CN116637177A - ***和尿酸酶分子的组合疗法及其用途 - Google Patents

***和尿酸酶分子的组合疗法及其用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及***和尿酸酶分子的组合疗法及其用途。本文描述了用于降低对尿酸酶疗法的抗体应答，改善痛风的治疗，降低尿酸水平和预防和/或延迟输注反应的方法。这些方法可包括给予如本文所述的尿酸酶和类固醇。

Description

***和尿酸酶分子的组合疗法及其用途
本申请是中国申请号为201780082380.X、发明名称为“***和尿酸酶分子的组合疗法及其用途”且申请日为2017年11月10日的专利申请(PCT申请号为PCT/US2017/061126)的分案申请。
相关申请的交叉引用
本申请要求于2016年11月11日提交的美国临时申请号62/421,079的权益，其披露内容以其全文通过引用特此并入。
序列表的并入
含有在名为“HOR0064401PC_ST25,”的文件(如在Microsoft Windows操作***中测量的为18.6千字节)中的序列表于2017年11月10日创建，在此以电子方式提交，并通过引用结合于此。
披露领域
本披露总体上涉及用于降低对用于治疗痛风的尿酸酶疗法的抗体应答的方法。
背景技术
高尿酸血症是一种以血液中异常高水平的尿酸为特征的病症。尿酸(UA)是人嘌呤分解代谢途径中的终末代谢物。在生理pH条件下，尿酸主要作为尿酸盐(UA的离子形式)存在。体内尿酸盐的量取决于通过食物摄入所获得的嘌呤的量、体内合成的尿酸盐的量以及尿液中或通过胃肠道***的尿酸盐的量之间的平衡。在人中，正常范围的上限对于女性为约360μmol/L(约6mg/dL)，对于男性为约400μmol/L(约6.8mg/dL)。当血清尿酸(SUA)的浓度高于溶解度的生化限值时，例如约6.8mg/dL，尿酸单钠晶体可在组织中沉淀。经过多年持续的高尿酸血症，尿酸单钠晶体的积累可引起痛风的症状，如急性关节炎症(痛风发作)、痛风石的形成、痛风性关节炎和UA肾病(包括UA肾结石)。在美国，共有约830万患者被诊断患有痛风。
对于改进降低血液中尿酸水平的疗法存在着需要，其可用于治疗高尿酸血症和相关病症。
发明内容
本披露内容至少部分基于以下发现：类固醇和尿酸酶分子的组合改善了受试者中高尿酸血症和相关病症的治疗，例如相对于单独使用尿酸酶分子。在一些实施例中，一个或多个治疗周期，每个治疗周期包括类固醇和尿酸酶分子的给予。在一些实施例中，在尿酸酶分子之前、同时或之后给予类固醇分子。
不希望受理论束缚，据信，本文披露的新颖组合增加受试者对尿酸酶疗法例如包含尿酸酶分子的疗法的应答性，例如通过预防(例如延迟和/或减少)输注反应。因此，本文披露了方法、组合物、剂量方案和试剂盒以改善尿酸酶疗法的功效。
在一个方面中，本披露内容提供了降低有此需要的受试者的尿酸水平的方法，该方法包括：给予该受试者尿酸酶分子和类固醇；其中该尿酸酶分子和该类固醇一起将受试者的尿酸水平降低至大于单独给予尿酸酶和/或类固醇所见的降低的程度。在一个实施例中，在给予尿酸酶分子之前给予类固醇。在另一个实施例中，在给予尿酸酶分子前10天、9天、8天、7天、6天、5天、4天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、6小时、4小时、2小时、或1小时给予类固醇。在另一个实施例中，在给予尿酸酶分子同时给予类固醇。在另一个实施例中，在给予尿酸酶分子后给予类固醇。在另一个实施例中，在给予尿酸酶分子后10天、9天、8天、7天、6天、5天、4天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、6小时、4小时、2小时、或1小时给予类固醇。
在另一个方面中，本披露内容提供了降低有此需要的受试者的尿酸水平的方法，该方法包括：给予该受试者尿酸酶分子和类固醇，其中尿酸酶分子以足以降低受试者中尿酸水平的剂量和/或频率给予；在尿酸水平应答尿酸酶分子降低后，中止给予尿酸酶分子；在中止给予尿酸酶分子后，给予第二非尿酸酶降尿酸盐疗法。在一个实施例中，第二非尿酸酶降尿酸盐疗法是选自黄嘌呤氧化酶抑制剂、别嘌呤醇和非布索坦的口服降尿酸盐剂(ULA)。
在另一个实施例中，中止尿酸酶分子后，受试者的血清尿酸水平≤6mg/dL。在另一个实施例中，中止尿酸酶分子后，受试者的血清尿酸水平≤6mg/dL，持续6个月或更长时间。
在另一个实施例中，治疗期包括每4-10天一次给予一剂量的尿酸酶分子。在另一个实施例中，治疗期包括每7天一次给予一剂量的尿酸酶分子。在另一个实施例中，治疗期包括：给予第一剂量的尿酸酶分子和第一剂量的类固醇；并且之后在治疗期期间每14天给予随后剂量的尿酸酶分子和类固醇。在另一个实施例中，该方法进一步包括在第一剂后7天给予另外剂量的尿酸酶分子和类固醇。
在另一个实施例中，第一剂量的尿酸酶分子为12mg，随后剂量的尿酸酶分子为8mg；第一剂量和随后剂量的类固醇为从约40mg至约200mg。在另一个实施例中，第一剂量的尿酸酶分子为16mg，随后剂量的尿酸酶分子为8mg；第一剂量和随后剂量的类固醇为从约40mg至约200mg。在另一个实施例中，尿酸酶分子以约4mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、约12mg或约16mg的剂量给予；并且类固醇以从约40mg至约200mg的剂量给予。在另一个实施例中，尿酸酶分子以约8mg的剂量给予，类固醇以从约40mg至约200mg的剂量给予。在另一个实施例中，将第一剂量的尿酸酶分子和类固醇给予体重超过120kg的患者。
在另一个实施例中，治疗期包括给予1个剂量、2个剂量、3个剂量、4个剂量或5个剂量尿酸酶分子和类固醇。在另一个实施例中，治疗期包括给予3个剂量尿酸酶分子和类固醇。
在另一个实施例中，尿酸酶和类固醇的一起给予减少尿酸酶分子的免疫清除，减少应答于尿酸酶分子的抗体产生，降低对尿酸酶分子的免疫应答，增加免疫抑制，增加抗原特异性免疫抑制，和/或减少输注反应。
在另一个实施例中，该方法包括每11-18天一次给予一个剂量的尿酸酶分子和类固醇。在另一个实施例中，该方法包括每14天一次给予一个剂量的尿酸酶分子和类固醇。
在另一个实施例中，该方法包括：以约4mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg或约12mg的剂量给予尿酸酶分子；以从约40mg至约200mg的剂量给予类固醇。在另一个实施例中，该方法包括以约8mg的剂量给予尿酸酶分子，并且以从约40mg至约200mg的剂量给予类固醇。
在另一个实施例中，该方法包括给予4个剂量、5个剂量、6个剂量、7个剂量、8个剂量、9个剂量、10个剂量、11个剂量、12个剂量、24个剂量或48个剂量尿酸酶分子和类固醇。在另一个实施例中，该方法包括给予4个剂量尿酸酶分子和类固醇。在另一个实施例中，该方法包括给予12个剂量尿酸酶分子和类固醇。
在另一个实施例中，用尿酸酶和类固醇治疗后导致血清尿酸水平降至≤6mg/dL。在另一个实施例中，血清尿酸水平降至≤6mg/dL，持续至少6个月。
在另一个实施例中，该尿酸酶分子是尿酸酶缀合物。在另一个实施例中，该尿酸酶缀合物包含聚醚、聚酯、聚氨基酸、聚碳酸酯、聚缩醛、聚缩酮、多糖或其组合中的一种或多种。在另一个实施例中，该聚醚选自聚乙二醇和聚丙二醇。
在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含真菌或微生物尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶选自黄曲霉、球形节杆菌、芽孢杆菌属物种和产朊假丝酵母尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含无脊椎动物尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶选自下组，该组由以下组成：黑腹果蝇和拟暗果蝇尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含植物尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶来自大豆。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含哺乳动物尿酸酶。在另一个实施例中，该哺乳动物尿酸酶选自下组，该组由以下组成：牛、猪、绵羊和狒狒尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含嵌合尿酸酶，其包含来自两种或更多种哺乳动物尿酸酶的氨基酸。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含重组猪-狒狒嵌合尿酸酶。
在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含与SEQ ID NO:8至少90％相同的序列。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含在其氨基末端、其羧基末端或两者处截短3-10个氨基酸的尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含在其氨基末端、其羧基末端或两者处截短4-13个氨基酸的尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含在其氨基末端、其羧基末端或两者处截短6个氨基酸的尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的猪尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含具有被氨基酸取代D7T、S46T、R291K和T301S修饰的SEQ ID NO:2的氨基酸序列的猪尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含SEQID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ IDNO:7、或SEQ ID NO:8中任一个的氨基酸序列。
在另一个实施例中，该尿酸酶分子是聚乙二醇化的。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含四个相同的非共价结合的尿酸酶单体亚基。在另一个实施例中，该尿酸酶分子是四聚体。
在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含脱-(1-6)-[7-苏氨酸,46-苏氨酸,291-赖氨酸,301-丝氨酸]猪-狒狒尿酸酶的氨基酸序列。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含单甲氧基聚(乙二醇)修饰的重组哺乳动物尿酸酶。在另一个实施例中，该尿酸酶分子是培戈洛酶(pegloticase)
在另一个实施例中，该受试者患有高尿酸血症。在另一个实施例中，该受试者患有痛风、慢性痛风、难治性痛风或痛风石性痛风。在另一个实施例中，该受试者先前用口服降尿酸盐疗法、黄嘌呤氧化酶抑制剂、别嘌呤醇和非布索坦中的一种或多种治疗。在另一个实施例中，该受试者具有体重≥约80kg、90kg、100kg、110kg、或120kg。在另一个实施例中，该受试者是≥55、60、65、或70岁。
在另一个实施例中，该方法包括改善或减轻受试者中高尿酸血症的至少一种症状或可测量的生理参数。在另一个实施例中，该方法包括改善或减轻受试者中痛风的至少一种症状或可测量的生理参数。在另一个实施例中，该方法包括降低受试者的尿酸水平，减少痛风发作的发生率，减少关节炎症，减少痛风石的形成，减少痛风性关节炎和/或减少尿酸肾病。在另一个实施例中，该方法包括降低受试者的C-反应蛋白水平。在另一个实施例中，该方法包括降低受试者的健康评估问卷残疾指数(HAQ-DI)。在另一个实施例中，该方法包括改善或减轻痛风、慢性痛风、难治性痛风或痛风石性痛风。在另一个实施例中，该方法包括延迟或预防受试者的输注反应。在另一个实施例中，该方法包括降低或预防受试者对尿酸酶的抗体应答。
在另一个实施例中，该方法进一步包括在给予尿酸酶分子之前或同时给予至少一种免疫抑制剂。在另一个实施例中，该方法进一步包括在给予尿酸酶分子之前或同时给予至少一种抗炎化合物。在另一个实施例中，该抗炎化合物选自皮质类固醇、抗组胺药、秋水仙碱和非类固醇抗炎药(NSAID)。在另一个实施例中，该皮质类固醇选自下组，该组由以下组成：***、氢化可的松、甲基强的松龙、Depo-Medrol、Solu-Medrol。
在另一个实施例中，该尿酸酶分子和该类固醇以药物组合物的形式给予。在另一个实施例中，该尿酸酶分子和该类固醇以纳米载体配制品的形式给予。在另一个实施例中，该尿酸酶分子和该类固醇通过静脉内输注给予。
在另一个方面中，本披露内容提供了一种试剂盒，其包含：尿酸酶分子；类固醇；和在本文描述的方法中使用的说明书。
在另一个方面中，本披露内容提供了一种治疗受试者慢性痛风的方法，该方法包括：给予该受试者尿酸酶分子和类固醇；其中该尿酸酶和该类固醇一起降低该受试者的尿酸水平。
在另一个方面中，本披露内容提供了一种治疗受试者慢性痛风的方法，该方法包括：给予该受试者尿酸酶分子和类固醇，其中尿酸酶分子以足以降低受试者中尿酸水平的剂量和/或频率给予；在尿酸水平应答尿酸酶分子降低后，中止给予尿酸酶分子；在中止给予尿酸酶分子后，给予第二非尿酸酶降尿酸盐疗法。
本文披露的方法、组合物、剂量方案和试剂盒的另外的特征和实施例包括以下一种或多种。
组合疗法/给药
在一些实施例中，在尿酸酶缀合物之前、同时或之后给予类固醇。在一些实施例中，尿酸酶缀合物可以约4mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、或约12mg，例如约8mg的剂量给予。
在一些实施例中，本文所述的类固醇可以是***、氢化可的松、甲基强的松龙、Depo-Medrol、Solu-Medrol。技术人员将认识到，根据本文所述的披露内容，任何类固醇都可以是有用的，以实现所期望的结果。例如，***分子，例如甲基***龙，可以以从约0.1mg/kg至约5mg/kg、约0.2mg/kg至约4mg/kg、约0.3mg/kg至约3mg/kg、约0.4mg/kg至约2mg/kg、或约0.5mg/kg至约1.5mg/kg的范围，或典型地约0.5mg/kg、约0.6mg/kg、约0.7mg/kg、约0.8mg/kg、约0.9mg/kg、约1.0mg/kg、约1.1mg/kg、约1.2mg/kg、约1.3mg/kg、约1.4mg/kg、或约1.5mg/kg的量给予。在其他实施例中，该甲基强的松龙作为均匀的剂量给予，例如约1mg至约500mg、约10mg至约400mg、约20mg至约300mg、约30mg至约200mg、或约50mg至约150mg，或典型地约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约110mg、约120mg、约130mg、约140mg、或约150mg。
在一些实施例中，如本文所述的类固醇可以是氢化可的松、甲基***龙、***、或根据本披露内容认为合适的任何其他类固醇。在一些实施例中，如本文所述的甲基强的松龙可以是例如Depo-Medrol、Solu-Medrol等。如本文所述的类固醇的剂量可以适当地变化。例如，氢化可的松可以在培戈洛酶输注之前以每两周200mg的剂量静脉内(IV)给予。在一些实施例中，甲基强的松龙可以在培戈洛酶输注之前以每两周40mg的剂量IV给予。在一些实施例中，甲基强的松龙可以在培戈洛酶输注之前以每两周80mg的剂量IV给予。虽然此类剂量可以代表常规剂量，但是本领域技术人员将认识到，可以根据本披露内容适当地给予其他剂量并且视为有益的。
在一些实施例中，***可与培戈洛酶一起给予作为痛风发作的预防性治疗，以预防痛风发作。在这种情况下，***可以每日5或10mg的剂量口服(PO)给予。如本领域技术人员所理解的，在一些实施例中，可以视情况根据特定药物治疗和/或剂量使用任何给药途径。
在一些实施例中，在尿酸酶分子之前给予***分子，例如甲基***龙。在一些实施例中，在给予尿酸酶分子之前约10分钟或更长时间、约20分钟或更长时间、约30分钟或更长时间、约40分钟或更长时间、约50分钟或更长时间、约1小时或更长时间、约2小时或更长时间、或约3小时或更长时间给予***分子。在其他实施例中，在给予尿酸酶分子之前约10分钟、约20分钟、约30分钟、约40分钟、约50分钟、约1小时、约2小时或约3小时给予***分子。在其他实施例中，***分子和尿酸酶分子的给予部分重叠。
在一个实施例中，***分子静脉内(IV)、肌肉内(IM)，通过输注(IV输注)、口服、直肠或局部给予。
在一些实施例中，治疗周期是每11天、12天、13天、14天、15天、16天、17天或18天重复一次，例如每14天重复一次，例如每隔一周重复一次。在一个实施例中，剂量方案为每隔一周重复一次。
在一些实施例中，剂量方案包括***分子和尿酸酶分子的一个或多个第一治疗周期，和不含***的尿酸酶分子的一个或多个第二治疗周期。
在一些实施例中，剂量方案包括7、10、12、24、48或更多个治疗周期。
尿酸酶分子
在一些实施例中，该尿酸酶分子是天然存在的尿酸酶，或天然存在的尿酸酶的变体(例如，突变形式、截短形式、片段形式、嵌合形式或衍生形式)。
在一些实施例中，该尿酸酶分子是重组的。
在一些实施例中，该尿酸酶分子是四聚体，例如同源四聚体。
在一些实施例中，该尿酸酶分子是哺乳动物尿酸酶。在一些实施例中，该尿酸酶分子是猪、牛、或绵羊、或狒狒尿酸酶，或其嵌合组合。在一些实施例中，该尿酸酶分子包含猪、牛、绵羊、或狒狒尿酸酶的基本上相同的序列，或其嵌合组合。
在一些实施例中，该尿酸酶分子是真菌或微生物尿酸酶，例如酵母尿酸酶。在一些实施例中，该真菌或微生物尿酸酶来自黄曲霉、球形节杆菌或产朊假丝酵母，或者包含与任何所述真菌或微生物尿酸酶基本相同的序列。
在一些实施例中，该尿酸酶分子是植物尿酸酶。
在一些实施例中，该尿酸酶分子是嵌合体。在一些实施例中，该尿酸酶分子包含猪肝脏和狒狒肝脏尿酸酶的一部分。
在一些实施例中，该尿酸酶分子包含在氨基末端或羧基末端或两者处截短的哺乳动物尿酸酶氨基酸序列(例如，截短约1-13个氨基酸)，所述截短是相对于具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的天然存在的猪尿酸酶。在一些实施例中，该尿酸酶分子包含在位置7处用苏氨酸的氨基酸取代(D7T)，在位置46处用苏氨酸的氨基酸取代(S46T)，在位置291处用赖氨酸的氨基酸取代(R291K)和在位置301处用丝氨酸的氨基酸取代(T301S)，所述氨基酸取代相对于具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的天然存在的猪尿酸酶。
在一些实施例中，该尿酸酶分子的氨基末端氨基酸是丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、或苏氨酸。在一些实施例中，该尿酸酶分子的氨基末端氨基酸是苏氨酸。
在一些实施例中，该尿酸酶分子包含脱-(1-6)-[7-苏氨酸,46-苏氨酸,291-赖氨酸,301-丝氨酸]猪-狒狒尿酸酶的氨基酸序列。
在一些实施例中，该尿酸酶分子包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列，或与其基本相同的氨基酸序列(例如，95％-98％相同)。
在一些实施例中，该尿酸酶分子包含四个相同的非共价结合的尿酸酶单体亚基。
在一些实施例中，该尿酸酶分子约为130-140kDa，例如约135-137kDa(例如约136.8kDa)。
在一些实施例中，该尿酸酶分子进一步包含聚合物。在一些实施例中，该尿酸酶分子是缀合物的形式，例如，包括例如直接或间接(例如，经由接头)偶联至聚合物的尿酸酶序列(例如，突变形式、截短形式、片段形式、嵌合形式的尿酸酶)的缀合物。
在一些实施例中，该聚合物包含聚醚、聚酯、聚氨基酸、聚碳酸酯、聚缩醛、聚缩酮、多糖或其组合中的一种或多种。在一些实施例中，该聚醚包含聚乙二醇或聚丙二醇。
在一些实施例中，该缀合物包含1至40个聚合物分子(例如聚乙二醇分子)/尿酸酶分子单体。在其他实施例中，该缀合物包含5至20个聚合物分子(例如聚乙二醇分子)/尿酸酶分子单体。在另外实施例中，该缀合物包含5至12个聚合物分子(例如聚乙二醇分子)/尿酸酶分子单体。在一些实施例中，该缀合物包含约10个聚合物分子(例如聚乙二醇分子)/尿酸酶分子单体。
在一些实施例中，每个聚合物分子，例如聚乙二醇分子，具有在约1kDa和100kDa之间的分子量。在其他实施例中，每个聚合物分子，例如聚乙二醇分子，具有在约5kDa和50kDa之间的分子量。在另外的实施例中，每个聚合物分子，例如聚乙二醇分子，具有在约5kDa和20kDa之间的分子量。在一些实施例中，每个聚合物分子，例如聚乙二醇分子，具有为约10kDa的分子量。
在一些实施例中，该缀合物具有为约500-600kDa，例如约540-560kDa的聚合物重量。
在一些实施例中，使用单甲氧基聚(乙二醇)-对硝基苯基碳酸酯(mPEG-NPC)衍生该尿酸酶分子的缀合物。
在一些实施例中，该尿酸酶分子的缀合物包含甲氧基PEG(mPEG)。在一个实施例中，每个尿酸酶序列包括单甲氧基聚(乙二醇)(mPEG)，例如5-50kDa(例如10kDa)的mPEG部分。
在一些实施例中，该尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)是在药物组合物(例如，具有药学上可接受的载体或赋形剂的配制品)中。
在一些实施例中，该尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)是在纳米载体配制品中。在另外的实施例中，该纳米载体配制品包含脂质纳米颗粒、脂质体、聚合物纳米颗粒、树枝状聚合物或基于表面活性剂的乳液。在另外的实施例中，该聚合物纳米颗粒包含聚醚、聚酯、聚氨基酸、聚碳酸酯、聚缩醛、聚缩酮、多糖或其组合中的一种或多种。在一些实施例中，该聚醚包含聚乙二醇或聚丙二醇。
在另外的实施例中，该药物组合物(例如配制品)包括免疫抑制剂。在另外的实施例中，该免疫抑制剂是mTOR抑制剂，例如雷帕霉素或雷帕霉素类似物。
在一些实施例中，该尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)是培戈洛酶
***分子
在一些实施例中，该***分子是***，或其变体、代谢物或衍生物(包括其药学上可接受的形式，例如其盐)。
在一个实施例中，该***分子是化合物17,21-二羟基孕甾-1,4-二烯-3,11,20-三酮(IUPAC名称)，或其变体、代谢物或衍生物。
在一个实施例中，该***分子是***的甲基化衍生物，例如甲***。在一个实施例中，甲***是化合物(16β)-17,21-二羟基-16-甲基孕甾-1,4-二烯-3,11,20-三酮(IUPAC名称)，或其变体、代谢物或衍生物(包括其药学上可接受的形式，例如其盐)。
在一个实施例中，该***分子是***的活性代谢物。在一个实施例中，该***的活性代谢物是***龙。
在一些实施例中，该***分子是***龙或其变体、代谢物或衍生物(包括其药学上可接受的形式，例如其盐)，在本文中统称为***龙分子。在一个实施例中，该强的松龙分子选自醋酸强的松龙，醋酸甲基强的松龙或甲基强的松龙琥珀酸钠。
在一个实施例中，该强的松龙分子是化合物(11β)-11,17,21-三羟基孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮(IUPAC名称)，或其变体、代谢物或衍生物(包括其药学上可接受的形式，例如其盐)。
在另一个实施例中，该强的松龙分子是强的松龙的在B环的碳6处甲基化的变体。
在还另一个实施例中，该强的松龙分子是甲基强的松龙，例如是化合物(1S,2R,8S,10S,11S,14R,15S,17S)-14,17-二羟基-14-(2-羟基乙酰基)-2,8,15-三甲基四环[8.7.0.02,7.011,15]十七碳-3,6-二烯-5-酮(IUPAC名称)，或其变体或衍生物(包括其药学上可接受的形式，例如其盐)。
在一些实施例中，该***分子是甲***、***龙、甲基***龙、醋酸***龙、醋酸甲基***龙，或甲基***龙琥珀酸钠。
在一个实施例中，该***分子或***龙分子不是氢化可的松。
另外的组合疗法
在一些实施例中，该组合，例如治疗周期，进一步包括给予秋水仙碱或非甾体类抗炎药。在一些实施例中，在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)前，例如在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)前4天、5天、6天、7天、8天、9天、或10天，例如在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)前7天，开始给予秋水仙碱或非甾体类抗炎药。在一些实施例中，秋水仙碱以每天一次、每天两次、或隔天一次给予，例如每天一次。在另外的实施例中，秋水仙碱以0.6至1.2mg/天的剂量给予。
在一些实施例中，治疗周期进一步包括在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)前给予至少一种另外的抗炎化合物。在另外的实施例中，抗炎化合物选自抗组胺药和非类固醇抗炎药(NSAID)。在一些实施例中，给予至少一种皮质类固醇、至少一种抗组胺药和至少一种NSAID。在一些实施例中，该皮质类固醇可以包括但不限于***、氢化可的松、甲基强的松龙、Depo-Medrol、或Solu-Medrol。
在一些实施例中，NSAID选自布洛芬、消炎痛、甲氧萘丙酸、阿司匹林、对乙酰氨基酚、塞来昔布或伐地昔布。在某些实施例中，该NSAID是对乙酰氨基酚。在一些实施例中，对乙酰氨基酚以500至1500mg的剂量给予。在一些实施例中，在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)前1至4小时给予对乙酰氨基酚。
在一些实施例中，抗组胺药选自阿扎他定、溴苯那敏、西替利嗪、氯苯那敏、氯马斯汀、盐酸二苯环庚啶、地氯雷他定、右氯苯那敏、乘晕宁、苯海拉明、苯吡拉明、非索非那定、羟嗪、氯雷他定和苯茚胺。在某些实施例中，该抗组胺药是非索非那定。在某些实施例中，非索非那定以30至180mg的剂量给予。在某些实施例中，在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)前1至4小时给予非索非那定。在一些实施例中，在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)前一晚给予非索非那定。
药物组合物
在一些实施例中，该尿酸酶分子，例如尿酸酶缀合物，通过注射(例如皮下或静脉内)给予。在一个实施例中，该尿酸酶分子，例如缀合物，通过皮下注射给予。
在一些实施例中，该尿酸酶分子，例如尿酸酶缀合物，以每毫升溶液含有约4至约12，例如约8毫克缀合物的药物组合物形式提供。在一些实施例中，将该尿酸酶分子，例如尿酸酶缀合物，例如8毫克的缀合物，溶解在250毫升盐水溶液中用于输注。在另外的实施例中，其中盐水溶液包括0.45％或0.9％氯化钠。
在一些实施例中，该尿酸酶分子，例如尿酸酶缀合物，经100-200分钟，例如120分钟的期间给予。
受试者
