CN1315530C - 蛋白质类药物控制释放***制备方法 - Google Patents

蛋白质类药物控制释放***制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1315530C
CN1315530C CNB2005100571545A CN200510057154A CN1315530C CN 1315530 C CN1315530 C CN 1315530C CN B2005100571545 A CNB2005100571545 A CN B2005100571545A CN 200510057154 A CN200510057154 A CN 200510057154A CN 1315530 C CN1315530 C CN 1315530C
Authority
CN
China
Prior art keywords
microcapsule
multivesicular liposomes
sodium alginate
release
medicine
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB2005100571545A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1727001A (zh
Inventor
戴传云
王伯初
王黎
李标
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chongqing University
Original Assignee
Chongqing University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chongqing University filed Critical Chongqing University
Priority to CNB2005100571545A priority Critical patent/CN1315530C/zh
Publication of CN1727001A publication Critical patent/CN1727001A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1315530C publication Critical patent/CN1315530C/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

一种蛋白质类药物控制释放***的制备方法。该方法以磷脂和海藻酸钠为包封材料，牛血清白蛋白(BSA)为模型药物，采用复乳法制备多泡脂质体，然后将多泡脂质体以及制备过程中的游离BSA与海藻酸钠混合均匀后，滴加BaCI2溶液于上述***中，离心去除游离的BSA，真空干燥得微胶囊。该微胶囊对BSA的包封率为95%以上，体外溶出度测定表明，该微胶囊3d内的释放速率不到30%，15d内的释放速率为85%左右，20d后，仍有5%左右的药物没有被释放，具有良好的缓释效果，并且没有明显的突释效应，生产过程简单且为绿色工艺。该微胶囊能应用于医药、食品添加剂、香精香料等领域的缓释包封材料。

Description

蛋白质类药物控制释放***制备方法
技术领域
本发明涉及一种药物控制释放***，特别是蛋白质类药物控制释放***的制备方法。
技术背景
脂质体最早作为研究生物膜的模型提出(Bangham，J.Mol.Biol.1965，13)，它的发现，引起了生物学家、药学家的极大兴趣。20世纪70年代，脂质体首先作为β-半乳糖苷酶载体治疗糖原累积疾病后，人们开始应用脂质体作为药物的载体控制药物的释放，提高药物的靶向性，以减少药物毒性和副作用，提高药物的疗效。近几年来，随着生物技术的不断发展，脂质体工艺的逐步完善，加之脂质体适合于生物体内降解、无毒性和无免疫原性，特别是脂质体作为药物载体，具有靶向性，从而减少药物剂量，降低毒性、减少副作用等。因此，脂质体包埋生物活性药物也愈来愈受到重视并得到广泛应用。
海藻酸钠是从褐藻或细菌中提取出的天然多糖，由α-L-古洛糖醛酸(G段)与其立体异构体β-D-甘露糖醛酸(M段)两种结构单元，以三种方式(MM段、GG段和MG段)通过(1-4)糖苷键链接而成的一种无支链的线性阴离子共聚物。海藻酸钠是无毒、生物相容性好、可降解的天然生物高分子材料。同时，该材料具有良好的成型和成膜特性，被广泛作为释放或包埋药物、蛋白与细胞的载体(Macromil.chem.phys.1994，195)。
已被用于提供药物释放的脂质体包括，单层脂质体(Huang，Biochemistry，1969，8；Kim，Biochim，Biophys.Acta，1981，646)、多层脂质体(Bangham，J.Mol.Biol.1965，13)和稳定的多层脂质体(美国专利No.4,522,803)，但是在这些方法所制备的脂质体对水溶性蛋白药物的包封率相对较低，并且被包入囊泡内的分子的释放速率也较高。
发明内容
本发明的目的是提供一种新型的蛋白质类药物的控制释放***制备方法，使制备的微胶囊对模型药物蛋白——牛血清蛋白的包封率高达95％以上，并且具有良好的缓释作用。
本发明所涉及的蛋白质类药物控制释放***的制备方法，其技术方案为：
1)采用复乳法制备多泡脂质体，首先将卵磷脂、甘油三脂按质量比为8∶1～5∶1混合，将混合体溶解于***和氯仿的混合有机溶剂中，***和氯仿的体积比为3∶1～2∶1，搅拌使其完全溶解，此为油相；缓慢滴加等体积的含牛血清蛋白的葡萄糖溶液，葡萄糖溶液的百分浓度为5.0～8.0％，其中每毫升葡萄糖溶液含牛血清蛋白1～3mg，此为一水相，涡旋振荡并探针超声成初乳，取初乳用注射器快速注入1～4.0％的葡萄糖溶液，此为二水相，涡旋振荡成复乳，用氮气吹除有机溶剂，即得多泡脂质体混悬液；
2)制备多泡脂质体微囊，将上述多泡脂质体混悬液和质量百分浓度为3.0～8.0％海藻酸钠溶液混合，最终使海藻酸钠的质量百分浓度为0.1～5％，混合搅拌后，放置于冰箱0.5-5小时，除去气泡，加入一定质量的CaCO3，温和搅拌混匀，取20～50ml的液体石蜡，加Span-80乳化剂，和上述海藻酸钠溶液加入，振荡混匀，形成W/O乳剂，加入的冰醋酸，反应时间10～30分钟后，加入2％的CaCl2溶液使微囊沉降，静置30～60分钟，蒸馏水冲洗，即得多泡脂质体微囊。
本发明制得的微胶囊的包封率高达95％以上，体外释放实验表明，该微胶囊具有良好的缓释作用，而且没有出现突释效应，该微胶囊能广泛应用于生物活性蛋白类药物的缓释包封材料。
具体实施方式
实施例1：采用复乳法制备多泡脂质体，即将卵磷脂、甘油三脂按质量比为6∶1溶解于混合有机溶剂中，溶解于体积比为2∶1的***和氯仿有机溶剂中，搅拌使其完全溶解(油相)，缓慢滴加等体积的含2mg/ml牛血清蛋白的6.0％的葡萄糖溶液(一水相)，涡旋振荡并探针超声成初乳，取初乳用注射器快速注入2.0％的葡萄糖溶液(二水相)，涡旋振荡成复乳，用氮气吹除有机溶剂，即得多泡脂质体混悬液；然后，将多泡脂质体以及脂质体制备过程中未被其包封的游离活性蛋白药物的共存的悬浮液和质量百分数为3.0％海藻酸钠溶液混合，使海藻酸钠的终质量百分数浓度为1.5％，混合后搅拌，于冰箱放置0.5小时除去气泡，加一定质量的CaCO3，温和搅拌混匀，取20～50ml的液体石蜡，加Span-80乳化剂，和上述Alg溶液加入，振荡混匀，形成W/O乳剂，加入的冰醋酸，反应时间30分钟后，加入2.0％的CaCl2溶液使微囊沉降，静置30～60分钟，蒸馏水冲洗，即得多泡脂质体微囊。包封模型蛋白的微胶囊的包封率为97.2％，在模拟生理环境内，3天释放率为20％，15天释放率为62％，一个月内释放率为87％。
实施例2：采用复乳法制备多泡脂质体，即将卵磷脂、甘油三脂按质量比为8∶1溶解于混合有机溶剂中，溶解于一定体积比为3∶1的***和氯仿有机溶剂中，搅拌使其完全溶解(油相)，缓慢滴加等体积的含2mg/ml牛血清蛋白的6.0％的葡萄糖溶液(一水相)，涡旋振荡并探针超声成初乳，取初乳用注射器快速注入3.0％的葡萄糖溶液(二水相)，涡旋振荡成复乳，用氮气吹除有机溶剂，即得多泡脂质体混悬液；然后，将多泡脂质体以及脂质体制备过程中未被其包封的游离活性蛋白药物的共存的悬浮液和质量百分数为4.0％海藻酸钠溶液混合，使海藻酸钠的终质量百分数浓度为2.0％，混合后搅拌，于冰箱放置1.0小时除去气泡，加一定质量的CaCO3，温和搅拌混匀，取40ml的液体石蜡，加Span-80乳化剂，和上述Alg溶液加入，振荡混匀，形成W/O乳剂，加入的冰醋酸，反应时间30分钟后，加入2.0％的CaCl2溶液使微囊沉降，静置60分钟，蒸馏水冲洗，即得多泡脂质体微囊。包封模型蛋白的微胶囊的包封率为90.6％，在模拟生理环境内，3天释放率为25％，15天释放率为75％，一个月内释放率为87％。
实施例3：采用复乳法制备多泡脂质体，即将卵磷脂、甘油三脂按质量比为7∶1溶解于混合有机溶剂中，溶解于一定体积比为2∶1的***和氯仿有机溶剂中，搅拌使其完全溶解(油相)，缓慢滴加等体积的含3mg/ml牛血清蛋白的5.0％的葡萄糖溶液(一水相)，涡旋振荡并探针超声成初乳，取初乳用注射器快速注入4.0％的葡萄糖溶液(二水相)，涡旋振荡成复乳，用氮气吹除有机溶剂，即得多泡脂质体混悬液；然后，将多泡脂质体以及脂质体制备过程中未被其包封的游离活性蛋白药物的共存的悬浮液和质量百分数为2.5％海藻酸钠溶液混合，使海藻酸钠的终质量百分数浓度为3.0％，混合后搅拌，于冰箱放置3小时除去气泡，加一定质量的CaCO3，温和搅拌混匀，取30ml的液体石蜡，加Span-80乳化剂，和上述Alg溶液加入，振荡混匀，形成W/O乳剂，加入的冰醋酸，反应时间30分钟后，加入2.0％的CaCl2溶液使微囊沉降，静置40分钟，蒸馏水冲洗，即得多泡脂质体微囊。包封模型蛋白的微胶囊的包封率为96.7％，在模拟生理环境体外3天释放率为28％，15天释放率为79％，一个月内释放率为95％。
实施例4：采用复乳法制备多泡脂质体，即将卵磷脂、甘油三脂按质量比为7∶1溶解于混合有机溶剂中，溶解于一定体积比为2∶1的***和氯仿有机溶剂中，搅拌使其完全溶解(油相)，缓慢滴加等体积的含1.0mg/ml牛血清蛋白的6.0％的葡萄糖溶液(一水相)，涡旋振荡并探针超声成初乳，取初乳用注射器快速注入3.0％的葡萄糖溶液(二水相)，涡旋振荡成复乳，用氮气吹除有机溶剂，即得多泡脂质体混悬液；然后，将多泡脂质体以及脂质体制备过程中未被其包封的游离活性蛋白药物的共存的悬浮液和质量百分数为3～8％海藻酸钠溶液混合，使海藻酸钠的终质量百分数浓度为2.8％，混合后搅拌，于冰箱放置1.0小时除去气泡，加一定质量的CaCO3，温和搅拌混匀，取50ml的液体石蜡，加Span-80乳化剂，和上述Alg溶液加入，振荡混匀，形成W/O乳剂，加入的冰醋酸，反应时间10分钟后，加入2.0％的CaCl2溶液使微囊沉降，静置30分钟，蒸馏水冲洗，即得多泡脂质体微囊。包封模型蛋白的微胶囊的包封率为96.2％，在模拟生理环境内，3天释放率为23％，15天释放率为68％，一个月内释放率为93％。

Claims (2)

1、一种蛋白质类药物控制释放***的制备方法，其特征在于制备步骤如下：
1)采用复乳法制备多泡脂质体，首先将卵磷脂、甘油三脂按质量比为8∶1～5∶1混合，将混合体溶解于***和氯仿的混合有机溶剂中，***和氯仿的体积比为3∶1～2∶1，搅拌使其完全溶解，此为油相；缓慢滴加等体积的含牛血清蛋白的葡萄糖溶液，葡萄糖溶液的百分浓度为5.0～8.0％，其中每毫升葡萄糖溶液含牛血清蛋白1～3mg，此为一水相，涡旋振荡并探针超声成初乳，取初乳用注射器快速注入1～4.0％的葡萄糖溶液，此为二水相，涡旋振荡成复乳，用氮气吹除有机溶剂，即得多泡脂质体混悬液；
2)制备多泡脂质体微囊，将上述多泡脂质体混悬液和质量百分浓度为3.0～8.0％海藻酸钠溶液混合，最终使海藻酸钠的质量百分浓度为0.1～5％，混合搅拌后，放置于冰箱0.5-5小时，除去气泡，加入一定质量的CaCO3，温和搅拌混匀，取20～50ml的液体石蜡，加Span-80乳化剂，和上述海藻酸钠溶液加入，振荡混匀，形成W/O乳剂，加入的冰醋酸，反应时间10～30分钟后，加入2％的CaCl2溶液使微囊沉降，静置30～60分钟，蒸馏水冲洗，即得多泡脂质体微囊。
2、根据权利1要求所述的方法制备的多泡脂质体微囊是用作蛋白质类药物牛血清白蛋白的缓释包封材料。
CNB2005100571545A 2005-07-04 2005-07-04 蛋白质类药物控制释放***制备方法 Expired - Fee Related CN1315530C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2005100571545A CN1315530C (zh) 2005-07-04 2005-07-04 蛋白质类药物控制释放***制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2005100571545A CN1315530C (zh) 2005-07-04 2005-07-04 蛋白质类药物控制释放***制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1727001A CN1727001A (zh) 2006-02-01
CN1315530C true CN1315530C (zh) 2007-05-16

Family

ID=35926639

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2005100571545A Expired - Fee Related CN1315530C (zh) 2005-07-04 2005-07-04 蛋白质类药物控制释放***制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1315530C (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1895223B (zh) * 2006-04-05 2012-06-27 沈阳药科大学 一种新的脂质体制备方法
CN113527465A (zh) * 2021-07-05 2021-10-22 爱普香料集团股份有限公司 蛋白质-香料偶联物及其用途

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1166136A (zh) * 1994-09-13 1997-11-26 迪普技术公司 活性药剂控制释放的多泡脂质体的制备
WO1999012523A1 (en) * 1997-09-08 1999-03-18 Skyepharma Inc. Modulation of drug loading in multivesicular liposomes
US6071534A (en) * 1988-02-18 2000-06-06 Skyepharma Inc. Multivesicular liposomes with controlled release of active agents encapsulated in the presence of a hydrochloride

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6071534A (en) * 1988-02-18 2000-06-06 Skyepharma Inc. Multivesicular liposomes with controlled release of active agents encapsulated in the presence of a hydrochloride
CN1166136A (zh) * 1994-09-13 1997-11-26 迪普技术公司 活性药剂控制释放的多泡脂质体的制备
WO1999012523A1 (en) * 1997-09-08 1999-03-18 Skyepharma Inc. Modulation of drug loading in multivesicular liposomes

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
包覆技术及其控制释放***的研究与开发 日用化学品科学，第4期 1996 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN1727001A (zh) 2006-02-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4921757A (en) System for delayed and pulsed release of biologically active substances
AU2003231943B2 (en) Topical drug delivery using phosphatidylcholine
US4900556A (en) System for delayed and pulsed release of biologically active substances
CA2303432C (en) Modulation of drug loading in multivesicular liposomes
Tice et al. Parenteral drug delivery: injectables
CN101249077A (zh) 一种可降解聚合物多孔微球的制备方法及其用途
US20030078194A1 (en) Pro-micelle pharmaceutical compositions
JPH0240644B2 (zh)
JP2003525258A (ja) 一つの高分子電解質外被を持つナノカプセル
CN105106174B (zh) 一种核-壳双层微球及其制备方法
Gowthamarajan et al. Oral insulin—fact or fiction? Possibilities of achieving oral delivery for insulin
CN104546691A (zh) 一种关节腔注射用温敏原位凝胶制剂组合物及其制备方法
JP5487666B2 (ja) 内水相を固定化することを特徴とするリポソームの製造方法
EP0199362A2 (en) System and apparatus for delayed and pulsed release of biologically active substances
CN1315530C (zh) 蛋白质类药物控制释放***制备方法
CN102657871B (zh) 一种口服缓释制剂、包载材料及制备方法
CN1771912B (zh) 用于口服给药的蛋白多肽类复合物纳米粒及其制法
CN104739806B (zh) 口服胰岛素复合微囊及制备方法
TWI311488B (zh)
CN1198100A (zh) 聚氨基葡糖药物投递***
CN1891301A (zh) 一种纳米微凝胶、其制备方法及应用
CN102552145A (zh) 一种人工脂质体的制备方法
CN101040847B (zh) 一种采用氢化蓖麻油生产的纳米药物制剂及其制备工艺
CN103536533B (zh) 一种水溶性药物脂质体制备方法
Latrobdiba et al. Liposome optimisation for oral delivery of nutraceuticals in food: a review

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C19 Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee