CN117503742A - Endosidin-2在制备抗病毒药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域,具体涉及Endosidin‑2在制备抗病毒药物中的应用。本发明首次发现化合物Endosidin‑2能够有效抑制包括水疱性口炎病毒、单纯疱疹病毒I型、牛疱疹病毒I型和牛副流感3型病毒在内的多种病毒的复制,阻断病毒释放,且对细胞的毒性相对较小,表明其具有开发成抗上述病毒药物的前景,从而为Endosidin‑2开辟了新的药物用途,也为开发高效特异的抗病毒药物奠定实验基础并提供新的视野,因此具有良好的实际应用之价值。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及Endosidin-2在制备抗病毒药物中的应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
病毒寄生于宿主细胞内,其复制、转录和翻译都必须在宿主细胞中进行的非细胞型生物。由病毒性感染引起的传染病具有种类繁多、传染性强、发病率高、死亡率高等特点,严重危害人类及动物的生命健康。病毒性疾病药物的研发是全球药物研发的难点和热点,研发安全有效的药物及挖掘现有药物的抗病毒新用途,为研发更加高效的抗病毒药物提供参考,对推动抗病毒药物研发具有重要意义。
小分子药物Endosidin-2(简称为ES2,CAS:1839524-44-5)在癌症和糖尿病中的应用发现,ES2能提高顺铂在上皮性卵巢癌的临床化疗疗效,也可以用于2型糖尿病治疗。因此ES2有望成为治疗糖尿病、癌症等人类疾病靶点药物,但ES2在抗病毒的作用,尚不清楚。
发明内容
针对上述现有技术中存在的不足,发明人经长期的技术与实践探索,提供Endosidin-2在制备抗病毒药物中的应用。本发明通过研究首次发现并证实Endosidin-2具有抗水疱性口炎病毒、单纯疱疹病毒I型、牛疱疹病毒I型、牛副流感3型病毒等作用,因此具有开发成抗病毒药物的前景。基于上述研究成果,从而完成本发明。
为实现上述技术目的,本发明采用如下技术方案:
本发明的第一个方面,提供在Endosidin-2制备抗病毒产品中的应用;其中,所述病毒包括水疱性口炎病毒、单纯疱疹病毒I型、牛疱疹病毒I型和牛副流感3型病毒中的至少一种。并因此,Endosidin-2在对于预防和/或治疗与上述病毒相关的疾病是有效的。
本发明的第二个方面,提供一种药物组合物,所述药物组合物由Endosidin-2与至少一种其它药物活性成分和/或至少一种其它非药物活性成分构成。
本发明的第三个方面,提供一种用于预防和/或治疗与上述病毒感染相关疾病的方法,所述方法包括向受试者施用上述Endosidin-2或上述药物组合物。
与现有技术方案相比,上述一个或多个技术方案具有如下有益效果:
上述技术方案首次发现化合物Endosidin-2能够有效抑制包括水疱性口炎病毒、单纯疱疹病毒I型、牛疱疹病毒I型和牛副流感3型病毒在内的多种病毒的复制,阻断病毒释放,且对细胞的毒性相对较小,表明其具有开发成抗上述病毒药物的前景,从而为Endosidin-2开辟了新的药物用途,也为开发高效特异的抗病毒药物奠定实验基础并提供新的视野,因此具有良好的实际应用之价值。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解,本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明,并不构成对本发明的不当限定。
图1为本发明实施例中Endosidin-2在HeLa细胞、Vero细胞和MDBK细胞中的CC50。
图2为本发明实施例中Endosidin-2作用于VSV、HSV-1、BoHV-1及BPIV3病毒的IC50值。
图3为本发明实施例中Endosidin-2作用于VSV、HSV-1、BoHV-1及BPIV3病毒的SI值。
图4为本发明实施例中Endosidin-2抑制VSV、HSV-1、BoHV-1及BPIV3复制的作用效果。
具体实施方式
应该指出,以下详细说明都是例示性的,旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明,本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是,这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式,而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的,除非上下文另外明确指出,否则单数形式也意图包括复数形式,此外,还应当理解的是,当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时,其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
如前所述,尚未有发现Endosidin-2在抗病毒方面的应用。
有鉴于此,本发明的一个典型具体实施方式中,Endosidin-2在制备抗病毒产品中的应用。其中,所述病毒包括水疱性口炎病毒、单纯疱疹病毒I型、牛疱疹病毒I型和牛副流感3型病毒中的至少一种。并因此,Endosidin-2对于预防和/或治疗上述病毒相关的疾病是有效的。
需要说明的是,该应用是首次公开,与其已知的用药用途并不相同。
所述抗病毒至少表现为直接灭活上述病毒和/或抑制上述病毒复制的能力。
所述产品可以为药物或试验试剂,所述试验试剂供基础研究使用,从而可用于构建相关细胞或动物模型。
因此,本发明的又一具体实施方式中,提供:
(a)Endosidin-2在制备灭活病毒的产品中的应用;
(b)Endosidin-2在制备抑制病毒复制的产品中的应用。
其中,所述病毒包括水疱性口炎病毒、单纯疱疹病毒I型、牛疱疹病毒I型和牛副流感3型病毒中的至少一种。
根据本发明,不仅公开了Endosidin-2在制备抗病毒药物中的应用,而且还公开了施用Endosidin-2与其它至少一种药物活性成分的组合时,可以增强这种作用。作为其它药物活性成分的替代或补充,Endosidin-2还可以与其它非药物活性成分组合使用。
本发明又一具体实施方式中,提供一种药物组合物,所述药物组合物由Endosidin-2与至少一种其它药物活性成分和/或至少一种其它非药物活性成分构成。
所述其它药物活性成分包括具有抑制和/或杀灭上述病毒的物质。
所述非药物活性成分包括药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。
本发明的又一具体实施方式中,所述非药物活性成分包括:
药学上相容的无机或有机酸或碱、聚合物、嵌段共聚物、单糖、多糖、离子和非离子型表面活性剂或脂质;
药理上无害的盐、调味剂、维生素、抗氧化剂,以及稳定剂和/或防腐剂。
所述药物组合物的给药剂型包括:液体剂型、固体剂型、外用制剂和喷剂;
本发明又一具体实施方式中,包括以下剂型:真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混旋剂型、片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂、包合物、填埋剂、贴剂、擦剂。
本发明又一具体实施方式中,提供一种用于预防和/或治疗与上述病毒相关疾病的方法,所述方法包括向受试者施用上述治疗有效剂量的Endosidin-2或上述药物组合物。
所述病毒包括水疱性口炎病毒、单纯疱疹病毒I型、牛疱疹病毒I型和牛副流感3型病毒中的至少一种,
所述受试者是指已经是治疗、观察或实验的对象的动物,优选指哺乳动物,进一步优选为反刍动物,如牛等。“治疗有效剂量”指导致任何参数或者临床症状改进的数量。实际的剂量可能随着每个受试者的不同而变化,并且不一定指消除所有疾病症状的总量,可以使用本领域内公知的方法确定,在此不再做具体赘述。
以下结合具体实例对本发明作进一步的说明,以下实例仅是为了解释本发明,并不对其内容进行限定。凡是依据本发明的技术实质对实施方式所做的任何简单修改,等同变化与修饰,均属于本发明技术方案的范围内。
实施例
1.材料
Hela细胞、Vero细胞、MDBK细胞、MDCK细胞和水疱性口炎病毒(VSV)、单纯疱疹病毒I型(HSV-1)、牛疱疹病毒I型(BoHV-1)、牛副流感3型病毒(BPIV3)均由山东师范大学反刍动物疾病研究中心保存。
ES2购自sparkjade;DMSO购自Solarbio;DMEM培养基、PBS、胎牛血清等细胞培养试剂均购自BI公司。
2.方法与结果
2.1ES2的细胞毒性检测
使用CCK-8试剂盒用于ES2对Hela细胞、Vero细胞、和MDBK细胞的细胞毒性作用。将长满单层的上述细胞,经胰酶消化分散细胞,细胞计数,取100μL细胞悬液接种于96孔培养板中,5×105个细胞/孔。37℃5%CO2细胞培养箱中培养12-24h,观察细胞贴壁良好,吸出各孔培养基,实验组加入含不同浓度ES2的DMEM培养基,空白组加入不含ES2的培养基,然后将96孔板在37℃5% CO2培养箱中孵育48h。每孔直接加入10μL的CCK-8溶液,放入37℃5%CO2培养箱中孵育1h。将96孔板取出,酶标仪检测各孔在450nm波长处的OD值,分析处理数据,计算细胞存活率:细胞存活率%=(加药细胞OD/对照细胞OD)×100%。求出T/C=50%时的药物浓度(CC50)绘制增殖曲线。
结果表明,ES2在HeLa细胞、Vero细胞和MDBK细胞中的CC50分别为163.6μM、582.8μM和314.6μM(图1)。
2.2ES2抗病毒能力检测
分别将Hela细胞、Vero细胞和MDBK细胞传代于96孔培养板,分别接种VSV、HSV-1、BPIV3及BoHV-1(0.001MOI/孔),37℃5%CO2细胞培养箱中孵育1h,分别加入含不同浓度ES2的2%血清的细胞维持液,持续观察4-7天,计算ES2作用于病毒的IC50及SI值。
结果显示ES2作用于VSV、HSV-1、BoHV-1及BPIV3的IC50分别为73.7μM、142.3μM、66.82μM和91.24μM(图2)。SI值均大于1,说明ES2有抵抗上述四种病毒的潜能(图3)。
2.3ES2抑制病毒复制
分别将Hela细胞、Vero细胞和MDBK细胞传代于6孔培养板,长满单层后,分别接种VSV、HSV-1、BoHV-1及BPIV3(0.1MOI/孔),37℃5% CO2细胞培养箱中孵育1h,加入分别含ES2和DMSO的2%血清的细胞维持液,24h后收获病毒,测定病毒液的TCID50。
结果如图4表明,ES2处理后VSV、HSV-1、BoHV-1及BPIV3的病毒滴度比对照DMSO处理组显著降低,表明ES2抑制VSV、HSV-1、BoHV-1及BPIV3的复制。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已,并不用于限制本申请,对于本领域的技术人员来说,本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (10)
1.Endosidin-2在制备抗病毒产品中的应用;其中,所述病毒包括水疱性口炎病毒、单纯疱疹病毒I型、牛疱疹病毒I型和牛副流感3型病毒中的至少一种。
2.如权利要求1所述应用,其特征在于,所述抗病毒至少表现为灭活病毒和/或抑制病毒复制的能力。
3.如权利要求1所述应用,其特征在于,所述产品为药物或试验试剂,所述试验试剂供基础研究使用。
4.Endosidin-2在制备灭活病毒的产品中的应用。
5.Endosidin-2在制备抑制病毒复制的产品中的应用。
6.如权利要求4或5所述应用,其特征在于,所述病毒包括水疱性口炎病毒、单纯疱疹病毒I型、牛疱疹病毒I型和牛副流感3型病毒中的至少一种。
7.一种药物组合物,其特征在于,所述药物组合物由Endosidin-2与至少一种其它药物活性成分和/或至少一种其它非药物活性成分构成。
8.如权利要求7所述药物组合物,其特征在于,所述其它药物活性成分包括具有抑制和/或杀灭所述病毒的物质。
9.如权利要求7所述药物组合物,其特征在于,所述非药物活性成分包括药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。
10.如权利要求7所述药物组合物,其特征在于,所述药物组合物的给药剂型包括:液体剂型、固体剂型、外用制剂和喷剂。
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