CN1631112A - 蛇接骨的组织培养繁殖和栽培技术 - Google Patents

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CN1631112A CN 200510002472 CN200510002472A CN1631112A CN 1631112 A CN1631112 A CN 1631112A CN 200510002472 CN200510002472 CN 200510002472 CN 200510002472 A CN200510002472 A CN 200510002472A CN 1631112 A CN1631112 A CN 1631112A
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雷一鸣
刘小荣
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Abstract

一种蛇接骨的组织培养繁殖和栽培技术,它是将蛇接骨的叶子切片,在试管里培养产生愈伤组织,再转移诱导培养,分化芽、根,培养成完整的植株,然后将试管苗移栽,通过科学的栽培管理,形成规模生产,本发明采用组织培养方法,繁殖蛇接骨种苗,使野生的蛇接骨得以人工驯化,形成规模生产,为开发利用蛇接骨提供种源。

Description

蛇接骨的组织培养繁殖和栽培技术
                          技术领域
本发明涉及一种蛇接骨的组织培养繁殖和栽培技术。
                          背景技术
蛇接骨[Gynura Procumbens(Lour)Merr]别名:平卧土三七、回筋口干、树三七、石三七、见肿消、羊草跌打、乌风七,为菊科土三七属植物,是中国及东南亚国家民间常用的传统中草药,具有散瘀消肿、消炎止咳作用,对跌打损伤、风湿关节痛、支气管炎、肺结核等许多疾患有显著的疗效,在国外已开始对其药理、植物活性成份进行深入研究,但国内很少有关于蛇接骨药用价值及其药理作用的专门报道,目前的蛇接骨均为野生,有限的野生资源限制了蛇接骨的开发利用和科学实验。
                         发明内容
本发明的目的就是提供一种蛇接骨组织培养繁殖和栽培技术,为开发利用蛇接骨提供种源材料。
本发明是这样来实现的,采用组织培育方法繁殖蛇接骨种苗,将蛇接骨的叶子切片,在试管里培养产生愈伤组织,再转移诱导培养,分化芽、根,培养成完整的植株,然后将试管苗移栽,具体方法步骤为:
(1)组织培养繁殖:取蛇接骨叶片两片,用自来水冲洗干净,用70%酒精浸1-3分钟,再在0.1%氯化汞溶液中浸渍6-10分钟,表面灭菌后,用无菌水冲洗4-5次,切成1厘米×1厘米小块外植体,接种在试管培养基上(试管培养基为MS+6BA2mg+NAA0.2mg),经2-4周的培养,叶片边缘切口处出现绿色粒状愈伤组织,将此愈伤组织切块转接到增殖培养基上(增埴培养基为MS+6BA1mg+NAA0.2mg+GA0.05mg),进行增殖培养15-25天,再转接到分化培养基(MS+6BA1mg+NAA0.2mg+椰汁50ml/L)上,进行分化培养,诱导芽根,培养20-40天,分化出芽、根,培养成完整的小植株,以上接种都是在接种箱内无菌操作。上述的培养基的PH为6.0,并添加琼脂8g/L,蔗糖20g/L,培养温度25±1℃,日照时数10h,光照强度1000LX。
(2)种苗移栽:试管苗移栽是组织培养繁殖的重要环节,是由导养转为自养的过程,在试管苗生根移栽前必须打开瓶盖,炼苗3-5天,然后用镊子小心取出试管苗放入18℃的温水中洗去根系周围的培养基,***预先处理好的培植基质床中,培植基质是沙和腐植土混合,提前一周用0.2%kMnO4消毒。栽植后要浇透水,使基质与根条之间密切结合,有利扎根。
(3)栽培技术:蛇接骨有同名异株,产地不同种质资源,所含有效成份有差异,药用效果也有差异。蛇接骨,适宜在热带山区丘陵沙质红土壤中生长,降雨量要求在1200毫米以上,气候湿润,土壤肥沃,无积水的环境生长,基杆匍匐状伸长,基杆***,分枝多,基杆为五钝梭形,叶片呈螺旋状互生,叶片椭圆形,边缘外翻(卷),叶片表面有细嫩茸毛,茎杆和叶片含暗灰色油脂状物质,粘在手上不易洗脱。蛇接骨冬季要用薄膜棚保温越冬,迂霜雪易受冻害。对水,肥管理和病虫害防治要求比较严,必须环环扣紧,加强田间管理才能夺高产。为保持本蛇接骨与原产地所含药用有效成份相仿,要求对栽培该药草的地块进行土壤改良,使土壤所含的元素物质与原产地土壤的元素物质相近,为此,才能最大限度保持蛇接骨的药用有效成份。
(4)培养基及其制备:按照培养基的要求称取大量元素、微量元素、有机成份、铁盐、激素等物质,按程序溶解后再混合搅拌均匀,最后用蒸馏水将容积补到1L,调整PH值至6,加入琼脂加热溶解充分,分装到培养基容器内,将分装好的培养基放入高压锅内灭菌。灭菌条件:压强为1.05Mpa,当锅内压力上升到0.5Mpa时,打开放气阀将冷空气放出,放尽冷空气后,当压力表指针上升在1.05Mpa时开始计时保持20分钟恒压,完成高压灭菌后,冷却取出培养基放入接种箱内备用。
本发明采用组织培养方法,繁殖蛇接骨种苗,通过科学的栽培管理,使野生的蛇接骨得以人工驯化,形成规模生产,为开发利用蛇接骨提供种源。
                         具体实施方式
实施例一,本发明是采用组织培养的方法,繁殖蛇接骨种苗,具体方法步骤是:
(1)组织培养繁殖:取蛇接骨种苗(种苗原产印度尼西亚,中国科学院赠送永丰县扶贫开发)叶片两片用自来水冲洗干净,用70%酒精浸2分钟,再在0.1%氯化汞溶液中浸渍8分钟,表面灭菌后,用无菌水冲洗5次,切成1厘米×1厘米小块外植体,接种在试管培养基上(试管培养基为MS+6BA2mg+NAA0.2mg),经3周的培养,叶片边缘切口处出现绿色粒状愈伤组织,将此愈伤组织切块转接到增殖培养基上(增埴培养基为MS+6BA1mg+NAA0.2mg+GA0.05mg),进行增殖培养20天,再转接到分化培养基(MS+6BA1mg+NAA0.2mg+椰汁50mg/L)上,进行分化培养,诱导芽根,培养30天,分化出芽、根,形成完整的小植株,以上接种都是在接种箱内无菌操作。培养基的PH为6.0,并添加琼脂8g/L,蔗糖20g/L,培养温度25±1℃,日照时数10h,光照强度1000/X。
(2)种苗移栽:试管苗移栽是组织培养繁殖的重要环节,也是由导养转为自养的过程,在试管苗生根移栽前打开药盖炼苗5天,然后用镊子小心取出试管苗放入18℃的温水中洗去根系周围的培养基,***预先处理好的培植基质床中,培植基质是沙和腐植土混合,提前一周用0.2%kMnO4消毒。栽植后要用清水浇透,使基质与根条之间密切结合,有利扎根。
(3)栽培技术:蛇接骨有同名异株,产地不同种质资源,所含有效成份有差异,药用效果也有差异。本蛇接骨的特征特性,适宜在热带山区丘陵沙质红土壤中生长,降雨量要求在1200毫米以上,气候湿润,土壤肥沃,无积水的环境生长,基杆匍匐状伸长,基杆***,分枝多,基杆为五钝梭形,叶片呈螺旋状互生,叶片椭圆形,边缘外翻(卷),叶片表面有细嫩茸毛,茎杆和叶片含暗灰色油脂状物质,粘在手上不易洗脱。在我县种植春季现蕾开花,不成熟种子,花丝脱落似蒲公英花丝随风在空中飘扬。冬季要用薄膜棚保温越冬,迂霜雪易受冻害。对水,肥管理和病虫害防治要求比较严,必须环环扣紧,加强田间管理才能夺高产。为保持本蛇接骨与原产地所含药用有效成份相仿,我们对栽培该药草的地块进行土壤改良,使土壤所含的元素物质与原产地土壤的元素物质相近,最大限度保持蛇接骨的药用有效成份。
(4)培养基及其制备:按照培养基的要求称取大量元素、微量元素、有机成份、铁盐、激素等物质,按程序溶解后再混合搅拌均匀,最后用蒸馏水将容积补到1L,调整PH值至6,加入琼脂加热溶解充分,分装到培养基容器内,将分装好的培养基放入高压锅内灭菌。灭菌条件:压强为1.05Mpa,当锅内压力上升到0.5Mpa时,打开放气阀将冷空气放出,放尽冷空气后,当压力表指针上升在1.05Mpa时开始计时保持20分钟恒压,完成高压灭菌后,冷却取出培养基放入接种箱内备用。

