CN1585668A - 苛宾诺盘电渗流泵 - Google Patents
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Abstract
本发明给出用于在通道、导管、管道等中的溶液中产生电渗流(EOF)的泵。通过在绝缘壁所确定的通道中的溶液中施加电场而产生电渗流。该现象取决于表面位置的电离作用,从而对于电中性来说,在溶液中存在过剩的可移动电荷。电场作用在溶液中的过剩电荷上使得液体流动。溶液中过剩电荷的数量和分布取决于溶液和表面材料,并与表征材料/溶液组合的参数捷塔(Z)电势有关。
Description
本发明给出用于在通道、导管、管道等中的溶液中产生电渗流(EOF)的泵。通过对绝缘壁所确定的通道中的溶液施加电场而产生电渗流。更特定地,本发明给出基于两个互相靠近、平行的圆板的EOF泵设计,在圆板中的一个——称作苛宾诺盘——的中心部分有一个孔。EOF泵可容易地集成在小型***——例如微***、微机械、微结构等——中,以在这样的***中产生有效且容易控制的液体流。
根据本发明,可使用电场来产生通道中的离子性溶液中的电渗流。为了生成电渗流,必须仔细选择通道的几何结构以及材料。本发明的优点在于给出用于产生和控制小流量***中的液体流的泵。此外,根据本发明的泵可利用通常用于制作小尺寸***和器件——例如芯片、微***、微机械、微结构、微流***等——的材料和工艺技术来制作。从而根据本发明的泵可集成在这样的小尺寸***和器件中,给出有效灵活的液体控制。
根据第一方面,本发明给出电渗流泵,用于在离子性溶液中从通道的入口向出口产生流动。电渗流泵优选地包含:具有用于容纳离子性溶液的通道的外壳;与通道中的离子性溶液电接触的第一电极和第二电极;在第一和第二电极之间施加电势差的装置;半径rout1的第一至少基本圆形的板;半径rout2的第二至少基本圆形的板,具有半径rin的中心圆孔;第一和第二板在通道中相对放置,基本平行且共心,相距d。优选地放置第一和第二板以使第一和第二电极之间的电通路经过板间的空间,并且液体流经过板间的空间并通过第二板中的孔。而且,所有侧向尺寸都优选地远大于纵向尺寸,rout1,rout2,rin>>d。此外,第一和第二板的相对表面部分优选地在pH值7-7.5之间的130-160mM的盐的水溶液中具有ζ>10mV的捷塔电势。
在本发明优选实施方案中,第一和第二板之间的距离d在0.1-2μm之间。而且,第一和第二板的外半径rout1和rout2在0.02-1.0cm之间。此外,第二板中的孔的内半径rin在0.01-0.5cm之间。
附图简述
图1为通道中电渗流的原理的图解。
图2A和B示出根据本发明的苛宾诺盘EOF泵的实施方案的剖视和顶视图。所示实施方案用于电生理测量***,以产生用于定位细胞的流。
图3为一曲线图,示出路径上下部分之间导流力与孔直径的关系。说明了图2A和B的电生理测量***中所用的电渗泵所需的性能。
图4为本发明另一集成在电生理测量***中的优选实施方案的图示。
详细描述
如果通道中的离子性液体利用电场来驱动,这一现象称作电渗。通过对绝缘壁所确定的通道中的溶液施加电场而产生电渗流,通道1的示意图示于图1中。通道由壁2形成,电极4和6分列两端。通道1中容纳的液体为具有正离子7和负离子8的离子性溶液。
该现象取决于壁2表面上的电负性位置9的电离作用,从而对于电中性来说,在溶液中存在过剩的可移动电荷,主要位于靠近壁处,界面处有一由德拜长度λD≈1-10nm所给出的薄的屏蔽层。施加给溶液的电场作用在屏蔽层中的过剩电荷上引起液体流动。溶液中过剩电荷的数量和分布取决于表面材料(可电离位置的密度)以及溶液成分,尤其是pH和离子浓度。电荷和分布与参数捷塔(ζ)电势有关,后者可与电渗流有关。然而,尽管对于材料/溶液组合测量并公布了捷塔电势的值,但是它依然不是一个容易控制的参数,并且由于它是由表面位置的电离作用引起的,因而ζ和EOF非常容易受表面条件和粘污的影响而改变。对于二氧化硅表面,文献中给出75mV的ζ值。对于玻璃来说,该值可以是二氧化硅上的两倍,但是对于这二者来说,pH和吸附物质的影响实际上可以显著减小这些值。ζ的这种值可以用于设计计算中,但明智的做法是保证恰当的性能并不依赖于它在实际中得到的值。EOF的方向由溶液中由表面位置的电离作用所产生的过剩可移动电荷来确定。由于二氧化硅或硅酸盐玻璃上的可电离基的pKa为~2,那么在中性pH值处,表面被充上负电荷,EOF随着可移动正电荷流向负性极化电极。与长度为L、恒定剖面积为A的流通道的电渗流有关的体流率Ivol eof由下式给出
其中ε为介电常数,η为液体粘度,ζ为液体和通道边界之间的界面的捷塔电势。U为具有长度L和恒定剖面积A的通道两端所施加的驱动电压。式1定义了在没有连接负载时EOF泵所能传送的最大可能流率。通道中液体质点的平均速度通常由u=Ivol/A给出,电场强度由E=U/L给出,使得电渗迁移率的定义μeof=u/E=εζ/η与含有EOF泵的流通道的任何特殊几何尺寸都无关,主要表征液体和壁之间的界面。当泵上连接负载之后,EOF驱动力将与压力驱动流(Poiseuille流)同时起作用。与层Poiseuille流有关的体流率由
给出,其中Δp为流通道两端之间的压力差,Kcanal为通道的导流力。于是总的流率由下式给出
令Ivol=0并求解Δp得到泵的压力灵活性(compliance):
任何特定EOF泵的总体性能可以由ΔpmaxIvol eof的乘积给出的性能功率来量化,后者是以瓦特为单位表达的量。功率越高,泵的总体性能越好。如果在泵的一端附加导流力Kload,并在另一端施加参考压力,则负载上相对于参考压力的压力差由下式给出:
流过负载的体流为
泵结构的具体选择将引起泵通道的电导Gcanal。作为EOF驱动电压的响应,泵通道中的电解质将携带电流Iq。由于泵中的功率耗散,与EOF有关的设计考虑应当包含热沉。此外,还应当考虑电极的位置和设计。在电生理器件中,电极材料的自然选择是AgCl,从而应当考虑泵工作时这种电极的消耗。电极材料的消耗速率以体积每时间单位如下给出:
其中mAgCl=143.321g/mol和ρAgCl=5.589g/cm3,为AgCl的摩尔质量和质量密度,e=1.602×10-19C和NA=6.02×1023mol-1为电荷的基本单位和阿伏加德罗常数。
建议使用可消耗电极的替代品,它包括给出通过对液体流具有高阻力的电解质桥与腔室相连的外部电极。这可以是与给出EOF泵吸的通道类似的细通道,但是表面具有更低的带电位置密度(低捷塔电势)或者其表面具有与EOF泵吸通道相反的极化电荷。在后一情形中,通向反电极的低导流力通道对EOF泵吸有贡献。大多数壁材料——像玻璃或二氧化硅——在与中性pH值的溶液接触时会带上负电荷。然而,有可能确定能带正电荷的材料。氧化铝基陶瓷可能是合适的,如果溶液处于中性偏低pH侧的话更是如此。作为选择,聚合物或胶体材料——例如琼脂糖、聚丙烯酰胺、Nafion、醋酸纤维素或其它投析膜型材料——可制作对液体流具有高阻力的桥。优选地,它们应当具有低的表面电荷密度或者与EOF泵吸通道相反的极化。
图2A和B示出根据本发明的苛宾诺EOF泵的优选实施方案。所示实施方案用于电生理测量***,以产生用于定位细胞的流。图2A示出器件的侧视图而图2B示出顶视图。使用密封粘合剂15将具有玻璃或二氧化硅表面的两块平行板11和12固定在吸阱19的底部,在平行板11和12之间***垫块18以保持它们之间的亚微米间距。当电极4和6之间产生带电离子流时,在间隔紧密的板11和12之间填满液体的空间中发生泵吸作用。上电极4既可以集成到吸阱中(如图所示),也可以从上方的器件支架浸入阱中。箭头14指出与器件其余部分的液体连接。为了装填EOF泵,应当将液体吸入平行板之上的阱中。为了克服毛细作用力,应当在阱的顶部施加气体压力,以将漏出板间空间的液体压回下电极6。一旦液体接触到两个电极4和6,EOF泵便可以工作,进行泵吸。
根据本发明的苛宾诺几何结构取决于安装在分层聚合物支架上被分隔开的具有二氧化硅或玻璃表面的板。间隔可以由聚合物垫球或在SU-8光刻胶中光刻成形的垫片来保持。在这一几何结构中,板具有圆形形状,流为径向的,排水在中心。板之间的距离h与圆形的内(rin)和外(rout)半径相比必须更小。这一泵结构尤其适用于在吸阱中的集成。关键参数如下:
