CN1418077A - 预防性传播疾病传播的方法和器具 - Google Patents

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Abstract

本发明提供通过使用含有聚季铵、甘油、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯中的至少一种的组合物，防止HIV传播的方法、预防HIV传播的方法和降低HIV经***、直肠或口传播的危险的方法。另一方面，该组合物含有表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液中的至少一种。本发明进一步提供使用该组合物抑制性传播疾病传播的方法。同时还公开了消毒针和注射器的方法。此外，本发明提供这种方法所用的组合物与器具的组合。

Description

预防性传播疾病传播的方法和器具
相关申请
本申请要求2000年1月28日提交的美国专利申请09/494,201和2000年4月15日提交的美国专利申请09/548,38l的优先权，所有这些申请引入本文作参考，包括其任何数字、表格或附图。
技术领域
本发明涉及预防可以通过性接触传播的疾病的方法，更具体而言，涉及预防HIV传播的方法。本发明还涉及这种方法所用的组合物和器具的组合。
背景技术
开发预防HIV在个体间传播的简单、有效和低成本的方法，是控制HIV感染的重要策略。已经鉴定出HIV的新的更强毒株的最近进展，结合一些现行疗法效力不及过去的提议，更增加了开发防止因性接触而初次HIV感染的方法的需求。
除HIV之外，许多不同疾病是性传播的。其中常见的有***(性病湿疣)、淋病、梅毒、单纯疱疹、性病肉芽肿(granulomacenereum)、软下疳、***、非***性尿道炎、急性***病、***炎和***直肠病。
尽管已知数种预防这些疾病的方法，但是尚未开发出普遍令人满意的方法。理论上讲，预防传播的最佳方法是节欲，但这在事实上经常是不实际而且也是行不同的。其他方法包括***物理屏障以阻止个体间体液的直接接触。然而，此类方法常常很不方便，需要使用者无可奈何的同意。而且，屏障本身有时会失败，取消了任何潜在的预防益处。
更具针对性的预防方法包括破坏HIV本身，使得病毒不能侵入接受者的组织。这种方法包括向***施用生物活性物质，例如，已知Nonoxynol-9具有杀菌(即杀微生物)作用并且能够破坏HIV。然而，由于存在引起粘膜炎症的危险，所以经******栓剂、乳膏剂、泡沫剂等而使用Nonoxynol-9和其它杀***和杀菌剂受到阻碍。此外，这些试剂倾向于破坏***健康菌群并经常引发酵母菌感染。具体而言，已有报道，称使用Nonoxynol-9造成娼妓间HIV感染危险增加，Kreiss等，JAMA 268(4)：477-482(1992)，该文献引入本文作参考。
破坏***中HIV的其它方法包括使用例如含碘的抗菌剂(美国专利5,545,401)。然而，这种方法常常需要使用者警惕以确保不引起刺激。另一种方法使用含有生殖器润滑剂的锌盐，在该方法中，使用者将润滑剂涂到生殖器表面以产生抗病毒化学屏障(美国专利5,624,675)。然而，由于锌进入血流后可能产生不确定的作用，因而一些个体可能不选择这种方法。
已经观察到，HIV相对极少通过口腔分泌物传播。事实上，带病毒个体的唾液通常只含有表明病毒破裂的HIV非感染性成分。有报道称这是低渗裂解的结果，唾液通过低渗裂解杀死感染的单核白细胞并阻止它们附着到粘膜上皮细胞上和产生感染性HIV(Baron等，Arch.Intern.Med.159：303-310(1999))。尽管唾液可被用作预防***、******和***中HIV传播的方法，但是唾液的低渗性预防作用被相对更大量的等渗***所抵消。
因此，需要预防性传播疾病传播，以及阻止***中HIV感染的白细胞或游离形式的HIV传播的更小刺激性的物质。此外，需要这样的方法，在该方法中物质的预防性质相对于通常引入的***体积而言保持无损。最后，需要简单、便捷、既可***使用又可直肠使用的预防方法。本发明满足这些需求并提供相关的有益效果。
发明内容
本发明提供通过使疑含有HIV的体液与含有聚季铵(polyquaternium)、甘油和防腐剂***中的至少一种的组合物接触，从而防止HIV经***或直肠或口传播的方法。在本方法和下面列举的方法中，防腐剂***的实施方案包括对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯。
本发明还提供通过使疑含有HIV的体液与含有聚季铵、甘油和防腐剂***中的至少一种的组合物接触，从而预防HIV经***或直肠或口传播的方法。
本发明还提供通过使疑含有HIV的体液与含有聚季铵、甘油和防腐剂***中的至少一种的组合物接触，从而降低HIV经***或直肠或口传播的危险的方法。
本发明还提供通过将含有聚季铵、甘油和防腐剂***中的至少一种的组合物在体液沉积到***或直肠之前放入***、直肠、口腔、***套中或置于可以******或直肠中的其它屏障器具上，从而抑制由存在于体液中的因子(agent)引起的性传播疾病传播的方法。
另一方面，本发明提供通过放置含有至少一种选自表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂(anticellular agent)、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液的成分的组合物，抑制由存在于体液中的因子引起的性传播疾病传播的方法。在体液沉积到口腔之前，将该组合物放入口腔中。或者，在体液沉积到相应的腔之前，可以将组合物与***套或******的其它屏障器具组合。
本发明还有一方面，是防止由多人使用的针和注射器传播HIV的方法。含有活的无供体细胞的HIV和/或HIV感染的供体细胞的针和注射器是一个或多个使用注射器和针的人污染的结果。该方法包括在使用注射器和针之前，使无供体细胞的HIV和HIV感染的供体细胞与抑制供体细胞产生HIV或抑制无细胞的HIV的活力或感染力的组合物接触的步骤。该组合物含有至少一种选自表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液的成分。
附图简述
图1是非处方(over the counter)***制剂抑制***CEM淋巴细胞中VSV增殖的效力的图示。
图2表示非处方***制剂抑制人***CEM淋巴细胞中HIV增殖的效力。
图3显示非处方***制剂抑制感染的人CEM淋巴细胞产生HIV所需的时间。
图4显示非处方***制剂抑制无细胞的HIV增殖的效力。
图5显示非处方***制剂抑制***中无细胞的HIV增殖的效力。
图6显示非处方***制剂的成分的毒性和抑制效价。在浓度低于8％甘油、0.2％聚季铵32、0.2％对羟基苯甲酸甲酯和0.004％对羟基苯甲酸丙酯时，各成分无毒性和抑制活性。
图7显示表面活性剂、胆汁盐和灌洗液成分对L-细胞内VSV增殖的阻断。
图8显示表面活性剂、醋和***凝胶剂对L-细胞内VSV增殖的阻断。
图9显示去污剂对悬浮于***中和放置于直肠组织上的VSV感染的CEM淋巴细胞的灭活。
图10显示去污剂对***中CEM淋巴细胞内的病毒(VSV)增殖的阻断。
图11显示含有VSV感染的CEM淋巴细胞的注射器的净化。
图12显示去污剂对悬浮于***中和放置于直肠组织上的VSV感染的CEM淋巴细胞的灭活。
图13显示去污剂对L-细胞内病毒(VSV)增殖的阻断。
图14显示唾液和表面活性剂对L-细胞内病毒(VSV)增殖的阻断。
图15显示去污剂对L-细胞内病毒(VSV)增殖的阻断。
图16显示灌肠剂和漱口剂对L-细胞内病毒(VSV)增殖的阻断。
图17显示去污剂对L-细胞内病毒(VSV)增殖的阻断。
图18显示灌洗液对L-细胞内病毒(VSV)增殖的阻断。
图19显示去污剂和漱口剂对L-细胞内病毒(VSV)增殖的阻断。
图20显示去污剂和非处方***或口腔制剂抑制无细胞的HIV。
图21显示胆汁盐和唾液对HIV感染的CEM淋巴细胞的灭活。
图22显示使用1％熊去氧胆酸盐净化含有处于血中的无细胞的HIV的注射器。
图23显示无细胞的HIV被熊去氧胆酸盐而不被唾液灭活。
本申请是2000年1月28日提交的序号为09/494,201的美国申请的继续部分申请。图24显示使用1％熊去氧胆酸盐净化含有处于血中的无细胞的HIV的注射器。
图25显示胆汁酸和唾液对无细胞的HIV的灭活。
图26显示胆汁酸对无细胞的HIV的灭活。
具体实施方式
总的来说，本发明涉及防止HIV传播的方法、预防HIV传播的方法、降低HIV经***或直肠传播的危险的方法，以及抑制性传播疾病传播的方法。这些方法包括使用水溶液中含有至少一种下列成分的组合物：聚季铵、甘油和防腐剂***。另一方面，本发明的方法所用的组合物含有选自表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液的至少一种成分。
尽管广泛开展了提高公众知晓的活动，但HIV感染的发病率仍保持较高，尤其是在发展中国家。因此，为了防止HIV经***和直肠传播，需要容易使用、有效且低成本的物质。本发明的一种配方含有性润滑剂。因而，除了屏障器具如***套，或者必要时，与屏障器具如***套分开，使用性润滑剂的机会增多了。而且，本发明的组合物的生产相对便宜。
本文所用术语“屏障器具”是指起到物理性地避免一个个体的体液接触另一个体的作用的器具。此类器具的实例包括：***套、女用避孕套，还可以包括宫颈帽和海绵，以及宫颈内器具和***隔。本文所用术语“体液”是指由机体***或释放出的个体的液体或流出物。此类体液的实例包括：血液、唾液、泪液、***、***溢液、脓、粘液、尿液和粪便。此类体液可以接触不同个体，从而传播性传播疾病。体液可能含有游离形式的HIV或HIV感染的细胞。
感染的单核白细胞是供体-带病毒者***的主要感染性成分。而且，它们通常在接受者***中的等渗***中存活。然后，感染的单核白细胞穿过***上皮并把感染传给上皮下白细胞或者附着并感染CD4阴性上皮细胞(Milman等，AIDS Res.Hum.Retrov.10：1305-13 12(1994)，该文献如同本文引证的其它参考文献和专利一样，引入本文作参考)。据信，感染的HIV-白细胞或无细胞的HIV颗粒在穿透上皮组织前，可在***或直肠停留约一个半小时(Bomsel，M.NatureMedicine，1997，3：42-47)。因此，理想地，本发明的组合物应当优选在与供体体液接触半小时内放置，但是无论如何也得在一小时内放置。最优选，开始性接触之前，把组合物置入***或直肠或口腔中，或者甚至置于***上。本文所用术语“性接触”是指供体的体液沉积到接受者的一个或多个粘膜表面上或进入其中，也就是说从供体到接受者。
本发明的方法的组合物包括至少两种可商购的***润滑剂产品：AstroGlide(BioFilm，Vista，California)和Vagisil(Combe Inc.，White Plains，NY)。AstroGlide组合物也以Silken Secret、ViAmor和Target的品牌出售。
AstroGlide产品包括水、甘油、聚季铵#33、丙二醇、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯。Vagisil含有聚季铵#32。不受限制，包括在本发明的方法的组合物中的其它含有聚季铵的***润滑剂是Just Between Us个人润滑剂(Key West Aloe Co.)、CVS个人润滑剂(Sun Mar Laboratories)和Ultra Lube(Super Brands)，所有这些润滑剂均含有聚季铵#5。Enhance个人润滑剂(The XandriaCollection)含有聚季铵#7。也不受限制，包括在本文公开的方法的组合物中的含有非聚季铵的个人用润滑剂包括Replens***湿润剂、K-Y Liquid、K-Y长效***湿润剂、K-Y Silk-E***湿润剂、K-Y凝胶个人润滑剂、Summer′s Eve***湿润剂、Aqua Lube和Wet，Light个人润滑凝胶。
以前没有被人们认识到的本发明的新的方面是本文的组合物也防止或降低HIV传播的危险以及其它性传播疾病的传播。例如，由于单纯疱疹病毒的形态学和化学与HIV的形态学和化学相似，所以本发明的组合物可以用于防止或降低单纯疱疹病毒传播的可能性。应当理解，形态学或化学上类似于HIV的病毒因子是本发明的预防或防止传播的方法的主题。还应当理解，形态学和化学上相似病毒因子的选择是本领域技术人员的常规工作(Baron等，MedicalMicrobiology，4th ed.，Galveston TX，The University of Texas MedicalBranch at Galveston，(1996))。另外，本发明的方法对涉及细菌因子的性传播疾病有效。本文所用术语“因子”(agent)是指病毒、细菌或作为造成性传播疾病从一个个体向下一个个体传播的病原体的其它因素。例如，AIDS中的一种因子是HIV，而生殖器疱疹中的因子是HSV。
本文所用术语“有效量”是指本发明的方法中所用组合物产生预期效果的量或浓度。本发明中，有效量通常是抗HIV有效量，它可能包括例如，防止、降低或者是预防HIV性传播的组合物的量。然而，有效量可以指抗HSV或抗微生物的量。本领域技术人员理解，有效量的选择将取决于何种因子在考虑之中，还应当理解这种选择是常规的。具体而言，抗HIV有效量或浓度是本发明的组合物抑制HIV复制、生长和确立(elaboration)的量或浓度。例如，抗HIV组合物的有效量是约0.5ml或更多。优选的有效量是1ml，然而使用者可能会使用更多量。或者有效量可以是0.5ml至大于10ml。
本发明中有用的聚季铵浓度范围是0.1％～10％(重量)。或者，任何聚季铵可以以不刺激粘膜上皮的任何浓度使用。尽管也发现阴离子或非离子聚季铵可以用于本发明的方法的组合物，但是考虑用于本发明的聚季铵本质上是阳离子的。The International CosmeticIngredient Dictionary and Handbook(7th Edition(1997)，Vol.2，J.A.Wenninger和G.N.McEwen编著，publ.The Cosmetic，Toiletry和Fragrance Association，Wash.D.C.)公开了适用于本发明的方法的组合物的聚季铵(及其商业来源)，但不受其限制。
本发明中有用的甘油浓度范围是约5％～约60％(重量)。本发明中有用的防腐剂***的浓度范围的实例包括0.03％～0.3％(重量)对羟基苯甲酸甲酯和0.015％～0.15％(重量)对羟基苯甲酸丙酯。
本文所用术语“防腐剂***”是指起防止组合物中其它成分污染或降解的一种或一组化学试剂。例如，对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯用作本发明的防腐剂。适用于本发明的其它防腐剂的实例包括，但不限于下列得到FDA批准的用于食品、化妆品和食品制剂的防腐剂***：
                            食品防腐剂
山梨酸                                  噻苯达唑
山梨酸钠                                乳链菌肽
山梨酸钾                                那他霉素
山梨酸钙                                甲酸
苯甲酸                                  甲酸钠
苯甲酸钠                                甲酸钙
苯甲酸钾                                六亚甲基四胺
苯甲酸钙                                亚硝酸钾
4-羟基苯甲酸乙酯                        亚硝酸钠
钠盐                                    硝酸钠
对羟基苯甲酸丙酯                        硝酸钾
4-羟基苯甲酸丙酯                        醋酸
对羟基苯甲酸甲酯                        醋酸钾
4-羟基苯甲酸甲酯                        二乙酸钠
                                        醋酸钠
二氧化硫                                醋酸铵
亚硫酸钠                                乳酸
亚硫酸氢钠(Sodium bisulsulphite)        丙酸
偏亚硫酸氢钠                            丙酸钠
偏亚硫酸氢钾                            丙酸钙
亚硫酸钾                                丙酸钾
亚硫酸钙                                二氧化碳
亚硫酸氢钙
亚硫酸氢钾
联苯
2-羟基联苯
联苯-2-基氧化钠
                           化妆品防腐剂
维生素A                                 对羟基苯甲酸甲酯
维生素C                                 邻苯基苯酚
维生素E(生育酚)                         对羟基苯甲酸丙酯
葡萄柚籽提取物                          对羟基苯甲酸乙酯
安息香胶                                肉豆蔻酸异丙酯
碧箩芷(Pycnogenol)                 棕榈酸异丙酯
对羟基苯甲酸丁酯                   棕榈酸辛酯
双咪唑烷基脲(Diazolidinyl Urea)    乙二胺四乙酸(EDTA)
                                   三钠和四钠
咪唑烷基脲(Imidazolidinyl Urea)
                         药品防腐剂
无水氨                             过硫酸钾
过硫酸铵                           山梨酸钾
苯甲酸                             亚硫酸钾
苯甲酰氯                           羟基苯甲酸丙酯
羟基苯甲酸丁酯                     对羟基苯甲酸丙酯
对羟基苯甲酸丁酯                   丙二醇
抗坏血酸钙                         糖精
氟化钙                             水杨酸
乙醇                               醋酸钠
羟基苯甲酸乙酯                     抗坏血酸钠
对羟基苯甲酸乙酯                   苯甲酸钠
甲醛                               氟氢化钠
***                           亚硫酸氢钠
氟硅酸                             氯化钠
异丙醇                             铬酸钠
乳酸                               异抗坏血酸钠
马来酸                             氟化钠
马来酸酐                           硝酸钠
羟基苯甲酸甲酯                     氟硅酸钠
对羟基苯甲酸甲酯                   亚硫酸钠
松油                               山梨酸
苯甲酸钾                           氯化亚锡
氟氢化钾                           硬脂酸
焦亚硫酸钾                         二氧化硫
硝酸钾                             氯化锌
本文所用术语“预防”是指防止染上或传播性传播疾病或降低其危险。另外，该术语是指抑制例如通过性接触传播的HIV的生长或复制。
本发明的一种方法包括通过使疑含有HIV的体液与含有至少一种选自聚季铵、甘油和防腐剂***的成分的含水组合物接触，从而防止HIV经***或直肠传播。在代表性实施方案中，体液是***，而在某些情况下可以是***液。另外，该方法可以包括在开始性接触一小时内将有效量的组合物置于***上或***或直肠中。理想的是，在开始性接触之前放置该组合物。在一个实施方案中，该组合物的有效量是1ml。本发明的方便特征是该组合物可以用施用器来放置。本文所用术语“施用器”是指某种器具，例如，但不限于带有长颈、足以舒服地到达***或直肠内部并沉积有效量的组合物的灌洗器或注射器。或者，组合物可以首先与器具如栓剂、***套、海绵或其它屏障器具组合，然后再******或直肠或者适合的话覆盖在***上。本发明的方法中所用的优选的组合物包括AstroGlide、Vagisil或ViAmor。
本发明的其它方法包括通过使疑含有HIV的体液与含有至少一种选自聚季铵、甘油和防腐剂***的成分的组合物接触，从而预防HIV经***或直肠传播的方法。
另外，本发明提供通过使疑含有HIV的体液与含有至少一种选自聚季铵、甘油和防腐剂***的成分的组合物接触，从而降低HIV经***或直肠传播的危险的方法。
本发明提供通过在体液沉积到***或直肠中之前，将含有至少一种选自聚季铵、甘油和防腐剂***的成分的组合物置入***、直肠、***套、海绵或可以******或直肠中的一些其它屏障器具上，从而抑制由存在于体液中的因子引起的性传播疾病的传播的方法。在一个实施方案中，因子是HIV，在另一个实施方案中，体液是***或***液，而在另一实施方案中，防腐剂***是对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯。
如用下面实施例XXIII至XXIX所部分举例说明的，本发明的另一方面涉及防止HIV经***或直肠在缘于性接触而接受供体体液的接受者中传播的方法。本方法包括使供体体液例如***中HIV感染的细胞例如白细胞与有效量的抑制供体细胞产生HIV的组合物接触的步骤。在某些类型的性接触中，感染细胞的供体源可能是***液。所述组合物含有至少一种选自以下的成分：表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液。优选的组合物配方具有足以滞留在***或直肠中的粘性并且可以与***混溶。此类配方的非限制性实例是润滑剂、凝胶、乳膏剂、子宫托、塞、糊剂、泡沫剂或喷雾剂，特别是***或直肠润滑剂、凝胶或乳膏剂。应当理解，将组合物放置到***、直肠或口中的方法包括组合物的局部施用。将组合物配方成具有足够粘性的组合物的方法是本领域技术人员众所周知的。将本方法的组合物与润滑剂、凝胶或乳膏组合在一起是制剂领域普通技术人员的常规操作，所述润滑剂、凝胶或乳膏是，但不限于选自商品润滑剂、凝胶或乳油。非限制性实例包括Astroglide牌产品、Vagisil牌产品、KY牌产品、Walgreen牌产品和Replens牌产品。
应当理解，组合物的成分可以归类为下组中的一种或多种：表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液。例如，许多抗肿瘤(抗癌)化合物可以归类为抗细胞剂和抑制剂。抗生素可以归类为杀微生物剂、抗细胞剂或抑制剂。
除了本文所列的实验发现外，使用本文公开的测定方法，无需繁琐的实验，本领域技术人员可以区分杀死或灭活供体细胞的成分及其组合物和不杀死或灭活供体细胞的成分及其组合物，可以选择配方本发明的方法中所用组合物的成分。使用本文的测定方法，可以容易地确定或测定杀死组织培养物或灭活HIV感染的供体细胞所需的剂量。细胞死亡或灭活是明确的终点。例如，死亡或灭活的供体细胞不能产生病毒。因此，在该测定中发现有效的任何成分或其组合物将防止病毒在供体细胞中增殖。
