CN116963755A - 经修饰的白细胞介素2（il-2）多肽以及制备和使用其的方法 - Google Patents

经修饰的白细胞介素2（il-2）多肽以及制备和使用其的方法 Download PDF

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Abstract

本公开主要涉及：经修饰的白细胞介素2(IL‑2)多肽；编码此类经修饰的IL‑2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体和病毒载体；制备此类经修饰的IL‑2多肽和编码所述经修饰的IL‑2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体和病毒载体的方法；以及使用此类经修饰的IL‑2多肽和编码所述经修饰的IL‑2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体和病毒载体的方法。

Description

经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽以及制备和使用其的方法
相关申请的交叉引用
本申请要求于2020年10月14日提交的美国临时专利申请第63/091,679号的优先权，所述美国临时专利申请的内容和公开内容出于所有目的以全文引用的方式并入本文中。
技术领域
本公开主要涉及经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽和/或包含经修饰的IL-2多肽的缀合物、编码此类经修饰的IL-2多肽的多核苷酸(如DNA多核苷酸和/或RNA多核苷酸)、携带此类多核苷酸的载体(如促进所述经修饰的IL-2多肽在体外和/或体内由携带此类载体的宿主细胞表达的病毒载体或非病毒载体)以及其用途，如用于治疗某些疾病、病状或病症的方法。
背景技术
细胞因子包含细胞信号传导蛋白家族，如趋化因子、干扰素、白细胞介素、淋巴因子、肿瘤坏死因子和其它在先天和适应性免疫细胞稳态中发挥作用的生长因子。细胞因子由如巨噬细胞、B淋巴细胞、T淋巴细胞和肥大细胞、内皮细胞、成纤维细胞和不同基质细胞等免疫细胞产生。在一些情况下，细胞因子调节体液免疫应答与基于细胞的免疫应答之间的平衡。
白细胞介素是调节T淋巴细胞和B淋巴细胞、单核细胞谱系细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、巨核细胞和造血细胞的发育和分化的信号传导蛋白。白细胞介素由辅助CD4 T和B淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞和其它组织内的细胞产生。白细胞介素2(IL-2)是多效性1型细胞因子，所述细胞因子的结构包含15.5kDa的四a-螺旋束。IL-2的前体形式的长度为153个氨基酸残基，其中前20个氨基酸形成信号肽并且残基21-153形成成熟形式。IL-2主要由抗原刺激后的CD4+T细胞产生，而较小部分由CD8+细胞、天然杀伤(NK)细胞以及NK T(NKT)细胞、经活化的树突细胞(DC)和肥大细胞产生。IL-2信号传导通过与IL-2受体(IL-2R)亚基、IL-2Rα(也称为CD25)、IL-2Rβ(也称为CD122)和IL-2Rγ(也称为CD 132)的特定组合相互作用而发生。IL-2与IL-2Rα的相互作用形成“低亲和力”IL-2受体复合物，其中Kd为约10-8M。IL-2与IL-2Rβ和IL-2Rγ的相互作用形成“中等亲和力”IL-2受体复合物，其中Kd为约10-9M。IL-2与所有三个亚基IL-2Rα、IL-2Rβ和IL-2Rγ的相互作用形成“高亲和力”IL-2受体复合物，其中Kd为约>10-11M。
在一些情况下，通过“高亲和力”IL-2Rαβγ复合物进行的IL-2信号传导能调控调节性T细胞的活化和增殖。调节性T细胞，如CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞通过抑制效应细胞(如CD8+T细胞)、辅助细胞(如CD4+Th1、Th2和Th17细胞)、B细胞、NK细胞和NK T细胞来介导免疫稳态的维持。在一些情况下，Treg细胞由胸腺(tTreg细胞)产生或由外周(pTreg细胞)中的初始T细胞诱导产生。在一些情况下，Treg细胞被认为是外周耐受性的主导介体。事实上，在一项研究中，将CD25耗竭的外周CD4+T细胞移植到裸鼠中会产生各种自身免疫性疾病，而CD4+CD25+T细胞的共移植能抑制自身免疫性的发展(Sakaguchi等人,《免疫学杂志(J.Immunol.)》(1995))。Treg细胞群的增强使效应T细胞的增殖降低并且抑制自身免疫反应和T细胞抗肿瘤应答。
用于治疗许多疾病和病症(如癌症以及自身免疫性疾病和炎性疾病)的白细胞介素-2(IL-2)的临床用途主要受毒性和较短的体内半衰期限制(Pachella等人,《肿瘤学高级从业者杂志(J Adv Pract Oncol)》(2015)；Lotze等人(1985)《免疫学杂志》(1985))。已经观察到，其毒性在缺乏CD25(IL-2受体α单元，IL-2Rα)的动物中显著降低(Boyman等人,《免疫学杂志》(2009))。在某些情况下，聚乙二醇化，即将聚乙二醇(PEG)与治疗剂共价连接，已经示出能克服如快速的机体清除、聚集和酶促降解等障碍(Maiser等人,《生物技术与生物工程(Biotechnol Bioeng)》(2014))。
WO 2019/028419 A1和WO 2019/028425 A1公开了某些白细胞介素(IL)缀合物(例如，IL-2缀合物)以及在治疗某些适应症中的用途。在WO 2019/028419 A1和WO 2019/028425A1中还描述了包含一种或多种白细胞介素缀合物(例如，IL-2缀合物)的药物组合物以及试剂盒。
现存在对改善的经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽的需求，包括包含缀合物的此类经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽。本文中和贯穿本文所提供的本公开解决了这一点和其它相关需要。
发明内容
本公开在本文中提供并且贯穿本文主要涉及：经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽；编码此类经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体和病毒载体；制备此类经修饰的IL-2多肽和编码此类IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体和病毒载体的方法；以及使用此类经修饰的IL-2多肽和编码此类IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体和病毒载体的方法。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2具有至少80％同一性的氨基酸序列，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、I128以及其组合，其中a)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体α(IL-2Rα)的结合增强；和/或b)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体αβγ(IL-2Rαβγ)的结合增强；和/或b)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与表达白细胞介素2受体αβγ(IL-2Rαβγ)的细胞的结合增强；和/或c)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽通过IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增强；和/或e)与不具有所述取代的IL-2多肽的IL-2Rαβγ受体信号传导效力与IL-2Rβγ受体信号传导效力的比率相比，所述经修饰的IL-2多肽的IL-2Rαβγ受体信号传导效力与IL-2Rβγ受体信号传导效力的比率增强；和/或f)所述经修饰的IL-2多肽被配置成与缀合部分缀合；和/或g)所述经修饰的IL-2多肽与缀合部分缀合；和/或h)a)至g)的组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含：a)在位置N29处用半胱氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸进行的取代；和/或b)在位置Y31处用半胱氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸或苯丙氨酸进行的取代。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含取代N29C。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含取代Y31C。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸或酪氨酸进行的取代：L18、L19、V69、Q74、N88、V91和I128。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含选自由Y31C组成的组的取代。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽被配制成与选自由以下组成的组的缀合部分缀合：水溶性聚合物、脂质、肽、蛋白质、多肽以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽与聚乙二醇缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含选自由以下组成的组的突变：N29C、N30C、Y31C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C，其中所述多肽在N29C、N30C、Y31C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C位点处聚乙二醇化。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含N29C或Y31C突变。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含：a)在选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸进行的取代：N29、N30、Y31以及其组合；或b)在选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸进行的取代：N30、Y31以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含：a)在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：N29、N30、Y31，并且：(i)是未缀合的；(ii)与以下缀合：或(iii)被配置成与以下缀合：一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽，所述缀合在一个或多个选自由以下组成的组的位置处进行：N29、N30、Y31、E100、N119、T123、S127、T131；和/或b)在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：N29、N30、Y31，并且：(i)是未缀合的；(ii)与以下缀合：或(iii)被配置成与以下缀合：一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽，所述缀合在一个或多个选自由以下组成的组的位置处进行：N29、N30、Y31；和/或c)在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：N29、N30、Y31以及其组合，并且：(i)是未缀合的；(ii)与以下缀合：或(iii)被配置成与以下缀合：一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽，所述缀合在所述经修饰的IL-2多肽的N末端和/或C末端处进行。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含：a)在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用半胱氨酸进行的取代：N29、N30、Y31；和/或b)在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用半胱氨酸进行的取代：N30、Y31；和/或c)包含在位置Y31处用半胱氨酸进行的取代；和/或f)包含在位置N30处用半胱氨酸进行的取代。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含在IL-2Rα相互作用区域、和/或IL-2Rβ相互作用区域和/或IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的一个或多个取代。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含在IL-2Rβ相互作用区域和/或IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的一个或多个取代。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的一个或多个取代：L18、L19、V69、Q74、N88、V91、I128以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含在选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸或酪氨酸进行的一个或多个取代：L18、L19、V69、Q74、N88、V91、I128以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含：a)在位置L18处用甲硫氨酸进行的取代；和/或b)在位置L19处用丝氨酸进行的取代；和/或c)在位置Y31处用半胱氨酸进行的取代；和/或d)包含在位置V69处用丙氨酸进行的取代；和/或e)包含在位置Q74处用脯氨酸进行的取代；和/或f)包含在位置N88处用精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸进行的取代；和/或g)包含在位置N88处用精氨酸进行的取代；和/或h)包含在位置N88处用天冬氨酸进行的取代；i)包含在位置N88处用谷氨酸进行的取代；j)包含在位置N88处用赖氨酸进行的取代；k)包含在位置V91处用赖氨酸进行的取代；l)包含在位置I128处用苏氨酸进行的取代；和/或m)a)至l)的组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含：a)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rβ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代；和/或b)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代；和/或c)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代、在IL-2Rβ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合增加。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合亲和力从约10％增加到约100％，或从约1倍增加到约100,000倍或更多倍。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加，所述结合从约10％增加到约100％，或从约1倍增加到约100,000倍或更多倍。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞内化的水平降低。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽具有被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化，所述内化水平为约10％至约100％，或从约1倍增加到约100,000倍或更多倍。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化为检测不到的水平。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增加。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα的结合增加，并且与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增加。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合增加，并且对IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加，并且与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞内化的水平降低。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中：(i)所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合增加；(ii)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加；(iii)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化为检测不到的水平；并且(iv)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增加。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体β(IL-2Rβ)或白细胞介素2受体γ(IL-2Rγ)的结合水平降低；和/或与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rβγ的受体信号传导效力降低。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rβγ的受体信号传导效力较低。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中：(i)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rβ或IL-2Rγ的结合水平较低；并且(ii)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rβγ的受体信号传导效力较低。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的信号传导效力与对IL-2Rβγ的信号传导效力的比率增加。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的信号传导效力与对IL-2Rβγ的信号传导效力的比率增加，所述增加大于1倍、大于10倍、大于100倍、大于1,000倍、大于10,000倍、大于100,000倍。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含N末端缺失，其中所述缺失包括氨基酸残基1至30(包括端值)之间的一个或多个的缺失，所述氨基酸残基存在于不包含所述N末端缺失的对应的修饰的IL-2多肽中。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含C末端缺失，其中所述缺失包括氨基酸残基114至134(包括端值)之间的一个或多个的缺失，所述氨基酸残基存在于不包含所述C末端缺失的对应的修饰的IL-2多肽中。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含N末端缺失以及C末端缺失。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽是包含另外的氨基酸序列的融合多肽的一部分。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含重组融合蛋白，所述重组融合蛋白包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的所述N末端或所述C末端与另外的氨基酸序列融合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的所述N末端或所述C末端与另外的氨基酸序列融合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体序列或其一部分或片段。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的所述N末端或所述C末端与另外的氨基酸序列融合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体的Fc部分或其一部分或片段。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽是分离的。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽由载体表达，所述载体包含编码所述经修饰的IL-2多肽的多核苷酸序列。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽由载体表达，所述载体包含编码所述经修饰的IL-2多肽的多核苷酸序列，其中所述载体是RNA载体、DNA、病毒载体或非病毒载体。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物、脂质、多肽、蛋白质或肽缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过一个或多个共价键与一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过一个或多个非共价键与一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的半胱氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的半胱氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过所述经修饰的IL-2多肽的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过以下与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：i)所述经修饰的IL-2多肽的N末端氨基酸残基的α氨基；ii)所述经修饰的IL-2多肽的赖氨酸氨基酸残基的ε氨基；或iii)所述经修饰的IL-2多肽的N糖基化位点或O糖基化位点。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过连接子与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽共价地缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过位于所述经修饰的IL-2多肽内的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述单个氨基酸残基位于所述另外的氨基酸序列内。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体序列或其一部分或片段。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体的Fc部分。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述单个氨基酸残基是：i)所述融合多肽的N末端氨基酸残基的α氨基；ii)所述融合多肽的赖氨酸氨基酸残基的ε氨基；或iii)所述融合多肽的N糖基化位点或O糖基化位点。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述融合多肽通过连接子与所述水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽共价地缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物缀合，所述水溶性聚合物包含聚乙二醇(PEG)、聚(丙二醇)(PPG)、乙二醇和丙二醇的共聚物、聚(氧乙基化多元醇)、聚(烯醇)、聚(乙烯基吡咯烷酮)、聚(羟烷基甲基丙烯酰胺)、聚(羟烷基甲基丙烯酸酯)、聚(糖)、聚(a-羟基酸)、聚(乙烯醇)、聚磷腈、聚噁唑啉(POZ)、聚(N-丙烯酰基吗啉)或其组合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含线性PEG分子的水溶性聚合物缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合，所述支化PEG分子包含从中央核心基团发出的约三个至约十个PEG链。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述支化PEG分子是包含从中央核心基团发出的约10个至约100个PEG链的星形PEG。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述支化PEG分子是包含移植到聚合物主链上的多个PEG链的梳状PEG。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子的分子量的范围为约300g/mol至约10,000,000g/mol。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子的平均分子量为约5,000道尔顿至约1,000,000道尔顿。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子的平均分子量为约20,000道尔顿至约30,000道尔顿。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子是单分散、均匀或离散的PEG分子。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物缀合，其中所述水溶性聚合物包含多糖。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与脂质缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与脂质缀合，其中所述脂质包含脂肪酸。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与蛋白质缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与蛋白质缀合，其中所述蛋白质包含抗体或其结合片段。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与抗体的Fc部分或其片段缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，所述水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽通过连接子与所述经修饰的IL-2多肽的所述取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸间接结合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，所述水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽与所述经修饰的IL-2多肽的所述取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸直接结合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽具有约5分钟至约10天的体内半衰期。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽选自由以下组成的组：ACT5200、ACT5201、ACT5210、ACT5211、ACT5212、ACT522S0、ACT522S1、ACT5230、ACT5231、ACT5260、ACT5261、ACT5270、ACT5271、ACT5280、ACT5281、ACT5290和ACT5291。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种药物组合物，其包含有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽以及药学上可接受的载体或赋形剂。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种药物组合物，其包含有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽，其中所述药物组合物进一步包含另一种活性成分。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种药物组合物，其包含有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽，其中所述药物组合物进一步包含一种或多种另外的成分，其中一种或多种活性成分包含：(i)抗炎物质或抗自身免疫性物质；(ii)抗赘生物物质；(iii)抗感染性疾病物质；和/或(iv)免疫缺陷病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种药物组合物，其包含有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽，其中所述药物组合物用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种药物组合物，其包含有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽，其中所述药物组合物用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含炎性疾病或病症或自身免疫性疾病或病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种药物组合物，其包含有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽，其中所述药物组合物用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种药物组合物，其包含有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽，其中所述药物组合物用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含感染性疾病或病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种药物组合物，其包含有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽，其中所述药物组合物用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含免疫缺陷病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含炎性疾病或病症或自身免疫性疾病或病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含感染性疾病或病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含免疫缺陷疾病或病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述受试者是人。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述受试者是非人哺乳动物。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症，其中所述增殖性病症包含肿瘤。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症，其中所述增殖性病症包含癌症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症，其中所述增殖性病症包含实体瘤或癌症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症，其中所述增殖性病症包含实体瘤或癌症，其中所述实体瘤或所述癌症选自由以下组成的组：软骨肉瘤、尤文氏肉瘤、骨/骨肉瘤恶性纤维组织细胞瘤、骨肉瘤、横纹肌肉瘤、心脏癌、星形细胞瘤、脑干胶质瘤、毛细胞型星形细胞瘤、室管膜瘤、原始神经外胚层肿瘤、小脑星形细胞瘤、脑星形细胞瘤、神经胶质瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、少突胶质细胞瘤、松果体星形细胞瘤、垂体腺瘤、视觉通路和下丘脑神经胶质瘤、乳腺癌、浸润性小叶癌、小管癌、浸润性筛状癌、髓样癌、男性乳腺癌、叶状肿瘤、炎性乳腺癌、肾上腺皮质癌、胰岛细胞癌(内分泌胰腺)、多发性内分泌瘤变综合征、甲状旁腺癌、嗜铬细胞瘤、甲状腺癌、默克尔细胞癌、葡萄膜黑色素瘤、视网膜母细胞瘤、***癌、阑尾癌、胆管癌、类癌瘤、胃肠道癌、结肠癌、肝外胆管癌、胆囊癌、胃癌、胃肠类癌瘤、胃肠间质瘤(GIST)、肝细胞癌、胰岛细胞胰腺癌、直肠癌、膀胱癌、***、子宫内膜癌、性腺外生殖细胞肿瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌(表面上皮-间质肿瘤)、卵巢生殖细胞肿瘤、***癌、肾细胞癌、肾盂和输尿管、移行细胞癌、***癌、睾丸癌、妊娠滋养细胞肿瘤、输尿管和肾盂、移行细胞癌、尿道癌、子宫肉瘤、***癌、外阴癌、维尔姆斯肿瘤、食管癌、头颈癌、鼻咽癌、口腔癌、口咽癌、鼻窦和鼻腔癌、咽癌、唾液腺癌、下咽癌、基底细胞癌、黑色素瘤、皮肤癌(非黑色素瘤)、支气管腺瘤/类癌、小细胞肺癌、间皮瘤、非小细胞肺癌、胸膜肺母细胞瘤、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、AIDS相关癌症、卡波西肉瘤、上皮样血管内皮瘤(EHE)以及促纤维增生性小圆细胞瘤和脂肪肉瘤。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症，其中所述增殖性病症包含肿瘤或癌症，其中所述肿瘤或所述癌症是恶性血液肿瘤。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症，其中所述增殖性病症包含肿瘤或癌症，其中所述肿瘤或所述癌症是选自由以下组成的组的恶性血液肿瘤：骨髓赘生物、白血病、淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤、血管免疫性T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤网状内皮组织增殖、网状细胞增多症、小神经胶质瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤、B细胞慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、纵隔大B细胞淋巴瘤、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、***边缘区B细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、淋巴瘤样肉芽肿病、结节性淋巴细胞主要霍奇金淋巴瘤、浆细胞白血病、急性红细胞增多症和红白血病、急性红细胞性骨髓病、急性红细胞白血病、黑尔梅尔-舍纳病、急性巨核细胞白血病、肥大细胞白血病、全骨髓组织病、急性全骨髓组织病伴骨髓纤维化、淋巴肉瘤细胞白血病、未指定细胞类型的急性白血病、急变期慢性骨髓性白血病、干细胞白血病、未指定细胞类型的慢性白血病、未指定细胞类型的亚急性白血病、加速期慢性骨髓性白血病、急性髓系白血病、真性红细胞增多症、急性早幼粒细胞白血病、急性嗜碱性白血病、急性嗜酸性白血病、急性淋巴细胞白血病、急性单核细胞白血病、成熟急性成髓细胞白血病、急性髓系树突细胞白血病、成人T细胞白血病/淋巴瘤、侵袭性NK细胞白血病、B细胞幼淋巴细胞白血病、B细胞慢性淋巴细胞白血病、B细胞白血病、慢性骨髓性白血病、慢性髓单核细胞白血病、慢性中性粒细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病、慢性特发性骨髓纤维化、多发性骨髓瘤、卡勒病、骨髓瘤、孤立性骨髓瘤、浆细胞白血病、浆细胞瘤、髓外、恶性浆细胞肿瘤NOS、浆细胞瘤NOS、单克隆丙种球蛋白病、多发性骨髓瘤、血管中心性免疫增殖性病变、淋巴样肉芽肿病、血管免疫母细胞性***病、T-γ淋巴组织增殖性疾病、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、α重链病、γ重链病、富兰克林氏病、免疫增殖性小肠疾病、地中海病、恶性免疫增殖性疾病、未指明和免疫增殖性疾病NOS。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含炎性疾病或病症或自身免疫性疾病或病症，其中所述炎性疾病或病症或所述自身免疫性疾病或病症选自由以下组成的组：炎症、自身免疫性疾病、副肿瘤性自身免疫性疾病、软骨炎症、纤维化疾病和/或骨退化、关节炎、类风湿性关节炎、幼年关节炎、幼年类风湿性关节炎、少关节型幼年类风湿性关节炎、多关节型幼年类风湿性关节炎、全身发病型幼年类风湿性关节炎、幼年强直性脊柱炎、幼年肠病性关节炎、幼年反应性关节炎、幼年瑞特综合征、SEA综合征(血清反应阴性、附着点病、关节病综合征)、幼年皮肌炎、幼年银屑病关节炎、幼年硬皮病、幼年全身性红斑狼疮、幼年血管炎、少关节炎类风湿性关节炎、多关节类风湿性关节炎、全身发病型类风湿关节炎、强直性脊柱炎、肠病性关节炎、反应性关节炎、瑞特综合征、SEA综合征(血清反应阴性、附着点病、关节病综合征)、皮肌炎、银屑病关节炎、硬皮病、全身性红斑狼疮、血管炎、肌炎、多发性肌炎、皮肌炎、骨关节炎、结节性多动脉炎、韦格纳肉芽肿病、动脉炎、风湿性多肌痛、结节病、硬皮病、硬化症、原发性胆汁硬化症、硬化性胆管炎、干燥综合征、牛皮癣、斑块状银屑病、滴状银屑病、反向型银屑病、脓疱性银屑病、红皮病型银屑病、皮炎、特应性皮炎、动脉粥样硬化、狼疮、斯蒂尔病、全身性红斑狼疮(SLE)、重症肌无力、炎性肠病(IBD)、克罗恩病、溃疡性结肠炎、乳糜泻、多发性硬化症(MS)、哮喘、COPD、吉兰-巴雷病、I型糖尿病、甲状腺炎(例如格雷夫斯氏病)、艾迪生氏病、雷诺现象、自身免疫性肝炎、GVHD和移植排斥。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含感染性疾病或病症，其中所述感染性疾病或病症选自由以下组成的组：不动杆菌感染、放线菌病、非洲昏睡病(非洲锥虫病)、AIDS(获得性免疫缺陷综合征)、阿米巴病、无形体病、血管圆线虫病、异尖线虫病、炭疽、溶血隐秘杆菌感染、阿根廷出血热、蛔虫病、曲霉菌病、星状病毒感染、巴贝虫病、蜡样芽孢杆菌感染、细菌性脑膜炎、细菌性肺炎、细菌性***病、拟杆菌感染、小袋虫病、巴尔通氏体病、贝利斯蛔虫病感染、BK病毒感染、黑色发结节病、芽囊原虫病、芽生菌病、玻利维亚出血热、肉毒中毒(和婴儿肉毒中毒)、巴西出血热、布鲁氏菌病、黑死病、伯克霍尔德菌感染、布鲁里溃疡、卡利西病毒感染(诺如病毒和札幌病毒)、弯杆菌病、念珠菌病(白念菌病；鹅口疮)、毛细线虫病、卡里翁氏病、猫抓病、蜂窝组织炎、恰加斯病(美国锥虫病)、软下疳、水痘、基孔肯雅热、衣原体、肺炎衣原体感染(台湾急性呼吸道病原体或TWAR)、霍乱、着色芽生菌病、壶菌病、支睾吸虫病、艰难梭菌结肠炎、球孢子菌病、科罗拉多蜱热(CTF)、普通感冒(急性病毒性鼻咽炎；急性鼻炎)、2019冠状病毒病(COVID-19)、克雅氏病(CJD)、克里米亚-刚果出血热(CCHF)、隐球菌病、隐孢子虫病、皮肤幼虫移行症(CLM)、环孢子虫病、囊尾幼虫病、巨细胞病毒感染、登革热、链带藻属感染、双核阿米巴病、白喉、裂头绦虫病、麦地那龙线虫病、埃博拉出血热、包虫病、埃里希体病、蛲虫病(蛲虫感染)、肠球菌感染、肠道病毒感染、流行性斑疹伤寒、传染性红斑(第五种疾病)、幼儿急疹(第六种疾病)、片吸虫病、姜片虫病、致命性家族性失眠症(FFI)、丝虫病、由产气荚膜梭状芽胞杆菌引起的食物中毒、自由生活阿米巴感染、梭状杆菌属感染、气性坏疽(梭状芽胞杆菌性肌坏死)、地霉病、格斯特曼-斯特劳斯勒-申克综合征(GSS)、贾第鞭毛虫病、鼻疽、颚口线虫病、淋病、***(杜诺凡病)、A组链球菌感染、B组链球菌感染、流感嗜血杆菌感染、手足口病(HFMD)、汉坦病毒肺综合征(HPS)、中原病毒病、幽门螺杆菌感染、溶血性***综合征(HUS)、出血热伴肾综合征(HFRS)、亨德拉病毒感染、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、单纯疱疹、组织胞浆菌病、钩虫感染、人博卡病毒感染、人伊氏埃利希病、人粒细胞无形体病(HGA)、人偏肺病毒感染、人单核细胞埃立克体病、人***瘤病毒(HPV)感染、人副流感病毒感染、膜壳绦虫病、爱泼斯坦-巴尔病毒传染性单核细胞增多症(Mono)、流感(流行性感冒)、等孢球虫病、川崎病、角膜炎、金格杆菌感染、库鲁病、拉沙热、军团病(退伍军人病)、庞蒂亚克热、利什曼病、麻风病、钩端螺旋体病、李斯特菌病、莱姆病(莱姆氏疏螺旋体病)、淋巴丝虫病(象皮病)、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎、疟疾、马尔堡出血热(MHF)、麻疹、中东呼吸综合征(MERS)、类鼻疽(惠特莫尔氏病)、脑膜炎、脑膜炎球菌病、后殖吸虫病、微孢子虫病、触染性软疣(MC)、猴痘、流行性腮腺炎、鼠型斑疹伤寒(地方性斑疹伤寒)、支原体肺炎、生殖支原体感染、足分支菌病、蝇蛆病、新生儿结膜炎(新生儿眼炎)、尼帕病毒感染、诺如病毒(儿童和婴儿)、(新)变异型克雅氏病(vCJD、nvCJD)、诺卡菌病、盘尾丝虫病(河盲症)、后睾吸虫病、副球孢子菌病(南美芽生菌病)、肺吸虫病、巴斯德菌病、头虱病(头虱)、体虱病(体虱)、阴虱病(阴虱、毛虱)、***性疾病(PID)、百日咳(顿咳)、鼠疫、肺炎球菌感染、肺孢子菌肺炎(PCP)、肺炎、脊髓灰质炎、普雷沃氏菌感染、原发性阿米巴脑膜脑炎(PAM)、进行性多灶性白质脑病、鹦鹉热、Q热、狂犬病、回归热、呼吸道合胞病毒感染、鼻孢子虫病、鼻病毒感染、立克次体感染、立克次体痘、裂谷热(RVF)、落基山斑疹热(RMSF)、轮状病毒感染、风疹、沙门氏菌病、SARS(严重急性呼吸道综合征)、疥疮、猩红热、血吸虫病、败血症、志贺氏菌病(杆菌性痢疾)、带状疱疹、天花、孢子丝菌病、葡萄球菌食物中毒、葡萄球菌感染、类圆线虫病、亚急性硬化性全脑炎、非性病性梅毒、梅毒和雅司病、绦虫病、破伤风(牙关紧闭症)、触染性须疮(须癣)、头癣(头皮癣)、体癣(身体癣)、股癣、手癣、黑癣、脚癣、甲癣(甲真菌病)、花斑癣(花斑糠疹)、弓蛔虫病(眼部幼虫移行症(OLM))、弓蛔虫病(内脏幼虫移行症(VLM))、弓形虫病、沙眼、旋毛虫病、滴虫病、鞭虫病(鞭虫感染)、结核病、土拉菌病、伤寒热、斑疹伤寒、***感染、山谷热、委内瑞拉马脑炎、委内瑞拉出血热、创伤弧菌感染、副溶血性弧菌肠炎、病毒性肺炎、西尼罗河热、白毛结节病(白秃疮)、假结核耶尔森菌病、耶尔森菌病、黄热病、兹斯保拉病、寨卡热和结合菌病。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或如本文中和贯穿本文所公开的药物组合物，其中所述疾病或病症包含免疫缺陷疾病或病症，其中所述免疫缺陷疾病或病症选自由以下组成的组：无丙种球蛋白血症：X连锁和常染色体隐性遗传、共济失调毛细血管扩张症、慢性肉芽肿性疾病和其它吞噬细胞病症、常见可变免疫缺陷、补体缺乏症、迪乔治综合征、噬血细胞淋巴组织细胞增生症(HLH)、高IgE综合征、高IgM综合征、IgG亚类缺乏症、先天免疫缺陷、NEMO缺乏综合征、选择性IgA缺乏症、选择性IgM缺乏症、严重联合免疫、缺乏症和联合免疫缺陷、特异性抗体缺乏症、婴儿期短暂性低丙种球蛋白血症、WHIM综合征(疣、低丙种球蛋白血症、感染和骨髓无效生成性粒细胞缺乏症)、威斯科特-奥尔德里奇综合征、其它抗体缺乏病症、其它原发性细胞免疫缺陷、严重联合免疫缺陷(SCID)、常见可变免疫缺陷(CVID)、人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)、药物诱导的免疫缺陷、移植物抗宿主综合征、原发性免疫缺陷病(PIDD)以及淋巴细胞减少症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体，其用于制备用于治疗或预防受试者的疾病或病症的药物。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体，其用于制备用于治疗或预防受试者的疾病或病症的药物，其中所述疾病或病症选自由以下组成的组：炎性疾病或病症；自身免疫性疾病或病症；增殖性疾病或病症；感染性疾病或病症；以及免疫缺陷疾病或病症。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触持续足以诱导与IL-2Rαβγ形成复合物的时间，由此刺激所述Treg细胞群扩增。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触持续足以诱导与IL-2Rαβγ形成复合物的时间，由此刺激所述Treg细胞群扩增，同时使细胞死亡率降低10％至100％。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触，其中所述方法使CD25+调节性T(Treg)细胞扩增，所述扩增是用包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽引起的CD25+Treg细胞的扩增的至少1倍、10倍、100倍、1,000倍、104倍、105倍、106倍、107倍、108倍或109倍。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述有效量使在与所述有效量温育之后T细胞群中的Treg细胞的百分比增加，并且所述Treg细胞的百分比为约或至少0.01％、0.1％、1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更多。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触，其中所述方法在体内进行。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触，其中所述方法在体外进行。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触，其中所述方法离体进行。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体在制备用于扩增细胞群中的Treg细胞的药物中的用途。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种有效量的各自独立地如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体在制备用于扩增细胞群中的Treg细胞的药物中的用途，其中所述Treg细胞在受试者体内扩增。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2具有至少80％同一性的氨基酸序列，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：L18、L19、N29、N30、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128和T131，其中所述经修饰的IL-2多肽可以未与或与水溶性聚合物、脂质或蛋白质或多肽缀合。相对于与经修饰的IL-2多肽在序列上相同的相应的IL-2多肽，除了所述相应的IL-2多肽不包括一个或多个氨基酸取代之外，如本文中和贯穿本文所提供的经修饰的IL-2多肽可以具有以下特性中的一个或多个特性：a)所述经修饰的IL-2多肽与不具有一个或多个取代的白细胞介素2受体α(IL-2Rα)的结合增强；b)所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体αβγ(IL-2Rαβγ)的结合增强；c)所述经修饰的IL-2多肽的被表达白细胞介素2受体α(IL-2Rα)或白细胞介素2受体αβγ(IL-2Rαβγ)受体的细胞内化的水平降低；d)所述经修饰的IL-2多肽通过IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增强；和/或e)所述经修饰的IL-2多肽的IL-2Rαβγ/IL-2Rβγ信号传导效力的比率增强。在某些实施方式中，如本文中和贯穿本文所提供的经修饰的IL-2多肽进一步包括在以下中的一个或多个处对半胱氨酸的氨基酸取代：N29、N30、Y31、Q74、K76、E100、N119、T123、S127或T131。在某些实施方式中，如本文中和贯穿本文所提供的经修饰的IL-2多肽进一步包括相对于SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的选自由以下组成的组的突变：N29C、N30C、Y31C、Q74C、K76C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C，并且IL-2通过突变位点处的半胱氨酸与脂质、糖、肽、蛋白质或聚合物缀合。在某些实施方式中，经修饰的IL-2多肽可以具有相对于SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的选自由以下组成的组的突变：N29C、N30C、Y31C、Q74C、K76C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C，并且IL-2通过突变氨基酸位置处的半胱氨酸与聚乙二醇缀合。如本文中和贯穿本文所提供的经修饰的IL-2多肽可以与SEQ ID NO:1或SEQID NO:2中的任一者具有至少80％、至少85％、至少90％或至少95％同一性。在某些实施方式中，如本文中和贯穿本文所提供的经修饰的IL-2多肽可以与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％同一性。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了如本文中和贯穿本文所提供的经修饰的IL-2多肽，除了所述经修饰的IL-2多肽包括在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、N88、V91、I128和T131，并且任选地进一步包括选自由以下组成的组的突变：N30C、Q74C、K76C、E100C、N119C、T123C、S127C和T131C之外，所述经修饰的IL-2多肽包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的序列。在一些实例中，经修饰的IL-2多肽包括以下突变中的一个或多个突变：L18M、L19S、N29C、Y31C、V69A、N71C、Q74P、N88R、V91K和I128T，并且进一步包括选自由以下组成的组的突变：N30C、Q74C、K76C、E100C、N119C、T123C、S127C和T131C，其中N30C、Q74C、K76C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C突变是与水溶性聚合物、糖、脂质、蛋白质或肽缀合的位点。在某些实施方式中，如本文中和贯穿本文所提供的经修饰的IL-2多肽可以包括在以下氨基酸位置中的一个或多个氨基酸位置处的突变：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、N88、V91、I128和T131，并且可以进一步包括以下突变中的一个或多个突变：N30C、Q74C、K76C、E100C、N119C、T123C、S127C和T131C，其中突变残基N30C、Q74C、K76C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C中的一个或多个是与水溶性聚合物、糖、脂质、蛋白质或肽缀合的位点。在各个实施方式中，经修饰的IL-2多肽与聚乙二醇(PEG)缀合。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的IL-2多肽，所述经修饰的IL-2多肽与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2具有至少80％同一性，所述经修饰的IL-2多肽包括相对于SEQ ID NO:1的选自由以下组成的组的突变：N29C、N30C、Y31C、N71C、Q74C、K76C、E100C、N119C、T123C、S127C和T131C。经修饰的IL-2多肽可以与水溶性聚合物、糖、脂质、蛋白质或肽在N29C、N30C、Y31C、N71C、Q74C、K76C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C突变位点处缀合。在某些实施方式中，经修饰的IL-2多肽在氨基酸位置29、30、31、74、76、100、119、123、127或131处的半胱氨酸处与PEG缀合。在各个实施方式中，相对于在氨基酸位置29、30、31、74、76、100、119、123、127或131处的半胱氨酸处未与PEG缀合的相应的IL-2多肽，在氨基酸位置29、30、31、74、76、100、119、123、127或131处的半胱氨酸处与PEG缀合的经修饰的IL-2多肽在人血清中的半衰期增加。在N29C、N30C、Y31C、Q74C、K76C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C处与水溶性聚合物、糖、脂质、蛋白质或肽缀合的经修饰的IL-2多肽可以进一步包括一个或多个突变，如本文中和贯穿本文所公开的任何突变。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种经修饰的IL-2多肽缀合物，所述经修饰的IL-2多肽缀合物包含如上文所述的经修饰的IL-2多肽，所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物、脂质、多肽(例如，蛋白质)或肽缀合。经修饰的IL-2多肽可以包括相对于以下氨基酸中的任何氨基酸的半胱氨酸的突变：N29、N30、Y31、N71、Q74、K76、E100、N119、T123、S127或T131，其中水溶性聚合物、糖、脂质、蛋白质或肽与经修饰的IL-2多肽缀合。在某些实施方式中，缀合物包含如本文中和贯穿本文所述的通过半胱氨酸残基与PEG缀合的经修饰的多肽。经修饰的IL-2多肽可以与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％，并且可以进一步包括相对于SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的在一个或多个或氨基酸L18、L19、N29、Y31、V69、N71、N88、V91和I128处的取代。在某些实施方式中，经修饰的IL-2缀合物可以包括具有以下突变中的任何突变的IL-2多肽：L18M、L19S、N29C、Y31C、V69A、N71C、Q74P、N88R、V91K和I128T。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种编码经修饰的IL-2多肽的核酸分子。在某些实施方式中，所述核酸分子可以包含RNA多核苷酸序列或DNA多核苷酸序列。在某些实施方式中，所述核酸分子可以是病毒载体或非病毒载体。在某些实施方式中，此类载体包含表达控制序列以及可选择或可检测标志物中的一个或多个。进一步提供了与递送化合物或结构(如脂质体或纳米颗粒)复合、与其结合或包封在其中的如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽或编码如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽的核酸分子。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种药物组合物，其包含经修饰的IL-2多肽、编码经修饰的IL-2多肽的核酸分子或经修饰的IL-2多肽缀合物以及药学上可接受的载体或赋形剂。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种用于治疗或预防有需要的受试者的疾病或病症(例如，感染性或自身免疫性疾病或病症)的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的经修饰的IL-2多肽、编码经修饰的IL-2多肽的核酸分子、经修饰的IL-2多肽缀合物或包括这些中的任何部分的药物组合物。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种有效量的如本文中和贯穿本文所述的经修饰的IL-2多肽、编码经修饰的IL-2多肽的核酸分子或经修饰的IL-2多肽缀合物在制备用于治疗或预防受试者的疾病或病症(例如，感染性或自身免疫性疾病或病症)的药物中的用途。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种扩增Treg细胞、CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、天然杀伤(NK)细胞、天然杀伤T(NKT)细胞或其它IL-2Rαβγ表达细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的如本文中和贯穿本文所述的经修饰的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽缀合物或包含经修饰的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽缀合物的药物组合物接触持续足以诱导与IL-2Rαβγ形成复合物的时间，由此刺激Treg细胞、CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、NK细胞和/或NKT细胞群扩增。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种扩增Treg细胞、CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、天然杀伤(NK)细胞、天然杀伤T(NKT)细胞或其它IL-2Rαβγ表达细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的如上文所述的经修饰的IL-2多肽或其经修饰的IL-2多肽缀合物、编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、编码经修饰的IL-2多肽的DNA多核苷酸、编码经修饰的IL-2多肽的病毒载体或编码经修饰的IL-2多肽的非病毒载体，或包含经修饰的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽缀合物的药物组合物接触持续足以诱导与IL-2Rαβγ形成复合物的时间，由此刺激Treg细胞、CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、NK细胞和/或NKT细胞群扩增，同时使细胞死亡率降低10％至100％。
在可以与本文中和贯穿本文所公开的其它实施方式组合的某些实施方式中，提供了一种有效量的如上文所述的经修饰的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽缀合物在制备用于扩增细胞群中的Treg细胞、CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、天然杀伤(NK)细胞、天然杀伤T(NKT)细胞或其它IL-2Rαβγ表达细胞的药物中的用途。
根据本文中和贯穿本文所提供的实施方式和实例，本公开的其它实施方式、方面和优点将是显而易见的。
为简洁起见，本说明书中引用的包括专利和专利申请的出版物的公开内容以全文引用的方式并入本文中。
附图说明
图1A展示了在位置125(SEQ ID NO:1)处包含从半胱氨酸到丝氨酸的突变的示例性重组人IL-2(rhIL-2)多肽的序列。通过上标数字标记了通过单独半胱氨酸取代聚乙二醇化的氨基酸位置和/或通过突变调节(例如，增强)IL-2Rα相互作用和/或调节(例如，降低)IL-2Rβγ相互作用的选定位置。图1B展示了源自PDB结构2b5i的IL-2以及受体IL-2Rαβγ复合物的3D结构。参见例如蛋白质数据库(Protein Data Bank)H.M.Berman,J.Westbrook,Z.Feng,G.Gilliland,T.N.Bhat,H.Weissig,I.N.Shindyalov,P.E.Bourne(2000)《核酸研究(Nucleic Acids Research)》,28:235-242.doi:10.1093/nar/28.1.235。图1A中指示的位置示出为红色圆球。
图2展示了针对示例性IL-2突变蛋白和PEG缀合物的色谱分析和SDS-PAGE分析的示例性或典型图谱。图2A示出了通过Superdex 75增加(Superdex 75Increase)柱获得的两种示例性经修饰的IL-2多肽，即ACT5210(Y31C+L18ML19S)和ACT5211(Y31C-PEG20+L18ML19S)的色谱分析。图2B示出了通过将多肽依次上样于SP琼脂糖FF(SP Sepharose FF)柱和Superdex 75增加柱所获得的洗脱液中含有的示例性经修饰的IL-2多肽ACT5210、ACT5211、ACT5230、ACT5231组分的SDS-PAGE分析(突变蛋白名称对应于表2中提供的名称)。
图3A-3C提供了由Octet Qke(加利福尼亚州圣何塞的艾瑞生物公司(ForteBio,San Jose,CA))获得的所示示例性IL-2突变蛋白和对应的PEG缀合物与IL-2受体的结合的示例性传感图。图3A描绘了与IL-2Rα的结合。图3B描绘了与所示的IL-2受体复合物的结合。图3C提供了含有针对IL-2、ACT5210和ACT5211的各种所测得的结合和/或动力学参数(例如，ka、kd、kD)的表格。
图4A-4C提供了IL-2Rαβγ表达CTL-2细胞上的所指示的示例性IL-2突变蛋白的结合数据。图4A和4B展示出，聚乙二醇化或未聚乙二醇化的许多示例性突变蛋白显示出与所示的IL-2Rαβγ表达CTLL2和CD25+T细胞的结合增强。还在聚乙二醇化的含Y31C的突变蛋白ACT5211和ACT5261中观察到增强的结合(图4C)。
图5展示了所示的示例性突变蛋白和IL-R2在与IL-2Rα表达T细胞共培养时的体外半衰期。至少ACT5201、ACT5210、ACT5211和ACT5231显示了相对于针对rhIL-2观察到的半衰期延长的半衰期。
图6A和6B提供了在用所示的突变蛋白和rhIL-2处理时观察到的Treg细胞的刺激和离体扩增。图6A提供了用rhIL2、ACT5211和ACT5231观察到的结果。图6B示出了用rhIL2、ACT5211和ACT5261观察到的结果。
图7A和7B各自展示了如通过pSTAT测定测量的针对所示的IL-2突变蛋白的T细胞活化。
图8提供了通过使用所示的IL-2突变蛋白进行ELISA测定获得的结合数据和EC50测量结果。
图9提供了在施用ACT2511(mpk＝毫克每千克(mg/kg)时获得的小鼠药代动力学(PK)数据。
图10A和10B提供了在向小鼠施用ACT2511时获得的药效学动力学(PD)数据。
具体实施方式
示例性技术
除非另有指示，否则本文中和贯穿本文所提供的本公开的实践将采用在本领域技术范围内的分子生物学(包含重组技术)、微生物学、细胞生物学、生物化学、免疫学和药理学的常规技术。此类技术在以下文献中有充分解释，如《分子克隆：实验室手册(Molecular Cloning:ALaboratory Manual)》,第2版(Sambrook等人,1989)；《寡核苷酸合成(OligonucleotideSynthesis)》(M.J.Gait,编辑,1984)；《动物细胞培养(Animal Cell Culture)》(R.I.Freshney,编辑,1987)；《酶学方法(Methods in Enzymology》(学术出版社有限公司(Academic Press,Inc.)；《当代分子生物学方案(Current Protocols in Molecular Biology)》(F.M.Ausubel等人,编辑,1987并且定期更新)；《PCR：聚合酶链反应(PCR:The Polymerase Chain Reaction)》(Mullis等人,编辑,1994)；以及《雷明顿：药学科学与实践(Remington,The Science and Practice ofPharmacy)》,第20版(利平科特·威廉斯和威尔金斯出版公司(Lippincott,Williams&Wilkins)2003)。
定义
除非另有定义，否则本文中和贯穿本文所使用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。本文中和贯穿本文所提及的所有专利、专利申请(出版的或未出版的)以及其它出版物以全文引用的方式并入本文。如果本章节中陈述的定义与在通过引用并入的专利、申请、公开的申请和其它出版物中陈述的定义相反或在其它方面不一致，则在本章节中陈述的定义优先于通过引用并入本文的定义。
如本文中和贯穿本文所使用的，“一个/种(a/an)”意指“至少一个”或“一个或多个”。类似地，除非明确地并且肯定地限于一个指示物，否则任何词的任何单数用途包括多个指示物。术语“或”以包含性含义使用，即等同于“和/或”，除非上下文另外明确指出。如本文中和贯穿本文所使用的，术语“包括”、“包含”和其语法变体旨在是非限制性的，使得列表中项的列举并不排除可以被添加到所列项的其它相似项。本说明书中的部分划分仅为了方便读者而提供，并不限制所讨论的元件的任何组合。在通过引用并入的材料与本文提供的明确描述的内容之间存在任何矛盾或冲突的情况下，以明确描述的内容为准。
术语“多肽”、“寡肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中和贯穿本文可互换使用来指代任何长度的氨基酸的聚合物，例如至少5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、100、200、300、400、500、1,000或更多个氨基酸。聚合物可以是线性或支化的，其可以包含经修饰的氨基酸，并且其可以被非氨基酸中断。这些术语还涵盖天然地或通过干预修饰的氨基酸聚合物；例如，二硫键形成、糖基化、脂化、乙酰化、磷酸化或任何其它操作或修饰，如与标记组分的缀合。此外，所述定义内还包含的是例如含有一个或多个氨基酸类似物(包含例如非天然氨基酸等)以及本领域已知的其它修饰的多肽。
如本文中和贯穿本文所使用的，术语“变体”用于指代与亲本多肽序列具有一定程度的氨基酸序列同一性的多肽。变体类似于亲本序列，但所述变体在其氨基酸序列中具有使其在序列上不同于亲本多肽的至少一种取代、缺失或***。另外地，变体可以保留亲本多肽的功能特性，例如维持亲本多肽的至少50％、60％、70％、80％、90％、95％、98％或99％的生物活性。
“抗体”是能够通过位于免疫球蛋白分子的可变区中的至少一个抗原识别位点与靶标(如碳水化合物、多核苷酸、脂质、多肽等)特异性结合的免疫球蛋白分子，并且可以是任何类别的免疫球蛋白，例如IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。IgY，其为如鸡等禽类物种中的主要抗体类型，也包含在此定义中。如本文中和贯穿本文所使用的，此术语不仅涵盖完整的多克隆或单克隆抗体，还涵盖其片段(如Fab、Fab'、F(ab')2、Fv)、单链(ScFv)、其变体、天然存在的变体、包含具有所需特异性的抗原识别位点的抗体部分的融合蛋白质、人源化抗体、嵌合抗体以及包含所需特异性的抗原识别位点的免疫球蛋白分子的任何其它经修饰的构型。
如本文中和贯穿本文所使用的，术语“抗原”是指由抗体通过其抗原识别位点特异性结合的靶分子。抗原可以是单价的或多价的，即，所述抗原可以具有被一个或多个抗体识别的一个或多个表位。可以被抗体识别的各种抗原的实例包含多肽、寡糖、糖蛋白、多核苷酸、脂质等。
如本文中和贯穿本文所使用的，术语“表位”是指抗原的一部分，例如，至少约3到5个，优选地约5到10或15个并且不超过约1,000个氨基酸(或其中任何整数)的肽序列，所述抗原的一部分定义单独或作为更大序列的一部分与响应于此类序列产生的抗体结合的序列。对于片段的长度没有临界上限，所述片段的长度可以例如包括抗原序列的几乎全长，或者甚至包括来自靶抗原的两个或更多个表位的融合蛋白的全长。用于本发明中的表位不限于具有其源自的亲本蛋白的部分的恰当序列的肽，而且还涵盖与天然序列相同的序列以及对天然序列的修饰，如缺失、添加和取代(本质上是保守的)。
如本文中和贯穿本文所使用的，各自呈单数或复数形式等的在本文中和贯穿本文可互换地使用的术语“经修饰的IL-2多肽”、“突变蛋白”和“IL-2突变蛋白”是指一个或多个参考IL-2多肽的经修饰的版本、突变体和/或变体。在某些实施方式中，此类经修饰的IL-2多肽、突变蛋白、IL-2突变蛋白或变体包含一个或多个取代、缺失、添加和或与如本文中和贯穿本文所公开的一种或多种另外的多肽的融合。
如本文中和贯穿本文所使用的，各自呈单数或复数形式等的在本文中和贯穿本文可互换地使用的术语“IL-2多肽缀合物”、“IL-2缀合物”、“经修饰的IL-2多肽缀合物”、“经修饰的IL-2多肽缀合物”和“IL-2突变蛋白”是指与一种或多种聚合物或其它化学部分缀合或被配置成与其缀合的IL-2多肽、经修饰的IL-2多肽、IL-2突变蛋白或变体，所述化学部分调节未如此缀合的对应的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽的结合、结合亲和力、活化和/或其相互作用的其它生物、生化或生理结果。各自呈单数或复数形式等的此类IL-2多肽缀合物、IL-2缀合物、经修饰的IL-2多肽缀合物、经修饰的IL-2多肽缀合物、IL-2变体和IL-2突变蛋白被理解为其本身、是和/或包含如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽、IL-2突变蛋白、IL-2变体等。
在某些实施方式中，各自呈单数或复数形式的在本文中和贯穿本文可互换地使用的“缀合物”、“缀合部分(conjugation moiety)”、“缀合部分(conjugating moiety)”是指可以如通过共价键和/或非共价键缔合和/或键合的化学实体，所述化学实体可以用于产生IL-2多肽缀合物、IL-2缀合物、经修饰的IL-2多肽缀合物、经修饰的IL-2多肽缀合物、IL-2变体和/或IL-2突变蛋白。在某些实施方式中，此类缀合物、缀合部分(conjugationmoiety)、缀合部分(conjugating moiety)可以包含聚合物或其它化学部分，如水溶性聚合物、脂质、肽和/或多肽。在某些实施方式中，此类缀合物、缀合部分(conjugation moiety)、缀合部分(conjugating moiety)可以包含聚合物或其它化学部分，如水溶性聚合物、脂质、肽和/或多肽。在某些实施方式中，此类缀合物、缀合部分(conjugation moiety)、缀合部分(conjugating moiety)可以包含一种或多种聚乙二醇(PEG)部分或聚合单元。
在某些实施方式中，IL-2多肽缀合物、IL-2缀合物、经修饰的IL-2多肽缀合物、经修饰的IL-2多肽缀合物、IL-2变体和/或IL-2突变蛋白包含一种或多种缀合物、缀合部分(conjugation moiety)和/或缀合部分(conjugating moiety)。在某些实施方式中，IL-2多肽缀合物、IL-2缀合物、经修饰的IL-2多肽缀合物、经修饰的IL-2多肽缀合物、IL-2变体和/或IL-2突变蛋白包含一种或多种如水溶性聚合物、脂质、肽和/或多肽。在某些实施方式中，IL-2多肽缀合物、IL-2缀合物、经修饰的IL-2多肽缀合物、经修饰的IL-2多肽缀合物、IL-2变体和/或IL-2突变蛋白包含一种或多种聚乙二醇(PEG)部分或聚合单元。
如本文中和贯穿本文所使用的，术语“特异性结合”是指特异性结合对的结合特异性。抗体在存在其它潜在靶标的情况下对特定靶标的识别是此类结合的一个特性。特异性结合涉及两种不同的分子，其中一种分子通过化学或物理方式与第二种分子特异性结合。在两种分子的相互结合使得其能够将其结合配偶体与具有类似特性的其它测定成分区分的意义上，这两种分子是相关的。结合组分对的成员被称为配体和受体(抗配体)、特异性结合对(SBP)成员和SBP配偶体等。分子也可以是分子聚集体的SBP成员；例如，针对第二抗体与其对应抗原的免疫复合物产生的抗体可以被视为免疫复合物的SBP成员。
在本文中和贯穿本文可互换使用的“多核苷酸”或“核酸”是指任何长度的核苷酸聚合物，并且包括DNA和RNA。核苷酸可以是脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、修饰的核苷酸或碱基和/或它们的类似物，或者可以通过DNA或RNA聚合酶并入聚合物中的任何基质。多核苷酸可以包含修饰的核苷酸(如甲基化核苷酸)及其类似物。如果存在，可以在聚合物的组装之前或之后赋予对核苷酸结构的修饰。核苷酸序列可以被非核苷酸组分中断。多核苷酸可以在聚合后如通过与标记组分缀合来进一步修饰。其它类型的修饰包括例如“帽”、用类似物取代一个或多个天然存在的核苷酸、核苷酸间修饰，例如，用不带电键(例如，甲基膦酸酯、磷酸三酯、磷酰胺、氨基甲酸酯等)和用带电键(例如，硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯等)的那些核苷酸间修饰、含有垂悬部分例如蛋白质(例如，核酸酶、毒素、抗体、信号肽、聚-L-赖氨酸等)的那些核苷酸间修饰、具有嵌入剂(例如，吖啶、补骨脂素等)的那些核苷酸间修饰、含有螯合剂(例如，金属、放射性金属、硼、氧化性金属等)的那些核苷酸间修饰、含有烷化剂的那些核苷酸间修饰、含有经修饰的键(例如，α异头核酸等)的那些核苷酸间修饰以及多核苷酸的未修饰形式。另外，通常存在于糖中的任何羟基均可以例如通过膦酸酯基团、磷酸酯基团来替代，通过标准保护基团来保护，或者被激活以制备与另外的核苷酸的另外的连接，或者可以被缀合至固体支撑物。5'和3'端OH可经具有1至20个碳原子的胺或有机封端部分磷酸化或取代。也可以将其它羟基衍生为标准保护基团。多核苷酸还可以含有本领域中一般已知的核糖或脱氧核糖的类似形式，包括例如2'-O-甲基-2'-O-烯丙基、2'-氟基-或2'-叠氮基-核糖、碳环糖类似物、α异头糖、差向异构糖(例如***糖、木糖或来苏糖)、哌喃醣、呋喃糖、景天庚糖、非环状类似物和无碱基核苷类似物(例如甲基核糖苷)。可以用替代性连接基团替代一个或多个磷酸二酯连接。这些替代性连接基团包括但不限于磷酸酯被P(O)S(“硫代酸酯”)、P(S)S(“二硫代酸酯”)、(O)NR 2(“酰胺化物”)、P(O)R、P(O)OR'、CO或CH2(“甲缩醛”)置换的实施方式，其中各个R或R'独立地是H或被取代或未被取代的烷基(1-20个C)，其任选地含有醚(--O--)键、芳基、烯基、环烷基、环烯基或芳醛基。多核苷酸中并非所有连接都需要是相同的。上述描述适用于本文中所提及的所有多核苷酸，包括RNA和DNA。
如本文中和贯穿本文所使用的，“寡核苷酸”通常是指短的、通常是单链、通常是长度通常但不一定小于约200个核苷酸的合成多核苷酸。术语“寡核苷酸”和“多核苷酸”并非互相排斥的。上文针对多核苷酸的描述等同地并且全部地适用于寡核苷酸。
如本文所使用的，术语“同源物”用于指通过对天然存在的核酸进行微小修饰而不同于天然存在的核酸(例如，“原型”或“野生型”核酸)，但维持天然存在形式的基本核苷酸结构的核酸。此类变化包括但不限于：一个或几个核苷酸的变化，包括缺失(例如，核酸的截短版本)、***和/或取代。同源物可以具有与天然存在的核酸相比增强的、降低的或基本上相似的特性。同源物可以与天然存在的核酸互补或匹配。同源物可以使用本领域中已知的用于产生核酸的技术产生，所述技术包括但不限于重组DNA技术、化学合成等。
如本文中和贯穿本文所使用的，“基本上互补的或基本上匹配的”意指两个核酸序列具有至少90％序列同一性。优选地，两个核酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性。替代性地，“基本上互补的或基本上匹配的”意指，两个核酸序列可以在一种或多种高严格度条件下杂交。
参考经序列修饰的多肽，术语“相应的多肽”是指除了经序列修饰的多肽的序列修饰或突变(一个或多个氨基酸的取代、缺失或***)之外在序列上与经修饰的主题多肽序列相同的多肽。相对于包括缀合部分(如缀合糖、脂质、蛋白质、肽或聚合物(例如，聚乙二醇))的经修饰的多肽的“相应的多肽”是与糖、脂质、蛋白质、肽或聚合物缀合的经修饰的主题多肽具有相同序列的多肽。
通常，杂合体的稳定性随离子浓度和温度而变。典型地，杂交反应是在较低严格度的条件下进行，之后进行不同但较高的严格度的洗涤。中等严格的杂交是指允许如探针等核酸分子结合互补核酸分子的条件。杂交的核酸分子通常具有至少60％同一性，包含例如70％、75％、80％、85％、90％或95％同一性中的至少任何同一性。中等严格条件是相当于以下的条件：在42℃下在50％甲酰胺、5x邓哈特溶液(Denhardt's solution)、5x SSPE、0.2％SDS中杂交，随后在42℃下在0.2x SSPE、0.2％ SDS中洗涤。可以通过以下提供高严格度条件：在42℃下在50％甲酰胺、5x邓哈特溶液、5x SSPE、0.2％ SDS中杂交，随后在65℃下在0.1x SSPE和0.1％ SDS中洗涤。低严格度杂交是指相当于以下的条件：在22℃下在10％甲酰胺、5x邓哈特溶液、6x SSPE、0.2％ SDS中杂交，随后在37℃下在1x SSPE、0.2％SDS中洗涤。邓哈特溶液含有1％聚蔗糖、1％聚乙烯吡咯烷酮和1％牛血清白蛋白(BSA)。20x SSPE(氯化钠、磷酸钠、乙二酰胺四乙酸(EDTA))含有3M氯化钠、0.2M磷酸钠和0.025M EDTA。其它合适的中等严格度和高严格度杂交缓冲液和条件是本领域的技术人员所众所周知的。
如本文中和贯穿本文所使用的，“载体”是指包含编码所关注多肽(如包含本文所公开的经修饰的IL-2多肽的多肽)的多核苷酸序列的离散元件。在某些实施方式中，此类载体可以用于将编码此类经修饰的IL-2多肽的异源DNA或RNA多核苷酸引入到细胞中以表达或复制其。此类载体的选择和使用是本领域技术人员已知且可用的。在某些实施方式中，此类载体包括以下中的至少一项：1)复制起点；2)可选择或可检测标志物；以及3)表达控制(基因调节性)序列，如启动子。
在某些实施方式中，此类载体(包括表达载体)与调节性序列(如启动子区域)可操作地连接，所述调节性序列能够表达编码本文所公开的经修饰的IL-2多肽的异源DNA或RNA多核苷酸序列，所述经修饰的IL-2多肽与此类调节性序列和/或启动子区域可操作地连接。因此，在某些实施方式中，表达载体是指重组DNA或RNA构建体，如质粒、噬菌体、重组病毒或其它在引入到适当宿主细胞中之后能够促进通过宿主细胞表达编码此类经修饰的IL-2多肽的异源DNA或RNA多核苷酸序列的载体。适用于编码和表达如本文所公开的经修饰的IL-2多肽的表达载体是本领域技术人员众所周知且可用的，并且包括在真核细胞和/或原核细胞中可复制的载体以及游离型载体或整合到宿主细胞基因组中的载体。
如本文中和贯穿本文所使用的，“启动子区域或启动子元件”是指控制与其可操作地连接的DNA或RNA的转录的DNA或RNA片段。启动子区域包含对于RNA聚合酶识别、结合和转录起始来说足够的特异性序列。启动子区域的这一部分被称为启动子。另外，启动子区域包含调节RNA聚合酶的这一识别、结合和转录起始活性的序列。这些序列可以是顺式作用的或可以响应于反式作用因子。取决于调节的性质，启动子可以是组成型或调节型的。预期用于原核生物的示例性启动子包括噬菌体T7和T3启动子等。
如本文中和贯穿本文所使用的，“可操作地连接(operatively linked)或操作地连接(operationally associated)”是指编码多肽的DNA或RNA多核苷酸序列与调节性和效应多核苷酸序列的功能上的关系。示例性此类调节性和/或效应多核苷酸序列包括启动子、增强子、转录和翻译起始位点、转录和翻译终止位点、聚腺苷酸化序列、核糖体进入位点、Kozak序列等。例如，与启动子可操作地连接的编码多肽的DNA是指编码多肽的DNA与启动子之间的物理上的和功能上的关系，使得此类编码多肽的DNA的转录通过RNA聚合酶从启动子起始，所述RNA聚合酶特异性地识别编码多肽的DNA、与其结合并且转录DNA。另外，与包含翻译起始位点和/或核糖体进入位点的多核苷酸序列可操作地连接的编码多肽的RNA是指编码多肽的RNA与翻译起始位点和/或核糖体进入位点之间的物理上的和功能上的关系，使得经编码的多肽的翻译起始。
为了优化表达和/或体外转录，可能有必要去除、添加或改变某些编码多肽的DNA或RNA多核苷酸序列的5'未翻译部分以消除在转录或翻译水平上可能干扰或减少表达的额外的、潜在的不期望的替代性翻译起始(即，开始)密码子或其它序列。可替代地，共有位点可以紧挨着起始密码子的5'***并且可以增强表达。参见例如Kozak(1991)《生物化学杂志(J.Biol.Chem.)》266:19867-19870。此类修饰的必要性(或需求)可以依经验而定。
“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”或“缓和(alleviation)”是指治疗性治疗，其中目标是减慢(减小，如果不是治愈)所靶向的病理性病症或障碍或者预防病症复发。在接受治疗量的治疗剂或治疗之后，如果受试者示出特定疾病的一种或多种病征和症状可观测和/或可测量的降低或不存在，那么受试者被成功“治疗”。患者也可以感受到疾病病征或症状的减少。如果患者病情稳定，那么也视为患者得到治疗。在某些实施方式中，用治疗剂治疗可有效地使得患者在治疗之后3个月，优选地6个月，更优选地一年，甚至更优选地治疗之后2年或更多年没有疾病。用于评估疾病的成功治疗和改进的这些参数可通过本领域具有适当技术的医师熟悉的常规程序容易地测量。在某些实施方式中，“治疗”意味着病况、病症或疾病的症状得到改善或以其它方式有益地变化的任何方式。治疗还涵盖本文组合物的任何药学使用。在某些实施方式中，通过施用特定药物组合物“改善”特定病症的症状是指可归因于组合物的施用或与组合物的施用相关的任何减轻，不论是永久性还是暂时性，持续性或短暂性的。
术语“预测”或“预后”常常在本文中用于指患者将对药物或药物组有利地或不有利地作出反应的可能性或疾病的可能结果。在某些实施方式中，预测涉及那些反应或结果的程度。在某些实施方式中，预测涉及在治疗(例如，用特定治疗剂治疗)后且在不存在疾病复发的某一时间段中，患者是否会存活或改善和/或患者会存活或改善的概率。本文中和贯穿本文所公开的预测方法可以在临床上用于通过选择对任何特定患者最适当的治疗方式来做出治疗决定。本文中和贯穿本文所公开的预测方法为有价值的工具以预测患者是否有可能对治疗方案(例如给定治疗性方案)有利地作出反应，所述治疗方案包括例如施用给定治疗剂或组合、手术干预、类固醇治疗等。
如本文中和贯穿本文所使用的，言辞“药学上可接受的载体”旨在包括与药学施用相容的任何和所有溶剂、分散介质、包衣、等张剂和吸收延迟剂等。此类介质和药剂用于药物活性物质的用途在本领域中是众所周知的。参见例如《雷明顿：药学科学与实践》,第20版(利平科特·威廉斯和威尔金斯出版公司2003)。除了任何常规介质或药剂与活性化合物不相容的情况之外，设想此类介质或药剂在组合物中的用途。
“药学上可接受的盐”旨在意指本文中和贯穿本文所表示的化合物的游离酸或碱的盐，其无毒、生物学上可耐受或以其它方式生物学上适合于施用于受试者。参见通常Berge等人,《药物科学杂志(J.Pharm.Sci.)》,1977,66,1-19。优选的药学上可接受的盐是在药理学上有效并且适合于与受试者的组织接触而没有过度的毒性、刺激或过敏反应的盐。本文所描述的经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽或其缀合物可以具有足够酸性的基团、足够碱性的基团、这两种类型的官能团或每种类型的多于一个基团，并且因此与多种无机或有机碱以及无机和有机酸反应以形成药学上可接受的盐。
药学上可接受的盐的实例包含硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、重亚硫酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、己炔-1,6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸酯、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、甲基磺酸盐、丙基磺酸盐、苯磺酸盐、二甲苯磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、γ-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐和扁桃酸盐。
如本文中和贯穿本文所使用的，术语“治疗有效量”或“有效量”是指当向细胞、组织或受试者单独施用或与另外的治疗剂组合施用时可有效地预防或改善受试者的疾病或病症、增殖性疾病或病症的治疗剂的量。治疗有效剂量进一步是指足以引起症状改善(例如，治疗、治愈、预防或改善相关医学病状或提高治疗、治愈、预防或改善此类病状的速率)的治疗剂的量。当应用于单独施用的个体活性成分时，治疗有效剂量单独是指所述个体活性成分。当应用于组合时，治疗有效剂量是指导致治疗效果的活性成分的组合量，无论是以组合方式连续施用还是同时施用。在一些实施方式中，“有效量的用于治疗特定疾病的化合物”是足以改善与疾病相关的症状或以某一方式减轻与疾病相关的症状的量。所述量可以以单一剂量形式施用或可以根据方案施用，由此其为有效的。所述量可治愈疾病，但通常被施用以便改善疾病的症状。可能需要重复施用以实现症状的所期望的改善。
术语“组合”是指一种剂量单位形式中的固定组合或用于组合施用的成套试剂盒，其中经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽或其缀合物和组合配偶体(例如，如下所述的另一种药物，也称为“治疗剂”或“辅剂”)可以同时独立施用或在时间间隔内单独施用，尤其是其中这些时间间隔使得组合配偶体示出协作效应，例如协同效应。如本文所使用的，术语“共同施用”或“组合施用”等意指涵盖向有需要的单个受试者(例如，患者)施用所选组合配偶体，并且旨在包含其中不一定通过相同的施用途径或同时施用药剂的治疗方案。如本文中和贯穿本文所使用的，术语“药物组合物”意指由多于一种活性成分混合或组合而成的产物，并且包含活性成分的固定和非固定组合两者。术语“固定组合”意指活性成分，例如经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽或其缀合物和组合配偶体，都以单个实体或剂量的形式同时施用于患者。术语“非固定组合”意指活性成分，例如经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽或其缀合物和组合配偶体，都作为单独的实体同时、并发或顺序施用于患者，没有特定的时间限制，其中此类施用在患者体内提供了治疗有效水平的两种物质。后者也适用于鸡尾酒疗法，例如施用三种或更多种活性成分。
如本文中和贯穿本文所使用的，“生物样本”是指从活体或病毒源或其它大分子和生物分子源获得的任何样本，并且包括可以从其中获得核酸或蛋白质或其它大分子的受试者的任何细胞类型或组织。生物样本可以是直接从生物源获得的样本或经加工的样本。在某些实施方式中，扩增的经分离核酸构成生物样本。生物样本包括但不限于来自动物和植物的体液(例如血液、血浆、血清、脑脊髓液、滑液、尿液和汗液)、组织和器官样本以及从中衍生的经加工样本。
术语“水平(level或levels)”用于指靶标(例如，作为疾病或病症的病因的一部分的物质或生物体)的存在和/或量，并且可以定性地或定量地确定。靶标水平的“定性”变化是指靶标的出现或消失，所述靶标在从正常对照获得的样本中是无法检测到或存在的。当与健康对照相比时，一个或多个靶标的水平的“定量”变化是指靶标水平的可测的增加或减小。
“健康对照”或“正常对照”是在治疗性治疗或诊断的情况下取自不患有疾病或病症(例如，增殖疾病或病症)的个体的生物样本。“阴性对照”是缺乏分析经设计以检测任何特定分析物的样本且因此为所述分析提供参考基线。
如本文中和贯穿本文所使用的，“哺乳动物”是指哺乳动物物种类别中的任一种。如本文中和贯穿本文所使用的，术语“哺乳动物”常常是指人类、人类受试者或人类患者。“哺乳动物”还指非人类哺乳动物物种类别中的任一种，例如实验、陪伴或经济非人类哺乳动物。示例性非人类哺乳动物包括小鼠、大鼠、兔、猫、犬、猪、牛、绵羊、山羊、马、猴、大猩猩和黑猩猩。
如本文中和贯穿本文所使用的，“通过重组手段产生”是指使用重组核酸方法的产生方法，所述重组核酸方法依赖于众所周知的分子生物学方法以表达由克隆的核酸编码的多肽或蛋白质。
如本文中和贯穿本文所使用的，术语“受试者”不限于特定物种或样本类型。例如，术语“受试者”可指患者，且通常是人类患者。然而，这一术语不限于人类，且因此涵盖多种非人类动物或哺乳动物物种。
如本文中和贯穿本文所使用的，“前药”是在体内施用后代谢或以其它方式转换成物质的生物、药学或治疗活性形式的物质。为了产生前药，修饰药学活性物质以使得活性物质将通过代谢过程再生。所述前药可以被设计成改变药物的代谢稳定性或运输特性，掩蔽副作用或毒性，改进药物的香味或改变药物的其它特征或特性。凭借对药效学过程和药物体内代谢的了解，一旦已知药学活性化合物，本领域的技术人员就可以设计出所述化合物的前药(参见例如Nogrady(1985)《药物化学：一种生化方法(MedicinalChemistry ABiochemical Approach)》,牛津大学出版社(Oxford University Press),纽约,第388-392页)。
应理解，本文中和贯穿本文所公开的方面和实施方式包括“由方面和实施方式组成”和/或“基本上由方面和实施方式组成”。
在整个本公开中，本公开的各个方面以范围格式呈现。应当理解的是，采用范围格式的描述仅仅是为了方便和清楚，而不应被理解为对本发明范围的僵化限制。因此，对范围的描述应当被认为已经明确地公开了所有可能的子范围以及所述范围内的单独数值。例如，对如从1到6等范围的描述应当被认为是具有明确公开的子范围，如从1到3、从1到4、从1到5、从2到4、从2到6、从3到6等；以及所述范围内的单独数字，例如，1、2、3、4、5和6。无论范围的宽度为多少，这都适用。
本文中和贯穿本文所提供的本公开的其它目标、优点和特征将根据以下说明结合附图而变得清楚。
经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所提供的本公开涉及一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其中所述经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽包含SEQ ID NO:1(人IL-2的成熟形式包含在氨基酸位置125处半胱氨酸到丝氨酸的取代)或SEQ ID NO:2(人IL-2的成熟形式包含在氨基酸位置1处丙氨酸到甲硫氨酸的取代)所示的氨基酸序列或与SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2具有至少80％同一性的氨基酸，其中所述经修饰的IL-2多肽包括在以下氨基酸位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：L18、L19、N29、N30、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128、T131或其组合，其中a)与不具有以下处的氨基酸取代的相应的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体α(IL-2Rα)的结合降低：L18、L19、N29、N30、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128、T131或其组合；和/或b)与相应的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力降低，其中除了相应的IL-2多肽不包括经修饰的IL-2多肽的氨基酸取代(例如，在以下处的氨基酸取代：L18、L19、N29、N30、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128、T131或其组合)之外，相应的IL-2多肽在序列上与经修饰的IL-2多肽相同。在各个实施方式中，在IL-2Rα相互作用区域、IL-2Rβ相互作用区域和/或IL-2Rγ相互作用区域内找到此类修饰。在某些实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽独立地在氨基酸残基10-25、80-100和/或100-134的区域中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽的对应区域具有至少约70％的序列同一性、至少约80％的序列同一性、至少约90％的序列同一性、至少约95％的序列同一性、至少约98％的序列同一性或至少约99％的序列同一性。在某些实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽具有至少约50％的序列同一性、至少约90％的序列同一性、至少约70％的序列同一性、至少约80％的序列同一性、至少约90％的序列同一性、至少约95％的序列同一性、至少约98％的序列同一性或至少约99％的序列同一性。
SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的氨基酸序列如下所示：
SEQ ID NO:1
(1APTSSSTKKTQL13QLEHLL19LDLQMILNGI29N30N31Y32K33N34P35KLT38RML41T42F43KF45YMP4 8K49KATELKHLQCLEE62EL64K65PLEEVL71NLA74QS76KNFHL81RPRD85LI87SNIN91V92I93VLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTL133T)
SEQ ID NO:2
(1MPTSSSTKKTQL13QLEHLL19LDLQMILNGI29N30N31Y32K33N34P35KLT38RML41T42F43KF45YMP4 8K49KATELKHLQCLEE62EL64K65PLEEVL71NLA74QS76KNFHL81RPRD85LI87SNIN91V92I93VLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTL133T)
SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2彼此不同，并且在位置1(在此位置处，SEQ ID NO:2与天然人序列和SEQ ID NO:1不同)和位置125(在此位置处，SEQ ID NO:1与天然人序列和SEQID NO:2不同)处的氨基酸的同一性上与天然人IL-2序列(SEQ ID NO:3)不同。因此，本文中和贯穿本文所提供的本公开中使用的氨基酸编号遵循天然人成熟IL-2氨基酸序列(SEQ IDNO:3)、SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的氨基酸编号。
如本文所提供的经修饰的IL-2多肽与不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ IDNO:2所示的氨基酸序列具有至少约80％的序列同一性，例如，至少约至少约80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性或更多的序列同一性。在某些实施方式中，除了在以下位置中的任何位置处的取代后的氨基酸之外，如本文所提供的经修饰的IL-2多肽具有与SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2的序列相同的序列：L18、L19、N29、N30、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128、T131，包括其任何组合。不包含如本文所提供的经修饰的IL-2多肽的一个或多个氨基酸取代(例如，在以下氨基酸位置中的任何位置处相对于SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2的取代：L18、L19、N29、N30、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128、T131或其任何组合)或在其它方面具有与本文所提供的经修饰的IL-2多肽的序列相同的序列的IL-2多肽在本文中被称为“不具有[氨基酸位置]取代的相应的IL-2多肽”、“不具有[氨基酸位置]取代的IL-2多肽”或提供相同含义的类似词组。本领域技术人员可以通过较不可能容忍突变的IL-2多肽的中性和保守氨基酸变化和区域的知识指导制造除所公开的突变位点之外的取代以维持活性IL-2多肽。
在某些实施方式中，经修饰的IL-2多肽在氨基酸残基10-25的区域中与包含在前述氨基酸位置中的任何位置处不具有取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的相应的IL-2多肽的对应区域具有至少约80％的序列同一性，例如，至少约80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性，并且优选地至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性或至少95％的序列同一性。
在其它实施方式中，经修饰的IL-2多肽在氨基酸残基80-100的区域中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的相应的IL-2多肽的对应区域具有至少约80％的序列同一性，例如，至少约80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性，并且优选地至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性或至少95％的序列同一性。
在仍其它实施方式中，经修饰的IL-2多肽在氨基酸残基100-133的区域中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的相应的IL-2多肽的对应区域具有至少约80％的序列同一性，例如，至少约80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性，并且优选地至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性或至少95％的序列同一性。在某些实施方式中，经修饰的IL-2多肽包括突变C125S(例如，SEQ ID NO:1)。其它C125取代可以存在于如本文所提供的经修饰的IL-2多肽中，如作为非限制性实例，突变C125A和C125T。
在另外的实施方式中，经修饰的IL-2多肽在氨基酸残基10-25和80-100的区域中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的相应的IL-2多肽的对应区域具有至少约80％的序列同一性，例如，至少约80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％，并且优选地至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性或至少95％的序列同一性。
在又另一个实施方式中，经修饰的IL-2多肽在氨基酸残基10-25和100-133的区域中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的相应的IL-2多肽的对应区域具有至少约80％的序列同一性，例如，至少约80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性，并且优选地至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性或至少95％的序列同一性。
在又另一个实施方式中，经修饰的IL-2多肽在氨基酸残基80-100和100-133的区域中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的相应的IL-2多肽的对应区域具有至少约80％的序列同一性，例如，至少约80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性，并且优选地至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性或至少95％的序列同一性。
在又另一个实施方式中，经修饰的IL-2多肽在氨基酸残基10-25、80-100和100-133的区域中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的相应的IL-2多肽的对应区域具有至少约80％的序列同一性，例如，至少约80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性，并且优选地至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性或至少95％的序列同一性。
在某些实施方式中，经修饰的IL-2多肽可以包含用天然氨基酸进行的任何合适的取代。在某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽可以包含在以下位置处用赖氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、组氨酸、甲硫氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸进行的取代：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128、T131或其组合。
在某些实施方式中，如本文所提供的经修饰的IL-2多肽：a)包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸进行的取代：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128、T131以及其组合，并且与缀合部分缀合或被配置成与其缀合。在某些实施方式中，此类缀合部分可以包含水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽或其组合。在某些实施方式中，经修饰的IL-2多肽包含：a)在一个或多个选自由以下组成的组的位置处的一种或多种缀合部分，如水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽或其组合：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128、T131以及其组合；和/或b)包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸进行的取代：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128、T131以及其组合，并且在多肽的N末端和/或C末端处与一种或多种缀合部分，如水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合或被配置成与其缀合。
在某些实施方式中，如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽：a)包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸进行的取代：N29和/或Y31；b)包含在选自由以下组成的组的位置处用半胱氨酸或丝氨酸进行的取代：N29和/或Y31以及其组合；c)包含在选自由以下组成的组的位置处用半胱氨酸进行的取代：N29和/或Y31以及其组合；d)包含在位置Y31处用半胱氨酸进行的取代；e)包含在位置Y31处用丝氨酸进行的取代；f)包含在位置N29处用半胱氨酸进行的取代；或g)包含在位置N29处用丝氨酸进行的取代。
在某些实施方式中，包含在N29或Y31处用天然氨基酸进行的取代的本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以进一步包含：a)在L18和/或L19处用天然氨基酸进行的取代；以及b)在位置L18处用甲硫氨酸进行的取代和/或在位置L19处用丝氨酸进行的取代。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽包含：a)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rβ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代；b)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代；或c)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代、在IL-2Rβ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代。
在某些实施方式中，除了在N29或Y31处的突变以及任选地在L18和/或L19处的突变之外，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以进一步包含在IL-2Rα相互作用区域、IL-2Rβ相互作用区域和/或IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以进一步包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸进行的取代：V69、N71、Q74、N88、V91、I128以及其组合。
在某些实施方式中，可替代地或另外地，可能具有在N29或Y31处的突变以及任选地在V69、N71、Q74、N88、V91、I128中的任一个处的一个或多个另外的突变的本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以进一步包含在选自以下的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：E100、N119、T123、S127、I128、T131以及其组合。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以进一步包含在选自以下的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸进行的取代：E100、N119、T123、S127、I128、T131以及其组合。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以包含用非天然氨基酸进行的任何合适的取代。在某些实施方式中，可以使用在WO 2019/028425 A1和WO 2019/028419A1中公开的非天然氨基酸。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽、非天然氨基酸可以是赖氨酸类似物、半胱氨酸类似物或组氨酸类似物，包含芳香族侧链；包含叠氮基；包含炔烃基团；或包含醛基或酮基。在另一个实施方式中，非天然氨基酸不包含芳香族侧链。且在另一个实施方式中，非天然氨基酸包含N6-叠氮乙氧基-L-赖氨酸(AzK)、N6-炔丙基乙氧基-L-赖氨酸(PraK)、BCN-L-赖氨酸、降冰片烯赖氨酸、TCO-赖氨酸、甲基四嗪赖氨酸、烯丙氧基羰基赖氨酸、2-氨基-8-氧代壬酸、2-氨基-8-氧代辛酸、对乙酰基-L-苯丙氨酸、对叠氮甲基-L-苯丙氨酸(pAMF)、对碘代-L-苯丙氨酸、间乙酰基苯丙氨酸、2-氨基-8-氧代壬酸、对炔丙基氧基苯丙氨酸、对炔丙基-苯丙氨酸、3-甲基-苯丙氨酸、L-二羟苯丙氨酸、氟化苯丙氨酸、异丙基-L-苯丙氨酸、对叠氮基-L-苯丙氨酸、对酰基-L-苯丙氨酸、对苯甲酰基-L-苯丙氨酸、对溴苯丙氨酸、对氨基-L-苯丙氨酸、异丙基-L-苯丙氨酸、O-烯丙基酪氨酸、O-甲基-L-酪氨酸、0-4-烯丙基-L-酪氨酸、4-丙基-L-酪氨酸、膦酰酪氨酸、三-O-乙酰基-GlcNAcp-丝氨酸、L-磷酸丝氨酸、膦酰丝氨酸、L-3-(2-萘基)丙氨酸、2-氨基-3-((2-((3-(苄氧基)-3-氧代丙基)氨基)乙基)硒酰基)丙酸、2-氨基-3-(苯基硒酰基)丙酸或硒代半胱氨酸。
在本文中和贯穿本文所公开的某些实施方式中，非天然氨基酸可以以任何合适的方式或方法并入经修饰的IL-2多肽中。在本文中和贯穿本文所公开的某些实施方式中，非天然氨基酸可以以正交tRNA合成酶/tRNA对并入经修饰的IL-2多肽中。可以使用任何合适的正交tRNA。在本文中和贯穿本文所公开的某些实施方式中，正交合成酶/tRNA对的正交tRNA可以包含至少一个非天然核苷碱基。
在某些实施方式中，与不具有氨基酸取代的相应的IL-2多肽相比，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα的结合可能增强。在本文中和贯穿本文所公开的某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα的结合亲和力可能从约10％增加到约100％或其子范围，例如，可能增加了约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％。在本文中和贯穿本文所公开的某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα的结合亲和力可能从约10％增加到约100％，或者可能从约1倍增加到约100,000倍或更多倍，例如，增加了至少1倍(100％)、10倍、100倍、1,000倍、10,000倍、100,000倍或更多倍，例如介于约1倍与100,000倍之间或其子范围。
在某些实施方式中，与不具有取代的相应的IL-2多肽相比，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力可能增加。在本文中和贯穿本文所公开的某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的信号传导效力和不具有取代的相应的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的信号传导效力可能从约10％增加到约100％或其子范围，例如，可能增加了约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％。在本文中和贯穿本文所公开的某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的信号传导效力可能从约10％增加到约100％，或者可能从约1倍增加到约100,000倍或更多倍，例如，增加了约1倍(100％)、10倍、100倍、1,000倍、10,000倍、100,000倍或更多倍，或介于约1倍与100,000倍之间或其子范围。
在某些实施方式中，与不具有氨基酸取代的相应的IL-2多肽相比，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ表达细胞内化的水平可能降低。在某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化与不具有所述取代的相应的IL-2多肽的被IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化之间的比率可以为约1/2至约1/100,000，例如，约1/2、1/5、1/10、1/100、1/1,000、1/10,000、1/100,000或更多或其子范围。在某些实施方式中，经修饰的IL-2多肽的被2Rα和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化为检测不到的水平。
在某些实施方式中，与不具有所述取代的相应的IL-2多肽的IL-2Rαβγ/IL-2Rβγ信号传导效力的比率相比，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽的IL-2Rαβγ/IL-2Rβγ信号传导效力的比率可能增强。在另一个实施方式中，与不具有经修饰的IL-2多肽的取代的相应的IL-2多肽的IL-2Rαβγ/IL-2Rβγ信号传导效力的比率相比，如本文所公开的经修饰的IL-2多肽的IL-2Rαβγ/IL-2Rβγr信号传导效力的比率可能增加了10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或大于100％，例如增加了约10％至约100％或其子范围。在另外的实施方式中，与不具有取代的相应的IL-2多肽的IL-2Rαβγ/IL-2Rβγ信号传导效力的比率相比，经修饰的IL-2多肽的IL-2Rαβγ/IL-2Rβγ信号传导效力的比率可能从约10％增加到约100％，或者可能从约1倍(100％)增加到约100,000倍或其子范围或更多倍，例如增加了约1倍、10倍、100倍、1,000倍、10,000倍、100,000倍或更多倍。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以具有SEQID NO:1或SEQ ID NO:2的序列，除了上文所公开的氨基酸取代中的一个或多个氨基酸取代，如组L18、L19、N29、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128和T131的一个或多个氨基酸取代之外。在此类实例中，相应的IL-2多肽具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的序列。在另外的实例中，具有上文所公开的氨基酸取代中的一个或多个氨基酸取代(如在选自下组的氨基酸位置处的一个或多个氨基酸取代：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128和T131)的经修饰的IL-2多肽可以具有与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％同一性的序列，其中除了在选自下组的位置处的一个或多个氨基酸取代之外，相应的IL-2多肽具有与经修饰的IL-2多肽相同的序列：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、E100、N119、T123、S127、I128和T131。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以包含在任何合适的位置处的缺失。在某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽具有N末端缺失，例如氨基酸残基1-10的N末端缺失或其子范围。在另一个实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽具有C末端缺失，例如氨基酸残基114-133的C末端缺失或其子范围。且在另一个实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽具有N末端缺失以及C末端缺失。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以是融合多肽(例如，重组融合蛋白)的一部分，所述融合多肽包含经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列。作为融合多肽的一部分的此类经修饰的IL-2多肽本身是经修饰的IL-2多肽的实例。本发明的经修饰的IL-2多肽可以以任何合适的方式与另外的氨基酸序列融合。在某些实施方式中，经修饰的IL-2多肽的N末端或C末端可以与另外的氨基酸序列融合，反之亦然。另外的氨基酸序列可以包含任何合适的序列或内容。在某些实施方式中，另外的氨基酸序列可以包含抗体序列或其一部分或片段。在另一个实施方式中，另外的氨基酸序列可以包含抗体的Fc部分。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以呈任何合适的形式。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以呈分离形式或纯化形式。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以使用任何合适的技术或工艺制备。在某些实施方式中，如本文所提供的经修饰的IL-2多肽可以通过重组产生、化学合成或其组合制备。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以以任何合适的形式应用。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以通过施用编码经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸递送，例如施用于患者。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽可以通过施用编码经修饰的IL-2多肽的非病毒载体或病毒载体递送，例如施用于患者。
经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽缀合物
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所提供的本公开涉及一种经修饰的IL-2多肽缀合物，所述经修饰的IL-2多肽缀合物包含如本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽。本身是示例性经修饰的IL-2多肽的此类经修饰的IL-2多肽缀合物可以与缀合部分(例如，水溶性聚合物、脂质、多肽、蛋白质、肽以及其组合)缀合或被配置成与其缀合。
所述经修饰的IL-2多肽可以以任何合适的形式与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合。在某些实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽可以与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽共价缀合。在另一个实例中，所述经修饰的IL-2多肽可以与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽非共价缀合。且在另一个实例中，所述经修饰的IL-2多肽可以通过任何合适的位置处的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合：N29、N30、Y31、E100、N119、T123、S127、I128、T131以及其组合。在另一个实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合：N29、N30、Y31、E100、N119、T123、S127、I128、T131以及其组合。且在另一个实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、谷氨酸、天冬酰胺、精氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合：N29、N30、Y31、E100、N119、T123、S127、I128、T131以及其组合。在又另一个实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的半胱氨酸与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合：N29、N30、Y31、E100、N119、T123、S127、I128、T131以及其组合。
所述经修饰的IL-2多肽可以通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合：N29、N30、Y31以及其组合。在某些实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽通过在位置N29和/或位置Y31处的取代后的天然氨基酸与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合。在另一个实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽通过在N29和Y31中的一个或两个处的取代后的赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、谷氨酸、天冬酰胺、精氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合。且在另一个实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽通过N29和Y31中的一个或两个处的取代后的半胱氨酸与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合。
所述经修饰的IL-2多肽可以通过所述经修饰的IL-2多肽的单个氨基酸残基或多个氨基酸残基与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合。在某些实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽可以通过以下与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合：i)所述经修饰的IL-2多肽的N末端氨基酸残基的α氨基；ii)所述经修饰的IL-2多肽的赖氨酸氨基酸残基的ε氨基；或iii)所述经修饰的IL-2多肽的N糖基化位点或O糖基化位点。
所述经修饰的IL-2多肽可以通过连接子与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)共价缀合。所述经修饰的IL-2多肽还可以在无需连接子的情况下直接与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)共价缀合。
所述经修饰的IL-2多肽可以通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合。所述单个氨基酸残基可以位于任何合适的位置。在某些实施方式中，所述单个氨基酸残基可以位于所述经修饰的IL-2多肽内。在另一个实例中，所述单个氨基酸残基可以位于所述另外的氨基酸序列内。
本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中的另外的氨基酸序列可以包含任何合适的序列或内容。在某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中的所述另外的氨基酸序列可以包含抗体序列或其一部分或片段。在另一个实例中，本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中的所述另外的氨基酸序列可以包含抗体的Fc部分。
所述经修饰的IL-2多肽可以以任何合适的形式与另一部分(例如，融合多肽中的水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合。在某些实施方式中，所述经修饰的IL-2多肽可以通过以下与另一部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)缀合：i)所述融合多肽的N末端氨基酸残基的α氨基；ii)所述融合多肽的赖氨酸氨基酸残基的ε氨基；或iii)所述融合多肽的N糖基化位点或O糖基化位点。在另一个实例中，所述融合多肽可以直接或通过连接子与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽共价缀合。
本发明的经修饰的IL-2多肽可以与任何合适的水溶性聚合物缀合。在某些实施方式中，所述水溶性聚合物可以包含聚乙二醇(PEG)、聚(丙二醇)(PPG)、乙二醇和丙二醇的共聚物、聚(氧乙基化多元醇)、聚(烯醇)、聚(乙烯基吡咯烷酮)、聚(羟烷基甲基丙烯酰胺)、聚(羟烷基甲基丙烯酸酯)、聚(糖)、聚(a-羟基酸)、聚(乙烯醇)、聚磷腈、聚噁唑啉(POZ)、聚(N-丙烯酰基吗啉)或其组合。参见例如WO 2019/028425A1和WO 2019/028419A1。
在本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中，所述水溶性聚合物可以包含PEG分子。所述PEG分子可以是线性PEG或支化PEG。所述支化PEG可以具有PEG链的任何合适的配置和/或任何合适的数量。在某些实施方式中，所述支化PEG可以具有从中央核心基团发出的约三个到约十个PEG链。在另一个实例中，所述支化PEG可以是包含从中央核心基团发出的约10个到约100个PEG链的星形PEG。且在另一个实例中，所述支化PEG可以是包含移植到聚合物主链上的多个PEG链的梳状PEG。
本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中的PEG分子可以具有任何合适的分子量。在某些实施方式中，PEG分子的分子量的范围可以为约300g/mol到约10,000,000g/mol，例如，约300g/mol、500g/mol、1,000g/mol、10,000g/mol、100,000g/mol、1,000,000g/mol、10,000,000g/mol或其子范围。在另一个实例中，PEG分子的平均分子量可以为约5,000道尔顿到约1,000,000道尔顿，例如，约5,000道尔顿、10,000道尔顿、100,000道尔顿、1,000,000道尔顿或其子范围。且在另一个实例中，PEG分子的平均分子量可以为约20,000道尔顿到约30,000道尔顿，例如，约20,000道尔顿、21,000道尔顿、22,000道尔顿、23,000道尔顿、24,000道尔顿、25,000道尔顿、26,000道尔顿、27,000道尔顿、28,000道尔顿、29,000道尔顿、30,000道尔顿或其子范围。
本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中的PEG分子可以呈任何合适的形式。在某些实施方式中，PEG分子可以是单分散、均匀或离散的PEG分子。
本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中的水溶性聚合物可以包含多糖。
本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中的经修饰的IL-2多肽可以与任何合适的脂质缀合。在某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中的脂质可以包含脂肪酸。
本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中的经修饰的IL-2多肽可以与任何合适的蛋白质缀合。在某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中的蛋白质可以包含抗体或其结合片段。所述抗体或其结合片段可以包含抗体的Fc部分。
在本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物中，其它部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)可以通过任何合适的方式与经修饰的IL-2多肽结合。在某些实施方式中，其它部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)可以通过连接子与经修饰的IL-2多肽的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸间接结合。在另一个实例中，其它部分(例如，水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽)可以与经修饰的IL-2多肽的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸直接结合。
本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物可以具有任何合适的体内半衰期。在某些实施方式中，本发明的经修饰的IL-2多肽缀合物的体内半衰期可以为约5分钟到约10天，例如，约5分钟、10分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、13小时、14小时、15小时、16小时、17小时、18小时、19小时、20小时、21小时、22小时、23小时、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天或其子范围。
药物组合物
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所提供的本公开涉及一种药物组合物，所述药物组合物包含有效量的如上所述的经修饰的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽缀合物以及药物上可接受的载体或赋形剂。
在某些实施方式中，药物组合物可以被配置成治疗或预防任何合适的疾病、病症或病状。在某些实施方式中，本发明的药物组合物可以被配置成治疗或预防受试者的增殖性病症。
在某些实施方式中，本发明的药物组合物被配置成治疗或预防受试者的实体瘤或癌症。实体瘤或癌症可能是软骨肉瘤、尤文氏肉瘤、骨/骨肉瘤恶性纤维组织细胞瘤、骨肉瘤、横纹肌肉瘤、心脏癌、星形细胞瘤、脑干胶质瘤、毛细胞型星形细胞瘤、室管膜瘤、原始神经外胚层肿瘤、小脑星形细胞瘤、脑星形细胞瘤、神经胶质瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、少突胶质细胞瘤、松果体星形细胞瘤、垂体腺瘤、视觉通路和下丘脑神经胶质瘤、乳腺癌、浸润性小叶癌、小管癌、浸润性筛状癌、髓样癌、男性乳腺癌、叶状肿瘤、炎性乳腺癌、肾上腺皮质癌、胰岛细胞癌(内分泌胰腺)、多发性内分泌瘤变综合征、甲状旁腺癌、嗜铬细胞瘤、甲状腺癌、默克尔细胞癌、葡萄膜黑色素瘤、视网膜母细胞瘤、***癌、阑尾癌、胆管癌、类癌瘤、胃肠道癌、结肠癌、肝外胆管癌、胆囊癌、胃癌、胃肠类癌瘤、胃肠间质瘤(GIST)、肝细胞癌、胰岛细胞胰腺癌、直肠癌、膀胱癌、***、子宫内膜癌、性腺外生殖细胞肿瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌(表面上皮-间质肿瘤)、卵巢生殖细胞肿瘤、***癌、肾细胞癌、肾盂和输尿管、移行细胞癌、***癌、睾丸癌、妊娠滋养细胞肿瘤、输尿管和肾盂、移行细胞癌、尿道癌、子宫肉瘤、***癌、外阴癌、维尔姆斯肿瘤、食管癌、头颈癌、鼻咽癌、口腔癌、口咽癌、鼻窦和鼻腔癌、咽癌、唾液腺癌、下咽癌、基底细胞癌、黑色素瘤、皮肤癌(非黑色素瘤)、支气管腺瘤/类癌、小细胞肺癌、间皮瘤、非小细胞肺癌、胸膜肺母细胞瘤、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、AIDS相关癌症、卡波西肉瘤、上皮样血管内皮瘤(EHE)、促纤维增生性小圆细胞瘤或脂肪肉瘤。
在另一个实施方式中，本发明的药物组合物被配置成治疗或预防受试者的恶性血液肿瘤。恶性血液肿瘤可以是包括以下的恶性血液肿瘤：骨髓赘生物、白血病、淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤、血管免疫性T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤网状内皮组织增殖、网状细胞增多症、小神经胶质瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤、B细胞慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、纵隔大B细胞淋巴瘤、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、***边缘区B细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、淋巴瘤样肉芽肿病、结节性淋巴细胞主要霍奇金淋巴瘤、浆细胞白血病、急性红细胞增多症和红白血病、急性红细胞性骨髓病、急性红细胞白血病、黑尔梅尔-舍纳病、急性巨核细胞白血病、肥大细胞白血病、全骨髓组织病、急性全骨髓组织病伴骨髓纤维化、淋巴肉瘤细胞白血病、未指定细胞类型的急性白血病、急变期慢性骨髓性白血病、干细胞白血病、未指定细胞类型的慢性白血病、未指定细胞类型的亚急性白血病、加速期慢性骨髓性白血病、急性髓系白血病、真性红细胞增多症、急性早幼粒细胞白血病、急性嗜碱性白血病、急性嗜酸性白血病、急性淋巴细胞白血病、急性单核细胞白血病、成熟急性成髓细胞白血病、急性髓系树突细胞白血病、成人T细胞白血病/淋巴瘤、侵袭性NK细胞白血病、B细胞幼淋巴细胞白血病、B细胞慢性淋巴细胞白血病、B细胞白血病、慢性骨髓性白血病、慢性髓单核细胞白血病、慢性中性粒细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病、慢性特发性骨髓纤维化、多发性骨髓瘤、卡勒病、骨髓瘤、孤立性骨髓瘤、浆细胞白血病、浆细胞瘤、髓外、恶性浆细胞肿瘤NOS、浆细胞瘤NOS、单克隆丙种球蛋白病、多发性骨髓瘤、血管中心性免疫增殖性病变、淋巴样肉芽肿病、血管免疫母细胞性***病、T-γ淋巴组织增殖性疾病、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、α重链病、γ重链病、富兰克林氏病、免疫增殖性小肠疾病、地中海病、恶性免疫增殖性疾病、未指明或免疫增殖性疾病NOS。
且在另一个实施方式中，本发明的药物组合物被配置成治疗或预防受试者的免疫缺陷疾病或病症。免疫缺陷疾病或病症可以是无丙种球蛋白血症：X连锁和常染色体隐性遗传、共济失调毛细血管扩张症、慢性肉芽肿性疾病和其它吞噬细胞病症、常见可变免疫缺陷、补体缺乏症、迪乔治综合征、噬血细胞淋巴组织细胞增生症(HLH)、高IgE综合征、高IgM综合征、IgG亚类缺乏症、先天免疫缺陷、NEMO缺乏综合征、选择性IgA缺乏症、选择性IgM缺乏症、严重联合免疫、缺乏症和联合免疫缺陷、特异性抗体缺乏症、婴儿期短暂性低丙种球蛋白血症、WHIM综合征(疣、低丙种球蛋白血症、感染和骨髓无效生成性粒细胞缺乏症)、威斯科特-奥尔德里奇综合征、其它抗体缺乏病症、其它原发性细胞免疫缺陷、严重联合免疫缺陷(SCID)、常见可变免疫缺陷(CVID)、人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)、药物诱导的免疫缺陷、移植物抗宿主综合征、原发性免疫缺陷病(PIDD)或淋巴细胞减少症。
且在另一个实施方式中，本发明的药物组合物被配置成治疗或预防受试者的自身免疫性疾病。炎性或自身免疫性疾病可以是：炎症、自身免疫性疾病、副肿瘤性自身免疫性疾病、软骨炎症、纤维化疾病和/或骨退化、关节炎、类风湿性关节炎、幼年关节炎、幼年类风湿性关节炎、少关节型幼年类风湿性关节炎、多关节型幼年类风湿性关节炎、全身发病型幼年类风湿性关节炎、幼年强直性脊柱炎、幼年肠病性关节炎、幼年反应性关节炎、幼年瑞特综合征、SEA综合征(血清反应阴性、附着点病、关节病综合征)、幼年皮肌炎、幼年银屑病关节炎、幼年硬皮病、幼年全身性红斑狼疮、幼年血管炎、少关节炎类风湿性关节炎、多关节类风湿性关节炎、全身发病型类风湿关节炎、强直性脊柱炎、肠病性关节炎、反应性关节炎、瑞特综合征、SEA综合征(血清反应阴性、附着点病、关节病综合征)、皮肌炎、银屑病关节炎、硬皮病、全身性红斑狼疮、血管炎、肌炎、多发性肌炎、皮肌炎、骨关节炎、结节性多动脉炎、韦格纳肉芽肿病、动脉炎、风湿性多肌痛、结节病、硬皮病、硬化症、原发性胆汁硬化症、硬化性胆管炎、干燥综合征、牛皮癣、斑块状银屑病、滴状银屑病、反向型银屑病、脓疱性银屑病、红皮病型银屑病、皮炎、特应性皮炎、动脉粥样硬化、狼疮、斯蒂尔病、全身性红斑狼疮(SLE)、重症肌无力、炎性肠病(IBD)、克罗恩病、溃疡性结肠炎、乳糜泻、多发性硬化症(MS)、哮喘、COPD、吉兰-巴雷病、I型糖尿病、甲状腺炎(例如格雷夫斯氏病)、艾迪生氏病、雷诺现象、自身免疫性肝炎、GVHD和移植排斥。
且在另一个实施方式中，本发明的药物组合物被配置成治疗或预防受试者的感染性疾病或病症。感染性疾病或病症可以是：不动杆菌感染、放线菌病、非洲昏睡病(非洲锥虫病)、AIDS(获得性免疫缺陷综合征)、阿米巴病、无形体病、血管圆线虫病、异尖线虫病、炭疽、溶血隐秘杆菌感染、阿根廷出血热、蛔虫病、曲霉菌病、星状病毒感染、巴贝虫病、蜡样芽孢杆菌感染、细菌性脑膜炎、细菌性肺炎、细菌性***病、拟杆菌感染、小袋虫病、巴尔通氏体病、贝利斯蛔虫病感染、BK病毒感染、黑色发结节病、芽囊原虫病、芽生菌病、玻利维亚出血热、肉毒中毒(和婴儿肉毒中毒)、巴西出血热、布鲁氏菌病、黑死病、伯克霍尔德菌感染、布鲁里溃疡、卡利西病毒感染(诺如病毒和札幌病毒)、弯杆菌病、念珠菌病(白念菌病；鹅口疮)、毛细线虫病、卡里翁氏病、猫抓病、蜂窝组织炎、恰加斯病(美国锥虫病)、软下疳、水痘、基孔肯雅热、衣原体、肺炎衣原体感染(台湾急性呼吸道病原体或TWAR)、霍乱、着色芽生菌病、壶菌病、支睾吸虫病、艰难梭菌结肠炎、球孢子菌病、科罗拉多蜱热(CTF)、普通感冒(急性病毒性鼻咽炎；急性鼻炎)、2019冠状病毒病(COVID-19)、克雅氏病(CJD)、克里米亚-刚果出血热(CCHF)、隐球菌病、隐孢子虫病、皮肤幼虫移行症(CLM)、环孢子虫病、囊尾幼虫病、巨细胞病毒感染、登革热、链带藻属感染、双核阿米巴病、白喉、裂头绦虫病、麦地那龙线虫病、埃博拉出血热、包虫病、埃里希体病、蛲虫病(蛲虫感染)、肠球菌感染、肠道病毒感染、流行性斑疹伤寒、传染性红斑(第五种疾病)、幼儿急疹(第六种疾病)、片吸虫病、姜片虫病、致命性家族性失眠症(FFI)、丝虫病、由产气荚膜梭状芽胞杆菌引起的食物中毒、自由生活阿米巴感染、梭状杆菌属感染、气性坏疽(梭状芽胞杆菌性肌坏死)、地霉病、格斯特曼-斯特劳斯勒-申克综合征(GSS)、贾第鞭毛虫病、鼻疽、颚口线虫病、淋病、***(杜诺凡病)、A组链球菌感染、B组链球菌感染、流感嗜血杆菌感染、手足口病(HFMD)、汉坦病毒肺综合征(HPS)、中原病毒病、幽门螺杆菌感染、溶血性***综合征(HUS)、出血热伴肾综合征(HFRS)、亨德拉病毒感染、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、单纯疱疹、组织胞浆菌病、钩虫感染、人博卡病毒感染、人伊氏埃利希病、人粒细胞无形体病(HGA)、人偏肺病毒感染、人单核细胞埃立克体病、人***瘤病毒(HPV)感染、人副流感病毒感染、膜壳绦虫病、爱泼斯坦-巴尔病毒传染性单核细胞增多症(Mono)、流感(流行性感冒)、等孢球虫病、川崎病、角膜炎、金格杆菌感染、库鲁病、拉沙热、军团病(退伍军人病)、庞蒂亚克热、利什曼病、麻风病、钩端螺旋体病、李斯特菌病、莱姆病(莱姆氏疏螺旋体病)、淋巴丝虫病(象皮病)、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎、疟疾、马尔堡出血热(MHF)、麻疹、中东呼吸综合征(MERS)、类鼻疽(惠特莫尔氏病)、脑膜炎、脑膜炎球菌病、后殖吸虫病、微孢子虫病、触染性软疣(MC)、猴痘、流行性腮腺炎、鼠型斑疹伤寒(地方性斑疹伤寒)、支原体肺炎、生殖支原体感染、足分支菌病、蝇蛆病、新生儿结膜炎(新生儿眼炎)、尼帕病毒感染、诺如病毒(儿童和婴儿)、(新)变异型克雅氏病(vCJD、nvCJD)、诺卡菌病、盘尾丝虫病(河盲症)、后睾吸虫病、副球孢子菌病(南美芽生菌病)、肺吸虫病、巴斯德菌病、头虱病(头虱)、体虱病(体虱)、阴虱病(阴虱、毛虱)、***性疾病(PID)、百日咳(顿咳)、鼠疫、肺炎球菌感染、肺孢子菌肺炎(PCP)、肺炎、脊髓灰质炎、普雷沃氏菌感染、原发性阿米巴脑膜脑炎(PAM)、进行性多灶性白质脑病、鹦鹉热、Q热、狂犬病、回归热、呼吸道合胞病毒感染、鼻孢子虫病、鼻病毒感染、立克次体感染、立克次体痘、裂谷热(RVF)、落基山斑疹热(RMSF)、轮状病毒感染、风疹、沙门氏菌病、SARS(严重急性呼吸道综合征)、疥疮、猩红热、血吸虫病、败血症、志贺氏菌病(杆菌性痢疾)、带状疱疹、天花、孢子丝菌病、葡萄球菌食物中毒、葡萄球菌感染、类圆线虫病、亚急性硬化性全脑炎、非性病性梅毒、梅毒和雅司病、绦虫病、破伤风(牙关紧闭症)、触染性须疮(须癣)、头癣(头皮癣)、体癣(身体癣)、股癣、手癣、黑癣、脚癣、甲癣(甲真菌病)、花斑癣(花斑糠疹)、弓蛔虫病(眼部幼虫移行症(OLM))、弓蛔虫病(内脏幼虫移行症(VLM))、弓形虫病、沙眼、旋毛虫病、滴虫病、鞭虫病(鞭虫感染)、结核病、土拉菌病、伤寒热、斑疹伤寒、***感染、山谷热、委内瑞拉马脑炎、委内瑞拉出血热、创伤弧菌感染、副溶血性弧菌肠炎、病毒性肺炎、西尼罗河热、白毛结节病(白秃疮)、假结核耶尔森菌病、耶尔森菌病、黄热病、兹斯保拉病、寨卡热和结合菌病。
本发明的药物组合物可以进一步包含另一种活性成分。另一种活性成分可以是用于治疗或预防任何合适的疾病、病症或病状的活性成分。在某些实施方式中，另一种活性成分可以是抗赘生物物质。
另外的活性成分可以在来自本公开的至少一种示例性经修饰的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽缀合物的单独药物组合物中调配或者可能包含有单一药物组合物中的本公开的至少一个示例性经修饰的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽缀合物。
本发明的药物组合物可以被调配成口服、胃肠外、吸入、局部、直肠、鼻腔、颊部、***、通过植入的储库或其它药物施用方法施用。如本文中和贯穿本文所使用的，术语“肠胃外”包含皮下、皮内、静脉内、肌肉内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内和颅内注射或输注技术。
如无菌可注射水性或油性悬浮液等无菌可注射组合物可以根据本领域已知技术使用适合的分散剂或湿润剂和悬浮剂进行调配。无菌可注射制剂也可以是在非毒性的、肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液。在可接受的媒剂和溶剂中，可以使用的包含甘露醇、水、林格氏溶液(Ringer's solution)和等渗氯化钠溶液。合适的载体和其它药物组合物组分通常是无菌的。
另外，无菌的不挥发性油常规被用作溶剂或悬浮介质(例如，合成单或双甘油酯)。如油酸等脂肪酸及其甘油酯衍生物可用于制备可注射物，药学上可接受的油类(如橄榄油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙烯化的形式)也是如此。这些油溶液或悬浮液也可以含有长链醇稀释剂或分散剂、或羧甲基纤维素或类似的分散剂。出于调配目的，也可以使用通常用于制造药学上可接受的固体、液体或其它剂型的各种乳化剂或生物利用度增强剂。
用于口服施用的组合物可以是任何口服可接受的剂型，包括但不限于片剂、胶囊、乳剂和水悬浮液、分散液和溶液。在用于经口使用的片剂的情况下，常用载剂包括乳糖和玉米淀粉。还可以添加如硬脂酸镁等润滑剂。对于呈胶囊形式的口服施用，有用的稀释剂包含乳糖和干燥的玉米淀粉。当口服施用水性悬浮液或乳液时，可将活性成分悬浮或溶解在与乳化剂或悬浮剂结合的油相中。如果需要，可以添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。鼻用气溶胶或吸入组合物可以根据药物调配物领域众所周知的技术来制备，并且可以采用适合的防腐剂(例如，苯甲醇)、用于增强生物利用度的吸收促进剂和/或本领域已知的其它增溶剂或分散剂制备成例如盐水中的溶液。
可以制备本文描述的化合物的任何适合的调配物。通常参见《雷明顿药物科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)》(2000)Hoover,J.E.编辑,第20版,宾夕法尼亚州伊斯顿利平科特·威廉斯·威尔金斯出版公司,第780-857页。选择适合于适当的施用途径的调配物。在化合物具有足够的碱性或酸性以形成稳定的无毒酸盐或碱盐的情况下，以盐的形式施用化合物可能是适当的。药学上可接受的盐的实例是与形成生理可接受的阴离子的酸形成的有机酸加成盐，例如甲苯磺酸盐、甲烷磺酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、α-酮戊二酸盐和α-甘油磷酸盐。还可形成适合的无机盐，包含盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、碳酸氢盐和碳酸盐。药学上可接受的盐是使用本领域中众所周知的标准程序获得的，例如通过足够碱性化合物，如具有适合的酸的提供生理上可接受的阴离子的胺。还制备了羧酸的碱金属(例如，钠、钾或锂)或碱土金属(例如，钙)盐。
如果所设想的化合物或物质以药理学组合物施用，则可设想到，化合物或物质可以与药学上可接受的赋形剂和/或载体混合调配。在某些实施方式中，所设想的化合物或物质可以作为中性化合物或物质或作为药学上可接受的盐口服施用或在生理盐水溶液中静脉内施用。常规缓冲剂例如磷酸盐、碳酸氢盐或柠檬酸盐等可出于此目的使用。当然，本领域的普通技术人员可在本说明书的教示内使调配物改性以提供用于特定施用途径的大量调配物。具体地，所设想的化合物或物质可以被改性以使其更易溶于水或其它媒剂中，这例如可以通过本领域中普通技术人员众所周知的微小改性(盐调配物、酯化等)来轻易完成。本公开的普通技术人员也熟知的是，为了管理本发明化合物或物质的药代动力学而对特定化合物或物质(例如，本公开的经修饰的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽缀合物)的施用途径和剂量方案进行修改以使患者具有最大的有益效果。
本发明的经修饰的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽缀合物可以溶于有机溶剂(如氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、异丙醇、乙腈、甘油，N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜等)中。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所提供的本公开提供了通过混合本公开的经修饰的IL-2多肽或经修饰的IL-2多肽缀合物与药学上可接受的载体制备的调配物。在某些实施方式中，调配物可以使用包括以下的方法来制备：a)将所述化合物或物质溶于水溶性有机溶剂、非离子溶剂、水溶性脂质、环糊精、如生育酚等维生素、脂肪酸、脂肪酸酯、磷脂或其组合中以提供溶液；以及b)添加含有1-10％碳水化合物溶液的生理盐水或缓冲液。在某些实施方式中，碳水化合物包含右旋糖。使用本发明方法获得的药物组合物是稳定的且适用于动物和临床应用。
用于本发明的药物组合物中的水溶性有机溶剂的说明性实例包括并且不限于聚乙二醇(PEG)、醇、乙腈、N-甲基-2-吡咯烷酮、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜或其组合。醇的实例包括但不限于甲醇、乙醇、异丙醇、甘油或丙二醇。
用于本发明的药物组合物中的水溶性非离子型表面活性剂的说明性实例包括并且不限于CREMOPHOR.RTM.EL、聚乙二醇改性的CREMOPHOR.RTM.(聚氧乙烯甘油三蓖麻酸酯35)、氢化CREMOPHOR.RTM.RH40、氢化CREMOPHOR.RTM.RH60、PEG-琥珀酸酯、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、SOLUTOL.RTM.HS(聚乙二醇660 12-羟基硬脂酸酯)、山梨醇单油酸酯、泊洛沙姆、LABRAFIL.RTM.(乙氧基化杏仁油)、LABRASOL.RTM.(癸酰基-己酰基聚乙二醇-8-甘油酯)、GELUCIRE.RTM.(甘油酯)、SOFTIGEN.RTM.(PEG 6辛酸甘油酯)、甘油、乙二醇聚山梨醇酯或其组合。
用于本发明的药物组合物中的水溶性脂质的说明性实例包括但不限于蔬菜油、甘油三酯、植物油或其组合。脂质油的实例包括但不限于蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油(polyoxylcastor oil)、玉米油、橄榄油、棉籽油、花生油、薄荷油、红花油、芝麻油、大豆油、氢化植物油、氢化大豆油、椰子油甘油三酯、棕榈籽油和其氢化形式或其组合。
用于本发明的药物组合物中的脂肪酸和脂肪酸酯的说明性实例包括但不限于油酸、甘油单酯、甘油二酯、PEG的单脂肪或二脂肪酸酯或其组合。
用于本发明的药物组合物中的环糊精的说明性实例包括但不限于α-环糊精、β-环糊精、羟丙基-β-环糊精或磺丁基醚-β-环糊精。
用于本发明的药物组合物中的磷脂的说明性实例包括但不限于大豆磷脂酰胆碱或二硬脂酰磷脂酰甘油或其氢化形式或其组合。
本领域的普通技术人员可以在本说明书的教示内使调配物改性以提供用于特定施用途径的大量调配物。具体地，化合物或物质可以被改性以使其更易溶于水或其它媒剂中。本公开的普通技术人员也熟知的是，为了管理本发明的化合物或物质的药代动力学而对特定化合物或物质的施用途径和剂量方案进行修改以使患者具有最大的有益效果。
用于治疗或预防疾病或病症的方法
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所提供的本公开涉及一种用于治疗或预防有需要的受试者的疾病或病症(例如，增殖性疾病或病症)的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如上所述的经修饰的IL-2多肽、经修饰的IL-2多肽缀合物或药物组合物。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防任何合适的受试者的疾病或病症(例如，增殖性疾病或病症)。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防人的疾病或病症(例如，增殖性疾病或病症)。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防非人哺乳动物的疾病或病症(例如，增殖性疾病或病症)。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗受试者的增殖性病症。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于预防受试者的增殖性病症。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防受试者的任何合适的增殖性疾病或病症。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防受试者的肿瘤。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防受试者的癌症。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防受试者的实体瘤或癌症。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防受试者的任何合适的实体瘤或癌症。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法，实体瘤或癌症可能是软骨肉瘤、尤文氏肉瘤、骨/骨肉瘤恶性纤维组织细胞瘤、骨肉瘤、横纹肌肉瘤、心脏癌、星形细胞瘤、脑干胶质瘤、毛细胞型星形细胞瘤、室管膜瘤、原始神经外胚层肿瘤、小脑星形细胞瘤、脑星形细胞瘤、神经胶质瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、少突胶质细胞瘤、松果体星形细胞瘤、垂体腺瘤、视觉通路和下丘脑神经胶质瘤、乳腺癌、浸润性小叶癌、小管癌、浸润性筛状癌、髓样癌、男性乳腺癌、叶状肿瘤、炎性乳腺癌、肾上腺皮质癌、胰岛细胞癌(内分泌胰腺)、多发性内分泌瘤变综合征、甲状旁腺癌、嗜铬细胞瘤、甲状腺癌、默克尔细胞癌、葡萄膜黑色素瘤、视网膜母细胞瘤、***癌、阑尾癌、胆管癌、类癌瘤、胃肠道癌、结肠癌、肝外胆管癌、胆囊癌、胃癌、胃肠类癌瘤、胃肠间质瘤(GIST)、肝细胞癌、胰岛细胞胰腺癌、直肠癌、膀胱癌、***、子宫内膜癌、性腺外生殖细胞肿瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌(表面上皮-间质肿瘤)、卵巢生殖细胞肿瘤、***癌、肾细胞癌、肾盂和输尿管、移行细胞癌、***癌、睾丸癌、妊娠滋养细胞肿瘤、输尿管和肾盂、移行细胞癌、尿道癌、子宫肉瘤、***癌、外阴癌、维尔姆斯肿瘤、食管癌、头颈癌、鼻咽癌、口腔癌、口咽癌、鼻窦和鼻腔癌、咽癌、唾液腺癌、下咽癌、基底细胞癌、黑色素瘤、皮肤癌(非黑色素瘤)、支气管腺瘤/类癌、小细胞肺癌、间皮瘤、非小细胞肺癌、胸膜肺母细胞瘤、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、AIDS相关癌症、卡波西肉瘤、上皮样血管内皮瘤(EHE)、促纤维增生性小圆细胞瘤或脂肪肉瘤。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防受试者的血液恶性肿瘤。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防受试者的任何合适的血液恶性肿瘤。在某些实施方式中，恶性血液肿瘤可能是骨髓赘生物、白血病、淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤、血管免疫性T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤网状内皮组织增殖、网状细胞增多症、小神经胶质瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤、B细胞慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、纵隔大B细胞淋巴瘤、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、***边缘区B细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、淋巴瘤样肉芽肿病、结节性淋巴细胞主要霍奇金淋巴瘤、浆细胞白血病、急性红细胞增多症和红白血病、急性红细胞性骨髓病、急性红细胞白血病、黑尔梅尔-舍纳病、急性巨核细胞白血病、肥大细胞白血病、全骨髓组织病、急性全骨髓组织病伴骨髓纤维化、淋巴肉瘤细胞白血病、未指定细胞类型的急性白血病、急变期慢性骨髓性白血病、干细胞白血病、未指定细胞类型的慢性白血病、未指定细胞类型的亚急性白血病、加速期慢性骨髓性白血病、急性髓系白血病、真性红细胞增多症、急性早幼粒细胞白血病、急性嗜碱性白血病、急性嗜酸性白血病、急性淋巴细胞白血病、急性单核细胞白血病、成熟急性成髓细胞白血病、急性髓系树突细胞白血病、成人T细胞白血病/淋巴瘤、侵袭性NK细胞白血病、B细胞幼淋巴细胞白血病、B细胞慢性淋巴细胞白血病、B细胞白血病、慢性骨髓性白血病、慢性髓单核细胞白血病、慢性中性粒细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病、慢性特发性骨髓纤维化、多发性骨髓瘤、卡勒病、骨髓瘤、孤立性骨髓瘤、浆细胞白血病、浆细胞瘤、髓外、恶性浆细胞肿瘤NOS、浆细胞瘤NOS、单克隆丙种球蛋白病、多发性骨髓瘤、血管中心性免疫增殖性病变、淋巴样肉芽肿病、血管免疫母细胞性***病、T-γ淋巴组织增殖性疾病、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、α重链病、γ重链病、富兰克林氏病、免疫增殖性小肠疾病、地中海病、恶性免疫增殖性疾病、未指明或免疫增殖性疾病NOS。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防受试者的免疫缺陷疾病或病症。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防受试者的任何合适的免疫缺陷疾病或病症。在某些实施方式中，免疫缺陷疾病或病症可以是无丙种球蛋白血症：X连锁和常染色体隐性遗传、共济失调毛细血管扩张症、慢性肉芽肿性疾病和其它吞噬细胞病症、常见可变免疫缺陷、补体缺乏症、迪乔治综合征、噬血细胞淋巴组织细胞增生症(HLH)、高IgE综合征、高IgM综合征、IgG亚类缺乏症、先天免疫缺陷、NEMO缺乏综合征、选择性IgA缺乏症、选择性IgM缺乏症、严重联合免疫、缺乏症和联合免疫缺陷、特异性抗体缺乏症、婴儿期短暂性低丙种球蛋白血症、WHIM综合征(疣、低丙种球蛋白血症、感染和骨髓无效生成性粒细胞缺乏症)、威斯科特-奥尔德里奇综合征、其它抗体缺乏病症、其它原发性细胞免疫缺陷、严重联合免疫缺陷(SCID)、常见可变免疫缺陷(CVID)、人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)、药物诱导的免疫缺陷、移植物抗宿主综合征、原发性免疫缺陷病(PIDD)或淋巴细胞减少症。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防自身免疫性疾病或病症。在某些实施方式中，自身免疫性疾病或病症包含炎症、自身免疫性疾病、副肿瘤性自身免疫性疾病、软骨炎症、纤维化疾病和/或骨退化、关节炎、类风湿性关节炎、幼年关节炎、幼年类风湿性关节炎、少关节型幼年类风湿性关节炎、多关节型幼年类风湿性关节炎、全身发病型幼年类风湿性关节炎、幼年强直性脊柱炎、幼年肠病性关节炎、幼年反应性关节炎、幼年瑞特综合征、SEA综合征(血清反应阴性、附着点病、关节病综合征)、幼年皮肌炎、幼年银屑病关节炎、幼年硬皮病、幼年全身性红斑狼疮、幼年血管炎、少关节炎类风湿性关节炎、多关节类风湿性关节炎、全身发病型类风湿关节炎、强直性脊柱炎、肠病性关节炎、反应性关节炎、瑞特综合征、SEA综合征(血清反应阴性、附着点病、关节病综合征)、皮肌炎、银屑病关节炎、硬皮病、全身性红斑狼疮、血管炎、肌炎、多发性肌炎、皮肌炎、骨关节炎、结节性多动脉炎、韦格纳肉芽肿病、动脉炎、风湿性多肌痛、结节病、硬皮病、硬化症、原发性胆汁硬化症、硬化性胆管炎、干燥综合征、牛皮癣、斑块状银屑病、滴状银屑病、反向型银屑病、脓疱性银屑病、红皮病型银屑病、皮炎、特应性皮炎、动脉粥样硬化、狼疮、斯蒂尔病、全身性红斑狼疮(SLE)、重症肌无力、炎性肠病(IBD)、克罗恩病、溃疡性结肠炎、乳糜泻、多发性硬化症(MS)、哮喘、COPD、吉兰-巴雷病、I型糖尿病、甲状腺炎(例如格雷夫斯氏病)、艾迪生氏病、雷诺现象、自身免疫性肝炎、GVHD、移植排斥等。然而，自身免疫性疾病是一个非常活跃的研究领域，并且可以通过治疗获得如本文中和贯穿本文所提供的本公开所鉴定的另外的疾病。自身免疫性疾病是指免疫***攻击其自身人疾病蛋白、细胞和组织。可以在《自身免疫性疾病(The Autoimmune Diseases)(Rose和Mackay,2014,学术出版社(Academic Press))中发现自身免疫性疾病以及其列表的综述。本发明的方法可以进一步包括施用有效量的第二治疗剂以治疗和/或预防受试者的增殖性病症。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以用于治疗或预防受试者的增殖性疾病或病症(例如，肿瘤或癌症)并且进一步包含向受试者施用抗赘生物物质。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的药物组合物被配置成治疗或预防受试者的感染性疾病或病症。在某些实施方式中，感染性疾病或病症是：不动杆菌感染、放线菌病、非洲昏睡病(非洲锥虫病)、AIDS(获得性免疫缺陷综合征)、阿米巴病、无形体病、血管圆线虫病、异尖线虫病、炭疽、溶血隐秘杆菌感染、阿根廷出血热、蛔虫病、曲霉菌病、星状病毒感染、巴贝虫病、蜡样芽孢杆菌感染、细菌性脑膜炎、细菌性肺炎、细菌性***病、拟杆菌感染、小袋虫病、巴尔通氏体病、贝利斯蛔虫病感染、BK病毒感染、黑色发结节病、芽囊原虫病、芽生菌病、玻利维亚出血热、肉毒中毒(和婴儿肉毒中毒)、巴西出血热、布鲁氏菌病、黑死病、伯克霍尔德菌感染、布鲁里溃疡、卡利西病毒感染(诺如病毒和札幌病毒)、弯杆菌病、念珠菌病(白念菌病；鹅口疮)、毛细线虫病、卡里翁氏病、猫抓病、蜂窝组织炎、恰加斯病(美国锥虫病)、软下疳、水痘、基孔肯雅热、衣原体、肺炎衣原体感染(台湾急性呼吸道病原体或TWAR)、霍乱、着色芽生菌病、壶菌病、支睾吸虫病、艰难梭菌结肠炎、球孢子菌病、科罗拉多蜱热(CTF)、普通感冒(急性病毒性鼻咽炎；急性鼻炎)、2019冠状病毒病(COVID-19)、克雅氏病(CJD)、克里米亚-刚果出血热(CCHF)、隐球菌病、隐孢子虫病、皮肤幼虫移行症(CLM)、环孢子虫病、囊尾幼虫病、巨细胞病毒感染、登革热、链带藻属感染、双核阿米巴病、白喉、裂头绦虫病、麦地那龙线虫病、埃博拉出血热、包虫病、埃里希体病、蛲虫病(蛲虫感染)、肠球菌感染、肠道病毒感染、流行性斑疹伤寒、传染性红斑(第五种疾病)、幼儿急疹(第六种疾病)、片吸虫病、姜片虫病、致命性家族性失眠症(FFI)、丝虫病、由产气荚膜梭状芽胞杆菌引起的食物中毒、自由生活阿米巴感染、梭状杆菌属感染、气性坏疽(梭状芽胞杆菌性肌坏死)、地霉病、格斯特曼-斯特劳斯勒-申克综合征(GSS)、贾第鞭毛虫病、鼻疽、颚口线虫病、淋病、***(杜诺凡病)、A组链球菌感染、B组链球菌感染、流感嗜血杆菌感染、手足口病(HFMD)、汉坦病毒肺综合征(HPS)、中原病毒病、幽门螺杆菌感染、溶血性***综合征(HUS)、出血热伴肾综合征(HFRS)、亨德拉病毒感染、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、单纯疱疹、组织胞浆菌病、钩虫感染、人博卡病毒感染、人伊氏埃利希病、人粒细胞无形体病(HGA)、人偏肺病毒感染、人单核细胞埃立克体病、人***瘤病毒(HPV)感染、人副流感病毒感染、膜壳绦虫病、爱泼斯坦-巴尔病毒传染性单核细胞增多症(Mono)、流感(流行性感冒)、等孢球虫病、川崎病、角膜炎、金格杆菌感染、库鲁病、拉沙热、军团病(退伍军人病)、庞蒂亚克热、利什曼病、麻风病、钩端螺旋体病、李斯特菌病、莱姆病(莱姆氏疏螺旋体病)、淋巴丝虫病(象皮病)、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎、疟疾、马尔堡出血热(MHF)、麻疹、中东呼吸综合征(MERS)、类鼻疽(惠特莫尔氏病)、脑膜炎、脑膜炎球菌病、后殖吸虫病、微孢子虫病、触染性软疣(MC)、猴痘、流行性腮腺炎、鼠型斑疹伤寒(地方性斑疹伤寒)、支原体肺炎、生殖支原体感染、足分支菌病、蝇蛆病、新生儿结膜炎(新生儿眼炎)、尼帕病毒感染、诺如病毒(儿童和婴儿)、(新)变异型克雅氏病(vCJD、nvCJD)、诺卡菌病、盘尾丝虫病(河盲症)、后睾吸虫病、副球孢子菌病(南美芽生菌病)、肺吸虫病、巴斯德菌病、头虱病(头虱)、体虱病(体虱)、阴虱病(阴虱、毛虱)、***性疾病(PID)、百日咳(顿咳)、鼠疫、肺炎球菌感染、肺孢子菌肺炎(PCP)、肺炎、脊髓灰质炎、普雷沃氏菌感染、原发性阿米巴脑膜脑炎(PAM)、进行性多灶性白质脑病、鹦鹉热、Q热、狂犬病、回归热、呼吸道合胞病毒感染、鼻孢子虫病、鼻病毒感染、立克次体感染、立克次体痘、裂谷热(RVF)、落基山斑疹热(RMSF)、轮状病毒感染、风疹、沙门氏菌病、SARS(严重急性呼吸道综合征)、疥疮、猩红热、血吸虫病、败血症、志贺氏菌病(杆菌性痢疾)、带状疱疹、天花、孢子丝菌病、葡萄球菌食物中毒、葡萄球菌感染、类圆线虫病、亚急性硬化性全脑炎、非性病性梅毒、梅毒和雅司病、绦虫病、破伤风(牙关紧闭症)、触染性须疮(须癣)、头癣(头皮癣)、体癣(身体癣)、股癣、手癣、黑癣、脚癣、甲癣(甲真菌病)、花斑癣(花斑糠疹)、弓蛔虫病(眼部幼虫移行症(OLM))、弓蛔虫病(内脏幼虫移行症(VLM))、弓形虫病、沙眼、旋毛虫病、滴虫病、鞭虫病(鞭虫感染)、结核病、土拉菌病、伤寒热、斑疹伤寒、***感染、山谷热、委内瑞拉马脑炎、委内瑞拉出血热、创伤弧菌感染、副溶血性弧菌肠炎、病毒性肺炎、西尼罗河热、白毛结节病(白秃疮)、假结核耶尔森菌病、耶尔森菌病、黄热病、兹斯保拉病、寨卡热或结合菌病。
为了实践本文中和贯穿本文所公开的方法，可以通过任何合适的途径施用如上所述的经修饰的IL-2多肽和/或编码经修饰的IL-2多肽或其缀合物的DNA多核苷酸、RNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体或包含以上中的任一项的药物组合物。在某些实施方式中，如本文所公开的经修饰的IL-2多肽和/或编码经修饰的IL-2多肽或其缀合物的DNA多核苷酸、RNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体或包含以上中的任一项的药物组合物可以通过口服、胃肠外、通过吸入、局部、直肠、鼻腔、颊部、***、通过植入的储库或其它药物施用方法施用。如本文中和贯穿本文所使用的，术语“肠胃外”包含皮下、皮内、静脉内、肌肉内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内和颅内注射或输注技术。
如无菌可注射水性或油性悬浮液等无菌可注射组合物可以根据本领域已知技术使用适合的分散剂或湿润剂和悬浮剂进行调配。无菌可注射制剂也可以是在非毒性的、肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液。在可接受的媒剂和溶剂中，可以使用的包含甘露醇、水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。合适的载体和其它药物组合物组分通常是无菌的。
另外，无菌的不挥发性油常规被用作溶剂或悬浮介质(例如，合成单或双甘油酯)。如油酸等脂肪酸及其甘油酯衍生物可用于制备可注射物，药学上可接受的油类(如橄榄油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙烯化的形式)也是如此。这些油溶液或悬浮液也可以含有长链醇稀释剂或分散剂、或羧甲基纤维素或类似的分散剂。出于调配目的，也可以使用通常用于制造药学上可接受的固体、液体或其它剂型的各种乳化剂或生物利用度增强剂。
用于口服施用的组合物可以是任何口服可接受的剂型，包括但不限于片剂、胶囊、乳剂和水悬浮液、分散液和溶液。在用于经口使用的片剂的情况下，常用载剂包括乳糖和玉米淀粉。还可以添加如硬脂酸镁等润滑剂。对于呈胶囊形式的口服施用，有用的稀释剂包含乳糖和干燥的玉米淀粉。当口服施用水性悬浮液或乳液时，可将活性成分悬浮或溶解在与乳化剂或悬浮剂结合的油相中。如果需要，可以添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。鼻用气溶胶或吸入组合物可以根据药物调配物领域众所周知的技术来制备，并且可以采用适合的防腐剂(例如，苯甲醇)、用于增强生物利用度的吸收促进剂和/或本领域已知的其它增溶剂或分散剂制备成例如盐水中的溶液。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所提供的本公开涉及一种有效量的如上所述的经修饰的IL-2多肽和/或编码经修饰的IL-2多肽或其缀合物的DNA多核苷酸、RNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体或包含以上中的任一项的药物组合物在制备用于治疗或预防受试者的疾病或病症(例如，增殖性疾病或病症)的药物中的用途。
用于扩增各种免疫细胞的方法
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所提供的本公开涉及一种扩增CD25+Treg、CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、天然杀伤(NK)细胞或天然杀伤T(NKT)细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的如上所述的经修饰的IL-2多肽和/或编码经修饰的IL-2多肽或其缀合物的DNA多核苷酸、RNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体或包含以上中的任一项的药物组合物接触持续足以诱导与IL-2Rβγ形成复合物的时间，由此刺激Treg细胞、CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、NK细胞和/或NKT细胞群扩增。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所提供的本公开涉及一种扩增CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、Treg细胞、天然杀伤(NK)细胞或天然杀伤T(NKT)细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的如上所述的经修饰的IL-2多肽和/或编码经修饰的IL-2多肽或其缀合物的编码DNA多核苷酸、RNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体或包含以上中的任一项的药物组合物接触持续足以诱导与IL-2Rβγ形成复合物的时间，由此刺激Treg细胞、CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、NK细胞和/或NKT细胞群扩增，同时使细胞死亡率降低10％至100％，例如使细胞死亡率降低10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或其任何子范围。
在某些实施方式中，相较于扩增与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ IDNO:2所示的氨基酸序列的相应的IL-2多肽接触的CD3+细胞群中的CD25+调节性T(Treg)细胞，如上所述的经修饰的IL-2多肽和/或编码RNA/DNA/病毒载体、经修饰的IL-2多肽缀合物或药物组合物使CD3+细胞群中的CD25+Treg细胞扩增大于1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更多。在某些实施方式中，如上所述的经修饰的IL-2多肽和/或编码经修饰的IL-2多肽或其缀合物的DNA多核苷酸、RNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体或包含以上中的任一项的药物组合物没有扩增所述细胞群中的CD8+T细胞。且在另一个实施方式中，在与如上所述的经修饰的IL-2多肽和/或编码RNA/DNA/病毒载体、经修饰的IL-2多肽缀合物或药物组合物一起温育后，所述细胞群中的Treg细胞与Teff细胞的比率为约1:100、1:50、1:20、1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、20:1、50:1、100:1或更大。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法可以以任何合适的方式进行。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法在体内进行。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法在体外进行。在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所公开的方法离体进行。
在某些实施方式中，本文中和贯穿本文所提供的本公开涉及一种有效量的如上所述的经修饰的IL-2多肽和/或编码经修饰的IL-2多肽或其缀合物的DNA多核苷酸、RNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体或包含以上中的任一项的药物组合物在制备用于扩增细胞群中的Treg细胞、CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、天然杀伤(NK)细胞或天然杀伤T(NKT)细胞群的药物中的用途。在某些实施方式中，本发明的用途被配置成扩增受试者体内的Treg细胞、CD4+辅助细胞、CD8+效应子初始和记忆细胞、天然杀伤(NK)细胞或天然杀伤T(NKT)细胞群。
其它示例性实施方式
实施方式1.一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其包含与SEQ ID NO:1或SEQID NO:2具有至少80％同一性的氨基酸序列，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、I128以及其组合，其中：
a)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体α(IL-2Rα)的结合增强；和/或
b)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体αβγ(IL-2Rαβγ)的结合增强；和/或
b)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与表达白细胞介素2受体αβγ(IL-2Rαβγ)的细胞的结合增强；和/或
c)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽通过IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增强；和/或
e)与不具有所述取代的IL-2多肽的IL-2Rαβγ受体信号传导效力与IL-2Rβγ受体信号传导效力的比率相比，所述经修饰的IL-2多肽的IL-2Rαβγ受体信号传导效力与IL-2Rβγ受体信号传导效力的比率增强；和/或
f)所述经修饰的IL-2多肽被配置成与缀合部分缀合；和/或
g)所述经修饰的IL-2多肽与缀合部分缀合；和/或
h)a)至g)的组合。
实施方式2.根据实施方式1所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在位置N29处用半胱氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸进行的取代；和/或
b)在位置Y31处用半胱氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸或苯丙氨酸进行的取代。
实施方式3.根据实施方式1或实施方式2所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含取代N29C。
实施方式4.根据实施方式1至3中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含取代Y31C。
实施方式5.根据实施方式1至4中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸或酪氨酸进行的取代：L18、L19、V69、Q74、N88、V91和I128。
实施方式6.根据实施方式1至5中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含选自由Y31C组成的组的取代。
实施方式7.根据实施方式1至6中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽被配制成与选自由以下组成的组的缀合部分缀合：水溶性聚合物、脂质、肽、蛋白质、多肽以及其组合。
实施方式8.根据实施方式1至7中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与聚乙二醇缀合。
实施方式9.根据实施方式1至8中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含选自由以下组成的组的突变：N29C、N30C、Y31C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C，其中所述多肽在N29C、N30C、Y31C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C位点处聚乙二醇化。
实施方式10.根据实施方式1至9中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含N29C或Y31C突变。
实施方式11.根据实施方式1至10中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸进行的取代：N29、N30、Y31以及其组合；或
b)在选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸进行的取代：N30、Y31以及其组合。
实施方式12.根据实施方式1至11中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：N29、N30、Y31，并且：
(i)是未缀合的；
(ii)与以下缀合：或
(iii)被配置成与以下缀合：
一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽，所述缀合在一个或多个选自由以下组成的组的位置处进行：N29、N30、Y31、E100、N119、T123、S127、T131；和/或
b)在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：N29、N30、Y31，并且：
(i)是未缀合的；
(ii)与以下缀合：或
(iii)被配置成与以下缀合：
一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽，所述缀合在一个或多个选自由以下组成的组的位置处进行：N29、N30、Y31；和/或
b)在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：N29、N30、Y31以及其组合，并且：
(i)是未缀合的；
(ii)与以下缀合：或
(iii)被配置成与以下缀合：
一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽，所述缀合在所述经修饰的IL-2多肽的N末端和/或C末端处进行。
实施方式13.根据实施方式1至12中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用半胱氨酸进行的取代：N29、N30、Y31；和/或
b)在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用半胱氨酸进行的取代：N30、Y31；和/或
c)包含在位置Y31处用半胱氨酸进行的取代；和/或
f)包含在位置N30处用半胱氨酸进行的取代。
实施方式14.根据实施方式1至13中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在IL-2Rα相互作用区域、和/或IL-2Rβ相互作用区域和/或IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的一个或多个取代。
实施方式15.根据实施方式1至14中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在IL-2Rβ相互作用区域和/或IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的一个或多个取代。
实施方式16.根据实施方式1至15中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的一个或多个取代：L18、L19、V69、Q74、N88、V91、I128以及其组合。
实施方式17.根据实施方式1至16中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸或酪氨酸进行的一个或多个取代：L18、L19、V69、Q74、N88、V91、I128以及其组合。
实施方式18.根据实施方式1至17中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在位置L18处用甲硫氨酸进行的取代；和/或
b)在位置L19处用丝氨酸进行的取代；和/或
c)在位置Y31处用半胱氨酸进行的取代；和/或
d)包含在位置V69处用丙氨酸进行的取代；和/或
e)包含在位置Q74处用脯氨酸进行的取代；和/或
f)包含在位置N88处用精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸进行的取代；和/或
g)包含在位置N88处用精氨酸进行的取代；和/或
h)包含在位置N88处用天冬氨酸进行的取代；
i)包含在位置N88处用谷氨酸进行的取代；
j)包含在位置N88处用赖氨酸进行的取代；
k)包含在位置V91处用赖氨酸进行的取代；
l)包含在位置I128处用苏氨酸进行的取代；和/或
m)a)至l)的组合。
实施方式19.根据实施方式1至18中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rβ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代；和/或
b)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代；和/或
c)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代、在IL-2Rβ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代。
实施方式20.根据实施方式1至19中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合增加。
实施方式21.根据实施方式1至20中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合亲和力从约10％增加到约100％，或从约1倍增加到约100,000倍或更多倍。
实施方式22.根据实施方式1至21中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加。
实施方式23.根据实施方式1至22中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加，所述结合从约10％增加到约100％，或从约1倍增加到约100,000倍或更多倍。
实施方式24.根据实施方式1至23中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞内化的水平降低。
实施方式25.根据实施方式1至24中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽具有被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化，所述内化水平为约10％至约100％，或从约1倍增加到约100,000倍或更多倍。
实施方式26.根据实施方式1至25中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化为检测不到的水平。
实施方式27.根据实施方式1至26中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增加。
实施方式28.根据实施方式1至27中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα的结合增加，并且与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增加。
实施方式29.根据实施方式1至28中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合增加，并且对IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加，并且与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞内化的水平降低。
实施方式30.根据实施方式1至29中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中：(i)所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合增加；(ii)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加；(iii)与包含不具有所述取代的SEQID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化为检测不到的水平；并且(iv)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增加。
实施方式31.根据实施方式1至30中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中：
与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体β(IL-2Rβ)或白细胞介素2受体γ(IL-2Rγ)的结合水平降低；
和/或与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rβγ的受体信号传导效力降低。
实施方式32.根据实施方式1至31中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rβγ的受体信号传导效力较低。
实施方式33.根据实施方式1至32中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中：(i)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rβ或IL-2Rγ的结合水平较低；并且(ii)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rβγ的受体信号传导效力较低。
实施方式34.根据实施方式1至33中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的信号传导效力与对IL-2Rβγ的信号传导效力的比率增加。
实施方式35.根据实施方式1至34中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的信号传导效力与对IL-2Rβγ的信号传导效力的比率增加，所述增加大于1倍、大于10倍、大于100倍、大于1,000倍、大于10,000倍、大于100,000倍。
实施方式36.根据实施方式1至35中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含N末端缺失，其中所述缺失包括氨基酸残基1至30(包括端值)之间的一个或多个的缺失，所述氨基酸残基存在于不包含所述N末端缺失的对应的修饰的IL-2多肽中。
实施方式37.根据实施方式1至36中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含C末端缺失，其中所述缺失包括氨基酸残基114至134(包括端值)之间的一个或多个的缺失，所述氨基酸残基存在于不包含所述C末端缺失的对应的修饰的IL-2多肽中。
实施方式38.根据实施方式1至37中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含N末端缺失以及C末端缺失。
实施方式39.根据实施方式1至38中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽是包含另外的氨基酸序列的融合多肽的一部分。
实施方式40.根据实施方式1至39中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含重组融合蛋白，所述重组融合蛋白包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列。
实施方式41.根据实施方式1至40中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的所述N末端或所述C末端与另外的氨基酸序列融合。
实施方式42.根据实施方式1至41中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的所述N末端或所述C末端与另外的氨基酸序列融合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体序列或其一部分或片段。
实施方式43.根据实施方式1至42中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的所述N末端或所述C末端与另外的氨基酸序列融合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体的Fc部分或其一部分或片段。
实施方式44.根据实施方式1至43中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽是分离的。
实施方式45.根据实施方式1至44中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽由载体表达，所述载体包含编码所述经修饰的IL-2多肽的多核苷酸序列。
实施方式46.根据实施方式1至45中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽由载体表达，所述载体包含编码所述经修饰的IL-2多肽的多核苷酸序列，其中所述载体是RNA载体、DNA、病毒载体或非病毒载体。
实施方式47.一种经修饰的IL-2多肽，其包含与水溶性聚合物、脂质、多肽、蛋白质或肽缀合的根据实施方式1至46中任一项所述的经修饰的IL-2多肽。
实施方式48.根据实施方式1至47中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过一个或多个共价键与一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
实施方式49.根据实施方式1至48中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过一个或多个非共价键与一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
实施方式50.根据实施方式1至49中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
实施方式51.根据实施方式1至50中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
实施方式52.根据实施方式1至51中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
实施方式53.根据实施方式1至52中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的半胱氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
实施方式54.根据实施方式1至53中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
实施方式55.根据实施方式1至54中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
实施方式56.根据实施方式1至55中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
实施方式57.根据实施方式1至56中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的半胱氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
实施方式58.根据实施方式1至57中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过所述经修饰的IL-2多肽的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
实施方式59.根据实施方式1至58中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过以下与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：
i)所述经修饰的IL-2多肽的N末端氨基酸残基的α氨基；
ii)所述经修饰的IL-2多肽的赖氨酸氨基酸残基的ε氨基；或
iii)所述经修饰的IL-2多肽的N糖基化位点或O糖基化位点。
实施方式60.根据实施方式1至59中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过连接子与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽共价地缀合。
实施方式61.根据实施方式1至60中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
实施方式62.根据实施方式1至61中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过位于所述经修饰的IL-2多肽内的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
实施方式63.根据实施方式1至62中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述单个氨基酸残基位于所述另外的氨基酸序列内。
实施方式64.根据实施方式1至63中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体序列或其一部分或片段。
实施方式65.根据实施方式1至64中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体的Fc部分。
实施方式66.根据实施方式1至65中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述单个氨基酸残基是：
i)所述融合多肽的N末端氨基酸残基的α氨基；
ii)所述融合多肽的赖氨酸氨基酸残基的ε氨基；或
iii)所述融合多肽的N糖基化位点或O糖基化位点。
实施方式67.根据实施方式1至65中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述融合多肽通过连接子与所述水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽共价地缀合。
实施方式68.根据实施方式1至67中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物缀合。
实施方式69.根据实施方式1至68中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物缀合，所述水溶性聚合物包含聚乙二醇(PEG)、聚(丙二醇)(PPG)、乙二醇和丙二醇的共聚物、聚(氧乙基化多元醇)、聚(烯醇)、聚(乙烯基吡咯烷酮)、聚(羟烷基甲基丙烯酰胺)、聚(羟烷基甲基丙烯酸酯)、聚(糖)、聚(a-羟基酸)、聚(乙烯醇)、聚磷腈、聚噁唑啉(POZ)、聚(N-丙烯酰基吗啉)或其组合。
实施方式70.根据实施方式1至69中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合。
实施方式71.根据实施方式1至70中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含线性PEG分子的水溶性聚合物缀合。
实施方式72.根据实施方式1至71中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合。
实施方式73.根据实施方式1至72中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合，所述支化PEG分子包含从中央核心基团发出的约三个至约十个PEG链。
实施方式74.根据实施方式1至73中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述支化PEG分子是包含从中央核心基团发出的约10个至约100个PEG链的星形PEG。
实施方式75.根据实施方式1至74中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述支化PEG分子是包含移植到聚合物主链上的多个PEG链的梳状PEG。
实施方式76.根据实施方式1至75中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子的分子量的范围为约300g/mol至约10,000,000g/mol。
实施方式77.根据实施方式1至76中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子的平均分子量为约5,000道尔顿至约1,000,000道尔顿。
实施方式78.根据实施方式1至77中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子的平均分子量为约20,000道尔顿至约30,000道尔顿。
实施方式79.根据实施方式1至78中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子是单分散、均匀或离散的PEG分子。
实施方式80.根据实施方式1至79中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物缀合，其中所述水溶性聚合物包含多糖。
实施方式81.根据实施方式1至80中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与脂质缀合。
实施方式82.根据实施方式1至81中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与脂质缀合，其中所述脂质包含脂肪酸。
实施方式83.根据实施方式1至82中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与蛋白质缀合。
实施方式84.根据实施方式1至83中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与蛋白质缀合，其中所述蛋白质包含抗体或其结合片段。
实施方式85.根据实施方式1至84中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与抗体的Fc部分或其片段缀合。
实施方式86.根据实施方式1至85中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，所述水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽通过连接子与所述经修饰的IL-2多肽的所述取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸间接结合。
实施方式87.根据实施方式1至86中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，所述水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽与所述经修饰的IL-2多肽的所述取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸直接结合。
实施方式88.根据实施方式1至87中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽具有约5分钟至约10天的体内半衰期。
实施方式89.根据实施方式1至88中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽选自由以下组成的组：ACT5200、ACT5201、ACT5210、ACT5211、ACT5212、ACT522S0、ACT522S1、ACT5230、ACT5231、ACT5260、ACT5261、ACT5270、ACT5271、ACT5280、ACT5281、ACT5290和ACT5291。
实施方式90.一种药物组合物，其包含有效量的根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽以及药学上可接受的载体或赋形剂。
实施方式91.根据实施方式90所述的药物组合物，其中所述药物组合物进一步包含另一种活性成分。
实施方式92.根据实施方式90或实施方式91所述的药物组合物，其进一步包含一种或多种另外的成分，其中一种或多种活性成分包含：
(i)抗炎物质或抗自身免疫性物质；
(ii)抗赘生物物质；
(iii)抗感染性疾病物质；和/或
(iv)免疫缺陷病症。
实施方式93.根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-1多肽或根据实施方式90至92中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症。
实施方式94.根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-1多肽或根据实施方式90至92中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含炎性疾病或病症或自身免疫性疾病或病症。
实施方式95.根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-1多肽或根据实施方式90至92中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症。
实施方式96.根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-1多肽或根据实施方式90至92中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含感染性疾病或病症。
实施方式97.根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-1多肽或根据实施方式90至92中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含免疫缺陷病症。
实施方式98.一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或根据实施方式90至92中任一项所述的药物组合物。
实施方式99.一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或根据实施方式90至92中任一项所述的药物组合物，其中所述疾病或病症包含炎性疾病或病症或自身免疫性疾病或病症。
实施方式100.一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或根据实施方式90至92中任一项所述的药物组合物，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症。
实施方式101.一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或根据实施方式90至92中任一项所述的药物组合物，其中所述疾病或病症包含感染性疾病或病症。
实施方式102.一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或根据实施方式90至92中任一项所述的药物组合物，其中所述疾病或病症包含免疫缺陷疾病或病症。
实施方式103.根据实施方式93至97中任一项所述的用途或根据实施方式98至102中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。
实施方式104.根据实施方式93至97中任一项所述的用途或根据实施方式97至102中任一项所述的方法，其中所述受试者是非人哺乳动物。
实施方式105.根据实施方式95所述的用途或根据实施方式100所述的方法，其中所述增殖性病症包含肿瘤。
实施方式106.根据实施方式95所述的用途或根据实施方式100所述的方法，其中所述增殖性病症包含癌症。
实施方式107.根据实施方式95所述的用途或根据实施方式100所述的方法，其中所述增殖性病症包含实体瘤或癌症。
实施方式108.根据实施方式95所述的用途或根据实施方式100所述的方法，其中所述增殖性病症包含实体瘤或癌症，其中所述实体瘤或所述癌症选自由以下组成的组：软骨肉瘤、尤文氏肉瘤、骨/骨肉瘤恶性纤维组织细胞瘤、骨肉瘤、横纹肌肉瘤、心脏癌、星形细胞瘤、脑干胶质瘤、毛细胞型星形细胞瘤、室管膜瘤、原始神经外胚层肿瘤、小脑星形细胞瘤、脑星形细胞瘤、神经胶质瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、少突胶质细胞瘤、松果体星形细胞瘤、垂体腺瘤、视觉通路和下丘脑神经胶质瘤、乳腺癌、浸润性小叶癌、小管癌、浸润性筛状癌、髓样癌、男性乳腺癌、叶状肿瘤、炎性乳腺癌、肾上腺皮质癌、胰岛细胞癌(内分泌胰腺)、多发性内分泌瘤变综合征、甲状旁腺癌、嗜铬细胞瘤、甲状腺癌、默克尔细胞癌、葡萄膜黑色素瘤、视网膜母细胞瘤、***癌、阑尾癌、胆管癌、类癌瘤、胃肠道癌、结肠癌、肝外胆管癌、胆囊癌、胃癌、胃肠类癌瘤、胃肠间质瘤(GIST)、肝细胞癌、胰岛细胞胰腺癌、直肠癌、膀胱癌、***、子宫内膜癌、性腺外生殖细胞肿瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌(表面上皮-间质肿瘤)、卵巢生殖细胞肿瘤、***癌、肾细胞癌、肾盂和输尿管、移行细胞癌、***癌、睾丸癌、妊娠滋养细胞肿瘤、输尿管和肾盂、移行细胞癌、尿道癌、子宫肉瘤、***癌、外阴癌、维尔姆斯肿瘤、食管癌、头颈癌、鼻咽癌、口腔癌、口咽癌、鼻窦和鼻腔癌、咽癌、唾液腺癌、下咽癌、基底细胞癌、黑色素瘤、皮肤癌(非黑色素瘤)、支气管腺瘤/类癌、小细胞肺癌、间皮瘤、非小细胞肺癌、胸膜肺母细胞瘤、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、AIDS相关癌症、卡波西肉瘤、上皮样血管内皮瘤(EHE)、促纤维增生性小圆细胞瘤和脂肪肉瘤。
实施方式109.根据实施方式95所述的用途或根据实施方式100所述的方法，其中所述增殖性病症包含肿瘤或癌症，其中所述肿瘤或所述癌症是恶性血液肿瘤。
实施方式110.根据实施方式95所述的用途或根据实施方式100所述的方法，其中所述增殖性病症包含肿瘤或癌症，其中所述肿瘤或所述癌症是选自由以下组成的组的恶性血液肿瘤：骨髓赘生物、白血病、淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤、血管免疫性T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤网状内皮组织增殖、网状细胞增多症、小神经胶质瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤、B细胞慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、纵隔大B细胞淋巴瘤、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、***边缘区B细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、淋巴瘤样肉芽肿病、结节性淋巴细胞主要霍奇金淋巴瘤、浆细胞白血病、急性红细胞增多症和红白血病、急性红细胞性骨髓病、急性红细胞白血病、黑尔梅尔-舍纳病、急性巨核细胞白血病、肥大细胞白血病、全骨髓组织病、急性全骨髓组织病伴骨髓纤维化、淋巴肉瘤细胞白血病、未指定细胞类型的急性白血病、急变期慢性骨髓性白血病、干细胞白血病、未指定细胞类型的慢性白血病、未指定细胞类型的亚急性白血病、加速期慢性骨髓性白血病、急性髓系白血病、真性红细胞增多症、急性早幼粒细胞白血病、急性嗜碱性白血病、急性嗜酸性白血病、急性淋巴细胞白血病、急性单核细胞白血病、成熟急性成髓细胞白血病、急性髓系树突细胞白血病、成人T细胞白血病/淋巴瘤、侵袭性NK细胞白血病、B细胞幼淋巴细胞白血病、B细胞慢性淋巴细胞白血病、B细胞白血病、慢性骨髓性白血病、慢性髓单核细胞白血病、慢性中性粒细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病、慢性特发性骨髓纤维化、多发性骨髓瘤、卡勒病、骨髓瘤、孤立性骨髓瘤、浆细胞白血病、浆细胞瘤、髓外、恶性浆细胞肿瘤NOS、浆细胞瘤NOS、单克隆丙种球蛋白病、多发性骨髓瘤、血管中心性免疫增殖性病变、淋巴样肉芽肿病、血管免疫母细胞性***病、T-γ淋巴组织增殖性疾病、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、α重链病、γ重链病、富兰克林氏病、免疫增殖性小肠疾病、地中海病、恶性免疫增殖性疾病、未指明和免疫增殖性疾病NOS。
实施方式111.根据实施方式94所述的用途或根据实施方式99所述的方法，其中所述炎性疾病或病症或所述自身免疫性疾病或病症选自由以下组成的组：炎症、自身免疫性疾病、副肿瘤性自身免疫性疾病、软骨炎症、纤维化疾病和/或骨退化、关节炎、类风湿性关节炎、幼年关节炎、幼年类风湿性关节炎、少关节型幼年类风湿性关节炎、多关节型幼年类风湿性关节炎、全身发病型幼年类风湿性关节炎、幼年强直性脊柱炎、幼年肠病性关节炎、幼年反应性关节炎、幼年瑞特综合征、SEA综合征(血清反应阴性、附着点病、关节病综合征)、幼年皮肌炎、幼年银屑病关节炎、幼年硬皮病、幼年全身性红斑狼疮、幼年血管炎、少关节炎类风湿性关节炎、多关节类风湿性关节炎、全身发病型类风湿关节炎、强直性脊柱炎、肠病性关节炎、反应性关节炎、瑞特综合征、SEA综合征(血清反应阴性、附着点病、关节病综合征)、皮肌炎、银屑病关节炎、硬皮病、全身性红斑狼疮、血管炎、肌炎、多发性肌炎、皮肌炎、骨关节炎、结节性多动脉炎、韦格纳肉芽肿病、动脉炎、风湿性多肌痛、结节病、硬皮病、硬化症、原发性胆汁硬化症、硬化性胆管炎、干燥综合征、牛皮癣、斑块状银屑病、滴状银屑病、反向型银屑病、脓疱性银屑病、红皮病型银屑病、皮炎、特应性皮炎、动脉粥样硬化、狼疮、斯蒂尔病、全身性红斑狼疮(SLE)、重症肌无力、炎性肠病(IBD)、克罗恩病、溃疡性结肠炎、乳糜泻、多发性硬化症(MS)、哮喘、COPD、吉兰-巴雷病、I型糖尿病、甲状腺炎(例如格雷夫斯氏病)、艾迪生氏病、雷诺现象、自身免疫性肝炎、GVHD和移植排斥。
实施方式112.根据实施方式96所述的用途或根据实施方式101所述的方法，其中所述感染性疾病选自由以下组成的组：不动杆菌感染、放线菌病、非洲昏睡病(非洲锥虫病)、AIDS(获得性免疫缺陷综合征)、阿米巴病、无形体病、血管圆线虫病、异尖线虫病、炭疽、溶血隐秘杆菌感染、阿根廷出血热、蛔虫病、曲霉菌病、星状病毒感染、巴贝虫病、蜡样芽孢杆菌感染、细菌性脑膜炎、细菌性肺炎、细菌性***病、拟杆菌感染、小袋虫病、巴尔通氏体病、贝利斯蛔虫病感染、BK病毒感染、黑色发结节病、芽囊原虫病、芽生菌病、玻利维亚出血热、肉毒中毒(和婴儿肉毒中毒)、巴西出血热、布鲁氏菌病、黑死病、伯克霍尔德菌感染、布鲁里溃疡、卡利西病毒感染(诺如病毒和札幌病毒)、弯杆菌病、念珠菌病(白念菌病；鹅口疮)、毛细线虫病、卡里翁氏病、猫抓病、蜂窝组织炎、恰加斯病(美国锥虫病)、软下疳、水痘、基孔肯雅热、衣原体、肺炎衣原体感染(台湾急性呼吸道病原体或TWAR)、霍乱、着色芽生菌病、壶菌病、支睾吸虫病、艰难梭菌结肠炎、球孢子菌病、科罗拉多蜱热(CTF)、普通感冒(急性病毒性鼻咽炎；急性鼻炎)、2019冠状病毒病(COVID-19)、克雅氏病(CJD)、克里米亚-刚果出血热(CCHF)、隐球菌病、隐孢子虫病、皮肤幼虫移行症(CLM)、环孢子虫病、囊尾幼虫病、巨细胞病毒感染、登革热、链带藻属感染、双核阿米巴病、白喉、裂头绦虫病、麦地那龙线虫病、埃博拉出血热、包虫病、埃里希体病、蛲虫病(蛲虫感染)、肠球菌感染、肠道病毒感染、流行性斑疹伤寒、传染性红斑(第五种疾病)、幼儿急疹(第六种疾病)、片吸虫病、姜片虫病、致命性家族性失眠症(FFI)、丝虫病、由产气荚膜梭状芽胞杆菌引起的食物中毒、自由生活阿米巴感染、梭状杆菌属感染、气性坏疽(梭状芽胞杆菌性肌坏死)、地霉病、格斯特曼-斯特劳斯勒-申克综合征(GSS)、贾第鞭毛虫病、鼻疽、颚口线虫病、淋病、***(杜诺凡病)、A组链球菌感染、B组链球菌感染、流感嗜血杆菌感染、手足口病(HFMD)、汉坦病毒肺综合征(HPS)、中原病毒病、幽门螺杆菌感染、溶血性***综合征(HUS)、出血热伴肾综合征(HFRS)、亨德拉病毒感染、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、单纯疱疹、组织胞浆菌病、钩虫感染、人博卡病毒感染、人伊氏埃利希病、人粒细胞无形体病(HGA)、人偏肺病毒感染、人单核细胞埃立克体病、人***瘤病毒(HPV)感染、人副流感病毒感染、膜壳绦虫病、爱泼斯坦-巴尔病毒传染性单核细胞增多症(Mono)、流感(流行性感冒)、等孢球虫病、川崎病、角膜炎、金格杆菌感染、库鲁病、拉沙热、军团病(退伍军人病)、庞蒂亚克热、利什曼病、麻风病、钩端螺旋体病、李斯特菌病、莱姆病(莱姆氏疏螺旋体病)、淋巴丝虫病(象皮病)、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎、疟疾、马尔堡出血热(MHF)、麻疹、中东呼吸综合征(MERS)、类鼻疽(惠特莫尔氏病)、脑膜炎、脑膜炎球菌病、后殖吸虫病、微孢子虫病、触染性软疣(MC)、猴痘、流行性腮腺炎、鼠型斑疹伤寒(地方性斑疹伤寒)、支原体肺炎、生殖支原体感染、足分支菌病、蝇蛆病、新生儿结膜炎(新生儿眼炎)、尼帕病毒感染、诺如病毒(儿童和婴儿)、(新)变异型克雅氏病(vCJD、nvCJD)、诺卡菌病、盘尾丝虫病(河盲症)、后睾吸虫病、副球孢子菌病(南美芽生菌病)、肺吸虫病、巴斯德菌病、头虱病(头虱)、体虱病(体虱)、阴虱病(阴虱、毛虱)、***性疾病(PID)、百日咳(顿咳)、鼠疫、肺炎球菌感染、肺孢子菌肺炎(PCP)、肺炎、脊髓灰质炎、普雷沃氏菌感染、原发性阿米巴脑膜脑炎(PAM)、进行性多灶性白质脑病、鹦鹉热、Q热、狂犬病、回归热、呼吸道合胞病毒感染、鼻孢子虫病、鼻病毒感染、立克次体感染、立克次体痘、裂谷热(RVF)、落基山斑疹热(RMSF)、轮状病毒感染、风疹、沙门氏菌病、SARS(严重急性呼吸道综合征)、疥疮、猩红热、血吸虫病、败血症、志贺氏菌病(杆菌性痢疾)、带状疱疹、天花、孢子丝菌病、葡萄球菌食物中毒、葡萄球菌感染、类圆线虫病、亚急性硬化性全脑炎、非性病性梅毒、梅毒和雅司病、绦虫病、破伤风(牙关紧闭症)、触染性须疮(须癣)、头癣(头皮癣)、体癣(身体癣)、股癣、手癣、黑癣、脚癣、甲癣(甲真菌病)、花斑癣(花斑糠疹)、弓蛔虫病(眼部幼虫移行症(OLM))、弓蛔虫病(内脏幼虫移行症(VLM))、弓形虫病、沙眼、旋毛虫病、滴虫病、鞭虫病(鞭虫感染)、结核病、土拉菌病、伤寒热、斑疹伤寒、***感染、山谷热、委内瑞拉马脑炎、委内瑞拉出血热、创伤弧菌感染、副溶血性弧菌肠炎、病毒性肺炎、西尼罗河热、白毛结节病(白秃疮)、假结核耶尔森菌病、耶尔森菌病、黄热病、兹斯保拉病、寨卡热和结合菌病。
实施方式113.根据实施方式97所述的用途或根据实施方式102所述的方法，其中所述免疫缺陷疾病或病症选自由以下组成的组：无丙种球蛋白血症：X连锁和常染色体隐性遗传、共济失调毛细血管扩张症、慢性肉芽肿性疾病和其它吞噬细胞病症、常见可变免疫缺陷、补体缺乏症、迪乔治综合征、噬血细胞淋巴组织细胞增生症(HLH)、高IgE综合征、高IgM综合征、IgG亚类缺乏症、先天免疫缺陷、NEMO缺乏综合征、选择性IgA缺乏症、选择性IgM缺乏症、严重联合免疫、缺乏症和联合免疫缺陷、特异性抗体缺乏症、婴儿期短暂性低丙种球蛋白血症、WHIM综合征(疣、低丙种球蛋白血症、感染和骨髓无效生成性粒细胞缺乏症)、威斯科特-奥尔德里奇综合征、其它抗体缺乏病症、其它原发性细胞免疫缺陷、严重联合免疫缺陷(SCID)、常见可变免疫缺陷(CVID)、人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)、药物诱导的免疫缺陷、移植物抗宿主综合征、原发性免疫缺陷病(PIDD)以及淋巴细胞减少症。
实施方式114.一种有效量的根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或编码根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体在制备用于治疗或预防受试者的疾病或病症的药物中的用途。
实施方式115.根据实施方式114所述的用途，其中所述疾病或病症选自由以下组成的组：炎性疾病或病症；自身免疫性疾病或病症；增殖性疾病或病症；感染性疾病或病症；以及免疫缺陷疾病或病症。
实施方式116.一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或编码根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触持续足以诱导与IL-2Rαβγ形成复合物的时间，由此刺激所述Treg细胞群扩增。
实施方式117.一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或编码根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触持续足以诱导与IL-2Rαβγ形成复合物的时间，由此刺激所述Treg细胞群扩增，同时使细胞死亡率降低10％至100％。
实施方式118.根据实施方式116或117所述的方法，其中所述有效量使CD25+调节性T(Treg)细胞扩增，所述扩增是用包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽引起的CD25+Treg细胞的扩增的至少1倍、10倍、100倍、1,000倍、104倍、105倍、106倍、107倍、108倍或109倍。
实施方式119.根据实施方式116或117所述的方法，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述有效量使在与所述有效量温育之后T细胞群中的Treg细胞的百分比增加，并且所述Treg细胞的百分比为约或至少0.01％、0.1％、1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更多。
实施方式120.根据实施方式116至119中任一项所述的方法，其中所述方法在体内进行。
实施方式121.根据实施方式116至119中任一项所述的方法，其中所述方法在体外进行。
实施方式122.根据实施方式116至119中任一项所述的方法，其中所述方法离体进行。
实施方式123.一种有效量的根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或编码根据实施方式1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体在制备用于扩增细胞群中的Treg细胞的药物中的用途。
实施方式124.根据实施方式123所述的用途，其中所述Treg细胞在受试者体内扩增。
实施例
实施例1：PEG修饰的IL-2突变蛋白的设计
IL-2中IL-2Rα增强突变位点的选择根据被修饰成包括C125S突变(参见例如阿地白介素药物数据库(DB00041(BTD00082、BIOD00082))的人IL-2肽序列，来自“位点1”(表1)列表的氨基酸中的一个或多个氨基酸被选择并用其它氨基酸(如半胱氨酸、丝氨酸等)取代。与天然IL-2分子相比，期望突变蛋白与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合增强。所有构建体都是在野生型人IL-2且在位置125(即C125S)处用半胱氨酸取代丝氨酸(本文中称为rhIL-2或rhIL2；SEQ ID NO:1)的背景下制成的，C125S用以去除IL-2中此不成对的半胱氨酸残基。示例性聚乙二醇化IL-2突变蛋白分子对IL-2Rα的亲和力增强，与IL-2Rαβγ的结合强并且降低了受体介导的内化并延长其在人类和其它动物体內的半衰期。
表1.IL-2突变设计
IL-2中PEG连接位点的选择除了由与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合的增强产生的突变之外，还从表1所示的“位点2”列引入其它突变和/或修饰。示例性突变蛋白与马来酰亚胺活化的PEG缀合。也可以使用其它PEG试剂。
如表1所示，某些突变属于位点1和位点2两者，并且因此向包含一个或多个此类突变的经修饰的IL-2多肽提供与位点1和位点2两者相关的特性。与天然IL-2分子(以及rhIL-2C125S多肽)相比，如通过聚乙二醇化进行的额外的修饰的此类经修饰的IL-2多肽，被期望具有延长的半衰期。尽管此类聚乙二醇化多肽可能表现出对IL-2Rα或IL-2Rαβγ的结合亲和力的某一差异，但是此类差异被认为是极小的(图1，表1)。
降低IL-2Rα介导的内化和/或减少与IL-2Rβ的结合/其活化的另外的突变位点的选择除了表1中的位点1和位点2中列出的修饰之外，引入了另外的修饰。这些修饰携带一个或多个突变，所述一个或多个突变用任何其它氨基酸取代“位点3”(表1)列表中的氨基酸。这些位点处的突变增强或进一步增强与IL-2Rα的结合，降低受体介导的内化和/或减少IL-2Rβγ的结合/活化。
实施例2：IL-2突变蛋白的产生和纯化
合成编码IL-2突变蛋白的cDNA并将其克隆到pcDNA3.1(-)载体中。表2中描绘了某些示例性突变蛋白多肽(和编码其的多核苷酸)。
表2.IL-2突变蛋白的代码名称
通过用PEI MAX(多元科学公司(Polysciences))瞬时转染HEK293F细胞并培养转染后的细胞96个小时，将示例性经修饰的IL-2多肽表示为His-Tag融合物。通过以4000xg持续离心20分钟来采集上清液。
然后使用标准蛋白质纯化技术从上清液中分离出经修饰的IL-2多肽。简而言之，经修饰的IL-2多肽都会在His-Tag纯化(/>His-Tag Purification)柱(罗氏公司(Roche))上被捕获并且通过Superdex 75增加柱(通用电气医疗集团(GEHealthcare))精制。在含有pH为6.0的0.1M MES和150mM NaCl的缓冲液中将经纯化的蛋白质从Superdex 75增加柱(通用电气医疗集团)上洗脱并且将其储存在-80℃下以供进一步使用。
实施例3：IL-2突变蛋白的聚乙二醇化
在室温下用5mM TCEP(赛默飞世尔公司(Thermo Fisher))还原经纯化的IL-2突变蛋白(1mg/ml)持续15分钟并且然后在室温下与50倍摩尔过量的马来酰亚胺-PEG 20K(莱桑生物公司(Laysan Bio))反应持续30分钟。通过加入达到相对于马来酰亚胺-PEG 20k2倍摩尔的过量的L-半胱氨酸(西格玛公司(Sigma))来停止反应。PEG缀合物在SP琼脂糖FF柱上进一步纯化，随后在Superdex 75增加柱(通用电气医疗集团)上进一步纯化。图3中示出了纯化过程的代表性色谱图和SDS-PAGE分析。
实施例4：IL-2突变蛋白和PEG缀合物与IL-2受体的体外结合
通过Octet QKe(艾瑞生物公司)确定经纯化的IL-2突变蛋白和PEG缀合物与IL-2受体的结合亲和力。在抗人IgG Fc捕获(anti-human IgG Fc capture(AHC))传感器上捕获人Fc融合蛋白格式的IL-2Rα或IL-2Rβ(北京百普赛斯生物科技股份有限公司(ACROBiosystems))。在1倍动力学缓冲液中建立基线后，将传感器浸入含有连续稀释的rhIL-2、IL-2突变蛋白或PEG缀合的IL-2突变蛋白的孔中以测量缔合常数。在将传感器转移到仅含有缓冲液的孔中后检测解离。由Octet用户软件收集和分析数据。为了分析动力学常数，使用1:1曲线拟合模型。表3示出了观察到的所示的经修饰的IL-2多肽-PEG缀合物与所示的IL-2受体亚基的结合和动力学参数。图4中示出了结合的典型传感图。
表3.经修饰的IL-2多肽-PEG缀合物与IL-2Rα相互作用的动力学常数
Kon(M-1S-1) Koff(S-1) KD(M)
rhIL-2 7.32×105 1.18×10-2 1.61E-08
Y31C-PEG20 6.15×105 1.52×10-2 2.47E-08
Y31C-PEG20+V69A+Q74P 4.74±0.09×105 4.31±0.03×10-3 9.09E-09
Y31C-PEG20+L18M+L19S 4.24×105 3.88×10-2 9.15E-08
Y31C-PEG20+L18M+L19S+V69A+Q74P 5.81×105 0.43×10-2 7.38E-09
Y31C-PEG20+V69A+Q74P+V91K 3.55×105 0.32×10-3 9.07E-09
Y31C-PEG20+N30G 3.79×105 2.32×10-2 6.10E-08
Y31C-PEG20+N30S 6.39×105 3.02×10-2 4.73E-08
Y31C-PEG20+N30A 5.20×105 1.94×10-2 3.73E-08
Y31C-PEG20+N30G 3.79×105 2.32×10-2 6.10E-08
Y31C-PEG20+V69A+Q74P+I128T 3.93×105 0.35×10-2 8.86E-09
Y31C-PEG20+V69A+Q74P+N30S 3.18×105 0.29×10-2 9.14E-08
Y31C-PEG20+V69A+Q74P+N88R 3.45×105 0.37×10-2 1.06E-08
N29C-PEG20 5.38×105 10.1×10-2 1.88E-07
注：ND＝未检测到
实施例5：IL-2突变蛋白与IL-2Rαβγ表达细胞的表面结合
表达IL-2Rαβγ的CTLL2细胞和IL-2Rα+T细胞两者用于分析Il-2突变蛋白与IL-2Rαβγ的表面结合。
通过与抗CD3/CD28 Dynabeads一起温育来产生从PBMC中分离的经活化的人T细胞。至少90％经活化的细胞上的IL-2Rα呈阳性。收集CTLL2细胞和IL-2Rα+T细胞并将其以2-4百万个细胞/ml重新悬浮于冷的结合缓冲液(FBB，含5％ FBS的DPBS)中。将His标记的IL-2和IL-2突变体加入细胞悬浮液中，混合并在4℃下温育40分钟。将细胞在洗涤缓冲液(FWB，含1％ FBS的DPBS)中洗涤一次，并且将离心沉降的细胞与1:100抗His-APC(生物传奇公司(BioLegend)362605)重新悬浮于FBB中。在室温下将样本温育15分钟。然后用120ul FWB洗涤细胞，然后重新悬浮以进行流式细胞术分析。
如图4A和图4B所示的，相对于erIL-2，若干种突变蛋白(如Y31C和Y31C-PEG20)显示出对CTLL2细胞和IL-2Rα阳性人T细胞中的一者或两者的结合增强。另外，ACT5211(Y31C-PEG20+L18M+L19S)和ACT5261显示出相较于rhIL-2与IL-2Rα表达T细胞更好地结合(图4C)。
实施例6：IL-2突变蛋白与IL-2R在ELISA测定中的结合
与rhIL-2对这些受体复合物的结合亲和力相比，为了评估示例性IL-2突变蛋白对IL-2Rα和IL-2Rβγ的相对结合亲和力，通过基于ELISA的测定来确定经纯化的IL-2突变蛋白与IL-2Rα或IL-2Rβγ受体的结合。IL-2Rα和IL-2Rβγ-人Fc融合蛋白构建体(北京百普赛斯生物科技股份有限公司)各自由抗人IgG Fc(艾博抗公司(abcam))表达和固定，然后在微孔板的孔的表面上捕获所述抗人IgG Fc。将连续稀释的His缀合的IL-2、His缀合的IL-2突变蛋白(ACT5210)和PEG缀合的IL-2突变蛋白(ACT5211)样本各自添加到含IL-2Rα或IL-2Rβγ的孔中。使用与和基质一起温育的辣根过氧化物酶(HRP)(金斯瑞公司(Genscript))缀合的抗His或抗PEG抗体检测结合。用基于吸光度的微孔板酶标仪测量结合的定量。通过Graphpas prism9软件分析数据。计算针对每个结合反应的EC50并将其用作IL-2多肽(例如，rh-IL2、经修饰的IL-2突变蛋白和其聚乙二醇化版本)的相对结合亲和力的度量。
如图8所示的，观察到rhIL-2显示出相较于IL-2Rα与IL-2Rβγ的结合增强。另外，观察到rhIL-2在与IL-2Rβγ一起温育时具有的EC50值是在与IL-2Rα一起温育时获得的EC50值的大约1/13(即优先的)，表明相较于IL-2Rα，其对IL-2Rβγ具有显著优先的结合亲和力。相比之下，ACT5210和ACT5211两者显示出与IL2Rα的结合增强，而与IL2Rβγ的结合降低。如下表4所提供的，相较于针对rhIL-2观察到的α/βγEC50比率，图8中描绘的根据针对ACT5211的所测得的EC50值计算的α/βγEC50比率增强超过67倍。
表4.rIL-2和示例性突变蛋白与IL-2IL2Rα和IL2Rβγ结合的所观察到的EC50
EC50(ng/ml) IL-2Rα IL-2Rβγ 比率(α/βγ)
rhIL2 46.7 2.3 20.3
ACT5210 2.5 39.6 0.06
ACT5211 5.1 21.7 0.3
rhIL2/ACT5211 6.8 0.1 67.7
实施例7：与T细胞共培养的IL-2和突变蛋白的半衰期
为了评估示例性IL-2突变蛋白的相对半衰期，从在AIM V加5％ FBS中接种解冻的人PBMC并用100ng/ml抗CD3(克隆OKT3)刺激2天以获得经活化的T细胞。将活化后的T细胞接种于96孔板的孔中并用不同浓度的人重组IL-2(rhIL-2)或示例性突变蛋白给药。在1、2、4、6、8、24、48、72、96、120、144、168和192小时时收集上清液，并且在收集之后迅速冷冻。在收集所有样本之后，使冷冻的上清液解冻并且使用人IL-2未涂覆的ELISA试剂盒(赛默飞世尔公司(ThermoFisher)测试IL-2和IL-2突变蛋白浓度。包括缺乏IL-2的培养基的孔用作基线以评估IL-2稳定性，并且从添加IL-2的样本中减去所述孔以评估IL-2转换率。
如图5所示的，相对于rhIL-2，ACT5210(Y31C+L18M+L19S)和ACT5230(Y31C+V69A+Q74P)突变蛋白两者的转换率降低。另外，相对于对应的非聚乙二醇化版本，这些突变蛋白(即分别是ACT5211和ACT5231)的聚乙二醇化版本产生显著增强的延长。此外，观察到另一种示例性聚乙二醇化突变蛋白ACT5201相对于rhIL-2显示出类似增强的半衰期延长。
实施例8：响应于聚乙二醇化IL-2突变蛋白的淋巴细胞增殖
为了评估示例性IL-2突变蛋白诱导淋巴细胞增殖的能力，将人PBMC的样本解冻，使所述样本在AIM V、5％ FBS、5ng/ml抗CD3(克隆OKT3)中，并且在存在每种示例性突变蛋白之一或rhIL-2的情况下生长到大约5百万个细胞/ml的浓度。从第5天开始，每3-4天用新鲜的加IL-2或IL-2突变蛋白的培养基对细胞传代。从第7天开始，每2-3天用1:1000活/死FITC、1:200抗CD3 BV650、1:200抗CD4 BV421、1:100抗CD25 APC-Cy7、1:50抗FoxP3Alexa647和1:200抗CD8 PE对细胞进行染色。对总细胞、调节性T(Treg)细胞(CD3+CD4+CD25+Foxp3+)和CD8 T细胞(CD3+CD8+)的数量进行计数。
如图6A所示的，与rhIL-2(“WT”)相比，示例性突变蛋白ACT5211(Y31C-PEG20+L18M+L19S)在1-500ng/ml的浓度下，相较于CD8 T细胞优先刺激Treg，尤其在第13天与第17天之间。野生型重组IL-2和ACT5231(Y31C-PEG20+V69A+Q74P)未示出像这样对Treg细胞的优先刺激。类似地，在图6B中的单独实验中，突变蛋白ACT5211(Y31C-PEG20+L18M+L19S)和ACT5261(Y31C-PEG20+L18M+L19S+V69A+Q74P)两者相较于CD8 T细胞优先刺激Treg细胞增殖，其中在10-100ng/ml观察到最佳效果。
实施例9：如通过STAT5磷酸化测量的T细胞活化
为了评估如通过STAT5磷酸化反映的示例性突变蛋白活化T细胞的能力，在不具有血清的AIM V培养基(赛默飞世尔公司)中解冻冷冻的人PBMC并且在37℃下温育2-4小时。在此温育时间段之后，将大约5x 105个细胞/孔接种于96孔板中，并且在存在所选的示例性突变蛋白中的一种突变蛋白的情况下在37℃下温育15分钟。离心后，针对细胞外标志物的抗体(1:300-抗人CD4 FITC，抗人CD8 APC，抗人CD25 BV650，抗人R45RA BV421，生物传奇公司)和可固定活力染料(1:1000-eFluor 780，赛默飞世尔公司)对细胞团粒进行染色持续15分钟。在黑暗中洗涤和固定30分钟之后，将细胞旋转并在4℃下用甲醇透化过夜。然后将细胞离心并在室温下用1:80抗人pSTAT5-PE(生物传奇公司)染色持续30分钟。通过流式细胞术(NovoCyte，艾森生物公司(ACEA Biosciences))评估初始CD8+T细胞(CD8+CD45RA+CD25低，IL-2Rβγ表达)和Treg(CD4+CD45RA-CD25高，IL-2Rαβγ表达)中的所示表面标志物和STAT5磷酸化程度。
如图7A所示的，响应于的STAT5磷酸化的剂量应答表明，rhIL-2和指定的示例性IL-2突变蛋白在与IL-2Rαβγ表达Treg细胞一起温育的情况下表现出的活性(表示为如所示的较低EC50值)高于与IL-2Rβγ表达初始CD8+T细胞一起温育的情况下表现出的活性。相对于用其对应的非聚乙二醇化突变蛋白，突变蛋白Y31C的聚乙二醇化会略微降低其在T细胞的两种亚型中观察到的活性。如通过STAT5磷酸化进行评估，额外的突变表现出了在调节Treg或CD8+初始T细胞活化中的差异效果，(参见例如图7B)。
实施例10：C57BL/6小鼠的PK研究
在C57BL/6小鼠中对ACT5211进行药代动力学研究。每个时间点使用三只小鼠进行血液收集。每只小鼠施用1、0.3或0.1mg/kg单次皮下剂量的ACT5211。在给药ACT5211后的0.033、0.083、0.17、0.5、1、4、24、48、72、96、120和168小时采集血液样本。在以5000rpm离心10分钟之前，在室温下使血液凝结。收集血清，在干冰中冷冻并保持在-80℃下直到ELISA分析。
通过ELISA测定确定小鼠血液中的ACT5211。在微孔板的孔的表面上捕获PEG化的抗体5E10E9(金斯瑞公司A01795)。将经稀释的血清样本添加到经涂覆的板的指定孔中。样本通过生物素缀合的单克隆IL-2抗体(BG5生物素，赛默飞世尔公司)和亲和素HRP(生物传奇公司)检测，洗掉多余检测抗体，并且然后添加HRP缀合物和HRP底物。用基于吸光度的微孔板酶标仪获得ELISA测量结果，，用Graphpas prism9软件利用对应的ACT5211标准曲线将所述测量结果转换为浓度(ng/ml)。如图9所描绘的，ACT5211的血清浓度-时间曲线从大约1000–22,000ng/ml的峰值开始剂量依赖性增加。另外，所观察到的针对ACT5211的终末半衰期(t1/2)为11.48小时，其是针对rhIL-2的终末半衰期(大约2.5小时)的大约4.6倍，参见例如R.Melder等人,《癌症免疫学和免疫疗法(Cancer Immunology and Immunotherapy)》54(6):535-47(2005)。
实施例11：C57BL/6小鼠的PD研究
在C57BL/6小鼠中对ACT5211进行药效动力学研究。每个时间点使用三只小鼠进行血液收集。每只小鼠施用1、0.3或0.1mg/kg单次皮下剂量的ACT5211。给药后三天，处死小鼠，并且采集血液样本和脾样本。
用荧光团缀合的抗CD3、抗CD4、抗Foxp3、抗CD49b和抗CD8抗体(全部来自生物传奇公司)对从脾样本获得的脾细胞进行染色并且通过流式细胞术进行检测。细胞Treg、T对照、CD8+T细胞和NK细胞的百分比以样本中的脾细胞的百分比各自计算。如图10A所证明的，ACT2511以剂量依赖性的方式刺激Treg(CD4+FoxP3+)细胞增殖，其中最低剂量(0.1mg/kg)诱发此类Treg细胞大约四倍的百分比增加，并且最高剂量(1mg/kg)诱发此类Treg细胞大约10倍的百分比增加。相比之下，ACT2511没有诱发相对于模拟物处理的(PBS)动物的动物中的天然杀伤(NK)细胞显著增殖，并且仅在最高剂量(即1mg/kg)下轻度地诱导相对于模拟物处理的(PBS)动物的动物中的CD8+T细胞增殖。此外，ACT2511(如果有的话)诱发相对于模拟物处理的(PBS)动物的动物中的Tcon细胞的百分比降低。
在注射后第1天、第2天、第3天、第5天和第7天采集也从脾样本和外周血样本获得的嗜酸性粒细胞。使用抗CD45、抗siglec F和抗CCR3(全部来自生物传奇公司)通过流式细胞术分析确定嗜酸性粒细胞。嗜酸性粒细胞的百分比以样本中的脾细胞的百分比各自计算。如图10B所证明的，ACT2511在任何被测时间点相对于用模拟物处理的(PBS)动物没有显著影响经处理的动物中的嗜酸性粒细胞的百分比。
序列
SEQ ID NO:1
蛋白质
人工
具有C125S突变的智人IL-2链A的变体
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT
SEQ ID NO:2
蛋白质
人工
具有A1M突变的智人IL-2链A的变体
MPTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT
SEQ ID NO:3
蛋白质
智人
白细胞介素2，链A2，成熟(GenBank登录号：AAH66254.1)
APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT

Claims (124)

1.一种经修饰的白细胞介素2(IL-2)多肽，其包含与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2具有至少80％同一性的氨基酸序列，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：L18、L19、N29、Y31、V69、N71、Q74、N88、V91、I128以及其组合，其中：
a)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体α(IL-2Rα)的结合增强；和/或
b)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体αβγ(IL-2Rαβγ)的结合增强；和/或
b)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与表达白细胞介素2受体αβγ(IL-2Rαβγ)的细胞的结合增强；和/或
c)与不具有所述取代的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽通过IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增强；和/或
e)与不具有所述取代的IL-2多肽的IL-2Rαβγ受体信号传导效力与IL-2Rβγ受体信号传导效力的比率相比，所述经修饰的IL-2多肽的IL-2Rαβγ受体信号传导效力与IL-2Rβγ受体信号传导效力的比率增强；和/或
f)所述经修饰的IL-2多肽被配置成与缀合部分缀合；和/或
g)所述经修饰的IL-2多肽与缀合部分缀合；和/或
h)a)至g)的组合。
2.根据权利要求1所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在位置N29处用半胱氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸进行的取代；和/或
b)在位置Y31处用半胱氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸或苯丙氨酸进行的取代。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含取代N29C。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含取代Y31C。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸或酪氨酸进行的取代：L18、L19、V69、Q74、N88、V91和I128。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含选自由Y31C组成的组的取代。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽被配制成与选自由以下组成的组的缀合部分缀合：水溶性聚合物、脂质、肽、蛋白质、多肽以及其组合。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与聚乙二醇缀合。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含选自由以下组成的组的突变：N29C、N30C、Y31C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C，其中所述多肽在N29C、N30C、Y31C、E100C、N119C、T123C、S127C或T131C位点处聚乙二醇化。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含N29C或Y31C突变。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸进行的取代：N29、N30、Y31以及其组合；或
b)在选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸进行的取代：N30、Y31以及其组合。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：N29、N30、Y31，并且：
(i)是未缀合的；
(ii)与以下缀合：或
(iii)被配置成与以下缀合：
一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽，所述缀合在一个或多个选自由以下组成的组的位置处进行：N29、N30、Y31、E100、N119、T123、S127、T131；和/或
b)在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：N29、N30、Y31，并且：
(i)是未缀合的；
(ii)与以下缀合：或
(iii)被配置成与以下缀合：
一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽，所述缀合在一个或多个选自由以下组成的组的位置处进行：N29、N30、Y31；和/或
c)在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的取代：N29、N30、Y31以及其组合，并且：
(i)是未缀合的；
(ii)与以下缀合：或
(iii)被配置成与以下缀合：
一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽，所述缀合在所述经修饰的IL-2多肽的N末端和/或C末端处进行。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用半胱氨酸进行的取代：N29、N30、Y31；和/或
b)在一个或多个选自由以下组成的组的位置处用半胱氨酸进行的取代：N30、Y31；和/或
c)包含在位置Y31处用半胱氨酸进行的取代；和/或
f)包含在位置N30处用半胱氨酸进行的取代。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在IL-2Rα相互作用区域、和/或IL-2Rβ相互作用区域和/或IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的一个或多个取代。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在IL-2Rβ相互作用区域和/或IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的一个或多个取代。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在选自由以下组成的组的位置处用天然氨基酸或非天然氨基酸进行的一个或多个取代：L18、L19、V69、Q74、N88、V91、I128以及其组合。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含在选自由以下组成的组的位置处用赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸或酪氨酸进行的一个或多个取代：L18、L19、V69、Q74、N88、V91、I128以及其组合。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在位置L18处用甲硫氨酸进行的取代；和/或
b)在位置L19处用丝氨酸进行的取代；和/或
c)在位置Y31处用半胱氨酸进行的取代；和/或
d)包含在位置V69处用丙氨酸进行的取代；和/或
e)包含在位置Q74处用脯氨酸进行的取代；和/或
f)包含在位置N88处用精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸进行的取代；和/或
g)包含在位置N88处用精氨酸进行的取代；和/或
h)包含在位置N88处用天冬氨酸进行的取代；
i)包含在位置N88处用谷氨酸进行的取代；
j)包含在位置N88处用赖氨酸进行的取代；
k)包含在位置V91处用赖氨酸进行的取代；
l)包含在位置I128处用苏氨酸进行的取代；和/或
m)a)至l)的组合。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含：
a)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rβ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代；和/或
b)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代；和/或
c)在IL-2Rα相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代、在IL-2Rβ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代以及在IL-2Rγ相互作用区域内的位置处用天然氨基酸进行的取代。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合增加。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合亲和力从约10％增加到约100％，或从约1倍增加到约100,000倍或更多倍。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加，所述结合从约10％增加到约100％，或从约1倍增加到约100,000倍或更多倍。
24.根据权利要求1至23中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞内化的水平降低。
25.根据权利要求1至24中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽具有被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化，所述内化水平为约10％至约100％，或从约1倍增加到约100,000倍或更多倍。
26.根据权利要求1至25中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化为检测不到的水平。
27.根据权利要求1至26中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增加。
28.根据权利要求1至27中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα的结合增加，并且与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增加。
29.根据权利要求1至28中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合增加，并且对IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加，并且与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞内化的水平降低。
30.根据权利要求1至29中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中：(i)所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rα和/或IL-2Rαβγ的结合增加；(ii)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的结合增加；(iii)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽的被IL-2Rα表达细胞和/或IL-2Rαβγ表达细胞的内化为检测不到的水平；并且(iv)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的受体信号传导效力增加。
31.根据权利要求1至30中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中：
与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与白细胞介素2受体β(IL-2Rβ)或白细胞介素2受体γ(IL-2Rγ)的结合水平降低；
和/或与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rβγ的受体信号传导效力降低。
32.根据权利要求1至31中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rβγ的受体信号传导效力较低。
33.根据权利要求1至32中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中：(i)与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽与IL-2Rβ或IL-2Rγ的结合水平较低；并且(ii)与包含不具有所述取代的SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rβγ的受体信号传导效力较低。
34.根据权利要求1至33中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的信号传导效力与对IL-2Rβγ的信号传导效力的比率增加。
35.根据权利要求1至34中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽对IL-2Rαβγ的信号传导效力与对IL-2Rβγ的信号传导效力的比率增加，所述增加大于1倍、大于10倍、大于100倍、大于1,000倍、大于10,000倍、大于10,0000倍。
36.根据权利要求1至35中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含N末端缺失，其中所述缺失包括氨基酸残基1至30(包括端值)之间的一个或多个的缺失，所述氨基酸残基存在于不包含所述N末端缺失的对应的修饰的IL-2多肽中。
37.根据权利要求1至36中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含C末端缺失，其中所述缺失包括氨基酸残基114至134(包括端值)之间的一个或多个的缺失，所述氨基酸残基存在于不包含所述C末端缺失的对应的修饰的IL-2多肽中。
38.根据权利要求1至37中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含N末端缺失以及C末端缺失。
39.根据权利要求1至38中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽是包含另外的氨基酸序列的融合多肽的一部分。
40.根据权利要求1至39中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽包含重组融合蛋白，所述重组融合蛋白包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列。
41.根据权利要求1至40中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的所述N末端或所述C末端与另外的氨基酸序列融合。
42.根据权利要求1至41中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的所述N末端或所述C末端与另外的氨基酸序列融合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体序列或其一部分或片段。
43.根据权利要求1至42中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽的所述N末端或所述C末端与另外的氨基酸序列融合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体的Fc部分或其一部分或片段。
44.根据权利要求1至43中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽是分离的。
45.根据权利要求1至44中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽由载体表达，所述载体包含编码所述经修饰的IL-2多肽的多核苷酸序列。
46.根据权利要求1至45中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽由载体表达，所述载体包含编码所述经修饰的IL-2多肽的多核苷酸序列，其中所述载体是RNA载体、DNA、病毒载体或非病毒载体。
47.一种经修饰的IL-2多肽，其包含与水溶性聚合物、脂质、多肽、蛋白质或肽缀合的根据权利要求1至46中任一项所述的经修饰的IL-2多肽。
48.根据权利要求1至47中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过一个或多个共价键与一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
49.根据权利要求1至48中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过一个或多个非共价键与一种或多种水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
50.根据权利要求1至49中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
51.根据权利要求1至50中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
52.根据权利要求1至51中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
53.根据权利要求1至52中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的半胱氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
54.根据权利要求1至53中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
55.根据权利要求1至54中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的天然氨基酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
56.根据权利要求1至55中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
57.根据权利要求1至56中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过在选自由以下组成的组的位置处的取代后的半胱氨酸与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：L18、L19、N30、Y31、V69、Q74、N88、V91、I128、E100、N119、T123、S127、T131以及其组合。
58.根据权利要求1至57中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过所述经修饰的IL-2多肽的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
59.根据权利要求1至58中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过以下与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合：
i)所述经修饰的IL-2多肽的N末端氨基酸残基的α氨基；
ii)所述经修饰的IL-2多肽的赖氨酸氨基酸残基的ε氨基；或
iii)所述经修饰的IL-2多肽的N糖基化位点或O糖基化位点。
60.根据权利要求1至59中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过连接子与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽共价地缀合。
61.根据权利要求1至60中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
62.根据权利要求1至61中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过位于所述经修饰的IL-2多肽内的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合。
63.根据权利要求1至62中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述单个氨基酸残基位于所述另外的氨基酸序列内。
64.根据权利要求1至63中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体序列或其一部分或片段。
65.根据权利要求1至64中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述另外的氨基酸序列包含抗体的Fc部分。
66.根据权利要求1至65中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述单个氨基酸残基是：
i)所述融合多肽的N末端氨基酸残基的α氨基；
ii)所述融合多肽的赖氨酸氨基酸残基的ε氨基；或
iii)所述融合多肽的N糖基化位点或O糖基化位点。
67.根据权利要求1至65中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽通过包含所述经修饰的IL-2多肽以及另外的氨基酸序列的融合多肽中的单个氨基酸残基与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，其中所述融合多肽通过连接子与所述水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽共价地缀合。
68.根据权利要求1至67中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物缀合。
69.根据权利要求1至68中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物缀合，所述水溶性聚合物包含聚乙二醇(PEG)、聚(丙二醇)(PPG)、乙二醇和丙二醇的共聚物、聚(氧乙基化多元醇)、聚(烯醇)、聚(乙烯基吡咯烷酮)、聚(羟烷基甲基丙烯酰胺)、聚(羟烷基甲基丙烯酸酯)、聚(糖)、聚(a-羟基酸)、聚(乙烯醇)、聚磷腈、聚噁唑啉(POZ)、聚(N-丙烯酰基吗啉)或其组合。
70.根据权利要求1至69中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合。
71.根据权利要求1至70中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含线性PEG分子的水溶性聚合物缀合。
72.根据权利要求1至71中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合。
73.根据权利要求1至72中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合，所述支化PEG分子包含从中央核心基团发出的约三个至约十个PEG链。
74.根据权利要求1至73中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述支化PEG分子是包含从中央核心基团发出的约10个至约100个PEG链的星形PEG。
75.根据权利要求1至74中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含支化PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述支化PEG分子是包含移植到聚合物主链上的多个PEG链的梳状PEG。
76.根据权利要求1至75中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子的分子量的范围为约300g/mol至约10,000,000g/mol。
77.根据权利要求1至76中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子的平均分子量为约5,000道尔顿至约1,000,000道尔顿。
78.根据权利要求1至77中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子的平均分子量为约20,000道尔顿至约30,000道尔顿。
79.根据权利要求1至78中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与包含PEG分子的水溶性聚合物缀合，其中所述PEG分子是单分散、均匀或离散的PEG分子。
80.根据权利要求1至79中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物缀合，其中所述水溶性聚合物包含多糖。
81.根据权利要求1至80中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与脂质缀合。
82.根据权利要求1至81中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与脂质缀合，其中所述脂质包含脂肪酸。
83.根据权利要求1至82中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与蛋白质缀合。
84.根据权利要求1至83中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与蛋白质缀合，其中所述蛋白质包含抗体或其结合片段。
85.根据权利要求1至84中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与抗体的Fc部分或其片段缀合。
86.根据权利要求1至85中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，所述水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽通过连接子与所述经修饰的IL-2多肽的所述取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸间接结合。
87.根据权利要求1至86中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽与水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽缀合，所述水溶性聚合物、脂质、蛋白质或肽与所述经修饰的IL-2多肽的所述取代后的天然氨基酸或非天然氨基酸直接结合。
88.根据权利要求1至87中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽具有约5分钟至约10天的体内半衰期。
89.根据权利要求1至88中任一项所述的经修饰的IL-2多肽，其中所述经修饰的IL-2多肽选自由以下组成的组：ACT5200、ACT5201、ACT5210、ACT5211、ACT5212、ACT522S0、ACT522S1、ACT5230、ACT5231、ACT5260、ACT5261、ACT5270、ACT5271、ACT5280、ACT5281、ACT5290和ACT5291。
90.一种药物组合物，其包含有效量的根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽以及药学上可接受的载体或赋形剂。
91.根据权利要求90所述的药物组合物，其中所述药物组合物进一步包含另一种活性成分。
92.根据权利要求90或权利要求91所述的药物组合物，其进一步包含一种或多种另外的成分，其中一种或多种活性成分包含：
(i)抗炎物质或抗自身免疫性物质；
(ii)抗赘生物物质；
(iii)抗感染性疾病物质；和/或
(iv)免疫缺陷病症。
93.根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-1多肽或根据权利要求90至92中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症。
94.根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-1多肽或根据权利要求90至92中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含炎性疾病或病症或自身免疫性疾病或病症。
95.根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-1多肽或根据权利要求90至92中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症。
96.根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-1多肽或根据权利要求90至92中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含感染性疾病或病症。
97.根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-1多肽或根据权利要求90至92中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症，其中所述疾病或病症包含免疫缺陷病症。
98.一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或根据权利要求90至92中任一项所述的药物组合物。
99.一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或根据权利要求90至92中任一项所述的药物组合物，其中所述疾病或病症包含炎性疾病或病症或自身免疫性疾病或病症。
100.一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或根据权利要求90至92中任一项所述的药物组合物，其中所述疾病或病症包含增殖性疾病或病症。
101.一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或根据权利要求90至92中任一项所述的药物组合物，其中所述疾病或病症包含感染性疾病或病症。
102.一种用于治疗或预防患有或疑似患有疾病或病症的受试者的所述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或根据权利要求90至92中任一项所述的药物组合物，其中所述疾病或病症包含免疫缺陷疾病或病症。
103.根据权利要求93至97中任一项所述的用途或根据权利要求98至102中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。
104.根据权利要求93至97中任一项所述的用途或根据权利要求97至102中任一项所述的方法，其中所述受试者是非人哺乳动物。
105.根据权利要求95所述的用途或根据权利要求100所述的方法，其中所述增殖性病症包含肿瘤。
106.根据权利要求95所述的用途或根据权利要求100所述的方法，其中所述增殖性病症包含癌症。
107.根据权利要求95所述的用途或根据权利要求100所述的方法，其中所述增殖性病症包含实体瘤或癌症。
108.根据权利要求95所述的用途或根据权利要求100所述的方法，其中所述增殖性病症包含实体瘤或癌症，其中所述实体瘤或所述癌症选自由以下组成的组：软骨肉瘤、尤文氏肉瘤、骨/骨肉瘤恶性纤维组织细胞瘤、骨肉瘤、横纹肌肉瘤、心脏癌、星形细胞瘤、脑干胶质瘤、毛细胞型星形细胞瘤、室管膜瘤、原始神经外胚层肿瘤、小脑星形细胞瘤、脑星形细胞瘤、神经胶质瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、少突胶质细胞瘤、松果体星形细胞瘤、垂体腺瘤、视觉通路和下丘脑神经胶质瘤、乳腺癌、浸润性小叶癌、小管癌、浸润性筛状癌、髓样癌、男性乳腺癌、叶状肿瘤、炎性乳腺癌、肾上腺皮质癌、胰岛细胞癌(内分泌胰腺)、多发性内分泌瘤变综合征、甲状旁腺癌、嗜铬细胞瘤、甲状腺癌、默克尔细胞癌、葡萄膜黑色素瘤、视网膜母细胞瘤、***癌、阑尾癌、胆管癌、类癌瘤、胃肠道癌、结肠癌、肝外胆管癌、胆囊癌、胃癌、胃肠类癌瘤、胃肠间质瘤(GIST)、肝细胞癌、胰岛细胞胰腺癌、直肠癌、膀胱癌、***、子宫内膜癌、性腺外生殖细胞肿瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌(表面上皮-间质肿瘤)、卵巢生殖细胞肿瘤、***癌、肾细胞癌、肾盂和输尿管、移行细胞癌、***癌、睾丸癌、妊娠滋养细胞肿瘤、输尿管和肾盂、移行细胞癌、尿道癌、子宫肉瘤、***癌、外阴癌、维尔姆斯肿瘤、食管癌、头颈癌、鼻咽癌、口腔癌、口咽癌、鼻窦和鼻腔癌、咽癌、唾液腺癌、下咽癌、基底细胞癌、黑色素瘤、皮肤癌(非黑色素瘤)、支气管腺瘤/类癌、小细胞肺癌、间皮瘤、非小细胞肺癌、胸膜肺母细胞瘤、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、AIDS相关癌症、卡波西肉瘤、上皮样血管内皮瘤(EHE)、促纤维增生性小圆细胞瘤和脂肪肉瘤。
109.根据权利要求95所述的用途或根据权利要求100所述的方法，其中所述增殖性病症包含肿瘤或癌症，其中所述肿瘤或所述癌症是恶性血液肿瘤。
110.根据权利要求95所述的用途或根据权利要求100所述的方法，其中所述增殖性病症包含肿瘤或癌症，其中所述肿瘤或所述癌症是选自由以下组成的组的恶性血液肿瘤：骨髓赘生物、白血病、淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤、血管免疫性T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤网状内皮组织增殖、网状细胞增多症、小神经胶质瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤、B细胞慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、纵隔大B细胞淋巴瘤、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、***边缘区B细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、淋巴瘤样肉芽肿病、结节性淋巴细胞主要霍奇金淋巴瘤、浆细胞白血病、急性红细胞增多症和红白血病、急性红细胞性骨髓病、急性红细胞白血病、黑尔梅尔-舍纳病、急性巨核细胞白血病、肥大细胞白血病、全骨髓组织病、急性全骨髓组织病伴骨髓纤维化、淋巴肉瘤细胞白血病、未指定细胞类型的急性白血病、急变期慢性骨髓性白血病、干细胞白血病、未指定细胞类型的慢性白血病、未指定细胞类型的亚急性白血病、加速期慢性骨髓性白血病、急性髓系白血病、真性红细胞增多症、急性早幼粒细胞白血病、急性嗜碱性白血病、急性嗜酸性白血病、急性淋巴细胞白血病、急性单核细胞白血病、成熟急性成髓细胞白血病、急性髓系树突细胞白血病、成人T细胞白血病/淋巴瘤、侵袭性NK细胞白血病、B细胞幼淋巴细胞白血病、B细胞慢性淋巴细胞白血病、B细胞白血病、慢性骨髓性白血病、慢性髓单核细胞白血病、慢性中性粒细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病、慢性特发性骨髓纤维化、多发性骨髓瘤、卡勒病、骨髓瘤、孤立性骨髓瘤、浆细胞白血病、浆细胞瘤、髓外、恶性浆细胞肿瘤NOS、浆细胞瘤NOS、单克隆丙种球蛋白病、多发性骨髓瘤、血管中心性免疫增殖性病变、淋巴样肉芽肿病、血管免疫母细胞性***病、T-γ淋巴组织增殖性疾病、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、α重链病、γ重链病、富兰克林氏病、免疫增殖性小肠疾病、地中海病、恶性免疫增殖性疾病、未指明和免疫增殖性疾病NOS。
111.根据权利要求94所述的用途或根据权利要求99所述的方法，其中所述炎性疾病或病症或所述自身免疫性疾病或病症选自由以下组成的组：炎症、自身免疫性疾病、副肿瘤性自身免疫性疾病、软骨炎症、纤维化疾病和/或骨退化、关节炎、类风湿性关节炎、幼年关节炎、幼年类风湿性关节炎、少关节型幼年类风湿性关节炎、多关节型幼年类风湿性关节炎、全身发病型幼年类风湿性关节炎、幼年强直性脊柱炎、幼年肠病性关节炎、幼年反应性关节炎、幼年瑞特综合征、SEA综合征(血清反应阴性、附着点病、关节病综合征)、幼年皮肌炎、幼年银屑病关节炎、幼年硬皮病、幼年全身性红斑狼疮、幼年血管炎、少关节炎类风湿性关节炎、多关节类风湿性关节炎、全身发病型类风湿关节炎、强直性脊柱炎、肠病性关节炎、反应性关节炎、瑞特综合征、SEA综合征(血清反应阴性、附着点病、关节病综合征)、皮肌炎、银屑病关节炎、硬皮病、全身性红斑狼疮、血管炎、肌炎、多发性肌炎、皮肌炎、骨关节炎、结节性多动脉炎、韦格纳肉芽肿病、动脉炎、风湿性多肌痛、结节病、硬皮病、硬化症、原发性胆汁硬化症、硬化性胆管炎、干燥综合征、牛皮癣、斑块状银屑病、滴状银屑病、反向型银屑病、脓疱性银屑病、红皮病型银屑病、皮炎、特应性皮炎、动脉粥样硬化、狼疮、斯蒂尔病、全身性红斑狼疮(SLE)、重症肌无力、炎性肠病(IBD)、克罗恩病、溃疡性结肠炎、乳糜泻、多发性硬化症(MS)、哮喘、COPD、吉兰-巴雷病、I型糖尿病、甲状腺炎(例如格雷夫斯氏病)、艾迪生氏病、雷诺现象、自身免疫性肝炎、GVHD和移植排斥。
112.根据权利要求96所述的用途或根据权利要求101所述的方法，其中所述感染性疾病选自由以下组成的组：不动杆菌感染、放线菌病、非洲昏睡病(非洲锥虫病)、AIDS(获得性免疫缺陷综合征)、阿米巴病、无形体病、血管圆线虫病、异尖线虫病、炭疽、溶血隐秘杆菌感染、阿根廷出血热、蛔虫病、曲霉菌病、星状病毒感染、巴贝虫病、蜡样芽孢杆菌感染、细菌性脑膜炎、细菌性肺炎、细菌性***病、拟杆菌感染、小袋虫病、巴尔通氏体病、贝利斯蛔虫病感染、BK病毒感染、黑色发结节病、芽囊原虫病、芽生菌病、玻利维亚出血热、肉毒中毒(和婴儿肉毒中毒)、巴西出血热、布鲁氏菌病、黑死病、伯克霍尔德菌感染、布鲁里溃疡、卡利西病毒感染(诺如病毒和札幌病毒)、弯杆菌病、念珠菌病(白念菌病；鹅口疮)、毛细线虫病、卡里翁氏病、猫抓病、蜂窝组织炎、恰加斯病(美国锥虫病)、软下疳、水痘、基孔肯雅热、衣原体、肺炎衣原体感染(台湾急性呼吸道病原体或TWAR)、霍乱、着色芽生菌病、壶菌病、支睾吸虫病、艰难梭菌结肠炎、球孢子菌病、科罗拉多蜱热(CTF)、普通感冒(急性病毒性鼻咽炎；急性鼻炎)、2019冠状病毒病(COVID-19)、克雅氏病(CJD)、克里米亚-刚果出血热(CCHF)、隐球菌病、隐孢子虫病、皮肤幼虫移行症(CLM)、环孢子虫病、囊尾幼虫病、巨细胞病毒感染、登革热、链带藻属感染、双核阿米巴病、白喉、裂头绦虫病、麦地那龙线虫病、埃博拉出血热、包虫病、埃里希体病、蛲虫病(蛲虫感染)、肠球菌感染、肠道病毒感染、流行性斑疹伤寒、传染性红斑(第五种疾病)、幼儿急疹(第六种疾病)、片吸虫病、姜片虫病、致命性家族性失眠症(FFI)、丝虫病、由产气荚膜梭状芽胞杆菌引起的食物中毒、自由生活阿米巴感染、梭状杆菌属感染、气性坏疽(梭状芽胞杆菌性肌坏死)、地霉病、格斯特曼-斯特劳斯勒-申克综合征(GSS)、贾第鞭毛虫病、鼻疽、颚口线虫病、淋病、***(杜诺凡病)、A组链球菌感染、B组链球菌感染、流感嗜血杆菌感染、手足口病(HFMD)、汉坦病毒肺综合征(HPS)、中原病毒病、幽门螺杆菌感染、溶血性***综合征(HUS)、出血热伴肾综合征(HFRS)、亨德拉病毒感染、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、单纯疱疹、组织胞浆菌病、钩虫感染、人博卡病毒感染、人伊氏埃利希病、人粒细胞无形体病(HGA)、人偏肺病毒感染、人单核细胞埃立克体病、人***瘤病毒(HPV)感染、人副流感病毒感染、膜壳绦虫病、爱泼斯坦-巴尔病毒传染性单核细胞增多症(Mono)、流感(流行性感冒)、等孢球虫病、川崎病、角膜炎、金格杆菌感染、库鲁病、拉沙热、军团病(退伍军人病)、庞蒂亚克热、利什曼病、麻风病、钩端螺旋体病、李斯特菌病、莱姆病(莱姆氏疏螺旋体病)、淋巴丝虫病(象皮病)、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎、疟疾、马尔堡出血热(MHF)、麻疹、中东呼吸综合征(MERS)、类鼻疽(惠特莫尔氏病)、脑膜炎、脑膜炎球菌病、后殖吸虫病、微孢子虫病、触染性软疣(MC)、猴痘、流行性腮腺炎、鼠型斑疹伤寒(地方性斑疹伤寒)、支原体肺炎、生殖支原体感染、足分支菌病、蝇蛆病、新生儿结膜炎(新生儿眼炎)、尼帕病毒感染、诺如病毒(儿童和婴儿)、(新)变异型克雅氏病(vCJD、nvCJD)、诺卡菌病、盘尾丝虫病(河盲症)、后睾吸虫病、副球孢子菌病(南美芽生菌病)、肺吸虫病、巴斯德菌病、头虱病(头虱)、体虱病(体虱)、阴虱病(阴虱、毛虱)、***性疾病(PID)、百日咳(顿咳)、鼠疫、肺炎球菌感染、肺孢子菌肺炎(PCP)、肺炎、脊髓灰质炎、普雷沃氏菌感染、原发性阿米巴脑膜脑炎(PAM)、进行性多灶性白质脑病、鹦鹉热、Q热、狂犬病、回归热、呼吸道合胞病毒感染、鼻孢子虫病、鼻病毒感染、立克次体感染、立克次体痘、裂谷热(RVF)、落基山斑疹热(RMSF)、轮状病毒感染、风疹、沙门氏菌病、SARS(严重急性呼吸道综合征)、疥疮、猩红热、血吸虫病、败血症、志贺氏菌病(杆菌性痢疾)、带状疱疹、天花、孢子丝菌病、葡萄球菌食物中毒、葡萄球菌感染、类圆线虫病、亚急性硬化性全脑炎、非性病性梅毒、梅毒和雅司病、绦虫病、破伤风(牙关紧闭症)、触染性须疮(须癣)、头癣(头皮癣)、体癣(身体癣)、股癣、手癣、黑癣、脚癣、甲癣(甲真菌病)、花斑癣(花斑糠疹)、弓蛔虫病(眼部幼虫移行症(OLM))、弓蛔虫病(内脏幼虫移行症(VLM))、弓形虫病、沙眼、旋毛虫病、滴虫病、鞭虫病(鞭虫感染)、结核病、土拉菌病、伤寒热、斑疹伤寒、***感染、山谷热、委内瑞拉马脑炎、委内瑞拉出血热、创伤弧菌感染、副溶血性弧菌肠炎、病毒性肺炎、西尼罗河热、白毛结节病(白秃疮)、假结核耶尔森菌病、耶尔森菌病、黄热病、兹斯保拉病、寨卡热和结合菌病。
113.根据权利要求97所述的用途或根据权利要求102所述的方法，其中所述免疫缺陷疾病或病症选自由以下组成的组：无丙种球蛋白血症：X连锁和常染色体隐性遗传、共济失调毛细血管扩张症、慢性肉芽肿性疾病和其它吞噬细胞病症、常见可变免疫缺陷、补体缺乏症、迪乔治综合征、噬血细胞淋巴组织细胞增生症(HLH)、高IgE综合征、高IgM综合征、IgG亚类缺乏症、先天免疫缺陷、NEMO缺乏综合征、选择性IgA缺乏症、选择性IgM缺乏症、严重联合免疫、缺乏症和联合免疫缺陷、特异性抗体缺乏症、婴儿期短暂性低丙种球蛋白血症、WHIM综合征(疣、低丙种球蛋白血症、感染和骨髓无效生成性粒细胞缺乏症)、威斯科特-奥尔德里奇综合征、其它抗体缺乏病症、其它原发性细胞免疫缺陷、严重联合免疫缺陷(SCID)、常见可变免疫缺陷(CVID)、人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)、药物诱导的免疫缺陷、移植物抗宿主综合征、原发性免疫缺陷病(PIDD)以及淋巴细胞减少症。
114.一种有效量的根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或编码根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体在制备用于治疗或预防受试者的疾病或病症的药物中的用途。
115.根据权利要求114所述的用途，其中所述疾病或病症选自由以下组成的组：炎性疾病或病症；自身免疫性疾病或病症；增殖性疾病或病症；感染性疾病或病症；以及免疫缺陷疾病或病症。
116.一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或编码根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触持续足以诱导与IL-2Rαβγ形成复合物的时间，由此刺激所述Treg细胞群扩增。
117.一种扩增Treg细胞群的方法，所述方法包括使细胞群与有效量的根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或编码根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体接触持续足以诱导与IL-2Rαβγ形成复合物的时间，由此刺激所述Treg细胞群扩增，同时使细胞死亡率降低10％至100％。
118.根据权利要求116或117所述的方法，其中所述有效量使CD25+调节性T(Treg)细胞扩增，所述扩增是用包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽引起的CD25+Treg细胞的扩增的至少1倍、10倍、100倍、1000倍、104倍、105倍、106倍、107倍、108倍或109倍。
119.根据权利要求116或117所述的方法，其中与包含不具有所述取代的SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的IL-2多肽相比，所述有效量使在与所述有效量温育之后T细胞群中的Treg细胞的百分比增加，并且所述Treg细胞的百分比为约或至少0.01％、0.1％、1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更多。
120.根据权利要求116至119中任一项所述的方法，其中所述方法在体内进行。
121.根据权利要求116至119中任一项所述的方法，其中所述方法在体外进行。
122.根据权利要求116至119中任一项所述的方法，其中所述方法离体进行。
123.一种有效量的根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽或编码根据权利要求1至89中任一项所述的经修饰的IL-2多肽的RNA多核苷酸、DNA多核苷酸、非病毒载体或病毒载体在制备用于扩增细胞群中的Treg细胞的药物中的用途。
124.根据权利要求123所述的用途，其中所述Treg细胞在受试者体内扩增。
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