CN115837027A - 一种眼用***药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种眼用***药物组合物。所述眼用***药物组合物的原料包括：***，羟丙基‑γ‑环糊精，γ‑环糊精，聚合物稳定剂以及水。本发明通过将增溶环糊精和聚集环糊精共用，有效解决了***/γ‑环糊精混悬滴眼液在剧烈高温条件下发生降解的技术问题，获得工艺放大更易实现、具有满意稳定性和更高生物利用度的眼用***药物组合物。

Description

一种眼用***药物组合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种新的水性滴眼液组合物，其活性成分为***。

背景技术

随着人口老龄化程度增加，中度至重度视力障碍和失明的人数急剧上升。眼后段疾病，如年龄相关性黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、葡萄膜炎和黄斑水肿，是发达国家老龄化人口视力受损的主要原因。目前实现眼后段药物递送的给药方式主要为玻璃体内给药和脉络膜上腔给药。玻璃体内途径被认为是向视网膜递送药物的最有效途径之一，目前涉及病理性血管生成和血管通透性改变的后段疾病通常通过玻璃体内给药来治疗，但玻璃体内注射或植入给药会带来并发症的风险，并对临床操作提出极高的要求，临床实际注射次数和频率低于临床试验从而影响疗效。脉络膜上腔途径主要通过微针将药物注入脉络膜上腔，可绕过巩膜，比外周途径提供更高的生物利用度，目前已有药物批准上市

用于治疗与葡萄膜炎相关的黄斑水肿，与玻璃体内途径相比更安全且副作用风险更低，但仍存在患者依从性低的侵入性操作。眼表局部给药更安全、更容易使用，还可以根据患者具体情况定制治疗方案，但局部给药到眼后段组织的难度非常大，当前常规技术无法获得药物治疗水平。因此，采用非侵入性药物递送***治疗慢性致盲性视网膜疾病的的需求日益增长。

***是用于治疗眼部疾病的皮质类固醇中全球处方最多的药物之一，用于治疗多种眼部疾病，包括前段炎症(如角膜炎、睑缘炎、过敏性结膜炎、前葡萄膜炎和干眼)和后段炎症(如中间葡萄膜炎、脉络膜炎、全葡萄膜炎和黄斑水肿)，还用于减轻各种眼部手术后的炎症；对于角膜移植排斥的术后管理和预防，***通常被用作免疫抑制剂。***用于治疗眼部疾病已有多种剂型上市，目前已被美国食品药品监督管理局(Food andDrug Administration，FDA)批准上市的***单方眼用原研制剂有用于治疗眼前段类固醇响应性炎性疾病的混悬滴眼液

用于治疗黄斑水肿和眼后段葡萄膜炎的玻璃体内植入物/>

用于术后炎症的眼球内注射混悬液/>

以及用于术后炎症和眼部瘙痒的植入剂/>

***的有效治疗需要在目标部位达到并维持治疗浓度。局部给药可到达眼前段，但因对角膜的渗透性差，估计只有不到3％的给药剂量到达房水；***的房水半衰期约为3-6小时，因而需要频繁给药(最多6次/天)。目前上市产品中将***递送到眼后段的方式只能采用玻璃体内植入的侵入性方法。

***结构式如下式所示(分子式C₂₂H₂₉FO₅，分子量392.47)

由于眼部复杂且独特的解剖学和生理学特点，药物从眼表递送到眼后段组织，受到多重屏障阻碍，包括药物在泪液中的溶解度、泪液引流、眼表粘液、膜屏障和其他障碍等，到达眼内组织药物量不超过5％，到达视网膜的量不超过0.01％，药物向眼后段递送更是面临着巨大的挑战。为了克服眼部药物递送障碍并提高药物生物利用度，开发了新型药物递送***(drug delivery system，DDS)，如乳剂、纳米胶束、原位凝胶、脂质体、纳米颗粒、层状双氢氧化物、树状聚合物、环糊精聚集体等(Wang Y,Xu X,Gu Y,et al.Recent advanceof nanoparticle-based topical drug delivery to the posterior segment of theeye.Expert Opin Drug Deliv.2018；15(7):687-701.)。虽然这些新的DDS克服了常规DDS在眼部疾病管理方面的一些局限性，但目前除环糊精聚集体技术外，暂无通过眼表局部给药向眼后段递送的运用其他制剂技术手段的药物成功进入临床试验阶段。

环糊精空腔边缘羟基可以形成环糊精分子间氢键，导致溶解的环糊精分子自组装，形成环糊精聚集体。利用环糊精及其包合物自组装形成微粒聚集体的趋势制备混悬滴眼液，眼表给药后可延长药物的眼表滞留时间，亚稳态微粒会分解成粘附在粘液层的纳米颗粒，随着泪液的稀释药物持续释放，可实现眼表在较长时间内保持较高的药物浓度。Oculis公司运用环糊精聚集体技术研制的***/γ-环糊精混悬滴眼液已有两个适应症正在开展Ⅲ期临床试验，分别评价对糖尿病性黄斑水肿的有效性和安全性(临床试验登记号：NCT05066997)以及评价对白内障术后眼部炎症和疼痛的有效性和安全性(临床试验登记号：NCT05147233)；已完成的Ⅱ期临床试验结果(临床试验登记号：EudraCT No.2017-001172-36，NCT04130802)初步证明了环糊精聚集体技术在递送药物至眼后段的可行性。

Oculis公司研制的***/γ-环糊精混悬滴眼液工艺中涉及到原辅料水混悬液121℃加热20min的工艺操作(Tanito M,Hara K,Takai Y,et al.Topicaldexamethasone-cyclodextrin microparticle eye drops for diabetic macularedema.Invest Ophthalmol Vis Sci.2011；52(11):7944-7948.)，而***在剧烈高温条件下会发生一定降解；且此操作对生产设备要求高，需要使用专用的大型混悬液灭菌设备，目前常规滴眼液生产并不具备，现有设备难以满足。同时，在***/γ-环糊精混悬滴眼液的已经开展的人体相关试验(Ohira A,Hara K,Johannesson G,et al.ActaOphthalmol.2015；93:610-615.Shulman S,Johannesson G,Stefansson E,et al.2015；93:411-415.Krag S,Hessellund A.2014；92:e689-e690.)中，治疗眼后段疾病的给药次数为每天3-4次，给药频次仍较高。因此，***在眼部的生物利用度还需进一步提高。

虽然已有关于共同使用γ-环糊精和羟丙基-γ-环糊精提高***溶解度的报道(Jansook P,Ritthidej GC,Ueda H,et al.γCD/HPγCD mixtures as solubilizer:solid-state characterization and sample dexamethasone eye drop suspension.JPharm Pharm Sci.2010；13(3):336-350.)，但是这些先前的研究仍使用了121℃灭菌20分钟的工艺操作，且稳定性没有进行全面的研究，也没有进一步增加体内***的眼部药物递送。

因此，仍迫切需要一种包含***的工艺放大更易实现、具有满意稳定性和更高生物利用度的眼用药物组合物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种包含***作为活性成分的眼用药物组合物，其患者使用依从性好，且工艺放大更易实现、具有满意稳定性和更高生物利用度。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种眼用***药物组合物，原料包括：

(1)眼科有效的***；

(2)有效地与所述***形成水溶性复合物的量的羟丙基-γ-环糊精；

(3)有效形成***/羟丙基-γ-环糊精复合物聚集体的量的γ-环糊精；

(4)聚合物稳定剂；和

(5)水；

所述***的总浓度为1.0％w/v-2.0％w/v，所述羟丙基-γ-环糊精的总浓度为约3％w/v-12.5％w/v，所述γ-环糊精的总浓度为约4.25％w/v-12.75％w/v，所述聚合物稳定剂的总浓度为约0.1％w/v-2.5％w/v。

所述眼用***药物组合物，其固体药物部分包含直径为约0.5μm至约50μm的***/环糊精聚集体颗粒。在一个实施方案中，所述的眼科药物组合物，其固体药物部分包含直径(D90)为3μm至10μm的***/环糊精颗粒。在一个实施方案中，所述的眼科药物组合物，其固体药物部分包含直径(D90)为3μm至6μm的***/环糊精颗粒。

在一个实施方案中，所述***的总浓度为约1.25％w/v-1.75％w/v，所述羟丙基-γ-环糊精的总浓度为约5％w/v-12.5％w/v，所述γ-环糊精的总浓度为约6％w/v-10％w/v，所述聚合物稳定剂的总浓度为约0.25％w/v-2.5％w/v。

在一个具体实施方案中，所述***的总浓度为约1.5％w/v，所述羟丙基-γ-环糊精的总浓度为约6.5％w/v-12.5％w/v，所述γ-环糊精的总浓度为约8％w/v-10％w/v，所述聚合物稳定剂的总浓度为约1％w/v-2.5％w/v。

在一个实施方案中，所述聚合物稳定剂选自泊洛沙姆、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇或透明质酸，优选为泊洛沙姆、羟丙甲纤维素或羧甲基纤维素钠，更优选为泊洛沙姆。

在一个实施方案中，所述的眼科药物组合物，还包含pH调节剂，所述pH调节剂选自盐酸、氢氧化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、枸橼酸、枸橼酸钠中的至少一种。优选地所述pH调节剂为磷酸氢二钠和枸橼酸。

在一个实施方案中，所述的眼科药物组合物，还包含等渗调节剂，所述等渗调节剂选自氯化钠、葡萄糖或甘露醇。优选地所述等渗调节剂为氯化钠。

在一个实施方案中，所述的眼科药物组合物，还包含金属离子螯合物，所述金属离子螯合物为依地酸二钠或依地酸钙钠。优选地所述金属离子螯合剂为依地酸二钠。

在一个实施方案中，所述的眼科药物组合物，其还包含抑菌剂，所述抑菌剂为苯扎氯铵、苯扎溴铵、尼泊金甲酯或尼泊金丙酯。优选地所述抑菌剂为苯扎氯铵。

上述眼用***药物组合物可以通过将羟丙基-γ-环糊精和γ-环糊精与***分步超声制得。特别地，对于水性混悬滴眼液而言，可以采用如下制备方法：将聚合物稳定剂、羟丙基-γ-环糊精和***水性混悬液超声，加入γ-环糊精溶液超声，以及振摇。

上述眼用***药物组合物的一些实施方案还提供了一种水性混悬滴眼液的制备方法：将聚合物稳定剂、羟丙基-γ-环糊精和***水性混悬液超声，加入γ-环糊精溶液搅拌，以及振摇。

上述眼用***药物组合物在制备治疗和/或预防眼后段相关疾病的药物的应用。所述眼后段相关疾病为眼后段视网膜相关疾病，例如糖尿病性黄斑水肿、老年性黄斑病变、黄斑囊样水肿和葡萄膜炎。

所述药物可以采用溶液剂、混悬液剂、凝胶剂、乳剂等形式，特别地可以是水性混悬滴眼液。

发明人意外地发现，采用121℃灭菌20分钟工艺制备***/γ-环糊精混悬滴眼液，导致***在剧烈高温条件下发生降解；且此操作对生产设备要求高，常规滴眼液生产设备难以满足。此外，在***/γ-环糊精混悬滴眼液已经开展的人体试验中给药次数为每天3-4次，给药频次较高。

经过进一步实验，发明人出乎意料地发现：在眼用***药物组合物中，增溶环糊精和聚集环糊精共用，例如采用羟丙基-γ-环糊精和γ-环糊精合用，运用超声包合工艺制备，可以有效地解决上述问题，获得工艺放大更易实现、具有满意稳定性和更高生物利用度的眼用***药物组合物。基于此发现，本发明提供了一种包含***的眼用药物组合物。

本发明的***眼用药物组合物工艺放大更易实现。本发明的***眼用药物组合物仅需进行超声操作就可以实现药物包合，不需要采用121℃灭菌20分钟的操作，不需要使用大型的特定的混悬液灭菌设备，易于生产放大。

本发明的***眼用药物组合物具有满意的稳定性。稳定性考察结果显示，本发明的***眼用药物组合物在加速试验条件和长期试验条件下放置6个月稳定性良好。

本发明的***眼用药物组合物可以避免侵入性操作带来的不良反应，并实现了眼部更高的生物利用度。体内眼组织分布试验数据结果显示，眼表局部给予本发明的***眼用药物组合物与眼表局部给予对比例***/γ-环糊精混悬滴眼液相比，单次给药后2小时内各眼组织中的药物浓度显著增加，在角膜、结膜、房水、巩膜和脉络膜-视网膜的AUC_0-12h分别是对比例的1.95、1.41、1.65、1.46和1.41倍，进一步提高了药物的生物利用度，具有进一步降低给药频率的潜力，同时眼表局部给药提高了患者的依从性和用药方便性。

附图说明

图1为实施例1中***在不同环糊***溶液中的相溶解度曲线。

图2为实施例2***在γ-环糊***溶液中的相溶解度曲线(不同包合工艺)。

图3为实施例8和对比例1单次给药后***在家兔各眼组织中的药物浓度(Mean±SD，n＝3，×表示未达到检测限，*p<0.05，与对比例1组有显著性差异)。

具体实施方式

本发明公开了眼用的***的药物组合物特别是水性眼用制剂，本领域技术人员可以借鉴本发明的内容，结合药剂学原理，适当改进工艺参数或配方配比来实现。

以下实施例仅以举例说明的方法进行详细描述，其不应解释为在精神或范围上是限制性的；对于本领域技术人员而言，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明的范围内。本发明的应用己经较好地通过实施例进行了描述，相关人员可以在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行适当的改动、变更或组合，来实现和应用本发明。

实施例1

研究了不同种类环糊精对***在水中的溶解度的影响，测定了不同环糊精与***的包合效率(complexation efficiency，CE)和包合常数(K_1:1)。称取过量***分别加入纯水和不同浓度(w/v)的不同种类环糊***溶液(α-环糊精：1％、3％、5％、7％、10％、14％；γ-环糊精：0.5％、1％、2％、3％、5％、7％、9％、12％、15％、20％；羟丙基-β-环糊精：1％、3％、5％、10％、15％、20％、25％；羟丙基-γ-环糊精：1％、3％、5％、10％、15％、20％、25％；甲基-β-环糊精：1％、3％、5％、10％、15％、20％、25％)中，密封，50℃超声1h，冷却至室温，置于恒温水浴摇床25℃震荡7天(100rpm)。使用0.45μm PES滤膜过滤各样品，取续滤液测定***的浓度。

***浓度测定方法：高效液相色谱法；十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(150×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-水(28:72)；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测波长：240nm。

以环糊精浓度(mM)为X轴，药物浓度(mM)为Y轴绘制相溶解度曲线，并按照下式计算CE和K_1:1。

其中，S₀为***的固有溶解度；Slope为相溶解度曲线进行线性回归的斜率。

结果如表1所示。

表1***与不同环糊精的CE和K_1:1

CD	Slope	R<sup>2</sup>	K<sub>1:1</sub>(M<sup>-1</sup>)	CE
					α-环糊精	0.0445	0.9998	228.67	0.05
羟丙基-β-环糊精	0.2955	0.9981	2059.50	0.42
					羟丙基-γ-环糊精	0.5471	0.9979	5931.30	1.21
甲基-β-环糊精	0.4261	0.9964	3645.53	0.74
					γ-环糊精*	0.6667	0.9998	9821.57	2.00

*注：γ-环糊精仅对其线性段(0.5-2％w/v)进行拟合计算。

由图1可知，γ-环糊精的相溶解度曲线属于B_S型，前段部分随着γ-环糊精浓度的增加，溶解的***线性增加，达到***的最大溶解度；随着γ-环糊精浓度的继续增加，包合物自组装形成聚集体，从溶液中沉淀析出，溶解的***浓度逐渐下降。因此，***-环糊精混悬滴眼液的处方中需要选择γ-环糊精形成聚集体。而其他筛选的环糊精均随着其浓度的增加，溶解的***浓度线性增加，相溶解度曲线均属于A_L型。由相溶解度图及表1中K_1:1值可知，羟丙基-γ-环糊精对***的增溶能力最强。

实施例2

研究了不同包合工艺对相溶解度的影响。采用灭菌包合工艺考察***在系列γ-环糊精溶液中的相溶解度，并与实施例1所测得的采用超声包合工艺的相溶解度结果进行对比。称取过量***分别加入不同浓度(w/v)的γ-环糊***溶液(0.5％、1％、2％、3％、5％、7％、9％、12％、15％、20％)中，密封，121℃灭菌20min，冷却至室温，置于恒温水浴摇床25℃震荡7天(100rpm)。使用0.45μm PES滤膜过滤各样品，取续滤液测定***浓度，并计算CE和K_1:1。

研究结果显示，采用50℃超声1h包合和121℃灭菌20min包合所测定的γ-环糊精对***的K_1:1值分别为9821.57M^-1和9050.85M^-1，相溶解度曲线如图2所示。由此可知，所采用的两种包合工艺对γ-环糊精的包合行为无明显影响。因此，包合工艺在对环糊精的包合能力方面无关键影响。

实施例3

制备了不同羟丙基-γ-环糊精用量和γ-环糊精用量的制剂，具体制备方法为：处方占比1％(w/v)的泊洛沙姆407和羟丙基-γ-环糊精加入50％总体积的纯化水，搅拌溶解，加入处方占比1.5％(w/v)的***，50℃超声30min；再加入γ-环糊精的水溶液，50℃超声30min，纯化水定容，搅拌混合均匀，25℃振摇7天(100rpm)。不同制剂的羟丙基-γ-环糊精和γ-环糊精处方占比见表2。

表2不同制剂的羟丙基-γ-环糊精用量和γ-环糊精用量

制剂	羟丙基-γ-环糊精处方占比(w/v)	γ-环糊精处方占比(w/v)
			F1	12.5％	12.75％
F2	12.5％	8.5％
			F3	12.5％	4.25％
F4	12.5％	2.55％
			F5	9％	12.75％
F6	9％	8.5％
			F7	9％	4.25％
F8	9％	2.55％
			F9	6.5％	12.75％
F10	6.5％	8.5％
			F11	6.5％	4.25％
F12	6.5％	3.4％
			F13	6.5％	2.55％
F14	5％	8.5％
			F15	4％	8.5％
F16	3％	8.5％

照粒度和粒度分布测定法(中国药典2020版四部通则0982第三法)测定样品粒径，具体操作为：取充分再分散后的样品适量，以纯水为分散介质，在分散速度为2000rpm的搅拌状态下，将混悬液加入分散介质中进行稀释使仪器显示的遮光比在10％-20％之间，分散30-120s使混悬液分散均匀，测定时间为20s，记录D10、D50和D90。

固体药物分数用来评价***处于固体环糊精微粒聚集体中的比例，具体测定步骤如下：量取样品8000rpm离心10min，测定上清液中***浓度；取充分再分散后的样品测定***浓度即为总药物浓度。计算公式如下：

表3不同制剂的测定结果

由表3的检测结果可知，制剂F2、F6、F9、F10、F11、F14、F15、F16均得到了浅乳白色至乳白色的混悬液，粒径(D90)在约3-25μm范围内，固体药物分数在3％-70％范围内，可用于眼部给药，并通过混悬液形式提高药物在眼表的滞留时间，减少眼表损失，并随着泪液的稀释药物持续释放，实现眼表在较长时间内保持较高的药物浓度。此时羟丙基-γ-环糊精处方占比在3％-12.5％范围内，γ-环糊精处方占比在4.25％-12.75％范围内。在此范围内，γ-环糊精用量越大，所形成聚集体的粒径越大，固体药物分数也越大。

实施例4

制备了含有不同种类聚合物稳定剂的制剂，具体制备方法为：聚合物稳定剂和羟丙基-γ-环糊精加入50％总体积的纯化水，搅拌溶解，加入***，50℃超声30min；再加入γ-环糊精的水溶液，50℃超声30min，纯化水定容，搅拌混合均匀，25℃振摇7天(100rpm)。含有不同种类聚合物稳定剂的制剂配方见表4。

表4含有不同种类聚合物稳定剂的制剂配方(w/v)

表5不同制剂的测定结果

由表5的检测结果可知，配方中不加入聚合物稳定剂时(F17、F18、F19)，样品性状出现明显分层，且难以再分散，无法达到眼用制剂的要求。在实施例3中使用了泊洛沙姆作为聚合物稳定剂；在本实施例中，聚乙烯吡咯烷酮、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇和透明质酸也可以作为聚合物稳定剂加入制备得到符合眼用要求的制剂。

实施例5

制备了含有不同泊洛沙姆407用量的制剂，具体制备方法为：泊洛沙姆407和羟丙基-γ-环糊精加入50％总体积的纯化水，搅拌溶解，加入***，50℃超声30min；再加入γ-环糊精的水溶液，50℃超声30min，纯化水定容，搅拌混合均匀，25℃振摇7天(100rpm)。含有不同泊洛沙姆407用量的制剂配方见表6。

表6含有不同泊洛沙姆407用量的制剂配方(w/v)

制剂	***	羟丙基-γ-环糊精	γ-环糊精	泊洛沙姆407
					F29	1.5％	12.5％	8.5％	1.75％
F30	1.5％	9％	8.5％	1.75％
					F31	1.5％	6.5％	8.5％	1.75％
F32	1.5％	12.5％	8.5％	2.5％
					F33	1.5％	9％	8.5％	2.5％
F34	1.5％	6.5％	8.5％	2.5％

表7不同制剂的测定结果

由表7的检测结果结合实施例3中表3的检测结果可知，聚合物稳定剂泊洛沙姆用量在1％-2.5％范围内，可得到符合眼用要求的混悬液制剂。

实施例6

表8滴眼液的处方组成

组分	占比(％)	用量(100mL)
			***	1.5	1.5g
羟丙基-γ-环糊精	12.5	12.5g
			γ-环糊精	8.5	8.5g
泊洛沙姆407	1	1.0g
			苯扎氯铵	0.02	20mg
依地酸二钠	0.1	100mg
			Na<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>·12H<sub>2</sub>O	0.39	0.39g
枸橼酸	适量	调节pH 5.0-6.0
			氯化钠	0.28	280mg
纯化水	适量	加至100mL

按照表8处方，处方量依地酸二钠、Na₂HPO₄·12H₂O、苯扎氯铵、氯化钠、泊洛沙姆407、羟丙基-γ-环糊精加入50％总体积的纯化水，搅拌溶解，0.1mol/L枸橼酸溶液调节pH至5.0-6.0。加入处方量***，50℃超声30min；再加入处方量γ-环糊***溶液，50℃超声30min，纯化水定容，搅拌混合均匀，25℃振摇5天(100rpm)。

实施例7

表9滴眼液的处方组成

组分	占比(％)	用量(100mL)
			***	1.5	1.5g
羟丙基-γ-环糊精	9	9g
			γ-环糊精	8.5	8.5g
泊洛沙姆407	1	1.0g
			苯扎氯铵	0.02	20mg
依地酸二钠	0.1	100mg
			Na<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>·12H<sub>2</sub>O	0.39	0.39g
枸橼酸	适量	调节pH 5.0-6.0
			氯化钠	0.33	330mg
纯化水	适量	加至100mL

按照表9处方，处方量依地酸二钠、Na₂HPO₄·12H₂O、苯扎氯铵、氯化钠、泊洛沙姆407、羟丙基-γ-环糊精加入50％总体积的纯化水，搅拌溶解，0.1mol/L枸橼酸溶液调节pH至5.0-6.0。加入处方量***，40℃超声30min；再加入处方量γ-环糊***溶液，搅拌至澄清，纯化水定容，搅拌混合均匀，25℃振摇5天(100rpm)。

实施例8

表10滴眼液的处方组成

组分	占比(％)	用量(1000mL)
			***	1.5	15g
羟丙基-γ-环糊精	6.5	65g
			γ-环糊精	8.5	85g
泊洛沙姆407	1	10g
			苯扎氯铵	0.02	200mg
依地酸二钠	0.1	1g
			Na<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>·12H<sub>2</sub>O	0.39	3.9g
枸橼酸	适量	调节pH 5.0-6.0
			氯化钠	0.41	4.1g
纯化水	适量	加至1000mL

按照表10处方，处方量依地酸二钠、Na₂HPO₄·12H₂O、苯扎氯铵、氯化钠、泊洛沙姆407、羟丙基-γ-环糊精加入50％总体积的纯化水，搅拌溶解，0.5mol/L枸橼酸溶液调节pH至5.0-6.0，0.22μm微孔滤膜过滤。加入处方量***，30℃超声30min；再加入经0.22μm微孔滤膜过滤的处方量γ-环糊***溶液，搅拌至澄清，纯化水定容，搅拌混合均匀，25℃振摇5天(100rpm)。

对比例1

按照文献(Tanito M,Hara K,Takai Y,et al.Topical dexamethasone-cyclodextrin microparticle eye drops for diabetic macular edema.InvestOphthalmol Vis Sci.2011；52(11):7944-7948.)中提到的处方(表11)和工艺制备样品，并测定其质量特性。

表11对比例1处方

成分	用量	占比(％)
			***	1.50g	1.5
γ-环糊精	14g	14
			苯扎氯铵	20mg	0.02
依地酸二钠	100mg	0.1
			泊洛沙姆407	2.5g	2.5
氯化钠	570mg	0.57
			配制成	100mL	——

制备方法：将处方量***和γ-环糊精混悬在含有苯扎氯铵、依地酸二钠、泊洛沙姆407、氯化钠的水溶液中，将形成的混悬液在密封容器中121℃高压蒸汽灭菌20min，冷却至室温，25℃振摇7天(100rpm)。

有关物质测定方法

照高效液相色谱法(中国药典2020版四部通则0512)测定。色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(250×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-水(28:72)；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测波长：240nm；进样量：20μL。

表12检测结果对比

由表12可知，采用超声工艺制备的实施例6、7、8的样品的有关物质明显低于采用121℃灭菌工艺制备的对比例1样品。

实施例9

稳定性研究

实施例8样品分别在加速条件(温度40℃±2℃，相对湿度75％±5％)和长期条件(温度25℃±2℃，相对湿度60％±5％)条件下放置，于1月、2月、3月、6月取样检测。

黏度测定方法

照《中国药典》2020年版四部通则0633第三法旋转黏度计测定法测定本品黏度。设定转速为60rpm(1号转子)，取充分再分散后的样品适量置于烧杯中，供试品温度维持在25℃，使转子的液体标志与液面相平进行测定，记录仪器显示读数。

再分散性测定方法：样品为混悬液，为了评价其再分散性，测定再分散后的混悬液1滴的含量，平行测定三份。

表13实施例8样品加速条件稳定性考察结果(40℃±2℃，75％±5％ RH)

表14实施例8样品长期条件稳定性考察结果(25℃±2℃，60％±5％ RH)

由表13和表14研究结果可知，实施例8样品在加速条件和长期条件下6个月的稳定性良好，关键质量属性均未发生显著变化，所有项目均符合拟定质量标准。

实施例10

***混合环糊精聚集体滴眼液(实施例8)和***单一环糊精聚集体滴眼液(对比例1)的动物组织分布对比研究

材料与方法

实验动物：新西兰大白兔(南京市浦口区莱芙养殖场)，2.0-2.5kg，雄性，合格证号：NO.202212467。

受试样品：实施例8样品、对比例1样品

实验方法：

将36只雄性家兔随机分为12组，每组3只。将家兔固定后，向每组家兔的左眼下结膜囊内单次给药50μL实施例8样品或对比例1样品，右眼作为空白对照不进行任何处理。给药后使眼睑自由闭合并按压鼻泪管60s。分别于单次给药后的0.5、1、2、4、8、12h采用耳缘静脉注射空气法处死对应家兔，从眼球表面取结膜组织，然后迅速摘取眼球，除去眼球表面的血块和多余结蹄组织，用生理盐水冲洗干净。微量注射器刺入眼球收集房水，然后沿角膜边缘剪下角膜并收集；剪开巩膜，充分去除玻璃体液，将脉络膜-视网膜刮起收集，然后收集巩膜。各组织分别置取样管中并称重。分别对各眼组织样品进行适当处理测定样品中的***浓度。

实验结果：

表15单次给药后家兔各眼组织的药代动力学参数(Mean±SD，n＝3)

*p<0.05，与对比例1相比

实施例8样品和对比例1样品在家兔各眼组织中的药物浓度如图3所示。采用pKSolver2.0药动学软件计算各眼组织中药物的相关药动学参数，结果见表15。在兔眼单次局部给药后2h内，实施例8样品在各组织中的药物浓度高于对比例1样品(p＜0.05)。实施例8样品在角膜、结膜、房水、巩膜和脉络膜-视网膜的AUC_0-12h分别是对比例1样品的1.95、1.41、1.65、1.46和1.41倍，进一步提高了药物的生物利用度。据报道，***对HeLa细胞中糖皮质激素受体(被认为主要负责皮质类固醇的抗炎作用)的激活效力为3nM(即1.2ng/mL)(Whitcup SM,Cidlowski JA,Csaky KG,et al.Pharmacology of corticosteroidsfor diabetic macular edema.Invest Ophthalmol Vis Sci.2018；59(1):1-12.)，这一细胞层面的***激活效力在***植入物

的FDA药理审评报告中也得到证实。实施例8样品单次给药后12h内眼后段视网膜测得的药物浓度均高于***的有效浓度。本发明与对比例1样品***/γ-环糊精混悬滴眼液相比生物利用度提高，可进一步降低给药频次。/>

Claims (10)

1.一种眼用***药物组合物，其特征在于：原料包括：***，羟丙基-γ-环糊精，γ-环糊精，聚合物稳定剂，以及水；

所述***的用量为1.0% w/v-2.0% w/v，所述羟丙基-γ-环糊精的用量为3% w/v-12.5% w/v，所述γ-环糊精用量为4.25% w/v-12.75% w/v，所述聚合物稳定剂的用量为0.1% w/v-2.5% w/v。

2.根据权利要求1所述的眼用***药物组合物，其特征在于：所述***的用量为1.25% w/v-1.75% w/v，所述羟丙基-γ-环糊精的用量为5% w/v-12.5% w/v，所述γ-环糊精用量为6% w/v-10% w/v，所述聚合物稳定剂的用量为0.25% w/v-2.5% w/v。

3.根据权利要求1所述的眼用***药物组合物，其特征在于：所述***的用量为1.5% w/v，所述羟丙基-γ-环糊精的用量为6.5% w/v-12.5% w/v，所述γ-环糊精用量为8% w/v-10% w/v，所述聚合物稳定剂的用量为1% w/v-2.5% w/v。

4.根据权利要求1所述的眼用***药物组合物，其特征在于：所述聚合物稳定剂选自泊洛沙姆、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇或透明质酸，优选为泊洛沙姆、羟丙甲纤维素或羧甲基纤维素钠，更优选为泊洛沙姆。

5.根据权利要求1所述的眼用***药物组合物，其特征在于：原料还包含pH调节剂，所述pH调节剂选自盐酸、氢氧化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、枸橼酸或枸橼酸钠中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的眼用***药物组合物，其特征在于：原料还包含等渗调节剂，所述等渗调节剂选自氯化钠、葡萄糖或甘露醇。

7.根据权利要求1所述的眼用***药物组合物，其特征在于：原料还包含金属离子螯合物，所述金属离子螯合物为依地酸二钠或依地酸钙钠。

8.根据权利要求1所述的眼用***药物组合物，其特征在于：原料还包含抑菌剂，所述抑菌剂为苯扎氯铵、苯扎溴铵、尼泊金甲酯或尼泊金丙酯。

9.权利要求1-8任一项所述的眼用***药物组合物在制备治疗和/或预防眼后段相关疾病的药物的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述眼后段相关疾病为眼后段视网膜相关疾病。

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