CN116615254A - 对胰高血糖素、glp-1和gip受体全部具有活性的三角激动剂在治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症中的用途 - Google Patents

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CN116615254A CN202180077958.9A CN202180077958A CN116615254A CN 116615254 A CN116615254 A CN 116615254A CN 202180077958 A CN202180077958 A CN 202180077958A CN 116615254 A CN116615254 A CN 116615254A
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Abstract

提供了对胰高血糖素、GLP‑1和GIP受体全部具有活性的三角激动剂和/或其缀合物在预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症中的用途。

Description

对胰高血糖素、GLP-1和GIP受体全部具有活性的三角激动剂 在治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症中的用途
技术领域
本发明涉及对胰高血糖素、GLP-1、GIP受体全部具有活性的三角激动剂(三重激动剂，trigonal agonist)和/或其缀合物在预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症中的用途。
背景技术
呼吸道感染性疾病是因感染病原体(病毒、细菌、支原体、真菌等)而引起的呼吸道疾病。代表性呼吸道感染性疾病包括病原性病毒感染引起的呼吸道病毒感染性疾病。呼吸道感染性疾病可引起轻度上呼吸道感染和重度下呼吸道感染，伴有肺炎和支气管炎，并对心肺功能损害者可能致命。
在呼吸道病毒当中，一种引起冠状病毒病-19(COVID-19)的SARS-CoV-2(2019-nCoV或SARS-CoV-2)具有高度感染性，并且还出现了几种感染性很强的SARS-CoV-2病毒变体，从而在全球范围内造成大流行病。由于通过呼吸道传播的新型冠状病毒通过主要在II型肺泡上皮细胞中表达的ACE2和TMPRSS2穿透到细胞中，因此肺被认为是主要易感器官。主要症状包括发烧、咳嗽等，并且健康成年人很可能经过时间康复。然而，在一些患者中，极端的免疫反应如细胞因子释放综合征会引起肺损伤并且促进肺纤维化的进展，这可能伴有诸如急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、脓毒症等的症状。
患有诸如新型冠状病毒的呼吸道感染性疾病的患者即使完全康复也会留下后遗症，并且常给日常生活造成困难，而这些后遗症往往可能是细胞因子风暴所致，从而导致肺损伤。
关于已在全世界造成大流行病的SARS-CoV-2病毒，据报告，感染后会出现超免疫反应，导致重度肺炎和急性呼吸窘迫综合征，在完全康复后也会留下后遗症。
已知超免疫反应的代表性机理是炎症小体(inflammasome)复合物过度分泌促炎细胞因子，炎症小体复合物是负责因感染SARS-CoV-2病毒而激活炎性反应的胞质多蛋白寡聚体，并且激活的巨噬细胞引起组织损伤，同时强烈地表现出炎性巨噬细胞的特性。此外，细胞因子风暴引起的超免疫炎性反应可能会损害肺以外的其它主要器官。
由于超免疫炎性反应，即使从呼吸道病毒感染中完全康复后，仍会留下各种后遗症，因此，即使在呼吸道感染性疾病治疗后，适当的治疗和管理也是很重要的。例如，在冠状病毒病-19患者的情况下，即使在康复后，也会出现各种后遗症如呼吸困难、咳嗽、胸闷、极度疲劳、心脏病、肺功能丧失、肾损伤等。具体地，已知随着冠状病毒病-19的风险变得更高或症状更加严重，后遗症的风险也会增加(Deependra Kumar Rai et al.,IndianJTuberc.2020Nov 10)。
COVID-19后肺纤维化(Post-COVID-19pulmonary fibrosis)是冠状病毒病-19患者经历的后遗症之一，已知主要由病毒感染造成的肺损伤引起。病毒感染引起的过度免疫反应(细胞因子风暴)是导致肺损伤的主要原因之一。
肺纤维化是冠状病毒病-19之后出现的后遗症，其症状的发作和进展比肺纤维化中通常观察到的要快得多。因此，与现有的侧重于从长期角度缓解症状和延缓进展的肺纤维化治疗剂不同，需要能够同时靶向作为肺纤维化病因的肺部炎症以及纤维化的治疗方法。然而，尚未鉴定出有效的治疗剂。例如，有人提出使用被称为抗纤维化剂(anti-fibrotic agents)的吡非尼酮(pirfenidone)或尼达尼布(nintedanib)进行治疗的可能性，但其功效有限，因为它们对肺部炎症本身没有表现出相对大的作用。此外，由于大多数冠状病毒病-19患者表现出肝功能障碍，并且广泛归类为吡非尼酮或尼达尼布的抗纤维化剂极有可能导致肝毒性，因此很难向遭受冠状病毒病-19后的后遗症的患者开出通常已知的抗纤维化剂的处方(Deependra Kumar Rai et al.,Indian J Tuberc.2020Nov 10)。
最后，尽管正在开发各种治疗剂以治疗由呼吸道病毒引起的感染性疾病，但开发出能够通过抑制炎性反应而使肺损伤如肺纤维化程度最低的用于预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的治疗剂仍不令人满意。
另一方面，胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)是代表性胃肠激素和神经元激素，并且是参与根据食物摄入控制血糖水平的物质。胰高血糖素是由胰腺分泌的肽激素并且连同上述两种物质参与控制血糖水平。利用能够作用于GLP-1受体、GIP受体和胰高血糖素受体各自或全部的药物的治疗正在开发中(US 10,370,426、US10,400,020)。
到目前为止，关于呼吸道感染性疾病后的后遗症的研究已经进行了各种各样的研究，但是对于实用且有效的治疗剂的开发还不够。因此，需要持续开发治疗剂。
发明内容
【技术问题】
需要开发用于预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的治疗剂。
【技术方案】
本发明的目的是提供用于预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的药物组合物，所述药物组合物包括对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽或所述肽的长效缀合物。
本发明的另一个目的是提供预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的方法，所述方法包括向有需要的个体施用包括所述肽或所述肽的长效缀合物的组合物的步骤。
本发明的又一个目的是提供包括所述肽或所述肽的长效缀合物的组合物在制备用于呼吸道感染性疾病后的后遗症的预防剂或治疗剂中的用途。
本发明的又一个目的是提供包括所述肽或所述肽的长效缀合物的组合物在预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症中的用途。
【有利效果】
根据本发明的三角激动剂或其长效缀合物可对胰高血糖素受体、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体具有活性，从而表现出预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的效果。
附图说明
图1A显示了根据SEQ ID NO:42的长效缀合物的施用在SARS-CoV-2感染的仓鼠中降低的肺细胞因子表达，而图1B显示了肺部炎症评分的变化；以及
图2显示了根据SEQ ID NO:42的长效缀合物的施用在细胞因子风暴诱导的仓鼠的肺纤维化区域中的变化。
具体实施方式
实现本发明的一个实施方式提供了用于预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的药物组合物，所述药物组合物包括对胰高血糖素受体、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体具有活性的肽。
在一个具体实施方式中，用于预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的药物组合物的特征在于包括药学上可接受的赋形剂和药学有效量的包含SEQ ID NO:1-102的任一个氨基酸序列的肽。
根据任一项具体实施方式的药物组合物的特征在于所述肽是长效缀合物的形式，其中所述长效缀合物由下列化学式1表示：
[化学式1]
X–L–F
其中X是包含SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列的肽；
L是包括乙二醇重复单元的连接体，
F是免疫球蛋白Fc区，并且
–表示X和L之间以及L和F之间的共价键合。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述呼吸道感染性疾病是呼吸道病毒感染性疾病。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述呼吸道病毒感染性疾病是由选自下列的任一种呼吸道病毒引起的感染性疾病：腺病毒、牛痘病毒、单纯疱疹病毒、副流感病毒、鼻病毒、水痘带状疱疹病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞体病毒、登革热病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、冠状病毒、严重急性呼吸综合征相关病毒(SARS相关病毒)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述冠状病毒是SARS-CoV-2。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述呼吸道病毒是变体病毒。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述变体呼吸道病毒引起与所述呼吸道病毒引起的后遗症相同的后遗症。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述变体呼吸道病毒是选自下列的任一种：SARS-CoV-2α变体(B.1.1.7谱系)、SARS-CoV-2β变体(B.1.351谱系)、SARS-CoV-2γ变体(P.1谱系)和SARS-CoV-2δ变体(B.1.617.2谱系)。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述呼吸道感染性疾病后的后遗症是选自下列的任一种或多种：发热、呼吸困难、咳嗽、肺炎、肺纤维化、疼痛、肌痛、疲劳、炎症和神经***障碍。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述呼吸道感染性疾病后的后遗症是由过度细胞因子分泌造成的组织损伤引起的。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述呼吸道感染性疾病后的后遗症是COVID-19后肺纤维化。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述药物组合物在施用时具有下列特征中的一种或多种：
(i)肺部炎症评分降低；
(ii)促炎细胞因子的表达或分泌减少；
(iii)肺纤维化区域减小；和
(iv)炎症小体复合物的产生受到抑制。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述细胞因子是选自下列的任一种或多种：白细胞介素、肿瘤坏死因子和干扰素。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述细胞因子是IL-1β、TNF-α或IFN-γ。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述药物组合物被施用于患有细胞因子风暴综合征、脓毒症或由于呼吸道病毒感染导致的器官衰竭的个体。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述肽在其C-末端被酰胺化。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述肽被酰胺化或在其C-末端具有游离羧基(–COOH)。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述肽包含选自SEQ ID NO:21、22、42、43、50、77和96的氨基酸序列。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述肽具有在氨基酸残基之间形成的环。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述肽序列具有在从N-末端起第16位氨基酸和第20位氨基酸之间形成的环。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区是非糖基化的(aglycosylated)。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区选自(a)CH1结构域、CH2结构域、CH3结构域和CH4结构域；(b)CH1结构域和CH2结构域；(c)CH1结构域和CH3结构域；(d)CH2结构域和CH3结构域；(e)CH1结构域、CH2结构域、CH3结构域和CH4结构域中的一个结构域或者两个或更多个结构域与免疫球蛋白铰链区或所述铰链区的部分的组合；和(f)重链恒定区和轻链恒定区的每个结构域的二聚体。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区缺失能够形成二硫键的区域、缺失天然Fc形式的N-末端处的几个氨基酸、向所述天然Fc形式的N-末端添加甲硫氨酸残基、缺失补体结合位点或缺失抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)位点。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区衍生自IgG、IgA、IgD、IgE或IgM。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述F是IgG Fc区。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区是IgG4 Fc区。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区是人IgG4衍生的非糖基化Fc区。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区具有两条多肽链经由二硫键连接的结构，其中它们仅经由所述两条链中的一条链的氮原子连接。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区具有二聚体形式。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区包括具有SEQID NO:123的氨基酸序列的单体。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区是具有SEQID NO:123的氨基酸序列的单体的同型二聚体。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区经由其N-末端的脯氨酸氮原子连接。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区、F和X不是糖基化的。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述免疫球蛋白Fc区是不同来源的结构域杂合体，所述不同来源衍生自选自IgG、IgA、IgD、IgE和IgM的免疫球蛋白。
根据任一项具体实施方式所述的组合物的特征在于区域F是由两条多肽链组成的二聚体，并且L的一端仅与所述两条多肽链中的一条多肽链连接。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于在所述缀合物中，F和X经由共价键彼此连接，所述共价键是通过分别使L的一端与F的胺基或硫醇基反应和使L的另一端与X的胺基或硫醇基反应形成的。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于L是聚乙二醇。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述乙二醇重复单元由[OCH2CH2]n表示，其中n是自然数，n被确定使得所述肽缀合物中[OCH2CH2]n的平均分子量，例如数均分子量为1kDa至100kDa。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于n的值被确定使得所述肽缀合物中[OCH2CH2]n的平均分子量，例如数均分子量为10kDa。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于以L表示的所述乙二醇重复单元的式量在1kDa至100kDa的范围内。
根据任一项具体实施方式的组合物的特征在于所述肽包含选自SEQ ID NO:21、22、42、43、50、77和96的氨基酸序列。
实现本发明的另一个实施方式提供了预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的方法，所述方法包括向有需要的个体施用所述肽、其长效缀合物或包括其的组合物的步骤。
实现本发明的又一个实施方式提供了所述肽、其长效缀合物或包括其的组合物在制备用于呼吸道感染性疾病后的后遗症的预防剂或治疗剂中的用途。
实现本发明的又一个实施方式提供了所述肽、其长效缀合物或包括其的组合物在预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症中的用途。
实施本发明的方式
在下文中，将更详细地描述本公开。
与此同时，本公开所公开的各个描述和实施方式都可适用于其它描述和实施方式。即，本公开所公开的各种要素的所有组合都落入本公开的范围内。此外，本公开的范围不受下文具体描述的限制。
在整个说明书中，不仅对天然存在的氨基酸使用常见的单字母和三字母代码，而且使用通常允许用于其它氨基酸的三字母代码，如2-氨基异丁酸(Aib)、N-甲基甘氨酸(Sar)和α-甲基-谷氨酸等。此外，本文中以缩写方式提到的氨基酸按照下列IUPAC-IUB规则来描述：
如本文所用，“Aib”可与“2-氨基异丁酸”或“氨基异丁酸”互换使用，并且2-氨基异丁酸和氨基异丁酸可彼此互换使用。
实现本发明的一个实施方式提供了用于预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的药物组合物，所述药物组合物包括对胰高血糖素受体、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体具有活性的肽。
在一个实施方式中，所述肽可包含SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列。
在另一个实施方式中，用于预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的药物组合物可以是包括药学上可接受的赋形剂和药学有效量的包含SEQ ID NO:1-102的任一个氨基酸序列的肽的药物组合物。如本文所用，术语“药学有效量”可以指安全施用剂量，以此剂量，所述肽或其长效缀合物对呼吸道感染性疾病后的后遗症表现出治疗效果，但对患者不表现出毒性或副作用。具体地，药学有效量可以指能够通过减少细胞因子分泌和/或表达获得诸如抑制炎性反应和抑制纤维化的效果的剂量，但不限于此。
本发明的呼吸道感染性疾病可以是由病原体(病毒、细菌、真菌等)感染引起的呼吸道疾病，并且感染的代表性病因可包括呼吸道病毒。在呼吸道感染性疾病中，呼吸道病毒感染性疾病可以指病原性病毒感染引起的呼吸道疾病。呼吸道病毒可包括腺病毒、牛痘病毒、单纯疱疹病毒、副流感病毒、鼻病毒、水痘带状疱疹病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞体病毒、登革热病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、冠状病毒、严重急性呼吸综合征相关病毒(SARS相关病毒)或中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)，但不限于此。此外，在本发明中，呼吸道病毒可包括变体病毒，其中突变发生在基因组序列或性状中，但不限于此。本发明的变体病毒可以指与呼吸道病毒相比，即使具有突变也可能引起相同后遗症的病毒。
冠状病毒的非限制性示例可包括SARS-CoV-2，而SARS-CoV-2感染可引起冠状病毒病-19(冠状病毒病2019，COVID-19)。在本发明中，SARS-CoV-2病毒可包括变体病毒，而变体病毒的具体示例可包括变体病毒如α(B.1.1.7谱系)、β(B.1.351谱系)、γ(P.1谱系)、δ(B.1.617.2谱系)等，但不限于此，只要它们是具有可表现出与SARS-CoV-2病毒不同的性状，或可诱导与其不同的性状的突变的病毒即可。
本发明的药物组合物可预防、治疗或改善后遗症，而不限于呼吸道病毒及其变体。
如本文所用，术语“冠状病毒病-19”是指由新型冠状病毒(2019-nCoV或SARS-CoV-2)感染引起的病毒感染性疾病。虽然传播的来源和方式尚未明确，但传播力是非常强大的，造成了世界性大流行病。
新型冠状病毒(2019-nCoV或SARS-CoV-2)是一种能够感染人类和各种动物的病毒。它是一种RNA病毒，基因大小为27kb至32kb，并且主要表现为咳嗽伴随发热、呼吸困难、气促、咳痰等呼吸道症状。已知冠状病毒攻击支气管纤毛细胞或2型肺泡上皮细胞，其中受体如“ACE2”、“TMPRSS2”等大量存在，有助于穿透到细胞中。
与其它病毒一样，冠状病毒会攫取宿主细胞的资源和***，剧烈增殖，然后从被感染的细胞中释放出来。此时，指数增殖的病毒逃逸并迅速浸润到周围健康的纤毛细胞和II型肺泡上皮细胞中。被感染的细胞诱导各种炎性细胞(包括能够分泌导致强烈炎症的细胞因子物质的巨噬细胞)的浸润、增殖和活化，从而导致继发性症状(发热、咳嗽、呼吸困难等)。
细胞因子是免疫细胞分泌的蛋白质，并通过诱导巨噬细胞增殖或促进分泌细胞自身分化参与免疫反应。当呼吸道病毒感染导致细胞因子过度分泌时，它们会引起过度的免疫反应，造成组织或器官损伤——被称为细胞因子风暴综合征。由于这种细胞因子风暴综合征，呼吸道病毒感染后会留下组织损伤、组织纤维化和组织功能丧失等后遗症。
在冠状病毒病-19患者中，由于SARS-CoV-2感染，肺组织中发生免疫细胞活化，特别是，活化的单核细胞通过血流浸润到肺组织中，除了消除病毒外，还由于过度的免疫反应引起组织损伤。细胞因子风暴综合征可能是自冠状病毒病-19完全康复后留下的后遗症的主要病因。
细胞因子可以是促炎细胞因子，而其具体的示例包括白细胞介素、肿瘤坏死因子、干扰素、TGFβ、GM-CSF、G-CSF等。白细胞介素的非限制性示例可包括IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8等，肿瘤坏死因子的非限制性示例可包括TNF-α、TNFβ等，以及干扰素的非限制性示例可包括IFNα、IFNβ、IFNγ等。
如本文所用，术语“呼吸道感染性疾病后的后遗症”是指呼吸道感染性疾病患者经呼吸道感染性疾病治疗后独立地出现的异常症状。在本发明中，呼吸道感染性疾病后的后遗症可以具体地是呼吸道病毒感染性疾病后的后遗症，更具体地是冠状病毒病-19(COVID-19)后的后遗症，但不限于此。
本发明的呼吸道感染性疾病后的后遗症是指去除感染源后留下的组织变形或功能障碍等病理状态，而这些症状包括发热、呼吸困难、咳嗽、肺炎、肺纤维化、疼痛、肌痛、疲劳、炎症、神经***障碍等。在本发明中，呼吸道感染性疾病后的后遗症可由细胞因子分泌过度导致的组织损伤引起，但不限于此。
如本文所用，术语“冠状病毒病-19(COVID-19)后遗症(COVID-19后遗症)”是指SARS-CoV-2感染后在患者中发生的后遗症。就冠状病毒病-19而言，已知已完全康复的患者常常抱怨慢性疲劳、疼痛、呼吸困难等持续性症状。此类冠状病毒病-19后遗症也称为慢性冠状病毒病-19(长期COVID)，并且冠状病毒病-19及其后遗症非常严重，因此在美国，遭受冠状病毒病-19后遗症的患者被称为“长期症状患者(long-haulers)”。
具体地，冠状病毒病-19后遗症可包括但不限于发热、呼吸困难、咳嗽、肺炎、肺纤维化、疼痛、肌痛、疲劳、炎症、神经***障碍等。
特别地，冠状病毒病-19后遗症可表现为呼吸道(特别是肺)的功能障碍和/或损伤，但不限于此。具体地，在炎症和/或纤维化进展的肺中，发生难以恢复的组织损伤，并发生功能丧失。纤维化导致的肺容量减少可导致呼吸困难、咳嗽、疼痛等。
就本发明的目的而言，根据本发明的肽或其长效缀合物可在从呼吸道病毒感染性疾病或冠状病毒病-19完全恢复之前和/或之后，或在恢复期间，独立于抗病毒活动来预防在呼吸道病毒感染的患者中发生的异常器官损伤和/或可帮助改善和恢复受损器官。
如本文所用，术语“肺炎”是指在肺的实质组织或肺泡中发生炎症的状况，并且具体指在患有呼吸道感染性疾病的患者中或在已自其康复的患者中发生的炎症。就本发明的目的而言，肺炎可以指由呼吸道病毒感染引起的急性肺炎。由于这种慢性炎症，肺组织可能会出现损伤和/或纤维化症状。
作为冠状病毒病-19的严重后遗症，COVID-19后肺纤维化是已知的。
肺纤维化是指在肺部中各种应激(化学刺激、辐射等)造成损伤后的伤口愈合过程中，组织由于失去正常控制而过度纤维化的状态。免疫机制正常的人，其肺功能可望恢复正常，但炎症(肺炎)严重的患者的双肺会发生出血和充血而难以恢复到正常状态，并且还可能因粘连而发生纤维化。特别是在呼吸道感染性疾病患者中，会发生针对感染的过度免疫反应，并且纤维化症状常常发展为后遗症。已知在遭受中度或更严重的冠状病毒病-19症状的患者中，由于免疫反应过度导致的肺纤维化以及肺损伤和肺功能障碍更为常见。
特别地，在冠状病毒病-19的患者中，具有抑制肺中炎症的功能的巨噬细胞被源自血液单核细胞的促炎巨噬细胞替代，并且存在于肺上皮细胞或免疫细胞中的炎症小体复合物被激活，导致由于超免疫反应如严重肺炎和细胞因子风暴引起的后遗症。因此，为了减少冠状病毒病-19患者的后遗症，重要的是通过抑制过度免疫反应来抑制肺损伤和纤维化。
炎症小体复合物(或炎症小体)是一种多蛋白细胞内复合物，其激活促炎细胞因子白细胞介素-1b(IL-1b)和IL-18，并参与免疫反应，如诱导被称为细胞焦亡(pyroptosis)的细胞死亡等。已知在冠状病毒病-19患者中，由于炎症小体复合物的活性而发生细胞因子分泌过度和细胞因子风暴，从而导致后遗症。
根据本发明的肽或其缀合物可抑制炎症小体复合物的产生及其活性，并且可减少IL-1β、TNF-α、IFN-γ细胞因子的分泌和/或表达，IL-1β、TNF-α、IFN-γ细胞因子是在冠状病毒病-19患者中表达的代表性炎性因子，从而预防在冠状病毒病-19患者中由于病毒感染而发生的细胞因子风暴，并且还改善诸如肺损伤和肺纤维化等后遗症。换句话说，根据本发明的肽或其缀合物可改善由于呼吸道病毒感染引起的过度免疫反应，从而通过同时抑制炎症和纤维化来改善呼吸道病毒感染性疾病后的后遗症。
就本发明的目的而言，根据本发明的包括所述肽或其缀合物的药物组合物在向患有呼吸道感染性疾病后的后遗症的个体施用时可具有下列特征中的一种或多种：
(i)减轻由冠状病毒感染引起的肺部炎症；和
(ii)减轻伴随肺部炎症的COVID-19后肺纤维化。
具体地，所述药物组合物在施用时可具有下列特征中的一种或多种：
(i)肺部炎症评分降低；
(ii)促炎细胞因子的表达或分泌减少；
(iii)肺纤维化区域减小；和
(iv)炎症小体复合物的产生受到抑制。
所述药物组合物的特征可包括由于纤维化而增加的肺部重量的减少或通过根据本发明的包括所述肽或其缀合物的药物组合物造成纤维沉积的减少，但不限于此。
在本发明中，细胞因子可以是选自白细胞介素、肿瘤坏死因子和干扰素中的任一种或多种，并且具体地，细胞因子可以是IL-1β、TNF-α或IFN-γ，但不限于此。
本发明的肽(三角激动剂)的特征可改善作为COVID-19后肺纤维化的主要病因的肺炎症，并且还可直接改善肺纤维化(双重抑制作用)，表明了抑制和改善作为冠状病毒病-19后遗症发生的COVID-19后肺纤维化的效果，并且还表明了对冠状病毒病-19后遗症的预防或治疗效果。
因此，呼吸道感染性疾病后的后遗症可以是COVID-19后肺纤维化，但不限于此。
如本文所用，“COVID-19后肺纤维化”，其是在冠状病毒病-19患者中发生的肺纤维化，是指在冠状病毒病-19的恢复期过程中于冠状病毒病-19患者的肺中发现的涉及组织纤维化的病理状况。病毒感染引起的肺组织炎症和过度免疫反应(细胞因子风暴)以及纤维化引起的损伤被认为是其病因，但其明确的发病机制尚未阐明。与数月至数年间发展的常见的肺纤维化不同，COVID-19后肺纤维化可在数天至数月内迅速发展。
同时，呼吸道感染性疾病的后遗症包括味觉丧失、意识改变、惊厥、中风、脑出血、脑炎、痴呆和谵妄等多种神经异常。已知严重感染患者发展出抑郁、强迫症、精神病、帕金森病、阿尔茨海默病等疾病的风险较高。
这些神经障碍被认为是由直接作用于神经***的感染源(直接感染)、肺功能减退导致的脑缺氧以及体内炎性反应导致的神经***损伤引起的。
例如，作为感染源的一个示例的SARS-CoV-2可与血管紧张素转化酶2(ACE2)结合以抑制血管紧张素2(血管紧张素II)向血管紧张素1(血管紧张素I)的转化，从而导致血管紧张素2增加，造成血管收缩，这可能会损伤肾、心脏、脑等。
可选地，感染源(例如，SARS-CoV-2)可导致体内过度免疫反应，从而激活细胞因子或各种炎性物质，并且通常可能诱导细胞因子风暴。具体地，已有报道称发生凝血并产生血凝块导致中风，发生神经血管炎导致神经损伤，或细胞因子风暴直接损伤血脑屏障(BBB)，并且各种炎性物质穿过受损的BBB导致脑水肿和脑损伤。换句话说，已知对包括脑在内的身体各种器官的损伤可能作为过度炎性反应的结果而发生，即使它不是与感染源的直接感染，而最终神经***障碍会作为呼吸道感染性疾病的后遗症出现。
由于根据本发明的包括所述肽或其缀合物的药物组合物可减轻患有呼吸道感染性疾病后的后遗症的个体的炎症，因此其可具有抑制、延迟或恢复由炎症引起的中枢神经***损伤的效果。
在本发明中，所述药物组合物可施用于患有由呼吸道病毒感染引起的细胞因子风暴综合征、脓毒症或器官衰竭的个体，从而减少细胞因子分泌和/或表达并抑制免疫反应，并且所述药物组合物可施用于呼吸道感染后患有肺炎和肺纤维化症状的个体，但不限于此。
本发明的药物组合物可包括药学有效量的对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽，具体是包括SEQ ID NO:1至102的氨基酸序列中的任一个序列、主要由其组成或由其组成的肽，但不限于此。
“对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽”可与如本文所用的术语“三角激动剂”或“肽”互换使用。
对胰高血糖素、GLP-1和GIP受体具有显著活性水平的三角激动剂可对一种或多种受体，具体是两种或更多种受体，以及更具体地胰高血糖素、GLP-1和GIP受体中的三种受体全部表现出下列体外活性，但不特别限于：与相应受体的天然配体(天然胰高血糖素、天然GLP-1、天然GIP)相比，约0.001％或更高、约0.01％或更高、约0.1％或更高、约1％或更高、约2％或更高、约3％或更高、约4％或更高、约5％或更高、约6％或更高、约7％或更高、约8％或更高、约9％或更高、约10％或更高、约20％或更高、约30％或更高、约40％或更高、约50％或更高、约60％或更高、约70％或更高、约80％或更高、约90％或更高、约100％或更高、约150％或更高或者约200％或更高。然而，范围不受限制，只要三角激动剂表现出显著活性即可。
这里，关于对受体的活性，与天然物的活性相比，对受体的体外活性可以是0.001％或更高、0.01％或更高、0.1％或更高、1％或更高、2％或更高、3％或更高、4％或更高、5％或更高、6％或更高、7％或更高、8％或更高、9％或更高、10％或更高、20％或更高、30％或更高、40％或更高、50％或更高、60％或更高、70％或更高、80％或更高、90％或更高、100％或更高、约200％或更高。
如本文所用，术语“约”包括包含±0.5、±0.4、±0.3、±0.2、±0.1等的范围的全部，并且包括在等于或近似于术语“约”之后的值的范围内的所有值，但不限于此。
同时，包括在本发明的组合物中的肽的特征在于具备下列i)至iii)中的一种或多种活性、两种或更多种活性，并且具体是全部三种活性，具体是显著的活性：
i)活化GLP-1受体；ii)活化胰高血糖素受体；和iii)活化GIP受体。
这里，作为活化受体的示例，与天然物的活性相比，对这些受体的体外活性可以是约约0.1％或更高、约1％或更高、约2％或更高、约3％或更高、约4％或更高、约5％或更高、约6％或更高、约7％或更高、约8％或更高、约9％或更高、约10％或更高、约20％或更高、约30％或更高、约40％或更高、约50％或更高、约60％或更高、约70％或更高、约80％或更高、约90％或更高、约100％或更高、约150％或更高、约200％或更高。关于测量三角激动剂的体外活性的方法，可参考本说明书实验实施例1，但不特别限于此。
此外，与天然GLP-1、天然胰高血糖素和天然GIP中的任一种相比，所述肽可具有增加的体内半衰期，但不特别限于此。
所述肽可以是，但不特别限于，非天然存在的肽。
在本说明书中，尽管被描述为“由具体序列编号组成的”肽，但只要所述肽可具有与由相应序列编号的氨基酸序列组成的肽相同或相应的活性即可，在相应序列编号的氨基酸序列的上游或下游添加无意义序列、天然发生的突变或其中的沉默突变并不排除在外，并且显而易见具有这种序列添加或突变的肽也被包括在本发明的范围内。换言之，即使某些序列中存在差异，但只要其表现出在预定水平以上的同源性并且表现出对胰高血糖素受体的活性，那么其也可落入本发明的范围内。
例如，本发明的肽可包括包含SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列的肽，或(主要)由SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列组成的肽，或与SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列具有至少60％或更高、65％或更高、70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、91％或更高、92％或更高、93％或更高、94％或更高或者95％或更高序列同一性的肽。只要所述肽具有预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的效果，其就不限于特定的序列。
所述三角激动剂的示例可包括选自SEQ ID NO:1至102的任何氨基酸序列，或可包括选自SEQ ID NO:1至11、13至102的任何氨基酸序列，或可(主要)由选自SEQ ID NO:1至11、13至102的任何氨基酸序列组成，但不限于此。
在一个具体实施方式中，所述三角激动剂肽可包括下列、可主要由下列组成或可由下列组成：SEQ ID NO:21至24、28、29、31、32、37、42、43、50、51至54、56、58、64至73、75至79、82、83、91和96至102的任一个氨基酸序列，但不限于此。
举一个示例，所述三角激动剂肽可包括下列、可主要由下列组成或可由下列组成：SEQ ID NO:21、22、42、43、50、64、66、67、70、71、76、77、96、97和100的任一个氨基酸序列，但不限于此。
举另一个示例，所述肽可包括下列、可主要由下列组成或可由下列组成：SEQ IDNO:21、22、42、43、50、66、67、77、96、97和100的任一个氨基酸序列，但不限于此。
在另一个具体实施方式中，所述三角激动剂可包括下列、可主要由下列组成或可由下列组成：选自SEQ ID NO:21、22、27、30至32、34、36、37、42、43、50至56、58、64至79、83、86、91、93和96至102的任一个氨基酸序列，但不限于此。
在又一个具体实施方式中，所述三角激动剂可包括下列、可主要由下列组成或可由下列组成：选自SEQ ID NO:21、22、31、32、37、42、43、50、53、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、75、76、77、79、96、97、98、99、100、101和102的任一个氨基酸序列，但不限于此。
可选地，所述三角激动剂可包括与上述氨基酸序列具有至少60％或更高、65％或更高、70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、91％或更高、92％或更高、93％或更高、94％或更高或者95％或更高序列同一性的肽。只要所述肽具有预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的效果，其就不限于特定的序列。
如本文所用，术语“同源性”或“同一性”是指两个给定的氨基酸序列或核苷酸序列之间的相关度，并且可表示成百分比。
术语“同源性”和“同一性”常常可彼此互换使用。
任意两个肽序列是否具有同源性、相似性或同一性可通过已知的计算机算法如采用默认参数的“FASTA”程序确定，如Pearson et al.(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:2444 4中那样。可选地，其可通过下列确定：Needleman-Wunsch算法(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.48:443–453)——其利用EMBOSS包(EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件(The European Molecular Biology Open Software Suite),Rice et al.,2000,TrendsGenet.16:276–277)(5.0.0版本或更高版本)的Needleman程序执行(GCG程序包(Devereux,J.,et al.,Nucleic Acids Research 12:387(1984))、BLASTP、BLASTN、FASTA(Atschul,S.F.,etal.,J MOLEC BIOL 215:403(1990)；Guide to Huge Computers,MartinJ.Bishop,ed.,Academic Press,San Diego,1994,以及CARILLO et al.(1988)SIAM JApplied Math 48:1073)。例如，可利用美国国家生物技术信息中心(National Center forBiotechnology Information)的BLAST或ClustalW来确定同源性、相似性或同一性。
肽的同源性、相似性或同一性可通过利用例如GAP计算机程序，如Needleman etal.(1970),J Mol Biol.48:443，公开于Smith和Waterman,Adv.Appl.Math(1981)2:482中，比较序列信息来确定。简而言之，GAP程序将其定义为相似地经比对符号(即氨基酸)的数量除以两个序列中较短者的符号总数所获得的值。GAP程序的默认参数可包括(1)一元比较矩阵(包含同一性值1和非同一性值0)和Gribskov et al.(1986)Nucl.Acids Res.14:6745的加权比较矩阵(或EDNAFULL(NCBI NUC4.4的EMBOSS版)替换矩阵)，公开于Schwartz和Dayhoff,eds.,Atlas Of Protein Sequence And Structure,National BiomedicalResearch Foundation,pp.353–358(1979)；(2)每个空位3.0的罚分和每个空位中每个符号另外0.10的罚分(或10的空位开放罚分和0.5的空位扩展罚分)；和(3)末端空位无罚分。因此，如本文所用，术语“同源性”或“同一性”是指序列之间的相关性。
所述对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽可包括分子内桥(例如，共价交联或非共价交联)，并且具体地，其可以是包括环的形式。例如，所述肽可以是在所述肽的第16位氨基酸和第20位氨基酸之间形成环的形式，但不特别限于此。
所述环的非限制性示例可包括内酰胺交联(或内酰胺环)。
此外，所述肽包括经修饰以包括能够在所需位点形成环，从而包括了环的氨基酸的所有的肽。
例如，所述肽可以是所述肽的第16位和第20位的氨基酸对可被能够形成环的谷氨酸或赖氨酸替换的肽，但不限于此。
所述环可在所述肽内的氨基酸的侧链之间形成，例如，以在赖氨酸侧链和谷氨酸侧链之间形成的内酰胺环的形式，但不特别限于此。
通过这些方法的组合制备的肽的示例包括对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽，其中氨基酸序列中的一个或多个与天然胰高血糖素的氨基酸序列不同，并且N-末端氨基酸残基的α-碳已被去除，但本发明不限于此。用于类似物制备的各种方法的组合可用于制备适用于本发明的肽。
此外，在本发明的肽中，一部分氨基酸可以，但不特别限于被另一个氨基酸或非天然化合物取代以避免被激动剂降解酶识别，从而增加体内半衰期。
具体地，所述肽可以是这样的肽：体内半衰期可通过经由对所述肽的氨基酸序列中第2个氨基酸序列的取代来避免被降解酶识别而得以增加。然而，为避免被体内降解酶识别的任何氨基酸取代或修饰都被非限制地包括在内。
此外，用于所述肽制备的这种修饰包括下列全部：利用L型或D型氨基酸和/或非天然氨基酸的修饰；和/或天然序列的修饰，例如，侧链官能团的修饰、分子内共价结合(例如，侧链之间成环)、甲基化、酰基化、泛素化、磷酸化、氨基己烷化(aminohexanation)、生物素化等。
此外，所述修饰还可包括向所述三角激动剂的氨基末端和/或羧基末端添加一个或多个氨基酸的所有修饰。
在氨基酸的取代或添加过程中，不仅可以使用常见于人类蛋白质中的20种氨基酸，也可以使用非典型氨基酸或非天然存在的氨基酸。非典型氨基酸的商业来源可包括Sigma-Aldrich、ChemPep Inc.和Genzyme Pharmaceuticals。包含这些氨基酸的肽以及典型肽序列可被合成以及从商业供应商(例如，American Peptide Company(美国)或Antigen(韩国))购买。
可以以类似的方式获得氨基酸衍生物，并且例如，可以使用4-咪唑乙酸等。
此外，根据本发明的三角激动剂可以是变体形式，其中其N-末端和/或C-末端被化学修饰或被有机基团保护，或氨基酸可被添加到所述肽的末端，以使其在体内免受蛋白酶影响，同时提高其稳定性。
特别地，在化学合成的三角激动剂的情况下，其N-末端和C-末端是带电的，因此为了去除电荷，N-末端可被乙酰化和/或C-末端可被酰胺化，但是所述三角激动剂不特别限于此。
具体地，本发明的肽的N-末端或C-末端可具有胺基(–NH2)或羧基(–COOH)，但不限于此。
根据本发明的肽可包括C-末端可被酰胺化或可具有游离羧基(–COOH)的肽，或C-末端可以不被修饰的肽，但不限于此。
在一个具体实施方式中，所述肽在其C-末端可以是酰胺化的，但不限于此。
在一个具体实施方式中，所述肽可以是非糖基化的，但不限于此。
本发明的肽可通过固相合成方法合成，也可通过重组方法生产，或者可商业制备，但不限于此。
此外，本发明的肽可根据其长度通过本领域公知的方法(例如，通过自动肽合成仪)合成，并且可通过基因工程技术生产。
具体地，本发明的肽可通过标准合成方法、重组表达***或本领域已知的任何其它方法来制备。因此，本发明的肽可通过多种方法合成，包括例如下述方法：
(a)通过固相或液相方法，逐步地或通过片段组装合成肽，之后分离和纯化最终肽产物的方法；或
(b)在宿主细胞中表达编码肽的核酸构建体并从宿主细胞培养物回收表达产物的方法；或
(c)进行编码肽的核酸构建体的体外无细胞表达并从中回收表达产物的方法；或者
通过方法(a)、(b)和(c)的任意组合获得肽片段，连接这些肽片段获得肽，然后回收所述肽的方法。
这些描述也可适用于本发明的其它具体实施方式或方面，但不限于此。
此外，所述对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽可以是长效缀合物的形式，其中能够增加其体内半衰期的生物相容性物质与所述对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽连接。在本发明中，所述生物相容性物质可与载体互换使用。包括在本发明的药物组合物中的肽可以是长效缀合物的形式。
在本发明中，所述肽的缀合物与未连接载体的肽相比，可表现出功效耐久性的增加，而在本发明中，这种缀合物被称为“长效缀合物”或“缀合物”。
在本发明的一个具体实施方式中，所述长效缀合物可具有作为生物相容性材料的免疫球蛋白Fc区与所述对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽连接的形式。具体地，在所述缀合物中，免疫球蛋白Fc区经由连接体与所述对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽共价连接，但不特别限于此。
同时，所述缀合物可以是非天然存在的。
在本发明的一个具体实施方式中，所述长效缀合物可由下列化学式1表示，但不限于此：
[化学式1]
X–L–F
其中X是包含SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列的肽；
L是包括乙二醇重复单元的连接体，
F是免疫球蛋白Fc区，并且
–表示X和L之间以及L和F之间的共价键合。
化学式1的长效缀合物的X可以是上述对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽(三角激动剂)，具体是包括SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列的肽，或主要由或由SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列组成的肽，但不限于此。
化学式1的长效缀合物可具有这样的形式：包括SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列的肽和免疫球蛋白Fc区经由连接体彼此连接，其中所述缀合物与包括不与免疫球蛋白Fc区连接的SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列的肽相比，可表现出功效耐久性的增加。
本发明的缀合物，即使以缀合物的形式，也可对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体表现出显著的活性，从而表现出预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的效果。
具体地，本发明的缀合物可表现出下列对胰高血糖素受体、GLP-1受体和/或GIP受体的体外活性：与其天然形式相比，0.01％或更高、0.1％或更高、0.2％或更高、0.5％或更高、0.7％或更高、1％或更高、2％或更高、3％或更高、4％或更高、5％或更高、6％或更高、7％或更高、8％或更高、9％或更高、10％或更高、20％或更高、30％或更高、40％或更高、50％或更高、60％或更高、70％或更高、80％或更高、90％或更高、100％或更高，但不限于此。
就本发明的目的而言，所述肽或其缀合物可表现出下列对胰高血糖素受体、GLP-1受体和/或GIP受体的活性：与其天然形式相比，0.1％或更高、0.2％或更高、0.5％或更高、0.7％或更高、1％或更高、2％或更高、3％或更高、4％或更高、5％或更高、10％或更高、20％或更高、30％或更高、40％或更高、50％或更高、60％或更高、70％或更高、80％或更高、90％或更高、100％或更高，但不限于此。
本发明的组合物可包括(i)所述对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽，或(ii)所述对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽的长效缀合物。基于增加的体内耐久性，所述长效缀合物可对呼吸道感染性疾病后的后遗症表现出优异的预防或治疗效果。
在化学式1的长效缀合物中，作为包括SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列的肽的X与免疫球蛋白Fc区之间的键合可以是物理键或化学键，或非共价键或共价键，具体是共价键，但不限于此。
此外，X可用连接体(L)与F连接。更具体地，X和L以及L和F可经由共价键彼此连接。在这方面，所述缀合物是这样的缀合物：X、L和F分别经由共价键、按化学式1的顺序连接。
F可以是免疫球蛋白Fc区，并且更具体地，所述免疫球蛋白Fc区可衍生自IgG，但不特别限于此。
在本发明的一个具体实施方式中，F(免疫球蛋白Fc区)是由两条多肽链组成的二聚体，并且具有L的一端仅与两条多肽链中的一条多肽链连接的结构，但不限于此。
在本发明中，“免疫球蛋白Fc区”是指包括重链恒定区2(CH2)和/或重链恒定区3(CH3)，而不包括免疫球蛋白的重链和轻链可变区的区域。所述免疫球蛋白Fc区可以是构成本发明的缀合物部分的元件。
如本文所用，Fc区不仅包括通过木瓜蛋白酶消化免疫球蛋白获得的天然序列，还包括其衍生物，例如，天然序列中的一个或多个氨基酸残基通过缺失、***、非保守或保守取代或其组合而被转变并因此不同于天然序列的变体等等。要求上述衍生物、取代物和变体保留FcRn结合能力。在本发明中，F可以是人免疫球蛋白区域，但不限于此。F(免疫球蛋白Fc区)具有这样的结构：两条多肽链经由二硫键、仅经由这两条链中的一条链的氮原子彼此连接。经由氮原子的键合可经由对赖氨酸的ε氨基或N-末端氨基进行还原胺化来连接。
还原胺化是指这样的反应：其中一个反应物的胺基或氨基与另一反应物的醛(即能够还原胺化的官能团)反应产生胺，然后通过还原反应形成胺键。这是本领域公知的有机合成反应。
在一个具体实施方式中，F可通过其N-末端脯氨酸的氮原子连接，但不限于此。
所述免疫球蛋白Fc区可以是构成本发明化学式1的缀合物部分的元件，并且具体地，其可对应于化学式1中的F。
这种免疫球蛋白Fc区可包括重链恒定区中的铰链区，但不限于此。
在本发明中，所述免疫球蛋白Fc区可在N-末端包括具体的铰链序列。
如本文所用，术语“铰链序列”是指位于重链且通过二硫键(间二硫键(inter-disulfide bond))形成所述免疫球蛋白Fc区的二聚体的区域。
在本发明中，所述铰链序列可通过缺失铰链序列的具有下列氨基酸序列的部分而变为仅具有一个半胱氨酸残基，但不限于此：
Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:103)。
所述铰链序列可通过使SEQ ID NO:103的铰链序列中第8位或第11位半胱氨酸残基缺失而仅包含一个半胱氨酸残基。本发明的铰链序列可仅包含一个半胱氨酸残基并且可由3至12个氨基酸组成，但不限于此。更具体地，本发明的铰链序列可具有下列序列：
Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:104)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro–Ser–Pro(SEQ ID NO:105)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro–Ser(SEQ ID NO:106)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro–Pro(SEQ IDNO:107)、Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro–Ser(SEQ ID NO:108)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys(SEQ ID NO:109)、Glu–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys(SEQ ID NO:110)、Glu–Ser–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:111)、Glu–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:112)、Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:113)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:114)、Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:115)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:116)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys(SEQ ID NO:117)、Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro(SEQ ID NO:118)、Glu–Ser–Lys–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:119)、Glu–Ser–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:120)、Glu–Pro–Ser–Cys(SEQ IDNO:121)、Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:122)。
更具体地，所述铰链序列可包括SEQ ID NO:113(Pro–Ser–Cys–Pro)或SEQ ID NO:122(Ser–Cys–Pro)的氨基酸序列，但不限于此。
本发明的免疫球蛋白Fc区可以是因所述铰链序列的存在，两分子免疫球蛋白Fc链形成二聚体的形式，并且化学式1的缀合物可以是所述连接体一端连接至二聚体免疫球蛋白Fc区的一条链的形式，但不限于此。
如本文所用，术语“N-末端”是指蛋白质或多肽的氨基端，并且可包括氨基端的最外端，或从该最外端起1、2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个氨基酸。本发明的免疫球蛋白Fc区可在N-末端处包括所述铰链序列，但不限于此。
此外，本发明的免疫球蛋白Fc区可以是延伸的Fc区，其包括重链恒定区1(CH1)和/或轻链恒定区1(CL1)的部分或全部，不包括免疫球蛋白的重链和轻链可变区，只要其具有与其天然形式相比基本上等同或改善的效果即可。此外，所述免疫球蛋白Fc区可以是对应于CH2和/或CH3的相当长的氨基酸序列的一部分被去除的区域。
例如，本发明的免疫球蛋白Fc区可以是1)CH1结构域、CH2结构域、CH3结构域和CH4结构域，2)CH1结构域和CH2结构域，3)CH1结构域和CH3结构域，4)CH2结构域和CH3结构域，5)CH1结构域、CH2结构域、CH3结构域和CH4结构域当中的一个或者两个或更多个结构域与免疫球蛋白铰链区(或所述铰链区的部分)之间的组合，和6)重链恒定区和轻链恒定区的每个结构域之间的二聚体，但不限于此。
在本发明中，所述免疫球蛋白Fc区可以是由相同来源的结构域组成的单链免疫球蛋白组成的二聚体或多聚体，但不限于此。
此外，在一个具体实施方式中，所述免疫球蛋白Fc区F是由两条多肽链组成的二聚体，其中二聚体Fc区F和X可经由一个相同的连接体L(包括乙二醇重复单元)彼此共价连接。在一个具体实施方式中，X仅经由连接体L与二聚体Fc区F的两条多肽链中的一个多肽链共价连接。在一个更具体实施方式中，仅一分子X经由L共价连接至二聚体Fc区F的两条多肽链中连接了X的一条多肽链。在一个最具体的实施方式中，F是同型二聚体。
在另一个实施方式中，所述免疫球蛋白Fc区F是由两条多肽链组成的二聚体，并且L的一端仅与这两条多肽链中的一条多肽链连接，但不限于此。
在本发明另一个实施方式的长效缀合物中，两分子X可以以二聚体形式对称地结合至一个Fc区。在这方面，所述免疫球蛋白Fc区和X可经由连接体(L)彼此连接，但不限于上述示例。
此外，本发明的免疫球蛋白Fc区包括天然氨基酸序列以及其序列衍生物。氨基酸序列衍生物是指天然氨基酸序列中的一个或多个氨基酸残基因缺失、***、非保守或保守取代或其组合而具有不同的序列。
例如，在IgG Fc中已知对于键合重要的第214至238位、第297至299位、第318至322位或第327至331位的氨基酸残基可用作适于变异的位点。
此外，各种类型的衍生物也是可能的，例如，去除能够形成二硫键的位点的衍生物、几个N-末端氨基酸从天然Fc中去除的衍生物、甲硫氨酸残基被添加到天然Fc的N-末端的衍生物。此外，为了去除效应物功能，可去除补体结合位点(例如，C1q结合位点)，或抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)位点。用于制备所述免疫球蛋白Fc区的序列衍生物的技术被公开在国际公开号WO 97/34631、和WO 96/32478等中。
蛋白质或肽中不改变分子整体活性的氨基酸交换在本领域是公知的(H.Neurath,R.L.Hill,The Proteins,Academic Press,New York,1979)。最常见的交换发生在氨基酸残基Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Thy/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu和Asp/Gly之间。在某些情况下，可通过磷酸化、硫酸化、丙烯酸化(acrylation)、糖基化、甲基化、法尼基化、乙酰化、酰胺化等修饰氨基酸。
上述Fc衍生物可以是表现出与本发明的Fc区相同的生物活性的Fc衍生物，并且所述Fc区对热、pH等具有增加的结构稳定性。
此外，这种Fc区可从分离自人类或动物如牛、山羊、猪、小鼠、兔子、仓鼠、大鼠、豚鼠等的天然形式获得，也可以是从转化的动物细胞或微生物获得的其重组体或衍生物。在本文中，从天然形式获得的方法是从人类或动物生物体分离完整的免疫球蛋白，然后用蛋白酶处理它们的方法。当用木瓜蛋白酶处理时，天然形式被消化成Fab和Fc，而当用胃蛋白酶处理时，其被切割成pF′c和F(ab)2。可利用尺寸排阻色谱法等分离出Fc和pF′c。在更具体实施方式中，所述Fc区可以是重组免疫球蛋白Fc区，其中人源Fc区获自微生物。
此外，所述免疫球蛋白Fc区可具有天然聚糖，或与天然型相比增加或减少的聚糖，或是去糖基化的形式。所述免疫球蛋白Fc的聚糖的增加、减少或去除可通过本领域经常使用的任何方法如化学法、酶促法和使用微生物的基因工程法实现。在这方面，通过去除聚糖获得的免疫球蛋白Fc区显示出对补体c1q的结合亲和力显著降低和抗体依赖性细胞毒性或补体依赖性细胞毒性的降低或丧失，因此从而不会在活生物体内诱导不必要的免疫反应。在此基础上，鉴于本发明的目的，去糖基化或非糖基化的免疫球蛋白Fc区可能更适合作为药物载体。
如本文所用，术语“去糖基化”是指使用酶从中除去聚糖的Fc区，而术语“非糖基化”是指在原核生物中，在更具体的实施方式中是在大肠杆菌(E.coli)中产生的未糖基化的Fc区。
同时，所述免疫球蛋白Fc区可衍生自人类或动物，包括牛、山羊、猪、小鼠、兔子、仓鼠、大鼠、豚鼠等，而在更具体的实施方式中，其可衍生自人类。
此外，所述免疫球蛋白Fc区可以是衍生自IgG、IgA、IgD、IgE、IgM或其组合或杂合体的Fc区。在更具体的实施方式中，其可衍生自IgG或IgM——人类血液中最丰富的蛋白质，而在再更具体的实施方式中，其可衍生自IgG——已知增加配体结合蛋白的半衰期。在更具体的实施方式中，所述免疫球蛋白Fc区可以是IgG4 Fc区，而在甚至更具体的实施方式中，所述免疫球蛋白Fc区是衍生自人IgG4的非糖基化Fc区，但不限于此。
此外，在一个具体实施方式中，所述免疫球蛋白Fc区是人IgG4 Fc区，并且可以是同型二聚体形式，其中两个单体经由在半胱氨酸——各单体的第3位氨基酸——之间的二硫键(链间形式)连接。在这方面，同型二聚体的各单体具有或者可以具有独立的两个内二硫键(链内)，即在第35和95位半胱氨酸之间形成的二硫键以及在第141和199位半胱氨酸之间的二硫键。各单体的氨基酸数目可以是221个氨基酸，并且形成同型二聚体的氨基酸可由总共442个氨基酸组成，但不限于此。具体地，对于所述免疫球蛋白Fc片段，各自具有SEQ IDNO:123的氨基酸序列(由221个氨基酸组成)的两个单体经由在各单体第3位的半胱氨酸之间的二硫键形成同型二聚体，并且同型二聚体的单体可各自独立地形成在第35和95位半胱氨酸之间的链内二硫键以及在第141和199位半胱氨酸之间的链内二硫键，但不限于此。
化学式1的F可包括SEQ ID NO:123的氨基酸序列的单体，并且F可以是SEQ ID NO:123的氨基酸序列的单体的同型二聚体，但不限于此。
例如，所述免疫球蛋白Fc区可以是包含SEQ ID NO:124的氨基酸序列(由442个氨基酸组成)的同型二聚体，但不限于此。
在一个具体实施方式中，所述免疫球蛋白Fc区和X可以不是糖基化的，但不限于此。
同时，如本文所用，与所述免疫球蛋白Fc区相关的术语“组合”是指编码相同来源的单链免疫球蛋白Fc区的多肽与不同来源的单链多肽连接形成二聚体或多聚体。换句话说，二聚体或多聚体可由选自IgG Fc、IgA Fc、IgM Fc、IgD Fc和IgE的Fc区的两个或更多个区制备。
如本文所用，术语“杂合体”意为对应于不同来源的两个或更多个免疫球蛋白Fc区的序列存在于单链免疫球蛋白恒定区中。在本发明中，各种杂合体形式都是可能的。换句话说，杂合体结构域可由选自IgG Fc、IgM Fc、IgA Fc、IgE Fc和IgD Fc的CH1、CH2、CH3和CH4的一至四个结构域组成，并且可包括铰链区。
同时，IgG也可分为IgG1、IgG2、IgG3和IgG4亚类，并且本发明也可包括其组合或其杂合体，具体地是IgG2和IgG4亚类，并且更具体地是IgG4的Fc片段，其几乎没有效应物功能如补体依赖性细胞毒性(CDC)。
此外，上述缀合物可具有与天然GLP-1、GIP、胰高血糖素或未经F修饰的X相比增加的功效耐久性，并且这种缀合物不仅可以呈上述形式，而且可以呈其被包封在可生物降解纳米颗粒中的形式，但不限于此。
同时，在化学式1中，L是非肽基连接体，例如，包括乙二醇重复单元的连接体。
如本文所用，术语“非肽基连接体”包括缀合了两个或更多个重复单元的生物相容性聚合物。重复单元通过任何共价键而非肽键彼此连接。非肽基聚合物可以是构成本发明缀合物部分的元件，并且对应于化学式1中的L。
适用于本发明的非肽基连接体可以非限制地使用，只要它是在体内对蛋白水解酶具有抗性的聚合物即可。在本发明中，所述非肽基连接体可与非肽基聚合物互换使用。
此外，与对应于F的多肽结合的本发明的非肽基连接体可以是一种类型的聚合物以及不同类型的聚合物的组合。
在一个具体实施方式中，所述缀合物可以是F和X经由非肽基连接体共价连接在一起的缀合物，在两端包括能够结合F(具体是所述免疫球蛋白Fc区)和X(具体是所述三角激动剂)的反应性基团。
具体地，在本发明中，所述非肽基连接体可在其端部包括反应性基团，以通过与构成所述缀合物的其它组成部分的反应形成缀合物。当两端具有反应性官能团的非肽基连接体经由各自的反应性基团与化学式1的X和F结合形成所述缀合物时，所述非肽基连接体或非肽基聚合物可被称为非肽基聚合物连接体部分或非肽基连接体部分。
所述非肽基连接体可以是，但不特别限于包括乙二醇重复单元的连接体，例如，聚乙二醇连接体。本领域已知的其衍生物和本领域普通技术人员容易制备的衍生物也包括在本发明的范围内。
如本文所用，“聚乙二醇连接体”包括结合了两个或更多个乙二醇重复单元的生物相容性聚合物。重复单元不是通过肽键而是通过任何共价键彼此连接的。所述聚乙二醇连接体可以是构成本发明缀合物部分的元件，并且对应于化学式1中的L。
具体地，L(聚乙二醇连接体)可以是包括乙二醇重复单元(例如，聚乙二醇)的连接体，但不限于此。如本文所用，聚乙二醇是包括乙二醇同聚物、PEG共聚物或单甲基取代PEG聚合物(mPEG)全部的术语，但不特别限于此。本领域已知的其衍生物和本领域普通技术人员容易制备的衍生物也包括在本发明的范围内。
所述聚乙二醇连接体可包括乙二醇重复单元，同时在其端部包括在形成缀合物之前用于制备所述缀合物的官能团。在根据本发明的长效缀合物中，X和F可通过官能团彼此连接，但不限于此。在本发明中，所述非肽基连接体可包括两个或三个或更多个官能团，其中各个官能团彼此相同或不同，但不限于此。
具体地，所述连接体可以是由下列化学式2表示的聚乙二醇(PEG)，但不限于此：
[化学式2]
其中n＝10至2400，n＝10至480，或n＝50至250，但不限于此。
在所述长效缀合物中，PEG部分可包括–(CH2CH2O)n–结构和插在连接元件与–(CH2CH2O)n–结构之间的氧原子，但不限于此。
在一个具体实施方式中，所述乙二醇重复单元可由例如[OCH2CH2]n表示，其中n的值是自然数，并且可被确定使得所述肽缀合物中[OCH2CH2]n位点的平均分子量，例如，数均分子量大于0kDa至约100kDa，但不限于此。在另一个实施方式中，n的值是自然数，并且可被确定使得所述肽缀合物中[OCH2CH2]n位点的平均分子量，例如，数均分子量可为约1kDa至约100kDa、约1kDa至约80kDa、约1kDa至约50kDa、约1kDa至约30kDa、约1kDa至约25kDa、约1kDa至约20kDa、约1kDa至约15kDa、约1kDa至约13kDa、约1kDa至约11kDa、约1kDa至约10kDa、约1kDa至约8kDa、约1kDa至约5kDa、约1kDa至约3.4kDa、约3kDa至约30kDa、约3kDa至约27kDa、约3kDa至约25kDa、约3kDa至约22kDa、约3kDa至约20kDa、约3kDa至约18kDa、约3kDa至约16kDa、约3kDa至约15kDa、约3kDa至约13kDa、约3kDa至约11kDa、约3kDa至约10kDa、约3kDa至约8kDa、约3kDa至约5kDa、约3kDa至约3.4kDa、约8kDa至约30kDa、约8kDa至约27kDa、约8kDa至约25kDa、约8kDa至约22kDa、约8kDa至约20kDa、约8kDa至约18kDa、约8kDa至约16kDa、约8kDa至约15kDa、约8kDa至约13kDa、约8kDa至约11kDa、约8kDa至约10kDa、约9kDa至约15kDa、约9kDa至约14kDa、约9kDa至约13kDa、约9kDa至约12kDa、约9kDa至约11kDa、约9.5kDa至约10.5kDa或约10kDa，但不限于此。
此外，在一个具体实施方式中，所述缀合物可具有所述肽(X)和所述免疫球蛋白Fc区(F)经由包括乙二醇重复单元的连接体彼此共价连接的结构，但不限于此。
此外，在一个具体实施方式中，所述长效缀合物可具有本发明的肽(X)和免疫球蛋白Fc区(F)经由包括乙二醇重复单元的连接体(L)彼此共价连接的结构，但不限于此。
可用于本发明的非肽基连接体可以非限制地使用，只要它是包括乙二醇重复单元、在体内对蛋白水解酶具有抗性的聚合物即可。非肽基聚合物的分子量可在大于0kDa和约100kDa的范围内，在约1kDa至约100kDa的范围内，具体地在约1kDa至约20kDa的范围内，或在约1kDa至约10kDa的范围内，但不限于此。此外，与对应于F的多肽结合的本发明的非肽基连接体可以是一种类型的聚合物以及不同类型的聚合物的组合。
具体地，在F和X不与其结合的状态下，所述非肽基连接体可在其两端具有反应性基团，并且可经由所述反应性基团与F和X结合。
在一个具体实施方式中，所述连接体的两端可结合至所述免疫球蛋白Fc区的硫醇基、氨基或羟基和所述肽(X)的硫醇基、氨基、叠氮基或羟基，但不限于此。
具体地，所述连接体可在其两端包括能够分别与所述免疫球蛋白Fc区和所述肽(X)结合的反应性基团，具体是能够与所述免疫球蛋白Fc区中半胱氨酸的硫醇基；位于N-末端、赖氨酸、精氨酸、谷氨酰胺和/或组氨酸的氨基；和/或位于C-末端的羟基；以及所述肽(X)中半胱氨酸的硫醇基；赖氨酸、精氨酸、谷氨酰胺和/或组氨酸的氨基；叠氮-赖氨酸(azido-lysine)的叠氮基；和/或羟基结合的反应性基团，但不限于此。
更具体地，所述连接体的反应性基团可以是选自醛基、马来酰亚胺基和琥珀酰亚胺衍生物中的一种或多种，但不限于此。
在上文中，所述醛基的示例可包括丙醛基或丁醛基，但不限于此。
在上文中，所述琥珀酰亚胺衍生物的示例可包括琥珀酰亚胺戊酸酯、琥珀酰亚胺甲基丁酸酯、琥珀酰亚胺甲基丙酸酯、琥珀酰亚胺丁酸酯、琥珀酰亚胺丙酸酯、N-羟基琥珀酰亚胺、羟基琥珀酰亚胺基、琥珀酰亚胺基羧基甲基或琥珀酰亚胺基碳酸酯，但不限于此。
所述连接体可经由这些反应性基团与所述免疫球蛋白Fc区F和所述肽(三角激动剂)X连接，以转化为连接体部分。
此外，经由醛键通过还原胺化产生的最终产物比经由通过酰胺键形成的键合获得的最终产物要更稳定。醛反应性基团选择性地在低pH下与N-末端反应，同时在高pH(例如，在pH 9.0)下与赖氨酸残基形成共价键。
另外，所述非肽基连接体两端的反应性基团可以彼此相同或不同，例如，醛基可被提供在两端，而马来酰亚胺基可被提供在一端并且醛基、丙醛基或丁醛基可被提供在另一端。然而，这些反应性基团并不特别限于此，只要F——具体是所述免疫球蛋白Fc区，以及X可与所述非肽基连接体的端部分别连接即可。
例如，所述非肽基连接体可在一端包括马来酰亚胺基作为反应性基团，而在另一端包括醛基、丙醛基或丁醛基作为反应性基团。
当两端均具有羟基反应性基团的聚乙二醇用作所述非肽基聚合物时，可通过已知的化学反应将羟基活化成各种反应性基团，或者通过利用具有修饰的反应性基团的商业可获得的聚乙二醇来制备根据本发明的长效蛋白质缀合物。
在一个具体实施方式中，所述非肽基聚合物可连接至X的半胱氨酸残基，更具体地是半胱氨酸的–SH基团，但不限于此。
例如，所述非肽基聚合物可连接至对应于X的肽中第10位半胱氨酸残基、第13位半胱氨酸残基、第15位半胱氨酸残基、第17位半胱氨酸残基、第19位半胱氨酸残基、第21位半胱氨酸残基、第24位半胱氨酸残基、第28位半胱氨酸残基、第29位半胱氨酸残基、第30位半胱氨酸残基、第31位半胱氨酸残基、第40位半胱氨酸残基、第41位半胱氨酸残基，但不特别限于此。具体地，所述非肽基聚合物的反应性基团可与半胱氨酸残基的–SH基团连接，并且所有上述反应性基团将均适用于所述反应性基团。
具体地，所述非肽基聚合物的反应性基团可与半胱氨酸残基的–SH基团连接，并且所有上述反应性基团将均适用于所述反应性基团。
此外，在所述缀合物中，所述非肽基聚合物的反应性基团可连接至位于所述免疫球蛋白Fc区N-末端的–NH2，而这仅仅是一个示例。
当采用马来酰亚胺–PEG–醛时，马来酰亚胺基可经由硫醚键与所述肽的–SH基团连接，而醛基可经由还原烷基化与所述免疫球蛋白Fc区的–NH2基团连接，但不限于此。这仅仅是一个示例。
通过这种还原烷基化，所述免疫球蛋白Fc区的N-末端氨基通过具有–CH2CH2CH2–结构的连接体反应性基团与位于PEG一端的氧原子连接形成一种结构，如–PEG–O–CH2CH2CH2NH–免疫球蛋白Fc。通过硫醚键，可形成PEG一端与位于所述肽的半胱氨酸中的硫原子连接的结构。上述硫醚键可包含下列结构：
然而，本发明不特别限于上述示例，而这仅仅是一个示例。
此外，在所述缀合物中，所述连接体的反应性基团可连接至位于所述免疫球蛋白Fc区的N-末端的–NH2，而这仅仅是一个示例。
此外，在所述缀合物中，根据本发明的肽可经由C-末端与具有反应性基团的连接体连接，而这仅仅是一个示例。
如本文所用，术语“C-末端”是指所述肽的羧基端，而就本发明的目的而言，其是指能够与所述连接体连接的位点。例如，C-末端可包括C-末端最外端的氨基酸残基和C-末端附近的氨基酸残基全部，并且具体地是从最外端起第1至第20位氨基酸残基，但C-末端不限于此。
此外，与X未经F修饰相比，上述缀合物可具有功效耐久性的增加，并且这种缀合物不仅可以呈上述形式，而且可以呈其被包封在可生物降解的纳米颗粒中的形式。
同时，关于上述三角激动剂及其长效缀合物，国际公开号WO 2017/116204和WO2017/116205的公开内容通过引用以其整体并入本文。
除非另有指示，否则详细描述和权利要求中关于根据本发明的“肽”或所述肽共价连接至生物相容性材料的“缀合物”的技术，不仅可以适用于所述肽或缀合物，还可以适用于所述肽或缀合物的盐(例如，所述肽的药学上可接受的盐)或其溶剂化物的形式。因此，尽管说明书中只是描述了“肽”或“缀合物”，但对其的描述也可以适用于其特定盐、其特定溶剂化物及特定盐的溶剂化物。这种盐可以是例如药学上可接受的盐的形式。盐的类型没有特别限制。然而，盐可以是在个体(例如，哺乳动物)中安全且有效的形式，但不限于此。
盐的类型没有特别限制。然而，盐可以是在个体(例如，哺乳动物)中安全且有效的形式，但不限于此。
术语“药学上可接受的”是指在医药决策的范围内可有效用于所需目的而不引起过度毒性、刺激、过敏反应等的物质。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指衍生自药学上可接受的无机酸、有机酸或碱的盐。合适的酸的示例可包括盐酸、溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、甲苯-对-磺酸、酒石酸、乙酸、柠檬酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸、苯磺酸等。衍生自合适的碱的盐的示例可包括碱金属如钠、钾等；碱土金属如镁等；以及铵等。
此外，如本文所用，术语“溶剂化物”是指根据本发明的肽或其盐与溶剂分子的复合物。
根据本发明的组合物可包括所述肽(三角激动剂)或其缀合物，具体是药学有效量的所述肽或其缀合物。此外，所述组合物还可包括药学上可接受的载体。本发明的组合物可具有呼吸道感染性疾病后的后遗症的预防或治疗用途。
如本文所用，术语“预防”是指意图通过施用所述肽(例如，所述肽本身或通过将生物相容性材料连接于其上而形成的长效缀合物)或包括其的组合物来抑制或延迟呼吸道感染性疾病后的后遗症的所有行为。在本发明中，呼吸道感染性疾病后的后遗症的预防可以指，独立于对感染源的抑制，可能发生在感染后的被感染个体中的异常的身体反应(例如，器官功能障碍或损伤等)受到预先抑制或延迟，但不限于此。
如本文所用，术语“治疗”是指通过施用所述肽(例如，所述肽本身或通过将生物相容性材料连接于其上而形成的长效缀合物)或包括其的组合物来减轻或有益地改变呼吸道感染性疾病后的后遗症症状的所有行为。在本发明中，呼吸道感染性疾病后的后遗症的治疗可以指，独立于对感染源的抑制，可能发生在感染后的被感染个体中的异常的身体反应(例如，器官功能障碍或损伤等)已经好转或经过有利地改变，但不限于此。
具体地，根据本发明的肽、长效缀合物或包括其的组合物可改善过度炎症和纤维化，从而预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症，但不限于此。
在本发明中，对呼吸道感染性疾病后的后遗症的预防或治疗可在呼吸道感染性疾病完全康复之前和/或之后执行。
如本文所用，术语“施用”是指通过任何合适的方法将预定物质(例如，所述三角激动剂或其长效缀合物)引入患者中，并且所述组合物的施用途径可以是，但不特别限于能够将所述组合物递送到活生物体内的目标的任何常见途径，例如，腹膜内施用、静脉内施用、肌内施用、皮下施用、皮内施用、口服施用、局部施用、鼻内施用、肺内施用或直肠内施用等。
使用本发明的对胰高血糖素、GLP-1和GIP受体全部具有活性的三角激动剂或其长效缀合物具有很大的优点，因为由于血液半衰期和体内功效耐久性的显著增加，其可通过降低需要每天施用的长期(慢性，chronic)患者的施用频率来提高患者的生活质量。
本发明的药物组合物还可包括药学上可接受的载体或稀释剂。这种药学上可接受的载体或稀释剂可以是非天然存在的。
如本文所用，术语“药学上可接受的”是指这样的量：足以表现出治疗效果而不引起副作用，并且可以容易地由本领域普通技术人员根据医学领域公知的因素如疾病类型、患者的年龄、体重、健康状况、性别和药物敏感性、施用途径、施用方法、施用频率、治疗持续时间以及组合或同时使用的药物来确定。
包括本发明的肽的药物组合物可包括药学上可接受的赋形剂。虽然赋形剂没有特别限制，但是粘合剂、润滑剂、崩解剂、增溶剂、分散剂、稳定剂、悬浮剂、着色剂和调味剂可用于口服施用，缓冲剂、防腐剂、镇痛剂、增溶剂、等渗剂和稳定剂可组合用于可注射制剂，以及碱、赋形剂、润滑剂、防腐剂等可用于局部施用制剂。
本发明的组合物可与上述药学上可接受的赋形剂组合配制成各种形式。例如，对于口服施用，所述组合物可配制成片剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆、晶片(wafer)等形式。对于可注射制剂，所述组合物可被配制成单剂安瓿或多剂形式。所述组合物还可被配制成溶液、悬浮液、片剂、丸剂、胶囊、缓释制剂等。
同时，适用于制剂的载体、赋形剂和稀释剂的示例可包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、***胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁或矿物油。此外，所述组合物还可包括填充剂、抗凝剂、润滑剂、润湿剂、调味剂、防腐剂等。
此外，本发明的药物组合物可具有选自下列的任一种制剂：片剂、丸剂、粉末、颗粒、胶囊、悬浮液、内用制剂、乳液、糖浆、无菌水溶液、非水性溶剂、冻干制剂和栓剂。
此外，根据本领域常用的方法，所述组合物可被配制成适合向患者身体中施用的单位剂型，具体地可被配制成用于蛋白质药物施用的形式，并且可采用本领域常用的施用方法通过口服施用途径或肠胃外施用途径如皮内、静脉内、肌内、动脉内、髓内、鞘内、心室内、肺内、经皮、皮下、腹膜内、鼻内、胃内、局部、舌下、***或直肠途径施用，但不限于此。
此外，可与各种批准作为药物的载体如盐水溶液或有机溶剂组合来使用所述缀合物。作为所述药物，为了提高稳定性或可吸收性，可以使用碳水化合物如葡萄糖、蔗糖或葡聚糖、抗氧化剂如抗坏血酸或谷胱甘肽、螯合剂、低分子量蛋白质或其它稳定剂。
本发明的另一方面提供了预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的方法，所述方法包括向个体施用所述药物组合物的步骤，所述药物组合物包括药学有效量的包含SEQID NO:1至102的任一个氨基酸序列的肽或其长效缀合物。
本发明的药物组合物的施用剂量和频率根据作为活性成分的药物的类型以及各种相关因素来确定，这些因素诸如待治疗的疾病、施用途径、患者的年龄、性别和体重以及疾病严重程度。具体地，本发明的组合物可包括药学有效量的所述三角激动剂或包括其的缀合物，但不限于此。
包括药学有效量的所述肽或所述长效缀合物是指由于所述三角激动剂或所述长效缀合物而可获得所需药理学活性(例如，预防、改善或治疗呼吸道感染的后遗症)的程度，并且还可以指在待施用的个体中不引起毒性或副作用，或者引起不显著的水平的毒性或副作用的药学上可接受的水平，但不限于此。这样的药学有效量可考虑施用频率、患者、制剂等来确定。
本发明的长效缀合物可以以每kg约0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.08mg、0.09mg、0.10mg、0.11mg、0.12mg、0.13mg、0.14mg、0.15mg或更多的量施用，但不限于此。
本发明的药物组合物可包含，但不特别限于，0.01％至99％重量/体积的组分(活性成分)。
本发明组合物的总有效量可以以单剂向患者施用，也可以根据分级治疗方案以多剂长时期施用。在本发明的药物组合物中，活性成分的含量可根据疾病严重程度而改变。具体地，根据本发明的肽或其缀合物的优选总日剂量可以是每1kg患者体重约0.0001mg至约500mg。然而，所述肽或其缀合物的有效剂量是考虑了除所述药物组合物的施用途径和治疗频率外的各种因素包括患者的年龄、体重、健康状况、性别、疾病严重程度、饮食和***率确定的。在这方面，本领域技术人员可容易地确定适用于本发明药物组合物的具体用途的有效剂量。根据本发明的药物组合物不特别限于配制和施用途径及方式，只要其显示出本发明的效果即可。
本发明的药物组合物具有优异的体内耐久性和功效，并且可以显著减少本发明药物制剂的施用次数和频率。
例如，本发明的药物组合物可每周施用一次、每2周施用一次、每4周施用一次或每月施用一次，但不限于此。
实现本发明的又一个方面提供了预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的方法，所述方法包括向有需要的个体施用所述三角激动剂(肽)和/或所述三角激动剂的长效缀合物或包括其的组合物的步骤。
所述三角激动剂和/或所述三角激动剂的长效缀合物或包括其的组合物、所述呼吸道感染性疾病后的后遗症、所述预防和所述治疗与上述相同。
在本发明中，所述个体是指疑似患有呼吸道感染性疾病后的后遗症的个体，而所述疑似患有呼吸道感染性疾病后的后遗症的个体是指患有呼吸道感染性疾病或甚至在从所述呼吸道感染性疾病完全康复后仍具有或处于具有异常身体状况的哺乳动物如人、大鼠、家畜等，但是可用根据本发明的三角激动剂和/或缀合物或包括其的组合物治疗的任何个体都可以非限制地包括在内。此外，通过施用根据本发明的三角激动剂和/或其长效缀合物或包括其的组合物可抑制细胞因子分泌和/或表达，从而抑制过度免疫反应(细胞因子风暴)并改善肺炎和纤维化。因此，所述个体可以是具有细胞因子风暴、脓毒症或器官衰竭的个体，特别是在呼吸道感染后患有肺炎和肺纤维化的个体，但不限于此。
如本文所用，术语“施用”是指通过任何合适的方法将预定物质引入患者中，并且所述组合物的施用途径可以是，但不特别限于能够将所述组合物递送到活生物体内的目标的任何常见途径，例如，腹膜内施用、静脉内施用、肌内施用、皮下施用、皮内施用、口服施用、局部施用、鼻内施用、肺内施用或直肠内施用等。
本发明的方法可包括施用药学有效量的包括所述三角激动剂或其长效缀合物的药物组合物。适当的总日剂量可由医师在正确的医疗决策范围内确定，并可施用一次或分成几个剂量施用。然而，就本发明的目的而言，优选的是特定患者的具体治疗有效量将取决于各种因素包括待实现的响应的类型和程度、具体组合物(包括在某些情况下是否使用了其它剂)、患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食、所述组合物的施用时间、施用途径和***率、治疗持续时间、与所述具体组合物一起或同时使用的药物以及医学领域公知的类似因素来施加。
本发明的药物组合物可以是，但不限于，每周施用一次、每2周施用一次、每4周施用一次或每月施用一次，但不限于此。
实现本发明的又一个方面提供了包括所述三角激动剂或其长效缀合物的组合物在制备用于呼吸道感染性疾病后的后遗症的预防剂或治疗剂中的用途。就本发明的目的而言，所述三角激动剂、其长效缀合物或包括其的组合物可具有抑制细胞因子风暴的效果，但不限于此。
所述三角激动剂和/或其缀合物，或包括其的组合物、所述呼吸道感染性疾病后的后遗症、所述预防和所述治疗与上述相同。
实现本发明的又一方面提供了所述三角激动剂或其长效缀合物或包括其的组合物在预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症中的用途。就本发明的目的而言，所述三角激动剂、其长效缀合物或包括其的组合物可具有抑制细胞因子风暴的效果，但不限于此。
所述三角激动剂和/或其缀合物，或包括其的组合物、所述呼吸道感染性疾病后的后遗症、所述预防和所述治疗与上述相同。
在下文中，将参考下列实施例更详细地描述本发明。然而，这些实施例仅用于说明的目的，并且本发明的范围并不旨在由这些实施例限定。
实施例1：三角激动剂的制备
制备了对GLP-1、GIP和胰高血糖素受体全部表现出活性的三角激动剂，并且其序列显示在下表1中。
表1
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在表1描述的序列中，用X标记的氨基酸表示非天然氨基酸Aib(2-氨基异丁酸)，而下划线意为下划线的氨基酸彼此成环。在表1中，CA表示4-咪唑乙酰基。所述三角激动剂肽根据需要被用作C-末端酰胺化的三角激动剂。
实施例2：三角激动剂的长效缀合物的制备
为了将两端分别具有马来酰亚胺基和醛基的10kDa PEG，即马来酰亚胺–PEG–醛(10kDa,NOF,日本)聚乙二醇化到实施例1的各三角激动剂(SEQ ID NO:21、22、42、43、50、77和96)的半胱氨酸残基中，使各三角激动剂和马来酰亚胺–PEG–醛以1:1至3的摩尔比，1mg/mL至5mg/mL的蛋白质浓度，在低温下反应0.5至3小时。在此情况下，反应在包括向其中添加了20％至60％异丙醇的50mM Tris缓冲液(pH 7.5)的环境中进行。反应完成后，将反应溶液施加至SP琼脂糖凝胶HP(GE Healthcare,USA)以纯化单聚乙二醇化到半胱氨酸上的各三角激动剂。
接下来，使纯化的单聚乙二醇化三角激动剂与免疫球蛋白Fc(SEQ ID NO:123的同型二聚体)以1:1至5的摩尔比，且10mg/mL至50mg/mL的蛋白质浓度，在4℃至8℃下进行反应12至18小时。反应在包括向100mM磷酸钾缓冲液(pH 6.0)中添加作为还原剂的10mM至50mM氰基硼氢化钠和10％至30％异丙醇的环境中进行。反应完成后，通过施加至丁基琼脂糖凝胶FF纯化柱(GE Healthcare,USA)和Source ISO纯化柱(GE Healthcare,USA)，将包括三角激动剂和免疫球蛋白Fc的各缀合物从反应溶液中纯化。此纯化的长效缀合物具有这样的结构：三角激动剂肽、聚乙二醇(PEG)连接体和Fc二聚体在分子中以1:1:1的摩尔比彼此共价连接，其中PEG连接体与Fc二聚体的两条多肽链中的仅一条链连接。
同时，关于免疫球蛋白Fc，各自具有SEQ ID NO:123(由221个氨基酸组成)的氨基酸序列的两个单体经由各单体第3位的半胱氨酸氨基酸之间的二硫键形成同型二聚体，其中同型二聚体的单体均独立地形成在第35和95位半胱氨酸之间的内二硫键以及在第141和199位半胱氨酸之间的内二硫键。
在制备后，通过反相色谱法、尺寸排阻色谱法和离子交换色谱法分析的纯度为95％或更高。
在这里，通过将对SEQ ID NO:21的三角激动剂C-末端酰胺化制备的三角激动剂与免疫球蛋白Fc经由PEG连接体连接而制备的缀合物被命名为“包括SEQ ID NO:21和免疫球蛋白Fc的缀合物”或“SEQ ID NO:21的长效缀合物”，并且它们可互换使用。
在这里，通过将对SEQ ID NO:22的三角激动剂C-末端酰胺化制备的三角激动剂与免疫球蛋白Fc经由PEG连接体连接而制备的缀合物被命名为“包括SEQ ID NO:22和免疫球蛋白Fc的缀合物”或“SEQ ID NO:22的长效缀合物”，并且它们可互换使用。
在这里，通过将对SEQ ID NO:42的三角激动剂C-末端酰胺化制备的三角激动剂与免疫球蛋白Fc经由PEG连接体连接而制备的缀合物被命名为“包括SEQ ID NO:42和免疫球蛋白Fc的缀合物”或“SEQ ID NO:42的长效缀合物”，并且它们可互换使用。
在这里，通过将对SEQ ID NO:43的三角激动剂C-末端酰胺化制备的三角激动剂与免疫球蛋白Fc经由PEG连接体连接而制备的缀合物被命名为“包括SEQ ID NO:43和免疫球蛋白Fc的缀合物”或“SEQ ID NO:43的长效缀合物”，并且它们可互换使用。
在这里，通过将对SEQ ID NO:50的三角激动剂C-末端酰胺化制备的三角激动剂与免疫球蛋白Fc经由PEG连接体连接而制备的缀合物被命名为“包括SEQ ID NO:50和免疫球蛋白Fc的缀合物”或“SEQ ID NO:50的长效缀合物”，并且它们可互换使用。
在这里，通过将对SEQ ID NO:77的三角激动剂C-末端酰胺化制备的三角激动剂与免疫球蛋白Fc经由PEG连接体连接而制备的缀合物被命名为“包括SEQ ID NO:77和免疫球蛋白Fc的缀合物”或“SEQ ID NO:77的长效缀合物”，并且它们可互换使用。
在这里，通过将对SEQ ID NO:96的三角激动剂C-末端酰胺化制备的三角激动剂与免疫球蛋白Fc经由PEG连接体连接而制备的缀合物被命名为“包括SEQ ID NO:96和免疫球蛋白Fc的缀合物”或“SEQ ID NO:96的长效缀合物”，并且它们可互换使用。
实验实施例1：三角激动剂及其长效缀合物的体外活性的测量
为了测量实施例1和2中制备的三角激动剂及其长效缀合物的活性，利用各自转化有GLP-1受体、胰高血糖素(GCG)受体和GIP受体的细胞系在体外测量细胞活性。
这些细胞系是通过转化CHO(中国仓鼠卵巢)以分别表达人GLP-1受体、人GCG受体和人GIP受体基因制备的细胞系，并且它们适于测量GLP-1、GCG和GIP的活性。因此，分别使用转化后的细胞系来测量各活性。
为了测量实施例1和2中制备的三角激动剂及其长效缀合物的GLP-1活性，将人GLP-1进行从50nM到0.000048nM的4倍连续稀释，以及将实施例1和2中制备的三角激动剂及其长效缀合物进行从400nM到0.00038nM的4倍连续稀释。从培养的表达人GLP-1受体的CHO细胞去除培养液，然后将5μL的量的各连续稀释的材料添加至细胞中。此后，加入5μL含有cAMP抗体的缓冲液，之后在室温下温育15分钟。然后，向其中加入10μL含有细胞裂解缓冲液的检测混合物以裂解细胞，并使其在室温下反应90分钟。将反应完成后的细胞裂解物施加至LANCE cAMP试剂盒(PerkinElmer,USA)，以通过累积的cAMP计算EC50值，并将这些值相互比较。与人GLP-1相比的相对效价示于下表2和表3中。
为了测量实施例1和2中制备的三角激动剂及其长效缀合物的GCG活性，将人GCG进行从50nM到0.000048nM的4倍连续稀释，以及将实施例1和2中制备的三角激动剂及其长效缀合物进行从400nM到0.00038nM的4倍连续稀释。从培养的表达人GCG受体的CHO细胞去除培养液，然后将5μL的量的各连续稀释的材料添加至细胞中。此后，加入5μL含有cAMP抗体的缓冲液，之后在室温下温育15分钟。然后，向其中加入10μL含有细胞裂解缓冲液的检测混合物以裂解细胞，并使其在室温下反应90分钟。将反应完成后的细胞裂解物施加至LANCEcAMP试剂盒(PerkinElmer,USA)，以通过累积的cAMP计算EC50值，并将这些值相互比较。与人GCG相比的相对效价示于下表2和表3中。
为了测量实施例1和2中制备的三角激动剂及其长效缀合物的GIP活性，将人GIP进行从50nM到0.000048nM的4倍连续稀释，以及将实施例1和2中制备的三角激动剂及其长效缀合物进行从400nM到0.00038nM的4倍连续稀释。从培养的表达人GIP受体的CHO细胞去除培养液，然后将5μL的量的各连续稀释的材料添加至细胞中。此后，加入5μL含有cAMP抗体的缓冲液，之后在室温下温育15分钟。然后，向其中加入10μL含有细胞裂解缓冲液的检测混合物以裂解细胞，并使其在室温下反应90分钟。将反应完成后的细胞裂解物施加至LANCEcAMP试剂盒(PerkinElmer,USA)，以通过累积的cAMP计算EC50值，并将这些值相互比较。与人GIP相比的相对效价示于下表2和表3中。
表2
三角激动剂的相对效价比
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表3
三角激动剂长效缀合物的相对效价比
如上所述制备的新型三角激动剂长效缀合物具有能够激活GLP-1受体、GIP受体和胰高血糖素受体全部的三角激动剂功能，因此可用作呼吸道感染性疾病后的后遗症的治疗剂材料。
实验实施例2：改善因SARS-CoV-2感染诱导的细胞因子风暴造成的急性肺炎症的 效果
为了检查上述实施例中制备的SEQ ID NO:42的长效缀合物对改善由SARS-CoV-2感染引起的肺部炎症的功效，使用了仓鼠模型(SYRIAN HAMSTER,RjHAN:aura,Central LabAnimal)，其中急性肺部炎症由SARS-CoV-2感染诱导。
首先，以103TCID50/mL(PBS)制备传代培养的SARS-CoV-2，并将120μL的相应的病毒溶液滴入仓鼠鼻腔以通过吸入诱导病毒感染。将SARS-CoV-2感染的仓鼠模型划分成赋形剂对照和用SEQ ID NO:42的长效缀合物处理的组，并且每2天进行重复施用。
在第一项测试中，在重复施用两次后，通过尸检取出每只仓鼠的肺组织，并通过定量PCR评估促炎细胞因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的表达水平。
结果，证实了当施用SEQ ID NO:42的长效缀合物时，与赋形剂对照组相比，肺组织中促炎细胞因子的表达减少(图1A,vs.SARS-CoV-2,媒剂,通过非配对t检验)。
在第二项测试中，将赋形剂或SEQ ID NO:42的长效缀合物向SARS-CoV-2感染的仓鼠模型重复施用四次，并取出肺组织，并且通过H&E染色评估组织的炎症程度。作为阴性对照，使用未施用SEQ ID NO:42的长效缀合物的SARS-CoV-2感染组。
结果，类似于图1A的结果，证实了当施用SEQ ID NO:42的长效缀合物时，与赋形剂对照组相比，观察到肺部炎症评分显著降低(图1B，vs.SARS-CoV-2,媒剂,通过非配对t检验)。
这些结果表明，SEQ ID NO:42的长效缀合物可以降低参与体内炎性反应的细胞因子的水平，从而改善炎症，这表明根据本发明的长效缀合物可以抑制细胞因子风暴并且可以抑制过度免疫反应，从而有效地改善和控制被称为COVID-19后遗症的急性肺部炎症。
实验实施例3：改善因细胞因子风暴诱导造成的肺纤维化的效果
使用LPS(脂多糖)仓鼠模型进行实验以检查SEQ ID NO:42的长效缀合物对改善肺纤维化的功效，其中肺纤维化是通过过度急性肺炎症诱导的。
首先，经过第0天→第1天→第3天，通过气管内→腹膜内→气管内注射将100μg至200μg LPS注射入仓鼠中。将注射LPS的仓鼠划分成赋形剂对照组和施用SEQ ID NO:42的长效缀合物的组，并且以2天的间隔进行重复施用。在重复施用六次后的第11天，通过尸检取出每只仓鼠的肺组织，并通过Masson三色染色(Masson-trichrome,MT)进行染色来评估组织纤维化的程度。作为阴性对照组，使用未施用SEQ ID NO:42的长效缀合物的LPS注射组。结果，证实了当施用SEQ ID NO:42的长效缀合物时，与赋形剂对照组相比，肺组织中的纤维化区域显著减少(图2,vs.LPS,媒剂,通过非配对t检验)。
此结果证实了SEQ ID NO:42的长效缀合物可以抑制肺纤维化。
综合这些实施例的实验结果，证实了根据本发明的长效缀合物，以SEQ ID NO:42的长效缀合物为代表，能够改善由SARS-CoV-2感染引起的过度肺部炎性反应，从而有效地改善甚至是肺纤维化——COVID-19的代表性后遗症。
基于以上描述，本领域技术人员将理解，在不改变本公开的技术精神或本质特征的情况下，本公开可以以不同的具体形式实现。在这方面，应当理解上述实施方式不是限制性的，而在所有方面都是说明性的。本公开的范围由所附权利要求而非由在其之前的描述来限定，因此落入这些权利要求的边界或此类边界的等同物之内的所有变化和修改因此都意图被这些权利要求所囊括。
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Xaa Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Ile Gln Tyr Glu Glu
1 5 10 15
Glu Ala Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Lys Asp Thr Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
35 40
<210> 21
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 21
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Cys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
35
<210> 22
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 22
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
35
<210> 23
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 23
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Cys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys
20 25 30
Lys Asn Asp Trp Lys His Asn Ile Thr
35 40
<210> 24
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 24
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Cys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210> 25
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<400> 25
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
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<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<400> 26
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Ser
1 5 10 15
Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
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<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<400> 27
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
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20 25 30
Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35 40
<210> 28
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<400> 28
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
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20 25 30
Lys Asn Asp Trp Lys His Asn Ile Thr
35 40
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 29
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Thr Cys
20 25 30
<210> 30
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 30
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr Cys
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<210> 31
<211> 29
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 31
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Cys Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Ala Gln
20 25
<210> 32
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 32
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Cys Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210> 33
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 33
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Cys
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 34
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Cys
20 25 30
<210> 35
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 35
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
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<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 36
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Cys Glu
1 5 10 15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Gly
35 40
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<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 37
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Cys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Gly
35 40
<210> 38
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<400> 38
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Ser Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
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20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Ser
35 40
<210> 39
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<400> 39
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Gly
1 5 10 15
Gln His Ala Gln Cys Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Gly Gly Pro
20 25 30
Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35 40
<210> 40
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<400> 40
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Arg Ala Cys Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210> 41
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<400> 41
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Cys Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210> 42
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 42
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
35 40
<210> 43
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 43
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Cys Ser
20 25 30
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35
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<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<400> 44
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1 5 10 15
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20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210> 45
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<400> 45
His Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Met Asp Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Gln Asp Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
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<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<400> 46
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1 5 10 15
Gln His Ala Gln Glu Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
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<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<400> 47
His Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Gln Glu Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
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<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<400> 48
His Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
<210> 49
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 49
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Cys Met Asp Glu
1 5 10 15
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20 25 30
<210> 50
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 50
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
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35 40
<210> 51
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 51
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
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<210> 52
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 52
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr Cys
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<210> 53
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 53
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Cys
20 25 30
<210> 54
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 54
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asp Trp Leu Leu Ala Glu Cys
20 25 30
<210> 55
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 55
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Cys
20 25 30
<210> 56
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 56
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Cys
20 25 30
<210> 57
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 57
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Cys
20 25 30
<210> 58
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 58
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Thr Lys Cys
20 25 30
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 59
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Cys Met Asp Glu
1 5 10 15
Lys His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Lys
20 25 30
<210> 60
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 60
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
Lys His Cys Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Lys
20 25 30
<210> 61
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 61
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
Ile Ala Cys Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Lys
20 25 30
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<400> 62
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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1 5 10 15
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20 25 30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
35
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<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 64
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Cys Ala Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
35
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<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 65
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 66
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Cys Arg Ala Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
20 25 30
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<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 67
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Cys Ala Ala Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 68
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 69
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
35
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<213> 人工序列
<220>
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 70
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
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Lys Arg Ala Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 71
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
35
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<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 72
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 73
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1 5 10 15
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20 25 30
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35
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 74
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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35
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<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 75
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
20 25 30
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<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 76
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
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<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 77
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
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20 25 30
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 78
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
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<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 79
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1 5 10 15
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<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 80
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 81
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Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Thr Cys
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<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 82
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 83
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1 5 10 15
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 84
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1 5 10 15
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20 25 30
<210> 85
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 85
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1 5 10 15
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20 25 30
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 86
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1 5 10 15
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<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 87
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1 5 10 15
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<220>
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 88
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20 25 30
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<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 89
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<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 90
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1 5 10 15
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20 25 30
<210> 91
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 91
Xaa Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asp Trp Leu Leu Ala Glu Lys Cys
20 25 30
<210> 92
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 92
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Cys
20 25 30
<210> 93
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 93
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Cys
20 25 30
<210> 94
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 94
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1 5 10 15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Lys Cys
20 25 30
<210> 95
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 95
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Cys His His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
35
<210> 96
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 96
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His Cys Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
35
<210> 97
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 97
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Cys His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
35
<210> 98
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 98
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
35 40
<210> 99
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 99
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Ala Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
35 40
<210> 100
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 100
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gln His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
35 40
<210> 101
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 101
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Asp Gln His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
35 40
<210> 102
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三角激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是2-氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸成环
<400> 102
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Leu Asp Glu
1 5 10 15
Lys Ala Ala Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asp Gln His Pro Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
35 40
<210> 103
<211> 12
<212> PRT
<213> 智人
<400> 103
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro
1 5 10
<210> 104
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 104
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Pro Ser Cys Pro
1 5 10
<210> 105
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 105
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Pro
1 5 10
<210> 106
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 106
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser
1 5 10
<210> 107
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 107
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro
1 5 10
<210> 108
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 108
Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser
1 5
<210> 109
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 109
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys
1 5
<210> 110
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 110
Glu Lys Tyr Gly Pro Pro Cys
1 5
<210> 111
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 111
Glu Ser Pro Ser Cys Pro
1 5
<210> 112
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 112
Glu Pro Ser Cys Pro
1 5
<210> 113
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 113
Pro Ser Cys Pro
1
<210> 114
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 114
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Ser Cys Pro
1 5 10
<210> 115
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 115
Lys Tyr Gly Pro Pro Pro Ser Cys Pro
1 5
<210> 116
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 116
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Ser Cys Pro
1 5
<210> 117
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 117
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys
1 5
<210> 118
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 118
Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
1 5
<210> 119
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 119
Glu Ser Lys Pro Ser Cys Pro
1 5
<210> 120
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 120
Glu Ser Pro Ser Cys Pro
1 5
<210> 121
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 121
Glu Pro Ser Cys
1
<210> 122
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 122
Ser Cys Pro
1
<210> 123
<211> 221
<212> PRT
<213> 智人
<400> 123
Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu
1 5 10 15
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu
20 25 30
Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln
35 40 45
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
50 55 60
Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu
65 70 75 80
Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys
85 90 95
Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
100 105 110
Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser
115 120 125
Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys
130 135 140
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln
145 150 155 160
Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly
165 170 175
Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn
195 200 205
His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
210 215 220
<210> 124
<211> 442
<212> PRT
<213> 智人
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(442)
<223> 第1至442位的氨基酸形成人免疫球蛋白G4 Fc片段 (同型二聚体)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(221)
<223> 第1至221位的氨基酸形成一个单体
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (222)..(442)
<223> 第222至442位的氨基酸形成一个单体
<220>
<221> DISULFID
<222> (3)..(224)
<223> 第3位和第224位的氨基酸形成间二硫键
<220>
<221> DISULFID
<222> (35)..(95)
<223> 第35位和第95位的氨基酸形成链内二硫键
<220>
<221> DISULFID
<222> (141)..(199)
<223> 第141位和第199位的氨基酸形成链内二硫键
<220>
<221> DISULFID
<222> (256)..(316)
<223> 第256位和第316位的氨基酸形成链内二硫键
<220>
<221> DISULFID
<222> (362)..(420)
<223> 第362位和第420位的氨基酸形成链内二硫键
<400> 124
Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu
1 5 10 15
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu
20 25 30
Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln
35 40 45
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
50 55 60
Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu
65 70 75 80
Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys
85 90 95
Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
100 105 110
Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser
115 120 125
Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys
130 135 140
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln
145 150 155 160
Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly
165 170 175
Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn
195 200 205
His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Pro Ser Cys
210 215 220
Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
225 230 235 240
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
245 250 255
Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp
260 265 270
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
275 280 285
Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
290 295 300
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
305 310 315 320
Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
325 330 335
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu
340 345 350
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
355 360 365
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
370 375 380
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
385 390 395 400
Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn
405 410 415
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
420 425 430
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440

Claims (16)

1.用于预防或治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症的药物组合物，所述药物组合物包括药学上可接受的赋形剂和药学有效量的包含SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列的肽。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述肽是长效缀合物的形式，并且所述长效缀合物由下列化学式1表示：
[化学式1]
X–L–F
其中X是SEQ ID NO:1至102的任一个氨基酸序列的肽；
L是包括乙二醇重复单元的连接体，
F是免疫球蛋白Fc区，并且
–表示X和L之间以及L和F之间的共价键合。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述呼吸道感染性疾病是呼吸道病毒引起的感染性疾病。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中所述呼吸道病毒是选自下列的任一种：腺病毒、牛痘病毒、单纯疱疹病毒、副流感病毒、鼻病毒、水痘带状疱疹病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞体病毒、登革热病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、冠状病毒、严重急性呼吸综合征相关病毒(SARS相关病毒)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)。
5.根据权利要求3所述的药物组合物，其中所述呼吸道病毒是SARS-CoV-2。
6.根据权利要求3所述的药物组合物，其中所述呼吸道病毒是变体病毒。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其中所述变体呼吸道病毒引起与所述呼吸道病毒引起的后遗症相同的后遗症。
8.根据权利要求6所述的药物组合物，其中所述变体呼吸道病毒是选自下列的任一种：SARS-CoV-2α变体(B.1.1.7谱系)、SARS-CoV-2β变体(B.1.351谱系)、SARS-CoV-2γ变体(P.1谱系)和SARS-CoV-2δ变体(B.1.617.2谱系)。
9.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述呼吸道感染性疾病后的后遗症是选自下列的任一种或多种：发热、呼吸困难、咳嗽、肺炎、肺纤维化、疼痛、肌痛、疲劳、炎症和神经***障碍。
10.根据权利要求9所述的药物组合物，其中所述呼吸道感染性疾病后的后遗症是由过度细胞因子分泌造成的组织损伤引起的。
11.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述呼吸道感染性疾病后的后遗症是COVID-19后肺纤维化。
12.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述药物组合物在施用时具有下列特征中的一种或多种：
(i)肺部炎症评分降低；
(ii)促炎细胞因子的表达或分泌减少；
(iii)肺纤维化区域减小；和
(iv)炎症小体复合物的产生受到抑制。
13.根据权利要求12所述的药物组合物，其中所述细胞因子是选自下列的任一种或多种：白细胞介素、肿瘤坏死因子和干扰素。
14.根据权利要求12所述的药物组合物，其中所述细胞因子是IL-1β、TNF-α或IFN-γ。
15.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述药物组合物被施用于患有细胞因子风暴综合征、脓毒症或由于呼吸道病毒感染导致的器官衰竭的个体。
16.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述肽包含选自SEQ ID NO:21、22、42、43、50、77和96的氨基酸序列。
CN202180077958.9A 2020-10-16 2021-10-18 对胰高血糖素、glp-1和gip受体全部具有活性的三角激动剂在治疗呼吸道感染性疾病后的后遗症中的用途 Pending CN116615254A (zh)

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