CN115927550A - 一种全自动核酸样品检测前处理方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于核酸检测技术领域，尤其涉及一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：准备样品和试剂，样品依次经试剂加载及配置暂存步骤、试剂传递防污染步骤、分杯步骤、核酸提取步骤和配液步骤，再封膜离心后送检；上述步骤在由不同机械模块隔断分开又连接成一体而形成的相对封闭的空间中自动完成。本发明中检测前处理智能自动一体化，使核酸提取、纯化、扩增检测和保存等步骤整合成一体且自动化进行，检测快、高效、安全和准确，避免了交叉污染或核酸污染，节约了大量人力，检测成本低。

Description

一种全自动核酸样品检测前处理方法

技术领域

本发明属于核酸检测技术领域，尤其涉及一种全自动核酸样品检测前处理方法。

背景技术

核酸检测的物质是病毒的核酸。核酸检测是查找患者的呼吸道标本、血液或粪便中是否存在外来入侵的病毒的核酸，来确定是否被新冠病毒感染。因此一旦检测为核酸“阳性”，即可证明患者体内有病毒存在。

核酸检测中容易出现假阳性与假阴性的技术问题，假阳性是指患者本来没感染新冠病毒，但核酸检测出现阳性结果的情况，由于实验室检测过程中标本间的交叉污染或实验室核酸污染造成。假阴性是指从患者的临床症状、肺部影像学结果甚至流行病学史都支持为新冠肺炎，但患者病毒核酸检测结果为“阴性”，检测结果与临床不符。实验室污染是所有新冠人最怕的“敌人”。持续作业的不仅仅是人员，实验室更是24小时不间断作业，尤其是在人员、实验室高强度作业后，人员操作失误概率增高，实验室污染风险逐步增高。实验室人员谈“气溶胶”色变，污染容易，去污染很难。

一般检测前处理流程包括样本的采集、保存、转运，样本核酸的提取和检测等步骤。具体的在获得检测样本之后，需要进行分杯分样处理、核酸提取、扩增板分液分样等操作再进行最后的检测。但目前新冠核酸处理过程中大部分检测步骤及结构是分开操作，比如样本的采集后进行简单保存后，统一集中送检，检测机构收到大量样品后进行提取和检测。送检过程中容易被污染，且检测时间长。因此整个核酸检测前处理过程中需要检测人员实际接触操作，感染风险较大，对检测人员的防护等级要求较高，处理效率较低。从样本信息录入、试剂配制、样本前处理、提取、转板、关盖、离心到上机至少需要15-20个步骤，消耗大量的人力。

检测过程中，还存在检测提取和检测为人工或半人工操作，样品量大，从而工作量大，过程繁锁、检测强度繁重等技术问题。

实验室自动化程度低，虽然实验室采购了大量的核酸提取仪、扩增仪，但是并没有提高实验室自动化水平。然而现在市场上自动化产品层出不穷，实验室真正需要什么，什么样的自动化仪器是可以解决根本问题，“选什么”“怎么选”成了难题。

发明内容

为了解决以上技术问题，本发明提供一种全自动核酸样品检测前处理方法，智能自动一体化，核酸提取、纯化、扩增检测和保存等步骤整合成一体且自动化进行，检测快、高效、安全和准确，避免了交叉污染或核酸污染，节约了大量人力，检测成本低。

解决以上技术问题的本发明中的一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：准备样品和试剂，样品依次经试剂加载及配置暂存步骤、试剂传递防污染步骤、分杯步骤、核酸提取步骤和配液步骤，再封膜离心后送检；上述步骤在由不同机械模块隔断分开又连接成一体而形成的相对封闭的空间中自动完成。

本发明中操作步骤自动完成，即每个步骤对应一个机械模块进行操作完成，机械模块为由不同机械设备连接构成，各个模块统一由独立控制主机进行控制，通过智能化软件发出指令完成，实现机械智能自动化。各步骤中试剂与样本的移动，通过机械臂的传递来完成。步骤对应的机械模块之间有单向互锁传递窗，每个步骤还配置紫外消毒灯来进行杀菌和消毒。

本发明中试剂暂存与配置步骤起试剂储存、混匀、分装和PCR体系建立作用，试剂传递防污染步骤起试剂传递及避免污染作用，因为试剂区不能直接与样本相连，需要一个缓冲区避免污染。分杯步骤起样本提取前处理作用，对原始采样管进行扫码、开盖、移液和关盖。核酸提取步骤为样本核酸提取，封膜离心步骤中进行样品封存。

所述试剂加载及配置步骤中暂存控温范围为-30℃ ~100℃，升温从20℃升至100℃的时间≤15min，试剂冷藏保存。

所述试剂冷藏保存为金属浴，金属浴温度为4℃。

准备样品和试剂，其中试剂为核酸提取试剂和扩增试剂。

所述试剂加载及配置步骤中中制冷时间：从100降到25℃所需时间≤ 30min；从室温降到-30℃≤ 30min。环境温度为26℃以下时检测。

试剂暂存与配置步骤中用料盘来储存常温放置的试剂，一次性可储存1920人份试剂或更多；试剂冷藏保存容器，用于低温保存试剂的4℃恒温保存。

试剂自动分液到96孔板和八排管中，通过机械臂转移到分杯***。自动识别采样管上的条形码并上传至医院信息***，如遇条码识别失败则自动启用AI视觉识别功能。

所述分杯步骤中分杯扫描过程中采用转圈扫码方式，每转30时停顿一下，再进行下一个步骤的动作。

所述停顿时间为50毫秒，可节约扫码时间。

所述离心采用自动离心机，最大转速为3000r/min，最大相对离心力为1970g。

所述相对封闭的空间的温度为10°C～30°C，相对湿度≤80%，无冷凝和腐蚀性气体，且通风良好，这个空间中各个模块水平放置。

所述封膜步骤中，膜的大小为pcr板的大小，贴合度更好，实现自动化贴封膜，不需要人工操作。

封膜用材料为PP。

所述封膜离心步骤中核酸分检后进行再次保存，可溯源追查，方便复查。pcr板封膜离心后可以直接上机，核酸封膜后放置冰箱内保存。

所述所述相对封闭的空间中压力为负压，各步骤在负压环境中运转。

所述负压为梯度负压，其中试剂暂存与配置步骤的压力值为0PA，分杯步骤和核酸提取步骤的压力值为-10PA。

负压环境中运转，自带负压及HEPA，所有吸入及排出气体均经过高效过滤，大大降低对污染及对实验结果造成不利影响，也能对实验室工作人员形成良好的保护。实现减少检测人员与样本接触，全面助力实验室自动化升级改造，样本从采样管到 96 孔板的转移、试剂配制，到样本分杯、核酸提取、核酸转板、pcr体系封膜离心及与医院信息***自动连接与医院信息***自动连接。

本发明中的全自动样品处理方法，针对试剂分装、样品分杯处理、核酸提取为一体研发的全自动样品处理主法，配备了独立控制主机，通过智能化软件完成试剂分装、提取试剂向后转移、样品分杯处理、核酸提取、体系构建和封膜离心操作等，无需人工干预可高效、安全、准确地实现样品处理。每个步骤对应一个模块，多个模块一体化设计，结构紧凑美观，具有集成桌面化的特点，不需要复杂的PCR实验室，核酸提取及扩增分析检测全流程可直接在该装置***内进行。

本发明中处理后的模板可进行RT-PCR上机，各步骤各区可以以一次性装载20个96孔PCR版、20*96个核酸提取深孔板、20个磁棒套板和配套的吸头，并与移液工作站、分杯***、核酸提取仪、机械臂匹配实现对PCR板、深孔板、磁棒套等实现自动装载。

本发明全自动、高效高通量、安全防污染的实验需求，为打造高精化、简便化、自动化和***化实验室。本发明中方法中处理样本处理通量≥4000管/天，或样本处理通量为≥8000管/天。节约了大量人力，检测成本低。

附图说明

图1为本发明中***检测流程框架图

图2为本发明中***正面结构示意图

图3为本发明中***俯视结构示意图

其中，图中标识为：

1.相对封闭的空间，2.试剂暂存与配置模块，3.试剂传递防污染模块，4.分杯模块，5.核酸提取模块，6.封膜离心模块，7.显示屏，8.滑轮，9.可视窗，10.柜门，11.料盘，12.试剂传递步骤区，13.机械臂，14.预分装试剂暂存区，15.分杯处理区，16.废料架，17.封模离心区，18.Tips头加载区，19.核酸提取区

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明中做进一步的阐述：

实施例1

一种全自动核酸样品检测前处理方法，准备样品和试剂，样品再依次经试剂加载及配置暂存步骤、试剂传递防污染步骤、分杯步骤、核酸提取步骤和配液步骤，然后封膜离心后送检；上述步骤在由不同机械模块隔断分开又连接成一体而形成的相对封闭的空间中自动完成。

操作步骤自动完成，即每个步骤对应一个机械模块进行操作完成，机械模块为由不同机械设备连接构成，各个模块（每个步骤）统一由独立控制主机进行控制，通过智能化软件发出指令完成，实现机械智能自动化。本发明中机械模块有试剂暂存与配置模块、试剂传递防污染模块、分杯模块、核酸提取模块和封膜离心模块。

各步骤中试剂与样本的移动，通过机械臂的传递来完成。两步骤之间有单向互锁传递窗，每个步骤都配置紫外消毒灯来杀菌和消毒，无需人工干预可高效、安全、准确地实现样品处理。

各步骤为负压环境中运转，压力值为梯度负压，试剂暂存与配置步骤的压力值为0PA、分杯步骤和核酸提取步骤的压力值为-10PA。

试剂加载及配置步骤中暂存控温范围为 -30℃ ~100℃，升温从20℃升至100℃的时间≤15min，冷藏保存为金属浴，金属浴温度为4℃。制冷时间：从100降到25℃所需时间≤30min；从室温降到-30℃≤ 30min。( 环境温度为26℃以下时检测）。

此步骤中用料盘来储存常温放置的试剂，一次性可储存1920人份试剂或更多；试剂冷藏保存容器，用于低温保存试剂的4℃恒温保存。准备样品和试剂，其中试剂为核酸提取试剂和扩增试剂，为常规试剂。

试剂自动分液到96孔板和八排管中，通过机械臂转移到分杯***。自动识别采样管上的条形码并上传至医院信息***，如遇识别失败的条码自动启用AI视觉识别功能。

分杯步骤中分杯扫描过程中采用转圈扫码方式，每转30时停顿下，再进行下一步骤的动作。

离心采用自动离心机，最大转速为3000r/min，最大相对离心力为1970g。温度为10°C～30°C，相对湿度≤80%，无冷凝，无腐蚀性气体且通风良好的室内，水平放置。

每个步骤中操作分区明确，机构化设计，传递窗单向传递，梯度负压形成一个P2+微型实验室。试剂准备区（试剂暂存与配置步骤）为绝对洁净区，无核酸浓度，是正压；样本制备区（分杯步骤）为污染区，低核酸浓度区，是-10PA，确保样本制备区的空气不会流向试剂准备区。所有操作均在负压装运机柜中，即整个流程在安全的P2+实验室中进行，符合生物安全规定，安全无污染。

各步骤具体如下：

（1）试剂加载及配置暂存步骤有1个试剂料盘，主要用于储存常温放置的试剂；1个试剂冷藏保存部位，用于低温保存试剂的4℃恒温保存；1个机械手，机械手上有夹爪及气动泵，用于预混试剂开关盖及向96孔板分装；料盘和机械手并列设制在平台上，机械手设有机械臂、夹爪和气动泵，机械臂垂直设在平台上，夹爪设在机械臂末端，气动泵与机械臂后端连接，驱动机械臂按设定方式移动；冷藏保存容器设在机械臂下方的平台上。结构相互之间通过线路连接和网络通讯无线连接。其中2个四轴机械臂，用于预装载试剂及分装完成试剂的转移。

试剂配置区分为PCR板、提取试剂1深孔板、磁珠溶液深孔板、提取试剂2深孔板、洗脱液深孔板准备料盘，共12列。初始状态时同一层编号如图，层的编号从最下方一层开始，合计10层，编号为1-10。

磁珠溶液深孔板（含磁棒套）：放置在1-4列，共计40块。PCR板：无裙边96孔PCR板，PCR板放置在专用PCR板载具中，然后放置5-6列，条码朝向转盘轴心方向，共计20块。提取试剂1深孔板：放置在7-8列，条码朝向转盘轴心方向，共计20块。提取试剂2深孔板：放置在9-10列，共计20块。洗脱液深孔板：放置在11-12列，共计20块。

分装试剂准备在预分装试剂暂存区完成：将金属浴温度设为4℃，将各装有蛋白酶K和内标混合液的4支10ml冻存管（关盖状态）放在金属浴B列，将各装有扩增反应液和酶混合液的4支10ml冻存管（关盖状态）放在金属浴A列，TIP头准备：将两板1000微升规格TIP头放置在如图位置。

***得到中控信号后，1）机械手从料盘上取1块提取试剂1深孔板扫码后放到加液位；

2）三轴模组从B列取蛋白酶K和内标混合液的10ml冻存管（夹管身）放到夹紧位A，夹紧后开盖。3）三轴模组带动移液枪装一个TIP头；4）三轴模组带动移液枪用一吸多吐的方式将蛋白酶K和内标的混合液（每个样本约16微升）加到提取试剂1深孔板对应位置中（与分杯采样管架中样本的排布对应）。5）三轴模组带动移液枪褪去TIP头；试剂配置侧的隔离门自动开启，机械手将提取试剂1深孔板扫码后放到传递窗中转位；6）三轴模组将蛋白酶K和内标的混合液冻存管关盖后放回原位（夹管身）；机械手从料盘上取1块PCR板（含PCR板载具）扫码后放到加液位；试剂配置侧的隔离门自动关闭；7）机械手依次从旋转料盘上取磁珠深孔板，提取试剂2深孔板和洗脱液深孔板放到传递窗中转位上；8）模仿2-4步的动作，将扩增反应液和酶混合液（每个样本10微升）加到PCR板中（与分杯采样管架中样本的排布对应）；9）三轴模组带动移液枪褪去TIP头；试剂配置侧的隔离门自动开启，机械手将PCR板（含PCR板载具）放到传递窗中转位；10）三轴模组将扩增反应液和酶的混合液冻存管关盖后放回原位（夹管身）；试剂配置侧的隔离门自动关闭；11）旋转料盘和三轴模组复位，等待下一个动作指令。

故障识别和处理：三轴模组上开关盖模块使用EFG20脉冲型夹爪，在搬运冻存管和开关盖过程中如有位置异常，停机报警等待人工处理；移液分液过程中如有液路堵塞或TIP头插拔故障等异常，停机报警等待人工处理；搬运机械手末端使用EFG20脉冲型夹爪，并在水平方向配有压力传感器，如在搬运孔板或PCR板的过程中有位置异常，停机报警等待人工处理；如果在搬运过程中有压力异常，重做两次后若异常未能消除，停机报警等待人工处理。

（2）试剂传递防污染步骤中包括一个滑轨和一个机械臂，滑轨和机械臂并列设制在平台上，机械臂末端设有夹爪，用以转移试剂暂存与配置模块通过滑轨过来的试剂，滑轨平铺在平台上，机械臂垂直设在平台上。

试剂传递步骤区中分别放置一块提取试剂1深孔板和备用PCR板（放置在PCR板载具上），条码全部朝向分杯区。

（3）分杯步骤中有两个样品装载盘位，共计可装载192样品；1个tips头装载***，包括tips头架传送进装置，顶升装置，tips头架传送出装置；移液***：包含1台四轴机械臂和气动泵，气动泵用于从样品试管中取样，并转移至深孔板中；开关盖***：包含1台四轴机械臂，机械臂末端安装有夹爪，用于开关盖，此外还包含2台夹爪，用于临时放置试管以及配合开关盖动作；废TIP头收纳盒；

具体的设有样品装载盘、tips头装载装置、移液装置和开关盖装置，各个结构并列分布在平台上，相互通过上位机控制。tips头装载装置设有tips头架传送进装置、顶升装置和tips头架传送出装置，同样通过上位机控制连接，通过tips头架传送进装置将tip头载架装置顶升至固定位置，放置样本装载盘后开关盖装置将样本放入抱紧夹爪内，移液装置装载tip后移液。样品装载盘位，可装载96样品。

开关盖装置设有四轴机械臂，机械臂末端设有3个夹爪，1个用于开关盖；另2个夹爪，用于临时放置试管以及配合开关盖动作，3个夹爪并列设于机械臂末端。机械臂的1个夹爪负责抓取采样管，采样管放在另个2个夹爪上从而把采样管底部夹紧，机械臂旋转开盖。

待分装试剂阵列摆放在机械臂下方的操作平台上，分为操作平台阵列和低温处理阵列。待分装试剂经由试剂传递缓冲机构传递至样品分杯处理机构，操作平台阵列为分杯处理机构当下分装处理的阵列，低温处理阵列为试剂传递缓冲机构传递至样品分杯处理机构时的等待处理阵列区域。

此步骤的分杯处理区中，将4板1000微升tecan规格TIP头放置在料盘上，共计5个料盘，20板TIP头。将5个装满TIP头的料盘放置在下机架中的上层传送线上，并确保第1个料盘已经顶升到位。

（4）核酸提取步骤有设有中元汇吉 EXM6000核酸提取仪1台，主要用于核酸提取；试剂放置及移动***，有1台可横移四轴机械臂，1台上面有夹爪，方便进行试剂放置及提取试剂后试剂丢弃；具体的核酸提取机构设有核酸提取仪和试剂放置及移动装置，并列设在平台上，相互通过上位机连接；试剂放置及移动装置设有机械臂和滑轨，机械臂末端设有夹爪，用以将通过滑轨从样品分杯处理机构转移过来的试剂放于核酸提取仪进行核酸提取，机械臂垂直设在平台上，滑轨平铺设在平台上，用以转移从样品分杯处理机构过来的试剂。核酸提取仪用于核酸提取，试剂放置及移动装置放置和移动试剂，机械臂方便进行试剂放置及提取试剂后试剂丢弃。

分杯步骤和核酸提取区的核酸提取步骤操作如下：

1）人工放采样管到设备中，并按对应位置输入样本数量；2）开关盖机械手取一个采样管扫码后放到夹紧位开盖；3）横移模组从传递窗接提取试剂1深孔板后将其传递到最右侧；移液机械手装一个TIP头；4）核酸提取站机械手将提取试剂1深孔板扫码后搬运到移液位；5）移液机械手将样本从采样管转移到孔板中；6）移液机械手换新的TIP头；开关盖机械手将采样管关盖后放回原位；7）依次完成其他样本移液；搬运机械手依次将横移模组上的磁珠深孔板，提取试剂2深孔板和洗脱液深孔板搬运放到核酸提取仪2,3,5号位； 8）所有样本移液完成后，核酸提取站搬运机械手将提取试剂1深孔板放到核酸提取仪1号位；

9）核酸提取站搬运机械手将横移模组上PCR板（含PCR板载具）搬运到离心封膜设备的横移模组上；10）核酸提取完成后，搬运机械手将提取试剂1深孔板搬运到离心封膜设备的横移模组上；11）搬运机械手依次将磁珠深孔板，提取试剂2深孔板和洗脱液深孔板放到板栈1,2,3区，或直接放在废物收集箱中。

其中故障识别和处理：扫码失败后，机械手将采用管放置到旋转扫描位视觉解码，若再解码失败将采样管放置到不良位；开关盖，移液模块和机械手搬运模块同上。

（4）封模离心区和离心封膜步骤有1个tips头装载***，包括tips头架传送进装置、顶升装置、和tips头架传送出装置；移液***包含1台四轴机械臂和气动泵，气动泵用于从样品试管中取样，并转移至深孔板中；1个四轴机械臂，主要用于预装载试剂及分装完成试剂的转移：1台封膜仪主要用于构建好的模板进行最后封装；1台蜀科 DD-4离心机。

具体的，封膜离心模块和Tips头加载区有tips头装载装置、移液装置、封膜仪和离心机，各个结构并列设在平台上，相互通过上位机控制连接；将核酸、建立好的PCR体系通过机械臂放置相应的位置，移液装置装载tip后将核酸转板至PCR体制内，然后将转板完成的PCR体系通过机械臂放入封膜仪中，封膜完成后放入离心机中离心，然后放置PCR板暂存位；转板完成的核酸通过机械臂放入封膜仪中封膜，放置核酸板暂存位。

 tips头装载装置设有tips头架传送进装置、顶升装置和tips头架传送出装置，同样通过上位机控制；传入时，tips头架传送进装置将tips头装载装置通过运输带传输到顶升装置上，顶升装置上升到规定高度；传出时，顶升装置下降到tips头架传送出装置起点，电光感应到后通过运输带传出。

同上，tips头装载装置设有tips头架传送进装置、顶升装置和tips头架传送出装置，同样通过上位机控制。传入时，tips头架传送进装置将tips头装载装置通过运输带传输到顶升装置上，顶升装置上升到规定高度。传出时，顶升装置下降到tips头架传送出装置起点，电光感应到后通过运输带传出。

移液装置设有机械臂和气动泵，机械臂后端与气动泵连接，机械臂前端设有夹爪，机械臂垂直设在平台上。tips头装载装置用于从样品试管中取样，并转移至深孔板中；机械臂用于预装载试剂及分装完成试剂的转移，封膜仪用于构建好的模板进行最后封装，离心机用于离心试剂。

离心封膜步骤中将20板200微升Tecan规格TIP头按照设置U型卡槽的方式准备，将卷状膜安装的封膜仪上。

封膜离心模块还设有模板配制装置，模板配制装置与其它结构并列设在平台上，模板配制为提取后的核酸转入之前建立好的PCR体系。

此步骤操作如下：

1）搬运机械手将PCR板（含PCR板载具）从横移模组搬运到PCR板位；2）搬运机械手将深孔板从横移模组搬运到深孔板位；3）移液机械将所有样本依次从深孔板转移10微升到PCR板对应位置，每转移一个样本换依次TIP头；4）搬运机械手将工装放到封膜仪上；

5）搬运机械手将PCR板（含PCR板载具）从PCR板位搬运到封膜仪上的工装上；6）PCR板封膜后，搬运机械手将PCR板（含PCR板载具）放到离心机中；7）搬运机械手将工装从封膜仪上取下；8）搬运机械手将深孔板搬运到封膜仪上封膜；9）搬运机械手将封完膜的深孔板搬运到深孔板收集位；10）重复1-9，将第2块PCR板（含PCR板载具）放到离心机中；

11）离心2分钟后，搬运机械手将PCR板（含PCR板载具）从离心机搬运到PCR板收集位。

故障识别和处理：开关盖，移液模块和机械手搬运同上。

以上步骤中各个设备都是通过线路连接和网络通讯无线连接，最终通过上位机控制下达指令。此方法中还设有显示屏，设在外机架正面两侧，用于扫码功能。报刊8K线阵相机，主要用于样品管条码识别（ProNAT4000）。

本发明中开门自动定位、全自动开关门和电磁门锁。机架上整机均有观察窗，样品加载为上掀门，可以方便观察设备内部工作状态。电气部分集成在下机架下部，包括工控一体机，各类电气原件，方便用户操作，并且不额外占用空间，使设备更加整洁美观。电气设制为常规设制。自动门以及开关等结构为常规设制。

试验一

操作步骤如实施例中内容，使用96个无生物安全危害的不含临床样品的采样管，运行三轮实验，转移量分别为1ul、200ul、1000ul，转移至空白深孔板中，检测深孔板中保存液的体积（考虑移液消耗）。每批实验中随机加入3-4个空白采样管及无生物安全危害的充满咽拭子的采样管，设备应能监测TIP头中有无液体及气路堵塞，气路堵塞应报警或再次吸液。

使用空白的96空白和去离子水，将去离子水分装到96孔板中，计算其时间，结果符合移液工作站处理时间约9分钟/板（每板96个样品）。

使用96个无生物安全危害的不含临床样品的采样管，所有采样管贴上测试条码运行一轮实验，计算其时间，ProNAT4000样品处理时间约24分钟/板；ProNAT8000样品处理时间约16分钟/板。

提取仪运行一轮，计算其时间，样品提取时间约12分钟/板。

使用两个96孔板，A版为每孔装有少量去离子水，B版为空板，完成A版到B版的转移，计算其时间，样品转板时间约10分钟/板。

连续运行24小时，其处理样本的通量ProNAT4000处理样本≥4000管/天；ProNAT8000处理样本≥8000管/天。

机架上整机均有观察窗，样品加载为上掀门，可以方便观察设备内部工作状态。

电气部分集成在下机架下部，包括工控一体机，各类电气原件，方便用户操作，并且不额外占用空间，使设备更加整洁美观。

上述实施/试验例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (10)

1.一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：准备样品和试剂，样品依次经试剂加载及配置暂存步骤、试剂传递防污染步骤、分杯步骤、核酸提取步骤和配液步骤，再封膜离心后送检；上述步骤在由不同机械模块隔断分开又连接成一体而形成的相对封闭的空间中自动完成。

2.根据权利要求1所述的一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：所述试剂加载及配置步骤中暂存控温范围为 -30℃ ~100℃，升温从20℃升至100℃的时间≤15min，试剂冷藏保存。

3.根据权利要求2所述的一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：所述试剂冷藏保存为金属浴，金属浴温度为4℃。

4.根据权利要求1或2所述的一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：所述试剂加载及配置暂存步骤中制冷时间为从100℃降到25℃所需时间≤ 30min；从室温降到-30℃≤ 30min。

5.根据权利要求1所述的一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：所述分杯步骤中分杯扫描过程中采用转圈扫码方式，每转30度时停顿一下，再进行下一个步骤的动作。

6.根据权利要求5所述的一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：所述停顿时间为50毫秒。

7.根据权利要求1所述的一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：所述离心采用自动离心机，最大转速为3000r/min，最大相对离心力为1970g。

8.根据权利要求1所述的一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：所述相对封闭的空间温度为10°C～30°C，相对湿度≤80%，无冷凝和腐蚀性气体，通风好。

9.根据权利要求1所述的一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：所述相对封闭的空间中压力为负压，各步骤在负压环境中运转。

10.根据权利要求9所述的一种全自动核酸样品检测前处理方法，其特征在于：所述负压为梯度负压，其中试剂暂存与配置步骤的压力值为0PA，分杯步骤和核酸提取步骤的压力值为-10PA。

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