CN117858873A - ***基丙烯酰胺的杂芳基衍生物和结晶形式的合成方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及制备由结构式(VII)表示的化合物的方法，该方法包括使由结构式(II)表示的化合物与由结构式(III)表示的化合物在溶剂中，在Pd催化剂和一种或多种无机碱的存在下，在适合制备由结构式(VII)表示的化合物的条件下进行反应：结构式(VII)、(II)、和(III)中的变量的值和示例值在本文中定义。本发明还涉及由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I和II、结晶形式在治疗与CRM1相关的疾病或障碍中的用途、以及制备结晶形式的方法。

Description

***基丙烯酰胺的杂芳基衍生物和结晶形式的合成方法

相关申请

本申请要求于2021年5月20日提交的美国临时申请号63/190,987的权益。上述申请的全部教导通过引用并入本文。

背景技术

某些***基丙烯酰胺、尤其是苯基***基丙烯酰胺，可用作选择性核输出抑制剂(SINE)，特别是用作抗癌药物。这样的苯基***基丙烯酰胺通过与输出蛋白1(XPO1或CRM1)结合发挥作用，从而阻断几种参与癌细胞生长的蛋白质从细胞核到细胞质的转运，最终阻止细胞周期并导致细胞凋亡。用于制造这些SINE的合成方法是多步骤方案，需要严格控制条件以确保可接受的产率和立体选择性。需要稳健、高产率的合成方法以在工业规模上生产这样的SINE。

除了需要高产率的合成方法之外，还需要SINE化合物的结晶形式，因为这样的形式在药物组合物的配制中可能很重要。

发明内容

本发明涉及由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I和II、包含结晶形式I和II的组合物、包括施用结晶形式I或结晶形式II或者包含结晶形式I或结晶形式II的组合物以治疗CRM-1相关的疾病或障碍的治疗方法、以及制备由结构式(VII)表示的化合物和该化合物的结晶形式(例如结晶形式I和II)的方法。

在示例实施例中，本发明是制备由结构式(VII)表示的化合物的方法，

该方法包括：使由结构式(II)表示的化合物，

与由结构式(III)表示的化合物，

在第一溶剂中，在Pd催化剂和一种或多种无机碱的存在下，在适合制备由结构式(VII)表示的化合物的条件下进行反应，其中：每个R是氢、C₁-C₄烷基，或两个基团R与它们所附接的氧原子一起形成5-7元环状缩醛部分，从而获得该由结构式(VII)表示的化合物。

在另一示例实施例中，本发明是由结构式(V)表示的化合物

或其盐。

在另一示例实施例中，本发明是由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I：

其中该结晶形式是形式I，其特征在于在2θ角4.6°、22.8°、23.2°、和24.4°处的X射线粉末衍射峰。

在又一示例实施例中，本发明是由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式II：

其中该结晶形式是形式II，其特征在于在2θ角9.9°、19.2°、22.4°、和24.4°处的X射线粉末衍射峰。

在另一实施例中，本发明涉及药物组合物，其包含由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式(例如结晶形式I或结晶形式II)和药学上可接受的载剂。

在另一实施例中，本发明涉及用于治疗或预防CRM1相关的疾病或障碍的方法，该方法包括向有需要的受试者施用治疗或预防有效量的如本文所描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式(例如结晶形式I或结晶形式II)。

在另一实施例中，本发明涉及如本文所描述的结晶形式I或结晶形式II用于在有需要的受试者中治疗如本文所描述的CRM-1相关的疾病或障碍的用途。

在又一实施例中，本发明涉及如本文所描述的结晶形式1或结晶形式II在制造用于在有需要的受试者中治疗如本文所描述的CRM-1相关的疾病或障碍的药物中的用途。

附图说明

通过下面对本发明的示例实施例的更特定的描述，前述内容将变得显而易见，如附图中所示，在附图中，相同的附图标记(reference character)在不同图中指代相同的部分。附图不一定是按比例绘制的，而是重点在于说明本发明的实施例。

图1描绘了根据示例实施例的一个方面的总体合成方案。

图2描述了总结初始Pd催化剂评估结果的表。

图3描述了总结Pd催化反应的反应溶剂的筛选结果的表。

图4是总结无机碱的筛选结果的表。

图5是总结催化反应的反应条件的筛选结果的表。

图6是总结催化剂的筛选结果的表。

图7是总结为检查催化剂化学计量对化学性能的影响而进行的实验结果的表。

图8是总结为探索MB7当量的下限而进行的实验结果的表。

图9是总结铃木偶联的溶剂筛选结果的表。

图10是总结测试二噁烷:水溶剂***的比率的实验结果的表。

图11是总结测试总溶剂体积对铃木偶联反应的影响的结果的表。

图12是总结评估铃木偶联的反应温度的结果的表。

图13是比较铃木偶联的脱气反应和未脱气反应的结果的表。

图14是总结评估pH对铃木偶联反应的影响的实验的表。

图15A和图15B共同呈现了本文披露的合成方法相对于现有程序的显著变化和改进的总结。

图16描绘了整个反应的步骤1的产物的HPLC分析结果。

图17显示了整个反应的步骤2的该批产物的DMSO中的质子NMR。

图18显示了化合物MB3(参见图1)的¹H NMR谱。

图19显示了化合物MB6(5)(参见图1)的¹H NMR。

图20是化合物MB6(5)的结晶形式I的x射线粉末衍射(XRPD)图。

图21是描绘化合物MB6(5)的结晶形式I的差示扫描量热法(DSC)热分析图的图。

图22是描绘化合物MB6(5)的热重分析(TGA)热分析图的图。

图23是化合物MB6(5)的结晶形式I的动态蒸气吸附(DVS)图。

图24是化合物MB6(5)的结晶形式II的XRPD图。

图25是描绘化合物MB6(5)的结晶形式II的DSC热分析图的图。

图26是描绘化合物MB6(5)的结晶形式II的TGA热分析图的图。

具体实施方式

本发明的示例实施例的描述如下。

工艺：

在第一示例实施例中，本发明是制备由结构式(VII)表示的化合物的方法，

在第一示例实施例的第一方面，该方法包括使由结构式(II)表示的化合物，

与由结构式(III)表示的化合物，

在第一溶剂中，在Pd催化剂和一种或多种无机碱的存在下，在适合制备由结构式(VII)表示的化合物的条件下进行反应，其中：每个R是氢、C₁-C₄烷基，或两个基团R与它们所附接的氧原子一起形成5-7元环状缩醛部分，从而获得该由结构式(VII)表示的化合物。

在第二方面，该一种或多种无机碱选自季铵、钠、钾、或碳酸铯、碳酸氢盐、乙酸盐或氢氧化物。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对第一方面所定义。

在第三方面，该Pd催化剂选自氯{[4-(N,N-二甲基氨基)苯基]二-叔丁基膦基}(2’-氨基-1,1’-联苯基-2-基)钯(II)或氯(巴豆基)[二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第二方面所定义。

在第四方面，该由结构式(III)表示的化合物是由结构式(IIIB)表示的化合物：

第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第三方面所定义。

在第五方面，该无机碱是Cs₂CO₃或CsOH，例如Cs₂CO₃。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第四方面所定义。

在第六方面，该Pd催化剂是氯(巴豆基)[二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第五方面所定义。

在第七方面，该第一溶剂是醚溶剂、C1-C4醇、或其组合。例如，该第一溶剂选自MTBE、CPME、THF、二噁烷、MeTHF、甲醇，单独或与水或乙醇组合。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第六方面所定义。

在第八方面，该Pd催化剂负载量为0.5mol％至10mol％。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第七方面所定义。

在第九方面，相对于该由结构式(II)表示的化合物，该无机碱的量为0.5至2摩尔当量的碱。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第八方面所定义。

在第十方面，这些适合制备该由结构式(VII)表示的化合物的条件包括：

-该Pd催化剂负载量为0.5mol％至3mol％；

-相对于该由结构式(II)表示的化合物，该由结构式(III)表示的化合物的量为1.0至2.2摩尔当量；

-相对于该由结构式(II)表示的化合物，该无机碱的量为0.8-1.2总摩尔当量的碱；

-该第一溶剂包含16份至21份的二噁烷以及2份至3份的水；

-反应温度为约55℃至约60℃；以及

-反应时间为约7-8小时。

第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第九方面所定义。

在第十一方面，该方法进一步包括制备该由结构式(II)表示的化合物的步骤，

该步骤通过将由结构式(IV)表示的化合物脱氢溴化，

在第二溶剂中，在有机碱的存在下，在适合生产该由结构式(II)表示的化合物的条件下进行。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第十方面所定义。

在第十二方面，该有机碱是三乙胺或二异丙基乙胺(DIPEA)。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第十一方面所定义。

在第十三方面，该第二溶剂包含乙腈(ACN)。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第十二方面所定义。

在第十四方面，该第二溶剂是80％ ACN/20％水。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第十三方面所定义。

在第十五方面，该方法进一步包括制备该由结构式(IV)5表示的化合物的步骤，

该步骤通过使由结构式(V)表示的化合物，

与溴(Br₂)在第三溶剂中，在溴化物盐的存在下，在适合制备该由结构式(IV)表示的化合物的条件下进行反应来进行。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第十四方面所定义。

在第十六方面，该第三溶剂包含水，并且该溴化物盐是溴化钠。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第十五方面所定义。

在第十七方面，相对于该由结构式(IV)表示的化合物，该第二溶剂包含约11份的ACN和约4份的H₂O，该有机碱是DIPEA，并且其中这些适合制备该由结构式(II)表示的化合物的条件包括：

-相对于该由结构式(IV)表示的化合物，DIPEA的量为约1摩

尔当量；

-反应温度为20℃至25℃；以及

-反应时间为2至3小时。

第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第十六方面所定义。

在第十八方面，该第三溶剂是乙酸。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第十七方面所定义。

在第十九方面，使该由结构式(V)表示的化合物与Br₂在20℃至30℃的温度进行反应，时间持续12小时至16小时。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第十八方面所定义。

在第二十方面，该方法进一步包括制备由结构式(V)表示的化合物的步骤，

该步骤通过用酰胺化剂将由结构式(VI)表示的化合物酰胺化，

在第四溶剂中，在叔胺有机碱和氯甲酸酯的存在下，在适合生产该由结构式(V)表示的化合物的条件下进行。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第十九方面所定义。

在第二十一方面，该酰胺化剂是氢氧化铵，该叔胺有机碱是N-甲基吗啉(NMM)，并且该氯甲酸酯是由以下结构式表示的氯甲酸异丁基酯

第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第二十方面所定义。

在第二十二方面，该第四溶剂是四氢呋喃(THF)或2-甲基四氢呋喃(MeTHF)。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第二十一方面所定义。

在第二十三方面，该第四溶剂是MeTHF，并且其中将该由结构式(VI)表示的化合物酰胺化是在0℃至5℃的温度进行的且持续时间为3小时至4小时。第一示例实施例的其余值和示例值如上文针对它们各自的第一至第二十二方面所定义。

在第二示例实施例中，本发明是由以下结构式表示的化合物

或其盐。

由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I和II以及重结晶方法：

应当理解，除非另有规定，否则术语“约”在涉及温度的数值时意味着该数值具有所列举的数值的±5℃的范围。例如，当所描述的实施例或权利要求叙述“约20℃”的温度时，这应理解为是指20℃±5℃，即，15℃至25℃的温度。

应当理解，除非另有规定，否则术语“约”在涉及时间的数值时意味着该数值具有所列举的数值的±5分钟的范围。例如，当所描述的实施例或权利要求叙述“约60分钟”的时间段时，这应理解为是指60分钟±5分钟，即，55分钟至65分钟的时间段。

应当理解，除非另有规定，否则术语“约”在涉及醇与水体积比的数值时意味着x的数值具有所列举的数值的±5％的范围。例如，当所描述的实施例或权利要求叙述“约70/30”的醇与水体积比时，这应理解为是指75/25至65/35的醇与水体积比。

本文提供了具有结构式(VII)的化合物的结晶形式，指定为结晶形式I和结晶形式II。

如本文所用，“结晶”或“晶体”是指由在组成部分之间具有固定距离的原子、离子或分子(例如，无水分子或其盐、其溶剂化物、或前述的组合)的重复三维模式形成的均质固体。晶胞是该模式中最简单的重复单元。

本文提供的结晶形式可以基于x射线粉末衍射(XRPD)分析中的特征峰来鉴定。XRPD是一种科学技术，可测量粉末或微晶材料散射的x射线、中子或电子作为散射角的函数。XRPD可用于鉴定和表征结晶固体，因为由特定固体产生的衍射图通常与该固体不同，并且可用作“指纹”来鉴定该固体。例如，基本上与参考XRPD图或衍射图一致的XRPD图或衍射图(例如，由样品(例如未知样品)产生的图或衍射图)可用于测定样品材料和参考材料之间的一致性。XRPD衍射图中的峰的位置和相对强度二者都指示材料的特定相和一致性。

本文提供的结晶形式可以是单一结晶形式，或可包含两种或更多种不同结晶形式的混合物。例如，在一些实施例中，由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I作为单一结晶形式提供。可替代地，在其他实施例中，结晶形式可包含由结构式(VII)表示的化合物的两种或更多种结晶形式的混合物。

如本文所用，“单个结晶形式”是指结晶固体的单个晶体或结晶固体的多个晶体，其中多个晶体中的每个具有相同的晶体形式。

图20和24分别显示了如本文所描述的结晶形式I和II的XRPD图。与本文中显示XRPD图或衍射图的一个或多个图“基本上一致”的XRPD图是本领域技术人员认为代表由结构式(VII)表示的化合物(作为提供本文提供的一个或多个图的XRPD图的由结构式(VII)表示的化合物的样品)的相同结晶形式的XRPD图。因此，基本上一致的XRPD图可以与图中的一个相同，或者更可能地可以与一个或多个图有些不同。与一个或多个图有些不同的XRPD图可能不一定显示本文给出的衍射图的每一条线，和/或可能显示线的外观或强度的轻微变化或者线的位置的偏移。这些差异通常由获得数据所涉及的条件的差异或用于获得数据的样品的纯度差异而导致。本领域技术人员能够通过比较样品的XRPD图和本文披露的相应XRPD图来确定结晶化合物的样品是否与本文披露的形式具有相同的形式或不同的形式。

应当理解，本文规定的任何2θ角是指规定值±0.2°。例如，当所描述的实施例或权利要求规定4.4°的2θ时，这应理解为是指4.4°±0.2°，即，4.2°至4.6°的2θ角。

本文提供的结晶形式I和结晶形式II还可以基于差示扫描量热法(DSC)和/或热重分析(TGA)来鉴定。DSC是一种热分析技术，其中升高样品温度所需的热量差作为温度的函数进行测量。DSC可用于检测物理转化，例如样品的相变。例如，DSC可用于检测样品经历结晶、熔融或玻璃化转变所处的温度。

TGA是一种热重量分析方法，其中材料的物理和化学性质的变化作为温度升高(以恒定加热速率)的函数或作为时间(以恒定温度和/或恒定质量损失)的函数进行测量。TGA可以提供关于物理现象(例如二级相变)或关于化学现象(例如去溶剂化和/或分解)的信息。

图21和25分别显示了如本文所描述的结晶形式I和II的DSC热分析图。与本文中显示DSC或TGA热分析图的一个或多个图“基本上一致”的DSC或TGA热分析图是本领域技术人员认为代表由结构式(VII)表示的化合物(作为提供本文提供的一个或多个图的DSC或TGA热分析图的由结构式(VII)表示的化合物的样品)的相同结晶形式的DSC或TGA热分析图。

应当理解，本文规定的与DSC或TGA相关的任何温度是指规定值±5℃或更低。例如，当实施例或权利要求规定了在约184℃处的吸热峰时，这应理解为是指184℃±5℃或更低，即，179℃至189℃的温度。在优选的实施例中，DSC或TGA温度是规定值±3℃，在更优选的实施例中是±2℃。

所提供的结晶形式I还可通过动态蒸气吸附(DVS)来表征，其中使样品经受变化的湿度和温度条件，并通过重量分析测量样品的响应。特别地，DVS分析的结果可以是提供作为相对湿度(RH)随时间的函数的样品重量百分比的双曲线、提供作为RH随时间的函数的样品水含量的双曲线、提供相对于RH的重量百分比的曲线、或提供相对于RH的水含量的曲线。用于测量这样的数据的设备是本领域已知的，并且任何这样的设备均可用于测量根据本披露的化合物。在某些实施例中，DVS分析可以通过在一系列特定RH值下扫描来进行。因此，根据本披露的特定多晶型物可以相对于在DVS分析中获得的代表性图和/或近似峰来鉴定和描述，特别是以5％或10％ RH的步长间隔从0％至95％ RH扫描。

图23显示了本文描述的结晶形式I的DVS图。与本文中显示DVS图的一个或多个图“基本上一致”的DVS图是本领域技术人员认为代表由结构式(VII)表示的化合物(作为提供本文提供的一个或多个图的DVS图的由结构式(VII)表示的化合物的样品)的相同结晶形式的DVS图。

在一些实施例中，本文提供的结晶形式可以是由结构式(VII)表示的化合物所表示的化合物的结晶形式，其中该化合物为溶剂化物的形式。如本文所用，“溶剂化物”是指通过溶质(例如，具有结构式(VII)的化合物)和一种或多种溶剂(例如，甲醇、乙醇、水)的相互作用而形成的化学化合物。因此，“溶剂化物”包括含有单个类型的溶剂分子的溶剂化物和含有多于一种类型的溶剂分子的溶剂化物(混合溶剂化物或共溶剂化物)。通常，本文描述的溶剂化物中的一种或多种溶剂是有机溶剂或有机溶剂的组合，尽管水也可以形成溶剂化物(称为水合物)。

形式I

在第三示例实施例中，本发明是由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式，其中该结晶形式是形式I，并且其特征在于在2θ角4.6°、22.8°、23.2°、和24.4°处的x射线粉末衍射峰；在选自4.6°、20.0°、22.8°、23.2°、和24.4°的2θ角处的至少四个x射线粉末衍射峰；或在选自4.6°、19.0°、20.0°、22.8°、23.2°、23.7°、24.4°、和27.9°的2θ角处的至少五个x射线粉末衍射峰。在第三示例实施例的一些方面，结晶形式I的特征在于x射线粉末衍射图基本上与图20中所描绘的一致。

结晶形式I的进一步的特征可在于差示扫描量热法热分析图包含在约225℃处的尖锐吸热峰(与熔融一致)。在第三实施例的一些方面，DSC热分析图基本上与图21中的一致。在第三实施例的一些方面，TGA热分析图基本上与图22中的一致。

结晶形式I的特征还可在于动态蒸气吸附图显示从0至90％RH的可逆的0.12％w/w水吸附。在第三实施例的一些方面，DVS图基本上与图23中的一致。

形式II

在第四示例实施例中，本发明是由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式，其中该结晶形式是形式II，并且其特征在于在2θ角9.9°、19.2°、22.4°、和24.4°处的x射线粉末衍射峰；在选自9.9°、19.2°、22.4°、23.5°、和24.4°的2θ角处的至少四个x射线粉末衍射峰；或在选自9.9°、19.2°、21.3°、21.9°、22.4°、23.5°、24.4°、和29.2°的2θ角处的至少五个x射线粉末衍射峰。在第四实施例的一些方面，结晶形式VI的特征在于x射线粉末衍射图基本上与图24中所描绘的一致。

结晶形式II的进一步的特征可在于差示扫描量热法热分析图包含在约112℃处的宽吸热峰(与去溶剂化一致)和在约225℃处的尖锐吸热峰(与熔融一致)。在第四实施例的一些方面，DSC热分析图基本上与图25中的一致。在第四实施例的一些方面，TGA热分析图基本上与图26中的一致。

结晶形式II可以是由结构式(VII)表示的化合物所表示的化合物的结晶形式，其中该化合物为溶剂化物的形式。例如，具有结构式(VII)的化合物是甲醇溶剂化物。

分离形式I的重结晶程序：

在第五示例实施例中，本发明是制备由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I的方法

该方法包括：(a)使该由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式II与约18体积的4-甲基-2-戊烷酮(MIBK)接触以形成混合物；(b)将步骤(a)的混合物加热至约80℃-85℃，以形成加热的混合物；(c)任选地将SiDMT添加至步骤(b)的加热的混合物中；(d)将该加热的混合物维持在约80℃-85℃的温度约4.5小时；(e)将该加热的混合物过滤，以获得滤液；(f)在约80℃-85℃的温度将MIBK添加至该滤液中；(g)通过将该滤液冷却至约20℃-25℃来诱导该滤液中形式I的成核；(h)通过该滤液的受控冷却结晶来使形式I结晶，最终温度为0℃-5℃；以及(i)从该滤液中分离结晶形式I。在一个方面，通过过滤从滤液中分离结晶形式I。

定义

本发明的化合物包括在上文中总体上描述的那些，并且通过本文披露的类别、亚类和种类进一步说明。如本文所用，除非另有说明，否则以下定义应适用。出于本发明的目的，根据元素周期表,CAS版本,Handbook of Chemistry and Physics[化学和物理手册],第75版对这些化学元素进行鉴定。另外，有机化学的一般原则描述于“Organic Chemistry[有机化学]”,Thomas Sorrell,University Science Books[大学科学书籍出版社],索萨利托:1999，以及“March’sAdvanced Organic Chemistry[马奇的高等有机化学]”,第5版,Smith,M.B.和March,J.编辑，约翰威利父子出版公司(John Wiley&Sons),纽约:2001中，将它们的全部内容通过引用特此并入。

除非本说明书中另有规定，否则本说明书中使用的命名法总体上遵循在Nomenclature of Organic Chemistry[有机化学命名法],A、B、C、D、E、F、和H章节,帕加马出版社(Pergamon Press),牛津,1979中陈述的实例和规则，其中其示例性化学结构名称及关于化学结构命名的规则通过引用并入本文。任选地，可以使用化学命名程序生成化合物的名称：ACD/ChemSketch,第5.09版/2001年9月,Advanced Chemistry Development,Inc.(高等化学发展公司),多伦多,加拿大。

本发明的化合物可以具有不对称中心、手性轴以及手性平面(例如，如描述于以下中：E.L.Eliel和S.H.Wilen,Stereo-chemistry of Carbon Compounds[碳化合物的立体化学],约翰威利父子出版公司,纽约,1994,第1119-1190页)，并且作为外消旋体、外消旋混合物以及单独的非对映异构体或对映异构体存在，其中所有可能的异构体及其混合物(包括旋光异构体)均包括在本发明中。

如本文所用，“醚溶剂”是包括C-O-C部分的有机溶剂。实例包括：叔戊基乙基醚、环戊基甲基醚(CPME)、二-叔丁基醚、二(丙二醇)甲基醚、二丁基醚、二***、二异丙基醚、二甲氧基乙烷、二甲氧基甲烷、1,4-二噁烷(二噁烷)、乙基叔丁基醚、甲氧基乙烷、2-(2-甲氧基乙氧基)乙醇、甲基叔丁基醚(MBTE)、吗啉、聚乙二醇、丙二醇甲基醚、四氢呋喃(THF)、2-甲基-THF(MeTHF)、四氢糠醇、四氢吡喃、2,2,5,5-四甲基四氢呋喃。

如本文所用，除非另有说明，否则术语“烷基”意指直链的或支链的饱和单价烃基，通常是C₁-C₁₂、优选C₁-C₆。因此，“C₁-C₆烷基”意指具有一至六个碳原子(例如，1、2、3、4、5或6个)的直链的或支链的饱和单价烃基。烷基基团的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基和叔丁基。

如本文所用，术语“烷氧基”意指“烷基-O-”基团，其中烷基如上文所定义。烷氧基的实例包括甲氧基和乙氧基。

如本文所用，术语“烯基”意指具有2至12个碳原子并且具有至少一个碳-碳双键的饱和直链的或支链的非环状烃。烯基基团可任选地被一个或多个取代基取代。术语“烯基”或其任何结构描述涵盖具有“顺式”和“反式”或可替代地“E”和“Z”构型的碳-碳双键的基团。如果烯基基团包括多于一个碳-碳双键，则每个碳-碳双键独立地是顺式或反式双键、或其混合物。

如本文所用，术语“氨基”包括单烷基氨基和二烷基氨基基团，并且是指具有式-N(R)₂的化学部分，其中每个R独立地选自氢和C₁-C₄烷基。

如本文单独或组合使用的术语“芳基”意指含有一个或多个环的碳环芳族***，这些环可以以悬垂方式附接在一起或可以稠合。在特定的实施例中，芳基是一个、两个或三个环。在一个方面，芳基具有六至十二个环原子。术语“芳基”涵盖芳族基团，例如苯基、萘基、四氢萘基、茚满基、联苯基、菲基、蒽基和苊基(acenaphthyl)。芳基基团可以如本文所定义和描述任选地被取代。

如本文所用，术语“卤代”或“卤素”意指处于放射性和非放射性形式的卤素，并且包括例如但不限于氟、氯、溴、碘等。在优选的实施例中，卤代选自由氟、氯和溴组成的组。

如本文所用，术语“卤代烷基”包括被一个或多个F、Cl、Br或I取代的烷基，其中烷基如上文所定义。

如本文所用，术语“杂芳基”是指含有一个或多个杂原子(例如，独立地选自O、S和N的一个或多个杂原子)的芳族基团。杂芳基基团可以是单环的或多环的，例如与一个或多个碳环芳族基团或其他单环杂芳基基团稠合的单环杂芳基环。本发明的杂芳基基团还可以包括被一个或多个氧代部分取代的环***。在一个方面，杂芳基具有五至十五个环原子，并且优选5或6个环原子。杂芳基基团的实例包括但不限于吡啶基、哒嗪基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、***基、吡嗪基、喹啉基、异喹啉基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、吲嗪基、酞嗪基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、嘌呤基、噁二唑基、噻唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并苯硫基、苯并***基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、二氢喹啉基、四氢喹啉基、二氢异喹啉基、四氢异喹啉基、苯并呋喃基、呋喃并吡啶基、吡咯并嘧啶基、和氮杂吲哚基。前述杂芳基基团可以是C-附接的或N-附接的(如果可能的话)。例如，衍生自吡咯的基团可以是吡咯-1-基(N-附接的)或吡咯-3-基(C-附接的)。

“羟基”意指-OH。

“氧代”意指＝O。

“巯基”意指–SH。

“氰基”意指–CN。

“硫代烷氧基”和“硫代烷基”分别意指–S-烷氧基和-S-烷基，其中烷氧基和烷基如上文所定义。

“嘧啶基”是衍生自嘧啶环的基团，无论是取代的还是未取代的

“二噁烷”是由以下结构式表示的化合物

如本文所用，术语“缩醛”是指由以下结构式表示的部分

其中“原子”意指可以与两个氧原子形成共价键的任何原子、例如碳或硼，并且波浪线表示与其他原子的附接点。环状缩醛部分是其中“原子”和与其附接的两个氧原子一起形成环状基团的缩醛。环状缩醛部分的实例是由以下结构式表示的基团：

如本文所用，“无机碱”是指不包括有机部分的碱。实例包括金属(NH₄ ⁺、Li、K、Na、K、Rb、Cs、Mg、Ca、Ba、Sr等)氢氧化物、磷酸盐、乙酸盐、碳酸盐和碳酸氢盐。另外的实例包括Na、K或Cs碳酸盐或碳酸氢盐、磷酸盐、乙酸盐和氢氧化物。无机碱的另一个实例是季铵盐。在一些示例实施例中，无机碱是CsOH或Cs₂CO₃。

“有机碱”是根据任一公认的碱定义(阿伦尼乌斯(Arrhenius)、布朗斯台德(Bronsted)或路易斯(Lewis))充当碱的有机碱。

如本文所用，“Pd催化剂”是指能够促进由结构式(II)表示的化合物与由结构式(III)表示的化合物之间的反应产生由结构式(VII)表示的化合物的任何含Pd材料，无论是预先形成还是通过添加含Pd材料和单独的配体原位形成。这样的催化剂的实例是选自氯{[4-(N,N-二甲基氨基)苯基]二-叔丁基膦基}(2’-氨基-1,1’-联苯基-2-基)钯(II)或氯(巴豆基)[二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)的Pd催化剂。

应当理解，本发明化合物上的取代基和取代模式可以由本领域普通技术人员选择，以提供化学稳定的并且可以容易地通过本领域已知的技术以及下述那些方法合成的化合物。一般而言，术语“取代的”，无论其前面是否有术语“任选地”，意指指定部分的一个或多个氢被合适的取代基替代。除非另有说明，否则“任选地被取代的基团”可在该基团的每个可取代的位置处具有合适的取代基，并且当任一给定结构中的多于一个位置可以被多于一个选自指定基团的取代基取代时，在每个位置处的取代基可以是相同的或者不同的。可替代地，“任选地被取代的基团”可以是未取代的。

任一烷基、芳基或杂芳基上的示例取代基可以选自由以下组成的组：-OH、-SH、硝基(-NO₂)、卤素、氨基、氰基、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₁₂烯基、C₂-C₁₂炔基、C₁-C₁₂烷氧基、C₁-C₁₂卤代烷基、C₁-C₁₂卤代烷氧基和C₁-C₁₂硫代烷氧基。烷基上的示例取代基包括上述取代基和氧代。在一个实施例中，取代基是具有式-N(R)₂的氨基基团，其中每个R独立地选自氢和C₁-C₄烷基。

药物组合物

在第六示例实施例中，本披露涉及药物组合物，其包含根据第三实施例的任一方面的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I和药学上可接受的载剂。例如，药物组合物包含由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I(其特征在于在2θ角4.6°、22.8°、23.2°、和24.4°处的x射线粉末衍射峰)和药学上可接受的载剂。

术语“药学上可接受的载剂”意指与活性成分混合以允许形成药物组合物(即，能够向受试者施用的剂型)的无毒溶剂、分散剂、赋形剂、辅助剂或其他材料。“药学上可接受的载剂”不应破坏与其进行配制的化合物的活性。药学上可接受的载剂在本领域中是熟知的。

可以在本披露的药物组合物中使用的药学上可接受的载剂、辅助剂或媒介物包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、缓冲物质(例如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质(例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐)、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。

本披露的药物组合物可以口服、肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内和皮内)、通过吸入喷雾、局部、直肠、鼻腔、口腔、***或经由植入型储器而施用。在一些实施例中，所提供的药物组合物口服施用。

如本文所用，术语“肠胃外”包括皮下、静脉内、肌内、眼内、玻璃体内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、腹膜内、病灶内和颅内注射或输注技术。在特定的实施例中，口服、皮下、腹膜内或静脉内施用药物组合物。本披露的药物组合物的无菌可注射形式可以是水性悬浮液或油质悬浮液。这些悬浮液可以根据本领域已知的技术使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂来配制。无菌可注射制剂也可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如作为在1,3-丁二醇中的溶液。可采用的可接受的媒介物和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，常规采用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。

本披露的药物组合物可以以任何口服可接受的剂型(包括但不限于胶囊、片剂、水性悬浮液或溶液)口服施用。在用于口服使用的片剂的情况下，常用的载剂包括乳糖和玉米淀粉。通常还添加润滑剂，例如硬脂酸镁。对于胶囊形式的口服施用，有用的稀释剂包括乳糖和干玉米淀粉。当需要用于口服使用的水性悬浮液时，将活性成分与乳化剂和悬浮剂组合。如果需要，也可以添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。在一些实施例中，所提供的口服配制品被配制用于立即释放或持续/延迟释放。在一些实施例中，组合物适用于口腔或舌下施用，包括片剂、锭剂和软锭剂。所提供的化合物也可以是微胶囊形式。

适用于口服配制品(例如片剂或胶囊)的特定的药学上可接受的载剂包括但不限于微晶纤维素(Avicel PH101)、交联羧甲基纤维素钠(Ac-Di-Sol)、kollidon 30粉末(聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮)、胶体二氧化硅M5-P、硬脂酸镁、微晶纤维素(Avcel PH102)、十二烷基硫酸钠(Kolliphor SLS Fine)和胶体二氧化硅M5-P。上文列出的每种载剂可以单独或以任何组合用于口服配制品中。

适用于口服配制品(例如片剂或胶囊)的另外的药学上可接受的载剂包括但不限于微晶纤维素(Avicel PH112)、交聚维酮(polyplasdone XL-10)、胶体二氧化硅(Cab-O-Sil M-5P)、滑石粉、淀粉和硬脂酸钙。

本披露的药物组合物还可以通过鼻用气溶胶或吸入来施用。

本披露的药物组合物中由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I的量使得其可有效地可测量地治疗或预防受试者中与CRM1活性相关的障碍。如本文所用，术语“受试者”可以是人受试者或动物。

可以与药学上可接受的载剂材料组合以产生单一剂型的药物组合物的结晶形式I的量将根据所治疗的宿主和/或特定的施用模式而变化。在一个实施例中，药物组合物应配制为使得可以向接受这些组合物的患者施用剂量为0.01-200mg的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I。在另一实施例中，剂量为约0.5至约100mg。该剂量可以每天施用一次或每天施用多次，并且可以在给定的治疗周期内每周施用一次或每周施用多次(例如第1天、第3天和第5天)。

还应理解，针对任何特定受试者(例如，患者)的特定剂量和治疗方案将取决于多种因素，包括年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、***率、药物组合、以及治疗医生的判断和所治疗的特定疾病的严重程度。

当受试者的病症改善时，如果需要，可以施用维持剂量的本披露的药物组合物。随后，随着症状的变化，在症状已减轻到所希望的水平时可以将施用的剂量或频率或两者减少至维持病症改善的水平。然而，一旦疾病症状出现任何复发，就可能需要对受试者进行长期的间歇治疗。

结晶形式I和包含其的药物组合物的治疗方法和用途

本文披露的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I和包含其的药物组合物通常可用于抑制CRM1，并因此可用于治疗与CRM1活性相关的一种或多种障碍。因此，在第七实施例中，本披露提供了用于治疗与CRM1活性相关的障碍的方法，该方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的如本文所描述的结晶形式I或包含结晶形式I和药学上可接受的载剂的药物组合物。结晶形式I和包含其的药物组合物还可以施用于培养物中的细胞(例如体外或离体)，或施用于受试者(例如体内)，以治疗、预防和/或诊断多种障碍，包括下文描述的那些。

结晶形式I和包含其的药物组合物作为CRM1抑制剂的活性可以在体外、体内或在细胞系中测定。用于测定CRM1抑制剂(例如由结构式I表示的化合物的结晶形式I)的详细条件在国际公开号WO 14/205389中阐述。

术语“治疗(treat或treating)”是指减轻症状，消除症状的起因(暂时地或永久地)，或者预防或减缓指定障碍或病症的症状的出现。

如本文所用，术语“CRM1-介导的”障碍或病症或者“与CRM1活性相关的障碍”意指已知CRM1在其中发挥作用的任何疾病或其他有害病症。因此，本披露的另一实施例涉及治疗已知CRM1在其中发挥作用的一种或多种疾病或者缓解其严重程度。在一些实施例中，本披露提供了治疗受试者的与p53、p73、p21、pRB、p27、INB、NFNB、c-Abl、FOXO蛋白、COX-2或HDAC(组蛋白脱乙酰酶)的表达或活性相关的疾病的方法，这些方法包括向该受试者施用治疗有效量的本文描述的结晶形式I。在另一实施例中，本披露涉及治疗选自以下的疾病或病症或者缓解其严重程度的方法：增生性障碍(例如，癌症)、炎性障碍、自身免疫性障碍、病毒感染、眼科障碍或神经退行性障碍，其中所述方法包括向有需要的患者施用由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或包含形式I和药学上可接受的载剂的药物组合物。在更特定的实施例中，本披露涉及治疗癌症或者缓解其严重程度的方法。上述障碍的特定实例在下文详细阐述。

术语“治疗有效量”意指由结构式(VII)表示的化合物的晶体形式I的量，该量有效地治疗障碍或病症的一种或多种症状或者缓解其严重程度。在促进伤口愈合的情况下，治疗有效量是促进伤口愈合的量。

如本文所用，术语“预防(prophylaxis)”或“预防性(prophylactic)”是指在疾病发作之前预防疾病或增加对疾病的抵抗力所采取的措施，以及在疾病发作之前改善疾病的症状的措施。预防还包括为防止疾病复发而采取的措施。

术语“预防有效量”意指由结构式(VII)表示的化合物的晶体形式I的量，该量有效地预防可由这种化合物治疗的病症。

如本文所用，“促进伤口愈合”意指治疗具有伤口的受试者并且部分或完全地实现伤口愈合。促进伤口愈合可以意味着例如以下中的一项或多项：促进表皮闭合；促进真皮迁移；促进真皮中的真皮闭合；减少伤口愈合并发症，例如表皮增生和粘连；减少伤口开裂；以及促进正确结痂。

在一些实施例中，本披露涉及用于促进有需要的受试者的伤口愈合的方法，该方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物。

可通过本文描述的由结构式VII表示的化合物的结晶形式I或药物组合物治疗的癌症包括但不限于血液***恶性肿瘤(白血病，淋巴瘤，骨髓瘤，包括多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征和骨髓增生性障碍)和实体瘤(***癌、乳腺癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌、肾癌、卵巢癌以及软组织癌等、及骨肉瘤和间质肿瘤)。乳腺癌(BC)可包括基底样乳腺癌(BLBC)、三阴性乳腺癌(TNBC)以及同时为BLBC和TNBC的乳腺癌。此外，乳腺癌可包括侵袭性或非侵袭性导管癌或小叶癌，乳腺的管状癌、髓质癌、粘液癌、***状癌、筛状癌，男性乳腺癌，复发性或转移性乳腺癌，乳腺叶状肿瘤以及***佩吉特病(Paget’s disease)。在一个实施例中，癌症是多发性骨髓瘤。

可通过本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物治疗的炎性障碍包括但不限于多发性硬化症、类风湿性关节炎、退行性关节疾病、***性狼疮、***性硬化症、血管炎综合征(小血管、中血管和大血管)、动脉粥样硬化、炎性肠病、肠易激综合征、克罗恩病、粘液性结肠炎、溃疡性结肠炎、胃炎、脓毒症、牛皮癣和其他皮肤科炎性障碍(例如湿疹、特应性皮炎、接触性皮炎、荨麻疹、硬皮病和具有急性炎性成分的皮肤病、天疱疮、类天疱疮、过敏性皮炎)和荨麻疹综合征。

可通过本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物治疗的病毒性疾病包括但不限于急性发热性咽炎、咽结膜热、流行性角结膜炎、小儿胃肠炎、柯萨奇感染、传染性单核细胞增多症、伯基特淋巴瘤、急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌、原发性HSV-1感染(例如儿童龈口炎、成人扁桃体炎和咽炎、角结膜炎)、潜伏性HSV-1感染(例如唇疱疹和嘴边疱疹)、原发性HSV-2感染、潜伏性HSV-2感染、无菌性脑膜炎、传染性单核细胞增多症、巨细胞包涵体病、卡波西肉瘤、多中心卡斯尔曼病、原发性渗出性淋巴瘤、AIDS、流感、雷氏综合征(Reye syndrome)、麻疹、感染后脑脊髓炎、流行性腮腺炎、增生性上皮病变(例如常见疣、扁平疣、足底疣和***生殖器疣，喉***状瘤，疣状表皮发育不良)、***、鳞状细胞癌、哮吼、肺炎、细支气管炎、普通感冒、脊髓灰质炎、狂犬病、流感样综合征、严重细支气管炎伴肺炎、德国麻疹、先天性风疹、水痘和带状疱疹。可通过本披露的化合物治疗的病毒性疾病还包括慢性病毒性感染，包括乙型肝炎和丙型肝炎。另外，可通过本披露的化合物治疗的病毒性疾病包括由冠状病毒引起的感染，例如SARS、MERS、和SARS-CoV-2。

可通过本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物治疗的示例性眼科障碍包括但不限于黄斑水肿(糖尿病的和非糖尿病的黄斑水肿)、与年龄有关的黄斑湿性和干性变性、年龄性盘状黄斑变性、囊样黄斑水肿、眼睑水肿、视网膜水肿、糖尿病性视网膜病变、脉络膜视网膜病变、新生血管性黄斑病变、新生血管性青光眼、葡萄膜炎、虹膜炎、视网膜脉管炎、眼内炎、全眼球炎、转移性眼炎、脉络膜炎、视网膜色素上皮炎、结膜炎、睫状体炎、巩膜炎、巩膜外层炎、视神经炎、球后视神经炎、角膜炎、睑炎、渗出性视网膜脱离、角膜溃疡、结膜溃疡、慢性钱币状角膜炎、与组织缺氧或局部缺血相关的眼科疾病、早产儿视网膜病变、糖尿病增生性视网膜病变、息肉状脉络膜血管病变、视网膜血管瘤样增生、视网膜动脉闭塞、视网膜静脉闭塞、科茨氏病(Coats'disease)、家族性渗出性玻璃体视网膜病变、无脉病(高安氏病(Takayasu's disease))、视网膜静脉周围炎、抗磷脂抗体综合征、白血病性视网膜病变、血液高粘滞综合征、巨球蛋白血症、干扰素相关的视网膜病变、高血压性视网膜病变、放射性视网膜病变、角膜上皮干细胞缺乏或白内障。

可通过本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物治疗的神经退行性疾病包括但不限于帕金森病、阿尔茨海默病、和亨廷顿病、以及肌萎缩性侧索硬化症(ALS/卢·格里克病(Lou Gehrig’s Disease))。

本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物还可用于治疗异常组织生长和纤维化的障碍，包括扩张型心肌病、肥厚型心肌病、限制性心肌病、肺纤维化、肝纤维化、肾小球肾炎、多囊肾脏障碍(PKD)和其他肾脏障碍。

本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物还可用于治疗与食物摄入相关的障碍，例如肥胖和食欲过盛。

在另一实施例中，本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物可用于治疗或预防过敏和呼吸***障碍，包括哮喘、支气管炎、肺纤维化、过敏性鼻炎、氧中毒、肺气肿、慢性支气管炎、急性呼吸窘迫综合征和任何慢性阻塞性肺病(COPD)。

在一些实施例中，与CRM1活性相关的且可通过由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I治疗的障碍或病症是β-地中海贫血、肌肉萎缩、关节炎(例如骨关节炎和类风湿性关节炎)、强直性脊柱炎、外伤性脑损伤、脊髓损伤、脓毒症、风湿性疾病、癌性动脉粥样硬化、1型糖尿病、2型糖尿病、钩端螺旋体肾病、青光眼、视网膜疾病、老化、头痛、疼痛、复杂区域疼痛综合征、心脏肥大、肌肉耗损、分解代谢障碍、肥胖、胎儿生长迟缓、高胆固醇血症、心脏病、慢性心力衰竭、局部缺血/再灌注、中风、脑动脉瘤、心绞痛、肺病、囊性纤维化、酸诱发的肺损伤、肺动脉高压、哮喘、慢性阻塞性肺病、干燥综合征、透明膜病、肾病、肾小球疾病、酒精性肝病、肠疾病、腹膜性子宫内膜异位、皮肤病、鼻窦炎、间皮瘤、无汗型外胚层性发育异常-ID、贝切特病、色素失调症、结核病、哮喘、克罗恩病、结肠炎、眼部过敏、阑尾炎、佩吉特病、胰腺炎、牙周炎、子宫内膜异位、炎性肠病、炎性肺病、二氧化硅诱发的疾病、睡眠呼吸暂停、AIDS、HIV-1、自身免疫性疾病、抗磷脂综合征、狼疮、狼疮肾炎、家族性地中海热、遗传性周期性发热综合征、心理社会应激性疾病、神经病理学疾病、家族性淀粉样多神经病、炎性神经病、帕金森病、多发性硬化症、阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症、亨廷顿病、白内障、或听力损失。

在其他实施例中，与CRM1活性相关的障碍或病症是头部损伤、葡萄膜炎、炎性疼痛、过敏原诱发的哮喘、非过敏原诱发的哮喘、肾小球肾炎、溃疡性结肠炎、坏死性肠结肠炎、高免疫球蛋白血症D伴周期性发热(HIDS)、TNF受体相关周期综合征(TRAPS)、隐热蛋白相关周期综合征、穆-韦综合征(荨麻疹耳聋淀粉样变性),家族性冷性荨麻疹、新生儿发病的多***炎性疾病(NOMID)、周期热、口疮性口炎、咽炎和腺炎(PFAPA综合征)、布劳综合征、化脓性无菌性关节炎-坏疽性脓皮病-痤疮综合征(PAPA)、白细胞介素-1受体拮抗因子缺乏(DIRA)、蛛网膜下腔出血、多囊肾病、移植、器官移植、组织移植、骨髓增生异常综合征、刺激物诱发的炎症、植物刺激物诱发的炎症、毒藤/漆酚原油诱发的炎症、化学刺激物诱发的炎症、蜂蜇伤诱发的炎症、昆虫叮咬诱发的炎症、日晒病、烧伤、皮炎、内毒素血症、肺损伤、急性呼吸窘迫综合征、酒精性肝炎、或由寄生虫感染引起的肾损伤。

