CN115850439A - 一种癌症相关的肿瘤特异转录本marco-tst及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种癌症相关的肿瘤特异转录本MARCO‑TST及其用途。本发明公开了一个MARCO新的转录本，命名为MARCO‑TST(MARCO‑Tumor Specific Transcript)。所述MARCO‑TST多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。MARCO‑TST在三阴性乳腺癌细胞中特异表达，在正常组织中不表达。MARCO‑TST有一个新的转录起始位点，MARCO‑TST编码的蛋白在N端多了一段新的序列。下调MARCO‑TST的表达可在体外和体内显著抑制肿瘤细胞的增殖和转移潜能。MARCO‑TST可以作为新的肿瘤诊断治疗的靶分子。

Description

一种癌症相关的肿瘤特异转录本MARCO-TST及其用途

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，尤其是涉及一种癌症相关的肿瘤特异转录本MARCO-TST及其用途。

背景技术

深度RNA测序已经从一个崭新的视角展现了人类转录组的特性和剪切方式的多样性和复杂性。癌症是一种具有异质性的复杂疾病，包含了遗传学和表观遗传学层面的改变，使得它形成了更复杂的转录组。因此，癌症的转录组有很大的潜能产生肿瘤特异转录本(Tumor-Specific Transcripts,TST)。肿瘤特异转录本的敲除具有非常重要的临床作用，肿瘤特异转录本的分类，例如融合转录本(fusion transcripts)对理解肿瘤的发生过程也有很重大的意义(融合转录本是肿瘤特异转录本的一种，来源于DNA的易位)。失去正常调控的转录过程和表观遗传学改变可能导致大量的肿瘤特异转录本，包括特异的mRNA和基因间的全新转录本。然而，这些特异转录本的鉴定和功能还尚未被完全阐明。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种癌症相关的肿瘤特异转录本MARCO-TST及其用途。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

本发明的第一方面提供了一种分离的MARCO-TST多肽，所述MARCO-TST多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

在本发明的一个实施方式中，所述MARCO-TST多肽来自于哺乳动物，较佳地，人、大鼠、小鼠，优选，人。

本发明第二方面提供了一种分离的多核苷酸，所述多核苷酸编码本发明第一方面所述MARCO-TST多肽。

在本发明的一个实施方式中，编码所述MARCO-TST多肽的多核苷酸的序列如SEQID NO.2所示。

本发明中，所述MARCO-TST多肽是基于野生型MARCO(MARCO-WT)得到的，MARCO-WT的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。编码所述MARCO-WT的多核苷酸的序列如SEQ ID NO.4所示。

可以看出，MARCO-TST蛋白在N端多了一段新的序列，能被特异性的反义寡核苷酸靶向结合。

本发明第三方面提供了一种载体，所述载体含有本发明第二方面所述的多核苷酸。

本发明第四方面提供了一种宿主细胞，所述宿主细胞含有本发明第三方面所述的载体或基因组中整合有本发明第二方面所述的多核苷酸。

本发明第五方面提供了一种所述MARCO-TST多肽的制备方法，包括：

在适合表达的条件下，培养本发明第四方面所述的宿主细胞，从而表达出本发明第一方面所述的多肽；和分离所述的多肽。

本发明第六方面提供了一种特异性抑制剂，所述抑制剂特异性地与本发明第一方面所述的MARCO-TST多肽结合或抑制所述MARCO-TST多肽表达。在本发明的一个实施方式中，所述的抑制剂为反义核酸。

在本发明的一个实施方式中，所述反义核酸包括siRNA、shRNA、miRNA。

在本发明的一个实施方式中，所述的抑制剂不抑制或基本不抑制野生型MARCO。

MARCO所述的抑制剂优先抑制MARCO-TST。

在本发明的一个实施方式中，所述的抑制剂特异性针对MARCO-TST的特异表位。

在本发明的一个实施方式中，所述的特异表位指MARCO-TST具有的但野生型MARCO不具有的表位。

本发明第七方面提供了一种本发明第六方面所述的特异性抑制剂的用途，所述特异性抑制剂用于制备药物或制剂，所述药物或制剂用于(i)肿瘤的诊断或预后判断；(ii)抑制肿瘤细胞生长和增殖；和/或(iii)抑制肿瘤转移的能力。

在本发明的一个实施方式中，所述肿瘤细胞选自下组肿瘤的细胞：肝癌、***、子宫内膜癌、胶质瘤、乳腺癌、黑色素瘤、肺癌、结肠癌、胃癌、或其组合。

在本发明的一个实施方式中，所述肿瘤选自下组：肝癌、***、子宫内膜癌、胶质瘤、乳腺癌、黑色素瘤、肺癌、结肠癌、胃癌、或其组合。

本发明第八方面提供了一种药物组合物，包括：

本发明第六方面所述的特异性抑制剂；和药学上可接受的载体。

在本发明的一个实施方式中，所述药物组合物还包括下调所述MARCO-TST多肽或核苷酸的表达量或活性的小分子化合物、和/或核酸。

在本发明的一个实施方式中，所述核酸包括siRNA、shRNA、miRNA。

本发明第九方面提供了一种检测(尤其是非诊断地体外检测)样品中是否存在MARCO-TST的方法，包括：将样品与MARCO-TST的特异性抗体接触，观察是否形成抗体复合物，形成了抗体复合物就表示样品中存在MARCO-TST。

本发明第十方面提供了一种检测与MARCO-TST异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括：检测编码所述多肽的核酸序列中是否存在突变。

本发明第十一方面提供了一种本发明第一方面所述的多肽、本发明第二方面所述的多核苷酸的用途，用于筛选抑制MARCO-TST活性的抑制剂、或者用于肽指纹图谱鉴定、或用作核酸检测的对照品。

本发明第十二方面提供了一种确定测试物是否是MARCO-TST的抑制剂的方法，包括步骤：

(a)在测试组中，在培养体系中，在测试物存在下，培养表达MARCO-TST的细胞；并且在不存在所述测试物且其它条件相同的对照组中，培养相同的细胞；

(b)检测测试组中所述细胞中所述MARCO-TST的表达量E1或其活性A1；并与对照组中所述细胞中所述MARCO-TST的表达量E2或活性A2进行比较；

其中，如果所述表达量E1显著低于所述表达量E2或所述活性A1显著低于所述活性A2，则表示所述待测试物是MARCO-TST的抑制剂。

在本发明的一个实施方式中，所述的方法还包括步骤(c)：对步骤(b)确定的MARCO-TST多肽抑制剂进一步测试其对肿瘤细胞生长和增殖的抑制作用(包括体外细胞实验、或动物实验)。

本发明通过转录组测序(RNA-seq)发现了一个MARCO基因的全新转录本，它在三阴性乳腺癌(TNBC)中表现出表达水平较高，命名为MARCO-TST。MARCO-TST在TNBC肿瘤组织和TNBC细胞系中特异性表达，在正常组织中不表达。MARCO-TST表达高的病人预后较差。与野生型MARCO转录本不同，MARCO-TST从一个新的转录起始位点产生而来。在体内实验和体外实验显示，下调MARCO-TST的表达可以显著抑制肿瘤细胞增殖。这些发现证明了MARCO基因在癌症中激活的全新机制，并提示MARCO-TST作为肿瘤诊断和治疗的潜在应用价值。

与现有技术相比，本发明公开了一个MARCO新的转录本，命名为MARCO-TST(MARCO-Tumor Specific Transcript)。MARCO-TST在三阴性乳腺癌细胞中特异表达，在正常组织中不表达。MARCO-TST有一个新的转录起始位点，MARCO-TST编码的蛋白在N端多了一段新的序列，能被特异性的反义寡核苷酸靶向结合。下调MARCO-TST的表达可在体外和体内显著抑制肿瘤细胞的增殖和转移潜能。MARCO-TST可以作为新的肿瘤诊断治疗的靶分子。

附图说明

图1：转录组测序分析在多种癌症中发现了新的肿瘤特异转录本MARCO-TST。

图1中，(A)桑基图展示预后相关的TST在FUSCCTNBC队列中的表达频率以及在各个TNBC分子分型中的表达频率特征，(B)MARCO-TST在TNBC分子亚型中表达频率的差异，(C)TCGA队列(n＝9,581，包含33个癌种)中MARCO-TST在各个癌种中的表达频率差异，无表达的癌种并未在图中展示，(D)CCLE数据库中MARCO-TST在各个细胞系中的表达频率差异，无表达的细胞系并未在图中展示。统计学分析采用χ2检验；*P<0.05，***P<0.001。

图2、MARCO-TST转录本的鉴定。

(A)IGV软件显示细胞或组织中chr2:118,850,000-119,000,000(hg19)的RNA-seq数据，红色表示MARCO-TST表达的样本，蓝色表示MARCO-WT表达的样本，(B)MARCO-TST的全长mRNA序列，包含1895个碱基。红色标注为区别于MARCO-WT的序列，黑色标注的为和MARCO-WT共有的序列，(C)MARCO-TST全长PCR产物的DNA凝胶电泳图，(D)MARCO-TST的外显子3和4连接处的Sanger测序峰图。

图3、MARCO-TST在多种肿瘤组织以及细胞系中的表达情况及其与肿瘤预后的关系。

(A和B)用qPCR实验检测MARCO-TST和MARCO-WT转录本在多种细胞系(A)以及乳腺癌组织样本(B)中的表达情况，(C)MARCO-TST的表达与Ki-67增殖指数的关系，(D)MARCO-TST的表达与患者发生肺转移的关系。统计学分析采用Wilcoxon秩和检验和χ2检验，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。)(E)FUSCCTNBC队列中MARCO-TST及-WT的表达与TNBC患者的较短无远处转移生存(distant-metastasis free survival，DMFS)相关。统计分析采用Log-rank法。

图4、MARCO-TST对肿瘤细胞增殖的影响。

(A)细胞迁移实验检测敲低MARCO-TST后HCC38及BT549细胞的迁移能力，(B)CCK8法检测敲低MARCO-TST后HCC38及BT549细胞的增殖能力，(C和D)使用对照以及稳定过表达MARCO-TST的LM2细胞接种NOD/SCID小鼠的脂肪点处，构建小鼠原位成瘤模型并观察小鼠肿瘤的生长情况(C)，接种8周后处死小鼠，取出肺和股骨进行成像(D)，评估转移情况。统计分析采用t检验，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。

实验方法：

1、鉴定肿瘤特异性转录本

将RNA-seq数据使用STAR软件进行比对，然后将比对的数据通过StringTie软件(version 1.2.3)进行组装。此后，使用Assembling Splice Junctions Analysis(ASJA)软件进行RNA剪接位点的分析、定量以及注释，将得到三种剪接即线性剪接、融合剪接和反向剪接。我们计算肿瘤中特异性发生的剪接(RNA jucntion)，根据既往文献报道，肿瘤特异性剪接需要满足一下两个条件之一：(1)max_PT＝0&max_normal＝0；或者(2)median_tumor/max_PT>10。max_PT表示配对的癌旁组织中该junction表达的最大值，max_normal表示正常组织中该junction表达的最大值，median_tumor表示肿瘤组织中该junction表达量的中位数。获取候选junction后首先通过GENCODE数据库(version 22)进行注释，然后再从拼接后的RNA-seq数据中提取转录本信息，最终得到肿瘤特异性转录本(tumor-specifictranscripts，TST)。

2、细胞培养和化学试剂

人正常乳腺上皮细胞MCF10A；人乳腺癌细胞系MCF7、T47D、HCC1143、HCC1187、HCC1395、HCC1806、HCC1937、HCC38、HCC70、Hs-578T、MDA-MB-231、MDA-MB-436、MDA-MB-453、MDA-MB-468、BT-549和BT-20；人胚胎肾细胞系293T(HEK-293T)均购自American TypeCulture Collection(ATCC)，均使用ATCC建议的培养基进行培养，培养条件为5％CO₂，37℃培养箱。LM2细胞来自美国普林斯顿大学康毅滨实验室，使用含有10％胎牛血、100U/ml青霉素和10μg/ml链霉素的高糖DMEM培养基。所有细胞系均通过短串联重复序列鉴定，并排除支原体污染。

3、RNA抽提，逆转录和实时定量PCR反应(Quantitative real-time polymerasechain reaction)

总RNA根据生产商的操作指南用TRIzol试剂从细胞或者组织中提取。cDNA用PrimeScript^TM RT reagent Kit(TaKaRa,Tokyo,Japan)合成。实时定量PCR反应(qPCR)使用(47)AceQ荧光定量PCR试剂盒(探针法)(南京诺维赞生物科技有限公司).GAPDH用作内参。

按如下体系于冰上配制反应液：

按如下程序设置仪器：

使用的引物序列如下：

4、小干扰RNA转染

小干扰RNA(Small interfering RNA，siRNA)由RiboBio(Guangzhou,China)公司合成，细胞使用

RNAiMAX reagent(Invitrogen)试剂转染寡核苷酸，最终浓度为50nM，转染后48h进行实验。

siRNA序列如下

5、细胞增殖及迁移实验

使用CCK8(Cell Counting Kit-8,Dojindo Laboratories,Kumamoto,Japan)检测细胞的增殖。在细胞迁移实验中，8×10⁴/200μL细胞种在24孔板的小室中，下层加入500μl含10％FBS的DMEM培养基，37℃培养8-12小时。细胞使用4％多聚甲醛固定并用1％结晶紫(Sigma-Aldrich)染色。最后进行细胞计数和分析。

6、裸鼠接种

在每只裸鼠(雄BALB/c-nu/nu,6周龄)的脂肪垫部位皮下接种2×10⁶个细胞(重悬于50μL DMEM)。每隔3-4天用游标卡尺测量肿瘤的长径(L)和短径(W)。用下列公式计算肿瘤的体积(V):V＝(L x W²)/2.4周后处死小鼠，取出形成的肿瘤并称重。所有裸鼠的饲养和实验操作都按照上海医学实验动物伦理委员会的规定进行。

实验结果：

通过不同正常组织和癌症组织及数个细胞系的转录组测序(RNA-seq)使用ASJA软件分析研究了潜在的肿瘤特异性转录本。发现了大量的新肿瘤特异转录本，在这些肿瘤特异转录本中，本申请发现了一个MARCO基因的全新转录本，它在TNBC中表现出最高的表达水平，命名为MARCO-TST(图1A和B)。为了测定MARCO-TST的表达，本申请从TCGA转录本测序数据库中筛选了22个不同的肿瘤的超过7000个样本。MARCO-TST在TNBC中的表达频率最高(图1C)。本申请发现MARCO-TST在TNBC肿瘤组织、TNBC细胞系HCC1599及HCC38中的表达，而野生型MARCO转录本(MARCO-WT)则表达于THP-1巨噬细胞系中(图1B-D)。MARCO-TST在5’端具有3个新的外显子，另外10个外显子则与野生型的转录本所含外显子2-11一致(图2A)。本申请通过PCR法确认了MARCO-TST转录本的存在(图2B和C)。

为了区别和定量分析MARCO-WT和MARCO-TST的表达水平，本申请设计了特殊的引物，并在多种细胞系中进行了实时聚合酶链反应(RT-PCR)。本申请进一步在例60例乳腺癌样本以及24株细胞系确认MARCO-TST在TNBC中广泛表达，但不在正常乳腺组织或细胞中表达(图3A和B)。生存分析表明患有TNBC且表达MARCO-TST的病人具有更高的增值指数和更差的预后(图3C-E)。

本申请使用siRNA转染技术沉默MARCO-TST的表达，并观察到显著的细胞生长抑制作用和细胞迁移抑制作用(图4A和B)。在TNBC细胞系中，过表达MARCO-TST显著地促进了肿瘤的体内生长和骨肺转移能力(图4C和D)。这些结果表明MARCO-TST是对于癌症细胞增殖和肿瘤转移非常关键的转录本，并在一定程度上具备作为癌症治疗特异靶标的潜能。

本发明中，SEQ ID NO.1为：

MHCLSRRSLETPTHSAVLPLSPVSAWPCGSQLQPRFLLHHETFASKLVPKPKRRNGVNFSLAVVVIYLILLTAGAGLLVVQVLNLQARLRVLEMYFLNDTLAAEDSPSFSLLQSAHPGEHLAQGASRLQVLQAQLTWVRVSHEHLLQRVDNFTQNPGMFRIKGEQGAPGLQGHKGAMGMPGAPGPPGPPAEKGAKGAMGRDGATGPSGPQGPPGVKGEAGLQGPQGAPGKQGATGTPGPQGEKGSKGDGGLIGPKGETGTKGEKGDLGLPGSKGDRGMKGDAGVMGPPGAQGSKGDFGRPGPPGLAGFPGAKGDQGQPGLQGVPGPPGAVGHPGAKGEPGSAGSPGRAGLPGSPGSPGATGLKGSKGDTGLQGQQGRKGESGVPGPAGVKGEQGSPGLAGPKGAPGQAGQKGDQGVKGSSGEQGVKGEKGERGENSVSVRIVGSSNRGRAEVYYSGTWGTICDDEWQNSDAIVFCRMLGYSKGRALYKVGAGTGQIWLDNVQCRGTESTLWSCTKNSWGHHDCSHEEDAGVECSV

SEQ ID NO.2为：

ATGCACTGCCTGTCTAGGAGGAGCCTGGAAACACCCACCCATTCTGCCGTTCTGCCGCTGAGCCCCGTCTCTGCCTGGCCATGTGGAAGTCAGCTCCAGCCAAGATTCTTGCTGCATCATGAAACATTTGCTTCCAAATTGGTTCCAAAGCCCAAGAGGAGAAATGGGGTGAACTTCTCCCTAGCTGTGGTGGTCATCTACCTGATCCTGCTCACCGCTGGCGCTGGGCTGCTGGTGGTCCAAGTTCTGAATCTGCAGGCGCGGCTCCGGGTCCTGGAGATGTATTTCCTCAATGACACTCTGGCGGCTGAGGACAGCCCGTCCTTCTCCTTGCTGCAGTCAGCACACCCTGGAGAACACCTGGCTCAGGGTGCATCGAGGCTGCAAGTCCTGCAGGCCCAACTCACCTGGGTCCGCGTCAGCCATGAGCACTTGCTGCAGCGGGTAGACAACTTCACTCAGAACCCAGGGATGTTCAGAATCAAAGGTGAACAAGGCGCCCCAGGTCTTCAAGGTCACAAGGGGGCCATGGGCATGCCTGGTGCCCCTGGCCCGCCGGGACCACCTGCTGAGAAGGGAGCCAAGGGGGCTATGGGACGAGATGGAGCAACAGGCCCCTCGGGACCCCAAGGCCCACCGGGAGTCAAGGGAGAGGCGGGCCTCCAAGGACCCCAGGGTGCTCCAGGGAAGCAAGGAGCCACTGGCACCCCAGGACCCCAAGGAGAGAAGGGCAGCAAAGGCGATGGGGGTCTCATTGGCCCAAAAGGGGAAACTGGAACTAAGGGAGAGAAAGGAGACCTGGGTCTCCCAGGAAGCAAAGGGGACAGGGGCATGAAAGGAGATGCAGGGGTCATGGGGCCTCCTGGAGCCCAGGGGAGTAAAGGTGACTTCGGGAGGCCAGGCCCACCAGGTTTGGCTGGTTTTCCTGGAGCTAAAGGAGATCAAGGACAACCTGGACTGCAGGGTGTTCCGGGCCCTCCTGGTGCAGTGGGACACCCAGGTGCCAAGGGTGAGCCTGGCAGTGCTGGCTCCCCTGGGCGAGCAGGACTTCCAGGGAGCCCCGGGAGTCCAGGAGCCACAGGCCTGAAAGGAAGCAAAGGGGACACAGGACTTCAAGGACAGCAAGGAAGAAAAGGAGAATCAGGAGTTCCAGGCCCTGCAGGTGTGAAGGGAGAACAGGGGAGCCCAGGGCTGGCAGGTCCCAAGGGAGCCCCTGGACAAGCTGGCCAGAAGGGAGACCAGGGAGTGAAAGGATCTTCTGGGGAGCAAGGAGTAAAGGGAGAAAAAGGTGAAAGAGGTGAAAACTCAGTGTCCGTCAGGATTGTCGGCAGTAGTAACCGAGGCCGGGCTGAAGTTTACTACAGTGGTACCTGGGGGACAATTTGCGATGACGAGTGGCAAAATTCTGATGCCATTGTCTTCTGCCGCATGCTGGGTTACTCCAAAGGAAGGGCCCTGTACAAAGTGGGAGCTGGCACTGGGCAGATCTGGCTGGATAATGTTCAGTGTCGGGGCACGGAGAGTACCCTGTGGAGCTGCACCAAGAATAGCTGGGGCCATCATGACTGCAGCCACGAGGAGGACGCAGGCGTGGAGTGCAGCGTCTGA

SEQ ID NO.3为：

MRNKKILKEDELLSETQQAAFHQIAMEPFEINVPKPKRRNGVNFSLAVVVIYLILLTAGAGLLVVQVLNLQARLRVLEMYFLNDTLAAEDSPSFSLLQSAHPGEHLAQGASRLQVLQAQLTWVRVSHEHLLQRVDNFTQNPGMFRIKGEQGAPGLQGHKGAMGMPGAPGPPGPPAEKGAKGAMGRDGATGPSGPQGPPGVKGEAGLQGPQGAPGKQGATGTPGPQGEKGSKGDGGLIGPKGETGTKGEKGDLGLPGSKGDRGMKGDAGVMGPPGAQGSKGDFGRPGPPGLAGFPGAKGDQGQPGLQGVPGPPGAVGHPGAKGEPGSAGSPGRAGLPGSPGSPGATGLKGSKGDTGLQGQQGRKGESGVPGPAGVKGEQGSPGLAGPKGAPGQAGQKGDQGVKGSSGEQGVKGEKGERGENSVSVRIVGSSNRGRAEVYYSGTWGTICDDEWQNSDAIVFCRMLGYSKGRALYKVGAGTGQIWLDNVQCRGTESTLWSCTKNSWGHHDCSHEEDAGVECSV

SEQ ID NO.4为：

ATGAGAAATAAGAAAATTCTCAAGGAGGACGAGCTCTTGAGTGAGACCCAACAAGCTGCTTTTCACCAAATTGCAATGGAGCCTTTCGAAATCAATGTTCCAAAGCCCAAGAGGAGAAATGGGGTGAACTTCTCCCTAGCTGTGGTGGTCATCTACCTGATCCTGCTCACCGCTGGCGCTGGGCTGCTGGTGGTCCAAGTTCTGAATCTGCAGGCGCGGCTCCGGGTCCTGGAGATGTATTTCCTCAATGACACTCTGGCGGCTGAGGACAGCCCGTCCTTCTCCTTGCTGCAGTCAGCACACCCTGGAGAACACCTGGCTCAGGGTGCATCGAGGCTGCAAGTCCTGCAGGCCCAACTCACCTGGGTCCGCGTCAGCCATGAGCACTTGCTGCAGCGGGTAGACAACTTCACTCAGAACCCAGGGATGTTCAGAATCAAAGGTGAACAAGGCGCCCCAGGTCTTCAAGGTCACAAGGGGGCCATGGGCATGCCTGGTGCCCCTGGCCCGCCGGGACCACCTGCTGAGAAGGGAGCCAAGGGGGCTATGGGACGAGATGGAGCAACAGGCCCCTCGGGACCCCAAGGCCCACCGGGAGTCAAGGGAGAGGCGGGCCTCCAAGGACCCCAGGGTGCTCCAGGGAAGCAAGGAGCCACTGGCACCCCAGGACCCCAAGGAGAGAAGGGCAGCAAAGGCGATGGGGGTCTCATTGGCCCAAAAGGGGAAACTGGAACTAAGGGAGAGAAAGGAGACCTGGGTCTCCCAGGAAGCAAAGGGGACAGGGGCATGAAAGGAGATGCAGGGGTCATGGGGCCTCCTGGAGCCCAGGGGAGTAAAGGTGACTTCGGGAGGCCAGGCCCACCAGGTTTGGCTGGTTTTCCTGGAGCTAAAGGAGATCAAGGACAACCTGGACTGCAGGGTGTTCCGGGCCCTCCTGGTGCAGTGGGACACCCAGGTGCCAAGGGTGAGCCTGGCAGTGCTGGCTCCCCTGGGCGAGCAGGACTTCCAGGGAGCCCCGGGAGTCCAGGAGCCACAGGCCTGAAAGGAAGCAAAGGGGACACAGGACTTCAAGGACAGCAAGGAAGAAAAGGAGAATCAGGAGTTCCAGGCCCTGCAGGTGTGAAGGGAGAACAGGGGAGCCCAGGGCTGGCAGGTCCCAAGGGAGCCCCTGGACAAGCTGGCCAGAAGGGAGACCAGGGAGTGAAAGGATCTTCTGGGGAGCAAGGAGTAAAGGGAGAAAAAGGTGAAAGAGGTGAAAACTCAGTGTCCGTCAGGATTGTCGGCAGTAGTAACCGAGGCCGGGCTGAAGTTTACTACAGTGGTACCTGGGGGACAATTTGCGATGACGAGTGGCAAAATTCTGATGCCATTGTCTTCTGCCGCATGCTGGGTTACTCCAAAGGAAGGGCCCTGTACAAAGTGGGAGCTGGCACTGGGCAGATCTGGCTGGATAATGTTCAGTGTCGGGGCACGGAGAGTACCCTGTGGAGCTGCACCAAGAATAGCTGGGGCCATCATGACTGCAGCCACGAGGAGGACGCAGGCGTGGAGTGCAGCGTCTGA

上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种分离的MARCO-TST多肽，其特征在于，所述MARCO-TST多肽的氨基酸序列如SEQID NO.1所示。

2.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码权利要求1所述MARCO-TST多肽。

3.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求2所述的多核苷酸。

4.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求3所述的载体或基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸。

5.一种特异性抑制剂，其特征在于，所述抑制剂特异性地与权利要求1所述的MARCO-TST多肽结合或抑制权利要求1所述MARCO-TST多肽表达。

6.根据权利要求5所述的一种特异性抑制剂，其特征在于，所述的抑制剂为反义核酸。

7.一种权利要求5所述的特异性抑制剂的用途，其特征在于，所述特异性抑制剂用于制备药物或制剂，所述药物或制剂用于(i)肿瘤的诊断或预后判断；(ii)抑制肿瘤细胞生长和增殖；和/或(iii)抑制肿瘤转移的能力。

8.根据权利要求7所述的特异性抑制剂的用途，其特征在于，所述肿瘤细胞选自下组肿瘤的细胞：肝癌、***、子宫内膜癌、胶质瘤、乳腺癌、黑色素瘤、肺癌、结肠癌、胃癌、或其组合。

9.一种药物组合物，其特征在于，包括：权利要求5所述的特异性抑制剂；和药学上可接受的载体。

10.根据权利要求9所述的一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括下调权利要求1所述MARCO-TST多肽或权利要求2所述多核苷酸的表达量或活性的小分子化合物、和/或核酸。

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