CN117597489A - 用于湿态细菌控制的增强的ipbc - Google Patents
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- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
包含IPBC、氧化锌和细菌膜破坏物质的抗菌有效组合的杀生物组合物,以及工作组合物,其包含水、一种或多种有机化合物和对于工作组合物的湿态和干膜防腐有效的包含IPBC、氧化锌和细菌膜破坏物质的杀生物组合物。此外,一种增强IPBC在包含水和一种或多种有机化合物的湿态工作组合物中的抗菌活性的方法,其包括在氧化锌和细菌膜破坏物质存在的情况下用IPBC处理工作组合物,以及一种处理包含一种或多种有机化合物的含水工作制剂以防止、抑制或减少制剂的湿态细菌污染的方法,其包括用包含IPBC、氧化锌和细菌膜破坏物质的抗菌有效组合的杀生物组合物处理工作制剂。
Description
相关申请
本申请基于2021年5月21日提交的美国临时专利申请序列号63/191,612和2022年4月19日提交的美国临时专利申请序列号63/332,344并要求其优先权,所述申请通过引用并入本文。
背景
丁基氨基甲酸碘代丙炔基酯(Iodopropynyl butylcarbamate)(IPBC)是工业上重要的杀真菌剂,对其的认知是对真菌生物体的广谱活性,但对细菌物种的效力有大差异。在业界普遍认为,IPBC只能控制选择的细菌的生长。特别地,假单胞菌属(Pseudomonas)中的物种尤其因其对IPBC处理的抗性而为人所知。因此,例如,涂料生产商不得不使用许多杀生物剂产品,以实现在湿态和干膜态下充分保护涂料组合物免受微生物侵蚀。目前,涂料生产商需要分别购买和配制至少两种类型的杀生物成分,即湿态防腐剂和干膜防腐剂。
因此,仍然需要杀生物组合物,其作为单一产品,为涂料组合物和其它工作组合物提供抵抗范围广泛的微生物危害(即,当配制成涂料或工作组合物时,当组合物处于湿态以及当其已经转化成干膜时,同时防止或延缓微生物生长的单一产品),特别是抵抗湿态(例如,罐内)细菌和真菌侵蚀以及干膜态真菌和/或藻类侵蚀的充分保护。另外,由于减少或消除使用敏化剂和CMR防腐剂的全球监管压力,需要这些不含异噻唑啉酮、巯氧吡啶(pyrithiones)和甲醛的杀生物组合物。
概述
本公开提供了包含杀生物剂丁基氨基甲酸碘代丙炔基酯(IPBC)的单一杀生物产品,该产品能够为含有一种或多种有机化合物的水性工作组合物(特别是涂料组合物诸如油漆和着色剂)以及填缝混合料(无论处于湿态还是作为干膜)提供足够水平的保护,无论是在湿态还是作为干膜,以对抗广泛的生物类型(细菌、真菌)。通过使用本文所述的本发明的杀生物组合物,可以避免用多种来源的不同杀生物剂来配制涂料组合物的需要。也就是说,不需要向涂料组合物中加入任何其它含杀生物剂的成分,就可以获得涂料组合物对生物侵蚀(特别是湿态细菌侵蚀)的足够的湿态和干膜态抗性。
根据本公开,氧化锌增强了IPBC在水性组合物中的杀菌活性,并且IPBC和氧化锌的组合协同地起作用。IPBC与氧化锌的组合获得了强且出乎意料的抗IPBC抗性细菌(如假单胞菌属(Pseudomonas))的杀灭活性。IPBC和氧化锌进一步与1,2-己二醇的组合在控制湿态细菌生长方面出乎意料地且格外地有效,使杀真菌剂IPBC重新用于杀死湿态细菌而不损失其干膜活性。本公开的杀生物组合物代表了显著的进步,并且满足了对无异噻唑啉酮、巯氧吡啶和甲醛的罐内和干膜防腐的重要市场需求。
因此,与涂料工业中分开的湿态和干膜防腐包装的常规使用相比,根据本公开的杀生物组合物提供了以下实际有利方面:
i)降低了最终用户(涂料配制者)的成本;
ii)最终用户购买、存储和维护的不同库存项目更少;
iii)操作简单性,仅将一种而不是几种含杀生物剂的产品计量加入到涂料组合物中;
iv)减轻了环境影响,这是由于生产、包装和运输单一的含杀生物剂的产品而不是几种产品导致的较低的能量使用;以及
v)通过不含异噻唑啉酮、巯氧吡啶和甲醛,对最终用途产品产生有利的监管影响。
本公开的各种示例方面可以总结如下。
方面1:一种杀生物组合物,其包含IPBC与氧化锌的抗菌有效组合。
方面2:方面1的杀生物组合物,其中IPBC和氧化锌以25∶1至1∶25的重量比存在。
方面3:方面1或2的杀生物组合物,其中氧化锌包含氧化锌纳米颗粒。
方面4:方面1-3的杀生物组合物,其还包含一种或多种细菌膜破坏物质。
方面5:方面1-4的杀生物组合物,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种邻位二醇。
方面6:方面1-5的杀生物组合物,其中一种或多种邻位二醇包含1,2-己二醇。
方面7:方面4-7的杀生物组合物,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种二醇醚。
方面8:方面1-7的杀生物组合物,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含己基卡必醇(hexyl carbitol)、TPnB二醇醚、丁氧基三甘醇或三醋精。
方面9:方面1-8的杀生物组合物,其还包含一种或多种另外的杀生物物质。
方面10:方面1-9的杀生物组合物,其中一种或多种另外的杀生物物质包含一种或多种抗真菌物质和/或一种或多种杀藻物质。
方面11:方面1-10的杀生物组合物,其包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种邻位二醇。
方面12:方面1-11的杀生物组合物,其包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的一种或多种邻位二醇。
方面13:方面7的杀生物组合物,其包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种二醇醚。
方面14:方面1-13的杀生物组合物,其包含约10重量%的IPBC、约5重量%的氧化锌和约60重量%的一种或多种二醇醚。
方面15:一种工作组合物,其包含水、一种或多种有机化合物和对于所述工作组合物的湿态抗菌防腐有效的包含IPBC和氧化锌的杀生物组合物。
方面16:方面15的工作组合物,其中IPBC和氧化锌以25∶1至1∶25的重量比存在。
方面17:方面15或16的工作组合物,其中氧化锌包含氧化锌纳米颗粒。
方面18:方面15-17的工作组合物,其中杀生物组合物还包含一种或多种细菌膜破坏物质。
方面19:方面18的工作组合物,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种邻位二醇。
方面20:方面18或19的工作组合物,其中一种或多种邻位二醇包含1,2-己二醇。
方面21:方面18的工作组合物,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种二醇醚。
方面22:方面21的工作组合物,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含己基卡必醇、TPnB二醇醚、丁氧基三甘醇或三醋精。
方面23:方面15-22的工作组合物,其还包含一种或多种另外的杀生物物质。
方面24:方面23的工作组合物,其中一种或多种另外的杀生物物质包含一种或多种抗真菌物质和/或一种或多种杀藻物质。
方面25:方面15-19的工作组合物,其中杀生物组合物包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种邻位二醇。
方面26:方面26的工作组合物,其中杀生物组合物包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的一种或多种邻位二醇。
方面27:方面15-21的工作组合物,其包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种二醇醚。
方面28:方面27的工作组合物,其包含约10重量%的IPBC、约5重量%的氧化锌和约60重量%的一种或多种二醇醚。
方面29:方面15-28的工作组合物,其中一种或多种有机化合物包含一种或多种聚合物粘合剂或填料。
方面30:方面15-29的工作组合物,其包含化妆品、盥洗用品、个人护理品、家用品、洗衣用品、清洁用品、消毒用品、油漆、涂料、矿物浆料(mineral slurry)、颜料、液体浆(pulp slurry)、纸浆、纸、金属加工液、建筑用品(construction)、植物营养物、聚合物晶格、墙板填缝混合料、墙板、腻子膏(spackling)、密封剂、粉饰灰泥、胶泥、沥青乳液、木材防腐剂、釉料、着色剂、石膏、胶粘剂、纺织品、皮革处理、兽皮处理(hide treatment)、无纺织物、建筑材料、粉饰灰泥、混凝土或嵌缝料产品。
