CN116327631B - 四聚蛋白组合物及其应用、制备工艺 - Google Patents
四聚蛋白组合物及其应用、制备工艺 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116327631B CN116327631B CN202310372456.XA CN202310372456A CN116327631B CN 116327631 B CN116327631 B CN 116327631B CN 202310372456 A CN202310372456 A CN 202310372456A CN 116327631 B CN116327631 B CN 116327631B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- component
- solution
- water
- collagen peptide
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 32
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 32
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 41
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 64
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 64
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 64
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 45
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 claims abstract description 23
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 claims abstract description 23
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 claims abstract description 23
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 73
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 claims description 50
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 34
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 32
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 23
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 20
- 210000004712 air sac Anatomy 0.000 claims description 18
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 18
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 18
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 17
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 16
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 16
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 16
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 16
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 15
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 14
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 14
- 230000009182 swimming Effects 0.000 claims description 12
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 11
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims description 10
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims description 10
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 claims description 10
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims description 10
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims description 10
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims description 10
- DNIAPMSPPWPWGF-VKHMYHEASA-N (+)-propylene glycol Chemical compound C[C@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 9
- 229940015975 1,2-hexanediol Drugs 0.000 claims description 9
- YPFDHNVEDLHUCE-UHFFFAOYSA-N 1,3-propanediol Substances OCCCO YPFDHNVEDLHUCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229940035437 1,3-propanediol Drugs 0.000 claims description 9
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 9
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 9
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 9
- FHKSXSQHXQEMOK-UHFFFAOYSA-N hexane-1,2-diol Chemical compound CCCCC(O)CO FHKSXSQHXQEMOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 9
- WCVRQHFDJLLWFE-UHFFFAOYSA-N pentane-1,2-diol Chemical compound CCCC(O)CO WCVRQHFDJLLWFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229920000166 polytrimethylene carbonate Polymers 0.000 claims description 9
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 claims description 8
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 claims description 8
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 8
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 claims description 8
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 8
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 8
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 8
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 8
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 claims description 7
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 7
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 7
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 7
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000013522 chelant Substances 0.000 claims description 6
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 5
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 claims description 3
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 abstract description 8
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 abstract description 8
- 230000001153 anti-wrinkle effect Effects 0.000 abstract description 8
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 abstract description 8
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 8
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 230000008439 repair process Effects 0.000 abstract description 3
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 abstract description 2
- 230000037384 skin absorption Effects 0.000 abstract description 2
- 231100000274 skin absorption Toxicity 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 89
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 7
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 7
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 6
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 6
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 6
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 4
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- AJLNZWYOJAWBCR-OOPVGHQCSA-N (4s)-4-acetamido-5-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-5-amino-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-amino-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-4-methylsulfanyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-car Chemical compound OC(=O)CC[C@H](NC(C)=O)C(=C)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(N)=O AJLNZWYOJAWBCR-OOPVGHQCSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- QHMBSVQNZZTUGM-UHFFFAOYSA-N Trans-Cannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1C1C(C(C)=C)CCC(C)=C1 QHMBSVQNZZTUGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940095094 acetyl hexapeptide-8 Drugs 0.000 description 2
- 108010006338 acetyl-glutamyl-glutamyl-methionyl-glutaminyl-arginyl-argininamide Proteins 0.000 description 2
- QHMBSVQNZZTUGM-ZWKOTPCHSA-N cannabidiol Chemical compound OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)=C)CCC(C)=C1 QHMBSVQNZZTUGM-ZWKOTPCHSA-N 0.000 description 2
- 229950011318 cannabidiol Drugs 0.000 description 2
- ZTGXAWYVTLUPDT-UHFFFAOYSA-N cannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1C1C(C(C)=C)CC=C(C)C1 ZTGXAWYVTLUPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- PCXRACLQFPRCBB-ZWKOTPCHSA-N dihydrocannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)C)CCC(C)=C1 PCXRACLQFPRCBB-ZWKOTPCHSA-N 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 2
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- BIVBRWYINDPWKA-VLQRKCJKSA-L Glycyrrhizinate dipotassium Chemical compound [K+].[K+].O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C=C4[C@@H]5C[C@](C)(CC[C@@]5(CC[C@@]4(C)[C@]3(C)CC[C@H]2C1(C)C)C)C(O)=O)C([O-])=O)[C@@H]1O[C@H](C([O-])=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BIVBRWYINDPWKA-VLQRKCJKSA-L 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 206010034960 Photophobia Diseases 0.000 description 1
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000005786 degenerative changes Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 229940101029 dipotassium glycyrrhizinate Drugs 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 208000013469 light sensitivity Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000001521 two-tailed test Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
- A61K8/65—Collagen; Gelatin; Keratin; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/59—Mixtures
- A61K2800/592—Mixtures of compounds complementing their respective functions
- A61K2800/5922—At least two compounds being classified in the same subclass of A61K8/18
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
- A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
- A61K2800/782—Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/805—Corresponding aspects not provided for by any of codes A61K2800/81 - A61K2800/95
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明提供了一种四聚蛋白组合物,所述组合物包括:组分A:弹性蛋白;组分B:胶原蛋白肽;组分C:纤连蛋白和组分D:血清蛋白。本发明考虑到弹性蛋白、胶原蛋白肽和纤连蛋白的特点,以及皮肤吸收后的皮肤自主修复能力等特点,采用分子肽结合络合物的特点事先在皮肤方面的优势;本发明采用多种酶、结合酶解工艺,且设定使用酶的先后顺序,从而使得制备得到的胶原蛋白肽的透明质酸酶抑制率具有很高的优势,从而实现由外到内的抗衰老;本发明结合了四种蛋白组合物,弹性蛋白、胶原蛋白肽、纤连蛋白、血清蛋白从组织、填充、提高自身修复等多角度实现了紧致抗皱、舒缓修护的效果。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其是涉及一种四聚蛋白组合物及其应用、制备工艺。
背景技术
皮肤衰老是一类生理退行性改变,在皮肤老化过程中,随着胶原蛋白的减少或者成分分配的改变,防护能力减弱,皮肤外观逐渐发生变化,出现暗淡、色斑、干燥和皱纹等皮肤。
除了外界原因之外,例如紫外线等,人体内的自由基、内分泌等原因是造成皮肤衰老的内部原因之一。近期有实验证明,口服胶原蛋白可以修复皮肤衰老。
胶原蛋白在动物体内以胶原纤维的形式存在于***中,占总蛋白含量的20%以上,是一类重要的结构蛋白。胶原蛋白具有特殊的三螺旋结构,由三股单链螺旋交联而成,该生物结构使胶原蛋白不易分解,难以被人体分解吸收,这种情况下的胶原蛋白生物利用率极低。弹性蛋白是一种重要的细胞外基质蛋白,在生物体内的含量仅次于胶原蛋白,在组织伸缩运动、抗外力形变等方面发挥着不可替代的作用。
专利CN113527523A公开了一种重组蛋白,由透皮肽通过连接肽连接纤连蛋白构成重组透皮纤连蛋白。
专利CN110090166A公开了一种抗皱组合物、抗皱乳液及其制备方法,该抗皱组合物,以重量份计,包括以下组分:乙酰基六肽-8 0.1-5份、纤连蛋白0.1-5份和***二酚0.5-4.5份。上述抗皱组合物通过采用乙酰基六肽-8、纤连蛋白和***二酚按特定的质量比混合,各组分相互协同作用,不仅可以有效地减少已有的面部皱纹,还具有深度滋养肌肤,加速细胞新陈代谢的作用,提高肌肤抗性,防止新的皱纹产生。
现有的技术只是将弹性蛋白、胶原蛋白肽和纤连蛋白进行复配混合,但是并未考虑到三者混合复配之后皮肤的吸收率,已经长期保持率等问题。
发明内容
针对上述问题,本发明提供一种四聚蛋白组合物,所述组合物包括:
组分A:弹性蛋白;
组分B:胶原蛋白肽;
组分C:纤连蛋白;
组分D:血清蛋白。
作为本发明的一种实施方式,所述组分A、组分B和组分C的比例为20-30:1-10:1-10。
作为本发明的一种实施方式,所述组分A、组分B和组分C的比例为25:6:3。
作为本发明的一种实施方式,所述胶原蛋白肽的制备方法如下:
S01将鱼鳔进行脱脂烘干;将烘干后的鱼鳔进行碱性预处理;
S02将S01中预处理后的鱼鳔和酶溶液进行混合、浸泡;随后离心取上清液;
S03将上清液进行处理得胶原蛋白肽。
作为本发明的一种实施方式,所述S02中酶包括木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜复合胰蛋白酶中的一种或多种。
作为本发明的一种实施方式,所述弹性蛋白采用生物发酵工艺制备得到;所述组分A的pH值为6.0-8.0。
作为本发明的一种实施方式,所述纤连蛋白采用生物发酵工艺制备得到;所述组分C的1%水溶液的pH值为5.0-8.0。
本发明第二方面提供一种四聚蛋白制品,其由所述组合物制备得到。
本发明第三方面提供所述的四聚蛋白组合物,其用于护肤品领域。
本发明第四方面提供一种制备所述的一种四聚蛋白制品的方法,步骤如下:
(1)分别准备组分A、组分B、和组分C;
(2)将组分B和铜盐进行螯合;
(3)将组分A和组分C加入到步骤(2)得到的螯合物中,即得。
采用上述技术方案,本发明具有如下有益效果:
1.本发明考虑到弹性蛋白、胶原蛋白肽和纤连蛋白的特点,以及皮肤吸收后的皮肤自主修复能力等特点,采用分子肽结合络合物的特点事先在皮肤方面的优势;
2.本发明采用多种酶、结合酶解工艺,且设定使用酶的先后顺序,从而使得制备得到的胶原蛋白肽的透明质酸酶抑制率具有很高的优势,从而实现由外到内的抗衰老。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为DPPH自由基清除率;
图2为透明质酸酶抑制率;
图3-图6为实施例1的实际功效图。
具体实施方式
下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明中所述四聚蛋白组合物是指由四种蛋白类物质组合在一起。
本发明提供一种四聚蛋白组合物,所述组合物包括:
组分A:弹性蛋白;
组分B:胶原蛋白肽;和
组分C:纤连蛋白。
作为本发明的一种实施方式,所述弹性蛋白、胶原蛋白肽和纤连蛋白的比例为20-30:1-10:1-10。
作为本发明的一种实施方式,所述弹性蛋白、胶原蛋白肽和纤连蛋白的比例为25:6:3。
作为本发明的一种优选方式,所述组合物包括:
组分A:弹性蛋白、氯化钠、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、精氨酸、海藻糖、水;
组分B:胶原蛋白肽;和
组分C:纤连蛋白、甘油、1,3-丙二醇、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、水。
作为本发明的一种实施方式,所述胶原蛋白肽的制备方法如下:
S01将鱼鳔进行脱脂烘干;将烘干后的鱼鳔进行碱性预处理;
S02将S01中预处理后的鱼鳔和酶溶液进行混合、浸泡;随后离心取上清液;
S03将上清液进行处理得胶原蛋白肽。
作为本发明的一种优选方式,所述胶原蛋白肽的制备方法如下:
S01取鱼鳔,用正己烷和去离子水交替洗涤脱脂后,于30℃下烘干后,进行切块;并浸泡在0.1mg/mL的NaOH溶液中浸泡48h后,过滤收集固形物,并用蒸馏水洗至中性;
S02分别制备0.1wt%胃蛋白酶的0.5mg/mL醋酸溶液(溶液1);0.2wt%胰蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液2);0.1wt%木瓜蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液3);2wt%碱性蛋白酶的水溶液(溶液4);
S03将S01处理后的鱼鳔按照固体和溶液的比例为1:50(g/mL)进行混合,将S01处理后的鱼鳔先后浸泡在S02的溶液1、溶液2、溶液3和溶液4中,浸泡时间分别为18h、24h、12h和6h;每次取上清液,加入NaCl混合均匀后,静置24h,收集沉淀物、干燥,即得胶原蛋白粗品;
