CN1319527C - 表没食子儿茶素没食子酸酯在制备预防和治疗因化疗引起脱发的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及茶多酚在制备预防和治疗因化疗引起脱发药物或功能性食品中的应用。所述茶多酚是指从茶叶中提取的含黄烷醇类结构的表没食子儿茶素没食子酸酯(Epi-gallo-catechin-gallate,简称EGCG)含量至少在30%以上的提取物或单一成分的表没食子儿茶素没食子酸酯。动物试验结果表明,EGCG可以明显抑制CYP引起的小鼠毛发脱落,说明EGCG在临床防治化疗药物引起的脱发具有重要的应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及药物领域。具体涉及茶多酚在制备预防和治疗因化疗引起脱发药物或功能性食品中的应用。
背景技术
目前***的化疗药物最大的副反应之一就是脱发,这给病人造成很大的生理和心理上的伤害,至今没有药物能够治疗。
茶多酚是从茶叶中提取的活性成分,主要含黄烷醇类、黄酮类、花青素类和酚酸类化合物,据报道它有抗氧化、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、强心、抗心律失常、防治脑缺血再灌注损伤、抗龋护齿、抑菌等多种药理作用,可用于开发保健食品、抗心脑血管病和抗肿瘤药品、防紫外线化妆品、抗龋牙膏、天然食用色素和食品抗氧化剂等。但至今未见有关将其用于防止和治疗因化疗引起的脱发的各种药品和功能性食品的报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于开发茶多酚的新用途,提供茶多酚在制备预防和治疗因化疗引起脱发药物或功能性食品中的应用。
本发明所述茶多酚是指从茶叶中提取的含黄烷醇类结构的表没食子儿茶素没食子酸酯(Epi-gallo-catechin-gallate,简称EGCG)含量至少在30%以上的提取物或单一成分的表没食子儿茶素没食子酸酯。
本发明所述的茶多酚从茶叶中提取的方法为常规茶多酚提取方法,即以茶叶为原料,经稀乙醇浸泡后,加热提取,提取液回收乙醇后,用乙酸乙酯萃取,萃取液浓缩干燥即得。采用高压液相检测其中EGCG的含量,至少30%。
茶叶为山茶科植物茶Camellia sinensis O.Ktze.的叶,性凉,味苦、甘,为常用的食品原料。由其提取得到的EGCG具有下述式I结构:
茶多酚具极强的清除自游基作用,并能改善微循环、促进血循环状态的改善,有利于维持细胞和机体内困境的稳定,防止毛囊细胞的损伤,这是茶多酚能促进毛发生长的主要原因。
本发明将从茶叶中提取含表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)30%以上的茶多酚复合成分进行有关预防和治疗因化疗引起脱发的药效试验,结果显示:EGCG可以明显抑制环磷酰胺(CYP)引起的小鼠毛发脱落,说明EGCG在临床防治化疗药物引起的脱发具有重要的应用价值。本发明实施例2对此有进一步的描述。
药效试验表明,含EGCG 30%以上的茶多酚提取物可作为预防和治疗因肿瘤化疗引起脱发的药物或辅助治疗的功能性食品,其使用方法为化疗开始前一星期服用茶多酚(EGCG 30%以上的茶多酚),每天3次,每次300mg-900mg,连服5周为一疗程,下次化疗前同样服用。
具体实施方式
实施例1
I、制备工艺
取茶叶粗干粉10公斤加5倍量50%乙醇浸泡12小时,加热提取2小时,过滤,滤液减压回收乙醇,水液加中等量乙酸乙酯萃取2次;合并乙酸乙酯萃取液,用适量水洗,减压回收萃取液中的乙酸乙酯,残留物加温水溶解至相对密度为1.08-1.09的浓缩液,浓缩液进行喷雾干燥,得棕色粉末约120克。
II、EGCG含量测定
1.检测设备
(HPLC)高效液相设备,产地日本岛津公司
2.检测条件
温度30℃,波长:280nm,液速1.0ml/min
流动相液:用甲醇∶水∶磷酸,27∶78∶0.1
进样量:10μl
3.计算方法
峰面积归一计算方法(标样由美国西格曼公司提供)
4.结果
上述提取物测得EGCG含量为55%。
实施例2动物试验
1.实验药物
EGCG,纯度为55%以上(实施例1获得),使用前用蒸馏水溶解。
环磷酰胺(cyclophosphamide,CYP,注射用),上海华联制药有
限公司,批号为030501,临用前溶于蒸馏水。
2.实验动物
近交系C57BL/6雌性小鼠,6-8周龄(青年期),15-20g,由上
海西普尔-必凯实验动物有限公司提供。小鼠在正常条件下喂养,即
饲养室温度为18-20℃,光照和黑暗各12h交替进行,小鼠可以自
由进食和饮水。所有实验小鼠均处于毛发生长终止期。动物分组为:正常组,对照组,EGCG低剂量组,EGCG高剂量组,每组15只小鼠。
3.实验方法
(1)诱导毛发生长初期的第VI阶段
用戊巴比妥钠(80mg/kg)将小鼠麻醉,在小鼠背部涂上熔融的蜂蜡和松香的混合物,***后,剥掉,使所有的毛囊均处于生长初期。至第8-9天时,毛发生长即进入生长初期的第VI阶段,此时毛囊发育成熟,皮肤颜色由灰变黑,并出现新生的、均一的黑色毛杆。
(2)脱发实验动物模型的建立到第9天时,给对照组和EGCG组小鼠一次性腹腔注射环磷酰胺,注射剂量为100mg/kg,正常组小鼠只注射蒸馏水。
(3)给药方案
从脱毛后第3天开始直至第15天,给小鼠口服EGCG,低剂量组为300mg/kg.d,高剂量组为600mg/kg.d,分两次灌胃(早、晚各一次)。
(4)脱毛后第13天(注射CYP后第4天)和第20天(注射CYP后第11天)的脱毛情况:
注射CYP后第4天,将小鼠麻醉,用统一的分辨率(1024×768,SONY DSC-P30数码照相机)给各组的每只小鼠拍照,利用图像分析***(复日FR-988)对照片进行分析,选定背部的整个脱毛区域和明显没有毛杆生长的区域,分别测量其面积,并计算每只小鼠的脱毛面积比例:脱毛面积比例=没有毛杆生长区域的面积/背部整个脱毛区域的面积)×100%。统计每组小鼠的脱毛面积比例,以平均值±标准差表示(x±s),采用t检验进行统计学分析。
4.实验结果
从脱毛后第3天开始,皮肤逐渐出现色素沉着,颜色开始变灰,至第5天时,整个背部已全部变为灰色且较光滑。至7-8天时,在背部的上半部分的脊柱两侧已出现较短且稀疏的毛杆。
至脱毛后第10天,即注射CYP后第二天,即可见对照组小鼠背部长出的毛杆有明显脱落,脱落区域的皮肤又恢复为较光滑的状态,颜色仍为灰色,EGCG高、低剂量组亦有毛杆脱落现象,但程度较轻。至脱毛后第13天时,即注射CYP后第4天,对照组和EGCG组脱毛现象更加严重,但可见明显差异,结果见表1。
至第20天时,即注射CYP后第4天,毛发已逐渐恢复再生,并且各组脱毛面积比例均明显缩小,但对照组的脱毛面积比例仍明显高于EGCG组。结果见表1。
表1EGCG对CYP致小鼠脱毛的面积的影响
分组 | 动物数(只) | 给药方案 | 脱毛后第13天的脱毛面积比例(%) | 脱毛后第20天的脱毛面积比例(%) |
正常组对照组EGCG低剂量EGCG高剂量 | 15151515 | 蒸馏水CYP+蒸馏水CYP+EGCG(300mg/kg.d)CYP+EGCG(600mg/kg.d) | 10.26±4.11**88.42±18.3652.47±14.62**42.55±12.97** | 3.13±1.41**39.72±11.3427.85±8.28**21.26±6.55** |
**与对照组相比,P<0.01
5.结论
本实验中所使用的CYP致小鼠脱发的动物模型,模拟了临床上化疗药物引起的脱发副作用。实验结果表明,EGCG可以明显抑制CYP引起的小鼠毛发脱落,说明EGCG在临床防治化疗药物引起的脱发具有重要的应用价值。
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1、表没食子儿茶素没食子酸酯在制备预防和治疗因化疗引起脱发的药物或功能性食品中的应用。
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辅助治疗药物和化疗药物 仲兆金,首都医药,第13期 2003 * |
辅助治疗药物和化疗药物 仲兆金,首都医药,第13期 2003;自由基-功过是非细评说 孙海金,中国中医药报 2003 * |
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