在一些实施例中，该受试者患有或可能患有高尿酸血症，例如痛风。在一些实施例中，该受试者患有慢性痛风。在其他实施例中，该受试者患有难治性或痛风石性痛风。在另外的实施例中，该受试者患有或已经被鉴定为患有口服ULA疗法难以治愈的痛风，例如，未能使血清尿酸正常化，和/或其体征和症状用口服ULA疗法(例如黄嘌呤氧化酶抑制剂)不能充分控制。
在一些实施例中，该受试者患有高尿酸血症，例如，具有血清尿酸水平≥6mg/dl。
在一些实施例中，该受试者先前用口服ULA，例如黄嘌呤氧化酶抑制剂、别嘌呤醇或非布索坦治疗。
在一些实施例中，治疗的受试者显示高尿酸血症，例如，该受试者患有痛风。在某些实施例中，该受试者对降尿酸盐疗法例如口服ULA是难治的或具有降低的应答能力。在一个实施例中，该受试者具有或被鉴定具有对尿酸酶疗法较低的功效(例如，显示抗尿酸酶抗体(例如，抗培戈洛酶抗体)的发生率增加和/或应答于尿酸酶疗法的输注反应的发生率增加)。
监测受试者
在一些实施例中，该方法进一步包括测量受试者中抗尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)的抗体水平，例如从受试者获得的血液样品测量。在一些实施例中，通过免疫吸附测定法，例如酶联免疫吸附测定法(ELISA)测量抗尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)的抗体水平。在一些实施例中，在给予缀合物之前测量抗尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)的抗体水平，例如在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)之前72、48、24、12、6、4或2小时测量。在其他实施例中，在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)后，例如在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)后0.5、1、2、3、4或5小时，测量抗尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)的抗体水平。
在一些实施例中，该方法进一步包括测量受试者中的尿酸水平，例如血浆或血清尿酸水平。在一些实施例中，在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)之前测量尿酸水平，例如在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)之前72、48、24、12、6、4或2小时，例如，尿酸的低谷水平。在其他实施例中，在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)之后测量尿酸水平，例如，在给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)之后0.5、1、2、3、4或5小时，例如，尿酸的峰值水平。
在一些实施例中，受试者的尿酸水平，例如血清或血浆尿酸水平，相对于参考者(例如相对于未治疗的受试者，或治疗前或在先前治疗后的受试者)降低。在另外的实施例中，尿酸水平，例如，血清或血浆尿酸水平，可降低至6.8mg/dl或更低。
在一些实施例中，受试者是患有口服ULA疗法难治性痛风的受试者，其中中止给予尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)并且在中止尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)给予后给予口服ULA疗法，并且其中尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)以使得在中止后受试者的尿酸水平保持低于6.8mg/dl的时间和量给予。在另外的实施例中，该尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)以使得在受试者的尿酸水平保持低于6.0mg/dl的时间和量给予。在一些实施例中，该尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)以使得在中止后受试者的尿酸水平保持低于6.8mg/dl持续6个月或者更长时间的时间和量给予。
在一些实施例中，尿酸水平，例如，血清或血浆尿酸水平，可降低至6.0mg/dl或更低。在一些实施例中，在缀合物剂量之前测量尿酸水平，并且对于3次或更多次连续剂量，尿酸水平降低至6mg/dl或更低。在另外的实施例中，尿酸水平，例如，血清或血浆尿酸水平，可降低至5.0mg/dl或更低。
标题或编号或字母要素，例如(a)、(b)、(i)等，仅为了便于阅读而呈现。在本文件中使用的标题或编号或字母要素不要求步骤或要素按字母顺序进行，或者步骤或要素必须彼此不连续。
本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献通过引用以其整体而并入。
本披露的其他特征、目的和优点会从说明书和附图以及权利要求书中显而易见。
序列简要说明
SEQ ID NO:1-来自产朊假丝酵母的尿酸酶的序列。
SEQ ID NO:2-来自猪的尿酸酶的序列。
SEQ ID NO:3-来自狒狒的尿酸酶的序列。
SEQ ID NO:4-嵌合猪-K-S或PKS尿酸酶的序列。
SEQ ID NO:5-猪-KS-ΔN的序列，其是在氨基末端截短6个氨基酸的PKS尿酸酶(SEQ ID NO:4)。
SEQ ID NO:6-在位置46处是苏氨酸的猪-KS-ΔN(SEQ ID NO:5)的位置44至56的序列。
SEQ ID NO:7-猪-TTKS-ΔN的序列，其是猪-KS-ΔN(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的位置8至287。
SEQ ID NO:8-猪-TTKS-ΔN的序列，其是除去N-末端甲硫氨酸的猪-KS-ΔN的位置8至287。
附图说明
图1–显示通过皮质类固醇预防类型的输注次数。
图2–显示中止疗法的患者的百分比。
图3–显示通过预防和治疗终止的输注平均次数。
具体实施方式
某些术语定义如下。
如本文所用，冠词“一个/种(a)”和“一个/种(an)”是指冠词的一个/种或多于一个/种(例如，是指至少一个/种)语法宾语。
除非上下文另有明确说明，否则如本文所用术语“或”意指术语“和/或”并且可与术语“和/或”互换使用。
术语“包括”或“包含”在本文中可互换使用。
“约”和“大约”通常意指考虑到测量的性质或精度，测量的量的可接受程度的误差。示例性误差程度在给定值或给定值的范围的百分之(％)20内，典型地在10％内，并且更典型地在5％内。
如本文所用，术语“尿酸酶分子”包括全长的天然存在的尿酸酶分子、以及变体(例如，功能变体(例如，截短形式、片段形式、突变形式(例如，基本上相似的序列)或其衍生化形式)，只要保留未经修饰的(例如，天然存在的)分子的至少一种功能和/或活性。在一些实施例中，该尿酸酶分子是衍生的，例如，是处于缀合物的形式，例如本文所述的尿酸酶缀合物。
在一些实施例中，该尿酸酶分子是真菌或微生物尿酸酶，例如具有来自黄曲霉、球形节杆菌、芽孢杆菌属物种或产朊假丝酵母的序列，或与其基本相同。在一些实施例中，该尿酸酶分子是无脊椎动物尿酸酶，例如来自黑腹果蝇或拟暗果蝇尿酸酶。在一些实施例中，该尿酸酶分子是植物尿酸酶，例如，来自大豆。
在一个实施例中，该尿酸酶分子是哺乳动物尿酸酶分子。在一个实施例中，该哺乳动物尿酸酶分子包含至少猪、牛、绵羊或狒狒肝脏尿酸酶的序列的一部分，或其组合。在一个实施例中，该尿酸酶分子是选自以下中的两种或更多种哺乳动物尿酸酶的嵌合尿酸酶：猪、牛、绵羊或狒狒肝脏尿酸酶的两种或更多种的部分。
在一个实施例中，该尿酸酶分子在N-或C-末端截短。在一个实施例中，该尿酸酶分子在其氨基末端截短3至10个氨基酸，例如6个氨基酸。在另一个实施例中，该尿酸酶分子在其羧基末端截短3至10个氨基酸，例如6个氨基酸。在另一个实施例中，该尿酸酶分子在其羧基和氨基末端截短3至10个氨基酸，例如6个氨基酸。
在一个实施例中，氨基酸突变包含分别在例如SEQ ID NO:8的位置7、46、291和301处苏氨酸、苏氨酸、赖氨酸和丝氨酸。
在一个实施例中，该尿酸酶分子包括SEQ ID NO:8的氨基酸序列，或与其90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、或100％相同，例如95％-98％相同的序列。
“衍生自”(当该术语在本文中使用时)表示第一和第二分子之间的关系。它通常是指第一分子和第二分子之间的结构相似性，并不暗示或包括对衍生自第二分子的第一分子的过程或来源的限制。
术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”(如果是单链的话)在本文中可互换地使用来指具有任何长度的氨基酸聚合物。聚合物可以是直链或支链的，它可以包含经修饰的氨基酸，并且它可以被非氨基酸中断。所述术语还涵盖已修饰的氨基酸聚合物；例如，二硫键形成、糖基化、脂化、乙酰化、磷酸化或任何其他操纵，如与标记组分缀合。多肽可以从天然来源分离，可以通过重组技术从真核或原核宿主中产生，或者可以是合成程序的产物。
术语“氨基酸”旨在包括包含氨基官能团和酸官能团并且能够包含在天然存在的氨基酸的聚合物中的所有分子(无论是天然的还是合成的)。示例性氨基酸包括天然存在的氨基酸；或其类似物、衍生物和同类物；具有变体侧链的氨基酸类似物；以及任何前述的任何一种的所有立体异构体。如本文所用，术语“氨基酸”包括D-或L-光学异构体和肽模拟物。
本披露的方法和剂量涵盖具有指定的序列、或与其基本上相同或相似的序列(例如，与指定的序列至少85％、90％、95％或更高相同的序列)的多肽和核酸。在氨基酸序列的上下文中，在本文中使用术语“基本上相同”来指含有足够或最少数量的如下氨基酸残基的第一氨基酸，所述氨基酸残基i)与第二氨基酸序列中的比对的氨基酸残基相同，或ii)是第二氨基酸序列中的比对的氨基酸残基的保守取代，使得第一和第二氨基酸序列可以具有共有结构域和/或共同功能活性。例如，含有共有结构域的氨基酸序列与参考序列(例如，本文提供的序列)具有至少约85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性。
在核苷酸序列的上下文中，在本文中使用术语“基本上相同”来指含有足够或最少数量的如下核苷酸的第一核酸序列，所述核苷酸与第二核酸序列中的比对的核苷酸相同，使得第一和第二核苷酸序列编码具有共同功能活性的多肽，或编码共有结构多肽结构域或共同功能多肽活性。例如，核苷酸序列与参考序列(例如，本文提供的序列)具有至少约85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性。
序列之间的同源性或序列同一性(所述术语在本文中可互换地使用)的计算如下进行。
为了测定两个氨基酸序列、或两个核酸序列的百分比同一性，出于最佳比对的目的将序列比对(例如，可以在第一和第二氨基酸或核酸序列中的一个或两个中引入空位以用于最佳比对，并且出于比较目的，非同源序列可以忽略)。在一个实施例中，出于比较目的比对的参考序列长度是参考序列长度的至少30％，优选地至少40％，更优选地至少50％、60％，并且甚至更优选地至少70％、80％、90％、100％。然后比较对应的氨基酸位置或核苷酸位置处的氨基酸残基或核苷酸。当第一序列中的位置被与第二序列中的对应位置相同的氨基酸残基或核苷酸占据时，则所述分子在该位置是相同的(如本文所用，氨基酸或核酸“同一性”等同于氨基酸或核酸“同源性”)。
两个序列之间的百分比一致性是所述序列共享的相同位置的数量的函数，考虑了空位数量以及每个空位的长度，需要引入它们以用于两个序列的最佳比对。
序列比较和两个序列之间百分比一致性的测定可以使用数学算法来完成。在一个实施例中，使用Needleman和Wunsch((1970)J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]48:444-453)算法使用Blossum 62矩阵或PAM250矩阵，16、14、12、10、8、6、或4的空位权重和1、2、3、4、5、或6的长度权重来测定两个氨基酸序列之间的百分比同一性，所述算法已并入GCG软件包(可在http://www.gcg.com获得)中的GAP程序中。在还另一个实施例中，使用GCG软件包(可在http://www.gcg.com获得)中的GAP程序，使用NWSgapdna.CMP矩阵以及40、50、60、70、或80的空位权重和1、2、3、4、5、或6的长度权重来测定两个核苷酸序列之间的百分比同一性。一组参数(除非另有说明，否则应使用的参数)是Blossum 62评分矩阵，空位罚分为12，空位延伸罚分为4，并且移码空位罚分为5。
两个氨基酸或核苷酸序列之间的百分比同一性可以使用E.Meyers和W.Miller((1989)CABIOS[生物科学中的计算机应用],4:11-17)的算法，使用PAM120权重残基表、12的空位长度罚分和4的空位罚分来测定，所述算法已并入ALIGN程序(版本2.0)中。
本文描述的核酸和蛋白质序列可以用作“查询序列”以对公共数据库进行检索，例如来鉴定其他家族成员或相关序列。可以使用Altschul等人(1990)J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]215:403-10的NBLAST和XBLAST程序(版本2.0)来执行这样的检索。可以用NBLAST程序，得分＝100、字长＝12执行BLAST核苷酸检索，以获得与本披露内容的核酸分子同源的核苷酸序列。可以用XBLAST程序，得分＝50，字长＝3执行BLAST蛋白质检索，以获得与本披露内容的蛋白质分子同源的氨基酸序列。为了获得用于比较目标的有空位的比对，可以利用如在Altschul等人,(1997)Nucleic Acids Res.[核酸研究]25:3389-3402中所述的GappedBLAST。当利用BLAST和Gapped BLAST程序时，可以使用各程序(例如，XBLAST和NBLAST)的默认参数。参见http://www.ncbi.nlm.nih.gov。
应理解，尿酸酶分子可以具有另外的保守或非必需氨基酸取代，其对所述分子的功能没有实质性影响。
在本披露的上下文中，使用以下常见核酸碱基的缩写。“A”是指腺苷、“C”是指胞嘧啶、“G”是指鸟苷、“T”是指胸苷、“U”是指尿苷。
如本文所用，“保守突变”是在基本上不改变蛋白质行为的位置处或附近处的一个或多个氨基酸的突变。在一个实施例中，包含至少一个保守突变的尿酸酶分子具有与没有此类突变的尿酸酶分子相同的尿酸酶活性。在可替代的实施例中，包含至少一个保守突变的尿酸酶分子具有与没有此类突变的尿酸酶分子基本上相同的尿酸酶活性、活性的5％内、活性的10％内、或活性的30％内。
保守氨基酸取代定义为通过改变肽、多肽或蛋白质或其片段的氨基酸改变氨基酸组成。在一些实施例中，该尿酸酶分子具有一个、两个、三个或四个保守突变。取代是具有通常相似的性质(例如，酸性、碱性、芳香族、大小、带正电或带负电、极性、非极性)的氨基酸，使得取代基本上不改变肽、多肽或蛋白质特征(例如，电荷、IEF、亲和力、亲合力、构象、溶解度)或活性。可以对此类保守氨基酸取代进行的典型取代可以在如下的氨基酸组中：
甘氨酸(G)、丙氨酸(A)、缬氨酸(V)、亮氨酸(L)和异亮氨酸(I)；
天冬氨酸(D)和谷氨酸(E)；
丙氨酸(A)、丝氨酸(S)和苏氨酸(T)；
组氨酸(H)、赖氨酸(K)和精氨酸(R)；
天冬酰胺(N)和谷氨酰胺(Q)；
苯丙氨酸(F)、酪氨酸(Y)和色氨酸(W)。
具有一个或多个保守取代的蛋白质保持其结构稳定性并且即使其DNA序列与原始蛋白质的DNA序列不同，也可以催化反应。
范围：在整个本披露中，本披露的各个方面可以以范围形式呈现。应该理解，范围形式的描述仅仅是为了方便以及简洁，不应该被解释为对本披露范围的不灵活的限制。因此，应该认为范围的描述已经具体披露了所有可能的子范围以及该范围内的各个数值。例如，应当认为对诸如1至6的范围的描述已经具体披露了子范围，例如从1至3、从1至4、从1至5、从2至4、从2至6、从3至6等，以及在该范围内的各个数字，例如，1、2、2.7、3、4、5、5.3和6。作为另一个实例，诸如95％-99％同一性的范围包括具有95％、96％、97％、98％或99％同一性，并且包括子范围诸如96％-99％、96％-98％、96％-97％、97％-99％、97％-98％和98％-99％同一性。无论范围的广度如何，这都适用。
本披露的各个方面在下面进一步详细地描述。另外的定义贯穿说明书而陈述。
尿酸酶分子
本文披露的方法和剂量方案包括使用尿酸酶分子(例如尿酸酶缀合物)，以耐受和治疗剂量方案给予，单独或与其他疗法组合，以例如降低尿酸水平，治疗痛风，预防(例如延迟)输注反应，和/或减少针对尿酸酶的抗体应答。适用于本文披露的方法和剂量方案的尿酸酶包括从细菌、真菌和植物和动物(包括脊椎动物和无脊椎动物)的组织中分离的天然存在的尿酸盐氧化酶，以及尿酸酶的重组形式，包括尿酸酶的突变的、杂交的和/或截短的酶活性变体。
该尿酸酶分子可以是真菌或微生物尿酸酶。在这个实施例的一个方面中，该真菌或微生物尿酸酶分子可以是来自黄曲霉、球形节杆菌、芽孢杆菌属物种的天然存在的或重组形式的尿酸酶。在一些实施例中，该尿酸酶分子来自产朊假丝酵母(SEQ ID NO:1)。可替代地，该尿酸酶分子可以是无脊椎动物尿酸酶，例如来自黑腹果蝇或拟暗果蝇尿酸酶的天然存在的或重组形式的尿酸酶。本文披露的尿酸酶分子也可以是植物尿酸酶，例如，来自大豆根瘤(大豆)的天然存在的或重组形式的尿酸酶。
除非另有说明，否则如本文所用的尿酸酶分子包括单个亚基以及四聚体。在一些实施例中，该尿酸酶分子是同源四聚体。在一些实施例中，该尿酸酶分子包含四个相同的非共价结合的尿酸酶单体亚基。
如本文所用，“截短的尿酸酶分子”是指具有缩短的一级氨基酸序列的尿酸酶分子。在可能的截短中的是在氨基和/或羧基末端或其周围的截短。这种类型的特定截短可以使得天然存在的蛋白质的最终氨基酸(氨基和/或羧基末端的氨基酸)存在于截短的蛋白质中。氨基末端截短可以在位置1、2、3、4、5或6处开始。在一些实施例中，氨基末端截短开始于位置2处，从而留下氨基末端甲硫氨酸。可以通过翻译后修饰除去该甲硫氨酸。在一些实施例中，在产生尿酸酶后除去氨基末端甲硫氨酸。在一个实施例中，通过内源性细菌氨肽酶除去该甲硫氨酸。
相对于全长序列，截短的尿酸酶分子的一个或多个氨基酸序列被排除。包含截短的尿酸酶的蛋白质除了截短的尿酸酶序列外还可包括任何氨基酸序列。在一些实施例中，包含截短的尿酸酶的尿酸酶蛋白(其中截短开始于位置6处(即，截短的尿酸酶开始于位置7处))在截短的尿酸酶的紧接上游不具有野生型尿酸酶在位置6处具有的任何氨基酸。
除非特别参考另一序列或特定SEQ ID NO另有说明，否则提及本文所述的尿酸酶分子的氨基酸的编号位置是关于猪尿酸酶序列的氨基酸编号。如本文所用，提及“从位置X处到位置Y处”的氨基酸或核酸是指从位置X处开始并在位置Y处结束的连续序列，包括位置X和Y处的氨基酸或核酸。
在一个实施例中，该尿酸酶分子在其氨基末端截短4至13个氨基酸。在另一个实施例中，该尿酸酶分子在其羧基末端截短4至13个氨基酸。在另一个实施例中，该尿酸酶分子在其羧基和氨基末端截短4至13个氨基酸。
在一个实施例中，该尿酸酶分子在其氨基末端截短6个氨基酸。在另一个实施例中，该尿酸酶分子在其羧基末端截短6个氨基酸。在另一个实施例中，该尿酸酶分子在其羧基和氨基末端截短6个氨基酸。
一种示例性哺乳动物尿酸酶分子是重组猪-狒狒嵌合尿酸酶，其由猪肝脏和狒狒肝脏尿酸酶的序列的部分组成，两者首先是由Wu等人(1989)确定的。此类嵌合尿酸酶分子的一个实例含有来自猪序列(SEQ ID NO:2)的前288个氨基酸和来自狒狒序列(SEQ ID NO:3)的最后16个氨基酸。由于后一序列仅在两个位置与猪序列不同，在残基291处赖氨酸(K)代替精氨酸而在残基301处丝氨酸(S)代替苏氨酸，这种突变体被称为猪-K-S或PKS尿酸酶(SEQ ID NO:4)。在一些实施例中，PKS尿酸酶在其氨基末端截短6个氨基酸，并且被称为“猪-KS-ΔN”(SEQ ID NO:5)。
在一个实施例中，该尿酸酶分子包含来自猪尿酸酶(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的从位置13处至位置292处的氨基酸序列。在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含来自猪-KS-ΔN(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列的从位置8处至位置287处的氨基酸序列。
在另一个实施例中，该尿酸酶分子包含来自在位置46处包含苏氨酸的猪-KS-ΔN(SEQ ID NO:6)的位置44至位置56的氨基酸序列。该尿酸酶区域与尿酸酶的隧道折叠(T-折叠)结构域内的序列具有同源性，并且在其内部在位置46处具有相对于天然猪尿酸酶序列的突变。
在一个实施例中，在位置7、46、291和301处包含苏氨酸、苏氨酸、赖氨酸和丝氨酸的尿酸酶分子包含来自猪尿酸酶的氨基酸序列的从位置13至位置292的氨基酸序列。在另一个实施例中，在位置7、46、291和301处包含苏氨酸、苏氨酸、赖氨酸和丝氨酸的尿酸酶分子包含来自猪-KS-ΔN的氨基酸序列的从位置8至位置287的氨基酸序列(猪-TTKS-ΔN)(SEQ ID NO:7)。在另一个实施例中，在位置7、46、291和301处包含苏氨酸、苏氨酸、赖氨酸和丝氨酸的尿酸酶分子包含来自猪-KS-ΔN的氨基酸序列的从位置8至位置287的氨基酸序列并且去除了N-末端甲硫氨酸(猪-TTKS-ΔN)(SEQ ID NO:8)。
在一个实施例中，该尿酸酶分子包括SEQ ID NO.8的序列，或与其90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、或100％相同，例如95％-98％相同的序列。
在实施例中，该尿酸酶分子包含脱-(1-6)-[7-苏氨酸,46-苏氨酸,291-赖氨酸,301-丝氨酸]猪-狒狒尿酸酶的氨基酸序列。
本文披露的截短的哺乳动物尿酸酶分子可以进一步在氨基末端包含甲硫氨酸。倒数第二个氨基酸可以是允许被细菌甲硫氨酸氨肽酶(MAP)去除N-末端甲硫氨酸的氨基酸。允许最完全除去N-末端甲硫氨酸的氨基酸是丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸和苏氨酸。在一个实施例中，该尿酸酶分子包含两个氨基末端氨基酸，其中这两个氨基末端氨基酸是甲硫氨酸，接着是选自丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸和苏氨酸的氨基酸。在另一个实施例中，该氨基酸是苏氨酸。
在一个实施例中，该尿酸酶分子是哺乳动物尿酸酶分子。已经在若干种哺乳动物物种中鉴定了尿酸酶基因和蛋白质，例如猪、狒狒、大鼠、兔、小鼠和恒河猴。本文通过参考其公共数据库登录号描述各种尿酸酶蛋白的序列，如下：gi|50403728|sp|P25689；gi|20513634|dbj|BAB91555.1；gi|176610|gb|AAA35395.1；gi|20513654|dbj|BAB91557.1；gi|47523606|ref|NP_999435.1；gi|6678509|ret]NP_033500.1；gi|57463|emb|CAA31490.1；gi|20127395|rer]NP__446220.1；gi|137107|sp|P11645；gi|51458661|refjXP_497688.1；gi|207619|gb|AAA42318.1；gi|26340770|dbj|BAC34047.1；和gi|57459|emb|CAA30378.1。通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)可访问的公共数据库中的这些序列及其注释中的每一个通过引用整体并入。
在一个实施例中，该哺乳动物尿酸酶分子包括猪、牛、绵羊或狒狒肝脏尿酸酶的序列。
在一个实施例中，该尿酸酶分子可以是狒狒肝脏尿酸酶，其中酪氨酸97已经被组氨酸取代，由此尿酸酶分子的比活性可以增加至少约60％。
在一个实施例中，该尿酸酶分子是两种或多种哺乳动物尿酸酶的嵌合尿酸酶。
在一个实施例中，嵌合尿酸酶的哺乳动物尿酸酶选自猪、牛、绵羊或狒狒肝脏尿酸酶。
在一个实施例中，该尿酸酶分子包括SEQ ID NO.8的序列，或与其90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、或100％相同，例如95％-98％相同的序列。
在实施例中，该尿酸酶分子包含脱-(1-6)-[7-苏氨酸,46-苏氨酸,291-赖氨酸,301-丝氨酸]猪-狒狒尿酸酶的氨基酸序列。
在实施例中，该尿酸酶分子是80-200kDa。在实施例中，该尿酸酶分子是100-160kDa。在实施例中，该尿酸酶分子是110-150kDa。在实施例中，该尿酸酶分子是120-180kDa。在实施例中，该尿酸酶分子是130-140kDa，例如，约135-137kDa(例如约136.8kDa)。
在一个实施例中，该尿酸酶分子是分离的。在另一个实施例中，该尿酸酶分子是经纯化的。在另一个实施例中，该尿酸酶分子是分离的和经纯化的。
可以通过本领域技术人员已知的任何方法分离和/或纯化尿酸酶分子。表达的多肽通常可以以基本上纯的形式分离。在一些实施例中，将多肽分离至至少80％(按重量计)的纯度。在另外的实施例中，将多肽分离至至少95％(按重量计)的纯度。在另外的实施例中，将多肽分离至至少99％(按重量计)的纯度。通常，此类纯化可以使用例如硫酸铵分级分离、SDS-PAGE电泳和亲和色谱的标准技术来实现。可以使用阳离子表面活性剂，例如氯化十六烷基铵基吡啶(CPC)，根据美国专利公开US 2009/0317889中描述的方法分离尿酸酶分子，该专利公开名称为Protelation with Cationic Surfactant[用阳离子表面活性剂纯化蛋白质]，其通过引用整体并入本文。
在宿主细胞中表达尿酸酶分子的方法是本领域已知的。例如，可以处理宿主细胞以引起尿酸酶分子的表达。尽管可以使用多种其他方法(例如电穿孔)，但可以使用用钙离子沉淀的DNA完成用载体转染细胞。表达尿酸酶分子的载体可以在渗透压敏感启动子的控制下。启动子是在开始将DNA转录成RNA之前RNA聚合酶结合的DNA区域。渗透压敏感启动子由于细胞感知的渗透压增加而启动转录。在一个实施例中，启动子是修饰的osmB启动子。
尿酸酶缀合物
在某些实施例中，尿酸酶分子是缀合形式。本文披露的尿酸酶分子可以与一个或多个聚合物缀合，例如水溶性聚合物(例如，一个或多个PEG部分)。
本文披露了包含尿酸酶分子的缀合物，例如尿酸酶缀合物。这些缀合物基本上是非免疫原性的并且可以保留未修饰酶的尿酸分解活性的至少75％、85％、或95％或更多。在实施例中，该聚合物包含聚醚、聚酯、聚氨基酸、聚碳酸酯、聚缩醛、聚缩酮、多糖或其组合中的一种或多种。在实施例中，该聚合物是聚丙二醇。在实施例中，该聚合物是聚乙二醇。适用于本文披露的方法的水溶性聚合物包括直链和支链聚(乙二醇)或聚(环氧乙烷)，所有这些通常称为PEG。支链形PEG的实例是美国专利号5,643,575的主题。直链PEG的一个实例是通用结构CH3O-(CH2CH2O)nH的单甲氧基PEG，其中n从约100至约2,300之间变化。
在实施例中，每个聚合物分子，例如聚乙二醇分子，具有在约1kDa和100kDa之间的分子量。在实施例中，每个聚合物分子，例如聚乙二醇分子，具有在约5kDa和50kDa之间的分子量。在实施例中，每个聚合物分子，例如聚乙二醇分子，具有在约5kDa和20kDa之间的分子量。在实施例中，每个聚合物分子，例如聚乙二醇分子，具有为约20kDa的分子量。在实施例中，每个聚合物分子，例如聚乙二醇分子，具有为约10kDa的分子量。在实施例中，每个聚合物分子，例如聚乙二醇分子，具有为约10kDa的分子量。
在实施例中，该缀合物具有为300-800kDa的聚合物重量。在实施例中，该缀合物具有为400-700kDa的聚合物重量。在实施例中，该缀合物具有为约500-600kDa，例如约540-560kDa的聚合物重量。
在实施例中，该缀合物包含1至40个聚合物分子(例如聚乙二醇分子)/尿酸酶分子单体。在实施例中，该缀合物包含5至20个聚合物分子(例如聚乙二醇分子)/尿酸酶分子单体。在实施例中，该缀合物包含5至12个聚合物分子(例如聚乙二醇分子)/尿酸酶分子单体。在实施例中，该缀合物包含约10个聚合物分子(例如聚乙二醇分子)/尿酸酶分子单体。
尿酸酶分子可以经由生物学稳定的、无毒的共价连接与相对少量的PEG链缀合。此类连接可包括聚氨酯(氨基甲酸酯)连接、仲胺连接和酰胺连接。
通过在琥珀酰亚胺基碳酸酯(SC)或PEG的对硝基苯基碳酸酯(NPC)衍生物的存在下孵育尿酸酶，可以形成与尿酸酶的聚氨酯连接。SC-PEG可以使用美国专利号5,612,460中描述的方法合成，将其通过引用结合在此。根据在Veronese,FM等人，(1985)Appl BiochemBiotechnol[应用生物化学与生物技术]11:141-152和在美国专利号5,286,637中描述的方法，NPC-PEG可以通过使PEG与氯甲酸对硝基苯酯反应来合成，将其通过引用结合在此。美国专利号5,286,637中所述的方法适用于较高分子量的PEG，通过调节反应物的浓度来维持类似的化学计量。Büttner,W等人在East German Patent Specification[德国专利说明书]DD 279 486A1中描述了NPC-PEG合成的可替代的方法。在实施例中，使用单甲氧基聚(乙二醇)-对硝基苯基碳酸酯(mPEG-NPC)衍生该缀合物的尿酸酶分子。
可以使用PEG的羧酸衍生物(Shearwater Polymers)的N-羟基琥珀酰亚胺酯获得与尿酸酶的酰胺连接。可以使用2,2,2-三氟乙磺酰基PEG(三氟代乙烷磺酰基PEG；Shearwater Polymers)或使用PEG醛(Shearvater Polymers)和氰基硼氢化钠的还原性烷基化形成仲胺连接。
如US 6,783,965中所述，在含有分子量为10kDa的PEG的缀合物中，每个亚基偶联的同时保留未修饰酶的至少75％的尿酸分解活性的PEG的最大链数为约12条链，这是对于哺乳动物的尿酸酶(例如PKS尿酸酶，猪尿酸酶的突变蛋白；参见实例5中的测定条件)。后一种PEG化程度相当于总氨基基团的约40％。存在若干个因素会影响最佳分子量和PEG链的数量的选择，以便与给定形式的尿酸酶偶联。通常，与相对较高分子量的PEG的较少链的相比，基本上不损失尿酸水解活性的免疫原性的降低或消除可能需要相对更多的较低分子量的PEG链的偶联。同样地，每种不同形式的尿酸酶在链的大小和数量方面可以具有不同的最佳值。使用本领域已知的方法可以容易地确定PEG的最佳链数和PEG分子量。
在另一个实施例中，已经除去了尿酸酶缀合物的基本上所有大聚集体。除去的方法包括离子交换色谱或尺寸排阻色谱(pH在约9和10.5之间，例如10.2)，然后将所得的基本上无聚集的尿酸酶制剂与PEG缀合。来自制备型柱的每个级分中尿酸酶的分子量可以通过任何尺寸依赖性分析技术监测，包括例如HPLC、常规尺寸排阻色谱、离心、光散射、毛细管电泳或非变性缓冲液中的凝胶电泳。对于使用尺寸排阻色谱分离的无聚集尿酸酶，可以合并仅含有140-kDa和280-kDa形式的酶的级分并用于与PEG缀合。对于使用离子交换色谱分离的四聚体加八聚体尿酸酶，可以分析来自离子交换柱的级分的大小，以确定哪些级分含有大量的四聚体和八聚体形式，而没有通过光散射检测到大聚集体。因此，在纯化产物中，不希望的大聚集体可构成总尿酸酶的约1％或更少。
在一些实施例中，该尿酸酶缀合物是培戈洛酶培戈洛酶是一种与聚乙二醇缀合的重组哺乳动物尿酸酶，被批准用于治疗常规治疗难治性成人患者的慢性痛风。1成人患者的培戈洛酶的推荐剂量和方案为每两周静脉输注8mg(尿酸酶蛋白)。1提示输注前预防(抗组胺药、皮质类固醇)以使给予培戈洛酶时输注反应的风险最小化。1在随机对照试验期间给予氢化可的松(200mg IV)，并且通常用作培戈洛酶输注前预防的组分。2甲基强的松龙已成功用于包括英夫利昔单抗在内的多种生物蛋白的输注前预防。3甲基强的松龙现在被一些供应商用作针对培戈洛酶的可替代的输注前预防皮质类固醇。甲基强的松龙作为针对培戈洛酶输注的预防尚未得到***评估。如本文所述使用的其他类型的皮质类固醇可以包括但不限于***、氢化可的松、甲基强的松龙、Depo-Medrol、和/或Solu-Medrol。
组合疗法的用途
治疗
升高的血清尿酸盐可以是痛风的生化标志物。持续升高的血浆尿酸(PUA)或血清尿酸(SUA)水平导致尿酸在关节和软组织中沉积。随着尿酸的总身体负担增加，痛风的体征和症状(包括关节炎，其特征在于反复出现的疼痛痛风发作)导致痛风石的发展和关节畸形，伴随因而发生的慢性疼痛/炎症和随之发生的身体功能丧失。
如本文所用，除非另有说明，术语“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”是指治疗性治疗和预防性或防止性措施，其中目的是预防或减缓(减轻)不希望的生理变化或障碍，例如病症或障碍(例如，高尿酸血症(例如，痛风))的发展或恶化。有益的或所希望的临床结果包括但不限于症状的减轻、疾病的程度减弱、疾病状态稳定(即，未恶化)、疾病进展的延迟或减慢、疾病状态的改善或缓和，无论是可检测的或不可检测的。需要治疗的那些包括已患有病症或障碍的那些以及易于患上病症或障碍的那些或打算预防病症或障碍的那些。
例如，在治疗痛风的情况下，在一些实施例中，治疗性治疗可以指在根据方法的给药后或用本文所述的药物组合物的给药后降低尿酸水平。例如，治疗后尿酸水平降低至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、或至少约50％。在另一个实施例中，治疗后尿酸水平降低超过50％、例如至少约60％、或至少约70％。在一个实施例中，与对照(例如，在不存在本文所述的药物组合物的情况下)相比，尿酸水平降低至少约80％、至少约90％或更多。
在另一个实施例中，治疗性治疗是指减轻与痛风相关的至少一种症状。可测量的减轻包括在治疗后可测量的标志物或症状的任何统计学显著的下降，例如血液样品中的血清/血浆尿酸水平。在一个实施例中，至少一种标志物或症状减轻至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、或至少约50％。在另一个实施例中，至少一种标志物或症状减轻超过50％、例如至少约60％、或至少约70％。在一个实施例中，与对照(例如，在不存在本文所述的药物组合物的情况下)相比，至少一种标志物或症状减轻至少约80％、至少约90％或更多。
如本文所用，除非另有说明，术语“预防(prevent)”、“预防(preventing)”和“预防(prevention)”是指在受试者开始具有可检测的症状或患有病症或病症复发之前发生的作用。在一个实施例中，该病症是痛风。预防不需要导致病症的完全预防；该术语涵盖部分预防或减轻病症或病症的症状，或降低发生病症的风险。
如本文所用，并且除非另有说明，化合物(例如组合形式的尿酸酶分子)的“治疗有效量”是足以在障碍(例如，痛风，或一种或多种与痛风相关的症状)的治疗中提供治疗益处，或延迟或最小化与障碍(例如，痛风，或一种或多种与痛风相关的症状)相关的一种或多种症状的量。化合物的治疗有效量是指独自或与其他治疗剂组合地在障碍的治疗或管理方面提供益处的治疗剂的量。术语“治疗有效量”可以涵盖改善整体疗法，减少或避免障碍(例如，痛风，或一种或多种与痛风相关的症状)的一种或多种症状或原因，或增强另一种的治疗剂的治疗功效的量。在一些实施例中，治疗有效量是实现尿酸水平降低的量。在一些实施例中，治疗有效量是实现尿酸水平低于或约6mg/dl的量。
如本文所用，并且除非另有说明，化合物的“预防有效量”是足以预防障碍(例如，痛风，或一种或多种与痛风相关的症状)的量。化合物的预防有效量指独自或与其他治疗剂组合地在障碍的预防中提供预防益处的化合物的量。术语“预防有效量”可以涵盖改进整体治疗，或增强另一预防剂的预防效果的量。
如本文所述，“痛风”是尿酸盐代谢的慢性障碍，导致关节和软组织中的尿酸单钠晶体沉积，伴随炎症，并且最终在一些患者中是破坏性的慢性关节病。痛风是男性关节炎的一种普遍形式，并且在两种性别的老年人中发病率和流行率都在增加。痛风的治疗包括口服ULA(降尿酸盐剂)，例如黄嘌呤氧化酶抑制剂，包括别嘌呤醇和非布索坦，和尿酸酶。在一些实施例中，对口服ULA无应答的患者用尿酸酶治疗。
“难治性痛风”是指受试者的痛风，所述受试者为例如对一种或多种口服降尿酸盐剂(ULA)(例如黄嘌呤氧化酶抑制剂)无应答或应答差或已经经历或正在增加经历不利事件的风险的患者。大约有2％的用别嘌呤醇治疗的患者出现过敏反应，约0.4％的患者出现严重的超敏综合征(Arellano等人，Ann Pharmacother[药物治疗年报]1993；27:337-43)。患有由于过敏/超敏反应的黄嘌呤氧化酶抑制剂的医学禁忌症，或者在这些药物的最大医学适当剂量下未能使SUA正常化的患者，可继续发展为慢性痛风。
“常规疗法(GRT)难治性慢性痛风”是进行性痛风的罕见但严重的结果。慢性痛风是由于已证实的对可用疗法的不耐受性或难治性导致的，所述可用疗法目的为通过降低和维持血清尿酸盐水平在亚饱和范围内来防止尿酸盐晶体沉积。
多年来反复发作痛风或持续性高尿酸血症的受试者可发展为痛风石性痛风。痛风石性痛风描述了称为痛风石的大量尿酸盐晶体的积累。患有这种形式的痛风的受试者可以在关节、滑囊(缓冲和保护组织的充满液体的囊)、骨骼、和软骨、或皮肤下形成痛风石。痛风石可能导致骨骼侵蚀，并且最终导致关节损伤和畸形(称为痛风性关节病)。
在一些实施例中，本文披露的方法和剂量方案中使用的尿酸酶分子是聚乙二醇化尿酸酶。聚乙二醇化尿酸酶是一种单甲氧基聚(乙二醇)(PEG)修饰的重组哺乳动物尿酸酶(尿酸氧化酶)，通过催化UA转化为尿囊素降低血清(或血浆)中的UA水平，尿囊素是一种比尿酸更容易在尿液中***的水溶性代谢物。聚乙二醇化尿酸酶提供减少痛风患者中SUA的治疗机制。聚乙二醇化尿酸酶为以降低SUA和减少痛风石负荷方式应答的患者提供医疗益处。
本文描述了尿酸酶缀合物(例如聚乙二醇化尿酸酶)的耐受性和治疗剂量方案。此外，相对于常规剂量方案，这些给药方案的组合提供了尿酸水平的改善的降低，改善的痛风治疗，降低的抗体应答和预防(例如，延迟)输注反应。
输注反应
在PEG化尿酸酶疗法的情况下，已经显示输注反应(IR)与抗PEG化尿酸酶抗体滴度的增加，对PEG化尿酸酶疗法的应答能力丧失或两者相关。
如本文所用，术语“输注反应”是在疗法期间或之后发生的疗法(例如，尿酸酶疗法)的不期望的和/或非预期的效果，例如不良事件。在一些实施例中，输注反应在尿酸酶疗法期间发生。在其他实施例中，输注反应在尿酸酶疗法后发生。在另外的实施例中，输注反应在尿酸酶疗法后2小时内发生。
在一些实施例中，尿酸酶疗法包括输注，例如尿酸酶静脉内输注。输注反应可以是任何不良事件。在一些实施例中，输注反应是痛风发作。在一些实施例中，输注反应包括荨麻疹、呼吸困难、胸部不适、胸痛、红斑或瘙痒。在一些实施例中，输注反应是过敏性的。在一些实施例中，输注反应是非过敏性的。
在一些实施例中，输注反应包括过敏反应。过敏反应的症状包括全身性荨麻疹；瘙痒或潮红；嘴唇、舌头或悬雍垂肿胀；呼吸***受损(例如，呼吸困难、喘息-支气管痉挛、喘鸣、呼气流量峰值减少，低氧血症)；以及血压降低。
在一些实施例中，输注反应包括免疫复合物相关障碍。免疫复合物相关障碍可以由体内小血管中免疫复合物的沉积引起。免疫复合物相关障碍包括肾小球性肾炎、皮肤血管炎或关节炎。
联合疗法
本文披露了应答于尿酸酶疗法治疗痛风或减少输注反应的方法。在一些实施例中，本文披露的方法包括组合给予***分子和尿酸酶分子。如本文所用，“组合”给予意指在受试者被障碍折磨的过程中向受试者递送两种(或更多种)不同的治疗，例如，在受试者被诊断患有障碍之后且在障碍治愈或消除之前或因其他原因停止治疗之前递送两种或更多种治疗。在一些实施例中，当第二治疗的递送开始时，仍然发生第一治疗的递送，从而在给予方面存在重叠。这有时在本文中称为“同时”或“并行递送”。在其他实施例中，一种治疗的递送在另一种治疗的递送开始之前结束。在任一情况的一些实施例中，由于组合给予，治疗更有效。例如，与在没有第一治疗的情况下施用第二治疗时将看到的情况相比，第二治疗更有效，例如，在较少第二治疗下看到等同效果，或第二治疗在更大程度上减轻症状，或利用第一治疗看到类似的情况。在一些实施例中，递送使得症状或与障碍相关的其他参数的下降大于在没有另一者时递送一种治疗的情况下将观察到的结果。两种治疗的效果可以部分累加、完全累加或大于累加。递送可以使得在递送第二治疗时仍然可以检测到递送的第一治疗的效果。
在一些实施例中，该尿酸酶分子，例如尿酸酶缀合物可以约4mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、或约12mg，例如约8mg的剂量给予。
在一些实施例中，***分子，例如甲基***龙，可以以从约0.1mg/kg至约5mg/kg、约0.2mg/kg至约4mg/kg、约0.3mg/kg至约3mg/kg、约0.4mg/kg至约2mg/kg、或约0.5mg/kg至约1.5mg/kg的范围，或典型地约0.5mg/kg、约0.6mg/kg、约0.7mg/kg、约0.8mg/kg、约0.9mg/kg、约1.0mg/kg、约1.1mg/kg、约1.2mg/kg、约1.3mg/kg、约1.4mg/kg、或约1.5mg/kg的量给予。在其他实施例中，该甲基强的松龙作为均匀的剂量给予，例如约1mg至约500mg、约10mg至约400mg、约20mg至约300mg、约30mg至约200mg、或约50mg至约150mg，或典型地约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约110mg、约120mg、约130mg、约140mg、或约150mg。
在一些实施例中，在尿酸酶分子之前给予***分子，例如甲基***龙。在一些实施例中，在给予尿酸酶分子之前约10分钟或更长时间、约20分钟或更长时间、约30分钟或更长时间、约40分钟或更长时间、约50分钟或更长时间、约1小时或更长时间、约2小时或更长时间、或约3小时或更长时间给予***。在其他实施例中，在给予尿酸酶分子之前约10分钟、约20分钟、约30分钟、约40分钟、约50分钟、约1小时、约2小时或约3小时给予甲基***。在其他实施例中，***和尿酸酶分子的给予部分重叠。
在一个实施例中，***分子静脉内(IV)、肌肉内(IM)，通过输注(IV输注)、口服、直肠或局部给予。
在一些实施例中，治疗周期是每11天、12天、13天、14天、15天、16天、17天或18天重复一次，例如每14天重复一次，例如每隔一周重复一次。在一个实施例中，剂量方案为每隔一周重复一次。
在一些实施例中，剂量方案包括***和尿酸酶分子的一个或多个第一治疗周期，和不含***的尿酸酶分子的一个或多个第二治疗周期。
在一些实施例中，剂量方案包括7、10、12、24、48或更多个治疗周期。
受试者
本文所述的方法可用于治疗受试者，例如人受试者。在一些实施例中，该受试者是患者，例如人患者。在一些实施例中，该受试者患有痛风，例如患有痛风的患者。在一些实施例中，该受试者被诊断患有痛风。在一些实施例中，治疗的受试者显示高尿酸血症，例如，该受试者患有痛风。在某些实施例中，该受试者对降尿酸盐疗法例如口服ULA是难治的或具有降低的应答能力。在一个实施例中，该受试者具有或被鉴定具有对尿酸酶疗法较低的功效(例如，显示抗尿酸酶抗体(例如，抗培戈洛酶抗体)的发生率增加和/或应答于尿酸酶疗法的输注反应的发生率增加)。在一些实施例中，该受试者超重或肥胖，例如，具有基线体重>100kg。
痛风的诊断可以基于通过MRI、X射线或超声确定的关节发炎，滑液分析中晶体的存在，通过血液或尿液测试确定的升高的血清尿酸和/或痛风石。在一些实施例中，该受试者可能患有痛风。在一些实施例中，该痛风是慢性的。在一些实施例中，该痛风是痛风石性痛风。在一些实施例中，该痛风是急性的。在一些实施例中，该痛风是严重的。在一些实施例中，该痛风是轻微的。
在一些实施例中，该受试者可能患有难治性痛风，例如，未能使血清尿酸正常化，和/或具有用ULA(例如黄嘌呤氧化酶抑制剂)未充分控制的体征和症状。在一些实施例中，该受试者先前用口服ULA，例如黄嘌呤氧化酶抑制剂、别嘌呤醇或非布索坦治疗。
血清尿酸饱和点可为约6.8mg/dL。不希望受理论的束缚，认为在高于6mg/dL的浓度下，痛风症状发展的风险稳定增加。在一些实施例中，该受试者患有高尿酸血症，例如，具有血清尿酸水平≥4mg/dl、≥4.1mg/dl、≥4.2mg/dl、≥4.3mg/dl、≥4.4mg/dl、≥4.5mg/dl、≥4.5mg/dl、≥4.6mg/dl、≥4.7mg/dl、≥4.8mg/dl、≥4.9mg/dl、≥5.0mg/dl、≥5.1mg/dl、≥5.2mg/dl、≥5.3mg/dl、≥5.4mg/dl、≥5.5mg/dl、≥5.6mg/dl、≥5.7mg/dl、≥5.8mg/dl、≥5.9mg/dl、≥6.0mg/dl、≥6.1mg/dl、≥6.2mg/dl、≥6.3mg/dl、≥6.4mg/dl、≥6.5mg/dl、≥6.6mg/dl、≥6.7mg/dl、≥6.8mg/dl，例如，具有血清尿酸水平≥6mg/dl。
可以从所要求保护的方法中受益的一类患者是超重或肥胖患者。不希望受理论束缚，在这样的患者中，相对于正常体重的患者，表达为mg/kg的尿酸酶缀合物的剂量可以降低，并且这可以降低治疗的功效。在治疗期开始时具有增加的剂量或增加的剂量频率的治疗剂量方案可以增加这些患者对尿酸酶疗法的应答性。如本文所用，“治疗期”是指特定个体的治疗长度或持续时间，即特定患者或个体被给予尿酸酶分子以降低尿酸水平的时间长度。治疗期可以指如本文所述的给予尿酸酶分子的数周，或者可以指尿酸酶分子的单独给予(即输注)的时间长度。治疗期可根据本文所述的个体而变化。治疗期还指在患者中给予尿酸酶分子之前、同时或之后给予类固醇的时间期。治疗期可根据个体而变化。在一些实施例中，受试者具有体重大于或等于80kg、90kg、100kg、110kg、120kg，例如100kg。在一些实施例中，该受试者已被鉴定为具有大于或等于80kg、90kg、100kg、110kg、120kg，例如100kg的体重。
超重和肥胖的评估可以通过来自美国国立卫生研究院的“成人超重和肥胖的鉴定、评估和治疗临床指南(Clinical Guidelines on the Identification,Evaluation,and Treatment of Overweight and Obesity in Adults)”中定义的体重指数(BMI)的分类来确定。通过将受试者的体重(例如，按千克(kg)计)除以受试者身高(例如，按米(m)计)的平方来获得体重指数。BMI为18.5至24.9的受试者通常被归类为正常体重，而BMI为25.0至29.9的受试者被归类为超重。BMI为30.0或更高的受试者被归类为肥胖，并且可以细分为三类：I类(BMI＝30.0至34.9)；II类(BMI＝35.0至39.9)；和III类(BMI大于或等于40)。
在一个实施例中，受试者超重，例如受试者具有BMI大于或等于25.0但小于或等于29.9。
在另一个实施例中，受试者是或被鉴定为肥胖，例如，该受试者具有BMI大于或等于30，例如大于30、大于35、大于40、大于45、或大于50。
在一些实施例中，受试者是55岁或更大、60岁或更大、65岁或更大、或70岁或更大，例如65岁或更大。在一些实施例中，受试者年龄小于70岁、65岁、60岁或55岁，例如年龄小于65岁。
监测受试者
用于评估给定剂量方案的有效性的合适指标是本领域技术人员已知的。此类指标的实例包括血清尿酸(SUA)或血浆尿酸水平(PUA)的正常化或降低以及尿酸水平的降低或维持。已知持续升高的血浆尿酸(PUA)或血清尿酸(SUA)水平导致尿酸在关节和软组织中沉积。随着尿酸的总身体负担增加，痛风的体征和症状(包括关节炎，其特征在于反复出现的疼痛痛风发作)导致痛风石的发展和关节畸形，伴随因而发生的慢性疼痛/炎症和随之发生的身体功能丧失。
在实施例中，尿酸水平，例如，血清或血浆尿酸水平可以降低至6.8mg/dL或更低、6.7mg/dL或更低、6.6mg/dL或更低、6.5mg/dL或更低、6.4mg/dL或更低、6.3mg/dL或更低、6.2mg/dL或更低、6.1mg/dL或更低、6.0mg/dL或更低、5.9mg/dL或更低、5.8mg/dL或更低、5.7mg/dL或更低、5.6mg/dL或更低、5.5mg/dL或更低、5.4mg/dL或更低、5.3mg/dL或更低、5.2mg/dL或更低、5.1mg/dL或更低、5.0mg/dL或更低、4.9mg/dL或更低、4.8mg/dL或更低、4.7mg/dL或更低、4.6mg/dL或更低、4.5mg/dL或更低、4.4mg/dL或更低、4.3mg/dL或更低、4.2mg/dL或更低、4.1mg/dL或更低、或4.0mg/dL或更低。在实施例中，尿酸水平，例如，血清或血浆尿酸水平，可降低至6.8mg/dL或更低。在实施例中，尿酸水平，例如，血清或血浆尿酸水平，可降低至6mg/dL或更低。在实施例中，在缀合物剂量之前测量尿酸水平，并且对于3次或更多次连续剂量，尿酸水平可以降低至6mg/dl或更低。在实施例中，尿酸水平，例如，血清或血浆尿酸水平，可降低至5.0mg/dl或更低。在实施例中，用本文披露的组合物治疗的受试者具有6mg/ml或更低的SUA或PUA，持续总治疗期的至少70％、至少80％或至少90％。例如，对于24周治疗期，受试者具有6mg/ml或更低的SUA或PUA，持续24周治疗期的至少80％，即，持续至少等于134.4天时间量的时间(24周x 7天/周x 0.8＝134.4天)。在实施例中，受试者的尿酸水平，例如血清或血浆尿酸水平，相对于参考者(例如相对于未治疗的受试者，或治疗前或在先前治疗后的受试者)可以降低。
在实施例中，尿酸水平可以通过免疫吸附测定法测量，例如酶联免疫吸附测定法(ELISA)。在实施例中，在给予尿酸酶缀合物前，例如在给予缀合物前72、48、24、12、6、4或2小时，可以测量尿酸的低谷水平。在实施例中，在给予缀合物后，例如在给予缀合物后0.5、1、2、3、4或5小时，可以测量尿酸的峰值水平。
给定剂量方案的有效性的另一个度量是测量受试者中针对缀合物的抗体水平。抗缀合抗体，例如抗PEG化的尿酸酶抗体，可以例如在受试者的血液中测量。测量抗体水平的方法是本领域熟知的，包括例如酶联免疫吸附测定法(ELISA)。在实施例中，在给予缀合物前，例如在给予缀合物前72、48、24、12、6、4或2小时，可以测量针对缀合物的抗体水平。在实施例中，在给予缀合物后，例如在给予缀合物后0.5、1、2、3、4或5小时，可以测量针对缀合物的抗体水平。
给定剂量方案的有效性的另一个度量是测量受试者的健康评估问卷残疾指数(HAQ-DI)。HAQ-DI旨在评估8个类别的功能能力水平(Bruce和Fries，2003)。它由20个问题组成，代表一系列综合的功能活动(穿衣和梳头、起身、进食、行走、卫生、伸展、抓握和活动)。应答的评分从0(无残疾)到3(完全残疾)。HAQ还包括对疼痛严重程度和整体功能能力的自我评估。在实施例中，受试者的HAQ-DI可以相对于参考者降低。在一些实施例中，该参考者是在较早时间点的该受试者。在一些实施例中，较早的时间点是在治疗之前。在一些实施例中，较早的时间点是在治疗之前即刻。在一些实施例中，较早的时间点是治疗的早期。在一些实施例中，较早的时间点是在先前的治疗后。在实施例中，受试者的HAQ-DI可以在1、2、3或更多类别中降低1分或更多。
给定剂量方案的有效性的另一个度量是受试者中C-反应蛋白的水平。C-反应蛋白(CRP)是在血浆中发现的环状(环型的)五聚体蛋白，其水平应答于炎症而升高，包括炎症病症如痛风。测量蛋白质水平的方法(例如CRP)是本领域熟知的。在实施例中，C-反应蛋白的水平可以相对于参考者降低。在一些实施例中，该参考者是未经治疗的受试者。在一些实施例中，该参考者是正在用尿酸酶治疗的受试者。在一些实施例中，该受试者仅正在接受治疗剂量方案，例如每两周8mg的聚乙二醇-尿酸酶缀合物。
在实施例中，C-反应蛋白的水平可以相对于受试者中在较早的时间点的C-反应蛋白的水平降低。在一些实施例中，较早的时间点是在给予该缀合物之前。在一些实施例中，较早的时间点是在给予缀合物之前即刻。在一些实施例中，相对于给予该缀合物之前受试者中C-反应蛋白的水平，C-反应蛋白的水平可降低10％、20％、30％或更多。
给定剂量方案的有效性的另一个度量是痛风发作的频率。在实施例中，该受试者具有降低的痛风发作的频率。在实施例中，该受试者具有相对于参考者的降低的痛风发作的频率。在一些实施例中，该参考者是未经治疗的受试者。在一些实施例中，该参考者是正在用尿酸酶治疗的受试者。在一些实施例中，该受试者仅正在接受治疗剂量方案，例如每两周8mg的聚乙二醇-尿酸酶缀合物。
在实施例中，该受试者显示痛风发作的频率相对于较早时间点的受试者的痛风发作的频率减少。在一些实施例中，较早的时间点是用缀合物治疗期间的较早时间。在一些实施例中，较早的时间点是用缀合物治疗之前。在一些实施例中，较早的时间点是在用缀合物治疗之前即刻。在实施例中，该受试者显示痛风发作的频率相对于给予缀合物之前的受试者的痛风发作频率降低5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、或90％。
药物组合物
含有尿酸酶分子或尿酸酶缀合物(例如聚乙二醇化尿酸酶)的药物配制品可通过常规技术制备，例如，如在Gennaro,AR(编辑)(1990)Remington’s PharmaceuticalSciences[雷明顿药物科学]，第18版，伊斯顿，宾夕法尼亚州：麦克出版有限公司(MackPublishing Co.)中所述的。用于制备可注射溶液的合适赋形剂包括例如磷酸盐缓冲盐水、乳酸林格氏溶液、水、多元醇和甘油。用于胃肠外注射的药用组合物包含药学上可接受的无菌水性或非水性液体、分散液、混悬液、或乳液，以及仅在使用前重构成无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。这些配制品可含有另外的组分，例如比如防腐剂、增溶剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、缓冲剂、抗氧化剂和稀释剂。
尿酸酶分子或尿酸酶缀合物也可以作为控释组合物提供，用于植入个体中以持续控制体液中升高的尿酸水平。例如，聚乳酸、聚乙醇酸、再生胶原、聚-L-赖氨酸、海藻酸钠、结冷胶、壳聚糖、琼脂糖、多层脂质体和许多其他包含可与生物活性组合物一起配制的可生物消化的或可生物降解的材料的常规长效配制品。当植入或注射时，这些材料逐渐分解并将活性材料释放到周围组织。例如，一种包封PEG-尿酸酶的方法包括美国专利号5,653,974中披露的方法，将其通过引用结合在此。在一些实施例中，该缀合物作为可生物消化的、可生物降解的或其他长效配制品提供。在实施例中，输注泵和基体截留***用于递送尿酸酶分子或尿酸酶缀合物。尿酸酶分子或尿酸酶缀合物也可有利地包封在胶束或脂质体中。脂质体包封技术在本领域中是众所周知的。参见，例如Lasic,D等人，(编辑)(1995)StealthLiposomes.[隐形脂质体]佛罗里达州博卡拉顿:CRC出版社(CRC Press)。
在一些实施例中，该尿酸酶缀合物以纳米载体配制品提供。在一些实施例中，该纳米载体配制品包含脂质纳米颗粒、脂质体、聚合物纳米颗粒、树枝状聚合物或基于表面活性剂的乳液。在一些实施例中，该聚合物纳米颗粒包含聚醚、聚酯、聚氨基酸、聚碳酸酯、聚缩醛、聚缩酮、多糖或其组合中的一种或多种。
在一些实施例中，该纳米载体配制品包含免疫抑制剂。在一些实施例中，该免疫抑制剂是mTOR抑制剂，例如雷帕霉素或雷帕霉素类似物。
本文披露的组合物可降低尿酸盐诱导的肾衰竭高风险患者的血液透析需求，例如器官移植接受者(参见Venkataseshan,VS等人，(1990)Nephron[肾单位]56:317-321)和患有一些恶性疾病的患者。在具有大量结晶尿酸盐(痛风石)积聚的患者中，此类药物组合物可以比目前可用的治疗更快地改善生活质量。
在一个实施例中，该组合物是尿酸酶的溶液。在另一个实施例中，该溶液是无菌的，且适用于注射。在一个实施例中，此类组合物包含尿酸酶作为磷酸盐缓冲盐水中的溶液。在一个实施例中，该组合物提供在小瓶中，任选地具有橡胶注射塞。在一些实施例中，该组合物包含溶液中的尿酸酶，其浓度为每毫升溶液从2至16毫克尿酸酶，每毫升溶液从4至12毫克尿酸酶，或每毫升溶液从6至10毫克尿酸酶。在另一个实施例中，该组合物包含浓度为8毫克/毫升的尿酸酶。在实施例中，尿酸酶的质量是相对于蛋白质质量来测量的。
尿酸酶可以以本领域技术人员已知的任何适当方式给予，例如，静脉内，肌肉内或皮下。在一些实施例中，当静脉内给药时，给予0.5mg至12mg的尿酸酶。在另外的实施例中，当皮下给药时，给予4至24mg的尿酸酶。在一个实施例中，该尿酸酶通过静脉内输注经30至240分钟给予。在一些实施例中，可以使用100至500mL的盐水溶液进行输注。在另一个实施例中，经120分钟给予溶液中的8mg尿酸酶。在一些实施例中，将尿酸酶溶解在250mL的盐水溶液中用于输注。在一些实施例中，盐水溶液包含0.45％或0.9％的氯化钠。在一些实施例中，经3个月、6个月、8个月或12个月的治疗期给予尿酸酶。在其他实施例中，该治疗期为12周、24周、36周或48周。在一个实施例中，治疗期是延长的时间段，例如2年或更长时间，长直至被治疗的受试者的生命年限。此外，可以使用多个治疗期，其中间隔有不治疗的时间，例如治疗6个月，随后不治疗3个月，随后治疗另外的6个月，等等。
实例
实例1：对培戈洛酶的输注反应的预防：美国社区风湿病学实践中两种不同皮质类固醇输注前方案的分析
研究了与氢化可的松相比，使用甲基强的松龙(用于输注前预防)在培戈洛酶给予中对治疗持续时间和输注反应的影响进行了研究。假设与氢化可的松相比使用甲基强的松龙将导致更少的输注反应和更长的治疗持续时间。
设计和程序
在2013年1月与2016年3月期间用培戈洛酶治疗且完成疗程的患者进行了回顾性图表抽取。数据分析中包括92名符合条件的患者的图表。在分析样本中代表了19个地理位置分散的美国以社区为基础的风湿病学实践。
收集的变量包括人口统计资料、副发病变、疾病持续时间、sUA(每次输注前)、培戈洛酶输注日期和时间、输注前预防(包括类固醇和抗组胺药)、以及培戈洛酶前后痛风疗法。
数据分析
输注次数被视为应答变量。年龄、最后输注前的sUA和输注前皮质类固醇(氢化可的松或甲基强的松龙)的类型被视为预测变量。通过多重逻辑回归进行分析，显著性p<0.01作为可接受的显著性水平。
结果
收集了来自96名患者的数据。其中，来自92名患者的数据符合研究纳入标准。由于未达到研究纳入标准，三名患者的记录从分析中删除，一名患者代表极端异常值。研究样本的人口统计资料特征(总结于表1中)与患有慢性难治性痛风的患者的一般人群相似。使用的氢化可的松的平均剂量符合随机对照临床试验中使用的标准输注前预防。
表1.患者人口统计资料和特征。
回归分析
使用皮质类固醇预防的类型、患者年龄(<65与≥65)和终末sUA(最终输注前的sUA)作为预测变量进行多重逻辑回归分析，其中治疗的持续时间(输注次数)作为因变量。甲基强的松龙的使用和终末sUA是治疗持续时间的高度显著(p<0.001)预测因子。甲基强的松龙的使用首次作为治疗持续时间的预测因子进入模型。在含有皮质类固醇预防的类型和输注前sUA的线性模型中，输注前sUA是输注反应的重要预测因子(p<0.001)。对于两组，在开始培戈洛酶治疗之前，sUA水平之间没有显著差异。在仅含有皮质类固醇的类型的线性模型中，皮质类固醇预防的类型是输注反应的显著(p<0.001)预测因子。
输注次数
接受甲基强的松龙作为预防的患者的培戈洛酶输注的平均次数显著(p<0.001)高于接受氢化可的松作为预防的患者(图1)。接受氢化可的松的患者的培戈洛酶输注的范围为3-16，接受甲基强的松龙的患者为3-13。
治疗中止
计划的治疗结束前中止治疗的原因有很多，包括患者选择和输注反应。过早治疗终止的最常见原因是在输注期间存在输注反应。所有输注反应均表现为轻度或中度，症状类似于培戈洛酶关键性试验。当输注反应发生时，通过停止输注或以较慢的速率重新开始输注来控制输注。接受甲基强的松龙作为预防的患者(8.2％)与接受氢化可的松作为预防的患者(41.9％)相比较早终止治疗的比例显著更低(p<0.01)(图2)。
到终止治疗的输注次数
如果治疗持续到计划的持续时间而不是由于患者选择或输注反应终止，则两种类型的预防的平均输注次数都更大(p<0.01)。然而，对于这两种结果，接受甲基强的松龙预防的患者的平均输注次数更多。治疗中止的平均输注次数中的差异不显著(p＝0.18)，最可能的原因是服用甲基强的松龙患者中止的人数较少。对于未中止的治疗，平均输注次数的差异是显著的(p<0.01)(图3)。
结论
当甲基强的松龙用作皮质类固醇用于输注前预防时，研究中的患者接受了显著更多次的输注。这些结果表明，与氢化可的松相比，用于输注前预防的甲基强的松龙可以允许更长的培戈洛酶治疗持续时间。该模式施加显著更高的糖皮质激素负荷，其可以抑制输注反应的症状和/或抑制培戈洛酶药物抗体的形成。作为输注前对于培戈洛酶的预防，甲基强的松龙与氢化可的松相比，需要进一步研究以确定疗效和长期安全性。
等效物
本领域的普通技术人员只使用常规实验就将认识到或能够确定本文描述的本披露内容的具体实施例的许多等效形式。
本发明还涉及如下项：
1.一种降低有需要的受试者的尿酸水平的方法，该方法包括：
给予该受试者尿酸酶分子和类固醇，其中该尿酸酶分子和该类固醇一起降低该受试者的尿酸水平；并且其中所述降低大于单独给予尿酸酶或类固醇。
2.如项1所述的方法，其中在给予该尿酸酶分子之前给予该类固醇。
3.如项2所述的方法，其中在给予该尿酸酶分子前10天、9天、8天、7天、6天、5天、4天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、6小时、4小时、2小时、或1小时给予该类固醇。
4.如项1所述的方法，其中在给予该尿酸酶分子同时给予该类固醇。
5.如项1所述的方法，其中在给予该尿酸酶分子后给予该类固醇。
6.如项5所述的方法，其中在给予该尿酸酶分子后10天、9天、8天、7天、6天、5天、4天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、6小时、4小时、2小时、或1小时给予该类固醇。
7.一种降低有需要的受试者的尿酸水平的方法，该方法包括：
给予该受试者尿酸酶分子和类固醇，其中该尿酸酶分子以足以降低该受试者中尿酸水平的剂量和/或频率给予；
在尿酸水平应答该尿酸酶分子降低后，中止给予该尿酸酶分子；并且
在中止给予该尿酸酶分子后，给予第二非尿酸酶降尿酸盐疗法。
8.如项7所述的方法，其中该第二非尿酸酶降尿酸盐疗法是选自黄嘌呤氧化酶抑制剂、别嘌呤醇和非布索坦的口服降尿酸盐剂(ULA)。
9.如项7或8所述的方法，其中中止该尿酸酶分子后，该受试者的血清尿酸水平≤6mg/dL。
10.如项7-9中任一项所述的方法，其中中止该尿酸酶分子后，该受试者的血清尿酸水平≤6mg/dL，持续6个月或更长时间。
11.如项1-10中任一项所述的方法，其中治疗期包括每4-10天一次给予一剂量的该尿酸酶分子。
12.如项1-10中任一项所述的方法，其中治疗期包括每7天一次给予一剂量的该尿酸酶分子。
13.如项1-10所述的方法，其中治疗期包括：
给予第一剂量的该尿酸酶分子和第一剂量的该类固醇；并且
之后在治疗期期间每14天给予随后剂量的该尿酸酶分子和该类固醇。
14.如项13所述的方法，该方法进一步包括：在该第一剂量后7天给予另外剂量的该尿酸酶分子和该类固醇。
15.如项13所述的方法，其中第一剂量的该尿酸酶分子为12mg，并且随后剂量的该尿酸酶分子为8mg；并且其中该类固醇的第一剂量和随后剂量为从约40mg至约200mg。
16.如项13所述的方法，其中第一剂量的该尿酸酶分子为16mg，并且随后剂量的该尿酸酶分子为8mg；并且其中该类固醇的第一剂量和随后剂量为从约40mg至约200mg。
17.如项1-16中任一项所述的方法，其中尿酸酶分子以约4mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、约12mg、或约16mg的剂量给予；并且其中该类固醇以从约40mg至约200mg的剂量给予。
18.如项1-17中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子以约8mg的剂量给予，并且该类固醇以从约40mg至约200mg的剂量给予。
19.如项15或16所述的方法，其中将第一剂量的该尿酸酶分子和该类固醇给予体重超过120kg的患者。
20.如项1-19中任一项所述的方法，其中治疗期包括给予1个剂量、2个剂量、3个剂量、4个剂量或5个剂量的该尿酸酶分子和该类固醇。
21.如项1-20中任一项所述的方法，其中治疗期包括给予3个剂量的该尿酸酶分子和该类固醇。
22.如项1-21中任一项所述的方法，其中该尿酸酶和该类固醇的一起给予减少该尿酸酶分子的免疫清除，减少应答于该尿酸酶分子的抗体产生，降低对该尿酸酶分子的免疫应答，增加免疫抑制，增加抗原特异性免疫抑制，和/或减少输注反应。
23.如项1-22中任一项所述的方法，该方法包括：每11-18天一次给予一剂量的该尿酸酶分子和该类固醇。
24.如项1-23中任一项所述的方法，该方法包括：每14天一次给予一剂量的该尿酸酶分子和该类固醇。
25.如项1-24中任一项所述的方法，该方法包括：
以约4mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg或约12mg的剂量给予该尿酸酶分子；并且
以从约40mg至约200mg的剂量给予该类固醇。
26.如项1-25中任一项所述的方法，该方法包括以约8mg的剂量给予该尿酸酶分子并且以从约40mg至约200mg的剂量给予该类固醇。
27.如项1-26中任一项所述的方法，该方法包括给予4个剂量、5个剂量、6个剂量、7个剂量、8个剂量、9个剂量、10个剂量、11个剂量、12个剂量、24个剂量或48个剂量的该尿酸酶分子和该类固醇。
28.如项1-27中任一项所述的方法，该方法包括给予4个剂量的该尿酸酶分子和该类固醇。
29.如项1-27中任一项所述的方法，该方法包括给予12个剂量的该尿酸酶分子和该类固醇。
30.如项1-29中任一项所述的方法，其中用该尿酸酶和该类固醇治疗的结果是导致血清尿酸水平降至≤6mg/dL。
31.如项1-30中任一项所述的方法，其中血清尿酸水平降至≤6mg/dL，持续至少6个月。
32.如项1-31中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子是尿酸酶缀合物。
33.如项32所述的方法，其中该尿酸酶缀合物包含聚醚、聚酯、聚氨基酸、聚碳酸酯、聚缩醛、聚缩酮、多糖或其组合中的一种或多种。
34.如项33所述的方法，其中该聚醚选自聚乙二醇和聚丙二醇。
35.如项1-34中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含真菌或微生物尿酸酶。
36.如项35所述的方法，其中该尿酸酶选自黄曲霉、球形节杆菌、芽孢杆菌属物种和产朊假丝酵母尿酸酶。
37.如项1-34中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含无脊椎动物尿酸酶。
38.如项37所述的方法，其中该尿酸酶选自下组，该组由以下组成：黑腹果蝇和拟暗果蝇尿酸酶。
39.如项1-34中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含植物尿酸酶。
40.如项39所述的方法，其中该尿酸酶来自大豆。
41.如项1-34中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含哺乳动物尿酸酶。
42.如项41所述的方法，其中该哺乳动物尿酸酶选自下组，该组由以下组成：牛、猪、绵羊和狒狒尿酸酶。
43.如项1-41中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含嵌合尿酸酶，该嵌合尿酸酶包含来自两种或更多种哺乳动物尿酸酶的氨基酸。
44.如项42所述的方法，其中该尿酸酶分子包含重组猪-狒狒嵌合尿酸酶。
45.如项1-33或41-44中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含与SEQ ID NO:8至少90％相同的序列。
46.如项1-33或41-44中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列。
47.如项1-44中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含在其氨基末端、其羧基末端或两者处截短3-10个氨基酸的尿酸酶。
48.如项1-44中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含在其氨基末端、其羧基末端或两者处截短4-13个氨基酸的尿酸酶。
49.如项1-44中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含在其氨基末端、其羧基末端或两者处截短6个氨基酸的尿酸酶。
50.如项1-33中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的猪尿酸酶。
51.如项1-33中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含具有被氨基酸取代D7T、S46T、R291K和T301S修饰的SEQ ID NO:2的氨基酸序列的猪尿酸酶。
52.如项1-33中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含SEQ ID NO:1、SEQ IDNO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、或SEQ ID NO:8中任一个的氨基酸序列。
53.如项1-52中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子是聚乙二醇化的。
54.如项1-53中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含四个相同的非共价结合的尿酸酶单体亚基。
55.如项1-54中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子是四聚体。
56.如项1-33中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子包含脱-(1-6)-[7-苏氨酸,46-苏氨酸,291-赖氨酸,301-丝氨酸]猪-狒狒尿酸酶的氨基酸序列。
57.如项53所述的方法，其中该尿酸酶分子包含单甲氧基聚(乙二醇)修饰的重组哺乳动物尿酸酶。
58.如57所述的方法，其中该尿酸酶分子是培戈洛酶
59.如项1-58中任一项所述的方法，其中该受试者患有高尿酸血症。
60.如项1-59中任一项所述的方法，其中该受试者患有痛风、慢性痛风、难治性痛风或痛风石性痛风。
61.如项1-60中任一项所述的方法，其中该受试者先前用口服降尿酸盐疗法、黄嘌呤氧化酶抑制剂、别嘌呤醇和非布索坦中的一种或多种治疗。
62.如项1-61中任一项所述的方法，其中该受试者具有体重≥约80kg、90kg、100kg、110kg、或120kg。
63.如项1-62中任一项所述的方法，其中该受试者是≥55、60、65、或70岁。
64.如项1-63中任一项所述的方法，其中该方法包括改善或减轻该受试者中高尿酸血症的至少一种症状或可测量的生理参数。
65.如项1-64中任一项所述的方法，其中该方法包括改善或减轻该受试者中痛风的至少一种症状或可测量的生理参数。
66.如项1-65中任一项所述的方法，其中该方法包括降低该受试者的尿酸水平，减少痛风发作的发生率，减少关节炎症，减少痛风石的形成，减少痛风性关节炎和/或减少尿酸肾病。
67.如项1-66中任一项所述的方法，其中该方法包括降低该受试者的C-反应蛋白水平。
68.如项1-67中任一项所述的方法，其中该方法包括降低该受试者的健康评估问卷残疾指数(HAQ-DI)。
69.如项1-68中任一项所述的方法，其中该方法包括改善或减轻痛风、慢性痛风、难治性痛风或痛风石性痛风。
70.如项1-69中任一项所述的方法，其中该方法包括延迟或预防该受试者的输注反应。
71.如项1-70中任一项所述的方法，其中该方法包括降低或预防该受试者对该尿酸酶的抗体应答。
72.如项1-71中任一项所述的方法，该方法进一步包括在给予该尿酸酶分子之前或同时给予至少一种免疫抑制剂。
73.如项1-72中任一项所述的方法，该方法进一步包括在给予该尿酸酶分子之前或同时给予至少一种抗炎化合物。
74.如项73所述的方法，其中该抗炎化合物选自皮质类固醇、抗组胺药、秋水仙碱和非类固醇抗炎药(NSAID)。
75.如项74所述的方法，其中该皮质类固醇选自下组，该组由以下组成：***、氢化可的松、甲基强的松龙、Depo-Medrol、Solu-Medrol。
76.如项1-74中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子和该类固醇以药物组合物给予。
77.如项1-75中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子和该类固醇以纳米载体配制品给予。
78.如项1-76中任一项所述的方法，其中该尿酸酶分子和该类固醇通过静脉内输注给予。
79.一种试剂盒，其包含：
尿酸酶分子；
类固醇；以及
对于在项1-77中任一项所述的方法中使用的说明书。
80.一种治疗受试者慢性痛风的方法，该方法包括：
给予该受试者尿酸酶分子和类固醇，其中该尿酸酶和该类固醇一起降低该受试者的尿酸水平。
81.一种治疗受试者慢性痛风的方法，该方法包括：
给予该受试者尿酸酶分子和类固醇，其中该尿酸酶分子以足以降低该受试者中尿酸水平的剂量和/或频率给予；
在尿酸水平应答该尿酸酶分子降低后，中止给予该尿酸酶分子；并且
在中止给予该尿酸酶分子后，给予第二非尿酸酶降尿酸盐疗法。

Claims (10)

1.一种降低有需要的受试者的尿酸水平的方法，该方法包括：
给予该受试者尿酸酶分子和类固醇，其中该尿酸酶分子和该类固醇一起降低该受试者的尿酸水平；并且其中所述降低大于单独给予尿酸酶或类固醇。
2.如权利要求1所述的方法，其中在给予该尿酸酶分子之前给予该类固醇。
3.如权利要求2所述的方法，其中在给予该尿酸酶分子前10天、9天、8天、7天、6天、5天、4天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、6小时、4小时、2小时、或1小时给予该类固醇。
4.如权利要求1所述的方法，其中在给予该尿酸酶分子同时给予该类固醇。
5.如权利要求1所述的方法，其中在给予该尿酸酶分子后给予该类固醇。
6.如权利要求5所述的方法，其中在给予该尿酸酶分子后10天、9天、8天、7天、6天、5天、4天、4天、3天、2天、1天、18小时、12小时、6小时、4小时、2小时、或1小时给予该类固醇。
7.一种降低有需要的受试者的尿酸水平的方法，该方法包括：
给予该受试者尿酸酶分子和类固醇，其中该尿酸酶分子以足以降低该受试者中尿酸水平的剂量和/或频率给予；
在尿酸水平应答该尿酸酶分子降低后，中止给予该尿酸酶分子；并且
在中止给予该尿酸酶分子后，给予第二非尿酸酶降尿酸盐疗法。
8.如权利要求7所述的方法，其中该第二非尿酸酶降尿酸盐疗法是选自黄嘌呤氧化酶抑制剂、别嘌呤醇和非布索坦的口服降尿酸盐剂(ULA)。
9.如权利要求7或8所述的方法，其中中止该尿酸酶分子后，该受试者的血清尿酸水平≤6mg/dL。
10.如权利要求7-9中任一项所述的方法，其中中止该尿酸酶分子后，该受试者的血清尿酸水平≤6mg/dL，持续6个月或更长时间。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2604399A1 (en) 2005-04-11 2006-10-19 Savient Pharmaceuticals, Inc. Variant forms of urate oxidase and use thereof
KR101861547B1 (ko) 2009-06-25 2018-07-02 크레알타 파마슈티칼스 엘엘씨 페길화된 유리카아제 치료 중에 혈청 요산을 모니터링하여 주입 반응의 위험성 및 반응의 항체­매개 상실을 예측하는 방법 및 키트
AU2018297309A1 (en) 2017-07-07 2020-01-30 Allena Pharmaceuticals, Inc. Recombinant uricase enzyme
WO2020160322A1 (en) * 2019-01-30 2020-08-06 Horizon Pharma Rheumatology Llc Tolerization reduces intolerance to pegloticase and prolongs the urate lowering effect (triple)
CN111088268B (zh) * 2019-03-05 2022-08-02 北京锦篮基因科技有限公司 一种高尿酸血症的基因治疗药物
WO2021042055A1 (en) * 2019-08-30 2021-03-04 Horizon Pharma Rheumatology Llc Pegloticase for treatment of gout in renal transplant recipients
CN114807286B (zh) * 2022-05-10 2023-09-15 华中药业股份有限公司 一种基于静息细胞转化精制醋酸***的方法
CN115433756B (zh) * 2022-08-30 2024-04-09 山东新华制药股份有限公司 一种***龙的制备方法

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DD279486A1 (de) 1986-03-10 1990-06-06 Akad Wissenschaften Ddr Verfahren zur aktivierung von hydroxylgruppenhaltigen polymeren verbindungen
US5324844A (en) 1989-04-19 1994-06-28 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
US5286637A (en) 1989-08-07 1994-02-15 Debiopharm, S.A. Biologically active drug polymer derivatives and method for preparing same
US5653974A (en) 1990-10-18 1997-08-05 Board Of Regents,The University Of Texas System Preparation and characterization of liposomal formulations of tumor necrosis factor
US6783965B1 (en) 2000-02-10 2004-08-31 Mountain View Pharmaceuticals, Inc. Aggregate-free urate oxidase for preparation of non-immunogenic polymer conjugates
CA2604399A1 (en) * 2005-04-11 2006-10-19 Savient Pharmaceuticals, Inc. Variant forms of urate oxidase and use thereof
CZ2007700A3 (cs) 2005-04-11 2008-02-27 Savient Pharmaceuticals, Inc. Variantní forma urátoxidázy a její použití
US20080159976A1 (en) * 2005-04-11 2008-07-03 Jacob Hartman Methods for lowering elevated uric acid levels using intravenous injections of PEG-uricase
US9534013B2 (en) 2006-04-12 2017-01-03 Horizon Pharma Rheumatology Llc Purification of proteins with cationic surfactant
TW201016208A (en) 2008-09-15 2010-05-01 Elan Pharm Inc Methods of treatment of hyperuricemia and associated disease states
WO2010071865A1 (en) 2008-12-19 2010-06-24 Nuon Therapeutics, Inc. Pharmaceutical compositions and methods for treating hyperuricemia and related disorders
US20100160351A1 (en) * 2008-12-19 2010-06-24 Nuon Therapeutics, Inc. Pharmaceutical compositions and methods for treating hyperuricemia and related disorders
WO2011032175A1 (en) 2009-09-14 2011-03-17 Nuon Therapeutics, Inc. Combination formulations of tranilast and allopurinol and methods related thereto
MX357510B (es) * 2011-11-04 2018-07-12 Cymabay Therapeutics Inc Metodos para tratar ataques de gota.

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