CN115975886B - 一株新型假单胞菌及其在作物细菌性病害防治中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株新型假单胞菌及其在作物细菌性病害防治中的应用。该菌株为假单胞菌属的一个潜在新种，命名为Pseudomonas sp.F0096，该菌株已于2022年12月2日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:63027。本发明的新型假单胞菌F0096能够高效广谱抑制多种作物细菌性病害病原菌的生长，同时能够产生铁载体。因此，本发明的新型假单胞菌F0096在作物细菌性病害防治和促进作物铁吸收等方面具有很好的应用潜力。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，特别涉及株新型假单胞菌及其在作物细菌性病害防治中的应用。
背景技术
作物细菌性病害是指由细菌病菌浸染所引起的病害。细菌性病害在高温、高湿条件下容易发病，常引起植物腐烂、萎蔫、褪色、斑点等症状，严重影响农作物的产量和品质，给农业生产造成重大损失。据不完全统计，全球每年主要农作物细菌性病害导致的损失约占作物总产量的20～40％，每年的直接经济损失高达几十亿美元。我国是人口大国，粮食的需求量非常大。目前，作物的细菌性病害已经严重影响到了我国作物生长，威胁着我国粮食安全。为了应对越来越严重的作物细菌性病害，大量化学农药被使用。但是，由于长期、高剂量的不合理使用产生了一系列问题。化学农药使用引起了广泛的农药残留问题，对农产品的质量和安全带来严重危害。同时，化学农药使用也造成了严重的环境污染问题，污染了大气，土壤和水体等，进而威胁着人类的健康。另外，化学农药使用也造成了作物病原细菌产生了抗药性和耐药性，严重降低了化学农药的作用效果。因此，开发针对细菌性病害新的防治方法具有重要意义。
近年来，利用生物之间的相互作用，采用细菌、真菌等生物防控植物病害的生物防控方法具有无残留、无污染、环境友好等优点，其开发与利用得到越来越多研究者的关注。在生防细菌中，假单胞菌是一个重要类群，在自然界分布广泛，繁殖快，定殖能力强，营养要求简单，具有抑制多种植物病害和促进植物生长的作用。假单胞菌也是根际和叶际中重要的细菌，对于维持作物根际和叶际的微生物生态平衡发挥重要作用。目前报道最多具有生防效果的假单胞菌包括荧光假单胞菌、铜绿假单胞菌和绿针假单胞菌等物种。荧光假单胞菌能够产生大量抑制植物病原菌的次级代谢产物，比如藤黄绿农菌素、硝吡咯菌素和2,4-二乙酰藤黄酚，因此具有很好的生物防治效果。铜绿假单胞菌也能够分泌多种拮抗植物病原菌的活性产物，可以防治多种植物真菌和细菌性病害。绿针假单胞菌能够产生吩嗪-1羧酸，抑制小麦全蚀病菌、黄瓜炭疽病、水稻纹枯病、辣椒疫病等。但是，目前具有广谱防治柑橘溃疡病、青枯病、番茄溃疡病和果树溃疡病等作物细菌性病害的假单胞菌未见报道。
发明内容
本发明的第一个目的是克服现有技术的缺点和不足，提供假单胞菌属的一个潜在新种-假单胞菌(Pseudomonas sp.)F0096。该菌株已保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为GDMCC No:63027，保藏日期为2022年12月2日。
所述的假单胞菌F0096的形态特征如下：革兰氏染色呈阴性，单菌落呈圆形、黄色、表面光滑、不透明、边缘不规则。
本发明的第二个目的是提供所述新型假单胞菌F0096在制备防治柑橘溃疡病、青枯病、番茄溃疡病、果树溃疡病的药物和/或促进作物铁吸收的微生物菌剂或肥料添加剂中的应用。
本发明的第三个目的是提供一种用于防治柑橘溃疡病的微生物制剂，含有上述假单胞菌F0096作为活性成分。
本发明的第四个目的是提供一种用于防治青枯病的微生物制剂，含有上述假单胞菌F0096作为活性成分。
本发明的第五个目的是提供一种用于防治番茄溃疡病的微生物制剂，含有上述假单胞菌F0096作为活性成分。
本发明的第六个目的是提供一种用于防治果树溃疡病的微生物制剂，含有上述假单胞菌F0096作为活性成分。
本发明的第七个目的是提供一种用于促进作物铁吸收的微生物活菌制剂，含有上述的假单胞菌F0096作为活性成分。
本发明的第八个目的是提供一种抑制柑橘溃疡病病原菌、青枯病病原菌茄科劳尔氏菌、番茄溃疡病病原菌密执安棒状杆菌、果树溃疡病病原菌丁香假单胞菌的活性物质，来自于上述假单胞菌F0096的发酵液，用于制备防治柑橘溃疡病、青枯病、番茄溃疡病和果树溃疡病的抑制剂、药剂等。
本发明还提供了一种防治柑橘溃疡病、青枯病、番茄溃疡病和果树溃疡病的方法，其是将假单胞菌F0096喷洒至待防治区域。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
本发明首次报道假单胞菌属中一个潜在新种，对柑橘溃疡病、青枯病、番茄溃疡病和果树溃疡病具有很好的防治效果，同时该菌株能够产生铁载体，促进作物铁吸收。该菌株的首次发现丰富了我国用于生防促生的有益微生物资源，其抑菌效果稳定、高效和环境友好的有点，在防治作物细菌性病害和促进作物生长等方面具有很好的应用前景。
Pseudomonas sp.F0096，已保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为GDMCCNo:63027，保藏日期为2022年12月2日。
附图说明
图1为新型假单胞菌F0096在NA培养基上菌落形态。
图2为新型假单胞菌F0096***基因组发育树。
图3为新型假单胞菌F0096在NA液体培养基的生长曲线。
图4为新型假单胞菌F0096对柑橘溃疡病病原菌Xcc的抑制效果。
图5为新型假单胞菌F0096对青枯病病原菌茄科劳尔氏菌的抑制效果。
图6为新型假单胞菌F0096对番茄溃疡病病原菌密执安棒状杆菌的抑制效果。
图7为新型假单胞菌F0096对果树溃疡病病原菌丁香假单胞菌的抑制效果。
具体实施方式
以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
实施例1：新型假单胞菌F0096的分离和鉴定
选择广东省韶关市仁化县城口镇城口服务区(N 25°18′33″，E 113°43′48″)柑橘果园中健康果树，使用无菌的剪刀剪取新鲜柑橘叶片，放于无菌采样袋。随后，将叶片样品置于4℃采样箱保存。将样品带回实验室后，在超净工作台称取叶片10g，加入装有190mL无菌PBS缓冲液(0.2mol/L，pH＝7.0)的500mL三角瓶，摇匀后放置于28℃恒温摇床，200rpm震荡30min。随后，将三角瓶放置于超声波震荡器中，40KHz，工作8s，间歇2s，超声10min。最后，取洗脱液1mL加入装有9mL的PBS缓冲液试管中，依次稀释至10-1、10-2、10-3和10-4，吸取洗脱液原液、10-1、10-2、10-3和10-4稀释样品各100μL分别涂布于TSA培养基(青岛海博，货号HB0177)，置于28℃生化培养箱中培养7天。通过观察，根据菌落大小、颜色、干湿程度、光滑性和是否产生晕圈等特征，从培养基上挑取不同的单菌落至新TSA培养基上，并通过多次划线纯化直至获得纯培养。将纯化获得的菌株进行编号，并与25％甘油(v/v)混匀后保藏于超低温冰箱，由此得到菌株F0096。
菌株F0096革兰氏染色呈阴性，该菌株在R2A培养基上培养4天时的菌落形态如附图1所示，单菌落呈圆形，直径2～8mm，黄色，表面光滑，不透明，边缘不整齐。
实施例2：新型假单胞菌F0096的16S rRNA基因序列分析
采用HiPure细菌DNA提取试剂盒(货号D3146-03，广州美基生物科技有限公司)提取菌株F0096的基因组DNA并进行纯化。以纯化基因组DNA为模板，使用细菌16S rRNA基因扩增通用引物27F/1492R，即27F(5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3')和1492R(5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3')扩增菌株F0096的16S rRNA基因序列。扩增完成后，取适量PCR产物进行凝胶电泳检测，在确定目的条带存在的情况下，将剩余PCR产物送至苏州金唯智生物科技有限公司进行测序，其序列如SEQ ID NO.1所示，长度为1532bp。将菌株F0096的16SrRNA基因序列提交至EzBioCloud数据库(www.ezbiocloud.net)进行序列同源比对。比对结果表明：菌株F0096与模式菌株Pseudomonas fulva NBRC 16637T的16SrRNA基因序列(登录号，BBIQ01000036)的相似度最高，为99.66％；与Pseudomonas parafulva NBRC 16636T的16S rRNA基因序列(登录号，BBIU01000051)的相似度次之，为99.52％；与Pseudomonas属的其它模式菌株间的16S rRNA基因的相似度均低于99.00％。这些分析表明：菌株F0096与Pseudomonas fulva和Pseudomonas parafulva具有最近缘***发育关系。但是，菌株F0096与Pseudomonas fulva和Pseudomonas parafulva两个种的模式菌株的16S rRNA基因序列的相似度接近，目前仅仅通过16S rRNA基因测序分析不能准确确定菌株F0096的分类地位。
实施例3：新型假单胞菌F0096的全基因序列分析
利用实施例2中提取的新型假单胞菌F0096基因组，送至上海美吉生物医药科技有限公司进行基因组测序。通过构建Illumina PE(～400bp)文库，使用Illumina Novaseq平台进行测序。对原始的Reads进行质检后，对获得的高质量数据使用SPAdes v3.15.3进行基因组序列拼接。按照拼接的contig的覆盖度≥100，且长度≥500bp为参数，过滤去除低质量的contig序列。去除低质量序列后，使用软件CheckM v1.1.3对菌株F0096基因组进行质检。结果表明：菌株F0096基因组的完整度为99.30％，污染度为0.48％。通常，基因组的完整度≥95％，且污染度≤5％，则认为该基因组是高质量的。因此，菌株F0096基因组是一个高质量基因组，能够保证分析的准确性。使用软件QUAST v5.0.2对菌株F0096基因组进行分析。结果表明：菌株F0096基因组序列共包含44个contig，基因组总长度为5013616bp，N50的长度为235436bp，基因组DNA G+C的含量是63.59％。
70％的数字化DNA-DNA杂交值(digital DNA-DNA hybridization，dDDH)是原核生物物种分类鉴定的金标准。使用在线工具Genome-to-Genome Distance Calculator 3.0(https://ggdc.dsmz.de/ggdc.php#)计算菌株F0096的基因组序列与近缘物种模式菌株Pseudomonas fulva NBRC 16637T(基因组登录号：BBIQ00000000)和Pseudomonasparafulva NBRC 16636T(基因组登录号：BBIU00000000)的基因组序列间的dDDH数值，分别为24.3和25.1％，这两个dDDH数值均低于70％物种划分的标准，表明菌株F0096与Pseudomonas fulva和Pseudomonas fulva这两个物种不同。使用软件UBCG v3.0构建菌株F0096和近缘参考模式菌株的基因组***发育树。结果如附图2所示，菌株F0096形成了一个独立的***发育分枝，且支持自展值是100，表明菌株F0096具有独立分类地位。综合dDDH和***基因组发育分析的结果，菌株F0096是Pseudomonas属中的一个潜在新物种，因此将其命名为假单胞菌(Pseudomonas sp.)F0096。该菌株已保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为GDMCC No:63027，保藏日期为2022年12月2日。
实施例4：新型假单胞菌F0096生长性能鉴定
取新型假单胞菌F0096接种至NB液体培养基进行活化，培养24h后收集发酵液作为种子液。在96孔细胞培养板中分别添加180μL的NB液体培养基作为基础培养基，而后每个孔添加20μL种子液和NB液体培养基(作为对照)，设置3个重复，摇匀后放置于28℃恒温摇床，180rpm培养48h。在培养过程中，每两个小时使用分光光度计检测每个孔的OD600的吸光度。如附图3所示，新型假单胞菌F0096接种于NB液体培养基后，0～2h为菌株F0096生长延滞期，由于细胞需要适应新的生长环境，因此细胞数目没有明显的增长。在2-10h为菌株F0096生长对数期，菌株细胞数目显著增加。在10h后，菌株F0096的生长进入稳定期直到检测结束。新型假单胞菌F0096生长性能测定结果表明：菌株F0096的生长速度快，代谢能力强，发酵周期短，培养条件简单，具备了优良生产菌株的基本特征，是一株潜在的发酵性能优异的菌株。
实施例5：新型假单胞菌F0096对柑橘溃疡病病原菌的抑制作用鉴定
采用双层平板琼脂扩散法测定新型假单胞菌F0096对柑橘溃疡病病原菌的抑制作用。柑橘溃疡病病原菌Xcc和新型假单胞菌F0096接种至NB液体培养基进行活化，培养24h后分别收集发酵液。制备底层NA培养基(琼脂粉含量1.6％)，培养基厚度适中。在底层NA培养基上放置牛津杯，每个平板3个。取1mL的Xcc发酵液加入300mL的NA培养基(琼脂粉含量1％)，Xcc的终浓度为106～107cfu/mL，凝固后取出牛津杯，即为上层培养基。取30μL新型假单胞菌F0096发酵液加入孔中，28℃培养36h，使用游标卡尺测量抑菌圈的直径。
如附图4所示，加入新型假单胞菌F0096后，柑橘溃疡病病原菌Xcc在孔的周围形成了清晰的透明圈，其直径分别为22.96、21.69和22.31mm，平均值为23.32mm。结果表明：新型假单胞菌F0096对柑橘溃疡病病原菌Xcc的生长具有显著得抑制作用。
实施例6：新型假单胞菌F0096对青枯病病原菌的抑制作用鉴定
采用双层平板琼脂扩散法测定新型假单胞菌F0096对青枯病病原菌的抑制作用。青枯病病原菌茄科劳尔氏菌GMI 1000和新型假单胞菌F0096接种至NB液体培养基进行活化，培养24h后分别收集发酵液。制备底层NA培养基(琼脂粉含量1.6％)，培养基厚度适中。在底层NA培养基上放置牛津杯，每个平板3个。取1mL的GMI 1000发酵液加入300mL的NA培养基(琼脂粉含量1％)，GMI 1000的终浓度为106～107cfu/mL，凝固后取出牛津杯，即为上层培养基。取30μL新型假单胞菌F0096发酵液加入孔中，28℃培养36h，使用游标卡尺测量抑菌圈的直径。
如附图5所示，加入新型假单胞菌F0096后，青枯病病原菌茄科劳尔氏菌GMI 1000在孔的周围形成了清晰的透明圈，其直径分别为24.36、23.27和24.08mm，平均值为23.90mm。结果表明：新型假单胞菌F0096对青枯病病原菌茄科劳尔氏菌GMI 1000的生长具有显著得抑制作用。
实施例7：新型假单胞菌F0096对番茄溃疡病病原菌的抑制作用鉴定
采用双层平板琼脂扩散法测定新型假单胞菌F0096对番茄溃疡病病原菌的抑制作用。番茄溃疡病病原菌密执安棒状杆菌GDMCC 1.858和新型假单胞菌F0096接种至NB液体培养基进行活化，培养24h后分别收集发酵液。制备底层NA培养基(琼脂粉含量1.6％)，培养基厚度适中。在底层NA培养基上放置牛津杯，每个平板3个。取1mL的GDMCC 1.858发酵液加入300mL的NA培养基(琼脂粉含量1％)，GDMCC 1.858的终浓度为106～107cfu/mL，凝固后取出牛津杯，即为上层培养基。取30μL新型假单胞菌F0096发酵液加入孔中，28℃培养36h，使用游标卡尺测量抑菌圈的直径。
如附图6所示，加入新型假单胞菌F0096后，番茄溃疡病病原菌密执安棒状杆菌GDMCC1.858在孔的周围形成了清晰的透明圈，其直径分别为20.42、17.89和19.13mm，平均值为19.14mm。结果表明：新型假单胞菌F0096对番茄溃疡病病原菌密执安棒状杆菌GDMCC1.858的生长具有显著得抑制作用。
实施例8：新型假单胞菌F0096对果树溃疡病病原菌的抑制作用鉴定
采用双层平板琼脂扩散法测定新型假单胞菌F0096对果树溃疡病病原菌的抑制作用。果树溃疡病病原菌丁香假单胞菌GDMCC 1.330和新型假单胞菌F0096接种至NB液体培养基进行活化，培养24h后分别收集发酵液。制备底层NA培养基(琼脂粉含量1.6％)，培养基厚度适中。在底层NA培养基上放置牛津杯，每个平板3个。取1mL的GDMCC 1.330发酵液加入300mL的NA培养基(琼脂粉含量1％)，GDMCC 1.330的终浓度为106～107cfu/mL，凝固后取出牛津杯，即为上层培养基。取30μL新型假单胞菌F0096发酵液加入孔中，28℃培养36h，使用游标卡尺测量抑菌圈的直径。
如附图7所示，加入新型假单胞菌F0096后，果树溃疡病病原菌丁香假单胞菌GDMCC1.330在孔的周围形成了清晰的透明圈，其直径分别为15.03、15.55和15.64mm，平均值为15.41mm。结果表明：新型假单胞菌F0096对果树溃疡病病原菌丁香假单胞菌GDMCC1.330的生长具有显著得抑制作用。
实施例9：新型假单胞菌F0096产铁载体鉴定
将新型假单胞菌F0096接种于NB液体培养基，30℃，200rpm培养36h，吸取1mL发酵液于1.5mL离心管，12000rpm离心2min。吸取100μL上清液加到96孔板，同时加入100μL的CAS检测液，置于28℃培养箱孵育1h。利用酶标仪测定630nm的吸光度，记为ODA。对于空白对照，加入100μL NB液体培养基，同时加入100μL CAS检测液，相同条件孵育后测定其630nm的吸光度，记为ODB。通过ODA与ODB的比值判断新型假单胞菌F0096产铁载体能力，比值越小，产铁载体能力越强。ODA与ODB的比值大于1，表明菌株不能产生铁载体；若比值小于1，表明菌株能够产生铁载体。新型假单胞菌F0096的ODA与ODB的比值为0.91353，表明它能够产生铁载体。
以上结果表明，新型假单胞菌(Pseudomonas sp.)F0096是假单胞菌属的一个潜在新种，具有显著抑制柑橘溃疡病病原菌Xcc、青枯病病原菌茄科劳尔氏菌GMI 1000，番茄溃疡病病原菌密执安棒状杆菌GDMCC 1.858和果树溃疡病病原菌丁香假单胞菌GDMCC 1.330等生长的能力，同时发酵性能优异，是一株广谱高效的生防功能菌株，能够通过直接喷施，用于柑橘溃疡病、青枯病、番茄溃疡病和果树溃疡病的防治，或者用于微生物肥料、农药，微生物菌剂等的生产，进而应用于上述作物病害的防治。新型假单胞菌(Pseudomonas sp.)F0096能够产生铁载体，因此在促进作物铁吸收方面具有很大的应用潜力。
SEQ ID NO.1
TGAAGAGTTT GATCATGGCT CAGATTGAAC GCTGGCGGCA GGCCTAACAC ATGCAAGTCG 60
AGCGGATGAG AGGAGCTTGC TTCTCGATTC AGCGGCGGAC GGGTGAGTAA TGCCTAGGAA 120
TCTGCCTGGT AGTGGGGGAC AACGTTTCGA AAGGAACGCT AATACCGCAT ACGTCCTACG 180
GGAGAAAGCA GGGGACCTTC GGGCCTTGCG CTATCAGATG AGCCTAGGTC GGATTAGCTA 240
GTTGGTGAGG TAATGGCTCA CCAAGGCGAC GATCCGTAAC TGGTCTGAGA GGATGATCAG 300
TCACACTGGA ACTGAGACAC GGTCCAGACT CCTACGGGAG GCAGCAGTGG GGAATATTGG 360
ACAATGGGCG AAAGCCTGAT CCAGCCATGC CGCGTGTGTG AAGAAGGTCT TCGGATTGTA 420
AAGCACTTTA AGTTGGGAGG AAGGGTTGTA GATTAATACT CTGCAATTTT GACGTTACCG 480
ACAGAATAAG CACCGGCTAA CTCTGTGCCA GCAGCCGCGG TAATACAGAG GGTGCAAGCG 540
TTAATCGGAA TTACTGGGCG TAAAGCGCGC GTAGGTGGTT TGTTAAGTTG GATGTGAAAG 600
CCCCGGGCTC AACCTGGGAA CTGCATCCAA AACTGGCAAG CTAGAGTACG GTAGAGGGTG 660
GTGGAATTTC CTGTGTAGCG GTGAAATGCG TAGATATAGG AAGGAACACC AGTGGCGAAG 720
GCGACCACCT GGACTGATAC TGACACTGAG GTGCGAAAGC GTGGGGAGCA AACAGGATTA 780
GATACCCTGG TAGTCCACGC CGTAAACGAT GTCAACTAGC CGTTGGAATC CTTGAGATTT 840
TAGTGGCGCA GCTAACGCAT TAAGTTGACC GCCTGGGGAG TACGGCCGCA AGGTTAAAAC 900
TCAAATGAAT TGACGGGGGC CCGCACAAGC GGTGGAGCAT GTGGTTTAAT TCGAAGCAAC 960
GCGAAGAACC TTACCAGGCC TTGACATGCA GAGAACTTTC CAGAGATGGA TTGGTGCCTT 1020
CGGGAACTCT GACACAGGTG CTGCATGGCT GTCGTCAGCT CGTGTCGTGA GATGTTGGGT 1080
TAAGTCCCGT AACGAGCGCA ACCCTTGTCC TTAGTTACCA GCACGTCATG GTGGGCACTC 1140
TAAGGAGACT GCCGGTGACA AACCGGAGGA AGGTGGGGAT GACGTCAAGT CATCATGGCC 1200
CTTACGGCCT GGGCTACACA CGTGCTACAA TGGTCGGTAC AGAGGGTTGC CAAGCCGCGA 1260
GGTGGAGCTA ATCTCACAAA ACCGATCGTA GTCCGGATCG CAGTCTGCAA CTCGACTGCG 1320
TGAAGTCGGA ATCGCTAGTA ATCGCGAATC AGAATGTCGC GGTGAATACG TTCCCGGGCC 1380
TTGTACACAC CGCCCGTCAC ACCATGGGAG TGGGTTGCAC CAGAAGTAGC TAGTCTAACC 1440
TTCGGGGGGA CGGTTACCAC GGTGTGATTC ATGACTGGGG TGAAGTCGTA ACAAGGTAGC 1500
CGTAGGGGAA CCTGCGGCTG GATCACCTCC TT 1532
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.假单胞菌（Pseudomonas sp.）F0096，保藏编号为：GDMCC No: 63027。
2.权利要求1所述的假单胞菌F0096的发酵液在制备防治柑橘溃疡病、青枯病、番茄溃疡病和果树溃疡病的药物中的应用。
3.权利要求1所述的假单胞菌F0096在制备促进作物铁吸收的微生物菌剂或肥料添加剂中的应用。
4.一种微生物制剂，其特征在于，含有权利要求1所述的假单胞菌F0096的发酵液作为活性成分。
5.根据权利要求4所述的微生物制剂，其特征在于，所述的微生物制剂是用于防治青枯病的微生物制剂。
6.根据权利要求4所述的微生物制剂，其特征在于，所述的微生物制剂是用于防治番茄溃疡病的微生物制剂。
7.根据权利要求4所述的微生物制剂，其特征在于，所述的微生物制剂是用于防治果树溃疡病的微生物制剂。
8.一种用于促进作物铁吸收的微生物活菌制剂，其特征在于，含有权利要求1所述的假单胞菌F0096作为活性成分。
9.一种抑制柑橘溃疡病病原菌、青枯病病原菌茄科劳尔氏菌、番茄溃疡病病原菌密执安棒状杆菌和果树溃疡病病原菌丁香假单胞菌的活性物质，其特征在于，该活性物质为权利要求1所述的假单胞菌F0096的发酵液。
10.一种防治柑橘溃疡病、青枯病、番茄溃疡病和果树溃疡病的方法，其特征在于，是将权利要求1所述的假单胞菌F0096的发酵液喷洒至待防治区域。
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