CN1652766A - 间苯二酚和***素的局部制剂及其施用方法 - Google Patents

间苯二酚和***素的局部制剂及其施用方法 Download PDF

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Abstract

一方面，本发明提供一种防止HIV从一个个体传播至另一个体的方法。按照该方法，在接近第一个体和第二个体接触的时间，将药用组合物局部施用于藏匿HIV的第一个体，或处于HIV感染危险下第二个体，所述药用组合物包括至少一种间苯二酚衍生化合物和/或***素(例如***酚衍生物，Δ8－THC衍生物，***环萜酚衍生物，***二酚衍生物，***萜酚衍生物)(包括其组合)。本发明还提供至少一种间苯二酚和/或***素和水不溶性聚合物如水凝胶的局部制剂。

Description

间苯二酚和***素的局部制剂及其施用方法
技术领域
本发明涉及防止通过人际传播的HIV感染。
背景技术
性传播是HIV疾病全球蔓延的主要形式，女性代表最大数量的通过感染的男***接触病毒的个体。现在已经公认，性转播疾病(STD)将人们置于更大的感染HIV的危险中，女性遭受最多的与高度混杂伙伴的无保护的性的后果。清楚地，存在对一种局部试剂的需要，女性可以在***之前使用该局部试剂，为她提供对HIV感染的保护。理想地该试剂将能够在施用的短时间内发挥作用，而不干扰正常保护性的***菌群和无任何特别的令人不快的性质如气味，粘膜屏障的刺激或改变而使之对微生物磨蚀更敏感。该试剂应当理想地耐持久和不被***冲洗洗去，并且可以随后重新施用而不干扰***是否有或没有危险。人际传播如在分娩和母乳喂养期间的母婴传播是可以通过在分娩之前预先处理孕妇和在母乳喂养之前擦洗婴儿的嘴(粘膜表面)来预防的另一事件。
逆转录病毒人免疫缺陷病毒1和2(HIV)是最常见的AIDS病原体。为了导致感染，HIV必需接近宿主的免疫***。除了输血和暴露于感染的血液的针，最常见的传播方式是通过异性***中的***上皮或同性***中的***直肠的性。***中的粘膜表面提供对HIV传播的重要屏障。尽管***上皮可能有效，它对HIV-1感染不是绝对的屏障，因为病毒具有将其自身隐藏在上皮细胞中而呈递给上皮内和固有层的免疫细胞的能力。研究已经显示病毒首先出现在紧接着固有层之下的层，其为上皮提供流体和湿度。尽管***上皮不同于直肠上皮，子宫颈内的上皮类似于直肠的柱状上皮，各种促进最早期事件的因素在那发生。这里，通过穿过磨蚀的粘膜或通过联合传染性的辅助因子侵入表面，通过直接与这些表面接触，病毒不仅获得进入上皮而且遇到最初的高度特化的称为树突细胞(DC)的抗原呈递细胞(APC)。暴露于病毒的最初的APC是朗氏细胞，其相间错杂在上皮细胞之间。朗氏细胞是未成熟的树突细胞，缺少共同刺激分子CD80和CD86，这些分子在以后当它们迁移至***并成熟时表达。然而，它们确实具有起作用的CCR5受体并且生产M-营养性HIV病毒，其可以增强血浆病毒血症和将病毒传播至T细胞。另外，朗氏细胞表达CD24或HSA，其为涉及T细胞增殖的分子。
尽管生殖道可以被SI/X4或NSI/R5变体感染，巨噬细胞-营养性NSI占优势。有趣地足够的CXCR4在树突细胞中表达，其程度比CCR5大得多，提示粘膜T细胞和巨噬细胞更可能受R-5营养性病毒感染。最近还显示在性暴露后全范围的粘膜单核细胞(MMC)可以被R-5(M-营养性)HIV-1毒株感染。这些包括T淋巴细胞，其表达CCR5的程度大于在血液隔室中所发现的并且还保持高水平的CXCR4表达。还存在表达CCR5的巨噬细胞。然而，表达CXCR4和CCR5的生殖T细胞对R-5和X-4病毒株敏感。T细胞与CD14+巨噬细胞簇的观察提示巨噬细胞可以用作长期贮存器，并且它们在抗原加工和呈递中的作用可以形成感染后免疫应答的所有组成成分。另外的研究证实内皮下的巨噬细胞是器官培养物的生殖道粘膜组织中HIV-1感染的主要靶细胞，没有在子宫颈上皮内感染的证据。一旦被M-营养性HIV病毒感染，这些专业的抗原呈递者形成异种syncitia或与由***/生殖粘膜部位传入的***排出的内回肠***中的CD4+T-淋巴细胞结合。
在结合以后，病毒与细胞膜融合和内在化。在细胞内，它生产逆转录酶，将其基因组RNA转录为DNA。HIV逆转录物然后整合到细胞DNA中，在那它作为“原病毒”存在细胞生命中。原病毒可以保持潜伏不定的时期，或者它可以激活转录mRNA和基因组RNA，导致蛋白质合成，装配，新病毒体形成，病毒从细胞表面出芽，和细胞死亡。
屏障装置如避孕套的使用可以预防STD，但要求男***的合作，对其缺乏认可无疑是其缺点。此外，已经证明洗涤剂杀***剂，如壬苯醇醚-9(N-9)实际上增加HIV传播的危险。因此需要一种与子宫颈***或***上皮的刺激或溃疡无关的试剂，如果STD传播的问题有限其将用作局部杀微生物剂。
发明内容
发明概述
一方面，本发明提供一种防止HIV从一个个体传播至另一个体的方法。按照该方法，在接近第一个体和第二个体接触的时间，将药用组合物局部施用于藏匿HIV的第一个体，或处于HIV感染危险下第二个体，所述药用组合物包括至少一种间苯二酚衍生化合物和/或***素(cannabinoid)(例如***酚衍生物，Δ8-THC衍生物，***环萜酚衍生物，***二酚衍生物，***萜酚衍生物)(包括其组合)。本发明还提供至少一种间苯二酚和/或***素和水不溶性聚合物如水凝胶的局部制剂。本发明的这些和其它优点以及另外的发明特征将从附图和下列详细描述中明显体现。
附图说明
图1用图表比较使用加入时间测定在外周血单核细胞中测量的IC50值。
图2用图表表示使用AZT使用加入时间研究观察到的逆转录水平。
图3用图表表示在病毒进入至逆转录完成的间隔期间，使用加入时间测定在外周血单核细胞中测量的相对IC50。
图4用图表表示在病毒进入至逆转录完成的间隔期间，使用加入时间测定在外周血单核细胞中测量的HIV复制的最大抑制。
发明详述
至少一种用于本发明的化合物可以是间苯二酚衍生物(例如5-烷基或3-烷基或酰基间苯二酚)。在一个优选实施方案中，在药用组合物中至少一种化合物可以是5-烷基-间苯二酚衍生物。这些化合物对于用于本发明方法是有利的，因为它们通常显示低毒性。适用于本发明方法和组合物的化合物的制备和配制在本领域是已知的(参见例如美国专利5,859,067，6,274,635和公开的国际专利申请WO 00/56303，其结合于此作为参考)。特别优选的烷基-间苯二酚衍生物具有下式：
                          式I
其中，R1，R3，R5，和R6可以任选地分别为-COR1，-COR3，-COR5，和/或-COR6，优选R3为-COR3，其中R可以另外如下：
R1是：
a)H，
b)C1-4烷基或其酯，
c)COOH，
d)OH，
e)O-C1-5烷基(优选OCH3)或烷酰基，其任选地被一或二甲氨基或乙氨基取代，
f)含有羧基或氨基的O-CO-C3-10烷基，
g)
Figure A0381106500072
其中n＝1-8
h)对氨基苄基或C1-7氨基烷基或其有机或无机酸加成盐，对氨基苄基或氨基烷基的异氰酸酯或异硫氰酸酯衍生物，具有1-7个另外的碳原子的氨基烷基的羧基末端衍生物或其盐，该羧基末端衍生物的活化衍生物；
i)R1和R2构成式-O(CH2)3-5所示取代基，其中R1和R2与它们所键合的碳原子一起构成一个环，其中在所述环上至少有一个氢原子任选地被卤素(例如氟，溴，碘，砹)取代，
j)内酯(例如，COCOH)；或
k)CH(CH3)CO2H或-OCOCH3
R2是：
a)H，OH，COOH，或卤素
b)C1-6羧基或烷氧基，或者
c)R1和R2构成式-O(CH2)3-5所示取代基，其中R1和R2与它们所键合的碳原子一起构成一个环，在所述环上至少有一个氢原子可任选被卤素取代，
R3是
a)(W)m-Y-(Z)n，其中
W是C5-12直链或支链(优选1S’CH3，2R’CH3二甲基)烷基(例如-戊基，-己基，-庚基，-辛基，或-壬基)、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素(例如卤素末端基团乃至二卤素)取代，
Y是一条键、O、S、SO、SO2、CO、NH、N(C1-6烷基)、或NCS，
Z是：
i)C5-12烷基、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，任选被末端芳环取代，
ii)CN1-3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2，CONHC1-4烷基，或CON(C1-4烷基)2，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
iii)苯基或苄基，其中所述基团可任选被卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、CN、CF3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，并且其中
m和n相同或不同，并各自为0或1，
b)C5-12烷基或卤代烷基，所述基团可任选被末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
c)C5-12链烯基或炔基，所述基团可任选被卤素、二硫杂环戊烯(dithiolene)、末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同；
R4是：
a)H或卤素(优选溴)，
b)OH，或
c)C1-6烷氧基或羧基；
R5是
a)H，
b)C1-4烷基，
c)COOH，
d)OH，或OCH3，
e)O-C1-5烷基(醚)或烷酰基，其任选地被至少一个一或二-甲氨基或乙氨基取代，或
f)内酯；和
R6是
a)H或OH；
b)C1-4烷基(优选乙基)、链烯基、炔基、或其混合物，
c)O-C1-4烷基、链烯基、炔基、或其混合物，或
d)pryenyl、香叶烯基(gerenyl)、或法呢基，所述基团任选在任意位置被一个或多个卤素取代，
e)(W)m-Y-(Z)n，其中
W是C5-12烷基、链烯基，炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，
Y是一条键、O、S、SO、SO2、CO、NH、N(C1-6烷基)、或NCS，
Z是：
i)C5-12烷基、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，任选被末端芳环取代，
ii)CN1-3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2，其中在酰胺氮原子上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
iii)苯基或苄基，其中所述基团可任选被卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、CN、CF3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮原子上的每一C1-4烷基可相同或不同，并且其中
m和n相同或不同，并分别为0或1，
f)C5-12烷基或卤代烷基，所述基团可任选被末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮原子上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
g)C5-12链烯基或炔基，所述基团可任选被卤素、二硫杂环戊烯、末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮原子上的每一C1-4烷基可相同或不同，或
h)CH(CH3)CO2H，CH2COOH，或-OCOCH3。
按照式I的化合物优选包括内酯，H，OH或OCH3，-CH(CH3)CO2H，或-OCOCH3作为R1的取代基。R2的优选取代基是氢，卤素(最优选氟)羟基，COOH，或甲氧基。R4的优选取代基包括H或卤素(最优选溴)。R5的优选取代基包括内酯，H，OH，和OCH3。R6的优选取代基包括H，OH，乙基，CH(CH3)CO2H，CH2COOH，和-OCOCH3。当包括式I的化合物时，优选R6为甲基或乙基。更优选的按照式I的化合物在R1，R5上含有羟基取代基，在R6上含有甲基取代基；还更优选地，化合物在R2上含有第三个羟基取代基。R3的优选取代基在本文别处讨论；然而，本发明提供按照式I的化合物，其中R3为：
a)(W)m-Y-(Z)n，其中
W是C5-12烷基、链烯基、炔基(例如2’-炔基，3’-炔基或4’-炔基)、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，
Y是一条键、O，S、SO、SO2、CO、NH、N(C1-6烷基)、或NCS，
Z是：
i)C5-12烷基、链烯基、炔基(例如2’-炔基，3’-炔基或4’-炔基)、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，任选被末端芳环取代，
ii)CN1-3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
iii)苯基或苄基，其中所述基团可任选被卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、CN、CF3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，
其中W和Z中至少有一个包括支链，并且其中m和n相同或不同，并各自为0或1，
b)末端支链(例如末端二甲基)的C5-12烷基或卤代烷基，所述基团可任选被末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
c)末端支链的C5-12链烯基或炔基，所述基团可任选被卤素、二硫杂环戊烯、末端芳环、CN1-3，NCS，CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同。
特别优选的R3取代基包括C5-C12炔，特别优选的基团还包括二或三-甲基末端基团。R3的最优选的取代基是二甲基庚基，特别是1’S，2’SR，还优选末端卤素(二卤素)取代基，并且另外的优选取代基是5，5-二甲基己(1-烯)(3-炔)基(例如化合物Ii)。许多这样的化合物表现出了抗肿瘤活性，并且如本文所述可以就这样使用。虽然本发明方法的组合物可包括任意这样的化合物，但是一些优选的化合物如下所示：
Figure A0381106500121
如上所述，式I化合物可在R6具有香叶烯基取代基。在这方面，用于本发明组合物中的化合物可以是下式所示的***萜酚或其衍生物：
                           式II
其中：
R1是：
a)H，
b)C1-4烷基或其酯，
c)COOH，
d)OH，
e)O-C1-5烷基(优选OCH3)或烷酰基，其任选地被一或二甲氨基或乙氨基取代，
f)含有羧基或氨基的O-CO-C3-10烷基，
g)
Figure A0381106500132
其中n＝1-8
h)对氨基苄基或C1-7氨基烷基或其有机或无机酸加成盐，对氨基苄基或氨基烷基的异氰酸酯或异硫氰酸酯衍生物，具有1-7个另外的碳原子的氨基烷基的羧基末端衍生物或其盐，该羧基末端衍生物的活化衍生物；
i)R1和R2构成式-O(CH2)3-5所示取代基，其中R1和R2与它们所键合的碳原子一起构成一个环，其中在所述环上至少有一个氢原子任选地被卤素取代，
j)内酯(例如，COCOH)；或
k)CH(CH3)CO2H或-OCOCH3
R2是：
a)H，OH，COOH，或卤素
b)C1-6羧基或烷氧基，或者
c)R1和R2构成式-O(CH2)3-5所示取代基，其中R1和R2与它们所键合的碳原子一起构成一个环，在所述环上至少有一个氢原子可任选被卤素取代，
R3是
a)(W)m-Y-(Z)n，其中
W是C5-12直链或支链(优选1S’CH3，2R’CH3二甲基)烷基、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，
Y是一条键、O、S、SO、SO2、CO、NH、N(C1-6烷基)、或NCS，
Z是：
i)C5-12烷基、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，任选被末端芳环取代，
ii)CN1-3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2，CONHC1-4烷基，或CON(C1-4烷基)2，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
iii)苯基或苄基，其中所述基团可任选被卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、CN、CF3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，并且其中
m和n相同或不同，并各自为0或1，
b)C5-12烷基或卤代烷基，所述基团可任选被末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
c)C5-12链烯基或炔基，所述基团可任选被卤素、二硫杂环戊烯(dithiolene)、末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同；
R5是
a)H，
b)C1-4烷基，
c)COOH，
d)OH，或OCH3，
e)O-C1-5烷基(醚)或烷酰基，其任选地用至少一个一或二-甲氨基或乙氨基取代，或
f)内酯；和
R6是
a)氢，
b)C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，C1-6烷基(优选乙基)，或C1-6卤代烷基，
c)CN，
d)CO2H，
e)CO2-C1-4烷基，
f)C(Y)(Z)-OH，
g)C(Y)(Z)-O-C1-4烷基，或
h)C1-6烷基-CO2-Y，
其中Y和Z各自独立地为H或C1-6烷基，
R7是：
a)羟基(优选β-羟基)或内酯，
b)卤素，
c)C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，C1-6烷基，或C1-6卤代烷基，
d)CN，
e)N3，
f)CO2H，
g)CO2-C1-4烷基，
h)C(Y)(Z)-OH，
i)C(Y)(Z)-O-C1-4烷基，
j)C1-6烷基-CO2-Y，或
k)＝O或＝S，
其中Y和Z各自独立地为H或C1-6烷基，并且其中R7可以在2-5位的任何之一上。
式I和II化合物可用已知方法由商购原料合成(参见例如Dominianni等，J.Org.Chem.，42，344-46(1977)；Baek等，Arch.Pharm.Res.，19，228-30(1996)；Guthrie等，J.Org.Chem.47，2369-76(1982))。例如，在酸催化下将2，6-二甲氧基苯酚与OH-R3缩合可生成4-烷基苯酚中间体。将酚基转化成磷酸二乙酯，然后在液氨中用锂金属还原，可生成二甲氧基苯衍生物。之后将该化合物进行一或二脱甲基化(例如用三溴化硼)可分别生成所需的甲氧基苯酚和/或间苯二酚(式I)。在R6上有烷基取代基的式I化合物可通过下述方法制得：例如，首先将二甲氧基苯衍生物在R6锂化(lithiation)(例如在Bu/THF存在下)，然后暴露于烷化剂(例如甲基或乙基碘化物或硫酸酯)。之后将该化合物进行一或二脱甲基化(例如用三溴化硼)可分别生成所需的在R6有烷基取代基的甲氧基苯酚和/或间苯二酚(式I)。式II化合物可通过例如在酸催化下将在R3具有所需取代基的甲氧基苯酚和/或间苯二酚(式I)与香叶醇缩合(例如在BF3、Et2O、二氧化硅，和CH2Cl2存在下)而制得。当然，这些化合物可通过其它适当方法(有许多是本领域已知的)合成获得。
在另一实施方案中，用于本发明的至少一种化合物可以是***酚或其衍生物(例如Δ8-四氢***酚，Δ9-四氢***酚，或其衍生物)。其它优选的***酚衍生物具有下式：
Figure A0381106500161
式III
其中，
R1是：
a)H，
b)C1-4烷基或其酯，
c)COOH，
d)OH，
e)O-C1-5烷基(优选OCH3)或烷酰基，其任选地被一或二甲氨基或乙氨基取代，
f)含有羧基或氨基的O-CO-C3-10烷基，
g)
Figure A0381106500171
其中n＝1-8
h)对氨基苄基或C1-7氨基烷基或其有机或无机酸加成盐，对氨基苄基或氨基烷基的异氰酸酯或异硫氰酸酯衍生物，具有1-7个另外的碳原子的氨基烷基的羧基末端衍生物或其盐，该羧基末端衍生物的活化衍生物；
i)R1和R2构成式-O(CH2)3-5所示取代基，其中R1和R2与它们所键合的碳原子一起构成一个环，其中在所述环上至少有一个氢原子任选地被卤素取代，
j)内酯(例如，COCOH)；或
k)CH(CH3)CO2H或-OCOCH3
R2是：
a)H，OH，COOH，或卤素
b)C1-6羧基或烷氧基，或者
c)R1和R2构成式-O(CH2)3-5所示取代基，其中R1和R2与它们所键合的碳原子一起构成一个环，在所述环上至少有一个氢原子可任选被卤素取代，
R3是
a)(W)m-Y-(Z)n，其中
W是C5-12直链或支链(优选1S’CH3，2R’CH3二甲基)烷基、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，
Y是一条键、O、S、SO、SO2、CO、NH、N(C1-6烷基)、或NCS，
Z是：
i)C5-12烷基、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，任选被末端芳环取代，
ii)CN1-3、CO2H 、或CO2C1-4烷基、CONH2，CONHC1-4烷基，或CON(C1-4烷基)2，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
iii)苯基或苄基，其中所述基团可任选被卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、CN、CF3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，并且其中
m和n相同或不同，并各自为0或1，
b)C5-12烷基或卤代烷基，所述基团可任选被末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
c)C5-12链烯基或炔基，所述基团可任选被卤素、二硫杂环戊烯(dithiolene)、末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同；
R6和R6’一起形成＝O或＝S，或者各自独立地选自：
a)H，
b)C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，C1-6烷基，或C1-6卤代烷基，
c)CN，
d)CO2H，
e)CO2-C1-4烷基，
f)C(Y)(Z)-OH，
g)C(Y)(Z)-O-C1-4烷基，和
h)C1-6烷基-CO2-Y，
其中Y和Z各自独立地为H或C1-6烷基，
R7是：
a)羟基或内酯，
b)卤素，
c)C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，C1-6烷基，或C1-6卤代烷基，
d)CN，
e)N3，
f)CO2H，
g)CO2-C1-4烷基，
h)C(Y)(Z)-OH，
i)C(Y)(Z)-O-C1-4烷基，
j)C1-6烷基-CO2-Y，或
k)＝O或＝S，
其中Y和Z各自独立地为H或C1-6烷基；
Q为：
a)O或S，或
b)N-W，其中W是：
i)氢，
ii)C1-6烷氧基烷基、C1-6烷基、或C1-6卤代烷基
iii)OC1-6烷基、或OC1-6卤代烷基，
iv)CN，
v)C1-6烷基，
vi)C(Y)(Z)C1-4烷基，或
vii)C1-6烷基-CO2-Z，
其中Y和Z分别独立地为H或C1-6烷基。
优选式III中的R1为H，O-C1-4烷基(更优选甲氧基)或琥珀酸、丙二酸的半酯或丙氨酸的丙氨酸酯及其盐。在另一优选实施方案中，R1和R2一起构成式-O(CH2)3-5-的取代基，其中R1和R2与它们键合的碳原子一起构成环，其中该环中至少一个氢原子任选地被卤素取代(例如O，2丙氧环)。另外，当式III的R2为卤素时，优选其为碘。优选地，R6和R6’一起形成＝O或者各自为甲基，乙基，或甲氧基。
尽管R7可以在环C的7-10位的任何之一上，优选它在环的9位上。此外，在一些实施方案中，R7优选带负电(例如COOH，卤素，β-羟基，或内酯)，而在其它实施方案中，它可以被内酯或β-羟基取代。
式III中的环C可以是下列各项中的任何一个(虚线表示在Δ6a-10a，Δ8-9，或Δ9-10位的双键)：
或 或
Figure A0381106500203
然而，优选环为芳香环。在这些化合物中，R7优选带负电，更优选在C9上。此外，对于这些实施方案，R1优选不为OH，且优选为脱氧的，酯，或醚。例举的***酚衍生化合物包括：
Figure A0381106500204
另一优选式III的化合物是Δ-8四氢***酚的衍生物，其中R1为乙酸酯，R6为内酯，R7为COOH(其例举的种类在例如Rhee等J.Med.Chem.，40，3228-33(1997)中描述)。
许多式III化合物是众所周知的，并且其它式III化合物可依据公开的方法制得(参见，例如，国际专利申请WO 99/20268(Burstein)，和美国专利2,509,386(Adams)、3,799,946(Loev)、3,856,821(Loev)、3,897,306(Vidic等)、4,064,009(Fukada等)、4,087,545(Archer等)、4,142,139(Bindra)、4,309,545(Johnson)、4,599,327(Nógrádi等)、4,833,073(McNally等)、4,876,276(Mechoulan等)、4,973,603(Burstein)、5,338,753(Burstein等)、5,389,375(E1Sohly)、5,440,052(Makriyannis等)、5,605,906(Lau)、和5,635,530(Mechoulam等)；和Charalambous等，Pharm.Biochem.Behav.，40，509-12(191)，Gareau等，Bioorg.Med.Chem.Lett.，6(2)，189-94(1996)，Griffin等，Br.J.Pharmacol.，126，1575-84(1999)，Huffman等，Bioorg.Med.Chem.Lett.，6，2281-88(1998)，Lemberger等，Clin.Pharmacol.Ther.，18(6)，720-26(1975)，Loev等，J.Med.Chem.，16(11)，1200-06 9(1973)，Loev等，J.Med.Chem.，17(11)，1234-35(1974)，Martin等，Pharm.Biochem.Behav.，46，295-301(1993)，Papahatjis等，J.Med.Chem.，41(7)，1195-1200(1998)，Pars等，J.Med.Chem.，19(4)，445-53(1976)，Pertwee等，Pharmacol.Ther.，74(2)，129-80(1997)，Razdan等，J.Med.Chem.，19(4)，454-60(1976)，Razdan，Pharmacol.Reviews，38(2)75-149(1980)，Reggio等，J.Med.Chem.，40(20)，3312-18(1997)，Reggio等，Life Sci.，56(23/24)，2025-32(1995)，(Ross等，Br.J.Pharmacol.，126，665-72(1999)，Thomas等，J.Pharm.Exp.Ther.，285(1)，285-92(1998)，Wiley等，J.Pharm.Exp.Ther.，285(1)，995-1004(1998)，Winn等，J.Med.Chem.，19(4)，461-71(1976)，和Xie等，J.Med.Chem.，41，167-74(1998))。
在其中式III的环C是芳香环的优选实施方案中，这样的化合物还可以通过用已知方法将适当的四氢***酚(THC)衍生物分子芳构化而制得(参见，例如，Adams等，J.Am.Chem.Soc.，62，23401(1940)；Ghosh等，J.Chem.Soc.，1393(1940)；和Adams等，J.Am.Chem.Soc.，70，664(1948))。例如，可通过将这样的化合物与硫在约238-240℃于氮气氛下加热约4小时来使其芳构化(Rhee等，J.Med.Chem.，40(20)，3228-33(1997))。其它合适的方法包括使用催化剂(例如披钯炭)或化学脱氢剂(例如2，3-二氯-5，6-二氰基醌)进行的芳构化(参见，例如美国专利3,799,946(Loev))。
如上所述，在一些应用中，特别是其中组合物中的至少一种化合物是***酚衍生物中，希望减轻某些这样的化合物所可能具有的有害精神活性。作为在组合物中使用非精神活性***酚衍生物(例如选择性CB2激动剂)之外的另一选择，可使用除了能减轻精神活性作用以外的其它药理活性剂。例如，因为某些上述化合物可能对CB1受体施加一些活性，所以经常希望给患者辅助施用选择性CB1拮抗剂。许多合适的选择性CB1拮抗剂是本领域已知的(Rinaldi-Carmona等，FEBS Lett.，350，240-44(1994)，还参见美国专利5,624,941(Barth等)、5,747,524(Cullinan等)，5,925,768(Barth等))。SR-1241716A是特别有效的，因此是用于本发明方法的优选选择性CB1拮抗剂。其它优选的选择性CB1拮抗剂是***二酚及其衍生物(参见，例如美国专利2,304,669(Adams)；Razdan等，Pharmacol.Reviews，38(2)，75-149(1986)；Reggio等，Life Sci.，56(23-24)，2025-32(1995))，它们能有效地拮抗CB1受体。除了拮抗CB1以外，***二酚和许多其衍生物还能有利地减弱肝脏中的细胞色素P450***，从而提高了组合物中其它化合物的生物利用度(例如Bornheim等，Chem.Res.Toxicol.，11，1209-16(1998))。因此，在本发明方法的一些实施方案中，药用组合物中的至少一种化合物是***二酚或其衍生物。优选的***二酚衍生物可以例如具有下式：
式IV
其中：
R1是：
a)H，
b)C1-4烷基或其酯，
c)COOH，
d)OH，
e)O-C1-5烷基(优选OCH3)或烷酰基，其任选地被一或二甲氨基或乙氨基取代，
f)含有羧基或氨基的O-CO-C3-10烷基，
g)
其中n＝1-8
h)对氨基苄基或C1-7氨基烷基或其有机或无机酸加成盐，对氨基苄基或氨基烷基的异氰酸酯或异硫氰酸酯衍生物，具有1-7个另外的碳原子的氨基烷基的羧基末端衍生物或其盐，该羧基末端衍生物的活化衍生物；
i)R1和R2构成式-O(CH2)3-5所示取代基，其中R1和R2与它们所键合的碳原子一起构成一个环，其中在所述环上至少有一个氢原子任选地被卤素取代，
j)内酯(例如，COCOH)；或
k)CH(CH3)CO2H或-OCOCH3
R2是：
a)H，OH，COOH，或卤素
b)C1-6羧基或烷氧基，或者
c)R1和R2构成式-O(CH2)3-5所示取代基，其中R1和R2与它们所键合的碳原子一起构成一个环，在所述环上至少有一个氢原子可任选被卤素取代，
R3是
a)(W)m-Y-(Z)n，其中
W是C5-12直链或支链(优选1S’CH3，2R’CH3二甲基)烷基、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，
Y是一条键、O、S、SO、SO2、CO、NH、N(C1-6烷基)、或NCS，
Z是：
i)C5-12烷基、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，任选被末端芳环取代，
ii)CN1-3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2，CONHC1-4烷基，或CON(C1-4烷基)2，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
iii)苯基或苄基，其中所述基团可任选被卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、CN、CF3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，并且其中
m和n相同或不同，并各自为0或1，
b)C5-12烷基或卤代烷基，所述基团可任选被末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
c)C5-12链烯基或炔基，所述基团可任选被卤素、二硫杂环戊烯(dithiolene)、末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同；
R5是
a)H，
b)C1-4烷基，
c)COOH，
d)OH，或OCH3，
e)O-C1-5烷基(醚)或烷酰基，其任选地用至少一个一或二-甲氨基或乙氨基取代；
R6是
a)氢，
b)C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，C1-6烷基，或C1-6卤代烷基，
c)CN，
d)CO2H，
e)CO2-C1-4烷基，
f)C(Y)(Z)-OH，
g)C(Y)(Z)-O-C1-4烷基，或
h)C1-6烷基-CO2-Y，
其中Y和Z各自独立地为H或C1-6烷基，
R7是：
a)羟基或内酯，
b)卤素，
c)C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，C1-6烷基，C1-6羧基，或C1-6卤代烷基，
d)CN，
e)N3，
f)CO2H，
g)CO2-C1-4烷基，
h)C(Y)(Z)-OH，
i)C(Y)(Z)-O-C1-4烷基，
j)C1-6烷基-CO2-Y，或
k)＝O或＝S，
其中Y和Z各自独立地为H或C1-6烷基，并且其中R7可以在环C的1，2，5，或6位中的任何之一上。
用于本发明的另一优选化合物是***环萜酚或其衍生物。优选***环萜酚衍生物可以具有例如下式：
式V
其中，
R1是：
a)H，
b)C1-4烷基或其酯，
c)COOH，
d)OH，
e)O-C1-5烷基(优选OCH3)或烷酰基，其任选地被一或二甲氨基或乙氨基取代，
f)含有羧基或氨基的O-CO-C3-10烷基，
g)
其中n＝1-8
h)对氨基苄基或C1-7氨基烷基或其有机或无机酸加成盐，对氨基苄基或氨基烷基的异氰酸酯或异硫氰酸酯衍生物，具有1-7个另外的碳原子的氨基烷基的羧基末端衍生物或其盐，该羧基末端衍生物的活化衍生物；
i)R1和R2构成式-O(CH2)3-5所示取代基，其中R1和R2与它们所键合的碳原子一起构成一个环，其中在所述环上至少有一个氢原子任选地被卤素取代，
j)内酯(例如，COCOH)；或
k)CH(CH3)CO2H或-OCOCH3
R2是：
a)H，OH，COOH，或卤素
b)C1-6羧基或烷氧基，或者
c)R1和R2构成式-O(CH2)3-5所示取代基，其中R1和R2与它们所键合的碳原子一起构成一个环，在所述环上至少有一个氢原子可任选被卤素取代，
R3是
a)(W)m-Y-(Z)n，其中
W是C5-12直链或支链(优选1S’CH3，2R’CH3二甲基)烷基、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，
Y是一条键、O、S、SO、SO2、CO、NH、N(C1-6烷基)、或NCS，
Z是：
i)C5-12烷基、链烯基、炔基、或其混合物，所述基团可任选被至少一个卤素取代，任选被末端芳环取代，
ii)CN1-3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2，CONHC1-4烷基，或CON(C1-4烷基)2，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
iii)苯基或苄基，其中所述基团可任选被卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、CN、CF3、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，并且其中
m和n相同或不同，并各自为0或1，
b)C5-12烷基或卤代烷基，所述基团可任选被末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同，或者
c)C5-12链烯基或炔基，所述基团可任选被卤素、二硫杂环戊烯、末端芳环、CN1-3、NCS、CO2H、或CO2C1-4烷基、CONH2、CONHC1-4烷基、或CON(C1-4烷基)2取代，其中在酰胺氮上的每一C1-4烷基可相同或不同；
R6选自
a)氢，
b)羟基或内酯，
c)卤素，
d)C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，C1-6烷基，或C1-6卤代烷基，
e)CN，
f)N3，
g)CO2H，
h)CO2-C1-4烷基，
i)C(Y)(Z)-OH，
j)C(Y)(Z)-O-C1-4烷基，或
k)C1-6烷基-CO2-Y，
其中Y和Z各自独立地为H或C1-6烷基，
R7选自：
a)氢，
b)羟基或内酯，
c)卤素，
d)C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，C1-6烷基，或C1-6卤代烷基，
e)CN，
f)N3，
g)CO2H，
h)CO2-C1-4烷基，
i)C(Y)(Z)-OH，
j)C(Y)(Z)-O-C1-4烷基，
k)C1-6烷基-CO2-Y，和
l)＝O或＝S；
其中Y和Z各自独立地为H或C1-6烷基，
R12和R12’一起形成＝O或＝S，或者各自独立地选自：
a)氢，
b)羟基或内酯，
c)卤素，
b)C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，C1-6烷基，或C1-6卤代烷基，
c)CN，
d)N3，
d)CO2H，
e)CO2-C1-4烷基，
f)C(Y)(Z)-OH，
g)C(Y)(Z)-O-C1-4烷基，和
h)C1-6烷基-CO2-Y，
其中Y和Z各自独立地为H或C1-6烷基，
Q为：
a)O或S，或
b)N-W，其中W是：
i)氢，
ii)C1-6烷氧基烷基、C1-6烷基、或C1-6卤代烷基
iii)OC1-6烷基、或OC1-6卤代烷基，
iv)CN，
v)C1-6烷基，
vi)C(Y)(Z)C1-4烷基，或
vii)C1-6烷基-CO2-Z，
其中Y和Z分别独立地为H或C1-6烷基。
许多***环萜酚衍生物是已知的，其它可以使用本领域已知的方法合成(参见，例如美国专利4,315,862)。
除了具有所指出的取代基以外，在式I-IV中任何一个的R3优选为：
或
Figure A0381106500292
其中W1是H、甲基、或乙基，其中W2和W3分别独立地为H或甲基，其中W1、W2和W3中至少有一个不是H和/或被卤代，并且其中W4是C1-4烷基或卤代烷基，所述基团可任选被芳环取代。R3优选为含有至少一个双键(更优选在C4-C10位置)的支链C6-12烷基，并且该链优选具有奇数数目的碳原子。更优选地，R3是末端支链的或含有末端双键，并且本发明提供了具有这样的取代基的式I-V的化合物。更优选地，R3优选为二甲基庚基(DMH)(例如1’，1’DMH或1’R，2’S DMH)、二甲基己基，或二甲基戊基。例如，R3可以是二-、三-或四甲基戊基、-己基、或-庚基等，链(例如1，1，5-三甲基己基、1，1，5，5-四甲基己基、或1，1，5-三甲基-庚-4-烯基)。在一些实例中，R3取代基可具有庞大的末端部分，例如甲基、二甲基，(CH2)1-6-CON(CH3)2、或具有卤代末端碳原子(优选溴，氟和碘)的C6-12卤代烷基。
在本发明上下文中，卤代烷烃、烯烃、和炔烃可具有任意数目的卤素取代基。在优选的实施方案中，卤代烷烃、烯烃、或炔烃在末端碳原子上具有至少一个卤素原子(例如CX1-3，其中X是卤素)。烷基(以及链烯烃和炔烃)可以是直链或支链。此外，化合物可以作为单一的立体异构体或立体异构体混合物(例如外消旋混合物)，或单一的几何异构体(例如E，Z，顺式或反式)或几何异构体混合物存在，所有这些形式的化合物都在本发明范围内。
在一个实施方案中，本发明提供防止HIV从一个体(例如HIV-感染的第一个体)传播至另一个体(例如处于HIV感染危险下的第二个体)的方法。按照该方法，局部施用药用组合物，其包括至少一种间苯二酚衍生化合物和/或***素(例如***酚衍生物，Δ8-THC衍生物，***环萜酚衍生物，***二酚衍生物，***萜酚衍生物)。间苯二酚衍生化合物和/或***素可以是如上所述的这些化合物中的一种或其组合。
结合本发明的方法，可以将间苯二酚衍生化合物和/或***素局部施用于第一或第二个体，甚至两个个体的表面。在这方面，可以将间苯二酚衍生化合物和/或***素施用于皮肤，粘膜组织，上皮层口腔或其它腔，或一个或两个个体表面的其它任何合适部分。化合物可以用于防止由于与第一个体接触而处于HIV感染危险下的第二个体的HIV感染。
该方法还可以用于保护处于HIV感染危险下的个体免于HIV污染的物品的HIV感染。在这方面，物品可以是可以被HIV感染的任何物品，如针，血液或血液制品，屏障避孕用具，或其它装置。为了辅助保护处于HIV感染危险下的个体在与这些装置接触时免于HIV，在接近个体与物品接触的时间，将间苯二酚衍生物和/或***素化合物施用于个体和/或物品。
本发明方法在抵抗主要通过***传播的人类HIV疾病中特别有效。实际上，其中将组合物施用于粘膜组织(例如***或直肠组织)的本发明方法的应用可以阻碍通过这些组织的病毒吸收，由此降低初次感染的发生率。因此，本发明提供防止HIV传播的方法。另外，药物高度亲油的性质确保它与***，子宫颈和结肠上皮的非特异性结合，提供屏障防止进一步传递通过也暴露于药物的相间错杂的朗氏细胞或树突细胞。
在本发明方法的实施中，典型地，以约1至约1000μM/ml，更优选10至100μM/ml，如约25至约75μM/ml的浓度传递烷基间苯二酚和/或***素化合物。
在本发明方法的实施中，在接近两个个体接触(或个体之一与污染的物品接触)的时间，将化合物局部施用于一个或两个个体或HIV污染的物品。理想地，将化合物在他们接触之前局部施用于一个或两个个体，或在个体与物品接触之前局部施用于个体或污染的物品。例如，可以将化合物在两个个体接触之前几秒或数秒(例如约5秒，或甚至约10秒或更多)，或约1分钟或几分钟(例如长于约30秒，如1分钟或两分钟，或甚至5分钟或更多，如至少约15分钟或更多)局部施用于个体。实际上，在个体之间接触之前多达半小时或1小时或数小时，通过局部施用该化合物可以获得适当的保护。在一些应用中，如果在接触之前或之后，如在与第一个体或HIV污染的物品接触数分钟内(如数小时内，或可能在约1天或约数天内)，将间苯二酚衍生化合物和/或***素局部施用，可以成功地减轻感染。实际上，尽管包含该化合物的组合物典型地刚好在***前施用，化合物保留在***穹窿内至少1至3天的能力是长期有利的，特别是因为某些***素可以具有与***上皮高度非特异性结合，导致增加的***分层和粘液样细胞层覆盖在分层的上皮之上，导致增加的粘液生成，其本身可以提供另外的保护。
为了有效地传递烷基间苯二酚和/或***素化合物，可以以任何所需方式配制它们以局部施用于期望组织。例如，可以将化合物配制成溶液或混悬剂(例如在水或油中)或在凝胶中，霜剂，软膏或适合于局部施用的其它流体或半流体制剂。备选地，化合物可以配制成与其它装置，优选屏障装置(例如避孕套，海绵，隔膜等)结合使用的组合物。配制单独或与这些屏障装置结合使用的组合物的方法在本领域公知，可以任意使用它们中的任何一种。
同时，为了用于本发明方法，烷基间苯二酚和/或***素化合物可以以任何适当和所需方式配制，本发明还提供适用于局部施用组织的组合物，其包含至少一种烷基间苯二酚和/或***素化合物和水不溶性生物附着性聚合物作为水凝胶。生物附着性(bioadhesive)聚合物是可以粘附于生物基质之上的聚合物。水凝胶是能够膨胀和不溶于水性介质如水的亲水基质。间苯二酚和/或***素化合物可以加载于这些生物附着性的聚合物或水凝胶之中，以使水吸收于基质之中，发生链松弛，药物分子通过水凝胶网络内的间隔或通道释放。
在本发明组合物内，活性剂(即烷基间苯二酚，***素，或其组合)典型地占组合物的至少约1％，如至少约2％或至少约5％，并且可以占组合物多达约20％，更典型地多达约15％或高达约10％。理想地，如上所述，烷基间苯二酚和/或***素化合物以约1μM/ml至约1000μM/ml，更优选约10μM/ml至约100μM/ml，如约25μM/ml至约75μM/ml的浓度存在。然而，如果需要，可以使用大得多浓度的间苯二酚和/或***素化合物，如高达约100mM/ml，或甚至高达约1000mM/ml或5000mM/ml。
许多生物附着性聚合物是由合成或天然聚合物制成。大多数当前的合成生物附着性聚合物是聚丙烯酸或纤维素衍生物。聚丙烯酸基聚合物的代表有卡波普，聚卡波非，聚丙烯酸(PAAc)，聚丙烯酸酯，聚(甲基乙烯基醚-共-甲基丙烯)酸，聚(甲基丙烯酸2-羟乙酯)，聚(甲基丙烯酸酯)，聚(烷基氰基丙烯酸酯)，聚(异己基氰基丙烯酸酯)，和聚(异丁基氰基丙烯酸酯)。纤维素制品包括羧甲基纤维素，羟乙基纤维素，羟丙基纤维素，羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，和甲基羟乙基纤维素。另外，(半)天然生物附着性聚合物包括壳聚糖和各种树胶如瓜尔胶，黄原胶，gellan，卡拉胶，果胶，和藻酸盐。最后，作为合成生物附着性聚合物可以包括PHPAAm，聚(乙烯吡咯烷酮)，和聚(乙烯醇)。为了获得理想的生物附着和稠度，期望聚合物构成组合物的约0.5％和约5％，更典型地组合物重量的约1％和约3％。
用于本发明的优选聚合物是聚卡波非，U.S.P.，其可商购自俄亥俄州，克利夫兰的B.F.Goodrich Speciality Polymers，商品名为NOVEONAA-1USP。该水不溶性聚合物表观pKa约为4.5，在水中重量提高60-100倍。它是合成的，不吸附的无毒物质，对高温和高氧含量稳定。含有聚卡波非的凝胶已经显示保留在***组织上3-4天，并用作传递药剂如孕酮的平台。因为***素在结构上与类固醇相比，将聚卡波非用作主要功能聚合物是理想的。
可以与NOVEONAA-1结合使用的其它生物附着性聚合物有Noveon卡波普934P NF，卡波普974P NF，和卡波普971P NF。自从20世纪60年代中期，卡波普934P NF聚合物已经广泛用于口服混悬剂和片剂。在过去10年中，Noveon，Inc.已经设计两种在乙酸乙酯中聚合的新产品，作为卡波普934P NF聚合物在毒理学上优选的备选。卡波普974P NF具有类似于卡波普934P NF的流变学性质：两者都是高度交联的聚合物，生成半固体制剂，流动流变学极短。短流动流变学可以表征为类似于蛋黄酱的胶凝稠度。卡波普971P NF是高度交联的聚合物，在低使用水平下提供极低的粘度和优异的产率值。基于卡波普971P NF聚合物的半固体剂型具有较长的流变学，将以类似蜂蜜的方式流动。还可以使用进行从液体至半固体变化的相变聚合物。相变聚合物的实例有泊洛沙姆407，羧甲基纤维素钠，卡波普，透明质酸，或黄原胶。
典型地，通过聚合物或预聚物和交联剂的聚合反应制备生物附着性聚合物。适当的交联剂包括二乙烯基乙二醇，二乙烯基苯，N，N-二烯丙基丙烯酰胺，3，4-二羟基-1，5-己二烯，2，5-二甲基-1，5-己二烯和类似试剂。应当以这样的量存在交联剂即提供足够的生物粘着以允许***保持附着在靶上皮表面足够的时间以允许使期望的剂量给药发生。另外在最优选的实施中，生物附着性聚合物含有约0.05％至约2％重量的交联剂，尽管它可能含有约0.01％至约10％重量的交联剂。通过改变聚合物中交联剂的量可以调整聚合物制剂以控制药物(***素和烷基间苯二酚)的释放速率。例如，大于2％交联剂可以降低聚合物吸附水和膨胀的能力，这在一些***中可能是期望的。
凝胶的流变学性质将决定与期望表面接触的制剂中给定药物的滞留时间。其释放将由多个因素决定，包括药物与聚合物的相互作用和药物与胶束的分离。凝胶本身的物理特性由交联的程度决定。例如，卡波姆934P是可以用于本发明制剂的凝胶形成剂(former)，其可以被其它凝胶形成剂替代，如卡波姆974P，卡波姆980和甲基纤维素或丙基纤维素。尽管C981和C940交联密度不同(C940更高的交联)，释放通常无差异。卡波普1342具有共价结合的，亲油修饰，即丙烯酸长链(C10-C30)烷基酯。认为胶束和聚合物之间的亲油相互作用导致从该凝胶的较慢释放。在另一方面，已经显示卡波姆934P在禁食大鼠的小肠中具有零级释放。
对于***给药，优选制剂保持附着在上皮表面至少约24至约72小时的时期。这些结果可以在不同时期在临床上测量。当通常获得该优选生物粘着水平时，交联剂以约0.1-约6.0重量％的聚合物存在，最优选约1.0-2.0重量％，只要导致适当水平的生物粘着。***自给药的方便剂型是凝胶。因此，制备含有1-3％聚卡波非加上通常赋形剂制剂的产品以生产稠的乳剂-凝胶。取决于其预期的靶治疗，产品的pH可以调整至2.5-7，更典型地3.0-6；对于***施用的典型pH为约4.5-6.5。
不同卡波普和聚卡波非的相互作用可影响选择哪种活性剂和赋形剂的组合。相对于例如聚卡波非，对卡波姆发现的更高的钙结合亲和力可以归因于它们不同的交联方式。聚卡波非通过二乙烯基乙二醇交联，且程度低于卡波姆，卡波姆通过烯丙基蔗糖交联。例如，聚卡波非和卡波普934P的组合研究显示，观察到聚卡波非的钙结合亲和力统计显著(P＜0.05)低于卡波姆。然而，选择适合于期望最终使用的适当聚合物和交联剂在本领域普通技术范围内。
这些材料具有的优点是它们提供药物在粘膜表面滞留比简单液体或粉末***发现的更长时期的能力。聚合物混合物如聚卡波非和daichitosan可以结合不同聚合物的属性以提供优异的生物附着性。因为***素是高度亲油的和已经显示具有与***上皮的高度非特异性结合和与固有层较低的非特异性结合。
应当避免干燥葡聚糖微球粒的使用，因为它导致细胞不可逆的收缩，最终导致胞间连接的物理分离，这在STD如HIV-1，HSV-2和细菌病原体的固定中是不合需要的。
渗透促进剂(例如甘胆酸钠，脱氧甘胆酸钠，和十二烷基硫酸钠)，也可以掺入本发明的组合物中。这些试剂可以提高药剂穿过粘膜的渗透性和由此提高它们的生物利用度。当包括这些渗透促进剂时，典型地它们占组合物的约0.5％-10％(w/v)，更典型地约1％-5％(w/v)；然而，根据需要可以使用稍微或多或少的渗透促进剂。
为了制备掺入本发明制剂的***素或烷基间苯二酚，可以将化合物在适当载体，典型地油中溶解或乳化。将1gm药物溶解在1ml醇或10gm药物溶解在25ml温热的芝麻油中是常规增溶途径。然而，***子油在本发明制剂中期望代替芝麻油使用。来源于***子油的优选油是多不饱和的必需脂肪酸∶γ-亚麻酸(c18∶3w6)(GLA)及其代谢物(1-6％)dihomo-γ-亚麻酸或DGLA(C20∶3w6)，LA亚麻酸(C18∶2w6)(50-70％)，LNA亚麻酸(C18∶3w3)(15-25％)，其可具有抗氧化作用。其它脂肪酸可以用于乳化复合体：硫辛酸是脂溶性和水溶性的，易于吸收和转运穿过细胞膜，用作胞外和胞内抗氧化剂。它与环糊精以1∶1的化学计量形成包含复合体。辅酶10(泛醌)是另一种具有抗氧化作用的脂肪酸，可以与***素和烷基间苯二酚复合。尽管吐温80(聚山梨酸酯80)已经用于***素眼用制剂的乳化，作为阴离子洗涤剂它不优选用于本发明的组合物中。另外，吐温80在大鼠中显示类似于DES的对子宫和发情周期的作用。聚山梨酸酯可以用5％的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)替代，因为其悬浮能力以及润滑和粘附性质，聚乙烯吡咯烷酮也是有用的。它可以与聚乙烯吡咯烷酮作为共聚物复合。本领域技术人员将知道在增溶之前制备乳剂的方法。亲水-亲油平衡或HLB将决定混合物所选乳化剂的比率。例如，当将十二烷基硫酸钠用作乳化剂时，不应该以大于5％w/v使用它以防止对***粘膜的任何可能刺激。十二烷基硫酸钠更酸稳定和将乳剂保持pH为4.5-6.5，这是***分泌的理想pH范围。典型地，当乳化剂包括在本发明组合物中时，它占组合物的约0.5％至约10％，更典型地约1％至约5％，经常约3％重量。
除了聚合物体系，任选的穿透剂，和任选的乳化剂，本发明组合物还可以包括增溶剂。优选的增溶剂是环糊精(CD)，其是含有连成环的6-8个吡喃型葡萄糖单元的寡糖。在本发明上下文中，术语“环糊精”包括环糊精及其衍生物，例如醚，酯和酰胺衍生物。适当的环糊精包括α-环糊精，β-环糊精和γ环糊精，2-羟基-丙基-b-环糊精(2-HP b-CD)，甲基-β-环糊精(2，6-DM14-b-CD)，硫代丁基醚b-环糊精(SBE-b-CD)，聚合物-β-环糊精。它们的环状结构提供环糊精疏水腔。通过将它们复合到环糊精的疏水腔中将环糊精典型地用于增加药物的水溶性。极性较小的药物分子和疏水性药物可以进入这些腔，形成包含复合体。包含复合可以增强包括的药物分子的溶解性和稳定性。环糊精可以影响溶质在胶束之间的分配。控制取代度在平衡水溶性和复合能力中是重要的。例如，将甲基取代基引入2-和6-位似乎改善多种药物包含于CD腔。2，6-DM 14-b-CD的结合常数平均比b-CD大5倍，然而由于可能的肾毒性不应当***使用(Thompson DO)。甲基似乎增加CD腔的疏水性以及在母体CD上增加衍生物的溶解性。甲基化程度在优化复合中是重要的。(2HP)-b-CD的两种商购制剂，Encapsin和Molecusol确认了该折衷的需要并具有在溶解性和复合之间提供平衡的取代水平。Encapsin和Molecusol分别具有约4和8的MDS值。
硫代丁基醚b-CD：最佳的阴离子CD。SBE-b-CD制剂在所有取代水平下显示良好的水溶性和有效的复合特性，但对于商购的SBE b-CD衍生物，七取代的制剂是最佳规格。该水平的取代有效地最经济地消除在产品中残余的b-CD。SBE7-b-CD(Captisol)具有高的内在水溶性(＞50％wt/v)和显示比得上不饱和-CD的结合能力，但经常好于HP-β-CD。它不能形成1∶2复合体可有助于潜在的安全利益。这由Cydex作为Captisol上市。Captisol不是一种渗透促进剂，这对于膜活性药物是有利的。
在环糊精腔的大小和聚合物的截面积之间存在良好的关联，这应当允许CD增溶的药物传递而到达靶组织。***素文献的实例证实用环糊精增溶Δ8-THC的可能性：在10％β-羟丙基环糊精溶液中以100μM的浓度制备HE-211溶液。这不能转化成1∶1的摩尔比。PCT申请99/32107显示β-羟丙基环糊精与THC一起使用。包含b环糊精，羟丙基-b-环糊精或SBE-β-CD的包含复合体与***素或烷基间苯二酚的摩尔比理想地为1∶1或1∶2。另一实施方案包含足够的环糊精而形成含有γ-环糊精，羟丙基-环糊精和聚合物-β-环糊精的包含复合体，***素或烷基间苯二酚与环糊精的摩尔比为1∶2或1∶1。还有另外的实施方案包含分子量为4000-4500的聚合物-β-环糊精作为能够与***素和烷基间苯二酚形成包含复合体的试剂。增溶剂与***素的重量比典型地为100∶1-5∶1，优选30∶1-10∶1。因此，当将环糊精作为增溶剂用于组合物中时，它们可以占组合物的约1％至约25％，更典型地约3％至约20％，如约5％-约15％。
用于本发明的组合物还可以包含一种或多种药用或化妆品用添加剂，它们在此称为典型地有助于提供卫生产品延长的货架寿命和顾客接收性的辅药。例举性的辅药包括防腐剂，组织调色剂，组织调节剂，组织触觉增强剂，软化剂，润滑油(例如脂类)，乳化剂，润滑剂，着色剂，和提供气味的试剂(增味剂)。
已知与女性卫生产品一起使用的典型防腐剂包括乙醇，棕榈酸抗坏血酸酯，苯甲酸，丁基化羟基苯甲醚，丁基化的，羟基甲苯，氯代丁醇，乙二胺，对羟基苯甲酸乙酯，乙基香草醛，甘油，对羟基苯甲酸甲酯，一硫代甘油，苯酚，苯乙醇，硝酸苯汞，对羟基苯甲酸丙酯，黄樟油，苯甲酸钠，甲醛合次硫酸氢钠，焦亚硫酸钠，山梨酸，二氧化硫，马来酸，和没食子酸丙酯。明显地，根据任何前述防腐剂对***刺激的程度，应当选择较不刺激的防腐剂。
已知与女性卫生产品一起使用的在本文中使用的典型软化剂通常是温和的，脂性或油性物质，包括蓖麻油，硫酸化蓖麻油，可可油，椰子油，冷霜，玉米油，棉籽油，有玫瑰香水味的软膏(也称为冷霜)，十二烷基硫酸钠、丙二醇和楼梯井(stairwell)醇的组合，芝麻油，可可油，肉豆蔻醇和鲨鱼肝油。
已知与女性卫生产品一起使用的在本文中使用的典型润滑剂或油有矿脂，白或黄蜡，可可油，油酸，橄榄油，霍霍巴油，石蜡，甘油淀粉，羊毛脂，亲水性矿脂，矿物油，乙酰基醇，单硬脂酸甘油酯，硬脂酸，聚乙二醇，硬脂酸-40-聚烃氧基酯，聚山梨酸酯，硅氧烷弹性体，胆固醇和高分子量脂类。当存在时，典型地这些润滑剂占组合物重量的约0.5％-约5％，如约1％-约3％。
软化剂和润滑剂为卫生产品提供适当的润滑性，触觉感觉和擦入性质以增强使用的简易和鼓励顾客更不受限制地和更经常地使用产品。某些四元化合物允许诸如矿脂的物质与甘油结合和在个人关爱产品中而不感觉油腻。矿脂-甘油结合在缓和干燥皮肤中特别有效。已知与女性卫生产品一起使用的在本文中使用的典型乳化剂有海藻酸钠，卡波姆，羧甲基纤维素钠，卡拉胶，明胶，羟乙基纤维素，羟基丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，辛苯苷醇-9，油醇，聚乙烯醇，聚乙烯吡咯烷酮，十二烷基硫酸钠，山梨糖醇酐酯，楼梯井醇，黄蓍胶，和黄原胶。将乳化剂用于生产水包油型乳剂并可以分成三类：单分子的，多分子的和固体颗粒。已知的单分子乳化剂包括月桂酸钾，聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯。多分子乳化剂包括***胶和明胶。固体颗粒乳化剂包括膨润土，石墨和氢氧化镁。乳化剂也可以在化学上分成阴离子型，阳离子型和非离子型。
已知与女性卫生产品试剂一起使用的在本文中有效的典型润滑剂有甘油，丙二醇，吡咯烷酮羧酸，乳酸钠，脲，和某些天然脂类混合物。其它已知的润滑剂包括某些蛋白质，明胶，透明质酸，维生素和一些天然成分。一些所用蛋白质是胶原，弹性蛋白，胎盘蛋白，还使用来自哺乳动物上皮组织的蛋白质。
组合物还可以包含一种或多种防腐剂，如在现有技术中所常规使用的。优选的防腐剂是对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯和山梨酸，但根据需要可以使用其它。
上面化合物-聚卡波非，卡波普，环糊精，5％聚乙烯吡咯烷酮，与作为乳剂的新***素和/或间苯二酚和硫辛酸和辅酶Q10的组合乳剂混合物-的一种组合可以产生用于本发明方法的适当组合物。具体制剂可以根据传递方式，即凝胶，栓剂，明胶胶囊或缓释装置而变化。然而，通常，基于重量百分比的赋形剂的范围可以如下：
溶剂            纯化水：40-80％
乳化剂          聚乙烯吡咯烷酮
                聚乙烯吡咯烷酮：1-5％
                硫辛酸或辅酶Q10或亚油酸或***籽油(hemp oil)：1-3％
活性剂          ***素或烷基间苯二酚：1-10％(以10-100μM/ml提供)
增溶剂          环糊精：5-15％
生物附着剂      NOVEONAA-1(聚卡波非)(1-3％)
                卡波普(凝胶形成聚合物)(1-3％)
                壳聚糖
渗透促进剂      甘氨胆酸钠(1-5％w/v)
                十二烷基硫酸钠(1-5％w/v)
防腐剂          对羟基苯甲酸甲酯(0.5-2％)
润滑剂          丙二醇或硅氧烷弹性体，Dow Coming(1-3％)
因为性接触是HIV传播的主要方式，本发明组合物的一种优选使用方式是在***内。关于该应用，可以将组合物以约0.01至约5mg/cm2，如约0.05至约3mg/cm2接触***细胞的量施用。假设***平均具有约40cm2的内表面，可以将约1.75g至2.5g剂量的本发明组合物施用于***。然而，根据需要可以使用或多或少的组合物。实际上，对***上皮的施用可以是和优选超过所需以提供杀微生物活性。
为了将本发明方法的产品传递至***和子宫颈，可以使用适当的方法，例如通过含有凝胶的子宫帽或隔膜，通过***栓剂或通过柱塞施用的凝胶帽，通过与容器连接的导管作为凝胶或溶液施用，***海绵，一次性压挤瓶或无针注射器，或通过灌洗器或其它适当的工具如类似带孔棉塞的装置或包含在男性避孕套中。引入***用于传递组合物的任何装置可以涂布促进组合物从内储存室释放的物质。备选地，本发明的产品可以通过可以在***环境中溶解的软弹性胶囊传递。通过加入甘油，山梨糖醇，或类似的多元醇可以进一步将明胶增塑。主要关注的是明胶的来源。如果是动物来源，宗教考虑可能阻止其使用，特别是在印度和***国家，除非它来源于鱼。可获得犹太教所规定允许的制剂，可以获得合成的与动物无关的凝胶帽。
                    制备实施例
制备实施例1
将2，6-二甲氧基苯酚(73.4g，0.48mol)，2，6-二甲基-2-庚醇(69.0g，0.48mol)和甲磺酸(95mL)的混合物在50℃搅拌3小时，然后在室温搅拌过夜。在搅拌下将该混合物倒入冰水(600mL)中。用二氯甲烷(2×200mL)萃取该混合物。将该萃取液用水、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥。将该溶液减压浓缩，获得油状产物(130g，96％)。该物质的分析(MS(FAB)m/z 281(MH)+；1H NMR(CDCl3)δ0.80(d，6H)，1.0-1.1(m，4H)，1.27(s，6H)，1.40-1.60(m，3H)，3.89(s，6H)，5.36(s，1H)，6.54(s，2H))显示了其是4-(1，1，5-三甲基己基)-2，6-甲氧基苯酚(以下称为IMG-502)：
制备实施例2
将得自实施例1的粗制4-(1，1，5-三甲基己基)-2，6-二甲氧基苯酚(130g，0.46mol)在无水CCl4(100mL)中的溶液在冰浴中冷却，并加入亚磷酸二乙酯(70mL，0.54mol)。向该搅拌混合物中滴加三乙胺(75mL，0.54mol)，控制其加入速度以维持反应混合物的温度低于10℃。将该反应混合物在冰浴中搅拌2小时，并在室温搅拌过夜。然后将该混合物用二氯甲烷(200mL)稀释，用水、4N氢氧化钠水溶液(100mL)、1N盐酸水溶液(125mL)，水和饱和氯化钠水溶液洗涤。将提取液用无水硫酸钠干燥，并减压浓缩。通过二氧化硅柱色谱法纯化粗产物，用环己烷∶EtOAc(7∶1-3∶1梯度)洗脱，获得103g(54％)产物，其为无色蜡状油。该物质的分析(MS(FAB)m/z417(MH)+。1H NMR(CDCl3)δ0.81(d，6H)，1.0-1.1(m，4H)，1.26(s，6H)，1.35-1.6(m，9H)，3.86(s，6H)，4.25-4.38(m，4H)，6.53(s，2H))显示其为4-(1，1，5-三甲基己基)-2，6-二甲氧基苯基二乙基磷酸酯：
制备实施例3
将得自实施例2的4-(1，1，5-三甲基己基)-2，6-甲氧基苯基二乙基磷酸酯(82g，0.197mol)在Et2O(175mL)和THF(35mL)中的溶液缓慢地加到包含在装配有机械搅拌器、温度计、干冰冷凝器和压力平衡式加液漏斗的三颈容器内的液氨(450mL)中，同时以维持蓝色的速度加入新切割的-锂丝小片(2.8g，0.40g-原子)。将该反应混合物再搅拌1小时，然后通过加入饱和NH4Cl水溶液(22mL)来中止反应。加入***(220mL)，将氨蒸发过夜。用水(220mL)处理该残余物。分离各层，将***层用4N NaOH(200mL)，水(2×200mL)和饱和氯化钠水溶液洗涤。将有机萃取液干燥(MgSO4)并减压浓缩。通过二氧化硅柱色谱法纯化粗产物，用环己烷∶EtOAc(95∶5)洗脱，获得43g(83％)产物，其为无色油状物。该物质的分析(MS(FAB)m/z 265(MH)+；1H NMR(CDCl3)δ0.80(d，6H)，1.00-1.10(m，4H)，1.26(s，6H)，1.4-1.6(m，3H)，3.79(s，6H)，6.30(m，1H)，6.49(m，2H))显不其为4-(1，1，5-三甲基己基)-2，6-二甲氧基苯(以下称为IMG-503)：
Figure A0381106500411
制备实施例4
将得自实施例3的4-(1，1，5-三甲基己基)-2，6-二甲氧基苯(10g，0.038mol)在无水二氯甲烷(100mL)中的溶液在冰浴中冷却，然后用1小时向其中滴加三溴化硼的二氯甲烷溶液(100mL 1M溶液，0.10mol)进行处理。将该混合物在冰浴中搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。将该反应混合物在冰浴中冷却，并小心地用水(100mL)处理。将所得混合物用二氯甲烷(100mL)稀释，并用半饱和碳酸氢钠水溶液处理。分离各层，将有机层减压浓缩至一半体积，并用2N氢氧化钠水溶液(2×75mL)萃取。将该碱性水萃取液冷却，并用1N盐酸水溶液酸化至pH3.0。用Et2O(2×100mL)萃取该酸化的混合物。将***层用饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，并减压浓缩。通过二氧化硅柱色谱法纯化所得粗产物，用环己烷∶EtOAc(8∶1-4∶1梯度)洗脱，获得8.0g(90％)产物，其为无色固体结晶。该物质的分析(Mp95-96℃。MS(FAB)m/z 237(MH)+；1H NMR(CDCl3)δ0.80(d，6H)，1.00-1.10(m，4H)，1.23(s，6H)，1.40-1.58(m，3H)，4.65(s，2H)，6.17(m，1H)，6.38(m，2H))显示其为5-(1，1，5-三甲基己基)间苯二酚(以下称为IMG-501)：
制备实施例5
将得自实施例4的4-(1，1，5-三甲基己基)间苯二酚(2g，0.0076mol)在无水二氯甲烷(10mL)中的溶液在冰浴中冷却，并滴加三溴化硼在二氯甲烷中的溶液(2.6mL 1M溶液，0.0026mol)。将该混合物在冷却浴中搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。将该混合物在冰浴中冷却，并用水(10mL)小心地处理，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)处理。分离出有机层，用硫酸镁干燥，并减压浓缩。通过二氧化硅柱色谱法纯化残余物，用环己烷∶EtOAc(8∶1-4∶1梯度)洗脱，获得0.364g(19％)产物，其为无色油状物。该物质的分析(MS(FAB)m/z 251(MH)+；1H NMR(CDC3)δ0.80(d，6H)，1.00-1.10(m，4H)，1.24(s，6H)，1.4-1.6(m，3H)，3.78(s，3H)，4.67(s，1H)，6.23(m，1H)，6.40(m，1H)，6.47(m，1H))显示其为3-甲氧基-5-(1，1，5-三甲基己基)苯酚(以下称为IMG-504)：
制备实施例6
向来自实施例1的粗制4-(1，1，5-三甲基己基)-2，6-二甲氧基苯酚(0.19g，0.68mmol)在无水THF(6mL)中的溶液加入碘代甲烷(0.78g，5.4mmol)。在氮气气氛下用氢氧化钠在矿物油中的60％分散液(0.06g，1.5mmol)处理混合物。在室温下搅拌混合物24小时，然后减压浓缩。用***(20mL)处理残渣。小心加入水(5mL)。分离层，用水(5mL)洗涤***层，干燥(MgSO4)并减压浓缩。通过二氧化硅柱色谱纯化粗产品，使用环己烷/EtOAc 6∶1作为洗脱剂以获得0.17g(85％)产物。该物质的分析(MS(FAB)m/z 295(MH)+ 1H NMR(CDCl3)δ0.81(d，6H)，1.0-1.2(m，4H)，1.28(s，6H)，1.40-1.60(m，3H)，3.84(s，3H)，3.87(s，6H)，6.53(s，2H))显示其为1-(1，1，5-三甲基己基)-3，4，5-三甲氧基苯(以下称为IMG-507)：
Figure A0381106500431
制备实施例7
将来自实施例6的1-(1，1，5-三甲基己基)-3，4，5-三甲氧基苯(0.344g，1.5mmol)和香叶醇(0.348g，1.5mmol)和对甲苯磺酸(0.03g)在无水苯(50mL)中的溶液加热回流2小时。将混合物浓缩至干燥。通过制备性厚层板(2×0.25mm)色谱法纯化粗产物，使用环己烷∶EtOAc 5∶1作为展开剂，接着二氧化硅柱色谱法，使用环己烷/EtOAc 95∶5作为洗脱液以获得0.107g(20％)产品。化合物的分析(MS(FAB)m/z 373(MH)+ 1H NMR(CDCl3)δ0.80(d，6H)，1.0-1.2(m，4H)，1.21(s，6H)，1.31(s，3H)，1.4-1.51(m，2H)，1.52-1.7(m，9H)，1.7-1.9(m，2H)，2.0-2.15(m，2H)，2.60(t，2H)，4.56(s，1H)，5.1(m，1H)，6.31(s，1H)，6.39(s，1H))显示其为3，4-二氢-2-甲基-2-(4-甲基-3-戊烯基)-7-(1，1，5-三甲基己基)-2H-1-苯并吡喃-5-醇(以下称为IMG-508)：
Figure A0381106500432
制备实施例8
将5-(1，1，5-三甲基己基)间苯二酚(0.472g，2mmol)，对薄荷-2-烯-1，8-二醇(0.30g，2.1mmol)和对甲苯磺酸(0.084g)在无水苯(25mL)中的溶液在迪安-斯达克榻分水器中回流4小时。将混合物冷却至室温并用饱和碳酸氢钠水溶液(25mL)处理。分离层。用苯萃取水层。干燥(MgSO4)合并的有机萃取液并减压浓缩。粗产物用硅胶柱色谱分离，使用环己烷/EtOAc 95∶5作为洗脱剂而获得0.22g(30％)产品。化合物的分析(MS(FAB)m/z 371(MH)+.1H NMR(CDCl3)δ0.80(d，6H)，1.00-1.10(m，4H)，1.11(s，3H)，1.21(s，6H)，1.39(s，3H)，1.4-1.52(m，3H)，1.71(s，3H)，1.75-1.95(m，3H)，2.1-2.2(m，1H)，2.62-2.73(m，1H)，3.12-3.25(m，1H)，4.61(s，1H)，5.4-5.5(m，1H)，6.23(s，1H)，6.39(s，1H))显示其为3-正戊基-3-(1，1，5-三甲基己基)-Δ8-四氢***酚(以下称为IMG-509)：
Figure A0381106500441
制备实施例9
将4-(1，1，5-三甲基己基)-2，6-二甲氧基苯酚(10g，35.7mmol)在无水吡啶(70mL)中的溶液冷却至0℃。向搅拌的溶液中滴加三氟甲磺酸酐(11g，39mmol)。在加入完成后，使反应混合物升温至室温并在氩气下室温搅拌过夜。向混合物中加入附加量的三氟甲磺酸酐(1.7g，6mmol)并在室温下搅拌2小时。将混合物减压浓缩以去除大部分吡啶。用冷水(100mL)处理残渣并用CH2Cl2(3×50mL)萃取。用1N HCl和盐水洗涤有机萃取液，干燥并减压浓缩以获得有机浆(14g，95％)。浆如此获得的三氟甲磺酸酯(triflate)这样用于下一步骤。
将上面的三氟甲磺酸酯(10g，23.3mmol)，无水氯化锂(8.3g，196mmol)，三苯膦(3.83g，14.6mmol)和二氯双(三苯膦)钯(II)(1.8g，2.6mmol)在无水DMF(110mL)中的混合物在氮气气氛下放置在不锈钢压力容器中。向该混合物加入四甲基锡(10g，56mmol)和几毫克2，6-二-叔丁基-4-甲基苯酚。将混合物在油浴中在120℃下加热24小时。加入附加量的四甲基锡(5.5g，19mmol)和少许2，6-二-叔丁基-4-甲基苯酚晶体，将混合物在130℃下加热24小时。将混合物冷却至室温并过滤通过硅藻土垫以去除钯催化剂。将滤液减压浓缩至1/4体积并过滤以去除黄色固体。将滤液进一步浓缩至接近干燥。将残渣溶解在CH2Cl2(200mL)中，连续用1.5N HCl(5×100mL)，饱和氟化钾水溶液(5×50mL)，和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO4)并减压浓缩以获得深色油。将这通过二氧化硅柱色谱法纯化，使用环己烷/CH2Cl2梯度(97∶3-90∶10)以获得1.82g(27％)二甲氧基甲基化合物。该产物如此用于下一步骤。
将上面二甲氧基化合物(1g，3.6mmol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液冷却至0℃，用BBr3在CH2Cl2(7.2mL，7.2mmol)中的1M溶液逐滴处理。将混合物在冷浴中搅拌2小时，然后在室温下搅拌过夜。将反应混合物在冰浴中冷却并用半饱和的碳酸氢钠水溶液(20mL)稀释。用CH2Cl2(25mL)稀释混合物，分离层。干燥(MgSO4)有机萃取液，在减压下去除溶剂以获得米色固体，其通过二氧化硅柱色谱法纯化，使用环己烷/EtOAc 95∶5作为洗脱液以获得0.41g(46％)产品。产品分析(Mp145-147℃.MS(FAB)m/z251(MH)+.1H NMR(CDCl3)d0.80(d，6H)，1.00-1.10(m，4H)，1.21(s，6H)，1.40-1.55(m，3H)，2.11(s，3H)，2.07(s，2H)，6.37(s，2H))显示其为2-甲基-5-(1，1，5-三甲基己基)间苯二酚(以下称为IMG-510)：
制备实施例10
将3-正戊基-3-(1，1，5-三甲基己基)-Δ8-四氢***酚(1.4g，3.8mmol)和元素硫(0.3g，0.5mmol)的混合物放置在试管中并在沙浴中在240-260℃下加热3小时。通过二氧化硅柱色谱法纯化粗产物，使用环己烷/EtOAc 97∶3作为洗脱剂以获得0.7g(51％)产品。产品分析(MS(FAB)m/z 367(MH)+.1H NMR(CDCl3)δ0.79(d，6H)，1.00-1.11(m，4H)，1.25(s，6H)，1.38-1.58(m，3H)，1.60(s，6H)，2.39(s，3H)，5.09(s，1H)，6.41(s，1H)，6.56(s，1H)，7.05(d，1H)，7.15(d，1H)，8.16(s，1H))显示其为3-正戊基-3-(1，1，5-三甲基己基)***酚(以下称为IMG-511)：
实验实施例1
下述研究包含5种IMG化合物(507-511)和***素及它们在各种测定中的活性。除了经典的使用HeLa工程细胞的附着和融合测定以外，所有工作是使用外周血单核细胞(PBMC)进行的。在加入时间测定中评估在PBMC中标准的6天抗病毒测定期间所有化合物抑制HIV-1附着和融合。在这些研究期间进行另外的实验或者当个人努力遇到问题时设计改进方法。
将IMG化合物制备为100％DMSO中的溶液。***二酚购自SigmaChemical(St Louis，MO)，并溶解在100％DMSO中。所有DMSO中的贮液在-20℃下冷冻保存，在使用前即刻解冻。在贮液制备和测定布置期间使用光预防以最小化溶解的化合物在处理期间对环境光的曝露。
PBMC分离和冲击处理(blasting)：
通过菲可hypaque梯度分离，从健康肝炎-和HIV-阴性供体中获得外周血单核细胞(PBMC)。洗涤单核细胞以除去残余的分离介质，计数，测定生存力，将细胞以1×106个细胞/mL的浓度重悬浮在补充有下述物质的RPMI 1640培养基中：15％热灭活的胎牛血清、2mM L-谷氨酰胺、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素、和10μg/mL庆大霉素、以及2μg/mL PHA。培养细胞(37℃，5％CO2)48-72小时。在温育后，通过离心收集细胞，洗涤，并重悬浮在补充有以下各项的RPMI 1640培养基中：15％热灭活的胎牛血清、2mM L-谷氨酰胺、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素、和10μg/mL庆大霉素、20U/mL重组IL-2(R&D Systems，Minneapolis，MN)。在培养基中包括IL-2是保持由PHA促有丝***刺激引发的细胞***，并促进PBMC的最佳生长条件。然后维持该培养物直至使用，每3天用新鲜的含IL-12的培养基改变培养物体积。
PBMC测定：
人外周血单核细胞(PBMC)来自最少2个已经用PHA和IL-2冲击处理的供体，对其计数，通过锥虫蓝染料排斥测定生存力并等比率混合。使用合并的供体以最小化在个体供体之间观察到的变异性，其产生于HIV感染和原代淋巴细胞群对PHA和IL-2的总响应的定量和定性差异。将细胞以1×106个细胞/mL重悬浮在补充有下述物质的不含酚红的RPMI1640中：15％胎牛血清(热灭活)、2mM L-谷氨酰胺、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素、10μg/mL庆大霉素和IL-2(20U/ml，R&DSystems，Minneapolis，MN)。然后以南方研究院传染病研究室开发的标准形式将50μl细胞分配到96孔圆底微量滴定培养板的内部60孔中。每个平板包含细胞对照孔(只有细胞)、病毒对照孔(细胞加病毒)、实验孔(药物加细胞加病毒)。备选地，将细胞以1×106个细胞/ml的起始密度培养在T25cm2或T75cm2组织培养瓶中。向该微量滴定板或组织培养瓶中加入连续稀释的化合物，然后加入适当预滴定的HIV-1毒株。对于病毒复制抑制实验使用HIV-1毒株RoJo。这是一种低传代可能B亚型的儿科分离物，其在南方研究院人员分离的MT-2细胞中具有合胞体诱导(SI)表型。所有样品一式三份测定，可能伴随测定化合物的毒性。微量滴定板中每孔的终体积为200μl。组织培养瓶中的终体积根据实验设计合摇瓶大小而变化。将分析物在37℃、5％CO2下在湿润气氛中培养6天，然后收集上清液以通过MTS染料还原分析RT活性和细胞生存力。还用显微镜检查培养物，注意任何异常，在组织培养瓶的情形中，细胞计数和通过锥虫蓝染料排斥测定生存力。
PBMC加入时间测定/附着测定
以两种方式用PBMC进行加入时间测定。对于两种测定，分离PBMC并在如上所述的条件下培养。在组织培养瓶形式(T-75cm2)或微量滴定板中进行加入时间测定。在两种情形中，由于缺少可塑性附着和PBMC群体对感染敏感性的异质性，不可能在定时吸附以同步化感染之后使用完全去除病毒和将测定限制于单轮感染。因此，使用通过部分去除培养基连续洗涤来降低测定中的病毒浓度和化合物(如果需要)。在在病毒加入即刻前或即刻后的短的加入间隔内或感染后高达72小时评估化合物加入与抗病毒活性的关系。对于所有测定，通过测定无细胞上清液中的RT表达在培养6天时评估病毒复制。在组织培养瓶形式中，将细胞计数，使用锥虫蓝染料排斥来监视化合物的细胞毒性。通过MTS染料还原测定96孔微量滴定板形式中的细胞生存力。将AZT用作阳性对照。
关于细胞生存力的MTS染色：
在测定终止时，用可溶性的基于四唑的染料MTS(CellTiter96Reagent Promega)将测定板染色以测定细胞生存力和定量化合物的毒性。代谢活跃的细胞的线粒体酶将MTS代谢成可溶性的甲产物，允许快速定量分析细胞生存力和化合物细胞毒性。该试剂是一种单一稳定的溶液，在使用前不需要制备。在测定终止时，每孔加入20μL MTS试剂并在37℃下温育4小时。使用粘附性的板封闭器代替盖，密封的板倒转数次以混合可溶性的甲产物，用Molecular Devices Vmax平板读数器在490nm读取板的分光光度值。
对于培养物上清液的逆转录酶测定：
在不含细胞的上清液中测定逆转录酶活性。将滴定的胸苷三磷酸(NEN)(TTP)以5Ci/mL的浓度重悬在蒸馏水中。制备聚rA和低聚dT作为贮备液，并保持在-20℃。以每日的基础新鲜制备RT反应缓冲液，其由125μL 1.0M EGTA，125μL dH2O，110μL 10％SDS，50μL 1.0M Tris(pH7.4)，50μL 1.0M DTT，和40μL 1.0M MgCl2组成。将这三种溶液以2份TTP、1份聚rA∶低聚dT、和1份反应缓冲液的比例混合在一起。将10μl该反应混合物置于圆底微量滴定板中，加入15μL含病毒的上清液并混合。将该平板在具有防止板浸没的固体载体的水浴中37℃温育，并温育60分钟。反应后，将体积点到DE81纸片上，在5％磷酸钠缓冲液中洗涤5次，每次5分钟，在蒸馏水中洗涤2次，每次1分钟，在70％乙醇中洗涤2次，每次1分钟，然后干燥。然后向各样品中加入Opti-Fluor O，并使用Wallac 1450 Microbetaplus液体闪烁计数器定量掺入的放射性。
P24抗原ELISA：
ELISA试剂盒购自Coulter Electronics。按照制造商的使用说明进行测定。在每个测定中产生对照曲线以准确定量每个样品中p24抗原的量。对于使用细胞裂解液的实验。将5万(5×104)个活细胞在Coulter ELISA缓冲液中裂解并进行1轮冻/融以释放捕获的p24，按照制造商的使用说明检测p24。使用Molecular Devices Vmax板读数器，使用标准曲线在450nm用分光光度计定量HIV衣壳蛋白(p24)。使用Molecular Devices Vmax软件包从光密度值计算终浓度。
附着测定：
用获自AIDS研究和参考试剂贮藏所的HeLa CD4 LTR β-gal细胞进行附着测定。HeLa细胞不表达细胞表面CD4，表达HIV辅助受体CXCR4，除非存在CD4，不可被HIV-1感染。HeLa CD4 LTR β-gal细胞表达细胞表面CD4并包含LTRβ-半乳糖苷酶受体构建体。经感染后，整合到病毒粒体中的Tat蛋白或在病毒整合和转录以后合成的新Tat反式激活LTRβ-gal受体，导致β-半乳糖苷酶的表达。用所需选择抗生素常规培养HeLa CD4LTR β-gal细胞并筛选支原体污染。在测定开始之前24小时将细胞胰蛋白酶化，计数，将1×104个细胞放置在0.2cm孔不含选择抗生素的培养基中。在24小时去除培养基，将培养基中化合物置于细胞上并在37℃下温育15-30分钟。然后向孔中加入已知滴度的病毒并继续温育1小时。在温育结束时用培养基洗涤孔6次，继续培养48小时。在48小时用PBS洗涤孔1次，按照制造商的使用说明(Tropix Gal-screenTM，Tropix，Bedford，MA)，通过化学发光测定β-半乳糖苷酶的表达。在成对(sister)板上使用MTS染料还原(reduction)监视化合物的细胞毒性。
如下用PBMC进行附着测定。简短地，在聚丙烯管中将1×106PHA/IL-2PBMC与IMG化合物和***二酚温育0，2，4和24小时。在化合物的存在下加入预滴定量的HIV-1(96USHIPS7毒株，获自AIDS研究和参考试剂计划)并在37℃下温育3小时。在温育后用培养基(1∶25,000稀释输入的p24)洗涤培养物3次(400xg，10min，4℃)，用p24裂解缓冲液(Coulter)裂解细胞沉淀并通过ELISA测定p24含量。
融合测定
该测定使用获自AIDS研究和参考试剂贮藏所的HeLa CD4 LTR β-gal细胞和HL2-3细胞。该融合测定使用HeLa CD4 LTR β-gal细胞和HL2-3细胞通过HIV gp120和CD4的相互作用作为融合配偶体(partner)。HL2/3细胞在其细胞表面上表达HIV-1 Env并包含HIV-1 Tat表达盒。在合胞体形成和质膜融合后，HL2/3和HeLa CD4 LTR β-gal细胞内含物的胞质混合导致LTR的反式激活，于是β-半乳糖苷酶的表达直接与细胞膜融合的抑制相关。因此，这两个机械测定可以用于证实和鉴定基于病毒侵入的化合物靶。另外，因为附着测定使用无细胞病毒，该测定可以用于显示对无细胞病毒传播的适用性。
如AIDS研究和参考试剂贮藏所所建议，保持两种细胞系。在测定开始之前24小时将细胞胰蛋白酶化，计数，将5×103个细胞放置在0.2cm孔不含选择抗生素的培养基中。为了开始融合测定，将HeLa CD4 LTRβ-gal细胞(每个0.2cm孔5×103个细胞)与化合物在37℃下温育1小时。将HL2/3细胞(5×103)加入0.2cm孔，继续温育48小时。在48小时用PBS洗涤1次，按照制造商的使用说明(Tropix Gal-screenTM，Tropix，Bedford，MA)，通过化学发光测定β-半乳糖苷酶的表达。在成对板上使用MTS染料还原监视化合物的毒性。
数据分析：
对于所有抗病毒评估使用软件包计算IC50(50％，病毒复制抑制)，I50(抑制浓度50％)TC50(细胞生存力减少50％)和治疗指数(TI，IC50/TC50)。
                     结果和讨论
病毒附着和融合的抑制
IMG化合物和***二酚作用的一种可能机制是通过在化合物与***二酚受体相互作用以后非特异性的下调HIV-1辅助受体，或者通过非特异性的膜作用防止辅助受体的共定位来抑制病毒侵入。因此，使用设计来监视HIV附着和融合抑制的测定以评估这些化合物的作用。
两个使用HeLa CD4 LTR β-gal细胞的实验在表1中总结。在这些实验中在化合物加入后15分钟或者在用化合物预处理细胞4或24小时后加入病毒进行附着测定。如果HIV复制抑制是由于在***素受体干扰(cross-talk)后HIV辅助受体的非特异性损失；那么这两个时间间隔应当鉴定该作用。4小时温育将足以通过干扰和在再循环代替它们之前去除辅助受体。因此化合物将鉴定为附着抑制剂。24小时预温育足以让G-偶联受体发生脱敏和HIV辅助受体的再表达。因此，如果非特异性辅助受体调节是它们的作用机制，化合物应当对病毒附着无影响。如果化合物有活性，这将提示其它可能的抗病毒靶，但不排除病毒侵入。
IMG化合物(507-510)和***二酚对HeLa CD4 LTR β-gal细胞的生存力具有不同作用(参见表1)。在第一个实验中，化合物未改变细胞生存力，而在第二个实验中细胞毒性似乎与暴露时间相关。因为这是48小时的测定，经常观察到细胞毒性化合物的变异性，其取决于测定开始时细胞的密度和健康。因此，结果显示所有化合物可能改变HeLa CD4 LTR β-gal细胞的生存力。除了对细胞生存力的影响以外，几种化合物抑制β-半乳糖苷酶的合成低于背景(仅细胞+在所有时间化合物：IMG507，ING508，IMG511和***二酚和在24小时暴露后IMG509和IMG510)。另外，用IMG507和对于IMG509(0小时)和IMG510(4小时)在特定化合物加入时间始终观察到在低浓度化合物下的病毒复制的瞬时抑制。这些人为结果(artifact)在两个独立实验中始终如一，而且在使用Chicago Sky Blue(CSB)的阳性对照测定中未发现。另外，用CSB进行的测定满足可接受测定的所有内部测定确认标准。因此，可以得出结论，化合物与HeLa CD4 LTR β-gal细胞相互作用，通过特异性(改变转录或蛋白质合成)或非特异性(细胞毒性)途径改变它们诱导β-半乳糖苷酶的能力。
除了评估与HeLa CD4 LTR β-gal细胞的附着抑制以外，使用HeLa CD4LTR β-gal细胞和HL 2/3细胞进行病毒融合测定。未使用定时加入化合物，而是进行测定来证实化合物对HeLa CD4 LTR β-gal细胞的β-半乳糖苷酶表达的作用。表2总结这些数据和显示尽管在融合测定中化合物对HeLaCD4 LTR β-gal细胞的作用不如附着测定显著，仍存在作用。
PC041036
表1：在HeLa CD4 LTR β-gal HIV-1附着测定中IMG化合物和***二酚的作用
化合物 在(h)预处理       实验1          实验2               注释
    IC50   TC50     IC50     TC50
  CSB(μg/ml)     0     1.1   ＞10     0.17     ＞10  阳性对照
    4     1.71   ＞10     2.11     ＞10
    24     1.3   ＞10     4.7     ＞10
 IMG507(μM)     0     ＞50   ＞50     16     ＞50  在低浓度下的瞬时抑制丧失
    4     ＞50   ＞50     ＞50     ＞50  在低浓度下的瞬时抑制丧失
    24     ＞50   ＞50     ＞50     ＞50  在低浓度下的瞬时抑制丧失
 IMG508(μM)     0     16   ＞50     0.9     ＞50  β-半乳糖苷酶活性抑制，在低浓度下的瞬时抑制丧失
    4     10.8   ＞50     11     29  β-半乳糖苷酶活性抑制
    24     7.4   ＞50     2.6     12.2  β-半乳糖苷酶活性抑制，在低浓度下的瞬时抑制丧失
 IMG509(μM)     0     ＞50   ＞50     28     ＞50  在低浓度下的瞬时抑制丧失
    4     21   ＞50     36     37
    24     11.5   ＞50     3.5     14.9  β-半乳糖苷酶活性抑制
 IMG510(μM)     0     ＞50   ＞50     ＞50     ＞50
    4     ＞50   ＞50     ＞50     ＞50  在低浓度下的瞬时抑制丧失
    24     0.14   ＞50     11.5     39.4  β-半乳糖苷酶活性抑制
 IMG511(μM)     0     25   ＞50     ＜0.16     ＞50  β-半乳糖苷酶活性抑制
    4     9.5   ＞50     8.3     ＞50  β-半乳糖苷酶活性抑制，在低浓度下的瞬时抑制丧失
    24     2.5   ＞50     7.1     11.1  β-半乳糖苷酶活性抑制
 ***二酚(μM)     0     14.1   ＞50     1.3     ＞50  实验1β-半乳糖苷酶活性抑制
    4     6.8   ＞50     28     41  β-半乳糖苷酶活性抑制
    24     1.2   ＞50     1.4     33  β-半乳糖苷酶活性抑制
表2：在HeLa CD4 LTR β-gal/HL2/3 HIV-1融合测定中IMG化合物和***二酚的作用
    化合物       抗病毒活性          注释
    IC50     TC50
    CSB(μg/ml)     1.75     ＞10  阳性对照
    IMG507     ＞50     ＞50
    IMG508     29.9     36.5
    IMG509     22     29.9  β-半乳糖苷酶活性抑制
    IMG510     33.6     ＞50
    IMG511     28.4     33.8  β-半乳糖苷酶活性抑制
    ***二酚     19.3     39.8  β-半乳糖苷酶活性抑制
两种观察结果提示经由除了特异性或非特异性抑制病毒附着/侵入以外的靶的抗病毒活性。在与IMG508，IMG510，IMG511和***二酚而不是IM507和IMG509预温育24小时以后的HeLa CD4 LTR β-gal细胞中看到的HIV附着/侵入的一致抑制，提示化合物与细胞的相互作用是不同的。在未处理细胞中β-半乳糖苷酶活性的总体减少也提示化合物特异性抗-HIV LTR或非特异性细胞抑制转录/翻译。
接下来进行改进的PMBC测定以解决化合物是否通过妨碍病毒侵入来抑制病毒复制的问题。将用化合物预处理0，2，4，和24小时的PBMC与无细胞HIV-1温育3小时，去除过量未结合的HIV。然后通过测量总细胞裂解液与细胞相连的p24含量来评估与细胞结合的HIV的量。表3总结这些实验的结果。
PBMC的附着测定经常显示由于病毒非特异性捕捉的次要问题。如表3所示，20μg/ml硫酸葡聚糖的病毒附着总抑制为43.4％。因此，该实验的分析是基于在IMG化合物处理的样品之一中鉴定等效或更好的抑制。当在时间0加入时，所有IMG化合物和***二酚以某种程度(10-25％抑制)调节/减少HIV附着。而且，如果预处理24小时，IMG508和***二酚显示返回至病毒结合的对照水平。这些数据提示IMG化合物可以调节一些辅助受体的表达。然而，因为这些结合减少是奈韦拉平(19％，RT抑制剂)的量级级别，这些变化不能与测定中的非特异性作用分开。仅IMG509和IMG510在15μM下预处理4小时接近阳性对照硫酸葡聚糖所发现的病毒附着抑制，分别为40％和29％。因为当在感染(0小时)加入时这些化合物具有等价于奈韦拉平(10μM)的作用，这强烈提示化合物调节辅助受体表达而不是直接阻止病毒附着。然而，这些观察的意义不能仅从该数据确定。IMG509和IMG510通过***素受体干扰对辅助受体的潜在作用可以通过在用这些化合物处理PBMC或其它细胞以后趋化因子配体结合的丧失确切证明。
                        表3：PBMC中的HIV附着测定
    化合物   时间     pgp24    ％对照     注释
奈韦拉平(10μM)     0     311.7     81.2 阳性对照19％抑制
硫酸葡聚糖(20μg/ml)     0     221     57.6 阳性对照43.4％抑制
IMG5071     0     320     83.3 无显著作用
    2     351     91.4
    4     293     76.3
    24     368     95.8
IMG508     0     312     81.3 无显著作用
    2     328     85.4
    4     279     72.7
    24     428     111.5
IMG509     0     321     83.6 在4小时40％抑制
    2     314     81.8
    4     235     61.2
    24     297     77.3
IMG510     0     350     91.1 在4小时29％抑制
    2     329     85.7
    4     274     71.4
    24     339     88.3
IMG511     0     290     75.5 无显著作用
    2     328     85.4
    4     294     76.6
    24     352     91.7
***二酚     0     317     82.6 无显著作用
    2     286     74.5
    4     349     90.9
    24     439     114.3
1所有IMG化合物和***二酚为15μM
加入时间研究
最初基于假设即IMG化合物和***二酚通过特异的辅助受体相互作用和第二信使途径调节抗病毒活性，提议PBMC的加入时间研究。因此最初研究是设计来看看预处理对抗病毒活性的影响。加入时间测定产生的数据在表4和图1中总结。
表4：PBMC的加入时间测定(在感染之前加入)
 化合物(μM) 预处理(h)     IC50     TI     注释
 AZT     0     0.0013     ＞3077  TI或IC50无显著变化
    2     0.0011     ＞3636
    4     0.0011     ＞3636
    24     0.0031     ＞1290
 IMG507     0     6.9     17  TI或IC50无显著变化
    2     6.1     19.9
    4     5.3     22.7
    24     10.8     11.1
 IMG508     0     14.2     3.5  4小时预处理IC50降低4倍
    2     10.4     4.8
    4     4.1     12
    24     11.9     4.2
 IMG509     0     9.3     5.3  TI或IC50无显著变化
    2     11     4.4
    4     12.6     4.0
    24     6.6     7.4
 IMG510     0     13.4     10.4  2小时预处理IC50降低9.5倍
    2     1.4     104
    4     11.5     9.4
    24     9.5     15
 IMG511     0     6.6     18  24小时预处理IC50增加5倍
    2     9.4     12.5
    4     11.7     73
    24     33.2     3.5
 ***二酚     0     0.58     83  开始2小时损失10倍，4小时恢复3.3倍，然后在24小时预处理IC50总共提高17倍
    2     5     9.7
4 1.5 33
    24     10.5     4.6
该实验确定用IMG化合物和***二酚预处理PBMC的一些显著作用。结果可以分成4类响应：
1.无变化，2.预处理IC50瞬时降低，3.预处理IC50提高，和4.观察2和3的结合。
IC50的非显著变化
化合物IMG507和IMG509在预处理高达24小时下未显示显著的IC50变化。图1中IC50更精细的研究显示在24小时的约2倍减少(IMG509)和提高(IMG507)。这些变化在IC50测定期望的3倍误差范围内，如AZT的1.1-3.1nM的IC50范围所示。因此这两种化合物的抗病毒靶独立于对PBMC的早期作用，不涉及辅助受体的调节。然而这不排除这些化合物可能的信号途径元件。重要的是注意4小时预温育IMG509能够显著抑制HIV细胞联合(表3)。这进一步支持IMG509抗病毒活性独立于细胞表面和改变***素活性的可诱导或可调控的细胞途径的可能性。
预处理IC50的瞬时降低
IMG508和IMG510分别在4小时和2小时显示IC50的瞬时降低。IC50的降低转换成抗病毒效力的增加，因为化合物施加恒定量的细胞毒性(TC50)。其它预处理时间未显示与加入化合物和病毒的显著变化。该活性模式提示用IMG508和510预处理调节细胞途径或与细胞途径相互作用，该细胞途径直接负责抗病毒响应的效力，如调节转录因子表达或化合物代谢的信号途径。最佳相互作用产生编码更好抗病毒活性的信号。因此返回最初水平显示通过下调受体或信号途径的最佳作用的丧失。
从这些数据不能确定IMG508和IMG510产生这些现象的精确途径。然而IMG410在2小时的最大抗病毒活性和在4小时病毒附着减少的时间关联加强涉及病毒侵入受体的可能机制。与此对比，因为增强的IMG508不与附着抑制关联，这提示独立于病毒侵入途径的作用机制。然而我们不能排除存在独立于CD4的辅助受体调节，这将产生所观察到的附着负(negative)模式。
预处理IC50提高
观察到的第三种模式是IC50的瞬时提高或抗病毒效力的丧失。这在IMG51124小时温育后观察到。该观察结果提示抗病毒活性的丧失是通过这些化合物的适当受体的损失，受体脱敏和/或二次信号的诱导，该信号作用来关掉抗病毒应答；由此使细胞不能响应化合物。这些结果经精细研究后显示化合物暴露后，IMG511预处理以IC50简单的时间依赖型进展而进行至较小活性，进一步提示“关掉”或丧失响应化合物的能力。该观察提示长期暴露于IMG511将导致对其作用的无反应性。
IC50提高和降低的结合
***二酚的模式更复杂。它在2小时预处理时丧失其约10倍的效力，在4小时预处理时部分恢复效力(IC50降低3.3倍)，然后在24小时丧失任何收益(总共丧失效力17倍)。这些结果显示天然***二酚与PBMC具有复杂的相互作用，IMG类似物已经通过化学方法将这与细胞的复杂相互作用分成其中的一些成分。
除了在加入时间测定中显示抗病毒活性调节的多种模式以外，进行两个观察。尽管可以假定在时间0加入化合物的细胞将经历相同的抗病毒活性调节，观察到预加入化合物在连续暴露化合物的6天PBMC测定中保持抗病毒活性。第二个观察是IMG-衍生物在PBMC中具有多种抗病毒作用机制。附着与活性调节的分离和活性调节的多种模式提示这些化合物通过不同途径与不同受体相互作用。
IMG化合物和***二酚在调节多个抗病毒靶中有活性的观察促进第二个加入时间测定，其中将预处理与后处理偶联。相对于病毒加入-4，0和+6小时加入的化合物不仅显示期望的预处理IC50调节，而且在感染时或在感染后6小时加入化合物之间在抗病毒效力方面未显示差异(表5)。在这些实验中，在4小时预温育下，AZT显示期望的活性增加(4.6-倍)，证明它在有活性之前要求磷酸化。因此，***二酚和IMG化合物在+6小时的结果提示尽管它们可以在预处理情形下调节抗病毒结果，可能是通过改变受体表达和诱导第二信使途径，这些调节不是抗病毒作用的主要机制。在+6小时感染下加入化合物以后的观察导致我们评估在加入时间测定中IMG化合物和***二酚的活性，该测定包括病毒复制中从病毒侵入至逆转录完成的事件。
表5：加入时间测定(在相对于感染-4，0和+6小时加入)
  化合物     处理             抗病毒活性(μM)
    IC50     TC50     TI
    AZT   -4小时预处理     0.0008     ＞4     ＞5000
    感染时     0.0037     ＞4     ＞1081
  感染后6小时     0.0046     ＞4     ＞869
  IMG507   -4小时预处理     39.5     ＞100     ＞2.5
    感染时     67     ＞100     ＞1.5
  感染后6小时     46.1     ＞100     ＞2.2
  IMG508   -4小时预处理     6.2     ＞100     ＞16
    感染时     15.7     ＞100     ＞6.3
  感染后6小时     22.5     ＞100     ＞4.4
  IMG509   -4小时预处理     19.6     ＞100     ＞5.1
    感染时     17.5     ＞100     ＞5.7
  感染后6小时     10.0     ＞100     ＞9.9
  IMG510   -4小时预处理     17.7     ＞100     ＞5.66
    感染时     16.1     ＞100     ＞6.2
  感染后6小时     14.4     ＞100     ＞6.9
  IMG511   -4小时预处理     15.2     ＞100     ＞6.6
    感染时     16.9     ＞100     ＞5.9
  感染后6小时     9.3     ＞100     ＞13.7
  ***二酚   -4小时预处理     12.1     ＞100     ＞8.3
    感染时     13.8     ＞100     ＞7.3
  感染后6小时     12.1     ＞100     ＞8.3
使用PBMC的加入时间测定经常不如在细胞系模型中进行的那些清晰，在细胞系模型中初始感染可以同步化和可以在单轮感染后评估病毒表达。典型地使用HeLa CD4 LTR β-gal细胞进行加入时间测定来评估化合物在逆转录或稍后事件中的作用。然而，这些化合物对β-半乳糖苷的表达具有次级作用，使它们的应用有问题。因此我们使用PBMC。由于与组织培养基质不附着和PBMC群体的异质性，PBMC中的起始感染不能同步化，导致CD4+淋巴细胞感染的初始频率小于10％。这些特性阻止了在感染早期简单和可重复的检测HIV复制。因此基于PBMC的加入时间测定必须允许经过多轮感染以使病毒充分复制而评估抑制剂的作用。该测定类型中历史上的AZT实例在图2中显示。如图2所示，逆转录在感染后32和48小时之间完成。在该测定中，这意味着充分的逆转录已经发生，6天的总病毒表达(RT)允许与处理组的统计学相关比较。因此，尽管在该期间还发生更多轮的感染，先前轮的感染已经建立了足够的病毒表达，更多轮的感染对总的病毒表达无助。
图3和4总结了PBMC加入时间测定，其在病毒侵入至逆转录完成间隔期间使用化合物加入。数据以两种形式作图。图3对每种处理的6天相对IC50作图。该图显示当在病毒暴露以后加入时化合物的相对效力。图4是最大抑制图。该图显示当将化合物与病毒同时加入时，对于每个时刻导致病毒复制完全抑制的最低浓度的结果。图3和4结果的比较显示所有化合物具有在逆转录完成后存在的抗病毒靶。从这些数据中，IMG508，509，510和511似乎全部与除了病毒侵入或逆转录以外的抗病毒靶相互作用。尽管不能确实鉴定抗病毒靶，对于HIV-1的抑制剂已经发现这种模式，作用机制定位为抑制转录。然而它也提示可能存在多个抗病毒靶或与单个靶相互作用而具有不同效力。
另外对于IMG507，图3的结果提示在逆转录之前和同时存在抗病毒靶。如表3所示，IMG507对病毒附着或者当用化合物预处理细胞时不具有显著作用。这提示在图3中在4小时观察到的第一个抑制“峰”表示在病毒与细胞膜/侵入受体相互作用后即刻或同时存在的抗病毒靶。这由其瞬时性质和在18小时完全逆转支持。另外，图3和4的比较进一步提示IMG507可能的第二个或可能的第三个抗病毒靶。这些实验提供抗病毒靶的强大证据，这些抗病毒靶在时间上与逆转录后的事件一致。
如上所示，关于使用细胞预处理的加入时间测定，***二酚显示类似于IMG-conger显示的病毒复制48小时后抑制的抑制模式。然而，图4提示IMG化合物在它们与抗病毒靶相互作用方面可能更有效。尽管在图4中数据提示可能的备选靶，图3基于IC50变化的分析将反对另外的抗病毒靶。
因此完全加入时间研究提示IMG类似物与多个抗病毒靶相互作用，在它们与它们的抗病毒靶相互作用方面可能比***二酚更有效。预处理研究进一步提示IMG conger与PBMC的相互作用模式可能代表***二酚与PBMC总体相互作用的具体方面。另外，这些研究鉴定IMG507为在该系列中唯一的可能与病毒侵入靶相互作用的conger。最后，尽管当预暴露于细胞时IMG508-511和***二酚可能能够调节抗病毒应答，它们的主要作用机制涉及在病毒侵入和逆转录完成后的抗病毒靶。
上面讨论的结果显示IMG化合物通过抗病毒靶调节抗病毒(即抗-HI)活性，该抗病毒靶独立于HIV侵入和逆转录。另外，预处理研究显示化合物可以通过多种途径与PBMC相互作用，以不同效力和/或动力学诱导它们。尽管未鉴定IMG化合物的精确作用机制，这里进行的研究提示病毒复制的抑制与细胞周期的调节密切相关。
实验实施例2
下述研究包含5种具体的UMG化合物(509，510，和511)和***二酚和它们在病毒附着和融合测定中的活性。
细胞和病毒：
HIV-1 IIIB，和HeLa CD4 LTR β-gal，和HL2/3细胞系获自NIH AIDS研究和参考试剂计划(Bethesda，MD)，并根据推荐保持。ME 180细胞获自美国典型培养物保藏中心(ATCC)(Manassas，VA)。
试验材料处理和贮存：
将化合物溶解在100％DMSO中并保藏在-80℃直至试验。将冷冻贮液在室温下冻融，在组织培养基制备工作溶液之前在37℃预温热15分钟并涡旋。在化合物稀释和处理的所有阶段期间，通过不透明覆盖物和通过保存并稀释在不透明或琥珀色的组织培养塑料制品中保护化合物免于入射光。另外，通过将实验室中的总荧光照明减少50％来控制入射的房间和层流组织培养罩的光曝露。在最高试验浓度下最终的DMSO浓度为0.25％。病毒附着测定
该测定使用HeLa CD4 LTRβ-gal细胞检测阻止病毒附着的化合物。用选择抗生素培养HeLa CD4 LTRβ-gal细胞。在测定开始之前24小时，将细胞胰蛋白酶化，计数并平板接种于0.2cm孔无选择抗生素的培养基中。在24小时去除培养基，将培养基中的化合物置于细胞上并在37℃下温育15分钟。然后将已知滴度的HIV-1 IIIB毒株加入孔中并继续温育1-2小时。在温育结束时，用培养基洗涤孔2次并继续培养40-48小时。在测定终止时，去除培养基，按照制造商的使用说明(Tropix Gal-screen，Tropix，Bedford，MA)，通过化学发光测定β-半乳糖苷酶的表达。在成对板上通过XTT或MTS染料还原监视化合物的毒性。所有测定一式三份进行，连续-Log 10稀释试验材料。1-2小时的病毒吸附间隔足够短以致要求磷酸化以获得其活性三磷酸酯形式(AZT-TTP)的AZT在本测定中无活性。
融合测定：
该融合测定评估化合物阻止由HIV-1 Env和分离细胞上表达的CD4介导的细胞-细胞融合的能力。该测定对于ga120/CD4相互作用的抑制剂和X4辅助受体的抑制剂敏感。将HeLa CD4 LTR β-gal细胞平板接种在微量滴定孔中并加入稀释的化合物，在加入HL 2/3细胞之前允许在37℃温育1小时。温育然后继续40-48小时，其后通过测量化学发光(Tropix Gal-screen，Tropix，Bedford，MA)可检测的β-半乳糖苷酶的表达监视融合。在成对板上使用XTT或MTS染料还原监视化合物的毒性。所有测定一式三份进行，连续-Log 10稀释试验材料。
结果：
病毒附着和融合测定的结果在表6中表示。结果显示三种IMG化合物对病毒附着/侵入过程无抑制性，而显示某种病毒融合的抑制。
                                                      表6
    化合物              附着测定              融合测定       注释
  IC50   TC50   TI   IC50   TC50     TI
    Chicago SkyBlue(μg/ml)   0.63   ＞10   ＞15.87   0.41   ＞100   ＞24.39   活性对照化合物
    IMG 509(μM)   48.4   ＞100   ＞2.07   1.21   18.4   15.21   活性融合，但非附着抑制剂
    IMG 510(μM)   50.8   ＞100   ＞1.97   1.36   ＞100   ＞73.53   活性融合，但非附着抑制剂
    IMG 511(μM)   46.3   ＞67   1.45   0.92   20.7   22.5   活性融合，但非附着抑制剂
本文引用的所有参考文献，包括出版物，专利申请和专利结合于此作为参考，其程度相同于将各篇参考文献单个和明确地显示结合作为参考并且在本文中完整地阐述。
除非在本文中另有说明或与上下文明显矛盾，在描述本发明的上下文中(特别是在后附权利要求的上下文中)术语“一个(a)”和“一个(an)”和“这(the)”和类似对象的使用应当认为包括单数和复数。除非另外指出，术语“包含”，“具有”，“包括”，和“含有”应当认为是开放式的术语(即意味着“包括但不限于”)。除非在本文中另外指出，本文数值范围的列举仅意欲用作单独提及位于范围内的每个分离值的简写方法，每个分离值结合在说明书中而似乎在本文中被单独引用。除非在本文中另有说明或与上下文明显矛盾，可以以任何适当的顺序实施本文描述的所有方法。除非另外要求，任何和所有实施例，或本文提供的例举性的语言(例如“如”)的使用仅意欲更好地举例说明本发明，而未对本发明的范围施加限制。说明书中的语言不应当认为是指任何未要求的要素为本发明实施所必需。
本文描述了本发明的优选实施方案，包括发明人已知的实施本发明的最佳方式。在阅读前面的说明书以后，那些优选实施方案的变化对于本领域那些普通技术人员可变得明显。发明人期望技术人员适当地使用这些变化，发明人意欲除了如本文具体描述以外实施本发明。因此，本发明包括在于此后附的权利要求中引用主题的所有适用法律允许的改进和等效物。此外，除非在本文中另有说明或与上下文明显矛盾，本发明包括上述要素以其所有可能变化的任何组合。

Claims (21)

1.一种组合物，其包含至少一种选自烷基-间苯二酚、***素、及其组合的化合物和生物附着性聚合物。
2.权利要求1的组合物，其中所述化合物是选自***酚衍生物、Δ8-THC衍生物、***环萜酚衍生物、***二酚衍生物、***萜酚衍生物的***素。
3.权利要求1的组合物，其中至少一种化合物是IMG507，IMG508，IMG509，IMG510，或IMG511。
4.权利要求1的组合物，其中所述烷基-间苯二酚、***素、或其组合占组合物的约1％至约10％。
5.权利要求1的组合物，其中所述烷基-间苯二酚、***素、或其组合以约10μM/ml至约100μM/ml存在。
6.权利要求1的组合物，其中所述生物附着性聚合物占组合物的约1％至约3％。
7.权利要求1的组合物，其另外包含约40％至约80％的水。
8.权利要求1的组合物，其另外包含约1％至约5％的乳化剂。
9.权利要求8的组合物，其中所述乳化剂是***籽油。
10.权利要求1的组合物，其另外包含增溶剂。
11.权利要求10的组合物，其中所述增溶剂占组合物的约5％至约15％。
12.权利要求1的组合物，其另外包含渗透促进剂。
13.权利要求12的组合物，其中所述渗透促进剂占组合物的约1％至约5％(w/v)。
14.权利要求1的组合物，其另外包含防腐剂。
15.权利要求1的组合物，其另外包含润滑剂。
16.一种防止HIV从藏匿HIV的第一个体传播至处于HIV感染危险下的第二个体的方法，其包含在接近所述第一个体和所述第二个体之间接触的时间，将至少一种烷基间苯二酚、***素、或其组合局部施用于所述第一个体，或所述第二个体。
17.权利要求16的方法，其中所述化合物是选自***酚衍生物、Δ8-THC衍生物、***环萜酚衍生物、***二酚衍生物、***萜酚衍生物的***素。
18.权利要求16的方法，其中至少一种化合物是IMG507，IMG508，IMG509，IMG510，或IMG511。
19.一种防止HIV传播至经与HIV污染的物品接触处于HIV感染危险下的个体的方法，其包含在接近个体与物品之间接触的时间，将至少一种烷基-间苯二酚、***素、或其组合局部施用于所述个体。
20.权利要求19的方法，其中所述化合物是选自***酚衍生物、Δ8-THC衍生物、***环萜酚衍生物、***二酚衍生物、***萜酚衍生物的***素。
21.权利要求19的方法，其中至少一种化合物是IMG507，IMG508，IMG509，IMG510，或IMG511。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106265364A (zh) * 2016-09-30 2017-01-04 汉义生物科技（北京）有限公司 一种含***提取物的组合物及其在清洁用品中的应用
WO2021139741A1 (zh) * 2020-01-08 2021-07-15 成都百裕制药股份有限公司 ***二酚衍生物及其制备方法和在医药上的应用
CN114191420A (zh) * 2014-05-29 2022-03-18 雷迪厄斯制药公司 稳定的***素类化合物制剂
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2471190T3 (es) * 2003-06-24 2014-06-25 Gw Pharma Limited Composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos de tipo cannabicromeno
US20060078955A1 (en) * 2004-10-13 2006-04-13 Lin-Zhi International Method for retrieving delta9-THC from oral fluid
CA2719853A1 (en) * 2008-03-25 2009-10-01 Paloma Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating fibrotic disorders
WO2012112791A1 (en) 2011-02-16 2012-08-23 Paloma Pharmaceuticals, Inc. Radiation countermeasure agents
EP2827833A2 (en) * 2012-03-22 2015-01-28 The Procter & Gamble Company Personal care compositions and methods
NL2009671C2 (en) * 2012-10-19 2014-04-23 Fytagoras B V New antiviral use for acidic cannabinoids.
WO2016077327A1 (en) 2014-11-10 2016-05-19 The Procter & Gamble Company Personal care compositions with two benefit phases
US10966916B2 (en) 2014-11-10 2021-04-06 The Procter And Gamble Company Personal care compositions
US11207248B2 (en) 2014-11-10 2021-12-28 The Procter And Gamble Company Personal care compositions with two benefit phases
JP6574329B2 (ja) * 2015-01-29 2019-09-11 株式会社日清製粉グループ本社 食用油脂の製造方法
WO2016133824A1 (en) * 2015-02-16 2016-08-25 Axim Biotechnologies, Inc. Cosmetic and topical compositions comprising cannabigerol
US10499584B2 (en) 2016-05-27 2019-12-10 New West Genetics Industrial hemp Cannabis cultivars and seeds with stable cannabinoid profiles
WO2019079405A1 (en) 2017-10-20 2019-04-25 The Procter & Gamble Company AEROSOL FOAMING CLEANSER FOR THE SKIN
EP3697375B1 (en) 2017-10-20 2021-12-01 The Procter & Gamble Company Aerosol foam skin cleanser
US11033527B2 (en) 2018-02-07 2021-06-15 Immugen Pharma Llc Non-hormonal treatment of the genitourinary syndrome of menopause
US10912806B2 (en) 2018-09-26 2021-02-09 Michael MCGOWAN Composition comprising an essential oil and its packaging thereof
JP2022513411A (ja) * 2018-10-31 2022-02-07 ベイメディカ インコーポレイテッド カンナビノイド類似体およびそれらの調製のための方法
WO2020112486A1 (en) 2018-11-29 2020-06-04 The Procter & Gamble Company Methods for screening personal care products
AU2021247269A1 (en) * 2020-03-29 2022-12-01 Akseera Pharma Corp. Interaction of SARS-CoV-2 proteins with molecular and cellular mechanisms of host cells and formulations to treat Covid-19.
WO2021245676A1 (en) * 2020-06-03 2021-12-09 Epm (Ip), Inc. Cannabidiolic acid (cbda) derivatives and uses thereof
WO2021245675A1 (en) * 2020-06-03 2021-12-09 Epm (Ip), Inc. Cannabidiolic acid (cbda) derivatives and uses thereof
EP4161901A1 (en) * 2020-06-03 2023-04-12 Yissum Research Development Company of the Hebrew University of Jerusalem Ltd. Cannabigerolic acid (cbga) derivatives and uses thereof
IL303176A (en) 2020-11-24 2023-07-01 Yissum Res Dev Co Of Hebrew Univ Jerusalem Ltd Cannabinoid derivatives and their use to treat inflammation and/or pain and/or obesity
EP4105204A1 (en) * 2021-06-14 2022-12-21 Swiss CannaPharmaceutical SA Conversion of thc, cbd and their derivatives to cannabinol
WO2023108277A1 (en) * 2021-12-14 2023-06-22 Agile Pharmaceuticals Solutions Inc. Cannabinoid and psychedelic formulations comprising hydrotropic agents

Family Cites Families (75)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2509386A (en) * 1950-05-30 Debenzopyran marihuana-like
US564827A (en) * 1896-07-28 Car-fender
US2304669A (en) * 1940-08-16 1942-12-08 Adams Roger Isolation of cannabidiol
US3388136A (en) * 1966-01-11 1968-06-11 Edward C. Taylor Dibenzo [b, d] pyrans and process
US3507885A (en) * 1966-03-25 1970-04-21 Hoffmann La Roche 3-alkyl-6h-dibenzo(b,d)pyrans
US3919322A (en) * 1969-01-22 1975-11-11 Hoffmann La Roche 3-Substituted -5-alkyl-2-cyclohexen-1-ones
US3649650A (en) * 1970-02-13 1972-03-14 Little Inc A Novel derivatives of tetrahydro-cannabinol
US3668224A (en) * 1970-07-02 1972-06-06 Theodor Petrzilka PROCESS OF PRODUCING 6a, 10a-TRANS-6a,7,8,10a-TETRAHYDRODIBENZO (b,d)-PYRANS
CH558792A (de) * 1971-10-14 1975-02-14 Petrzilka Theodor Verfahren zur herstellung von tetrahydrodibenzopyranen.
US3799946A (en) * 1972-03-13 1974-03-26 Smithkline Corp Dibenzo(b,d)pyran compounds
CH574888A5 (zh) * 1972-12-07 1976-04-30 Ciba Geigy Ag
US4020098A (en) * 1972-12-07 1977-04-26 Ciba-Geigy Corporation Process for the preparation of 5-substituted resorcinols and related intermediates
DE2335136A1 (de) * 1973-07-06 1975-01-16 Schering Ag 7-hydroxy-delta hoch 8-tetrahydrocannabinole
US3856822A (en) * 1973-07-18 1974-12-24 Smithkline Corp 3-alkenyl dibenzo (b,d)pyrans
US3856820A (en) * 1973-07-18 1974-12-24 Smithkline Corp 2-AMINOMETHYL DIBENZO (b,d) PYRANS
US3856821A (en) * 1973-07-18 1974-12-24 Smithkline Corp ALKOXY DIBENZO (b,d) PYRANS
US3864492A (en) * 1973-08-01 1975-02-04 Abbott Lab Method of treating depression using 1,4{40 -dihydroxy-3-n-pentyl-6,6,9-trimethyl-6a,7,10,10a-tetra-hydrodibenzo{8 b,d{9 pyran
US3928598A (en) * 1973-11-05 1975-12-23 Lilly Co Eli Hexahydro-dibenzo{8 b,d{9 pyran-9-ones as an anti-anxiety drug
US4018766A (en) * 1974-12-19 1977-04-19 Warner-Lambert Company Substituted benzopyrano[3,4-c]pyridine-5-ones
US4116979A (en) * 1975-06-23 1978-09-26 Sheehan Institute For Research, Inc. Process for the preparation of (-)-6a,10a-trans-6a,7,8,10a-tetrahydrodibenzo[b,d]-pyrans
GB1522057A (en) * 1975-11-03 1978-08-23 Pfizer 9-hydroxydibenzo(b,d)pyrans and intermediates therefor
US4018777A (en) * 1975-11-14 1977-04-19 Abbott Laboratories 2-Substituted-5-alkyl resorcinols
US4087545A (en) * 1976-02-17 1978-05-02 Eli Lilly And Company Hexahydro-dibenzo[b,d]pyran-9-ones as antiemetic drugs
US4064009A (en) * 1976-06-09 1977-12-20 Eli Lilly And Company Novel 3-(oxygenated alkyl)-1,9-dihydroxy and 1-hydroxy-9-keto dibenzo[b,d]py
US4054583A (en) * 1976-07-06 1977-10-18 Eli Lilly And Company Process for converting 2,7-dihydroxy-5-isopropylidene-9-substituted-2,6-methano-3,4,5,6-tetrahydro-2H-1-benzoxocin to trans-1-hydroxy-3-substituted-6,6-dimethyl-6,6a,7,8,10,10a-hexahydro-9H-dibenzo(b,d)pyran-9-one
GB1579137A (en) * 1976-07-06 1980-11-12 Lilly Co Eli 5-isopropylidene-2,6-methano-3,4,5,6-tetrahydro-2h-1-benzoxocins
US4180669A (en) * 1976-12-13 1979-12-25 Abbott Laboratories 2-(N-phenethyl-4-piperidino)-5-pentyl resorcinol
US4195078A (en) * 1979-03-09 1980-03-25 Eli Lilly And Company Nabilone granulation
US4315862A (en) * 1979-05-31 1982-02-16 The University Of Mississippi Process for preparing cannabichromene
US4309545A (en) * 1980-07-28 1982-01-05 Pfizer Inc. Oximino-1-hydroxyoctahydrobenzo[c]quinolines and derivatives thereof
US4405626A (en) * 1980-10-03 1983-09-20 Pfizer Inc. 9-Hydroxyoctahydrobenzo(c)quinolines analgesic compositions containing them and processes for producing analgesic with them
US4464378A (en) * 1981-04-28 1984-08-07 University Of Kentucky Research Foundation Method of administering narcotic antagonists and analgesics and novel dosage forms containing same
US4351840A (en) * 1981-09-18 1982-09-28 Pfizer Inc. Antibacterial esters of resorcinol with ampicillin and penicillanic acid 1,1-dioxide derivatives
US4841078A (en) * 1982-03-16 1989-06-20 Pfizer Inc. Benzopyrans
US4661505A (en) * 1982-11-03 1987-04-28 Eli Lilly And Company Leukotriene antagonists
HU194858B (en) * 1982-12-03 1988-03-28 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet Process for producing dibenzo/b,d/pirane derivatives and pharmaceutical compositions containing them
DE3305755A1 (de) * 1983-02-19 1984-08-23 Gödecke AG, 1000 Berlin N-phenyl-benzamid-derivate, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung bei der bekaempfung von erkranungen des immunsystems
IL80411A (en) * 1986-10-24 1991-08-16 Raphael Mechoulam Preparation of dibenzopyranol derivatives and pharmaceutical compositions containing them
US4833073A (en) * 1987-01-27 1989-05-23 Hoffmann-La Roche Inc. Immunoassay for tetrahydrocannabinol metabolites
US4758597A (en) * 1987-05-15 1988-07-19 University Patents, Inc. Carenadiol and derivatives
US4777298A (en) * 1987-06-19 1988-10-11 Eli Lilly And Company Process for intermediates to leukotriene antagonists
US4847290A (en) * 1987-08-17 1989-07-11 Sumner Burstein Delta 1-thc-7-oic acid and analgesic and anti-inflammatory agents
US5250551A (en) * 1988-05-27 1993-10-05 Delalande S.A. New (hetero)aryl substituted diazole derivatives, the method of preparing them and application thereof in therapeutics
US4973603A (en) * 1988-06-16 1990-11-27 Sumner Burstein Platelet activating factor antagonist and methods of use therefor
US5068234A (en) * 1990-02-26 1991-11-26 Sterling Drug Inc. 3-arylcarbonyl-1-(c-attached-n-heteryl)-1h-indoles
US5112820A (en) * 1990-03-05 1992-05-12 Sterling Drug Inc. Anti-glaucoma compositions containing 2- and 3-aminomethyl-6-arylcarbonyl- or 6-phenylthio-2,3-dihydropyrrolo-(1,2,3-de)-1,4-benzoxazines and method of use thereof
DE4100441A1 (de) * 1991-01-09 1992-07-16 Mack Chem Pharm Verfahren zur herstellung von 6,12-dihydro-6-hydroxy-cannabidiol und dessen verwendung zur herstellung von trans-delta-9-tetrahydrocannabinol
US5527819A (en) * 1991-09-06 1996-06-18 Merck & Co., Inc. Inhibitors of HIV reverse transcriptase
US5635530A (en) * 1991-09-12 1997-06-03 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem (3S,4S)-delta-6-tetrahydrocannabinol-7-oic acids and derivatives thereof, processors for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US5292899A (en) * 1991-11-27 1994-03-08 Synthetic Technology Corporation Synthesis of 11-nor-Δ-9-tetrahydrocannabinol-9-carboxylic acid glucuronide
FR2692575B1 (fr) * 1992-06-23 1995-06-30 Sanofi Elf Nouveaux derives du pyrazole, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
US5434151A (en) * 1992-08-24 1995-07-18 Cytomed, Inc. Compounds and methods for the treatment of disorders mediated by platelet activating factor or products of 5-lipoxygenase
US5338753A (en) * 1992-07-14 1994-08-16 Sumner H. Burstein (3R,4R)-Δ6 -tetrahydrocannabinol-7-oic acids useful as antiinflammatory agents and analgesics
US5484926A (en) * 1993-10-07 1996-01-16 Agouron Pharmaceuticals, Inc. HIV protease inhibitors
US5342971A (en) * 1992-12-29 1994-08-30 The Australian National University Process for the preparation of dibenzo[b,d]pyrans
US5389375A (en) * 1993-05-21 1995-02-14 University Of Mississippi Stable suppository formulations effecting bioavailability of Δ9 -thc
US5440052A (en) * 1993-08-06 1995-08-08 University Of Connecticut Compositions useful as a cannabinoid receptor probe
US5637589A (en) * 1993-10-29 1997-06-10 University Of North Carolina At Chapel Hill Suksdorfin, analogs, compositions thereof, and methods for making and using thereof
US5521198A (en) * 1993-12-21 1996-05-28 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting autoimmune diseases
US5498419A (en) * 1994-06-03 1996-03-12 Pars; Harry G. Fumarate salt of 4-(diethyl-3-(1-methyloctyl)-7,8,9,10-tetrahydro-6,6,9-trimethyl-6H-dibenzo[b,d]pyran-1-ol, 4-(diethyl-amino) butyric
US5596106A (en) * 1994-07-15 1997-01-21 Eli Lilly And Company Cannabinoid receptor antagonists
IT1271266B (it) * 1994-12-14 1997-05-27 Valle Francesco Della Impiego terapeutico di ammidi di acidi mono e bicarbossilici con amminoalcoli,selettivamente attive sul recettore periferico dei cannabinoidi
US5532237A (en) * 1995-02-15 1996-07-02 Merck Frosst Canada, Inc. Indole derivatives with affinity for the cannabinoid receptor
US5605906A (en) * 1995-03-24 1997-02-25 Merck Frosst Canada, Inc. Cannabinoid receptor agonists
US5916566A (en) * 1995-06-07 1999-06-29 Avmax, Inc. Use of benzoin gum to inhibit P-glycoprotein-mediated resistance of pharmaceutical compounds
FR2735774B1 (fr) * 1995-06-21 1997-09-12 Sanofi Sa Utilisation de composes agonistes du recepteur cb2 humain pour la preparation de medicaments immunomodulateurs, nouveaux composes agonistes du recepteur cb2 et les compositions pharmaceutiques les contenant
IL115245A (en) * 1995-09-11 2002-12-01 Yissum Res Dev Co Tumor necrosis factor inhibiting pharmaceuticals
FR2742148B1 (fr) * 1995-12-08 1999-10-22 Sanofi Sa Nouveaux derives du pyrazole-3-carboxamide, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant
US5891469A (en) * 1997-04-02 1999-04-06 Pharmos Corporation Solid Coprecipitates for enhanced bioavailability of lipophilic substances
US6114572A (en) * 1996-11-20 2000-09-05 Hoechst Marion Roussel, Inc. Substituted phenols and thiophenols useful as antioxidant agents
EP0979228A4 (en) * 1997-03-18 2000-05-03 Smithkline Beecham Corp CANNABINOID RECEPTOR AGONISTS
US5939429A (en) * 1997-09-30 1999-08-17 Virginia Commonwealth University Cardiovascular uses of cannabinoid compounds
US5847128A (en) * 1998-05-29 1998-12-08 Virginia Commonwealth University Water soluble derivatives of cannabinoids
US6049207A (en) * 1998-11-25 2000-04-11 Picker International, Inc. Double-duty gradient coil assembly having two primary gradient coil sets and a common screening coil set
AU2002213429A1 (en) * 2000-09-28 2002-04-08 Immugen Pharmaceuticals, Inc. Antiviral methods and compounds

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114191420A (zh) * 2014-05-29 2022-03-18 雷迪厄斯制药公司 稳定的***素类化合物制剂
US11911361B2 (en) 2014-05-29 2024-02-27 Radius Pharmaceuticals, Inc. Stable cannabinoid formulations
CN106265364A (zh) * 2016-09-30 2017-01-04 汉义生物科技（北京）有限公司 一种含***提取物的组合物及其在清洁用品中的应用
WO2021139741A1 (zh) * 2020-01-08 2021-07-15 成都百裕制药股份有限公司 ***二酚衍生物及其制备方法和在医药上的应用

Also Published As

Publication number Publication date
WO2003080043A1 (en) 2003-10-02
US20030232101A1 (en) 2003-12-18
AU2003214226A1 (en) 2003-10-08

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