Claims (3)

1、一种蛇接骨的组织培养繁殖和栽培技术,其特征是采用组织培养方法繁殖蛇接骨种苗,将蛇接骨的叶子切片,在试管里培养产生愈伤组织,再转移诱导培养,分化芽、根,培养成完整的植株,然后将试管苗移栽,具体方法步骤为:
(1)组织培养繁殖:取蛇接骨种苗叶片两片用水冲洗干净,用70%酒精浸1-3分钟,再在0.1%氯化汞溶液中浸渍6-10分钟,表面灭菌后,用无菌水冲洗4-5次,切成1厘米×1厘米小块外植体,接种在试管培养基上,经2-4周的培养,叶片边缘切口处出现绿色粒状愈伤组织,将此愈伤组织切块转接到增殖培养基上,进行增殖培养15-20天,再转接到分化培养基上,进行分化培养,诱导芽根,培养20-40天,分化出芽、根,形成完整的小植株,接种是在接种箱内无菌操作;
(2)种苗移栽:在试管苗生根移栽前,打开瓶盖,炼苗3-5天,然后用镊子小心取出试管苗放入18℃的温水中洗去根系周围的培养基,***预先处理好的培植基质床中,培植基质是沙和腐植土混合,并提前一周用0.2%kMnO4消毒,栽植后浇透水,使基质与根条之间密切结合;
(3)栽培技术:蛇接骨适宜在热带山区丘陵沙质红土壤中生长,降雨量要求在1200毫米以上,气候湿润,土壤肥沃,无积水的环境生长,冬季要用薄膜棚保温越冬,对水,肥管理和病虫害防治要求严,必须环环扣紧,加强田间管理;
(4)培养基及其制备:按照培养基的要求称取大量元素、微量元素、有机成份、铁盐、激素等物质,按程序溶解后再混合搅拌均匀,最后用蒸馏水将容积补到1L,调整PH值至6,加入琼脂加热溶解充分,分装到培养基容器内,将分装好的培养基放入高压锅内灭菌,灭菌条件:压强为1.05Mpa,当锅内压力上升到0.5Mpa时,打开放气阀将冷空气放出,放尽冷空气后,当压力表指针上升在1.05Mpa时开始计时保持20分钟恒压,完成高压灭菌后,冷却取出培养基放入接种箱内备用。
2、根据权利要求1所述的蛇接骨组织培养繁殖和栽培技术,其特征是:试管培养基为MS+6BA2mg+NAA0.2mg,增埴培养基为MS+6BA1mg+NAA0.2mg+GA0.05mg,分化培养基MS+6BA1mg+NAA0.2mg+椰汁50mg/L;培养基的PH为6.0,并添加琼脂8g/L,蔗糖20g/L。
3、根据权利要求1所述的蛇接骨组织培养繁殖和栽培技术,其特征是组织培养的温度25±1℃,日照时数10-12h,光照强度1000LX。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102461462A (zh) * 2010-11-04 2012-05-23 湖北正佳微生物工程股份有限公司 一种适合蓝莓快速育苗组织培养的培养基制备方法
CN103548697A (zh) * 2013-11-07 2014-02-05 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 一种用于蓝莓组织培养的培养基
CN107864865A (zh) * 2017-12-26 2018-04-03 丽江市古城区秋成种养殖有限公司 一种红果参组培苗的高效炼苗技术及驯化栽培方法

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