CN1466884A - 芦荟酸乳酪饮品及其制造方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种芦荟酸乳酪饮品，其特征在于该饮品的原料组分为重量百分比为36％－66％的牛奶、25％～40％的水、4.5％～13％的芦荟果粒、4％～10％的蔗糖、0.2％～1.0％的稳定剂，及按0.02～0.08活力单位/千克比例加入的乳酸菌。同时提供一种芦荟酸乳酪饮品的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：①将蔗糖、水与稳定剂混合溶解；②灭菌；③冷却；④将牛奶灭菌，冷却至30－50℃，加入乳酸菌发酵3－6小时，冷却至10－20℃，搅拌后再与上述混合物相混合；⑤添加芦荟果肉；⑥通过均质；⑦冷却后即得到本发明的芦荟酸乳酪饮品。本饮品具有改善人体肠道菌群平衡和增强免疫力的功能；且其风味、口感、色泽、总体评价等都优于相关的对照产品。
Description
技术领域
本发明涉及一种酸乳酪饮品及其制造方法，尤其涉及一种芦荟酸乳酪饮品及其制造方法。
背景技术
目前乳酸菌饮料和芦荟的营养和健康价值越来越受到关注。因为：
牛奶：牛奶是优质蛋白质的来源。牛奶中富含易被人体吸收的钙，钙对运动人体是一个重要的营养素。牛奶中的碘、锌和卵磷脂能提高人脑的工作效率；牛奶中的镁能增加心脏和神经***的耐疲劳能力。
乳酸菌：牛奶基料在乳酸菌的发酵作用下(郭本恒编著.功能性乳制品.北京：轻工业出版社，2001：57-62)，牛奶中的乳糖被分解成葡萄糖和半乳糖，可以有效地缓解患有乳糖不耐症的人群不宜饮用牛奶的问题。牛奶中的蛋白质在酸性条件下发生变化，变成人体更易吸收利用的状态。乳酸菌进入人体内即在肠道内繁殖(郑建仙编著.功能性食品.北京：轻工业出版社：551-552)，使肠道菌群发生相应的变化，抑制了病原菌和有害于人体健康的细菌的生长繁殖，从而起到预防感染的作用。乳酸菌死菌在体内被分解后，其有效成分被有机体吸收，能增强人体免疫力，促进肝功能或通过肠道菌发挥有益肌体健康的作用。此外，还有实验表明(顾瑞霞、王亚威、骆承庠.发酵乳—最新研究动向(续)，中国乳品工业，全国乳品工业信息中心，1999：第27卷，第5期，41-45)，来自发酵乳的乳酸菌比肠道固有的乳酸菌具有更强大的免疫促进作用，而且混合菌种比单一菌株的促进作用强。乳酸菌还具有防癌和抗癌的作用(郑建仙编著.功能性食品.北京：轻工业出版社：551-552)，这是因为，一方面乳酸菌改善肠道菌群就同时抑制了致癌物质的产生及其促癌作用，另一方面乳酸菌及其代谢产物能通过诱导产生干扰素和促细胞***剂，活化NK细胞并促使免疫球蛋白抗体的产生，从而活化了巨噬细胞的功能，提高了人体免疫力，增强了对癌症的抵抗能力。
人体的衰老常常是由于过氧化引起的。因为过氧化常常会造成体内的自由基过多，自由基过多或清除太慢，就会攻击生命大分子物质，造成细胞、组织和器官损伤，这是引起肌体衰老的根本原因。例如，自由基会对核酸造成破坏，使DNA断裂，从而产生遗传突变或癌变。自由基造成蛋白质肽链断裂，导致生物活性酶失去活性，从而引起人体衰老。另外，自由基还会引起糖类和脂肪类的破坏，并且所有这些破坏都是累积性的，如果听之任之，就会加速人体衰老。
酸奶则具有延年益寿和防衰老之功效(张延利、唐秀敏著.酸奶的营养价值与保健功能.食品科技，北京市粮食科学研究所主办，1997年4月：40-41)。这是因为酸奶中有SOD及其他类抗氧化物质，可清除自由基，防止老化产生；或者协同抗氧化作用，活化物质跟过氧化自由基反应，起着延长过氧化反应诱导期的作用。另外酸奶中的乳酸菌产生有机酸、细菌素等能抑制肠道内腐败菌的生长，从而减少了这些细菌产生毒胺、靛基质、吲哚、氨、粪臭素、硫化氢、致癌物质和其他毒物等有害物质，从而使肌体衰老过程变得缓慢。
芦荟果粒：芦荟中含有的芦荟大黄素甙和芦荟大黄素等蒽醌类有效成分对增进人体免疫功能起着积极的作用(熊佑清著.芦荟.中国农业大学出版社，68-70)。当过度劳累或城市生活的紧张使人的体液由正常状态时的碱性变成酸性时(邵爱娟、孙宇梅著.芦荟的药理作用研究及临床应用概况.芦荟产业，科技部中国农村技术开发中心主办，1999年8月(第一期)：23-25)，病毒就易侵袭而得病，使用芦荟能使体液维持在正常的碱性状态，不易患感冒。此外芦荟甙成分可以增加大肠液的分泌，增加脂肪酶的活性，刺激失调的大肠自律神经，从而对治疗便秘起到很好的作用。芦荟甙还具有消炎杀菌(Aloe Vera and Inflammation，Robert H.Davis，Joseph M.Kabbani andNicholas P.Maro Proceedings of the Pennsylvania Academy of Science 60：67-70.1986)，吸热消肿、软化皮肤、增强细胞活力的功能，所以可以抗病毒感染，促进伤口愈合复原的功能。综上所述，芦荟甙可以通过调节肠道菌群，调节体液等，使人体的免疫功能有所增强。
芦荟中的所含有的另外一种有效成分是粘稠物质芦荟多糖类[Immunoreactive Lectins in Leaf Gel from Aloe barbadensis Miller，Wendell D.Winters Phytotherapy research，vol.7，P23-P25(1993)](乙酰化葡甘聚糖、Aloemannan、Aloeutin、Alomicin等)，它们是六碳糖的多糖体物质，是由糖和蛋白质相交联的复合蛋白，即糖蛋白物质，其平均分子量为45万。科研证明，分子量愈大的多糖体物质，对改善虚弱的病体，强化免疫功能，增强抗癌作用方面效果愈好。而且人们已渐认识到对抗癌有效的药用植物中都含有大量分子的多糖体。芦荟中的某些糖蛋白、平均分子量为18000，药理实验显示出具有抗肿瘤、消炎及免疫促进活性，它在整个芦荟功效中起着重要药理作用。有文献资料指出(Effects of Aloe Extracts on Human Normal and TumorCells in Vitro，W.D.Winters，R.Benavides，and W.J.Clouse Economic Botany，35(1)，1981，P 89-95)，芦荟多糖具有强烈的消炎抗菌作用(Two Functionallyand Chemically Distinct Immunomodulatory Compounds in the Gel of Aloe Vera，Journal of Ethnopharmacology，23，(1988)，P61-71)，并能刺激肌体产生某些天然化合物，从而减少疾病对身体免疫功能的破坏作用，并对多种疾病如癌症、爱滋病等有一定的辅助疗效。日本芦荟研究专家添田百枝博士在《关于芦荟的抗癌性研究》(熊佑清著.芦荟.中国农业大学出版社，68-70)(1969年发表)的论文中指出：芦荟中的Aloe mannan、Aloeutin、Alomicin等成分能阻止癌细胞活动。其中的CarrisynTM，已被FDA批准应用在治疗溃疡和爱滋病的临床上(邵爱娟、孙宇梅著.芦荟的药理作用研究及临床应用概况.芦荟产业，科技部中国农村技术开发中心主办，1999年8月(第一期)：23-25)。日本芦荟研究专家铃木郁男博士《芦荟素A之抗肿瘤活动》的论文，提出了动物实验中的卓越疗效。芦荟中的高分子物质对于红血球具有凝聚性质，含有能与细胞膜起反应的物质，具有强烈的生理活性。芦荟可以促进小鼠免疫器官脾脏、胸腺增长，可显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分数和吞噬指数，表明它具有提高免疫功能的作用(朱亮锋、邓新华、陈文详、何其敏著.中国芦荟的多糖研究.芦荟产业，科技部中国农村技术开发中心主办，1999年11月(第二期)：26)，可以促进NK细胞(王蜀秀等著.芦荟多糖的研究.植物学报，1989，31(5)：389-392)，即杀死生物体内异常的细胞——癌细胞，所以可作为抗肿瘤的辅助用药，在治疗免疫功能低下的病例中可望有一定的应用价值。此外，芦荟多糖在进食时(The benefits of aloe vera，NaturalLiving Products Limited)，不会被消化***破坏或吸收，而是直接进入人血液中并聚集到高活力水平，从而对促进免疫起着很大的作用。总之，利用芦荟，增加白介素，可用于多方面抗癌。
芦荟中的粘液(Mucin，就是蛋白质)，是以Arboran A，Arboran B，Aloemannan，Aloetin等多糖类为中心的。根据研究文献，明确了粘液类对于防止老化和慢性过敏症患者的治疗是非常重要的成分。粘液素存在于人体的肌肉和胃肠粘膜等处，使组织富有弹性力。如果粘液素不足，细胞就逐渐衰弱，进而失去对病原菌和病毒侵入的防御力。另外，粘液素还有壮身、强精的效果和旺盛精力的作用。
芦荟可显著降低磷苯三酚自氧化速率，对内毒素所致肝脏反血清中过氧化脂质的升高具有明显的抑制作用，这表明芦荟具有抗氧自由基功效。正因为其具有消炎、抗内毒素、组织修复和抗氧自由基等功效，因而对防御由生理因素或非生理因素(如疾病)诱发自由基长期慢性进行性的累积损伤有积极的意义。
此外，芦荟对胃功能，心脏功能均起到积极的作用。它能降低抗原进入肠道粘膜的机会，降低蛋白质在结肠中的腐化作用，降低进食后的胀气感，改善结肠中的细菌作用，从而改善肠胃功能，增强体质，这些对延缓人体衰老也起到一定的辅助作用。
而检索现有专利和文献等，并没有发现将芦荟果粒添加到乳酸菌饮料中的项目。专利《乳酸菌芦荟汁保健饮料》(申请过程中，申请号02132833.1)中涉及分别制取乳酸菌种液和芦荟汁，再将该两液合成及二次发酵，制作时间较长；专利《果肉型芦荟饮料及其制备方法》(申请过程中，申请号98104746.7)中涉及饮料中添加芦荟果肉，但其基料是水而不是乳酸菌饮料，营养与功能也完全不同。
发明内容
本发明针对以上问题，研究以牛奶为载体，以乳酸菌作为发酵剂对牛奶进行发酵，添加风味物质和芦荟果粒的乳制品。
故本发明的目的之一为提供一种芦荟酸乳酪饮品；另一目的为提供制备该芦荟酸乳酪饮品的方法。
本发明的目的是这样实现的：一种芦荟酸乳酪饮品，其特征在于该饮品的原料组分为重量百分比为36％-66％的牛奶、25％～40％的水、4.5％～13％的芦荟果粒、4％～10％的蔗糖、0.2％～1.0％的稳定剂，及按0.02～0.08u/Kg(活力单位/千克)比例加入的乳酸菌。
该饮品的原料中还可以加入0％～0.1％的风味物质。
本发明中所说的牛奶的定义：普通牛奶或用奶粉、乳清粉、稀奶油或其他牛奶组分配制成的还原奶或含乳饮料。
蔗糖的定义：来源于甘蔗或甜菜汁，经压榨、过滤、蒸发、浓缩、冷却和脱色而成的晶体，一般作为甜味物质使用。
稳定剂：由果胶、变性淀粉等食品级乳化剂和增稠剂混合而成的粉末状物体。
风味物质包括：食用香精、香料。
芦荟果粒：取可食用的芦荟品种的果肉，经切割、添加蔗糖、灭菌而成的糖水果粒。
乳酸菌：由嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和双歧杆菌等单独或混合组成的酸奶发酵剂。
上述芦荟酸乳酪饮品的制备方法包括以下步骤：
①将蔗糖、水与稳定剂混合溶解；
②灭菌；
③冷却；
④将牛奶灭菌，冷却至30-50℃，加入乳酸菌发酵3-6小时，冷却至10-20℃，搅拌后再与上述混合物相混合；
⑤添加芦荟果肉；
⑥通过均质；
⑦冷却后即得到本发明的芦荟酸乳酪饮品。
其中，进行混合溶解的温度为45-80℃。
所说的灭菌可在70-140℃的温度下进行灭菌3秒至30分钟。
而第一次冷却的温度可为20-60℃。
并在20-60℃，150-300千克/平方厘米下进行均质。
另外，在均质前还可以添加风味物质。
本发明的各项技术指标如下：
| 项目 | 指标 |
| 总固体 | 10.0～16.0％ |
| 总糖(以蔗糖计) | 3.0～12.0％ |
| 蛋白质 | 1.0～4.0％ |
| 乳酸菌 | 106～108cfu/ml |
| 酸度 | 25～80°T |
本发明具有改善人体肠道菌群平衡和增强免疫力的功能。该饮品的风味、口感、色泽、总体评价等都优于相关的对照产品。
具体实施方式
实施例1
配方：
| 原料 | 原料要求 | 添加量 |
| 牛奶 | 脂肪≥2.9％，蛋白质≥2.8％，非脂乳固体≥8.3％ | 36％ |
| 水 | 40％ | |
| 芦荟果粒 | 果粒含量≥40％ | 13％ |
| 蔗糖 | 10％ |
| 稳定剂 | 0.9％ | |
| 风味物质 | 0.1％ | |
| 乳酸菌 | 0.04u/Kg |
制备过程如下：
①将蔗糖、水与稳定剂加热至45℃混合溶解；
②在95℃温度下灭菌5分钟；
③冷却至20℃；
④将牛奶在95℃温度下灭菌5分钟，冷却至40℃，加入乳酸菌发酵5小时，冷却至10℃，搅拌后再与上述混合物相混合；
⑤添加芦荟果肉及风味物质；
⑥在20℃，150千克/平方厘米条件下进行均质；
⑦冷却至10℃即得到本发明的芦荟酸乳酪饮品。
检验结果如下：
| 项目 | 指标 |
| 总固体 | 13.03％ |
| 总糖(以蔗糖计) | 8.9％ |
| 蛋白质 | 1.01％ |
| 乳酸菌 | 3.5×106cfu/ml |
| 酸度 | 35°T |
实施例2
配方：
| 原料 | 原料要求 | 添加量 |
| 牛奶 | 脂肪≥2.9％，蛋白质≥2.8％，非脂乳固体≥8.3％ | 45％ |
| 水 | 35％ | |
| 芦荟果粒 | 果粒含量≥40％ | 10％ |
| 蔗糖 | 9.46％ | |
| 稳定剂 | 0.5％ | |
| 风味物质 | 0.04％ | |
| 乳酸菌 | 0.02u/Kg |
制备过程如下：
①将蔗糖、水与稳定剂加热至50℃混合溶解；
②在70℃温度下灭菌30分钟；
③冷却至60℃；
④将牛奶在70℃温度下灭菌30分钟，冷却至45℃，加入乳酸菌发酵4小时，冷却至15℃，搅拌后再与上述混合物相混合；
⑤添加芦荟果肉及风味物质；
⑥在60℃，220千克/平方厘米条件下进行均质；
⑦冷却至18℃即得到本发明的芦荟酸乳酪饮品。
检验结果如下：
| 项目 | 指标 |
| 总固体 | 14.54％ |
| 总糖(以蔗糖计) | 9.6％ |
| 蛋白质 | 1.26％ |
| 乳酸菌 | 1.7×107cfu/ml |
| 酸度 | 50°T |
实施例3
配方：
| 原料 | 原料要求 | 添加量 |
| 牛奶 | 脂肪≥2.9％，蛋白质≥2.8％，非脂乳固体≥8.3％ | 66％ |
| 水 | 25％ |
| 芦荟果粒 | 果粒含量≥40％ | 4.5％ |
| 蔗糖 | 4％ | |
| 稳定剂 | 0.45％ | |
| 风味物质 | 0.05％ | |
| 乳酸菌 | 0.08u/Kg |
制备过程如下：
①将蔗糖、水与稳定剂加热至55℃混合溶解；
②在95℃温度下灭菌10分钟；
③冷却至35℃；
④将牛奶在95℃温度下灭菌10分钟，冷却至30℃，加入乳酸菌发酵4.5小时，冷却至18℃，搅拌后再与上述混合物相混合；
⑤添加芦荟果肉及风味物质；
⑥在35℃，150千克/平方厘米条件下进行均质；
⑦冷却至15℃即得到本发明的芦荟酸乳酪饮品。
检验结果如下：
| 项目 | 指标 |
| 总固体 | 11.39％ |
| 总糖(以蔗糖计) | 4.1％ |
| 蛋白质 | 1.71％ |
| 乳酸菌 | 2.1×108cfu/ml |
| 酸度 | 55°T |
实施例4
配方：
| 原料 | 原料要求 | 添加量 |
| 牛奶 | 脂肪≥2.9％，蛋白质≥2.8％，非脂乳固体≥8.3％ | 55％ |
| 水 | 27％ | |
| 芦荟果粒 | 果粒含量≥40％ | 10％ |
| 蔗糖 | 7.5％ | |
| 稳定剂 | 0.5％ | |
| 乳酸菌 | 0.04u/Kg |
制备过程如下：
①将蔗糖、水与稳定剂加热至80℃混合溶解；
②在105℃温度下灭菌30秒；
③冷却至40℃；
④将牛奶在105℃温度下灭菌30秒，冷却至45℃，加入乳酸菌发酵3.5小时，冷却至18℃，搅拌后再与上述混合物相混合；
⑤添加芦荟果肉；
⑥在40℃，200千克/平方厘米条件下进行均质；
⑦冷却至20℃即得到本发明的芦荟酸乳酪饮品。
检验结果如下：
| 项目 | 指标 |
| 总固体 | 13.66％ |
| 总糖(以蔗糖计) | 7.7％ |
| 蛋白质 | 1.54％ |
| 乳酸菌 | 1.5×106cfu/ml |
| 酸度 | 60°T |
实施例5
配方：
| 原料 | 原料要求 | 添加量 |
| 牛奶 | 脂肪≥2.9％，蛋白质≥2.8％，非脂乳固体≥8.3％ | 60％ |
| 水 | 23.75％ | |
| 芦荟果粒 | 果粒含量≥40％ | 8％ |
| 蔗糖 | 8％ | |
| 稳定剂 | 0.2％ | |
| 风味物质 | 0.05％ | |
| 乳酸菌 | 0.06u/Kg |
制备过程如下：
①将蔗糖、水与稳定剂加热至70℃混合溶解；
②在121℃温度下灭菌15秒；
③冷却至30℃；
④将牛奶在121℃温度下灭菌15秒，冷却至50℃，加入乳酸菌发酵3小时，冷却至20℃，搅拌后再与上述混合物相混合；
⑤添加芦荟果肉及风味物质；
⑥在30℃，300千克/平方厘米条件下进行均质；
⑦冷却至10℃即得到本发明的芦荟酸乳酪饮品。
检验结果如下：
| 项目 | 指标 |
| 总固体 | 14.72％ |
| 总糖(以蔗糖计) | 8.2％ |
| 蛋白质 | 1.70％ |
| 乳酸菌 | 2.3×108cfu/ml |
| 酸度 | 65°T |
实施例6
配方：
| 原料 | 原料要求 | 添加量 |
| 牛奶 | 脂肪≥2.9％，蛋白质≥2.8％，非脂乳固体≥8.3％ | 45％ |
| 水 | 32％ | |
| 芦荟果粒 | 果粒含量≥40％ | 12％ |
| 蔗糖 | 10％ | |
| 稳定剂 | 1.0％ | |
| 乳酸菌 | 0.04u/Kg |
制备过程如下：
①将蔗糖、水与稳定剂加热至75℃混合溶解；
②在140℃温度下灭菌3秒；
③冷却至30℃；
④将牛奶在140℃温度下灭菌3秒，冷却至43℃，加入乳酸菌发酵6小时，冷却至12℃，搅拌后再与上述混合物相混合；
⑤添加芦荟果肉；
⑥在30℃，250千克/平方厘米条件下进行均质；
⑦冷却至25℃即得到本发明的芦荟酸乳酪饮品。
检验结果如下：
| 项目 | 指标 |
| 总固体 | 15.0％ |
| 总糖(以蔗糖计) | 10.1％ |
| 蛋白质 | 1.26％ |
| 乳酸菌 | 2.1×107cfu/ml |
| 酸度 | 70°T |
上述实施例中原料来源于：
牛奶：上海光明乳业股份有限公司第七、九牧场。
乳酸菌：法国罗地亚公司、丹麦汉森公司。
稳定剂：德固萨食品材料公司、丹尼斯克(中国)有限公司。
芦荟果粒：艾帝斯(大厂)食品配料有限公司、佳美(上海)食品股份有限公司。
效果实施例1 饮品效果检验结果
以实施例4的芦荟酸乳酪饮品为实验样品，与果料酸奶及酸乳酪饮品进行效果比较。其中感官评定由20名评价员完成，得分高者则效果好，评价高；免疫调节和延缓衰老效果由动物试验评价。具体结果见下表示：
| 指标 | 果料酸奶 | 酸乳酪饮品 | 本发明的芦荟酸乳酪饮品 | |
| 风味 | 36 | 30 | 54 | |
| 口感 | 40 | 20 | 60 | |
| 色泽 | 36 | 34 | 50 | |
| 酸甜比 | 30 | 40 | 50 | |
| 免疫调节 | 24 | 24 | 72 | |
| 延缓衰老 | 30 | 20 | 70 | |
| 总体评价(人次) | 优 | 6 | 4 | 16 |
| 良 | 8 | 8 | 2 | |
| 一般 | 6 | 8 | 2 | |
由以上数据显示，本发明的芦荟酸乳酪饮品比普通果料酸奶及酸乳酪饮品在风味和口感上有较大改进，免疫调节功能显著。
效果实施例2 饮品功能特性评价
本发明的芦荟酸乳酪饮品为带果粒的酸乳酪饮品，人体推荐剂量为每日250g/60Kg。以实施例3为实验样品，免疫调节和延缓衰老(抗氧化试验)设低、中、高三个剂量组，分为相当于人体推荐剂量的5、10、30倍，经口连续给予样品28天，果蝇生存试验设浓度为0.2％、0.7％、2％、6％的四个剂量组，试验结果表明：样品能明显增加小鼠NK细胞活性、巨噬细胞吞噬能力，提高细胞免疫和体液免疫水平；能明显降低老龄大鼠血中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)含量，增加血中超氧化歧化酶(SOD)活力；延长果蝇半数死亡时间和平均寿命。结论是该芦荟酸乳酪饮品具有免疫调节和延缓衰老的功能。
1.免疫调节作用
1.1动物来源：ICR种小白鼠，体重18～22克，雄性，清洁级动物。实验动物饲养室温度22±2℃，相对湿度50～70％，动物饲养料，由苏杭实验动物科技发展公司提供。
1.2剂量设计：本样品人体推荐剂量为每日250g/60Kg，本次试验设立低、中、高三个剂量组，分别为21、42、125g/Kg，空白对照组以蒸馏水灌胃，另设普通酸乳酪饮品对照组。
1.3样品处理：取样品4.2、8.4、25g(采用5倍浓缩液)分别加蒸馏水至40ml，即为低、中、高三个剂量组的供试液。
1.4给样途径：灌胃，灌胃容积为0.8ml/20g(剂量过大者一日内分多次灌胃)。
1.5实验方法和结果：
1.5.1血清溶血素试验：动物连续给样四周后，眼眶采血，颈椎脱臼处死，分离血清。在96孔微量血凝板上加25μl血清，以后各排作对倍稀释，每孔加1％SRBC 1滴，振荡后室温放置3小时，当血球对照出现沉落后观察结果，结果详见下表：
血清溶血素试验
| 组别 | 动物数(只) | 时间(天) | 抗体积数 |
| 空白对照 | 10 | 28 | 61±42.1 |
| 酸乳酪饮品对照 | 10 | 28 | 72±31.8 |
| 低剂量 | 10 | 28 | 68±49.4 |
| 中剂量 | 10 | 28 | 91±36.3 |
| 高剂量 | 10 | 28 | 104±32.2* |
*P＜0.05与酸乳酪饮品对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品高剂量组与酸乳酪饮品对照组相比，差异有统计学意义。
1.5.2抗体生成检测试验：动物连续给样四周后，将脱纤维绵羊红细胞免疫5天后，动物颈椎脱臼处死，取脾脏，制成脾细胞悬液，调整细胞浓度为5×106/ml。将表层培养基(1g琼脂加双蒸水100ml)加热溶解后，放入45℃水浴保温，与等量pH7.2～7.4、2倍浓度的Hanks液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加入50μl 10％SRBC，20μl脾细胞悬液，迅速混匀，倾倒于已刷琼脂薄层的6cm平皿上，放入二氧化碳培养箱中温育1.5小时，然后用SA缓冲液稀释的补体(1∶10)加入到平皿中，继续温育1.5小时后，计数溶血空斑数，结果用方差分析进行统计，结果见下表示：
| 组别 | 动物数(只) | 溶血空斑数(×103/全脾) |
| 空白对照 | 10 | 112.9±5.4 |
| 酸乳酪饮品对照 | 10 | 121.0±7.9 |
| 低剂量 | 10 | 119.1±9.8 |
| 中剂量 | 10 | 126.2±11.2 |
| 高剂量 | 10 | 132.3±17.0* |
*P＜0.05与酸乳酪饮品对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品高剂量组与酸乳酪饮品对照组相比，差异有统计学意义。
1.5.3小鼠碳廓清试验：小鼠尾静脉注射1∶3稀释的印度墨汁，待墨汁注入，立即计时。注入墨汁后2、10分钟，分别从眼静脉丛取血20μl，并将其加到2ml Na2CO3溶液作空白对照。根据动物体重、肝重和脾重计算吞噬指数，结果以方差分析进行统计，结果见下表示：
| 组别 | 动物数(只) | 吞噬指数 |
| 空白对照 | 10 | 6.48±1.32 |
| 酸乳酪饮品对照 | 10 | 7.93±0.82 |
| 低剂量 | 10 | 10.69±2.12 |
| 中剂量 | 10 | 12.49±1.45* |
| 高剂量 | 10 | 13.92±2.83* |
*P＜0.05与酸乳酪饮品对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品中、高剂量组与酸乳酪饮品对照组相比，差异均有统计学意义。
1.5.4NK细胞活性测定：动物连续给样四周后：颈椎脱臼处死，制成脾细胞悬液(效应细胞)，取传代后24小时YAC-1细胞加1640完全培养液，调整细胞浓度为1×105/ml(靶细胞)，取靶细胞和效应细胞各100μl(效靶比50∶1)，加入U型96孔培养板，靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μl，最大释放孔加靶细胞和1％NP40各100μl，上述各项均设三个复孔，于37℃、5％CO2培养箱中培养4小时，然后将96孔培养板以1500r/min离心5min，每孔吸取上清液100μl置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μl，反应3min，每孔加入1mol/l的HCL 30μl，用酶标仪在490nm处测定光密度值(OD)，结果详见下表：
NK细胞活性测定
| 组别 | 动物数(只) | 时间(天) | NK细胞活性 |
| 空白对照 | 10 | 28 | 39±2.9 |
| 酸乳酪饮品对照 | 10 | 28 | 42±2.9 |
| 低剂量 | 10 | 28 | 41±4.8 |
| 中剂量 | 10 | 28 | 44±4.2 |
| 高剂量 | 10 | 28 | 51±4.8* |
*P＜0.05与酸乳酪饮品对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品高剂量组与酸乳酪饮品对照组相比，差异有统计学意义。
1.6结论：小鼠经口连续给予本发明的芦荟酸乳酪饮品28天后，具有免疫调节作用。
2.延缓衰老作用
2.1抗氧化作用功能试验：
2.1.1剂量设计：本样品人体推荐剂量为每日250g/60Kg，本次试验设立低、中、高三个剂量组，分别为21、42、125g/Kg，分别相当于人体剂量的5倍、10倍和30倍。另设二老龄动物对照组，分别以蒸馏水和普通酸乳酪饮品灌胃。
2.1.2试验动物：SD大白鼠，20月龄，雄性。试验动物饲养室温度22±2℃，相对湿度50～70％，动物饲养料，由苏杭实验动物科技发展公司提供。
2.1.3样品处理：取样品42、84、250g(采用厂方提供5倍浓缩液)，分别加蒸馏水至400ml，使成均匀悬浊液，即为低、中、高三个剂量组的供试液。
2.1.4给样途径：灌胃，灌胃容积为4ml/100g(剂量过大者一日内分多次灌胃)。
2.1.5实验方法和结果：各剂量组给以样品，对照组以蒸馏水灌胃，连续30天，测定实验动物初始、中期、终期的体重以了解各样品对体重有无影响，结果见下表示：
样品对动物体重(克)的影响
| 组别 | 动物数(只) | 初始体重 | 中期体重 | 终期体重 |
| 空白对照 | 10 | 470±21 | 509±20 | 536±12 |
| 酸乳酪饮品对照 | 10 | 470±25 | 512±22 | 543±12 |
| 低剂量 | 10 | 476±27 | 527±22 | 555±17 |
| 中剂量 | 10 | 469±18 | 524±18 | 552±19 |
| 高剂量 | 10 | 465±21 | 505±18 | 543±16 |
由上表可见，样品各剂量组与酸乳酪饮品对照组相比，差异均无统计学意义。
第31天，5组动物摘眼球取血，离心，取血清。测定如下生化指标：血中过氧化脂质降解产品丙二醛(MDA)含量和血中超氧化物歧化酶(SOD)活力。试验结果用SAS软件进行统计，结果详见下二表示：
血中过氧化脂质降解产品丙二醛(MDA)含量
| 组别 | 动物数(只) | MDA含量(nmol/ml) |
| 空白对照 | 10 | 3.59±1.34 |
| 酸乳酪饮品对照 | 10 | 3.75±0.82 |
| 低剂量 | 10 | 2.58±0.82 |
| 中剂量 | 10 | 1.73±0.56* |
| 高剂量 | 10 | 1.85±0.61* |
*P＜0.05与酸乳酪饮品对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品中、高剂量组与酸乳酪饮品对照组相比，差异均有统计学意义。
血中超氧化物歧化酶(SOD)活力
| 组别 | 动物数(只) | SOD活力(u/ml) |
| 空白对照 | 10 | 91.5±11.5 |
| 酸乳酪饮品对照 | 10 | 97.5±21.5 |
| 低剂量 | 10 | 115.5±15.9 |
| 中剂量 | 10 | 140.8±21.3* |
| 高剂量 | 10 | 151.5±15.2* |
*P＜0.05与酸乳酪饮品对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品中、高剂量组与酸乳酪饮品对照组相比，差异均有统计学意义。
2.2果蝇生存试验
2.2.1样品处理：样品加入玉米粉培养基配成所需样品含量培养基供试。
2.2.2剂量设计：样品人体推荐剂量为每日250g/60Kg。本试验设四个剂量组，分别为含样品浓度0.2％、0.7％、2％和6％的培养基，每组用果蝇400只，雌雄各半。普通对照组给予普通玉米粉培养基。
2.2.3试验方法和结果：收集八小时那新羽化的果蝇成虫，***麻醉下区分雌雄随机分组，分别称重后进行试验。普通对照组给予普通玉米粉培养基，二周后，试验组分别给予含不同浓度样品的培养基。试验条件：气温25±1℃，相对湿度60～80％，每四天更换新鲜配制的培养基一次。每两天观察记录果蝇生存数和死亡数，直至全部果蝇死亡为止。计算出半数死亡时间平均寿命和平均最高寿命等三个指标，结果见下表示：
对果蝇生存试验的影响
| 样品浓度(％) | 样本数(只) | 平均体重(ug) | 半数死亡时间(天) | 平均寿命(天) | 平均最高寿命(天)A | |||||
| 雄 | 雌 | 雄 | 雌 | 雄 | 雌 | 雄 | 雌 | 雄 | 雌 | |
| 普通对照 | 200 | 200 | 562 | 594 | 48 | 58 | 48±18 | 57±14 | 76±3 | 77±3 |
| 0.2 | 200 | 200 | 559 | 610 | 50 | 56 | 47±20 | 56±12 | 78±3 | 75±2 |
| 0.7 | 200 | 200 | 566 | 602 | 58 | 60 | 53±18* | 57±16 | 76±2 | 77±1 |
| 2 | 200 | 200 | 563 | 603 | 60 | 58 | 53±19* | 55±17 | 78±2 | 79±2 |
| 6 | 200 | 200 | 555 | 599 | 56 | 56 | 52±18 | 55±15 | 77±3 | 77±3 |
A由寿命最长的20只果蝇计算得出。
*P＜0.05与对照组相比(经方差分析)
由上表可见，样品0.7％、2％和6％剂量组雄性果蝇半数死亡时间与对照组相比延长4天以上；0.7％和2％剂量组雄性果蝇的平均寿命与对照组相比均明显延长，差异均有统计学意义。
2.3结论：本发明的芦荟酸乳酪饮品具有延缓衰老作用。
Claims (10)
1、一种芦荟酸乳酪饮品，其特征在于该饮品的原料组分为重量百分比为36％-66％的牛奶、25％～40％的水、4.5％～13％的芦荟果粒、4％～10％的蔗糖、0.2％～1.0％的稳定剂，及按0.02～0.08活力单位/千克比例加入的乳酸菌。
2、根据权利要求1所述的芦荟酸乳酪饮品，其特征在于该稳定剂为果胶或变性淀粉的食品级乳化剂和增稠剂混合而成的粉末状物体。
3、根据权利要求1或2所述的芦荟酸乳酪饮品，其特征在于该饮品原料中还加入0％～0.1％的风味物质。
4、根据权利要求3所述的芦荟酸乳酪饮品，其特征在于该风味物质为食用香精或香料。
5、如权利要求1所述的芦荟酸乳酪饮品的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
①将蔗糖、水与稳定剂混合溶解；
②灭菌；
③冷却；
④将牛奶灭菌，冷却至30-50℃，加入乳酸菌发酵3-6小时，冷却至10-20℃，搅拌后再与上述混合物相混合；
⑤添加芦荟果肉；
⑥通过均质；
⑦冷却后即得到本发明的芦荟酸乳酪饮品。
6、根据权利要求5所述的方法，其特征在于混合溶解温度为45-80℃。
7、根据权利要求5所述的方法，其特征在于该灭菌条件为70-140℃，灭菌时间为3秒至30分钟。
8、根据权利要求5所述的方法，其特征在于该第一次冷却温度为20-60℃。
9、根据权利要求5所述的方法，其特征在于该均质条件为20-60℃，150-300千克/平方厘米。
10、根据权利要求5-9任一权利要求所述的方法，其特征在于在均质前添加风味物质。
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| CNA031166482A CN1466884A (zh) | 2003-04-25 | 2003-04-25 | 芦荟酸乳酪饮品及其制造方法 |
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| CN1466884A true CN1466884A (zh) | 2004-01-14 |
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| CN100459869C (zh) * | 2007-02-15 | 2009-02-11 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | 一种生产含有果肉颗粒的酸乳饮料的方法 |
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| CN101518286B (zh) * | 2008-02-25 | 2012-03-14 | 大叶大学 | 红酒晶球乳酪及其制造方法 |
| CN101066072B (zh) * | 2007-05-31 | 2012-03-21 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 一种含果胶颗粒的含乳饮料及其生产方法 |
| CN104489093A (zh) * | 2014-12-12 | 2015-04-08 | 重庆光大(集团)有限公司 | 芦荟乳酸饮料配方 |
-
2003
- 2003-04-25 CN CNA031166482A patent/CN1466884A/zh active Pending
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