CN117304368B - 一种透明质酸钠与胶原五肽的组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种透明质酸钠与胶原五肽的组合物及其应用，涉及多肽医疗美容化妆品技术领域。该组合物包括透明质酸钠或透明质酸钠衍生物；上述透明质酸钠衍生物，包括透明质酸钠交联衍生物；所述交联衍生物包括单链分子量为1‑8万、8‑15万、15‑30万、30‑80万和80‑200万的透明质酸钠中的一种或几种的混合交联物。一种透明质酸钠与胶原五肽的组合物及其应用，将透明质酸钠与胶原五肽结合应用，具有良好的刺激胶原再生能力，且产生协同增强的作用；同时加入辅料甘露醇或其衍生物，进一步提升组合物的刺激胶原再生能力。
Description
技术领域
本发明属于多肽医疗美容化妆品技术领域，具体涉及一种透明质酸钠与胶原五肽的组合物及其应用。
背景技术
透明质酸（HA）由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-葡糖胺的重复聚合二糖组成。其结构稳定性取决于二糖的立体化学性质。HA在动物与人体中的天然丰度、降解性和生物相容性使其在在调节各种生物过程和维持体内稳态方面中发挥着多方面的作用，例如皮肤修复、癌症诊断、伤口愈合、组织再生、抗炎和免疫调节。透明质酸拥有捕获约为其重量1000倍的水的能力，极佳的补水锁水能力使其成为医美、化妆品的主要成分之一。此外，较高浓度的透明质酸分子会纠缠在一起，形成一个连续多孔的网状结构。由于分子之间和分子内部相互排斥的增加，这种网状结构会产生膨胀压力，努力让自身结构相对松散。当外部压力施加到透明质酸网时，分子网络收缩，外部压力撤回时，由于内部膨胀压力，透明质酸网络将弹回到其原始形状，或者获得新的形状。由于其显著的流体动力学特性，它被用于面部注射时，能够为真皮的水合作用和生物力学完整性中发挥重要作用，为面部皮肤提供了弹性和延展性。
胶原五肽又被称为五肽-3或者五肽-4，氨基酸序列为赖氨酸-苏氨酸-苏氨酸-赖氨酸-丝氨酸（KTTKS）。由于其具有通过触发细胞过程增强皮肤重塑的能力，可以抑制胶原酶活性和增加细胞外基质（ECM）含量等，被视为“信号肽”。KTTKS是I型胶原的一个子片段，最早由田纳西大学的一组研究人员于1993年发现，是能够保持刺激ECM合成所需的大量母体肽80%原始活性的最小序列。对于KTTKS的刺激作用对I型胶原表达具有特异性。
包含胶原五肽在内的多肽通常不适合全身输送，因为其对广泛的蛋白水解降解、对极端pH条件（胃）敏感。局部应用提供了更直接的到达作用部位的途径，且途径代谢过程大大降低，可获得更高的生物利用度。然而，在胶原五肽配制成局部成分时需要考虑它们在皮肤上的被动渗透和渗透潜力。首先，KTTKS由于其亲水特性，极难被角质层吸收分配。其次，即使小部分扩散通过角质层，KTTKS有极大可能在缓慢扩散过程中与蛋白水解酶发生明显的相互作用。上述两点为其的广泛使用增加了难点。胶原五肽在化妆品中通常以亲油性改性体形式存在，通过棕榈酰基团改性增加皮肤透过率，但是能够达到真皮层的有效利用率仅为3%，且棕榈酰基团的引入使其无法用于常规水溶性皮肤产品中，也限制了其扩大应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种透明质酸钠与胶原五肽的组合物及其应用，将透明质酸钠与胶原五肽结合应用，具有良好的刺激胶原再生能力，且产生协同增强的作用；同时加入甘露醇或其衍生物，进一步提升组合物的刺激胶原再生能力。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种透明质酸钠衍生物，包括透明质酸钠交联衍生物；所述交联衍生物包括单链分子量为1-8万、8-15万、15-30万、30-80万和80-200万的透明质酸钠中的一种或几种的混合交联物。
具体而言，透明质酸钠交联衍生物的交联方式可以选用传统热交联、冷冻解冻交联、电子束交联、辐照交联等物理交联方式。
一种组合物，包括上述的非交联透明质酸钠或交联透明质酸钠。本发明首次将透明质酸钠与胶原五肽的联合应用获得组合物产品，开拓本产品中核心成分之一：胶原五肽的创新应用场景，提供一种生物利用度远高于传统外用涂抹的方式，将HA与KTTKS结合应用并作***研究，证明二者均具有良好的刺激胶原再生能力，且联合使用时效果更佳，产生协同增强的作用；该组合物产品在皮下植入、水光、微针导入等场景方面均能够应用；并且进一步明确胶原五肽的极限生物安全性浓度，为产品安全性与有效性提供保证。
具体而言，组合物还包括胶原五肽（KTTKS）。
具体而言，组合物还包括辅助成分，包括甘露醇、山梨醇、葡聚糖中的一种或几种；上述辅助成分的使用浓度为0.5~10wt%。本发明提供一种透明质酸钠、多肽、辅料的有效配比的技术方案，有助于皮肤年轻化，效果优异。在以HA+KTTKS为主体的前提下，增加甘露醇等作为辅助成分，重点在于上述辅料的的抗炎、吸附自由基能力，起到重要的辅助效果，明显提升组合物的作用效果，更好的促进TGF-β的表达，进而促进胶原蛋白的生成，且具有更佳的MMP-1抑制效果，显著增强刺激胶原再生能力。
更优选地，上述组合物中可采用甘露醇衍生物替代甘露醇。
需要说明的是，上述甘露醇衍生物包括5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸改性甘露醇的产物。本发明采用5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸改性甘露醇制备甘露醇衍生物，表现出更佳的生物活性，其抗氧化能力更强，对自由基的吸附去除能力显著提升；作为辅助成分加入组合物中，各组分复配使用，起到更佳的协同增强效果，进一步促进TGF-β的表达，进而促进Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的生成，增加对MMP-1抑制效果。
上述甘露醇衍生物的制备方法，包括：取5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸与甘露醇混合反应制备得到甘露醇衍生物。
进一步具体的，甘露醇衍生物的制备方法，包括：
取5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸加入干燥吡啶，搅拌溶解，然后冰水浴下缓慢加入D-甘露醇，搅拌2~4h，放置过夜，加入1/3体积量的冷水，常温下搅拌2~4h，然后边搅拌边加入至含有浓盐酸的冰水中，减压抽滤，无水乙醇洗涤至中性，脱水，接着无水乙醇重结晶、真空干燥得到甘露醇衍生物。
具体而言，5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸与吡啶的固液比为0.5~0.7g:1mL；D-甘露醇与5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸的摩尔比为1:6~8；冰水与吡啶的体积比为2.5~3.5:1；浓盐酸与冰水的体积比为1:2~3。
更优选地，一种透明质酸钠衍生物，包括酯化衍生物，其化学结构以透明质酸钠链为主链结构，化学接枝修饰含氯化合物；
上述含氯化合物包括N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪和1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷中的至少一种。
具体而言，含氯化合物通过其结构中的氯与透明质酸钠结构中的羧基化学反应连接于透明质酸钠链结构上。
具体而言，透明质酸衍生物的制备方法，包括：取N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪和/或1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷与透明质酸钠混合，在四丁基氯化铵条件下反应制备得到透明质酸衍生物。
进一步具体的，上述透明质酸钠衍生物的制备方法，包括：
取透明质酸钠、N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪和1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷，加入四丁基氯化铵、N,N-二甲基二酰胺，搅拌混合均匀，升温至60~70℃，搅拌反应2~3d，减压回收N,N-二甲基二酰胺，加入水，并调节pH至3~4，析出沉淀，过滤、真空干燥得到透明质酸钠衍生物。
具体而言，透明质酸钠、N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪的质量比为1:0.1~0.2；N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪和1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷的摩尔比为1:0.4~0.6；四丁基氯化铵与透明质酸钠的质量比为1:0.3~0.4。
具体而言，透明质酸钠与N,N-二甲基二酰胺的固液比为0.2~0.35g:1mL；水与N,N-二甲基二酰胺的体积比为1.4~1.8:1。
本发明还公开了上述透明质酸钠衍生物在制备医疗美容填充剂、化妆品或护肤品或药剂中的用途。
本发明又公开了上述组合物在制备医疗美容填充剂、化妆品或护肤品或药剂中的用途。
一种水溶液产品，包括上述组合物。
具体而言，水溶液产品中透明质酸钠或透明质酸钠衍生物的浓度为0.2~1.wt%；优选0.5~1wt%。
具体而言，水溶液产品中胶原五肽的浓度为2~2000ppm，优选20~500ppm；更优选50~100ppm。
一种粉剂产品，包含上述组合物。
具体而言，粉剂产品中透明质酸钠或透明质酸钠交联衍生物，使用时经水溶解后，浓度为0.2~1.5wt%。
具体而言，粉剂产品中胶原五肽，使用时经水溶解后，浓度为2~2000ppm。
相比于现有技术，本发明具有如下有益效果：
本发明将透明质酸钠与胶原五肽的联合应用获得组合物产品，联合使用时效果更佳，产生协同增强的作用，显著增强刺激胶原再生能力，增加对MMP-1抑制效果。同时，本发明提供一种透明质酸钠、多肽、甘露醇的有效配比的技术方案，有助于皮肤年轻化，效果优异；采用5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸改性甘露醇制备甘露醇衍生物，表现出更佳的抗氧化能力，作为辅助成分加入组合物中，各组分复配使用，起到更佳的协同增强效果，进一步促进TGF-β的表达，进而促进胶原蛋白的生成，增加对MMP-1抑制效果，显著增强刺激胶原再生能力。
因此，本发明提供了一种透明质酸钠与胶原五肽的组合物及其应用，将透明质酸钠与胶原五肽结合应用，具有良好的刺激胶原再生能力，且产生协同增强的作用；同时加入甘露醇或其衍生物，进一步提升组合物的刺激胶原再生能力。
附图说明
图1为本发明实施例中细胞毒性测试结果；
图2为本发明实施例中不同浓度胶原五肽水溶液样品处理后测定相关抗衰基因的相对表达；
图3为本发明实施例中不同浓度HA水溶液样品处理后测定相关抗衰基因的相对表达；
图4为本发明实施例中透明质酸钠衍生物以及透明质酸钠的红外测试结果；
图5为本发明实施例中甘露醇衍生物的红外测试结果。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合实施例对本发明的各实施方式进行详细的阐述。然而，本领域的普通技术人员可以理解，在本发明各实施方式中，为了使读者更好地理解本申请而提出了许多技术细节。但是，即使没有这些技术细节和基于以下各实施方式的种种变化和修改，也可以实现本申请所要求保护的技术方案。
实施例1：
一种包含透明质酸钠与胶原五肽的水溶液产品，按照表1配制系列浓度产品：
表1 样品浓度配比
产品细胞毒性测定
MTT法测试细胞毒性，将HA与含有牛胎血清的DMSO溶剂进行混合作为液体培养基，培养基中HA浓度模拟产品中HA的浓度。
测试结果如图1所示。从图中分析可知，选取0.2%、0.6%、1.2%三种浓度的透明质酸钠分别加入不同浓度的KTTKS，所得溶液无细胞毒性反应。
实施例2：
HA+KTTKS的协同作用机制探究
本探究实验使用基于Luminex200悬浮芯片多重检测***的QuantiGene Plex（QGP）方法， 该方法是一种结合了分支DNA技术的检测方法，其通过信号扩增直接测量RNA转录产物。Luminex200悬浮芯片多重检测***结合了微球双荧光标记和液流分散激光自动检测技术，能够实现多通道高通量的核酸和抗体等分析。
本实验中，以50岁的衰老人成纤维细胞（HFF50）为对照组，共计设计5组样品作用于该细胞中，具体列表如下表2所示：
表2 样品分组情况
同时，提供6岁的人成纤维细胞（HFF6）作为额外验证，从而大致确定抗衰基因表达的调控范围。
测试结果分析：
图2为不同浓度胶原五肽水溶液样品处理50岁人成纤维细胞后，通过QuantiGenePlex（QGP）检测方法，测定相关抗衰基因的相对表达情况（图中，TGF-β为生长转化因子β；COL1α1为Ⅰ型胶原基因）。 从图中分析可知，KTTKS对I型胶原刺激作用主要与生物合成途径有关，通过促进转化生长因子β（TGF-β）表达上调，进而促进I型胶原的合成；同时相关过程中仍然保持mRNA的稳定性。
图3为不同HA样品处理50岁人成纤维细胞后，通过QuantiGene Plex（QGP）检测方法，测定相关抗衰基因的相对表达情况（图中，TGF-β为生长转化因子β；MMP1为基质金属蛋白酶1；COL1α1为Ⅰ型胶原基因；COL3α1为Ⅲ型胶原基因）。从图中分析可知，生长转化因子β（TGF-β）的表达随着透明质酸钠浓度的增加而增长，呈现出剂量依赖式关系，而KTTKS（100ppm）的引入对TGF-β的表达起强促进作用，而非简单的两者增益效果相叠加。故HA与KTTKS共同促进TGF-β的表达，进而促进Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的生成，且HA与KTTKS二者间具有协同促进作用。
同时，KTTKS无明显的抑制基质金属蛋白酶（MMP-1）的效果，而与HA联用时，具有极好的MMP-1抑制效果，证明二者具有协同作用。外源性衰老因子的一个靶点是真皮成纤维细胞产生的真皮细胞外基质。紫外线（UVB）通过上调基MMP-1来激活真皮胶原原纤维的蛋白水解切割。作为胶原蛋白降解的结果，尽管胶原蛋白从头合成和修复，ECM网络仍会受到干扰，ECM中仍会存在小缺陷，并随着时间的推移而积累。因此MMP-1的抑制可以减缓对细胞外基质的降解速率，进一步促进胶原蛋白的再生
综上所述，本发明首次将HA与KTTKS结合应用并作***研究，证明二者均具有良好的刺激胶原再生能力，且联合使用时效果更佳。
实施例3：
透明质酸钠交联衍生物的制备
取8-15万Da分子量的透明质酸钠（市购）、80-200万Da分子量的透明质酸钠（市购）溶于水中，常温下搅拌混合均匀，升温至80℃，搅拌1h后，加入柠檬酸调节pH至4.5，移入高压反应釜中，在180℃下反应2h，降温至80℃下，搅拌10min，再次转移至高压反应釜中，在120℃下停留6h后降至常温，形成部分物理交联的透明质酸钠1。具体制备过程中，8-15万Da分子量的HA与80-200万Da的HA的摩尔比为3：1，透明质酸钠总浓度为1.5wt%。
透明质酸钠交联物2的制备与透明质酸钠交联物1的区别在于：制备过程中将80-200万Da分子量更换为15-80万Da（市购）；
透明质酸钠交联物3制备与透明质酸钠交联物1的区别在于：制备过程中将80-200万Da分子量更换为1-8万Da（市购）。
实施例4：
系列透明质酸钠交联衍生物+KTTKS的协同作用探究
具体测试方法同实施例2。测试样品M1为：透明质酸钠交联物1（实施例3制备的）浓度1.5%+KTTKS100ppm；测试样品M2为：透明质酸钠交联物2（实施例3制备的）浓度1.5%+KTTKS100ppm；测试样品M3（实施例3制备的）为：透明质酸钠交联3浓度1.5%+KTTKS100ppm；测试样品M4为：透明质酸钠交联物1浓度1.5%；测试样品M5为：透明质酸钠交联物2浓度1.5%；测试样品M6为：透明质酸钠交联物3浓度1.5%。
测试结果如表3所示：
表3 基因相对表达量情况测试结果
从表3中的数据分析可知，采用本实施例制备的交联透明质酸钠与KTTKS组合物，其中根据分子量的大小变化，可以得到低交联度、中等交联、高交联度的组合物，其中高交联度透明质酸钠M4以及其与KTTKS的组合物M1都显示TGF-β、COL1α1以及COL3α1的基因相对表达量最高，可以证实用于填充作用的透明质酸钠，其所产生的适当的异物反应，能够通过TGF-β信号通路，刺激胶原再生。同组情况下，KTTKS的引入能够进一步提高正向增益效果。MMP1的基因相对表达量，同组之间差距较小，但是对比单独的交联HA与含有KTTKS的组合物，MMP1的表达量减少，衰老程度降低。
产品细胞毒性测定
测试方法同实施例1。从测试结果分析可知，本实施例所得测试样品溶液无细胞毒性反应。
实施例5：
系列透明质酸钠衍生物+KTTKS的协同作用探究
具体测试方法同实施例2。测试样品M1为：本实施例制备的透明质酸钠衍生物1浓度0.6%+KTTKS100ppm；测试样品M2为：本实施例制备的透明质酸钠衍生物2浓度0.6%+KTTKS100ppm；测试样品M3为：本实施例制备的透明质酸钠衍生物3浓度0.6%+KTTKS100ppm。
透明质酸钠衍生物1的制备：
取透明质酸钠（20-40万分子量，市购）、N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪和1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷，加入四丁基氯化铵、N,N-二甲基二酰胺，搅拌混合均匀，升温至68℃，搅拌反应2.5d，减压回收N,N-二甲基二酰胺，加入水，并调节pH至3.6，析出沉淀，过滤、真空干燥得到透明质酸钠衍生物1。具体制备过程中，透明质酸钠、N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪的质量比为1:0.16；N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪和1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷的摩尔比为1:0.51；四丁基氯化铵与透明质酸钠的质量比为1:0.35；透明质酸钠与N,N-二甲基二酰胺的固液比为0.28g:1mL；水与N,N-二甲基二酰胺的体积比为1.6:1。
透明质酸钠衍生物2的制备与透明质酸钠衍生物1的不同在于：制备过程中采用等摩尔量的N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪替代1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷。
透明质酸钠衍生物3的制备与透明质酸钠衍生物1的不同在于：制备过程中采用等摩尔量的1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷替代N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪。
结果分析：
采用本实施例制备的透明质酸钠衍生物与KTTKS共同使用，TGF-β、COL1α1以及COL3α1的基因相对表达量明显高于透明质酸钠+KTTKS共同使用的，MMO1的基因相对表达量明显低于透明质酸钠+KTTKS共同使用的，且测试样品M1的效果明显好于测试样品M2和测试样品M3的，表明采用N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪对透明质酸钠进行化学修饰改性，获得透明质酸钠衍生物，与KTTKS复配使用，能够进一步增强其复配效果，更好的促进TGF-β的表达，进而促进Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的生成，且具有更佳的MMP-1抑制效果；并且，在同时使用1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷与N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪改性透明质酸钠的情况下，两者起到协同增强的作用，显著增强刺激胶原再生能力。
产品细胞毒性测定
测试方法同实施例1。从测试结果分析可知，本实施例所得测试样品溶液无细胞毒性反应。
实施例6：
HA+KTTKS+甘露醇或甘露醇衍生物共同使用情况探究
具体测试方法同实施例2。测试样品N1为：HA浓度0.6%+KTTKS100ppm；+甘露醇1%；测试样品N2为：HA浓度0.6%+KTTKS100ppm；+甘露醇衍生物1%。
甘露醇衍生物的制备：
按照固液比为0.6g:1mL的比例取5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸加入干燥吡啶，搅拌溶解，然后冰水浴下缓慢加入D-甘露醇（与5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸的摩尔比为1:7.2），搅拌3h，放置过夜，加入1/3体积量的冷水，常温下搅拌3h，然后边搅拌边加入至含有浓盐酸的冰水（浓盐酸与冰水的体积比为1:2.5，冰水与吡啶的体积比为3:1）中，减压抽滤，无水乙醇洗涤至中性，脱水，接着无水乙醇重结晶、真空干燥得到甘露醇衍生物。
测试结果如表4所示：
表4 基因相对表达量情况测试结果
从表4中的数据分析可知，测试样品N1以及N2的TGF-β、COL1α1以及COL3α1的基因相对表达量明显高于HA+KTTKS共同使用的，MMO1的基因相对表达量明显低于透明质酸钠+KTTKS共同使用的，同时测试样品N2效果明显好于测试样品N1的，表明采用甘露醇或其衍生物与HA、KTTKS复配使用，均能够起到增强的作用，进一步促进TGF-β的表达，进而促进Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的生成，且具有更佳的MMP-1抑制效果；并且采用5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸化学改性甘露醇获得甘露醇衍生物，能够显著提升混合样品的促进及抑制效果。
产品细胞毒性测定
测试方法同实施例1。从测试结果分析可知，本实施例所得测试样品溶液无细胞毒性反应。
实施例6：
甘露醇以及衍生物性能表征
自由基清除效果测定
取DPPH溶于少量甲苯后，用50%浓度乙醇配成120µmol/L的溶液，取1.9mL，加入0.1mL的2.0g/L浓度的测试样品，室温下静置20min，然后测定525nm处的吸光值。按照下列式子计算清除率：
清除率/%=(A-A1)/(A-A0)×100%
式中，A为对照体系吸光值，A1为测试样品的吸光值，A0为空白对照组的吸光值。
对甘露醇以及实施例4制备的甘露醇衍生物进行上述测试，结果如表5所示：
表5 自由基清除效果测试结果
从表5中的数据分析可知，甘露醇衍生物对DPPH自由基的清除率明显高于甘露醇的，表明采用5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸化学改性甘露醇获得甘露醇衍生物，能够显著提升甘露醇衍生物的自由基吸附清除能力。
试验例1：
红外表征
测试采用傅里叶红外光谱仪进行，测试范围500~4000cm-1。
对实施例3制备的透明质酸钠交联物进行上述测试，其红外图谱中的特征峰为3275~3390（b）、1615（s）、1405（m）、1150、1077、1045（s）、946（m）、893（w）。指纹区实测谱带的波数误差小于±5 cm-1。
对实施例4制备的透明质酸钠衍生物1以及透明质酸钠进行上述测试，结果如图4所示。从图中分析可知，相比于透明质酸钠的红外测试结果，在实施例3制备的透明质酸钠衍生物1的红外图谱中，在3000~2800cm-1范围内出现的亚甲基的特征吸收峰强度明显提升，且在1350~1250cm-1范围内C-N键的特征吸收峰强度增强，1100~1000cm-1范围内C-O键的特征吸收峰强度增强，以上结果表明实施例3中透明质酸钠衍生物1成功制备。
对实施例5制备的甘露醇衍生物进行上述测试，结果如图5所示。从图中分析可知，3000~2800cm-1范围内出现的甲基、亚甲基的特征吸收峰，1500~1400cm-1范围内出现的苯环的特征吸收峰，1353cm-1、1183cm-1附近出现的S=O的特征吸收峰，以上结果表明实施例3中甘露醇衍生物成功制备。
上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。
Claims (7)
1.一种组合物，包括胶原五肽、透明质酸钠和甘露醇衍生物，甘露醇衍生物包括5-氯磺酰基-2-羟基苯甲酸改性甘露醇的产物；或，
包括胶原五肽和透明质酸钠衍生物，所述透明质酸钠衍生物包括透明质酸钠交联衍生物或透明质酸钠衍生物1或透明质酸钠衍生物2或透明质酸钠衍生物3；
所述透明质酸钠交联衍生物包括单链分子量为1-8万、8-15万、15-30万、30-80万和80-200万的透明质酸钠中的一种或几种的混合交联物，透明质酸钠交联衍生物的交联方式选用物理交联；
所述透明质酸钠衍生物1制备中，由N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪和1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷与透明质酸钠混合，在四丁基氯化铵条件下反应制备得到透明质酸衍生物1；透明质酸钠衍生物2制备中，由N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪与透明质酸钠混合，在四丁基氯化铵条件下反应制备得到透明质酸衍生物2；透明质酸钠衍生物3制备中，由1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷与透明质酸钠混合，在四丁基氯化铵条件下反应制备得到透明质酸衍生物3；
透明质酸钠、N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪的质量比为1:0.1~0.2；N1-γ-氯丙基-N4-β-羟乙基哌嗪和1,2-二(2-氯乙氧基)乙烷的摩尔比为1:0.4~0.6；四丁基氯化铵与透明质酸钠的质量比为1:0.3~0.4；
所述胶原五肽为KTTKS，KTTKS为赖氨酸-苏氨酸-苏氨酸-赖氨酸-丝氨酸。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述组合物还包括辅助成分，包括山梨醇、葡聚糖中的一种或几种。
3.权利要求1所述的组合物在制备医疗美容注射填充剂、化妆品或护肤品或药剂中的用途。
4.一种水溶液产品，包括权利要求1~2任一项所述的组合物。
5.根据权利要求4所述的水溶液产品，其特征在于：所述水溶液产品中透明质酸钠或透明质酸钠衍生物的浓度为0.2~1.5wt%；胶原五肽的浓度为2~2000ppm。
6.一种粉剂产品，包含权利要求1~2任一项所述的组合物。
7.根据权利要求6所述的粉剂产品，其特征在于：所述产品中透明质酸钠或透明质酸钠交联衍生物，使用时经水溶解后，浓度为0.2~1.5wt%；所述产品中胶原五肽，使用时经水溶解后，浓度为2~2000ppm。
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