CN116254209B - 一种提高木质素降解菌降解性能的方法 - Google Patents

一种提高木质素降解菌降解性能的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种提高木质素降解菌降解性能的方法，菌株Erwinia sp.QL‑Z3对木质素的降解率从优化前的14.23%优化至25.01%；在培养基初始pH值为8，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为3g/L的条件下，LiP酶活力可优化至371.00U/L，是优化前的3.53倍；在培养基初始pH值为9.5，氮源为NH4NO3，木质素浓度为2.5g/L，MnP、Lac酶活力分别可优化至839.50U/L、219.00U/L，是优化前的3.18、2.84倍，优化结果显著。

Description

一种提高木质素降解菌降解性能的方法
技术领域
本发明属于微生物技术领域，涉及微生物的发酵培养，具体涉及一种提高木质素降解菌降解性能的方法。
背景技术
木质纤维素主要由纤维素、半纤维素和木质素组成，其中木质素是一类由苯丙烷类衍生物组成的高分子聚合物，存在于植物体内的木质部，是自然界中储量最丰富的芳香族化合物。木质素及其产物可以用来制备香草醛、阿魏酸等高价值化学品，且木质素衍生物转化为传感器组分、生物复合材料、生物燃料、水凝胶和散装化学品等应用方面具有很大潜力。
生物炼油厂与制浆和造纸工业会生产大量造纸黑液，黑液中含有大量的木质素难以降解。据报道，每年仅制浆工业就生产约5000万吨木质素，造纸工业中也只有大约2%的木质素用于商业用途，其余的直接排放或者焚烧。这不仅使木质素资源没有得到充分利用，也给自然环境带来严重的污染。另外，木质素作为秸秆中的一部分，即使通过秸秆还田也很难自然降解。因此，如何通过生物技术将污水及废弃秸秆中的木质素加速降解，并转化为能源、化工成品等，不仅有助于治理木质素污染，也能在生物质能源的综合利用中发挥价值。
发明内容
本发明的目的在于通过优化木质素降解菌的培养发酵条件，提高木质素降解菌对木质素的降解效率，同时提高与木质素降解密切相关酶的酶活力。
为实现本发明的技术目的，本发明的技术方案围绕木质素降解菌Erwinia sp.QL-Z3展开，所述Erwinia sp.QL-Z3菌株16SrRNA基因GenBank登录号为MH828331，全基因组测序GenBank登录号为CP037950。
具体地，本发明提供一种提高木质素降解菌降解性能的方法，其所述木质素降解菌为Erwinia sp.QL-Z3菌株，将活化后的Erwinia sp.QL-Z3菌株接种于木质素液体培养基，30℃，180rpm培养。
所述木质素液体培养基的pH值为5，氮源为(NH4)2SO4，木质素的添加量为1.5g/L。
每1L所述木质素液体培养基的组份及含量为：木质素1.5g、K2HPO4 2g、MgSO4·7H2O 0.3g、CaCl2 0.08g、FeSO4·7H2O 0.05g、MnCl2 0.02g、(NH4)2SO4 2g。
本发明优化获知所述Erwinia sp.QL-Z3菌株降解木质素的最佳发酵条件，在此条件下，所述Erwinia sp.QL-Z3菌株对木质素的降解率优化至25.24%。
作为本发明提高木质素降解菌降解性能方法的优选实施方式之一，调整所述木质素液体培养基pH为8，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为3g/L，所述Erwinia sp.QL-Z3菌株的木质素过氧化物酶的酶活力优化至371.00U/L。
作为本发明提高木质素降解菌降解性能方法的优选实施方式之一，调整所述木质素液体培养基pH为9.5，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为2.5g/L，所述Erwinia sp.QL-Z3菌株的漆酶酶活力可优化至219.00U/L。
作为本发明提高木质素降解菌降解性能方法的优选实施方式之一，调整所述木质素液体培养基pH为9.5，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为2.5g/L，所述Erwinia sp.QL-Z3菌株的锰过氧化物酶的酶活力优化至839.50U/L。
本发明还提供了一种提高木质素降解菌降解性能的培养基。所述培养基为木质素液体培养基，所述木质素液体培养基的pH为5，氮源为(NH4)2SO4，木质素的添加量为1.5g/L；每1L所述木质素液体培养基的组份及含量为：木质素1.5g、K2HPO4 2g、MgSO4·7H2O 0.3g、CaCl2 0.08g、FeSO4·7H2O 0.05g、MnCl2 0.02g、(NH4)2SO4 2g；用所述木质素液体培养基在30℃，180rpm条件下培养木质素降解菌Erwinia sp.QL-Z3菌株，Erwinia sp.QL-Z3菌株对木质素的降解率优化至25.24%。
本发明还提供了一种提高木质素降解菌木质素过氧化物酶酶活力的培养基。所述培养基为木质素液体培养基，所述木质素液体培养基的pH为8，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为3g/L；每1L所述木质素液体培养基的组份及含量为：木质素3g、K2HPO4 2g、MgSO4·7H2O0.3g、CaCl2 0.08g、FeSO4·7H2O 0.05g、MnCl2 0.02g、NH4NO3 2g；用所述木质素液体培养基在30℃，180rpm条件下培养木质素降解菌Erwinia sp.QL-Z3菌株，Erwinia sp.QL-Z3菌株的木质素过氧化物酶的酶活力优化至371.00U/L。
本发明还提供了一种提高木质素降解菌漆酶酶活力的培养基。所述培养基为木质素液体培养基，所述木质素液体培养基的pH为9.5，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为2.5g/L；每1L所述木质素液体培养基的组份及含量为：木质素2.5g、K2HPO4 2g、MgSO4·7H2O0.3g、CaCl2 0.08g；FeSO4·7H2O 0.05g、MnCl2 0.02g、NH4NO3 2g；用所述木质素液体培养基在30℃，180rpm条件下培养木质素降解菌Erwinia sp.QL-Z3菌株，Erwinia sp.QL-Z3菌株的漆酶酶活力优化至219.00U/L。
本发明还提供了一种提高木质素降解菌锰过氧化物酶酶活力的培养基。所述培养基为木质素液体培养基，所述木质素液体培养基的pH为9.5，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为2.5g/L；每1L所述木质素液体培养基的组份及含量为：木质素2.5g、K2HPO4 2g、MgSO4·7H2O 0.3g、CaCl2 0.08g、FeSO4·7H2O 0.05g、MnCl2 0.02g、NH4NO3 2g；用所述木质素液体培养基在30℃，180rpm条件下培养木质素降解菌Erwinia sp.QL-Z3菌株，Erwinia sp.QL-Z3菌株的锰过氧化物酶的酶活力优化至839.50U/L。
与现有技术相比，本发明“一种提高木质素降解菌降解性能的方法”具有以下有益效果：
微生物对木质素的降解是将木质素大分子转化为小分子并被微生物细胞吸收的过程，是菌株在发酵过程中多个酶分泌并发挥功能的结果。本发明通过对Erwinia sp.QL-Z3菌株降解率和木质素降解酶活力进行优化，找到其最优条件，从而最大程度的提高Erwinia sp.QL-Z3菌株对木质素的降解能力。
Erwinia sp.QL-Z3菌株发酵降解木质素的最优条件为：培养基初始pH=5.0，氮源为(NH4)2SO4，木质素浓度为1.5g/L。在此条件下，Erwinia sp.QL-Z3菌株的木质素降解率从优化前的14.23%优化至25.01%，优化结果显著。
通过对Erwinia sp.QL-Z3菌株发酵液上清的LiP、Lac、MnP酶活力进行单因素优化和正交实验优化。在pH选择8，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为3g/L的条件下，LiP粗酶液酶活力可优化至371.00U/L，是优化前的3.53倍，优化成果显著。MnP、Lac粗酶液酶活力最佳发酵条件为：培养基初始pH=9.5，氮源为NH4NO3，木质素浓度为2.5g/L，在该条件下，Erwiniasp.QL-Z3菌株的锰过氧化物酶的酶活力为839.50U/L，漆酶为219.00U/L，分别是优化前的3.18、2.84倍，优化结果显著。
附图说明
图1为不同木质素浓度对木质素过氧化酶（LiP）酶活力的影响。
图2为不同木质素浓度对漆酶（Lac）酶活力的影响。
图3为不同木质素浓度对锰过氧化物酶（MnP）酶活力的影响。
图4为不同pH值对木质素过氧化酶（LiP）酶活力的影响。
图5为不同pH值对漆酶（Lac）酶活力的影响。
图6为不同pH值对锰过氧化物酶（MnP）酶活力的影响。
图7为不同氮源种类对木质素过氧化酶（LiP）酶活力的影响。
图8为不同氮源种类对漆酶（Lac）酶活力的影响。
图9为不同氮源种类对锰过氧化物酶（MnP）酶活力的影响。
图10为不同温度对木质素过氧化酶（LiP）酶活力的影响。
图11为不同温度对漆酶（Lac）酶活力的影响。
图12为不同温度对锰过氧化物酶（MnP）酶活力的影响。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行说明，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例所用培养基如表1所示。
表1，所用培养基配方
实施例中酶活力测定方法如下。
木质素过氧化物酶：反应体系为3mL，反应混合液含有1.85mL 0.24mmol/L藜芦醇和1.0mL粗酶液，预热至37℃后加入0.1mL 6.0mmol/L的H2O2启动反应，并测定3min前后在310nm下吸光度值的增加量。一个酶活力单位用每分钟吸光值增加0.1的酶量表示。
漆酶：在25℃，3mL反应体系中，反应混合液含有2mL 0.5mmol/L的ABTS（溶于0.1mmol/L，pH值5.0的醋酸－醋酸钠缓冲溶液中），加入1mL粗酶液启动反应，每隔1min测定420nm下的吸光值，取吸光值线性变化部分，一个酶活力单位用每分钟吸光值增加0.1的酶量表示。
锰过氧化物酶：在37℃，3mL反应体系，反应混合液含有2.4mL 50mmol/L pH值4.5的醋酸缓冲液，0.1mL 1.6mmol/LMnSO4溶液，0.4mL粗酶液，37℃下加入0.1mL 1.6mmol/L的H2O2溶液启动反应，测定最初3min内在240nm下吸光度值并取线性变化部分。一个酶活力单位用每分钟吸光值增加0.1的酶量表示。
实施例中木质素降解率测定方法如下。
将QL-Z3菌株接种至LB液体培养基中活化培养至OD600为0.9左右，5000rpm离心5min，弃上清后用无菌水清洗两次，按照1%的接种量接种于木质素液体培养基中。放入恒温摇床30℃，180rpm转速下进行摇瓶培养。培养3d后取木质素摇瓶培养基的发酵液，8000rpm离心浓缩5min。上层粗酶液用0.22μm微孔水系滤膜过滤除菌后在280nm下测定OD值，并根据木质素标准曲线计算木质素降解率。公式如下：
降解率=（A0−An）/A0×100%
式中，A0为未接菌前木质素在培养基质中的浓度；An为接种n小时后木质素在培养基质中的浓度。
实施例1
本实施例提供了培养基初始pH（A）、氮源种类（B）、木质素浓度（C）3种影响因子的3个水平量，对菌株QL-Z3木质素降解率进行正交试验优化。表2为测定所需的影响因素与对应的影响水平。试验设计表见表3。
表2，试验设计所需的因素与水平
表3，试验设计表
注：K1、K2以及K3是单个因素下对应的1、2、3水平降解率的和，k1、k2以及k3分别为对应的平均值，R为最大k值与最小k值的差。
表4，正交模型方差分析
注：**代表p＜0.01，表示差异极显著；*代表p＜0.05，表示差异显著。
由表4可知，模型F值为21.026，其P值小于0.05，R2=0.989接近于1，这代表该结果的可靠性高，制作的模型显著，可用来预测初始pH、氮源、木质素浓度三种因子对降解率的影响。正交组合方差模型分析结果中，初始pH（A）、培养基初始pH（B）和木质素浓度（C）对菌株在降解木质素的过程中产生的影响是显著的。根据各个因子所对应的极差R值可确定各因子对降解情况的影响，R值越大，对结果的影响越强，排序靠前；主次排序为：木质素浓度（C）>培养基初始pH（A）>氮源种类（B）。
经试验分析，A1B2C2为QL-Z3降解木质素的最佳发酵条件组合，即pH选择5，氮源为(NH4)2SO4，木质素浓度为1.5g/L，最终降解率可优化至25.24%，优化成果显著。经四次验证性实验，该最佳组合测得的木质素降解率结果分别为：25.24%，24.28%，24.89%，25.67%，重复后的降解率平均值为25.01%，实验结果具有重复性，则实验结果有效。
实施例2
本实施例提供了木质素浓度对菌株QL-Z3产木质素过氧化物酶（LiP）、漆酶（Lac）、锰过氧化物酶（MnP）的酶活力的影响。
将菌株QL-Z3接种在50mL液体LB培养基中（含50mg/L氨苄霉素），30℃，180rpm培养过夜。分别取菌液至2mL EP管中冷冻离心浓缩，用无菌生理盐水洗去剩余LB后悬浮，再将菌悬液接种于不同起始浓度的木质素液体培养基（1.0、1.5、2.0、2.5和3.0g/L），其中每个浓度梯度设置3个重复，30℃，180rpm培养7d，每隔24h取发酵液离心后取上清，测定LiP、Lac、MnP的酶活力，并绘制酶活变化曲线。
由图1、2、3可看出，在1~2g/L的木质素浓度之间，木质素过氧化物酶（LiP），漆酶（Lac），锰过氧化物酶（MnP）三种酶活力不断升高，且变化趋势一致，当木质素浓度从2.0g/L变化到2.5g/L时，三种酶随木质素浓度的增加均有较大幅度的提高并达到最大酶活力。最适木质素浓度为2.5g/L，LiP、Lac、MnP酶活力分别为：293.00U/L、78.50U/L、324.17U/L。三种酶对应酶活力排名前三的木质素浓度均为2.5g/L，3.0g/L和2.0g/L。
实施例3
本实施例提供了培养基初始pH值对菌株QL-Z3产木质素过氧化物酶（LiP）、锰过氧化物酶（MnP）、漆酶（Lac）的酶活力的影响。
将菌株QL-Z3接种在50mL液体LB培养基中（含50mg/L氨苄霉素），30℃，180rpm培养过夜。分别取菌液至2mL EP管中冷冻离心浓缩，用无菌生理盐水洗去剩余LB后悬浮，将已配制好的液体培养基分别调至成不同的pH（5.0、6.5、8.0、9.5和11.0），设置3个重复。再将菌悬液接种至木质素液体发酵培养基中进行发酵培养，30℃，180rpm培养7d，每隔24h取发酵液离心后取上清，测定LiP、Lac、MnP的酶活力，并绘制酶活变化曲线。
由图4、5、6可看出，三种木质素降解相关酶在不同pH值的木质素液体培养基中均表现出酶活力，在碱性条件下表现出较高酶活力，并在pH为9.5时三种酶的活力均达到最高，其中木质素过氧化物酶（LiP）为133.00U/L、漆酶（Lac）为236.00U/L、锰过氧化物酶（MnP）为251.67U/L。
实施例4
本实施例提供了不同氮源对菌株QL-Z3产木质素过氧化物酶（LiP）、漆酶（Lac）、锰过氧化物酶（MnP）的酶活力的影响。
将菌株QL-Z3接种在50mL液体LB培养基中（含50mg/L氨苄霉素），30℃，180rpm培养过夜。分别取菌液至2mL EP管中冷冻离心浓缩，用无菌生理盐水洗去剩余LB后悬浮。以木质素为唯一碳源，以2.0g/L酵母粉的总氮含量为标准，在液体培养基中分别添加等氮含量的不同氮源（蛋白胨、酵母粉、NH4NO3、NaNO3、（NH4）2SO4），设置3个重复，接种后30℃，180rpm培养7d，每隔24h取发酵液离心后取上清，测定LiP、Lac、MnP的酶活力，并绘制酶活变化曲线。
在氮源优化过程中，所用氮源的量均以2.0g/L酵母粉的总氮含量为标准。由图7、8、9可以看出，三种木质素降解相关酶在含不同氮源的木质素液体培养基中均表现出酶活力，添加有机氮源的三种酶活力明显高于无机氮源。在NH4NO3作为氮源时三种酶的活力均达到最高，其中木质素过氧化物酶（LiP）活力为251.50U/L、漆酶（Lac）活力为158.00U/L、锰过氧化物酶（MnP）活力为204.38U/L。对三种酶影响较大的氮源为NH4NO3，NaNO3和(NH4)2SO4。
实施例5
本实施例提供了温度对菌株QL-Z3产木质素过氧化物酶（LiP）、漆酶（Lac）、锰过氧化物酶（MnP）的酶活力的影响。
将菌株QL-Z3接种在50mL液体LB培养基中（含50mg/L氨苄霉素），30℃，180rpm培养过夜。分别取菌液至2mL EP管中冷冻离心浓缩，用无菌生理盐水洗去剩余LB后悬浮，再将菌悬液接种至不同温度的木质素液体培养基中进行摇瓶培养，其中木质素液体培养基所设置培养温度分别为20、25、30、35和40℃，设置3个重复，放置于上述不同温度的摇床中180rpm培养7d，每隔24h取发酵液离心后取上清，测定LiP、MnP、Lac的酶活力，并绘制酶活变化曲线。
由图10、11、12可看出，漆酶和锰过氧化物酶的酶活在30℃时达到最大酶活力，分别为272.33U/L和238.75U/L。木质素过氧化物酶在25℃时达到109.50U/L的最大酶活力，与30℃条件下101.50U/L相差不大。且菌株QL-Z3的最适培养温度是30℃，因此在正交实验中，不再选择培养温度作为优化条件。
实施例6
本实施例提供了木质素过氧化物酶（LiP）酶活力正交试验优化方案及优化结果。经上述实施例优化后，选择木质素浓度（A）、氮源种类（B）、培养基初始pH（C）3种差异较明显的因素下的3个水平量对酶活力进一步优化。表5为影响因子与对应的影响水平。表6为试验设计表。表7为正交模型方差分析。
表5，影响因子与影响水平
表6，试验设计表
注：K1、K2以及K3是单个因素下对应的1、2、3 LiP酶活力的和，k1、k2以及k3分别为对应的平均值，R为最大k值与最小k值的差。
表7，正交模型方差分析
注：**代表p＜0.01，表示差异极显著；*代表p＜0.05，表示差异显著。
模型F值为26.573，其P值小于0.05，R2接近于1，表示分析结果可靠性高，模型显著，可用来预测三种因子对木质素过氧化物酶（LiP）的活力影响。木质素浓度（A）和氮源种类（B）对菌株LiP酶活力的影响是显著的。根据各个因子所对应的极差R值可确定各因子对酶活力的影响，R值越大，对结果的影响越强，排序靠前；主次排序为：氮源种类（B）>木质素浓度（A）>培养基pH（C）。
经试验分析，A3B3C1为木质素过氧化物酶粗酶液的发酵条件组合，即pH选择8，氮源为NH4NO3，木质素浓度为3g/L。在此条件下，LiP酶活力可优化至371.00U/L，是优化前的3.53倍，优化成果显著。经四次重复性试验，该最佳组合测得的LiP酶活力分别为：385.00U/L，350.00U/L，321.00U/L，417.00U/L，平均值为368.30U/L。实验结果具有重复性，则实验结果有效。
实施例7
本实施例提供了漆酶（Lac）正交试验优化结果。表8为试验设计表。表9为正交模型方差分析。
表8，试验设计表
注：K1、K2以及K3是单个因子下对应的1、2、3水平Lac酶活力的和，k1、k2以及k3分别为对应的平均值，R为最大k值与最小k值的差。
表9，正交模型方差分析
注：**，p＜0.01表示差异极显著；*，p＜0.05表示差异显著。
由表9可知，模型F值为23.583，其P值小于0.05，R2接近于1，这代表该结果的可靠性高，制作的模型显著，可以用来预测这三种因子对漆酶酶活的影响。正交组合方差模型分析结果中，木质素浓度（A）、氮源种类（B）和培养基初始pH（C）对菌株在降解木质素的过程中Lac的酶活力产生的影响是显著的。根据各个因子所对应的极差R值可确定各因子对降解情况的影响，R值越大，对结果的影响越强，排序靠前。主次排序为：培养基pH（C）>氮源种类（B）>木质素浓度（A）。
经试验分析，A2B1C2为漆酶发酵条件最佳组合，即pH选择9.5，氮源为NH4NO3，木质素浓度为2.5g/L。此时Lac酶活力可优化至219.00U/L，是优化前的2.84倍，优化成果显著。经四次验证性实验，该最佳组合测得的Lac酶活力结果分别为：220.00U/L，215.00U/L，222.00U/L，226.00U/L，平均值为220.80U/L，实验结果具有重复性，则实验结果有效。
实施例8
本实施例提供了锰过氧化物酶（MnP）正交试验优化结果。表10为试验设计表。表11为正交模型方差分析。
表10，试验设计表
注：K1、K2以及K3是单个因素下对应的1、2、3水平MnP酶活力的和，k1、k2以及k3分别为对应的平均值，R为最大k值与最小k值的差。
表11，正交模型方差分析
注：**代表p＜0.01，表示差异极显著；*代表p＜0.05，表示差异显著。
由表11可知，模型F值为21.026，其P值小于0.05，R2接近于1，该结果的可靠性高，制作的模型显著，可以用来预测此三种因子对锰过氧化物酶的酶活影响。木质素浓度（A）和培养基初始pH（C）对菌株锰过氧化物酶（MnP）的影响是显著的。根据各个因子所对应的极差R值可确定各因子对降解情况的影响，R值越大，对结果的影响越强，排序靠前；主次排序为：培养基pH（C）>木质素浓度（A）>氮源种类（B）。
经试验分析，A2B1C2为锰过氧化物酶（MnP）发酵条件的最佳组合，即pH选择9.5，氮源选择为NH4NO3，木质素浓度为2.5g/L。锰过氧化物酶的酶活力可优化至839.50U/L，是优化前的3.18倍，优化成果显著。经4次验证性试验，该最佳组合测得的MnP酶活力结果分别为：815.00U/L，802.50U/L，815.00U/L，792.50U/L，平均值为806.10U/L，实验结果具有重复性，则实验结果有效。
以上所述的实施例是是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。在依据本发明构思的条件下本领域普通技术人员进行的相关推演和替换，在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

Claims (4)

1.一种提高木质素降解菌降解性能的方法，其特征在于，所述木质素降解菌为Erwiniasp.QL-Z3菌株，将活化后的Erwinia sp.QL-Z3菌株接种于木质素液体培养基，30℃，180rpm培养；
所述木质素液体培养基的pH为5，氮源为(NH4)2SO4，木质素的添加量为1.5g/L；
每1L所述木质素液体培养基的组份及含量为：木质素1.5g、K2HPO4 2g、MgSO4·7H2O0.3g、CaCl2 0.08g、FeSO4·7H2O 0.05g、MnCl2 0.02g、(NH4)2SO4 2g；
所述Erwinia sp.QL-Z3菌株对木质素的降解率优化至25.24%；
调整所述木质素液体培养基pH为8，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为3g/L，所述Erwinia sp.QL-Z3菌株的木质素过氧化物酶的酶活力优化至371.00U/L；
调整所述木质素液体培养基pH为9.5，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为2.5g/L，所述Erwinia sp.QL-Z3菌株的漆酶的酶活力可优化至219.00U/L；
调整所述木质素液体培养基pH为9.5，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为2.5g/L，所述Erwinia sp.QL-Z3菌株的锰过氧化物酶的酶活力优化至839.50U/L；
所述Erwinia sp.QL-Z3菌株16SrRNA基因GenBank登录号为MH828331，全基因组测序GenBank登录号为CP037950。
2.一种提高木质素降解菌木质素过氧化物酶的酶活力的方法，其特征在于，用木质素液体培养基在30℃，180rpm条件下培养木质素降解菌Erwinia sp.QL-Z3菌株，Erwiniasp.QL-Z3菌株的木质素过氧化物酶的酶活力优化至371.00U/L；
所述木质素液体培养基的pH为8，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为3g/L；每1L所述木质素液体培养基的组份及含量为：木质素3g、K2HPO4 2g、MgSO4·7H2O 0.3g、CaCl2 0.08g、FeSO4·7H2O 0.05g、MnCl2 0.02g、NH4NO3 2g；
所述Erwinia sp.QL-Z3菌株16SrRNA基因GenBank登录号为MH828331，全基因组测序GenBank登录号为CP037950。
3.一种提高木质素降解菌漆酶的酶活力的方法，其特征在于，用木质素液体培养基在30℃，180rpm条件下培养木质素降解菌Erwinia sp.QL-Z3菌株，Erwinia sp.QL-Z3菌株的漆酶的酶活力优化至219.00U/L；
所述木质素液体培养基的pH为9.5，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为2.5g/L；每1L所述木质素液体培养基的组份及含量为：木质素2.5g、K2HPO4 2g、MgSO4·7H2O 0.3g、CaCl20.08g、FeSO4·7H2O 0.05g、MnCl2 0.02g；NH4NO3 2g；
所述Erwinia sp.QL-Z3菌株16SrRNA基因GenBank登录号为MH828331，全基因组测序GenBank登录号为CP037950。
4.一种提高木质素降解菌锰过氧化物酶的酶活力的方法，其特征在于，用木质素液体培养基在30℃，180rpm条件下培养木质素降解菌Erwinia sp.QL-Z3菌株，Erwinia sp.QL-Z3菌株的锰过氧化物酶的酶活力优化至839.50U/L；
所述木质素液体培养基的pH为9.5，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为2.5g/L；每1L所述木质素液体培养基的组份及含量为：木质素2.5g、K2HPO4 2g、MgSO4·7H2O 0.3g、CaCl20.08g、FeSO4·7H2O 0.05g、MnCl2 0.02g、NH4NO3 2g；
所述Erwinia sp.QL-Z3菌株16SrRNA基因GenBank登录号为MH828331，全基因组测序GenBank登录号为CP037950。
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