S04将S03收集到的胶原蛋白粗品,将胶原蛋白粗品溶解于40℃水中(23%,m/v),加入胶原蛋白酶(0.01%,m/v),在40℃条件下置于震荡水浴摇床,酶解1h;然后灭酶、离心,取上清,冷冻干燥后所得即胶原蛋白肽。
作为本发明的一种实施方式,所述弹性蛋白采用生物发酵工艺制备得到;所述组分A的pH值为6.0-8.0。
作为本发明的一种实施方式,所述纤连蛋白采用生物发酵工艺制备得到;所述组分C的1%水溶液的pH值为5.0-8.0。
本发明第二方面提供一种四聚蛋白制品,其由所述组合物制备得到。
本发明第三方面提供所述的四聚蛋白组合物,其用于护肤品领域。
本发明第四方面提供一种制备所述的一种四聚蛋白制品的方法,步骤如下:
(1)分别准备组分A、组分B、和组分C;
(2)将组分B和铜盐进行螯合;
(3)将组分A和组分C加入到步骤(2)得到的螯合物中,即得。
作为本发明的一种实施方式,所述的一种四聚蛋白制品的制备方法,步骤如下:
(1)分别准备组分A、组分B、和组分C;
(2)将组分B、去离子水和硫酸铜混合搅拌,水浴加热至50℃反应0.5h;
(3)反应后,加入无水乙醇,过滤取沉淀;
(4)将组分A、组分C和步骤(3)中的沉淀物混合均匀,即得。
作为本发明的一种实施方式,所述四聚蛋白组合物还包括组分D:
组分A:弹性蛋白0.1%、氯化钠0.2%、1,2-戊二醇0.2%、1,2-己二醇0.5%、精氨酸0.5%、海藻糖3%、水余量;
组分B:胶原蛋白肽;和
组分C:纤连蛋白0.05%、甘油40%、1,3-丙二醇10%、磷酸氢二钠0.01%、磷酸二氢钠0.01%、水余量;
组分D:血清蛋白1%、海藻糖2%、甘露糖醇93%、水4%。
所述组分A、组分B、组分C和组分D的比例为25:6:3:1。
下面结合具体的实施方式对本发明做进一步的解释说明。
实施例1
本实施例提供的一种四聚蛋白制品,其包括:质量百分比,
组分A:弹性蛋白0.1%、氯化钠0.2%、1,2-戊二醇0.2%、1,2-己二醇0.5%、精氨酸0.5%、海藻糖3%、水余量;
组分B:胶原蛋白肽;和
组分C:纤连蛋白0.05%、甘油40%、1,3-丙二醇10%、磷酸氢二钠0.01%、磷酸二氢钠0.01%、水余量;
组分D:血清蛋白1%、海藻糖2%、甘露糖醇93%、水4%。
所述组分A、组分B、组分C和组分D的比例为25:6:3:1。
其中,组分A购买自江苏创健医疗科技股份有限公司;组分C购买上海纤连生物技术有限公司,组分D购买自武汉禾元生物科技股份有限公司。
所述胶原蛋白肽的制备方法如下:
S01取鱼鳔,用正己烷和去离子水交替洗涤脱脂后,于30℃下烘干后,进行切块;并浸泡在0.1mg/mL的NaOH溶液中浸泡48h后,过滤收集固形物,并用蒸馏水洗至中性;
S02分别制备0.1wt%胃蛋白酶的0.5mg/mL醋酸溶液(溶液1);0.2wt%胰蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液2);0.1wt%木瓜蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液3);2wt%碱性蛋白酶的水溶液(溶液4);
S03将S01处理后的鱼鳔按照固体和溶液的比例为1:50(g/mL)进行混合,将S01处理后的鱼鳔先后浸泡在S02的溶液1、溶液2、溶液3和溶液4中,浸泡时间分别为18h、24h、12h和6h;每次取上清液,加入NaCl混合均匀后,静置24h,收集沉淀物、干燥,即得胶原蛋白粗品;
S04将S03收集到的胶原蛋白粗品,将胶原蛋白粗品溶解于40℃水中(23%,m/v),加入胶原蛋白酶(0.01%,m/v),在40℃条件下置于震荡水浴摇床,酶解1h;然后灭酶、离心,取上清,冷冻干燥后所得即胶原蛋白肽。
所述的一种四聚蛋白制品的制备方法,步骤如下:
(1)分别准备组分A、组分B、和组分C;
(2)将组分B、去离子水和硫酸铜混合搅拌,水浴加热至50℃反应0.5h;
(3)反应后,加入无水乙醇,过滤取沉淀;
(4)将组分A、组分C、组分D和步骤(3)中的沉淀物混合均匀,即得。
实施例2
本实施例提供的一种四聚蛋白制品,其包括:
组分A:弹性蛋白、氯化钠、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、精氨酸、海藻糖、水;
组分B:胶原蛋白肽;和
组分C:纤连蛋白、甘油、1,3-丙二醇、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、水;
所述组分A、组分B和组分C的比例为25:6:3。
其中,组分A购买自江苏创健医疗科技股份有限公司;组分C购买上海纤连生物技术有限公司,组分D购买自武汉禾元生物科技股份有限公司。
所述胶原蛋白肽的制备方法如下:
S01取鱼鳔,用正己烷和去离子水交替洗涤脱脂后,于30℃下烘干后,进行切块;并浸泡在0.1mg/mL的NaOH溶液中浸泡48h后,过滤收集固形物,并用蒸馏水洗至中性;
S02分别制备0.1wt%胃蛋白酶的0.5mg/mL醋酸溶液(溶液1);0.2wt%胰蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液2);0.1wt%木瓜蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液3);2wt%碱性蛋白酶的水溶液(溶液4);
S03将S01处理后的鱼鳔按照固体和溶液的比例为1:50(g/mL)进行混合,将S01处理后的鱼鳔先后浸泡在S02的溶液1、溶液2、溶液3和溶液4中,浸泡时间分别为18h、24h、12h和6h;每次取上清液,加入NaCl混合均匀后,静置24h,收集沉淀物、干燥,即得胶原蛋白粗品;
S04将S03收集到的胶原蛋白粗品,将胶原蛋白粗品溶解于40℃水中(23%,m/v),加入胶原蛋白酶(0.01%,m/v),在40℃条件下置于震荡水浴摇床,酶解1h;然后灭酶、离心,取上清,冷冻干燥后所得即胶原蛋白肽。
所述的一种四聚蛋白制品的制备方法,步骤如下:
(1)分别准备组分A、组分B、和组分C;
(2)将组分B、去离子水和硫酸铜混合搅拌,水浴加热至50℃反应0.5h;
(3)反应后,加入无水乙醇,过滤取沉淀;
(4)将组分A、组分C和步骤(3)中的沉淀物混合均匀,即得。
实施例3
本实施例提供的一种四聚蛋白制品,其包括:
组分A:弹性蛋白0.1%、氯化钠0.2%、1,2-戊二醇0.2%、1,2-己二醇0.5%、精氨酸0.5%、海藻糖3%、水余量;
组分B:胶原蛋白肽;和
