CN117741129A - 一种无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及检测采样技术领域,尤其涉及一种无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,包括,负压吸引器,吸附腔一侧设有两块等距并列的微孔层,形成一个可放置吸附材料的中间间隙;吸附腔另一侧与带弯角的管道连接;且管道与吸附腔连接的一端处设有单向阀;渗出液检测盒,包括壳体,样本注入口、观测区、支撑片和检测试纸;样本主入口位于壳体的上表面顶部中心位置;样本注入口处下方设置有水平延伸的支撑片,支撑片上固定有检测试纸。本发明能够快速吸附并获取口腔黏膜组织的渗出液,降低患者的痛苦和创伤;该装置结合特定抗原‑抗体反应和分层的显示,明确判断阳性和阴性,进行半定量的分析,实时反映治疗前后蛋白质水平的变化。
Description
技术领域
本发明涉及检测采样技术领域,尤其涉及一种无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置。
背景技术
口腔黏膜组织液是黏膜细胞自然分泌的液体,含有生物活性分子、细胞、电解质及蛋白质等,在许多生理和病理状态中具有关键意义。获取口腔黏膜组织来源的渗出液可以在分子层面监测疾病的发生发展进程,利用其中潜在的生物标志物,使口腔黏膜组织渗出液成为了疾病早期诊断和疾病进展监测的有力工具。为了确保诊断的准确性,对渗出液的采集量与质量有着严格要求,即需要保证采集液体的性状稳定一致,同时应当避免混杂入唾液的干扰以及唾液中各种酶对于样本蛋白的降解,还需要保证充分的采集量以满足检测的最低需要。
现有的采集手段,如刮片法、吸棉条法等等,采集的组织渗出液中均混杂有唾液成分,因唾液主要来自于腮腺、颌下腺和舌下腺一类的外分泌腺,且受口腔菌群和采集时间的影响很大,因而不能真实有效地反应黏膜组织中的实际情况;并且这些手段在采集时间、部位和采集的液体量方面都存在一定的不确定性,以至于导致了在生物标志物的分析过程中可能出现偏差。另外,在疾病诊断和进展监测中,半定量/定性数据可以提供关于生物标志物相对完善的检测分析,有助于更为精确的评估健康状态,使得评估更具有科学性和可比性,然而大多数采集手段忽略量的提取,或者缺乏稳定性,无法确保口腔黏膜组织渗出液的稳定和一致性,对后续的半定量分析带来了挑战。
因此,考虑到口腔黏膜组织渗出液的特性和采集的需求,需要一样无创的口腔黏膜组织渗出液的提取,避免对口腔黏膜造成再次的伤害,又提高了采集效率和准确性,对后续蛋白水平的半定量分析提供稳定、准确的检测数据。
发明内容
本发明的目的是针对上述技术问题,提出了一种无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,本发明的目的可通过下列技术方案来实现:
本发明提供了一种无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,包括负压吸引器和渗出液检测盒,
负压吸引器,包括吸附腔、微孔层、吸附材料和管道;吸附腔的一侧设有两块等距并列的微孔层,形成一个可放置吸附材料的中间间隙;管道设置弯角部分,便于负压吸引器通过弯角部分将吸附腔放置在所需采集的位置,管道一端通过软管连接一个负压装置,吸附腔另一侧与管道连接;且管道与吸附腔连接的一端处设有单向阀,确保所述吸附腔采集时的稳定,避免了负压的反向流动;
渗出液检测盒,采用硬性材料,包括壳体,样本注入口、观测区、支撑片和检测试纸;样本主入口位于壳体的上表面顶部中心位置,用于接收含有所述渗出液的保存液;观测区位于壳体的上表面中段,位于顶部和底部之间;样本注入口处下方设置有水平延伸的支撑片,支撑片上固定有检测试纸,检测试纸包括着质控条带和检测条带,均位于观测区内。
进一步地,微孔层的宽度范围在3~7mm之内。微孔层的孔宽度范围为200~500微米之间。
进一步地,管道的弯角的夹角范围在120°~150°之间。
进一步地,吸附材料包括采样吸水纸或多孔海绵状高分子聚合物。
进一步地,检测试纸包括的质控条带包括一般质控条带和唾液蛋白质控条带。一般质控条带检测组织渗出液中的蛋白质,而唾液质控条带检测唾液中的蛋白质。
进一步地,检测条带至少包括4条显色条,分别用以检测特定蛋白的类型或浓度。
与现有技术相比,本发明存在以下至少一种技术效果:
本发明利用负压原理设计的口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,能够(1)无创性获取口腔黏膜组织渗出液,减少对患者的伤害,因而可多次实施,有利于开展病情监测;(2)可以按实际需要选择拟采集渗出液的组织部位,利于精确、真实地反应特定组织部位的疾病或病情状态;(3)最大程度上减少唾液微环境和口腔菌群对拟采集样本的干扰,提高检测结果的可信度;(4)该装置结合特定抗原-抗体反应和分层的显示,不仅明确判断阳性和阴性,还能够进行半定量的分析,实时反映治疗前后生物标记性蛋白水平的变化;(5)单次采样即可同时检测多种蛋白和细胞因子。相较于传统方法,这种装置简单、高效、稳定,检测结果真实稳定。这种装置不仅限于医院,还可以在社区、药店等进行初步筛查或跟踪观察,大大提高了口腔疾病的早期发现和干预的可能性。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单的介绍:
图1为本发明无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置的负压吸引器和渗出液检测盒的结构示意图;
图2为本发明无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置的未添加吸附材料的负压吸引器的结构示意图;
图3为本发明渗出液检测盒中检测试纸中质控条带与检测条带的工作原理图。
附图标记说明
1:管道;2:弯角;3:单向阀;
4:吸头;401:吸附腔;402:微孔层A;403:吸附材料;404:中间间隙;405:微孔层B;
5:壳体;6:样本注入口;7:观测区;8:检测试纸。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及具体实施方式,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施方式仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例1
本实施例提供了一种无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,包括负压吸引器和渗出液检测盒,
请参阅图1、2,负压吸引器的吸头4包括吸附腔401、微孔层、吸附材料403和管道1;吸附腔401一侧设有两块等距并列的微孔层,形成一个可放置吸附材料403的中间间隙404;管道1设置弯角部分,便于负压吸引器通过弯角部分将吸附腔放置在所需采集的位置,管道一端通过软管连接一个负压装置,吸附腔401的另一侧与带弯角2的管道1另一端连接;且管道1与吸附腔401连接的一端处设有单向阀3,确保所述吸附腔采集时的稳定,避免了负压的反向流动。
吸附腔401的一端内部顺次排列着两层微孔层,微孔层的宽度范围在3~7mm之内;微孔层的孔宽度范围为200~500微米之间,微孔层设计可以确保液体的进入并被吸附材料403吸收;微孔层中间夹置着吸附材料403。吸附腔401另一端与管道1连接处设有单向阀3,且管道1设有弯角2设计,管道1的弯角2的夹角范围在120°~150°之间;便于负压吸引器放置到所需采集的位置;
负压吸引器采用硬性材料,硬质材料可采用PTE或ABS等材料;其中,如图2所示,微孔层A 402是单层,外侧微孔层B 405与吸附腔401连接,连接方式包括螺旋连接、快速卡扣连接等,外侧微孔层B 405与吸附腔401都配备了相互匹配的螺纹,当旋入吸附腔即可实现机械的固定,除此之外,连接方式还可以采用快速卡扣模式,外侧微孔层B 405外圈壁上设置微小的卡扣或者按钮,而吸附腔401内侧或外侧设置匹配的夹持位置,只要简单按下卡扣或者按钮,即可将外侧微孔层B 405固定到吸附腔401上,或者方便地将其取下,所提到的两种方法不仅确保了微孔层B 405与吸附腔401之间的稳固连接,还使得微孔层B405的更换过程变得便捷和简单。
吸附材料可以是吸纸、多孔海绵状的高分子聚合物或者棉片等,在实施检测和研究时,量化的方法为我们提供了精确、可靠和可比较的数据,从而确保结果的准确性和可复制性,尤其是在涉及液体体积和生物分子浓度的场景下,不同的体积或者浓度可能导致明显的效应,因此我们需要对采集的口腔黏膜的渗出液进行精确的量化。为了确保吸附材料在每次采样中采用其材料相同、质地均匀一致吸附材料,在这种情况下,最大的饱和吸水量应该是一样的,该饱和吸水量可以控制在5μL或10μL。这些吸附材料具有较高的吸水性和生物分子保留能力。按照本研究的设计,负压吸引器中包含的吸附材料直径、体积应完全一致。一个比较标准的操作的情况下,应当是整片吸附材料在采样过程中完全浸润液体,同时取下负压吸引器的时候,应当有一部分的多余液体能够从中流出来,即代表采用材料已经完全吸收饱和,不能再吸收更多的液体。
除此之外,负压吸引在口腔黏膜的应用是基于口腔黏膜的独特性质,与皮肤有明显的区别。口腔黏膜与皮肤,尽管都是人体的外部覆盖组织,但它们在结构、功能和应对外界刺激的方式上有所不同。以下是这两者的一些关键差异及其对负压吸引的影响:从组织结构的差异来看,口腔黏膜比皮肤薄,它的上皮层和基底层较为薄且透明。而皮肤的表皮层更厚,尤其是角质层更明显。这意味着,对于负压的应用,口腔黏膜更容易允许液体的渗透。从血流与组织液的差异来看:口腔黏膜中的血管丰富且更接近于黏膜表面,组织液的含量也相对多。这使得当我们应用负压时,黏膜中的组织液更容易被吸引出来。在口腔黏膜上,由于其特有的组织特性和较皮肤更高的修复能力,应用适度的负压不容易造成显著损伤。
因此,基于以上分析,负压吸引在口腔黏膜上的应用确实具有其独特性和优势,与在皮肤上的应用有着根本的不同。在进行实验或应用时,确实应该考虑到这些差异,并充分利用口腔黏膜的优点,同时确保操作的安全性和有效性。
请参阅图2,渗出液检测盒,包括壳体5,样本注入口6、观测区7、支撑片和检测试纸8;样本主入口位于壳体5的上表面顶部中心位置,用于接收含有渗出液的保存液;观测区7位于壳体5的上表面中段,位于顶部和底部之间;样本注入口6处下方设置有水平延伸的支撑片,支撑片上固定有检测试纸8,检测试纸8包括着质控条带和检测条带,均位于观测区内。检测试纸8包括的质控条带包括一般质控条带(C1)和唾液质控条带(C2)。一般质控条带(C1)检测组织渗出液中的蛋白质,而唾液质控条带(C2)检测唾液中的蛋白质。检测条带至少包括4条显色条,检测蛋白浓度。
其中,关于检测试纸8的工作原理是抗原抗体反应和酶催化显色反应(类似酶联免疫吸附试验enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。以渗出液中的蛋白多肽作为抗原,也就是被检测物,将相应的特异性抗体预置在条带上,当渗出液中的蛋白浸润到条带部位的时候,通过抗原抗体反应和酶催化显色反应,使之能够在条带部位显示出颜色。
请参阅图3,在质检区中,C1和C2条带为control条带,即质控条带。C1条带拟选用一种组织中稳定且保守存在的蛋白多肽,如β肌动蛋白(β-actin)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、胶原蛋白(collagen)等。C2条带拟选用唾液中稳定存在的蛋白多肽,如唾液黏蛋白等。C1条带显色即代表被检测样本中含有组织来源的渗出液和物质(包括蛋白),C2条带显色即代表被检测样本中含有唾液来源的液体和物质(包括蛋白)。对于检测组织渗出液来说,应该是C1条带显色而C2条带不显色,即代表被测样本中只含有组织来源的渗出液和物质,而不含有唾液来源的液体和物质,可避免唾液成分的干扰。
T1-T4是检测条带,在这些条带上事先预置了特异性的抗体和酶催化显色反应剂体系。按照预置不同浓度抗体的设计,起到半定量检测相应抗原含量的作用。以颗粒酶B(Granzyme B,GZB)为例,T1条带的GZB可检测浓度(即预置抗体的浓度)设定为10pg/mL;T2条带按照5倍比例提高预置抗体浓度,即可GZB可检测浓度为50pg/mL;以此类推,T3条带可检测浓度为250pg/mL,T4条带为1250pg/mL。
实施例2
与实施例1中提到的用于检测蛋白浓度的渗出液检测盒不同,实施例2的设计目标是提供一个多功能的抗原检测盒,可定性的检测不同类型的抗原。
按照预置不同类型抗体的设计,起到定性检测相应抗原的作用。在检测试纸8上,包括质检条带和检测条带。
其中,质检条带中的一般质控条带(C1)和唾液质控条带(C2)的设计依旧不变,而T1-T4条带分别预置着不同的抗体和酶催化显色体系,具体包括,I型干扰素、各种类型的白介素、组织生长因子等。每个条带均包含一个特定的酶催化显色体系,该体系会在与目标抗原结合时产生颜色变化,从而使得用户能够直观地读取结果
操作步骤:
(1)将样品液滴加至检测盒的样品孔。
(2)等待推荐的时间(例如10分钟),观察检测条带上的颜色变化。
(3)读取结果。若C1显色而C2不显色,说明检测盒正常工作。T1-T4条带的颜色变化则表示相应的抗原在样品中的存在。
由于此检测盒可以同时检测多种抗原,因此可以适用于那些需要快速和广泛筛查的场合,如在大型流行病爆发时进行筛查或在需要快速诊断的医院环境中。此外,该检测盒还可用于研究,以快速比较不同样品中各种生物分子的存在。
实施例3
基于相同的发明构思,本发明还提供了一种无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平方法,应用于如上述的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,其特征在于,参阅图1、2,包括如下步骤,
步骤S1、嘱患者使用生理盐水漱口,清洁口腔后确定拟采集部位,用棉球或纱布轻轻吸干该部位口腔黏膜表面的唾液,并注意隔湿;
步骤S2、将负压吸引器的管道1接口通过软管连接到负压装置,比如抽气设备,将负压吸引器外侧的微孔层B 405紧贴在拟采集部位的口腔黏膜上;
步骤S2、打开抽气设备,使来自口腔黏膜组织的渗出液通过外侧的微孔层B 405被吸附到中间间隙404中的材料吸附材料403中;当吸水达到饱和或达到预定的采样量,或观测到有液体开始流向单向阀3,关闭抽气设备并取下材料吸附材料层,将材料吸附材料层置入保存液中,确保渗出液与保存液充分混合。
步骤S4、从保存液中取预设范围内的样品液,滴入样本注入口6,样品液通过样本注入口进入检测试纸8并开始浸润扩散;
步骤S5、样品液浸润过程中,在质控条带中,判断样品液的来源是来自组织渗透液还是混杂有唾液中的蛋白质,确保样品液的准确性。当样品液浸润到检测条带,组织渗透液中的特定蛋白会被对应的抗体捕获,产生显色条带;在定性检测中,观察显色条带的出现位置,确定目标蛋白或其对应抗原是否存在;在半定量检测中,根据显色条带的数量,判断目标蛋白质在等比例稀释后的相对浓度。
本发明虽然已以较佳实施例公开如上,但其并不是用来限定本发明,任何本领域技术人员在不脱离本发明的精神和范围内,都可以利用上述揭示的方法和技术内容对本发明技术方案做出可能的变动和修改,因此,凡是未脱离本发明技术方案的内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化及修饰,均属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (6)
1.一种无创的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,其特征在于,包括负压吸引器和渗出液检测盒,
所述负压吸引器,包括吸附腔、微孔层、吸附材料和管道;所述吸附腔的一侧设有两块等距并列的所述微孔层,形成一个可放置所述吸附材料的中间间隙;所述管道设置弯角部分,便于所述负压吸引器通过所述弯角部分将所述吸附腔放置在所需采集的位置,所述管道一端通过软管连接一个负压装置,另一端与所述吸附腔另一侧连接;且所述管道与所述吸附腔连接的一端处设有单向阀,确保所述吸附腔采集时的稳定,避免了负压的反向流动;
所述渗出液检测盒,包括壳体、样本注入口、观测区、支撑片和检测试纸;所述样本注入口位于所述壳体的上表面顶部中心位置,用于接收含有所述渗出液的保存液;所述观测区位于所述壳体的上表面中段,位于所述顶部和底部之间;所述样本注入口处下方设置有水平延伸的所述支撑片,所述支撑片上固定有所述检测试纸,所述检测试纸包括质控条带和检测条带,均位于所述观测区内。
2.根据权利要求1所述的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,其特征在于,所述微孔层的宽度范围在3~7mm之内;所述微孔层的孔宽度范围为200~500微米之间。
3.根据权利要求2所述的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,其特征在于,所述管道的所述弯角的夹角范围在120°~150°之间。
4.根据权利要求1所述的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,其特征在于,所述吸附材料包括采样吸水纸或多孔海绵状的高分子聚合物。
5.根据权利要求1所述的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,其特征在于,所述检测试纸包括的所述质控条带包括一般质控条带和唾液蛋白质控条带;所述一般质控条带检测组织渗出液中的蛋白质,而所述唾液质控条带检测唾液中的蛋白质。
6.根据权利要求5所述的检测口腔黏膜组织渗出液蛋白水平装置,其特征在于,所述检测条带至少包括4条显色条,分别用以检测特定蛋白的类型或浓度。
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