CN117042763A - 炎性疾病的治疗 - Google Patents

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Abstract

药物组合物，其包含至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐和至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐。

Description

炎性疾病的治疗
技术领域
本发明涉及组合疗法，其包含至少一种趋化因子受体2途径抑制剂和至少一种内皮素A受体抑制剂。
背景技术
炎性疾病病理(特别是与单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和2型C-C趋化因子受体(CCR2)之间相互作用相关的那些，以及与内皮素***功能障碍相关的那些)与疾病例如葡萄膜炎、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎、多发性硬化症、神经性疼痛、瘙痒症、克罗恩病、肾炎、器官同种异体移植排斥、纤维化肺、肾功能不全、糖尿病和糖尿病并发症、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病、糖尿病性视网膜炎、糖尿病性微血管病、结核、结节病、侵袭性葡萄球菌、白内障手术后炎症、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、慢性荨麻疹、过敏性哮喘、牙周病、牙周炎、牙龈炎、牙龈疾病、舒张性心肌病、心肌梗塞、心肌炎、慢性心力衰竭、血管狭窄、再狭窄、再灌注障碍、肾小球肾炎、实体瘤和癌症、慢性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病、多发性骨髓瘤、恶性骨髓瘤、霍奇金病以及膀胱癌、乳腺癌、子***、结肠癌、肺癌、***癌或胃癌有关。
需要为包括肾病、肺病和心脏病在内的炎性疾病病理提供新的治疗；或者至少提供替代治疗以补充先前已知的炎性疾病病理治疗。
先前对背景技术的讨论仅旨在促进对本发明的理解。该讨论并不承认或认可所提及的任何材料是或曾经是截至本申请的优先权日的公知常识的一部分。
发明概述
本发明提供了药物组合物，其包含：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了药物组合物，其包含：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐；和
c)至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐。
优选地，该内皮素A受体抑制剂选自：内皮素A受体拮抗剂例如西他生坦、安贝生坦、阿曲生坦、BQ-123和齐泊腾坦(zibotentan)；双重内皮素A和B拮抗剂例如波生坦、马昔腾坦和替唑生坦；和双重异源性(dual heterologous)受体拮抗剂例如司帕生坦。
优选地，该趋化因子受体2(CCR2)抑制剂选自：瑞帕锗；丙帕锗；CCX140；Cenicriviroc；PF-6309；PF-04178903；CCX872-B(CCX-872)；MLN1202；和PF-04634817。
优选地，该血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂选自：司帕生坦、厄贝沙坦、依普罗沙坦、氯沙坦、缬沙坦、替米沙坦、坎地沙坦、奥美沙坦、ZD-7115、非马沙坦、阿齐沙坦、DuP753、EXP 3174、恩布沙坦(BAY 10-6734)、KRH-594、福沙坦(fonsartan)(HR 720)和普拉沙坦(KT3-671)。
CCR2途径抑制剂、内皮素A受体抑制剂和/或AT1R阻断剂可以以相同的剂型或分开的剂型施用。
CCR2途径抑制剂、内皮素A受体抑制剂和/或AT1R阻断剂可以同时或依次给药。
本发明还提供了治疗、改善或预防疾病的方法，该方法包括向受试者给药治疗有效量的以下组合：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了治疗、改善或预防疾病的方法，该方法包括向受试者给药治疗有效量的以下组合：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐；和
c)至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐。
优选地，该疾病为肾病、肺病或心脏病。该肾病可选自以下的列表：局灶性节段性肾小球硬化症(FSGS；包括原发性FSGS和继发性FSGS)、肾脏纤维化疾病、糖尿病肾病引起的慢性肾脏病、肾功能不全(糖尿病和非糖尿病)和肾衰竭病症、包括糖尿病肾病、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病蛋白尿和肾血管性高血压。该肺病可为传染性或非传染性炎症性肺病，优选地选自以下列表：社区获得性肺炎、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、支气管扩张症、细支气管炎、支气管炎、肺气肿、胸膜炎或肺纤维化。该心脏病可为冠状动脉病，优选地选自以下列表：关节硬化、肺动脉高压、缺血性心脏病、心肌病和炎症性心脏病。
本发明还考虑了药物组合物在制备用于治疗、改善或预防疾病的剂型中的用途，该药物组合物包含：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐。
本发明进一步考虑了药物组合物在制备用于治疗、改善或预防疾病的剂型中的用途，该药物组合物包含：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐；和
c)至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐。
本发明提供了至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐和至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂中。
本发明提供了至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐、至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐和至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂中。
本发明提供了：
•至少一种内皮素A受体抑制剂，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂，其中该至少一种内皮素A受体抑制剂与至少一种CCR2途径抑制剂同时或依次给药于受试者。
•至少一种CCR2途径抑制剂，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂，其中该至少一种CCR2途径抑制剂与至少一种内皮素A受体抑制剂同时或依次给药于受试者。
·至少一种内皮素A受体抑制剂，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂，其中该至少一种内皮素A受体抑制剂与至少一种CCR2途径抑制剂和至少一种血管紧张素1型受体阻断剂同时或依次给药于受试者。
·至少一种CCR2途径抑制剂，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂，其中该至少一种CCR2途径抑制剂与至少一种内皮素A受体抑制剂和至少一种血管紧张素1型受体阻断剂同时或依次给药于受试者。
·至少一种血管紧张素1型受体阻断剂，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂，其中该至少一种CCR2途径抑制剂与至少一种内皮素A受体抑制剂和至少一种CCR2途径抑制剂同时或依次给药于受试者。
本发明提供了用于治疗、改善或预防疾病的试剂盒，所述试剂盒包含：
a)至少一种趋化因子受体2(CCR2)途径抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
c)使用说明书。
本发明提供了用于治疗、改善或预防疾病的试剂盒，所述试剂盒包含：
a)至少一种趋化因子受体2(CCR2)途径抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；
c)至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐；和
d)使用说明书。
附图说明
在以下几个非限制性实施方案的描述中更全面地描述了本发明的其他特征。仅出于举例说明本发明的目的而包括该描述。不应将其理解为对上述本发明的广泛概述、公开或描述的限制。该描述将参照附图进行，其中：
图1是ETAR/Rluc8+Barr2/Venus+CCR2的图，其表明当ETAR用Rluc8标记并且β-抑制蛋白(β-arrestin)用Venus标记在未标记的CCR2存在的情况下时，β-抑制蛋白在ET-1存在的情况下(正如所预期的)被募集到ETAR，而且在CCL2/MCP1存在的情况下也是如此，这证实了受体之间存在复合物。两种配体的存在都会导致β-抑制蛋白募集过度激活，从而证实了异聚体的相互作用。
图2是ETAR/Rluc8+Barr2/Venus+CCR2的图，其表明当CCL2存在的情况下，β-抑制蛋白被募集到ETAR，从而证实了ETAR和未标记的CCR2的相互作用。当CCL2/CMP-1和ET-1配体同时存在时，司帕生坦能够消除过度激活，但不会停止β-抑制蛋白向ETAR的募集。
图3是ETAR/Rluc8+Barr2/Venus+CCR2的图，其表明通过添加司帕生坦或CCR2抑制作用可以消除ETAR和CCR2异聚体的过度激活。当ET-1刺激时，无论CCR2是否存在，ETAR都能够以低强度募集β-抑制蛋白，而司帕生坦会抑制这种独立于CCR2激活的信号传导。仅当ET-1和CCL2/MCP-1存在且当同时抑制CCR2和ETAR时，才会完全抑制β-抑制蛋白向ETAR的募集。
图4是CCR2/Rluc8+Barr2/Venus+HA-ETAR的图，其表明在不同的实验方向中，在未标记的ETAR存在的情况下，CCR2用Rluc8标记并且β-抑制蛋白用Venus标记，在CCL2/MCP-1存在的情况下，β-抑制蛋白被募集到CCL2。在CCL2/MCP-1和ET-1配体存在的情况下观察到β-抑制蛋白的募集增加，这证实了CCR2和ETAR之间存在相互作用。
图5是CCR2/Rluc8+Barr2/Venus+HA-ETAR的图，其表明当用司帕生坦阻断ETAR激活时，在CCL2/MCP-1和ET-1存在的情况下，未观察到β-抑制蛋白的募集增加。
图6是CCR2/Rluc8+Barr2/Venus+HA-ETAR的图，其表明在CCL2/MCP-1存在的情况下，当CCR2被抑制时，无论是否存在具有ET-1的ETAR激活，都不会募集β-抑制蛋白到CCR2。
发明内容
发明详述
研究表明，G蛋白偶联受体(GPCR)不仅可以作为单体，还可以作为同源和异源二聚体和/或同源和异源寡聚体(也称为同聚物和异聚物)，其导致配体结合、信号传导和胞吞作用改变(Rios等人(2000)Pharmacol.Ther.92：71-87)。因此，作为特定受体的激动剂或拮抗剂的药物的作用可能取决于该受体的结合配偶体。可能需要限制药物对由特定受体二聚体或寡聚体介导的细胞反应的作用。
组合物
本发明提供了药物组合物，其包含：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了药物组合物，其包含：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐；和
c)至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐。
药物组合物还可包含药学上可接受的载体或赋形剂。
不受任何理论的束缚，据信趋化因子受体2和内皮素A受体在一些组织中形成异源二聚体/异源寡聚体。当CCR2和ETAR处于其异源二聚体/异源寡聚体构型时，同时抑制两种受体比单独抑制任一受体或当受体不处于异源二聚体构型时抑制任一受体产生更大的效果。
还据信趋化因子受体2和血管紧张素1型受体在一些组织中形成异源二聚体/异源寡聚体。当CCR2和AT1R处于其异源二聚体/异源寡聚体构型时，同时抑制两种受体比单独抑制任一受体或当受体不处于异源二聚体构型时抑制任一受体产生更大的效果。
上述发现允许通过同时抑制异源二聚体/异源寡聚体的两个要素来进行特异性和有针对性的干预，这将在形成异二聚体的组织中产生更大的治疗效果，但在受体不呈异二聚体形式的组织中不会产生更大的治疗效果。
趋化因子受体2途径抑制剂
C-C趋化因子受体2型(CCR2或CD192)是一种人G蛋白偶联受体。CCR2是单核细胞趋化蛋白-1的主要受体(MCP-1/CCL2)。
短语“趋化因子受体2途径”应理解为包括由其天然配体激活的趋化因子受体2的任何一种途径，包括但不限于引起趋化迁移、细胞运动、细胞外调节激酶(ERK)磷酸化、cAMP产生、肌动蛋白募集、蛋白质磷酸化、核蛋白定位、基因转录或翻译、G蛋白偶联、β-抑制蛋白募集或介导的信号传导的那些途径。
短语“趋化因子受体2途径抑制剂”旨在包括抑制或部分抑制与趋化因子受体2相关的任何一种途径的任何化合物或药剂。CCR2途径抑制剂包括抑制或部分抑制趋化因子受体2活化的化合物或药剂。该CCR2途径抑制剂可以是肽、多肽或小化学实体。例如，该CCR2途径抑制剂可以是蛋白质、结合蛋白或抗体。
这可能是通过与CCR2配体、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1/CCL2)结合，使其不再与趋化因子受体2(CCR2)结合。在一个实施方案中，趋化因子受体2途径抑制剂通过直接靶向MCP-1来抑制或部分抑制由MCP-1诱导的单核细胞的体外趋化迁移。此类化合物包括结合MCP-1的试剂。
或者，趋化因子受体2途径抑制剂可以结合趋化因子受体2本身，阻断配体的进入或结合。此类CCR2途径抑制剂可以是直接CCR2拮抗剂、直接CCR2反向激动剂或直接CCR2负变构调节剂。CCR2拮抗剂会阻断CCR2并阻止MCP-1的结合；CCR2反向激动剂会与CCR2结合并将其活性降低至基础水平以下；一旦MCP-1结合，CCR2负变构调节剂将与CCR2结合并降低其对MCP-1的亲和力和/或其功效。
短语“趋化因子受体2途径抑制剂”包括抑制或部分抑制除趋化因子受体2本身之外的趋化因子受体2途径的组分的化合物或药剂。例如，抑制剂可以抑制或部分抑制与趋化因子受体2相关的蛋白质，或者可以抑制趋化因子受体本身之前和/或之后的化合物或途径步骤。在这种情况下，优选地，趋化因子受体2途径抑制剂选自：间接CCR2拮抗剂、间接CCR2反向激动剂或间接CCR2负变构调节剂。
本文所用的术语“除趋化因子受体2本身之外的趋化因子受体2途径的组分”应理解为是指趋化因子受体2途径的组分，其中该组分本身不是趋化因子受体2。趋化因子受体2途径的成分可能直接与趋化因子受体2相互作用。或者，趋化因子受体2途径的组分可以通过蛋白质-蛋白质相互作用或复合物形成的方式与趋化因子受体2间接相互作用。或者，趋化因子受体2途径的组分可以通过信号级联与趋化因子受体2间接相互作用。优选地，该组分是蛋白质，例如但不限于转导蛋白或信号蛋白。
一方面，如果趋化因子受体2途径抑制剂抑制或部分抑制除了趋化因子受体2本身之外的途径的组分，则该抑制剂通过靶向糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白例如CD55、CD59和CD16来阻断MCP-1诱导的单核细胞迁移和激活以及趋化迁移。
在另一个方面，如果趋化因子受体2途径抑制剂抑制或部分抑制除趋化因子受体2之外的途径的组分，则该受抑制的组分选自CCR2配体列表，其包括：CCL7(MCP-3)、CCL8、CCL13(MCP-4)和CCL16(血滤液CC趋化因子(HCC)-4)。在一种实施方案中，趋化因子受体2途径抑制剂通过直接靶向配体来抑制或部分抑制由上述CCR2配体诱导的单核细胞的体外趋化迁移。此类化合物包括结合CCL7、CCL8、CCL13和CCL16的试剂。
在其他实施方案中，该趋化因子受体2途径抑制剂通过靶向选自CD55、CD59和CD16的一种或多种GPI锚定蛋白来抑制或部分抑制由MCP-1诱导的单核细胞的体外趋化迁移。在这种情况下，趋化因子受体2途径抑制剂可以稳定复合物CCR2/CD55和/或CCR2/CD59和/或CCR2/CD16。
已知的CCR2途径的抑制剂包括：瑞帕锗或丙帕锗；RS504393；RS102895；MLN-1202(Millennium Pharmaceuticals)；INCB3344,INCB3284和INCB8696(IncytePharmaceuticals)；MK-0812(Merck)；CCX140和CCX872-B(CCX-872)；(ChemoCentryx)；BMS-741672(Bristol-Myers Squibb)；和PF-04136309(也称为PF-6309)、PF-04178903和PF-04634817(Pfizer)；和Cenicriviroc(TAK-652，TBR-652)。优选地，趋化因子受体2途径2抑制剂选自：瑞帕锗；丙帕锗；CCX140；PF-6309和PF-04634817。
在一个优选的实施方案中，CCR2途径抑制剂是趋化因子受体2的直接拮抗剂，例如瑞帕锗、丙帕锗或CCX140。
丙帕锗(3-氧锗丙烯酸聚合物)是一种已被用作慢性肝炎治疗剂的分子，也已被证明可以通过似乎需要糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白例如CD55、CD59和CD16的机制，在体外特异性抑制由MCP-1诱导的单核细胞的趋化迁移。丙帕锗也称为3-[(2-羧乙基-氧代锗烷基)氧基-氧代锗烷基]丙酸、普洛脉宁、Ge-132、双(2-羧乙基锗)倍半氧化物(CEGS)、2-羧乙基锗倍半氧烷、SK-818、有机锗、锗倍半氧化物、3,3<'>-(1,3-二氧代-1,3-二锗氧烷二基)双丙酸、3-氧锗丙烯酸聚合物、聚-fra/7s-(2-羧乙基)锗倍半氧烷、普洛脉宁、瑞帕锗和SerocionTM。
内皮素A受体抑制剂
内皮素受体A(也称为ETAR、ETA、EDNRA、ET1受体、ETA受体、ETA、EDN1和ET-AR)是人G蛋白偶联受体。
短语“内皮素A受体抑制剂”(也称为ETAR抑制剂)旨在包括抑制或部分抑制与内皮素A受体相关的任何一种途径的任何化合物或试剂。ETAR抑制剂应理解为包括抑制或部分抑制ETAR活化的任何化合物或试剂。ETAR抑制剂可以是肽、多肽或小化学实体。例如，ETAR抑制剂可以是蛋白质、结合蛋白或抗体。
这可能是通过与ETAR配体内皮素-1(ET-1)结合，使其不再与内皮素A受体(ETAR)结合。在一个实施方案中，ETAR抑制剂通过直接靶向ET-1来抑制或部分抑制由ET-1诱导的信号传导。此类化合物包括结合ET-1的试剂。
或者，ETAR抑制剂可以与ETAR本身结合，阻断配体的进入或结合。此类ETAR抑制剂可以是直接ETAR拮抗剂、直接ETAR反向激动剂或直接ETAR负变构调节剂。ETAR拮抗剂会阻断ETAR并阻止ET-1的结合；ETAR反向激动剂会与ETAR结合并将其活性降低至基础水平以下；一旦ET-1结合，ETAR负变构调节剂将与ETAR结合并降低其与ET-1的亲和力和/或其功效。
已知的内皮素A受体抑制剂包括：内皮素A受体拮抗剂例如西他生坦、安贝生坦(GalaxoSmithKline)、阿曲生坦(AbbVie)、BQ-123、齐泊腾坦(ZD4054,AstraZeneca)；双重内皮素A和B拮抗剂例如波生坦、马昔腾坦、替唑生坦；和双重异源性受体拮抗剂例如司帕生坦。
作为实例，该内皮素A受体抑制剂可以为司帕生坦。司帕生坦，也称为2-[4-[(2-丁基-4-氧代-1,3-二氮杂螺[4.4]壬-1-烯-3-基)甲基]-2-(乙氧基甲基)苯基]-N-(4,5-二甲基-1,2-噁唑-3-基)苯磺酰胺，是血管紧张素II 1型受体(AT1R)和ETA受体的联合选择性拮抗剂。
血管紧张素1型受体
血管紧张素1型受体(AT1R、AT1R、血管紧张素II受体1型)是G蛋白偶联受体。
短语“血管紧张素1型受体阻断剂”(也称为AT1R阻断剂或ARB)旨在包括抑制或部分抑制与血管紧张素1型受体相关的任何一种途径的任何化合物或药剂。AT1R阻断剂应理解为包括抑制或部分抑制AT1R活化的任何化合物或药剂。AT1R阻断剂可以是肽、多肽或小化学实体。例如，AT1R阻断剂可以是蛋白质、结合蛋白或抗体。
这可能是通过与AT1R配体(例如血管紧张素II(Ang II))结合，使其不再与AT1R结合。在一个实施方案中，AT1R阻断剂通过直接靶向AT1R配体来抑制或部分抑制由AT1R配体与AT1R结合诱导的信号传导。此类化合物包括结合AT1R配体的药剂，例如结合血管紧张素II(Ang II)的药剂。
或者，AT1R阻断剂可以与AT1R本身结合，阻断配体的进入或结合。此类AT1R阻断剂可以是直接AT1R拮抗剂、直接AT1R反向激动剂或直接AT1R负变构调节剂。AT1R拮抗剂会阻断AT1R并阻止AT1R配体的结合；AT1R反向激动剂会与AT1R结合并将其活性降低至基础水平以下；一旦AT1R配体结合，AT1R负变构调节剂将与AT1R结合并降低其与AT1R配体的亲和力和/或其功效。
例如，AT1R阻断剂可以选自：司帕生坦、厄贝沙坦、依普罗沙坦、氯沙坦、缬沙坦、替米沙坦、坎地沙坦、奥美沙坦、ZD-7115、非马沙坦、阿齐沙坦、DuP 753(2-正丁基-4-氯-5-羟基-甲基-1-[(2'-(1H)-四唑-5-基)联苯-4-基)甲基]咪唑钾盐)、EXP 3174、恩布沙坦(BAY10-6734)、KRH-594、福沙坦(HR 720)和普拉沙坦(KT3-671)。
Taylor等人(2011)回顾了AT1R阻断剂并指出，“尽管一些较新的药物可能比旧药物更有效地降低血压，但此类较旧药物的疗效或其他临床特征没有重大差异”。特征差异似乎与其他途径的相互作用有关，而不是与核心血管紧张素1型受体阻断有关。值得注意的是，尽管“ARB之间存在一些药理学差异，并且此类药物中的一些药物具有独立于血管紧张素II受体阻断的特殊作用，但目前没有强有力的证据表明这些药物可以转化为针对高血压靶器官损伤的独特保护作用”。因此，就其对AT1R阻断的影响而言，尽管结构存在差异，但AT1R阻断剂在功能上是可以互换的。
AT1R阻断剂于20世纪90年代首次投入商业应用。尽管此类药物的使用时间较长，但医生仍将它们视为在很大程度上可以相互替代的一组药物。虽然某些组的确切药理学存在一些具体的微妙之处，但这些似乎与其血管紧张素1型受体活性无关。此外，所有药物产品在某些患者中的表现都会略有不同，但某些亚组变异性并不妨碍它们在治疗中普遍有用(Taylor等人,2011)。
作为实例，该血管紧张素受体抑制剂可为厄贝沙坦。厄贝沙坦为血管紧张素1型受体拮抗剂，也称为2-丁基-3-({4-[2-(2H-1,2,3,4-四唑-5-基)苯基]苯基}甲基)-1,3-二氮杂螺[4.4]壬-1-烯-4-酮。该血管紧张素受体抑制剂可为司帕生坦。司帕生坦(也称为2-[4-[(2-丁基-4-氧代-1,3-二氮杂螺[4.4]壬-1-烯-3-基)甲基]-2-(乙氧基甲基)苯基]-N-(4,5-二甲基-1,2-噁唑-3-基)苯磺酰胺)为血管紧张素II 1型受体(AT1R)和ETA受体的联合选择性拮抗剂。
治疗方法
本发明还提供了治疗、改善或预防疾病的方法，该方法包括向受试者给药治疗有效量的以下组合：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了治疗、改善或预防疾病的方法，该方法包括向受试者给药治疗有效量的以下组合：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐；和
c)至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐。
CCR2途径抑制剂和内皮素A受体抑制剂可以以相同的剂型或分开的剂型给药。CCR2途径抑制剂和内皮素A受体抑制剂可以同时或依次给药。
如果治疗、改善或预防方法还包含至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂，则AT1R阻断剂可以与CCR2途径抑制剂和/或ETAR抑制剂相同的剂型或分开的剂型给药。血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂、CCR2途径抑制剂和内皮素A受体抑制剂可以同时或依次给药。
内皮素A受体抑制剂、CCR2途径抑制剂和/或AT1R阻断剂可以是内皮素A受体抑制剂、CCR2途径抑制剂和/或AT1R阻断剂的药学上可接受的盐。
本发明的治疗的一种组分可以已经被施用于受试者，例如作为护理治疗的标准。在这种情况下，本发明治疗的第二(和第三，如果存在的话)组分作为疗法中的第二(和第三)组分施用以提供本发明的治疗。
尽管不旨在限于任何具体的作用模式，但在一个优选实施方案中，当CCR2与内皮素A受体相连时，CCR2途径抑制剂在与CCR2相互作用或调节其下游途径时具有更大的亲和力和/或效力和/或功效。例如，CCR2和内皮素A受体可以相连为CCR2/ETAR异源二聚体/异源寡聚体。在进一步优选的实施方案中，当将CCR2途径抑制剂与内皮素A受体抑制剂同时或依次施用于受试者时，组合的亲和力、效力和/或功效相比于当CCR2途径抑制剂不与内皮素A受体抑制剂(同时或依次)施用时已经实现的亲和力、效力和/或功效更大。在更进一步优选的实施方案中，当将CCR2途径抑制剂与内皮素A受体抑制剂(同时或依次)施用于受试者时，实现了协同效应(如通过亲和力、效力和/或功效测量)。
尽管不旨在限于任何具体的作用模式，但在一个优选实施方案中，当内皮素A受体与CCR2相连时，内皮素A受体抑制剂在与内皮素A受体相互作用时具有更大的亲和力和/或效力和/或功效。例如，CCR2和内皮素A受体可以相连为CCR2/ETAR异源二聚体/异源寡聚体。在进一步优选的实施方案中，当将内皮素A受体抑制剂与CCR2途径抑制剂同时或依次施用于受试者时，组合的亲和力、效力和/或功效相比于当内皮素A受体抑制剂不与CCR2途径抑制剂(同时或依次)施用时已经实现的亲和力、效力和/或功效更大。在更进一步优选的实施方案中，当将内皮素A受体抑制剂与CCR2途径抑制剂(同时或依次)施用于受试者时，实现了协同效应(如通过亲和力、效力和/或功效测量)。
尽管不旨在限于任何具体的作用模式，但在一个优选实施方案中，当CCR2与血管紧张素受体相连时，CCR2途径抑制剂在与CCR2相互作用或调节其下游途径时具有更大的亲和力和/或效力和/或功效。例如，CCR2和血管紧张素受体可以相连为CCR2/AT1R异源二聚体/异源寡聚体。在进一步优选的实施方案中，当将CCR2途径抑制剂与AT1R阻断剂同时或依次施用于受试者时，组合的亲和力、效力和/或功效相比于当CCR2途径抑制剂不与AT1R阻断剂(同时或依次)施用时已经实现的亲和力、效力和/或功效更大。在更进一步优选的实施方案中，当将CCR2途径抑制剂与AT1R阻断剂(同时或依次)施用于受试者时，实现了协同效应(如通过亲和力、效力和/或功效测量)。
尽管不旨在限于任何具体的作用模式，但在一个优选实施方案中，当血管紧张素受体与CCR2相连时，AT1R阻断剂在与血管紧张素受体相互作用时具有更大的亲和力和/或效力和/或功效。例如，CCR2和血管紧张素受体可以相连为CCR2/AT1R异源二聚体/异源寡聚体。在进一步优选的实施方案中，当将AT1R阻断剂与CCR2途径抑制剂同时或依次施用于受试者时，组合的亲和力、效力和/或功效相比于当AT1R阻断剂不与CCR2途径抑制剂(同时或依次)施用时已经实现的亲和力、效力和/或功效更大。在更进一步优选的实施方案中，当将AT1R阻断剂与CCR2途径抑制剂(同时或依次)施用于受试者时，实现了协同效应(如通过亲和力、效力和/或功效测量)。
由于当被它们的同源配体同时激活时，CCR2/ETAR异源二聚体/异源寡聚体比单独的每个要素具有更大的亲和力、效力和/或功效，并且当被它们的同源配体激活时，CCR2/AT1R异源二聚体/异源寡聚体比单独的每个要素具有更大的亲和力、效力和/或功效，预计同时抑制两组异源二聚体/寡聚体将产生高水平的治疗优势。
待治疗的受试者优选是哺乳动物，包括人类哺乳动物。
病症或疾病
优选地，CCR2途径抑制剂、内皮素A受体抑制剂和/或AT1R阻断剂用于治疗、改善或预防选自以下列表的疾病：肺病、肾病、心血管疾病，包括(急性和慢性)充血性心力衰竭、左心室功能障碍和肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上性和室性心律失常、心房颤动或心房扑动、心肌梗塞及其后遗症、动脉粥样硬化、心绞痛(无论不稳定或稳定)、心力衰竭、心绞痛、糖尿病、继发性醛固酮增多症、原发性和继发性肺醛固酮增多症、原发性和肺动脉高压、糖尿病视网膜病、黄斑变性、眼部疾病、胰岛素抵抗、管理其他血管疾病，如偏头痛、雷诺氏病、管腔增生、认知功能障碍(如阿尔茨海默病)、中风、高钾血症、先兆子痫、结节病、缺血和再灌注损伤、动脉粥样硬化、慢性阻塞性肺疾病、哮喘和过敏性肾病、类风湿性关节炎、神经性疼痛和瘙痒症。
内皮素A受体抑制剂、CCR2途径抑制剂和/或AT1R阻断剂可以用于治疗、改善或预防肾病，更具体地选自以下列表的疾病：局灶性节段性肾小球硬化症(FSGS；包括原发性FSGS和继发性FSGS)、肾脏纤维化疾病、糖尿病肾病引起的慢性肾脏病、肾功能不全(糖尿病和非糖尿病)和肾衰竭病症包括糖尿病肾病、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病蛋白尿和肾血管性高血压。
内皮素A受体抑制剂、CCR2途径抑制剂和/或AT1R阻断剂可以用于治疗、改善或预防肺病，优选传染性或非传染性炎性肺病。优选地，该传染性或非传染性炎性肺病选自包括以下的列表：社区获得性肺炎、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、支气管扩张症、细支气管炎、支气管炎、肺气肿、胸膜炎或肺纤维化。
内皮素A受体抑制剂、CCR2途径抑制剂和/或AT1R阻断剂可以用于治疗、改善或预防心脏病。该心脏病可选自包括以下的列表：冠状动脉病包括关节硬化、肺动脉高压、缺血性心脏病、心肌病和炎症性心脏病。
术语“预防”包括将本发明的组合物给药于具有表明其处于发展疾病风险中的症状的受试者，但在治疗时可能未诊断出患有该疾病。例如，受试者可能患有糖尿病，但可能尚未被诊断患有糖尿病相关的肾病。
术语“改善”包括将本发明的组合物给药于患有该疾病并且有发展为疾病后病症例如纤维化和持续性炎症的风险的受试者。该疾病后病症可能是由于疾病本身造成的，或可能是由于医疗干预措施(例如肺病急性期使用的呼吸机)造成的。
抑制的测量
短语“内皮素A受体抑制剂”应理解为包括抑制或部分抑制内皮素A受体活化的任何化合物或药剂。
短语“血管紧张素1型受体阻断剂”应理解为包括抑制或部分抑制AT1R活化的任何化合物或药剂。
短语“趋化因子受体2途径抑制剂”旨在包括抑制或部分抑制与趋化因子受体2相关的任何一种途径的任何化合物或药剂。
本文所用的术语“抑制”是指与参考相比降低到可检测限度以下。该短语包括阻止、阻滞或阻碍某作用以防止出现不良结果。
本文使用的术语“部分抑制”是指与参考相比时在可检测限度内的任何减少。该短语包括阻止、阻滞或阻碍某作用以防止出现不良结果。
由(i)CCR2途径抑制剂和内皮素A受体抑制剂，或(ii)CCR2途径抑制剂、内皮素A受体抑制剂和AT1R阻断剂引起的CCR2途径、内皮素A受体和/或AT1R的抑制或部分抑制可使用本文所述的体外方法测量，包括但不限于用于评估表达CCR2的中性粒细胞和本领域已知的其他细胞的体外趋化迁移的生化或细胞测定，以及测量磷酸肌醇产生、细胞外调节激酶(ERK)磷酸化、cAMP产生、肌动蛋白募集、蛋白质磷酸化、核蛋白定位、基因转录、无标记技术(例如使用阻抗、光折射或电荷再分配)、使用邻近度报告***或其他方法的G蛋白偶联、β-抑制蛋白募集或介导的信号传导、基于转录因子的报告***、使用荧光标记的显微镜可视化、使用抗体评估受体细胞定位(如酶联免疫吸附测定)，以及荧光激活细胞分选。
由(i)CCR2途径抑制剂和内皮素A受体抑制剂，或(ii)CCR2途径抑制剂、内皮素A受体抑制剂和AT1R阻断剂引起的CCR2途径内皮素A受体和/或AT1R的抑制或部分抑制可使用本文所述的体内方法测量。
例如，如果该疾病是肾病，则测量包括但不限于通过测量血浆肌酸酐和尿素(例如通过自动分析仪)进行的肾功能的连续测量；蛋白尿的测量，白蛋白尿的测量；和GFR或估算的GFR；通过例如光学显微镜(LM)来检查诸如肾和/或心脏和/或眼结构的终点，以评估肾小球和心脏肥大、肾小球硬化和/或纤维化和/或足细胞变化，和/或；免疫组织化学，用于测量基质沉积的程度和促纤维化生长因子及其活性的调节；收缩血压评估、胰岛素空腹血糖调节、血红蛋白A1c调节；和根据常规测定法(例如本领域已知的测定法)评估肾和心脏和眼结构的分子生物学技术。抑制或部分抑制可以通过肾和/或心脏和/或眼结构的质量改善来指示，如通过一个或多个上述终点或其他患者受益终点(例如生活质量改善或肾脏或总体生存率)来测量。
或者，如果该疾病是肺病，则测量包括但不限于测量肺渗出液的细胞和细胞因子含量，测量肺功能，包括使用基于肺活量测定的肺功能的物理容量，或使用测量血气或其他生化测量测量的肺功能输出，或功能益处，包括通过生存或定量方法(例如步行测试)或定性方法(例如患者报告的结果评估)测量的临床益处的改善。抑制或部分抑制可以通过肺结构的定性改善来指示，如通过一个或多个上述终点测量的。
在其他实施方案中，当与施用各组分而不施用任何其他组分时的内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂或CCR2途径抑制剂的功效相比，药物制剂的总功效更大。因此，组合制剂可以以单一剂量施用，包括亚治疗剂量，或者较不经常的，组分中的任一种可以作为单一化合物施用。
优选地，当与施用各组分而不施用任何其他组分时的内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂和/或CCR2途径抑制剂的功效之和相比，药物制剂的总功效更大。更优选地，当同时或依次施用内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂和/或CCR2途径抑制剂时观察到功效的协同效应。
或者，药物制剂的总功效等于当施用任一组分而不施用任何其他组分时的内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂和/或CCR2途径抑制剂的功效之和。作为该替代方案的另一个优选实施方案，当同时或依次施用内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂和/或CCR2途径抑制剂时，观察到功效的相加效应。
在另一个替代方案中，药物制剂的总功效小于当施用任一组分而不施用任何其他组分时的内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂和/或CCR2途径抑制剂的功效之和。在进一步的实施方案中，虽然组合功效小于当施用各组分而不施用任何其他组分时的内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂和/或CCR2途径抑制剂的功效之和，但与内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂或CCR2途径抑制剂单独施用的单次治疗相比，该治疗提供更大的功效。
优选地，各组分同时施用(例如作为一起服用的两片或三片片剂，或作为与每种组分一起配制的单一片剂)或依次施用(例如服用另一片片剂后服用一片或两片片剂)。每种组分的剂量可以一起服用(同时)，或依次服用，彼此相隔数秒、数分钟、数天、数周或数月。
递送
本发明提供的剂型还可以包含小瓶、药筒、容器、片剂或胶囊，其包含本发明药物制剂连同用于将剂型施用于受试者以治疗、改善或预防疾病的剂量说明。
可以与载体材料组合以产生单一剂量的每种活性成分的量将根据待治疗的宿主和具体的施用方式而变化。例如，旨在用于人类口服施用的制剂可含有约0.5mg至1g的每种活性化合物以及合适且方便量的载体材料，其可在总制剂的约5％至95％w/w变化。剂量单位形式通常含有约0.5mg至500mg的活性成分。
优选地，CCR2途径抑制剂以每天0.5mg至2000mg的量提供，以一个或多个剂量提供。甚至更优选地，该CCR2途径抑制剂以每天0.5mg至50mg的剂量提供，以一个或多个剂量提供。
优选地，内皮素A受体抑制剂以每天0.5mg至2000mg提供，以一个或多个剂量提供。甚至更优选地，该内皮素A受体抑制剂以每天0.5mg至300mg的剂量提供，以一个或多个剂量提供。例如，ETAR抑制剂是司帕生坦，以每天75、150或300mg的剂量施用，以一个或多个剂量提供。其他示例性剂量包括：安贝生坦的剂量为每天5mg或10mg，以一个或多个剂量提供；波生坦的剂量为每天62.5mg或125mg，以一个或多个剂量提供；或马昔腾坦的剂量为每天10mg，以一个或多个剂量提供。
优选地，AT1R阻断剂以每天50mg至500mg提供，以一个或多个剂量提供。甚至更优选地，AT1R阻断剂以每天75mg至300mg提供。例如，AT1R阻断剂为厄贝沙坦，以每天75、150或300mg的剂量施用，以一个或多个剂量提供。例如，AT1R阻断剂为司帕生坦，以每天75、150或300mg的剂量施用，以一个或多个剂量提供。
每种活性剂的剂量可以单一剂型、两种分开的剂型或三种分开的剂型提供。活性剂可以以每天约0.5mg至2g的CCR2途径抑制剂、约0.5mg至2g的ETAR抑制剂和/或约50mg至500mg的AT1R阻断剂提供。活性剂的剂量可以以单一剂型、两种分开的剂型或三种分开的剂型提供。
然而，应当理解，任何具体受试者的特定剂量水平将取决于多种因素，包括所用特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、施用途径、***率、药物组合以及正在接受治疗的具体病症或疾病的严重程度。
在各个方面，本发明的制剂可以通过注射施用，或被制备用于口服、肺、鼻或任何其他形式的施用。优选地制剂通过例如以下方式施用：口服或通过胃饲管、静脉内、皮下、肌肉内、眶内、眼内、心室内、颅内、囊内、脊柱内、脑池内、腹膜内、颊部、直肠、***、鼻内或通过气雾剂施用。
施用模式在一方面至少适合于已制备制剂的形式。最有效反应的施用模式可以凭经验确定，并且下文描述的施用模式作为实例给出，并且不以任何方式限制本发明制剂的递送方法。所提供的所有制剂均常用于制药行业，并且为合格的从业人员所熟知。
注射剂型
本发明的制剂在某些方面可以包含药学上可接受的无毒赋形剂和载体，并通过任何肠胃外技术如皮下、静脉内和腹膜内注射施用。此外，制剂可以任选地含有一种或多种佐剂。如本文所用，“药物载体”是向受试者递送化合物的药学上可接受的溶剂、悬浮剂、赋形剂或媒介物。载体可以是液体或固体，并根据计划的施用方式进行选择。
适合注射使用的药物形式任选地包含无菌水溶液(在水溶性的情况下)或分散体和用于临时制备无菌注射溶液或分散体的无菌粉末。或者，本发明的化合物在某些方面被封装在脂质体中并以可注射溶液的形式递送以帮助它们跨细胞膜转运。或者或另外，此类制剂包含自组装孔结构的构成以促进跨细胞膜的转运。在各个方面，载体是溶剂或分散介质，其含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)、它们的合适混合物和植物油。适当的流动性例如但不限于，通过使用包衣例如卵磷脂、通过在分散体的情况下保持所需的粒度和通过使用表面活性剂来保持。
本发明还提供了可注射的缓释药物制剂的延长吸收，该制剂包含根据本发明的治疗有效的药物制剂和释放延迟剂。释放延迟剂可以是例如单硬脂酸铝和明胶。
通过将所需量的活性化合物与一种或多种上面列举的其他成分(根据需要)掺入适当的溶剂中，然后过滤灭菌来制备无菌可注射溶液。通常，分散体是通过将各种已杀菌活性成分掺入无菌媒介物中来制备的，该无菌媒介物中含有来自上面列举的那些基本分散体介质和所需的其他成分。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，某些方面的制备包括但不限于真空干燥和冷冻干燥技术，其从其先前无菌过滤的溶液中产生活性成分加上任何另外的所需成分的粉末。
口服剂型
本文考虑使用的是口服固体剂型，其一般描述于Martin，Remington'sPharmaceutical Sciences，第18版(1990Mack Publishing Co.Easton PA18042)的第89章，其通过引用将其并入本文。固体剂型包括片剂、胶囊、丸剂、***片或锭剂、扁囊剂、液体、悬浮液或小丸剂。此外，脂质体或类蛋白包封可用于配制本发明的制剂(例如，美国专利号4,925,673中报道的类蛋白微球)。可以使用脂质体封装并且可以用各种聚合物衍生脂质体(例如，美国专利号5,013,556)。Marshall在Modern Pharmaceutics，第10章，Banker andRhodes等人，(1979)中给出了治疗剂可能的固体剂型的描述，该文献以引用方式并入本文。一般而言，该制剂将包括作为本发明的一部分描述的化合物(或其化学改性形式)，以及允许保护免受胃环境影响和在肠中释放生物活性材料的惰性成分。
本发明的口服剂型可以是液体、悬浮液或直接递送至处于昏迷和/或使用呼吸器且无法吞咽片剂等的患者的饲管中的其他合适的剂型。
对于本发明的CCR2途径抑制剂、内皮素A受体抑制剂或AT1R阻断剂，释放位置可以是胃、小肠(十二指肠、空肠或回肠)或大肠。本领域技术人员有可用的制剂，它们不会在胃中溶解，但会在十二指肠或肠的其他地方释放物质。一方面，通过保护制剂或通过将化合物释放到胃环境之外(例如在十二指肠或肠的其他地方)释放将避免胃环境的有害影响。
包衣或包衣混合物也可用于片剂，其并非旨在保护胃部。这包括但不限于糖衣或使片剂更容易吞咽的包衣。示例性胶囊由用于递送干治疗剂即粉末的硬壳(例如明胶)组成；对于液体形式，可以使用软明胶壳。扁囊剂的外壳材料在某些方面是厚淀粉或其他可食用纸。对于丸剂、锭剂、模制片剂或片剂研磨剂，也可考虑湿法聚集技术(moist massingtechniques)，但不限于此。
如本文所用，术语“缓释”是指口服摄取后治疗化合物内容物在相对延长的时期内逐渐但连续或持续释放。在药物制剂从胃中通过，通过直到药物制剂到达肠道和在此之后释放可以继续。短语“缓释”还意指延迟释放，其中治疗化合物的释放不是在药物制剂到达胃时立即开始，而是延迟一段时间，例如，直到药物制剂到达肠时。在到达肠道后，pH值的增加可能会引发治疗化合物从药物制剂中的释放。
尽管在本文中使用术语“释放延迟剂”，但它是指当口服摄入时降低治疗化合物从药物制剂中释放的速率的物质。释放延迟剂可以是聚合物或非聚合物。释放延迟剂可以根据几种缓释***，包括例如扩散***、溶解***和/或渗透***中的任何一种使用。
在某些方面，治疗剂作为大小约为1mm的颗粒或小丸形式的细多颗粒包含在制剂中。在某些方面，用于胶囊施用的材料的制剂是粉末、轻压塞或甚至片剂。一方面，治疗剂可以通过压制制备。
可以任选地包括着色剂和调味剂。例如，可以配制化合物(例如但不限于，通过脂质体或微球封装)，然后进一步包含在可食用产品，例如含有着色剂和调味剂的冷藏饮料中。
一方面，治疗剂的体积可以用惰性材料稀释或增加。这些稀释剂可以包括碳水化合物，尤其是甘露醇、α-乳糖、无水乳糖、纤维素、蔗糖、改性葡聚糖和淀粉。某些无机盐也可任选用作填料，包括三磷酸钙、碳酸镁和氯化钠。一些市售稀释剂是Fast-Flo、Emdex、STA-Rx 1500、Emcompress和Avicell。
在其他实施方案中，崩解剂包含在将治疗剂制成固体剂型的制剂中。用作崩解剂的材料包括但不限于淀粉，包括基于淀粉的商业崩解剂Explotab。还考虑羟基乙酸淀粉钠、Amberlite、羧甲基纤维素钠、超支链淀粉、海藻酸钠、明胶、橘皮、酸性羧甲基纤维素、天然海绵和膨润土。另一种形式的崩解剂是不溶性阳离子交换树脂。粉状胶也可任选用作崩解剂和粘合剂，这些包括但不限于粉状胶，例如琼脂、Karaya或黄蓍胶。海藻酸及其钠盐也可用作崩解剂。
预期粘合剂将治疗化合物保持在一起以形成硬片剂并且包括但不限于来自天然产物的材料，例如***胶、黄蓍胶、淀粉和明胶。其他粘合剂包括但不限于甲基纤维素(MC)、乙基纤维素(EC)和羧甲基纤维素(CMC)。聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和羟丙基甲基纤维素(HPMC)被考虑用于酒精溶液中以使治疗剂成粒。
治疗剂的制剂中可以任选地包含减摩剂以防止配制过程中的粘连。润滑剂可以任选地用作治疗剂和模具壁之间的层，并且这些润滑剂可以包括但不限于：硬脂酸(包括其镁盐和钙盐)、聚四氟乙烯(PTFE)、液体石蜡、植物油和蜡。还可以使用示例性的可溶性润滑剂，例如包括十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸镁、各种分子量的聚乙二醇以及Carbowax4000和6000。
可以任选地添加助流剂，该助流剂可在配制过程中改善化合物的流动特性并有助于压缩过程中的重排。助流剂可以包括但不限于淀粉、滑石、热解二氧化硅和水合硅铝酸盐。
为了帮助治疗剂溶解到水性环境中，在某些实施方案中可以添加表面活性剂作为润湿剂。表面活性剂可以包括，例如但不限于，阴离子洗涤剂，例如十二烷基硫酸钠、二辛基磺基琥珀酸钠和二辛基磺酸钠。可以任选使用阳离子洗涤剂，并且可以包括但不限于苯扎氯铵或苄索氯铵。可以作为表面活性剂包含在制剂中的潜在非离子洗涤剂的列表是聚桂醇400、聚乙二醇40硬脂酸酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油10、50和60、单硬脂酸甘油酯、聚山梨醇酯40、60、65和80，蔗糖脂肪酸酯，甲基纤维素和羧甲基纤维素。当使用时，这些表面活性剂可以单独存在于化合物的制剂中，也可以作为不同比例的混合物存在。
潜在地增强化合物的吸收的添加剂是例如但不限于脂肪酸油酸、亚油酸和亚麻酸。
控释制剂可能是理想的。还考虑了这些制剂。在某些方面，可以将化合物掺入惰性基质中，该惰性基质允许通过扩散或浸出机制即树胶释放。在一些方面，还可以将缓慢退化的基质掺入到制剂中。这种治疗剂的另一种控释形式是通过基于Oros治疗***(AlzaCorp.)的方法，即药物被封闭在半透膜中，允许水进入并通过单个小开口将药物推出(由于渗透作用)。一些肠溶包衣还具有缓释作用。
在其他方面，可以使用混合材料来提供最佳薄膜包衣。薄膜包衣可以例如但不限于在锅包衣机中或在流化床中或通过压缩包衣进行。
肺部和鼻部剂型
本文还考虑了本发明制剂的肺部递送。在这些方面，CCR2途径抑制剂、内皮素A受体抑制剂或AT1R阻断剂可在吸入时被递送至受试者的肺并穿过肺上皮衬里进入血流。
预期用于实施本发明的是广泛范围的设计用于肺部递送治疗产品的机械装置，包括但不限于雾化器、计量吸入器和粉末吸入器，所有这些都是本领域技术人员所熟悉的。
适用于实施本发明的市售装置的一些具体实例是例如但不限于Ultravent雾化器，由Mallinckrodt,Inc.,St.Louis,Missouri制造；Acorn II雾化器，由MarquestMedical Products,Englewood,Colorado制造；Ventolin计量吸入器，由Glaxo Inc.,Research Triangle Park,North Carolina制造；和Spinhaler粉末吸入器，由FisonsCorp.,Bedford,Massachusetts制造。
所有这些装置都需要使用适合化合物分配的制剂。通常，每种制剂都特定于所用装置的类型，并且除了用于治疗的常用稀释剂、佐剂和/或载体之外，还可能涉及使用适当的推进剂材料。另外，还考虑使用脂质体、微胶囊或微球、包合复合物或其他类型的载体。
适合与喷雾器(喷射或超声波)一起使用的制剂通常包含悬浮在水中的化合物。一方面，制剂还可以包含缓冲剂和单糖(例如，用于蛋白质稳定和渗透压调节)。在一个实施方案中，喷雾器制剂还可以包含表面活性剂，以减少或防止在形成气溶胶时由溶液雾化引起的表面诱导的化合物聚集。
与计量吸入器装置一起使用的制剂在一方面通常包含细碎的粉末，该粉末含有借助表面活性剂悬浮在推进剂中的化合物。推进剂可以是为此目的使用的任何常规材料，例如但不限于氯氟烃、氢氯氟烃、氢氟烃或烃，包括三氯氟甲烷、二氯二氟甲烷、二氯四氟乙醇和1,1,1,2四氟乙烷，或它们的组合。合适的表面活性剂包括但不限于脱水山梨糖醇三油酸酯和大豆卵磷脂。在某些方面，油酸也可用作表面活性剂。
用于从粉末吸入器装置分配的制剂将包含含有该化合物的细碎干粉，并且还可以包括填充剂，例如但不限于乳糖、山梨糖醇、蔗糖或甘露醇，其量有利于粉末从装置中分散，例如占制剂重量的50至90％。在某些实施方案中，将化合物制备成平均粒度小于10微米、最优选0.5至5微米的颗粒形式，以最有效地递送至远端肺。
还考虑了化合物的鼻腔递送。鼻腔递送允许在将治疗产品施用于鼻子后直接将蛋白质通过血流，而无需将产品沉积在肺中。用于鼻腔递送的制剂包括具有例如但不限于葡聚糖或环葡聚糖的那些。
给药方案
应当理解，在某些方面，本发明的制剂可以作为单剂量方案给予，或者优选地，以多剂量方案给予。多剂量方案是这样一种方案，其中主要的递送过程可以是1至10个分开的剂量，随后任选地以维持或加强治疗所需的后续时间间隔给予其他剂量。剂量方案也将至少部分地由个体的需要和从业者的判断来确定。
因此，本发明提供了包含本发明药物制剂的片剂；包含本发明药物制剂的胶囊、包含本发明药物制剂的可注射混悬剂和包含本发明药物制剂的用于肺部递送的制剂。内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂和/或CCR2途径抑制剂可以在相同的制剂中递送，或者可以在分开的制剂中递送。
内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂和/或CCR2途径抑制剂可以在相同的剂型中，或者可以在分开的剂型中。施用内皮素A受体抑制剂、AT1R阻断剂和/或CCR2途径抑制剂的受试者可能已经接受了一种或多种活性剂，并且可以根据本发明施用本发明治疗的其他组分。本发明的治疗可以包括仅施用CCR2途径抑制剂和内皮素A受体抑制剂，或者可以包括施用CCR2途径抑制剂、内皮素A受体抑制剂和AT1R阻断剂。
赋形剂
CCR2途径抑制剂、ETAR抑制剂和AT1R阻断剂都可以是各自活性剂的药学上可接受的盐。药学和兽医学上可接受的盐包括保留本公开化合物的生物学有效性和性质并且在生物学或其他方面不是不期望的盐。在许多情况下，本文公开的化合物能够由于氨基和/或羧基或与其类似的基团的存在而形成酸和/或碱盐。可接受的碱加成盐可由无机和有机碱制备。衍生自无机碱的盐仅作为示例包括钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐和镁盐。衍生自有机碱的盐包括但不限于伯胺、仲胺和叔胺的盐，仅作为示例例如烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二(取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、环烷基胺、二(环烷基)胺、三(环烷基)胺、取代的环烷基胺、二取代的环烷基胺、三取代的环烷基胺、环烯基胺、二(环烯基)胺、三(环烯基)胺、取代的环烯基胺、二取代的环烯基胺、三取代的环烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、杂芳基胺、二杂芳基胺、三杂芳基胺、杂环胺、二杂环胺、三杂环胺、混合的二胺和三胺，其中胺上的至少两个取代基不同并且选自烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、杂芳基、杂环等。还包括其中两个或三个取代基与氨基氮一起形成杂环或杂芳基的胺。
药学和兽医学上可接受的酸加成盐可以由无机酸和有机酸制备。可以使用的无机酸包括，仅举例来说，盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。可以使用的有机酸包括，仅举例来说，乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。
可用于本公开的化合物的药学或兽医学上可接受的盐可以通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，此类盐可以通过将这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量的适当碱或酸在水中或有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备；通常，非水介质如***、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈是优选的。合适的盐列表见Remington's Pharmaceutical Sciences.第17版，Mack Publishing Company,Easton,Pa.(1985),p.1418，其公开内容通过引用并入本文。此类可接受的盐的实例是碘化物、乙酸盐、苯乙酸盐、三氟乙酸盐、丙烯酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、甲基苯甲酸酸、邻乙酰氧基苯甲酸盐、萘-2-苯甲酸盐、溴化物、异丁酸盐、苯基丁酸盐、γ-羟基丁酸盐、β-羟基丁酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、己炔-1,4-二酸盐、己炔-1,6-二酸盐、己酸盐、辛酸盐、氯化物、肉桂酸盐、柠檬酸盐、癸酸盐、甲酸盐、富马酸盐、乙醇酸盐、庚酸盐、马尿酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、邻苯二甲酸盐、对苯二甲酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、丙炔酸盐、丙酸盐、苯丙酸盐、水杨酸盐、癸二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、焦硫酸盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磺酸盐、苯磺酸盐、对溴苯磺酸盐、氯苯磺酸盐、丙磺酸盐、乙磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐、甲基磺酸盐、萘-I-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、对甲苯磺酸盐、二甲苯磺酸盐、酒石酸盐等。
用途
本发明还考虑了药物组合物在制备用于治疗、改善或预防疾病的剂型中的用途，该药物组合物包含：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐。
本发明进一步考虑了药物组合物在制备用于治疗、改善或预防疾病的剂型中的用途，该药物组合物包含：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐；和
c)至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐。
本发明提供了至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐和至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂。
本发明提供了至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐、至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐以及至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂。
本发明提供了：
•用于治疗、改善或预防疾病的制剂的至少一种内皮素A受体抑制剂，其中该至少一种内皮素A受体抑制剂与至少一种CCR2途径抑制剂同时或依次给药于受试者。
•用于治疗、改善或预防疾病的制剂的至少一种CCR2途径抑制剂，其中该至少一种CCR2途径抑制剂与至少一种内皮素A受体抑制剂同时或依次给药于受试者。
·用于治疗、改善或预防疾病的制剂的至少一种内皮素A受体抑制剂，其中该至少一种内皮素A受体抑制剂与至少一种CCR2途径抑制剂和至少一种血管紧张素1型受体阻断剂同时或依次给药于受试者。
·用于治疗、改善或预防疾病的制剂的至少一种CCR2途径抑制剂，其中该至少一种CCR2途径抑制剂与至少一种内皮素A受体抑制剂和至少一种血管紧张素1型受体阻断剂同时或依次给药于受试者。
·用于治疗、改善或预防疾病的制剂的至少一种血管紧张素1型受体阻断剂，其中该至少一种CCR2途径抑制剂与至少一种内皮素A受体抑制剂和至少一种CCR2途径抑制剂同时或依次给药于受试者。
优选地，该疾病为肾病、肺病或心脏病。该肾病可以选自包括以下的列表：局灶性节段性肾小球硬化症(FSGS；包括原发性FSGS和继发性FSGS)、肾脏纤维化疾病、糖尿病肾病引起的慢性肾脏病、肾功能不全(糖尿病和非糖尿病)和肾衰竭病症、包括糖尿病肾病、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病蛋白尿和肾血管性高血压。该肺病可为传染性或非传染性炎症性肺病，优选地选自以下列表：社区获得性肺炎、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、支气管扩张症、细支气管炎、支气管炎、肺气肿、胸膜炎或肺纤维化。该心脏病可为冠状动脉病，优选地选自以下列表：关节硬化、肺动脉高压、缺血性心脏病、心肌病和炎症性心脏病。
内皮素A受体抑制剂、CCR2途径抑制剂和/或AT1R阻断剂可以以相同的剂型或分开的剂型施用。内皮素A受体抑制剂、CCR2途径抑制剂和AT1R阻断剂可以同时或依次给药。
内皮素A受体抑制剂、CCR2途径抑制剂和/或AT1R阻断剂可以为内皮素A受体抑制剂、CCR2途径抑制剂和/或AT1R阻断剂的药学上可接受的盐。
试剂盒
本发明提供了用于治疗、改善或预防疾病的试剂盒，所述试剂盒包含：
a)至少一种趋化因子受体2(CCR2)途径抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
c)使用说明书。
本发明提供了用于治疗、改善或预防疾病的试剂盒，所述试剂盒包含：
a)至少一种趋化因子受体2(CCR2)途径抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；
c)至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐；和
d)使用说明书。
该试剂盒的内容物可以被冻干并且该试剂盒可以另外包含用于重构冻干组分的合适溶剂。试剂盒的各分组件将包装在单独的容器中，并且与这些容器相关联的可以是监管药品或生物产品的制造、使用或销售的政府机构规定的形式的通知，该通知反映了该机构批准用于人类施用的制造、使用或销售。
当试剂盒的组分以一种或多种液体溶液形式提供时，液体溶液可以是水溶液，例如无菌水溶液。对于体内使用，表达构建体可以配制成药学上可接受的可注射组合物。在这种情况下，容器装置本身可以是吸入器、注射器、移液管、滴管或其他类似装置，制剂可以从这些装置施加到动物的受影响区域，例如肺，注射到动物体内，或甚至适用于并与试剂盒的其他成分混合。
试剂盒的组分也可以干燥或冻干形式提供。当试剂或组分以干燥形式提供时，通常通过添加合适的溶剂进行重构。设想溶剂也可以提供在另一个容器装置中。不考虑容器的数量或类型，本发明的试剂盒还可以包括或包装有用于辅助注射/施用或放置最终复合组合物在动物体内的仪器。这样的仪器可以是吸入器、注射器、移液管、镊子、量匙、滴眼管或任何这样的医学上批准的递送工具。
通用
本领域的技术人员将理解，本文描述的本发明易于进行除具体描述的那些之外的变化和修改。本发明包括所有这些变化和修改。本发明还单独或共同地包括说明书中提及或指示的所有步骤、特征、制剂和化合物，以及包括任何和所有组合或任何两个或更多个步骤或特征。
本文中引用的每篇文献、参考、专利申请或专利均通过引用明确地整体并入本文，这意味着读者应将其作为本文的一部分阅读和考虑。本文中引用的文献、参考、专利申请或专利在本文中不重复仅仅是为了简洁。
本文提及的或通过引用并入本文的任何文件中的任何产品的任何制造商的说明、描述、产品规格和产品表均通过引用并入本文，并且可以在本发明的实践中使用。
本发明的范围不受本文所述的任何具体实施方案的限制。这些实施方案仅用于示例目的。功能等同的产品、制剂和方法显然在本文所述的本发明范围内。
本文描述的本发明可以包括一个或多个值范围(例如，尺寸、位移和场强等)。值的范围将被理解为包括该范围内的所有值，其包括限定该范围的值，以及与该范围相邻的值，其导致与紧邻限定该范围边界的值相同或基本相同的结果。因此，除非有相反的说明，否则说明书和权利要求书中提出的数值参数是近似值，可以根据本发明寻求获得的所需特性而变化。因此，“约80％”意味着“约80％”以及“80％”。至少，每个数值参数都应该根据有效数字的位数和普通的四舍五入方法来解释。
在整个说明书中，除非上下文另有要求，否则词语“包含(comprise)”或变体(例如“comprises”或“comprising”)将被理解为暗示包含所陈述的整数或整数组，但不排除任何其他整数或整数组。还应注意，在本公开内容中，特别是在权利要求和/或段落中，诸如包含(“comprises”、“comprised”、“comprising”)等术语可以具有美国专利法中赋予它的含义；例如，它们可以表示“包括”(“includes”、“included”、“including”)等；并且术语例如“基本上由……组成”(“consisting essentially of”和“consists essentially of”)具有美国专利法赋予它们的含义，例如，它们允许未明确列举的元素，但排除现有技术中发现的或影响本发明的基本或新颖特征的元素。
本文使用的选定术语的其他定义可在本发明的详细描述中找到并且自始至终适用。除非另有定义，本文使用的所有其他科学和技术术语与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同。术语“活性剂”可以是指一种活性剂或可以包括两种或更多种活性剂。
以下实施例用于更全面地描述使用上述发明的方式，以及提出为实施本发明的各个方面所设想的最佳模式。应当理解，这些方法绝不用于限制本发明的真实范围，而是出于说明性目的而呈现的。
参考文献
·Taylor等人(2011)J Clin Hypertens.13：677–686
·Rios等人(2000)Pharmacol.Ther.92：71-87
·Pfleger等人(2006)Cell Signal 18：1664-1670
·Pfleger等人(2006)Nat Protoc 1：336-344
·Ayoub等人(2015)PLoS One 10(3)：e0119803
实施例
在以下非限制性实施例中更全面地描述了本发明的其他特征。仅出于举例说明本发明的目的而包括该描述。不应将其理解为对上述本发明的广泛描述的限制。
实施例1
受体功能相互作用的测定
HEK293FT细胞以约700,000个细胞/孔的密度接种在6孔板中，并保持在37℃、5％CO2的完全培养基(含有0.3mg/ml谷氨酰胺、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素(ThermoFisher)的DMEM)，其补充有10％胎牛血清(FCS；Bovogen)。根据制造商的说明，在接种后24小时使用FuGene6(Promega)进行瞬时转染。转染后24小时，用PBS洗涤细胞，使用0.05％胰蛋白酶/0.53mM EDTA分离，重悬于含有5％ FCS的无酚红完全培养基中，并添加到聚-L-赖氨酸包被的白色96-微孔板(Greiner Bio-One)。转染后48小时，在细胞与EnduRenTM(Promega)以30μM的终浓度，于37℃、5％ CO2预孵育2小时后，进行生物发光共振能量转移(BRET)测定。使用CLARIOstar(BMG Labtech)在37℃进行BRET测量。在每个‘供体波长窗口’(410-490nm)和‘受体波长窗口’(520-620nm)测量过滤后的光发射1s。
对于拮抗剂测定，将细胞在EnduRen中预孵育2小时。添加拮抗剂(10μM)，并读取测定结果30分钟。随后，添加激动剂(CXCL8 10nM,AngII 100nM)并继续测量1小时。
在相互作用的蛋白质之间观察到的BRET信号通过减去背景BRET比率来归一化。这可以通过以下两种方式之一完成(参见Pfleger等人(2006)Cell Signal 18:1664-1670；Pfleger等人(2006)Nat Protoc 1:336-344)：1)从含有相互作用的受体和供体融合蛋白的样品的520-550nm发射与460-490nm发射的比率中减去仅含有供体构建体的细胞样品的相同比率；2)从用配体处理细胞的样品的第二个等分试样的520-550nm发射与460-490nm发射的比率中减去用媒介物处理的相同细胞样品的相同比率。在以下实施例中，将使用第二次计算，并将信号描述为“配体诱导的BRET”。
受体-异聚体研究技术(Receptor-HIT)是一种测定配置，可提供对受体复合物的深入了解(Ayoub等人(2015)PLoS One 10(3):e0119803)。在评估GPCR时，它也称为GPCR-HIT。它是一种测定配置，其中一种受体(例如CCR2)用基于邻近度的报告***(例如BRET)的一种组分(例如海肾萤光素酶变体Rluc8)标记，其互补组分(例如Venus黄色荧光蛋白)融合到受体相互作用伙伴(例如β-抑制蛋白2)。用相对于BRET测定(例如血凝素表位标记的AT1R；HA-AT1R)对未标记的受体有选择性的配体(例如AngII)处理导致BRET标记的受体和相互作用伙伴的邻近度的调节，其导致BRET信号的变化，这表明两种受体之间的功能相互作用。
结果
图1是ETAR/Rluc8+Barr2/Venus+CCR2的图，其表明当ETAR用Rluc8标记并且β-抑制蛋白用Venus标记在未标记的CCR2存在的情况下时，β-抑制蛋白在ET-1存在的情况下(正如所预期的)被募集到ETAR，而且在CCL2/MCP1存在的情况下也是如此这证实了受体之间存在复合物。两种配体的存在都会导致β-抑制蛋白募集过度激活，从而证实了异聚体的相互作用。
图2是ETAR/Rluc8+Barr2/Venus+CCR2的图，其表明当CCL2存在的情况下，β-抑制蛋白被募集到ETAR，从而证实了ETAR和未标记的CCR2的相互作用。当CCL2/CMP-1和ET-1配体同时存在时，司帕生坦能够消除过度激活，但不会停止β-抑制蛋白向ETAR的募集。
图3是ETAR/Rluc8+Barr2/Venus+CCR2的图，其表明通过添加司帕生坦或CCR2抑制作用可以消除ETAR和CCR2异聚体的过度激活。当ET-1刺激时，无论CCR2是否存在，ETAR都能够以低强度募集β-抑制蛋白，而司帕生坦会抑制这种独立于CCR2激活的信号传导。仅当ET-1和CCL2/MCP-1存在且当同时抑制CCR2和ETAR时，才会完全抑制β-抑制蛋白向ETAR的募集。
图4是CCR2/Rluc8+Barr2/Venus+HA-ETAR的图，其表明在不同的实验方向中，在未标记的ETAR存在的情况下，CCR2用Rluc8标记并且β-抑制蛋白用Venus标记，在CCL2/MCP-1存在的情况下，β-抑制蛋白被募集到CCL2。在CCL2/MCP-1和ET-1配体存在的情况下观察到β-抑制蛋白的募集增加，这证实了CCR2和ETAR之间存在相互作用。
图5是CCR2/Rluc8+Barr2/Venus+HA-ETAR的图，其表明当用司帕生坦阻断ETAR激活时，在CCL2/MCP-1和ET-1存在的情况下，未观察到β-抑制蛋白的募集增加。
图6是CCR2/Rluc8+Barr2/Venus+HA-ETAR的图，其表明在CCL2/MCP-1存在的情况下，当CCR2被抑制时，无论是否存在具有ET-1的ETAR激活，都不会募集β-抑制蛋白到CCR2。
实施例2
制剂
用于本发明的示例性制剂。
表1：示例性制剂
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Claims (27)

1.药物组合物，其包含：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1的药物组合物，其还包含至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐。
3.根据权利要求1的药物组合物，其中所述内皮素A受体抑制剂选自：内皮素A受体拮抗剂；双重内皮素A和B拮抗剂；和双重异源性受体拮抗剂及其组合。
4.根据权利要求3的药物组合物，其中：
a)所述内皮素A受体拮抗剂选自：西他生坦、安贝生坦、阿曲生坦、BQ-123、齐泊腾坦；
b)所述双重内皮素A和B拮抗剂选自：波生坦、马昔腾坦、替唑生坦；和/或
c)所述双重异源性受体拮抗剂选自：司帕生坦。
5.根据权利要求1的药物组合物，其中所述趋化因子受体2(CCR2)抑制剂选自：瑞帕锗；丙帕锗；CCX140；Cenicriviroc；PF-6309；PF-04178903；CCX872-B；MLN1202；和PF-04634817。
6.根据权利要求2的药物组合物，其中所述血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂选自：司帕生坦、厄贝沙坦、依普罗沙坦、氯沙坦、缬沙坦、替米沙坦、坎地沙坦、奥美沙坦、ZD-7115、非马沙坦、阿齐沙坦、DuP 753、EXP 3174、恩布沙坦、KRH-594、福沙坦和普拉沙坦。
7.根据权利要求1或2的药物组合物，其中CCR2途径抑制剂和内皮素A受体抑制剂以相同的剂型或分开的剂型施用。
8.根据权利要求1的药物组合物，其中CCR2途径抑制剂和内皮素A受体抑制剂同时或依次给药。
9.根据权利要求2的药物组合物，其中CCR2途径抑制剂、内皮素A受体抑制剂和AT1R阻断剂以相同的剂型或分开的剂型施用。
10.根据权利要求2的药物组合物，其中CCR2途径抑制剂、内皮素A受体抑制剂和AT1R阻断剂同时或依次给药。
11.治疗、改善或预防疾病的方法，所述方法包括向受试者给药治疗有效量的以下组合：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐。
12.根据权利要求11的方法，其还包括向所述受试者给药治疗有效量的至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐。
13.根据权利要求11的方法，其中所述疾病为肾病、肺病或心脏病。
14.根据权利要求13的方法，其中：
-所述肾病选自以下列表：局灶性节段性肾小球硬化症(FSGS；包括原发性FSGS和继发性FSGS)、肾脏纤维化疾病、糖尿病肾病引起的慢性肾脏病、肾功能不全(糖尿病和非糖尿病)和肾衰竭病症，包括糖尿病肾病、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病蛋白尿和肾血管性高血压；
-所述肺病为传染性或非传染性炎症性肺病；和/或
-所述心脏病为冠状动脉病。
15.根据权利要求14的方法，其中所述传染性或非传染性炎症性肺病选自以下列表：社区获得性肺炎、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、支气管扩张症、细支气管炎、支气管炎、肺气肿、胸膜炎或肺纤维化。
16.根据权利要求14的方法，其中所述冠状动脉病选自以下列表：关节硬化、肺动脉高压、缺血性心脏病、心肌病和炎症性心脏病。
17.药物组合物在制备用于治疗、改善或预防疾病的剂型中的用途，所述药物组合物包含：
a)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
b)至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐。
18.根据权利要求17的用途，其中所述组合物还包含至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐。
19.至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐和至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂。
20.至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐、至少一种趋化因子受体2(CCR2)抑制剂或其药学上可接受的盐和至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂。
21.至少一种内皮素A受体抑制剂，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂，其中所述至少一种内皮素A受体抑制剂与至少一种CCR2途径抑制剂同时或依次给药于受试者。
22.至少一种CCR2途径抑制剂，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂，其中所述至少一种CCR2途径抑制剂与至少一种内皮素A受体抑制剂同时或依次给药于受试者。
23.至少一种内皮素A受体抑制剂，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂，其中所述至少一种内皮素A受体抑制剂与至少一种CCR2途径抑制剂和至少一种血管紧张素1型受体阻断剂同时或依次给药于受试者。
24.至少一种CCR2途径抑制剂，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂，其中所述至少一种CCR2途径抑制剂与至少一种内皮素A受体抑制剂和至少一种血管紧张素1型受体阻断剂同时或依次给药于受试者。
25.至少一种血管紧张素1型受体阻断剂，其用于治疗、改善或预防疾病的制剂，其中所述至少一种血管紧张素1型受体阻断剂与至少一种内皮素A受体抑制剂和至少一种CCR2途径抑制剂同时或依次给药于受试者。
26.用于治疗、改善或预防疾病的试剂盒，所述试剂盒包含：
a)至少一种趋化因子受体2(CCR2)途径抑制剂或其药学上可接受的盐；
b)至少一种内皮素A受体抑制剂或其药学上可接受的盐；和
c)使用说明书。
27.根据权利要求26的试剂盒，其还包含至少一种血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂或其药学上可接受的盐。
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