组分C:纤连蛋白0.05%、甘油40%、1,3-丙二醇10%、磷酸氢二钠0.01%、磷酸二氢钠0.01%、水余量;
组分D:血清蛋白1%、海藻糖2%、甘露糖醇93%、水4%。
所述组分A、组分B、组分C和组分D的比例为25:6:3:1。
其中,组分A购买自江苏创健医疗科技股份有限公司;组分C购买上海纤连生物技术有限公司,组分D购买自武汉禾元生物科技股份有限公司。
所述胶原蛋白肽的制备方法如下:
S01取鱼鳔,用正己烷和去离子水交替洗涤脱脂后,于30℃下烘干后,进行切块;并浸泡在0.1mg/mL的NaOH溶液中浸泡48h后,过滤收集固形物,并用蒸馏水洗至中性;
S02分别制备0.1wt%胃蛋白酶的0.5mg/mL醋酸溶液(溶液1);0.2wt%胰蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液2);0.1wt%木瓜蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液3);
S03将S01处理后的鱼鳔按照固体和溶液的比例为1:50(g/mL)进行混合,将S01处理后的鱼鳔先后浸泡在S02的溶液1、溶液2、溶液3中,浸泡时间分别为18h、24h、12h和6h;每次取上清液,加入NaCl混合均匀后,静置24h,收集沉淀物、干燥,即得胶原蛋白粗品;
S04将S03收集到的胶原蛋白粗品,将胶原蛋白粗品溶解于40℃水中(23%,m/v),加入胶原蛋白酶(0.01%,m/v),在40℃条件下置于震荡水浴摇床,酶解1h;然后灭酶、离心,取上清,冷冻干燥后所得即胶原蛋白肽。
所述的一种四聚蛋白制品的制备方法,步骤如下:
(1)分别准备组分A、组分B、和组分C;
(2)将组分B、去离子水和硫酸铜混合搅拌,水浴加热至50℃反应0.5h;
(3)反应后,加入无水乙醇,过滤取沉淀;
(4)将组分A、组分C、组分D和步骤(3)中的沉淀物混合均匀,即得。
实施例4
本实施例提供的一种四聚蛋白制品,其包括:
组分A:弹性蛋白0.1%、氯化钠0.2%、1,2-戊二醇0.2%、1,2-己二醇0.5%、精氨酸0.5%、海藻糖3%、水余量;
组分B:胶原蛋白肽;和
组分C:纤连蛋白0.05%、甘油40%、1,3-丙二醇10%、磷酸氢二钠0.01%、磷酸二氢钠0.01%、水余量;
组分D:血清蛋白1%、海藻糖2%、甘露糖醇93%、水4%。
所述组分A、组分B、组分C和组分D的比例为25:6:3:1。
其中,组分A购买自江苏创健医疗科技股份有限公司;组分C购买上海纤连生物技术有限公司,组分D购买自武汉禾元生物科技股份有限公司。
所述胶原蛋白肽的制备方法如下:
S01取鱼鳔,用正己烷和去离子水交替洗涤脱脂后,于30℃下烘干后,进行切块;并浸泡在0.1mg/mL的NaOH溶液中浸泡48h后,过滤收集固形物,并用蒸馏水洗至中性;
S02分别制备0.1wt%胃蛋白酶的0.5mg/mL醋酸溶液(溶液1);0.2wt%胰蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液2);0.1wt%木瓜蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液3);2wt%碱性蛋白酶的水溶液(溶液4);
S03将S01处理后的鱼鳔按照固体和溶液的比例为1:50(g/mL)进行混合,将S01处理后的鱼鳔先后浸泡在S02的溶液4、溶液3、溶液2和溶液1中,浸泡时间分别为18h、24h、12h和6h;每次取上清液,加入NaCl混合均匀后,静置24h,收集沉淀物、干燥,即得胶原蛋白粗品;
S04将S03收集到的胶原蛋白粗品,将胶原蛋白粗品溶解于40℃水中(23%,m/v),加入胶原蛋白酶(0.01%,m/v),在40℃条件下置于震荡水浴摇床,酶解1h;然后灭酶、离心,取上清,冷冻干燥后所得即胶原蛋白肽。
所述的一种四聚蛋白制品的制备方法,步骤如下:
(1)分别准备组分A、组分B、和组分C;
(2)将组分B、去离子水和硫酸铜混合搅拌,水浴加热至50℃反应0.5h;
(3)反应后,加入无水乙醇,过滤取沉淀;
(4)将组分A、组分C、组分D和步骤(3)中的沉淀物混合均匀,即得。
实施例5
本实施例提供的一种四聚蛋白制品,其包括:
组分A:弹性蛋白0.1%、氯化钠0.2%、1,2-戊二醇0.2%、1,2-己二醇0.5%、精氨酸0.5%、海藻糖3%、水余量;
组分B:胶原蛋白肽;和
组分C:纤连蛋白0.05%、甘油40%、1,3-丙二醇10%、磷酸氢二钠0.01%、磷酸二氢钠0.01%、水余量;
组分D:血清蛋白1%、海藻糖2%、甘露糖醇93%、水4%。
所述组分A、组分B、组分C和组分D的比例为25:6:3:1。
其中,组分A购买自江苏创健医疗科技股份有限公司;组分C购买上海纤连生物技术有限公司,组分D购买自武汉禾元生物科技股份有限公司。
所述胶原蛋白肽的制备方法如下:
S01取鱼鳔,用正己烷和去离子水交替洗涤脱脂后,于30℃下烘干后,进行切块;并浸泡在0.1mg/mL的NaOH溶液中浸泡48h后,过滤收集固形物,并用蒸馏水洗至中性;
S02分别制备0.1wt%胃蛋白酶的0.5mg/mL醋酸溶液(溶液1);0.2wt%胰蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液2);0.1wt%木瓜蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液3);
S03将S01处理后的鱼鳔按照固体和溶液的比例为1:50(g/mL)进行混合,将S01处理后的鱼鳔先后浸泡在S02的溶液3、溶液2、溶液1中,浸泡时间分别为18h、24h、12h和6h;每次取上清液,加入NaCl混合均匀后,静置24h,收集沉淀物、干燥,即得胶原蛋白粗品;
S04将S03收集到的胶原蛋白粗品,将胶原蛋白粗品溶解于40℃水中(23%,m/v),加入胶原蛋白酶(0.01%,m/v),在40℃条件下置于震荡水浴摇床,酶解1h;然后灭酶、离心,取上清,冷冻干燥后所得即胶原蛋白肽。
所述的一种四聚蛋白制品的制备方法,步骤如下:
(1)分别准备组分A、组分B、和组分C;
(2)将组分B、去离子水和硫酸铜混合搅拌,水浴加热至50℃反应0.5h;
(3)反应后,加入无水乙醇,过滤取沉淀;
(4)将组分A、组分C、组分D和步骤(3)中的沉淀物混合均匀,即得。
实施例6
本实施例提供的一种四聚蛋白制品,其包括:
组分A:弹性蛋白0.1%、氯化钠0.2%、1,2-戊二醇0.2%、1,2-己二醇0.5%、精氨酸0.5%、海藻糖3%、水余量;
组分B:胶原蛋白肽;和
组分C:纤连蛋白0.05%、甘油40%、1,3-丙二醇10%、磷酸氢二钠0.01%、磷酸二氢钠0.01%、水余量;
组分D:血清蛋白1%、海藻糖2%、甘露糖醇93%、水4%。
所述组分A、组分B、组分C和组分D的比例为25:6:3:1。
其中,组分A购买自江苏创健医疗科技股份有限公司;组分C购买上海纤连生物技术有限公司,组分D购买自武汉禾元生物科技股份有限公司。
所述胶原蛋白肽的制备方法如下:
S01取鱼鳔,用正己烷和去离子水交替洗涤脱脂后,于30℃下烘干后,进行切块;并浸泡在0.1mg/mL的NaOH溶液中浸泡48h后,过滤收集固形物,并用蒸馏水洗至中性;
S02分别制备0.1wt%胃蛋白酶的0.5mg/mL醋酸溶液(溶液1);0.2wt%胰蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液2);0.1wt%木瓜蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0(溶液3);2wt%碱性蛋白酶的水溶液(溶液4);
S03将S01处理后的鱼鳔按照固体和溶液的比例为1:50(g/mL)进行混合,将S01处理后的鱼鳔先后浸泡在S02的溶液1、溶液2、溶液3和溶液4中,浸泡时间分别为18h、24h、12h和6h;每次取上清液,加入NaCl混合均匀后,静置24h,收集沉淀物、干燥,即得胶原蛋白粗品;
S04将S03收集到的胶原蛋白粗品,将胶原蛋白粗品溶解于40℃水中(23%,m/v),加入胶原蛋白酶(0.01%,m/v),在40℃条件下置于震荡水浴摇床,酶解1h;然后灭酶、离心,取上清,冷冻干燥后所得即胶原蛋白肽。
所述的一种四聚蛋白制品的制备方法,步骤如下:分别准备组分A、组分B、和组分C、组分D;并将组分A、B、C、D进行混合即可。
性能测试
测试1:DPPH自由基清除法:采用DPPH自由基清除法测定鱼鳞胶原蛋白肽的抗氧化活性。准确称取3.94mgDPPH溶于100mL无水乙醇中,将实施例1-实施例6制备得到的制剂,溶解于水溶液中,得到质量分数为0.1%的溶液;取2mL待测样品与等体积DPPH溶液充分混合,室温下避光静置30min后在517nm下测定吸光值,以蒸馏水作空白对照。
DPPH自由基清除率(%)=(Ao-As)/Ao×100
式中:As为样品组吸光值;Ao为空白组吸光值。
测试结果见表1和图1。
表1试验结果表
测试2:透明质酸酶抑制率
检测依据,按照HMC-W1-029透明质酸酶抑制率进行测试。
实施例1-6:用纯水稀释至样品浓度为0.2%;
阳性对照物(甘草酸二钾,纯度≥98%):用水稀释至阳性对照物浓度为3%;
阴性对照物:纯水。
试验操作步骤:
设计样品组、样品本底组、溶剂组和溶剂本底组,每个组别设立需设立3个平行,分别在四组中加入不同试剂溶液,摇匀,室温放置30min显色,用紫外分光光度计测定波长为528nm处吸光度值。
计算公式
透明质酸酶抑制率(%)=(1-(C-D)/(A-B))×100
其中,A为不含样品的反应溶液的吸光度;B为不含样品和酶的反应溶液的吸光度;C为含有样品和酶的反应溶液的吸光度;D为含有样品和不含酶的反应溶液的吸光度。
统计分析软件为SPSS,试验样品、阳性对照物和阴性对照物透明质酸酶抑制率之间的比较采用独立样板t检验。上述统计分析均为双尾检验,显著性水平为α=0.05,P>0.05,表示两组之间无显著性差异;P<0.05,表示两组之间具有显著性差异。
表2试验结果表
透明质酸酶抑制率保留三位小数,P<0.05,表示样品和阳性对照与阴性对照相比有显著性差异。
测试3:人体功效实验:抗皱紧致
试验目的:通过招募一定合格的受试者,采用图像采集的方式来观察产品使用前后受试者面部皱纹的变化;通过受试者使用产品后填写问卷,反应总体的受试者满意度。从而评价使用该产品后的抗皱紧致的功效,为化妆品的抗皱紧致功效宣传提供依据。用仪器VISIA-CR进行拍照,搭配ipp进行分析。。
受试者
(1)挑选35-60岁,健康男性或者女性,60名,平均每组10名;(2)无过敏性疾病,无化妆品或其他外用制剂过敏史;
(3)既往无光感性疾病史,近期内未使用影响光感性的药物;(4)面部明显有皱纹。
方案设计
测试周期:4期;环境条件:温度21±1℃;相对湿度50±10%。
测试结果:
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (3)
1.一种四聚蛋白制品,其特征在于,所述制品包括:
组分A:弹性蛋白0.1%、氯化钠0.2%、1,2-戊二醇0.2%、1,2-己二醇0.5%、精氨酸0.5%、海藻糖3%、水余量;
组分B:胶原蛋白肽;和
组分C:纤连蛋白0.05%、甘油40%、1,3-丙二醇10%、磷酸氢二钠0.01%、磷酸二氢钠0.01%、水 余量;
组分D:血清蛋白1%、海藻糖2%、甘露糖醇93%、水4%;
所述组分A、组分B、组分C和组分D的比例为25:6:3:1;
所述胶原蛋白肽的制备方法如下:
S01 取鱼鳔,用正己烷和去离子水交替洗涤脱脂后,于30℃下烘干后,进行切块;并浸泡在0.1mg/mL的NaOH溶液中浸泡48h后,过滤收集固形物,并用蒸馏水洗至中性;
S02 分别制备溶液1:0.1wt%胃蛋白酶的0.5mg/mL醋酸溶液;溶液2:0.2wt%胰蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0;溶液3:0.1wt%木瓜蛋白酶的磷酸缓冲液pH值为11.0;溶液4:2wt%碱性蛋白酶的水溶液;
S03 将S01处理后的鱼鳔按照固体和溶液的比例为1:50 g/mL进行混合,将S01处理后的鱼鳔先后浸泡在S02的溶液1、溶液2、溶液3和溶液4中,浸泡时间分别为18h、24h、12h和6h;每次取上清液,加入NaCl混合均匀后,静置24h,收集沉淀物、干燥,即得胶原蛋白粗品;
S04 将S03收集到的胶原蛋白粗品溶解于40℃水中,加入胶原蛋白酶,在40℃条件下置于震荡水浴摇床,酶解1 h;然后灭酶、离心,取上清,冷冻干燥后所得即胶原蛋白肽;
制备所述的一种四聚蛋白制品的步骤如下:
(1)分别准备组分A、组分B、和组分C;
(2)将组分B和铜盐进行螯合;
(3)将组分A、组分C和组分D加入到步骤(2)得到的螯合物中,即得。
2.根据权利要求1所述的制品,其特征在于,所述弹性蛋白采用生物发酵工艺制备得到;所述组分A的pH值为6.0-8.0。
3.权利要求1或2所述的四聚蛋白制品,其用于护肤品领域。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202310372456.XA CN116327631B (zh) | 2023-04-07 | 2023-04-07 | 四聚蛋白组合物及其应用、制备工艺 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202310372456.XA CN116327631B (zh) | 2023-04-07 | 2023-04-07 | 四聚蛋白组合物及其应用、制备工艺 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN116327631A CN116327631A (zh) | 2023-06-27 |
CN116327631B true CN116327631B (zh) | 2023-09-08 |
Family
ID=86887730
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202310372456.XA Active CN116327631B (zh) | 2023-04-07 | 2023-04-07 | 四聚蛋白组合物及其应用、制备工艺 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN116327631B (zh) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101899491A (zh) * | 2010-05-18 | 2010-12-01 | 武汉艾诗妮娜生物科技有限公司 | 利用复合酶从鱼鳞中制取小分子胶原蛋白肽的方法 |
CN103992384A (zh) * | 2014-05-22 | 2014-08-20 | 浙江海洋学院 | 一种大黄鱼鱼骨胶原肽及其制备方法和用途 |
CN106519020A (zh) * | 2016-10-31 | 2017-03-22 | 华南理工大学 | 一种具有美容功效的功能性肽及其制备方法和用途 |
CN115925788A (zh) * | 2023-01-18 | 2023-04-07 | 浙江海洋大学 | 具有治疗非酒精性脂肪肝病的鮟鱇鱼鱼鳔抗氧化肽及其制备方法和应用 |
-
2023
- 2023-04-07 CN CN202310372456.XA patent/CN116327631B/zh active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101899491A (zh) * | 2010-05-18 | 2010-12-01 | 武汉艾诗妮娜生物科技有限公司 | 利用复合酶从鱼鳞中制取小分子胶原蛋白肽的方法 |
CN103992384A (zh) * | 2014-05-22 | 2014-08-20 | 浙江海洋学院 | 一种大黄鱼鱼骨胶原肽及其制备方法和用途 |
CN106519020A (zh) * | 2016-10-31 | 2017-03-22 | 华南理工大学 | 一种具有美容功效的功能性肽及其制备方法和用途 |
CN115925788A (zh) * | 2023-01-18 | 2023-04-07 | 浙江海洋大学 | 具有治疗非酒精性脂肪肝病的鮟鱇鱼鱼鳔抗氧化肽及其制备方法和应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN116327631A (zh) | 2023-06-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Leslie et al. | Folate binding by the brush border membrane proteins of small intestinal epithelial cells | |
CN112043621B (zh) | 一种具有抗衰效果的无防腐多肽组合物 | |
JP2007151453A (ja) | エラスチン高含有可溶性ペプチドおよびその製造方法 | |
CN116514912B (zh) | 抗皮肤氧化损伤的草菇多肽及其应用 | |
CN108420749A (zh) | 一种具有抗衰老效果的护肤品及其制备方法 | |
CN103948536B (zh) | 复合蚂蚁精华和胎盘低分子活性多肽的抗衰老护肤组合物 | |
CN109381348B (zh) | 一种稳定的高含量胶原蛋白透明化妆水 | |
CN116327631B (zh) | 四聚蛋白组合物及其应用、制备工艺 | |
CN117530879A (zh) | 一种多重抗氧化组合物及其制备方法和应用 | |
CN113749967B (zh) | 一种肽类组合物及其应用 | |
CN108969397A (zh) | 一种活性多肽面膜及其制备方法 | |
CN114573682A (zh) | 一种弹性蛋白肽及其制备方法 | |
CN113876610A (zh) | 一种能够增强细胞能量并提高皮肤抵抗力的组合物及其制备方法与应用 | |
CN111388505A (zh) | 一种动物胎盘转移因子的制备方法 | |
CN111773155B (zh) | 一种含发酵来源的活性物稳定肽 | |
CN115068387B (zh) | 一种植物组合物及其在化妆品中的应用 | |
CN115300443B (zh) | 一种羊胎素提取方法及在化妆品中的应用 | |
CN115154351B (zh) | 含熊果苷的皮肤美白用组合物 | |
Zachariae et al. | Methods for isolation and identification of acid mucopolysaccharides in connective tissue | |
CN108486204B (zh) | 一种袋鼠皮胶原蛋白肽的制备方法 | |
CN108690131B (zh) | 一种袋鼠皮胶原蛋白肽及其用途 | |
RU2709513C1 (ru) | Способ получения окрашенного коллагена и определения активности коллагеназы | |
CN117137822B (zh) | 一种抗衰老组合物及其应用 | |
US20220323536A1 (en) | Use of beta-l-aspartyl-l-arginine on senescent skin | |
JP5035169B2 (ja) | シスチン−コラーゲンペプチド複合体およびその製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |