CN117430589A - 2-氨基嘧啶类化合物或其盐及其制备方法和用途 - Google Patents

2-氨基嘧啶类化合物或其盐及其制备方法和用途 Download PDF

Info

Publication number
CN117430589A
CN117430589A CN202310864407.8A CN202310864407A CN117430589A CN 117430589 A CN117430589 A CN 117430589A CN 202310864407 A CN202310864407 A CN 202310864407A CN 117430589 A CN117430589 A CN 117430589A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkyl
mmol
pyrazol
cycloalkyl
halogen
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202310864407.8A
Other languages
English (en)
Inventor
程***
余发志
王永辉
陈伟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Lidi Hangzhou Pharmaceutical Technology Co ltd
Original Assignee
Lidi Hangzhou Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lidi Hangzhou Pharmaceutical Technology Co ltd filed Critical Lidi Hangzhou Pharmaceutical Technology Co ltd
Publication of CN117430589A publication Critical patent/CN117430589A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65583—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system each of the hetero rings containing nitrogen as ring hetero atom

Abstract

本发明涉及式(I)化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，它们的制备方法，包含它们的药物组合物，其中各变量如本文所定义。本发明还涉及治疗或预防CDK12相关疾病或病症的方法，和所述化合物在制备用于治疗或预防CDK12相关疾病或病症的药剂中的用途。

Description

2-氨基嘧啶类化合物或其盐及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及2-氨基嘧啶类化合物及其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，它们的制备方法，以及包含它们的药物组合物。本发明还涉及治疗或预防CDK12相关疾病或病症、例如异常细胞增殖性疾病、强直性肌营养不良Ⅰ型(DM1)、感染、炎性病症、自身免疫性疾病、心血管疾病、神经变性疾病和由辐射引起的造血毒性疾病、肿瘤或癌症等的方法，和所述化合物在制备用于治疗或预防CDK12相关疾病或病症的药剂中的用途。
背景技术
细胞周期蛋白依赖性激酶12(Cyclin-dependent kinase 12,CDK12)是21种细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)中的一种。CDK12也简称为CRKRS、CRKR或CRK7。CDK12使RNA聚合酶II羧基端氨基酸(carboxy terminal domain of RNA polymerase II，RNA pol II CTD)中的丝氨酸磷酸化，并参与多种细胞生理过程，例如DNA损伤反应、细胞增殖和分化以及mRNA剪接等。大量的研究揭示了CDK12在细胞功能中所起的作用，例如细胞周期控制、细胞凋亡、转录调节和DNA修复等，并阐明了它作为生物标记物和治疗靶点的潜在的医疗用途。
CDK12编码基因的突变将导致多种细胞过程调控异常，基因不稳定性增加，这都可能促进肿瘤的发生发展。已有研究表明，在结直肠癌、卵巢癌、乳腺癌、食管癌、胃癌、子宫内膜癌、膀胱癌、胰腺癌中广泛存在CDK12的基因突变和过表达。
Bajrami I.等人(Cancer Res.,2014,74,287-297)报道，对DNA修复中所涉及的PARP和CDK12的抑制都通过合成致死作用完全抑制了DNA修复反应并诱导了癌细胞的细胞死亡。
CDK12的抑制对于治疗或预防肿瘤和/或癌症是非常有用的。
近年来，已经开发出一些CDK12抑制剂。THZ531是一种对CDK12/13具有选择性的抑制剂(European Journal of Medicinal Chemistry 221(2021)113481)。WO2019193509A1、EP3782986A1和Bioorg.Med.Chem.Lett.25(17),3420–3435(2015)等分别报道了其它类型的CDK12抑制剂。然而，目前报道的CDK12小分子抑制剂存在诸多成药性隐患：例如，小鼠肝微粒体代谢稳定性较差，体内暴露量低、代谢半衰期短等。另一方面，目前的CDK12小分子抑制剂基本都表现出对CDK13相当的抑制作用，存在潜在的安全性问题。而且，已有研究表明，现有的CDK12小分子抑制剂在用药后很快诱导耐药细胞株的产生(Jiang B.等人,Nat.Chem.Bio.2021,17,675–683.)。
因此，探索开发不同种类的CDK12抑制剂具有重要意义。
发明内容
发明简述
本发明人出人意料地发现：本发明的化合物具有良好的CDK12抑制活性和良好的抑制癌细胞增殖的活性。发明人还出人意料地发现，本发明的化合物具有改进的物理和化学稳定性和/或改进的药物动力学性质如改进的代谢稳定性，低的GSH反应性，具有良好的成药性。
因此，在第一方面，提供了式(I)化合物或可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药。
在第二方面，提供了药物组合物，包含本发明的化合物以及可药用的载体、稀释剂或赋形剂。
在第三方面，提供了用于治疗或预防CDK12相关疾病或病症的本发明的化合物。
在第四方面，提供了在个体中治疗或预防CDK12相关疾病或病症的方法，该方法包括给所述个体施用有效量的本发明的化合物。
在第五方面，提供了本发明的化合物在制备药剂中的用途，所述药剂用于治疗或预防CDK12相关疾病或病症。
在第六方面，提供了本发明的化合物与其它活性剂的组合。
在第七方面，提供了本发明的化合物的制备方法。
本发明的上述和其它方面在下文进行了更详细的描述。
发明详述
在一个方面中，本发明提供了式(I)化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，
其中
X为N或-C(＝O)-；
Y为NRy1或CRy2；m＝1或2；当m为2时，两个Y可以相同或不同；
Z为N或C；
表示所处的环是芳香性的；
Ry1各自独立地为H或C1-6烷基；
Ry2各自独立地为H、卤素、CN或C1-6烷基；
R1和R3各自独立地选自H；卤素；CN；-OR4；-NR5R6；C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基或3-10元杂环烃基，其各自任选被一个或多个选自卤素、CN和羟基的取代基取代；和C6-10芳基或5-10元杂芳基，其各自任选被一个或多个R7取代；
R2为氢、卤素、C1-3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷基、C1-3卤代烷氧基或环丙基；
R4为H；任选被卤素、CN和/或C3-8环烷基取代的C1-6烷基；或任选被卤素、CN和/或C3-8环烷基取代的C3-8环烷基；
R5和R6各自独立地选自H；C1-6烷基、C3-8环烷基或3-10元杂环烃基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、CN、OH、C1-6烷基和C3-8环烷基的取代基取代；和C6-10芳基或5-7元杂芳基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、CN、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、-O-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、-CO-R8、-CO-NHR8、-SO-R8、-SO2-R8、和-P(＝O)R8R8的取代基取代；或者R5和R6可以与它们连接的N一起形成4-7元杂环烃基；
R7各自独立地选自卤素、CN、OH、-NH2、-NH(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、-C1-3亚烷基-C1-6烷氧基、C3-8环烷基、C3-8环烷氧基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、和-C3-8亚环烷基-C1-6烷基；
R8各自独立地选自C1-6烷基和C3-8环烷基，优选C1-6烷基；
环A选自C6-10亚芳基、5-10元亚杂芳基、C5-10亚环烷基和5-10元亚杂环烷基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、C1-3烷基和CN的取代基取代；
L为NH或键，优选为NH；
G为其中Rg1、Rg2和Rg3各自独立地选自H、CN、卤素、C1-6烷基、C1-6烷基-O-CO、N(C1-3烷基)(C1-3烷基)-C1-3亚烷基-、或5-10元杂环烷基-C1-3亚烷基-；和
n＝0或1。
在一个方面中，本发明提供了式(I)化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，
其中
X为N或-C(＝O)-；
Y为NRy1或CRy2；m＝1或2；当m为2时，两个Y可以相同或不同；
Z为N或C；
表示所处的环是芳香性的；
Ry1各自独立地为H或C1-6烷基；
Ry2各自独立地为H、卤素、CN或C1-6烷基；
R1和R3各自独立地选自H；卤素；CN；-OR4；-NR5R6；C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基或3-10元杂环烃基，其各自任选被一个或多个选自卤素、CN和羟基的取代基取代；和C6-10芳基或5-10元杂芳基，其各自任选被一个或多个R7取代；
R2为氢、卤素、C1-3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷基、C1-3卤代烷氧基或环丙基；
R4为H；任选被卤素、CN和/或C3-8环烷基取代的C1-6烷基；或任选被卤素、CN和/或C3-8环烷基取代的C3-8环烷基；或任选被卤素、CN和/或C3-8环烷基取代的3-8元杂环烷基；
R5和R6各自独立地选自H；C1-6烷基、C3-8环烷基或3-10元杂环烃基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、CN、OH、C1-6烷基和C3-8环烷基的取代基取代；和C6-10芳基或5-7元杂芳基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、CN、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、-O-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、-CO-R8、-CO-NHR8、-SO-R8、-SO2-R8、和-P(＝O)R8R8的取代基取代；或者R5和R6可以与它们连接的N一起形成4-7元杂环烃基；
R7各自独立地选自卤素、CN、OH、-NH2、-NH(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、-C1-3亚烷基-C1-6烷氧基、C3-8环烷基、C3-8环烷氧基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、和-C3-8亚环烷基-C1-6烷基；
R8各自独立地选自C1-6烷基和C3-8环烷基，优选C1-6烷基；
环A选自C6-10亚芳基、5-10元亚杂芳基、C5-10亚环烷基和5-10元亚杂环烷基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、C1-3烷基和CN的取代基取代；
L为NH或键，优选为NH；
G为其中Rg1、Rg2和Rg3各自独立地选自H、CN、卤素、C1-6烷基、C1-6烷基-O-CO、N(C1-3烷基)(C1-3烷基)-C1-3亚烷基-、或5-10元杂环烷基-C1-3亚烷基-；和
n＝0或1。
在一些实施方案中，部分选自/>优选地，部分/>选自/>更优选地，部分选自/>
在一些实施方案中，式(I)具有如下亚式：
在一些实施方案中，R2为卤素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷基或C1-3卤代烷氧基。优选地，R2为卤素、C1-3卤代烷基或C1-3卤代烷氧基。更优选地，R2为卤素或C1-3卤代烷基。最优选地，R2为氯或CF3。
在一些实施方案中，R1和R3之一为H，且另一个为H；卤素；CN；-OR4；-NR5R6；C1-6烷基，任选被一个或多个选自卤素、CN和羟基的取代基取代；或者C6-10芳基或5-10元杂芳基，各自任选被一个或多个R7取代。
在另一些实施方案中，R1为H，且R3为H；-OR4；-NR5R6；C1-6卤代烷基；C1-6羟基烷基；或者C6-10芳基或5-10元含氮杂芳基，各自任选被一个或多个R7取代。
在另一些实施方案中，R1为H，且R3为H；-OR4；-NR5R6；或者C6-10芳基或5-10元含氮杂芳基，各自任选被一个或多个R7取代。
在另一些实施方案中，R1为H，且R3为-OR4；-NR5R6；或者苯基、吡咯基、吡唑基、吲哚基、异吲哚基、吡咯并吡啶基、吡唑并吡啶基或吲唑基，各自任选被一个或多个R7取代。
在另一些实施方案中，R1为H，且R3为-OR4；-NR5R6；或者苯基、吡唑基、吲哚基、吡咯并吡啶基、吡唑并吡啶基或吲唑基，各自任选被一个或多个R7取代。
在一些实施方案中，R4为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6氰基烷基、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-、C3-8环烷基、C3-8卤代环烷基或C3-8氰基环烷基。在另一些实施方案中，R4为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-、或C3-8环烷基。在另一些实施方案中，R4为C1-6卤代烷基或C3-8环烷基-C1-6亚烷基-。在另一些实施方案中，R4为C3-8环烷基-C1-6亚烷基-，例如环丙基亚甲基-。
在一些实施方案中，R4为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6氰基烷基、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-、C3-8环烷基、C3-8卤代环烷基或C3-8氰基环烷基或含1、2或3个各自独立地选自N或O的杂原子的3-8元杂环烷基。在另一些实施方案中，R4为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-、C3-8环烷基或含1个选自N或O的杂原子的3-8元杂环烷基。在另一些实施方案中，R4为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-或含1个O原子的3-8元杂环烷基。在另一些实施方案中，R4为C1-6烷基、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-或含1个O原子的4-6元杂环烷基，例如甲基、环丙基亚甲基-和氧杂环丁烷。
在一些实施方案中，R5和R6之一为H，且另一个选自H；C1-6烷基，任选被一个或多个独立地选自卤素、CN或OH的取代基取代；和C6-10芳基或5-7元杂芳基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、CN、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、-O-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、-CO-R8、-CO-NHR8、-SO-R8、-SO2-R8、或-P(＝O)R8R8的取代基取代。
在另一些实施方案中，R5和R6之一为H，且另一个选自H；C1-6烷基，任选被一个或多个独立地选自卤素、CN或OH的取代基取代；和C6-10芳基或5-7元杂芳基，各自任选被一个或多个独立地选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-CO-R8、-SO-R8、-SO2-R8、或-P(＝O)R8R8的取代基取代。
在另一些实施方案中，R5和R6之一为H，且另一个选自C6-10芳基或5-7元杂芳基，各自任选被一个或多个独立地选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-CO-R8、-SO-R8、-SO2-R8或-P(＝O)R8R8的取代基取代。
在另一些实施方案中，R5和R6之一为H，且另一个选自C6-10芳基或5-7元含氮杂芳基如吡唑基，各自任选被一个或多个独立地选自C1-6烷基、-SO2-R8、和-P(＝O)R8R8的取代基取代。
在另一些实施方案中，R5和R6之一为H，且另一个选自苯基或吡唑基，各自任选被一个或多个独立地选自C1-6烷基、-SO2-R8、和-P(＝O)R8R8的取代基取代。
在另一些实施方案中，R5和R6之一为H，且另一个选自苯基，各自任选被一个或多个独立地选自-SO2-R8和-P(＝O)R8R8的取代基取代。
在一些实施方案中，R7各自独立地选自卤素、CN、OH、-NH2、-NH(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、和-C3-8亚环烷基-C1-6烷基。在另一些实施方案中，R7各自独立地选自卤素、CN、OH、-NH2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、和-C3-8亚环烷基-C1-6烷基。在另一些实施方案中，R7各自独立地选自卤素、CN、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、和-C1-3亚烷基-C3-8环烷基。在另一些实施方案中，R7各自独立地选自F、Cl、CN、CH3、CF3和环丙基甲基-。
在一些实施方案中，R8各自独立地是C1-6烷基，优选C1-3烷基。
在一些实施方案中，R1为H，且R3为H、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-O-、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基；C1-6羟基烷基、/>
在另一些实施方案中，R1为H，且R3为H、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-O-、
在另一些实施方案中，R1为H，且R3为C3-8环烷基-C1-6亚烷基-O-、
在一些实施方案中，当R3为被一个或多个R7取代的含氮杂芳基(例如吡唑基、吲哚基、吡咯并吡啶基、吡唑并吡啶基或吲唑基)时，优选R7连接在所述含氮杂芳基的可用的碳环成员上，例如在中。
在一些实施方案中，环A选自亚苯基、5-7元亚杂芳基、C5-8亚环烷基和5-8元亚杂环烷基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、C1-3烷基和CN的取代基取代。在另一些实施方案中，环A选自亚苯基、5-7元亚杂芳基、C5-8亚环烷基和5-8元亚杂环烷基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素的取代基取代。在另一些实施方案中，环A选自亚苯基、亚吡啶基、亚哒嗪基、亚嘧啶基、亚吡嗪基、亚环己基和亚哌啶基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、C1-3烷基和CN的取代基、特别是选自卤素的取代基取代。在另一些实施方案中，环A选自亚苯基和亚吡啶基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、C1-3烷基和CN的取代基、特别是选自卤素的取代基取代。
在一些实施方案中，环A选自：
在另一些实施方案中，环A选自：
在一些实施方案中，L为NH。在另一些实施方案中，L为键。当L为键时，优选环A为含氮的亚杂环烷基(例如亚哌啶基)并且G连接在环A的氮杂原子上。
在一些实施方案中，G为其中Rg1、Rg2和Rg3各自独立地选自H、CN、卤素、C1-6烷基、C1-6烷基-O-CO-、二甲氨基-C1-3亚烷基-、哌啶基-C1-3亚烷基-、吡咯烷基-C1-3亚烷基-、氮杂环丁基-C1-3亚烷基-、任选被氧杂环丁基取代的哌嗪基-C1-3亚烷基-、吗啉基-C1-3亚烷基-、或5-10元氮杂螺环烷基-C1-3亚烷基。
在一些实施方案中，G为其中Rg1、Rg2和Rg3各自独立地选自H、CN、卤素、C1-6烷基、C1-6烷基-O-CO-、和N(C1-3烷基)(C1-3烷基)-C1-3亚烷基-。
在另一些实施方案中，G为其中Rg1和Rg2各自独立地选自H、C1-6烷基、C1-6烷基-O-CO-、和N(C1-3烷基)(C1-3烷基)-C1-3亚烷基-，且Rg3为H或CN。
在一些实施方案中，G为
优选地，G为
本发明的上述和其它方面可以任意地进行组合，构成未直接描述的技术方案，这些技术方案也涵盖在本申请的公开范围内。
在优选的实施方案中，本发明的化合物选自实施例的化合物，例如：
/>
/>
在优选的实施方案中，本发明的化合物选自：
/>
/>
/>
在另一方面，本发明还提供了药物组合物，其包含本发明的化合物以及一种或多种可药用的载体、稀释剂或赋形剂。
在另一方面，本发明还提供了用于治疗或预防CDK12相关疾病或病症的本发明的化合物。
在另一方面，本发明还提供了在个体中治疗或预防CDK12相关疾病或病症的方法，该方法包括给所述个体施用有效量的本发明的化合物。
在另一方面，本发明还提供了本发明的化合物在制备药剂中的用途，所述药剂用于治疗或预防CDK12相关疾病或病症。
在另一方面，本发明还提供了药物组合产品，包含本发明的化合物与其它活性剂。
定义
在本申请中，除非另有说明，否则本申请所用的术语具有下文定义的含义。本申请未明确定义的术语具有本领域技术人员通常理解的一般含义。
在本申请中使用的术语“一个”、“一种”、“该”和类似术语应理解为包括单数和复数，除非上下文另外特别指出或根据上下文明显矛盾。
不在两个字母或符号之间的短横(“-”)表示取代基的连接位点。例如，-NR5R6表示该基团通过氮原子与分子的其余部分连接，-C1-3亚烷基-C3-8环烷基表示该基团的连接点在C1-3亚烷基上。当取代基的连接位点对本领域技术人员来说显而易见时(例如对于卤素、羟基、NR5R6等而言)，“-”也可以省略。
当基团的价键带有波浪线时，表示所述基团通过该价键与分子其余部分连接。
当价键穿过环时，例如在中，表示所述环通过环上任意可用的位置与其它部分连接。
术语“卤素”或“卤代”指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。优选的卤素是氟和氯。
术语“烷基”单独或作为其它基团一部分表示由碳和氢原子组成的完全饱和的直链或支链烃基团。烷基优选具有1-8个碳原子(即C1-8烷基)、更优选具有1-6个碳原子(即C1-6烷基)、1-4个碳原子(即C1-4烷基)或1-3个碳原子(即C1-3烷基)。烷基的代表性实例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(Pr)(包括正丙基和异丙基)、丁基(Bu)(包括正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基)、戊基(包括正戊基、异戊基、新戊基等)、己基、庚基、辛基等。
术语“亚烷基”单独或作为其它基团一部分表示由碳和氢原子组成的完全饱和的直链或支链二价烃基团。亚烷基优选具有1-8个碳原子(即C1-8亚烷基)、更优选1-6个碳原子(即C1-6亚烷基)、1-4个碳原子(即C1-4亚烷基)或1-3个碳原子(即C1-3亚烷基)。亚烷基的代表性实例包括但不限于亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基等。
术语“烯基”单独或作为其它基团一部分表示由碳原子和氢原子组成的包含至少一条双键的直链或支链烃基团。烯基优选具有2-8个碳原子(即C2-8烯基)、更优选2-6个碳原子(即C2-6烯基)、2-4个碳原子(即C2-4烯基)或2-3个碳原子(即C2-3烯基)。烯基的代表性实例包括但不限于乙烯基、丙烯基、烯丙基、丁烯基、异丁烯基、戊烯基、异戊烯基、己烯基、庚烯基等。
术语“亚烯基”单独或作为其它基团一部分表示由碳原子和氢原子组成的包含至少一条双键的直链或支链二价烃基团。亚烯基优选具有2-8个碳原子(即C2-8亚烯基)、更优选2-6个碳原子(即C2-6亚烯基)、2-4个碳原子(即C2-4亚烯基)或2-3个碳原子(即C2-3亚烯基)。亚烯基的代表性实例包括但不限于亚乙烯基、亚丙烯基、亚烯丙基、亚丁烯基等。
术语“炔基”单独或作为其它基团一部分表示由碳原子和氢原子组成的包含至少一条叁键的直链或支链烃基团。炔基优选包含2-8个碳原子(即C2-8炔基)、更优选2-6个碳原子(即C2-6炔基)、2-4个碳原子(即C2-4炔基)或2-3个碳原子(即C2-3炔基)。炔基的代表性示例包括但不限于乙炔基、丙炔基、炔丙基、丁炔基、异丁炔基、戊炔基、异戊炔基、己炔基、庚炔基等。
术语“亚炔基”单独或作为其它基团一部分表示由碳原子和氢原子组成的包含至少一条三键的直链或支链二价烃基团。亚炔基优选具有2-8个碳原子(即C2-8亚炔基)、更优选2-6个碳原子(即C2-6亚炔基)、2-4个碳原子(即C2-4亚炔基)或2-3个碳原子(即C2-3亚炔基)。亚炔基的代表性实例包括但不限于亚乙炔基、亚丙炔基、亚丁炔基等。
术语“卤代烷基”指其中一个或多个氢原子、例如1、2、3、4、5、6或7个氢原子、例如1、2或3个氢原子被卤素取代的如本文所定义的烷基。可以理解，当卤素取代基多于一个时，所述卤素取代基可以相同或不同，并且可以位于相同或不同的碳原子上。卤代烷基优选是C1-8卤代烷基、更优选C1-6卤代烷基、C1-4卤代烷基或C1-3卤代烷基。卤代烷基的代表性实例包括但不限于氟甲基、氯甲基、二氟甲基、二氯甲基、氟氯甲基、三氟甲基、三氯甲基、二氯氟甲基、二氟乙基、三氟乙基、三氯乙基、二氟氯乙基、二氟丙基和三氟丙基等。
类似地，术语“卤代烯基”和“卤代炔基”分别指其中一个或多个氢原子、例如1、2、3、4、5、6或7个氢原子、例如1、2或3个氢原子被卤素取代的如本文所定义的烯基和炔基。可以理解，当卤素取代基多于一个时，所述卤素取代基可以相同或不同，并且可以位于相同或不同的碳原子上。
术语“羟基烷基”指其中一个或多个氢原子、例如1、2、3、4、5、6或7个氢原子、例如1、2或3个氢原子被羟基替代的如本文所定义的烷基。羟基烷基优选是C1-8羟基烷基、更优选C1-6羟基烷基、C1-4羟基烷基或C1-3羟基烷基。羟基烷基的代表性实例包括但不限于羟甲基、羟乙基、羟丙基等。
术语“氰基烷基”指其中一个或多个氢原子、例如1、2、3、4、5、6或7个氢原子、例如1、2或3个氢原子被氰基替代的如本文所定义的烷基。氰基烷基优选是C1-8氰基烷基、更优选C1-6氰基烷基、C1-4氰基烷基或C1-3氰基烷基。氰基烷基的代表性实例包括但不限于氰基甲基、氰基乙基、氰基丙基等。
术语“烷氧基”或“烷基氧基”可互换使用，表示通过氧桥连接的如上定义的烷基。烷氧基优选具有1-8个碳原子(即C1-8烷氧基)，更优选具有1-6个碳原子(即C1-6烷氧基)、1-4个碳原子(即C1-4烷氧基)或1-3个碳原子(即C1-3烷氧基)。烷氧基的代表性实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基(包括正丙氧基、异丙氧基)、丁氧基(包括正丁氧基、仲丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基等)、戊氧基(包括正戊氧基、异戊氧基、新戊氧基等)、己氧基、庚氧基、辛氧基等。
术语“卤代烷氧基”或“卤代烷基氧基”可互换使用，表示通过氧桥连接的如上定义的卤代烷基。卤代烷氧基优选是C1-8卤代烷氧基、更优选C1-6卤代烷氧基、C1-4卤代烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
术语“环烃基”指饱和或部分不饱和的非芳族单环或二环烃基团。当“环烃基”为完全饱和时，称为“环烷基”。环烃基或环烷基优选3-10个环碳原子(即C3-10环烃基或C3-10环烷基)、更优选3-8个环碳原子(即C3-8环烃基或C3-8环烷基)、5-10个环碳原子(即C5-10环烃基或C5-10环烷基)或5-8个环碳原子(即C5-8环烃基或C5-8环烷基)。环烃基的代表性实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基、环辛基、双环[1.1.1]戊基、双环[2.2.1]庚基、螺[3.4]辛烷基等。
术语“亚环烃基”和“亚环烷基”分别指二价的如本文定义的环烃基和环烷基。亚环烃基或亚环烷基优选具有3-10个环碳原子(如C3-10亚环烷基)、更优选3-8个环碳原子(如C3-8亚环烷基)、5-10个环碳原子(如C5-10亚环烷基)或5-8个环碳原子(如C5-8亚环烷基)。。
术语“环烷氧基”或“环烷基氧基”可互换使用，表示通过氧桥连接的如上定义的环烷基。环烷氧基优选具有优选3-10个环碳原子、更优选3-8个环碳原子、5-10个环碳原子或5-8个环碳原子。环烷氧基的代表性实例包括但不限于环丙基氧基、环丁基氧基、环戊基氧基、环戊烯基氧基、环己基氧基和环己烯基氧基等。
术语“环烷基烷基”或“环烷基烷基-”表示被环烷基取代的烷基，其中环烷基和烷基分别如本文所定义，其连接点在烷基上。该术语也可以表示为“环烷基-亚烷基-”，即通过亚烷基连接的环烷基。优选地，“环烷基烷基”是C3-8环烷基-C1-6烷基-(即C3-8环烷基-C1-6亚烷基-)，更优选是C3-8环烷基-C1-3烷基-(即C3-8环烷基-C1-3亚烷基-)。
术语“烷氧基烷基”或“烷氧基烷基-”表示被烷氧基取代的烷基，其中烷氧基和烷基分别如本文所定义，其连接点在烷基上。该术语也可以表示为“烷氧基-亚烷基-”，即通过亚烷基连接的烷氧基。优选地，“烷氧基烷基”是C1-6烷氧基-C1-6烷基-或C1-6烷氧基-C1-6亚烷基-，更优选是C1-6烷氧基-C1-3烷基-或C1-6烷氧基-C1-3亚烷基-。
术语“烷基环烷基”或“烷基环烷基-”表示被烷基取代的环烷基，其中烷基和环烷基分别如本文所定义，其连接点在环烷基上。该术语也可以表示为“烷基-亚环烷基-”，即通过亚环烷基连接的烷基。优选地，“烷基环烷基”是C1-6烷基-C3-6环烷基-或C1-6烷基-C3-6亚环烷基-。
术语“芳基”指具有一个或多个环、优选1或2个环的单价碳环，其中至少一个环是芳香性的，其它环(如果存在的话)可以是芳族或非芳族的。芳基优选具有6-10个(即C6-10芳基)、更优选6个环碳原子(即C6芳基或苯基)。芳基的代表性实例包括但不限于苯基(即C6芳基)、萘基、四氢萘基、茚基、二氢茚基或四氢萘基等。
术语“亚芳基”指二价的如本文定义的芳基。亚芳基优选具有6-10个环碳原子(即C6-10亚芳基)、更优选6个环碳原子(即C6亚芳基或亚苯基)。
术语“杂环”、“杂环基”、“杂环基团”和“杂环的”可互换使用，指具有一个或多个、例如1-6个、更优选1、2、3或4个独立地选自N、O或S的杂原子且其余环成员为碳的完全饱和的、部分不饱和的或芳香族的单环、二环或三环环状基团。杂环的碳成员可以被-CO-代替，并且所述任意N和S杂原子可以任选被氧化(例如在NO、SO、SO2中)和所述任意N杂原子可以任选被季铵化(例如在[NR]+Cl-、[NR]+OH-中)。该术语涵盖完全饱和的“杂环烷基”、完全饱和或部分不饱和的“杂环烃基”、芳香性的“杂芳基”等。优选地，杂环具有3-20个环成员、更优选3-12个环成员，例如3至10个、5至10个、3至8个、5至7个、7至10个、4至6个、或5至6个环成员。
术语“含氮”表示相关的杂环或杂环基团(包括杂环烃基、杂环烷基、亚杂环烷基、杂芳基、杂杂芳基等)仅含有氮原子作为环杂原子且其它环成员为碳，例如在含氮杂环烃、含氮杂环烷烃、含氮杂环烷基、含氮亚杂环烷基、含氮杂芳环、含氮杂芳基、含氮亚杂芳基等中。
术语“杂环烃”和“杂环烃基”可互换使用，指具有一个或多个、例如1-6个、更优选1、2、3或4个独立地选自N、O或S的杂原子且其余环成员为碳的饱和或部分不饱和的非芳族单环、二环或三环环状基团。当“杂环烃基”为完全饱和时，其可称为“杂环烷基”。杂环烃的碳成员可以被-CO-代替，并且所述任意N和S杂原子可以任选被氧化(例如在NO、SO、SO2中)和所述任意N杂原子可以任选被季铵化(例如在[NR]+Cl-、[NR]+OH-中)。杂环烃基可以具有3-20个环成员，例如3-12个环成员，例如3、4、5、6、7、8、9、10、11、12个环成员或由其组合而成的任意数值范围的环成员，例如3-10个、3-8个、5-10个、5-8个、4-7个环成员，例如3-8元单环杂环烃基或7-10元双环杂环烃基。其代表性的实例包括但不限于：氮丙啶基、环氧乙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、二氢吡咯基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、二氢噻吩基、四氢噻吩基、四氢噻吩基1-氧化物、四氢噻吩基1,1-二氧化物、二氢吡唑基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、咪唑酮基、二氢咪唑酮基、四氢咪唑酮基、二氢噁唑基、噁唑烷基、二氢异噁唑基、异噁唑烷基、二氢噻唑基、噻唑烷基、二氢异噻唑基、异噻唑烷基、二氢吡啶基、四氢吡啶基、哌啶基、哌啶酮基、二氢哒嗪基、四氢哒嗪基、六氢哒嗪基、二氢嘧啶基、四氢嘧啶基、六氢嘧啶基、二氢吡嗪基、四氢吡嗪基、哌嗪基、吡喃基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、噻喃基、二氢噻喃基、四氢噻喃基、噁嗪基、异噁嗪基、二氢噁嗪基、噁嗪烷基、吗啉基、硫吗啉基、硫吗啉1-氧化物、硫吗啉1,1-二氧化物、二氢吲哚基、二氢苯并呋喃基、二氢异苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噻唑基、色烯基、二氢苯并吡喃基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基等。杂环烃基可以通过碳原子或杂原子与分子的其余部分连接，只要化学上可行即可。
术语“杂环烷基”指具有一个或多个、例如1-6个、更优选1、2、3或4个独立地选自N、O或S的杂原子且其余环成员为碳的饱和的单环、二环或三环环状基团，包括螺环。杂环烷基可以具有3-20个环成员，例如3-12个环成员，例如3、4、5、6、7、8、9、10、11、12个环成员或由其组合而成的任意数值范围的环成员，例如3-10个、5-10个、5-8个环成员。其代表性的实例包括但不限于：吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡唑烷基、咪唑烷基、咪唑酮基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、哌啶基、哌啶酮基、六氢哒嗪基、六氢嘧啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、吗啉基、硫吗啉基、硫吗啉1-氧化物、硫吗啉1,1-二氧化物等。杂环烷基可以通过碳原子或杂原子与分子的其余部分连接，只要化学上可行即可。
术语“亚杂环烷基”和“杂环烷基亚基”可互换使用，指二价的如本文定义的杂环烷基。
术语“杂环烃基氧基”指通过氧桥连接的杂环烃基，其中所述杂环烃基如本文所定义。
术语“杂芳基”指具有一个或多个、优选1-6个、更优选1、2、3或4个独立地选自N、O或S的杂原子且其余环成员为碳的单环、二环或三环环状基团，其中至少一个环是芳香性的，且其它环(如果存在的话)可以是芳族或非芳族的。杂芳基的任意N和S杂原子可以任选被氧化(例如在NO、SO、SO2中)和所述任意N杂原子可以任选被季铵化(例如在[NR]+Cl-、[NR]+OH-中)。杂芳基优选是5-14元、更优选5-10元杂芳基，例如5-7元杂芳基(例如单环，例如含氮的)或7-10元杂芳基(例如双环，例如含氮的)。杂芳基的代表性实例包括但不限于：吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噻唑基、噻唑基、异噻唑基、***基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡喃基、噻喃基、噁嗪基、噁二嗪基、吲哚基、异吲哚基、氮杂吲哚基(例如7-氮杂吲哚基、6-氮杂吲哚基、5-氮杂吲哚基、4-氮杂吲哚基)、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、喹啉基、异喹啉基、苯并吡喃基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、苯并噁嗪基、苯并***基、嘌呤基、中氮茚基、吡咯并吡啶基、吡咯并嘧啶基、吡咯并吡嗪基、咪唑并吡啶基、咪唑并嘧啶基、吡唑并吡啶基、吡唑并哒嗪基、吡唑并嘧啶基、吡唑并吡嗪基、吡啶并吡嗪基、吡啶并嘧啶基、嘧啶并嘧啶基、吡嗪并吡嗪基、酞嗪、萘啶基等。杂芳基可以通过碳原子或杂原子与化合物的其余部分连接，只要化学上可行即可。
术语“亚杂芳基”和“杂芳基亚基”可互换使用，指二价的如本文定义的杂芳基。
术语“亚基”或“亚…基”表示从分子上移除两个氢原子而衍生的二价基团。
术语“CN”表示氰基。
术语“OH”表示羟基。
术语“NH2”表示氨基。术语“-NH(C1-6烷基)”表示被一个C1-6烷基取代的氨基。术语“-N(C1-6烷基)2”表示被两个相同或不同的C1-6烷基取代的氨基，例如二甲基氨基、(甲基)(乙基)氨基-。
术语“-CO-”或“-C(＝O)-”表示羰基。
术语“-SO-”表示亚磺酰基。
术语“-SO2-”表示磺酰基。
术语“P(＝O)”表示磷酰基。
术语“氮保护基”指当进行化学反应时避免氮发生不希望的化学反应并且在反应后容易被移除的基团。其实例包括但不限于氨基甲酸酯、酰胺、烷基、芳基、亚胺等。特别地，氮保护基包括但不限于苄氧羰基(Cbz)、对甲氧基苄基(Pmb)、叔丁氧羰基(Boc)、9-芴基甲氧羰基(Fmoc)、乙酰基、苯甲酰基、苄基、对甲氧基苯基、3,4-二甲氧基苄基等。
表述“任选”、“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件可以发生或可以不发生，并且该表述包括所述事件发生的情形以及所述事件不发生的情形。例如，“任选被一个或多个R7取代”包括未被取代的情形以及被一个或多个R7取代的情形，并且其中所述R7各自可以相同或不同。“任选的取代基”表明所述取代基可以存在或不存在。本领域技术人员可以理解，对于含有一个或多个取代基的任意基团而言，所述基团不包括任何在空间上不切实际的、化学上不正确的、合成上不可行的和/或内在不稳定的取代模式。
当任意变量在结构式中出现多于一次时，其在每次出现时是各自独立地定义的。例如，对于表述“任选被一个或多个R7取代”中被多个R7取代的情形，所述R7各自可以相同或不同。
表述“被一个或多个独立地选自A、B和C的取代基取代”表示被一个或多个各自独立地选自A、B和C的取代基取代的情形，例如被一个或多个A取代，被一个或多个B取代，被一个或多个C取代，被一个或多个A和一个或多个B取代，被一个或多个A和一个或多个C取代，被一个或多个B和一个或多个C取代，被一个或多个A、一个或多个B和一个或多个C取代，等。
取代基和/或变量的组合是允许的，只要这样的组成产生了稳定的化合物。
在一些实施方案中，概括地描述了二价基团，而未具体说明键合排列。可以理解，该描述意欲包括两种键合排列，另有指示除外。例如，在基团R’-R”-R”’中，如果基团R”被描述为-CH2C(O)-，可以理解该基团可以键合为R’-CH2C(O)-R”和R’-C(O)CH2-R”’，另有指示除外。
术语“包含”或“包括”指包括所述的要素、整数或步骤，但是不排除任意其它要素、整数或步骤。在本文中，当使用术语“包含”或“包括”时，除非另有指明，否则也涵盖由所述及的要素、整数或步骤组合的情形。
术语“本发明的化合物”或“本申请的化合物”指符合式(I)或其亚式如式(Ia)、(Ib)或(Ic)的化合物或其盐、特别是可药用盐以及立体异构体(包括非对映异构体、对映异构体和外消旋物)、几何异构体、构象异构体(包括旋转异构体和阻转异构体)、互变异构体、代谢物、前药以及同位素标记的化合物(包括氘取代)，包括多晶型物、溶剂合物和/或水合物。在一些实施方案中，“本发明的化合物”特别指实施例的化合物或其盐、特别是可药用盐以及立体异构体、几何异构体、构象异构体、互变异构体、代谢物、前药以及同位素标记的化合物，包括多晶型物、溶剂合物和/或水合物。在一些实施方案中，排除溶剂合物、代谢物、同位素或前药或其任意组合。
在本文中，式(I)的称谓也包括其亚式，例如式(Ia)、(Ib)或(Ic)。
短语“可药用”或“药学上可接受”可互换使用，指当施用于动物如人时不产生副反应、***反应或其它不想要的反应的物质或组合物。
本发明的化合物可以是盐、例如可药用盐的形式。“可药用盐”包括酸加成盐和碱加成盐。“可药用酸加成盐”指保留游离碱的生物学有效性和性质并且不是生物学或其它方面不期望的那些盐。酸加成盐可以用无机酸或有机酸形成，无机酸盐例如有盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、碳酸盐、磷酸盐等，有机酸盐例如有甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、乙醇酸盐、葡糖酸盐、乳酸盐、丙酮酸盐、草酸盐、苹果酸盐、丙二酸盐、戊二酸盐、己二酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、昔萘酸盐、抗坏血酸盐、谷氨酸盐、邻氨基苯甲酸盐、苯甲酸盐、肉桂酸盐、扁桃酸盐、双羟萘酸盐、苯乙酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、乙二磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、二甲苯磺酸盐、三甲基苯磺酸盐(mesitylate)、羟乙磺酸盐、萘磺酸盐、萘二磺酸盐、樟脑磺酸盐、水杨酸盐、油酸盐、烟酸盐、糖精酸盐(saccharinate)、棕榈酸盐、硬脂酸盐、糠酸盐、马尿酸盐、乳清酸盐和扑酸盐等。盐还包括由无机碱衍生的那些，例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等；和由无毒有机碱衍生的那些：伯胺、仲胺和叔胺，被取代的胺、包括天然存在的被取代的胺，环胺和碱性离子交换树脂如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、氨丁三醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等。盐可以通过常规方法由母体化合物进行合成。
可药用盐是优选的。然而，其它盐也可以是有用的，例如在分离或纯化步骤中，其可以在制备期间使用，因此被囊括在本公开的范围内。
本发明的化合物可以含有一个或多个不对称碳原子。因此，化合物可以作为非对映异构体、对映异构体或其混合物存在。化合物的合成可以采用外消旋物、非对映异构体或异构体作为原料或作为中间体。可以通过色谱或结晶方法使特定非对映异构化合物的混合物分离或富含一种或多种特定非对映异构体。类似地，采用相同的技术或本领域已知的其它技术可以使对映异构混合物分离或对映异构体富含。非对称碳或氮原子各自可以是R或S构型，这两种构型都在本发明的范围内。在本文所示的结构中，当未指出任意特定手性原子的立体化学时，则所有立体异构体被包括在内作为本发明的化合物。本文使用的立体化学定义和约定遵循本领域的通常约定。
术语“非对映异构体”指具有两个或更多个手性中心并且其分子不互为镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，如熔点、沸点、光谱性质和生物活性。非对映异构体的混合物可通过高分辨分析操作如电泳和色谱法如HPLC来进行分离。
术语“对映异构体”指互为不可重叠的镜像的化合物的两种立体异构体。
术语“互变异构体”指可通过低能垒互相转化的具有不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子移变互变异构体)包括通过质子迁移的互相转化，例如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过一些成键电子的重组进行的互相转化。
术语“代谢物”指特定化合物或其盐经体内代谢产生的产物。这类产物可以产生于所施用化合物的例如氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱脂、酶裂解等。代谢物结构以常规方式来确定，例如通过MS、LC/MS或NMR分析。通常，代谢物分析以与本领域技术人员熟知的常规药物代谢研究相同的方式进行。代谢产物可用于本发明的化合物的治疗剂量的诊断分析，只要未在体内发现它们。
术语“前药”指被化学修饰的活性或非活性的化合物，其在施用于个体后经过体内生理作用(例如水解、新成代谢等)转化为本发明的化合物。制造和使用前药的技术是本领域技术人员熟知的。
术语“多晶型物”指具有相同的化学结构/组成、但是形成结晶的分子和/或离子的空间排列不同的结晶形式。本发明的化合物可以作为无定型固体或结晶固体来提供。本发明的范围意欲囊括所有这些物理形式。
一些本发明的化合物可以以非溶剂化形式和溶剂化形式、包括水合形式存在。术语“溶剂合物”指一种或多种溶剂分子与本发明的化合物的缔合物或复合物。形成溶剂合物的溶剂的实例包括水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。术语“水合物”指其中溶剂分子是水的复合物。溶剂化的方法是本领域公知的。
术语“个体”或“患者”指动物，优选是哺乳动物。个体的实例包括但不限于灵长类(例如人和非人灵长类动物如猴)、马、牛、羊、猫、狗、兔、兔以及啮齿类(例如小鼠和大鼠)。在一些实施方案中，个体是人，包括儿童、青少年或成人。
术语“治疗”指(i)治疗或防止特定疾病、病症或障碍、(ii)减弱、改善或消除特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状和任选地(iii)防止或延迟本文所述的特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作。在一些实施方案中，“治疗”指改善至少一种身体参数，其可能不为患者所察觉。在另一些实施方案中，“治疗”指从身体上(例如稳定可察觉的症状)或生理学上(例如稳定身体的参数)或上述两方面调节疾病或病症。
术语“预防”指给具有易患所述疾病或病症的体质的个体施用一种或多种药物物质、特别是本发明的化合物和/或其可药用盐，用以防止个体罹患该疾病。
术语“抑制”和“减轻”等指特定的病患、症状或病症或疾病的减轻或抑制，或者生物学活性或过程基线活性的显著降低。
术语“有效量”指以需要的剂量并持续需要的时间段有效实现所需治疗效果或预防效果的量。其可以由参与医师或兽医执业者来确定，并且将随着化合物、所治疗的疾病状态、所治疗的疾病的严重程度、个体的年龄和相关健康状况、施用途径和形式、主治医师或兽医执业者的判断等因素而变化。通常，“预防有效量”将小于“治疗有效量”。
术语“制剂”或“药物组合物”指适合于向动物、优选哺乳动物(包括人)施用的包含至少一种活性成分和至少一种非活性成分、例如可药用赋形剂的组合物。本发明的制剂可以是本领域适用的任意制剂，例如片剂、胶囊剂、液体制剂等。
术语“可药用赋形剂”指药物制剂中除活性成分以外的成分，其对个体是无毒的。可药用载体的实例包括但不限于粘合剂、崩解剂、润滑剂、溶剂、分散介质、缓冲剂、赋形剂、抗氧化剂、防腐剂或矫味剂等。
当涉及化学反应时，“处理”、“接触”和“反应”指在适当的条件下加入或混合两种或更多种试剂，以产生所示的和/或所需的产物。应当理解，产生所示和/或所需产物的反应可能不一定直接来自最初加入的两种试剂的组合，即，在混合物中可能存在生成的一种或多种中间体，这些中间体最终导致了所示和/或所需产物的形成。
表述A“和/或”B包括单独的A、单独的B以及A+B的情形。
一般而言，术语“约”与数值联合使用时表示该数值±20％、优选±10％、更优选±5％的范围。
功效
本发明的化合物具有良好的CDK12抑制活性。本发明的化合物显示出良好的抑制癌细胞增殖的活性。而且，本发明的化合物具有改进的物理和化学性质以及良好的药物动力学性质(例如良好的代谢稳定性)，GSH反应性低，成药性好。本发明的化合物可用于需要抑制CDK12的多种应用中。
具体地，经研究发现，本发明的化合物可有效抑制CDK12和/或有效抑制肿瘤细胞株活性，能够实现以下一种或多种技术效果：
·高的CDK12抑制活性：抑制CDK12激酶活性的IC50<500nM，优选<200nM，进一步优选<100nM，更优选<70nM。；
·高的肿瘤细胞株增殖抑制活性，例如：高的HCC70细胞株增殖抑制活性，HCC70细胞的增殖抑制的IC50在1～3000nM、优选1～2000nM、更优选1～1000nM、还优选1～500nM、最优选1～200nM的范围，如活性实施例B所验证；在JurKat细胞上也表现出明显的增殖抑制活性的优势；对HT-29细胞(人结肠癌细胞)和A-673细胞(人横纹肌肉瘤细胞)等也表现出明显的增殖抑制活性；和/或
·具有良好的药物代谢动力学性质，例如具有更长的t1/2，从而例如可以加大给药间隔，更长的半衰期，使患者具有更好的依从性；
·GSH反应性低；和/或
·优异的理化性质，如溶解度、物理和/或化学稳定性改善。
CDK12相关疾病或病症例如为异常细胞增殖性疾病、强直性肌营养不良Ⅰ型(DM1)、感染(例如病毒如疱疹、HIV感染，、真菌感染等)、炎性病症(例如类风湿性关节炎、骨关节炎等)、自身免疫性疾病(例如牛皮藓、狼疮、Ⅰ型糖尿病、糖尿病性肾病、多发性硬化、肾小球性肾炎等)、心血管疾病(例如心肌梗塞、中风、动脉粥样硬化、手术后血管狭窄等)、神经变性疾病(例如阿尔兹海默症、帕金森病等)和由辐射引起的造血毒性疾病(例如骨髓抑制、嗜中性白血球减少症、白细胞减少症、贫血等)。
在一些实施方案中，所述异常细胞增殖性疾病为肿瘤或癌症、特别是CDK12介导的肿瘤或癌症，例如乳腺癌、卵巢癌、***癌、中枢神经***肿瘤(例如脊柱肿瘤、脑干胶质瘤、多形性胶质母细胞瘤、星形细胞瘤)、食管癌、肠癌、胃癌、肝癌、胰腺癌(例如，胰腺导管癌、胰腺内分泌肿瘤)、结直肠癌(例如结肠癌、直肠癌)、肺癌(例如非小细胞肺癌、小细胞肺癌、支气管肺泡细胞癌)、肾癌、皮肤癌(例如良性和恶性黑素瘤、基底肉瘤)、成胶质细胞瘤、神经鞘瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、鳞状细胞癌、垂体腺瘤、肉瘤(例如尤文氏肉瘤、血管肉瘤、脂肪肉瘤、肌肉瘤)、骨软骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、***瘤、睾丸肿瘤、子宫癌(例如子***、子宫内膜癌)、头颈瘤(例如上颌骨瘤、咽癌、喉癌、舌癌、口内癌)、多发性骨髓瘤、良性和恶性淋巴瘤(例如网状细胞肉瘤、淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤、套细胞淋巴瘤)、真性红细胞增多症、白血病(例如急性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病)、甲状腺瘤、输尿管肿瘤、膀胱瘤、胆囊癌、胆管癌、绒毛膜上皮癌、儿科肿瘤(例如尤因家族性肉瘤、维尔姆斯肉瘤、横纹肌肉瘤、胚胎睾丸瘤、视网膜母细胞瘤、肾母细胞瘤)等，或上述一种或多种癌症的组合。
在一些实施方案中，所述癌症选自乳腺癌、卵巢癌、***癌、胃癌、食管癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、结直肠癌、胰腺导管癌、神经母细胞瘤和尤文氏肉瘤。
在一些实施方案中，所述疾病选自强直性肌营养不良Ⅰ型(DM1)。
在一些实施方案中，本发明的化合物可用于治疗或预防CDK12相关疾病或障碍，例如肿瘤或癌症。
在优选的实施方案中，本发明的化合物可用于治疗或预防肺癌、非小细胞肺癌、支气管肺泡细胞肺癌、乳腺癌、卵巢癌、***癌、胃癌、食管癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、结直肠癌、胰腺导管癌、神经母细胞瘤、尤文氏肉瘤等肿瘤或癌症。
药物组合物和施用
本发明的化合物可以以药物组合物的形式、通过任意适用的途径施用，例如但不限于口服(以片剂、包衣片剂、锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液、乳剂或悬浮液的形式)、吸入(例如以喷雾剂形式)、直肠(例如以栓剂形式)或胃肠道外(例如以注射液形式，例如静脉内、肌内、皮下、腹膜内、颅内等)进行施用。特别优选口服、鼻内和肠胃外施用。
将本发明的化合物制备成药物组合物的技术是本领域熟知的。例如，可以使用一种或多种可药用载体、稀释剂或赋形剂将本发明的化合物加工成药物组合物的形式，例如片剂、包衣片剂、胶囊剂、液体制剂(例如注射液、输液、糖浆、乳剂、混悬剂等)、散剂、粉针剂、分散体、喷雾剂、栓剂、脂质体等。可药用载体、稀释剂或赋形剂是本领域熟知的，例如填充剂、崩解剂、溶媒、增溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、防腐剂、甜味剂、着色剂、矫味剂、用于改变渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂或抗氧化剂等。
剂量可在宽范围内改变，并且当然必须根据每个具体病例中的个体需要进行调整。适宜剂量的确定可以由主治医师根据所治疗疾病的种类及其严重性、个体的健康状况和既往病史、共用药物、所施用的具体化合物和施用途径等酌情确定。70kg成人口服施用的日剂量典型地为约0.01mg至约1000mg本发明的化合物或相应量的可药用盐。根据需要，本发明的化合物的用量可以超出该剂量范围。日剂量可作为单剂量或以分次剂量施用。
药物组合
本发明的化合物可以单独地或与一种或多种其它活性剂或疗法组合使用，所述其它活性剂或疗法可以具有与本发明的化合物相同或不同的药理学功效。本发明的化合物可以与所述其它活性剂或疗法同时、在其之前或在其之后施用。
当本发明的化合物与其它活性剂组合施用时，组合施用的活性剂的剂量当然将根据共用药物、待治疗病症、个体的一般健康状况、医师或兽医的判断等因素而变化。本发明的化合物可以与共用的其它活性剂通过相同或不同的施用途径同时、分别或依次施用。它们可以被包含在同一药物组合物中(固定组合物)，也可以是分开形式、例如药盒形式的组合产品。它们可以由相同或不同的制造商配制和/或供应。而且，本发明的化合物和其它活性剂可以(i)在将组合产品发送给医师之前(例如在包含本发明的化合物和其它活性剂的药盒的情形中)；(ii)在临施用前由医师自身(或在医师指导下)；或(iii)由患者自身、例如在本发明的化合物和其它活性剂的依次施用期间一起加入组合治疗中。
在一些实施方案中，本申请提供了包含本发明的化合物以及一种或多种其它活性剂的药物组合物。任选地，药物组合物可以包含一种或多种可药用载体、稀释剂或赋形剂。
在一些实施方案中，本申请提供了药物组合产品如药盒，其包含两个或更多个单独的药物组合物，其中至少一个含有本发明的化合物。在一些实施方案中，药盒包括用于分别容纳所述组合物的器具，例如容器、分开的瓶或分开的箔袋。
本申请的药盒可用于施用不同的剂型、例如口服和胃肠道外剂型，用于以不同的剂量间隔施用单独的组合物，或用于相对于另一种逐步增加单独的组合物。为了帮助顺应性，本申请的药盒通常包含施用说明书。
本发明化合物的制备方法
本发明的化合物可以通过多种方法、包括下文流程中的方法、实施例中给出的方法或与之类似的方法来制备。对于各反应步骤而言，适当的反应条件是本领域技术人员已知的或者可以容易地确定。原料通常可购买获得，或者可以利用本领域公知的方法或本文所述的方法容易地制备。通式中的各变量具有本文定义的含义，另有说明除外。
仅为解释目的，以下流程提供了合成本发明化合物的示例性途径。本领域技术人员理解，其它合成途径也是可利用的，并且通过下文所述方法制备的化合物可以根据本申请的内容、利用本领域技术人员熟知的常规化合物进行进一步改变。
在本发明的化合物的制备中，基团的保护(例如氨基保护基、羟基保护基)可能是需要的，这可以由本领域技术人员容易地决定。对于保护基的一般描述及其用途，参见T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley&Sons，纽约，1991。如果没有特别说明，在制备这些化合物中使用的原料和试剂通常可商购获得，或者可以通过下文的方法、与下文给出的方法类似的方法或本领域已知的方法制得。
如果需要，合成反应流程中的原料和中间体可以采用常规技术进行分离和纯化，所述技术包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱法等。所述材料可以采用包括物理常数和波谱数据在内的常规方法表征。
合成方案1：
本发明的合成方案1提供了合成式(I)化合物的方法，其中L0为L的前体，LG为反应离去基团，且其它变量如本文对式(I)化合物所定义，该方法包括以下步骤：
步骤a：使式(I-5)化合物与多取代的2-氯嘧啶连接，得到式(I-4)化合物。所述反应包括但不限于亲核取代反应。亲核取代反应可以在有或无碱的存在下进行，所述碱包括但不限于Na2CO3、K2CO3、CsF和DIPEA。亲核取代反应也可以在有或无酸的存在下进行，所述酸包括但不限于对甲苯磺酸、苯磺酸和TFA。特别地，这些反应优选在适合的有机溶剂中进行，所述有机溶剂可选自NMP、DMF、DMSO、EtOH、正丁醇、仲丁醇、异丙醇、吡啶及其任意组合。这些反应优选在适合的温度下进行，例如0-200℃、10-100℃、20-50℃或室温(约20-25℃)。
步骤b：使式(I-4)化合物与式(I-3)化合物连接，得到式(I-2)化合物。所述反应包括但不限于亲核取代反应。亲核取代反应可以在有或无碱的存在下进行，所述碱包括但不限于Na2CO3、K2CO3、CsF和DIPEA。特别地，这些反应优选在适合的有机溶剂中进行，所述有机溶剂可选自NMP、DMF、DMSO、ACN、吡啶及其任意组合。这些反应优选在适合的温度下进行，例如0-200℃、10-100℃、20-50℃或室温(约20-25℃)。
步骤c：使式(I-2)化合物的L0基团转化为L基团，得到式(I-1)化合物。所述反应包括但不限于还原反应。还原反应需在还原试剂存在下进行，所述的还原试剂包括但不限于Fe/NH4Cl、Fe/AcOH、Fe/HCl、SnCl2/NH4Cl、SnCl2/AcOH、Pd/C、Pd(OH)2。特别地，这些反应优选在适合的有机溶剂中进行，所述有机溶剂可选自EtOH、THF、二噁烷、DCM、H2O及其任意组合。这些反应优选在适合的温度下进行，例如0-200℃、10-100℃、20-50℃或室温(约20-25℃)。
步骤d：使式(I-1)化合物与官能团G连接，得到式(I)化合物。所述反应包括但不限于酰胺缩合反应、酰化反应。酰化反应可以在碱存在下进行，所述的碱包括但不限于Na2CO3、K2CO3、Et3N、DIPEA。特别地，这些反应优选在适合的有机溶剂中进行，所述有机溶剂可选自无水DCM、无水THF、无水DMF、无水ACN等及其任意组合。这些反应优选在适合的温度下进行，例如0-200℃、10-100℃、20-50℃、0-4℃、0℃或室温(约20-25℃)。
具体实施方式
提供以下实施例对本发明进行进一步说明。应当理解，其仅仅是为了能够更好的理解本发明，而不以任何方式限定本发明的范围。
在本申请中，当化学名称和结构式不一致时，应当以结构式所示为准，除非根据上下文可以推断化学名称而非结构式是正确的。为简便，在本申请所给出的一些化合物结构式中并非所有氢原子均被明确地标示出来。当化合物中存在空余化合价时，表示存在未标示出的氢原子。
本申请使用的缩写具有本领域通常理解的含义，除非说明书中另外清楚定义。在下面列出说明书中使用的缩写的含义：
本发明提供的目标化合物制备方法中，柱层析色谱采用上海泰坦科技有限公司生产的硅胶(100-200目和200-300目)；薄层色谱采用GF254(0.25毫米)；核磁共振色谱(NMR)使用Bruker AvanceⅢ400MHz核磁共振仪测定；液质联用(LC/MS)使用Agilent 1200/6120single quadrupole MSD或1956A single quadrupole MSD或6110single quadrupoleMSD液质联用仪，制备HPLC用Shimadzu LC-20AP。
LC-MS
实施例中提供的LC-MS数据以保留时间、纯度和/或质量(m/z)给出，采用以下方法获得：
方法A：柱：Luna C18(2.0*50mm,5μm)；流动相A：0.04％ TFA水溶液；流动相B:0.02％TFA乙腈溶液；流速：1.0ml/min；柱温：40℃；检测波长：214nm,254nm；按照表1进行梯度洗脱：
表1
时间(min) A％ B％
0.00 95 5
0.40 95 5
3.00 5 95
4.00 5 95
4.01 95 5
4.50 95 5
方法B：柱：SunFire C18(50*4.6mm 5um)；流动相A：0.1％ FA水溶液；流动相B:0.1％FA乙腈溶液；流速：2.0ml/min；柱温：40℃；检测波长：214nm,254nm；按照表2进行梯度洗脱：
表2
时间(min) A％ B％
0.00 90 10
0.40 70 30
2.00 5 95
2.90 5 95
2.91 90 10
方法C：柱：XBridge C18(2.1*50mm,5μm)；流动相A：H2O+10mM NH4HCO3；流动相B：乙腈；流速：0.8ml/min；柱温：40℃；检测波长：214nm,254nm；按照表3进行梯度洗脱：
表3
时间(min) A％ B％
0.00 95 5
3.40 5 95
3.85 5 95
3.86 95 5
4.50 95 5
此外，凡涉及易氧化或易水解的原料的所有操作都在氮气保护下进行。除非另有说明，本发明使用的原料都是市售原料、无需进一步纯化可以直接使用，本发明使用的温度均为摄氏度(℃)。液体的比例为体积比，例如在PE/EA中。
实施例
实施例1：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基) 甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将1-(溴甲基)-4-硝基苯(333mg,1.54mmol)加至5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(580mg,1.29mmol)和K2CO3(533mg,3.86mmol)的ACN(6.00mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌12hrs。反应混合物加水(10.0mL)稀释，用EA(10.0x3mL)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物通过硅胶层析(EA＝100％)分离纯化，得到目标化合物(400mg,收率53.06％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:586.1[M+H]+。
步骤2：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将还原铁粉(229mg,4.10mmol)加至5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(400mg,682mmol)和NH4Cl(219mg,4.10mmol)的EtOH(5.00mL)/水(1.00mL)的混合液中，反应混合物在80℃下搅拌3hrs。反应混合物过滤，滤液减压浓缩，残余物用EA(10.0mL)溶解，用水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(350mg,粗品,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:556.2[M+H]+。
步骤3：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将NaOH(1M,5.00mL)水溶液滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(380mg,683μmol)的二噁烷(5.00mL)中，反应混合物在室温下搅拌3hrs。反应混合物直接加EA(20.0mL)稀释，有机相用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(250mg,收率87.9％黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:416.1[M+H]+。
步骤4：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(43.5mg,481μmol)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(200mg,481μmol)和DIPEA(186mg,1.44mmol)的THF(2.00mL)溶液中，反应化合物在0℃下搅拌30分钟。加水(10.0mL)淬灭反应，用EA(5.00x3 mL)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物通过Pre-HPLC(柱:Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝35％-65％；10min)分离纯化，得到标题化合物(73.52mg,收率32.5％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:470.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.97-11.82(m,1H),10.16(s,1H),9.59-9.48(m,1H),8.53-8.37(m,2H),8.02-7.96(m,1H),7.66-7.58(m,3H),7.53-7.49(m,1H),7.27-6.97(m,4H),6.48-6.38(m,1H),6.29-6.22(m,1H),5.75(dd,J＝10.15,2.08Hz,1H),5.28-5.19(m,2H)。
实施例2：N-(4-((5-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-氧代吡啶-1 (2H)-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮的合成
将3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(苯磺酰基)-1H-吲哚(2.00g,4.95mmol)加至5-氨基吡啶-2-酚(1.09g,9.89mmol)和DIPEA(10.0mL)的NMP(10.0mL)溶液中，反应混合物在130℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后加入EA(30.0mL)，析出大量固体，再加水(50.0mL)搅拌，过滤，滤液分层，有机相用无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物和滤饼一起干燥，得到目标化合物(1.50g,收率63.4％,棕色固体)，直接用于下一步。LC-MS(ESI)m/z:478.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.62-11.37(m,1H),9.56-9.38(m,1H),8.67-8.62(m,1H),8.58(s,1H),8.11(br d,J＝7.82Hz,2H),8.01(br d,J＝8.31Hz,1H),7.78-7.71(m,2H),7.68-7.59(m,4H),7.47-7.43(m,1H),7.32(br d,J＝6.36Hz,1H),6.36(br d,J＝9.54Hz,1H)。
步骤2：5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1-(4-硝基苄基)吡啶-2(1H)-酮的合成
将对硝基苄溴(181mg,837mmol)加至5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮(200mg,419mmol)和DIPEA(162mg,1.26mmol)的NMP(2.00mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌6hrs。反应混合物用EA(10.0mL)稀释，用水(5.00x2 mL)洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Pre-TLC(PE:EA＝0:1)分离纯化，得到目标化合物(100mg,收率38.9％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:613.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.62-9.51(m,1H),8.74-8.66(m,1H),8.66-8.61(m,1H),8.32-8.16(m,5H),8.07(br d,J＝8.13Hz,2H),7.83-7.78(m,1H),7.76-7.68(m,3H),7.47(br s,3H),7.25(br d,J＝1.63Hz,1H),6.56(br d,J＝9.38Hz,1H),5.24(br s,2H)。
步骤3：1-(4-氨基苄基)-5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮的合成
将还原铁粉(364mg,6.52mmol)加至5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1-(4-硝基苄基)吡啶-2(1H)-酮(500mg,815μmol)和NH4Cl(349mg,6.52mmol)的EtOH(2.50mL)/水(0.5mL)的混合液中，反应混合物在80℃下搅拌6hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤液减压浓缩，用EA(20.0mL)溶解，用水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(400mg,粗品,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:583.2[M+H]+。
步骤4：1-(4-氨基苄基)-5-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮的合成
将NaOH(1M,2.00mL)水溶液滴加至1-(4-氨基苄基)-5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮(400mg,686μmol)的二噁烷(2.00mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌4hrs。反应混合物用EA(20.0mL)稀释，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Pre-TLC(EA:MeOH＝10:1)分离纯化，得到目标化合物(200mg,收率65.8％,红色固体)。LC-MS(ESI)m/z:443.1[M+H]+。
步骤5：N-(4-((5-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(40.8mg,450μmol)缓慢滴加至1-(4-氨基苄基)-5-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮(190mg,429μmol)和DIPEA(166mg,1.29mmol)的THF(2.00mL)溶液中，反应混合物在0℃下搅拌30分钟。加水(10.0mL)淬灭反应，用EA(5.00x3 mL)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:Phenomenex Luna C18 75*30mm*3um；流动相:[A-水(0.2％FA)/B-ACN]；B％＝40％-70％；8min)分离纯化，得到标题化合物(30.61mg,收率14.3％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:497.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm12.01-11.86(m,1H),10.18-10.07(m,1H),9.27-9.16(m,1H),8.59-8.35(m,2H),8.12(d,J＝2.69Hz,1H),7.69-7.48(m,4H),7.29-7.03(m,4H),6.53-6.38(m,2H),6.34-6.20(m,1H),5.80-5.69(m,1H),5.09-5.00(m,2H)。
实施例3：N-(4-((5-((5-氯-4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-氧代吡啶-1 (2H)-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
步骤1：4-(2-((1-(4-((叔丁氧羰基)氨基)苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
将(4-((5-氨基-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(220mg,0.690mmol)加至4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(50.0mg,110mg)和DIPEA(3.00mL)的sec-BuOH(3.00mL)中，然后在110℃下搅拌过夜。LC-MS监测反应完成。待反应混合物冷却至室温后加水(30.0mL)，用EA(100mL)萃取，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝20/1)分离纯化，得到目标化合物(100mg,粗品,棕色固体)。LC-MS(ESI)m/z:594.07[M+H]+。
步骤2:1-(4-氨基苄基)-5-((5-氯-4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮的合成
将HCl·MeOH(4N,1.50mL)缓慢滴加至4-(2-((1-(4-((叔丁氧羰基)氨基)苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(0.070mg,3.10mmol)的MeOH(4.00mL)溶液中，然后在室温搅拌过夜。反应混合物减压浓缩，得到目标化合物(67mg,粗品,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:394.11[M+H]+。
步骤3:N-(4-((5-((5-氯-4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
冰浴条件下，将丙烯酰氯(4.40mg,0.048mmol)缓慢滴加至1-(4-氨基苄基)-5-((5-氯-4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮(47.0mg,0.120mmol)和Et3N(73.0mg,0.72mmol)的DCM(5.00mL)溶液中，然后在室温搅拌2小时。反应混合物中加水(30.0mL)淬灭反应，用DCM(100mL)萃取，用饱和食盐水(30.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经prep-HPLC(柱:Waters Xbridge C18 10um OBD 19*250mm；流动相:A-0.1％NH4HCO3(水)/B-ACN；B％＝20％-45％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(2.47mg,收率4.5％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:448.12[M+H]+。
实施例4：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基) 甲基)-3-氟苯基)丙烯酰胺
步骤1：5-氯-N-(1-(2-氟-4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将1-(溴甲基)-2-氟-4-硝基苯(400mg,1.71mmol)、5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(848mg,1.88mmol)和K2CO3(472mg,3.42mmol)加至ACN(2.00mL)中，反应混合物在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE:EA＝1:2)分离纯化，得到目标化合物(550mg,收率53.2％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:604.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.95-9.77(m,1H)8.71-8.50(m,2H)8.29-7.91(m,6H)7.78-7.71(m,1H)7.69-7.59(m,3H)7.51-7.40(m,1H)7.34-7.24(m,1H)5.59-5.36(m,2H)3.48-3.41(m,1H)。
步骤2：N-(1-(4-氨基-2-氟苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将5-氯-N-(1-(2-氟-4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(510mg,844μmol)和NH4Cl(271mg,5.07mmol)加至EtOH(2.50mL)/水(0.500mL)的混合液中，待反应升温至60℃时加入还原铁粉(283mg,5.07mmol)，反应混合物在70℃下搅拌2hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，减压浓缩，残余物用EA(10.0mL)稀释，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(450mg,粗品,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:574.3[M+H]+。
步骤3：N-(4-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-3-氟苯基)丙烯酰胺的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(70.9mg,784μmol)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基-2-氟苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(450mg,783.93umol)和DIPEA(304mg,2.35mmol)的无水THF(2.00mL)溶液中，反应混合物在0℃下搅拌30分钟。加水(5.00mL)淬灭反应，用EA(5.00x2 mL)萃取，饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(450mg,粗品,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:628.1[M+H]+。
步骤4：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-3-氟苯基)丙烯酰胺的合成
将NaOH(1M,2.00mL)水溶液滴加至N-(4-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-3-氟苯基)丙烯酰胺(400mg,637μmol)的二噁烷(2.00mL)溶液中，反应混合物在25℃下搅拌12hrs。反应混合物加EA(10.0mL)稀释，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:WatersXbridge BEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝30％-60％；10min)分离纯化，得到标题化合物(69.45mg,收率22.3％,浅黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:488.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm 11.89(br s,1H),10.38(s,1H),9.54(brs,1H),8.45(br s,1H),8.41(s,1H),7.99(s,1H),7.73(dd,J＝12.6,1.7Hz,1H),7.59(s,1H),7.50(d,J＝8.2Hz,1H),7.29(br d,J＝8.1Hz,1H),7.26-7.04(m,3H),6.46-6.36(m,1H),6.32-6.24(m,1H),5.79(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),5.28(br s,2H)。
实施例5：(E)-N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑- 1-基)甲基)苯基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯酰胺
步骤1：(E)-4-溴丁-2-烯酰氯的合成
室温下，将(E)-4-溴丁-2-烯酸(1.00g,6.06mmol)加至SOCl2(16.4g,137mmol)中，然后在80℃下搅拌3hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，得到目标化合物(0.800g,产率71.9％,黄色油状物)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:279.0[M+H]+。
步骤2：(E)-N-(4-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯酰胺的合成
在0℃下，将(E)-4-溴丁-2-烯酰氯(72.5mg,395μmol)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(200mg,359μmol)和DIPEA(278mg,2.16mmol)的无水THF(3.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌2hrs，然后冷却到0℃，滴加二甲胺溶液(2M,1.80mL)，再在室温下搅拌12hrs。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用DCM(10.0mL x 2)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝5/1～0/1)分离纯化，得到目标化合物(200mg,产率83.3％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:667.2[M+H]+。
步骤3：(E)-N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯酰胺的合成
在0℃下，将NaOH(1M,2.00mL)水溶液滴加至(E)-N-(4-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯酰胺(200mg,299μmol)的二噁烷(2.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌12hrs。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用EA(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，用水(5.00mL)洗涤后减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝30％-60％；10min)分离纯化，得到标题化合物(27.0mg,产率17.0％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:527.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.88(brs,1H)10.10(s,1H)9.52(br s,1H)8.16-8.83(m,3H)7.97(s,1H)7.56-7.65(m,3H)7.50(d,J＝8.25Hz,1H)6.96-7.27(m,4H)6.72(dt,J＝15.32,5.97Hz,1H)6.27(d,J＝15.38Hz,1H)5.22(s,2H)3.11(br d,J＝5.50Hz,2H)2.22(s,6H)。
实施例6：N-(6-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基) 甲基)吡啶-3-基)丙烯酰胺
步骤1：5-氯-N-(1-((5-硝基吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将2-(溴甲基)-5-硝基吡啶(230mg,1.06mmol)、5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(478mg,1.06mmol)和K2CO3(293mg,2.12mmol)加至ACN(5.00mL)中，反应混合物在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE:EA＝1:2)分离纯化，得到目标化合物(120mg,收率19.3％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:587.1[M+H]+。
步骤2：N-(1-((5-氨基吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将5-氯-N-(1-((5-硝基吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(114mg,194μmol)和NH4Cl(62.3mg,1.17mmol)加至EtOH(2.50mL)/水(0.5mL)中，将所得混合物加热至60℃时加入还原铁粉(65.0mg,1.17mmol)，反应混合物在60℃下搅拌2hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，减压浓缩，残余物用EA(5.00mL)稀释，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(100mg,粗品,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:557.1[M+H]+。
步骤3：N-(6-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-3-基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(14.6mg,162μmol)缓慢滴加至N-(1-((5-氨基吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(90.0mg,161μmol)和DIPEA(62.6mg,485μmol)的无水THF(2.00mL)溶液中，反应混合物在0℃下搅拌30分钟。加水(5.00mL)淬灭反应，用EA(5.00x2 mL)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(100mg,粗品,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:611.1[M+H]+。
步骤4：N-(6-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-3-基)丙烯酰胺的合成
将NaOH(1M,1.00mL)水溶液滴加至N-(6-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-3-基)丙烯酰胺(90.0mg,147μmol)的二噁烷(1.00mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌5hrs。反应混合物加EA(10.0mL)稀释，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:WatersXbridge Prep OBD C18 150*40mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝25％-55％；8min)分离纯化，得到标题化合物(21.17mg,收率30.5％,浅黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:471.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)11.88(br s,1H),10.38(s,1H),9.56(brs,1H),8.77(d,J＝2.3Hz,1H),8.45(br s,1H),8.41(s,1H),8.09-8.02(m,2H),7.61(s,1H),7.50(d,J＝8.2Hz,1H),7.19(br d,J＝6.7Hz,1H),7.06(d,J＝8.4Hz,1H),6.48-6.39(m,1H),6.33-6.25(m,1H),5.80(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),5.33ppm(s,2H)。
实施例7：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基) 甲基)-2-氟苯基)丙烯酰胺
步骤1：4-(溴甲基)-2-氟-1-硝基苯的合成
将NBS(8.61g,48.3mmol)加至2-氟-4-甲基-1-硝基苯(5.00g,32.2mmol)和偶氮二异丁腈(529mg,3.22mmol)的CCl4(50.0mL)溶液中，反应混合物在90℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝1/0～20/1)分离纯化，得到目标化合物(2.50g,产率33.1％,黄色固体)。1H NMR(400MHz,CHCl3-d)δppm 8.05(dd,J＝7.8,8.7Hz,1H),7.40-7.30(m,2H),4.47(s,2H)。
步骤2：5-氯-N-(1-(3-氟-4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将4-(溴甲基)-2-氟-1-硝基苯(259mg,1.11mmol)加至5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(500mg,1.11mmol)和K2CO3(306mg,2.22mmol)的ACN(5.00mL)溶液中，反应混合物在50℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后倒入水(10.0mL)中，用EA(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(650mg,产率97.0％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:604.1[M+H]+。
步骤3：N-(1-(4-氨基-3-氟苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将还原铁粉(161mg,2.90mmol)加入到5-氯-N-(1-(3-氟-4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(350mg,579μmol)和NH4Cl(154mg,2.90mmol)的EtOH(5.00mL)/水(1.00mL)的混合液中，反应混合物在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后倒入水(10.0mL)中，用DCM(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(330mg,产率99.2％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:574.1[M+H]+。
步骤4：N-(4-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-氟苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将丙烯酰氯(65.5mg,724μmol)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基-3-氟苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(320mg,557μmol)和DIPEA(216mg,1.67mmol)的无水THF(3.00mL)中，反应混合物在室温下搅拌1hr。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用DCM(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(300mg,产率85.6％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:628.1[M+H]+。
步骤5：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-氟苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将NaOH(1M,3.00mL)水溶液滴加至N-(4-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-氟苯基)丙烯酰胺(300mg,477μmol)的二噁烷(3.00mL)中，然后在室温下搅拌3hrs。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用DCM(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10.0mL)洗涤后减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝30％-60％；10min)分离纯化，得到标题化合物(21.9mg,产率9.44％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:488.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 5.28(s,2H)5.76(dd,J＝10.19,1.94Hz,1H)6.26(dd,J＝17.01,1.88Hz,1H)6.59(dd,J＝16.95,10.19Hz,1H)6.97-7.14(m,3H)7.21(br t,J＝7.00Hz,1H)7.50(d,J＝8.25Hz,1H)7.61(s,1H)7.93(t,J＝8.13Hz,1H)8.03(s,1H)8.31-8.86(m,3H)9.54(br s,1H)9.95(s,1H)11.88(br s,1H)。
实施例8：N-(5-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基) 甲基)吡啶-2-基)丙烯酰胺
步骤1：3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(苯磺酰基)-1H-吲哚的合成
氮气保护下，将Pd(PPh3)4(2.30g,1.99mmol)加至(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)硼酸(6.00g,19.9mmol)、2,4,5-三氯嘧啶(7.31g,39.8mmol)和Na2CO3(4.22g,39.8mmol)的ACN(60.0mL)/水(30.0mL)的混合液中，反应混合物在85℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后倒入冰水(30.0mL)中，搅拌析出固体，过滤，滤饼悬浮于甲基叔丁基醚(30.0mL)中搅拌1hr，过滤，得到目标化合物(8.00g,产率99.3％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:404.0[M+H]+。步骤2：5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将对甲苯磺酸(5.11g,29.6mmol)加至3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(苯磺酰基)-1H-吲哚(6.00g,14.8mmol)和1H-吡唑-4-胺(1.36g,16.3mmol)的n-BuOH(60.0mL)溶液中，反应混合物在135℃下搅拌12.0hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝5/1至0/1)分离纯化，得到目标化合物(3.50g,产率52.3％,褐色固体)。LC-MS(ESI)m/z:451.0[M+H]+。
步骤3：5-氯-N-(1-((6-硝基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将K2CO3(306mg,2.22mmol)加至5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(500mg,1.11mmol)和5-(溴甲基)-2-硝基吡啶(240mg,1.11mmol)的ACN(5.00mL)溶液中，反应混合物在50℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后倒入冰水(10.0mL)中，用EA(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(0.600g,产率92.1％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:587.1[M+H]+。
步骤4：N-(1-((6-氨基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将还原铁粉(261mg,4.68mmol)加至5-氯-N-(1-((6-硝基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(550mg,936.95μmol)和NH4Cl(250mg,4.68mmol)的EtOH(10.0mL)/水(2.00mL)的混合液中，反应混合物在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(10.0x2 mL)洗涤，合并滤液与洗涤液，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(500mg,产率95.8％,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:557.1[M+H]+。
步骤5：N-(5-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(40.6mg,448μmol)缓慢滴加至N-(1-((6-氨基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(250mg,448μmol)和DIPEA(174mg,1.35mmol)的无水THF(3.00mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌1hr。反应混合物直接过滤，滤液用DCM(10.0mL)稀释，用水(3.00mL x 2)洗涤，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(200mg,产率72.9％,黄色油状物)。LC-MS(ESI)m/z:611.1[M+H]+。
步骤6：N-(5-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将NaOH(1M,2.00mL)水溶液加入到N-(5-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙烯酰胺(150mg,245μmol)的二噁烷(2.00mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌3hrs。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用DCM(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:Phenomenex Luna C18 150*30mm*5um；流动相:[A-水(0.1％TFA)/B-ACN]；B％＝15％-50％；8min)分离纯化，得到标题化合物(10.0mg,产率8.65％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:471.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δppm 5.27-5.35(m,2H)5.84(br d,J＝11.38Hz,1H)6.36-6.61(m,2H)7.02(br s,1H)7.20(br t,J＝7.63Hz,1H)7.38-7.53(m,1H)7.66(s,1H)7.74(br d,J＝7.75Hz,1H)7.96-8.15(m,2H)8.17-8.26(m,1H)8.27-8.33(m,1H)8.35-8.56(m,2H)。
实施例9：N-(4-((5-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-3-基) 甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：2-(4-硝基苯基)乙酸甲酯的合成
在0℃下，将催化量的浓H2SO4(829mg,8.28mmol)滴加至2-(4-硝基苯基)乙酸(5.00g,27.6mmol)的MeOH(50.0mL)溶液中，反应混合物在70℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物用EA(100mL)溶解，Na2CO3水溶液(20％,30.0mLx3)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(5.4g,粗品,棕色固体)，直接用于下一步反应。
步骤2：4-(4-硝基苯基)-3-氧代丁腈的合成
在-70℃，氮气保护下，将无水ACN(1.84g,44.8mmol)滴加至n-BuLi(2.50M,17.9mL)的无水THF(30.0mL)溶液中，搅拌1hr，再滴加2-(4-硝基苯基)乙酸甲酯(3.80g,19.5mmol)的无水THF(30.0mL)溶液，所得反应混合物在-70℃下搅拌5hrs。在-60℃下，将稀HCl(1N)滴加至反应混合物中至pH＝2，用EA(30.0mLx3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物悬浮于DCM(30.0mL)中搅拌2hrs，过滤，收集滤饼；滤液减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～5/1～2/1)分离纯化，得到目标化合物(2.00g,收率49.8％,棕色固体)。LC-MS(ESI)m/z:203.2[M-H]-。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm8.19(d,J＝8.7Hz,2H),7.47(d,J＝8.7Hz,2H),4.17(s,2H),4.08(s,2H)。
步骤3：3-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-5-胺的合成
室温下，将水合肼(1.14g,22.3mmol)滴加至4-(4-硝基苯基)-3-氧代丁腈(1.80g,8.82mmol)的EtOH(30.0mL)溶液中，然后在85℃下搅拌3hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，得到目标化合物(2.00g,粗品,棕色固体)。LC-MS(ESI)m/z:217.2[M-H]-。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.19(d,J＝8.8Hz,2H),7.49(d,J＝8.8Hz,2H),6.51(s,1H),3.73(s,1H),3.41(s,1H)。
步骤4：5-氯-N-(3-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-5-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，向3-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-5-胺(194mg,891μmol)的n-BuOH(5.00mL)溶液中加入对甲苯磺酸(256mg,1.48mmol)和3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(苯磺酰)-1H-吲哚(300mg,742μmol)，所得反应混合物在100℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温，加DCM(30.0mL)稀释，用Na2CO3水溶液(20％,10.0mLx2)洗涤，再用饱和食盐水(10.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(450mg,粗品,棕色固体)。LC-MS(ESI)m/z:584.2[M-H]-。
步骤5：N-(3-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-5-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将还原铁粉(257mg,4.61mmol)和NH4Cl(246mg,4.61mmol)加至5-氯-N-(3-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-5-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(450mg,768μmol)的无水EtOH(10.0mL)/水(2.00mL)的混合液中，室温搅拌3hrs。反应混合物直接过滤，滤液减压蒸馏，残余物经Prep-HPLC(柱:Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)-CH3CN]；B％＝45％-65％；8min)分离纯化，得到目标化合物(20mg,收率4.07％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:556.2[M+H]+。
步骤6：N-(4-((5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下中，将丙烯酰氯(3.26mg,36.0μmol)缓慢滴加至N-(3-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-5-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(20.0mg,36.0μmol)和DIPEA(9.30mg,71.9μmol)的无水THF(2.00mL)溶液中，反应混合物在0℃下搅拌1hr。加入MeOH(0.500mL)淬灭反应，减压浓缩，得到目标化合物(22mg,粗品,黄色油状物)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:610.0[M+H]+。
步骤7：N-(4-((5-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
室温下，将NaOH(1M,1.00mL)水溶液滴加至N-(4-((5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)甲基)苯基)丙烯酰胺(22.0mg,36.1μmol)的二噁烷(1.00mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌5hrs。向反应混合物中滴加稀HCl(1N)至pH＝7，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:Phenomenex Luna C18 75*30mm*3um；流动相:[A-水(0.2％FA)/B-ACN]；B％＝35％-55％；8min)分离纯化，得到标题化合物(2.20mg,收率12.38％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:470.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 12.18(br,s,1H)11.87(br s,1H)10.10(br s,1H)9.75(br,s,1H)8.63(br,s,1H)8.47(br s,1H)8.38(s,1H)7.58(br d,J＝7.75Hz,2H)7.47(br d,J＝7.27Hz,1H)7.34-7.22(m,1H)7.20(br d,J＝8.23Hz,3H)7.05-7.03(m,1H)6.48-6.36(m,1H)6.28-6.16(m,1H)5.73(br d,J＝10.85Hz,1H)3.87(br s,2H)。
实施例10：N-(4-((4-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯 基)丙烯酰胺
步骤1：N-(1H-吡唑-4-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺的合成
在氮气保护下，向2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(1.80g,9.86mmol)的二噁烷(30.0mL)溶液中，分别加入1H-吡唑-4-胺(819mg,9.86mmol)、(±)-2,2-双(二苯膦基)-1,1-联萘(1.23g,1.97mmol)、Pd(OAc)2(221mg,986μmol)和Cs2CO3(9.64g,29.6mmol)，反应混合物在100℃下搅拌4hrs。待反应混合物冷却至室温后，过滤，滤饼用EtOH(30.0mL)洗涤，滤液减压浓缩，残余物通过Prep-HPLC(柱:Phenomenex Luna C18 200*40mm*10um；流动相:[A-水(0.2％FA)/B-ACN]；B％＝1％-50％；8min)分离纯化，得到1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]-1H-吡唑-4-胺(600mg,收率26.6％,白色固体)，LC-MS(ESI)m/z:330.6[M+H]+,1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.27(s,2H),8.32(s,1H),7.80(s,1H)；以及N-(1H-吡唑-4-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(200mg,收率8.85％,白色固体)，LC-MS(ESI)m/z:330.6[M+H]+,1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.18(s,1H),8.76(br d,J＝10.1Hz,2H),7.79(s,2H)。
步骤2：N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺的合成
在25℃下，向N-(1H-吡唑-4-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(700mg,3.05mmol)的ACN(30.0mL)溶液中，分别加入1-(溴甲基)-4-硝基苯(660mg,3.05mmol)和K2CO3(507mg,3.67mmol)，反应混合物在室温下搅拌72hrs。用水(50.0mL)稀释，EA(20.0mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物通过硅胶层析(PE/EA＝10/1～5/1～2/1)分离纯化，得到目标化合物(330mg,粗品,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:365.2,500.2[M+H]+。
步骤3：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺的合成
在25℃下，将还原铁粉(98.1mg,1.76mmol)和NH4Cl(94.0mg,1.76mmol)加至上一步所得混合物(151mg,55.6μmol)的EtOH(2.00mL)/H2O(0.400mL)的混合液中，所得反应混合物在25℃下搅拌5hrs。用水(10.0mL)淬灭反应，DCM(5.00mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(280mg,粗品,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:333.0[M-H]-。
步骤4：N-(4-((4-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(20.2mg,223.15μmol)缓慢滴加至上一步所得混合物(100mg,41.0μmol)和DIPEA(57.7mg,446μmol)的无水THF(5.00mL)溶液中，反应混合物在氮气保护下于0℃搅拌1hr。用MeOH(0.500mL)淬灭反应，减压浓缩，残余物通过Prep-HPLC(柱:Phenomenex Luna C18 75*30mm*3um；流动相:[A-水(0.2％FA)/B-ACN]；B％＝20％-60％；8min)分离纯化，得到N-(4-((4-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺(48.18mg,收率53.3％,白色固体)，LC-MS(ESI)m/z:389.0[M+H]+，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.23(s,1H),10.16(s,1H),8.75(br s,2H),8.00(s,1H),7.66-7.56(m,3H),7.21(d,J＝8.46Hz,2H),6.47-6.36(m,1H),6.29-6.20(m,1H),5.74(dd,J＝10.01,2.03Hz,1H),5.25(s,2H)。
实施例11：N-(4-((4-((5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡 唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-甲基-1H-吲哚的合成
在0℃，氮气保护下，将三氯化铝(8.72g,65.4mmol)缓慢加至2,4,5-三氯嘧啶(10.0g,54.5mmol)和1-甲基吲哚(7.15g,54.5mmol)的二氯乙烷(200mL)溶液中，反应混合物在80℃下搅拌5hrs。待反应混合物冷却至室温后倒入冰水中，用EA(100mLx3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(3.00g,收率15.2％)。LC-MS(ESI)m/z:278.0,280.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.78(s,1H),8.72(s,1H),8.53-8.57(m,1H),7.61(d,J＝7.67Hz,1H),7.32-7.37(m,2H),3.95(s,3H)。
步骤2：5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将对甲苯磺酸(1.24g,7.19mmol)加至3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-甲基-1H-吲哚(1.00g,3.60mmol)和1H-吡唑-4-胺(448mg,5.39mmol)的n-BuOH(30.0mL)溶液中，然后在120℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后用水(100mL)淬灭反应，DCM(50.0mLx3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝1/1)分离纯化，得到目标化合物(780mg,收率66.8％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:325.1,327.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 12.51(br s,1H),9.47(br s,1H),8.49(br s,1H),8.40(s,1H),7.76(br s,2H),7.55(d,J＝8.23Hz,1H),7.09-7.40(m,3H),3.92(s,3H)。
步骤3：5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将K2CO3(638mg,4.62mmol)和1-(溴甲基)-4-硝基苯(499mg,2.31mmol)依次加至5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(750mg,2.31mmol)的ACN(20.0mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌5天。反应混合物用EA(100mL)稀释，水(30.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物悬浮于DCM(3.00mL)中搅拌1hr，过滤，收集滤饼，滤液减压浓缩，残余物用Prep-HPLC(柱:Phenomenex Luna C18 75*30mm*3um；流动相:[A-水(0.2％FA)/B-ACN]；B％＝40％-70％；8min)分离纯化，得到目标化合物(500mg,收率39.3％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:460.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.58(br s,1H),8.69(br s,1H),8.50(br s,1H),8.40(s,1H),8.21(br d,J＝8.68Hz,2H),8.08(br s,1H),7.65(s,1H),7.54(d,J＝8.31Hz,1H),7.42(br d,J＝8.44Hz,2H),7.27(br t,J＝6.48Hz,1H),7.08(br s,1H),5.47(s,2H),3.92(s,3H)。
步骤4：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将还原铁粉(72.9mg,1.30mmol)和NH4Cl(69.8mg,1.30mmol)加至5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(100mg,217μmol)的EtOH(2.00mL)/H2O(0.50mL)的混合液中，反应混合物在室温下搅拌5hrs。反应混合物直接经硅藻土过滤，滤饼用DCM(5.00mLx3)洗涤，合并的洗涤液用水(5.00mL)洗涤,无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(95mg,粗品,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:430.1[M+H]+。
步骤5：N-(4-((4-((5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(20.0mg,221μmol)的无水THF(1.00mL)溶液缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(95.0mg,221μmol)和DIPEA(57.1mg,442μmol)的无水THF(2.00mL)溶液中，反应混合物在0℃下搅拌1hr。用MeOH(1.00mL)淬灭反应，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:WatersXbridge BEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝40％-70％；10min)分离纯化，得到标题化合物(12.0mg,收率11.2％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:484.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.18(s,1H),9.55(br s,1H),8.43-8.59(m,1H),8.40(s,1H),7.97(s,1H),7.62(d,J＝8.55Hz,2H),7.54～7.57(m,2H),7.24-7.33(m,1H),7.13-7.21(m,2H),6.37-6.47(m,1H),6.21-6.28(m,1H),5.72-5.77(m,1H),5.22(brs,2H),3.92(s,3H)。
实施例12：N-(4-((4-((5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡 唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：2,5-二氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)嘧啶的合成
在氮气保护下，将Pd(PPh3)4(3.85g,3.34mmol)加至2,4,5-三氯嘧啶(6.12g,33.3mmol)、(1-甲基-1H-吡唑-5-基)硼酸(4.20g,33.3mmol)和KF(3.88g,66.7mmol)的乙二醇二甲醚(50.0mL)中，然后在80℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～5/1)分离纯化，得到目标化合物(1.50g,收率19.6％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:228.9[M+H]+。
步骤2：5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
将1H-吡唑-4-胺(279mg,3.36mmol)加至2,5-二氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)嘧啶(700mg,3.06mmol)的n-BuOH(10.0mL)溶液中，反应混合物在120℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～5/1)分离纯化，得到目标化合物(600mg,收率71.2％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:276.0[M+H]+。
步骤3：5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
将K2CO3(601mg,4.35mmol)加至5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(600mg,2.18mmol)和1-(溴甲基)-4-硝基苯(470mg,2.18mmol)的ACN(10.0mL)溶液中，反应混合物在50℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～5/1)分离纯化，得到目标化合物(300mg,收率33.5％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:411.1[M+H]+。
步骤4：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)嘧啶-2-胺的合成
将还原铁粉(101mg,1.83mmol)加至5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(150mg,365μmol)和NH4Cl(97.6mg,1.83mmol)的EtOH(2.00mL)/H2O(0.40mL)的混合液中，反应混合物在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(5.00mLx3)洗涤，合并的母液用水(5.00mL)洗涤,无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(100mg,收率71.9％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:381.1[M+H]+。
步骤5：N-(4-((4-((5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(26.1mg,288μmol)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)嘧啶-2-胺(100mg,262.5umol)和DIPEA(101mg,787μmol)的无水THF(1.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌1hrs。将反应混合物直接减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:Waters Xbridge Prep OBD C18 150*40mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝25％-55％；8min)分离纯化，得到标题化合物(20.4mg,收率17.9％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:435.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 3.93(br s,3H)5.25(s,2H)5.74(dd,J＝10.07,1.81Hz,1H)6.13-6.32(m,1H)6.36-6.53(m,1H)6.82(br s,1H)7.20(d,J＝8.38Hz,2H)7.43-7.72(m,4H)7.91(br s,1H)8.59(s,1H)9.81(s,1H)10.16(s,1H)。
实施例13：N-(4-((4-((5-氯-4-((2-(异丙磺酰基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)- 1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：2,5-二氯-N-(2-(异丙磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺的合成
在0℃下，将NaH(1.20g,30.1mmol,60％)加至2-异丙磺酰基苯胺(3.00g,15.0mmol)的DMF(20.0mL)溶液中，搅拌0.5hr后，加入2,4,5-三氯嘧啶(2.76g,15.1mmol)，反应混合物在室温下搅拌2hrs。反应混合物中加入水(50.0mL)，用EA(50.0x3 mL)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经(DCM/MeOH＝20/1)分离纯化，得到目标化合物(5.00g,收率95.9％,棕色固体)。LC-MS(ESI)m/z:346.0[M+H]+。
步骤2：5-氯-N4-(2-(异丙磺酰基)苯基)-N2-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2,4-二胺的合成
室温下，将对甲苯磺酸(2.98g,17.3mmol)加入到2,5-二氯-N-(2-(异丙磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺(3.00g,8.66mmol)和1H-吡唑-4-胺(720mg,8.66mmol)的n-BuOH(50.0mL)溶液中，反应混合物在100℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后加EA(20.0mL)，用水(20.0mL)洗涤，水相再用EA(10.0mL x 3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝20/1)分离纯化，得到目标化合物(3.20g,收率94.0％,棕色固体)。LC-MS(ESI)m/z:393.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.36-9.75(m,2H),8.73-8.18(m,5H),7.94(br d,J＝3.8Hz,1H),7.82(br t,J＝7.5Hz,1H),7.51(br d,J＝7.5Hz,4H),7.13(br d,J＝7.4Hz,4H),5.75(s,1H),4.02(q,J＝7.0Hz,1H),3.71(br t,J＝6.3Hz,1H),3.53-3.42(m,1H),2.29(s,5H),1.98(s,1H),1.91(s,1H),1.20-1.06(m,6H)。
步骤3：5-氯-N4-(2-(异丙磺酰基)苯基)-N2-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2,4-二胺的合成
室温下,将K2CO3(704mg,5.09mmol)加至5-氯-N4-(2-(异丙磺酰基)苯基)-N2-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2,4-二胺(1.00g,2.55mmol)和1-(溴甲基)-4-硝基-苯(605mg,2.80mmol)的ACN(10.0mL)溶液中，反应混合物在50℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后加EA(10.0mL)，用水(10.0mL)洗涤，水相再用EA(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1)分离纯化，得到目标化合物(200mg,收率14.9％,墨绿色固体)。LC-MS(ESI)m/z:528.1[M+H]+。
步骤4：N2-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-N4-(2-(异丙磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺的合成
将还原铁粉(121mg,2.16mmol)加至5-氯-N4-(2-(异丙磺酰基)苯基)-N2-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2,4-二胺(190mg,360μmol)和NH4Cl(116mg,2.16mmol)的EtOH(20.0mL)/水(4.00mL)的混合液中，反应混合物在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(10.0x2 mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，合并有机相，减压浓缩，得到目标化合物(170mg,收率95.0％,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:498.2[M+H]+。
步骤5：N-(4-((4-((5-氯-4-((2-(异丙磺酰基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(29.1mg,321μmol,26.2μL)缓慢滴加至N2-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-N4-(2-(异丙磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺(160mg,321μmol)和DIPEA(125mg,964μmol)的无水THF(20.0mL)溶液中，反应混合物在25℃下搅拌1hr。反应混合物加无水MeOH(5.00mL)淬灭，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:Waters XbridgeBEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝35％-65％；10min)分离纯化，得到标题化合物(20.2mg,收率11.4％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:552.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CHCl3-d)δppm 9.63(s,1H),8.51-8.34(m,1H),8.09(s,1H),7.91(dd,J＝1.5,7.9Hz,1H),7.72-7.63(m,1H),7.62-7.50(m,4H),7.49-7.40(m,1H),7.18(br d,J＝8.1Hz,2H),6.52-6.37(m,1H),6.30-6.15(m,1H),5.80(dd,J＝1.1,10.1Hz,1H),5.22(s,2H),3.22(td,J＝6.8,13.7Hz,1H),1.30(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例14：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1- 基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：(1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将(Boc)2O(28.8g,132mmol)加至1H-吡唑-4-胺(10.0g,120mmol)和NaHCO3(25.2g,300mmol)的THF(200mL)溶液中，然后在室温下搅拌48hrs。将反应混合物倒入水(50.0mL)中，用EA(50.0mL x 3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝10/1～5/1)分离纯化，得到目标化合物(11.6g,产率52.6％,棕色固体)。LC-MS(ESI)m/z:184.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CHCl3-d)δppm 7.63(br s,1H)7.42-7.85(m,1H)6.26-6.40(m,1H)6.32(br s,1H)6.19-6.45(m,1H)1.26-1.73(m,9H)。
步骤2：(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将K2CO3(7.54g,54.5mmol)加至(1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(5.00g,27.2mmol)和1-(溴甲基)-4-硝基苯(6.49g,30.0mmol)的ACN(60.0mL)溶液中，然后在80℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(6.00g,产率69.0％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:319.1[M+H]+。
步骤3：1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺·盐酸的合成
在0℃下，将HCl·二噁烷(4M,12.0mL)溶液滴加至(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(6.00g,18.8mmol)的DCM(50.0mL)中，然后在室温下搅拌12hrs。将反应混合物直接减压浓缩，得到目标化合物(4.50g,产率93.7％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:411.1[M+H]+。
步骤4：(1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)硼酸的合成
将Et3N(7.23g,71.5mmol)加至(1H-吡唑-3-基)硼酸(4.00g,35.7mmol)和苯磺酰氯(6.95g,39.3mmol)的ACN(40mL)溶液中，反应混合物在80℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物悬浮于甲基叔丁基醚(20.0mL)溶液中搅拌2hrs,过滤，收集滤饼，得到目标化合物(9.00g,产率99.8％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:253.0[M+H]+。
步骤5：2,5-二氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶的合成
在氮气保护下，将Pd(dtbpf)Cl2(2.33g,3.57mmol)加至2,4,5-三氯嘧啶(6.55g,35.7mmol)、(1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)硼酸(9.00g,35.7mmol)和K2CO3(9.87g,71.4mmol)的二噁烷(100mL)/水(20.0mL)的混合液中，然后在80℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～5/1)纯化，得到目标化合物(3.00g,产率23.6％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:354.9[M+H]+。
步骤6：5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将Et3N(170mg,1.69mmol)加至2,5-二氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶(300mg,844μmol)和1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺·盐酸(236mg,929μmol)的n-BuOH(3.00mL)溶液中，然后在110℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(250mg,产率55.1％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:537.2[M+H]+。
步骤7：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将还原铁粉(130mg,2.33mmol)加至5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺(250mg,465.59μmol)和NH4Cl(124mg,2.33mmol)的EtOH(2.50mL)/水(0.5mL)的混合液中，然后在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(5.00mLx3)洗涤，合并的母液用水(5.00mL)洗涤,无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(200mg,产率84.7％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:507.1[M+H]+。
步骤8：N-(4-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(39.2mg,433μmol)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺(200mg,394μmol)和DIPEA(152mg,1.18mmol)的无水THF(2.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌1hr。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用EA(5.00mL x 3)萃取，减压浓缩，得到目标化合物(220mg,产率99.4％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:561.1[M+H]+。
步骤9：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将NaOH(1M,2.00mL)水溶液滴加至N-(4-((4-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺(200mg,356μmol)的二噁烷(2.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌12hrs。反应混合物用EA(10.0mL)稀释，用水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:Waters XbridgeBEH C18100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝20％-55％；10min)分离纯化，得到标题化合物(19.6mg,产率13.1％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:421.0[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 13.39(br s,1H)10.17(s,1H)9.71(br s,1H)8.49(br s,1H)7.77-8.09(m,1H)7.51-7.72(m,3H)7.24(br d,J＝8.07Hz,2H)6.84(br s,1H)6.35-6.49(m,1H)6.17-6.30(m,1H)5.75(dd,J＝10.09,2.02Hz,1H)5.25(s,2H)。
实施例15：N-(4-((4-((5-氯-4-(4-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡 唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
/>
步骤1：(4-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)硼酸的合成
将Et3N(3.21g,31.7mmol)加至(4-甲基-1H-吡唑-3-基)硼酸(2.00g,15.8mmol)和苯磺酰氯(3.09g,17.47mmol,2.24mL)的ACN(20.0mL)溶液中，然后在80℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝5/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(2.30g,产率54.4％,棕色固体)。LC-MS(ESI)m/z:267.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δppm 7.97-7.91(m,3H),7.66-7.61(m,1H),7.55-7.50(m,2H),2.06(s,3H)。
步骤2：2,5-二氯-4-(4-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶的合成
在氮气保护下，将Pd(dppf)Cl2(137mg,187μmol)加至2,4,5-三氯嘧啶(379mg,2.07mmol)、(4-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)硼酸(500mg,1.88mmol)和无水K2CO3(398mg,3.76mmol)的乙二醇二甲醚(5.00mL)中，然后在80℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，EA(5.00mL)洗涤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝5/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(0.800g,产率38.4％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:369.0[M+H]+。
步骤3：5-氯-4-(4-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
将Et3N(438mg,4.33mmol)加至2,5-二氯-4-(4-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶(800mg,2.17mmol)和1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(827mg,3.25mmol,HCl)的n-BuOH(10.0mL)溶液中，然后在110℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(0.800g,产率67.0％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:551.0[M+H]+。
步骤4：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(4-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将还原铁粉(202mg,3.63mmol)加至5-氯-4-(4-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(400mg,725μmol)和NH4Cl(194mg,3.63mmol)的EtOH(5.00mL)/水(1.00mL)的混合液中，然后在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(5.00mLx3)洗涤，合并的母液用水(5.00mL)洗涤,无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(250mg,产率66.1％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:521.1[M+H]+。
步骤5：N-(4-((4-((5-氯-4-(4-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(43.4mg,479μmol)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(4-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺(250mg,479μmol)和DIPEA(186mg,1.44mmol)的无水THF(2.50mL)溶液中，然后在室温下搅拌1hr。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用EA(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(150mg,收率54.4％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:575.1[M+H]+。
步骤6：N-(4-((4-((5-氯-4-(4-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将NaOH(1M,1.46mL)水溶液滴加至N-(4-((4-((5-氯-4-(4-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺(150mg,260μmol)的二噁烷(2.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌12hrs。反应混合物用EA(10.0mL)稀释，用水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物Pre-HPLC(柱:WatersXbridge BEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝20％-55％；10min)分离纯化，得到标题化合物(25.2mg,22.3％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:435.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 12.98(br s,1H)10.16(s,1H)9.63(br s,1H)8.40-8.64(m,1H)7.90(br s,1H)7.62(d,J＝8.44Hz,3H)7.54(s,1H)7.19(d,J＝8.44Hz,2H)6.35-6.52(m,1H)6.17-6.31(m,1H)5.74(dd,J＝10.09,2.02Hz,1H)5.22(s,2H)2.08(brd,J＝7.70Hz,3H)。
实施例16：N-(4-((4-((5-氯-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡 唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：(5-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)硼酸的合成
将Et3N(3.21g,31.7mmol)加至(5-甲基-1H-吡唑-3-基)硼酸(2.00g,15.8mmol)和苯磺酰氯(3.09g,17.4mmol)的ACN(20.0mL)溶液中，反应混合物在80℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物悬浮于甲基叔丁基醚(20.0mL)中，搅拌2hrs，过滤，收集滤饼，得到目标化合物(4.00g,产率94.6％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:267.0[M+H]+。
步骤2：2,5-二氯-4-(5-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶的合成
在氮气保护下，将Na2CO3(3.19g,30.0mmol)和Pd(dppf)Cl2(1.10g,1.50mmol)依次加至2,4,5-三氯嘧啶(3.03g,16.5mmol)、(5-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)硼酸(4.00g,15.0mmol)的乙二醇二甲醚(5.00mL)溶液中，反应混合物在80℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(500mg,产率9.01％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:368.9[M+H]+。
步骤3：5-氯-4-(5-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
将Et3N(274mg,2.71mmol)加至2,5-二氯-4-(5-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶(500mg,1.35mmol)和1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(517mg,2.03mmol,HCl)的n-BuOH(5.00mL)溶液中，然后在110℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(350mg,产率46.9％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:551.1[M+H]+。
步骤4：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(5-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将还原铁粉(177mg,3.18mmol)加入到5-氯-4-(5-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(350mg,635μmol)和NH4Cl(169mg,3.18mmol)的EtOH(5.00mL)/水(1.00mL)的混合液中，然后在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(5.00mLx3)洗涤，合并的母液用水(5.00mL)洗涤,无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(200mg,产率60.4％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:521.1[M+H]+。
步骤5：N-(4-((4-((5-氯-4-(5-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(34.7mg,383mmol)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(5-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺(200mg,383mmol)和DIPEA(148mg,1.15mmol)的无水THF(2.50mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌1hr。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用EA(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(150mg,产率67.9％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:575.1[M+H]+。
步骤6：N-(4-((4-((5-氯-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将NaOH(1M,1.46mL)水溶液加入到N-(4-((4-((5-氯-4-(5-甲基-1-(苯磺酰基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺(150mg,260μmol)的二噁烷(2.00mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌12hrs。反应混合物加EA(10.0mL)稀释，用水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:Waters Xbridge BEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝20％-55％；10min)分离纯化，得到标题化合物(21.7mg,产率19.2％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:435.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 13.06(br s,1H)10.16(s,1H)9.68(br s,1H)8.45(br s,1H)7.91-8.06(m,1H)7.48-7.68(m,3H)7.23(br d,J＝7.87Hz,2H)6.63(br s,1H)6.35-6.47(m,1H)6.18-6.30(m,1H)5.74(dd,J＝10.01,2.03Hz,1H)5.25(s,2H)2.32(br s,3H)。
实施例17：N-(4-((4-((5-氯-4-((2-(二甲基膦酰基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨 基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：(2-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)苯基)二甲基氧膦的合成
室温下，将(2-氨基苯基)二甲基氧膦(2.03g,12.0mmol)加至2,4,5-三氯嘧啶(2.00g,10.9mmol)和K2CO3(2.26g,16.4mmol)的DMF(50.0mL)悬浮液中，反应混合物在60℃下搅拌6hrs。待反应混合物冷却至室温后加EA(15.0mL)稀释，用水(15.0mL)洗涤，水相再用EA(10.0mL x 3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝20/1)分离纯化，得到目标化合物(1.40g,收率40.6％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:316.0[M+H]+。
步骤2：(2-((5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)苯基)二甲基氧膦的合成
室温下，将对甲苯磺酸(545mg,3.16mmol)加至1-[(4-硝基苯基)甲基]吡唑-4-胺(403mg,1.58mmol)和(2-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)苯基)二甲基氧膦(500mg,1.58mmol)的n-BuOH(30.0mL)溶液中，反应混合物在100℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝20/1)分离纯化，得到目标化合物(400mg,收率50.8％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:498.1[M+H]+。
步骤3：(2-((2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)苯基)二甲基氧膦的合成
室温下，将还原铁粉(265mg,4.70mmol)加至(2-((5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)苯基)二甲基氧膦(390mg,783μmol)和NH4Cl(251mg,4.70mmol)的EtOH(20.0mL)/水(4.00mL)的混合液中，反应混合物在60℃下搅拌6hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(10.0x2 mL)洗涤，合并有机相，减压浓缩，得到目标化合物(150mg,收率41.0％,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:468.1[M+H]+。
步骤4：N-(4-((4-((5-氯-4-((2-(二甲基膦酰基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(18.6mg,205μmol,17.0μL)缓慢滴加至(2-((2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)苯基)二甲基氧膦(120mg,256μmol)和DIPEA(100mg,769μmol,134μL)的无水THF(20.0mL)溶液中，反应混合物在25℃下搅拌1hr。反应混合物中加无水MeOH(5.00mL)，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:WatersXbridge BEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝5％-45％；10min)分离纯化，得到标题化合物(20.0mg,收率14.9％,白色固体)的化合物。LC-MS(ESI)m/z:522.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CHCl3-d)δppm 10.67(br s,1H),8.38(br s,1H),7.99(s,1H),7.66(br s,1H),7.47(br d,J＝8.0Hz,2H),7.43(s,1H),7.25-7.20(m,2H),7.09(br d,J＝8.4Hz,2H),7.06-7.00(m,1H),6.57(s,1H),6.37(dd,J＝1.1,16.9Hz,1H),6.23-6.11(m,1H),5.71(dd,J＝1.0,10.3Hz,1H),5.13(s,2H),1.75(d,J＝13.1Hz,6H)。
实施例18：N-(4-((4-((5-氯-4-苯基嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯 基)丙烯酰胺
步骤1：5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-苯基嘧啶-2-胺的合成
室温下，将甲苯磺酸(765mg,4.44mmol)加至2,5-二氯-4-苯基嘧啶(500mg,2.22mmol)和1-(4-硝基苯甲基)-1H-吡唑-4-胺(679mg,2.67mmol)的n-BuOH(20.0mL)溶液中，反应混合物在100℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝1/1)分离纯化，得到目标化合物(260mg,收率28.8％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:407.1[M+H]+。
步骤2：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-苯基嘧啶-2-胺的合成
室温下，将还原铁粉(131.78mg,2.36mmol)加至5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-苯基嘧啶-2-胺(160mg,393μmol)和NH4Cl(126mg,2.36mmol)的EtOH(20.0mL)/水(4.00mL)的混合液中，反应混合物在40℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(10.0x2 mL)洗涤，合并有机相，减压浓缩，得到目标化合物(100mg,收率67.5％,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:377.1[M+H]+。
步骤3：N-(4-((4-((5-氯-4-苯基嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(17.3mg,191μmol,15.6μL)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-苯基嘧啶-2-胺(90.0mg,239μmol)和DIPEA(92.6mg,716μmol,124μL)的无水THF(15.0mL)溶液中，反应混合物在25℃下搅拌1hrs。反应混合物中加无水MeOH(5.00mL)淬灭反应，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:Waters Xbridge BEHC18100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝37％-67％；10min)分离纯化，得到标题化合物(20.0mg,收率19.4％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:431.0[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.16(s,1H),9.81(s,1H),8.53(s,1H),7.96-7.46(m,10H),7.21(d,J＝8.5Hz,2H),6.50-6.36(m,1H),6.31-6.20(m,1H),5.75(dd,J＝2.1,10.1Hz,1H)。
实施例19：N-(4-((4-((5-氯-4-(环丙基甲氧基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1- 基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：2,5-二氯-4-(环丙基甲氧基)嘧啶的合成
在0℃下，将NaH(523mg,13.0mmol,60％)加至环丙甲醇(943mg,13.0mmol)的无水THF(15.0mL)溶液中，搅拌0.5hr，然后加入2,4,5-三氯嘧啶(2.00g，10.9mmol)的THF(5.00mL)溶液，在室温下搅拌3hrs。在0℃下，用饱和NH4Cl(20.0mL)淬灭反应，用EA(15.0mLx 3)萃取，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(700mg,收率29.3％,黄色油状物)。LC-MS(ESI)m/z:218.9[M+H]+。
步骤2：5-氯-4-(环丙基甲氧基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
将Et3N(461mg,4.56mmol)加至1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(302mg,1.19mmol,HCl)和2,5-二氯-4-(环丙基甲氧基)嘧啶(200mg,912μmol)的n-BuOH(5.00mL)溶液中，然后在110℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(140mg,收率38.2％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:401.0[M+H]+。
步骤3：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(环丙基甲氧基)嘧啶-2-胺的合成
将还原铁粉(97.5mg,1.75mmol)加至5-氯-4-(环丙基甲氧基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(140mg,349μmol)和NH4Cl(93.4mg,1.75mmol)的EtOH(2.00mL)/水(0.40mL)的混合液中，然后在60℃下搅拌5hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(5.00mLx3)洗涤，合并的母液用水(5.00mL)洗涤,无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(120mg,收率92.6％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:371.1[M+H]+。
步骤4：N-(4-((4-((5-氯-4-(环丙基甲氧基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(29.5mg,326μmol)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(环丙基甲氧基)嘧啶-2-胺(110mg，296μmol)和DIPEA(115mg,889μmol)的无水THF(1.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌1hr。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用EA(5.00mL x 3)萃取，减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:Waters XbridgeBEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝35％-65％；10min)分离纯化，得到标题化合物(20.9mg,收率16.6％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:425.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.16(s,1H)9.56(br s,1H)8.21(s,1H)7.87(br s,1H)7.63(d,J＝8.38Hz,2H)7.50(s,1H)7.21(br d,J＝8.25Hz,2H)6.35-6.49(m,1H)6.19-6.30(m,1H)5.74(dd,J＝10.01,2.00Hz,1H)5.22(s,2H)4.21(d,J＝7.25Hz,2H)1.19-1.38(m,1H)0.47-0.67(m,2H)0.27-0.42(m,2H)。
实施例20：N-(4-((4-((5-(二氟甲氧基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基) 苯基)丙烯酰胺
步骤1：2-氯-5-(二氟甲氧基)嘧啶的合成
室温下，将2-氯-2,2-二氟醋酸钠(7.01g,46.0mmol)加至2-氯嘧啶-5-酚(3.00g,23.0mmol)和Cs2CO3(8.99g,27.6mmol)的DMF(100mL)悬浮液中，反应混合物在100℃下搅拌4hrs。待反应混合物冷却至室温后加甲基叔丁基醚(300mL)稀释，用水(100mL x 3)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝1/1)分离纯化，得到目标化合物(2.00g,收率47.0％,黄色油状)。1H NMR(400MHz,CHCl3-d)δppm 8.52(s,2H),6.62(t,J＝71.20Hz,1H)。
步骤2：5-(二氟甲氧基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
氮气保护下，将Pd(OAc)2(12.4mg,55.4μmol)和(±)-2,2-双(二苯膦基)-1,1-联萘(69.0mg,111μmol)加至1-(4-硝基苯甲基)-1H-吡唑-4-胺(145mg,665μmol)、2-氯-5-(二氟甲氧基)嘧啶(100mg,554μmol)和Cs2CO3(361mg,1.11mmol)的二噁烷(5.00mL)悬浮液中，反应混合物在100℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤液减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:Phenomenex C18 80*40mm*3um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝25％-55％；8min)分离纯化，得到目标化合物(50.0mg,收率25.0％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:363.1[M+H]+。
步骤3：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-(二氟甲氧基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将还原铁粉(46.2mg,828μmol)加至5-(二氟甲氧基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(50.0mg,138μmol)和NH4Cl(44.3mg,828μmol)的EtOH(30.0mL)/水(6.00mL)的混合液中，反应混合物在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(10.0x2 mL)洗涤，合并有机相，减压浓缩，得到目标化合物(40.0mg,收率87.2％,浅黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:333.2[M+H]+。
步骤4：N-(4-((4-((5-(二氟甲氧基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(8.72mg,96.3μmol,7.85μL)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-(二氟甲氧基)嘧啶-2-胺(40.0mg,120μmol)和DIPEA(46.7mg,361μmol,62.90μL)的无水THF(20.0mL)溶液中，反应混合物在25℃下搅拌1hr。反应混合物中加无水MeOH(5.00mL)淬灭反应，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:Waters Xbridge BEHC18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝25％-55％；10min)分离纯化，得到标题化合物(5.60mg,收率12.0％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:387.0[M+H]+。1HNMR(400MHz,MeOH-d4)δppm 8.29(s,2H),8.02(s,1H),7.66-7.58(m,3H),7.23(d,J＝8.5Hz,2H),6.74(t,J＝73.4Hz,1H),6.40(d,J＝9.5Hz,1H),6.36(d,J＝2.3Hz,1H),5.76(dd,J＝2.3,9.6Hz,1H),5.27(s,2H)。
实施例21：N-(4-((4-((5-氯-4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲 基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将对甲苯磺酸(238mg,1.38mmol)加至2,5-二氯-4-(三氟甲基)嘧啶(150mg,691μmol)和1-(4-硝基苯甲基)-1H-吡唑-4-胺(176mg,691μmol,HCl)的n-BuOH(20.0mL)溶液中，反应混合物在100℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝20/1)分离纯化，得到目标化合物(100mg,收率36.3％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:399.0[M+H]+。
步骤2：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将还原铁粉(75.6mg,1.35mmol)加至5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(90.0mg,226μmol)和NH4Cl(72.4mg,1.35mmol)的EtOH(20.0mL)/水(4.00mL)的混合液中，反应混合物在60℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(10.0x2 mL)洗涤，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(30.0mg,收率30.6％,浅黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:434.2[M+H]+。
步骤3：N-(4-((4-((5-氯-4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(4.52mg,49.9μmol,4.07μL)缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(23.0mg,62.4μmol)和DIPEA(24.2mg,187μmol,32.6μL)的无水THF(10.0mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌1hr。反应混合物中加无水MeOH(5.00mL)淬灭反应，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:WatersXbridge BEH C18 100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝35％-65％；10min)分离纯化，得到标题化合物(1.60mg,收率6.07％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:423.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CH3CN-d3)δppm 8.55(s,2H),8.24(br s,2H),7.91(s,1H),7.63-7.60(m,2H),7.59(s,1H),7.25(br s,2H),7.04(d,J＝8.3Hz,1H),6.60(d,J＝8.4Hz,1H),6.33(d,J＝4.4Hz,1H),5.72(dd,J＝4.1,7.9Hz,1H),5.23(s,2H)。
实施例22：N-(4-((4-((5-氯-4-(2-羟基丙烷-2-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑- 1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：2,5-二氯-4-(1-乙氧基乙烯基)嘧啶的合成
在氮气保护下，将Pd(dppf)Cl2(574mg,817μmol)加至2,4,5-三氯嘧啶(3.00g,16.36mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(6.26g,17.3mmol)的DMF(30.0mL)溶液中，然后在80℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后倒入饱和的KF溶液(20.0mL)中搅拌，用EA(10.0mL x 3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10mL)洗涤后干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝1/0～10/1)分离纯化，得到目标化合物(3.00g,产率83.7％,黄色油状物)。LC-MS(ESI)m/z:218.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CHCl3-d)δppm 8.56(s,1H),4.98-4.90(m,1H),4.94(d,J＝3.1Hz,1H),4.63(d,J＝3.1Hz,1H),3.94(q,J＝7.0Hz,2H),1.39(t,J＝7.0Hz,3H)。
步骤2：1-(2,5-二氯嘧啶-4-基)乙酮的合成
在0℃下，将稀HCl(4M,3.00mL)滴加至2,5-二氯-4-(1-乙氧基乙烯基)嘧啶(1.00g,4.56mmol)的THF(10.0mL)溶液中，然后在室温下搅拌24hrs。将反应混合物倒入水(20.0mL)中，用EA(10.0mL x 3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10mL)洗涤后干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(0.800g,产率91.7％,黄色油状物)。LC-MS(ESI)m/z:190.9[M+H]+。
步骤3：2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)丙烷-2-醇的合成
在-70℃下，将甲基溴化镁(3M,837μL)滴加至1-(2,5-二氯嘧啶-4-基)乙酮(400mg,2.09mmol)的THF(4.00mL)溶液中，然后在-70℃下搅拌30分钟。将反应混合物倒入饱和NH4Cl(10.0mL)中，用EA(10.0mL x 3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10.0mL)洗涤后干燥，减压浓缩，得到目标化合物(0.410g,产率94.5％,黄色油状物)。LC-MS(ESI)m/z:206.9[M+H]+。
步骤4：2-(5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)丙烷-2-醇的合成
将对甲苯磺酸(665mg,3.86mmol)加至2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)丙烷-2-醇(400mg,1.93mmol)和1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(541mg,2.13mmol,HCl)的n-BuOH(5.00mL)溶液中，然后在100℃下搅拌12hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝5/1～0/1)分离纯化，得到目标化合物(220mg,产率29.2％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:389.0[M+H]+。
步骤5：2-(2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)丙烷-2-醇的合成
将还原铁粉(79.0mg,1.41mmol)加至2-(5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)丙烷-2-醇(110mg,282μmol)和NH4Cl(75.6mg,1.41mmol)的EtOH(1.00mL)/水(0.20mL)的混合液中，然后在60℃下搅拌5hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用DCM(5.00mLx3)洗涤，合并的母液用水(5.00mL)洗涤,无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(80.0mg,产率78.8％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:359.0[M+H]+。
步骤6：N-(4-((4-((5-氯-4-(2-羟基丙烷-2-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(22.2mg,245μmol)缓慢滴加至2-(2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)丙烷-2-醇(80.0mg,222μmol)和DIPEA(86.4mg,668μmol)的无水THF(1.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌1hr。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用EA(5.00mL x 3)萃取，减压浓缩，残余物经Pre-HPLC(柱:Waters XbridgeBEH C18100*30mm*10um；流动相:[A-水(0.08％NH4HCO3)/B-ACN]；B％＝15％-55％；10min)分离纯化，得到标题化合物(25.0mg,产率27.2％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:413.0[M+H]+。1HNMR(400MHz,MeOH-d4)δppm 8.30(s,1H)7.99(s,1H)7.52-7.66(m,3H)7.24(d,J＝8.50Hz,1H)7.17-7.29(m,1H)6.28-6.49(m,2H)5.76(dd,J＝9.57,2.31Hz,1H)5.69-5.82(m,1H)5.27(s,2H)1.61(s,6H)。
实施例23：N-(4-((5-((5-氯-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨 基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)苯基)丙烯酰胺三氟乙酸盐
步骤1：5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮的合成
将3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(451mg,1.11mmol)加至5-氨基吡啶-2-酚(245mg,2.23mmol)和DIPEA(1.72g,13.32mmol)的NMP(5.00mL)溶液中，然后在130℃下搅拌过夜。LC-MS监测反应完成。待反应混合物冷却至室温后加EA(30.0mL)稀释，析出大量固体，然后加水(50.0mL)搅拌，过滤，滤饼用EA(10.0mL×2)洗涤，收集滤饼。合并的滤液分层，有机相用饱和食盐水(10.0mL×2)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物和滤饼合并，得到目标化合物(464mg,收率87.3％,棕色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:479.2[M+H]+。
步骤2：5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1-(4-硝基苄基)吡啶-2(1H)-酮的合成
室温下，将对硝基苄溴(373mg,1.73mmol)加至5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮(414mg,864μmol)和DIPEA(334mg,2.59mmol)的NMP(9.00mL)中，然后在90℃下搅拌3小时。待反应混合物冷却至室温后加EA(50.0mL)稀释，依次用水(50.0mLx2)洗涤，无水Na2SO4干燥，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝0/1)分离纯化，得到目标化合物(176mg,收率33.2％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:614.3[M+H]+。步骤3：1-(4-氨基苄基)-5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮的合成
室温下，将铁粉(160mg,2.87mmol)加至5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1-(4-硝基苄基)吡啶-2(1H)-酮(176mg,287μmol)和NH4Cl(154mg,2.87mmol)的EtOH(20.0mL)/水(4.00mL)的混合液中，然后在80℃下搅拌3小时。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤液减压蒸馏，残余物用EA(50.0mL)溶解，水(30.0mL)洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥，减压浓缩，得到目标化合物(90.0mg,粗品,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:584.3[M+H]+。
步骤4：N-(4-((5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将丙烯酰氯(14.0mg,154μmol)滴加至将1-(4-氨基苄基)-5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-2(1H)-酮(90mg,154μmol)和Et3N(47.0mg,0.462mmol)的THF(10.0mL)中，然后在室温搅拌2小时。将反应混合物倒入水(10.0mL)中淬灭，用EA(10.0mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，减压浓缩，得到目标化合物(98mg,粗品,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:636.3[M-H]-。步骤5：N-(4-((5-((5-氯-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)苯基)丙烯酰胺三氟乙酸盐的合成
室温下，将NaOH(1M,2.00mL)溶液滴加至N-(4-((5-((5-氯-4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)苯基)丙烯酰胺(98mg,154μmol)的二噁烷(2.00mL)中，然后在室温搅拌4小时。反应混合物加水(10.0mL)稀释，用EA(20.0mL)萃取，有机相依次用水(5.00mL)和饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，减压浓缩，残余物经prep-HPLC(柱:Ultimate XB-Phenyl 21.2*250mm 10um；流动相:A-水(0.1％TFA)/B-ACN；B％＝30％-45％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(3.06mg,收率3.99％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:498.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.47(s,1H),10.16(s,1H),9.26(s,1H),8.85–8.54(m,2H),8.41(s,1H),8.32(d,J＝3.8Hz,1H),8.05(d,J＝2.6Hz,1H),7.69–7.54(m,3H),7.32–7.19(m,2H),7.17–6.96(m,1H),6.50(d,J＝9.6Hz,1H),6.46–6.35(m,1H),6.31–6.18(m,1H),5.80–5.69(m,1H),5.06(s,2H)。19F NMR(377MHz,DMSO-d6)δ-74.52(s)。
实施例24：N-(4-((4-((5-氯-4-(6-氰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2- 基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：3-溴-6-氰基-7-氮杂吲哚的合成
0℃下，将NBS(746mg,4.19mmol)加至6-氰基-7-氮杂吲哚(500mg,3.49mmol)的DCM(10.0mL)溶液中，然后在15℃下搅拌1hr。反应混合物减压浓缩，残余物悬浮于PE(100mL)中，室温搅拌3hrs,过滤，干燥，得到目标化合物(1.10g,粗品,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:221.9[M-H]-。
步骤2：3-溴-1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-甲腈的合成
0℃下，将NaH(60％,198mg,4.95mmol)加至3-溴-6-氰基-7-氮杂吲哚(1.10g,4.95mmol)的无水THF(15.0mL)溶液中，搅拌0.5hr后，加入苯磺酰氯(1.10g,6.44mmol)，然后在室温搅拌过夜。反应混合物中加水(50.0mL)，用EA(50.0mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(石油醚/乙酸乙酯＝8/1～4/1)分离纯化，得到目标化合物(969mg,收率53.0％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:362.0[M+H]+。
步骤3：1-(苯磺酰基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-甲腈的合成
氮气保护下，将Pd(dppf)Cl2·DCM(217mg,0.268mmol)加至3-溴-1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-甲腈(969mg,2.68mmol)、联硼酸频那醇酯(1.00g,4.01mmol)和KOAc(526mg,5.36mmol)的二噁烷(10.0mL)悬浮液中，然后在100℃下搅拌2hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用EA(100mL×3)洗涤，合并滤液，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1～3/1)分离纯化，得到目标化合物(640mg,收率59.9％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:410.2[M+H]+。
步骤4：3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-甲腈的合成
氮气保护下，将Pd(dppf)Cl2·DCM(130mg,0.156mmol)加至1-(苯磺酰基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-甲腈(640mg,1.56mmol)、2,4,5-三氯嘧啶(286mg,1.56mmol)和Na2CO3(331mg,3.12mmol)的THF/H2O(10.0mL/1.00mL)的混合液中，然后在50℃下搅拌2hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤饼用EA(100mL×2)洗涤，合并滤液用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1～3/1)分离纯化，得到目标化合物(326mg,收率48.6％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:430.0[M+H]+。
步骤5：3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-甲腈的合成
室温下，将NaOH水溶液(2N,10.0mL)滴加至3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-甲腈(290mg,0.674mmol)的二噁烷(30.0mL)溶液中，然后在30℃下搅拌3hrs。反应混合物中加水(20.0mL)，用EA(30.0mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(264mg,粗品,黄色固体)，直接用于下一步反应。
步骤6：N-(4-((4-((5-氯-4-(6-氰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
室温下，将3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-甲腈(130mg,0.448mmol)加至N-(4-((4-氨基-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺(109mg,0.448mmol)和DIPEA(348mg,2.69mmol)的DMSO(9.00mL)溶液中，然后在90℃下搅拌过夜。反应混合物中加水(20.0mL)，用EA(30.0mL)萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:SunFire Prep C8 OBD 10um 19*250mm；流动相:A-水(0.1％FA)/B-CH3CN；B％＝30％-60％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(20.95mg,收率9.42％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:496.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.19(s,1H),9.70(s,1H),9.27(s,1H),8.87(s,1H),8.48(s,1H),7.97(s,1H),7.89–7.49(m,5H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),6.50–6.37(m,1H),6.32–6.15(m,1H),5.82–5.70(m,1H),5.26(s,2H)。
实施例25：N-(4-((4-((5-氯-4-(5-(环丙甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2- 基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：5-氯-4-(5-(环丙基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
将DIPEA(960mg,7.44mmol)逐滴加至2,5-二氯-4-(5-(环丙基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶(350mg,1.24mmol)和1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(539mg,2.47mmol)的NMP(8.00mL)溶液中，然后在氮气保护下130℃搅拌6小时。待反应混合物冷却至室温后加水(100mL)，用EA(100mLx3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝1/1)分离纯化，得到目标化合物(326mg,收率56.0％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:465.0[M+H]+。
步骤2：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(5-(环丙基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
将还原铁粉(392mg,7.00mmol)加至5-氯-4-(5-(环丙基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(326mg,0.700mmol)和NH4Cl(374mg,7.00mmol)的MeOH(10.0mL)/水(10.0mL)的混合液中，然后在70℃下搅拌6小时。待反应混合物冷却至室温后加饱和NaHCO3水溶液调pH＝8～9，用EA(100mLx2)萃取，合并有机相，用无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(315mg,收率100％,黄色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:435.1[M+H]+。
步骤3：N-(4-((4-((5-氯-4-(5-(环丙基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将丙烯酰氯(40.0mg,0.44mmol)的DCM(1.0 0mL)溶液缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(5-(环丙基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(160mg,0.370mmol)和Et3N(112mg,1.11mmol)的DCM(5.00mL)中，然后室温搅拌2小时。反应混合物加水(100mL)，用EA(100mL)萃取，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:Waters Xbridge C18 19*250mm 10um；流动相:A-水(0.1％氨水)/B-CH3CN；B％＝30％-45％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(47.4mg,收率26.2％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:489.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.28(s,1H),9.57(s,1H),8.51(s,1H),7.99-7.96(m,2H),7.73(d,J＝8.2Hz,2H),7.60(s,1H),7.31(d,J＝8.2Hz,2H),6.59–6.45(m,1H),6.41–6.29(m,1H),5.88–5.78(m,1H),5.31(s,2H),3.93(s,3H),3.24–2.84(m,2H),1.07–0.74(m,1H),0.52–0.24(m,2H),0.18–0.13(m,2H)。
实施例26：N-(4-((5-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1-甲基-1H-吡 唑-3-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)-N-(1-甲基-3-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-5-基)嘧啶-2-胺的合成
氮气保护下，将XPhos Pd G3(37.0mg，0.043mmol)加至1-甲基-3-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-5-胺(100mg,0.431mmol)、3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚(227mg,0.861mmol)和Cs2CO3(281mg,0.861mmol)的t-BuOH(5.00mL)悬浮液中，反应混合物在100℃下搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温，加EA(5.00mL)稀释，过滤，滤液减压浓缩，残余物经硅胶层析(EA/PE＝3/7)分离纯化，得到目标化合物(125mg,收率63.1％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:460.2[M+H]+。
步骤2：N-(3-(4-氨基苄基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将锌粉(53.0mg,0.815mmol)加至5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)-N-(1-甲基-3-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-5-基)嘧啶-2-胺(125mg，0.272mmol)和NH4Cl(44.0mg,0.815mmol)的EtOH/水(5.00mL,4/1)混合液中，反应混合物在80℃下搅拌3hrs。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤液浓缩后加EA(15.0mL)稀释，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(103mg,收率88.1％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:430.1[M+H]+。
步骤3：N-(4-((5-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(11.0mg,0.123mmol)缓慢滴加至N-(3-(4-氨基苄基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(53.0mg,0.123mmol)和Et3N(25.0mg,0.247mmol)的DCM(5.00mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌3hrs。反应混合物直接减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:SunFire Prep C8 OBD 10um 19*250mm；流动相:A-水(0.1％FA),B-ACN；B％＝5％-35％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(11.1mg,收率18.7％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:484.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.92(s,1H),10.07(s,1H),9.30(s,1H),8.54(d,J＝2.8Hz,1H),8.40(s,1H),8.17(s,1H),7.56(d,J＝8.4Hz,2H),7.46(d,J＝8.1Hz,1H),7.23(d,J＝8.4Hz,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),6.91(t,J＝7.4Hz,1H),6.42(dd,J＝17.0,10.1Hz,1H),6.23(dd,J＝17.0,2.0Hz,1H),6.00(s,1H),5.73(dd,J＝10.1,2.0Hz,1H),3.83(s,2H),3.59(s,3H)。
实施例27：N-(4-((4-((5-氯-4-(二氟甲氧基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基) 甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：2,5-二氯嘧啶-4-醇的合成
室温下，将NaOH(2.18g,54.5mmol)加至2,4,5-三氯嘧啶(5.00g,27.3mmol)的THF/H2O(10/1,27.5mL)的混合液中，然后在室温搅拌16小时。反应混合物加水(100mL)稀释，用EA(50.0mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(4.60g,收率97.7％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:165.0[M+H]+。
步骤2：5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-醇的合成
室温下，将TFA(1.56g,13.7mmol)加至1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(300mg,1.37mmol)和2,5-二氯嘧啶-4-醇(567mg,3.44mmol)的n-BuOH(10.0mL)溶液中，然后在130℃下搅拌2小时。待反应混合物冷却至室温后加水(60.0mL)，用EA(50.0mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝40/1-20/1)分离纯化，得到目标化合物(324mg,收率67.9％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:347.0[M+H]+。步骤3：5-氯-4-(二氟甲氧基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将Cs2CO3(40.6mg,0.104mmol)加至5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-醇(30.0mg,0.087mmol)和2-氯-2,2-二氟乙酸钠(26.5mg,0.173mmol)的DMF(6.00mL)溶液中，然后在100℃下搅拌5小时。待反应混合物冷却至室温后加水(60.0mL)，用EA(30.0mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝1/1)分离纯化，得到目标化合物(40.0mg,收率43.7％,黄色油状)。LC-MS(ESI)m/z:397.0[M+H]+。
步骤4：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(二氟甲氧基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将还原铁粉(48.3mg,0.087mmol)加至5-氯-4-(二氟甲氧基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(30.0mg,0.086mmol)和NH4Cl(46.3mg,0.087mmol)的MeOH/H2O(1/1,8.00mL)的混合液中，然后在70℃下搅拌1小时。待反应混合物冷却至室温后加水(10.0mL)，用EA(5.00mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝10/1)分离纯化，得到目标化合物(20.0mg,收率66.6％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:367.0[M+H]+。
步骤5：N-(4-((4-((5-氯-4-(二氟甲氧基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
0℃下，将丙烯酰氯(2.46mg,0.027mmol)的DCM(1.00mL)溶液滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(二氟甲氧基)嘧啶-2-胺(10.0mg,0.027mmol)和DIPEA(21.1mg,0.164mmol)的DCM(3.00mL)溶液中，然后室温搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:SunFire Prep C8 OBD 10um 19*250mm；流动相:A-水(0.1％FA)/B-CH3CN；B％＝48％-85％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(1.13mg,收率11.3％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:421.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.15(s,1H),10.07–9.89(m,1H),8.47(s,1H),8.10–7.68(m,1H),7.62(d,J＝8.4Hz,2H),7.52(s,1H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),6.47–6.36(m,1H),6.30–6.18(m,1H),5.78–5.69(m,1H),5.24(s,2H)。
实施例28：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨 基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：3-溴-1-对甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶的合成
氮气保护下，将对甲苯磺酰氯(5.32g,27.9mmol)加至3-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(5.00g,25.4mmol)和NaOH(1.12g,27.9mmol)的DCM(25.0mL)溶液中，然后在室温搅拌3小时。将反应混合物倒入水(100mL)中，用EA(50.0mLx3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(25.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝20/1)分离纯化，得到目标化合物(7.20g,收率80.9％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:351.0[M+H]+。
步骤2:3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1-对甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶的合成
氮气保护下，将Pd(dppf)Cl2(1.30g,17.8mmol)加至3-溴-1-对甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(6.20g,17.7mmol)、联硼酸频那醇酯(13.0g,53.0mmol)和KOAc(5.20g,53.0mmol)的二噁烷(60.0mL)溶液中，然后在100℃搅拌2小时。待反应混合物冷却至室温后倒入水(200mL)中，用EA(300mLx3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(60.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝10/1)分离纯化，得到目标化合物(16.0g,收率100％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:399.2[M+H]+。
步骤3：3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-对甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶的合成
氮气保护下，将Pd(dppf)Cl2(2.76g,3.77mmol)加至3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1-对甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(15.0g,37.69mmol)、2,4,5-三氯嘧啶(8.29mg,45.2mmol)和Na2CO3(12.0g,113mmol)的二噁烷(75.0mL)/水(7.00mL)的混合液中，然后在100℃搅拌2小时。待反应混合物冷却至室温后倒入水(200mL)中，用EA(300mLx3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(200mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM＝100％)分离纯化，得到目标化合物(3.10g,收率19.4％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:419.0[M+H]+。
步骤4：5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-对甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-对甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(1.00g,2.39mmol)加至1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(780mg,3.58mmol)和DIPEA(925mg,7.16mmol)的NMP(10.0mL)溶液中，然后在氮气保护下130℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后倒入水(50.0mL)中，用EA(20.0mLx3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝1/1)分离纯化，得到目标化合物(360mg,收率25.2％,类白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:601.2[M+H]+。
步骤5：5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将Cs2CO3(553mg,1.70mmol)加至5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1-对甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-胺(340mg,0.570mmol)的MeOH(5.00mL)溶液中，然后在氮气保护下30℃搅拌2小时。待反应混合物冷却至室温后过滤，滤液减压浓缩，得到目标化合物(169mg,收率67.1％,类白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:447.2[M+H]+。
步骤6：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将铁粉(98mg,1.75mmol)加至5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-胺(156mg,0.35mmol)和NH4Cl(187mg,3.49mmol)的EtOH(10.0mL)/水(2.00mL)的混合液中，然后在60℃搅拌1小时。待反应混合物冷却至室温，过滤，用DCM/MeOH(10/1,30.0mL)洗涤滤饼，合并滤液，减压浓缩,残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝40/1)分离纯化，得到目标化合物(113mg,收率68.9％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:417.2[M+H]+。
步骤7：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将丙烯酰氯(90.0mg,1.00mmol)的DCM(5.00mL)溶液缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-胺(83.0mg,0.200mmol)和Et3N(60.0mg,0.600mmol)的MeOH(5.00mL)溶液中，然后在氮气保护下0℃搅拌1小时。反应混合物用DCM(10.0mL)稀释，依次用水(5.00mL)、饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:SunFire Prep C8OBD 10um19*250mm；流动相:A-水(0.1％ FA)/B-CH3CN；B％＝40％-50％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(16.4mg,收率12.9％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:471.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(s,1H),10.16(s,1H),9.57(s,1H),9.08(s,1H),8.55(s,1H),8.43(s,1H),8.33(s,1H),7.96(s,1H),7.63(d,J＝8.4Hz,2H),7.57(s,1H),7.22-7.20(m,3H),6.43(dd,J＝7.2,10.0Hz,1H),6.25(dd,J＝14.8,2.0Hz,1H),5.75(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),5.24(s,2H)。
实施例29：N-(4-((4-((5-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)- 1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：3-碘吡唑并[1,5-a]吡啶的合成
将NIS(2.30g,10.2mmol)加至吡唑并[1,5-a]吡啶(1.00g,8.47mmol)的ACN(20.0mL)溶液中，然后在氮气保护下室温搅拌2小时。将反应混合物倒入水(20.0mL)中，用EA(40.0mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝1/1)分离纯化，得到目标化合物(1.80g,收率86.5％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:245.0[M+H]+。
步骤2：3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶的合成
将3-碘吡唑并[1,5-a]吡啶(1.40g,5.74mmol)和2-异丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷(1.60g,8.60mmol)用干燥四氢呋喃(20.0mL)溶解，然后冷却到0℃以后向其中缓慢加入异丙基氯化镁(6.00mL,7.80mmol)，该反应在氮气保护下于0℃反应2小时。LCMS显示反应完成。将反应液倒入水(100mL)，用乙酸乙酯(50.0mL×3)萃取，有机层再用饱和食盐水(50.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝30/1)分离纯化，得到白色固体(720mg,收率51.4％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:245.2[M+H]+。步骤3：3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶的合成
氮气保护下，将Pd(dppf)Cl2(183mg,0.25mmol)加至3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(600mg,2.46mmol)、2,4,5-三氯嘧啶(644mg,3.51mmol)和Na2CO3(573mg,5.40mmol)的DME(15.0mL)/水(3.00mL)的混合液中，然后在85℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后倒入水(100mL)中，用EA(50.0mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝30/1)分离纯化，得到目标化合物(420mg,收率64.4％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:265.1[M+H]+。
步骤4：5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(360mg,1.36mmol)加至1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(385mg,1.76mmol)和DIPEA(3.52g,27.2mmol)的NMP(20.0mL)溶液中，然后在氮气保护下130℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后倒入水(50.0mL)中，用EA(100mLx3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝100/1)分离纯化，得到目标化合物(480mg,收率78.9％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:447.2[M+H]+。
步骤5：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将铁粉(302mg,5.40mmol)加至5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-胺(480mg,1.08mmol)和NH4Cl(600mg,11.20mmol)的EtOH(20.0mL)/水(5.00mL)的混合液中，然后在70℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温，过滤，滤液减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝80/1)分离纯化，得到目标化合物(210mg,收率46.7％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:417.1[M+H]+。
步骤6：N-(4-((4-((5-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将丙烯酰氯(238mg,2.63mmol)的DCM(2.00mL)溶液缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-胺(210mg,0.505mmol)和Et3N(543mg,5.37mmol)的MeOH(20.0mL)溶液中，然后在氮气保护下0℃搅拌1小时。将反应混合物倒入水(30.0mL)中，用DCM(50.0mLx3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:SunFire Prep C8OBD 10um 19*250mm；流动相:A-水(0.1％ FA)/B-CH3CN；B％＝45％-55％；20mL/min)纯化得到目标化合物(35.0mg,收率14.7％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:471.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.15(s,1H),9.58(s,1H),8.97–8.82(m,3H),8.46–8.43(m,1H),7.95(s,1H),7.62(d,J＝7.9Hz,2H),7.56(s,1H),7.21(d,J＝7.9Hz,2H),7.14(s,2H),6.44-6.41(m,1H),6.25(d,J＝16.8Hz,1H),5.74(d,J＝10.2Hz,1H),5.24(s,2H)。
实施例30：N-(4-((4-((4-(1H-吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H- 吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
室温下，将(Boc)2O(4.39g,20.1mmol)加至3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(3.00g,15.5mmol)、DMAP(189mg,1.55mmol)和DIPEA(5.99g,46.4mmol)的DCM(30.0mL)溶液中，然后在30℃下搅拌过夜。反应混合物减压浓缩后加水(50.0mL)稀释，用EA(30.0mL×3)萃取，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到目标化合物(3.30g,收率72.5％,黄色固体)，直接用于下一步反应。
步骤2：3-(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将Pd(dppf)Cl2·DCM(448mg,0.612mmol)加至3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(1.80g,6.12mmol)、2,4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶(1.33g,6.12mmol)和K3PO4(3.90g,18.4mmol)的THF/水(25.0mL,4/1)的混合液中，然后在30℃下搅拌过夜。反应混合物过滤，滤饼用EA(20mL)洗涤，有机相减压浓缩，残余物经硅胶层析(EA/PE＝1/19)分离纯化，得到目标化合物(725mg,收率34.0％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:249.0[M+H]+。
步骤3：3-(2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将XPhos Pd G3(129mg,0.151mmol)加至3-(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(525mg,1.51mmol)、1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(427mg,1.96mmol)和Cs2CO3(981mg,3.01mmol)的t-BuOH(20.0mL)溶液中，然后在100℃下搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(EA/PE＝3/2)分离纯化，得到目标化合物(721mg,收率90.3％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:431.1[M+H-100]+。
步骤4：3-(2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将湿Pd/C(50.0mg)加至3-(2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(500mg,0.647mmol)的MeOH(15.0mL)溶液中，然后在氢气氛围中室温搅拌过夜。反应混合物过滤，减压浓缩，得到目标化合物(635mg,收率93.3％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:401.1[M+H-100]+。
步骤5：3-(2-((1-(4-丙烯酰胺苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(36.0mg,0.400mmol)缓慢滴加至3-(2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(200mg,0.400mmol)和Et3N(81.0mg,0.800mmol)的DCM(5.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌3hrs。反应混合物减压浓缩，残余物经硅胶层析(MeOH/DCM＝3/97)分离纯化，得到目标化合物(117mg,收率52.8％,棕色固体)。LC-MS(ESI)m/z:453.0[M+H-100]+。
步骤6：N-(4-((4-((4-(1H-吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
室温下，将TFA(0.500mL)滴加至3-(2-((1-(4-丙烯酰胺苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(117mg,0.211mmol)的DCM(3.00mL)溶液中，然后在室温搅拌过夜。反应混合物减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:WatersXbridge C18 10um OBD 19*250mm；流动相:[A-水(0.1％NH4HCO3)/B-CH3CN]；B％＝5％-30％；Flow:20mL/min)分离纯化，得到目标化合物(41.55mg,收率43.3％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:455.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.42(s,1H),10.18(s,2H),8.78–8.72(m,1H),8.04–8.01(m,1H),7.86(s,1H),7.73–7.58(m,3H),7.34–7.16(m,2H),6.81–6.77(m,1H),6.44(dd,J＝16.8,10.0Hz,1H),6.28–6.24(m,1H),5.76(d,J＝10.8Hz,1H),5.27(s,2H)。
实施例31：1-(4-(4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基) 哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮
类似实施例1合成。
LC-MS(ESI)m/z:448.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.89(s,1H),9.49(s,1H),8.90–8.30(m,3H),7.99(s,1H),7.61–7.41(m,2H),7.31–7.02(m,2H),6.95–6.74(m,1H),6.20–6.04(m,1H),5.82–5.59(m,1H),4.65–4.30(m,3H),4.28–4.04(m,2H),2.10–2.02(m,2H),1.86–1.64(m,2H)。
实施例32：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1- 基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将1-Boc-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(15.0g,51.0mmol)的THF(20.0mL)溶液滴加至2,4,5-三氯嘧啶(9.36g,51.0mmol)、Pd(dppf)Cl2·DCM(2.07g,2.55mmol)和K3PO4(21.7g,102mmol)的THF/H2O(60.0mL/20.0mL)的混合液中，然后在30℃下搅拌3hrs。反应混合物冷却至室温，加水(100mL)，用EA(100mL×2)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝16/1～8/1)分离纯化，得到目标化合物(8.40g,收率52.1％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:213.1[M-H-100]-。
步骤2：5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
室温下，将4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(3.05g,9.68mmol)、1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(2.11g,9.68mmol)和DIEPA(6.24g,48.4mmol)加至DMSO(53.0mL)中，然后在90℃下搅拌过夜，反应混合物冷却至室温，加水(100mL)，用EA(100mL×2)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝60/1～20/1)分离纯化，得到目标化合物(1.60g,收率41.3％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:397.1[M+H]+。
步骤3：4-(5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
室温下，将5-氯-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(1.60g,4.03mmol)、(Boc)2O(1.06g,4.84mmol)和DMAP(98.5g,0.806mmol)加至DMF(40.0mL)中，然后在30℃下搅拌过夜。反应混合物冷却至室温，加水(100mL)，用EA(100mL×2)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝4/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(1.50g,收率74.6％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:497.3[M+H]+。
步骤4：4-(2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将4-(5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(1.30g,2.77mmol)和湿Pd/C(300mg,10％)加至DCM/MeOH(1/1,60.0mL)混合溶剂中，反应混合物在氢气氛围下室温搅拌过夜。反应混合物经硅藻土过滤，滤液减压浓缩，得到目标化合物(1.15g,收率88.8％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:467.2[M+H]+。
步骤5：4-(2-((1-(4-丙烯酰胺苯基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(223mg,2.46mmol)的无水THF(5.00mL)溶液缓慢滴加至4-(2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(1.15g,2.46mmol)和Et3N(748mg,7.39mmol)的无水THF(20.0mL)溶液中，然后室温搅拌4hrs。反应混合物中加水(100mL)，用EA(100mL×2)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝4/1～1/1)分离纯化，得到目标化合物(890mg,收率69.4％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:521.3[M+H]+。
步骤6：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
室温下，将TFA(3.00mL)滴加至4-(2-((1-(4-丙烯酰胺苯基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(894mg,1.72mmol)的DCM(10.0mL)溶液中，然后室温搅拌3hrs。反应混合物中加水(10.0mL)，用NaOH(1N)调pH＝12，用DCM/MeOH(10/1,100mL×2)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝10/1,1％NH4OH)分离纯化，得到的粗品悬浮于MeOH(5.00mL)中，70℃搅拌3hrs，过滤，收集滤饼干燥得到目标化合物(439mg,收率60.6％,类白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:421.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.43(s,1H),10.17(s,1H),9.60(s,1H),8.57(s,1H),8.43(s,1H),8.26(s,1H),8.00(s,1H),7.82–7.46(m,3H),7.26(d,J＝7.6Hz,2H),6.57–6.38(m,1H),6.26(d,J＝16.8Hz,1H),5.75(d,J＝10.0Hz,1H),5.29(s,2H)。
实施例33：N-(4-((4-((5-氯-4-(3-甲基-1H-吲唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡 唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑的合成
室温下，将SEMCl(2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯，2.3mL,13.02mmol)逐滴加至1-甲基-3-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1H-吡唑(2.1g,10.09mmol)和DIPEA(5.25mL,30.2mmol)的DCM(20.0mL)溶液中，室温搅拌2hrs。反应混合物减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝200/1)分离纯化，得到目标化合物(3.0g,收率95.8％,液体)，直接用于下一步反应。
步骤2：2,5-二氯-4-(3-甲基-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶的合成
氩气保护下，将Pd(dppf)Cl2(180mg,0.24mmol)加至3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(3.00g,9.76mmol)、K2CO3(4.00g,29.0mmol)和2,4,5-三氯嘧啶(2.64g,29.0mmol)的dioxane/H2O(5/1,15.0mL)的混合液中，然后在80℃下搅拌3hrs。待反应混合物冷却至室温后倒入冰水中，用EA萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(PE/EA＝100:1-50:1)分离纯化，得到目标化合物(1.90g,收率54.4％,液体)。
步骤3：5-氯-4-(3-甲基-1-((2-(甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
氩气保护下，将Pd2(dba)3(三(二亚苄基丙酮)二钯(0)，63.0mg,0.069mmol)和x-phos(2-二环己基磷-2’,4’,6’-三异丙基联苯，99.0mg,200μmol)加至1-(-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(150mg,0.69mmol)、2,5-二氯-4-(3-甲基-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶(492mg,1.38mmol)和Cs2CO3(673mg,2.00mmol)的甲苯(4.00mL)悬浮液中，然后在110℃下搅拌4hrs。待反应混合物冷却至室温后倒入冰水中，用EA萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(PE/EA＝10:1-5:1)分离纯化，得到目标化合物(155.8mg,收率41.8％,固体)。
步骤4：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(3-甲基-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
将氯化亚锡(273mg,1.44mmol)加至5-氯-4-(3-甲基-1-((2-(甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(155.8mg,0.288mmol,1.0eq)的MeOH(2.40mL)溶液中，然后加入水(800μL)，浓HCl(25滴)，室温搅拌2hrs。冰浴下，将反应混合物逐滴加入到冷的饱和NaHCO3溶液(5.00mL)中，用EA(5.00mL x3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM/MeOH＝100:1)分离纯化，得到目标化合物(94.9mg,收率64.6％,固体)。
步骤5：N-(4-((4-((5-氯-4-(3-甲基-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(15.0μL,0.186mmol)的无水THF(4.00mL)溶液缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(3-甲基-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(94.9mg,0.186mmol)和DIPEA(65.0μL,372μL)的无水THF(1.00mL)溶液中，然后在0℃下搅拌30分钟。反应混合物中加水(5.00mL)，EA(5.00mLx3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(5.00mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM/MeOH＝50:1)分离纯化，得到目标化合物(34.7mg,收率33.0％,固体)。
步骤6：N-(4-((4-((5-氯-4-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
室温下，将TFA(0.25mL)逐滴加至N-(4-((4-((5-氯-4-(3-甲基-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺(34.7mg,0.061mmol)的DCM(1.00mL)溶液中，室温搅拌1hr。冰浴下，将反应混合物逐滴加入到冷的饱和NaHCO3溶液(5.00mL)中，EA(5.00mL x 3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM/MeOH＝20:1)分离纯化，得到标题化合物(16.5mg,收率62.3％,固体)。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.32(s,1H),8.13(s,1H),7.94(s,1H),7.62-7.59(m,1H),7.22(d,J＝6.0Hz,2H),6.45-6.33(m,2H),5.75(d,J＝6.4Hz,1H),5.25(s,1H),2.42(s,3H)
实施例34：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1- 基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：3-碘-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
将(Boc)2O(2.15g,9.80mmol)加至3-碘-1H-吲唑(2.00g,8.20mmol)和NaOH(492mg,10.2mmol)的ACN(25.0mL)溶液中，然后在氮气保护下室温搅拌2小时。将反应混合物倒入水(50.0mL)中，用EA(100mLx3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝15/1)分离纯化，得到目标化合物(2.70g,收率95.2％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:711.0[2M+Na]+。
步骤2：3-(三甲基锡基)-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将Pd(PPh3)4(335mg,0.290mmol)加至3-碘-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯(1.00g,2.89mmol)和六甲基二锡(1.42g,4.34mmol)的无水甲苯(20.0mL)溶液中，然后在110℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后倒入水(30.0mL)中，用EA(50.0mL×3)萃取，用饱和食盐水(50.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩得到无色油状物(1.80g,粗品)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:383.2[M+H]+。
步骤3：3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将Pd(PPh3)4(335mg,0.29mmol)加至3-(三甲基锡基)-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯(1.00g,2.62mmol)和2,4,5-三氯嘧啶(576mg,3.14mmol)的甲苯(20.0mL)溶液中，然后在110℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后倒入水(20.0mL)中，用EA(30.0mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝50/1)分离纯化，得到目标化合物(150mg,收率15.7％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:365.1[M+H]+。
步骤4：5-氯-4-(1H-吲唑-3-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
将3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯(150mg,0.41mmol)加至1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(117mg,0.54mmol)和DIPEA(3.52g,2.05mmol)的NMP(10.0mL)溶液中，然后在氮气保护下130℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后倒入水(50.0mL)中，用EA(100mLx3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝100/1)分离纯化，得到目标化合物(120mg,收率65.6％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:447.2[M+H]+。
步骤5：N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1H-吲唑-3-基)嘧啶-2-胺的合成
将铁粉(150mg,2.70mmol)加至5-氯-4-(1H-吲唑-3-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(120mg,0.27mmol)和NH4Cl(150mg,2.70mmol)的EtOH(20.0mL)/水(5.00mL)的混合液中，然后在80℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝40/1)分离纯化，得到目标化合物(80.0mg,收率71.4％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:417.2[M+H]+。
步骤6：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
在0℃下，将丙烯酰氯(88.0mg,0.960mmol)的DCM(1.00mL)溶液缓慢滴加至N-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-4-(1H-吲唑-3-基)嘧啶-2-胺(80.0mg,0.190mmol)和Et3N(116mg,1.14mmol)的MeOH(20.0mL)溶液中，然后在氮气保护下0℃搅拌1小时。将反应混合物倒入水(10.0mL)中，用EA(20.0mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10.0mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:SunFire Prep C8 OBD 10um19*250mm；流动相:A-(0.1％ FA)/B-CH3CN；B％＝30％-40％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(20.0mg,收率22.5％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:471.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.74(s,1H),10.16(s,1H),9.77(s,1H),8.57(s,1H),7.97(s,1H),7.68–7.58(m,5H),7.44(t,J＝7.5Hz,1H),7.19(d,J＝6.6Hz,3H),6.46 -6.39(m,10.1Hz,1H),6.25(dd,J＝17.0,2.0Hz,1H),5.75(dd,J＝10.1,2.0Hz,1H),5.23(s,2H)。
实施例35：N-(4-(4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基) 苯基)丙烯酰胺
类似实施例31合成。
LC-MS(ESI)m/z:456.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.93(s,1H),10.27(s,1H),9.74(s,1H),8.31-8.75(m,4H),7.82(s,1H),7.79-7.72(m,2H),7.72-7.60(m,2H),7.54(d,J＝8.2Hz,1H),7.25(t,J＝7.2Hz,1H),7.13(s,1H),6.55-6.40(m,1H),6.33-6.23(m,1H),5.85-5.66(m,1H)。
实施例36：N-(4-((4-((5-氯-4-((4,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基) 氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
类似实施例15合成。
LC-MS(ESI)m/z:464.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.47–12.11(m,1H),10.19(s,1H),9.21(s,1H),8.63(s,1H),8.42(s,1H),8.00(s,1H),7.62(d,J＝8.4Hz,2H),7.51–7.17(m,2H),7.07(s,2H),6.58–6.34(m,1H),6.35–6.18(m,1H),5.87–5.68(m,1H),5.04(s,2H),2.11(s,3H),1.74(s,3H)。
实施例37：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1- 基)甲基)环己基)丙烯酰胺
类似实施例1合成。
LC-MS(ESI)m/z:476.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.2-11.7(m,1H),9.46(s,1H),8.88–8.36(m,3H),7.93(d,J＝7.8Hz,1H),7.88–7.48(m,3H),7.35-7.26(m,1H),7.22-7.10(m,1H),6.25-6.11(m,1H),6.09-6.01(m,1H),5.53(dd,J＝10.0,2.4Hz,1H),4.19(d,J＝7.0Hz,2H),3.63–3.51(m,1H),1.83-1.79(m,2H),1.59(d,J＝11.8Hz,2H),1.25–1.09(m,5H)。
实施例38：N-(4-(4-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基) 环己基)丙烯酰胺
类似实施例1合成。
LC-MS(ESI)m/z:462.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.89(s,1H),9.49(s,1H),9.05-8.25(m,3H),8.20(s,1H),8.14–7.87(m,2H),7.64–7.40(m,2H),7.31-7.04(m,2H),6.45-6.23(m,1H),6.17-6.02(m,1H),5.67-5.47(m,1H),4.15(s,1H),3.96(s,1H),2.17-2.03(m,2H),1.93–1.81(m,2H),1.79-7.60(m,4H)。
实施例39：N-(4-((4-((4-((1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡 唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：2,5-二氯-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-胺的合成
室温下，将2,4,5-三氯嘧啶(1.65g,9.03mmol)加至1H-吡唑-4-胺(500mg,6.02mmol)和DIPEA(2.33g,18.1mmoL)的NMP(16.0mL)溶液中，然后在130℃下搅拌16hrs。待反应混合物冷却至室温后加水(100mL)稀释，用EA(50.0mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝2/1)分离纯化，得到目标化合物(880mg,收率63.6％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:230.0[M+H]+。
步骤2：5-氯-N2-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-N4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2,4-二胺的合成
将TFA(1.45g，12.7mmol)加至1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(278mg，1.27mmol)和2,5-二氯-N-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-胺(292mg，1.27mmol)的异丙醇(10.0mL)溶液中，然后在90℃下搅拌16hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，加水(50.0mL)稀释，用EA(30.0mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝40/1)分离纯化，得到目标化合物(1.01g，收率63.7％，黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:412.1[M+H]+。
步骤3：4-((5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
室温下，将(Boc)2O(585mg,2.68mmol)加至5-氯-N2-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-N4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2,4-二胺(920mg,2.23mmol)、DMAP(54.6mg,0.447mmol)和DIPEA(577mg,4.47mmol)的DMF(12.0mL)溶液中，然后在50℃下搅拌16hrs。待反应混合物冷却至室温后加水(60.0mL)稀释，用EA(50.0mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝1/1)分离纯化，得到目标化合物(432mg,收率46.9％,黄色油状)。LC-MS(ESI)m/z:512.2[M+H]+。
步骤4：N2-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-N4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2,4-二胺的合成
氮气保护下，将4-((5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(90mg,0.176mmol)的EtOH(4.00mL)溶液加至水合肼溶液(113mg,3.52mmol)和雷尼镍(0.50mL)的混合液中，然后在80℃下回流0.5hr。待反应混合物冷却至室温后加水(10.0mL)稀释，用EA(5.00mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝10/1)分离纯化，得到目标化合物(50.0mg,收率55.6％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:382.1[M+H]+。
步骤5：N-(4-((4-((4-((1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(11.8mg,0.131mmol)缓慢滴加至N2-(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)-5-氯-N4-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-2,4-二胺(50.0mg,0.131mmol)和Et3N(39.8mg,0.393mmol)的DCM(4.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌2hrs。反应混合物减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:SunFire Prep C8 OBD 10um 19*250mm；流动相:A-水(0.1％FA)/B-CH3CN；B％＝10％-22％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(1.02mg,收率2.04％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:436.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.18(s,1H),9.32–8.77(m,1H),8.58–8.30(m,4H),8.16–7.79(m,2H),7.62(d,J＝8.0Hz,2H),7.49–7.41(m,1H),7.20(d,J＝8.4Hz,2H),6.46–6.39(m,1H),6.31–6.16(m,1H),5.87–5.61(m,1H),5.18(s,2H)。
实施例40：N-(4-((4-((4-((1H-吡唑-3-基)氨基)-5-氯嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡 唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：2,5-二氯-N-(1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺的合成
室温下，将2,4,5-三氯嘧啶(1.65g,9.03mmol)加至1H-吡唑-3-胺(500mg,6.02mmol)和DIPEA(2.33g,18.1mmoL)的NMP(16.0mL)溶液中，然后在130℃下搅拌16hrs。待反应混合物冷却至室温后加水(100mL)稀释，用EA(50.0mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(PE/EA＝2/1)分离纯化，得到目标化合物(842mg,收率60.8％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:230.0[M+H]+。
步骤2：5-氯-N2-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-N4-(1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺的合成
将TFA(812mg,7.12mmol)加至2,5-二氯-N-(1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(518mg,2.37mmol)和2,5-二氯-N-(1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(545mg,2.37mmol)的异丙醇(10.0mL)中，然后在90℃下搅拌16hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，加水(50.0mL)稀释，用EA(30.0mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝40/1)分离纯化，得到目标化合物(600mg,收率60.8％,黄色油状)。LC-MS(ESI)m/z:230.0[M+H]+。
步骤3：3-((5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
室温下，将(Boc)2O(528mg,2.42mmol)加至5-氯-N2-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)-N4-(1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(500mg,1.18mmol)、DMAP(30.0mg,0.242mmol)和DIPEA(313mg,2.42mmol)的DMF(10.0mL)溶液中，然后在50℃下搅拌16hrs。待反应混合物冷却至室温后加入水(50.0mL)稀释，用乙酸乙酯(30.0mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝40/1)分离纯化，得到目标化合物(386mg,收率62.4％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:512.2[M+H]+。
步骤4：3-((2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将3-((5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(100mg,0.195mmol)的EtOH(4.00mL)溶液加至水合肼溶液(125mg,3.91mmol)和雷尼镍(0.50mL)的混合物中，然后在80℃下回流0.5hrs。待反应混合物冷却至室温后加水(10.0mL)稀释，用EA(5.00mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝10/1)分离纯化，得到目标化合物(100mg,收率81.9％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:482.2[M+H]+。
步骤5：3-((2-((1-(4-丙烯酰胺苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(15.2mg,0.168mmol)缓慢滴加至3-((2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(90mg,0.187mmol)和Et3N(56.7mg,0.560mmol)的DCM(4.00mL)溶液中，然后在室温搅拌2hrs。反应混合物加水(10.0mL)稀释，用DCM(5.00mL×3)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝10/1)分离纯化，得到目标化合物(70.0mg,收率63.1％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:536.3[M+H]+。
步骤6：N-(4-((4-((4-((1H-吡唑-3-基)氨基)-5-氯嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
室温下，将TFA(31.9mg,0.280mmol)加至3-((2-((1-(4-丙烯酰胺苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(50mg,0.093mmol)的DCM(3.00mL)溶液中，然后在室温下搅拌2hrs。反应混合物中加水(10.0mL)，用DCM(10.0mL×2)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:WatersXbridge C18 10um OBD 19*250mm；流动相:A-水(0.1％ NH4HCO3)/B-CH3CN；B％＝10％-35％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(6.89mg,收率13.8％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:436.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.01–12.31(m,1H),10.18(s,1H),9.20(s,1H),8.77(s,1H),8.32–7.88(m,1H),7.90–7.51(m,4H),7.57–6.90(m,3H),6.68–6.00(m,3H),6.03–5.47(m,1H),5.39–4.97(m,2H)。
实施例41：N-(4-((4-((5-氯-4-(4-氯-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡 唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将Pd(dppf)Cl2·DCM(399mg,0.545mmol)加至2,4,5-三氯嘧啶(1.00g,5.45mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(1.60g,5.45mmol)和K3PO4(2.31g,10.9mmol)的THF/水(20.0mL,4/1)的混合液中，然后在30℃下搅拌过夜。反应混合物过滤，滤饼用EA(20.0mL)洗涤，合并有机相，减压浓缩，残余物经硅胶层析(EA/PE＝1/19)分离纯化，得到目标化合物(916mg,收率55.3％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:214.9[M+H-100]+。
步骤2：2,5-二氯-4-(4-氯-1H-吡唑-3-基)嘧啶的合成
室温下，将NBS(424mg,3.17mmol)加至3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(500mg,1.59mmol)的AcOH(10.0mL)溶液中，然后在60℃下搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(EA/PE＝1/1)分离纯化，得到目标化合物(335mg,收率84.6％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:248.9[M+H]+。
步骤3：5-氯-4-(4-氯-1H-吡唑-3-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺的合成
常温下，将2,5-二氯-4-(4-氯-1H-吡唑-3-基)嘧啶(335mg,1.34mmol)加至1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(381mg,1.75mmol)和DIPEA(521mg,4.03mmol)的DMSO(10.0mL)溶液中，然后在130℃下搅拌5hrs。待反应混合物冷却至室温后减压浓缩，残余物经硅胶层析(MeOH/DCM＝1/19)分离纯化，得到目标化合物(531mg,收率91.7％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:431.1[M+H]+。
步骤4：4-氯-3-(5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
室温下，将(Boc)2O(548mg,2.51mmol)加至5-氯-4-(4-氯-1H-吡唑-3-基)-N-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺(541mg,1.25mmol)、DMAP(15.0mg,0.125mmol)和DIPEA(486mg,3.76mmol)的DCM(10.0mL)溶液中，然后在30℃下搅拌过夜。反应混合物减压浓缩，残余物经硅胶层析(MeOH/DCM＝3/97)分离纯化，得到目标化合物(311mg,收率46.7％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:531.3[M+H]+。
步骤5：3-(2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-4-氯-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将4-氯-3-(5-氯-2-((1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(241mg,0.454mmol)的EtOH(5.00mL)溶液加至水合肼(0.80mL)和雷尼镍(100mg)的混合液中，然后在室温搅拌1hr。反应混合物过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(MeOH/DCM＝1/19)分离纯化，得到目标化合物(186mg,收率81.8％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:401.1[M+H-100]+。
步骤6：3-(2-((1-(4-丙烯酰胺苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-4-氯-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯的合成
0℃，氮气保护下，将丙烯酰氯(34.0mg,0.371mmol)缓慢滴加至3-(2-((1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-4-氯-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(186mg,0.371mmol)和Et3N(75.0mg,0.742mmol)的DCM(5.00mL)溶液中，然后在室温搅拌3hrs。反应混合物减压浓缩，残余物经硅胶层析(MeOH/DCM＝3/97)分离纯化，得到目标化合物(113mg,收率54.8％,黄色液体)。LC-MS(ESI)m/z:455.2[M+H-100]+。
步骤7：N-(4-((4-((5-氯-4-(4-氯-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
常温下，将TFA(1.00mL)滴加至3-(2-((1-(4-丙烯酰胺苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-4-氯-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(113mg,0.203mmol)的DCM(5.00mL)溶液中，室温搅拌2hrs。反应混合物减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:Waters Xbridge C1810um OBD 19*250mm；流动相:A-水(0.1％NH4HCO3)/B-CH3CN；B％＝5％-35％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(23.55mg,收率25.4％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:455.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.25(s,1H),10.15(s,1H),9.87(s,1H),8.58(s,1H),8.08(s,1H),7.95(s,1H),7.63–7.58(m,3H),7.19(d,J＝8.0Hz,2H),6.46-6.39(m,1H),6.24(dd,J＝17.0,2.0Hz,1H),5.74(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),5.22(s,2H)。
实施例42：N-(4-((4-((5-氯-4-((2-(甲砜基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-1H- 吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
类似实施例13合成。
LC-MS(ESI)m/z:524.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.17(s,1H),9.41(s,1H),9.35-8.99(m,1H),8.45-7.99(m,2H),8.02-7.82(m,2H),7.74-7.30(m,6H),7.24-7.10(m,2H),6.53-6.37(m,1H),6.30-6.21(m,1H),5.82-5.70(m,1H),5.28-5.07(m,2H),3.24(s,3H)。
实施例43：N-(4-((4-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
步骤1：(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
室温下，将1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-胺(100mg,0.458mmol)、(Boc)2O(120mg,0.550mmol)、DIPEA(177mg，1.37mmol)和DMAP(11.0mg,0.092mmol)加至DMF(4.00mL)溶液中，然后在80℃下搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后加水(100mL)，用EA(100mL×2)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经Pre-TLC(PE/EA＝1/1)分离纯化，得到目标化合物(35.0mg,收率24.0％,黄色固体)。LC-MS(ESI)m/z:319.2[M+H]+。
步骤2：(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，将Pd/C(500mg,10％)加至(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(12.9g,9.11mmol)的MeOH(60.0mL)溶液中，然后在氢气氛围(15Psi)下室温搅拌过夜。反应混合物经硅藻土过滤，滤液减压浓缩，得到目标化合物(2.57g,粗品,棕色固体)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:289.2[M+H]+。
步骤3：(1-(4-丙烯酰胺苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
0℃下，将丙烯酰氯(863mg,9.54mmol)的THF(5.00mL)溶液滴加至(1-(4-氨基苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(2.50g,8.67mmol)和Et3N(2.63g,26.0mmol)的THF(50.0mL)溶液中，反应混合物在0℃下搅拌4小时。反应混合物中加水(100mL)，用EA(100mL×2)萃取，合并有机相，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝60/1～30/1)分离纯化，得到目标化合物(1.89g,收率63.6％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:343.2[M+H]+。
步骤4：N-(4-((4-氨基-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
室温下，将TFA(8.00mL)滴加至(1-(4-丙烯酰胺苄基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1.89g，5.52mmol)的DCM(20.0mL)溶液中，反应混合物室温搅拌3小时。减压浓缩，得到目标化合物(1.30g,粗品,棕色油)，直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)m/z:243.2[M+H]+。步骤5：N-(4-((4-((4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
将N-(4-((4-氨基-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺(221mg,0.910mmol)加至3-(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(199.67mg,0.46mmol)和DIPEA(353mg,2.73mmol)的DMSO(6.00mL)溶液中，反应混合物在90℃下搅拌3h。待反应混合物冷却至室温后加水(100mL)稀释，用EA(100mL×2)萃取,合并有机相，用无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，残余物经硅胶层析(DCM/MeOH＝80/1)分离纯化，得到目标化合物(260mg,收率87.6％,黄色油状物)。LC-MS(ESI)m/z:645.1[M+H]+。
步骤6：N-(4-((4-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺的合成
室温下，将NaOH水溶液(1mol/L,5.00mL)滴加至N-(4-((4-((4-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺(200mg,0.31mmol)的二噁烷(4.00mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌4h。反应混合物减压浓缩，残余物经Prep-HPLC(柱:Waters Xbridge C18 19*250mm 10um；流动相:A-水(0.1％NH3H2O)/B-CH3CN；B％＝10％-52％；20mL/min)分离纯化，得到标题化合物(26.5mg,收率12.8％,白色固体)。LC-MS(ESI)m/z:505.3[M+H]+。19F NMR(377MHz,DMSO-d6)δ-56.08,-57.18。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48–12.30(m,1H),10.28–9.97(m,2H),9.02–8.64(m,2H),8.41–8.25(m,1H),8.14–7.82(m,2H),7.72–7.54(m,3H),7.32–6.86(m,3H),6.50–6.37(m,1H),6.32–6.21(m,1H),5.83–5.70(m,1H),5.38–5.10(m,2H)。
类似地制备如下化合物：
实施例51：N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨 基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)-2-氰基-4,4-二甲基戊-2-烯酰胺
类似实施例28合成。
LC-MS(ESI)m/z:552.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48–12.41(m,1H),9.67–9.49(m,1H),9.11(brs,1H),8.61–8.53(m,1H),8.46–8.42(m,1H),8.38–8.28(m,1H),8.08–7.93(m,1H),7.70–7.49(m,2H),7.47–7.32(m,3H),7.32–7.08(m,3H),5.34–5.28(m,2H),0.92(s,9H)。
实施例52：(E)-N-(4-((4-((5-氯-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基) 氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺
类似实施例28合成。
LC-MS(ESI)m/z:526.3[M-H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(s,1H),10.16–10.06(m,1H),9.68–9.44(m,1H),8.60–8.51(m,1H),8.46–8.41(m,1H),8.40–8.28(m,1H),8.01–7.88(m,1H),7.66–7.54(m,4H),7.33–7.02(m,3H),6.82–6.60(m,1H),6.31–6.18(m,1H),5.26–5.21(m,2H),3.05(d,J＝5.4Hz,2H),2.17(s,6H)。
实施例53：(E)-4-((4-((4-((5-氯-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-2-基) 氨基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯基)氨基)-4-氧代丁-2-烯酸甲酯
类似实施例28合成。
LC-MS(ESI)m/z:529.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.52–12.35(m,1H),10.62(s,1H),9.76–9.47(m,1H),8.66–8.51(m,1H),8.50–8.39(m,1H),8.41–8.29(m,1H),7.97(s,1H),7.76–7.48(m,3H),7.40–7.06(m,4H),6.87–6.62(m,2H),5.26(s,2H),3.76(s,3H)。
对比例1：THZ-531
根据文献Nat.Chem.Biol.12(10):876-884(2016)(Zhang T et al.)记载的THZ-531的制备方法得到。
体外生物学实验实施例
如无特别说明，以下体外生物学实验实施例中所用的实验材料、试剂、操作和方法均可从市售渠道获得或基于现有技术容易地获知或制备。待测化合物指本发明的实施例化合物和对比例化合物THZ531。
实施例A：CDK12激酶活性抑制实验
采用Cisbio公司的Cisbio HTRF CDKs激酶活性检测试剂盒(Cisbio，#63ADK000CB11PEH)检测本申请的化合物对CDK12激酶活性的抑制作用。
CDK12蛋白购自无锡佰翱得生物科学有限公司(BioRTUS，定制)。
将待测化合物的10mM DMSO(Solarbio D8371)溶液用DMSO稀释5倍，再用DMSO进行3倍系列梯度稀释，一共稀释8个浓度(2000,666.7,222.2,74.1,24.7,8.23,2.74,0.91μM)。阳性对照化合物星形孢菌素(Staurosporine)溶液按照待测化合物同样的方式配制。向500μL 1x激酶缓冲液(10mM MgCl2,1mM DTT,100mM KCL以及1X的酶缓冲液)中加入10μg CDK12蛋白配制得到浓度为20ng/μL的CDK12酶溶液。
使用分液器Echo 550向384孔反应板的化合物孔和阳性对照孔中分别转移50nL的待测化合物溶液和阳性对照化合物溶液，阴性对照孔中加入50nL的1x激酶缓冲液。再分别向每孔中加入5μL的CDK12酶溶液，在室温下预孵育10分钟。再分别向每孔中加入5μL底物混合液(包含1μM的生物素标记RB蛋白底物以及60μM ATP，均来自检测试剂盒)，混匀后30℃孵育90分钟。再分别向每孔中加入10μL检测液(含有0.33nM EUK标记的抗磷酸化RB(pRB(Ser780)抗体(pRb(Ser780)mAb-Eu Cryptate)以及62.5nM链霉亲和素标记的XL665检测试剂，来自检测试剂盒)，4℃孵育过夜。按照试剂盒的说明，使用多功能酶标仪(TECAN，SPARK)读取信号，GraphPad7.0软件统计分析数据，计算出IC50值。
结果显示，本发明实施例的化合物显示出良好的抑制CDK12激酶的活性，其IC50<500nM，优选<200nM，更优选<100nM，最优选<70nM。作为示例，下表4具体提供了一些实施例化合物的CDK12激酶抑制IC50值。表4中的“+++++”表示测试化合物抑制CDK12激酶活性的IC50为<70nM,“++++”表示测试化合物抑制CDK12激酶活性的IC50为70～100nM,“+++”表示测试化合物CDK12激酶活性的IC50为100～200nM，“++”表示测试化合物抑制CDK12激酶活性的IC50为200～500nM，“+”表示测试化合物抑制CDK12激酶活性的IC50为500～1000nM。
表4.CDK12激酶抑制活性
/>
实施例B：细胞增殖抑制实验
将在RPMI-1640培养基(Gibco,#11875093)(含10％ FBS和10％P/S)中培养的HCC70细胞(人乳腺癌细胞，浙江美森细胞科技有限公司(CTCC-007-0281))以每孔3×103个细胞的密度接种于96孔板内。将板置于37℃、5％ CO2培养箱中培养过夜(过夜贴壁步骤)。第二天，每孔加入用100％ DMSO稀释的、不同浓度的测试化合物(DMSO终浓度为0.2％)。于37℃、5％ CO2培养箱中继续培养72hrs后，每孔加入10μL CCK8(Beyotime，#C0042)。37℃、5％ CO2培养箱中再孵育2.5-4hrs，然后用Tecan酶标仪在450nm处检测其吸光值，GraphPad7.0软件统计分析数据，计算出IC50值。
类似于上述操作进行了Jurkat细胞(人外周血白血病T细胞，科佰生物(DAMZ,ACC-282)增殖抑制实验，例外的是，采用每孔5×103个细胞的密度和不进行过夜贴壁步骤。
本实验的具体说明如下：
实验原理
Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒，是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】在电子耦合试剂(也就是细胞是活的，有呼吸，有能量代谢)存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色甲瓒产物formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
实验材料
(1)待测化合物：本发明的化合物，和来自对比例的对比化合物THZ-531：
(2)实验所用细胞
HCC70：人乳腺癌细胞，浙江美森细胞科技有限公司(CTCC-007-0281)
Jurkat：人外周血白血病T细胞，科佰生物(DAMZ,ACC-282)
试剂及耗材
实验步骤
1.化合物准备
(1)母液配制：将待测试化合物用DMSO(Solarbio D8371)溶解成10mM的母液于1.5mL EP管中，保存在4℃冰箱中，备用。(母液建议保存于-20℃，可储存约半年)
(2)化合物稀释：化合物母液用DMSO梯度稀释到一定的浓度，待用。
(3)化合物稀释：化合物先用培养基稀释到一个中间浓度，而后加入一定的体积到96孔板中，得到设定的终浓度，保证DMSO的终浓度<0.2％。
2.实验孔板布局:96孔板
3.细胞给药处理
对于HCC70细胞：
(1)HCC70细胞培养：RPMI 1640(Gibco 11875093)+10％FBS(Gibco 10099141C)+10％Penicilin/Streptomycin(10％ P/S)(Absin abs9244)。
(2)细胞铺板：HCC70细胞以3×103个细胞/孔铺于96孔板，过夜贴壁。
(3)细胞给药：隔天，梯度稀释的化合物先用培养基稀释到一个中间浓度，而后加入一定的体积到96孔板中，得到设定的终浓度，保证DMSO的终浓度<0.2％。轻轻拍打板壁，使其混合均匀，37℃培养箱(含5％CO2)孵育72h。
对于Jurkat细胞：
(1)Jurkat细胞培养：RPMI 1640(Gibco 11875093)+10％FBS(Gibco 10099141C)+10％Penicilin/Streptomycin(10％ P/S)(Absin abs9244)
(2)细胞铺板：Jurkat细胞以5×103个细胞/孔铺于96孔板
(3)细胞给药：梯度稀释的化合物先用培养基稀释到一个中间浓度，而后加入一定的体积到96孔板中，得到设定的终浓度，保证DMSO的终浓度<0.2％。轻轻拍打板壁，使其混合均匀，37℃培养箱(含5％CO2)孵育72h。
4.检测及数据处理
(1)细胞存活率检测：
(a)96孔每孔加入10μL CCK-8，37℃培养箱(含5％ CO2)孵育2.5-4h。
(b)在TECAN SPARK多功能酶标仪上于450nm处检测吸光值。
(c)根据吸光值直接计算细胞的存活率。
细胞存活率(％)＝[(OD450,实验孔-OD450,空白孔)/(OD450,对照孔-OD450,空白孔)]x 100
(2)数据处理：采用GraphPad软件统计数据，得出IC50值。
结果显示，实施例的化合物对HCC70细胞增殖显示出良好的抑制作用，其IC50在1～3000nM、优选1～2000nM、更优选1～1000nM、还优选1～500nM、最优选1～200nM的范围。大部分实施例的化合物在HCC70细胞抗增殖方面表现出了明显优于对比化合物THZ-531的活性。作为示例，下表5具体提供了一些实施例化合物对HCC70细胞增殖的抑制活性IC50值。表5中的“+++++”表示测试化合物对HCC70细胞增殖的抑制的IC50小于50nM,“++++”表示测试化合物对HCC70细胞增殖的抑制的IC50 50～100nM,“+++”表示测试化合物对HCC70对细胞增殖的抑制的IC50为100～200nM,“++”表示测试化合物对HCC70细胞增殖的抑制的IC50为200～500nM，“+”表示对测试化合物对HCC70细胞增殖的抑制的IC50为500～1000nM。
表5：本发明的化合物对HCC70细胞增殖的抑制活性
结果还显示，本发明的化合物、特别是实施例的化合物在Jurat细胞增殖抑制实验中也显示出明显的抑制活性，IC50在1～3000nM、优选1～2000nM、更优选1～1000nM、还优选1～500nM、最优选1～200nM的的范围。作为示例，下表6具体提供了一些实施例化合物对Jurkat细胞增殖的抑制活性IC50值。
还分别采用了人结肠癌HT-29细胞系、人横纹肌肉瘤A-673细胞系、人小细胞肺癌H1048细胞系、人乳腺癌MDA-MB-436细胞系、人乳腺癌MDA-MB-468细胞系、人胃癌HGC-27细胞系、人卵巢腺癌OVCAR3细胞系和人胃癌NCI-N87细胞系类似地进行了肿瘤细胞增殖抑制实验。结果显示，本发明的化合物、特别是实施例的化合物在这些细胞增殖抑制实验中也显示出明显的抑制活性，IC50在1～3000nM、优选1～2000nM、更优选1～1000nM、还优选1～500nM、最优选1～200nM的范围。
表6：本发明的化合物对Jurkat细胞增殖的抑制活性
实施例编号. Jurkat抑制IC50(nM)
1 16.8
2 12.8
4 14.8
5 23.3
6 6.2
7 15.8
8 29.7
THZ-531 75.1
实施例C：GSH反应性测试
GSH(谷胱甘肽)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，在人体内广泛分布。GSH作为一种重要的抗氧化剂，能够清除掉人体内的自由基，从而保护蛋白质和酶等分子生理功能的正常发挥。共价抑制剂的亲电弹头可能会与GSH结合，从而扰乱细胞的氧化还原环境。因此这种非靶点效应可能会导致特殊的毒性。
通过以下方法测试了本申请的化合物与GSH的反应性：
1)将本发明化合物和阳性对照化合物依鲁替尼(上海麦克林生化科技有限公司，C12288704)先用DMSO配制成2mM储备液，再用50％乙腈-水溶液稀释成100μM的待测化合物溶液，备用。
2)将内参化合物卡马西平(上海麦克林生化科技有限公司，C833320)用乙腈(上海麦克林生化科技有限公司，A800362)配置成10ng/mL溶液，作为内标工作溶液，备用。
3)将还原型谷胱甘肽GSH(萨恩化学技术上海有限公司，EQTRRE7Q)用0.2mM磷酸盐缓冲液(PB，pH7.4)配制成10mM GSH工作溶液，备用。
4)取20μL待测化合物或阳性对照化合物溶液至1.5mL离心管中，加入980μL PB溶液，涡旋混匀。
5)从上述离心管中取50μL化合物-PB溶液至一新的1.5mL离心管中，然后放在37℃水浴预孵育5min；上述配制好的10mM GSH工作溶液也放在37℃水浴预孵育5min。
6)向每个孵育管中加入50μL的预孵育的10mM GSH工作溶液，启动反应并计时。
7)分别在5min、30min、60min从37℃水浴中取出一个孵育样品，取出后，立即加入300μL卡马西平内标工作溶液终止反应，涡旋混匀，分别得到T5、T30、T60样品。
8)T0样品的制备：在含有50μL待测化合物-PB溶液的离心管中，先加入300μL卡马西平内标工作液，再加入50μL 0.2mM PB溶液，涡旋混匀。
9)所有样品(T0，T5，T30，T60)在6℃的离心机中于5500g离心10min。
10)分别取上清液150μL到新的离心管，再加入150μL超纯水，涡旋混匀，LC-MS/MS进样分析。
数据分析
化合物稳定性以与GSH孵育一定时间后原药的剩余量表示。原药剩余量计算公式如下：
原药剩余量％＝At/A0×100％
At：各个孵育时间点(5min，30min，60min)待测化合物与内标峰面积比
A0：0min(T0)样品待测化合物与内标峰面积比
结果显示，本发明实施例的化合物的GSH反应能力弱，表明没有可能导致特质性肝毒性的潜在的反应性代谢物形成，脱靶的可能性小，具有较好的成药性。作为示例，下表7具体提供了一些实施例化合物的GSH反应性数据。
表7.本发明的化合物的GSH反应性
实施例 T1/2(min)
1 91.2
2 58.2
28 182
29 49.9
32 82.5
通过引用将本发明中所提及的所有参考文献均完整合并入本文，就如同每一篇文献均单独列出一样。应理解，在阅读了本发明的公开内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落入本申请所附权利要求书所限定的范围内。

Claims (16)

1.式(I)化合物，或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，
其中
X为N或-C(＝O)-；
Y为NRy1或CRy2；m＝1或2；当m为2时，两个Y可以相同或不同；
Z为N或C；
表示所处的环是芳香性的；
Ry1各自独立地为H或C1-6烷基；
Ry2各自独立地为H、卤素、CN或C1-6烷基；
R1和R3各自独立地选自H；卤素；CN；-OR4；-NR5R6；C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基或3-10元杂环烃基，其各自任选被一个或多个选自卤素、CN和羟基的取代基取代；和C6-10芳基或5-10元杂芳基，其各自任选被一个或多个R7取代；
R2为氢、卤素、C1-3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷基、C1-3卤代烷氧基或环丙基；
R4为H；任选被卤素、CN和/或C3-8环烷基取代的C1-6烷基；或任选被卤素、CN和/或C3-8环烷基取代的C3-8环烷基；
R5和R6各自独立地选自H；C1-6烷基、C3-8环烷基或3-10元杂环烃基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、CN、OH、C1-6烷基和C3-8环烷基的取代基取代；和C6-10芳基或5-7元杂芳基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、CN、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、-O-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、-CO-R8、-CO-NHR8、-SO-R8、-SO2-R8、和-P(＝O)R8R8的取代基取代；或者R5和R6可以与它们连接的N一起形成4-7元杂环烃基；
R7各自独立地选自卤素、CN、OH、-NH2、-NH(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、-C1-3亚烷基-C1-6烷氧基、C3-8环烷基、C3-8环烷氧基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、和-C3-8亚环烷基-C1-6烷基；
R8各自独立地选自C1-6烷基和C3-8环烷基，优选C1-6烷基；
环A选自C6-10亚芳基、5-10元亚杂芳基、C5-10亚环烷基和5-10元亚杂环烷基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、C1-3烷基和CN的取代基取代；
L为NH或键，优选为NH；
G为其中Rg1、Rg2和Rg3各自独立地选自H、CN、卤素、C1-6烷基、C1-6烷基-O-CO-、N(C1-3烷基)(C1-3烷基)-C1-3亚烷基-、或5-10元杂环烷基-C1-3亚烷基-；和
n＝0或1。
2.式(I)化合物，或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，
其中
X为N或-C(＝O)-；
Y为NRy1或CRy2；m＝1或2；当m为2时，两个Y可以相同或不同；
Z为N或C；
表示所处的环是芳香性的；
Ry1各自独立地为H或C1-6烷基；
Ry2各自独立地为H、卤素、CN或C1-6烷基；
R1和R3各自独立地选自H；卤素；CN；-OR4；-NR5R6；C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基或3-10元杂环烃基，其各自任选被一个或多个选自卤素、CN和羟基的取代基取代；和C6-10芳基或5-10元杂芳基，其各自任选被一个或多个R7取代；
R2为氢、卤素、C1-3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷基、C1-3卤代烷氧基或环丙基；
R4为H；任选被卤素、CN和/或C3-8环烷基取代的C1-6烷基；任选被卤素、CN和/或C3-8环烷基取代的C3-8环烷基；或任选被卤素、CN和/或C3-8环烷基取代的3-8元杂环烷基；
R5和R6各自独立地选自H；C1-6烷基、C3-8环烷基或3-10元杂环烃基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、CN、OH、C1-6烷基和C3-8环烷基的取代基取代；和C6-10芳基或5-7元杂芳基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、CN、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、-O-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、-CO-R8、-CO-NHR8、-SO-R8、-SO2-R8、和-P(＝O)R8R8的取代基取代；或者R5和R6可以与它们连接的N一起形成4-7元杂环烃基；
R7各自独立地选自卤素、CN、OH、-NH2、-NH(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、-C1-3亚烷基-C1-6烷氧基、C3-8环烷基、C3-8环烷氧基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、和-C3-8亚环烷基-C1-6烷基；
R8各自独立地选自C1-6烷基和C3-8环烷基，优选C1-6烷基；
环A选自C6-10亚芳基、5-10元亚杂芳基、C5-10亚环烷基和5-10元亚杂环烷基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、C1-3烷基和CN的取代基取代；
L为NH或键，优选为NH；
G为其中Rg1、Rg2和Rg3各自独立地选自H、CN、卤素、C1-6烷基、C1-6烷基-O-CO-、N(C1-3烷基)(C1-3烷基)-C1-3亚烷基-、或5-10元杂环烷基-C1-3亚烷基-；和
n＝0或1。
3.根据权利要求1或2所述的化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，其中选自/>优选地，/>选自/>更优选地，选自/>
4.根据权利要求1-3任一项的化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，其中R2为卤素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷基或C1-3卤代烷氧基；优选地，R2为卤素、C1-3卤代烷基或C1-3卤代烷氧基；更优选地，R2为卤素或C1-3卤代烷基。
5.根据前述权利要求任一项的化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，其中
R1和R3之一为H，且另一个为：
H；卤素；CN；-OR4；-NR5R6；C1-6烷基，任选被一个或多个选自卤素、CN和羟基的取代基取代；或者C6-10芳基或5-10元杂芳基，各自任选被一个或多个R7取代；
优选地，R1为H，且R3为：
H；-OR4；-NR5R6；C1-6卤代烷基；C1-6羟基烷基；或者C6-10芳基或5-10元含氮杂芳基，各自任选被一个或多个R7取代；
更优选地，R1为H，且R3为：
H；-OR4；-NR5R6；或者C6-10芳基或5-10元含氮杂芳基，各自任选被一个或多个R7取代；
最优选地，R1为H，且R3为：
-OR4；-NR5R6；或者苯基、吡唑基、吲哚基、吡咯并吡啶基、吡唑并吡啶基或吲唑基，
各自任选被一个或多个R7取代。
6.根据前述权利要求任一项的化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，其中R4为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6氰基烷基、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-、C3-8环烷基、C3-8卤代环烷基、C3-8氰基环烷基或含1、2或3个各自独立地选自N或O的杂原子的3-8元杂环烷基；优选地，R4为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-、C3-8环烷基或含1个选自N或O的杂原子的3-8元杂环烷基；更优选地，R4为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-或含1个O原子的3-8元杂环烷基；最优选地，R4为C1-6烷基、C3-8环烷基-C1-6亚烷基-或含1个O原子的4-6元杂环烷基。
7.根据前述权利要求任一项的化合物，其中R5和R6之一为H，且另一个选自H；C1-6烷基，任选被一个或多个独立地选自卤素、CN和OH的取代基取代；和C6-10芳基或5-7元杂芳基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、CN、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、-O-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、-CO-R8、-CO-NHR8、-SO-R8、-SO2-R8、或-P(＝O)R8R8的取代基取代；
优选地，R5和R6之一为H，且另一个选自C6-10芳基或5-7元杂芳基，各自任选被一个或多个独立地选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-CO-R8、-SO-R8、-SO2-R8或-P(＝O)R8R8的取代基取代；
更优选地，R5和R6之一为H，且另一个选自C6-10芳基或5-7元含氮杂芳基如吡唑基，各自任选被一个或多个独立地选自C1-6烷基、-SO2-R8、和-P(＝O)R8R8的取代基取代；
最优选地，R5和R6之一为H，且另一个选自苯基，各自任选被一个或多个独立地选自-SO2-R8和-P(＝O)R8R8的取代基取代。
8.根据前述权利要求任一项的化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，其中R7各自独立地选自卤素、CN、OH、-NH2、-NH(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、和-C3-8亚环烷基-C1-6烷基；
优选地，R7各自独立地选自卤素、CN、OH、-NH2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基、-C1-3亚烷基-C3-8环烷基、和-C3-8亚环烷基-C1-6烷基；
更优选地，R7各自独立地选自卤素、CN、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、和-C1-3亚烷基-C3-8环烷基。
9.根据前述权利要求任一项的化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，其中环A选自亚苯基、5-7元亚杂芳基、C5-8亚环烷基和5-8元亚杂环烷基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素、C1-3烷基和CN的取代基取代；
优选地，环A选自亚苯基、5-7元亚杂芳基、C5-8亚环烷基和5-8元亚杂环烷基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素的取代基取代；
更优选地，环A选自亚苯基、亚吡啶基、亚哒嗪基、亚嘧啶基、亚吡嗪基、亚环己基和亚哌啶基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素的取代基取代；
最优选地，环A选自亚苯基和亚吡啶基，各自任选被一个或多个独立地选自卤素的取代基取代。
10.根据前述权利要求任一项的化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，其中G为其中Rg1、Rg2和Rg3各自独立地选自H、CN、卤素、C1-6烷基、C1-6烷基-O-CO-、二甲氨基-C1-3亚烷基-、哌啶基-C1-3亚烷基-、吡咯烷基-C1-3亚烷基-、氮杂环丁基-C1-3亚烷基-、任选被氧杂环丁基取代的哌嗪基-C1-3亚烷基-、吗啉基-C1-3亚烷基-、或5-10元氮杂螺环烷基-C1-3亚烷基；
或者，G为其中Rg1、Rg2和Rg3各自独立地选自H、CN、卤素、C1-6烷基、C1-6烷基-O-CO-、和N(C1-3烷基)(C1-3烷基)-C1-3亚烷基-；
或者，G为其中Rg1和Rg2各自独立地选自H、C1-6烷基、C1-6烷基-O-CO-、和N(C1-3烷基)(C1-3烷基)-C1-3亚烷基-，且Rg3为H或CN；
或者，G为
优选地，G为
11.化合物，选自：
12.药物组合物，包含权利要求1-11任一项的化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药，以及一种或多种可药用的载体、稀释剂或赋形剂。
13.权利要求1-11任一项的化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药在制备药剂中的用途，所述药剂用于治疗或预防CDK12相关疾病或病症。
14.根据权利要求12-13任一项的组合物、方法或用途，其中所述疾病选自异常细胞增殖性疾病、强直性肌营养不良Ⅰ型、感染(例如病毒如疱疹、HIV感染、真菌感染)、炎性病症(例如类风湿性关节炎、骨关节炎)、自身免疫性疾病(例如牛皮藓、狼疮、Ⅰ型糖尿病、糖尿病性肾病、多发性硬化、肾小球性肾炎)、心血管疾病(例如心肌梗塞、中风、动脉粥样硬化、手术后血管狭窄)、神经变性疾病(例如阿尔兹海默症、帕金森病)和由辐射引起的造血毒性疾病(例如骨髓抑制、嗜中性白血球减少症、白细胞减少症、贫血)。
15.根据权利要求12-13任一项的组合物、方法或用途，其中CDK12相关疾病或病症是肿瘤或癌症，例如乳腺癌、卵巢癌、***癌、中枢神经***肿瘤(例如脊柱肿瘤、脑干胶质瘤、多形性胶质母细胞瘤、星形细胞瘤)、食管癌、肠癌、胃癌、肝癌、胰腺癌(例如，胰腺导管癌、胰腺内分泌肿瘤)、结直肠癌(例如结肠癌、直肠癌)、肺癌(例如非小细胞肺癌、小细胞肺癌、支气管肺泡细胞癌)、肾癌、皮肤癌(例如良性和恶性黑色素瘤、基底肉瘤)、成胶质细胞瘤、神经鞘瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、鳞状细胞癌、垂体腺瘤、肉瘤(例如尤文氏肉瘤、血管肉瘤、脂肪肉瘤、肌肉瘤)、骨软骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、***瘤、睾丸肿瘤、子宫癌(例如子***、子宫内膜癌)、头颈瘤(例如上颌骨瘤、咽癌、喉癌、舌癌、口内癌)、多发性骨髓瘤、良性和恶性淋巴瘤(例如网状细胞肉瘤、淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤、套细胞淋巴瘤)、真性红细胞增多症、白血病(例如急性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病)、甲状腺瘤、输尿管肿瘤、膀胱瘤、胆囊癌、胆管癌、绒毛膜上皮癌、儿科肿瘤(例如尤因家族性肉瘤、维尔姆斯肉瘤、横纹肌肉瘤、胚胎睾丸瘤、视网膜母细胞瘤、肾母细胞瘤)。
16.药物组合产品，包含权利要求1-11任一项的化合物或其可药用的盐、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、溶剂合物或前药与其它活性剂。
CN202310864407.8A 2022-07-15 2023-07-14 2-氨基嘧啶类化合物或其盐及其制备方法和用途 Pending CN117430589A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210856335.8 2022-07-15
CN202210856335 2022-07-15

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN117430589A true CN117430589A (zh) 2024-01-23

Family

ID=89557211

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310864407.8A Pending CN117430589A (zh) 2022-07-15 2023-07-14 2-氨基嘧啶类化合物或其盐及其制备方法和用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN117430589A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI766882B (zh) 新穎化合物類
EP3377482B1 (en) Modulators of ror-gamma
WO2016147659A1 (en) Bicyclic imidazolo derivative
AU2013343105B2 (en) Heteroaromatic compounds as dopamine D1 ligands
EP2763533B1 (en) Triazolyl pde10 inhibitors
KR20140041583A (ko) Ｌｒｒｋ2 키나제 활성의 억제제
WO2016009297A1 (en) Pyridine derivatives as muscarinic m1 receptor positive allosteric modulators
EP3134087B1 (en) Heteroaromatic compounds and their use as dopamine d1 ligands
US20130096144A1 (en) Isoindolinone and pyrrolopyridinone derivatives as akt inhibitors
US9856263B2 (en) Heteroaromatic compounds and their use as dopamine D1 ligands
US9850232B2 (en) Heteroaromatic compounds and their use as dopamine D1 ligands
US10077272B2 (en) Heteroaromatic compounds and their use as dopamine D1 ligands
CN116669738A (zh) 一种作为sos1抑制剂的嘧啶并吡啶酮类衍生物、其制备方法及用途
EP3137469B1 (en) Heterocyclic compounds and their use as dopamine d1 ligands
CN117430589A (zh) 2-氨基嘧啶类化合物或其盐及其制备方法和用途
OA18535A (en) Heteroramatic Compounds and their use as Dopamine D1 Ligands.

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication