CN115886017B - 一种鼠虫消杀组合物以及消杀鼠虫的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种鼠虫消杀组合物以及消杀鼠虫的方法，该鼠虫消杀组合物包含不育剂和伊维菌素；所述伊维菌素的量以大于或等于0.0001重量％且小于0.1重量％的含量存在，基于鼠虫消杀组合物的总重量计。本发明消杀鼠虫的方法包括将鼠虫消杀组合物喂食鼠类。该鼠虫消杀组合物具有较好的适口性，且能够同时控制鼠类种群密度及体表寄生虫数量。
Description
技术领域
本发明涉及鼠虫害防治卫生领域，尤其涉及一种鼠虫消杀组合物以及消杀鼠虫的方法。
背景技术
鼠害是世界范围内重大的生物灾害之一。高种群密度的鼠类不仅会造成种植业和畜牧业的重大经济损失，还能传播疾病，严重威胁人类的健康安全。鼠类种群密度升高会导致鼠源性疾病流行风险增加。鼠疫是最为凶险的鼠传疾病，也是人类历史上发生的最严重的传染性疾病之一。蜱螨、蚤类是鼠疫等鼠传疾病的重要媒介生物，通过在不同个体间吸取血液传播鼠疫杆菌等病原。
控制鼠类种群密度的传统方法为采用杀鼠剂毒杀鼠类，降低种群密度。但此方法存在鼠类种群密度快速反弹、对非目标动物误伤较大以及危及动物福利等诸多问题。而且，传统杀鼠剂灭杀鼠后，会导致寄生于鼠体表的蚤类等离开鼠体，大量溢出于环境中。离开鼠体的蚤类可在环境中存活1个月之久，进而进一步转移至家畜或人类身上，威胁人类健康。因此，亟需一种能够同时控制鼠类种群密度及体表寄生虫数量的鼠虫消杀组合物。
此外，鼠虫消杀组合物的适口性与其鼠虫消杀效果密切相关，适口性较好，对鼠类的引诱力则较强，鼠类的摄食系数较高，毒杀效果较好。所以选择适口性较好的鼠虫消杀组合物对于提高鼠虫消杀效果具有重要意义。
因此，实际工作中需要一种适口性好，且能够同时控制鼠类种群密度及体表寄生虫数量的鼠虫消杀组合物。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的是提出一种鼠虫消杀组合物以及使用该鼠虫消杀组合物消杀鼠虫的方法，该鼠虫消杀组合物具有较好的适口性，且能够同时控制鼠类种群密度及体表寄生虫数量。
基于上述目的，本发明的第一个方面提供了一种鼠虫消杀组合物，其包含：不育剂和伊维菌素；所述伊维菌素的量以大于或等于0.0001重量％且小于0.1重量％的含量存在，基于鼠虫消杀组合物的总重量计。
在本说明书的上下文中，“不育剂”是指能使鼠类失去繁殖能力，以降低鼠类出生率为目标的药剂，包括使雄鼠不能产生***或不能产生健康***；使雌鼠不能产生健康卵子或阻止卵子受精或使受精卵不能在子宫着床或致胚胎死亡等的药剂。
在本发明的优选的实施方案中，所述不育剂选自左炔诺孕酮和炔雌醚中的至少一种，更为优选的是左炔诺孕酮和炔雌醚的组合。
在本发明的优选的实施方案中，所述伊维菌素的量以大于或等于0.0005重量％且小于或等于0.05重量％的含量存在，基于鼠虫消杀组合物的总重量计。
在本发明的优选的实施方案中，所述伊维菌素的量为0.01重量％，基于鼠虫消杀组合物的总重量计。
在本发明的优选的实施方案中，所述左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素的重量比为1:1:1～1:1:20。
在本发明的优选的实施方案中，所述左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素的重量比为1:1:2。
本发明的第二个方面提供了一种消杀鼠虫的方法，其包括将上述鼠虫消杀组合物喂食鼠类。
附图说明
图1显示本发明的鼠虫消杀剂饵料7日内取食量的变化，其中A为雄性大仓鼠取食量变化；B为雌性大仓鼠取食量变化；低剂量组饵料含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素；高剂量组饵料含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.1％伊维菌素；#表示低剂量组与对照组相比p<0.05；*表示高剂量组与对照组相比p<0.05。
图2为本发明的鼠虫消杀剂EP-1饵料使用7天，再正常饲养7天后雄性生殖器官变化图，其中A为显示大仓鼠睾丸及附睾形态变化的照片；B为大仓鼠睾丸重量变化；C为大仓鼠附睾重量变化；D为大仓鼠储精囊重量变化；EP-1饵料含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素；*表示与对照组相比p<0.05。
图3为本发明的鼠虫消杀剂EP-1饵料使用7天，再正常饲养7天后雌性生殖器官变化图，其中A为大仓鼠卵巢重量变化；B为大仓鼠子宫重量变化；EP-1饵料含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素；*表示与对照组相比p<0.05。
图4为本发明的鼠虫消杀剂EP-1饵料使用5天后，小鼠体表寄生蜱虫(长角血蜱(HaemaphysalisIongicornis))情况图，其中A为生存率变化；B为饱血率变化；EP-1饵料含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素；*表示与对照组相比p<0.05。
图5为本发明的鼠虫消杀剂EP-1饵料处理后，体表寄生蚤类(印鼠客蚤(Xenopsyllacheopis))生存率变化图，其中EP-1饵料含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素；*表示与对照组相比p<0.05。
图6为在北京东灵山地区投放本发明的鼠虫消杀剂EP-1饵料7天后，鼠体表蚤类平均数量对比，其中EP-1饵料含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素；*表示与对照组相比p<0.05。
具体实施方式
需要说明的是，除非另外定义，本说明书实施例使用的技术术语或者科学术语应当为所属领域的技术人员所理解的通常意义。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的药材原料、试剂材料等，如无特殊说明，均为市售购买产品。
如本说明书的背景技术部分所述，实际工作中需要一种适口性好，且且能够同时控制鼠类种群密度及体表寄生虫数量的鼠虫消杀组合物。已有研究发现，伊维菌素是一种高效广谱抗寄生虫药，对于多种寄生虫(例如螨、蜱、虱、蚤、蝇蛆等)具有良好、快速的灭杀效果，而对哺乳类和鸟类毒性较低。伊维菌素具有选择性的抑制作用，通过与无脊椎动物神经细胞与肌肉细胞中谷氨酸为阀门的氯离子通道的高亲和力结合，导致细胞膜对氯离子通透性的增加，引起神经细胞或肌肉细胞超极化，使寄生虫麻痹或死亡。因此可通过将伊维菌素添加到基饵中制成饵料来喂食鼠类，从而达到快速灭杀鼠类体表多种寄生虫的目的。
然而现有技术研究表明，将伊维菌素添加到基饵中存在适口性不佳的问题，例如现有技术文献(J.Jacob,K.Aplin,D.M.Watson,L.A.Hinds；Assessing the efficacy oforal intake of insecticides on mortality of fleas and ticks on commensalRattus species；Journal of Pest Science(2021)94:1543–1553；https://doi.org/10.1007/s10340-020-01316-5)使用谷物基的颗粒对大鼠进行了食物偏好性和灭蚤试验。在该试验中，分别使用了四种含有不同浓度的伊维菌素的颗粒(伊维菌素的用量分别为2.3mg/kg、4.0mg/kg、7.6mg/kg和29.9mg/kg饲料)来喂食大鼠。试验结果表明，饲喂伊维菌素饵料可以杀灭鼠体表的蚤类，但随着伊维菌素在颗粒中的浓度增加，颗粒的适口性明显变差，特别是在高浓度伊维菌素下，大鼠对颗粒的拒食已达显著程度(29.9mg/kg饲料时，对照组食饵量为伊维菌素组两倍以上)。并且该现有技术文献明确指出：应该避免使用高浓度的伊维菌素。但在实际应用中，伊维菌素在饵料中需要达到一定的浓度才能起到灭杀鼠类体表多种寄生虫的效果，这时候如何改善含有高浓度伊维菌素的饵料的适口性变得尤为重要。
适口性是指鼠类对鼠虫消杀组合物的喜食程度或接受程度，是衡量鼠虫消杀组合物性能的重要参数。鼠虫消杀组合物的鼠虫消杀效果与其适口性密切相关，这是因为：适口性较好，对鼠类的引诱力则较强，鼠类的摄食系数较高，毒杀效果较好；适口性较差，鼠类的摄食系数会较低，毒杀效果不佳。所以改善饵料的适口性对提高灭鼠效果具有重要意义。
本申请的发明人发现，将伊维菌素与不育剂组合使用，其饵料具有较好的适口性，能够同时控制鼠类种群密度及体表寄生虫数量。
本发明采用不育剂和伊维菌素配伍使用制成鼠虫消杀组合物，达到同时降低鼠类种群密度及体表寄生虫数量的效果。本发明的鼠虫消杀组合物含有不育剂和杀灭蜱螨、蚤类的有效成分伊维菌素，不仅可以持续降低鼠类种群密度，还能在短期杀灭蜱螨、蚤类等，可显著降低鼠疫等鼠传疾病发生风险。
本发明对伊维菌素在鼠虫消杀组合物中的合适含量进行了摸索。确定伊维菌素的量以大于或等于0.0001重量％且小于0.1重量％的含量存在，基于鼠虫消杀组合物的总重量计；优选地，伊维菌素的量以大于或等于0.0005重量％且小于或等于0.05重量％的含量存在，基于鼠虫消杀组合物的总重量计；更优选地，伊维菌素的量为0.01重量％，基于鼠虫消杀组合物的总重量计。
本发明的优选的不育剂选自左炔诺孕酮和炔雌醚中的至少一种，更为优选的是左炔诺孕酮和炔雌醚的组合。
本发明同样对上述优选方案中，左炔诺孕酮和炔雌醚在鼠虫消杀组合物中的最适含量进行了摸索，最终确定左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素的优选重量比为1:1:1～1:1:20；最优选地，左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素的重量比为1:1:2。
本发明的鼠虫消杀组合物可以进一步包含基饵，例如市售大小鼠生长饲料、禾本科作物种子、豆科类种子和麸皮类饵料等。
本发明的鼠虫消杀组合物可以用本领域的常规方法制备，例如通过将不育剂和伊维菌素添加到上述基饵中制成饵料来制备。本领域技术人员可根据需要选择相应的制备方法，也可采用本发明实施例中给出的方法进行制备。
本发明的鼠虫消杀组合物的效果主要反映在适口性、不育效果以及灭杀蜱虫和蚤类效果效果三个方面。
(1)适口性
本发明的实施例2进行了本发明的鼠虫消杀剂组合物的适口性实验。该实验中使用的饵料为：低剂量组饵料，其含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素；高剂量组饵料，其含有0.05％左炔诺孕酮、0.05％炔雌醚和0.1％伊维菌素。经过适口性实验证明，伊维菌素在饵料中的浓度为0.1％时，可导致鼠类较为严重的拒食。伊维菌素用量在饵料中的浓度为0.01％时，对饵料适口性产生影响是有限的，其中雄性的适口性在给予饵料7天后与对照无显著差异；雌性的适口性在测试所有时间段与对照无显著差异。这说明本发明将不育剂与伊维菌素组合使用时，伊维菌素的用量为0.01％及以下浓度时，饵料具有较好的适口性。
(2)不育效果
本发明的实施例3进行了本发明的鼠虫消杀剂组合物的不育效果实验。该实验中使用的饵料为：EP-1饵料，其含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素。经过不育实验证明，分别喂食雄性和雌性成年大仓鼠鼠虫消杀剂EP-1饵料，雄性成年大仓鼠的睾丸、附睾和储精囊重量相对于对照(喂食在其中未加入左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素的市售大小鼠生长饲料)均显著下降，雌性成年大仓鼠的卵巢重量相对于对照显著降低，子宫重量相对于对照显著升高，而子宫重量增加的幅度可导致雄性不育。这说明本发明将不育剂与伊维菌素组合使用可导致鼠类不育。
(3)灭杀蜱虫和蚤类效果
本发明的实施例4-5进行了本发明的鼠虫消杀剂组合物在室内对于蜱虫和蚤类的灭杀效果实验，本发明的实施例6进行了本发明的鼠虫消杀剂组合物在野外对于蚤类的灭杀效果实验。该实验中使用的饵料均为EP-1饵料，其含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素。经过室内对于蜱虫和蚤类的灭杀效果实验证明，喂食小鼠鼠虫消杀剂EP-1饵料，可导致寄生于小鼠体表的长角血蜱死亡率为100％，且未发现饱血长角血蜱个体；可导致寄生于小鼠体表的印鼠客蚤仅有5.1％生存率，远低于对照(喂食在其中未加入左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素的市售大小鼠生长饲料)的93.5％生存率。经过野外对于蚤类的灭杀效果实验证明，喂食野生鼠类鼠虫消杀剂EP-1饵料，野生鼠类体表带蚤数显著降低。这说明本发明将不育剂与伊维菌素组合使用会显著降低寄生于鼠类体表的寄生蚤类和蜱虫的死亡率、饱血率、生存率和数量。
本发明还提供了一种消杀鼠虫的方法，其包括将上述鼠虫消杀组合物喂食鼠类，用于鼠类和鼠类体表寄生虫(包括蚤(Siphonaptera)、蜱螨(Arachnoidea))的数量控制。
本发明提供了同时控制鼠类种群密度及其体表寄生虫数量的可行方法，有助于防止大规模灭鼠时体表寄生虫大量外溢引起鼠传疾病流行。
下面结合具体的实施例对本发明提供的技术方案做进一步的描述。下述实施例仅用于对本发明进行说明，并不会对本发明的保护范围进行限制。
以下实施例中使用的左炔诺孕酮和炔雌醚均购自大连美仑生物科技有限公司，伊维菌素购自浙江升华拜克生物科技有限公司，市售大小鼠生长饲料购自北京科澳协力饲料有限公司，成年大仓鼠和ICR品系雄性小鼠均由中国科学院动物研究所提供。
实施例1鼠虫消杀剂饵料的制备
本实施例的鼠虫消杀剂饵料包括低剂量组饵料和高剂量组饵料，其中低剂量组饵料：左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素的质量比为1:1:2(即相当于低剂量组饵料含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素)，每种成分的纯度均大于99％；高剂量组饵料：左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素的质量比为1:1:20(即相当于高剂量组饵料含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.1％伊维菌素)，每种成分的纯度均大于99％。分别将低剂量组的鼠虫消杀剂粉剂(左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素按照质量比1:1:2混合)和高剂量组的鼠虫消杀剂粉剂(左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素按照质量比1:1:20混合)逐渐搅拌溶解于55℃无水乙醇。将乙醇溶液以1:10(v/v)比例加入清水中搅拌，形成悬浊药液。
以市售大小鼠生长饲料为基饵，将悬浊药液逐渐滴加至饲料颗粒中，混合均匀至完全吸收，平均每500g混合物20-50ml悬浊液。混合好的饵料置于45℃烘箱中避光烘干12h，制得低剂量组饵料和高剂量组饵料。饵料可避高温、避潮湿、避光保存约1个月。
实施例2鼠虫消杀剂饵料的适口性
本实施例采用实施例1制备的低剂量组饵料和高剂量组饵料。对照饵料中未加入该鼠虫消杀剂粉剂(仅包含市售大小鼠生长饲料)，其它操作相同。实验采用体重相当的成年大仓鼠雌雄各12只，雄性平均约130-135g，雌性平均约125-130g。实验按照大仓鼠性别和高低剂量组饵料处理进行2×2分组，每组6只。所有大仓鼠个体单笼饲养。昼夜12h:12h。每只大仓鼠每日给食12g饵料，持续7天。每隔24h检查死亡率，并收集剩余饵料称重，计算24h饵料消耗。
雄性大仓鼠的高剂量组鼠虫消杀剂饵料消耗远低于对照(图1A和图1B)，对照大仓鼠日均取食约8-10g，而高剂量组仅为1-4g(图1A)。低剂量组鼠虫消杀剂饵料的取食情况则有所改善，在饵料处理的第7天，低剂量组的取食已大于5g，与对照无显著差异(图1A)，说明低剂量伊维菌素对饵料适口性产生影响是有限的。
鼠虫消杀剂饵料在雌性大仓鼠中的适口性高于雄性(图1B)。对照大仓鼠日均取食约7-9g，而高剂量组为1-6g(图1B)。低剂量组的适口性与对照相比未发现显著变化，尽管低剂量组的饵料消耗在所有时间点均低于对照(图1B)。
实施例3鼠虫消杀剂饵料的不育效果检测
本实施例采用鼠虫消杀剂EP-1饵料(含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素)进行实验，EP-1饵料的制备方法如实施例1中所示。对照饵料中未加入该鼠虫消杀剂粉剂(仅包含市售大小鼠生长饲料)，其它操作相同。实验采用体重相当的成年大仓鼠雌雄各12只，雄性平均约130-135g，雌性平均约125-130g。实验按照大仓鼠性别和不育剂处理进行2×2分组，每组6只。所有大仓鼠个体单笼饲养。昼夜12h:12h。每只大仓鼠每日给食12g饵料，持续7天。投喂后的大仓鼠正常饲养1周后，解剖观察生殖器官变化，包括睾丸重、附睾重、储精囊重、卵巢重和子宫重。
该鼠虫消杀EP-1饵料的雄性不育效果如图2所示。该鼠虫消杀剂饵料对于雄性大仓鼠生殖器官重量有明显影响(图2A)。先用饵料处理7天，再正常饲喂7天后，处理组睾丸重量显著下降，仅为对照组的约1/3重(2.7g相对于0.8g，图2B)。附睾的情况与睾丸类似，处理组的重量更是低达0.25g，远低于对照组的1g(图2C)。储精囊的变化则更加明显，由对照组的平均2g下降至处理组的0.3g(图2D)。
该鼠虫消杀剂EP-1饵料处理对于雌性大仓鼠生殖器官重量同样有显著影响。处理组大仓鼠卵巢有显著降低，幅度约为对照的1/3(图3A)。子宫重量则在处理后有显著升高，约为对照组的1.8倍(0.32g相对于0.58g，图3B)。子宫重量增加的幅度可能导致雌性不育。
实施例4鼠虫消杀剂饵料在室内对于蜱虫的灭杀效果
本实施例采用鼠虫消杀剂EP-1饵料(含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素)进行实验，EP-1饵料的制备方法如实施例1中所示。对照饵料中未加入该鼠虫消杀剂粉剂(仅包含市售大小鼠生长饲料)，其它操作相同。实验采用10周大小的ICR品系雄性小鼠，每组4只。实验用蜱虫为长角血蜱(HaemaphysalisIongicornis)。实验开始时，将小鼠固定，分别喂食对照和EP-1饵料，同时将蜱虫置于小鼠身体上，每只小鼠放置20-30只蜱虫。每24h观察蜱虫的生存率和饱血率，并移走脱落的蜱虫(无论是因为饱血还是因为死亡)，观察持续5天，计算蜱虫5天累计生存率和饱血率。
该鼠虫消杀剂EP-1饵料处理对于体表蜱类(长角血蜱(HaemaphysalisIongicornis))生存有极显著显著影响。采用EP-1饵料处理小鼠可导致寄生于体表的长角血蜱死亡，5天内死亡率为100％。对照组5天内未发现死亡长角血蜱个体(图4A)。长角血蜱的5天内饱血率也出现根本性逆转，处理组无饱血长角血蜱个体发现，对照组5天内饱血率为100％(图4B)。
实施例5鼠虫消杀剂饵料在室内对于蚤类的灭杀效果
本实施例采用鼠虫消杀剂EP-1饵料(含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素)进行实验，低剂量组的饵料制备方法如实施例1中所示。对照饵料中未加入该鼠虫消杀剂粉剂(仅包含市售大小鼠生长饲料)，其它操作相同。实验采用10周大小的ICR品系雄性小鼠，每组3只。实验用蚤类为印鼠客蚤(Xenopsyllacheopis)。小鼠首先用对照和EP-1饵料进行喂食处理。喂食至少3天后，将小鼠固定，印鼠客蚤直接置于小鼠身体上，每只小鼠约放置100只印鼠客蚤吸食血液3h。之后小心移除附着于小鼠体表的印鼠客蚤，置于洁净的15ml离心管内饲养。48h后观察印鼠客蚤的生存率并计录。
该鼠虫消杀剂EP-1饵料处理对于体表蚤类(印鼠客蚤(Xenopsyllacheopis))生存有显著影响。采用EP-1饵料喂食处理小鼠可导致寄生于体表的印鼠客蚤(小鼠用器具固定，蚤类吸血3小时)死亡。体表收集的印鼠客蚤正常饲养48h后，EP-1饵料处理组仅有5.1％生存；而对照组的平均生存率则高达93.5％(图5)。
实施例6鼠虫消杀剂饵料在野外对于蚤类的灭杀效果
本实施例采用鼠虫消杀剂EP-1饵料(含有0.005％左炔诺孕酮、0.005％炔雌醚和0.01％伊维菌素)进行实验，EP-1饵料的制备方法如实施例1中所示。对照饵料中未加入该鼠虫消杀剂粉剂(仅包含市售大小鼠生长饲料)，其它操作相同。实验样地于梨园岭-瓦窑一线的公路边。选取鼠密度较高的区域设立2公顷左右对照区和实验区，采用每隔5-6m投放10-15g EP-1饵料的网格式投药法，总计各投放约3kg对照和该鼠虫消杀剂EP-1饵料。投饵后1周，在每个区域内选取3个0.5公顷大小的样方，每个样方布下约30-35个鼠笼捕捉3天。统计捕获鼠的种类、体重和性别，并检除体表的蚤类类进行统计。
该鼠虫消杀剂EP-1饵料投放可降低野生鼠类体表带蚤数。在北京东灵山地区选择样地并一次性投放药饵，7天后检测发现，对照组平均每只鼠带蚤数远高于实验组(2.8相对于0.25，图6)，且带蚤数存在显著差异。
Claims (4)
1.一种鼠虫消杀组合物，其包含：不育剂和伊维菌素；所述伊维菌素的量以大于或等于0.01重量%且小于0.05重量%的含量存在，基于鼠虫消杀组合物的总重量计；
其中，所述不育剂为左炔诺孕酮和炔雌醚的组合，所述左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素的重量比为1:1:1~1:1:2。
2.根据权利要求1所述的鼠虫消杀组合物，其中，所述伊维菌素的量为0.01重量%，基于鼠虫消杀组合物的总重量计。
3.根据权利要求2所述的鼠虫消杀组合物，其中，所述左炔诺孕酮、炔雌醚和伊维菌素的重量比为1:1:2。
4.一种消杀鼠虫的方法，其包括将权利要求1-3中任一项所述的鼠虫消杀组合物喂食鼠类。
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