CN118308313A - 大豆脂氧合酶及其编码基因在调控植物耐盐性能中的应用 - Google Patents
大豆脂氧合酶及其编码基因在调控植物耐盐性能中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN118308313A CN118308313A CN202410408292.6A CN202410408292A CN118308313A CN 118308313 A CN118308313 A CN 118308313A CN 202410408292 A CN202410408292 A CN 202410408292A CN 118308313 A CN118308313 A CN 118308313A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- protein
- plant
- regulating
- expression
- salt tolerance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 167
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 title claims abstract description 120
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 title claims abstract description 42
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 title claims abstract description 36
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 title claims abstract description 34
- 108090000128 Lipoxygenases Proteins 0.000 title abstract description 21
- 102000003820 Lipoxygenases Human genes 0.000 title abstract description 18
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 title description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 96
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 61
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims abstract description 41
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims abstract description 39
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 37
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 32
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 27
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 26
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 26
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 15
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 13
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 12
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims description 11
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 10
- 239000012620 biological material Substances 0.000 claims description 9
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 8
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 6
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 claims description 6
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 claims description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 5
- 108700005075 Regulator Genes Proteins 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 241000220485 Fabaceae Species 0.000 claims description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 2
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000003976 plant breeding Methods 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 3
- 230000002222 downregulating effect Effects 0.000 claims 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 abstract description 8
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 abstract description 6
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 12
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 3
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 3
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 description 2
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 description 2
- 241000589155 Agrobacterium tumefaciens Species 0.000 description 2
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710175625 Maltose/maltodextrin-binding periplasmic protein Proteins 0.000 description 2
- 108700001094 Plant Genes Proteins 0.000 description 2
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 2
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 2
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 2
- 230000036579 abiotic stress Effects 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 108010045262 enhanced cyan fluorescent protein Proteins 0.000 description 2
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 description 2
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 2
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- -1 lipid hydroperoxides Chemical class 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000024121 nodulation Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000003938 response to stress Effects 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- 239000005631 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid Substances 0.000 description 1
- 101710111418 4,4'-diaponeurosporene oxygenase Proteins 0.000 description 1
- 244000298697 Actinidia deliciosa Species 0.000 description 1
- 235000009436 Actinidia deliciosa Nutrition 0.000 description 1
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 1
- 241000219195 Arabidopsis thaliana Species 0.000 description 1
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 1
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 1
- 108091092584 GDNA Proteins 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108020005004 Guide RNA Proteins 0.000 description 1
- HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N HA peptide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N 0.000 description 1
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 1
- 108020005350 Initiator Codon Proteins 0.000 description 1
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 1
- 108030005106 Linoleate 13S-lipoxygenases Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 108010026217 Malate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000004020 Oxygenases Human genes 0.000 description 1
- 108090000417 Oxygenases Proteins 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 108091027544 Subgenomic mRNA Proteins 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 1
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 1
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 1
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 description 1
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- MMDJDBSEMBIJBB-UHFFFAOYSA-N [O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[NH6+3] Chemical compound [O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[NH6+3] MMDJDBSEMBIJBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 1
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 1
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000021040 cytoplasmic transport Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 238000003028 enzyme activity measurement method Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000012255 expression quantity analysis Methods 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000004345 fruit ripening Effects 0.000 description 1
- 238000010230 functional analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003208 gene overexpression Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012268 genome sequencing Methods 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 101150054900 gus gene Proteins 0.000 description 1
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 150000002432 hydroperoxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 1
- KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N linolenic acid Natural products CC=CCCC=CCC=CCCCCCCCC(O)=O KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 101150070593 lox gene Proteins 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 108010058731 nopaline synthase Proteins 0.000 description 1
- 230000031787 nutrient reservoir activity Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008121 plant development Effects 0.000 description 1
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 1
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 108010054624 red fluorescent protein Proteins 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000009712 regulation of translation Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000021892 response to abiotic stimulus Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000002786 root growth Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 1
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 1
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 description 1
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明公开了大豆脂氧合酶及其编码基因在调控植物耐盐性能中的应用。本发明属于生物技术领域，具体涉及大豆脂氧合酶及其编码基因在调控植物耐盐性能中的应用。本发明的蛋白质GmLOX或调控基因的表达物质或调控蛋白质活性或含量的物质可应用于调控植物耐盐性能，过表达GmLOX能显著提高转基因植物的耐盐能力，对培育耐盐大豆品种提供了指导，具有应用前景。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及大豆脂氧合酶及其编码基因在调控植物耐盐性能中的应用。
背景技术
脂氧合酶(lipoxygenase，LOX，EC1.13.11.12)，又名亚油酸:氧氧化还原酶，俗称脂肪氧化酶、脂肪加氧酶、脂肪氧合酶或类胡萝卜素氧化酶，广泛存在于哺乳动物、植物和微生物中。从生化的角度看，它是一种含非血红素铁或锰的加氧酶，专一催化包括亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸在内具有顺、顺-1,4-戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸及其相应酯的加氧反应，从而生成具有共轭双键的脂氢过氧化物(hydroperoxides，HPOD)，HPOD再进一步代谢为其它生理活性物质；此外，某些植物LOX同工酶也能催化类胡萝卜素、叶绿素等化合物的共氧化反应形成其它次生产物。近年来，植物种子LOX引起了植物学界的广泛兴趣，而其基因表达和调控也已经成为研究真核生物基因表达的模式***。
LOX最早被报道于粮食作物大豆中,目前已从多种植物中分离出LOX基因，如拟南芥(AtLOX1-AtLOX6)、猕猴桃(AdLox1-AdLox6)及番茄(TomLoxA-TomLoxF)。此外许多植物基因组测序已经完成，这使得更多的脂氧合酶基因家族成员被发现，如在黄瓜全基因组中鉴定出23个家族成员，葡萄基因组中鉴定出18个家族成员。同一植物中不同LOX基因的时空表达存在差异，意味着LOX基因家族各个成员在植物生长发育过程中发挥着不同的功能。LOX启动合成的一系列氢过氧化脂肪酸以及它们的代谢产物统称为氧脂(oxylipins)，它们在块茎发育、线虫、果实成熟、根瘤发育、病菌防御、性别决定衰老以及种子发芽中起到了重要作用。近年来，关于不同植物中新发现的LOXs及功能分析的报道越来越多，LOXs在植物生长发育过程中的作用得到越来越多的关注。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是如何提高植物的耐盐性能。
为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白质活性或含量的物质在调控植物耐盐性能中的应用。
本发明提供了蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白质活性或含量的物质在下述任一种中的应用：
1)蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白质活性或含量的物质在调控植物耐盐性能中的应用；
2)蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白活性或含量的物质在制备调控植物耐盐性能的产品中的应用；
3)蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白活性或含量的物质在培育耐盐性能改变的植物中的应用；
4)蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白活性或含量的物质在制备培育耐盐性能改变的植物的产品中的应用；
5)蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白活性或含量的物质在植物育种中的应用；
所述蛋白质为如下任一所示蛋白质：
a1)氨基酸序列为SEQ ID No.2的蛋白质；
a2)将SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；
a3)与a1)-a2)中任一所限定的氨基酸序列具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；
a4)在a1)-a3)中任一所限定的蛋白质的末端连接标签后得到的融合蛋白。
上述a1)所述蛋白质的名称为GmLOX。
为了使a1)中的蛋白质便于纯化或检测，可在由序列表中SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接标签蛋白。
上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。
所述标签蛋白包括但不限于：GST(谷胱甘肽巯基转移酶)标签蛋白、His6标签蛋白(His-tag)、MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白、Flag标签蛋白、SUMO标签蛋白、HA标签蛋白、Myc标签蛋白、eGFP(增强型绿色荧光蛋白)、eCFP(增强型青色荧光蛋白)、eYFP(增强型黄绿色荧光蛋白)、mCherry(单体红色荧光蛋白)或AviTag标签蛋白。
本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化或点突变的方法，对本发明的编码蛋白质GmLOX的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本发明分离得到的蛋白质GmLOX的核苷酸序列75％或75％以上同一性的核苷酸，只要编码蛋白质GmLOX且具有蛋白质GmLOX功能，均是衍生于本发明的核苷酸序列并且等同于本发明的序列。
上述75％或75％以上同一性，可为80％、85％、90％或95％以上的同一性。
本文中，同一性是指氨基酸序列或核苷酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gap existence cost，Per residue gap cost和Lambda ratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。
本文中，所述80％以上的同一性可为至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性。
本文中，所述90％以上的同一性可为至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性。
上述应用中，所述蛋白质来源于大豆(Glycinemax(L.)Merr.)。
本文中，调控所述蛋白质活性和/或含量的物质可为调控基因表达的物质，所述基因编码所述蛋白质GmLOX。
上文中，所述调控基因表达的物质可为进行如下6种调控中至少一种调控的物质：1)在所述基因转录水平上进行的调控；2)在所述基因转录后进行的调控(也就是对所述基因的初级转录物的剪接或加工进行的调控)；3)对所述基因的RNA转运进行的调控(也就是对所述基因的mRNA由细胞核向细胞质转运进行的调控)；4)对所述基因的翻译进行的调控；5)对所述基因的mRNA降解进行的调控；6)对所述基因的翻译后的调控(也就是对所述基因翻译的蛋白质的活性进行调控)。
本发明中，所述调控可为上调或增强或提高。所述调控也可为下调或减弱或降低。
上述应用中，所述调控基因的表达物质或调控所述蛋白质活性或含量的物质可为与前文所述应用中所述蛋白质相关的生物材料，所述生物材料为下述任一种：
c1)编码所述蛋白的核酸分子；
c2)含有c1)所述核酸分子的表达盒；
c3)含有c1)所述核酸分子的重组载体、或含有c2)所述表达盒的重组载体；
c4)含有c1)所述核酸分子的重组微生物、或含有c2)所述表达盒的重组微生物、或含有c3)所述重组载体的重组微生物；
c5)含有c1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有c2)所述表达盒的转基因植物细胞系；
c6)含有c1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有c2)所述表达盒的转基因植物组织；
c7)含有c1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有c2)所述表达盒的转基因植物器官；
e1)抑制或降低或沉默所述蛋白编码基因表达的核酸分子；
e2)含有e1)所述核酸分子的表达盒；
e3)含有e1)所述核酸分子的重组载体、或含有e2)所述表达盒的重组载体；
e4)含有e1)所述核酸分子的重组微生物、或含有e2)所述表达盒的重组微生物、或含有e3)所述重组载体的重组微生物；
e5)含有e1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有e2)所述表达盒的转基因植物细胞系；
e6)含有e1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有e2)所述表达盒的转基因植物组织；
e7)含有e1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有e2)所述表达盒的转基因植物器官。
上述应用中，c1)所述核酸分子为如下任一所示的DNA分子，
d1)核苷酸序列是SEQ ID No.1所示的DNA分子；
d2)编码区序列是SEQ ID No.3所示的DNA分子；
d3)与d1)或d2)限定的核苷酸序列具有90％或90％以上同一性，且编码前文所述蛋白的DNA分子；
d4)在严格条件下与d1)或d2)限定的核苷酸序列杂交，且编码前文所述蛋白质的DNA分子。
本文所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如gRNA、mRNA、siRNA、shRNA、sgRNA、miRNA或反义RNA。
本文所述载体是本领域技术人员公知的，包括但不限于：质粒、噬菌体(如λ噬菌体或M13丝状噬菌体等)、黏粒(即柯斯质粒)、Ti质粒或病毒载体。具体可为载体pSOY1。
可用现有的植物表达载体构建含有GmLOX基因的重组表达载体。所述植物表达载体包括但不限于如双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等。所述植物表达载体还可包含外源基因的3'端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3'端，如包括但不限于农杆菌冠瘿瘤诱导(Ti)质粒基因(如胭脂合成酶Nos基因)、植物基因(如大豆贮藏蛋白基因)3'端转录的非翻译区均具有类似功能。
使用GmLOX基因构建重组植物表达载体时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型启动子或组成型启动子，包括但不限于如花椰菜花叶病毒(CAMV)35S启动子、玉米的泛素启动子(ubiquitin)，它们可单独使用或与其它植物启动子结合使用；此外，使用本发明的基因构建植物表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。
为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入包括但不限于可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、荧光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除草剂基因)等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。
利用任何一种可以引导外源基因在植物中表达的载体，将本发明所提供的GmLOX基因或基因的片段导入植物细胞或受体植物，可获得耐盐性能改变的转基因细胞系及转基因植株。携带GmLOX基因的表达载体可通过使用Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化植物细胞或组织，并将转化的植物组织培育成植株。
可选地，c3)所述重组载体为具有SEQ ID No.4所示DNA分子的质粒，例如下述实施例制备的重组载体PSOYI-GmLOX。
本发明还提供了一种提高植物耐盐性能的方法，所述方法包括步骤M，所述步骤M为增强、提高或上调目的植物中前文所述蛋白的活性和/或含量，或/和，增强、提高或上调前文所述蛋白的编码基因的表达量，来增强植物耐盐性能。
本发明还提供了一种降低植物耐盐性能的方法，所述方法包括步骤P，所述步骤P为抑制或降低或沉默目的植物中前文中所述蛋白质的活性和/或含量，或/和，抑制或降低或沉默前文所述蛋白质的编码基因的表达量，来抑制植物耐盐性能。
本发明还提供了一种培育耐盐性能提高的植物的育种方法，包括增强、提高或上调受体植物中前文所述蛋白质的编码基因的表达量，和/或，所述蛋白质的活性和/或含量，获得植物耐盐性能强于所述受体植物的植物。
上述增强、提高或上调受体植物中前文所述蛋白质的编码基因的表达量，或/和增强、提高或上调上述蛋白质的编码基因的活性和/或含量是通过将上述蛋白质的编码基因导入所述受体植物实现的。
在一个具体实施例中，上述方法包括如下步骤：
(1)构建增强、提高或上调前文所述蛋白质的编码基因的重组表达载体；
(2)将步骤(1)构建的重组表达载体转入受体植物中，获得植物耐盐性能强于所述受体植物的植物。
本发明还提供了一种培育耐盐性能降低的植物的育种方法，包括抑制或降低或沉默受体植物中前文所述蛋白质的编码基因的表达量，和/或，所述蛋白质的活性和/或含量，获得植物耐盐性能弱于所述受体植物的植物。
本文中，所述耐盐性能可表现为：在NaCl含量为150mM处理时的生长状况。
上述应用中的所述的蛋白质和/或所述的生物材料也属于本发明要求保护的范围。
本文中，所述植物可为如下任一种：
N1)双子叶植物：
N2)豆目植物；
N3)豆科植物；
N4)大豆属植物；
N5)大豆。
本研究以GmLOX基因为研究对象，将其转入大豆DN50中，获得了T1代转化子，取其中OE-7和OE-13两个转化子进行耐盐功能鉴定并对其进行酶活测定，以大豆DN50(CK)作为对照，研究GmLOX转基因大豆在盐胁迫下的变化。结果发现：盐胁迫处理条件下，GmLOX转基因大豆在盐的酶活性显著高于对照，且转基因株系的长势显著优于对照。这些结果表明GmLOX能显著提高转基因植物的耐盐能力，GmLOX作为耐盐基因可以被应用于培育大豆抗逆品种。
附图说明
图1为GmLOX基因过表达大豆株系OE7和OE13表达量分析。
图2为GmLOX基因在NaCl胁迫不同时间下的表达模式分析。
图3为GmLOX转基因植株OE7和OE13叶片脂氧合酶酶活测定。
图4为GmLOX转基因植株在盐碱胁迫下的生长状态。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
以下实施例中的定量实验，如无特别说明，均设置三次重复实验。
下述实施例中的Fu28载体已记载于:Runnan Zhou,Sihui Wang,Peiyan Liu,Yifan Cui,Zhenbang Hu,Chunyan Liu,Zhanguo Zhang,Mingliang Yang,Xin Li,XiaoxiaWu,Qingshan Chen,Ying Zhao,Genome-wide characterization of soybean malatedehydrogenase genes reveals a positive role of GmMDH2 in salt stressresponse,Journal of Integrative Agriculture,2024,ISSN 2095-3119。公众可从申请人处获得该生物材料，该生物材料只为重复本发明的实验所用，不可作为其它用途使用。
下述实施例中的pSOYI载体已记载于:金润哲(Kim Yunchol).GmTCP和GmNLP响应硝态氮浓度对大豆结瘤影响的分子机制[D].东北农业大学,2023.DOI:10.27010/d.cnki.gdbnu.2023.000037。公众可从申请人处获得该生物材料，该生物材料只为重复本发明的实验所用，不可作为其它用途使用。
下述实施例中的东农50(简称DN50)已记载于:李思楠,张超,马彦龙,等.外源2,4-D对大豆再生过程的影响[J].基因组学与应用生物学,2015,34(06):1324-1332.DOI:10.13417/j.gab.034.001324。公众可从申请人处获得该生物材料，该生物材料只为重复本发明的实验所用，不可作为其它用途使用。
实施例1、GmLOX基因过表达大豆转化株系的构建
1、GmLOX过表达转基因株系OE7和OE13的获得。
GmLOX基因的基因组序列为SEQ ID No.1，其编码序列(CDS)为SEQ ID No.3，编码蛋白质GmLOX的氨基序列为SEQ ID No.2。
具体步骤如下：
以东农50模板，获得GmLOX基因片段并通过同源重组连接到入门载体Fu28上，构建GmLOX-Fu28载体，将构建好的载体通过Gateway的方法获得过表达载体pSOYI-GmLOX。
GmLOX-Fu28的结构描述如下：将出发载体Fu28的EcoRⅠ和BamHⅠ之间的小片段替换为GmLOX片段(SEQ ID No.3)，保持载体Fu28其他序列不变得到的重组载体。
将构建好的GmLOX-Fu28入门载体质粒与pSOYI空载体质粒配制如下反应体系进行Gateway克隆反应。
表1、Gateway克隆反应体系
| 反应成分 | 体积 |
| (入门载体)GmLOX-Fu28 | 2μL |
| (表达载体)pSOYI | 2μL |
| LR ClonaseⅡEnzyme mix | 补足至20μL |
将反应体系轻轻混匀，置于25℃金属浴中反应5h。获得过表达载体pSOYI-GmLOX，pSOYI-GmLOX的核苷酸序列为SEQ ID No.4。
将含有pSOYI-GmLOX质粒的根癌农杆菌EHA105(上海唯地生物技术有限公司，AC1010)菌液侵染大豆子叶节进行大豆遗传转化，成功将GmLOX基因导入东农50大豆植株。经过外植体侵染、共培养、丛生芽诱导、筛选、伸长和生根炼苗等过程，最终获得过表达GmLOX转基因大豆植株。
最终获得GmLOX过表达转基因株系OE7和OE13。
2、GmLOX过表达植株表达量检测
利用TRIzol试剂(Invitrogen)分别提取转基因大豆OE7和OE13和DN50(简称WT)叶片总RNA。使用IIQ RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)进行反转录。采用ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix(Vazyme)试剂盒进行定量PCR。
反应混合液含有2*ChamQ Universal SYBR qRCR 10μl，上下游引物0.5μM，cDNA模板1μl(相当于100ng的RNA)，总体积为20μl。采用罗氏荧光定量PCR仪进行实时定量反应，实时定量反应程序：95℃5min；95℃10s，62℃30s，72℃30s，40个循环；溶解曲线，95℃5s，65℃1min，97℃30s；4℃，冷却。对得到CT值采用2-△△CT方法计算，比较GmLOX基因在转基因株系及DN50中表达差异。每一个样品进行三次独立的生物学重复，每次进行三次技术重复。
qRT-PCR结果表明(图1)，GmLOX基因在大豆OE7和OE13的T0和T1代叶片中均有表达，且与对照DN50相比有不同程度的增加。
实施例2、不同处理下GmLOX基因过表达植株的表型分析
1、GmLOX基因过表达植株在不同盐处理时间的GmLOX表达量分析
将水培2周的大豆用150mM NaCl处理，于处理不同时间点(0、1、3、6、12及24h)对大豆叶片进行取样，液氮速冻，-80℃保存，用于提取RNA。利用qRT-PCR检测GmLOX对非生物胁迫响应模式。使用Bio-Rad Chromo4 real-time PCR***进行实时定量PCR。反应混合液含有2×SYBR Green Realtime PCR Master Mix(Toyobo)12.5μl，上下游引物0.5μM，cDNA模板2μl(相当于100ng的RNA)，总体积为25μl。反应条件为：94℃，30s；45循环：94℃，12s；58℃，30s；72℃，30s。最后80℃，1s。相对表达水平利用2-△△CT方法计算。GmLOX在0h根中的表达水平设为1，其它的处理相应进行计算。每一个样品进行三次独立的生物学重复，每次进行三次技术重复。所有的引物显示在表2中。
表2、实时定量PCR引物序列
利用实时定量PCR分析GmLOX基因在非生物胁迫和激素响应下的表达模式。图2显示GmLOX在大豆叶片中对不同逆境响应情况，NaCl胁迫处理3h后，GmLOX基因在叶片中的表达呈显著上调。在NaCl处理12h时，GmLOX基因的表达强度达到最大值。以上结果表明在NaCl胁迫下叶片中GmLOX表达量显著提升，说明GmLOX是大豆适应非生物逆境过程中一个重要的调节因子。
2、GmLOX过表达植株酶活测定
分别取两个GmLOX过表达株系OE7和OE13的1g的叶片用液氮研磨至粉末状,加入9ml预冷的匀浆液,滤液在4℃下12000r离心15min,上清液即为酶粗提液。利用植物脂氧合酶(LOX)活性检测试剂盒(Sangon Biotech，货号：D799791)对转基因株系OE7与OE13植株叶片的LOX脂氧合酶酶活性进行测定。
结果表明(图3)：2个转基因株系中脂氧合酶活性均比对照显著增高。
3、GmLOX过表达植株耐盐性鉴定
为了鉴定盐胁迫条件下GmLOX对植物根生长的影响，不同株系大豆OE7和OE13的种子放置于装有蛭石的塑料盆(直径25cm，高6cm)中发芽，发芽后移植到6孔黑色水培盒中水培，海绵块固定子叶下部，每盆盛满蒸馏水。定植后，在昼夜温度为(26±2)℃/(24±2)℃，光周期为12h，相对湿度为75％温室内培养。蒸馏水培养至第一片三出复叶展开展开时作盐胁迫处理，胁迫处理7天时拍照。比较野生型、上述过表达系在盐胁迫处理下它们的耐盐生理特性差异，进而研究各转基因株系在盐胁迫下的抗逆能力。
结果显示(图4):NaCl胁迫条件下，转基因株系的长势显著好于野生型，说明GmLOX能够提高大豆对盐胁迫的耐受性。
通过对GmLOX转基因植株进行统计分析和表型观察，发现过表达GmLOX能显著提高转基因植物的耐盐能力，本结论为进一步利用转基因手段培育大豆耐盐品种提供了理论基础和基因准备。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。
Claims (9)
1.蛋白质或调控所述蛋白质的编码基因表达的物质或调控所述蛋白质的活性或含量的物质在下任一种中的应用；
1)蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白质活性或含量的物质在调控植物耐盐性能中的应用；
2)蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白活性或含量的物质在制备调控植物耐盐性能的产品中的应用；
3)蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白活性或含量的物质在培育耐盐性能改变的植物中的应用；
4)蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白活性或含量的物质在制备培育耐盐性能改变的植物的产品中的应用；
5)蛋白质或调控基因的表达物质或调控所述蛋白活性或含量的物质在植物育种中的应用；
所述蛋白质为如下任一所示蛋白质：
a1)氨基酸序列为SEQ ID No.2的蛋白质；
a2)将SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；
a3)与a1)或a2)所限定的氨基酸序列具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；
a4)在a1)-a3)中任一所限定的蛋白质的末端连接标签后得到的融合蛋白。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述蛋白来源于大豆。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，调控基因的表达物质或调控所述蛋白质活性或含量的物质为与权利要求1或2所述应用中所述蛋白质相关的生物材料，所述生物材料为下述任一种：
c1)编码所述蛋白的核酸分子；
c2)含有c1)所述核酸分子的表达盒；
c3)含有c1)所述核酸分子的重组载体、或含有c2)所述表达盒的重组载体；
c4)含有c1)所述核酸分子的重组微生物、或含有c2)所述表达盒的重组微生物、或含有c3)所述重组载体的重组微生物；
c5)含有c1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有c2)所述表达盒的转基因植物细胞系；
c6)含有c1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有c2)所述表达盒的转基因植物组织；
c7)含有c1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有c2)所述表达盒的转基因植物器官。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：c1)所述核酸分子为如下任一所示的DNA分子，
d1)核苷酸序列是SEQ ID No.3所示的DNA分子；
d2)编码区序列是序列表中SEQ ID No.1所示的DNA分子；
d3)与d1)或d2)限定的核苷酸序列具有90％或90％以上同一性，且编码权利要求1中所述蛋白的DNA分子；
d4)在严格条件下与d1)或d2)限定的核苷酸序列杂交，且编码权利要求1中所述蛋白的DNA分子。
5.一种改变植物耐盐性能的方法，其特征在于：所述方法包括步骤M或P，所述步骤M为增强、提高或上调目的植物中权利要求1或2中所述蛋白的活性和/或含量，或/和，增强、提高或上调权利要求1或2中所述蛋白的编码基因的表达量，来提高植物耐盐能力；
所述方法包括步骤P，所述步骤P为抑制或降低或下调目的植物中权利要求1或2中所述蛋白的活性和/或含量，或/和，抑制或降低或下调权利要求1或2中所述蛋白的编码基因的表达量，来降低植物耐盐能力。
6.一种培育高耐盐性能植物的方法，其特征在于，包括增强、提高或上调目的植物中权利要求1或2中所述蛋白质的编码基因的表达量，和/或，所述蛋白质的活性和/或含量得到高耐盐性能植物，所述高耐盐性能的植物的耐盐性能高于所述目的植物。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述增强、提高或上调植物中权利要求1或2中所述蛋白质的编码基因的表达包括向所述目的植物中导入权利要求4中c1)所述的核酸分子、c2)所述表达盒或c3)所述重组载体，获得高耐盐性能植物。
8.权利要求1或2中所述的蛋白质和/或权利要求3或4中所述的生物材料。
9.如权利要求5-7任一所述的方法，其特征在于，所述植物为如下任一种：
N1)双子叶植物：
N2)豆目植物；
N3)豆科植物；
N4)大豆属植物；
N5)大豆。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410408292.6A CN118308313A (zh) | 2024-04-07 | 2024-04-07 | 大豆脂氧合酶及其编码基因在调控植物耐盐性能中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410408292.6A CN118308313A (zh) | 2024-04-07 | 2024-04-07 | 大豆脂氧合酶及其编码基因在调控植物耐盐性能中的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN118308313A true CN118308313A (zh) | 2024-07-09 |
Family
ID=91721531
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202410408292.6A Pending CN118308313A (zh) | 2024-04-07 | 2024-04-07 | 大豆脂氧合酶及其编码基因在调控植物耐盐性能中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN118308313A (zh) |
-
2024
- 2024-04-07 CN CN202410408292.6A patent/CN118308313A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101280006B (zh) | 一种与植物耐缺铁相关的蛋白及其编码基因与应用 | |
| CN112226455B (zh) | 一种水稻籽粒粒长和粒重相关蛋白及其编码基因与应用 | |
| CN113563442B (zh) | 抗旱相关蛋白IbSPB1及其编码基因与应用 | |
| CN111434679B (zh) | 株型相关蛋白在调控植物株型中的应用 | |
| CN112457380A (zh) | 调控植物果形和/或果汁含量的蛋白质及其相关生物材料和应用 | |
| CN116970621B (zh) | 丹参抗逆相关蛋白SmDREB2A及其编码基因与应用 | |
| CN117106820A (zh) | 一种通过基因组编辑创制番茄少侧枝的方法及其应用 | |
| CN115160422B (zh) | 甘薯耐盐抗旱相关蛋白IbMYB44及其编码基因与应用 | |
| CN115073573B (zh) | 甘薯抗逆相关蛋白IbNAC087及其编码基因与应用 | |
| CN114717241B (zh) | 一种水稻耐盐相关基因OsMSRFP及其编码蛋白质和应用 | |
| CN113136398B (zh) | GsHA24蛋白及其相关生物材料在调控植物耐逆性中的应用 | |
| CN118308313A (zh) | 大豆脂氧合酶及其编码基因在调控植物耐盐性能中的应用 | |
| CN115197307B (zh) | 调控植物抗逆性的蛋白IbGER5及其编码基因与用途 | |
| CN114591927B (zh) | 甘薯薯块条筋发育相关蛋白IbPRX17及其编码基因与应用 | |
| CN116970053B (zh) | 植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用 | |
| CN114539373B (zh) | 与甘薯茎线虫病抗性相关蛋白IbPIF1及其编码基因与应用 | |
| CN113563443B (zh) | 耐盐相关蛋白IbWRKY32及其编码基因与应用 | |
| CN114524868B (zh) | 甘薯叶片发育及类黄酮强化相关蛋白IbBBX29及其编码基因与应用 | |
| CN115044592B (zh) | 一种调控玉米株型和瘤黑粉病抗性的基因ZmADT2及其编码蛋白和应用 | |
| CN114752605B (zh) | 一种水稻OsOFP22s基因及利用其提高水稻粒长、千粒重和改良直链淀粉含量的方法 | |
| CN117986331A (zh) | Drw1蛋白或调控其表达的物质在调控水稻耐盐性状中的应用 | |
| CN118028349A (zh) | 蛋白ZmHDT103及其编码基因在调控植物干旱抗性中的应用 | |
| CN107417778B (zh) | 抗病转TaOMT-A基因小麦的培育方法及相关生物材料与应用 | |
| CN117778457A (zh) | 蛋白ZmERF018及其编码基因在玉米干旱响应中的应用 | |
| CN117987450A (zh) | 大豆GmESR1基因在调控植物蛋白质含量中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication |