼痛降低至少50％且无伴随镇静作用。
35.根据权利要求33或权利要求34的方法，其特征在于所述外周止痛基本在无低血压作用的情况下发生。
36.根据权利要求33或权利要求34的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂不是硫脲或其衍生物。
37.根据权利要求33或权利要求34的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂不是硫脲或4-咪唑或其衍生物。
38.根据权利要求33的方法，其特征在于所述疼痛是神经痛。
39.根据权利要求38的方法，其特征在于所述疼痛由糖尿病神经病变引起。
40.根据权利要求33的方法，其特征在于所述疼痛是内脏疼痛。
41.根据权利要求33的方法，其特征在于所述疼痛是手术后疼痛。
42.根据权利要求33的方法，其特征在于所述疼痛由癌症或癌症治疗引起。
43.根据权利要求33的方法，其特征在于所述疼痛是炎症疼痛。
44.根据权利要求43的方法，其特征在于所述疼痛是关节疼痛。
45.根据权利要求43的方法，其特征在于所述疼痛是肠道激惹综合征疼痛。
46.根据权利要求33的方法，其特征在于所述疼痛是头痛。
47.根据权利要求33的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂是具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂。
48.根据权利要求47的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是硫酮。
49.根据权利要求48的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由分子式
Figure A038174720005C1
[“分子式3”]表示的化合物或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
50.根据权利要求49的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由分子式
Figure A038174720005C2
[“分子式3”]表示的化合物的(-)对映异构体或其可药用的盐或酯。
51.根据权利要求48的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由分子式
Figure A038174720006C1
[“分子式11”]表示的化合物或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
52.根据权利要求47的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是一种咪唑啉酮。
53.根据权利要求52的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由分子式
Figure A038174720006C2
[“分子式4”]表示的化合物或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
54.根据权利要求53的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由分子式
Figure A038174720006C3
[“分子式4”]表示的化合物的(+)对映异构体或其可药用的盐或酯。
55.根据权利要求47的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由选自下述分子式
Figure A038174720006C4
[分子式5]                              [分子式6]
[分子式9]                          [分子式14]
之一所表示的化合物及其所有可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。
56.根据权利要求33的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂通过口服给药。
57.根据权利要求33的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂通过皮下微型泵给药。
58.一种筛选产生无伴随镇静作用的外周止痛作用的有效试剂的方法，包括如下步骤为：
(a)将α-2A受体与具有止痛活性的α肾上腺素能激动剂接触；并且
(b)确定所述激动剂是否具有α-2A激动剂活性，
其中无α-2A激动剂活性表明所述具有止痛活性的α肾上腺素能激动剂是一种产生无伴随镇静作用的外周止痛作用的有效试剂。
59.一种筛选产生无伴随镇静作用的外周止痛作用的有效试剂的方法，包括如下步骤：
(a)将α-2A受体与试剂接触；
(b)确定所述试剂是否具有α-2A激动剂活性；
(c)将α-2B受体与所述试剂相接触；以及
(d)确定所述试剂是否具有α-2B激动剂活性，
其中无α-2A激动剂活性，同时存在有α-2B激动剂活性，表明所述试剂是产生无伴随镇静作用的外周止痛作用的有效试剂。
60.一种筛选产生无伴随镇静作用的外周止痛作用的有效试剂的方法，包括如下步骤：
(a)向具有至少野生型水平α-2A受体活性的对照动物外周给药α肾上腺素能激动剂；
(b)检测所述对照动物中的止痛作用；
(c)向具有较低水平的α-2A受体表达或活性的相应动物外周给药与所述对照动物用药量相近或更大量的所述α肾上腺素能激动剂；以及
(d)检测具有较低水平的α-2A受体表达或活性的所述相应动物中的止痛作用，
其中所述对照动物中无止痛作用，同时具有较低水平α-2A受体表达或活性的所述相应动物中有止痛作用，表明所述α肾上腺素能激动剂具有过量的α-2A激动剂活性；并且
其中所述对照动物中有止痛作用，同时具有较低水平α-2A受体表达或活性的所述相应动物中有止痛作用，表明所述α肾上腺素能激动剂是一种产生无伴随镇静作用的外周止痛作用的有效试剂。
61.根据权利要求60的方法，其特征在于所述对照动物在两个α-2A受体基因座均为野生型。
62.根据权利要求61的方法，其特征在于所述对照动物是野生型动物。
63.根据权利要求62的方法，其特征在于所述野生型动物是野生型小鼠。
64.根据权利要求60或63的方法，其特征在于所述相应动物在α-2A受体基因座有纯合点突变。
65.根据权利要求64的方法，其特征在于所述相应动物在α-2A受体编码序列中有点突变。
66.根据权利要求65的方法，其特征在于所述点突变发生在类似于Asp79的残基中。
67.根据权利要求66的方法，其特征在于所述点突变为Asp79到Asn的突变。
68.根据权利要求60或63的方法，其特征在于所述相应动物具有纯合α-2A基因敲除突变。
69.根据权利要求60或63的方法，其特征在于在步骤(b)和(d)中，止痛作用于硫前列酮敏化后检测。
70.权利要求60的方法，还包括：
(e)向具有较低水平的α-2B受体表达或活性的相应动物外周给药所述α肾上腺素能激动剂；并且
(f)检测具有较低水平的α-2B受体表达或活性的所述相应动物中的止痛作用，
其中所述对照动物中无止痛作用，同时具有较低水平α-2A受体表达或活性的所述相应动物中有止痛作用，表明所述α肾上腺素能激动剂具有过量的α-2A激动剂活性；并且
其中所述对照动物中有止痛作用，具有较低水平α-2A受体表达或活性的所述相应动物中有止痛作用，同时具有较低水平α-2B受体表达或活性的所述相应动物中无止痛作用，表明α肾上腺素能激动剂是一种产生无伴随镇静作用的外周止痛作用的有效试剂。
71.一种筛选产生无伴随镇静作用的外周止痛作用的有效试剂的方法，包括如下步骤：
(a)向具有至少野生型水平α-2B受体活性的对照动物外周给药α肾上腺素能激动剂；
(b)检测所述对照动物中的止痛作用；
(c)向具有较低水平的α-2B受体表达或活性的相应动物外周给药所述α肾上腺素能激动剂；以及
(d)检测具有较低水平的α-2B受体表达或活性的所述相应动物中的止痛作用，
其中所述对照动物中有止痛作用，同时具有较低水平α-2B受体表达或活性的所述相应动物中无止痛作用，表明所述α肾上腺素能激动剂是一种产生无伴随镇静作用的外周止痛作用的有效试剂。
72.根据权利要求71的方法，其特征在于所述对照动物在两个α-2B受体基因座均为野生型。
73.根据权利要求72的方法，其特征在于所述对照动物是野生型动物。
74.根据权利要求73的方法，其特征在于所述野生型动物是野生型小鼠。
75.根据权利要求71的方法，其特征在于所述相应动物具有杂合α-2B基因敲除突变。
76.根据权利要求71的方法，其特征在于所述相应动物具有纯合α-2B基因敲除突变。
77.根据权利要求71或74的方法，其特征在于在步骤(b)和(d)中，止痛作用在硫前列酮敏化后检测。
78.一种长期缓解受治疗者慢性疼痛的方法，包括在至少三天时间无α-2A受体激活作用的情况下，激活所述受治疗者中的止痛α肾上腺素能受体，
从而在所述受体无持续激活作用的情况下，维持慢性疼痛的缓解。
79.权利要求78的方法，包括在至少三天时间向所述受治疗者给药包括有效量的具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂的药用组合物，
从而在所述受治疗者无显著激动剂水平的情况下维持慢性疼痛的缓解。
80.权利要求78的方法，包括在至少三天时间向所述受治疗者给药包括有效量的α肾上腺素能激动剂的药用组合物以及包括有效量的选择性α-2A拮抗剂的药用组合物，
从而在所述受治疗者无显著激动剂水平的情况下维持慢性疼痛的缓解。
81.根据权利要求79或80的方法，其特征在于慢性疼痛的缓解在所述受治疗者无显著激动剂水平的情况下维持至少三周。
82.根据权利要求78的方法，其特征在于所述疼痛是神经痛。
83.根据权利要求82的方法，其特征在于所述疼痛由糖尿病神经病变引起。
84.根据权利要求78的方法，其特征在于所述疼痛是内脏疼痛。
85.根据权利要求78的方法，其特征在于所述疼痛是手术后疼痛。
86.根据权利要求78的方法，其特征在于所述疼痛由癌症或癌症治疗引起。
87.根据权利要求78的方法，其特征在于所述疼痛是炎症疼痛。
88.根据权利要求87的方法，其特征在于所述疼痛是关节疼痛。
89.根据权利要求87的方法，其特征在于所述疼痛是肠道激惹综合征疼痛。
90.根据权利要求78的方法，其特征在于所述疼痛是头痛。
91.根据权利要求79的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂是具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂。
92.根据权利要求91的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是硫酮。
93.根据权利要求92的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由分子式
[“分子式3”]表示的化合物或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
94.根据权利要求93的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由分子式
[“分子式3”]表示的化合物的(-)对映异构体或其可药用的盐或酯。
95.根据权利要求92的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由分子式
[“分子式11”]表示的化合物或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
96.根据权利要求91的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是一种咪唑啉酮。
97.根据权利要求96的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由分子式
[“分子式4”]表示的化合物或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
98.根据权利要求97的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由分子式
[“分子式4”]表示的化合物的(+)对映异构体或其可药用的盐或酯。
99.根据权利要求91的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α-2B激动剂是由选自下述分子式
Figure A038174720012C2
[分子式5]                                   [分子式6]
Figure A038174720012C3
[分子式7]                                   [分子式8]
Figure A038174720012C4
[分子式9]
之一所表示的化合物及其所有可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。
100.根据权利要求79的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂通过外周给药。
101.根据权利要求100的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂通过口服给药。
102.根据权利要求100的方法，其特征在于所述具有最低限度α-2A激动剂活性的α肾上腺素能激动剂通过皮下微型泵给药。
103.根据权利要求80的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂是一种pan-α-2激动剂。
104.根据权利要求103的方法，其特征在于所述pan-α-2激动剂是pan-α-1 pan-α-2激动剂。
105.根据权利要求80的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂是一种化合物，选自可乐定、溴莫尼定、替扎尼定、dexemedetomidine、去甲肾上腺素、由分子式
Figure A038174720013C1
[“分子式1”]表示的化合物，由分子式
[“分子式2”]表示的化合物及其所有可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体和外消旋混合物。
106.根据权利要求80、103、104或105的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂是4-咪唑或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
107.根据权利要求106的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂是分子式
[“分子式13”]表示的化合物或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
108.根据权利要求80、103、104或105的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂是BRL48962或其可药用的盐、酯、酰胺、立体异构体或外消旋混合物。
109.根据权利要求80、103、104或105的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂是外周受限的。
110.根据权利要求80的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂和所述选择性α-2A拮抗剂通过外周给药。
111.根据权利要求80或权利要求110的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂通过口服给药。
112.根据权利要求80或权利要求110的方法，其特征在于所述α-2A拮抗剂通过口服给药。
113.根据权利要求80或权利要求110的方法，其特征在于所述α肾上腺素能激动剂通过皮下微型泵给药。
114.根据权利要求80或权利要求110的方法，其特征在于所述选择性α-2A拮抗剂通过皮下微型泵给药。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101837000A (zh) * 2010-03-16 2010-09-22 云南大学 2-氟-β-D-糖苷治疗神经源性疼痛的用途

Families Citing this family (100)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6559186B1 (en) 1990-02-26 2003-05-06 Arc 1, Inc. Compositions and methods of treatment of sympathetically maintained pain
US20060280774A1 (en) * 1995-06-02 2006-12-14 Allergan, Inc. Compositions and methods for treating glaucoma
US5869079A (en) * 1995-06-02 1999-02-09 Oculex Pharmaceuticals, Inc. Formulation for controlled release of drugs by combining hydrophilic and hydrophobic agents
US6726918B1 (en) 2000-07-05 2004-04-27 Oculex Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating inflammation-mediated conditions of the eye
ES2250504T3 (es) 2000-11-29 2006-04-16 Allergan Inc. Prevencion del rechazo de injerto en el ojo.
KR100764348B1 (ko) * 2000-12-09 2007-10-08 주식회사 하이닉스반도체 디지털/아날로그 컨버터
US7345065B2 (en) * 2002-05-21 2008-03-18 Allergan, Inc. Methods and compositions for alleviating pain
US20040266776A1 (en) * 2003-06-25 2004-12-30 Gil Daniel W. Methods of preventing and reducing the severity of stress-associated conditions
US7358269B2 (en) * 2002-05-21 2008-04-15 Allergan, Inc. 2-((2-Thioxo-2,3-dihydro-1H-imidazol-4-yl)methyl)-3,4-dihydronapthalen-1(2H)-one
US20050048099A1 (en) 2003-01-09 2005-03-03 Allergan, Inc. Ocular implant made by a double extrusion process
US7439241B2 (en) 2003-05-27 2008-10-21 Galderma Laboratories, Inc. Compounds, formulations, and methods for treating or preventing rosacea
US8410102B2 (en) 2003-05-27 2013-04-02 Galderma Laboratories Inc. Methods and compositions for treating or preventing erythema
US20060293359A1 (en) * 2003-06-25 2006-12-28 Allergan, Inc. Methods and compositions for the treatment of diabetes
US20050059664A1 (en) * 2003-09-12 2005-03-17 Allergan, Inc. Novel methods for identifying improved, non-sedating alpha-2 agonists
US8708993B1 (en) * 2003-10-15 2014-04-29 Physician Technologies, Inc. Infusion catheter procedure and system
US20050244469A1 (en) 2004-04-30 2005-11-03 Allergan, Inc. Extended therapeutic effect ocular implant treatments
EP1791833A2 (en) * 2004-09-24 2007-06-06 Allergan, Inc. 4-(condensed cyclicmethyl)-imidazole-2-thiones acting as alpha2 adrenergic agonists
RU2383535C2 (ru) * 2004-09-24 2010-03-10 Аллерган, Инк. 4-(фенилметил и замещенный-фенилметил)-имидазол-2-тионы, действующие как специфические альфа2-адренергические агонисты
JP4986856B2 (ja) * 2004-09-28 2012-07-25 アラーガン、インコーポレイテッド 特異的または選択的α２アドレナリン作動剤としての不置換および置換４−ベンジル−１，３−ジヒドロ−イミダゾール−２−チオンならびにその使用方法
EP1885866A1 (en) * 2005-05-13 2008-02-13 Medimush A/S Feed or food products comprising fungal material
US8026266B2 (en) 2005-11-08 2011-09-27 Arcion Therapeutics, Inc. Treatment of length dependent neuropathy
BRPI0618705B8 (pt) 2005-11-14 2021-05-25 Labrys Biologics Inc anticorpos antagonistas humanizados direcionados contra peptídeo relacionado ao gene da calcitonina, composição farmacêutica e uso dos mesmos
US8536445B2 (en) * 2006-06-02 2013-09-17 Emcore Solar Power, Inc. Inverted metamorphic multijunction solar cells
US20070298073A1 (en) * 2006-06-23 2007-12-27 Allergan, Inc. Steroid-containing sustained release intraocular implants and related methods
US8802128B2 (en) 2006-06-23 2014-08-12 Allergan, Inc. Steroid-containing sustained release intraocular implants and related methods
US20080102097A1 (en) * 2006-10-31 2008-05-01 Zanella John M Device and method for treating osteolysis using a drug depot to deliver an anti-inflammatory agent
WO2008079727A2 (en) * 2006-12-22 2008-07-03 Allergan, Inc. Compositions comprising an pan-alpha-2 receptor agonist and an anticonvulsant for treating chronic pain
US20080153927A1 (en) * 2006-12-22 2008-06-26 Allergan, Inc. Alpha-2b receptor agonist and relaxant compositions for treating gastrointestinal motility disorders
US20080153874A1 (en) * 2006-12-22 2008-06-26 Allergan Inc. Alpha-2b receptor agonist and anticonvulsant compositions for treating chronic pain
US20080153825A1 (en) * 2006-12-22 2008-06-26 Allergan Inc. Alpha-2b receptor agonist and 5ht4 serotonin receptor compositions for treating gastrointestinal motility disorders
US20120083508A1 (en) 2006-12-22 2012-04-05 Allergan, Inc. Alpha-2b receptor agonist and anticonvulsant compositions for treating chronic pain
US20080153881A1 (en) * 2006-12-22 2008-06-26 Allergan, Inc. Alpha-2b receptor agonist and acid reducer compositions for treating gastrointestinal motility disorders
WO2008079728A2 (en) * 2006-12-22 2008-07-03 Allergan, Inc. Alpha-2b adrenergic receptor agonist and serotonin-norepinephrine reuptake inhibitor compositions for treating chronic pain
US8470360B2 (en) 2008-04-18 2013-06-25 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug depots having different release profiles for reducing, preventing or treating pain and inflammation
US20100216857A1 (en) * 2007-10-18 2010-08-26 Luhrs Lauren M B Method of treating motor disorders with 4-(1-(2,3-dimethylphenyl)ethyl)-1h-imidazole-2(3h)-thione
WO2009052073A2 (en) * 2007-10-18 2009-04-23 Allergan, Inc. Method of treating sensorimotor disorders with alpha-2 adrenergic receptor agonists
WO2009052075A2 (en) * 2007-10-18 2009-04-23 Allergan, Inc. Method of treating motor disorders with alpha-2b adrenergic receptor agonists
PL2252290T3 (pl) * 2008-02-15 2018-06-29 Bone Therapeutics S.A. Kompozycja farmaceutyczna do zastosowania w leczeniu i/lub zapobieganiu chorobom kostno-stawowym
EP2265287B1 (en) 2008-03-04 2018-09-05 Teva Pharmaceuticals International GmbH Methods of treating chronic pain
US20090264489A1 (en) * 2008-04-18 2009-10-22 Warsaw Orthopedic, Inc. Method for Treating Acute Pain with a Formulated Drug Depot in Combination with a Liquid Formulation
USRE48948E1 (en) 2008-04-18 2022-03-01 Warsaw Orthopedic, Inc. Clonidine compounds in a biodegradable polymer
US8946277B2 (en) * 2008-04-18 2015-02-03 Warsaw Orthopedic, Inc. Clonidine formulations in a biodegradable polymer carrier
US8889173B2 (en) * 2008-04-18 2014-11-18 Warsaw Orthopedic, Inc. Alpha adrenergic receptor agonists for treatment of pain and/or inflammation
US9072727B2 (en) 2008-04-18 2015-07-07 Warsaw Orthopedic, Inc. Alpha adrenergic receptor agonists for treatment of degenerative disc disease
US8883768B2 (en) * 2008-04-18 2014-11-11 Warsaw Orthopedic, Inc. Fluocinolone implants to protect against undesirable bone and cartilage destruction
US20090263451A1 (en) * 2008-04-18 2009-10-22 Warsaw Orthopedic, Inc. Anti-Inflammatory and/or Analgesic Agents for Treatment of Myofascial Pain
US8420114B2 (en) * 2008-04-18 2013-04-16 Warsaw Orthopedic, Inc. Alpha and beta adrenergic receptor agonists for treatment of pain and / or inflammation
US9132119B2 (en) 2008-04-18 2015-09-15 Medtronic, Inc. Clonidine formulation in a polyorthoester carrier
US9610243B2 (en) 2008-04-18 2017-04-04 Warsaw Orthopedic, Inc. Clonidine compounds in a biodegradable polymer
US9132085B2 (en) * 2008-04-18 2015-09-15 Warsaw Orthopedic, Inc. Compositions and methods for treating post-operative pain using clonidine and bupivacaine
US8722079B2 (en) 2008-04-18 2014-05-13 Warsaw Orthopedic, Inc. Methods for treating conditions such as dystonia and post-stroke spasticity with clonidine
US20090263489A1 (en) * 2008-04-18 2009-10-22 Warsaw Orthopedic, Inc. Analgesic and anti-inflammatory compositions and methods for reducing, preventing or treating pain and inflammation
US20090263443A1 (en) * 2008-04-18 2009-10-22 Warsaw Orthopedics, Inc. Methods for treating post-operative effects such as spasticity and shivering with clondine
US8956641B2 (en) * 2008-04-18 2015-02-17 Warsaw Orthopedic, Inc. Alpha adrenergic receptor agonists for treatment of inflammatory diseases
US8557273B2 (en) * 2008-04-18 2013-10-15 Medtronic, Inc. Medical devices and methods including polymers having biologically active agents therein
US8629172B2 (en) 2008-04-18 2014-01-14 Warsaw Orthopedic, Inc. Methods and compositions for treating post-operative pain comprising clonidine
US20090264477A1 (en) * 2008-04-18 2009-10-22 Warsaw Orthopedic, Inc., An Indiana Corporation Beta adrenergic receptor agonists for treatment of pain and/or inflammation
TWI473614B (zh) * 2008-05-29 2015-02-21 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Anti-analgesic inhibitors
PL2303264T3 (pl) 2008-06-09 2018-08-31 Allergan, Inc. Sposoby leczenia stanów pośredniczonych alfa-adrenergicznie z użyciem pochodnych imidazoliny
US9034910B2 (en) 2008-06-09 2015-05-19 Allergan, Inc. Methods of treating alpha adrenergic mediated conditions
US8063231B2 (en) 2008-06-09 2011-11-22 Allergan, Inc. Methods of treating alpha adrenergic mediated conditions
US20100203165A1 (en) * 2008-08-01 2010-08-12 Gerald Horn Compositions and methods for treatment of disorders or conditions of the eye
DK2320911T3 (da) 2008-08-01 2014-11-03 Eye Therapies Llc Vasokonstriktionspræparater og fremgangsmåder til anvendelse deraf
US8952011B2 (en) 2008-08-01 2015-02-10 Eye Therapies Llc Compositions and methods for the treatment of nasal conditions
EP2165706A1 (en) 2008-09-18 2010-03-24 BioAlliance Pharma Treating Inflammatory Pain in Mucosa of the Oral Cavity Using Mucosal Prolonged Release Bioadhesive Therapeutic Carriers.
US20100098746A1 (en) * 2008-10-20 2010-04-22 Warsaw Orthopedic, Inc. Compositions and methods for treating periodontal disease comprising clonidine, sulindac and/or fluocinolone
US8822546B2 (en) * 2008-12-01 2014-09-02 Medtronic, Inc. Flowable pharmaceutical depot
US20100228097A1 (en) * 2009-03-04 2010-09-09 Warsaw Orthopedic, Inc. Methods and compositions to diagnose pain
US20100239632A1 (en) * 2009-03-23 2010-09-23 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug depots for treatment of pain and inflammation in sinus and nasal cavities or cardiac tissue
US20100298335A1 (en) * 2009-05-22 2010-11-25 Kaufman Herbert E Preparations and Methods for Ameliorating or Reducing Presbyopia
US8299079B2 (en) 2009-05-22 2012-10-30 Kaufman Herbert E Preparations and methods for ameliorating or reducing presbyopia
WO2010148519A1 (en) * 2009-06-25 2010-12-29 Queen's University At Kingston Methods and therapies for alleviating pain comprising an ultra low dose of an alpha 2 receptor antagonist
US8617583B2 (en) * 2009-07-17 2013-12-31 Warsaw Orthopedic, Inc. Alpha adrenergic receptor agonists for prevention or treatment of a hematoma, edema, and/or deep vein thrombosis
US8987270B2 (en) 2009-07-27 2015-03-24 Eye Therapies Llc Formulations of selective alpha-2 agonists and methods of use thereof
CA2769449A1 (en) 2009-07-30 2011-02-03 Allergan, Inc. Selective alpha 2b/2c agonists
US8231891B2 (en) * 2009-07-31 2012-07-31 Warsaw Orthopedic, Inc. Implantable drug depot for weight control
WO2011028621A1 (en) 2009-08-26 2011-03-10 Allergan, Inc. Method of treating compulsive disorders with alpha-2b adrenergic receptor agonists
EP2470207A1 (en) * 2009-08-28 2012-07-04 Rinat Neuroscience Corporation Methods for treating visceral pain by administering antagonist antibodies directed against calcitonin gene-related peptide
US20110097375A1 (en) 2009-10-26 2011-04-28 Warsaw Orthopedic, Inc. Formulation for preventing or reducing bleeding at a surgical site
EP2329849B1 (en) 2009-11-18 2015-04-29 Galderma Research & Development Combination of alpha-2 adrenergic receptor agonist and non-steroidal anti-inflammatory agent for treating or preventing an inflammatory skin disorder
US8394800B2 (en) * 2009-11-19 2013-03-12 Galderma Laboratories, L.P. Method for treating psoriasis
US20110152271A1 (en) * 2009-12-17 2011-06-23 Gerald Horn Compositions and methods for ophthalmic delivery of nasal decongestants
WO2011117377A2 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Galderma Research & Development Improved methods and compositions for safe and effective treatment of erythema
US8916562B2 (en) 2010-03-26 2014-12-23 Galderma Research & Development Snc Methods and compositions for safe and effective treatment of telangiectasia
GB201013573D0 (en) * 2010-08-12 2010-09-29 Ucl Business Plc Treatment
HUE038366T2 (hu) 2010-08-16 2018-10-29 Allergan Inc Módszer szabályozó T-sejtek alfa-2B adrenerg receptor agonistákkal való aktiválásához
US8053427B1 (en) 2010-10-21 2011-11-08 Galderma R&D SNC Brimonidine gel composition
NO2444068T3 (zh) 2010-10-21 2014-12-20
US8445526B2 (en) 2011-02-03 2013-05-21 Glaucoma & Nasal Therapies Llc Compositions and methods for treatment of glaucoma
CN108014334B (zh) 2011-05-20 2021-11-30 H.伦德贝克公司 抗cgrp抗体和抗体片段用于在有需要的受试者中预防或抑制畏光或厌光的用途
EA033109B1 (ru) 2011-05-20 2019-08-30 Олдербайо Холдингз Ллк Способы ингибирования, профилактики или лечения диареи и/или поддержания соответствующих уровней электролитов и жидкости в толстой кишке субъекта, подвергающегося связанному с диареей состоянию, с помощью антитела против cgrp или фрагмента антитела против cgrp
EA201891284A1 (ru) 2011-05-20 2018-11-30 Олдербайо Холдингз Ллк Композиции антител против cgrp и их применение
RU2014119879A (ru) 2011-10-19 2015-11-27 Галдерма С.А. Способ снижения прилива крови к лицу при систематическом использовании ингибиторов фосфодиэстеразы типа 5
US8999938B2 (en) 2013-06-21 2015-04-07 Gnt Llc Ophthalmic lipophilic drug delivery vehicle formulations
EP2821072A1 (en) 2013-07-01 2015-01-07 Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL) Pharmacological stimulation to facilitate and restore standing and walking functions in spinal cord disorders
US10556945B2 (en) 2014-03-21 2020-02-11 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Antagonist antibodies directed against calcitonin gene-related peptide and methods using same
JP6568099B2 (ja) 2014-03-21 2019-08-28 テバ・ファーマシューティカルズ・インターナショナル・ゲーエムベーハーＴｅｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＧｍｂＨ カルシトニン遺伝子関連ペプチドに対するアンタゴニスト抗体及びその使用方法
KR20220031944A (ko) 2016-09-23 2022-03-14 테바 파마슈티컬스 인터내셔널 게엠베하 불응성 편두통의 치료
JP2022516956A (ja) 2019-01-08 2022-03-03 ハー・ルンドベック・アクチエゼルスカベット 抗ｃｇｒｐ抗体を用いた頭痛の急性治療及び迅速治療
WO2020222188A1 (en) 2019-05-01 2020-11-05 Clexio Biosciences Ltd. Methods of treating pruritus

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5021410A (en) * 1989-05-22 1991-06-04 Allergan, Inc. Combinations of selective alpha-adrenergic agonists and antagonists useful in lowering intraocular pressure
US5091528A (en) * 1990-09-12 1992-02-25 Allergan, Inc. 6- or 7- (2-imino-2-imidazolidine)-1,4-benzoxazines as α adrenergic agents
CA2181909C (en) * 1994-01-24 2008-10-07 Stephen A. Munk Aromatic 2-amino-imidazole derivatives as alpha-2a adrenoceptor agonists
US6087361A (en) * 1995-05-12 2000-07-11 Allergan Sales, Inc. Aryl-imidazolines and aryl-imidazoles useful as α-2 adrenergic agonists without cardiovascular side effects
US6329369B1 (en) * 1997-12-04 2001-12-11 Allergan Sales, Inc. Methods of treating pain and other conditions
NZ504667A (en) 1997-12-04 2003-03-28 Allergan Sales Inc Substituted imidazole derivatives having agonist-like activity at alpha 2B or 2B/2C adrenergic receptors
ATE291907T1 (de) * 1998-10-20 2005-04-15 Omeros Corp Spülende lösung und methoden zur hemmung von schmerzen und entzündungen
TWI283669B (en) 1999-06-10 2007-07-11 Allergan Inc Compounds and method of treatment having agonist-like activity selective at alpha 2B or 2B/2C adrenergic receptors
US6545182B2 (en) 2000-04-13 2003-04-08 Allergan Sales, Inc. Methods and compositions for modulating alpha adrenergic receptor activity
US6313172B1 (en) * 2000-04-13 2001-11-06 Allergan Sales, Inc. Methods and compositions for modulating alpha adrenergic receptor activity
US6787517B1 (en) * 2000-12-29 2004-09-07 Allergan, Inc. Agent and methods for treating pain
US7345065B2 (en) * 2002-05-21 2008-03-18 Allergan, Inc. Methods and compositions for alleviating pain

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101837000A (zh) * 2010-03-16 2010-09-22 云南大学 2-氟-β-D-糖苷治疗神经源性疼痛的用途

Also Published As

Publication number Publication date
KR101114184B1 (ko) 2012-08-30
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WO2003099289A2 (en) 2003-12-04
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