下面给出用于泵尺寸的实际选择的关键参数。用于与电生理器件中的微流有关的应用的可行的泵尺寸为:rout=0.25cm、rint=0.1cm以及h=0.5μm。计算基于与电生理器件相关的条件,其中所用的液体为生理缓冲液溶液。然而,对于大多数目的,相应于150mM NaCl溶液的数据是典型的。电导率为σ=0.014Scm-1,粘度η=8.94×10-4kgm-1s-1。计算基于U=100V的电压驱动和捷塔电势ζ=15mV的保守选择。对于若干孔直径实验确定细胞受体路径——假定是EOF泵最重要的负载——的导流力(见图3)。
在计算中假设了大致相应于1μm直径孔的导流力Kpassage=3pls-1mbar-1。
参数 | 值 |
泵通道导流力Kcanal [pls-1mbar-1] | 7.99 |
最大体流率Imax[nls-1] | 4.00 |
最大压力Δpmax[mbar] | 500.7 |
性能功率ΔpmaxImax [nW] | 200 |
负载上的压力差Δppassage[mbar] | 364.0 |
负载中的体流率Ipassage[nls-1] | 1.09 |
泵通道电导Gcanal[μS] | 4.80 |
泵通道电流Iq[μA] | 480 |
泵中的功率耗散UIq[mW] | 48 |
保持温升低于20C°所需的热沉的最大热阻[C°W-1] | 416.7 |
AgCl电极的消耗速率ΔVΔt[μm3s-1] | 127800 |
根据本发明的EOF泵设计可通过用2块间距≈1μm的玻璃板生成该结构来制作。间距可用垫球或光刻胶/粘合剂层来保持。可使用众所周知的腐蚀和光刻技术在多种材料——例如硅或SU-8感光环氧树脂——中形成。该结构适用于集成到添加液体的吸阱中,如图4所示。
图2A和B所示的优选实施方案可用于电生理测量***中,以产生并控制液体流,这示于图4中。液体流用来将细胞定位于所需的测量结构中。在图4中,外壳10含有被微结构单元24分隔开的液体通道21和22,微结构单元24支持其顶表面上的薄膜25。采用膜25中的路径固定细胞23并形成测量位置20。液体***由两个互相分隔开的流***组成。第一流***由容纳细胞溶液的通道21组成。通道21与膜25的上部、用于加入细胞溶液的入口28,以及具有根据本发明用于在通道21中的细胞溶液中产生并控制流动的EOF泵(电极未示出,可按图2A和B所示的放置)的出口30接触。第二流***由容纳细胞内缓冲液溶液的通道22组成。通道22与膜25的下部、入口29,以及具有根据本发明用于在通道22中的缓冲液溶液中产生并控制流动的EOF泵(电极未示出,可按图2A和B所示的放置)的出口30接触。细胞23通过用作吸阱的入口28引入,通过液体***到达测量位置20。通道在细胞俘获位置20变窄,以确保进行使用Coulter计数器原理的细胞探测。
下面将描述与EOF泵的本以及许多其它应用有关的许多问题。
装填是在工作之前用液体首次填充研究中的器件的过程。电渗驱动力在实现流动之前需要两个电极都浸没在液体中。所提出的不同EOF泵结构在某种程度上都利用狭窄的流通道中的毛细作用力来自发装填。然而,无法仅仅利用毛细作用力来装填含有两个电极的整个腔室。考虑到AgCl电极的消耗速率,沉积在玻璃板之间的薄膜电极不会持续器件的整个工作周期。对于滤网结构来说情况可能更糟。尽管研究中的器件被认为是用后即弃的,但是还是优选体电极。对于这一问题一个可行的解决方法可以是仅对含有体电极的泵腔的填充使用位置合适的薄膜电极。在填充过程之后可由体电极接管。另一可能的解决方法是在正确工作之前利用施加给泵和吸液部分的气体压力驱动来填充整个器件。即使是对于具有许多平行的测量位置的器件,也可通过将液体吸到所有位置和用同时施加给所有位置的气体压力来填充,对所有平行位置容易地进行填充。