本发明的方法的组合物中使用的表面活性剂选自去污剂、润湿剂和乳化剂中的一种或多种。应当理解，表面活性剂包括溶在水或水溶液中时降低表面张力，或降低两液体间或液体与固体间界面张力的任何化合物。表面活性剂在医学、生物学和生物化学中的性质和用途的指南是本领域技术人员能够得到的(例如，A Guide to theProperties and Uses of detergent in biology and biochemistry，Calbiochem Biochemicals，San Diego，CA)。对使用和选择表面活性剂的指导的其它实例是The bile acids，Chemistry，Physiology，andMetabolism(1971)，Padmanabhan Nair和David Kritchevsky编著(Plenum Press，NY)。使用本文公开的测定方法，无需繁琐的实验，本领域技术人员可以区分杀死或灭活供体细胞的表面活性剂和不杀死或灭活供体细胞的表面活性剂。
包括杀***剂的杀微生物剂理解为是指杀死或灭活细胞(原核或真核)和/或病毒的天然或合成化合物。本发明的方法中有用的杀微生物剂是杀死或灭活***中的或来自***的供体细胞，从而抑制供体细胞产生HIV的杀微生物剂。使用本文公开的测定方法，无需繁琐的实验，本领域技术人员可以区分杀死或灭活供体细胞的杀微生物剂和不杀死或灭活供体细胞的杀微生物剂。用于本发明的杀微生物剂可以为选自下列中的一种或多种：抗真菌药、抗感染药、AIDS化疗药、杀阿米巴药、抗蠕虫药、抗生素、抗疟药、抗原生动物药、抗结核药、抗病毒药、制麻风菌药、喹诺酮类、磺胺类和抗肿瘤药(抗癌药)(参见Physicians′Desk Reference.53rd ed.(1999)，MedicalEconomics Company))。杀微生物剂进一步包括可商购的消毒剂及其成分。
术语“抗细胞剂”是指本发明的方法所用的广义类的有效杀死或灭活细胞(原核或真核)和/或病毒的天然或合成物质。在本发明的方法中有用的抗细胞剂是杀死或灭活***中或来自***的供体细胞，从而抑制供体细胞产生HIV的抗细胞剂。使用本文公开的测定方法，无需繁琐的实验，本领域技术人员可以区分杀死或灭活供体细胞的抗细胞剂和不杀死或灭活供体细胞的抗细胞剂。本文所用术语“灭活”是指抑制供体感染细胞的HIV产生。本发明的方法所用的抗细胞剂包括但不限于抗肿瘤(抗癌)药、肽(非限制性实例包括细胞因子、趋化因子、防卫素和肿瘤坏死因子)、细胞凋亡剂、酶(非限制性实例包括脂肪酶、蛋白酶、糖酶、脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶)、靶向于供体细胞的抗体(优选抗体和与毒性物质缀合的)和杀***剂。
抑制剂是杀死或灭活HIV感染的供体细胞的各类化合物。本发明的方法所用的组合物所选择的抑制剂化合物组是DNA合成抑制剂、RNA合成抑制剂、蛋白质合成抑制剂、代谢抑制剂和代谢拮抗物，包括各种线粒体抑制剂和各种呼吸链抑制剂，以及抗生素(参见Inhibitor Tools in Cell Research，(1969)Th.Bucher和H.Sies，Springer-Verlag编著，NY))。
本发明的方法所用的酸试剂选自无机酸试剂，例如但不限于盐酸、硝酸和硫酸；以及有机酸，包括但不限于防腐剂酸(例如苯甲酸、柠檬酸、山梨酸和醋酸(醋)和酸性氨基酸，后者包括甘氨酸。已经证明，产病毒的细胞随pH降低而丧失其感染能力(Ongradi，J.等，AIDS Res.Hum Retroviruses(1990)6(12)：1433-1436)。
本发明的方法所用的碱试剂包括无机碱试剂，例如但不限于氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化钙；以及有机碱试剂。
本发明的方法所用的氧化剂包括但不限于过氧化氢、高碘酸盐、超氧化物、氧化氮和二硫化谷胱甘肽。
本发明的方法所用的有机溶剂选自醇、醚、酯、脂肪酸及其衍生物(饱和或不饱和的)、甘油二酯、甘油三酯、脂质，后者包括磷脂、糖脂、鞘脂、生色脂(chromophoric lipid)。本发明的方法的组合物中所用的有机溶剂的实例可以商购得到，例如，从Burdick&Jackson Laboratories，Inc。小分子有机溶剂包括丙二醇和氯仿。
本发明的方法所用的低渗溶液包括水或具有低溶质含量的溶液，溶质例如盐或糖或任何生理相容的溶质。
使用本文公开的测定方法，无需繁琐的实验，本领域技术人员可以区分杀死或灭活供体细胞的酸试剂、碱试剂、氧化剂、有机溶剂和低渗溶液以及不杀死或灭活供体细胞的那些。
如上所述，在开始性接触之前或之后，优选开始性接触一小时内，将包含在至少0.5ml体积中的有效量的组合物放置在接受者的***或直肠或口内或者供体的***上。可以使用施用器将组合物放置在接受者的***或直肠或口内。
本方法的实施方案包括组合物与器具组合使用，后者可以是栓剂、***套、海绵或其它屏障器具。
如下面的实施例所示，在本方法中使用的组合物包括但不限于商品皂、灌肠剂、漱口剂和灌洗液。这些商品的非限制性实例包括Jergens皂和Ivory皂去污剂、Walgreen或KY的***凝胶、Walgreen和Listerine的漱口剂、Summer′s Eve或Massengil或Walgreen的灌洗液。
抗HIV作用的组合物含有至少一种选自下列的成分：表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液，它们既胞外灭活病毒又杀死或灭活病毒寄居的供体细胞。
下列实施例旨在举例说明本发明，而不限制本发明。实施例I试剂的制备A.样品
从正常男子收集***。使用前，将样品在4℃贮存1～2天或者在-20℃贮存三个月。所有采集的样品都遵循University of TexasInstitutional Review Board Approval Guidelines，包括知情同意。B.病毒
用Baron等，Arch.Intern.Med.159(3)：303-310(1999)和Williams等，Virology 184(2)：723-728(1991)描述的标准过程，将213、AC0-1和9H HIV菌株原种在人H9淋巴细胞中繁殖，这两篇文献引入本文作参考。将等分试样于-70℃冷冻贮存。用Coppenhaver等，New Eng.J.Med.330(18)：1314-1315(1994)描述的方法，将疱疹性口腔炎病毒(VSV)的印地安那菌株在鼠L细胞中繁殖，该文献引入本文作参考。于-70℃冷冻贮存VSV原种。C.细胞
按照Baron等，Arch.Intern.Med.(出处同上)所述，准备人外周血单核白细胞(PBL或PBML)和人淋巴细胞系，CEM，并在含有10％胎牛血清和抗生素的RPMI 1640培养基中繁殖。通过Ficoll Hypaque纯化正常外周血白细胞，得到人外周血巨噬细胞。为了得到巨噬细胞，在37℃下使纯化的PBL粘附于玻璃表面三小时。用培养基冲洗掉未附着的单核白细胞，试验中所用的粘附的巨噬细胞涉及在唾液存在下的细胞活力。用Baron等，Arch.Intern.Med.(出处同上)报道的已建立的方法，繁殖人CEM淋巴细胞和THP-1巨噬细胞。实施例II病毒增殖
