CN1416811A - 吲哚美辛脂质体滴眼液 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种眼用药物制剂，特别是含有吲哚美辛的脂质体滴眼液制剂，本发明吲哚美辛脂质体滴眼液的组成为：吲哚美辛、制备脂质体用脂质、缓冲溶液。

Description

吲哚美辛脂质体滴眼液

技术领域：本发明涉及一种眼用药物制剂，特别是含有吲哚美辛的脂质体滴眼液制剂。

背景技术：吲哚美辛(Indometacin)，又名消炎痛，为一种临床上常用的非甾体抗炎药，是花生四烯酸的主要代谢产物。炎症刺激花生四烯酸代射，并释放其代谢产物，可导致发热、疼痛、血管扩张、通透性增加及白细胞渗出等炎症反应。吲哚美辛通过抑制花生四烯酸的代谢从而抑制***素(PG)的生物合成。故在临床上作为解热镇痛药，用于治疗急慢性风湿性关节炎、痛风性关节炎及癌性疼痛，也可用于胆绞痛、泌尿道结石所引起的绞痛，对偏头痛及痛经也有疗效。由于本药对抑制引起炎症反应的诱导性COX-2所需的剂量，能够同时抑制胃、肠道的原型COX-1，因此它可引起胃肠道反应(恶心、呕吐、腹痛、腹泻等)，其他如中枢神经***(头痛、眩晕)、肝功能损害，血液***的粒细胞减少等不良反应也偶可发生，但仍是一个在临床上广泛使用的药物。在眼科用药方面，近几十年来主要应用抗组织胺剂、抗充血剂、肥大细胞稳定剂、皮质类固醇、抗菌素等药物治疗眼部炎症、过敏等病患。但由于上述药物作用短暂，尤其是皮质固醇类药物副作用大，短期内不能立即停药，长期应用有导致肾上腺皮质功能减退，诱发溃疡病等严重不良反应，而非甾体抗炎药具有抗炎、抗过敏和止痛作用，且无皮质类固醇的不良反应，因此在眼科中的应用日益受到重视。当创伤发生时，创伤的刺激使细胞膜紊乱，磷脂酶A₂活化，在磷脂酶A₂的作用下，花生四烯酸即从细胞膜磷脂中释放出来。花生四烯酸的代谢途径有2个，其中之一是在环氧酶的催化下形成环内过氧化物(PGG₂和PGH₂)，再通过异构酶的作用转化成***(PGE₂、PGF₂、PGD₂)、前列环素(PGI₂)和血栓素A₂(TXA₂)。当眼睛受到物理、化学创伤、手术、前房穿刺、激光照射以及刺激三叉神经等均会导致眼组织合成***素。***素是目前所知天然物质中最强有力的眼部致炎物质，在体内有极微量ng级的生物合成或释放，都可引起显著的生理效应。***素在眼部可导致血—房水屏障受损，从而使蛋白质及多种细胞、毒素、免疫复合体等成分渗透到房水中，招致眼组织发生炎性反应，充血、水肿，而且引起房水量显著增加，引起眼压升高。***素还会导致新生血管的形成，而且***素具有痛觉增敏作用，可增加痛觉感受器对缓激肽等致痛物质的敏感性，且PGE₁、PGE₂、PGF_2a本身也有致痛作用。***素可降低皮肤中组胺诱发瘙痒感觉的阈值，而且，***素与其它新合成的介质相比，有一个独特的作用，即改变组织中神经末梢的反应性。增加其对瘙痒的敏感性。***素与眼部瘙痒也密切相关。而且，非甾体抗炎药具有抑制手术诱发缩瞳的作用，在手术中维持瞳孔扩大。据报道，事先经非甾体抗炎药处理或伤后早期使用，对减轻炎症反应及预防合并症发生有明显的抑制作用。在中国，吲哚美辛的制剂在2000年版中国药典中有肠溶片(25mg)、胶囊(25mg)、栓剂(25mg、50mg、100mg、)、乳膏(10g∶100mg)、贴片(7.2cm×7.2cm含12.5mg)、搽剂(120ml∶200mg、50ml∶500mg)；2000年中国国家药品监督管理局又批准了吲哚美辛滴眼液(露奇)(8ml/40mg)批准号为：国药准字2000×-80号，由邯郸星星制药厂生产。在国外，美国出版的PDR(2000年)中刊载有胶囊剂(25mg、50mg)、缓释胶囊(75mg)、口服混悬剂(5ml∶25mg)、栓剂(50mg)、吲哚美辛三水钠注射剂(静脉滴注，每支1mg)。邓意辉等曾研制过吲哚美辛脂质体的注射液，对其制备方法、含量测定及稳定性等均进行了观察，但其粒度过大，仅小于3μm，其他指标也多数不符合2000年版中国药典二部有关脂质体项目的要求。吲哚美辛系一有机酸，口服难以透入眼内，溶液滴眼则能迅速进入眼内，实验证明，其油剂的角膜透性高于混悬剂，并以角膜和房水中的浓度最高，翁景宁报道，用放免法测定的角膜上皮内PGE₁、PGF₂、PGF_2a、PGI₂和TXA₂的含量，并在紫外线照射前后分别采用2.5g/L吲哚美辛油型滴眼剂滴眼，6h后再次测定角膜上皮内***素发现PGE₁、PGE₂、PGI₂和TXA₂合成均受到明显抑制(P＜0.05-0.01)，且角膜炎症反应较轻。结果提示***素在电光性眼炎的发生、发展过程中起着调控介质的作用。用吲哚美辛与不用吲哚美辛相对比，伤前预防性用药与伤后对伤眼的PGE₁抑制作用分别有极显著差异(P＜0.001)和显著性差异(P＜0.05)，可见不论伤前、伤后用药对房水PEG₁与蛋白的升高都有抑制作用。另外，吲哚美辛能明显减轻前房渗出性反应，很大程度上抑制了房水蛋白成分的增加，有对抗由于前房穿刺造成的缩瞳作用，保持瞳孔扩大，减少粘连，如作为战时战前用药，很可能对战伤性眼外伤由于散瞳，抗炎治疗不及时所造成的瞳孔膜闭锁的预防有益。滴眼液给药，由于眼球运动和鼻泪***的作用，使大量的药物损失，需每日多次给药，剂量不准确，眼内药物浓度波动大；混悬液或软膏给药又影响视力和眼球运动。为克服上述缺点，采用加入亲水凝胶卡波姆(carbomer)增加粘度，延缓药物的滞留时间，增加吸收；但容易使视力模糊，影响眼睑运动；或植入长效的控释给药***，但患者有异物感。现有吲哚美辛滴眼剂主要用于治疗葡萄膜炎、角膜炎、巩膜炎以及眼部机械性或化学性损伤引起的眼部损伤以及带状疱疹、急生充血性青光眼及其它严重疼痛的眼病。吲哚美辛滴眼剂能针对性地减轻不同程度的充血、水肿、血管壁渗漏及疼痛等反应。其主要不良反应有眼部烧灼感及刺痛感。理想的眼部给药***应能维持药物贮库，较长时间地释放药物。脂质体滴眼液能有效地穿透角膜，到达眼内各用药部位；能降低原有药物的局部和全身毒副作用；制剂透明，不影响眼部的正常生理功能。脂质体作为眼部给药***，其组成材料为磷酯双分子层膜，类似于生物膜，易与生物融合，促进药物对生物膜的穿透性，故药物外用滴眼的跨角膜转运效率较高。脂质体作为一种新型眼用药物载体，具有增加角膜通透性、缓释、降低毒性反应的优点。普通眼用制剂滴入后一个脉冲进入，而后药物浓度迅速下降，需要反复的间隔时间很短给药。脂质体可减小药物浓度波动，达到长效。目前尚无以脂质体为载体的吲哚美辛滴眼液上市。

发明内容：

本发明将吲哚美辛滴眼液制备成脂质体滴眼液，本发明在技术上应用高压匀浆法制备吲哚美辛脂质体滴眼液，大大减少了滴眼后眼部的烧灼感及刺痛感，疗效优于普通吲哚美辛滴眼液。本发明的吲哚美辛脂质体滴眼液平均粒度＜150nm，包载率＞90％，其他各项指标也均符合2000版中国药典有关脂质体的要求。本发明吲哚美辛脂质体滴眼液的组成为：吲哚美辛、制备脂质体用脂质、缓冲溶液。其中，缓冲溶液可以为硼酸盐的缓冲溶液，制备脂质体用脂质可以是大豆磷脂、胆固醇、维生素E组成的脂质，缓冲溶液和脂质可按常规技术制备。本发明的吲哚美辛脂质体滴眼液的制备方法如下：1称取处方量的制备脂质体用脂质及吲哚美辛用乙醇使其溶解，混合均匀。2将脂质溶液于薄膜蒸发器上，减压除去乙醇，制备脂质膜。3按处方配制中性缓冲液，过滤除菌备用。4将缓冲溶液倾入磷脂膜，待磷脂膜完全水化后，用高压匀浆器挤压制备脂质体。5无菌操作下，分装即得。在上述方法制成的滴眼液中，吲哚美辛的量为0.1-100mg/ml，优选的量为1-10mg/ml，最优选的量为5mg/ml。脂质体用脂质的量为15-375mg/ml，优选的量为50-100mg/ml，最优选的量为75mg/ml。其余为缓冲溶液。本发明的滴眼液可以制成各种规格的制剂，如0.2ml 0.4ml 0.5ml 1ml 2ml 5ml10ml等。以下为本发明的吲哚美辛脂质体滴眼液的药效学实验数据对家兔眼碱损伤的影响：[实验目的]：观察家兔眼碱损伤后吲哚美辛脂质体滴眼液对损伤引起的炎性反应的影响并同吲哚美辛滴眼液治疗作用进行比较。[动物]：大耳白兔，2.5-3.0kg，雌雄不拘，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，合格证号：军医动字第BDW95014。[药物]：吲哚美辛滴眼液(露奇)，河北邯郸星星制药厂生产，批号：000704。吲哚美辛脂质体滴眼液(用实施例1的方法生产)，批号：011120；空白脂质体，批号：0108103，石家庄康平医药研究所提供。[实验方法]：选用2.5-3.0kg的健康成熟家兔56只，在1％地卡因点眼局麻下，将预先制成带有1.0×1.0mm方形孔的医用手套薄胶膜，放于家兔眼上方角膜缘处，使孔一半在巩膜上，另一半在角膜上，用以限定烧伤模型的位置与范围。用微量进样器吸取1mol/LNaOH 20μL，滴于胶皮膜的孔内。将56只家兔分成7组，每组8只，雌雄不拘，第1-6组家兔双眼碱损伤后10分钟，均用盐水冲洗30秒，1、3、5组左眼用吲哚美辛滴眼液治疗。2、4、6组左眼用吲哚美辛脂质体滴眼液治疗，每30分钟滴眼1次，每次2滴。各组右眼滴生理盐水，分别于损伤后2、4、24小时用结核菌素试验用注射器抽取前房水(第5、6组损伤当天左眼每30分钟滴药治疗1次，每次2滴，右眼滴生理盐水8次后，第二天，继续治疗4次。)第7组为对照组，左眼碱损伤后10分钟，用盐水冲洗30秒不做治疗，作为模型对照组。右眼不做任何处理为空白对照组，于左眼损伤后2小时，左、右眼分别取前房水，采用放射免疫测定法和Lowry法分别测定PGE₁和蛋白含量。计算每组动物左、右眼前房水PGE₁和蛋白含量，计算均数并对治疗组和对照组进行t检验统计。观察家兔眼睛损伤后用吲哚美辛脂质体滴眼液和吲哚美辛滴眼液的治疗效果。[结果]：家兔眼睛碱损伤后可引起前房水中PGE₁含量增高，损伤模型组同空白对照组比较，PGE₁含量显著升高，P＜0.001。吲哚美辛脂质体滴眼液和吲哚美辛滴眼液对碱损伤引起的PGE₁含量增高在损伤的2、6、24h时均能降低；但吲哚美辛脂质体滴眼液治疗组同不用药治疗的对照组比较在2、4、6h时均有显著性差异(P＜0.01、P＜0.05、P＜0.05)。吲哚美辛脂质体滴眼液只在2和4h时有显著性差异(P＜0.05、P＜0.05)。结果见表1、表2。

                          表1家兔眼碱损伤后用药不同时间对前房水中PEG₁的影响

            例               损伤后2h                       损伤后6h                    损伤后24h组别

            数     对照组             治疗组        对照组           治疗组         对照组         治疗组空白对照        8      1.94±1.64模型对照        8      15.81±3.47^△△△吲哚美辛

            8      15.10±4.64        10.76±3.72*  12.66±6.53      4.54±4.29*    11.49±5.71    6.48±6.20滴眼液吲哚美辛脂

            8      14.68±3.37        10.78±2.58*  14.70±6.03      7.14±3.27*    11.41±5.24    3.76±4.04*质体滴眼液

△△△：同空白对照组比较P＜0.001，*：同对照组比较P＜0.05。

              表2家兔眼碱损伤后用药不同时间对前房水中蛋白含量的影响

          例               损伤后2h                    损伤后6h                    损伤后24h组别

          数      对照组             治疗组         对照组        治疗组       对照组        治疗组空白对照      8       0.99±0.52模型对照      8       13.88±4.08^△△△吲哚美辛

          8       11.28±3.81        6.50±3.23*    3.92±2.53    1.53±0.62   4.59±3.71    2.59±1.60滴眼液吲哚美辛脂

          8       14.10±6.60        5.70±5.15*    5.53±2.82    2.19±1.85*  8.17±3.41    3.62±2.54*质体滴眼液

△△△：同空白对照组比较P＜0.001，*：同对照组比较P＜0.05。[结论]：本试验结果显示，吲哚美辛脂质体滴眼液和吲哚美辛滴眼液对因碱损伤引起的家兔前房水中PGE₁和蛋白含量在治疗期间有降低作用。对上述两种炎性介质的降低程度在治疗6h以后，吲哚美辛脂质体滴眼液优于市售吲哚美辛滴眼液。提示吲哚美辛脂质体滴眼液对因碱损伤引起的炎性反应有较好的治疗作用。吲哚美辛脂质体滴眼液家兔眼刺激试验[摘要]：吲哚美辛脂质体滴眼液0.1ml滴入家兔眼内，每日一次，连续一周，未见刺激反应。[目的]：观察家兔眼多次接触吲哚美辛脂质体滴眼液后所产生的刺激反应。[药物]：1：受试药物，吲哚美辛脂质体滴眼液，批号：001003，含量：5mg/ml，石家庄康平医药研究所提供。2对照药物，吲哚美辛滴眼液，5mg/ml，批号20000101，由河北省邯郸星星制药厂生产。[动物]：新西兰家兔2.0-3.0kg，雌雄各半，由华北制药集团实验动物中心提供。合格证书：冀动字0005号。[方法]：1取健康家兔8只，随机分成两组，在试验环境下饲养24小时后进行试验；2第一组家兔滴受试药物，左侧眼睑轻轻拉下，滴0.1ml吲哚美辛脂质体滴眼液入结膜囊内，立即轻轻闭合眼睛10秒，另侧眼睛滴0.1ml生理盐水作对照。第二组家兔滴对照药物，左侧眼睛滴0.1ml吲哚美辛滴眼液，另侧眼睛滴0.1ml生理盐水作对照，操作方法同第一组。每日一次，连续7天。3于给药后即刻、1、6、24、48、72小时至7天观察角膜、虹膜、结膜刺激反应程度和局部反应情况。[结果]：每天给吲哚美辛脂质体滴眼液和吲哚美辛滴眼液0.1ml，连续7天，家兔角膜、虹膜、结膜均未见刺激反应。按照《新药(西药)临床及临床前研究指导原则》评价标准判定，吲哚美辛脂质体滴眼液对家兔眼刺激评分为0，即无刺激结果见表3。

    表3：吲哚美辛脂质体滴眼液和吲哚美辛滴眼液对家兔眼刺激反应

            给药          给药量           动物数药物                                                         刺激部位及评分    反应评分

            途径          (ml)             (只)吲哚美辛脂                                                   角膜、虹膜、结膜

            滴眼          0.1              4                                 0质体滴眼液                                                   0     0     0吲哚美辛                                                     角膜、虹膜、结膜

            滴眼          0.1              4                                 0滴眼液                                                       0     0     0

具体实施方式：以下通过实施例进一步说明本发明。

实施例1制备1000支0.4ml的滴眼液其处方为：吲哚美辛                                     2g制备脂质体用脂质                             30g硼酸盐缓冲溶液                               400ml其中硼酸盐缓冲溶液的组成如下：

硼酸                                     8.35g

硼砂                                     1.2g

注射用水加至                             500ml制备方法：1称取处方量的制备脂质体用脂质及吲哚美辛，用乙醇使其溶解，混合均匀。2将脂质溶液于薄膜蒸发器上，减压除去乙醇，制备脂质膜。3按处方配制PH为7.0的硼酸盐缓冲液，过滤除菌备用。4将硼酸盐缓冲溶液倾入磷脂膜，待磷脂膜完全水化后，用高压匀浆器挤压制备脂质体。5无菌操作下，分装即得。

实施例2制备1000支0.2ml的滴眼液其处方为：吲哚美辛                                             2g制备脂质体用脂质                                     30g硼酸盐缓冲溶液                                       200ml其中硼酸盐缓冲溶液的组成如下：

硼酸                                             8.35g

硼砂                                             1.2g

注射用水加至                                     500ml制备方法：1称取处方量的制备脂质体用脂质及吲哚美辛，用乙醇使其溶解，混合均匀。2将脂质溶液于薄膜蒸发器上，减压除去乙醇，制备脂质膜。3按处方配制PH为7.0的硼酸盐缓冲液，过滤除菌备用。4将硼酸盐缓冲溶液倾入磷脂膜，待磷脂膜完全水化后，用高压匀浆器挤压制备脂质体。5无菌操作下，分装即得。

实施例3制备脂质体用脂质处方(100g)大豆磷脂∶胆固醇(摩尔比)＝8∶2大豆磷脂                                         88.88g胆固醇                                           11.02g维生素E                                          0.10g共制得100g制备方法：称取处方量的大豆磷脂、胆固醇及维生素E，用无水乙醇使其溶解，混合均匀。将脂质溶液于薄膜蒸发器上，减压除去无水乙醇，得到脂质块状物。

Claims (10)

1.一种以吲哚美辛为活性成分的滴眼液，其特征在于，由吲哚美辛，制备脂质体用脂质、缓冲溶液组成。

2.权利要求1的滴眼液，其特征在于，所述吲哚美辛的量为0.1-100mg/ml，制备脂质体用脂质的量为15-375mg/ml，其余为缓冲溶液。

3.权利要求2的滴眼液，其特征在于，所述吲哚美辛的量为1-10mg/ml，制备脂质体用脂质的量为50-100mg/ml，其余为缓冲溶液。

4.权利要求3的滴眼液，其特征在于，所述吲哚美辛的量为5mg/ml，制备脂质体用脂质的量为75mg/ml，其余为缓冲溶液。

5.权利要求1-4的滴眼液，其特征在于，其中的制备脂质体用脂质由大豆磷脂，胆固醇，维生素E组成。

6.权利要求1-4的滴眼液，其特征在于，其中的制备脂质体用脂质含有的大豆磷脂和胆固醇的摩尔比为1-10∶1。

7.权利要求1-4的滴眼液，其特征在于，其中的缓冲溶液为硼酸缓冲溶液。

8.要求7的滴眼液，其特征在于，其中的缓冲溶液PH值为6-8。

9.权利要求1的滴眼液，其特征在于，每瓶包装为0.4ml，其中含有吲哚美辛2mg，制备脂质体用脂质30mg，加缓冲溶液到0.4ml，其中制备脂质体用脂质中大豆磷脂和胆固醇的摩尔比为8∶2或7∶3或6∶4，维生素E的量为1g/kg。

10.权利要求1的滴眼液的制备方法，其特征在于，制备脂质体用脂质和吲哚美辛用乙醇溶解，将溶解后的吲哚美辛脂质溶液置于薄膜蒸发器上，除去乙醇，制备吲哚美辛脂质膜，将中性缓冲溶液和吲哚美辛脂质膜混合，待吲哚美辛脂质膜完全水化后，用高压匀浆器挤压。