CN117898209B - 一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法 - Google Patents
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Abstract
本申请是关于色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，包括以下步骤：（1）种子预处理；（2）无菌苗的获取；（3）不定芽诱导培养：将获取得到的无菌苗的叶片分切后接种到不定芽诱导培养基上培养；（4）不定芽开花、花粉收集；（5）继代培养；将已收集花粉后的生根苗，采取切除生根苗的根部后移入新的培养基继续进行继代培养，让其继续开花同时收集花粉。该方法快速简单，基于组织培养短期内获取得到大量整齐均匀且纯度一致的种苗，从而便于快速高效的收集花粉，且在继代培养时，得到的花粉活力依然较高，该方法提高了育种进程，有利于种质资源的保存和优良品种的推广。
Description
技术领域
本申请涉及植物育种技术领域，尤其涉及一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法。
背景技术
万寿菊（Tagetes erectaL.）是菊科万寿菊属一年生草本植物。万寿菊原产墨西哥，中国各地均有栽培。色素万寿菊含有丰富的叶黄素，叶黄素可作为食品、饲料、医药的原料，同时色素万寿菊通常为头状花序，花色以橙色为主，花朵较大，花瓣层次分明，形状独特，因而具有很高的观赏和药用价值。
在色素万寿菊杂交种（F1）实际生产中，花粉吸取设备常用于采集恢复系的花粉。然而，由于空气中存在散落的可育系花粉，即花粉收集区域有其他花粉源（例如雄性可育株），导致花粉交叉污染，这势必会造成种子纯度的下降，还存在着核心种质资源泄露的风险；同时，色素万寿菊通常在3月份开始播种，4月份进行移栽，6月份开始收集花粉。从播种到收集花粉大约需要130天，生产周期较长。此外，6月份云南已进入雨季，空气相对潮湿，不利于花粉的收集，还会大大缩短花粉储存寿命，降低花粉活力，从而影响授粉效果。因此，花粉的收集、贮藏和授粉受季节限制较为明显。此外在雨季，万寿菊较易受到灰霉病、褐斑病、叶枯病和蚜虫等多种因素的影响，导致植物长势衰弱，花粉产量减少等问题。
基于此，近些年以来，随着植物组织培养技术的发展，采用组织培养对具有优良品种特性的色素万寿菊进行快速繁殖，可以在短期内生产出大量整齐均匀的健壮种苗。然而，申请人发现，在利用组织培养技术培养色素万寿菊的过程中，经过初代培养以后的植株在继代时花粉活力常常会出现下降的问题，且随着继代次数的增加花粉活力愈发降低。也就是说，虽然通过组织培养可以短时间内获取得到大量的花粉，但由于继代培养时得到的花粉活力质量并不稳定，从而影响到制种工序。
发明内容
为解决或部分解决相关技术中存在的问题，本申请提供一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，该方法快速简单，基于组织培养短期内获取得到大量整齐均匀且纯度一致的种苗，从而便于快速高效的收集花粉，且在继代培养时，得到的花粉活力依然较高，从而保证了花粉活力，该方法提高了育种进程，有利于种质资源的保存和优良品种的推广。
本申请中的色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，包括以下步骤：
（1）种子预处理
将色素万寿菊恢复系种子于太阳下晾晒后，对种子进行消毒，无菌水冲洗，备用；
（2）无菌苗的获取
将步骤（1）中得到的备用种子在超净工作台中平铺于萌发培养基上，封口后移入培养室培养，得到无菌苗；
（3）不定芽诱导培养
将获取得到的无菌苗的叶片分切后接种到不定芽诱导培养基上，培养基经密封后移入培养室，先在光照强度为500lx条件下培养一周，再移入光照强度为2500-3000lx条件下培养直至得到再生不定芽；其中，不定芽诱导培养基的配方为：MS粉末4.4g/L、6-BA10mg/L、IAA 1mg/L、硝酸银2mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L；
（4）不定芽开花、花粉收集
将诱导得到的再生不定芽在超净台内切下接种至增殖培养基，密封后移入培养室进行生根培养至开花，即可进行花粉的收集；
（5）将已收集花粉后的生根苗，采取切除生根苗的根部后移入新的培养基继续进行继代培养，让其继续开花同时收集花粉；
所述继代培养的培养基配方为： MS粉末4.4g/L、TDZ 0.2mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L；
继代培养的条件为：光照强度为2500-3000lx下进行培养；培养温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
可选的，在一些实施方式中，所述步骤（3）中培养室条件为培养温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
可选的，在一些实施方式中，所述步骤（1）中晾晒具体操作为：晾晒的时间为3d，种子摊铺厚度不超过0.5mm，晾晒温度为18-28℃。
可选的，在一些实施方式中，所述步骤（2）中的萌发培养基配方为：MS粉末4.4g/L、TDZ 0.3mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L。
可选的，在一些实施方式中，所述步骤（4）中的增殖培养基配方为：MS粉末4.4g/L、TDZ 0.2mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L。
本申请提供的技术方案可以包括以下有益效果：
（1）利用本申请中的方法，由传统制种130 d的生产周期缩短至80d左右，大大缩短了花粉成熟所需时间，避免了花粉产量及活力易受季节影响以及收集花粉之前植株的病虫害及其他突发天气导致的花粉产量降低的问题，使花粉的生产可以不受季节时间限制，充分保证了制种的进程，有利于种质资源的保存和优良品种的推广。
（2）本申请中的色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，在经过初代培养以后，通过特定的继代培养基进行继代培养，在已开花采取了部分花粉的基础上，继续高频地诱导出大量地色素万寿菊再生芽和在原来的分枝开花，从而在短时间内获取得到大量的花粉。同时利用本申请中的方法在进行继代培养时，可以有效规避玻璃化苗的产生，保证继代培养时组培苗的质量，进而保证所得花粉的活力。
（4）利用本申请中的方法，杜绝了花粉交叉污染的情况，保证了杂交种的纯度，避免了色素万寿菊恢复系基因型不纯合，使杂交种颜色不一的问题，降低了核心种质资源泄露的风险。
具体实施方式
下面将参照实施例更详细地描述本申请的实施方式。虽然实施例中显示了本申请的实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本申请而不应被这里阐述的实施方式所限制。相反，提供这些实施方式是为了使本申请更加透彻和完整，并且能够将本申请的范围完整地传达给本领域的技术人员。
实施例1
本实施例中的色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，包括以下步骤：
（1）将色素万寿菊恢复系种子（博浩3号，来自云南博浩生物科技集团股份有限公司）于太阳下晾晒3d，种子厚度不超过0.5mm，晾晒温度18-28℃。对种子，在超净工作台内用2%次氯酸钠震荡消毒10min，再用0.1%升汞震荡消毒10min，使用无菌水冲洗4次，备用。
（2）将已灭菌后备用的种子在超净工作台中平铺于萌发培养基上，封口后移入培养室，培养室培养条件为温度24±2℃、光照强度为2500-3000lx、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%，萌发培养基配方为：MS粉末4.4g/L、琼脂8g/L、糖30g/L，种子在第二天部分萌发，继续培养至长出子叶后获取得到无菌苗。
（3）将无菌苗植株的叶片在超净台内分切后接种至不定芽诱导培养基中，将接种好叶片的培养基经密封后移入培养室，先进行一周的微光培养（光照强度为500lx），再移入光下培养（光照强度为2500-3000lx）；培养室其它培养条件为温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。其中，不定芽诱导培养基的配方为：MS粉末4.4g/L、6-BA 10mg/L、IAA 1mg/L、硝酸银2mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L。经过不定芽诱导培养最终得到再生不定芽。
（4）将诱导得到的再生不定芽在超净台内切下接种至增殖培养基，密封后移入培养室进行生根培养直至开花，对已盛开的花进行花粉的收集。检测初代培养后收获的花粉的活力。
其中，增殖培养基的配方为：MS粉末4.4g/L、TDZ 0.2mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L；培养室的培养条件为：24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
（5）对培养至已经开花、收集花粉后的生根苗，采取切除生根苗的根部后移入新的培养基继续进行第一次继代培养，让其继续开花同时收集花粉。检测第一次继代培养后收获的花粉的活力。
其中，第一次继代培养的培养基配方为：MS粉末4.4g/L、TDZ 0.2mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L。
继代培养的条件为：光照强度为2500-3000lx下进行培养；培养温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
实施例2
对实施例1中第一次继代培养至已经开花、收集花粉后的生根苗，采取切除生根苗的根部后移入新的培养基继续进行第二次继代培养，让其继续开花后收集花粉；
其中，第二次继代培养的培养基配方为：MS粉末4.4g/L、TDZ 0.2mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L。
继代培养的条件同实施例1。
对本实施例中第二次继代培养至已经开花、收集花粉后的生根苗，采取切除生根苗的根部后移入新的培养基继续进行第三次继代培养，让其继续开花后收集花粉；
其中，第三次继代培养的培养基配方为：MS粉末4.4g/L、TDZ 0.2mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L。
检测第二次、第三次继代培养后收获的花粉的活力。
实施例3
对实施例1中第一次继代培养至已经开花、收集花粉后的生根苗，采取切除生根苗的根部后移入新的培养基继续进行第二次继代培养，让其继续开花后收集花粉；
其中，第二次继代培养的培养基配方为：植物凝胶6.0g/L、IAA3.0 mg/L、6-BA3.0mg/L、糖30g/L；
继代培养的条件同实施例1。
对本实施例中第二次继代培养至已经开花、收集花粉后的生根苗，采取切除生根苗的根部后移入新的培养基继续进行第三次继代培养，让其继续开花同时收集花粉；
其中，第三次继代培养的培养基配方为：植物凝胶6.0g/L、IAA3.0 mg/L、6-BA3.0mg/L、糖30g/L；
检测第二次、第三次继代培养后收获的花粉的活力。
实施例4
对实施例3中第二次继代培养至已经开花、收集花粉后的生根苗，采取切除生根苗的根部后移入新的培养基继续进行第三次继代培养，让其继续开花后收集花粉；
其中，第三次继代培养的培养基配方为：植物凝胶6.0g/L、IAA3.0 mg/L、6-BA3.0mg/L、糖30g/L；
检测第三次继代培养后收获的花粉的活力。
需要说明的是，本申请中涉及到对花粉活力进行检测用的方法具体为TTC染色法，为现有技术，本领域技术人员完全能够理解。
同时作为对比，与来自于同一品种但分别在温室中和大田中按照常规培养方法培养得到的色素万寿菊温室苗、大田苗产生的花粉进行花粉活力对比。花粉活力测定的结果如下表所示：
上述花粉测定结果表明，实施例1中的组培苗经初代培养产生的花粉活力虽略低于温室苗和大田苗，但并无显著性差异。在利用本发明中的继代培养基进行第一次继代培养，测试结果意外地发现，第一次继代培养后的花粉活力（73.65%）甚至还高于初代培养后收获的花粉活力（69.52%）。
将实施例2和实施例3对比，其共同的特征在于：均是采用实施例1中第一次继代培养后的组培苗作为第二次继代培养的原材料，不同的地方在于在第二次继代培养和第三次继代培养时继代培养基的配方不相同。此外，需要说明的是，实施例3中的继代培养基的配方选自现有技术中在进行继代培养时成苗表现较好的继代培养配方，该配方具体来源为：赵子刚，曾丽，唐克轩，季春娟，孙佳，杨帆.色素万寿菊叶片再生体系的建立及优化[J].园艺学报2010，37（4）：655-660。从实施例2和实施例3中的结果中可以看出，利用本申请中的继代培养基配方进行第二次继代培养和第三次继代培养时，其花粉活力均明显高于上述现有技术中在进行继代培养时成苗表现较好的继代培养配方。在利用本申请中的继代培养基配方进行第三次继代培养时，第三次继代培养所得花粉的活力（71.41%）甚至是高于第二次继代培养所得花粉的活力（67.52%）；而在实施例3中，则是第三次继代培养所得花粉的活力（55.66%）低于第二次继代培养所得花粉的活力（62.37%）。
进一步地，从实施例4的结果中可以看出，当第二次继代培养用的是实施例1中的继代培养基配方，而第三次继代培养用的是实施例3中的继代培养基配方，第三次继代以后所得花粉活力（51.45%）是显著低于实施例2中第三次继代培养所得花粉的活力（71.41%），这也说明本申请中实施例1中的继代培养基的配方的关键作用。
以上已经描述了本申请的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。本文中所用术语的选择，旨在最好地解释各实施例的原理、实际应用或对市场中的技术的改进，或者使本技术领域的其它普通技术人员能理解本文披露的各实施例。
Claims (7)
1.一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）种子预处理
将色素万寿菊恢复系种子于太阳下晾晒后，对种子进行消毒，无菌水冲洗，备用；
（2）无菌苗的获取
将步骤（1）中得到的备用种子在超净工作台中平铺于萌发培养基上，封口后移入培养室培养，得到无菌苗；
（3）不定芽诱导培养
将获取得到的无菌苗的叶片分切后接种到不定芽诱导培养基上，培养基经密封后移入培养室进行不定芽诱导培养；
（4）不定芽开花、花粉收集
将诱导得到的再生不定芽在超净台内切下接种至增殖培养基，密封后移入培养室进行生根培养至开花，即可进行花粉的收集；
（5）继代培养
将已收集花粉后的生根苗，采取切除生根苗的根部后移入新的培养基继续进行继代培养，让其继续开花同时收集花粉；
所述继代培养的培养基配方为：MS粉末4.4g/L、TDZ 0.2mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L；
继代培养的培养条件为：光照强度为2500-3000lx下进行培养；培养温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
2.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（3）中培养室培养条件为温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
3.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（1）中晾晒具体操作为：晾晒的时间为3d，种子摊铺厚度不超过0.5mm，晾晒温度为18-28℃。
4.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（1）中消毒的具体操作为：用2%次氯酸钠震荡消毒10min，再用0.1%升汞震荡消毒10min。
5.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（2）中的萌发培养基配方为：MS粉末4.4g/L、TDZ 0.3mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L。
6.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（4）中的增殖培养基配方为：MS粉末4.4g/L、TDZ 0.2mg/L、IBA 0.1mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L。
7.根据权利要求1所述的一种色素万寿菊制种过程中快速收集花粉的方法，其特征在于，所述步骤（3）中不定芽诱导培养基的配方为：MS粉末4.4g/L、6-BA10 mg/L、IAA1mg/L、硝酸银2mg/L、琼脂8g/L、糖30g/L；不定芽诱导培养的培养条件为：先在光照强度为500lx下培养一周，再移入光照强度为2500-3000lx下进行培养；培养温度24±2℃、光照时间为16h/d，相对湿度为65%-75%。
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Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01153087A (ja) * | 1987-12-08 | 1989-06-15 | Shikoku Chem Corp | マリーゴールドの組織培養法 |
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Patent Citations (6)
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|---|---|---|---|---|
| JPH01153087A (ja) * | 1987-12-08 | 1989-06-15 | Shikoku Chem Corp | マリーゴールドの組織培養法 |
| CN101543185A (zh) * | 2009-04-30 | 2009-09-30 | 上海交通大学 | 色素万寿菊的组织培养方法 |
| CN110547200A (zh) * | 2019-09-30 | 2019-12-10 | 李传传 | 一种万寿菊花粉分化培养基及分化培养方法 |
| CN110881407A (zh) * | 2019-11-10 | 2020-03-17 | 华中农业大学 | 一种万寿菊再生体系的构建方法 |
| CN116656593A (zh) * | 2023-06-28 | 2023-08-29 | 云南省农业科学院花卉研究所 | 一种提高色素万寿菊花粉萌发率的培养基 |
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Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Protocol for in vitro regeneration and rapid mass multiplication of apetalous male sterile lines of marigold;Nandeesh Ganiga等;《Indian Journal of Horticulture》;20230327;第80卷(第1期);第110-116页 * |
| 万寿菊再生体系的建立及优化;王亚琴等;《植物学报》;20201110;第55卷(第6期);第749-759页 * |
| 万寿菊花粉活力及柱头可授性研究;赵剑颖;张华丽;张西西;张睿鹂;关雪莲;;中国农学通报;20120705(19);第159-163页 * |
| 万寿菊雄性不育系离体快繁体系的建立;吴丽芳等;《南方农业学报》;20190915;第50卷(第9期);第2029-2035页 * |
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