在病毒感染的人CEM淋巴细胞、THP-1巨噬细胞、外周血单核白细胞或L929细胞中，测定各种治疗对于病毒增殖的影响。以感染性HIV从2×l06个Ficoll-Hypaque纯化的正常外周血单核细胞的收率测定HIV在PBL中的增殖，所述外周血单核细胞先与phytopemagglutinin(4μg/ml)一起培养2天，然后用白介素2(40单位/ml)再处理2天，接着用105，50％组织培养物感染剂量的HIV，菌株213进行感染。然后，感染的细胞与20u/ml白介素2一起培养5天，洗涤四次，继之与或不与样品、样品的不同混合物或者培养基一起培养15或60分钟。随后，洗涤这些白细胞，并在RPMI 1640组织培养基中培养以使HIV产生，在收获无细胞的培养基以便按照实施例III所述测定HIV的收率之前24小时添加15％胎牛血清和20u/ml白介素2。在McKeating等，J.Gen.Virol.80(12)：3327-3333(1989)中所述使用人CEM淋巴细胞系的试验中，以感染性HIV从用105，50％组织培养物感染剂量的HIV菌株感染的6×105CEM淋巴细胞的收率测定增殖，该文献引入本文作参考。然后，培养细胞四天，在用不同制剂处理之前15～60分钟，洗涤四次。随后洗涤这些感染的淋巴细胞四次，在收获以便按照实施例III所述测定HIV的产生之前培养24小时。对于需要无污染工具进行更复杂操作的试验，使用更为安全的病毒代用品-疱疹性口腔炎病毒(VSV)代替HIV。先前已经使用过其它代用病毒，见Baron等，Arch.Intern.Med.(出处同上)中的描述。类似地，以感染性病毒从CEM淋巴细胞、THP-1巨噬细胞或鼠L细胞在培养基中的收率测定VSV增殖。在用3000个病毒噬斑形成单位感染后，进行测定。最初用VSV感染的人CEM淋巴细胞、THP-1巨噬细胞或鼠L细胞进行预实验。用HIV感染的CEM淋巴细胞和外周血单核白细胞进行确证性试验。所有试验平行测定三次。实施例IIIHIV和VSV产生的测定
按照McKeating等(出处同上)所述，在试验中使用MT-2人淋巴细胞通过标准组织培养物感染剂量50％测定，测定HIV产生。具体地说，用含有10％胎牛血清的RPMI培养基将从HIV感染的人细胞收获的培养液以0.5log10增量连续稀释。将50μl各稀释液加入到一式四份的微量滴定孔中，每孔含100μl在培养基中的2×104MT-2细胞。连续稀释后，向各孔加入120μl营养培养基。然后在37℃下在CO2培养箱中温育这些微量滴定板三天，接着再添加含有10％胎牛血清的培养基。在第5天或第6天，读取各孔HIV多核巨细胞致细胞病变效应。使用Reed等，Am.J.Hyg 27：493-497(1938)所描述的Reed-Muench方法，测定50％组织培养物感染剂量，该文献引入本文作参考。以L细胞中噬斑形成单位测定VSV产生。
除了基本描述统计如斯氏T检验之外，对于多重试验使用无调整的统计学方法如回归分析和非参数方法。在过去，在每种情形下，观察到的相关趋向和差异很大，而所有相关显著性水平(P值)很小，即使是使用小样本也如此。实施例IV***制剂抑制***中的VSV
本实施例提供非处方***制剂可以抑制疱疹性口腔炎病毒(VSV)在***中增殖的证据。如图1所示，检测了各种商购***制剂抑制VSV增殖的效力，所述商购***制剂包括AstroGlide和Vagisil，以及Nonoxynol-9。举例来说，将VSV感染的CEM淋巴细胞暴露于AstroGlide中，记录增殖的log10抑制。该试验中之所以选用VSV，是因为它与HIV具有类似的结构性质，但在试验室操作中更为安全和实用。无论是将AstroGlide与细胞混合，还是将AstroGlide仅层加，均观察到大于10000倍的抑制。Nonoxynol-9显示出几乎同等程度的抑制。只有Vagisil在与细胞混合时表现为稍微较小的抑制。尽管Nonoxynol-9显示强的抑制性质，但它在体内的应用是不切实际的，这是由于它引起粘膜炎症的倾向性，这种倾向性可能是它在人临床试验中无效的原因。
这些结果证明，本发明的方法的组合物包括但不限于AstroGlide和Vagisil，可以穿透***足以到达病毒感染的细胞并可以杀死那些细胞，从而预防病毒增殖和产生。实施例V***制剂抑制***中的HIV
观察到上述***制剂强烈抑制VSV在***中的增殖后，在类似条件下使用HIV进行了试验。
如图2所示，AstroGlide和Vagisil强烈抑制HIV感染的CEM淋巴细胞在***中的增殖。例如，当制剂与***混合时，各制剂显示大于1000倍的抑制。如预期的那样，当层加制剂时，它们产生大于30倍的抑制。有趣的是，无论是混合还是层加，Nonoxynol-9均产生大于1000倍的抑制。
这些结果证实，本发明的方法的组合物，包括但不限于AstroGlideg和Vagisil，对于抑制HIV感染的CEM淋巴细胞在***中的增殖极为有效。实施例VI***制剂抑制HIV的时间研究
本实施例确定本发明的方法的组合物，尤其是***制剂抑制感染的CEM淋巴细胞产生HIV所需的时间。
如图3所示，***制剂在5分钟内起效，温育20分钟内，它们产生大于100倍的最高抑制水平。该抑制水平保持稳定至少60分钟。如前文所述，业已证明，假定周边上皮组织无损伤的情况下，HIV感染的淋巴细胞和无细胞形式的HIV在病毒进入接受者的上皮组织之前，可在***或直肠内的***中留滞长达一小时。因此，这些结果表明，性接触后及时在***或直肠放置本发明的组合物，将在HIV以此方式传播之前将之破坏。实施例VII***制剂抑制无细胞的HIV
本实施例说明本发明的方法的组合物抑制无细胞的HIV的能力。科学文献一般报道称，在***中，发现大多数HIV隐匿于细胞，比例是10个隐匿HIV比1个游离HIV。因此，也研究了***制剂抑制无细胞的HIV的能力。
如图4所示，***制剂AstroGlide和Vagisil对无细胞的HIV产生显著的抑制。例如，对HIV，Vagisil产生约45倍的抑制，ViAmor产生约15倍的抑制，Astroglide产生约45倍的抑制。
因此，这些结果证明，本发明的方法的组合物，包括但不限于非处方***制剂Astroglide(ViAmor)和Vagisil，对于抑制无细胞的HIV也极为有效。实施例VIII***制剂抑制***中无细胞的HIV
本实施例为测定本发明的方法的组合物是否也抑制***中无细胞的HIV而进行。
如图5所示，各***制剂均有效抑制***中无细胞的HIV。例如，观察到Vagisil和AstroGlide每一种制剂均有约6倍的抑制。因而，这些结果证明，***制剂能够穿透多少有些保护性的***，并强烈抑制无细胞的HIV。实施例IX***制剂成分的毒性和抑制效价成分
本实施例研究***制剂的各种成分的毒性和抑制效价。
把图6所示成分的溶液稀释，并评价稀释溶液的抑制和毒性特征。在8％的浓度下，甘油不能有效杀死L-929细胞，但对VSV产生大于10倍的抑制。聚季铵32在0.2％的浓度下产生大于10倍的杀死L-929细胞和大于100倍的抑制VSV的作用。丙二醇(PropyleneG)几乎不产生抑制或杀死作用。对羟基苯甲酸甲酯仅在0.2％的浓度下产生大于300倍的L-929细胞效价，但产生约30倍的VSV抑制。对羟基苯甲酸丙酯在0.004％时产生约15倍的L-929毒性效价和约55倍的VSV抑制。
因此，甘油、聚季铵、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯各自独立地有效抑制VSV，很可能也抑制HIV。进一步的研究将确定对于HIV是否具有类似的作用，以及所述抑制是累加性的还是协同性的。
本实施例证明，AstroGlide的保护作用不是低渗性所致，而是一种或多种包括Astroglide的化合物灭活感染的白细胞所致。因此，AstroGlide的低渗因素不是抑制HIV感染的白细胞的原因。所以，AstroGlide含有不依赖于低渗性的保护性化合物，并且它不是缺少盐而是一种或多种化合物，这解释了本发明的方法中有用的组合物对HIV的灭活。将用该组合物进一步研究对HIV感染的白细胞的作用。在进一步的研究中，加入盐以制造等渗条件，以进一步证明AstroGlidet和本发明的方法的组合物即使是存在于或溶解于等渗环境中时，仍保持高度的保护性质。实施例X在HIV多株中的抑制作用
本实施例证明本发明的方法的化合物强烈抑制HIV多株。另外三种HIV分离株，213、AC-1和9H，用于感染悬浮于***中的人CEM淋巴细胞。使用Baron等，Arch.Intern.Med.(出处同上)和Williams等，Virology 184(2)：723-728(1991)所述的标准操作过程，将HIV213、Ac-1和9H株的原种在人H9淋巴细胞中繁殖，这两篇文献引入本文作参考)。准备两组感染的细胞，一组用例如，AstroGlide处理，另一组不予处理。测定显示，AstroGlide强烈抑制三种HIV株的增殖。未经处理的细胞保持活力。结果证实保护作用的普遍适用性。在本发明的方法化合物中，AstroGlide提供抗HIV多株的作用，该作用适用于人HIV感染。实施例XI用HIV感染的单核细胞进行研究