方面31:方面15-29的工作组合物,其中一种或多种聚合物粘合剂或填料包含一种或多种丙烯酸酯、丁二烯、PVA、EVA、苯乙烯或乙酸乙烯酯聚合物。
方面32:一种增强IPBC在包含水和一种或多种有机化合物的湿态工作组合物中的抗菌活性的方法,其包括在氧化锌存在的情况下用IPBC处理工作组合物。
方面33:方面32的方法,其中IPBC和氧化锌以25∶1至1∶25的重量比存在。
方面34:方面32或33的方法,其中氧化锌包含氧化锌纳米颗粒。
方面35:方面32-34的方法,其中用一种或多种细菌膜破坏物质进一步处理工作组合物。
方面36:方面32-35的方法,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种邻位二醇。
方面37:方面36的方法,其中一种或多种邻位二醇包含1,2-己二醇。
方面38:方面32-35的方法,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种二醇醚。
方面39:方面38的方法,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含己基卡必醇、TPnB二醇醚、丁氧基三甘醇或三醋精。
方面40:方面32-29的方法,其中用一种或多种另外的杀生物物质进一步处理工作组合物。
方面41:方面32-40的方法,其中一种或多种另外的杀生物物质包含一种或多种抗真菌物质和/或一种或多种杀藻物质。
方面42:方面32-41的方法,其包括用湿态抗菌有效量的杀生物组合物处理工作组合物,所述杀生物组合物包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种邻位二醇。
方面43:方面32-42的方法,其中杀生物组合物包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的一种或多种邻位二醇。
方面44:方面32-43的方法,其包括1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种二醇醚。
方面45:方面32-44的方法,其包括约10重量%的IPBC、约5重量%的氧化锌和约60重量%的一种或多种二醇醚。
方面46:一种处理含有一种或多种有机化合物的水性工作制剂以防止、抑制或减少制剂的湿态细菌污染的方法,其包括用包含IPBC和氧化锌的抗菌有效组合的杀生物组合物处理工作制剂。
方面47:方面46的方法,其中IPBC和氧化锌以25∶1至1∶25的重量比存在。
方面48:方面46或47的方法,其中氧化锌包含氧化锌纳米颗粒。
方面49:方面46-48的方法,其还包括用一种或多种细菌膜破坏物质处理工作制剂。
方面50:方面46-49的方法,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种邻位二醇。
方面51:方面50的方法,其中一种或多种邻位二醇包含1,2-己二醇。
方面52:方面46-49的方法,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种二醇醚。
方面53:方面46-52的方法,其中一种或多种细菌膜破坏物质包含己基卡必醇、TPnB二醇醚、丁氧基三甘醇或三醋精。
方面54:方面46-53的方法,其还包括用一种或多种另外的杀生物物质处理工作制剂。
方面55:方面46-54的方法,其中一种或多种另外的杀生物物质包含一种或多种抗真菌物质和/或一种或多种杀藻物质。
方面56:方面46-50的方法,其包括用杀生物组合物处理工作制剂,所述杀生物组合物包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种邻位二醇。
方面57:方面46-56的方法,其中杀生物组合物包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的一种或多种邻位二醇。
方面58:方面46-52的方法,其包括1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种二醇醚。
方面59:方面46-58的方法,其包括约10重量%的IPBC、约5重量%的氧化锌和约60重量%的一种或多种二醇醚。
方面60:方面46-59的方法,其中一种或多种有机化合物包含一种或多种聚合物粘合剂或填料。
方面61:方面46-60的方法,其中工作组合物包含化妆品、盥洗用品、个人护理品、家用品、洗衣用品、清洁用品、消毒用品、油漆、涂料、矿物浆料、颜料、液体浆、纸浆、纸、金属加工液、建筑用品、植物营养物、聚合物晶格、墙板填缝混合料、墙板、腻子膏、密封剂、粉饰灰泥、胶泥、沥青乳液、木材防腐剂、釉料、着色剂、石膏、胶粘剂、纺织品、皮革处理、兽皮处理、无纺织物、建筑材料、粉饰灰泥、混凝土或嵌缝料产品。
方面62:方面60的方法,其中一种或多种聚合物粘合剂或填料包含一种或多种丙烯酸酯、丁二烯、PVA、EVA、苯乙烯或乙酸乙烯酯聚合物。
下面将更详细地论述本公开的其它特征和方面。
附图简述
在说明书的其余部分,包括参考附图,更具体地阐述了本公开的完整和可实现的公开内容,其中:
图1描绘了在0.125-0.5mM PAβN存在并且有或无IPBC的情况下铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)(ATCC#10145)的生长曲线;
图2描绘了在有和无纳米颗粒ZnO的情况下铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的生长曲线,以及具有不同水平的IPBC和纳米颗粒ZnO的棋盘稀释法(checkerboard assay);
图3描绘了针对IPBC和ZnO的铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的杀灭曲线;
图4描绘了1,2-己二醇对铜绿假单胞菌(ATCC#10145)膜渗透性的影响;
图5描绘了针对IPBC、ZnO和1,2-己二醇(在1,2-己二醇的亚抑制浓度)的组合的铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的杀灭曲线;
图6是优选的本发明组合物(“Omniphase Z”)vs IPBC针对多种微生物的最小抑制浓度(MIC)的协同指数(S.I.)图;
图7描绘了填缝混合料和油漆中的针对多种微生物的比较攻击测试结果;
图8描绘了油漆中的比较干膜细菌抗性测试结果;
图9描绘了1,2-己二醇、1,2-辛二醇、德士醇(texanol)和各种二醇醚对铜绿假单胞菌(ATCC#10145)膜渗透性的影响;
图10描绘了ROC曲线,该曲线显示了由各种溶剂引起的膜透化程度与它们保存含有IPBC/ZnO的油漆的能力之间的关系;
图11描绘了针对用己基卡必醇(“1750-8”)配制的Omniphase Z的铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的杀灭曲线;和
图12是用己基卡必醇(“1750-8”)制备的Omniphase Z vs IPBC针对多种微生物的最小抑制浓度(MIC)的协同指数(S.I.)图。
在本说明书和附图中重复使用附图标记(reference character)旨在表示本公开的相同或类似的特征或元件。
详细描述
本领域普通技术人员应当理解,本讨论仅是示例性实施方案的描述,并且不旨在限制本公开的更广泛的方面。
氧化锌的存在扩大了IPBC在工作组合物中对抗多种不同细菌物种的活性谱。与1,2-己二醇的进一步组合显著加强了ZnO/IPBC在油漆、着色剂和填缝混合料中的活性,并且在湿态细菌攻击测试中显著优于1,2-己二醇、IPBC以及IPBC与1,2-己二醇的组合。制备含有10% IPBC、5%ZnO和60%1,2-己二醇的制剂,并在多种基质中进行测试,并且显示在着色剂、油漆和填缝混合料中具有广谱湿态细菌和真菌控制性能,在油漆中具有干膜真菌和细菌控制性能。本公开的杀生物组合物是显著的进步,并且满足了对无异噻唑啉酮、巯氧吡啶和甲醛的罐内和干膜防腐的重要市场需求。
IPBC
本公开的杀生物组合物包含丁基氨基甲酸3-碘代丙-2-炔-1-基酯(CAS号55406-53-6,有时在本文中称为“IPBC”)。IPBC有时也称为正丁基氨基甲酸3-碘代-2-丙炔基酯、丁基氨基甲酸3-碘代-2-丙炔基酯、丁基氨基甲酸碘代丙炔基酯或碘卡(iodocarb)。基于组合物的重量,IPBC以1重量%至25重量%、5重量%至20重量%、5重量%至15重量%或约10重量%的量存在于杀生物组合物中。
氧化锌
本公开的杀生物组合物还包含氧化锌(有时在本文中称为“ZnO”)。优选地,氧化锌包括粒度小于50微米的氧化锌颗粒。氧化锌也可以作为纳米颗粒存在。基于组合物的重量,氧化锌以1重量%至25重量%、2重量%至20重量%、3重量%至15重量%、4重量%至10重量%或约5重量%的量存在于杀生物组合物中。IPBC与ZnO的重量比应控制在25∶1至1∶25的范围内,包括端值。在本公开的各个方面,本公开的杀生物组合物中IPBC与ZnO的重量比为20∶1至1∶20、15∶1至1∶15、10∶1至1∶10、5∶1至1∶5或4∶1至1∶4。另一方面,IPBC与ZnO的重量比为2∶1。
膜破坏物质
本公开的杀生物组合物任选包含一种或多种能够破坏微生物膜,特别是细菌膜的物质。IPBC/ZnO活性的加强可能与膜透化有关。例如,由细菌膜破坏物质引起的透化程度与膜破坏物质提高涂料组合物中IPBC/ZnO抗菌性能的能力相关。
在本公开的各个方面,膜破坏物质包含一种或多种邻位二醇。可用于本公开的各个方面的邻位二醇包括1,2-己二醇,包括丙二醇、甲基丙二醇、丁二醇、1,2-戊二醇、辛二醇、1,2-癸二醇、辛基(caprylyl)甘油基醚、乙基己基甘油、单月桂酸甘油酯、单癸酸甘油酯、单辛酸甘油酯及其组合。在本公开的其它方面,一种或多种邻位二醇包括1,2-己二醇(CAS号6920-22-5,也称为DL-1,2-己二醇、1,2-二羟基己烷、dl-己烷-1,2-二醇或5,6-二羟基己烷)。另外,在本文公开的各个方面,膜破坏物质包含一种或多种二醇醚。在本文公开的各个方面中有用的二醇醚可包括己基卡必醇、己基CELLOSOLVETM、丁基CELLOSOLVETM和乙氧基三甘醇、DOWANOLTMEph6二醇醚(聚乙二醇苯基醚)、UCARTMFilmer IBT(2,2,4-三甲基-1,3-戊二醇单异丁酸酯)、DOWANOLTMLoV 485二醇醚(双-二丙二醇正丁基醚己二酸酯)、DOWANOLTMTPnB二醇醚(三丙二醇正丙基醚)、DOWANOLTMPnP二醇醚(丙二醇正丙基醚)、丁氧基三甘醇、Arcosolv PnB(1-丁氧基-2-丙醇)、Texanol或其组合。
一种或多种邻位二醇以组合物重量的40%至80%的量存在于本公开的杀生物组合物中。在本公开的各个方面,一种或多种邻位二醇以组合物重量的约60%的量存在于本公开的杀生物组合物中。另一方面,IPBC与氧化锌与一种或多种邻位二醇的重量比为10∶5∶60(2∶1∶12)。基于杀生物组合物的重量,本公开的优选杀生物剂组合物包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的1,2-己二醇。基于杀生物组合物的重量,本公开的特别优选的杀生物组合物包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的1,2-己二醇。
一种或多种二醇醚以组合物重量的40%至80%的量存在于本公开的杀生物组合物中。在本公开的各个方面,一种或多种二醇醚以组合物重量的约60%的量存在于本公开的杀生物组合物中。另一方面,IPBC与氧化锌与一种或多种二醇醚的重量比为10∶5∶60(2∶1∶12)。基于杀生物组合物的重量,本发明的优选杀生物组合物包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的己基卡必醇。基于杀生物组合物的重量,本发明的特别优选的杀生物组合物包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的己基卡必醇。
杀生物剂
除了IPBC以外,一种或多种其它杀生物剂还可存在于本公开的杀生物组合物中。一方面,本发明的杀生物组合物不含另外的杀生物剂。另一方面,另外的一种或多种杀生物剂包括一种或多种抗真菌和/或杀藻杀生物剂。一种或多种另外的杀生物剂可包括氨基甲酸甲基苯并咪唑-2-基酯(“BCM”)和/或3-(3,4-二氯苯基)-1,1-二甲基脲(“敌草隆”)。可以存在于本公开的杀生物组合物中的其它杀生物剂包括但不限于本领域已知的任何杀生物化合物。可以使用的补充湿态活性物质包括但不限于5-氯-2-甲基-2H-异噻唑-3-酮/2-甲基-2H-异噻唑-3-酮(“CMIT/MIT”)和2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇(“溴硝醇”)。可以使用的补充除藻剂包括但不限于2-叔丁基氨基-4-乙氨基-6-甲硫基-1,3,5-三嗪(“特丁净”)和3-(4-异丙基苯基)-1,1-二甲基脲(“异丙隆”)。
存在于杀生物组合物中的任何杀生物剂以相对细小的颗粒(例如,粒度为5至75微米的颗粒)形式存在是有利的。可用常规技术诸如研磨、碾磨、筛分等获得所需的粒度。
表面活性剂
本公开的杀生物组合物可以利用一种或多种表面活性剂。表面活性剂起到乳化剂的作用,有助于将制剂的不溶于水的组分保持在悬浮于水相中的小颗粒的稳定分散体(乳液)的形式。
合适类型的非离子表面活性剂包括但不限于聚氧基烷二醇烷基醚(例如,聚氧基乙二醇烷基醚、聚氧丙烯烷基醚、聚氧乙烯/丙烯烷基醚)、葡糖苷烷基醚、聚氧基烷二醇烷基酚醚(例如,聚氧基乙二醇烷基酚醚、聚氧基丙二醇烷基酚醚、聚氧乙烯/丙烯二醇烷基酚醚)、甘油烷基酯、聚氧基烷二醇脱水山梨醇烷基酯(例如,聚氧基乙二醇脱水山梨醇烷基酯)、脱水山梨醇烷基酯、椰油酰胺MEA、椰油酰胺DEA、聚乙二醇和聚丙二醇的嵌段共聚物(泊洛沙姆)、聚烷氧基化牛油胺、烷氧基化脂肪酸等及其组合。
特定的非离子型表面活性剂包括烷氧基化的脂肪族一元醇和烷氧基化的芳族一元醇。此类表面活性剂通常通过使一种或多种环氧烷烃(alkylene oxides)(例如,环氧乙烷、环氧丙烷、环氧乙烷和环氧丙烷的混合物)与一种或多种一元醇(例如,脂肪醇,其可以是例如直链或支链的伯醇或仲醇,或芳香醇,诸如苯酚,包括烷基和芳烷基取代的苯酚)反应来制备。每摩尔一元醇反应的环氧乙烷的摩尔数可以根据需要变化,但通常平均为约2至约50。如果使用不止一种类型的环氧烷烃,则环氧烷烃可以作为混合物反应(以提供具有无规共聚物结构的聚氧化烯链段)或顺序反应(以提供具有嵌段共聚物结构的聚氧化烯链段)。
用于本公开的另一种类型的非离子型表面活性剂是烷氧基化的脂族一元醇,其为乙氧基化的C10-C18脂族醇(特别是线性C12-C16脂族伯醇(或此类醇的混合物),其已经与每摩尔脂族醇约6至约15摩尔环氧乙烷反应,以提供每分子含有平均约6至约15个氧乙烯重复单元的烷氧基化醇)。例如,烷氧基化的脂族一元醇可以是每分子平均含有约8至约12个环氧乙烷单元的乙氧基化的C12-C16直链脂族醇。特别地,含有平均约10个环氧乙烷单元的乙氧基化的十三醇适用于本公开。
用于本公开的另一种类型的非离子型表面活性剂是含有环氧乙烷和环氧丙烷单元的烷氧基化的C2-C8脂族醇。例如,C2-C8脂族醇可以是正丁醇。环氧乙烷和环氧丙烷单元可以以嵌段方式排列(例如,表面活性剂可包含聚氧乙烯嵌段和聚氧丙烯嵌段)。也适合用作非离子型表面活性剂的是烷氧基化的酚,特别是乙氧基化的酚,其中酚可以被一个或多个烷基(特别是长链烷基,诸如壬基或十二烷基或芳烷基,诸如在三苯乙烯基酚中)取代。
合适的阴离子型表面活性剂包括但不限于在其头部含有阴离子官能团诸如硫酸根、磺酸根、磷酸根和羧酸根的表面活性剂。阴离子官能团的阳离子抗衡离子可以是例如碱金属(例如,Na、K)或胺(铵)阳离子诸如季铵。本公开中有用的阴离子型表面活性剂类型包括但不限于烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐、硫酸化链烷醇酰胺、甘油酯硫酸盐、烷基芳基磺酸盐(包括直链烷基苯磺酸盐、支链烷基苯磺酸盐、烷基萘磺酸盐)、α-烯烃磺酸盐、木质素磺酸盐、磺基-羧酸化合物(例如,月桂基磺基乙酸钠、磺基琥珀酸盐(包括二烷基磺基琥珀酸盐)、磺基琥珀酸盐、有机含磷表面活性剂、骶苷(sacrosides)、羟基链烷磺酸盐、链烷磺酸盐、烷基苯氧基聚氧乙烯丙基磺酸盐、聚氧乙烯烷基磺基苯基醚的盐、N-甲基-N-油基牛磺酸钠、N-烷基磺基琥珀酸单酰胺二钠、石油磺酸盐、硫酸化的蓖麻油、硫酸化的牛羊油、脂族烷基酯的硫酸酯的盐、烷基硫酸酯的盐、烷基硫酸酯的盐、聚氧乙烯烷基醚的硫酸酯、脂族单甘油酯的硫酸酯的盐、氢化椰子油脂肪酸的单硫酸化单甘油酯的钠盐、聚氧乙烯烷基苯基醚的硫酸酯的盐、烷基磷酸酯的盐、聚氧乙烯烷基醚的磷酸酯的盐、聚氧乙烯烷基苯基醚的磷酸酯的盐、苯乙烯-马来酸酐共聚物的部分皂化的化合物、烯烃-马来酸酐共聚物的部分皂化的化合物、萘磺酸盐-***缩合物、高级烷基磺基乙酸盐和1,2-二羟基丙烷磺酸盐的高级脂肪酸酯及其组合。这些阴离子型表面活性剂中特别地有磺酸盐表面活性剂,特别是烷基芳基磺酸盐,尤其是C8-C18烷基苯磺酸盐,诸如十二烷基苯磺酸盐,及其组合。
使用与可存在于组合物中的任何增稠剂和/或悬浮剂组合有效地提供物理稳定的分散体的总量的表面活性剂。获得物理稳定的分散体所需的表面活性剂的量将取决于许多因素,包括例如存在的杀生物剂和增稠剂/悬浮剂的类型和量以及使用的表面活性剂的类型。然而,通常使用的表面活性剂的量足以提供在约5∶1至约50∶1或约6∶1至约20∶1的范围内的杀生物剂∶表面活性剂的重量比。
此外,某些表面活性剂和表面活性剂的组合也具有众所周知的破坏膜的活性。这种活性对几种阳离子表面活性剂是普遍的,但对某些非离子和离子表面活性剂也是如此。
增稠剂/悬浮剂
本公开的杀生物组合物可包括一种或多种能够起到增稠剂或悬浮剂作用的物质,以使杀生物组合物物理稳定。特别地,选择增稠剂和/或悬浮剂的类型和量,使得在25℃下,所得杀生物组合物具有至少300cps的粘度。在其它实施方案中,杀生物组合物在25℃下的粘度为至少400cps或至少500cps。通常,希望杀生物剂组合物的粘度不会增加到难以通过泵送转移或处理杀生物剂组合物的程度。使用Brookfield粘度计(5号转子,100rpm)测量粘度。
合适的增稠剂/悬浮剂包括但不限于粘土(包括天然粘土和有机改性粘土)、硅酸盐(例如,二氧化硅诸如改性二氧化硅和煅制二氧化硅)、多糖(例如,树胶诸如黄原胶、纤维素聚合物)、聚丙烯酸酯等及其组合。
可选的附加成分
除了上面提到的那些组分之外,一种或多种其它组分还可以另外存在于本公开的杀生物组合物中。然而,在某些实施方案中,除了一种或多种消泡剂可任选地存在于此类实施方案中之外,杀生物组合物基本上由或仅由前述组分组成。
任选的附加组分包括但不限于分散剂、消泡剂(止泡剂,例如基于硅酮的消泡剂、基于矿物油的消泡剂、基于疏水性二氧化硅的消泡剂)、掩蔽剂/螯合剂、pH调节剂、填充剂、着色剂、防冻剂、缓蚀剂(防腐蚀添加剂)、紫外光稳定剂、抗氧化剂、溶剂、助溶剂、防垢剂等。
制作方法
根据本公开的杀生物组合物可通过采用本领域已知的任何技术来制备,所述技术使用表面活性剂(乳化剂)、增稠剂、悬浮剂以及这些成分的组合来产生不溶于水的物质在水中的分散体。例如,可以向合适尺寸的混合容器中加入水,然后加入希望包含在杀生物组合物中的表面活性剂。在搅拌表面活性剂/水混合物的同时,加入杀生物剂和一部分增稠剂/悬浮剂。可以继续高速和/或高剪切混合,直至获得具有所需粒度(通常为5-75微米)的均匀乳液。在该步骤中,混合物可以被加热到略高于室温的温度。然后可加入剩余的增稠剂/悬浮剂,搅拌混合物直至再次均匀。在最后加入增稠剂/悬浮剂之前,可将混合物冷却至室温。然后可通过泵送或其它方式将杀生物组合物转移到一个或多个合适的储存容器诸如罐、桶或箱中。
工作组合物
本公开的杀生物组合物可用于在多种工作组合物中,特别是水基产品中,赋予对微生物生长(包括细菌、真菌和藻类生长)的抗性。由于杀生物组合物通常被制备成含有相对高浓度的活性成分(即,杀生物剂),因此它们通常以浓缩物的形式使用,所述浓缩物以相对少量与一种或多种其它成分组合,以配制适于其预期用途的最终产品。
在一个方面,本发明的工作组合物包含水、一种或多种有机化合物和对于工作组合物的湿态抗菌防腐有效的包含IPBC和氧化锌的组合的杀生物组合物。IPBC和氧化锌可以以25∶1至1∶25的重量比存在于工作组合物中。
在各个方面,工作组合物是油漆或涂料组合物,其中其它成分可包括一种或多种颜料、聚合物树脂粘合剂或填料(例如,胶乳树脂)和载体媒介物诸如水。特定的聚合物树脂包括丙烯酸酯、丁二烯、PVA、EVA、苯乙烯或乙酸乙烯酯聚合物。在本公开的一个实施方案中,将杀生物组合物以涂料组合物重量的0.2-3%的量计量加入到涂料组合物特别是水基涂料组合物(例如乳胶漆)中。
另一方面,本公开的工作组合物可以是封缝止水合成物(joint sealingcompound)。封缝止水合成物(也称为墙板填缝混合料、干墙填缝混合料或墙板泥浆)用于将胶带粘附到墙板(也称为干墙、石膏板或石膏灰胶纸夹板(sheetrock))上,以覆盖胶带并遮盖墙板表面的缺陷。典型的墙板填缝混合料包含大量或较大比例的石膏或石灰石和水,以及相对较小比例的石头、粘土和聚合物。
本公开的杀生物组合物可以例如用于任何以下类型的产品:化妆品、盥洗用品、个人护理品、家用品、洗衣用品、清洁用品、消毒用品、油漆、涂料、矿物浆料、颜料、液体浆、纸浆、纸、金属加工液、建筑用品、植物营养物、聚合物晶格、墙板填缝混合料、墙板、腻子膏、密封剂、粉饰灰泥、胶泥、沥青乳液、木材防腐剂、釉料、着色剂、石膏、胶粘剂、纺织品、皮革处理、兽皮处理、无纺织物、建筑材料、粉饰灰泥、混凝土或嵌缝料产品,以及其中希望在湿态和干膜态两者中抑制或预防不希望微生物生长的任何其它应用。
使用方法
本公开的另一方面包括增强IPBC在包含水和一种或多种有机化合物的湿态工作组合物中的抗菌活性的方法,其包括在氧化锌存在的情况下用IPBC处理工作组合物。IPBC和氧化锌可以以25∶1至1∶25、20∶1至1∶20、15∶1至1∶15、10∶1至1∶10、5∶1至1∶5或4∶1至1∶4的重量比存在。另一方面,IPBC与ZnO的重量比为2∶1。氧化锌可包括氧化锌纳米颗粒。在该方法的另一方面,用一种或多种细菌膜破坏物质进一步处理工作组合物。一种或多种细菌膜破坏物质可包括1,2-己二醇、己基卡必醇、TPnB二醇醚、丁氧基三甘醇或三醋精。
在该方法的另一方面,进一步用一种或多种另外的杀生物物质处理工作组合物,所述杀生物物质可包括一种或多种抗真菌物质和/或一种或多种杀藻物质。
另一方面,使用方法包括用湿态抗菌有效量的杀生物组合物处理工作组合物,基于杀生物组合物重量,所述杀生物组合物包含1%至25%重量的IPBC、1%至25%重量的氧化锌和40%至80%重量的1,2-己二醇。基于杀生物剂组合物的重量,该方法中使用的杀生物剂组合物还可包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的1,2-己二醇。
另一方面,使用方法包括用湿态抗菌有效量的杀生物组合物处理工作组合物,基于杀生物组合物重量,所述杀生物组合物包含1%至25%重量的IPBC、1%至25%重量的氧化锌和40%至80%重量的己基卡必醇。基于杀生物剂组合物的重量,该方法中使用的杀生物剂组合物还可包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的己基卡必醇。
本公开的另一方面包括处理含有一种或多种有机化合物的水性工作制剂以防止、抑制或减少制剂的湿态细菌污染的方法,该方法包括用杀生物组合物处理工作制剂,所述杀生物组合物包含如上所述的IPBC与氧化锌的抗菌有效组合。
在本说明书中,已经以使得能够书写清楚和简明的说明书的方式描述了实施方案,但是希望并且将理解,在不脱离本公开的情况下,可将实施方案不同地组合或者分离。例如,应当理解,本文描述的所有优选特征适用于本文描述的公开内容的所有方面。
在一些实施方案中,本文的公开内容可被解释为排除不会显著影响组合物或方法的基本和新特征的任何要素或流程步骤。另外,在一些实施方案中,本公开可被解释为排除本文未指定的任何要素或流程步骤。
如本文中所用,术语“约”、“大致”或“大概”,当用于修饰值时,表示该值可以升高或降低10%并保持在所公开的方面内,诸如7.5%、诸如5%、诸如4%、诸如3%、诸如2%、诸如1%,或其间的任何范围或值。此外,当用于描述材料中物质的量时,术语“基本上不含”不限于完全或彻底不含,而是可以对应于材料中缺少任何可感知或可检测量的所述物质。因此,例如,当材料中的物质的量低于用于测量材料中的物质的量的工业接受的仪器或测试的精度时,材料“基本上不含”物质。在某些示例性实施方案中,当材料中的物质的量按材料的重量计小于10%、小于9%、小于8%、小于7%、小于6%、小于5%、小于4%、小于3%、小于2%、小于1%、小于0.5%或小于0.1%时,材料可以“基本上不含”物质。应当理解,在某些示例性实施方案中,本文所述的组合物可以基本上不含任何未具体列举的物质。
如在本申请和权利要求中所使用的,除非上下文另有明确规定,否则单数形式“一个/种(a)”、“一个/种(an)”和“该(the)”包括复数形式。另外,术语“包括”意指“包含”。本公开的方法和组合物,包括其组分,可以包含本文所述实施方案的基本要素和限制以及本文所述的或另外可用于营养组合物中的任何另外的或任选的成分、组分或限制,由其组成或基本上由其组成。
除非另有说明,说明书或权利要求中使用的表示成分数量、性质如分子量、百分比等的所有数字应理解为由术语“约”修饰。因此,除非另外指明,隐含地或明确地,列出的数值参数是近似值,其可取决于所寻求的期望性质和/或在标准测试条件/方法下的检测极限。当直接和明确区分实施方案与所讨论的现有技术时,实施方案数字不是近似的,除非记载了措辞“约”。
如本文中所用,“任选的”或“任选地”意指随后描述的材料、事件或情况可以存在或发生或者可以不存在或发生,以及该描述包括材料、事件或情况存在或发生的情况和其不存在的情况。如本文中所用,“w/w%”和“wt%”意指重量占总重量的百分比或相对于组合物中另一组分的百分比。
短语“有效量”意指促进、改善、刺激或激励对特定疾患或病症或疾患或病症的特定症状的反应的化合物的量。
尽管本文参考具体实施方案说明和描述了本公开,但是本公开并不局限于所示的细节。相反,可以在权利要求的等同范围内并且在不背离本公开的情况下对细节进行各种修改。
实施例
实验方法:
生长曲线
为了生成生长曲线,将来自平板计数琼脂的铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的过夜培养物提升并重悬于dH2O中,并用无菌Mueller Hinton肉汤(MHB)调节至OD600=0.01。将该培养物分配到含有指定的杀生物剂的未覆盖的96孔板的孔中。然后最初测量OD600,然后在恒定的双轨振荡下在37℃下每30分钟测量一次,持续16小时。由于用一些测试化合物给予的样品的不透明性,通过从含有无菌MHB的孔中减去背景,然后从它们的初始(t=0)测量值中减去背景,产生曲线。
最小抑制浓度测试
使用以下特定测试参数,通过微量肉汤稀释法(microbroth dilution)测定MIC:
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基于相当于8x108 CFU/mL的1.0的OD600,计算通过OD600的必要生物体稀释度。对于每次测定,杀生物剂稀释以2倍的增量进行。
协同指数计算
根据下面的质量作用方程计算协同指数(SI)得分:
S.I.=[MIC[A]混合/MIC[A]单独]+[MIC[B]混合/MIC[B]单独]
根据EUCAST指南的定义,成分的组合被确定为协同(S.I.≤0.5)、累加(S.I.>0.5至1)、无关(S.I.>1至<2)或拮抗(S.I.≥2)。参见欧洲临床微生物学和传染病学会(ESCMID)的抗微生物剂敏感性测试的欧洲委员会(EUCAST)。EUCAST Definitive Document E.Def1.2,May 2000:Terminology relating to methods for the determination ofsusceptibility of bacteria to antimicrobial agents,Clin.Microbiol.Infect.Off.Publ.Eur.Soc.Clin.Microbiol.Infect.Dis.6,503-508(2000);Helander I.M.,Mattila-Sandholm T.,Fluorometric assessment of gram-negative bacterialpermeabilization,J.Appl.Microbiol.88:213-219(2000)。
棋盘稀释法(Checkerboard Assay)
棋盘稀释法通过将Polyphase PW40(40% IPBC)和20%纳米颗粒ZnO分散体(Sigma#721077)分别计量加入到100微升含有约1.0*105CFU/mL铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的Mueller Hinton肉汤中来进行。然后将平板在持续的双轨振荡下于37℃孵育过夜。第二天,让分散体在工作台上静置2小时,并对平板进行拍照。该测定中的生长被定义为上清液的浊度。
杀灭曲线
将在胰蛋白酶大豆肉汤中生长的铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的过夜培养物在含有指定水平的测试化合物的Mueller Hinton肉汤中稀释至OD600=0.7。将Polyphase PW40(40% IPBC)计量加入到含有IPBC的样品中。从50% ZnO分散体(“1678-54”)计量加入含有ZnO的样品。通过将1mL样品加入9mL Dey-Engley中和肉汤中并在1x Butterfield磷酸盐缓冲液中进行系列稀释来收集时间点。在35℃孵育过夜后,从胰蛋白酶大豆琼脂中的倾注平板中获得计数。
NPN摄取测定
NPN摄取测定大致如前所述进行。参见Helander I.M.,Mattila-Sandholm T.,Fluorometric assessment of gram-negative bacterial permeabilization,J.Appl.Microbiol.88:213-219(2000),doi:10.1046/j.1365-2672.2000.00971.x。将铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的培养物在胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)中生长过夜,然后用无菌TSB稀释至OD600=0.1,并生长至早期指数期。接下来,将细胞离心(10,000g,5分钟),用测定缓冲液(5mM HEPES-KOH,5mM葡萄糖,pH 7.2)洗涤两次,并在测定缓冲液中重悬至OD600=1。然后在96孔光学底黑色平板(Thermo)中,将100微升在测定缓冲液中洗涤的细胞与100微升含有20μM NPN的测定缓冲液混合。然后加入2微升测试物质,短暂混合,然后放入平板读数器中,以1分钟的间隔监测荧光(激发350nm,发射420nm),持续10分钟。测定中包括不含细胞或仅含水的对照。使用下面的公式计算在每个时间点的NPN摄取,并在所有时间点和3个重复中求平均值。
NPN摄取=(F样品-F无细胞)-(F细胞-F无细胞)
细菌和真菌攻击测试(标准)
按照Troy的标准攻击测试程序SOP MI-07进行细菌和真菌攻击测试。细菌生物体是粪产碱杆菌(ATCC#25094)、产气肠杆菌(ATCC#13048)、大肠杆菌(ATCC#11229)、铜脓假单胞菌(ATCC#10145)。将所有细菌从平板计数琼脂(PCA)上的过夜培养物中混合,并通过OD600测量以相等的CFU混合,然后稀释至OD600=0.7(~108CFU/mL)以产生最终的细菌聚生体。如有指示,向接种物中加入额外的细菌生物体,使得接种物中的每个生物体提供相等的CFU。在湿态真菌攻击中使用的真菌生物体是黑曲霉(Aspergillus niger)(ATCC#6275)和绳状青霉(Penicillium funiculosum)(ATCC#12667)。在麦芽琼脂斜面上制备真菌聚生体,并在使用前用血细胞计数器计数稀释至106个孢子/mL。每种混合物在每次接种前不久制备。接种是通过向50g指定的测试样品中加入0.5mL来进行的,每次攻击提供约106CFU/g细菌或约104个孢子/g真菌。在每次攻击后,通过将少量测试样品施用于PCA(针对细菌)或麦芽琼脂(针对真菌)上,以指定的时间间隔进行存活力读数。然后在读数前,将细菌平板在32℃下孵育3-5天,将麦芽琼脂平板在28℃下孵育1周。用半定量量表评估存活力平板。该量表通过目测评估沿着划线的菌落密度来估计近似的CFU/g。读数记录为从“0”至“4”的两个重复半定量读数的平均值。在每次存活力读数之前和每次接种之后,将样品混合。
1Lunenburg-Duindam,Jenny&Lindner,Wolfgang,In-can preservation ofemulsion paints,European Coatings Journal,66-73(2000).
细菌攻击测试(工业强度)
在指示工业强度接种的情况下,细菌攻击测试生物为粪产碱杆菌(Alcaligenesfaecalis)(ATCC#25094)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)(ATCC#13048)、大肠杆菌(Escherichia coli)(ATCC#11229)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)(ATCC#10145)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)(ATCC#6538)、副氧化微杆菌(Microbacterium paraoxydans)(Troy分离株)、洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderiacenocepacia)(Troy分离株)、魏氏柠檬酸杆菌(Citrobacter werkmanii)(Troy分离株)和不动杆菌属的种(Acinetobacter sp.)(Troy分离株)。将所有细菌从在胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)中生长的单独过夜培养物中掺混,并通过OD600测量以相等的CFU混合,然后稀释至OD600=7(~109CFU/mL)以产生最终的细菌聚生体。在每次接种前不久制备每种混合物。通过向50g所示测试样品中加入0.1mL来进行接种,以产生约107CFU/g/接种。在每次攻击后,通过将少量测试样品施用到PCA上,以指定的时间间隔进行存活力读数。然后将平板在32℃下孵育3-5天,然后用半定量量表进行评估。该量表通过目测评估沿着划线的菌落密度来估计近似的CFU/g。读数记录为从“0”至“4”的两个重复半定量读数的平均值。在每次存活力读数之前和每次接种之后,将样品混合。
1Lunenburg-Duindam,Jenny&Lindner,Wolfgang,In-can preservation ofemulsion paints,European Coatings Journal,66-73(2000).
攻击测试评分
通过对每个测试样品收集的十二个数据点中的每一个的加权平方和来进行攻击测试评分。与连续日(streak day)成比例地进行加权,其中第1天加权10%,第2天加权20%,第3天加权70%。然后取所有12个值的总和,除以未被保护的样品的得分,得到总增长得分。报告的“加权性能”得分为1减去增长得分。
干膜抗霉性测试
一般按照ASTM D5590进行干膜抗霉性测试,其中测试针对生物体出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)(ATCC#9348)以及黑曲霉(ATCC#6275)与绳状青霉(ATCC#11797)的混合物进行。从麦芽琼脂斜面制备这些微生物的悬浮液,并用血细胞计数器调节至1·106个孢子/mL。通过在Whatman#2滤纸上涂上一薄层油漆,干燥3-5天,制成测试膜。然后将制备的薄膜切成1”x 1”,用0.2mL的悬浮液将其接种到麦芽琼脂上,并在28℃下孵育1个月。然后根据ASTM D5590,根据覆盖程度,将油漆表面上的真菌生长覆盖率评定在“0”与“4”之间。抑制区域单独记录为z(x),其中x是该区域的平均尺寸,单位为毫米。
干膜细菌抗性测试
在300、500、700和900ppm的IPBC水平下将Polyphase PW40或Omniphase Z计量加入来自测试漆“内用漆#4”的薄膜,混合,并在黑色Leneta上浇铸成5mil的薄膜。干燥后,通过与生物体大肠杆菌(ATCC#8739)和金黄色葡萄球菌(ATCC#6538)接触24小时,根据JISZ2801评价薄膜的细菌抗性。使用未被保护的油漆作为基础来计算对数降低。
测试杀生物剂组合物
Ref-“1721-18-2”[“A”]
Ref-“1721-18-4”[“B”]
Ref-“1721-18-5”[“C”]
Ref-“1721-52”/“1721-66”/“Omniphase Z”
Ref-“1678-54”[50%ZnO]
Ref-“1721-80”[40%ZnO]
Ref-“1721-81”[20%ZnO,20%IPBC]
ref-“1729-79”[1,2-己二醇Omniphase Z]
Ref-“1729-79”[DMDA Omniphase Z]
ref-"1750-8"[己基卡必醇Omniphase Z]
商业产品组成
产品 | 活性物质含量 | 载体 |
Polyphase PW40 | 40%IPBC | 水基分散体 |
Polyphase P20T | 20%IPBC | 乙醇酸溶液 |
未受保护的基质
从以下Troy项目中获得油漆和着色剂的未受保护的测试基质:
Troy代码 | 样本类型 |
U19-0785-2 | 内用漆#1 |
U19-0785-3 | 内用漆#2 |
U19-0785-4 | 内用漆#3 |
U20-0710-1 | 内用漆#4 |
U20-0586-1 | 着色剂(黑色) |
U20-0586-2 | 着色剂(红色) |
U21-0108-03 | 内用漆#5 |
根据以下配方在内部生产填缝混合料:
实施例1:
使用IPBC抗性生物体假单胞菌属,在37℃下,在0.125-0.5mM PAβN(Sigma#P4157)存在下、在IPBC(0.1%w/w Polyphase PW40;400ppm IPBC)存在和不存在的情况下,测量铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的生长,持续16小时。测试表明,单独的PAβN对假单胞菌属的生长影响极小,但在400ppm IPBC存在的情况下≥0.25mM的PAβN可在16小时内完全抑制假单胞菌属的生长(图1A)。
由于PAβN在较高浓度下也会导致膜不稳定,因此通过添加MgCl2稳定膜来隔离外排的作用。参见,Lamers,R.P.等人,The efflux inhibitor phenylalanine-argininebeta-napthylamide(PAbetaN)permeabilizes the outer membrane of gram-negativebacteria,PLoS ONE 8:e60666(2013)。在1mM MgCl2存在的情况下收集的生长曲线显示较弱的IPBC增强,假单胞菌属能够生长,但以PAβN浓度依赖的方式在指数期之前滞后(图1B)。对照结果显示在IPBC、MgCl2或其组合存在的情况下无假单胞菌属抑制作用(图1C)。综上所述,结果表明IPBC的劣膜渗透性和主动外排是假单胞菌属对IPBC的抗性的重要因素。
实施例2:
为了确定纳米颗粒ZnO是否能增强IPBC,如图1所示重复铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的生长曲线。IPBC的来源也是Polyphase PW40,并将来自Sigma-Aldrich(St.Louis,MO)的20%纳米颗粒ZnO悬浮液用于递送纳米颗粒ZnO。测试表明,对于IPBC与ZnO纳米颗粒的组合,该组合在16小时内显示出完全的生长抑制;但在单独的400ppm IPBC或1000ppm纳米颗粒ZnO存在的情况下生长(图2A)。为了进一步研究该效应,用100-500ppm ZnO纳米颗粒与100-500ppm IPBC的组合进行了棋盘稀释法。在持续搅拌以保持分散体悬浮的情况下孵育24小时后,仅含有IPBC或ZnO纳米颗粒的孔是混浊的,而含有IPBC和纳米颗粒ZnO的组合的全部孔均无混浊(图2B)。
实施例3:
通过最小抑制浓度(MIC)测试研究了IPBC和标准ZnO对多种不同细菌生物体的活性。然而,由于纳米颗粒ZnO比标准ZnO更昂贵,并且通过EPA进行额外的监管审查,因此评估了标准级ZnO增强IPBC对多种不同细菌物种的活性的能力。MIC测试表明,IPBC和ZnO对大多数细菌具有协同作用(SI<0.5),但对已经对IPBC高度敏感的细菌显示出累加效应(表1)。
实施例4:
测试了IPBC/ZnO组合对油漆防腐的可用性。将40%IPBC、40%ZnO或含有20%IPBC和20%ZnO的掺混物以0.5%w/w至2.5%w/w(2,000-10,000ppm活性成分(a.i.))添加到油漆中,并使用工业接种物测试其细菌抗性。尽管ZnO和ZnO/IPBC显示出优于IPBC的提高的活性(表A1),并且在2.5%w/w(10,000ppm)下攻击7天后实现了接种物的完全杀灭,但是攻击测试总体上显示出全部三种掺混合物的弱防腐作用。
为了确定IPBC/ZnO的杀灭效果,再次使用铜绿假单胞菌(ATCC#10145),因为其似乎对IPBC最具抗性(表1)。用假单胞菌属和2000ppm IPBC、2000ppm ZnO以及1000ppm的每一种完成的杀灭曲线显示,该组合能够在接触2小时后导致假单胞菌存活力降低2个log10(99%),在接触24小时后导致假单胞菌属存活力降低5个log10(>99.99%)。然而,48小时的测量显示假单胞菌属生长恢复,表明防腐剂被其自身作用耗尽,或者存活的假单胞菌属进行代谢变化以克服生长抑制(图3)。
表1-IPBC/ZnO对许多不同的细菌生物体具有协同作用。在孵育24小时后,用指定的测试生物体在MHB中从96孔微量肉汤稀释测定中收集MIC值。所有数值都以ppm报告。
实施例5:
评估了1,2-己二醇在工业***中增强整体功效的加强作用。PAβN增强IPBC活性的能力至少部分是归功于膜渗透性的增加(图1)。研究了1,2-己二醇增加铜绿假单胞菌(ATCC#10145)的膜渗透性的能力。为了定量这种效应,荧光探针1-N-苯基萘基胺(NPN)被用作膜渗透性的指示剂。NPN在溶液中只有微弱的荧光,通常不能高效地进入细胞,但是当与细胞中的磷脂结合时会发出强烈的荧光。NPN测定结果表明,1%的1,2-己二醇显著增加了假单胞菌属的膜的渗透性(图4)。
实施例6:
为了测量含有1,2-己二醇和IPBC/ZnO的掺混物的活性提高,配制了含有10%IPBC、5%ZnO和60%1,2-己二醇的制剂(“Omniphase Z”),并测试了针对表1中相同生物体的MIC值。还测定了1,2-己二醇的MIC值以计算协同指数值。MIC测试表明,“Omniphase Z”对大多数测试细菌具有协同作用,但对IPBC最敏感的微生物-伯克霍尔德菌属、芽孢杆菌属和微杆菌属具有累加或拮抗作用。测试生物体对IPBC的敏感性与“Omniphase Z”制剂的协同指数之间始终存在明显的正相关关系(图6)。此外,与用IPBC/ZnO获得的杀灭曲线结果(图3)相对,1,2-己二醇的添加完全能够杀死假单胞菌属(图5)。
实施例7:
为了区分1,2-己二醇与缺乏一种或多种增效剂的各种组合的相对基质内杀菌活性,制备、测试了单独的或者与1,2-己二醇或ZnO组合的15%IPBC的测试制剂,并将其与纯1,2-己二醇的性能进行了比较。在四次接种中,使用更易受影响的填缝混合料的标准接种物(106CFU/g/攻击)和油漆的工业混合物(107CFU/g/攻击)进行攻击试验,其中添加的测试混合物介于0.4%w/w与1.6%w/w(4000-16000ppm)之间。攻击结果表明,1,2-己二醇、IPBC和ZnO的掺混物在填缝混合料和油漆中优于所有其它掺混物(图7,表3)。数据有力地表明,当与1,2-己二醇和ZnO组合时,IPBC显著有助于湿态杀菌活性,并且全部三者的组合提供了有用的工业防腐。
表2-“1721-66”(“Omniphase Z”)”对许多不同的细菌生物体具有广泛的活性和协同作用。在孵育24小时后,用指定的测试生物体在MHB中从96孔微量肉汤稀释测定中收集MIC值。所有数值都以ppm报告。
表3-两种制剂中IPBC、ZnO和1,2-己二醇组合在细菌攻击测试中的合格水平。15%的IPBC、60%的1,2-己二醇和5%的ZnO以0.8%w/w(6,400ppm a.i.)在填缝混合料和油漆中通过了细菌的四次细菌连续接种,而仅含有15%的IPBC和60%的1,2-己二醇或99%的1,2-己二醇的掺混物在攻击测试中需要较高含量或未能表现出显著的性能。合格水平被定义为在第4次接种后7天没有可检测的细菌生长的最低测试物质浓度。攻击原始数据可在表A3中获得。
实施例8:
表征了配制的“Omniphase Z”(“1721-66”或“1721-52”)在附加基质中的活性以及用于湿态和干膜微生物控制的进一步功能性。通过四次接种在油漆中进行的攻击测试表明,“Omniphase Z”在0.75w/w下可实现湿态细菌和真菌控制以及干膜真菌控制(表A4、表A5、表A6)。在着色剂中,测试表明“Omniphase Z”在0.8%w/w下通过四次接种保护它们免于湿态细菌和真菌生长(表A7、表A8)。另外,当根据JIS Z2801测试时,“Omniphase Z”在抑制干膜细菌生长方面显著优于常规的IPBC(图8)。
实施例9:
测试了化学性质与1,2-己二醇类似的4种其它溶剂在油漆中增强IPBC/ZnO对假单胞菌属的抗菌活性的能力。这些溶剂的油漆攻击测试表明,三种二醇醚溶剂和三醋精显示出含有IPBC/ZnO的油漆的抗菌性有所改善(表A9)。己基卡必醇在增强IPBC/ZnO在油漆中的抗菌活性方面提供了与1,2-己二醇高度相似的性能。
实施例10:
油漆中IPBC/ZnO活性的增强先前被理论化为与膜透化相关(实施例5)。使用NPN测定测试了各种二醇醚渗透假单胞菌属的膜的相对能力。结果表明,二醇醚的1%w/v溶液的膜透化活性变化很大,尽管己基卡必醇、己基溶纤剂和酯醇德士醇对假单胞菌属具有最高的膜破坏潜力(图9)。
实施例11:
在油漆中以0.5%w/w测定赋予IPBC/ZnO抗菌活性的邻位二醇、二醇醚和醇酯德士醇的相对活性。为了区分材料本身的潜在保护作用,在有和无IPBC/ZnO的油漆中测量活性。通过四次接种进行的细菌攻击测试表明,除1,2-辛二醇外的所有材料本身都不能保护油漆免受细菌生长,但是当与IPBC/ZnO(其本身是无效的)组合时,几种材料都赋予油漆很强的抗菌保护(表A10)。结果表明,单独的IPBC/ZnO和各种乙二醇都不足以使油漆防腐,但组合显示出高效的防腐活性(表A10)。
实施例12:
为了确定每种物质产生的膜透化程度是否预示着它们增强油漆中IPBC/ZnO的抗菌活性的能力,进行了逻辑回归以确定NPN摄取(图9)是否预示着来自细菌攻击测试的合格-不合格标准(表A10)。合格(“1”)被定义为第四次细菌攻击后7天的“0”评级;不合格(“0”)被定义为任何其它数字。来自逻辑回归的数据强烈地表明,如果IPBC/ZnO也存在于油漆中,NPN摄取对通过攻击测试的结果更具预测性(AUC-0.5=0.33);而当IPBC/ZnO不存在时,预测性明显较低(AUC-0.5=0.17)。ROC曲线如图10所示。为这些材料收集的这些结果清楚地表明,膜透化是增强IPBC/ZnO在油漆中的抗菌活性的重要特征。
实施例13:
在所测试的有效1,2-己二醇替代品中,选择了己基卡必醇用于配制。溶剂分散制剂“1750-8”由10%的IPBC、5%的ZnO、50%的己基卡必醇、10%德士醇和附加的填料、稳定剂和增稠剂制成。制剂“1750-8”的表征开始于在MIC测试中确认IPBC/ZnO与己基卡必醇之间的协同作用。IPBC/ZnO、己基卡必醇和“1750-8”对多种不同IPBC敏感性和IPBC抗性细菌物种的MIC测试表明所述组分之间具有很强的协同作用(表4,图12)。
表4-“1750-8”(用己基卡必醇配制的“Omniphase Z”)对不同的生物体具有广泛的活性和协同作用。在孵育24小时后,用指定的测试生物体在MHB中从96孔微量肉汤稀释测定中收集MIC值。所有数值都以ppm报告。
实施例14:
评估了制剂“1750-8”杀灭溶液中IPBC抗性生物体假单胞菌属的能力。测试表明>=0.6%w/w的“1750-8”可导致>6log的杀灭,并可保持抑制48小时(图6)。
实施例15:
通过四次接种进行的细菌攻击测试表明,0.6%w/w显示出对测试油漆中细菌生长的良好抑制,并且更高的水平显示出更好的活性(表16)。
表格附录:
表A1-通过工业接种物的两次攻击得出的油漆中的IPBC/ZnO组合攻击数据。
表A2-铜绿假单胞菌(ATCC#10145)与2000ppmIPBC、2000ppm ZnO和1000ppm ZnO+1000ppm IPBC接触2小时、24小时和48小时后的杀灭曲线原始数据。数据的图表如图3所示。
表A3-0.4-1.6%w/w的4种测试杀生物剂制剂在填缝混合料和内用漆#1中的细菌攻击数据。制剂“A”含有15%的IPBC和60%的1,2-己二醇。制剂“B”与“A”相同,但含有5%的ZnO,制剂“C”仅含有15%的IPBC,制剂“D”是纯的1,2-己二醇。
表A4-制剂“1721-52”(10%IPBC、5%ZnO、60%1,2-己二醇)在内用漆#2中的细菌攻击数据。
表A5-制剂“1721-52”(10%IPBC,5%ZnO,60%1,2-己二醇)在内用漆#2中的真菌攻击数据。
表A6-制剂“1721-52”(10%IPBC,5%ZnO,60%1,2-己二醇)在内用漆#2中的干膜攻击数据。
表A7-制剂“1721-66”(10%IPBC,5%ZnO,60%1,2-己二醇)在三种着色剂中的细菌攻击数据。“1721-66”在化学成分上与“1721-52”一致。
表A8-制剂“1721-66”(10%IPBC,5%ZnO,60%1,2-己二醇)在三种着色剂中的真菌攻击数据。
表A9-拯救IPBC/ZnO活性的附加溶剂内用漆#5中的细菌攻击数据。
表A10-二醇醚、邻位二醇和醇酯(Texanol)在油漆中增强IPBC/ZnO抗菌活性的能力的细菌攻击结果。为了进行测试,将IPBC/ZnO加载到油漆中,并分成几个子样品。将候选溶剂以0.5%w/w加回到IPBC/ZnO配料的油漆中,并在0.5%w/w下测试其自身的活性。使用的接种物是Troy工业接种物(约107CFU/g/攻击)。
表A11-油漆中0.6-1.2%w/w的“1750-8”的细菌攻击结果。使用的接种物是Troy工业接种物(约107CFU/g/攻击)。
在不脱离本公开的精神和范围的情况下,本领域普通技术人员可以对本公开进行这些和其它修改和变化,在所附权利要求中更具体地阐述了本公开的精神和范围。另外,应当理解,各种实施方案的方面可以整体或部分互换。此外,本领域普通技术人员将会理解,前面的描述仅仅是示例性的,并不旨在限制在所附权利要求中进一步描述的公开内容。
Claims (62)
1.一种杀生物组合物,其包含IPBC与氧化锌的抗菌有效组合。
2.权利要求1的杀生物组合物,其中所述IPBC和氧化锌以25∶1至1∶25的重量比存在。
3.权利要求1或权利要求2的杀生物组合物,其中所述氧化锌包含氧化锌纳米颗粒。
4.上述权利要求中任一项的杀生物组合物,所述组合物还包含一种或多种细菌膜破坏物质。
5.以上权利要求中任一项的杀生物组合物,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种邻位二醇。
6.以上权利要求中任一项的杀生物组合物,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含1,2-己二醇。
7.权利要求4-7中任一项的杀生物组合物,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种二醇醚。
8.以上权利要求中任一项的杀生物组合物,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含己基卡必醇、TPnB二醇醚、丁氧基三甘醇或三醋精。
9.以上权利要求中任一项的杀生物组合物,其还包含一种或多种另外的杀生物物质。
10.以上权利要求中任一项的杀生物组合物,其中所述一种或多种另外的杀生物物质包含一种或多种抗真菌物质和/或一种或多种杀藻物质。
11.权利要求5的杀生物组合物,其包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种邻位二醇。
12.以上权利要求中任一项的杀生物组合物,其包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的所述一种或多种邻位二醇。
13.权利要求7的杀生物组合物,其包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的所述一种或多种二醇醚。
14.以上权利要求中任一项的杀生物组合物,其包含约10重量%的IPBC、约5重量%的氧化锌和约60重量%的所述一种或多种二醇醚。
15.一种工作组合物,其包含水、一种或多种有机化合物和对于所述工作组合物的湿态抗菌防腐有效的包含IPBC和氧化锌的杀生物组合物。
16.权利要求15的工作组合物,其中所述IPBC和氧化锌以25∶1至1∶25的重量比存在。
17.权利要求15或权利要求16的工作组合物,其中所述氧化锌包含氧化锌纳米颗粒。
18.权利要求15至17中任一项的工作组合物,其中所述杀生物组合物还包含一种或多种细菌膜破坏物质。
19.权利要求18的工作组合物,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种邻位二醇。
20.权利要求18或权利要求19的工作组合物,其中所述一种或多种邻位二醇包含1,2-己二醇。
21.权利要求18的工作组合物,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种二醇醚。
22.权利要求21的工作组合物,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含己基卡必醇、TPnB二醇醚、丁氧基三甘醇或三醋精。
23.权利要求15至22中任一项的工作组合物,其还包含一种或多种另外的杀生物物质。
24.权利要求23的工作组合物,其中所述一种或多种另外的杀生物物质包含一种或多种抗真菌物质和/或一种或多种杀藻物质。
25.权利要求15至19中任一项的工作组合物,其中所述杀生物组合物包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种邻位二醇。
26.权利要求25的工作组合物,其中所述杀生物组合物包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的一种或多种邻位二醇。
27.权利要求15至21中任一项的工作组合物,其包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种二醇醚。
28.权利要求27的工作组合物,其包含约10重量%的IPBC、约5重量%的氧化锌和约60重量%的一种或多种二醇醚。
29.权利要求15至28中任一项的工作组合物,其中所述一种或多种有机化合物包含一种或多种聚合物粘合剂或填料。
30.权利要求15至29中任一项的工作组合物,其包含化妆品、盥洗用品、个人护理品、家用品、洗衣用品、清洁用品、消毒用品、油漆、涂料、矿物浆料、颜料、液体浆、纸浆、纸、金属加工液、建筑用品、植物营养物、聚合物晶格、墙板填缝混合料、墙板、腻子膏、密封剂、粉饰灰泥、胶泥、沥青乳液、木材防腐剂、釉料、着色剂、石膏、胶粘剂、纺织品、皮革处理、兽皮处理、无纺织物、建筑材料、粉饰灰泥、混凝土或嵌缝料产品。
31.权利要求15至29中任一项的工作组合物,其中所述一种或多种聚合物粘合剂或填料包含一种或多种丙烯酸酯、丁二烯、PVA、EVA、苯乙烯或乙酸乙烯酯聚合物。
32.一种增强IPBC在包含水和一种或多种有机化合物的湿态工作组合物中的抗菌活性的方法,其包括在氧化锌存在的情况下用IPBC处理所述工作组合物。
33.权利要求32的方法,其中所述IPBC和氧化锌以25∶1至1∶25的重量比存在。
34.权利要求32或33的方法,其中所述氧化锌包含氧化锌纳米颗粒。
35.权利要求32至34中任一项的方法,其中用一种或多种细菌膜破坏物质进一步处理所述工作组合物。
36.权利要求32至35中任一项的方法,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种邻位二醇。
37.权利要求36的方法,其中所述一种或多种邻位二醇包含1,2-己二醇。
38.权利要求32至35中任一项的方法,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种二醇醚。
39.权利要求38的方法,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含己基卡必醇、TPnB二醇醚、丁氧基三甘醇或三醋精。
40.权利要求32至39中任一项的方法,其中用一种或多种另外的杀生物物质进一步处理所述工作组合物。
41.权利要求32至40中任一项的方法,其中所述一种或多种另外的杀生物物质包含一种或多种抗真菌物质和/或一种或多种杀藻物质。
42.权利要求32至41中任一项的方法,其包括用湿态抗菌有效量的杀生物组合物处理所述工作组合物,所述杀生物组合物包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种邻位二醇。
43.权利要求32至42中任一项的方法,其中所述杀生物组合物包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的一种或多种邻位二醇。
44.权利要求32至43中任一项的方法,其包括1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种二醇醚。
45.权利要求32至44中任一项的方法,其包括约10重量%的IPBC、约5重量%的氧化锌和约60重量%的一种或多种二醇醚。
46.一种处理含有一种或多种有机化合物的水性工作制剂以防止、抑制或减少所述制剂的湿态细菌污染的方法,其包括用包含IPBC和氧化锌的抗菌有效组合的杀生物组合物处理所述工作制剂。
47.权利要求46的方法,其中所述IPBC和氧化锌以25∶1至1∶25的重量比存在。
48.权利要求46或47的方法,其中所述氧化锌包含氧化锌纳米颗粒。
49.权利要求46至48中任一项的方法,其还包括用一种或多种细菌膜破坏物质处理所述工作制剂。
50.权利要求46至49中任一项的方法,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种邻位二醇。
51.权利要求50的方法,其中所述一种或多种邻位二醇包含1,2-己二醇。
52.权利要求46至49中任一项的方法,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含一种或多种二醇醚。
53.权利要求46至52中任一项的方法,其中所述一种或多种细菌膜破坏物质包含己基卡必醇、TPnB二醇醚、丁氧基三甘醇或三醋精。
54.权利要求46至53中任一项的方法,其还包括用一种或多种另外的杀生物物质处理所述工作制剂。
55.权利要求46至54中任一项的方法,其中所述一种或多种另外的杀生物物质包含一种或多种抗真菌物质和/或一种或多种杀藻物质。
56.权利要求46至50中任一项的方法,其包括用杀生物组合物处理所述工作制剂,所述杀生物组合物包含1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种邻位二醇。
57.权利要求46至56中任一项的方法,其中所述杀生物组合物包含10重量%的IPBC、5重量%的氧化锌和60重量%的一种或多种邻位二醇。
58.权利要求46至52中任一项的方法,其包括1重量%至25重量%的IPBC、1重量%至25重量%的氧化锌和40重量%至80重量%的一种或多种二醇醚。
59.权利要求46至58中任一项的方法,其包括约10重量%的IPBC、约5重量%的氧化锌和约60重量%的一种或多种二醇醚。
60.权利要求46至59中任一项的方法,其中所述一种或多种有机化合物包含一种或多种聚合物粘合剂或填料。
61.权利要求46至60中任一项的方法,其中所述工作组合物包含化妆品、盥洗用品、个人护理品、家用品、洗衣用品、清洁用品、消毒用品、油漆、涂料、矿物浆料、颜料、液体浆、纸浆、纸、金属加工液、建筑用品、植物营养物、聚合物晶格、墙板填缝混合料、墙板、腻子膏、密封剂、粉饰灰泥、胶泥、沥青乳液、木材防腐剂、釉料、着色剂、石膏、胶粘剂、纺织品、皮革处理、兽皮处理、无纺织物、建筑材料、粉饰灰泥、混凝土或嵌缝料产品。
62.权利要求60的方法,其中所述一种或多种聚合物粘合剂或填料包含一种或多种丙烯酸酯、丁二烯、PVA、EVA、苯乙烯或乙酸乙烯酯聚合物。
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