CN117106055A - 一种替尔泊肽的合成方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种替尔泊肽的合成方法，属于制药技术领域。本发明包括以下步骤：(1)Fmoc/tBu固相法合成替尔泊肽肽树脂，以氨基树脂为起始树脂，从C端到N端先合成主链，再脱除K20侧链保护基，然后依次偶联侧链各位点；(2)序列中K20位点使用物料Fmoc‑Lys(R1)‑OH(R1＝Alloc or Dde)进行偶联；(3)序列中Tyr1和Aib2，Ile12和Aib13分别使用物料Boc‑Tyr(tBu)‑Aib‑OH和Fmoc‑Ile‑Aib‑OH进行偶联；Glu3和Gly4使用Fmoc‑Glu(OtBu)‑Gly‑OH进行偶联；Gly29和Gly30使用Fmoc‑Gly‑Gly‑OH进行偶联，避免该位点产生的工艺杂质；(4)采用TFA混合溶液对肽树脂进行切割得到粗肽；(5)对粗肽进行HPLC纯化，转盐，浓缩，冻干，得到替尔泊肽精肽。本发明制得的替尔泊肽其HPLC纯度达99％以上，单个杂质低于0.1％。本方法操作简单，综合合成成本低，非常适合多肽原料药的工业化生产。
Description
【技术领域】
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种替尔泊肽的合成方法。
【背景技术】
替尔泊肽(Tirzepatide)是一款葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)和胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体双重激动剂，其将2种促胰岛素的作用整合至一个单分子中，通过双重作用机制激活参与血糖控制的激素受体--GIP和GLP-1两种肠促胰素受体。它通过每周一次皮下注射给药，达到控制血糖目标。2023年5月，Tirzepatide作为“first-in-class”药物获得美国FDA批准上市，是近十年来推出的首个新一代糖尿病药物。
Michael O.Frederick等人在Organic Process Research&Development上发表的“kilogram-scale GMP Manufacture of Tirzepatide Using a Hybrid SPPS/LPPSApproach with Continuous Manufacturing”文中提到了一种固相和液相混合的合成方法。采用固相合成法先合成1～14，15～21，22～29，30～39四个片段。然后用液相合成的方法将片段30～39与22～29偶联成片段22～39；再将片段22～39与15～21以液相合成的方式偶联成片段15～39。最后将片段1～14以液相合成的形式与15～39偶联成替尔泊肽全保护粗品，切割得到替尔泊肽粗肽。该方法使用4个固相合成的肽片段，物料成本高，流程较多，且片段之间偶联时工艺控制难度较大，每个片段都需要纯化，工艺较繁琐。
专利CN201911063432.6中介绍了位点1～4使用了全保护肽片段Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH，K20位点使用了全保护肽片段Fmoc-Lys((AEEA-AEEA-γ-Glu-(OtBu)-Eicosanedioic acid-OtBu))-OH；这两个肽片段价格昂贵，工业化程度低，不易于放大生产。
专利CN202011642239.0中介绍了位点1～2使用了全保护肽片段Boc-Tyr(tBu)-Aib-OH，位点K20使用了全保护肽片段Fmoc-Lys((AEEA-AEEA-γ-Glu-(OtBu)-Eicosanedioic acid-OtBu))-OH；同样存在专利CN201911063432.6中的缺点。
专利CN202110359421.3中介绍了使用多个含有Pro的肽片段进行偶联，虽然解决了缺失Pro产生的杂质问题，但该类片段使用固相合成，制备过程较多，成本高，且每一个片段都需要纯化，杂质控制难度较大，工业化程度低；专利CN202110359422.8中在位点22～26处使用了五肽片段，和专利CN202110359495.7中位点2～6使用了五肽片段，同样存在上述缺点；
专利CN202211588132.1在位点36～38、29～30、12～13、5～6、1～4均使用了肽片段，K20使用了五肽全保护片段，该物料成本较高，制备难度大，工业化程度低。
【发明内容】
针对上述背景技术存在的原料药的生产成本较高，杂质多，纯化难度大，工艺复杂，不利于工业化生产等问题，本发明提出一种替尔泊肽的合成方法，工艺简单易于控制，成本低，收率高，杂质易于控制，工业化程度高，易于放大生产。
为此，本发明采用以下技术方案：一种替尔泊肽的合成方法，包括以下步骤：
步骤一，通过Fmoc/tBu固相法合成替尔泊肽主链肽树脂；
Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ile-Ala-Gln(Trt)-Lys(R1)-Ala-Phe-Val-Gln(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-Resin(R1＝Alloc or Dde)；序列中K20位点使用物料Fmoc-Lys(R1)-OH(R1＝Alloc or Dde)进行偶联；序列中Tyr1和Aib2，Ile12和Aib13分别使用物料Boc-Tyr(tBu)-Aib-OH和Fmoc-Ile-Aib-OH进行偶联，序列中Glu3和Gly4使用Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-OH进行偶联，序列中Gly29和Gly30使用Fmoc-Gly-Gly-OH进行偶联。
步骤二，通过脱除K20位点侧链保护基R1后再依次偶联侧链各位点，得Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ile-Ala-Gln(Trt)-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-(OtBu)-Eicosanedioic acid-OtBu)-Ala-Phe-Val-Gln(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-Resin。
步骤三，采用TFA混合溶液对肽树脂进行切割得到替尔泊肽粗肽。
步骤四，对粗肽进行HPLC纯化，转盐，浓缩，冻干，得到替尔泊肽精肽。
上述一种替尔泊肽的合成方法，其特征在于步骤一中所述的步骤为：通过Fmoc/tBu固相法合成替尔泊肽主链肽树脂指的是以氨基树脂为起始树脂，按照Fmoc/tBu固相法，依次连接Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Gly-Gly-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(R1)-OH(R1＝Alloc or Dde)，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asp(OtBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ile-Aib-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Asp(OtBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-OH，Boc-Tyr(tBu)-Aib-OH，得到替尔泊肽主链肽树脂。所述的氨基树脂取代度为0.2～0.7mmol/g，优选0.3～0.5mmol/g；所述的氨基树脂为Rink Amide MBHA Resin、Rink AmideAM Resin、Sieber Resin中的一种，优选Rink Amide AM Resin；所述的缩合试剂为DIC/HOBT，TBTU/DIEA，PyBOP/DIEA中的一种或几种的组合；反应溶剂为二氯甲烷，N,N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮中的一种或几种的组合；反应温度为20～40℃，优选25～35℃。所述的Fmoc-保护氨基酸或保护氨基酸片段的用量为所投料树脂总摩尔数的2～6倍。
上述的一种替尔泊肽的合成方法，其特征在于步骤二中具体步骤为：R1选择Alloc作为保护基时，通过四三苯基膦钯/DCM的混合溶液进行脱除；R1选择Dde作为保护基时，通过2～3％水合肼/DMF溶液进行脱除，然后再根据肽序依次偶联Fmoc-AEEA-OH，Fmoc-AEEA-OH，Fmoc-Glu-OtBu，二十烷二酸单叔丁脂，得到替尔泊肽肽树脂。缩合试剂为DIC/HOBT，TBTU/DIEA，PyBOP/DIEA中的一种或几种的组合；反应溶剂为二氯甲烷，N,N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮中的一种或几种的组合；反应温度为20～40℃，优选25～35℃。所述的Fmoc-保护氨基酸或二十烷二酸单叔丁酯的用量为所投料树脂总摩尔数的2～6倍。
已公开的发明专利中大多采用Lys五肽进行侧链的连接，Lys五肽物料成本很高，物料性状差，不利于取料，同时其生产工艺极其复杂，势必引入更多的外源性杂质，给成品的质量控制带来难度，因此其缺陷显而易见。本发明人在开发替尔泊肽的工艺过程中发现，先连接主链再脱除Lys的侧链保护基连接侧链是能够以很高的收率得到目标产物的。
上述的一种替尔泊肽的合成方法，其特征在于步骤三中具体步骤为：采用TFA混合溶液对肽树脂进行切割得到替尔泊肽粗肽。TFA混合溶液为TFA与苯酚，水，乙二硫醇，三异丙基硅烷，苯甲硫醚，苯甲醚，二硫苏糖醇，3,6-二氧代-1、8-辛二硫醇等清除剂的组合，其中TFA的体积比不低于85％，各捕获剂的含量为2.5％～7.5％；酸裂解液用量为树脂重量的6～10ml/g，酸裂解时间为2～4h，酸裂解温度为20～30℃。
上述的一种替尔泊肽的合成方法，其特征在于步骤四中具体步骤为粗肽加水搅拌，用氨水调pH 9.0～9.5至完全溶解，溶液用0.45μm混合微孔滤膜过滤，采用高效液相色谱法进行纯化制备，收集替尔泊肽馏分；再采用高效液相色谱法进行换盐，收集换盐主峰并用分析液相检测纯度，合并换盐主峰溶液，减压浓缩，得到替尔泊肽醋酸水溶液，冷冻干燥得到替尔泊肽成品。
本发明可以达到以下有益效果：本发明方法制得的替尔泊肽其HPLC纯度达99％以上，单个杂质低于0.1％。本方法操作简单，综合合成成本低，非常适合多肽原料药的工业化生产。
【附图说明】
图1为本发明的合成流程示意图。
图2为替尔泊肽粗肽的HPLC图谱
图3为替尔泊肽粗肽的MS图谱
图4为替尔泊肽粗肽的HPLC图谱
图5为替尔泊肽粗肽的MS图谱
图6为替尔泊肽成品的HPLC图谱。
图7为替尔泊肽成品的MS图谱。
图8为替尔泊肽成品的HPLC图谱。
图9为替尔泊肽成品的MS图谱。
【具体实施方式】
下面结合附图对本发明的具体实施方式进行详细描述，所描述的实施例只是对本发明的说明和解释，并不构成对本发明的唯一限定。
在本发明具体实施方式中，申请文件中所用的英文缩写对应的中文含义见表1
表1
下面结合实例进一步阐述本发明。
替尔泊肽肽树脂：
Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ile-Ala-Gln(Trt)-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-(OtBu)-Eicosanedioic acid-OtBu)-Ala-Phe-Val-Gln(Trt)-Trp(Boc)
-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-Resin。
使用氨基树脂为起始树脂，通过激活和偶联反应，得到加载第一个位点的氨基酸树脂(Fmoc-Ser(tBu)-Resin)，然后通过去Fmoc保护、保护氨基酸激活和偶联，依次与表2中所示的保护氨基酸偶联，制得替尔泊肽肽树脂。本实例所使用的保护氨基酸相对应的保护氨基酸或片段如下所示：
表2
实施例1替尔泊肽主链肽树脂的制备
取135mmol第1个保护氨基酸和135mmol HOBT，用适量DMF溶解并冷却至0～15℃；另取135mmol DIC，搅拌下慢慢加入至保护氨基酸DMF溶液中，于0～15℃环境中搅拌反应10分钟，得到活化后的保护氨基酸溶液，备用。
取45mmol的氨基树脂(取代度0.40mmol/g)，采用DMF溶液溶胀60分钟，使用20％Pip/DMF溶液去保护30min，洗涤过滤得到待反应的树脂。
将活化后的第1个保护氨基酸溶液加入到待反应的树脂中，于25～35℃条件下偶联反应120～300分钟，过滤洗涤，得含1个保护氨基酸的树脂。
采用上述同样方法，依次接入上述对应的第2～39个保护氨基酸或片段，其中K20位点使用物料Fmoc-Lys(Alloc)-OH进行偶联；得替尔泊肽主链肽树脂。
实例2替尔泊肽肽树脂制备
脱除K20(Alloc)位点侧链保护基后再依次偶联侧链各位点。脱除Alloc保护基时，使用四三苯基膦钯/DCM的混合溶液进行脱除；四三苯基膦钯用量为树脂摩尔量的0.1倍。再依次接入Fmoc-AEEA-OH，Fmoc-AEEA-OH，Fmoc-Glu-OtBu，二十烷二酸单叔丁酯，得替尔泊肽肽树脂。
实施例3替尔泊肽粗品的制备
取实施例2制得的替尔泊肽肽树脂，加入TFA混合溶液，混合溶液配比为TFA:EDT/Tis/苯酚/H2O＝90:2.5:2.5:2.5:2.5，裂解试剂10ml/克树脂；20～30℃搅拌反应2～4小时，反应混合物使用砂芯漏斗过滤，收集滤液，树脂再用少量TFA洗涤3次，合并滤液后加入MTBE沉淀，再用MTBE洗沉淀3次，抽干得类白色粉末即为替尔泊肽粗品217.4g，粗品纯度为72.84％(图2)，分子量为4813.50(图3)。
实施例4替尔泊肽精肽的制备
取实施例3制得的替尔泊肽粗品，加水搅拌，用氨水调pH 9.0～9.5至完全溶解，溶液用0.45μm混合微孔滤膜过滤；
采用高效液相色谱法进行纯化制备，收集替尔泊肽馏分；
采用高效液相色谱法进行换盐，收集换盐主峰并用分析液相检测纯度，合并换盐主峰溶液，减压浓缩，得到替尔泊肽醋酸水溶液，冷冻干燥，得替尔泊肽精肽108.80g，纯度为99.76％，最大单一杂质0.07％(图6)，总收率为50.23％，分子量为4813.3(图7)。
实施例5替尔泊肽主链肽树脂的制备
取600mmol第1个保护氨基酸和600mmol HOBt，用适量DMF溶解并冷却至0～15℃；另取600mmol DIC，搅拌下慢慢加入至保护氨基酸DMF溶液中，于0～15℃环境中搅拌反应30分钟，得到活化后的保护氨基酸溶液，备用。
取200mmol的氨基树脂(取代度为0.37mmol/g)，采用DMF溶液溶胀60分钟，洗涤过滤得到待反应的树脂。
将活化后的第1个保护氨基酸溶液加入到待反应的树脂中，于25～35℃条件下偶联反应120～300分钟，过滤洗涤，得含1个保护氨基酸的树脂。
采用上述同样方法，依次接入上述对应的第2～39个保护氨基酸或片段，其中K20位点使用物料Fmoc-Lys(Dde)-OH进行偶联；得替尔泊肽主链肽树脂。
实例6替尔泊肽肽树脂制备
脱除K20(Dde)位点侧链保护基后再依次偶联侧链各位点。脱除Dde保护基时，使用2～3％水合肼/DMF溶液进行脱除，再依次接入Fmoc-AEEA-OH，Fmoc-AEEA-OH，Fmoc-Glu-OtBu，二十烷二酸单叔丁酯，得替尔泊肽肽树脂
实施例7替尔泊肽粗品的制备
取实施例6制得的替尔泊肽肽树脂，加入TFA混合溶液，混合溶液配比为TFA:EDT/Tis/苯酚/H2O＝90:2.5:2.5:2.5:2.5，裂解试剂10ml/克树脂；20～30℃搅拌反应2～4小时，反应混合物使用砂芯漏斗过滤，收集滤液，树脂再用少量TFA洗涤3次，合并滤液后加入MTBE沉淀，再用MTBE洗沉淀3次，抽干得类白色粉末即为替尔泊肽粗品1020.1g，粗品纯度为71.55％(图4)，分子量为4813.2(图5)。
实施例8替尔泊肽精肽的制备
取实施例7制得的替尔泊肽粗品，加水搅拌，用氨水调pH 9.0～9.5至完全溶解，溶液用0.45μm混合微孔滤膜过滤；
采用高效液相色谱法进行纯化制备，收集替尔泊肽馏分；
采用高效液相色谱法进行换盐，收集换盐主峰并用分析液相检测纯度，合并换盐主峰溶液，减压浓缩，得到替尔泊肽醋酸水溶液，冷冻干燥，得替尔泊肽精肽526.11g，纯度为99.91％，最大单一杂质0.06％(图8)，总收率为54.65％，分子量为4813.2(图9)。
上述实施例表明，本发明提供的方法所得产品纯度大于99.0％，单一杂质均小于0.1％，提高了产品质量和总收率，工艺简单易于控制，工业化程度高，具有广泛的实用价值和应用前景。
Claims (5)
1.一种替尔泊肽的合成方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤一，通过Fmoc/tBu固相法合成替尔泊肽主链肽树脂；
Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ile-Ala-Gln(Trt)-Lys(R1)-Ala-Phe-Val-Gln(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-Resin(R1＝Alloc or Dde)；序列中K20位点使用物料Fmoc-Lys(R1)-OH(R1＝Alloc or Dde)进行偶联；序列中Tyr1和Aib2，Ile12和Aib13分别使用物料Boc-Tyr(tBu)-Aib-OH和Fmoc-Ile-Aib-OH进行偶联，序列中Glu3和Gly4使用Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-OH进行偶联；序列中Gly29和Gly30使用Fmoc-Gly-Gly-OH进行偶联；
步骤二，通过脱除K20位点侧链保护基R1后再依次偶联侧链各位点，得到Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ile-Ala-Gln(Trt)-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-(OtBu)-Eicosanedioic acid-OtBu)-Ala-Phe-Val-Gln(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-Resin；
步骤三，采用TFA混合溶液对肽树脂进行切割得到替尔泊肽粗肽；
步骤四，对粗肽进行HPLC纯化，转盐，浓缩，冻干，得到替尔泊肽精肽。
2.根据权利要求1所述的一种替尔泊肽的合成方法，其特征在于步骤一中所述的步骤为：通过Fmoc/tBu固相法合成替尔泊肽主链肽树脂指的是以氨基树脂为起始树脂，按照Fmoc/tBu固相法，依次连接Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Gly-Gly-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Lys(R1)-OH(R1＝Alloc orDde)，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Asp(OtBu)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ile-Aib-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-Asp(OtBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-OH，Boc-Tyr(tBu)-Aib-OH，得到替尔泊肽主链肽树脂；所述的氨基树脂取代度为0.2～0.7mmol/g，优选0.3～0.5mmol/g，所述的氨基树脂为Rink Amide MBHAResin、Rink Amide AM Resin、Sieber Resin中的一种，优选Rink Amide AM Resin；所述的缩合试剂为DIC/HOBT，TBTU/DIEA，PyBOP/DIEA中的一种或几种的组合；反应溶剂为二氯甲烷，N,N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮中的一种或几种的组合；反应温度为20～40℃，优选25～35℃；所述的Fmoc-保护氨基酸或保护短肽片段的用量为所投料树脂总摩尔数的2～6倍。
3.根据权利要求1所述的一种替尔泊肽的合成方法，其特征在于步骤二中具体步骤为：R1选择Alloc作为保护基时，通过四三苯基膦钯/DCM的混合溶液进行脱除；R1选择Dde作为保护基时，通过2～3％水合肼/DMF溶液进行脱除，然后再根据肽序依次偶联Fmoc-AEEA-OH，Fmoc-AEEA-OH，Fmoc-Glu-OtBu，二十烷二酸单叔丁脂，得到替尔泊肽肽树脂；缩合试剂为DIC/HOBT，TBTU/DIEA，PyBOP/DIEA中的一种或几种的组合；反应溶剂为二氯甲烷，N,N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮中的一种或几种的组合；反应温度为20～40℃，优选25～35℃；所述的Fmoc-保护氨基酸或二十烷二酸单叔丁酯的用量为所投料树脂总摩尔数的2～6倍。
4.根据权利要求1所述的一种替尔泊肽的合成方法，其特征在于步骤三中具体步骤为：采用TFA混合溶液对肽树脂进行切割得到替尔泊肽粗肽；TFA混合溶液为TFA与苯酚，水，乙二硫醇，三异丙基硅烷，苯甲硫醚，苯甲醚，二硫苏糖醇，3,6-二氧代-1、8-辛二硫醇等清除剂的组合，其中TFA的体积比不低于85％，各捕获剂的含量为2.5％～7.5％；酸裂解液用量为树脂重量的6～10ml/g，酸裂解时间为2～4h，酸裂解温度为20～30℃。
5.根据权利要求1所述的一种替尔泊肽的合成方法，其特征在于步骤四中具体步骤为对粗肽进行纯化，转盐，浓缩，冻干，得到替尔泊肽精肽。
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| CN (1) | CN117106055A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117736273A (zh) * | 2023-12-08 | 2024-03-22 | 广东省卓肽医药有限公司 | 一种替尔泊肽的纯化方法 |
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2023
- 2023-08-18 CN CN202311050210.7A patent/CN117106055A/zh active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117736273A (zh) * | 2023-12-08 | 2024-03-22 | 广东省卓肽医药有限公司 | 一种替尔泊肽的纯化方法 |
| CN117736273B (zh) * | 2023-12-08 | 2024-05-07 | 广东省卓肽医药有限公司 | 一种替尔泊肽的纯化方法 |
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