由于HIV感染人***中的单核细胞以及淋巴细胞，因此进行下面的试验以确定本发明的方法的化合物，包括AstroGlide是否可以对HIV感染的单核细胞和淋巴细胞提供防护。THP-1单核细胞悬浮于***。准备两组细胞，一组用AstroGIide处理，另一组不予处理。结果显示，AstroGlide强烈抑制HIV感染的单核细胞。因此，该发现证明AstroGlide能够对***中HIV感染的所有类型的白细胞提供防护。实施例XII用初级细胞进行研究
本实施例为证明本发明的方法的化合物，包括AstroGlide，是否能够对HIV感染的初级外周血白细胞提供防护。人***正常含有初级外周血白细胞而不是前面研究中所用的细胞系。根据本领域技术人员熟知的已建立的方案，从人血中纯化正常人外周血单核白细胞。接着，将它们悬浮于***中，用HIV感染，之后，用AstroGlide处理或不予处理。结果证明，AstroGlide在抑制HIV感染的初级外周血白细胞方面高度有效。因此，这些发现适用于人的治疗。实施例XIII灭活无细胞的HIV株
本实施例使用本文公开的测定方法确定本发明的方法的化合物，包括AstroGlide，是否灭活四种无细胞的HIV株。将四种无细胞的HIV株悬浮于***，并用AstroGlide处理或不予处理。结果证明，在没有***存在下，AstroGlide灭活大于所有无细胞的HIV菌株的90％，在***存在下，则灭活80％。因此，AstroGlide对无细胞的HIV和HIV感染的细胞均提供防护。实施例XIV抑制性传播因子
本实施例为确定本发明的方法的化合物，包括AstroGlide，是否对HIV之外的性传播因子提供防护。例如疱疹的因子是单纯疱疹病毒(HSV)。为了检测对HSV的抑制，将Astroglide加入游离HSV中。37℃下温育一小时后，在Vero细胞上测定存活的感染性HSV。结果证明，AstroGlide也强烈抑制HSV。因此，它们抑制疱疹传播从而提供保护。
通过研究***瘤病毒家族，乳多空病毒，也检测了本发明的方法的组合物，包括AstroGlide，抑制***瘤病毒的能力。在悬浮于***中的感染的细胞和无细胞的病毒中研究了对生殖器乳多空病毒株的防护。将AstroGlide加入培养基中。根据本文前述的步骤对细胞进行测定。结果证明，AstroGlide强烈抑制生殖器乳多空病毒株。因此，它们提供对生殖器疣传播的防护。
另外，检测了AstroGlide和其它组合物抑制其它性传播微生物如淋病、梅毒、依原体和真菌病的能力。为了确定对这些微生物的防护，按照本领域技术人员熟知的操作，在营养培养基中培养每一种微生物。用不同***浓度的AstroGlide处理培养物或不予处理，所有浓度均可以由本领域技术人员决定，并且还在Baron等，Medical Microbioloey，4th ed.，Galveston TX，The University of TexasMedical Branch at Galveston，(1996)中描述，该文献引入本文作参考。结果证明，如抗微生物效价所指明的那样，AstroGlide对于破坏这些微生物极为有效。另外，它们提供保护作用。实施例XV持久性研究
本实施例证明本发明的方法的组合物，包括AstroGlide在***和直肠中的抗HIV活性的持续时间。
用AstroGlide处理五只兔的***，于四小时时采样。另外，用AstroGlide处理五只兔的直肠，于四小时时采样。这些兔在试验前12小时开始仅饮水。回收的样品用于检测抗HIV活性，与原始制剂进行比较。结果证明，即使是在四小时后，AstroGlide仍保持高度抗HIV活性。因此，AstroGlide在实践中是有用的。实施例XVI人研究
本实施例证明，AstroGlide和本发明的方法的组合物对人HIV提供防护。而且，还研究了保护的持续时间。
以下按照标准人受试者方案(human subject protocol)进行，并得到制度审查委员会(Institutional Review Board)的批准。给妇女提供AstroGlide原液，随后将原液放入***。四小时后，取等份试样并检测抗HIV活性。另外，将AstroGlide置入禁食的男子或女子的直肠。四小时时取样并以类似方式检测。结果证明，AstroGlide在体内四小时后仍保持高度抗HIV活性。因此，AstroGlide适宜应用于人。实施例XVII准备病毒和细胞a.病毒
使用Baron等，Arch.Intern.Med.159(3)：303-310(1999)和Williams等，Virology 184(2)：723-728(1991)所描述的标准过程，在人H9淋巴细胞中繁殖HIV 213株原种，这两篇文献引入本文作参考。等份试样于-70℃冷冻贮存。使用Coppenhaver等，New Eng.J.Med.330(18)：1314-1315(1994)中的方法，在鼠L细胞中繁殖疱疹性口腔炎病毒(VSV)的印地安那株，该文献引入本文作参考。VSV原种于-70℃冷冻贮存。b.细胞
按照Baron等，Arch.Intern.Med.(出处同上)所述，在含有10％胎牛血清和抗生素的RPMI 1640培养基中准备并繁殖人淋巴细胞系，CEM。按照Baron等，Arch.Intern.Med.(出处同上)和Baron等，J.Infect.Dis.181：498-504(2000)中报道的已建立的操作，繁殖人CEM淋巴细胞和THP-1巨噬细胞。实施例XVIII病毒增殖
在病毒感染的人CEM淋巴细胞或L929细胞中检测各种处理对病毒增殖的作用。在使用人CEM淋巴细胞系的试验中，使用McKeating等，J.Gen.Virol.80(12)：3327-3333(1989)所描述的操作，该文献引入本文作参考。以感染性VSV从用105，50％组织培养物感染剂量的VSV感染并悬浮或不悬浮于***中的2×105CEM淋巴细胞的收率测定增殖。然后，温育细胞60分钟，洗涤四次，然后用不同制剂处理30～60分钟。随后，洗涤这些感染的淋巴细胞四次并培养24小时，然后收获以便按照实施例III所述测定VSV产生。
在McKeating等，J.Gen.Virol.70：3327-33(1989)中所述使用人CEM淋巴细胞系的试验中，以感染性HIV从用105TCID50 HIV株213感染的6×105CEM淋巴细胞的收率测定增殖。然后，温育细胞4天，洗涤4次，并用不同制剂处理15-60分钟。洗涤这些感染的淋巴细胞4次并培养24小时，然后收获以便按下面所述测定HIV产生。实施例XIXHIV和VSV产生分析
在本试验中，通过McKeating等，J.Gen.Virol.70：3327-3333(1989)中所述的使用MT-2人淋巴细胞的标准TCID50测定来测定HIV的产生。具体而言，如Baron等，Arch.Intern.Med.159(3)：303-310(1999)所述，将从HIV感染的人CEM淋巴细胞收获的培养液以0.5-log10的增量连续稀释在含有10％胎牛血清的RPMI培养基中。接下来，将50ml各稀释液加入一式四份的微量滴定孔中，每孔含有在培养基中的110ml 2×104个MT-2细胞。连续稀释后，向每孔加入120ml营养培养基。在37℃下在CO2培养箱中温育这些微量滴定板3天，然后再加入含10％胎牛血清的培养基。在第5或第6天，读取各孔HIV多核巨细胞致细胞病变效应。通过Reed等Am.J.Hyg.27：493-7(1938)中所述Reed和Muench的方法，测定HIV的TCID50，并如Baron等，Arch.Intern.Med.159(3)：303-310(1999)所述，以L细胞中的pfu测定VSV产生。VSV抑制活性的滴定
在96孔微量滴定板中生长并事先用VSV的103噬斑形成单位感染2小时的鼠L细胞中进行各物质的连续两倍稀释。使物质与感染的细胞一起温育l小时，然后，洗涤三次并重新添加营养培养基。温育细胞24小时以使病毒增殖。独立收获培养液，并如所述滴定病毒噬斑收率。病毒收率以每50ml pfu计。细胞毒性测定
在确定物质对L细胞的抗细胞活性的研究中，用显微镜测定各物质的各稀释液的致细胞病变效应。按照Reed等，Am.J.Hyg.27：493-7(1938)中所述的Reed Muench方法计算出50％组织培养物致细胞病变剂量。统计
除了基本描述统计例如斯氏T检验外，对多重检验也使用非校正的统计方法如回归分析和非参数检验方法。在过去，每种情形下，观察到的相关趋势和差异很大，而所有相关显著性水平(P值)却很小，即使是使用小样本时也如此。实施例XX用OTC制剂或其成分抑制VSV
本实施例提供非处方***制剂和/或其成分能够抑制***中疱疹性口腔炎病毒(VSV)增殖的证据。如附图所示，检测了商购***制剂或其成分的抑制VSV增殖的效力。例如，将VSV感染的CEM淋巴细胞暴露于制剂和/或其成分，记录增殖的log10抑制。本试验之所以选用VSV，是因为它与HIV具有类似的结构特征，但在实验室操作中更安全和实用。实施例XXI注射器的净化
用注射器抽吸加有无细胞的VSV(105感染性单位/0.1ml)的0.1正常血液，或为了对比，抽吸加有感染的CEM细胞(105细胞/0.1ml)的0.1正常血液，从而使药物注射常用大小的注射器(3ml 1.5英寸22号针)受到污染。为了评估灭活VSV或HIV所需的本方法所用的组合物的体积，使组合物与无细胞的HIV或VSV感染的细胞接触。用总体积为3ml的组合物溶液清洗注射器。用营养培养基清洗对照。然后，从注射器收集残余的病毒或细胞至1ml培养基中，按所述方法测定感染性病毒。实施例XXII抑制无细胞的HIV
为了确定无细胞的HIV是否被该制剂抑制，我们将200ml1.6×104TCID50无细胞的HIV层加到200μl***或培养基上，并温育1小时，然后用前述方法滴定残余的无细胞的HIV。试验发现
图7显示VSV在L-细胞中的增殖被表面活性剂(胆汁盐)和被灌洗液成分所阻断。例如，试验证明，稀释达3倍的苯甲酸(0.3％)具有5log抑制效价，而从3倍到约15倍稀释，显示0.5log抑制效价。超过15倍稀释，对VSV在L-细胞中的增殖不再具有抑制作用。
图8显示，VSV在L-细胞中的增殖被表面活性剂胆汁盐、皂液、***凝胶、有机溶剂、酸和与磷酸三丁酯组合的表面活性剂TritonX100阻断。
图9、10、12、13、14、15和17表明，悬浮于***中的VSV感染的CEM淋巴细胞被胆汁盐和Tritonx100去污剂灭活。
图16显示，VSV在L-细胞中的增殖被灌肠剂和漱口剂和图11中的灌洗液阻断。
图19表明，去污剂和漱口剂阻断VSV在L-细胞中的增殖。
图20表明，非处方***制剂(灌洗液)或口腔制剂(漱口剂)抑制无细胞的HIV。
图21显示，胆汁盐和唾液灭活HIV感染的CEM淋巴细胞，而图19显示它们对无细胞的HIV的抑制作用。图20显示胆汁酸灭活无细胞的HIV。
图23显示，熊去氧胆酸盐灭活无细胞的HIV，而唾液不能。
图11、22和24显示，使用熊去氧胆酸盐、胆酸(colic acid)、脱氧胆酸盐、Triton X 100、磷酸三丁酯、Triton X 100和磷酸三丁酯的组合以及自来水净化(即抑制VSV产生或抑制无细胞的HIV)含有无细胞的HIV或VSV感染的细胞的注射器。这一发现表明，本发明的方法防止或抑制HIV通过游离HIV或VSV感染的细胞污染的针和注射器传播，而且该方法通过使用相对于漂白溶液而言给使用者带来更小危险的组合物来消毒针和注射器是有效的，所述漂白溶液常用于针和注射器的消毒或净化，但如果不注意地注射给使用者则会引起严重损害健康的危险。
其它实施例包括本发明请求保护的方法的研究，所述方法使用含有至少一种选自表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液的成分的组合物。与上述实施例X到XVI类似，这些研究包括实施例XXIII到XXIX，它们集中在本发明的方法上，所述方法使用含有至少一种选自表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液的成分的组合物或候选组合物。实施例XXIII在HIV多株的抑制活性
本实施例证明，本发明的方法的化合物强烈抑制HIV多株。将三种另外的HIV分离株，213、AC-1和III-B用于感染悬浮在***中的人CEM淋巴细胞。使用Baron等，Arch.Intern.Med.(出处同上)和Williams等，Virology 184(2)：723-728(1991)中所述的标准操作，使HIV的213、Ac-1和9H株的原种在人H9淋巴细胞中繁殖，这两篇文献引入本文作参考。准备两组感染的细胞，一组用含有至少一种选自表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液的成分的组合物处理。另一组作为对照。据测定，组合物强烈抑制与细胞缔合的(即供体细胞)三种HIV株的增殖。未经处理的细胞则保持活力。结果证实，本发明的方法中所用的含有至少一种选自表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液的成分的组合物所提供的保护的普遍适用性，其具有对抗HIV多株的作用，此作用在防止、抑制或降低通过已感染的供体和接受者之间性接触而感染HIV的危险方面具有功用。实施例XXIV用HIV感染的单核细胞进行研究
由于HIV感染人***中的单核细胞和淋巴细胞，所以进行下面的试验，以确定本发明的方法中所用的组合物是否能够对抗HIV感染的单核细胞和淋巴细胞。将THP-1单核细胞悬浮于***。准备两组细胞。一组用候选组合物处理，另一组不予处理。结果显示，含有至少一种选自表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液的成分的候选组合物强烈抑制HIV感染的单核细胞。因此，该发现证明，候选组合物可以对抗***中所有类型的HIV感染的白细胞。实施例XXV用初级细胞进行研究
本实施例为证明本发明的方法的化合物是否能够提供对抗HIV感染的初级外周血白细胞而进行。人***通常含有初级外周血白细胞而不是前面研究所用的细胞系。根据本领域技术人员熟知的已建立的方案，从人血纯化正常人外周血单核白细胞。接着，将它们悬浮于***，用HIV感染，随后用本发明的方法中所用的候选组合物处理或不予处理。结果证明，候选组合物在抑制HIV感染的初级外周血白细胞方面高度有效。因此，这些发现适宜于人治疗。实施例XXVI灭活无细胞的HIV株
本实施例为确定本发明的方法的候选化合物是否灭活四种无细胞的HIV株而进行。将悬浮于***中的四种无细胞的HIV株用候选组合物处理或不予处理。结果证明，候选组合物灭活所有无细胞的HIV株的大于90％，灭活***中HIV的80％。因此，候选组合物对无细胞的HIV和HIV感染的细胞均有防护。实施例XXVII对性传播因子的防护
本实施例为确定本发明的方法的候选化合物是否也对HIV之外的其它性传播因子提供防护而进行。例如，疱疹的因子是单纯疱疹病毒(HSV)。为了检测对HSV的防护，将Vero细胞悬浮于***中。向细胞中加入候选组合物。按照本文前面描述的操作测定细胞。结果证明，候选组合物也强烈抑制HSV。因此，它们对疱疹传播提供防护。通过研究***瘤病毒家族，乳多空病毒(Papoviruses)的研究，也检测了本发明的方法的候选组合物抑制***瘤病毒的能力。在悬浮于***中的感染的细胞和无细胞的病毒中研究了对生殖器乳多空病毒株的防护。向培养物中加入候选组合物。然后，按照本文前述步骤测定细胞。结果证明，候选组合物强烈抑制生殖器乳多空病毒株。因此，候选组合物对生殖器疣传播提供防护。
此外还检测了候选组合物抑制其它性传播微生物的能力，如淋病、梅毒、衣原体和真菌病。为确定对这些微生物的防护，按照本领域技术人员熟知的操作在营养培养基中培养每一种微生物。用系列变化浓度的候选组合物处理培养物或不予处理，这些浓度可以由本领域技术人员确定，它们在Baron等，Medical Microbiology，4th ed.，Galveston TX，The University of Texas Medical Branch at Galveston，(1996)中有进一步描述，该文献引入本文作参考。结果证明，如抗微生物效价所表明的那样，候选组合物在破坏这些微生物方面高度有效。而且，它们提供保护作用。实施例XXVIII持久性研究
本实施例证明本发明的方法的组合物和候选组合物在***和直肠中的抗HIV活性的持续时间。
用组合物处理五只兔的***并在四小时时采样。此外，用组合物处理五只兔的直肠并在四小时时采样。试验前12小时，这些兔子只进水。回收的样品用于检测抗HIV活性，以与最初的制剂进行比较。结果证明，即使四小时后，组合物仍保持高度抗HIV活性。因此，该组合物非常实用。实施例XXIX人研究
本实施例证明本发明的方法的组合物在人中提供对HIV的防护的能力。还进一步研究了保护的持续时间。
以下按照标准人受试者方案进行，并得到Institutional ReviewBoard的批准。给妇女提供组合物原液，随后将组合物放入***中。四小时后，取等分试样并检测抗HIV活性。另外，禁食男性或女性把组合物放入直肠。也于四小时时取样，以类似方式检测抗HIV活性。结果证明，在体内四小时后组合物仍保持高度抗HIV活性。因此，权利要求中要求所用的组合物非常适宜用于人。本发明的方法中所用的组合物是灭活供体感染的细胞而不引起接受者粘膜炎症的组合物。安全性已得到FDA-批准(例如FDA 1级安全)的成分及其组合物用于本发明的方法中。
应当理解，本发明的方法提供适合于女性控制的预防方法，即主要而不是唯一用于***的方法，并包括可在伴侣不知道的情况下使用的组合物。而且，本发明的方法并不限于绝对集中在***施用。本文公开的方法和组合物可主要在***施用，然而，应当认识到它们也可以施用于***，以及为异性恋或同性恋者用于口腔和直肠。
尽管参照上面提供的实施例已描述了本发明，但是应当理解，可进行不违背本发明实质的各种变改。因此，本发明只受权利要求的限制。

Claims (26)

1.防止HIV经***或直肠传播的方法，所述方法包括使体液中HIV感染的供体细胞与抑制所述供体细胞产生HIV的组合物接触的步骤，所述组合物含有至少一种选自表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液的成分。
2.权利要求1的方法，其中体液是***。
3.权利要求1的方法，其中体液是***液。
4.权利要求1的方法，所述方法进一步包括在开始性接触之前或之后将有效量的组合物放置在下组解剖区域的一处或多处之上或之内：***、***、直肠或口腔。
5.权利要求3的方法，其中使用施用器将组合物置入***或直肠中。
6.权利要求3的方法，其中有效量是至少0.5ml。
7.权利要求3的方法，其中在开始性接触一小时内放置组合物。
8.权利要求1的方法，其中组合物与器具组合，所述器具选自栓剂、***套、海绵和其它屏障器具。
9.权利要求1的方法，其中所述供体细胞是白细胞。
10.权利要求1的方法，其中所述组合物含有皂、灌肠剂、漱口剂和灌洗液中的一种。
11.权利要求1的方法，其中所述组合物具有足以滞留在***或直肠内的粘性，并且可以与***混溶。
12.权利要求11的方法，其中所述组合物还包含选自聚季铵和甘油的成分。
13.权利要求11的方法，其中所述组合物是润滑剂或凝胶。
14.权利要求13的方法，其中所述润滑剂或凝胶选自***或直肠润滑剂、凝胶和乳膏剂。
15.权利要求14的方法，其中所述润滑剂或凝胶选自Astroglide牌产品、Vagisil牌产品、KY牌产品、Walgreen牌产品和Replens牌产品。
16.权利要求1的方法，其中所述表面活性剂选自去污剂、润湿剂和乳化剂中的一种或多种。
17.权利要求1的方法，其中所述杀微生物剂选自下组中的一种或多种：抗真菌药、抗感染药、AIDS化疗药、杀阿米巴药、抗蠕虫药、抗生素、抗疟药、抗原生动物药、抗结核药、抗病毒药、制麻风菌药、喹诺酮类、磺胺类和抗肿瘤药。
18.权利要求1的方法，其中所述抗细胞剂选自下组成分中的一种或多种：抗肿瘤药、肽、细胞凋亡剂、酶、抗体和杀***剂。
19.权利要求1的方法，其中所述酸试剂选自无机酸和有机酸。
20.权利要求1的方法，其中所述碱试剂选自无机碱试剂和有机碱试剂。
21.权利要求1的方法，其中所述氧化剂选自过氧化物、高碘酸盐、超氧化物、氧化氮和二硫化谷胱甘肽。
22.权利要求1的方法，其中所述抑制剂选自DNA合成抑制剂、RNA合成抑制剂、蛋白合成抑制剂、代谢抑制剂、代谢拮抗物和抗生素。
23.权利要求1的方法，其中所述有机溶剂选自醇、醚、酯、脂肪酸及其衍生物(饱和或不饱和的)、甘油二酯、甘油三酯和脂质，后者包括磷脂、糖脂、鞘脂和生色脂。
24.权利要求1的方法，其中所述低渗溶液选自水和具有低溶质含量的溶液。
25.防止HIV经多人使用的针和注射器传播的方法，所述针和注射器含有活的无供体细胞的HIV和/或HIV感染的供体细胞，其是被一个或多个所述共用者污染的结果，所述方法包括在使用所述注射器前使所述无供体细胞的HIV和所述HIV感染的细胞与抑制所述供体细胞产生HIV的组合物接触的步骤，所述组合物含有至少一种选自表面活性剂、杀微生物剂、抗细胞剂、酸试剂、碱试剂、氧化剂、抑制剂、有机溶剂和低渗溶液的成分。
26.权利要求25的方法，其中所述组合物含有皂、灌肠剂、漱口剂和灌洗液中的一种。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101977610B (zh) * 2008-01-25 2012-05-16 奇默里克斯公司 治疗病毒感染的方法
CN105188664A (zh) * 2013-03-15 2015-12-23 康拉德公司 用于hiv治疗和预防的低甘油制剂

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114652741B (zh) * 2022-01-19 2023-08-25 昆明野水生物科技有限公司 一种用于抑制hpv的组合物、制剂及其应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994008536A1 (en) * 1992-10-21 1994-04-28 Gynetech Laboratories, Inc. Vaginal sponge delivery system
UA39965C2 (uk) * 1993-12-03 2001-07-16 Лайфор Леборетріз Лтд Вірусоцидний, бактерицидний та руйнуючий сперматозоїди вагінальний засіб і вагінальний супозиторій ( варіанти )
JP2717497B2 (ja) * 1993-12-28 1998-02-18 不二ラテックス株式会社 酸性多糖類被覆コンドーム
US5545401A (en) * 1994-06-02 1996-08-13 Shanbrom; Edward Antiviral, spermicidal vaginal gel and foam containing low molecular weight povidone-iodine
US6581775B1 (en) * 2001-08-10 2003-06-24 Garo Hagopian Method of external genital cleansing and prophylactic kit

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101977610B (zh) * 2008-01-25 2012-05-16 奇默里克斯公司 治疗病毒感染的方法
CN105188664A (zh) * 2013-03-15 2015-12-23 康拉德公司 用于hiv治疗和预防的低甘油制剂

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