在一可能的细胞定位过程中,在器件中加入位于具有路径的膜的前侧和后侧上的流通道。前侧指的是细胞送入并且用于电生理测量的外部细胞参考电极所在的一侧,而后侧指的是进行抽吸以将细胞拖至路径开口并且内部细胞电极所在的一侧。前侧流通道越过路径,与一端的泵(EOF泵或任何其它具有类似性能的泵)以及另一端的吸阱相连。前侧流通道的体积应当足够低以确保一旦细胞进入通道,后侧泵所保持的通向路径的流能够——在短时间内——将细胞拉至路径的位置以建立吉欧封接。窄的前侧流通道使得能够用与Coulter计数器中相同的原理来探测通过通道的细胞。探测可通过具有两个电极——每个位于通道的一端——的通道电阻的电学测量来进行。当细胞进入流通道时,它排出一定体积的缓冲液溶液,使其无法对电导有贡献。从而由细胞体积与通道体积之比给出电阻的相对改变。此外,还可预期会有扩展电阻的贡献。然而,如果细胞的剖面积与流通道的剖面积相比较小的话,则这一贡献较小。通道电阻的改变由下式计算:
其中Vcell和Vc分别为细胞和通道的体积。Rc为通道的电阻,Fs为计及与通道中的细胞有关的扩展电阻的几何因子。Fs为稍大于1的数,取决于细胞和流通道的相对剖面积。然而,如果通道宽度与细胞尺寸可比,那么几何因子会非常大,相应于扩展电阻取代缓冲液体积交换效应占据主导地位的情况。后侧流通道无需非常择,应当在一端具有一个泵端口并在另一端直接与路径相连,或者具有两个泵端口,分别处于两端,路径置于通道中间。如果在器件工作过程中需要细胞内缓冲液的交换的话,择应当选择两个泵端口的版本。可使用统计方法以估算送入与前侧流通道相连的吸阱中的细胞以一定概率通过通道之前所需的等待时间。这一概率将主要取决于悬浮液中的细胞浓度Cc、前侧流通道中的平均流速uc以及流通道的剖面积Af。时间t中通过通道的平均细胞数为:
β(t)=CcAfuct (8)
时间t中至少一个细胞通过通道的概率ρ(t)由泊松分布给出:
为了说明这一布置设计,为计算简便起见,可假设前侧流通道具有半径rc=25μm的圆形剖面和长度Lc=0.25mm。这一流通道的体积和导流力分别由Vc=0.5nl和
给出。压力驱动Poiseuille流的平均流速将为35mm s-1每mbar的驱动压力差。对于典型的细胞半径rcell=6μm,由式7给出的电阻改变将大约是90.9kΩ的总通道电阻中的177Ω,即0.19%的相对改变。这里计及扩展电阻,假设了1.06的几何因子。当前侧驱动压力差仅有1mbar时,在2秒内,平均将有4.1个细胞通过通道,至少一个细胞将通过的几率是98.4%。这一布置设计依赖于细胞一进入通道就停止前侧流的能力。这需要快速电子设备,避免这个的方法是对前侧流通道连续施加小的压力脉冲,直到利用Coulter计数器原理探测到细胞在通道中出现。考虑到前侧流通道的小体积,所提出的安装在后侧流通道上的EOF泵类型中的任何一个都将能够在瞬间将细胞吸入路径处的位置。Coulter计数器的细胞探测电子设备可用与离子沟道响应的电生理测量中所需的相同类型的制成。
根据本发明的苛宾诺盘EOF泵基于多用途设计,可用于许多小尺寸***和器件中,例如芯片、微***、微机械、微结构、微流***等。上面作为特定说明性实施例描述的电生理测量***并不限制本发明的范围或可能的应用范围。
Claims (4)
1.一种电渗流泵,用于在离子性溶液中从通道的入口向出口产生流动,该电渗流泵包含:外壳,具有用于容纳离子性溶液的通道;第一电极和第二电极,配置为与通道中容纳的离子性溶液电接触;在第一和第二电极之间施加电势差的装置;第一至少基本圆形的板,半径rout1;第二至少基本圆形的板,半径rout2,具有半径rin的中心圆孔,第一和第二板彼此相对放置,处于至少基本平行且共心的构型,在通道中相距d,以使第一和第二电极之间的电通路经过板间的空间,并且液体流经过板间的空间并通过所述孔,其中所有侧向尺寸都远大于纵向尺寸,rout1、rout2、rin>>d,其中第一和第二板的相面对的表面部分在pH值7-7.5之间的130-160mM的盐的水溶液中具有ζ>10mV的捷塔电势。
2.根据权利要求1的电渗流泵,其中第一和第二板之间的距离d在0.1-2μm之间。
3.根据前述任一权利要求的电渗流泵,其中第一和第二板的外半径rout1和rout2在0.02-1.0cm之间。
4.根据前述任一权利要求的电渗流泵,其中第二板中的孔的内半径rin在0.01-0.5cm之间。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |