CN116546967A - 天然护肤组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种外用化妆品组合物和方法，其可用于通过例如治疗和/或预防多种皮肤病症来改善皮肤的健康和/或外观。本发明还提供了用于增强免晒美黑的组合物和方法。生物两亲分子用作活性组分、制剂增强剂和/或皮肤活性组分的递送容器。

Description

天然护肤组合物

相关申请的交叉引用

本申请要求2020年8月12日提交的美国临时专利申请第63/064,468号的优先权，其全文以引用方式并入本文。

背景技术

皮肤是人体最大的器官。它由多层组成，包括表皮、真皮和皮下组织。表皮为最外层，具有控制细胞和组织的水分散失等功能。真皮层位于表皮之下，包含血管、***、毛囊和汗腺。皮下组织主要用于脂肪储存。

最外层的表皮由具有下层基底膜的复层扁平上皮组成。它不含血管，靠真皮扩散滋养。构成表皮的主要细胞类型是角质形成细胞，也有黑素细胞和朗格汉斯细胞。表皮可以进一步细分为以下层(从最外层开始)：角质层、透明层、颗粒层、棘层和基底层。细胞在最内层通过有丝***形成。当它们分化并充满角蛋白时，它们沿层向上移动，改变形状和组成。它们最终到达角质层并脱落。这个过程称为角质化，在约30天内发生。

由于皮肤(主要是表皮)暴露于环境中，并且其目的是作为保护屏障，因此皮肤随着时间的推移会遭受长期损伤。紫外线辐射、环境污染和大气污染、风、热、低相对湿度水平、接触家用表面活性剂和其他化学品、研磨剂、吸烟、酒精、药物、日常饮食、压力、机械压力、恶劣大气条件和遗传可影响皮肤的外观和健康，增加暴露量和/或时间通常导致更大的皮肤损伤。

其他因素，诸如皮肤衰老和其他生化变化、激素波动、疲劳、压力、痤疮、怀孕、晒黑、日常饮食、疾病、受伤、血肿和血液微循环障碍，也可对皮肤的外观和/或健康造成有害影响。此类对皮肤的有害作用的一些示例包括干燥、产生细纹和皱纹、弹性丧失、皮肤消瘦和松垂、坚实度丧失、皮肤变薄、肤色均匀性丧失、肤色暗淡、色素沉着过度、老年性黑子、老年斑、红斑、晒斑、表面纹理粗糙、大理石纹状色素沉着、瘢痕形成和脱皮。

有几种开发用于帮助对抗这些与衰老相关的皮肤病症以及其他慢性病症的外用护肤品和皮肤病学治疗。然而，这些产品的功效不稳定且通常不确定。一种此类产品是维生素A(视黄醇)和被称为类视黄醇的维生素A衍生物，其为外用治疗剂，被认为通过松弛皮肤顶层并促进细胞更替而起作用。此外，中和自由基的维生素C(抗坏血酸)外用用于愈合皮肤和减少细纹和皱纹的出现。维生素K外用用于帮助治疗破裂的血管、蜘蛛状静脉、瘀伤、黑眼圈和长斑的红皮肤。α-羟基酸(AHA)和β-羟基酸(BHA)为外用去角质剂，其提高皮肤活力并帮助预防痤疮。表皮生长因子(EGF)外用可改善皮肤功能并产生总体上更年轻的外观。

某些慢性皮肤问题，诸如痤疮、癌前病变、疤痕、色素沉着障碍、湿疹、牛皮癣和脂溢性皮炎，通常需要治疗，诸如口服药物、刺激性化学换肤和外用软膏；然而，许多此类治疗包含可引起不良副作用的成分，例如引起皮肤烧伤和脱皮、脱发以及胎儿伤害和出生缺陷(若在怀孕期间使用)。

另一种保护皮肤的同时维持年轻外观的方案是避免暴露于太阳或其他UV辐射源。此类暴露对皮肤有害并且实际上会引起晒伤、皮肤起疱、皮肤早衰或皮肤癌。自美黑或免晒美黑组合物提供了安全的替代方案，并使个人能够获得所需的晒黑外观。

最著名的免晒美黑剂是二羟基丙酮(“DHA”，化学上也称为1,3-二羟基-2-丙酮)。DHA在施用后被认为通过其羟基与天然存在于皮肤的水脂膜和角质层第一层中的氨基酸和肽的氨基之间的相互作用发挥其作用。这些所谓的美拉德反应被认为导致皮肤中形成褐色色素，从而使其具有与天然获得的褐色肤色相似的外观。尽管通过使用免晒美黑方案实现了减少暴露于有害辐射光的益处，但许多产品难以均匀地施用而不留条纹，由于不适当的给药导致皮肤出现不想要的橙色着色，并且/或者赋予令人不悦的气味。这些外用组合物也可能含有有害的或刺激皮肤的合成添加剂。

皮肤健康对于健康长寿的生活是至关重要的。此外，皮肤健康通常是美丽和年轻的外在表现。有多种产品和治疗选择用于治疗和/或预防多种皮肤病症，或以其他方式增强皮肤的健康和/或外观。然而，许多此类治疗使用具有负面副作用的刺激性处方药或手术。另外，更温和的选择并非对所有人都有效，或难以有效地非处方使用。因此，对改进的、安全的和有效的化妆品组合物的需求一直存在。

发明内容

本发明提供了包含多用途生物两亲性分子(BAM)的外用化妆品制剂，其中BAM用作活性成分、制剂增强剂和/或用于改善皮肤健康和/或外观的活性成分的递送剂。此外，本发明提供了使用该外用组合物治疗和/或预防一种或多种皮肤病症的方法，这些皮肤病症包括慢性和/或衰老相关的皮肤病症。有利地，本发明的外用组合物和方法是环境友好的、无毒的和有成本效益的。

在某些实施方案中，本发明的外用化妆品组合物包含一种或多种BAM，这些BAM对皮肤的外观和/或健康具有一种或多种直接或间接的积极作用。在一些实施方案中，外用组合物还可包含皮肤病学可接受的载体和/或一种或多种活性和/或非活性的化妆品成分，例如，诸如维生素、植物性药材、染料、香味剂、防晒剂、去角质剂、精油等。

在一些实施方案中，BAM包括生物表面活性剂，例如，诸如糖脂和脂肽。在一些实施方案中，BAM包括磷脂和/或磷脂混合物。在一些实施方案中，组合物包含多于一种类型的BAM的混合物，例如，诸如糖脂和磷脂的混合物。

在优选实施方案中，BAM由活细胞例如微生物产生。在一些实施方案中，BAM从生物材料中提取，例如，从诸如植物或植物油中提取。在一些实施方案中，BAM可以合成产生。

当包含在组合物中时，本发明的组合物的BAM可用于一种或多种目的。例如，BAM可以是活性成分、制剂增强剂和/或活性成分的递送容器。

在一个实施方案中，BAM可作为活性成分，用于通过例如治疗或预防皮肤病症来改善皮肤的健康和/或外观，该皮肤病症为例如诸如皱纹、松垂、干燥、粗糙、脱皮、湿疹、银屑病、皮炎、老年斑、色素沉着过度、疤痕、瘢痕疙瘩、扩张纹、脂溢性皮炎、痤疮、体臭等。在示例性实施方案中，BAM可改变表皮的表面，例如角质层或透明层(strata luceum)的表面，以改善纹理和强度，促进和/或抑制皮脂产生，促进水分保持，减少细纹和皱纹的出现，和/或提亮肤色。在另一个示例性实施方案中，BAM可具有抗微生物和/或抗生物膜特性。

在一个实施方案中，当配制成例如洗剂、浆液和乳膏时，BAM可用作外用组合物的制剂增强剂。在示例性实施方案中，BAM可用作乳化剂(水包油和油包水)、稳定剂、增稠剂、润肤剂、防腐剂、洗涤剂、粘度调节剂、消泡剂、发泡剂和/或UV光防护剂，以防止染料和活性成分的劣化。因此，在一些实施方案中，BAM可用于改善化妆品和护肤制剂的稳定性、保质期和外观。

在一个实施方案中，BAM可用作递送容器和/或皮肤渗透增强剂，其可以促进皮肤活性组分(包括其他BAM)通过表皮并且/或者将此类活性组分递送至目标皮肤层。在示例性实施方案中，BAM可形成脂质囊泡或脂质体，其中掺入了任选的活性组分。该脂质体可含有亲水性和/或亲脂性活性组分，例如抗氧化剂、维生素、抗菌剂、油、抗炎剂、血液循环促进剂、增亮剂、皮肤调理剂、抗衰老剂、保湿剂、激素、着色剂和蛋白质。

在某些实施方案中，组合物包含皮肤病学可接受的载体，诸如油包水或水包油乳液或水性浆液。

外用组合物可配制成例如悬浮液、乳液、纳米乳液、水凝胶、多相溶液、脂质体分散液、洗剂、乳膏、凝胶、泡沫、软膏、糊剂、喷雾剂、调理剂、洗发剂、面膜、清洁剂、胶束水、滋补剂、化妆品(例如唇膏、粉底、古铜色化妆品、胭脂、眼影)和/或须后水。

在优选实施方案中，提供了用于改善皮肤健康和/或外观的方法，其中将根据本发明实施方案的外用化妆品组合物直接施用于有需要的受试者的皮肤区域。

在一些实施方案中，“施用”组合物可包括使有效量的组合物直接与受试者的皮肤接触并且优选地使该组合物在皮肤上停留一段时间，例如约20秒至1小时，以便实现所需的美学、预防、治疗或其他美容有益效果。可使用手指或使用工具或装置(例如垫、棉球、刷子、布、施用笔、喷雾施用器等)施用组合物。

在某些实施方案中，将组合物揉进皮肤，使得该组合物被吸收于其中。在一些实施方案中，可将组合物施用到皮肤上一段时间，然后使用例如水将其从皮肤上冲洗掉。

在某些实施方案中，例如每隔一天、每天一次或每天两次施用外用化妆品组合物。在一些实施方案中，每隔一天、每天一次或每天两次施用外用组合物一段不确定的时间，例如至少一周、两周、三周或更长时间，以便实现和/或维持所需的效果。

在一些实施方案中，这些方法可用于改善皮肤衰老迹象，例如，减少细纹和皱纹的出现，减少老年斑和晒斑的出现，平衡肤色，提亮皮肤色调，平滑纹理，和/或恢复年轻的皮肤外观。

在一个实施方案中，这些方法可用于通过例如免晒美黑组合物增加皮肤的色素沉着。即，该组合物可用于在不使用UV和其他辐射光的情况下为皮肤提供晒黑的外观。因此，本发明这些的方法可用于通过降低受试者对日光浴的需求来降低晒伤和与阳光相关的皮肤癌的风险。

此外，这些方法可用于治疗和/或预防皮肤病症，包括例如痤疮、瑕疵、酒渣鼻、光损伤、皱纹、松垂/松弛、干燥、老年斑、疤痕、扩张纹、皮炎、蜂窝组织炎、瘢痕疙瘩、狼疮、银屑病、鱼鳞癣(ichtiosis)、特应性皮炎、慢性伤口、褥疮、毛周角化症(keratosispiralis)、皮脂腺囊肿、白癜风、黄褐斑(melisma)、疣、炎性皮肤病、炎症后色素沉着过度、角化病、湿疹、干燥病、瘙痒症、扁平苔癣、结节性痒疹、微生物感染、体臭、脂溢性皮炎、烧伤、晒伤、头皮屑和汗疹。

在一些实施方案中，这些方法可用于去除和/或溶解皮肤上的化妆品、油和其他杂质。

具体实施方式

本发明提供了包含多用途生物两亲性分子(BAM)的外用化妆品制剂，其中BAM用作活性成分、制剂增强剂和/或用于改善皮肤健康和/或外观的活性成分的递送剂。此外，本发明提供了使用该外用组合物治疗和/或预防一种或多种皮肤病症的方法，这些皮肤病症包括慢性和/或衰老相关的皮肤病症。有利地，本发明的外用组合物和方法是环境友好的、无毒的和有成本效益的。

选择的定义

如本文所用，“活性成分”、“活性化妆品成分”和“皮肤活性物”组分包括具有生物活性的物质，其是指在皮肤中引起所需的治疗和/或美容效果。这与非活性成分相对。非活性成分包括赋形剂和/或媒介物，用于例如携带、递送和/或稳定活性组分但不引起所需的治疗和/或美容效果。

如本文所用，术语“皮肤病症”包括影响表皮、真皮(包括***、皮脂腺和毛囊)和/或皮下组织的任何人类和动物病症、障碍或疾病。在某些实施方案中，可使用本文的组合物、产品和方法治疗和/或预防的皮肤病症包括但不限于伤口(包括例如烧伤)、疤痕、痤疮、瑕疵、酒渣鼻、毛囊炎、癌、黑素瘤、普通皮炎、口周皮炎、蜂窝组织炎、痈、光损伤、晒伤、皮肤衰老(例如皱纹和干燥)、老年斑、银屑病、鱼鳞癣(ichtiosis)、特应性皮炎、皮疹(包括但不限于红斑、斑疹、丘疹和/或大疱病症)、慢性伤口、褥疮、毛周角化症(keratosispiralis)、皮脂腺囊肿、白癜风、黄褐斑(melisma)、疣、炎性皮肤病、痛觉超敏、异位性皮炎、毛细血管扩张症、炎症后色素沉着过度、角化病、湿疹、干燥病、瘙痒症、扁平苔癣、结节性痒疹、微生物感染、体臭、头皮病症和汗疹。皮肤病症的症状可包括例如皮肤刺激/敏感性、瑕疵和其他痤疮样症状、色素沉着或其丧失、潮红、炎症、皱纹、干燥、松垂、增厚、起鳞、瘢痕形成、起屑、皮疹、荨麻疹、水疱、溃疡、脱皮、脱发和皮肤健康、功能和外观的其他改变。

如本文所用，术语“受试者”是指接受治疗的动物，尤其是哺乳动物，该治疗包括美容、非处方医疗护理、药物医疗和预防护理。本发明上下文中的优选受试者是人。受试者可以是任何年龄或发育阶段的，包括婴儿、幼儿、学步儿童、***前儿童、青少年和成人。受试者可以是任何性别。

如本文所用，“外用”是指适于外部局部施用于皮肤或皮肤施用。即，外用组合物不旨在通过口服、静脉内、肌内、鞘内、皮下、舌下、口腔、直肠、***、吸入、眼或耳途径施用于受试者。

如本文所用，“皮肤病学可接受的”、“美容上可接受的”和“外用可接受的”可互换使用，并且旨在表示特定组分以所用的水平应用于外皮(例如皮肤)时是安全和无毒的。在一个实施方案中，组合物的组分被认为是公认安全的(GRAS)。

如本文所用，术语“有效量”和“有效剂量”用于指能够引起所需的结果(例如皮肤健康和/或外观的改善)的某种事物(例如化合物、组合物、时间)的量。实际量将根据许多因素而变化，包括但不限于所需的结果、所治疗病症的严重程度、受试者的大小、年龄和健康状况以及施用途径。

如本文所用，术语“治疗”是指根除、降低、改善或逆转病症或障碍的程度、体征或症状至任何程度，并且包括但不要求完全治愈该病症或障碍。治疗可以是治愈、改善或部分改善病症。

如本文所用，“预防”病症或障碍是指避免、延迟、阻止或最小化该病症或障碍的特定体征或症状的发作。预防可以是但不要求是绝对的或完全的，这意味着体征或症状可能仍会在以后出现。预防可包括降低此种病症或障碍的发作的严重程度，和/或抑制该病症或障碍发展成更严重的病症或障碍。例如，在一个实施方案中，防止色素沉着过度可指避免、延迟、阻止或最小化与皮肤色素沉着过度相关的一种或多种不需要的特征，例如减少最终形成的色素沉着过度的区域的暗度或尺寸。又例如，在一个实施方案中，预防痤疮可指避免、延迟、阻止或最小化一种或多种与痤疮相关的不想要的特征，例如减少最终形成的黑头粉刺的数量、暗度和/或大小，减轻最终形成的痤疮的严重程度，和/或完全或几乎完全预防痤疮丙酸杆菌的生长、痤疮瑕疵的形成和痤疮的其他症状。

如本文所用，“微生物基组合物”是指包含由于微生物或其他细胞培养物的生长而产生的组分的组合物。因此，这些微生物基组合物可包含微生物本身和/或微生物生长的副产物(例如生物表面活性剂、溶剂和/或酶)。细胞可处于营养状态或为孢子形式，或为两者的混合。细胞可为浮游的或生物膜的形式，或为两者的混合。细胞可为完整的或裂解的。细胞与培养过这些细胞的培养液可以例如在每毫升组合物中有1×10⁴、1×10⁵、1×10⁶、1×10⁷、1×10⁸、1×10⁹、1×10¹⁰或1×10¹¹或更多个细胞的浓度存在。在一个实施方案中，微生物基组合物可以仅包含培养过细胞的培养液，其中细胞被去除。生长副产物可存在于培养液中，并且可包括例如代谢物、细胞膜组分、表达的蛋白质和/或其他细胞组分。

本发明还提供了“微生物基产品”，这些微生物基产品是将在实践中应用以实现期望结果的产品。该微生物基产品可仅仅是从微生物培养过程中收获的微生物基组合物。另选地，该微生物基产品可包含已添加的其他成分。例如，这些其他成分可包括稳定剂、缓冲剂、合适的载体(诸如水、盐溶液或任何其他合适的载体)、为支持微生物进一步生长而添加的营养物、非营养生长促进剂和/或有助于在其所施用的环境中跟踪微生物和/或组合物的试剂。该微生物基产品还可包含微生物基组合物的混合物。该微生物基产品还可包含微生物基组合物的一种或多种组分，已经以某种方式(诸如但不限于过滤、离心、裂解、干燥、纯化等)对该一种或多种组分进行了加工。

“代谢物”是指由代谢产生的任何物质或参与特定代谢过程所必需的物质。代谢物可以是作为代谢的起始材料、中间体或终产物的有机化合物。代谢物的示例可包括但不限于酶、酸、溶剂、醇、蛋白质、碳水化合物、维生素、矿物质、微量元素、氨基酸、生物聚合物和生物表面活性剂。

如本文所用，“分离的”或“纯化的”化合物，例如多核苷酸或多肽，基本上不含天然与该化合物相关的和/或产生了该化合物的其他化合物，诸如细胞材料、基因，基因序列、氨基酸或氨基酸序列。在微生物菌株的上下文中，“分离的”是指将菌株从其天然存在的和/或培育其的环境中取出。因此，分离的菌株可作为例如生物学纯的培养物或作为孢子(或菌株的其他形式)而存在。

在某些实施方案中，纯化的化合物至少是60重量％的所需化合物。优选地，制剂是至少75重量％、更优选地至少90重量％并且最优选地至少99重量％的所需化合物。例如，纯化的化合物为所需化合物的至少90重量％、91重量％、92重量％、93重量％、94重量％、95重量％、98重量％、99重量％或100重量％(w/w)的化合物。通过任何合适的标准方法(例如柱色谱法、薄层色谱法或高效液相色谱法(HPLC)分析)测量纯度。

本文提供的范围应理解为该范围内的所有值的简写。例如，范围1至20应理解为包括来自1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20的任何数字、数字组合或子范围以及所有介于上述整数之间的小数值(例如诸如1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8和1.9)。至于子范围，特别考虑了从该范围的任一端点延伸的“嵌套子范围”。例如，示例性范围1至50的嵌套子范围可在一个方向上包括1至10、1至20、1至30和1至40或者在另一个方向上包括50至40、50至30、50至20和50至10。

如本文所用，“减少”是指负变化，“增加”是指正变化，各自为至少1％、5％、10％、25％、50％、75％或100％。

如本文所用，“参考”是指标准或对照条件。

如本文所用，“表面活性剂”是指降低两种液体之间、液体和气体之间或液体和固体之间的表面张力(或界面张力)的化合物。表面活性剂用作例如洗涤剂、湿润剂、乳化剂、发泡剂和分散剂。“生物表面活性剂”是由活生物体产生的表面活性剂。

过渡术语“包括”与“包含”或“含有”同义，是包含性的或开放式的，并且不排除其他未列举的要素或方法步骤。相比之下，过渡短语“由...组成”排除了权利要求中未指定的任何要素、步骤或成分。过渡短语“基本上由...组成”将权利要求的范围限制在指定的材料或步骤以及“那些实质上不影响本要求保护的发明的基本和新颖特征的材料或步骤”。词组“包括”的使用考虑了“由”和/或“基本上由”列举的元素“组成”的实施方案。

除非特别说明或从上下文显而易见，否则如本文所用，术语“或者”应理解为包含性的。除非特别说明或从上下文显而易见，否则如本文所用，术语“一”、“一个”和“该”应理解为单数或复数。

除非特别说明或从上下文显而易见，否则如本文所用，术语“大约”应理解为在本领域的正常公差范围内，例如在平均值的2个标准偏差内。“大约”可理解为在规定值的10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％、0.05％或0.01％内。

本文中变量的任何定义中的化学基团列表的描述包括作为任何单个基团或所列基团的组合的变量的定义。本文中变量或方面的实施方案的描述包括作为任何单个实施方案或与任何其他实施方案或其部分组合的实施方案。

本文提供的任何组合物或方法可与本文提供的任何其他组合物和方法中的一种或多种组合。

本发明的其他特征和优点将从其以下优选实施方案的描述和权利要求书中显而易见。本文引用的所有参考文献都通过引用方式并入本文。

外用化妆品组合物

本发明提供了护肤组合物及其使用方法。特别地，本发明提供了可通过例如处理和/或预防皮肤病症来改善皮肤健康和/或外观的护肤和化妆产品。在某些实施方案中，组合物可用于给皮肤外观赋予美容性增强性质。

在某些实施方案中，本发明的外用化妆品组合物包含一种或多种BAM，这些BAM对皮肤的外观和/或健康具有一种或多种直接或间接的积极作用。在一些实施方案中，外用组合物还可包含皮肤病学可接受的载体以及一种或多种活性或非活性化妆品成分，例如，诸如维生素、保湿剂、染料、香味剂、防晒剂、自美黑颜料、去角质剂、精油、植物提取物等。

在优选实施方案中，提供了外用化妆品组合物，其包含多用途生物两亲性分子(BAM)，其中BAM用作活性成分、配制增强剂和/或活性化妆品成分的递送剂。

在一些实施方案中，BAM包括生物表面活性剂，例如，诸如糖脂和脂肽。在一些实施方案中，BAM包括磷脂和/或磷脂混合物。在一些实施方案中，组合物包含多于一种类型的BAM的混合物，例如，诸如糖脂和磷脂的混合物。

根据本发明有用的其他BAM包括甘露糖蛋白、β-葡聚糖和具有生物乳化和降低表面/界面张力性质的其他代谢物。

在优选实施方案中，BAM由活细胞例如微生物产生。在一些实施方案中，微生物BAM以粗品形式使用，其中分子存在于培养微生物的培养液中并且从中收集分子而不经纯化。粗品形式可包含例如培养液中至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％(w/v)的BAM。在一些实施方案中，BAM已从培养产物中纯化。

在一些实施方案中，BAM从生物材料中提取，例如，从诸如植物或植物油中提取。提取后可进一步纯化该BAM。在一些实施方案中，BAM可以合成产生。

生物表面活性剂

微生物产生的表面活性剂，即生物表面活性剂，是由两部分组成的两亲物：极性(亲水性)部分和非极性(疏水性)基团。生物表面活性剂可包括例如糖脂、脂肽、黄素脂、磷脂、脂肪酸酯以及高分子量的聚合物诸如脂蛋白、脂多糖-蛋白质复合物和/或多糖蛋白质-脂肪酸复合物。

由于它们的两亲性结构，生物表面活性剂降低了液体、固体和气体分子之间的表面和界面张力。此外，生物表面活性剂在界面处累积，导致在溶液中形成聚集的胶束结构。生物表面活性剂形成孔并使生物膜不稳定的能力允许它们用作例如抗细菌剂和抗真菌剂。此外，它们可抑制微生物对各种表面的粘附，防止形成生物膜，并且可具有强大的乳化和破乳性质。

例如，根据本发明方法的生物表面活性剂可选自例如，低分子量糖脂(例如槐糖脂、纤维二糖脂质、鼠李糖脂、甘露糖赤藓糖醇脂和海藻糖脂)、脂肽(例如表面活性素、伊枯草菌素、丰原素、关节炎素和地衣素)、黄酮脂、磷脂(例如心磷脂)和高分子量聚合物(诸如脂蛋白、脂多糖-蛋白质复合物和多糖-蛋白质-脂肪酸复合物)。

在某些实施方案中，BAM是糖脂，诸如甘露糖赤藓糖醇脂(MEL)、槐糖脂(SLP)、海藻糖脂(TL)、纤维二糖脂和/或鼠李糖脂(RLP)。在某些实施方案中，BAM是脂肽，诸如表面活性素、伊枯草菌素、地衣素、关节炎素和/或丰原素。在一个实施方案中，组合物可包含这些生物表面活性剂中的任一生物表面活性剂的组合。

在一个实施方案中，生物表面活性剂是糖脂，其通常包含与鞘脂连接的单糖或寡糖基团或可以乙酰化或烷基化的甘油基团，以及一种或多种脂肪酸。

在一个实施方案中，糖脂是MEL。MEL包含4--B-D-吡喃甘露糖基-内消旋赤藓糖醇或1-/>-B-D-吡喃甘露糖基-内消旋赤藓糖醇作为亲水性部分，以及脂肪酸基团和/或乙酰基作为疏水性部分。通常在甘露糖残基的C4和/或C6处的羟基中的一个或两个羟基可被乙酰化。此外，可以有一至三个酯化的脂肪酸，链长为8至12个碳或更多个碳。

MEL和类MEL物质(例如甘露糖基物质)主要由拟酵母属和黑粉菌属产生，每个物种产生的MEL结构中具有显著的变化性。某些具有与MEL相似性质的甘露糖基物质也可由季也蒙迈耶氏酵母产生。

MEL是无毒的，并且在宽的温度和pH范围内是稳定的。此外，MEL可在没有任何其他防腐剂的情况下使用。

MEL可以多于93种不同的组合生产，这些组合属于5个主要类别：MEL A、MEL B、MELD、三乙酰化MEL A和三乙酰化MEL B/C。可以合成修饰或天然修饰这些分子。例如，MEL可包含不同碳长链或不同数目的乙酰基和/或脂肪酸基团。

根据本发明的MEL分子和/或其修饰形式可包括例如三酰化、二酰化、单酰化、三乙酰化、二乙酰化、单乙酰化和非乙酰化MEL，以及其立体异构体和/或结构异构体。

根据本发明，也可使用其他具有相似结构和相似性质的甘露糖基物质/类MEL物质，例如甘露糖-甘露糖醇脂(MML)、甘露糖-***糖醇脂(MAL)和/或甘露糖-核糖醇脂(MRL)。

有利的是，MEL作为化妆品组合物中的活性或非活性成分可具有若干有益效果。这些有益效果可包括例如减少皮肤炎症、防止由于使用合成表面活性剂如SDS引起的细胞损伤、刺激毛球细胞和毛发生长、修复和/或强化受损毛发、增加成纤维细胞的活力和/或降低老年斑中的黑色素含量。

在优选实施方案中，外用化妆品组合物中MEL(或类MEL物质)的浓度为总组合物重量的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％或0.1％至2.0％。

在一个实施方案中，糖脂是SLP。包括蜜生假丝酵母和熊蜂生斯塔莫酵母的斯塔莫演化支酵母是SLP的两个主要生产者。SLP由连接到长链羟基脂肪酸的二糖槐糖组成。这些SLP是以β-糖苷的方式附接到17-L-羟基十八烷酸或17-L-羟基-Δ9-十八碳烯酸的部分乙酰化的2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-D-吡喃葡萄糖单元。羟基脂肪酸通常有16个或18个碳原子，并且可以含有一个或多个不饱和键。脂肪酸羧基基团可以是游离的(酸性或开放形式)或是在4″-位内酯化的(内酯形式)。

SLP在宽温度、pH和盐度范围的条件下具有环境相容性、高生物可降解性、低毒性、高选择性和比活性。

有利的是，SLP作为化妆品组合物中的活性或非活性成分可具有若干有益效果。这些有益效果可包括例如乳化水包油或油包水混合物、减少炎症和氧化应激、从皮肤上层去除损伤角质形成细胞、通过抗微生物和抗炎作用增强伤口愈合、改善成纤维细胞的代谢、改善胶原蛋白合成和调色/重构皮肤、刺激通过脂肪细胞的瘦素合成并帮助减少引起蜂窝组织炎的皮下脂肪过载、抑制弹性蛋白酶活性并减少皱纹的出现、剥脱和祛除皮肤上的斑点并抑制黑色素生成、控制微生物头皮屑、痤疮和体臭和/或减少炎性病症，诸如皮炎、湿疹和银屑病。

在优选实施方案中，外用化妆品组合物中SLP浓度为总组合物重量的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％或0.1％至2.0％。在一个实施方案中，外用组合物包含酸性形式的SLP。

在具体优选实施方案中，本发明的外用组合物包含约0.1重量％至2.0重量％的MEL，优选约1.0重量％的MEL；并且还包含约0.01重量％至约1.0重量％的SLP，优选约0.5重量％的SLP。

在一个实施方案中，糖脂是RLP。RLP包含糖基头部基团(即鼠李糖)部分和3-(羟基烷酰氧基)链烷酸(HAA)脂肪酸尾部，例如3-羟基癸酸。存在两种主要类型的鼠李糖脂：单鼠李糖脂和二鼠李糖脂，其分别包含一个或两个鼠李糖部分。HAA部分的长度和分支程度可以不同，这取决于例如生长培养基和环境条件。

RLP主要由假单胞菌属细菌例如绿针假单胞菌产生。它们是天然乳化剂，并且可根据本发明用于替代化妆品组合物中的非生物表面活性剂，例如月桂硫酸酯钠、十二烷基硫酸钠和月桂醇聚醚硫酸酯钠。此外，RLP可被配制成增加保湿或润滑皮肤，最小化皱纹的出现，并增加皮肤的光滑度。更进一步地，RLP可用作抗菌剂(革兰氏阳性)和抗真菌剂。

在优选实施方案中，外用化妆品组合物中RLP浓度范围为总组合物重量的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％，优选地0.1％至2.0％。

在一个实施方案中，糖脂是海藻糖脂质(TL)。TL是由例如红串红球菌产生的糖脂。TL具有乳化和分散特性。它们表现出增加的表面活性水平并具有某些抗病毒和抗微生物性质。

在优选实施方案中，外用化妆品组合物中TL浓度范围为总组合物重量的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％，优选地0.1％至2.0％。

在一些实施方案中，生物表面活性剂是脂肽。脂肽是由细菌使用大型多酶复合体合成的寡肽。它们常用作抗生素化合物，并且还表现出除表面活性剂活性外的宽的抗微生物作用谱。所有脂肽具有共同的环状结构，该环状结构由整合到肽部分中的β-氨基或β-羟基脂肪酸组成。芽孢杆菌属细菌的许多菌株能够产生脂肽，例如枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌。在某些实施方案中，脂肽由枯草芽孢杆菌NRRL B-68031和/或解淀粉芽孢杆菌NRRLB-67928产生。

表面活性素家族是最被广泛研究的脂肽家族，由含有13至15个碳原子的β-羟基脂肪酸的七肽组成。表面活性素被认为是最有效的生物表面活性剂之一。表面活性素具有高水平的表面活化功能，并且极度亲水；其与其他生物表面活性剂相比，在更宽的浓度范围内形成透明的凝胶。该生物表面活性剂可作为化妆品的皮肤渗透剂、发泡剂和乳化剂。此外，表面活性素表现出有效的抗菌(革兰氏阴性)、抗真菌和抗病毒性质。甚至进一步地，表面活性素也可以是建立稳定的生物膜的关键因素，同时也抑制包括革兰氏阴性细菌在内的其他细菌形成生物膜。

包括制磷脂菌素的丰原素家族包括具有β-羟基脂肪酸的十肽。丰原素在肽部分中包含鸟氨酸。它们具有抗真菌活性。

以例如伊枯草菌素A、抗霉枯草菌素和杆菌霉素为代表的伊枯草菌素家族是具有β-氨基脂肪酸的七肽。伊枯草菌素还表现出强的抗真菌活性。

在优选实施方案中，组合物以总组合物重量的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％、0.1％至5.0％，优选地0.01％至2.0％的浓度包含。

磷脂

在某些实施方案中，外用组合物的BAM是天然的或合成的磷脂或磷脂混合物。在优选实施方案中，根据本发明的磷脂具有包含由至少一个磷脂酸(PA)分子组成的极性头部的结构。在一些实施方案中，PA与甘油键合。

示例性磷脂包括但不限于磷脂酸、溶血磷脂酸、磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油、磷脂酰甘油磷酸酯、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油磷酸甘油、双(单酰基甘油)磷酸酯(BMP)、双(二酰基甘油)磷酸酯(BDP)、酰基磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、N-酰基磷脂酰乙醇胺以及心磷脂、鞘磷脂和缩醛磷脂。

在某些实施方案中，使用溶血磷脂、氢化、部分氢化和/或未水合的磷脂衍生物、磷脂类似物和/或聚乙二醇化磷脂。

当磷脂(例如溶血卵磷脂)中的磷脂酶A裂解酰基时，得到溶血磷脂。诸如1,3-二磷脂酰甘油的心磷脂是由两个通过甘油连接的磷脂酸组成的磷脂。鞘磷脂是一类鞘脂，通常由磷酸胆碱和神经酰胺组成。缩醛磷脂是醚脂，其中甘油的第一碳位置具有醚连接的烯烃，第二碳具有典型的酯连接的脂肪酸，第三碳通常具有磷脂头部基团，如胆碱或乙醇胺。

在某些实施方案中，使用磷脂混合物，其可包括但不限于卵磷脂，包括粗卵磷脂、溶血卵磷脂和已经脱油、分馏、喷雾干燥、乙酰化、水解、羟基化、氢化和/或富集磷脂级分例如磷脂酰胆碱的卵磷脂，或其组合。

卵磷脂是主要由胆碱、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三酯、碳水化合物和磷脂(例如磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰肌醇)组成的混合物。卵磷脂可在蛋黄和植物和动物细胞的质膜中找到，并且可从蛋黄或从植物油如大豆油、红花油、芥花油或玉米油中分离得到；卵磷脂是从这些植物油中化学或机械提取得到。

在一些实施方案中，磷脂由微生物产生。在示例性实施方案中，微生物是威克汉姆酵母属和/或毕赤酵母属的酵母，例如，诸如异常威克汉姆酵母。

在一些实施方案中，磷脂提取自其他天然来源，例如，诸如大豆、红花油、芥花油、玉米油、蛋黄、器官肉、瘦肉、谷粒、奶、鱼、鱼子和/或磷虾。

在一些实施方案中，磷脂是合成的。

在优选实施方案中，组合物以总组合物重量的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％、0.1％至5.0％，优选地0.01％至2.0％的浓度包含。

多功能BAM

在一些实施方案中，外用组合物包含不同BAM的混合物。在一个示例性实施方案中，组合物包含糖脂和磷脂。在具体的示例性实施方案中，组合物包含SLP和/或MEL，其含有心磷脂和/或磷脂酰甘油。在另一具体的示例性实施方案中，组合物包含SLP和MEL，其任选地含有脂肽或磷脂BAM。

当包含在组合物中时，BAM可用于一种或多种目的。例如，BAM可以是活性成分、制剂增强剂和/或活性化妆品成分的递送容器。

在某些实施方案中，BAM和/或由根据本发明的BAM形成的胶束的尺寸小于10nm，优选地小于8nm，更优选地小于5nm。在具体的示例性实施方案中，SLP分子和/或胶束的尺寸为0.8nm至1.5nm，或约1.0nm至1.2nm。

有利地，在某些实施方案中，本发明的BAM的小尺寸增强了其向纳米尺寸的空间和孔中渗透，例如，向诸如生物膜的胞外基质、微生物的细胞膜或细胞壁、皮肤毛孔以及真皮细胞和胶原纤维之间的空间渗透。因此，本发明的BAM可比更大的常规两亲性分子如合成表面活性剂更有效。

在一个实施方案中，BAM可作为活性成分，用于通过例如治疗或预防皮肤病症来改善皮肤的健康和/或外观，该皮肤病症选自例如皱纹、松垂、干燥、粗糙、脱皮、湿疹、银屑病、老年斑、色素沉着过度、疤痕、瘢痕疙瘩、扩张纹、脂溢性皮炎、痤疮、体臭和本文别处描述的其他病症。在示例性实施方案中，BAM可改变表皮的表面，例如角质层或透明层的表面，以改善纹理和强度，促进和/或抑制皮脂产生，促进水分保持，减少细纹和皱纹的出现，和/或提亮肤色。在另一个示例性实施方案中，BAM可具有抗微生物和/或抗生物膜特性。

在一个实施方案中，当配制成例如洗剂、浆液和乳膏时，BAM可用作外用组合物的制剂增强剂。在示例性实施方案中，BAM可用作乳化剂(水包油和油包水)、稳定剂、增稠剂、润肤剂、防腐剂、洗涤剂、粘度调节剂、消泡剂、发泡剂和/或UV光防护剂，以防止染料和活性成分的劣化。因此，在一些实施方案中，BAM可用于改善化妆品制剂的稳定性、保质期和外观。

在一个实施方案中，BAM可用作递送容器和/或皮肤渗透增强剂，其可以促进皮肤活性组分(包括其他BAM)通过表皮并且/或者将此类活性组分递送至目标皮肤层。在示例性实施方案中，BAM可形成脂质囊泡或脂质体，其中掺入了任选的活性组分。该脂质体可含有亲水性和/或亲脂性活性组分，例如抗氧化剂、维生素、抗菌剂、油、抗炎剂、血液循环促进剂、增白剂、皮肤调理剂、抗衰老剂、保湿剂、激素、着色剂和蛋白质。

根据本发明使用的脂质体可以是本领域已知的多种脂质囊泡中的任一种脂质囊泡，包括多层囊泡、小单层囊泡、大单层囊泡和蜗状囊泡，并且可根据大量制备方法中的任一种方法制备。用于形成脂质体的材料和步骤是本领域技术人员公知的。通常，将脂质或亲脂性物质(例如生物表面活性剂和/或磷脂)溶解在有机溶剂中。当除去溶剂时，例如通过真空旋转蒸发除去溶剂时，脂质残余物在容器壁上形成膜。

然后将通常含有电解质或亲水性生物活性材料的水溶液加到膜中。有时，包括环糊精或其他聚合物以增强脂质体的稳定性。脂质分子根据极性排列，疏水的尾部指向内部而极性头部基团指向外部。在多层囊泡中，膜的一个表面上的极性基团指向囊泡的内部，而另一个表面上的极性基团指向外部环境。当囊泡在其制备过程中形成时，加入水中的任何水溶性分子被包含在球体内部的水性空间中，而在囊泡形成过程中加入的任何脂溶性分子被包含在囊泡的核心中。

其他组分

外用组合物可被配制成悬浮液(例如脂质体悬浮液)、乳液、纳米乳液、水凝胶、多相溶液、脂质体分散液、洗剂、乳膏、凝胶、香精、泡沫、液体、糕饼、软膏、糊剂、浆液、喷雾剂、气溶胶、调理剂、洗发剂、面膜、清洁剂、滋补剂、化妆品(例如唇膏、粉底、古铜色化妆品、胭脂、眼影)、贴剂、铅笔、粉末、小毛巾、肥皂、清洁剂、棒、摩丝、酏剂、浓缩物和/或须后水。

该组合物可以在宽pH水平范围内配制。在一个实施方案中，外用组合物的pH范围为1.0至13.0。在一些实施方案中，外用组合物的pH范围为2.0至12.0。适于本发明的组合物的其他pH范围包括3.5至7.0或7.0至10.5。可加入合适的pH调节剂如氢氧化钠、柠檬酸和三乙醇胺以使pH在所需范围内。

在某些实施方案中，外用组合物包含其他化妆品成分。这些组分可视作活性成分或非活性成分，并且可根据它们提供的有益效果或它们假定的作用模式进行分类；然而，应当理解，在一些情况下，这些其他组分可提供多于一种有益效果或经由多于一种作用模式运作。因此，本文的分类是为了方便起见，而非旨在将试剂限制于该特定用途或所列出的用途。

此类成分类别的示例包括：有机溶剂、硅酮、pH调节剂、螯合剂、胶凝剂、蛋白质、维生素、润肤剂、油、羟基酸、去角质剂、类视黄醇、粘度调节剂、聚合物、矿物质、驱虫剂、润滑剂、防腐剂、植物性药材、澄清剂、湿润剂、非生物表面活性剂、抗氧化剂、增稠剂、软化剂、防晒剂、保湿剂、染料、着色剂、香味剂、研磨剂、吸收剂、美学组分如精油、皮肤感觉剂、收敛剂、抗痤疮剂、防结块剂、消泡剂、抗微生物剂、脱色剂、抗炎剂、晚期糖基化终末产物(AGE)抑制剂、类固醇、粘合剂、生物添加剂、缓冲剂、膨胀剂、螯合剂、化学添加剂、变性剂、外用止痛剂、角质溶解剂、剥脱剂、角质形成细胞增殖增强剂、胶原酶抑制剂、弹性蛋白酶抑制剂、成膜剂或材料、遮光剂、推进剂、还原剂、酶、多价螯合剂、皮肤漂白和提亮剂、皮肤调理剂、皮肤舒缓/愈合剂、增稠剂、矿物质、维生素及其衍生物。

关于这些和其他合适的化妆品成分的详细情况可在“International CosmeticIngredient Dictionary and Handbook”，第10版(2004)，由美国化妆品、盥洗用品和香水协会(CTFA)出版，第2177-2299页找到，其全部内容据此以引用方式并入本文。

每种成分(无论活性还是非活性)的量是化妆品领域中常规使用的以实现其预期目的那些量，范围通常为组合物的约0.0001％至约25％，或约0.001％至约20％，但该量可在这些范围之外。这些成分的性质和它们的量必须与本公开的组合物的生产和功能相容。

在一些实施方案中，外用组合物可包含皮肤病学可接受的或美容上可接受的媒介物或载体。

美容上可接受的媒介物可以是乳液的形式。合适的乳液的非限制性示例包括具有乳膏、凝胶、纳米乳液或微乳液外观的油包水乳液、水包油乳液、水包硅酮乳液、硅酮包水乳液、水包蜡乳液、水油水三重乳液等。

除非另有说明，如本文所用的术语“油”包括硅油。乳液可包括乳化剂，例如非离子、阴离子或两性表面活性剂，或助流剂(gallant)，其量通常为约0.001重量％至约5重量％。

在一些实施方案中，美容上可接受的媒介物可包括水；植物油；矿物油；酯油，诸如棕榈酸辛酯、肉豆蔻酸异丙酯和棕榈酸异丙酯；醚，诸如二辛基醚和二甲基异山梨醇；醇，诸如乙醇和异丙醇；脂肪醇，诸如鲸蜡醇、鲸蜡硬脂醇、硬脂醇和山萮醇；异石蜡，诸如异辛烷、异十二烷(IDD)和异十六烷；硅油，诸如环甲基硅酮、二甲基硅酮、二甲基硅酮交联聚合物、聚硅氧烷及其衍生物，优选有机改性的衍生物，包括PDMS、二甲基硅酮共聚醇、二甲基硅酮醇和氨基封端的二甲基硅酮醇(amodimethiconol)；烃油，诸如矿物油、矿脂、异二十烷和聚烯烃，例如(氢化)聚异丁烯；多元醇，诸如丙二醇、甘油、丁二醇、戊二醇、己二醇、辛乙二醇；蜡，诸如蜂蜡、巴西棕榈蜡、地蜡、微晶蜡、聚乙烯蜡和植物蜡；或前述的任何组合或混合物。水性媒介物可包括一种或多种与水混溶的溶剂，包括低级醇，诸如乙醇、异丙醇等。媒介物可占组合物的约1重量％至约99重量％、10重量％至约85重量％、25重量％至75重量％，或50重量％至约65重量％。

在一些实施方案中，外用化妆品组合物可包含有效量的由微生物产生的酶和/或蛋白质。例如，可包含约0.001重量％至约20重量％，优选约0.01重量％至约15重量％，或约0.05重量％至约10重量％的一种或多种酶和/或蛋白质。这些可包括但不限于有益于改善皮肤健康的外型-β-1,3-葡聚糖酶、“杀伤毒素”、几丁质酶、酯酶、脂肪酶、糖苷酶、淀粉酶和蛋白酶。

在一个实施方案中，组合物可包含植物提取物，诸如咖啡因、紫锥菊、人参、葡糖胺、硫酸软骨素、大蒜提取物、圣约翰草、锯棕榈、银杏、褪黑素、β胡萝卜素、类黄酮(例如花青素)、奇亚(chia)、胶原肽、阿萨伊果(acai)、活性炭、苜蓿、山金车、黄芪、芦荟、睡茄、颠茄、小檗碱、欧洲越橘、甜菜碱、苦瓜、苦橙、黑升麻、欧车前(black psyllium)、红茶、圣蓟、白车前子(blond psyllium)、蓝莓、蓝绿藻、硼、蜂斗菜、金盏花、***二酚(CBD)、辣椒素、辣椒、猫爪草、甘菊、圣洁莓、壳聚糖、肉桂、丁香、椰子、蔓越莓、蒲公英、鹿茸、魔鬼爪、当归、刺五加、麻黄、桉树、接骨木果、月见草、胡芦巴、野甘菊、亚麻籽、墨角藻、姜、甘草酸、枸杞、金印草、葡萄、葡萄籽、葡萄柚、生咖啡、绿茶、瓜拿纳、瓜尔胶、匙羹藤、山楂、麻渣、木槿、蜂蜜、和厚朴酚、蝴蝶亚、啤酒花、马栗、淫羊藿、马尾草、卡瓦(kava)、可乐果、薰衣草、柠檬草、甘草、叶黄素、番茄红素、玛卡(maca)、山竹、二甲基砜、乳蓟、槲寄生、月桂酸单甘油酯、烟酰胺、诺丽(noni)、燕麦、油橄榄、牛至、棕榈油、番木瓜、保哥果、花生油、普列薄荷、辣薄荷、石榴、蜂胶、槲皮素、玫瑰果、覆盆子酮、红三叶草、红曲米、灵芝、白藜芦醇、玫瑰果、鼠尾草、锯棕榈、Satureja bachtiarica油、决明、赤榆、大豆、留兰香、甜菊糖、酸樱桃、茶树油、雷公藤、甜根菜、特里马素(tellimagrandin II)、姜黄根粉、缬草、野山药、柳树皮、马黛茶、育亨宾、5-HTP等。

在一个实施方案中，组合物包含类视黄醇。如本文所用，“类视黄醇”包括维生素A或类视黄醇化合物的所有天然和/或合成的类似物，它们在皮肤中具有维生素A的生物活性以及这些化合物的几何异构体和立体异构体。类视黄醇优选为视黄醇、视黄醇酯(例如视黄醇的C2-C22烷基酯，包括棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯、丙酸视黄酯)、视黄醛和/或视黄酸(包括全反式视黄酸和/或13-顺式视黄酸)，更优选除视黄酸外的类视黄醇。其他合适的类视黄醇为生育酚视黄酸酯[视黄酸的生育酚酯(反式或顺式)、阿达帕林{6-[3-(1-金刚烷基)-4-甲氧基苯基]-2-萘甲酸}和他扎罗汀(6-[2-(4,4-二甲基二氢苯并噻喃-6-基)-乙炔基]烟酸乙酯)。

在一个实施方案中，组合物可包括抗衰老组分，包括但不限于植物性药材(例如紫铆提取物)、叶绿醇、植酸、除本文所述的那些以外的磷脂、硅酮、矿脂、甘油三酯、ω脂肪酸、类视黄醇、羟基酸(包括α-羟基酸和β-羟基酸)、水杨酸和烷基水杨酸盐、去角质剂(例如乙醇酸、3,6,9-三氧杂十一烷二酸等)、***合成酶刺激化合物(例如咖啡因和衍生物)、能够抑制5α-还原酶活性的化合物(例如亚麻酸、亚油酸、非那雄胺及其混合物)以及屏障功能增强剂(例如神经酰胺、甘油酯、胆固醇及其酯、α-羟基和ω-羟基脂肪酸及其酯)。当存在时，可以约0.0001重量％至约5重量％，更一般地约0.01重量％至约2.5重量％或约0.1重量％至约1.0重量％的量包含这些其他抗衰老化合物。

在一个实施方案中，组合物可包括去角质剂。合适的去角质剂包括例如α-羟基酸、β-羟基酸、含氧酸、含氧二酸及其衍生物，诸如酯、酸酐及其盐。合适的羟基酸包括例如乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、2-羟基链烷酸、扁桃酸、水杨酸及其衍生物。一种示例性去角质剂为乙醇酸。当存在时，去角质剂可占组合物的约0.001重量％至约20重量％。

在一个实施方案中，组合物可包含一种或多种抗氧化剂。合适的抗氧化剂包括例如具有酚羟基官能团的化合物，诸如抗坏血酸及其衍生物/酯；β-胡萝卜素；儿茶素类；姜黄素；阿魏酸衍生物(例如阿魏酸乙酯、阿魏酸钠)；没食子酸衍生物(例如没食子酸丙酯)；番茄红素；还原酸；迷迭香酸；单宁酸；四氢姜黄素；生育酚及其衍生物，包括乙酸生育酚酯；尿酸；或其任何混合物。其他合适的抗氧化剂是那些具有一个或多个硫醇官能团(--SH)的抗氧化剂，其为还原或非还原形式，诸如谷胱甘肽、硫辛酸、巯基乙酸和其他巯基化合物。抗氧化剂可以是无机的，诸如亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢盐、亚硫酸盐或其他含硫的无机盐和酸。抗氧化剂可单独或共同占组合物总重量的约0.001％至约10％(w/w)，或约0.01％至约5％(w/w)。

非生物表面活性剂也可加入到制剂中。表面活性剂的示例包括但不限于烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐(例如月桂硫酸酯钠/铵和月桂醇聚醚硫酸酯钠/铵)、两性表面活性剂(例如两性乙酸盐和两性丙酸盐)、磺基琥珀酸盐、烷基聚葡糖苷、甜菜碱(例如椰油酰胺丙基甜菜碱(CAPB))、磺基甜菜碱、鼠尾草酸酯、羟乙磺酸盐、牛磺酸盐、乙氧基化山梨糖醇酯、烷醇酰胺和氨基酸基表面活性剂。

也可将粘度调节剂加到组合物中，包括例如椰油酰胺DEA、油酰胺DEA、氯化钠、纤维素聚合物、聚丙烯酸酯、乙氧基化酯、醇、二醇、二甲苯磺酸盐、聚山梨醇酯20、烷醇酰胺和纤维素衍生物(例如羟丙基甲基纤维素和羟乙基纤维素)。

也可加入聚合物，包括例如黄原胶、瓜尔胶、聚季铵盐-10、PEG-120甲基葡萄糖二油酸酯、PEG-150二硬脂酸酯、PEG-150聚甘油基-2三硬脂酸酯和PEG-150季戊四醇硬脂酸酯。

可以包括防晒剂或防晒剂的组合以保护皮肤免受UVA和UVB射线的影响。可用于本发明组合物的防晒剂包括阿伏苯宗、肉桂酸衍生物(如肉桂酸辛基甲氧基酯)、水杨酸辛酯、羟苯甲酮、奥克立林、二氧化钛、氧化锌或其任意混合物。防晒剂可为组合物总重量的约1重量％至约30重量％。

在一些实施方案中，组合物包含保湿剂。保湿剂可作为润湿剂提供。通常，润湿剂是由于其吸湿性而促进水分保持的保湿剂。示例性湿润剂包括甘油、聚合二醇如聚乙二醇和聚丙二醇，以及山梨醇诸如山梨醇溶液、吡咯烷酮羧酸、脲或其混合物。

在一些实施方案中，组合物包含用于改善组合物的质地的润肤剂。润肤剂是油质的或油性物质，其有助于光滑和软化皮肤，并且还可降低其粗糙度、开裂或刺激。润肤剂的非限制性示例包括矿物油、羊毛脂油、椰子油、可可脂、橄榄油、杏仁油、夏威夷核果油、合成荷荷巴油、天然sonora荷荷巴油、红花油、玉米油、液体羊毛脂、棉籽油和花生油。

其他合适的润肤剂包括角鲨烷、蓖麻油、聚丁烯、无味的矿物精、甜杏仁油、鳄梨油、红厚壳油(clophyllum oil)、蓖麻油、维生素E乙酸酯、橄榄油、亚麻醇、油醇、谷物胚芽油诸如小麦胚芽油、棕榈酸异丙酯、棕榈酸辛酯(商品名为Lexol EHP，Inolex公司，费城，宾夕法尼亚州)、肉豆蔻酸异丙酯、硬脂酸十六酯、硬脂酸丁酯、油酸癸酯、乙酰甘油酯、(C12-C45)醇的辛酸酯和苯甲酸酯、醇和多元醇的辛酸酯和癸酸酯(诸如乙二醇和甘油的那些酯)、醇和多元醇的蓖麻油酸酯(诸如己二酸异丙酯、月桂酸己酯和十二烷酸辛酯的那些酯)。

在室温或环境温度下为固体或半固体的其他合适的润肤剂可以足以提供液体外用组合物的量使用。此类固体或半固体化妆润肤剂包括氢化羊毛脂、羟基化羊毛脂、乙酰化羊毛脂、矿脂、羊毛脂酸异丙酯、肉豆蔻酸丁酯、肉豆蔻酸鲸蜡酯、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、乳酸肉豆蔻酯、鲸蜡醇、异硬脂醇和羊毛脂酸异鲸蜡酯。

在一些实施方案中，组合物包含增稠剂以调节其粘度，使得其可容易地施用于皮肤。增稠剂或粘度控制剂的非限制性示例包括纤维素胶、烷烃三醇；丙烯酸酯；取代的纤维素，诸如甲基纤维素和羟丙基纤维素；羟烷基纤维素；羧甲基纤维素；鲸蜡醇；树胶，诸如天然树胶或合成树胶(例如瓜尔胶、黄原胶)；长链醇，诸如具有约9至约24个碳原子的那些醇；聚乙二醇类，诸如聚乙二醇、聚丙二醇、聚丁二醇、聚乙丙二醇或其混合物；蜡，诸如天然蜡或合成蜡；氢化油；乙二醇酯；脂肪酸酯；长链酸；酸酰胺；硅酸盐；及其混合物。

组合物中可包含着色剂以帮助判断在皮肤上形成均匀组合物涂层的施用情况。示例性着色剂包括认证染料，其为合成有机煤焦油衍生物，其被制造使得每批都通过食品药品监督管理局(FDA)的纯度检查。如果得到FDA批准，这些染料即被证明可用于食品、药物、化妆品(FDA颜料)、仅用于药物和食品(DC颜料)或用于外用药物和化妆品(外用DC颜料)。认证染料可以是水溶性的或色淀。色淀是通过将可溶性染料沉淀在反应性或吸收性层上而制得的有机颜料，该反应性或吸收性层是颜料组成的基本部分。大多数色淀是铝、钡或钙衍生的。当需要不会使皮肤着色的暂时性颜色(如油溶性染料通常表现的那样)时，这些不溶性颜料主要用于粉末或液体化妆品中。色淀与无机颜料诸如氧化铁、氧化锌和二氧化钛(最白的白色颜料)一起用于这些产品中。

也可使用水溶性染料，例如FDC蓝#1、FDC蓝#2、FDC绿#3、FDC红#3、FDC红#40、FDC黄#5、FDC黄#6、DC绿#5、DC红#22、DC红#28、DC红#33、DC黄#10、外用DC紫#2、外用DC黄#7、DC绿#8、DC橙#4和DC黄#8。水溶性彩色染料也可以是天然色素，诸如焦糖色素或胡桃仁提取物色素。

在一些实施方案中，组合物可包含防腐剂以防止细菌、真菌和/或酵母污染。示例性防腐剂包括苯氧基乙醇、苯甲酸、苯甲酸的衍生物和盐、对羟基苯甲酸酯、噁唑烷、氯化芳香族化合物和酚、乙内酰脲、甲酚和衍生物、咪唑啉基脲、碘丙醇丁基氨基甲酸酯、亚硫酸盐和亚硫酸氢盐。

在一些实施方案中，组合物可包含抗氧化剂以提供皮肤有益效果和/或帮助增加保质期。可使用的示例性抗氧化剂包括维生素，诸如维生素E、维生素E乙酸酯、维生素C、维生素A和维生素D及其衍生物。示例性抗氧化剂包括生育酚，其可视作天然或合成维生素E。另外的示例性抗氧化剂包括没食子酸的丙酯、辛酯和十二烷基酯、丁基化羟基苯甲醚(BHA)(通常为邻位异构体和间位异构体的混合物)、丁基化羟基甲苯(BHT)和去甲二氢愈创木酸，以及烷基化对羟基苯甲酸酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯。

在一些实施方案中，组合物可包含螯合剂。螯合剂是用于使金属离子与特定杂环结构螯合或结合的物质，其使得离子被来自每个参与环的化学键固定。合适的螯合剂包括乙二胺四乙酸(EDTA)、EDTA三钠、EDTA四钠、依地酸钙钠、EDTA三钠、EDTA四钠和EDTA二钾。

组合物可以任选地包含本领域技术人员已知的其他组分、添加剂或佐剂，包括但不限于：皮肤渗透增强剂；湿润剂(例如甘油、己二醇、辛二醇)；皮肤丰满剂(例如棕榈酰寡肽、胶原、胶原和/或糖胺聚糖(GAG)增强剂)；抗炎剂(例如芦荟、生物类黄酮、双氯芬酸、水杨酸)；螯合剂(例如EDTA或其盐，诸如EDTA二钠)；维生素(例如生育酚和抗坏血酸)；维生素衍生物(例如抗坏血酸基单棕榈酸酯、乙酸生育酚酯、维生素E棕榈酸酯)；胶凝剂(例如酯封端的聚酯酰胺)；结构剂；蛋白质(例如乳铁蛋白)；免疫调节剂(例如皮质类固醇和非类固醇免疫调节剂)；以及美黑活性组分(如二羟基丙酮(DHA)、1,3,4-三羟基-2-丁酮(赤藓酮糖)和植物提取物，诸如白桦和旱莲草、胡桃油、荷荷巴、香草、红茶和咖啡)。

改善皮肤健康和/或外观的方法

在优选实施方案中，提供了用于通过例如治疗和/或预防受试者的皮肤病症来改善皮肤健康和/或外观的方法，其中将根据本发明实施方案的外用化妆品组合物直接施用于有需要的受试者的皮肤区域。

在一些实施方案中，“施用”组合物可包括使有效量的组合物直接与受试者的皮肤接触并且优选地使该组合物在皮肤上停留一段时间，例如约20秒至1小时，以便实现所需的美学、预防、治疗或其他美容有益效果。可使用手指或使用工具或装置(例如垫、棉球、刷子、布、施用笔、喷雾施用器等)施用组合物。

在某些实施方案中，将组合物揉进皮肤，使得该组合物被吸收于其中。在一些实施方案中，可将组合物施用到皮肤上一段时间(例如以面膜的形式)，然后使用例如水将其从皮肤上冲洗掉。

在某些实施方案中，将组合物加载到贴剂上，该贴剂可粘附至皮肤用于连续施用。优选地，在睡眠时，使贴剂在皮肤上停留至少约5分钟、至少约15分钟、至少约30分钟或过夜。

在一个实施方案中，可以每cm²皮肤约0.001mg至约100mg，更一般地约0.01mg/cm²至约20mg/cm²，或约0.1mg/cm²至约10mg/cm²的量将组合物施用于皮肤。然而，根据待治疗的皮肤区域的大小，可使用更多或更少的量。

在某些实施方案中，根据本发明的方法治疗受试者的面部和颈部的皮肤。在一些实施方案中，可以治疗受试者皮肤的任何部分，包括例如耳朵、胸部、肩部、背部、手臂、腋下、手、腹部、臀部、腿和脚。

在一些实施方案中，这些方法可用于改善皮肤的健康和/或外观。在一个实施方案中，本发明提供了用于改善衰老迹象的方法，其中将本发明的组合物以足以改善衰老迹象的有效量外用于皮肤。示例性衰老迹象包括但不限于面部皱纹、细纹、皱纹、鱼尾纹、黑眼圈、瑕疵、老年斑、扩张纹、松垂、干燥、弱化的皮肤屏障修复性质或其组合。

在另一个实施方案中，本发明提供了用于改善皮肤美学外观的方法，其中将本发明的组合物以足以改善皮肤美学外观的有效量外用于皮肤。改善可涉及皮肤厚度、弹性、回弹性、保湿、色调、纹理、容光、光泽、亮度、清晰度、轮廓、均匀度、坚实度、紧实度、柔韧度、柔软度、敏感性、毛孔大小、失水减少或其组合。

在一个实施方案中，组合物通过例如免晒美黑组合物提供增加的皮肤色素沉着。即，该组合物可用于在不使用UV和其他辐射光的情况下为皮肤提供晒黑的外观。因此，本发明这些的方法可用于通过降低受试者对日光浴的需求来降低晒伤和与阳光相关的皮肤癌的风险。

此外，在一些实施方案中，这些方法用于治疗和/或预防受以下影响、导致以下或由以下引起的皮肤病症：银屑病、湿疹、皮炎、晒伤、***失衡、色素沉着过度、色素沉着不足、褪色、黄化、雀斑、皮肤萎缩、皮肤长痘、皮肤脆性、干燥、皲裂、松垂、变薄、增生、纤维化、毛孔增大、形成起蜂窝组织炎、挫伤、形成痤疮、痤疮疤痕、细胞凋亡、细胞分化、细胞去分化、预防肿瘤诱导或肿瘤进展、病毒感染、真菌感染、细菌感染、蜘蛛状静脉(毛细血管扩张)、多毛症、酒渣鼻、瘙痒症、昆虫叮咬或蛰刺、胼胝、疣、鸡眼、光损伤、疤痕、瘢痕疙瘩、狼疮、鱼鳞癣(ichtiosis)、特应性皮炎、慢性伤口、褥疮、毛周角化症(keratosis piralis)、皮脂腺囊肿、白癜风、黄褐斑(melisma)、疣、炎性皮肤病、炎症后色素沉着过度、角化病、湿疹、干燥病、扁平苔癣、结节性痒疹、微生物感染、体臭、脂溢性皮炎、头皮屑和汗疹、过敏反应和如本文所述的其他皮肤病症。

除了改善皮肤的美学或美容外观外，本发明的外用组合物可外用以增强皮肤的一般健康、活力和外观。例如，本发明的组合物可施用于皮肤以改善微循环、皮肤细胞间的传递、补充必需营养素或皮肤成分，或改善皮肤细胞的代谢、增殖、增长、更替和/或脱落。

微生物的生长和微生物生长副产物的产生

本发明提供了用于培养微生物和产生微生物代谢物和/或其他微生物生长副产物的方法。如本文所用，“发酵”是指细胞在受控条件下的生长。该生长可以是好氧的或厌氧的。

在一个实施方案中，本发明提供了用于制备生物质(例如活细胞材料)、细胞外代谢物(例如小分子和分泌的蛋白质)、残余营养物和/或细胞内组分(例如酶和其他蛋白质)的材料和方法。

根据本发明采用的微生物生长容器可为任何工业用发酵罐或培养反应器。在一个实施方案中，容器可以具有功能性控制器/传感器，或者可以与功能性控制器/传感器连接以测量培养过程中的重要因素诸(诸如pH、氧气、压力、温度、搅拌器轴功率、湿度、粘度和/或微生物密度和/或代谢物浓度)。

在另一个实施方案中，该容器还能够监测容器内微生物的生长(例如测量细胞数量和生长期)。另选地，可从容器中取出每日样本，并通过本领域已知的技术(诸如稀释平板涂布技术)进行计数。

在一个实施方案中，该方法包括在培养过程中补充氮源。例如，氮源可为硝酸钾、硝酸铵、硫酸铵、磷酸铵、氨、尿素和/或氯化铵。这些氮源可单独使用或两种或两种以上组合使用。

该方法可对生长中的培养物进行充氧。一个实施方案利用空气的缓慢运动来去除包括含氧量低的空气并引入充氧空气。充氧空气可以是通过机械装置每天补充的环境空气，这些机械装置包括用于机械搅动液体的叶轮以及用于向液体供应气泡以将氧气溶解到液体中的曝气器。

该方法还可包括在培养过程中补充碳源。碳源通常是碳水化合物(诸如葡萄糖、蔗糖、乳糖、果糖、海藻糖、甘露醇和/或麦芽糖)、有机酸(诸如乙酸、富马酸、柠檬酸、丙酸、苹果酸、丙二酸和/或丙酮酸)、醇(诸如乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、己醇、异丁醇和/或甘油)和脂肪和油(诸如大豆油、米糠油、橄榄油、玉米油、芝麻油和/或亚麻籽油)等等。这些碳源可单独使用或两种或两种以上组合使用。

在一个实施方案中，培养基中含有微生物的生长因子和微量营养物。当培育不能产生它们需要的维生素中的所有维生素的微生物时，这尤其是优选的。培养基中还可含有无机营养物，包括微量元素(诸如铁、锌、铜、锰、钼和/或钴)。此外，维生素、必需氨基酸和微量元素的来源可例如以面粉或粗粉(诸如玉米粉)的形式或提取物(诸如酵母提取物、马铃薯提取物、牛肉提取物、大豆提取物和香蕉皮提取物)的形式等或者以纯化的形式包含在内。还可含有氨基酸，例如，诸如那些用于蛋白质生物合成的氨基酸。

在一个实施方案中，还可含有无机盐。可使用的无机盐可为磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、硫酸镁、氯化镁、硫酸铁、氯化铁、硫酸锰、氯化锰、硫酸锌、氯化铅、硫酸铜、氯化钙、碳酸钙和/或碳酸钠。这些无机盐可单独使用或两种或两种以上组合使用。

在一些实施方案中，培养方法还可包括在培养过程之前和/或期间在液体培养基中加入其他的酸和/或抗菌剂。抗菌剂或抗生素用于保护培养物免受污染。另外，还可添加消泡剂以防止在培养期间形成和/或积聚泡沫。

混合物的pH应适合所需的微生物。缓冲剂和pH调节剂(诸如碳酸盐和磷酸盐)可用于将pH稳定在优选的值附近。当存在高浓度金属离子时，可能需要在液体培养基中使用螯合剂。

用于培养微生物和制备微生物副产物的方法和设备可分批、准连续或连续进行。

在一个实施方案中，在约5℃至约100℃(优选地15℃至60℃，更优选地25℃至50℃)下实施该用于培养微生物的方法。在另一个实施方案中，可在恒温下连续进行培养。在另一个实施方案中，培养过程中可改变温度。

在一个实施方案中，该方法和培养过程中使用的设备是无菌的。培养设备(诸如反应器/容器)可与灭菌装置(例如高压釜)分离，但与之相连。培养设备还可以具有在开始接种之前进行原位灭菌的灭菌单元。可通过本领域已知的方法对空气进行灭菌。例如，环境空气在被引入容器之前可穿过至少一个过滤器。在其他实施方案中，可以对培养基进行巴氏灭菌，或者任选地根本不进行加热，其中可以利用低水活度和低pH值来控制细菌生长。

在一个实施方案中，本发明提供了通过在适合于代谢物生长和产生的条件下培养本发明的微生物菌株来产生微生物代谢物的方法，该微生物代谢物包括例如生物表面活性剂、酶和/或其他蛋白质。所得培养物的代谢物含量可以是例如至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。

发酵液的生物质含量可为例如5g/L至180g/L或更高或者10g/L至150g/L。

由所需微生物产生的微生物生长副产物可保留在微生物中或分泌到液体培养基中。在另一个实施方案中，用于制备微生物生长副产物的方法还可以包括浓缩和纯化所需微生物生长副产物的步骤。在另一个实施方案中，液体培养基可以含有稳定微生物生长副产物的活性的化合物。

在一个实施方案中，在培养完成时(例如，在培养基中达到期望的细胞密度或特定代谢物的密度时)去除所有微生物培养物。在这个分批过程中，在收获第一批次时，开始一个全新的批次。

在另一个实施方案中，在任一时间仅去除一部分发酵产物。在该实施方案中，具有活细胞的生物质新培养批次的接种剂保留在容器中。被去除的组合物可以是无细胞培养液或含有细胞。这样，产生了准连续***。

有利地，该方法不需要复杂的设备或很高的能量消耗。所需微生物可小规模或大规模地就地培养和利用，甚至仍与它们的培养基混合在一起。类似地，微生物代谢物也可以在需要的位置处大量产生。

微生物可以是例如细菌、酵母和/或真菌。这些微生物可为天然的或转基因微生物。例如，可用特定基因转化微生物以表现出特定的特征。这些微生物也可为所需菌株的突变体。如本文所用，“突变体”意指参照微生物的菌株、遗传变体或亚型，其中与参照微生物相比，突变体具有一种或多种遗传变异(例如点突变、错义突变、无义突变、缺失、复制、移码突变或重复扩增)。制备突变体的方法是微生物学领域公知的。例如，为此目的广泛采用了UV诱变和亚硝基胍。

在某些实施方案中，微生物能够产生两亲性分子、酶、蛋白质和/或生物聚合物。特别地，微生物生物表面活性剂由多种微生物产生，诸如细菌、真菌和酵母，包括例如农杆菌属(例如放射形农杆菌)、节杆菌属、黄曲霉属、短梗霉属(例如出芽短梗霉)、固氮菌(例如维涅兰德固氮菌、圆褐固氮菌)、固氮螺菌属(例如，巴西固氮螺菌)、芽孢杆菌属(例如，枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌)、布拉霉属、念珠菌属(例如白色念珠菌、皱褶念珠菌、热带念珠菌、解脂念珠菌、球拟念珠菌)、梭菌属(例如丁酸梭菌、酪丁酸梭菌、乙酪酸梭菌、拜氏梭菌)、弯曲杆菌属、棒状杆菌属、隐球菌属、德巴利酵母属(例如汉逊德巴利酵母菌)、虫霉属、黄杆菌属、大头茶属、汉逊酵母属、有孢汉逊酵母属(例如葡萄汁有孢汉逊酵母)、伊萨酵母属、克鲁维酵母属、迈耶氏酵母属(例如季也蒙迈耶氏酵母)、被孢霉属、菌根、分支杆菌属、诺卡菌属、毕赤酵母属(例如异常毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、西方毕赤酵母、库德里阿兹氏毕赤酵母)、须霉属、腐霉属、假单胞菌属(例如铜绿假单胞菌、绿针假单胞菌、恶臭假单胞菌、荧光假单胞菌、莓实假单胞菌、丁香假单胞细菌)、拟酵母属(例如蚜虫拟酵母)、罗尔斯通氏菌属(Ralslonia spp.)(例如富养罗尔斯通氏菌)、红球菌属(例如红串红球菌)、红螺菌属(例如深红红螺菌)、根瘤菌属、根霉属、酵母属(例如酿酒酵母、布拉氏酵母、圆酵母)、鞘氨醇单胞菌属(例如少动鞘氨醇单胞菌)、斯塔莫酵母属(例如熊蜂生斯塔莫酵母)、破囊壶菌属、球拟酵母属、黑粉菌属(例如玉米黑粉菌)、威克汉姆酵母属(例如异常威克汉姆酵母)、拟威尔酵母属和/或接合酵母属(例如拜耳接合酵母)。

在一个实施方案中，该方法利用酵母，例如，诸如异常威克汉姆酵母、蚜虫拟酵母、熊蜂生斯塔莫酵母、库德里阿兹威毕赤酵母或季也蒙毕赤酵母(季也蒙迈耶氏酵母)。这些酵母是各种两亲分子的有效生产者，包括磷脂、糖脂、酶和其他有用的代谢物。

在一个实施方案中，该方法利用细菌，例如，诸如芽孢杆菌属。在某些实施方案中，该细菌是枯草芽孢杆菌B4(菌株NRRL B-68031)或解淀粉芽孢杆菌“B.amy”(菌株NRRL B-67928)。

在某些实施方案中，B.amy是特别有利的，因为它能够产生脂肽生物表面活性剂的混合物，当与解淀粉芽孢杆菌的参考菌株以及所有芽孢杆菌属的生物表面活性剂产生能力相比时，该混合物是独特的。该脂肽混合物包含表面活性素、地衣素、丰原素和伊枯草菌素A。在一些实施方案中，B.amy与解淀粉芽孢杆菌的参照菌株相比产生更大量的生物表面活性剂。

在一些实施方案中，菌株B4能够产生更多的脂肽生物表面活性剂，尤其是表面活性素。有利地，在一些实施方案中，B4和/或其产生的更多表面活性素可尤其有助于增强对家畜消化道和废物中的产甲烷生物膜的破坏。

在一些实施方案中，B4是“表面活性剂超产菌种”。例如，与其他枯草芽孢杆菌相比，该菌株可以产生至少0.1至10g/L(例如0.5至1g/L)生物表面活性剂，或者例如至少10％、25％、50％、100％、2倍、5倍、7.5倍、10倍、12倍、15倍或更多的生物表面活性剂。例如，在一些实施方案中，ATCC 39307可以用作参照菌株。

B.amy和B4菌株的培养物已经保藏于美国农业研究服务局北方地区研究实验室(NRRL)(1400Independence Ave.,S.W.,Washington,DC,20250,USA)。B.amy保藏物已由保藏机构指定为登录号NRRL B-67928，保藏日期为2020年2月26日。B4保藏物已由保藏机构指定为登记号NRRL B-68031，保藏日期为2021年5月6日。

本发明的每种培养物都在一定条件下保藏，这些条件确保在本专利申请未决期间，待授权的专利和商标专员确定的人可以根据37 CFR 1.14和35 U.S.C 122获得培养物。该保藏物可根据外国专利法的要求在提交本申请的对应物或其后代的国家中获得。然而，应当理解的是，保藏物的可用性不构成在减损政府行为授予的专利权的情况下实践本发明的许可。

此外，将根据《布达佩斯微生物保藏条约》的规定，本发明的每个培养物保藏物将被储存并向公众开放。即，在最近一次要求提供保藏物样本之后的至少五年的时间内以及任何情况下在保藏日期之后至少30(三十)年的时间内或者在可能发布的公布培养物的任何专利的可实施期限内，应极其小心地储存该培养物保藏物，以保持其存活且未受污染。如果保藏机构因保藏物的状况而无法按要求提供样本，则保藏机构应承认有责任更换保藏物。一旦公开本发明的专利授权，对公众获得本发明的培养物保藏物的所有限制就将被不可撤回地解除。

根据本发明，可使用其他微生物菌株，包括例如能够积累显著量的例如两亲性分子的其他菌株。根据本发明有用的其他代谢物包括甘露糖蛋白、β-葡聚糖和具有生物乳化和降低表面/界面张力性质的其他分子。

微生物基产品的制备

本发明的一种微生物基产品仅仅是含有微生物和/或由微生物产生的微生物代谢物和/或任何残留营养物的发酵液。发酵产物可在不进行提取或纯化的情况下直接使用。

然而，采用文献中描述的标准提取和/或纯化方法或技术可以很容易地实现提取和纯化。例如，在某些实施方案中，微生物基产品仅包含粗品或纯化形式的微生物生长的副产物。在特定实施方案中，副产物是由根据本发明培养的微生物产生的生物表面活性剂。

微生物和/或由微生物生长产生的培养液可以从生长容器中取出，并且经由例如管道进行转移，以便立即使用。

在其他实施方案中，考虑到例如预期用途、预期应用方法、发酵罐的尺寸以及从微生物生长设施到使用位置的任何运输模式，可以将组合物(微生物、培养液或者微生物和培养液)置于适当尺寸的容器中。因此，放置微生物基组合物的容器可为例如1加仑至1,000加仑或更大。在其他实施方案中，容器是2加仑、5加仑、25加仑或更大。

在某些实施方案中，本发明的组合物具有优于例如单独的生物表面活性剂的优点，包括以下一种或多种：高浓度的甘露糖蛋白作为酵母细胞壁外表面的一部分(甘露糖蛋白是能够达到高达80％乳化指数的有效生物乳化剂)；酵母细胞壁中存在生物聚合物β-葡聚糖(乳化剂)；培养物中存在能够降低表面和界面张力的生物表面活性剂；以及存在代谢物(例如乳酸、乙醇等)。

在从生长容器中收获微生物基组合物时，可以在将收获的产物置于容器中和/或以管道运输(或以其他方式运输以供使用)时添加另外的组分。添加剂可为例如缓冲剂、载体、在相同或不同设置中生产的其他微生物基组合物、粘度调节剂、防腐剂、微生物生长的营养物、示踪剂、溶剂、杀虫剂、其他微生物和其他专用于预期用途的成分。

可包含在根据本发明的制剂中的其他合适的添加剂包括常用于此类制剂的物质。此类添加剂的示例包括表面活性剂、乳化剂、润滑剂、缓冲剂、溶解度控制剂、pH调节剂、防腐剂、稳定剂和抗紫外光剂。

在一个实施方案中，组合物还可包含缓冲剂，这些缓冲剂包括有机酸和氨基酸或它们的盐。合适的缓冲剂包括柠檬酸盐、葡糖酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、乙酸盐、乳酸盐、草酸盐、天冬氨酸盐、丙二酸盐、葡庚糖酸盐、丙酮酸盐、半乳糖二酸盐、葡糖二酸盐、丙醇二酸盐、谷氨酸盐、甘氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、甲硫氨酸、半胱氨酸、精氨酸以及它们的混合物。也可采用磷酸和亚磷酸或它们的盐。合成缓冲剂适合使用，但优选地使用天然缓冲剂(诸如上面列出的有机酸和氨基酸或它们的盐)。

在另一个实施方案中，pH调节剂包括氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钾或碳酸氢钾、盐酸、硝酸、硫酸或其混合物。

在一个实施方案中，制剂中可包含另外的组分，诸如盐(诸如碳酸氢钠或碳酸钠、硫酸钠、磷酸钠、磷酸二氢钠)的水性制剂。

有利地，根据本发明，微生物基产品可包含培养过微生物的培养基。该产品可为例如按重量计至少1％、5％、10％、25％、50％、75％或100％的生长培养基。产品中生物质的量可为例如0重量％至100重量％(包括其间的所有百分比)。

任选地，该产品可在使用前储存。优选地，储存时间较短。因此，储存时间可小于60天、45天、30天、20天、15天、10天、7天、5天、3天、2天、1天或12小时。在优选的实施方案中，如果产品中存在活细胞，则将产品储存在较冷的温度下，例如，诸如低于20℃、15℃、10℃或5℃。另一方面，生物表面活性剂组合物通常可储存在环境温度下。

实施例

从以下通过举例说明的方式给出的实施例中，可更好地理解本发明及其许多优点。以下实施例说明了本发明的一些方法、应用、实施方案和变型。它们不应被认为是对本发明的限制。

实施例1—免晒美黑制剂

免晒美黑组合物是施用于皮肤以增加皮肤色素沉着的外用组合物。效果是不使用UV或其他辐射光的暂时性“晒黑”。

在某些实施方案中，本发明提供了包含一种或多种BAM的外用免晒美黑制剂。还提供了为受试者的皮肤提供免晒棕褐色的方法，其中将免晒美黑组合物直接施用于受试者的皮肤。优选地，将组合物均匀且均一地施用于皮肤的所有需要增加色素沉着的部位。

本发明这些的方法可用于通过降低受试者对日光浴的需求来降低晒伤和与阳光相关的皮肤癌的风险。

本发明的免晒美黑组合物可配制成例如气溶胶喷雾剂、喷雾凝胶、洗液、泡沫、乳膏、摩丝、浆液、凝胶、粉末和/或浸渍到海绵、湿擦拭物、小毛巾或滚球中。

此外，组合物可以由专业美黑沙龙使用加压免晒美黑喷雾剂来施用。可在封闭的隔室中或者用手持喷雾装置将这些免晒美黑喷雾以雾的形式递送到全身。

在优选实施方案中，免晒美黑组合物包含例如0.1重量％至50重量％，或0.5重量％至25重量％，或1.0重量％至15重量％，或2.0重量％至10重量％，或3重量％至5重量％的BAM。在某些优选实施方案中，BAM是槐糖脂。槐糖脂可含有内酯SLP、线性SLP和/或其衍生物的混合物。在某些实施方案中，直链与内酯SLP的比例的范围可为例如0:1至1:10或者1:4至1:5。

有利地，BAM可有助于将组合物保持为乳液，这意味着其在室温下放置包括几个月(例如2至24个月)的一段时间后抗相分离。此外，BAM可维持足够低的粘度，使得易于施用而不起泡。此外，所述BAM可通过例如在施用于皮肤时作为皮肤湿润剂、减少条纹产生、增加活性美黑组分的分散性以及改善着色剂的持久性、粘性和渗透性来增强免晒美黑制剂的施用和外观。

在某些实施方案中，BAM用于代替表面活性剂或除表面活性剂之外使用，表面活性剂包括例如本说明书中其他地方列出的那些，以及硬脂酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、聚山梨醇酯(例如吐温60)、聚氧乙烯硬脂酸酯及其混合物。

在优选实施方案中，组合物包含美黑活性组分，使得当组合物施用于皮肤时，皮肤在外观上变得更暗。美黑活性组分的非限制性示例包括二羟基丙酮(DHA)、1,3,4-三羟基-2-丁酮(赤藓酮糖)和植物提取物，诸如白桦和旱莲草、胡桃油、荷荷巴、香草、红茶和咖啡。

可将美黑活性组分以提供所需皮肤变黑水平的量包含在免晒美黑组合物中。在某些实施方案中，可将美黑活性组分以约0.1重量％至约25重量％，或约0.5重量％至约20重量％，或约1.0重量％至约15重量％包含在免晒美黑组合物中。

在某些实施方案中，BAM有助于提供美黑活性组分的持续释放，以便可以使用较低水平的活性物质来提供所需的效果。另外，某些美黑活性组分在某些较高水平下可能刺激皮肤；因此，在一些实施方案中，BAM可以用于减少此类施用引起的皮肤刺激。

在一些实施方案中，活性美黑组分可具有令人不快的气味。DHA的这种性质广为人知。因此，可能需要在免晒美黑组合物中包含芳香组分和/或气味中和剂。香味剂的示例包括从植物源(即玫瑰花瓣、栀子花、茉莉花等)提取的芳香物质，其可以单独或以任何组合的形式使用以产生精油。或者，可制备醇提取物以混合制备香料。可任选地以约0.001重量％至约10重量％或者约0.05重量％至约5重量％范围内的量将一种或多种香味剂包含在组合物中。

此外，气味中和剂可用于使免晒美黑组合物相对无味。可使用的示例性气味中和剂为Bell Aire Fragrances公司的名为Ordenone的产品。如果组合物包含气味中和剂，则可以足以中和某些气味的量例如约0.05重量％至约1重量％将其包括在内。

在一些实施方案中，免晒美黑组合物可进一步包括皮肤粘合组分、最大化剂、刺激剂、优化剂和加速剂，以增强外观和/或延长免晒美黑效果的寿命。

在一个具体实施方案中，组合物包含聚合物皮肤粘合组分，其保持美黑活性组分暴露于皮肤组织足够长的时间使得美黑活性组分向皮肤提供变黑效果。例如，皮肤粘合组分可使美黑组分粘附至皮肤至少1小时，至少4小时或至少8小时。有利地，皮肤粘合组分可减少施用美黑组合物后的时间，在该时间后受试者可在不洗掉美黑组合物的情况下淋浴。

可以提供所需皮肤变黑水平的量将皮肤粘合组分包含在免晒美黑组合物中。在某些实施方案中，可将皮肤粘合组分以约0.1重量％至约50重量％，或约0.5重量％至约30重量％，或约1.0重量％至约25重量％包含在免晒美黑组合物中。在某些实施方案中，本发明的BAM可增强和/或替代聚合物皮肤粘合组分。

在一些实施方案中，免晒美黑组合物包含提供约3.0至约5.0的所需pH的量(例如约0.1重量％至约0.5重量％的量)的pH调节剂。pH调节剂可以是例如柠檬酸、乳酸、乙酸、丙酸或其组合。

在一些实施方案中，免晒美黑组合物包含足量的水，使得将组合物施用于皮肤的同时提供所需的美黑活性组分的皮肤覆盖。水组分可以例如去离子水、过滤水、蒸馏水、反渗透水或自来水提供。在水包含硬度或其他组分的情况下，可能需要包含助剂、多价螯合剂和螯合剂以处理水的硬度。通常，免晒美黑组合物可包含至少约50重量％至95重量％的水，或约65重量％至约90重量％的水。

在一些实施方案中，免晒美黑组合物包含着色剂，诸如染料、颜料或染色剂。免晒美黑组合物可含有水溶性彩色染料(彩色指示剂)，其量足以使组合物在最初施用于皮肤时能够容易地显现(即着色)，以致当乳液在铺展在皮肤上后干燥和/或用人的手和/或手指擦掉时，颜色基本上消失。可以组合物重量的约0.00001％至约0.5％，或约0.0001％至约0.2％，或约0.001％至约0.1％的量将一种或多种着色剂用于组合物中。

在一些实施方案中，免晒美黑组合物任选地包含以下一种或多种：约例如0.1重量％至约2.0重量％，或约0.5重量％至约1.0重量％的增稠剂；约例如0.5重量％至约3重量％，或约1重量％至约2重量％的润肤剂；约例如0.5重量％至5.0重量％，或约1.0重量％至约2.5重量％的保湿剂；约例如0.25重量％至约1.0重量％，或约0.3重量％至约0.5重量％的防腐剂；约例如0.1重量％至1.0重量％，或约0.2重量％至约0.8重量％的抗氧化剂；和/或约例如0.001％至约0.1重量％的螯合剂。

Claims (38)

1.一种外用化妆品组合物，其包含有效量的一种或多种生物两亲性分子(BAM)、皮肤病学可接受的载体和一种或多种活性和/或非活性化妆品成分。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述BAM是糖脂、脂肽和/或磷脂。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述糖脂选自甘露糖赤藓糖醇脂(MEL)、槐糖脂(SLP)、海藻糖脂(TL)和鼠李糖脂(RLP)，并且其中所述脂肽选自表面活性素、伊枯草菌素、地衣素和丰原素。

4.根据权利要求2所述的组合物，其中所述糖脂和脂肽由细菌、酵母或真菌产生。

5.根据权利要求2所述的组合物，其中所述磷脂选自磷脂酸、溶血磷脂酸、磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油、磷脂酰甘油磷酸酯、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油磷酸甘油、双(单酰基甘油)磷酸酯(BMP)、双(二酰基甘油)磷酸酯(BDP)、酰基磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、N-酰基磷脂酰乙醇胺以及心磷脂、鞘磷脂、缩醛磷脂、溶血磷脂、

其氢化、部分氢化和未水合的衍生物、

其类似物及

其聚乙二醇化衍生物。

6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述磷脂是心磷脂或磷脂酰甘油。

7.根据权利要求2所述的组合物，其中所述磷脂是卵磷脂。

8.根据权利要求2所述的组合物，其中所述磷脂提取自蛋黄、大豆、红花油、向日葵油、芥花油、玉米油、器官肉、瘦肉、鱼、贝类、谷粒和/或奶。

9.根据权利要求2所述的组合物，其包含糖脂和磷脂。

10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述糖脂是MEL和/或SLP并且所述磷脂是心磷脂和/或磷脂酰甘油。

11.根据权利要求1所述的组合物，其中所述皮肤病学可接受的载体选自水、盐水、醇、水性悬浮液、油基悬浮液、油包水乳液、水包油乳液、水包硅酮乳液、硅酮包水乳液、水包蜡乳液、水油水三元纳米乳液和微乳液。

12.根据权利要求1所述的组合物，其中所述活性和/或非活性化妆品添加剂选自有机溶剂、硅酮、pH调节剂、螯合剂、胶凝剂、蛋白质、维生素、润肤剂、油、羟基酸、去角质剂、类视黄醇、粘度调节剂、聚合物、矿物质、驱虫剂、润滑剂、防腐剂、植物性药材、澄清剂、湿润剂、非生物表面活性剂、抗氧化剂、增稠剂、软化剂、防晒剂、保湿剂、染料、着色剂、香味剂、研磨剂、吸收剂、美学组分如精油、皮肤感觉剂、收敛剂、抗痤疮剂、防结块剂、消泡剂、抗微生物剂、脱色剂、抗炎剂、晚期糖基化终末产物(AGE)抑制剂、类固醇、粘合剂、生物添加剂、缓冲剂、膨胀剂、螯合剂、化学添加剂、变性剂、外用止痛剂、角质溶解剂、剥脱剂、角质形成细胞增殖增强剂、胶原酶抑制剂、弹性蛋白酶抑制剂、成膜剂或材料、遮光剂、推进剂、还原剂、酶、多价螯合剂、皮肤漂白和提亮剂、皮肤调理剂、皮肤舒缓/愈合剂、增稠剂、美黑活性组分、矿物质、维生素及其衍生物。

13.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物被配制成液体、乳膏、凝胶、软膏、擦拭物、洗剂、肥皂、洗发剂、调理剂、喷雾剂、气雾剂、泡沫、浆液、贴剂、酏剂或面膜，并且其中所述制剂适于直接施用于人皮肤。

14.根据权利要求1所述的组合物，其中所述BAM是活性成分、配制增强剂和/或皮肤活性物质的递送容器。

15.根据权利要求14所述的组合物，其中所述BAM是用于改善皮肤纹理、减少细纹和皱纹以及控制微生物和/或生物膜的活性成分。

16.根据权利要求14所述的组合物，其中所述BAM是通过作为乳化剂、稳定剂、增稠剂、润肤剂、防腐剂、洗涤剂、粘度调节剂、消泡剂、发泡剂和/或抗UV光剂起作用的制剂增强剂。

17.根据权利要求14所述的组合物，其中所述BAM形成为脂质体，所述脂质体可运输皮肤活性物质穿过皮肤层和/或可以作为活性成分。

18.一种用于改善受试者的皮肤的健康和/或外观的方法，其中所述方法包括将包含一种或多种BAM、皮肤病学可接受的载体和一种或多种活性和/或非活性化妆品成分的组合物直接施用于所述受试者的皮肤。

19.根据权利要求18所述的方法，其中每天施用一次或两次所述组合物。

20.根据权利要求18所述的方法，其中将所述组合物揉进皮肤以被吸收于其中。

21.根据权利要求18所述的方法，其中使所述组合物在皮肤上停留至少30秒，然后将其从皮肤上冲洗掉。

22.根据权利要求18所述的方法，其中所述BAM是糖脂、脂肽和/或磷脂。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述糖脂选自甘露糖赤藓糖醇脂(MEL)、槐糖脂(SLP)、海藻糖脂(TL)和鼠李糖脂(RLP)，并且其中所述脂肽选自表面活性素、伊枯草菌素、地衣素和丰原素。

24.根据权利要求22所述的方法，其中所述糖脂和脂肽由细菌、酵母或真菌产生。

25.根据权利要求22所述的方法，其中所述磷脂选自磷脂酸、溶血磷脂酸、磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油、磷脂酰甘油磷酸酯、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油磷酸甘油、双(单酰基甘油)磷酸酯(BMP)、双(二酰基甘油)磷酸酯(BDP)、酰基磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、N-酰基磷脂酰乙醇胺以及心磷脂、鞘磷脂、缩醛磷脂、溶血磷脂、

其氢化、部分氢化和未水合的衍生物、

其类似物及

其聚乙二醇化衍生物。

26.根据权利要求22所述的方法，其中所述磷脂是心磷脂或磷脂酰甘油。

27.根据权利要求22所述的方法，其中所述磷脂是卵磷脂。

28.根据权利要求22所述的方法，其中所述磷脂提取自蛋黄、大豆、红花油、向日葵油、芥花油、玉米油、器官肉、瘦肉、鱼、贝类、谷粒和/或奶。

29.根据权利要求18所述的方法，其中所述组合物包含糖脂和磷脂。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述糖脂是MEL和/或SLP并且所述磷脂是心磷脂和/或磷脂酰甘油。

31.根据权利要求18所述的方法，其中通过减少衰老迹象来改善皮肤健康和/或外观，所述衰老迹象选自面部皱纹、细纹、皱纹、鱼尾纹、黑眼圈、瑕疵、老年斑、扩张纹、松垂、干燥、弱化的皮肤屏障修复性质及其组合。

32.根据权利要求18所述的方法，其中改善的皮肤健康和/或外观包括增加和/或改善以下一种或多种：皮肤厚度、弹性、回弹性、保湿、色调、纹理、容光、光泽、亮度、清晰度、轮廓、均匀度、坚实度、紧实度、柔韧度、柔软度、敏感性、毛孔大小、失水减少或其组合。

33.根据权利要求18所述的方法，其中改善的皮肤健康和/或外观包括在不使用UV或其他辐射光的情况下为所述皮肤提供晒黑的外观。

34.根据权利要求18所述的方法，其中改善的皮肤健康和/或外观包括治疗和/或预防皮肤病症，所述皮肤病症选自银屑病、湿疹、皮炎、晒伤、***失衡、色素沉着过度、色素沉着不足、褪色、黄化、雀斑、皮肤萎缩、皮肤长痘、皮肤脆性、干燥、皲裂、松垂、变薄、增生、纤维化、毛孔增大、形成起蜂窝组织炎、挫伤、形成痤疮、痤疮疤痕、细胞凋亡、细胞分化、细胞去分化、预防肿瘤诱导或肿瘤进展、病毒感染、真菌感染、细菌感染、蜘蛛状静脉(毛细血管扩张)、多毛症、酒渣鼻、瘙痒症、昆虫叮咬或蛰刺、胼胝、疣、鸡眼、光损伤、疤痕、瘢痕疙瘩、狼疮、鱼鳞癣、特应性皮炎、慢性伤口、褥疮、毛周角化症、皮脂腺囊肿、白癜风、黄褐斑、疣、炎性皮肤病、炎症后色素沉着过度、角化病、湿疹、干燥病、扁平苔癣、结节性痒疹、微生物感染、体臭、脂溢性皮炎、头皮屑和汗疹，以及过敏反应。

35.一种用于向受试者的皮肤提供免晒棕褐色的方法，其中所述方法包括将包含一种或多种BAM、皮肤病学可接受的载体和美黑活性组分的组合物直接施用于所述受试者的皮肤。

36.根据权利要求35所述的方法，其中所述美黑活性组分是DHA和/或赤藓酮糖。

37.根据权利要求35所述的方法，其中所述组合物被配制成气溶胶喷雾剂、喷雾凝胶、洗液、乳膏、摩丝、浆液、凝胶、粉末和/或浸渍到海绵、湿擦拭物、小毛巾或滚球中。

38.权利要求35所述的方法，其中使用加压喷雾***将所述组合物以雾的形式施用于整个身体。