在另外的方面，本披露涉及本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物在制造用于治疗与CRM1活性相关的障碍的药物中的用途。本披露还涉及本文描述的结晶形式I或药物组合物，用于在治疗与CRM1活性相关的障碍中使用。与CRM1活性相关的障碍的特定实例如本文详细阐述。

在又另外的方面，本披露涉及本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物在制造以下药物中的用途，该药物用于治疗受试者的与p53、p73、p21、pRB、p27、INB、NFNB、c-Abl、FOXO蛋白、COX-2或HDAC的表达或活性相关的疾病。在一些实施例中，本披露涉及本文描述的结晶形式I或药物组合物在制造以下药物中的用途，该药物用于治疗癌症和/或肿瘤性障碍、血管生成、自身免疫性障碍、炎性障碍和/或疾病、表观遗传学、激素障碍和/或疾病、病毒性疾病、神经退行性障碍和/或疾病、伤口和眼科障碍中的任一种。

在一些实施例中，本披露涉及用于抑制生物样品中CRM1的方法，该方法包括使该生物样品与本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物接触，或向患者施用本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物。

肿瘤性障碍

本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物可用于***性障碍。“肿瘤性障碍”是以具有自主生长或复制能力的细胞为特征的疾病或障碍，例如以增殖性细胞生长为特征的异常状态或病症。示例性肿瘤性障碍包括：癌、肉瘤、转移性障碍(例如源自***、脑、骨、结肠、肺、乳腺、卵巢和肝来源的肿瘤)、造血肿瘤性障碍(例如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤和其他恶性浆细胞障碍)、以及转移性肿瘤。常见的癌症包括：乳腺癌、***癌、结肠癌、肺癌、肝癌和胰腺癌。使用化合物的治疗可以处于有效量，从而改善肿瘤性障碍的至少一种症状，例如减少细胞增殖、降低肿瘤质量等。

本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物可用于预防和治疗癌症，包括例如实体瘤、软组织肿瘤及其转移，以及家族性癌症综合征，例如李-佛美尼综合征、家族性乳腺癌-卵巢癌(BRCA1或BRAC2突变)综合征等。本文描述的结晶形式I或药物组合物还可用于治疗非实体癌。示例性实体瘤包括不同器官***的恶性肿瘤(例如，肉瘤、腺癌以及癌)，例如肺、乳腺、淋巴、胃肠道(例如，结肠)和泌尿生殖道(例如，肾脏、尿路上皮或睾丸肿瘤)、咽、***以及卵巢的那些恶性肿瘤。示例性腺癌包括结肠直肠癌、肾细胞癌、肝癌、非小细胞肺癌以及小肠癌。

由美国国家癌症研究所(National Cancer Institute)描述的示例性癌症包括：急性成淋巴细胞性白血病，成人；急性成淋巴细胞性白血病，儿童；急性髓性白血病，成人；肾上腺皮质癌；肾上腺皮质癌，儿童；AIDS相关的淋巴瘤；AIDS相关的恶性肿瘤；***癌；星形细胞瘤，儿童小脑；星形细胞瘤，儿童大脑；胆管癌，肝外的；膀胱癌；膀胱癌，儿童；骨癌，骨肉瘤/恶性纤维组织细胞瘤；脑干神经胶质瘤，儿童；脑肿瘤，成人；脑肿瘤，脑干神经胶质瘤，儿童；脑肿瘤，小脑星形细胞瘤，儿童；脑肿瘤，大脑星形细胞瘤/恶性神经胶质瘤，儿童；脑肿瘤，室管膜瘤，儿童；脑肿瘤，成神经管细胞瘤，儿童；脑肿瘤，幕上原始神经外胚层肿瘤，儿童；脑肿瘤，视神经通路和下丘脑神经胶质瘤，儿童；脑肿瘤，儿童(其他)；乳腺癌；乳腺癌和妊娠；乳腺癌，儿童；乳腺癌，男性；支气管腺瘤/类癌瘤，儿童；类癌肿瘤，儿童；类癌肿瘤，胃肠的；癌，肾上腺皮质的；癌，胰岛细胞；原发灶不明癌；中枢神经***淋巴瘤，原发性；小脑星形细胞瘤，儿童；大脑星形细胞瘤/恶性神经胶质瘤，儿童；***；儿童癌症；慢性淋巴细胞性白血病；慢性粒细胞性白血病；慢性骨髓增生性障碍；腱鞘透明细胞肉瘤；结肠癌；结肠直肠癌，儿童；皮肤T细胞淋巴瘤；子宫内膜癌；室管膜瘤，儿童；上皮癌，卵巢；食管癌；食管癌，儿童；尤因氏家族肿瘤；颅外生殖细胞瘤，儿童；性腺外生殖细胞瘤；肝外胆管癌；眼癌，眼内黑色素瘤；眼癌，成视网膜细胞瘤；胆囊癌；胃(Gastric，Stomach)癌；胃(Gastric，Stomach)癌，儿童；胃肠类癌肿瘤；生殖细胞瘤，颅外的，儿童；生殖细胞瘤，性腺外的；生殖细胞瘤，卵巢；妊娠性滋养细胞肿瘤；神经胶质瘤，儿童脑干；神经胶质瘤，儿童视神经通路和下丘脑；毛细胞白血病；头颈癌；肝细胞(肝)癌，成人(原发性)；肝细胞(肝)癌，儿童(原发性)；霍奇金淋巴瘤，成人；霍奇金淋巴瘤，儿童；妊娠期间的霍奇金淋巴瘤；下咽癌；下丘脑和视神经通路神经胶质瘤，儿童；眼内黑色素瘤；胰岛细胞癌(内分泌胰腺)；卡波西肉瘤；肾癌；喉癌；喉癌，儿童；白血病，急性成淋巴细胞性的，成人；白血病，急性成淋巴细胞性的，儿童；白血病，急性髓性的，成人；白血病，急性髓性的，儿童；白血病，慢性淋巴细胞性的；白血病，慢性粒细胞性的；白血病，毛细胞；唇和口腔癌；肝癌，成人(原发性)；肝癌，儿童(原发性)；肺癌，非小细胞；肺癌，小细胞；成淋巴细胞性白血病，成人急性；成淋巴细胞性白血病，儿童急性；淋巴细胞性白血病，慢性；淋巴瘤，AIDS相关的；淋巴瘤，中枢神经***(原发性)；淋巴瘤，皮肤T细胞；淋巴瘤，霍奇金，成人；淋巴瘤，霍奇金，儿童；淋巴瘤，妊娠期间的霍奇金；淋巴瘤，非霍奇金，成人；淋巴瘤，非霍奇金，儿童；淋巴瘤，妊娠期间的非霍奇金；淋巴瘤，原发性中枢神经***；巨球蛋白血症，瓦尔登斯特伦；男性乳腺癌；恶性间皮瘤，成人；恶性间皮瘤，儿童；恶性胸腺瘤；成神经管细胞瘤，儿童；黑色素瘤；黑色素瘤，眼内的；默克尔细胞癌；间皮瘤，恶性的；隐匿原发性转移性鳞状颈癌；多发性内分泌肿瘤综合征，儿童；多发性骨髓瘤/浆细胞肿瘤；蕈样霉菌病；骨髓增生异常综合征；粒细胞性白血病，慢性；髓性白血病，儿童急性；骨髓瘤，多发性；骨髓增生性障碍，慢性；鼻腔和副鼻窦癌；鼻咽癌；鼻咽癌，儿童；成神经细胞瘤；非霍奇金淋巴瘤，成人；非霍奇金淋巴瘤，儿童；妊娠期间的非霍奇金淋巴瘤；非小细胞肺癌；口腔癌，儿童；口腔和唇癌；口咽癌；骨肉瘤/骨恶性纤维组织细胞瘤；卵巢癌，儿童；卵巢上皮癌；卵巢生殖细胞瘤；卵巢低度恶性潜能的肿瘤；胰腺癌；胰腺癌，儿童；胰腺癌，胰岛细胞；副鼻窦和鼻腔癌；甲状旁腺癌；***癌；嗜铬细胞瘤；松果体和幕上原始神经外胚层肿瘤，儿童；垂体瘤；浆细胞肿瘤/多发性骨髓瘤；胸膜肺胚细胞瘤；妊娠和乳腺癌；妊娠和霍奇金淋巴瘤；妊娠和非霍奇金淋巴瘤；原发性中枢神经***淋巴瘤；原发性肝癌，成人；原发性肝癌，儿童；***癌；直肠癌；肾细胞(肾)癌；肾细胞癌，儿童；肾盂和输尿管，移行细胞癌；成视网膜细胞瘤；横纹肌肉瘤，儿童；唾液腺癌；唾液腺癌，儿童；肉瘤，尤因氏家族肿瘤；肉瘤，卡波西；肉瘤(骨肉瘤)/骨恶性纤维组织细胞瘤；肉瘤，横纹肌肉瘤，儿童；肉瘤，软组织，成人；肉瘤，软组织，儿童；塞扎里(Sezary)综合征；皮肤癌；皮肤癌，儿童；皮肤癌(黑色素瘤)；皮肤癌，默克尔细胞；小细胞肺癌；小肠癌；软组织肉瘤，成人；软组织肉瘤，儿童；隐匿原发性鳞状颈癌，转移性；胃(Stomach，Gastric)癌；胃(Stomach，Gastric)癌，儿童；幕上原始神经外胚层肿瘤，儿童；T细胞淋巴瘤，皮肤的；睾丸癌；胸腺瘤，儿童；胸腺瘤，恶性的；甲状腺癌；甲状腺癌，儿童；肾盂和输尿管的移行细胞癌；滋养细胞肿瘤，妊娠性的；原发灶不明癌，儿童；罕见儿童癌症；输尿管和肾盂，移行细胞癌；尿道癌；子宫肉瘤；***癌；视神经通路和下丘脑神经胶质瘤，儿童；外阴癌；瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症；以及维尔姆斯瘤。

另外的示例性癌症包括弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)和套细胞淋巴瘤(MCL)。又另外的示例性癌症包括子宫颈管内癌、B细胞ALL、T细胞ALL、B细胞或T细胞淋巴瘤、肥大细胞癌、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤、滤泡性淋巴瘤和里希特综合征(Richter’ssyndrome)。

示例性肉瘤包括纤维肉瘤、腺泡状软组织肉瘤(ASPS)、脂肪肉瘤、平滑肌肉瘤、软骨肉瘤、滑膜肉瘤、脊索瘤、梭形细胞肉瘤、组织细胞瘤、横纹肌肉瘤、尤因氏肉瘤、神经外胚层肉瘤、叶状/骨原性肉瘤以及成软骨细胞骨肉瘤。

根据本文描述的方法还可以治疗或预防上述癌症的转移。

在各个示例实施例中，本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物可用于治疗选自以下的障碍：结肠直肠癌、***癌、骨髓增生异常综合征、炎性肠病、鼻咽癌和***癌。

组合疗法

在一些实施例中，本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物与另外的“第二”治疗剂或治疗一起施用。第二治疗剂的选择可以选自通常用于单一疗法中以治疗所指示的疾病或病症的任何药剂。如本文所用，术语“一起施用”和相关术语是指向有需要的受试者同时或顺序施用治疗剂以治疗本文描述的任何一种或多种适应症。例如，本文描述的结晶形式I或药物组合物可以与另一治疗剂以单独的单位剂型同时或顺序施用或者以单一单位剂型一起施用。因此，本披露涉及包含本文描述的结晶形式I或药物组合物、另外的治疗剂和药学上可接受的载剂的单一单位剂型。

在本披露的一个实施例中，当向受试者施用第二治疗剂时，由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I的有效量小于其在不施用第二治疗剂的情况下的有效量。在另一实施例中，第二治疗剂的有效量小于其在不施用由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I的情况下的有效量。以此方式，可以将与任一药剂的高剂量相关联的不期望的副作用最小化。其他潜在的优点(包括但不限于改进的给药方案和/或降低的药物成本)对于本领域技术人员来说将是显而易见的。另外的药剂可以与本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物分开施用，作为多剂量方案的一部分。可替代地，那些药剂可以是单一剂型的一部分，与本文描述的结晶形式I或药物组合物混合在一起。

在某些实施例中，本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物可以单独施用或与可用于治疗或预防炎症的其他化合物组合施用。示例性抗炎剂包括例如类固醇(例如，氢化可的松、可的松、氟氢可的松、***、6[α]-甲基***、曲安西龙、倍他米松或***)、非甾体抗炎药物(NSAIDS)(例如，阿司匹林、扑热息痛、托美丁、布洛芬、甲芬那酸、吡罗昔康、萘丁美酮、罗非考昔、塞来考昔、依托度酸或尼美舒利)。在另一实施例中，其他治疗剂是抗生素(例如，万古霉素、盘尼西林、阿莫西林、氨比西林、头孢噻肟、头孢曲松、头孢克肟、利福平甲硝唑、多西环素或链霉素)。在另一实施例中，其他治疗剂是PDE4抑制剂(例如，罗氟司特或咯利普兰)。在另一实施例中，其他治疗剂是抗组胺剂(例如，赛克力嗪、羟嗪、异丙嗪或苯海拉明)。在另一实施例中，其他治疗剂是抗疟药(例如，青蒿素、蒿甲醚、青蒿琥酯、磷酸氯喹、盐酸甲氟喹、盐酸多西环素、盐酸氯胍、阿托伐醌或氯氟菲醇)。在一个实施例中，其他化合物是屈曲克凝α。在特定的实施例中，本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物与***组合施用。

抗炎剂的另外的实例包括例如醋氯芬酸、阿西美辛、e-乙酰氨基己酸、扑热息痛、醋氨沙洛、乙酰苯胺、乙酰水杨酸、S-腺苷甲硫氨酸、阿氯芬酸、阿氯米松、阿芬太尼、阿尔孕酮、烯丙罗定、阿明洛芬、阿洛普令、阿法罗定、阿司匹林铝、安西奈德、氨芬酸、氨氯苯噁嗪、3-氨基-4-羟基丁酸、2-氨基-4-甲基吡啶、氨丙吡酮、氨基比林、阿米西群、水杨酸铵、安吡昔康、呱氨托美丁、阿尼利定、安替比林、安曲非宁、阿扎丙宗、倍氯米松、苄达酸、贝诺酯、苯噁洛芬、苄哌吡酮、苄达明、苄***、柏莫洛芬、倍他米松、倍他米松-17-戊酸盐、贝齐米特、[α]-没药醇、溴芬酸、对溴乙酰苯胺、5-溴水杨酸乙酸酯、溴水杨醇、布西丁、布氯酸、布可隆、布***、丁苯羟酸、丁丙二苯肼、丁丙诺啡、布他西丁、布替布芬、布托啡诺、卡马西平、卡比芬、卡洛芬、卡沙兰、氯丁醇、氯***、氯乙苯噁嗪酮、水杨酸胆碱、辛可芬、桂美辛、西拉马朵、环氯茚酸、氯倍他索、氯可托龙、氯美辛、氯尼他秦、氯尼辛、氯吡酸、氯泼尼醇、丁香(clove)、可待因、溴甲可待因、磷酸可待因、硫酸可待因、可的松、可的伐唑、克罗丙胺、克罗乙胺、环佐辛、地夫可特、去氢睾酮、地素***、***、去羟米松、***、***-21-异烟酸酯、右奥沙屈、右吗拉胺、右丙氧芬、去氧皮质酮、地佐辛、地恩丙胺、二醋***、双氯芬酸、二苯米唑、联苯吡胺、二氟拉松、二氟可龙、二氟尼柳、二氟泼尼酯、二氢可待因、二氢可待因酮烯醇乙酸酯、二氢***、乙酰水杨酸二羟基铝、地美沙朵、地美庚醇、二甲噻丁、吗苯丁酯、地匹哌酮、迪普罗塞蒂(diprocetyl)、安乃近、地他唑、屈噁昔康、依莫法宗、恩芬那酸、甘草次酸、依匹唑、依他佐辛、依特柳酯、乙水杨胺、依索庚嗪、依托沙秦、乙甲噻丁、乙基***、依托度酸、依托芬那酯、依托尼秦、丁香酚、联苯乙酸、芬布芬、芬克洛酸、芬度柳、非诺洛芬、芬太尼、芬替酸、非普地醇、非普拉宗、夫洛非宁、氟扎可特、氟氯奈德、氟芬那酸、氟美松、氟尼缩松、氟尼辛、氟诺洛芬、醋酸氟轻松、氟轻松、醋酸氟轻松、氟可丁酯、氟考龙、氟苯乙砜、氟米龙、氟培龙、氟吡汀、氟泼尼定、氟泼尼龙、氟丙喹宗、氟氢缩松、氟比洛芬、氟替卡松、福莫可他、磷柳酸、龙胆酸、格拉非宁、葡美辛、水杨酸乙二醇酯、愈创蓝油烃、哈西奈德、乌倍他索、卤米松、卤***、氢可酮、氢可他酯、氢化可的松、醋酸氢化可的松、琥珀酸氢化可的松、半琥珀酸氢化可的松、氢化可的松21-赖氨酸酯、环戊丙酸氢化可的松、氢***酮、羟哌替啶、异丁芬酸、布洛芬、异丁普生、水杨酸咪唑、吲哚美辛、吲哚洛芬、三苯唑酸、异氟泼尼龙、醋酸异氟泼尼龙、艾斯拉多(isoladol)、异***、异尼辛、伊索克酸、伊索昔康、凯托米酮、酮洛芬、酮咯酸、对乳酰乙氧苯胺、利非他明、左洛啡烷、左啡诺、左芬啡烷、洛芬太尼、氯那唑酸、氯诺昔康、洛索洛芬、赖氨酸乙酰水杨酸、马泼尼酮、甲氯芬那酸、甲羟松、甲芬那酸、美洛昔康、哌替啶、甲***、美普他酚、氨基水杨酸、美他佐辛、***、左美丙嗪、甲基***龙、醋酸甲基***龙、甲基***龙琥珀酸钠、甲基***龙撒利普尼(suleptnate)、甲嗪酸、甲氧夫啉、美托酮、莫非布宗、莫苯唑酸、莫米松、吗拉宗、***、盐酸***、硫酸***、水杨吗啉、麦罗啡、萘丁美酮、纳布啡、烯丙***、水杨酸1-萘基酯、萘普生、奈福泮、尼可***、烟胺比林、尼氟灭酸、尼美舒利、5'-硝基-2'-丙氧基乙酰苯胺、去甲左啡诺、去甲***、去甲***、诺匹哌酮、奥沙拉秦、阿片、奥沙西罗、奥沙美辛、奥沙普秦、羟考酮、羟***酮、羟布宗、阿片全碱、帕拉米松、瑞尼托林、帕沙米特、喷他佐辛、哌立索唑、非那西丁、苯吗庚酮、非那佐辛、盐酸非那吡啶、非诺可、苯哌利定、非诺吡酮、非诺吗烷、乙酰水杨酸苯基酯、保泰松、水杨酸苯基酯、非尼拉朵、吡酮洛芬、匹米诺定、哌布宗、哌立酮、吡拉唑酸、哌腈米特、吡罗昔康、吡洛芬、普拉洛芬、泼尼卡酯、***龙、***、***龙戊酸酯、泼尼立定、丙谷美辛、普罗庚嗪、二甲哌替啶、丙帕他莫、丙哌利定、丙吡兰、右丙氧芬、异丙安替比林、普罗喹宗、丙替嗪酸、普罗沙唑、雷米那酮、瑞芬太尼、甲硫利马唑、醋水杨胺、水杨苷、水杨酰胺、水杨酰胺o-乙酸、水杨酸、水杨基硫酸、双水杨酯、沙维林、西美曲特、舒芬太尼、柳氮磺吡啶、舒林酸、超氧化物歧化酶、舒洛芬、琥布宗、他尼氟酯、替尼达普、替诺昔康、特罗芬那酯、粉防己碱、噻唑丁炎酮、噻洛芬酸、噻拉米特、替利定、替诺立定、替可的松、托芬那酸、托美丁、曲马多、曲安西龙、曲安奈德、托培辛、维米醇、联苯丁酸、希莫洛芬、扎托洛芬以及佐美酸。

在一个实施例中，本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物可以与选择性COX-2抑制剂一起施用以治疗或预防炎症。示例性选择性COX-2抑制剂包括例如地拉考昔、帕瑞考昔、塞来考昔、伐地考昔、罗非考昔、艾托考昔和芦米考昔。

在一些实施例中，本文描述的由结构式VII表示的化合物的结晶形式I或药物组合物与蒽环类药物或Topo II抑制剂组合施用。在某些实施例中，本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物与阿霉素(Dox)组合施用。在某些实施例中，本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物与硼替佐米(并且更广泛地包括卡非佐米)组合施用。

癌症组合疗法

在一些实施例中，本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物(例如，在本文描述的药物组合物中)与另外的癌症治疗一起施用。示例性另外的癌症治疗包括例如：化学疗法，靶向疗法例如抗体疗法、激酶抑制剂、免疫疗法和激素疗法，表观遗传学疗法，蛋白酶体抑制剂以及抗血管生成疗法。下面提供了这些治疗的每种的实例。如本文所用，术语“组合”、“组合的”和相关术语是指同时或顺序施用根据本披露的治疗剂。例如，由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I可以与另一治疗剂以单独的单位剂型同时或顺序施用或者以单一单位剂型一起施用。因此，本披露提供了包含由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I、另外的治疗剂和药学上可接受的载剂的单一单位剂型。

由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I和可以与载剂材料组合以产生单一剂型的另外的治疗剂(在包含如上所述的另外的治疗剂的那些组合物中)的量将根据所治疗的宿主和特定的施用模式而变化。优选地，本披露的药物组合物应配制为使得可以施用剂量为0.01-200的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I。

化学疗法

在一些实施例中，本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物与化学疗法共同施用。化学疗法是用能破坏癌细胞的药物治疗癌症。与靶向疗法相反，“化学疗法”通常是指总体上影响快速***的细胞的细胞毒性药物。化学疗法药物以各种可能的方式干扰细胞***，例如干扰DNA复制或新形成的染色体的分离。大多数形式的化学疗法靶向所有快速***的细胞，并且对癌细胞没有特异性，尽管一定程度的特异性可能来自于许多癌细胞无法修复DNA损伤，而正常细胞通常可以。

用于癌症疗法中的化疗剂的实例包括例如抗代谢物(例如，叶酸、嘌呤和嘧啶衍生物)以及烷化剂(例如，氮芥、亚硝基脲、铂、磺酸烷基酯、肼、三氮烯、氮丙啶、纺锤体毒剂、细胞毒性剂、拓扑异构酶抑制剂等)。示例性药剂包括阿柔比星、放线菌素、阿利维甲酸、六甲蜜胺、氨基蝶呤、氨基乙酰丙酸、氨柔比星、安吖啶、阿那格雷、三氧化二砷、天冬酰胺酶、阿曲生坦、贝洛替康、蓓萨罗丁、苯达莫司汀、博来霉素、硼替佐米、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡铂、卡波醌、卡非佐米、卡莫氟、卡莫司汀、塞来昔布、西妥昔单抗、苯丁酸氮芥、氮芥、CHOEP-21、CHOP、顺铂、克拉屈滨、氯法拉滨、克立他酶、环磷酰胺、阿糖胞苷或ara-C、达卡巴嗪、更生霉素、DA EPOCH、达妥木单抗(Daratumumab)、道诺霉素、地西他滨、秋水仙胺、***、多烯紫杉醇、阿霉素、乙丙昔罗、伊利司莫、依沙芦星、依诺他滨、表柔比星、艾日布林、雌莫司汀、依托格鲁、依托泊苷、FLAG(Flu+Cyt)、氟尿苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶(5FU)、FOLFOX、福莫司汀、吉西他滨、吉西他滨-奥沙利铂(GemOx)、格立得(Gliadel)植入剂、羟基脲(Hydroxycarbamide)、羟基脲(Hydroxyurea)、依鲁替尼、伊达比星、异环磷酰胺、伊立替康、伊洛福芬、伊沙匹隆、伊克撒佐米(Ixazomib)、拉洛他赛、来那度胺、亚叶酸、阿霉素脂质体、道诺霉素脂质体、氯尼达明、洛莫司汀、硫蒽酮、甘露舒凡、马索罗酚、美法仑、巯基嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、氨基酮戊酸甲酯、二溴甘露醇、米托胍腙、米托坦、丝裂霉素、米托蒽醌、Nab-紫杉醇、奈达铂、尼莫司汀、奥利默森、奥马西他辛、奥他赛、奥沙利铂、紫杉醇、培门冬酶、培美曲塞、喷司他丁、吡柔比星、匹杉琼、PLD(聚乙二醇化的阿霉素脂质体)、普卡霉素、泊马度胺、卟吩姆钠、泼尼莫司汀、丙卡巴肼、雷替曲赛、雷莫司汀、R-CHOP、r-dhaox、r-dhap、利妥昔单抗、罗米地辛、鲁吡替康、沙帕他滨、司莫司汀、塞西马集、萨拉弗尼(Sorafonib)、赛特铂、链佐星、他拉泊芬、替加氟-尿嘧啶、替莫泊芬、替莫唑胺、替尼泊苷、替司他赛、睾内酯、四硝酸酯、塞替派、噻唑呋林、硫鸟嘌呤、替吡法呢、拓扑替康、曲贝替定、三亚胺醌、曲他胺、三合铂(Triplatin)、维甲酸、曲奥舒凡、曲磷胺、乌拉莫司汀、戊柔比星、维替泊芬、长春花碱、长春新碱、长春地辛、长春氟宁、长春瑞滨、伏立诺他、佐柔比星以及本文描述的其他细胞生长抑制剂或细胞毒性剂。

靶向疗法

本文描述的由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I或药物组合物可以与靶向疗法组合使用或作为靶向疗法的一部分。靶向疗法包括使用对癌细胞中感兴趣的靶标(例如，失调的蛋白质)具有特异性的药剂。小分子靶向疗法药物通常是癌细胞内突变的、过表达的或在其他方面关键的蛋白质的酶结构域的抑制剂。突出的实例是酪氨酸激酶抑制剂，例如阿西替尼、博舒替尼、西地尼布、达沙替尼、厄洛替尼(erolotinib)、伊马替尼、吉非替尼、拉帕替尼、来他替尼、尼洛替尼、司马沙尼、索拉非尼、舒尼替尼及凡德他尼，以及周期蛋白依赖性激酶抑制剂，例如阿伏西地(Alvocidib)和塞立西布(Seliciclib)。单克隆抗体疗法是另一策略，其中治疗剂是特异性地与癌细胞表面上的蛋白质结合的抗体。实例包括通常用于乳腺癌的抗HER2/neu抗体曲妥珠单抗以及通常用于多种B细胞恶性肿瘤的抗CD20抗体利妥昔单抗和托西莫单抗。其他示例性抗体包括西妥昔单抗、帕尼单抗、曲妥珠单抗、阿仑单抗、贝伐单抗、依决洛单抗以及吉姆单抗。示例性融合蛋白包括阿柏西普和地尼白介素(Denileukin diftitox)。在一些实施例中，靶向疗法可以与本文描述的药物组合物，例如格列卫(Vignari和Wang 2001)组合使用。

靶向疗法还可以涉及作为“归巢装置(homing device)”的小肽，其可以与细胞表面受体或肿瘤周围受影响的细胞外基质结合。如果核素在细胞附近衰变，那么附接到这些肽(例如，RGD)上的放射性核素最终杀死癌细胞。这种疗法的一个实例包括

制备由结构式(VII)表示的化合物(化合物5)的工艺：

参考图1，显示了本发明的一个方面的总体反应方案。在步骤1中，化合物1被酰胺化。在步骤2中，两个可嵌入式反应(telescoping reaction)将化合物2转化为二溴化的化合物3，随后将3脱氢溴化为化合物4。在步骤3中，化合物5通过化合物4与由结构式(IIIB)表示的化合物之间的铃木偶联而产生。

由结构式(VII)表示的化合物(化合物5)的结晶形式：

参考图20-26，显示了由结构式(VII)表示的化合物(在本文中也称为化合物5或化合物MB6并且在本领域中称为艾塔尼西(eltanexor)或KPT-8602)的结晶形式I和II的表征数据。这样的数据包括x射线粉末衍射(XRPD)图、差示扫描量热法(DSC)热分析图、热重分析(TGA)热分析图和动态蒸气吸附(DVS)图。下面提供了如何分离每种形式以及用于生成表征数据的技术的描述。

结晶形式表征的通用材料和方法

XRPD

根据USP指南，不同的水合物和溶剂化物可能显示出大于0.2°2θ的峰值方差，并因此0.2°2θ的峰值方差不适用于这些材料。

“突出峰”是整个观察到的峰列表的子集。通过优选地鉴定具有高强度的非重叠、低角度峰，从观察到的峰中选择突出峰。

如果有多个衍射图可用，则可以评估粒子统计信息(PS)和/或择优取向(PO)。在单个衍射仪上分析的多个样品的XRPD图之间的重现性表明粒子统计信息是足够的。来自多个衍射仪的XRPD图之间相对强度的一致性表明良好的取向统计信息。可替代地，可以将观察到的XRPD图与基于晶体结构计算的XRPD图(如果可用)进行比较。使用区域检测器的二维散射图也可用于评估PS/PO。如果PS和PO的影响被确定为可忽略不计，则XRPD图代表样品的粉末平均强度，并且突出峰可被鉴定为“代表峰”。一般而言，为确定代表峰而收集的数据越多，对这些峰的分类就越有信心。

“特征峰”就其存在而言是代表峰的子集，并且用于区分一种结晶多晶型物与另一结晶多晶型物(多晶型物是具有相同化学组成的结晶形式)。通过相对于化合物的所有其他已知的结晶多晶型物评估该化合物的一种结晶多晶型物中存在哪些代表峰来确定特征峰，误差范围在±0.2°2θ之内。并非化合物的所有结晶多晶型物都必须具有至少一个特征峰。

使用Cu Kα辐射(40kV，40mA)、自动XYZ平台、用于自动样品定位的激光视频显微镜、和HiStar 2维区域检测器，在Bruker AXS C2 GADDS衍射仪上收集X射线粉末衍射图。X射线光学元件由与0.3mm的针孔准直器相结合的单个多层镜组成。使用经认证的标准NIST 1976刚玉(平板)进行每周性能检查。

光束发散度(即在样品上的X射线束的有效尺寸)为大约4mm。采用θ-θ连续扫描模式，其中样品-检测器距离为20cm，有效2θ范围为3.2°–29.7°。通常将样品暴露于X射线束120秒。用于数据收集的软件是针对XP/2000 4.1.43的GADDS，并且使用Diffrac Plus EVAv15.0.0.0对数据进行分析和呈现。

环境条件：使用按接收原样的未经研磨的粉末将样品制备为平板试样。将大约1–2mg样品轻轻地压在载玻片上以获得平坦表面。

非环境条件：将在非环境条件下运行的样品安装在具有导热化合物的硅晶片上。然后将样品以20℃/min加热至适当温度并且随后等温保持1分钟，然后开始收集数据。

另外，使用Cu Kα辐射(40kV，40mA)、θ-2θ测角仪、以及V4发散度和接收狭缝、Ge单色仪和Lynxeye检测器，在Bruker D8衍射仪上收集X射线粉末衍射图。使用经认证的刚玉标准品(NIST 1976)对仪器进行性能检查。用于数据收集的软件是Diffrac Plus XRDCommander v2.6.1，并且使用Diffrac Plus EVA v15.0.0.0对数据进行分析和呈现。

使用按接收原样的粉末，在环境条件下运行作为平板试样的样品。将样品轻轻地包装到切割成抛光的零背景(510)硅晶片的空腔中。在分析过程中，将样品在其自身的平面内旋转。数据收集的细节是：

角度范围：2至42°2θ；

步长：0.05°2θ；

收集时间：0.5s/步。

TGA

在配备有16位自动进样器的TA仪器Q500 TGA上收集TGA数据。使用经认证的铝媄(Alumel)和镍对仪器进行温度校准。通常将5–10mg每个样品加载到预先配衡的铝DSC盘上并且以10℃/min从环境温度加热至350℃。在样品上维持60ml/min的氮气吹扫。

仪器控制软件是用于Q系列v2.5.0.256和Thermal Advantage v5.5.3的Advantage，并且使用Universal Analysis v4.5A进行数据分析。

DSC

在配备有50位自动进样器的TA仪器Q2000上收集DSC数据。使用蓝宝石进行热容量校准，并且使用经认证的铟进行能量和温度校准。通常将在针孔铝盘中的0.5–3mg每个样品以10℃/min从25℃加热至280℃。在样品上维持50ml/min的干氮气吹扫。

仪器控制软件是用于Q系列v2.8.0.394和Thermal Advantage v5.5.3的Advantage，并且使用Universal Analysis v4.5A进行数据分析。

DVS

使用由DVS固有控制软件v1.0.1.2(或v 1.0.1.3)控制的SMSDVS固有水分吸附分析仪来获得吸附等温线。通过仪器控制将样品温度维持在25℃。通过将干氮气和湿氮气的流混合来控制湿度，其中总流速为200ml/min。通过位于样品附近的经校准的Rotronic探针(动态范围为1.0％–100％ RH)测量相对湿度(RH)。通过微量天平(精度±0.005mg)不断监测作为％RH的函数的样品重量变化(质量松弛)。

通常在环境条件下将5–20mg样品置于经配衡的网状不锈钢篮中。在40％ RH和25℃(通常为室内条件)下，加载和卸载样品。如下所概述进行水分吸附等温线(2次扫描给出1次完整的循环)。标准等温线在25℃，在0–90％ RH范围内，以10％ RH间隔进行。使用微软Excel使用DVS Analysis Suite v6.2(或6.1或6.0)进行数据分析。

表1.用于SMSDVS固有实验的方法

参数	值
		吸附-扫瞄1	40–90
解吸，吸附-扫描2	90–0，0–40
		解吸/吸附-扫描3	90-0，0-40
间隔(％RH)	10
		扫描次数	2
流速(ml/min)	200
		温度(℃)	25
稳定性(℃/min)	0.2
		吸附时间(小时)	6小时超时

在等温线完成后回收样品并通过XRPD重新分析。

¹H NMR

在配备有自动进样器并且由DRX400操纵台控制的Bruker 400MHz仪器上收集NMR谱。使用与Topspin v1.3一起运行的ICON-NMR v4.0.7使用标准Bruker加载实验获得自动化实验。对于非常规光谱学，通过单独使用Topspin获取数据。除非另有说明，否则在DMSO-d₆中制备样品。使用ACD Spectrus Processor 2012进行离线分析。

工艺：

步骤1

步骤1涉及制备由图1中参考为KPT-9508/MB3的化学结构表示的丙烯酰胺。氯甲酸异丁基酯用于生成混合酸酐，然后将其在氢氧化铵中淬灭，以提供MB3/KPT-9508。反应方案的细节如下：

向配备有硫酸洗涤器并在氮气下惰化的558L玻璃衬里锥形底容器中装入氢氧化铵(29.653kg，26％w/w水溶液)，并将溶液温度调节至0℃-5℃(内部温度为8.4℃至3.0℃，持续11小时36分钟)。

向在氮气下惰化的单独的206L玻璃衬里容器中装入2-MeTHF(24.0kg)，将其在回流下加热30分钟以干燥玻璃容器和冷凝器组件。将容器和内容物调节至<30℃，然后对2-MeTHF进行IPC取样(第一样品显示残留水为0.2％w/v，目标为<0.1％w/v，因此用另外的2-MeTHF重复回流)。将容器排空，然后真空干燥。

向206L容器中装入KGl(KPT-454，15.5kg)和2-MeTHF(77.l kg)，然后搅拌该批料并调节至0℃-5℃(内部温度在15分钟内为15.5℃至0.7℃)以形成溶液。随后添加氯甲酸异丁基酯和N-甲基吗啉，随后在氢氧化铵中淬灭，需要在最多4小时内完成(实际时间3小时5分钟)。装入氯甲酸异丁基酯(12.l kg)，同时维持0℃-5℃的温度(温度范围为0.0℃至l.0℃，持续25分钟)，并且将添加设备用2-MeTHF(8.l kg)正向漂洗(rinse forward)。装入N-甲基吗啉(8.9kg，预冷却至4℃-8℃)，同时维持0℃-5℃的温度(温度范围在25分钟内为0.4℃至5.6℃)，并且将添加设备用2-MeTHF(5.4kg)正向漂洗。将批料搅拌30-45分钟的时间段(35分钟，内部温度为l.8℃至0.5℃)。

在维持0℃-5℃的温度的同时，在剧烈搅拌下将批料转移至含有氢氧化铵的第一容器中，同时维持接收容器中的温度为0℃-10℃(温度范围在40分钟范围内为0.1℃至9.1℃)。将来自第二容器的反应混合物用2-MeTHF(13.l kg)漂洗到第一容器中，在4.3℃搅拌30分钟，然后进行IPC取样(相对于MB3+MC8残留KG1+KG5为2％a/a，目标值为NMT 2％a/a)。然后将批料的温度调节至20℃-25℃(53分钟，内部温度为1.7℃至20.4℃)。停止搅拌49分钟以允许相分离，并且排出并丢弃下层水相(分离时间58分钟，与有机层连接(interface)，上层有机相140L，下层水相20L)。装入水(77.5kg)，同时维持20℃-25℃的温度(温度范围为22.2℃至24.3℃，持续40分钟)，并搅拌20分钟。然后停止搅拌45分钟以允许相分离，并且排出并丢弃下层水相(分离时间35分钟，与水层连接，上层有机相144L，下层水相86L)。

将批料冷却至0℃-5℃(从22.5℃至3.3℃，持续65分钟)并置于真空下，然后逐渐加温至17.3℃的温度并在3小时10分钟内蒸馏至57-62L的目标体积(目测体积61L，测量的浸液体积57L)。在20.7℃至21.7℃的温度在30分钟内装入正庚烷(10.5kg)，然后搅拌1小时以使产物结晶。目测验证固体的存在，然后进一步地在22.2℃至22.5℃的温度范围内在1小时内装入正庚烷(94.9kg)。

将批料通过带有棉衬布的20cfm聚酯滤布过滤来分离(在SRF过滤器上保持在22.5℃的过滤时间为2小时20分钟)，然后将滤液返回容器中并在22.2℃在1小时24分钟内重新过滤以正向漂洗剩余的固体。将滤饼用正庚烷(2l.2kg，分两部分-过滤时间为15分钟和17分钟)洗涤，然后脱液(2小时)并在氮气流下干燥(58小时，环境温度)。IPC分析显示，58小时时LOD为1.4％w/w，限值为NMT 5％w/w，并且包装产物以提供12.4kg、80％产率的KPT-9508。分离的产物符合该化合物的HPLC标准。产物的HPLC在图16中显示。

HPLC条件如下：

装置：

1.UPLC柱：Agilent Zorbax SB-CN，3.0x 100mm，1.8μm

2.检测器：260nm

3.柱温：50℃

4.流动相：A：H20中的0.1％ TFA

B：50％ ACN:45％ MeOH:5％ H20

5.流速：0.5ml/min

6.进样体积：5μL

7.运行时间：32分钟

8.梯度：时间(min) ％A ％B

0.0 75 25

5.0 75 25

21.0 55 45

22.0 30 70

28.0 30 70

28.1 75 25

32.0 75 25

9.溶出溶剂(DS)：75％ ACN:25％ H₂O+0.1％ TFA

10.清除溶剂：50％ ACN:50％ H₂O

11.洗针液：50％ ACN:50％ H₂O

12.赛默飞世尔公司(Thermo Scientific)“Targer”全塑料一次性Luer-Lok注射器，3ml或同等量(必须与ACN/H₂O DS兼容)

13.0.2μm PTFE过滤器

14.贝克顿迪金森公司(BECTON DICKINSON&CO.)(8-D)预包装针或同等产品

试剂和标准品：

1.乙腈(ACN)、甲醇(MeOH)、水(H₂O)，HPLC级别或同等级别

2.三氟乙酸(TFA)，试剂级别或同等级别

3.MB3分辨率标准：1393-ES-038-1(含有Unk-1＝0.04％、MC8＝10％、KG1＝0.4％、KG5:0.4％)或同等标准。

最终产物(KPT-9508/MB3)的¹H NMR谱在图18中显示。

步骤2

步骤2由两次可嵌入式转化组成，以形成异构体ME2/KPT-9515+ME3/KPT-9506的二溴化的混合物(图1的步骤2a)，然后将其脱氢溴化以形成异构体MB5/KPT-7538+MB9/KPT-9507的中间体混合物(图1的步骤2b)。

步骤2a方案

在配备有顶置搅拌器、温度计、加料漏斗和氮气鼓泡器的2L三颈圆底烧瓶中装入14.69g的NaBr和110mL的乙酸。在环境温度下搅拌该批料的内容物。向该批料中装入45.6g的溴。用110mL乙酸正向漂洗加料漏斗。在单独的500mL三颈烧瓶中装入55g的MB3和220mL的乙酸。在环境温度下搅拌500mL***内容物以形成溶液。

将500mL容器的内容物在1小时的时间段内通过加料漏斗装入2L容器中，同时维持内部温度在20℃-30℃的范围内。用110mL乙酸正向漂洗加料漏斗。将批料在20℃-30℃进一步搅拌最少16小时的时间段。

在最少30分钟的时间段内向该批料中装入275mL 10％w/v亚硫酸氢钠溶液，同时维持内部温度为20℃-30℃。在5分钟的时间段内向该批料中装入275mL水，同时维持内部温度为20℃-30℃。将批料在20℃-30℃进一步搅拌最少60分钟的时间段。取出该批料的等分试样并观察是否存在残留溴。通过白色至灰白色悬浮液的存在观察到溴的完全还原。

然后在减压下通过布氏漏斗上的沃特曼(Whatmann)滤纸(70mm)过滤该批料的内容物。将滤饼用220mL水分成两份大致相等的部分洗涤。将收集的滤饼在减压下在20℃-30℃维持最少15分钟的时间段。获得中间体ME2产物，粗质量为102.13g，并且(相对于制定的标准)ME2的HPLC纯度：86.0％a/a且ME3的HPLC纯度：9.5％a/a。

步骤2b方案

步骤2b中描述的反应程序对早期开发工作进行了改进，早期开发工作在过程控制(IPC)测试期间对反应混合物取样存在困难。IPC测试的困难很大程度上是由于步骤2b的反应混合物过稠造成的。通过使用二异丙基乙胺而不是三甲胺作为碱，将混合物体积增加约3倍，并使用水和乙腈的混合物而不是单独的乙腈，解决了这些困难。下面描述了解决上述困难的最终程序。

500mL三颈圆底烧瓶配备有温度计、顶置搅拌器和氮气入口。向烧瓶中装入25gME2(49mmol；1.0当量)和140mL ACN(相对于(wrt)MB3为8份)以及70mL水(相对于MB3为4份)。向单独的100mL圆底烧瓶中装入8.6mL DIPEA(49mmol，相对于MB3为1.0当量)和52mLACN(相对于MB3为3份)。将混合物搅拌20-30分钟。在剧烈搅拌下，在1.0至1.5小时的时间段内将DIPEA溶液分批添加至ME2的悬浮液中。用9mL ACN(相对于MB3为0.5份)正向漂洗添加组件。将批料在20℃-25℃搅拌2-3小时。进行了IPC测试并达到了IPC目标(目标值：相对于MB5残留ME2不超过(NMT)0.3％a/a)。

使用滤纸过滤所得悬浮液。将滤饼用34mL的8:2ACN/H₂O混合物(相对于MB3为2份)洗涤。将滤饼用34mL的ACN(相对于MB3为2份)洗涤。通过用抽气机抽吸的氮气吹扫将滤饼干燥20小时。分离的产物为白色固体，并通过HPLC根据以下方案评估纯度：

装置：

1.UPLC柱：Agilent Zorbax SB-CN，3.0x 100mm，1.8μm

2.检测器：260nm

3.柱温：50℃

4.流动相：A：H₂O中的0.1％ TFA

B：50％ ACN:45％ MeOH:5％ H₂O

5.流速：0.5ml/min

6.进样体积：4μL

7.运行时间：35分钟

8.梯度：时间(min) ％A ％B

0.0 75 25

5.0 75 25

21.0 55 45

25.0 30 70

30.0 30 70

31.0 75 25

35.0 75 25

9.溶出溶剂(DS)：DMSO

10.清除溶剂：50％ ACN:50％ H₂O

11.洗针液：50％ ACN:50％ H₂O

12.赛默飞世尔公司“Targer”全塑料一次性Luer-Lok注射器，3ml或同等量(必须与ACN/H₂O DS兼容)

13.0.2μm PTFE过滤器

14.贝克顿迪金森公司(B-D)预包装针或同等产品

试剂和标准品：

1.乙腈(ACN)、二甲基亚砜(DMSO)、甲醇(MeOH)、水(H₂O)，HPLC级别或同等级别

2.三氟乙酸(TFA)，试剂级别或同等级别

3.KG1杂质标准：03-STD-061或同等标准

4.KG5杂质标准：1267-0-101-1或同等标准

5.MB3杂质标准：1393-ES-038-1或同等标准

6.ME2杂质标准：1389-NN-130-1或同等标准

7.ME3杂质标准：KP9506-C-1-A或同等标准

8.MB5分辨率标准：1389-NN-174-1(含有Unk-1＝0.14％、MC8＝0.13％、MB9＝3.4％)或同等标准。

重复运行导致的分离产率分别为86.0％和90.7％，具有99.2％a/a和99.2％a/a。以86.0％产率分离的批料的DMSO中的质子NMR在图17中显示。

步骤3

在该研究中，开发了一种用于制造化合物5，即(E)-3-(3-(3,5-双(三氟甲基)苯基)-lH-1,2,4-***-1-基)-2-(嘧啶-5-基)丙烯酰胺(MB6/KPT-8602)的可扩展的工艺。

可以使用以下HPLC方案。

最终产物(化合物KPT-8602/MB6/5)的¹H NMR在图19中显示。

认识到所用的四三苯基膦钯的选择性较差后，通过筛选用于该步骤的铃木偶联的几种催化剂，发现了一种更稳健且更具选择性的Pd催化剂(即Strem amphos palladacyclegen.2(目录号46-0342))。基于新的催化剂***，通过研究几个关键工艺参数，即Stremamphos palladacycle gen.2(目录号46-0342)和硼酸(由结构式(IIIB)表示的化合物，MB7)的化学计量、反应溶剂和溶剂比、溶剂体积、反应温度和不同碱，进一步评估了该工艺。还研究了其他问题，例如MB7降解、简化工艺操作、粗产物分离(MB6甲醇溶剂化物，本文描述的结晶形式II)和MB6在MIBK中重结晶以产生如本文所描述的结晶形式I的条件、以及最终分离产物中每种的Pd和MB7残留水平。结果发现，在改进的工艺中，不需要(但允许)通过用Si-DMT二氧化硅清除剂处理从粗产物中去除钯，因为粗产物的钯水平通常低于当前限值(NMT 400ppm)。

令人惊讶的是，据发现新的反应***非常稳健，无需剧烈脱气即可表现良好。新工艺已在15.5g规模的示范实验中进行，并成功生成了81％-86％总产率的呈结晶形式I的化合物5(如结构式(VII)表示的MB6(KPT-8602))。81％-86％的产率比之前工艺报告的26％-49％的产率有显著提高。产物的纯度非常好(HPLC纯度为100％a/a)，其中Pd和硼酸MB7的水平可接受。

一般反应条件-步骤3：根据评估步骤3的各种工艺参数的实验(下面详细讨论)，使用了以下反应条件：约1.0当量MB5、约2.0当量MB7、约0.5当量Cs₂CO₃、约24份脱气二噁烷:H₂O 7:1v/v、2mol％Strem amphos palladacycle gen.2(目录号46-0342)、在55℃-60℃7-7.5小时。所有当量均相对于(wrt)MB5而言。

甲醇化物(形式II)的分离-一般程序1：

形式II(最终形式I的甲醇化物前体)的一般分离程序如下：在55℃-60℃ 7-7.5小时的反应时间后(参见上文一般反应条件)，将反应混合物调节至约40℃-45℃，随后装入硅藻土浆液(相对于MB5为约0.5份)和约7:1v/v的二噁烷:水(相对于MB5为约2.5份)。将所得悬浮液在约40℃-45℃搅拌约15-20min。过滤反应混合物并用约7:1v/v的二噁烷:水(在约40℃-45℃，相对于MB5为约3份)洗涤滤饼。对所得滤液进行真空蒸馏并蒸馏至相对于MB5约4.5-5.5份的目标体积。将所得悬浮液调节至约50℃-55℃的内部温度。然后向反应混合物中分批装入MeOH(相对于MB5为约20份)。然后将悬浮液在约50℃-55℃搅拌约60-70min。然后将反应混合物冷却至约20℃-25℃，然后在约2-2.5小时内进一步冷却至约0℃-5℃，并在该温度维持约2-2.5小时的时间段。然后过滤所得悬浮液并用MeOH(相对于MB5为约10份)洗涤滤饼。然后干燥滤饼。

形式I的分离-一般程序2：

然后将来自一般程序1的干滤饼转移至配备有顶置搅拌器、温度计和氮气入口的烧瓶中，并将Si DMT(相对于MB5为约5当量)装入烧瓶中。然后将MIBK(相对于MB5为约25份)装入烧瓶中。然后将反应混合物加热至约65℃-70℃的内部温度，并且如果不使用清除剂则在该温度维持约1-1.5小时，而如果使用清除剂则维持在该温度约4-5小时。然后将反应混合物在约65℃-70℃热过滤至配备有顶置搅拌器、温度计和氮气入口的干净烧瓶中。用MIBK(在约65℃-70℃，相对于MB5为约1.0份)洗涤过滤器。在搅拌下，在约3-3.5小时内将滤液缓慢冷却至约20℃-30℃，然后真空蒸馏至相对于MB5约3-4份的目标体积。将批料温度调节至约55℃-60℃并将反应混合物在55℃-60℃搅拌约2-2.5小时。然后在约2-2.5小时内将悬浮液冷却至约0℃-5℃并在该温度搅拌最少约1小时。然后过滤反应混合物并用MIBK(相对于MB5为约1.0份，在约0℃-5℃)洗涤所得滤饼。

在15.5g规模上遵循上述一般程序。程序(使用的量、温度、时间等)可能会发生变化，但仍能获得良好的产率和纯度。下面还提供了分离(一般程序1)和重结晶条件(一般程序2)的另外的实例。

15.5g规模的一般程序1和2

500mL四颈圆底烧瓶配备有顶置搅拌器、温度计、回流冷凝器和N₂鼓泡器。用氮气冲洗烧瓶最少30分钟。在N₂流下，向烧瓶中装入15.5g化合物4(MB5)(36.1mmol，1.0当量)、8.95g MB7(72.2mmol，相对于MB5为2.0当量)、5.88g Cs₂CO₃(18.0mmol，相对于MB5为0.5当量)和0.415g Pd催化剂PT4(Strem Amphos Palladacycle Gen.2，目录号46-0342，0.72mmol，相对于MB5为0.02当量)，随后装入326mL脱气1,4-二噁烷(相对于MB5为21份)和47mL脱气水(相对于MB5为3份)。

在适度搅拌下，然后通过将氮气鼓泡60-70分钟的时间段，将反应混合物进一步脱气。然后将反应混合物加热至55℃-60℃的内部温度，并在该温度维持7-7.5小时的时间段。将反应温度调节至40℃-45℃，并采集IPC样品。完成后，将反应混合物调节至40℃-45℃，随后装入7.75g硅藻土浆液(相对于MB5为0.5份)和39mL 7:1v/v的二噁烷:水(相对于MB5为2.5份)。将所得悬浮液在40℃-45℃搅拌15-20分钟。过滤反应混合物并用46.5mL预温的7:1v/v的二噁烷:水(40℃-45℃，相对于MB5为3份)洗涤滤饼。对所得滤液进行真空蒸馏并蒸馏至70-85mL的目标体积(相对于MB5为4.5-5.5份)。将所得粘稠悬浮液调节至50℃-55℃的内部温度。然后在50℃-55℃向反应混合物中分批装入310mL MeOH(相对于MB5为20份)。然后将悬浮液在50℃-55℃搅拌60-70分钟的时间段。然后将反应混合物冷却至20℃-25℃，然后在2-2.5小时内进一步冷却至0℃-5℃，并在该温度维持2-2.5小时的时间段。然后通过使用沃特曼滤纸的布氏漏斗过滤所得悬浮液，并用155mL MeOH(相对于MB5为10份)洗涤滤饼。然后将滤饼在45℃-50℃真空干燥约4.5小时。获得89％产率的结晶形式II(甲醇化物)。产物的纯度非常好(HPLC纯度为99.3％至99.4面积％)，其中Pd和硼酸的水平可接受。

然后将干滤饼转移至配备有顶置搅拌器、温度计和氮气入口的500mL三颈圆底烧瓶中，随后装入0.25g SiDMT(相对于MB5为5当量)(230ppm残留Pd)。[根据残留钯水平，可以使用以下计算来确定要装入多少DMT二氧化硅。为了计算产物中的mmPd：Mmol Pd＝ppm Pdx g产物/106.42x 100，且清除剂负荷＝mmol Pd x 4当量/清除剂负载量(mmol/g)。]然后向固体中装入390mL 4-甲基-2-戊烷酮，在本文中也称为MIBK(相对于MB5为25份)。然后将反应混合物加热至65℃-70℃的内部温度，并在进行清除剂处理时在该温度维持4-5小时的时间段(如果没有进行清除剂处理，则1-1.5小时就足够)。然后将反应混合物在65℃-70℃通过布氏漏斗(带有沃特曼滤纸)热过滤至配备有顶置搅拌器、温度计和氮气入口的新的500mL三颈圆底烧瓶中。然后用15mL预温的MIBK(65℃-70℃，相对于MB5为1份)洗涤滤纸。在搅拌下，在3-3.5小时内将滤液缓慢冷却至20℃-30℃，然后真空蒸馏至50-55mL的目标体积(相对于MB5为约3-4份)。将批料温度调节至55℃-60℃并将反应混合物在55℃-60℃搅拌3-3.5小时。在2-2.5小时内将悬浮液冷却至0℃-5℃并在该温度搅拌最少1.0小时。然后通过使用沃特曼滤纸的布氏漏斗过滤反应混合物。然后在0℃-5℃用15.5mL预冷的MIBK(相对于MB5为1.0份)洗涤滤饼。然后将滤饼在真空烘箱中在48℃-53℃干燥1-2小时以提供呈固体的产物(结晶形式I)。总产率为81％-86％，HPLC纯度为100.0％a/a，其中Pd和硼酸的水平可接受。

形式I的分离-一般程序2A：

将粗MB6甲醇化物形式II装入反应器中，随后装入约18体积的MIBK。将浆液加热至约80℃-85℃以生成溶液。此时，可将约1体积MIBK中的DMT(在本文中也称为SiDMT并且是二氧化硅结合的2,4,6-三巯基三嗪(三硫代氰尿酸，TMT))清除剂装入反应器中以去除Pd。该清除剂的使用是任选的。然后将溶液(无清除剂)或浆液(有清除剂)混合一段时间。一旦该时间完成，将溶液/浆液热精滤至干净的反应器中，同时维持约80℃-85℃的温度。然后将2体积的MIBK装入原始反应器中并加热至约80℃-85℃。一旦达到温度，溶剂就通过精制过滤装置转移至批料中，作为反应器/过滤***的漂洗液。然后将溶液稍微冷却以在保持期间诱导成核。确认成核后，固体通过受控冷却结晶进行结晶，最终温度为0℃-5℃。将浆液在此温度保持适当的时间以完成结晶，然后通过过滤分离固体。将约2体积的MIBK精滤至反应器中并冷却至约0℃-5℃。一旦达到温度，将洗涤液分两部分装入滤饼中，并用抽吸将其拉过(pull through)滤饼。洗涤完成后，将固体干燥并包装。

17g规模的一般程序2A：

将17g粗MB6(甲醇溶剂化物形式II)称重放入400ml Easy max容器中。添加约306mL 4-甲基-2-戊烷酮(MIBK；相对于MB6甲醇化物为18V)。将混合物适度搅拌并加温至约80℃-85℃以溶解固体。将约0.51g Si DMT(相对于MB6(甲醇化物形式II)为3％)装入容器中。将约18mL MIBK(2V X 0.51g+1V漂洗液)装入容器中。将混合物在约80℃-85℃适度搅拌约4.5h。然后将反应混合物在约80℃-85℃通过布氏漏斗(带有沃特曼滤纸)热过滤至500mL锥形烧瓶中。然后将滤纸/SiDMT/Cs₂CO₃用约34mL预温的4-甲基-2-戊烷酮/MIBK(约80℃-85℃；相对于MB6(作为甲醇化物形式II)为约2V)洗涤。清洁easy max容器，并且将含有滤液和洗涤液的锥形瓶中的内容物加温至约80℃-85℃并放回到easy max容器中。将批料温度调节至约80℃-85℃并将反应混合物搅拌约30min以达到溶解。然后在最少3小时内将溶液冷却至约20℃-25℃。然后在约2-2.5小时内将悬浮液冷却至约0℃-5℃并在该温度搅拌最少约1.0小时。然后通过使用沃特曼滤纸的布氏漏斗过滤反应混合物。

然后用约34mL预冷的4-甲基-2-戊烷酮/MIBK洗涤滤饼(相对于MB6甲醇化物形式II为约2vol；在约0℃-5℃)。然后将滤饼在真空烘箱中在约25℃-30℃干燥约3小时以提供呈白色固体的产物(％产率75％，纯度＝99.98％a/a)。

Pd催化的铃木偶联反应–催化剂评估

初始Pd催化剂评估的结果总结在图2的表中。使用Pd(dppf)Cl₂·DCM进行基线实验(图2；条目1)。正如之前观察到的，基线实验显示转化不完全(71.1％a/a)和显著水平的脱溴化(15.8％a/a)。

使用一系列基于巴豆基的预催化剂***进行的筛选显示出改进的结果，尤其是当使用大体积富电子配体(例如Amphos和P(tBu)₃)时(图2；条目3和4)。发现P(tBu)₃的性能略优于Amphos，具有更高水平的转化(24小时后为93.5％相比于81.3％)。重复P(tBu)₃并且发现具有相似的性能(97.2％a/a转化)，显示出重现性(图2；条目11)。还值得注意的是，脱溴化通路显著降低(3.8％-5.7％a/a)。有趣的是，在筛选研究中鉴定了一种以前未表征的杂质，其m/z＝699(ESI)。根据观察到的质量指定暂定结构(PF9)。假设这种杂质是由涉及MC8和MB5之间的Heck型偶联的副反应产生的。根据上述结果，tBu₃PPd(巴豆基)Cl被鉴定为是用于进一步工艺开发的理想催化剂。

下面显示的三种杂质是该铃木偶联的主要副产物，并且反应后它们的水平是评估偶联性能的关键因素。

还对反应溶剂进行了Pd催化反应的筛选。这些结果总结在图3中。

在二噁烷/H₂O、THF/H20、和EtOH/MeTHF/H₂O中运行的反应实现了100％的转化和良好的产物纯度。然而，仍然有大量的杂质形成。观察到MeTHF/H₂O和甲苯/MeTHF/H₂O中的反应停止。因此，THF/H₂O溶剂***显示出进一步评估的潜力。使用不同类型的碱尝试了铃木偶联。下面的图4总结了结果。发现Cs₂CO₃在这4种碱中具有最佳性能。

进一步的工艺探究

在这项工作中，除非另有说明，否则使用单批具有高HPLC纯度(99.5％a/a)的MB5。

最初，将上面鉴定为理想催化剂的催化剂***tBu₃PPd(巴豆基)Cl)在4.3g规模的反应中运行。反应条件选择为1.0当量MB5、2.0当量硼酸MB7、0.5当量碳酸铯、和3％tBu₃PPd(巴豆基)Cl，在16份脱气THF/H₂O 15:2v/v中，在回流下(63℃)(将反应混合物作为悬浮液脱气20-30分钟，然后加热)。在回流下4小时后，IPC显示相对于MB6残留MB5为115％a/a(一小时后反应停止)，同时生成大量MC8(相对于MB6为21％a/a)。装入另外的Pd催化剂(2mol％更多)后，偶联可以重新激活。然而，观察到反应在相对于MB6残留MB5为55％a/a时再次停止。该反应在类似条件下重新运行，并且结果总结在图5中。

这些结果表明这些反应条件没有给出可重复的结果。评估了另外的催化剂，并且结果总结在图6中。

结果发现，当使用二噁烷:H₂O作为反应的溶剂***时，JM Amphos Pd(巴豆基)Cl(Pd-161)和Strem Amphos Palladacycle Gen.2(目录号46-0342)都提供了同样出色的结果(图6；条目5、6和7)，其中杂质水平低得多。当Strem Amphos palladacycle gen.2与THF:H₂O作为溶剂***一起使用时(表6；条目3和4)，生成的杂质有所增加。与tBu₃PPd(巴豆基)Cl相比，作为铃木偶联催化剂的JM Amphos Pd(巴豆基)Cl(Pd-161)和Strem Amphospalladacycle gen.2(目录号46-0342)均显示出更好的选择性和稳健性。

Strem Amphos palladacycle gen.2(目录号46-0342)和JM Amphos催化剂适合作为活性催化***。

图7总结了为检查催化剂化学计量对化学性能的影响而进行的实验结果。这些结果表明，2mol％和3mol％Pd催化剂之间具有相当的性能，而当催化剂减少到低于2mol％时，观察到反应停止。可以进一步减少催化剂负载量。

应尽量减少硼酸MB7的量以避免不良影响。进行实验是为了探索MB7当量的下限。图8总结了这些研究。

当硼酸减少到1.5当量时，观察到反应停止，即使使用3mol％Pd催化剂。当硼酸为1.8当量时，反应完成后的残留MB5非常接近限值(<1％a/a)。为了确保铃木偶联的稳健性，在此工艺的最终程序中设置了略高水平(2.0当量)的MB7。值得注意的是，多余的剩余MB7在产物分离步骤中被成功清除。

检查了几种溶剂***以优化铃木偶联。实验结果在图9中列出。

二噁烷:水被鉴定为是一种有益的***，因为可获得更干净的反应，而其他溶剂***会导致停止或更高水平的杂质。尽管二噁烷是2类溶剂且具有比其他溶剂更低的ICH限值，但最终工艺仍选择二噁烷:水溶剂***，因为二噁烷具有卓越的性能，并且在产物分离/重结晶操作后可以减少以满足最终API中所需的限值，这在之前的GMP生产中得到了证明。

进一步评估了二噁烷:水溶剂***的比率，并且结果总结在图10中。水的减少(14:1v/v二噁烷:水；图10，条目1)会减慢反应速度，而更多的水(2:1v/v二噁烷:水；图10，条目3)导致更高水平的杂质。7:1v/v的二噁烷:水给出了最佳结果，并因此被设置为该工艺的最终溶剂比。

还评估了该偶联的总溶剂体积。图11是这些实验结果的总结。

24份和34份之间的性能相当(图11；条目1和2)。虽然18份也被认为是可以接受的，但性能却有所下降。当使用12份时，偶联停止(可能是由于产生的双相反应条件)。因此，最终工艺中该偶联的体积选择为24份。

还检查了该铃木偶联的反应温度。该研究的总结结果在图12中制表显示。

升高的温度(71℃-72℃；图12中的条目4)使MC0(Z异构体)水平增加。在50℃-55℃进行的反应(图12中的条目1)稍微更干净但更慢。在55℃-60℃或60℃-65℃进行的反应具有相当的性能。最终工艺设置为55℃-60℃。

图13是铃木偶联的脱气反应和未脱气反应(在试剂/溶剂组合之后)的结果的比较。

发现铃木偶联表现良好，在试剂/溶剂组合后无需剧烈脱气。如果需要，可以在加热之前对反应混合物进行脱气以确保稳健性。

与硼酸降解研究一起评估了几种碱，这将在稍后讨论。这些不同的碱研究也可被视为评估pH作为可能影响反应性能的因素。相关结果总结在图14中。

当使用K₃PO₄替代Cs₂CO₃(图14，条目2)时，反应停止。当使用0.25当量Cs₂CO₃/0.25当量CsHCO₃的1:1混合物(图14，条目3)时，反应也会停止，但可以通过装入更多CsHCO₃(0.25当量)来重新启动，从而将碱负荷增加到等于参考条件的水平(图14，条目1)。使用0.25当量Cs₂CO₃/0.50当量CsOH的混合物的反应(图14，条目4)显示出与仅使用Cs₂CO₃相当的性能。这些结果表明，CO₂废气速率的变化不太可能影响规模扩大(scale-up)过程中的工艺性能。

如一般反应条件-步骤3中所述，完成上述一组实验后，建议采用以下反应条件：1.0当量MB5、2.0当量MB7、0.5当量Cs₂CO₃、24份脱气二噁烷:H₂O 7:1v/v、2mol％Stremamphos palladacycle gen.2、在55℃-60℃ 7-7.5小时。相对于先前程序的显著变化和改进总结在图15A和图15B中。

本文引用的所有专利、公开的申请以及参考文献的教导都通过引用以其全文并入。

虽然本发明已参考其示例实施例进行了特别显示和描述，但本领域技术人员将理解，在不偏离由所附权利要求书涵盖的本发明范围的情况下，可以在其中进行形式和细节方面的各种改变。

Claims (43)

1.一种由以下结构式(VII)表示的化合物的结晶形式：

其中

该结晶形式是形式I，其特征在于在2θ角4.6°、22.8°、23.2°、和24.4°处的x射线粉末衍射峰。

2.如权利要求1所述的结晶形式，其中该结晶形式是在选自4.6°、20.0°、22.8°、23.2°、和24.4°的2θ角处的至少四个x射线粉末衍射峰。

3.如权利要求1或2所述的结晶形式，其中该结晶形式的特征在于在选自4.6°、19.0°、20.0°、22.8°、23.2°、23.7°、24.4°、和27.9°的2θ角处的至少五个x射线粉末衍射峰。

4.如权利要求1-3中任一项所述的结晶形式，其中该结晶形式的特征在于x射线粉末衍射图基本上与图20中所描绘的一致。

5.如权利要求1-4中任一项所述的结晶形式，其中该结晶形式的特征在于DSC热分析图在约226℃具有吸热事件。

6.如权利要求1-5中任一项所述的结晶形式，其中该结晶形式的特征在于DSC热分析图基本上与图21中所描绘的一致。

7.一种由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式：

其中

该结晶形式是形式II，其特征在于在2θ角9.9°、19.2°、22.4°、和24.4°处的x射线粉末衍射峰。

8.如权利要求7所述的结晶形式，其中该结晶形式是在选自9.9°、19.2°、22.4°、23.5°、和24.4°的2θ角处的至少四个x射线粉末衍射峰。

9.如权利要求7或8所述的结晶形式，其中该结晶形式的特征在于在选自9.9°、19.2°、21.3°、21.9°、22.4°、23.5°、24.4°、和29.2°的2θ角处的至少五个x射线粉末衍射峰。

10.如权利要求7-9中任一项所述的结晶形式，其中该结晶形式的特征在于x射线粉末衍射图基本上与图24中所描绘的一致。

11.如权利要求7-10中任一项所述的结晶形式，其中该结晶形式的特征在于DSC热分析图在约112℃和约225℃具有两个吸热事件。

12.如权利要求7-11中任一项所述的结晶形式，其中该结晶形式的特征在于DSC热分析图基本上与图25中所描绘的一致。

13.如权利要求7-12中任一项所述的结晶形式，其中该具有结构式(VII)的化合物为溶剂化物的形式。

14.如权利要求4-13所述的结晶形式，其中该形式是甲醇溶剂化物。

15.一种制备由结构式(VII)表示的化合物的方法，

该方法包括：

使由结构式(II)表示的化合物，

与由结构式(III)表示的化合物，

在第一溶剂中，在Pd催化剂和一种或多种无机碱的存在下，在适合制备由结构式(VII)表示的化合物的条件下进行反应，其中：

每个R是氢、C₁-C₄烷基，或两个基团R与它们所附接的氧原子一起形成5-7元环状缩醛部分，

从而获得该由结构式(VII)表示的化合物。

16.如权利要求15所述的方法，其中该一种或多种无机碱选自季铵、钠、钾、或碳酸铯、碳酸氢盐、乙酸盐或氢氧化物。

17.如权利要求15或16中任一项所述的方法，其中该Pd催化剂选自氯{[4-(N,N-二甲基氨基)苯基]二-叔丁基膦基}(2’-氨基-1,1’-联苯基-2-基)钯(II)或氯(巴豆基)[二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)。

18.如权利要求15-17中任一项所述的方法，其中该由结构式(III)表示的化合物是由结构式(IIIB)表示的化合物：

19.如权利要求15-18中任一项所述的方法，其中该无机碱是Cs₂CO₃或CsOH。

20.如权利要求15-19中任一项所述的方法，其中该无机碱是Cs₂CO₃。

21.如权利要求15-20中任一项所述的方法，其中该Pd催化剂是氯{[4-(N,N-二甲基氨基)苯基]二-叔丁基膦基}(2’-氨基-1,1’-联苯基-2-基)钯(II)。

22.如权利要求15-21中任一项所述的方法，其中该第一溶剂是醚溶剂、C1-C4醇、或其组合。

23.如权利要求15-22中任一项所述的方法，其中该第一溶剂是MTBE、CPME、THF、二噁烷、MeTHF、甲醇，单独或与水或乙醇组合。

24.如权利要求15-23中任一项所述的方法，其中Pd催化剂负载量为0.5％至mol％至10mol％。

25.如权利要求15-24中任一项所述的方法，其中相对于该由结构式(II)表示的化合物，该无机碱的量为0.5至2摩尔当量的碱。

26.如权利要求15-25中任一项所述的方法，其中这些适合制备该由结构式(VII)表示的化合物的条件包括：

-该Pd催化剂负载量为0.5mol％至3mol％；

-相对于该由结构式(II)表示的化合物，该由结构式(III)表示的化合物的量为1.0至2.2摩尔当量；

-相对于该由结构式(II)表示的化合物，该无机碱的量为0.8-1.2总摩尔当量的碱；

-该第一溶剂包含16份至21份的二噁烷以及2份至3份的水；

-反应温度为约55℃至约60℃；以及

-反应时间为约7-8小时。

27.如权利要求15-26中任一项所述的方法，该方法进一步包括制备该由结构式(II)表示的化合物的步骤，

该步骤通过将由结构式(IV)表示的化合物脱氢溴化，

在第二溶剂中，在有机碱的存在下，在适合生产该由结构式(II)表示的化合物的条件下进行。

28.如权利要求15-27中任一项所述的方法，其中该有机碱是三乙胺或二异丙基乙胺(DIPEA)。

29.如权利要求15-28中任一项所述的方法，其中该第二溶剂包含乙腈(ACN)。

30.如权利要求15-29中任一项所述的方法，其中该第二溶剂是80％ACN/20％水。

31.如权利要求15-30中任一项所述的方法，该方法进一步包括制备该由结构式(IV)表示的化合物的步骤，

该步骤通过使由结构式(V)表示的化合物，

与溴(Br₂)在第三溶剂中，在溴化物盐的存在下，在适合制备该由结构式(IV)表示的化合物的条件下进行反应来进行。

32.如权利要求31中任一项所述的方法，其中该第三溶剂包含水，并且该溴化物盐是溴化钠。

33.如权利要求27-30中任一项所述的方法，其中相对于该由结构式(IV)表示的化合物，该第二溶剂包含约11份的ACN和约4份的H₂O，该有机碱是DIPEA，并且其中这些适合制备该由结构式(II)表示的化合物的条件包括：

-相对于该由结构式(IV)表示的化合物，DIPEA的量为约1摩尔当量；

-反应温度为20℃至25℃；以及

-反应时间为2至3小时。

34.如权利要求15-33中任一项所述的方法，其中该第三溶剂是乙酸。

35.如权利要求15-34中任一项所述的方法，其中使该由结构式(V)表示的化合物与Br₂在20℃至30℃的温度进行反应，时间持续12小时至16小时。

36.如权利要求15-35中任一项所述的方法，该方法进一步包括制备由结构式(V)表示的化合物的步骤，

该步骤通过用酰胺化剂将由结构式(VI)表示的化合物酰胺化，

在第四溶剂中，在叔胺有机碱和氯甲酸酯的存在下，在适合生产该由结构式(V)表示的化合物的条件下进行。

37.如权利要求15-36中任一项所述的方法，其中该酰胺化剂是氢氧化铵，该叔胺有机碱是N-甲基吗啉(NMM)，并且该氯甲酸酯是由以下结构式表示的氯甲酸异丁基酯

38.如权利要求15-37中任一项所述的方法，其中该第四溶剂是四氢呋喃(THF)或2-甲基四氢呋喃(MeTHF)。

39.如权利要求15-38中任一项所述的方法，其中该第四溶剂是MeTHF，并且其中将该由结构式(VI)表示的化合物酰胺化是在0℃至5℃的温度进行的且持续时间为3小时至4小时。

40.一种由结构式(V)表示的化合物

或其盐。

41.一种制备由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I的方法

该方法包括：

(a)使该由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式II与约18体积的4-甲基-2-戊烷酮(MIBK)接触以形成混合物；

(b)将步骤(a)的混合物加热至约80℃-85℃，以形成加热的混合物；

(c)任选地将SiDMT添加至步骤(b)的加热的混合物中；

(d)将该加热的混合物维持在约80℃-85℃的温度约4.5小时；

(e)将该加热的混合物过滤，以获得滤液；

(f)在约80℃-85℃的温度将MIBK添加至该滤液中；

(g)通过将该滤液冷却至约20℃-25℃来诱导该滤液中形式I的成核；

(h)通过该滤液的受控冷却结晶来使形式I结晶，最终温度为0℃-5℃；以及

(i)从该滤液中分离结晶形式I。

42.一种在有需要的受试者中治疗CRM1相关的疾病或障碍的方法，该方法包括向该受试者施用治疗有效量的由结构式VII表示的化合物的结晶形式I。

43.一种药物组合物，其包含由结构式(VII)表示的化合物的结晶形式I和药学上可接受的载剂。