CN118217288A - Claficapavir在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2感染的药物中的应用 - Google Patents
Claficapavir在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2感染的药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN118217288A CN118217288A CN202410408569.5A CN202410408569A CN118217288A CN 118217288 A CN118217288 A CN 118217288A CN 202410408569 A CN202410408569 A CN 202410408569A CN 118217288 A CN118217288 A CN 118217288A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- claficapavir
- cov
- sars
- infection
- preventing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- YZLFZFALAZYTCI-ZROIWOOFSA-N (e)-3-(5((5-(4-chlorophenyl)furan-2-yl)methylene)-4-oxo-2-thioxothiazolidin-3-yl)propanoic acid Chemical compound O=C1N(CCC(=O)O)C(=S)S\C1=C/C1=CC=C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)O1 YZLFZFALAZYTCI-ZROIWOOFSA-N 0.000 title claims abstract description 48
- 229940126338 Claficapavir Drugs 0.000 title claims abstract description 46
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 20
- 208000025721 COVID-19 Diseases 0.000 title claims abstract description 6
- 208000037847 SARS-CoV-2-infection Diseases 0.000 title claims abstract description 6
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 claims abstract 6
- 208000001528 Coronaviridae Infections Diseases 0.000 claims description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 5
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 5
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 claims description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 10
- 241001112090 Pseudovirus Species 0.000 abstract description 8
- 201000003176 Severe Acute Respiratory Syndrome Diseases 0.000 abstract description 8
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 abstract description 3
- 101000629318 Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 Spike glycoprotein Proteins 0.000 abstract description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract description 2
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- 101000674040 Homo sapiens Serine-tRNA ligase, mitochondrial Proteins 0.000 description 4
- 102100040597 Serine-tRNA ligase, mitochondrial Human genes 0.000 description 4
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 3
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- 238000010149 post-hoc-test Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- YZLFZFALAZYTCI-NTEUORMPSA-N 3-[(5e)-5-[[5-(4-chlorophenyl)furan-2-yl]methylidene]-4-oxo-2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-3-yl]propanoic acid Chemical compound O=C1N(CCC(=O)O)C(=S)S\C1=C\C1=CC=C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)O1 YZLFZFALAZYTCI-NTEUORMPSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000491 EC50 Toxicity 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010078851 HIV Reverse Transcriptase Proteins 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940122313 Nucleoside reverse transcriptase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 1
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 238000013400 design of experiment Methods 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000017188 evasion or tolerance of host immune response Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 231100001083 no cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229940042402 non-nucleoside reverse transcriptase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000002726 nonnucleoside reverse transcriptase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 239000003419 rna directed dna polymerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
本发明公开了Claficapavir在制备预防和/或治疗SARS‑CoV‑2感染的药物中的应用。本发明研究发现Claficapavir显示出对SARS‑CoV‑2具有显著的抗病毒活性。通过使用编码SARS‑CoV‑2刺突蛋白的荧光素假病毒进行评价，首次揭示了Claficapavir能够有效抑制SARS‑CoV‑2假病毒颗粒(SARS2pp)的感染。这一发现表明Claficapavir具备成为一种新型抗SARS‑CoV‑2药物的潜力，可以单独使用或与其他药物联用，用于预防和/或治疗由SARS‑CoV‑2引起的感染。
Description
技术领域
本发明属于生物医学和药物领域，涉及Claficapavir作为抗新冠病毒抑制剂在治疗严重急性呼吸综合征中的应用，特别涉及Claficapavir在制备预防和治疗SARS-CoV-2介导的疾病的药物中的应用。
背景技术
2019年底以来，由严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒感染(COVID-19)迅速演变成全球大流行，对公共卫生构成了前所未有的挑战。SARS-CoV-2的高传染性和病毒变异的能力导致了全球感染病例的持续增加，这迫切需要开发有效的预防和治疗策略。虽然疫苗接种在疫情控制中发挥了关键作用，但疫苗的分配不均、疫苗犹豫、以及病毒变异导致的免疫逃逸，均强化了寻找新的治疗手段的重要性。
Claficapavir是一种新型的HIV治疗药物，属于非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)。通过抑制HIV逆转录酶来阻止HIV病毒的复制，具有更广泛的抗病毒活性，对耐药株也有一定的作用。Claficapavir是一种长效药物，可通过皮下注射或口服给药，从而减少患者每天服药的频率，提高服药依从性。临床试验显示，Claficapavir具有良好的耐受性和抗病毒活性，对一些常见的HIV耐药株也具有一定的作用。然而，需要注意的是，Claficapavir目前仍在临床试验阶段，尚未被所有国家的药物管理机构批准上市。
发明内容
本发明的目的是提供Claficapavir的医药新用途。
本发明所提供的Claficapavir的医药新用途为Claficapavir在制备如下产品中的应用：
1)抗新冠病毒感染的药物；
2)新冠病毒抑制剂；
3)预防和/或治疗SARS-CoV-2感染的药物；
4)预防和/或治疗SARS-CoV-2介导的疾病的药物。
所述应用中，所述SARS-CoV-2介导的疾病具体可为SARS-CoV-2引起的新型冠状病毒感染(COVID-19)。
所述应用中，Claficapavir的浓度为：6μM-20μM，具体可为6μM、8μM、10μM或20μM。
Claficapavir，CAS号：2055732-24-4，分子式为C17H12ClNO4S2，英文名：Claficapavir，化学结构式如下所示：
本发明研究发现Claficapavir显示出对SARS-CoV-2具有显著的抗病毒活性。通过使用编码SARS-CoV-2刺突蛋白的荧光素假病毒进行评价，首次揭示了Claficapavir能够有效抑制SARS-CoV-2假病毒颗粒(SARS2pp)的感染。这一发现表明Claficapavir具备成为一种新型抗SARS-CoV-2药物的潜力，可以单独使用或与其他药物联用，用于预防和/或治疗由SARS-CoV-2引起的感染。
附图说明
图1为本发明实施例1中不同浓度Claficapavir对细胞存活率的影响。使用细胞计数试剂盒8(CCK-8)评估了不同剂量的Claficapavir处理后24小时的HEK-293T-ACE2细胞的存活能力。
图2为本发明实施例2中Claficapavir对SARS-CoV-2病毒感染的抑制作用。HEK-293T-ACE2细胞在SARS-CoV-2假病毒颗粒(SARS2pp)感染前2.5小时接受了Claficapavir处理。然后进行细胞液交换，细胞以MOI为0.3的假病毒颗粒进行感染，持续24小时。使用免疫荧光法检测了荧光素酶活性(A)和免疫荧光强度(B)。比例尺为100μm。
数据表示为生物学重复(CCK-8：n＝3；免疫荧光：n＝6)的平均值±SEM。统计分析结果显示*p<0.05,***p<0.001和n.s.：不显着(单因素方差分析与Dunnett’s事后检验)。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
材料和方法
实验设计
本研究的主要目的是评估Claficapavir对新冠病毒感染的影响。使用细胞计数试剂盒8(CCK-8)评估了Claficapavir的细胞毒性，并通过免疫荧光法评估了其对SARS-CoV-2病毒感染的影响。
假病毒、细胞和试剂
SARS-CoV-2XBB.1.16假病毒由AMMS生物信息学中心的***教授提供，李恬协助相关实验。
HEK-293T-ACE2细胞系在含有10％胎牛血清(FBS；Gibco，FND500)和1％双抗生素(青霉素-链霉素；Macgene)的Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM；Gibco，04242)中及37℃、湿润的5％CO2孵育箱中培养。
Claficapavir(MedChemExpress，HY-145560)以40mM的浓度溶解于二甲基亚砜(DMSO；Innochem，D3855)中，储存在-80℃冰箱中。在使用时，使用DMEM释将其稀释至不同的终浓度(0、0.5、1、2、4、6、8、10、20、40、60μM)，用于CCK-8细胞毒性检测实验；另外，在进行抗病毒药物干预实验时，使用opti-MEM(Gibco，31985-070)将其稀释至不同的终浓度(0、2、4、6、8、10、20、40μM)。
细胞培养及毒性检测
将HEK-293T-ACE2细胞以3×105个细胞/毫升的密度种植在96孔板中，每孔100微升，37℃孵箱孵育，过夜。随后，在37℃下使用不同浓度的Claficapavir(0-60μM)处理细胞，孵育24小时。按照产品说明操作，通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8；Bimake，C6005M)进行检测细胞活性。简单来说，将用DMEM稀释后的CCK-8试剂(CCK-8:DMEM＝1:9)加入细胞培养板中，每孔70μL的体积，与细胞一起在37℃孵育箱中孵育2小时，然后在450nm波长处测量光密度(OD值)。
假病毒感染及药物干预作用
在假病毒颗粒感染实验中，将HEK293/hACE细胞以3×105个细胞/mL的密度种植在96孔板中，每孔100微升，在37℃孵箱中孵育，过夜。随后，细胞以MOI为0.3的假病毒颗粒感染，持续24小时。使用Steady-LumiTMII荧光素检测试剂盒(Beyotime)检测荧光素酶活性。针对入侵抑制剂及处理时间的实验，HEK-293T-ACE2细胞在SARS-CoV-2假病毒颗粒(SARS2pp)感染前2.5小时给与Claficapavir处理。
统计分析
对于多组的比较，采用单因素方差分析与Dunnett’s事后检验进行多重比较(GraphPadPrism软件，美国)。所得数据以平均值±标准误差(SEM)表示。
实施例1、Claficapavir细胞毒性
为了评价不同浓度Claficapavir对细胞活力的影响，进行了细胞活力测定。结果显示，在HEK-293T-ACE2细胞中，当Claficapavir的浓度低于20μM时，未观察到细胞毒性。计算得出Claficapavir对HEK-293T-ACE2细胞的50％细胞毒浓度(CC50)为151.88μM(图1)。
实施例2、Claficapavir抑制了SARS-CoV-2病毒的感染
为了评估Claficapavir对SARS-CoV-2感染的抑制作用，进行了SARS2pp感染HEK-293T-ACE2细胞的实验测定。结果显示，在6μM、8μM、10μM、20μM的浓度下，Claficapavir可以分别使SARS2pp感染抑制率达到约50％、58％、70％、80％(图2A、2B)。
通过假病毒感染性测定，发现在安全浓度下，Claficapavir显著抑制了SARS2pp的感染。此外，计算得出Claficapavir的半数最大有效浓度(EC50)为6.05μM，表明Claficapavir可能是一种有效的SARS2pp阻断感染抑制剂(图2A、2B)。根据计算，Claficapavir的选择性指数为25，表明它在有效抑制目标活性的同时对细胞的毒性较低，具有广泛的工作浓度可供选择。通常情况下，选择性指数大于1被认为是有潜力的化合物。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。
Claims (6)
1.Claficapavir在制备抗新冠病毒感染的药物中的应用。
2.Claficapavir在制备新冠病毒抑制剂中的应用。
3.Claficapavir在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2感染的药物中的应用。
4.Claficapavir在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2介导的疾病的药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用中，所述SARS-CoV-2介导的疾病为SARS-CoV-2引起的新型冠状病毒感染。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的应用，其特征在于，所述应用中，Claficapavir的浓度为：6μM-20μM。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410408569.5A CN118217288A (zh) | 2024-04-07 | 2024-04-07 | Claficapavir在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2感染的药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410408569.5A CN118217288A (zh) | 2024-04-07 | 2024-04-07 | Claficapavir在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2感染的药物中的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN118217288A true CN118217288A (zh) | 2024-06-21 |
Family
ID=91502411
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202410408569.5A Pending CN118217288A (zh) | 2024-04-07 | 2024-04-07 | Claficapavir在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2感染的药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN118217288A (zh) |
-
2024
- 2024-04-07 CN CN202410408569.5A patent/CN118217288A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102265798B1 (ko) | 코로나 바이러스에 연관된 감염의 치료를 위한 항바이러스 조성물 | |
| CN102438604B (zh) | 高致病性传染性疾病的预防及治疗制剂 | |
| WO2021259195A1 (zh) | 治疗新型冠状病毒肺炎的联合用药物 | |
| WO2021207399A1 (en) | Hydrolysable tannins for use in mitigating acute respiratory distress syndrome | |
| WO2020114444A1 (zh) | 双醋瑞因在制备抗病毒药物及治疗病毒感染中的用途 | |
| CN113855654A (zh) | 一种预防和治疗冠状病毒感染的组合物 | |
| CA2465062C (en) | Preventive and/or therapeutic agent for viral infection | |
| CN112641789A (zh) | 一种化合物在治疗和预防新型冠状病毒和流感病毒药物方面的应用 | |
| CN113368121A (zh) | 抗冠状病毒的连翘苷和连翘脂素组合物 | |
| CN118217288A (zh) | Claficapavir在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2感染的药物中的应用 | |
| CN112843073A (zh) | 瑞德西韦（Remdesivir）在制备抗牛副流感病毒3型药物中的应用 | |
| RU2697887C1 (ru) | Средство, обладающее противовирусным действием в отношении вирусов клещевого энцефалита и герпеса простого I типа | |
| EP4135685A1 (en) | Cysteine protease inhibitors for use in the prevention and/or treatment of coronavirus | |
| CN114762694A (zh) | 寡糖转移酶抑制剂在预防和/或治疗新型冠状病毒感染中的应用 | |
| CN111568900A (zh) | 吲哚美辛在抗冠状病毒感染中的应用 | |
| CN105055387A (zh) | 牛磺酸在制备抗病毒药物中的应用 | |
| CN111529517B (zh) | 盐酸胍作为预防或治疗冠状病毒感染的药物的用途 | |
| CN109646440B (zh) | Cabotegravir在制备抗牛传染性鼻气管炎药物中的应用 | |
| CN114796256B (zh) | 环腺苷酸类化合物在制备抗寨卡病毒药物中的应用 | |
| CN118001274A (zh) | ADH-503在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2介导的疾病的药物中的应用 | |
| CN113521083A (zh) | 瑞德西韦在制备抗牛流行热病毒药物中的应用 | |
| CN110179785B (zh) | 魏特酮在制备治疗或预防手足口病药物中的应用 | |
| CN109646435B (zh) | 厄他培南钠在制备防治牛传染性鼻气管炎药物中的应用 | |
| CN117982492A (zh) | 异噁唑类化合物在制备抗寨卡病毒药物中的应用 | |
| CN105920004B (zh) | 1，2，4-三取代哌嗪化合物在制备抗流感病毒药物中的用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |