CN115651063A

CN115651063A - 放射性核素标记的ptp多肽及其应用

Info

Publication number: CN115651063A
Application number: CN202210317132.1A
Authority: CN
Inventors: 赵晋华; 邢岩; 赵凌舟; 龚佳丽; 朱美霖; 杨吉琴
Original assignee: Shanghai First Peoples Hospital; Ningxia Medical University; General Hospital of Ningxia Medical University
Current assignee: Shanghai First Peoples Hospital; Ningxia Medical University; General Hospital of Ningxia Medical University
Priority date: 2022-03-29
Filing date: 2022-03-29
Publication date: 2023-01-31

Abstract

本发明属于生物医学技术领域，涉及显像和治疗的放射性药物，更具体地涉及PTP多肽构建的核医学分子探针或治疗药物。本发明的放射性核素标记的多肽中，所述的多肽是网蛋白靶向多肽；所述的放射性核素标记的多肽含有双功能螯合剂偶联的网蛋白靶向多肽和放射性核素。本发明还包括其制备方法和应用。本发明的PTP多肽具备较好的肿瘤细胞特异性；未标记放射性核素的PTP多肽具有良好的细胞相容性；放射性核素标记的PTP多肽在多种皮下肿瘤中显示出良好靶向性和核医学显像效果，并且体内清除快，在核医学诊断和治疗方面具有临床潜力。

Description

放射性核素标记的PTP多肽及其应用

技术领域

本发明放射性核素标记的PTP多肽及其应用涉及生物医学技术领域，涉及显像和治疗的放射性药物，更具体地涉及为PTP多肽构建的核医学分子探针或治疗药物。所述核医学分子探针或治疗药物由PTP多肽与双功能螯合剂(chelator)和放射性核素(radionuclide)得到，即radionuclide-chelator-PTP；所述PTP多肽氨基酸序列为KTLLPTP；所述应用包括放射性核素标记的PTP多肽在制备诊断Plectin蛋白高表达肿瘤的显像剂中的应用；所述应用还包括放射性核素标记的PTP多肽在制备生物靶向Plectin蛋白高表达肿瘤的药物中的应用。

背景技术

分子影像技术能在细胞和分子水平去评估疾病发生和进展过程，在早期精准诊断疾病中具有重要作用。分子成像技术的关键是分子探针的制备，分子探针一般由配体和显像剂两个部分组成，利用配体受体特异性结合达到主动靶向分子成像的效果。

网蛋白（plectin）是一种蛋白分子量为500 KDa，几乎在所有哺乳动物组织和细胞中都有表达的骨架蛋白，在肌肉、皮肤和神经组织中起着至关重要的作用。Plectin不仅在胰腺癌细胞膜和细胞质内高度表达，同时在卵巢癌、头颈部鳞状细胞癌、食道鳞状细胞癌以及直肠癌中等也过度表达，能促进肿瘤的生长、增殖及迁移。因此，plectin有潜力成为多种恶性肿瘤的诊疗靶点。

网蛋白靶向多肽（plectin-targeted peptide, PTP）是从噬菌体展示肽库中筛选出来的一个七肽（KTLLPTP，SEQ ID NO 1），能与plectin特异性结合。相对于抗体来说，PTP多肽拥有分子量小、免疫原性低以及修饰简易等特点，在开发分子影像探针方面具有明显优势。目前已有多种PTP多肽的修饰物，如荧光素、药物或应用高分子载体材料构建的递药***等，已被用于多种肿瘤的显像和治疗研究。尽管PTP多肽在Plectin靶向性方面显示出重要潜力，但现有的以PTP为靶向多肽构建的肿瘤显像和治疗体系中，在核医学方面的研发还没有得到足够重视，未有相关核医学显像剂或放射性治疗药物的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供放射性核素标记的PTP多肽。

本发明的再一目的是提供所述放射性核素标记的PTP多肽在肿瘤显像和治疗中的应用。

针对目前存在的问题，本发明提供了放射性核素标记的PTP多肽及其在肿瘤显像和治疗中的应用。本发明包括PTP多肽构建的核医学分子探针或治疗药物；所述核医学分子探针或治疗药物由PTP多肽与双功能螯合剂(chelator)和放射性核素(radionuclide)得到，即radionuclide-chelator-PTP；所述PTP多肽氨基酸序列为KTLLPTP；所述应用包括放射性核素标记的PTP多肽在制备诊断Plectin蛋白高表达肿瘤的显像剂中的应用；所述应用还包括放射性核素标记的PTP多肽在制备生物靶向Plectin蛋白高表达肿瘤的药物中的应用。

一方面，本发明提供了一种放射性核素标记的多肽，所述的多肽是网蛋白靶向多肽；所述的放射性核素标记的多肽含有双功能螯合剂偶联的网蛋白靶向多肽和放射性核素。

较好的，所述的放射性核素标记的PTP多肽，通过先将PTP多肽与双功能螯合剂偶、再标记放射性核素得到。

较好的，所述的多肽的氨基酸序列是KTLLPTP。更好的，其结构为：

。

较好的，所述双功能螯合剂选自但不限于HYNIC、DTPA、DOTA或NOTA。其中，

HYNIC，是指6-肼基烟酸，其结构为：

。

DTPA，是指二乙基三胺五乙酸，其结构为：

。

DOTA，是指1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸，其结构为：

。

NOTA，指2,2',2''-(1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三基)三乙酸，其结构为：

。

较好的，所述放射性核素选自⁶⁸Ga、¹⁸F[AlF]、¹¹¹In、⁶⁷Ga、⁶⁴Cu、¹⁸⁸Re、¹⁷⁷Lu或⁹⁰Y中的一种或者几种。其中，¹¹¹In和⁶⁷Ga可用于核医学SPECT显像，肿瘤诊断；¹⁸F[AlF]、⁶⁸Ga和⁶⁴Cu可用于核医学PET显像，作为肿瘤诊断；¹⁸⁸Re、¹⁷⁷Lu和⁹⁰Y可用于核医学核素治疗药物，用于肿瘤治疗。

另一方面，本发明提供了一种所述的放射性核素标记的多肽的制备方法，包括：

（a）双功能螯合剂偶联的网蛋白靶向多肽；和

（b）使用放射性核素标记（a）获得的双功能螯合剂偶联的网蛋白靶向将多肽。

较好的，所述的网蛋白靶向多肽是PTP多肽。双功能螯合剂偶联PTP多肽时，PTP多肽溶于螯合剂修饰过程中常规使用的溶剂，然后加入双功能螯合剂。PTP多肽与双功能螯合剂的摩尔比可以为1：（0.5-2），例如，1：0.5，1：0.8，1：1，1：1.2，1：1.4，1：1.6，1：1.8，1：2等。偶联反应通常可以在室温进行，例如15-30℃，可以根据温度调节反应时间，也可以根据反应成分的组成和用量调整偶联反应的时间和温度，以确认其化学纯度（例如使用HPLC方法）大于95％时可以结束偶联反应。然后可以根据所使用的螯合剂和标记目的选择放射性核素并进行标记反应，标记过程可以按照常规标记方法配置相关试剂并调整反应条件，以放射性化学纯度大于或等于95％之时终止标记反应。

具体的，所述的制备方法可以按照以下步骤完成：

(1) 取PTP多肽溶于N ,N-二甲基甲酰胺，加入双功能螯合剂进行多肽修饰；PTP多肽与双功能螯合剂的摩尔比为1：（0.5-2）；室温反应2-6小时后，使用高效液相色谱仪分离纯化，冻干，并确认其化学纯度大于95％。

(2) 配制以下物质：

步骤(1)所得双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液1 mg/mL，

EDDA溶液20 mg/mL，以0.1 M NaOH为溶液，

Tricine溶液40 mg/mL，以0.2 M PBS为溶液，pH = 5.8-6.3，

SnCl₂溶液1 mg/mL，以0.1 M HCl为溶液，和

放射性核素50-200 mCi/mL。

(3) 将50-200 μL双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液与0.5 mL EDDA溶液和0.5mL Tricine溶液混合，再加入25 μL SnCl₂溶液和0.5-1 mL 放射性核素，95-110 ℃反应10-20分钟；放射性化学纯度大于95％时终止反应。

或者，上述双功能螯合剂修饰的PTP多肽也可以如下方法制备：

(1) 取PTP多肽溶于N ,N-二甲基甲酰胺，加入双功能螯合剂进行多肽修饰；PTP多肽与双功能螯合剂的摩尔比为1；（0.5-2）；室温反应2-6小时后，使用高效液相色谱仪分离纯化，冻干，并确认其化学纯度大于95％；

(2) 配制以下物质：

步骤(1)所得双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液1 mg/m，

醋酸钠缓冲液0.1 M，pH = 4.6-5.1，和

放射性核素50-200 mCi/mL；

(3) 20-50 μL双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液，与65-100 μL醋酸钠缓冲液混合，0.5-1 mL放射性核素，85°C反应15-60分钟；反应结束进行纯化，确认纯化后的放射性核素标记的多肽的放射性化学纯度大于或者等于95％。

其中，EDDA

PBS是磷酸缓冲液，可以使用放射性核素标记过程中常用或者溶解Tricine的常规PBS配方。例如，可以使用以下配方：

本发明还提供了上述放射性核素标记的PTP多肽的制备方法，包括以下步骤：

(1) 取PTP多肽100 μmol溶于100 μL N ,N-二甲基甲酰胺中，加入双功能螯合剂120 μmol，进行多肽修饰；室温反应4小时后，使用高效液相色谱仪(HPLC)离纯化，冻干，最后经高效液相色谱-质谱联用仪(HPLC-MS)鉴定，并确认其化学纯度大于95％；

(2) 配制步骤(1)所得双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液1 mg/mL，EDDA溶液20mg/mL（0.1 M NaOH溶液），Tricine溶液40 mg/mL（0.2 M PBS，pH = 6.0），SnCl₂溶液1 mg/mL（0.1 M HCl溶液），放射性核素50-200 mCi/mL；

(3) 50-200 μL双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液，与0.5 mL EDDA溶液和0.5mL Tricine溶液，再加入25 μL SnCl₂溶液和0.5-1 mL 放射性核素，100 °C反应15分钟；反应结束，Radio-HPLC测定放射性化学纯度大于95％，即得。

较好的，步骤(1)中所述双功能螯合剂为HYNIC或DTPA，所述的双功能螯合剂修饰的PTP多肽为HYNIC-PTP或DTPA-PTP。

较好的，步骤(2)中所述放射性核素选自¹⁸⁸Re或¹¹¹In。

本发明还提供了上述放射性核素标记的PTP多肽的第二种制备方法，其制备方法包括以下步骤：

(1) 取PTP多肽100 μmol溶于100 μL N ,N-二甲基甲酰胺中，加入双功能螯合剂120 μmol和二异丙基乙胺120 μmol，进行多肽修饰；室温反应2小时后，使用高效液相色谱仪(HPLC)离纯化，冻干，最后经高效液相色谱-质谱联用仪(HPLC-MS)鉴定，并确认其化学纯度大于95％；

(2) 配制步骤(1)所得双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液1 mg/mL，醋酸钠缓冲液0.1 M (pH = 4.8)，放射性核素50-200 mCi/mL；

(3) 20-50 μL双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液，与65-100 μL醋酸钠缓冲液混合，0.5-1 mL放射性核素，85°C反应15-60分钟；反应结束，Radio-HPLC进行纯化，纯化后放射性化学纯度大于95％，即得。

具体的，步骤(1)中所述双功能螯合剂为DOTA或NOTA，所述的双功能螯合剂修饰的PTP多肽为DOTA-PTP或NOTA-PTP。

具体的，步骤(2)中所述放射性核素选自¹¹¹In、⁹⁰Y、¹⁷⁷Lu、¹⁸F[AlF]、⁶⁷Ga、⁶⁸Ga或⁶⁴Cu。

本发明中放射性核素标记的PTP多肽的制备方法，可以通过本领域的常规手段制备获得。例如，采用固相合成方法制备PTP多肽，双功能螯合剂HYNIC、DTPA、DOTA或NOTA均为放射性药物领域常规应用，放射性核素从专业的公司购买。

另一方面，本发明还提供了所述的放射性核素标记的多肽的应用，所述的应用是所述的放射性核素标记的多肽在构建核医学分子探针、或者制备诊断或者治疗的药物中的应用。

本发明使用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜对本发明中PTP多肽进行了靶向性定性和定量研究，发现PTP对多种肿瘤具有靶向性。CCK-8实验评价了未标记放射性核素的PTP多肽的细胞相容性。放射性核素标记PTP多肽后，得到了核医学分子探针或治疗药物。建立裸鼠皮下肿瘤模型，进行SPECT显像实验，评价放射性核素标记的PTP多肽的肿瘤显像效果。结果显示，本发明的PTP多肽具备较好的肿瘤细胞特异性；未标记放射性核素的PTP多肽具有良好的细胞相容性；放射性核素标记的PTP多肽在多种皮下肿瘤中显示出良好靶向性和核医学显像效果，并且体内清除快，在核医学诊断和治疗方面具有临床潜力。

当反射性核素是¹¹¹In或者⁶⁷Ga时，所述的应用是放射性核素标记的多肽用于核医学SPECT显像，或者在制备诊断肿瘤的药物中的应用。

当反射性核素是¹⁸F[AlF]、⁶⁸Ga和⁶⁴Cu时，所述的应用是放射性核素标记的多肽用于核医学PET显像，或者在制备诊断肿瘤的药物中的应用。

当反射性核素是¹⁸⁸Re、¹⁷⁷Lu和⁹⁰Y时，所述的应用是放射性核素标记的多肽在制备核医学核素治疗和/或肿瘤治疗的药物中的应用。

再一方面，本发明提供了一种核医学分子探针，所述的核医学分子探针含有所述的放射性核素标记的多肽。

本发明还提供了一种显影剂，所述的显影剂是诊断Plectin蛋白高表达所导致疾病的显像剂；所述的显影剂含有所述的放射性核素标记的多肽。所述应用包括在制备诊断Plectin蛋白高表达肿瘤显像剂中的应用；或在制备生物靶向Plectin蛋白高表达肿瘤放射性药物中的应用。

本发明还提供了一种药物，所述的药物是治疗Plectin蛋白高表达所导致肿瘤的药物；所述的药物含有所述的放射性核素标记的多肽。较好的，所述的药物是用于生物靶向Plectin蛋白高表达肿瘤的治疗药物，其含有本发明的上述放射性核素标记的PTP多肽。

本发明具备以下有益效果：

(1) 本发明提供了放射性核素标记的具有靶向Plectin蛋白的PTP多肽；本发明的PTP多肽对多种肿瘤具有靶向性、良好的肿瘤细胞特异性和细胞相容性。

(2) 本发明提供的放射性核素标记的PTP多肽，可在体内结合肿瘤Plectin蛋白，聚集在肿瘤组织，通过核医学诊断核素，实现肿瘤核医学显像目的。本发明放射性核素标记的PTP多肽在多种皮下肿瘤中显示出良好靶向性和核医学显像效果，并且体内清除快，可成为新的显影剂。

(3) 本发明提供的放射性核素标记的PTP多肽，也可通过核医学治疗核素，实现肿瘤核医学治疗目的。本发明放射性核素标记的PTP多肽体内清除快，在核医学治疗和抗肿瘤方面具有临床潜力。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是流式细胞术测定PTP多肽靶向性结果图；

图2是激光共聚焦显微镜测定PTP多肽靶向性结果图；

图3是CCK-8测定PTP多肽细胞相容性结果；

图4是⁶⁸Ga-DOTA-PTP的Radio-HPLC谱图；

图5是⁶⁸Ga-DOTA-PTP的TLC谱图；

图6是⁶⁸Ga-DOTA-PTP体外稳定性；

图7是⁶⁸Ga-DOTA-PTP在皮下U87胶质瘤和BxPC-3胰腺肿瘤小动物PET/CT显像图。

具体实施方式

本发明提供了前述制备方法得到的放射性核素标记的PTP多肽。还涉及PTP多肽构建的核医学分子探针或治疗药物。所述核医学分子探针或治疗药物由PTP多肽与双功能螯合剂(chelator)和放射性核素(radionuclide)得到，即radionuclide-chelator-PTP；所述PTP多肽氨基酸序列为KTLLPTP。

所述放射性核素标记的PTP多肽应用包括放射性核素标记的PTP多肽在制备诊断Plectin蛋白高表达肿瘤的显像剂中的应用；所述应用还包括放射性核素标记的PTP多肽在制备生物靶向Plectin蛋白高表达肿瘤的药物中的应用。

下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。

实施例1

流式细胞术测定PTP靶向性：

将C6细胞（大鼠神经胶质瘤）悬液加入六孔板内，每孔加入2x10⁵个/mL, 于无菌细胞培养箱中（37℃，5% CO₂）静置培养24小时。弃去各孔内旧培养基，在C6细胞中加入含异硫氰酸荧光素(FITC)标记的PTP多肽（FITC-PTP）的新鲜的不完全培养基1mL: FITC-PTP的浓度设置为0、0.5、1、2、5、10、20和40 μM（每个浓度设三个副孔），PBS作为对照组，加样结束后将细胞置于培养箱中继续孵育4小时。收集细胞后在流式细胞仪上机测定各组细胞的平均荧光信号强度。

结果显示随着FITC-PTP的浓度逐渐增高，C6细胞的相对荧光强度也呈正比例增高。当FITC-PTP的浓度为40 μM时，C6细胞的相对荧光强度达95%，表明FITC-PTP与C6细胞结合具有饱和性。因此，FITC-PTP与C6细胞有较强的靶向性，参见图1。

实施例2

激光共聚焦显微镜测定PTP靶向性：

将正常肺上皮BESB -2B细胞、胰腺癌BxPC-3细胞、胶质瘤C6、U87细胞、非小细胞肺癌A549细胞及三阴性乳腺癌4T1细胞悬液加入六孔板内，每孔加入2x10⁵个/mL, 于无菌细胞培养箱中（37℃，5% CO₂）静置培养24小时。吸弃各皿内的旧培养基，加入1mL 含10 μMFITC-PTP的新鲜的不完全培养基于六种不同细胞的共聚焦皿内,在六种不同细胞的共聚焦皿内加入1mL的PBS作为阴性对照。加样结束后将细胞置于将细胞置于培养箱中继续孵育4小时。向各皿的玻底滴加200 μL 4%多聚甲醛，固定20分钟左右。PBST洗净后，在较暗的环境中向各皿的玻底滴加200 μL DAPI，细胞核染色5分钟，最后置于激光共聚焦显微镜下观察各皿内细胞的荧光亮度，并采集荧光图像。

结果显示相较于正常肺上皮BESA-2B细胞，胶质瘤C6、U87细胞、乳腺癌4T1细胞、胰腺癌BxPC-3和非小细胞肺癌A549细胞都有较高的绿色荧光信号。表明了FITC-PTP能被五种不同的恶性肿瘤特异性摄取，参见图2。

实施例3

CCK-8测定PTP多肽细胞相容性：

将BESB-2B和C6细胞均匀铺至两个96孔板内，在培养箱内静止培养过夜。吸弃96孔板各孔内的旧培养基，加入10 μL不同浓度的双功能螯合剂HYNIC修饰的PTP多肽（HYNIC-PTP多肽），浓度梯度为0、1、5、10、20、50、100和200 μg/mL,同时，设立PBS对照组，以上各组均设立6个副孔，加样结束后置于培养箱中静置培养24小时。弃去各孔内的旧培养基，向96孔板中每孔加入含10 μLCCK-8溶液的100 μL新鲜培养基溶液。继续孵育1.5-2小时后，用酶标仪（450 nm）测定96孔板内各孔的吸光度。

结果显示经过不同浓度梯度的HYNIC-PTP处理24小时后，正常肺上皮BESA-2B细胞和C6细胞存活率都在95%以上。由此表明多肽浓度为0-200 μg/mL内，HYNIC-PTP多肽具有良好的细胞相容性，参见图3。

实施例4

放射性核素标记的PTP多肽制备和放射性化学纯度测定：

⁶⁸Ga标记PTP多肽具体步骤如下：

用醋酸钠溶液溶解双功能螯合剂DOTA修饰的PTP多肽（DOTA-PTP多肽），浓度为1mg/mL；从⁶⁸Ge/⁶⁸Ga发生器淋洗下新鲜⁶⁸GaCl₃，取2 mL与130 μL DOTA-PTP多肽溶液混合，100℃反应10分钟，得到⁶⁸Ga -DOTA-PTP；Radio-HPLC和TLC测定放射性化学纯度。

结果表明，制⁶⁸Ga -DOTA-PTP的方法简单、高效，放射性化学纯度均大于95%，参见图4。

实施例5

放射性核素标记的PTP多肽的体外稳定性评价：

分别取100 μL ⁶⁸Ga -DOTA-PTP与900 μL PBS溶液（pH = 7.4）室温下混合或900 μL血清于37℃混合，测定1、2、4和6 小时放化纯，评价体外稳定性；TLC方法为溶液点样硅胶板，以50%乙腈为流动相展开。

结果显示，⁶⁸Ga -DOTA-PTP在室温PBS和37 ºC血清中，3小时放射性化学纯度没有明显变化，表明⁶⁸Ga -DOTA-PTP体外稳定性良好，参见图5。

实施例6

放射性核素标记的PTP多肽的体内生物分布试验：

皮下C6肿瘤裸鼠尾静脉注射^99mTc-HYNIC-PTP（100 μL，20 μCi），分别于注射后0.5、1、2和4小时处死裸鼠，每个时间点3只，取血、肿瘤、心、肺、肉、脾脏、小肠、肝脏和肾脏，称重，计算每克组织百分注射剂量率（% ID/g）；同样方法，测定了^99mTc-HYNIC-PTP在皮下4T肿瘤裸鼠体内的生物分布。

结果显示，^99mTc-HYNIC-PTP在4T1和C6皮下肿瘤裸鼠体内的生物分布情况类似，肿瘤组织有明显的摄取；放射性主要聚集在肾脏和膀胱，提示显像剂通过泌尿******，而肝脏、脾脏、心脏及软组织等显影微弱；血液清除快，有利于短时间内成像和降低体内辐射，参见图6。

实施例7

皮下肿瘤小动物PET/CT成像：

皮下荷胰腺癌BxPC-3和胶质瘤U87裸鼠每组3只，经尾静脉注射⁶⁸Ga-DOTA-PTP(200 μL，200 μCi)，注射1小时后进行小动物PET/CT显像。

结果显示，⁶⁸Ga-DOTA-PTP在U87胶质瘤裸鼠和BxPC-3胰腺癌裸鼠体内生物分布良好，肿瘤有明显摄取；⁶⁸Ga-DOTA-PTP主要在肾脏和膀胱有浓聚，提示显像剂通过泌尿******，而肝脏、脾脏、心脏及软组织等显影微弱，甲状腺区未见放射性摄取，表明⁶⁸Ga-DOTA-PTP能有效显示肿瘤组织，参见图7。

以上所述，仅为本申请的具体实施方式，但本申请的保护范围并不局限于此，任何熟悉本领域技术的技术人员在本申请公开的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本申请的保护范围之内。因此，本申请的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

SEQUENCE LISTING

<110> 上海市第一人民医院；宁夏医科大学；宁夏医科大学总医院

<120> 放射性核素标记的PTP多肽及其应用

<130> 20220224

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 7

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> 人工序列

<400> 1

Lys Thr Leu Leu Pro Thr Pro

1 5

Claims

1.一种放射性核素标记的多肽，其特征在于，所述的多肽是网蛋白靶向多肽；所述的放射性核素标记的多肽含有双功能螯合剂偶联的网蛋白靶向多肽和放射性核素。

2.根据权利要求1所述的放射性核素标记的多肽，其特征在于，所述的多肽的氨基酸序列是KTLLPTP；或者

所述双功能螯合剂选自HYNIC、DTPA、DOTA或NOTA；

所述放射性核素选自⁶⁸Ga、¹⁸F[AlF]、¹¹¹In、⁶⁷Ga、⁶⁴Cu、¹⁸⁸Re、¹⁷⁷Lu或⁹⁰Y中的一种或者几种。

3.根据权利要求1所述的放射性核素标记的多肽，其特征在于，

所述的多肽是PTP多肽，其结构为：

；

或者

所述的双功能螯合剂选自以下物质：HYNIC，是指6-肼基烟酸，其结构为：

；

或者

DTPA，是指二乙基三胺五乙酸，其结构为：

；

或者

；

或者

。

4.权利要求1至3任一项所述的放射性核素标记的多肽的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括：

（a）双功能螯合剂偶联的网蛋白靶向多肽；和

（b）使用放射性核素标记（a）获得的双功能螯合剂偶联的网蛋白靶向多肽。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1) 取PTP多肽溶于N ,N-二甲基甲酰胺，加入双功能螯合剂进行多肽修饰；PTP多肽与双功能螯合剂的摩尔比为1:（0.5-2）；室温反应2-6小时后，使用高效液相色谱仪分离纯化，冻干，并确认其化学纯度大于95％；

(2) 配制以下物质：

步骤(1)所得双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液1 mg/mL，

EDDA溶液20 mg/mL，以0.1 M NaOH为溶液，

Tricine溶液40 mg/mL，以0.2 M PBS为溶液，pH = 5.8-6.3，

SnCl₂溶液1 mg/mL，以0.1 M HCl为溶液，和

放射性核素50-200 mCi/mL；

(3) 将50-200 μL双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液与0.5 mL EDDA溶液和0.5 mLTricine溶液混合，再加入25μL SnCl₂溶液和0.5-1 mL 放射性核素，95-110℃反应10-20分钟；以至目标产物放射性化学纯度大于或者等于95％时终止反应。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1) 取PTP多肽溶于N ,N-二甲基甲酰胺，加入双功能螯合剂进行多肽修饰；PTP多肽与双功能螯合剂的摩尔比为1：（0.5-2）；室温反应2-6小时后，使用高效液相色谱仪分离纯化，冻干，并确认其化学纯度大于95％；

(2) 配制以下物质：

步骤(1)所得双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液1 mg/m，

醋酸钠缓冲液0.1 M，pH = 4.6-5.1，和

放射性核素50-200 mCi/mL；

(3) 20-50 μL双功能螯合剂修饰的PTP多肽水溶液，与65-100 μL醋酸钠缓冲液混合，0.5-1 mL放射性核素，85℃反应15-60分钟；反应结束进行纯化，确认纯化后的放射性核素标记的多肽的放射性化学纯度大于或者等于95％。

7.权利要求1至3任一项所述的放射性核素标记的多肽的应用，其特征在于，所述的应用是所述的放射性核素标记的多肽在构建核医学分子探针、或者制备诊断或者治疗的药物中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，

当放射性核素是¹¹¹In或者⁶⁷Ga时，所述的应用是放射性核素标记的多肽用于核医学SPECT显像，或者在制备诊断肿瘤的药物中的应用；

当放射性核素是¹⁸F[AlF]、⁶⁸Ga和⁶⁴Cu时，所述的应用是放射性核素标记的多肽用于核医学PET显像，或者在制备诊断肿瘤的药物中的应用；或者

9.一种核医学分子探针，其特征在于，所述的核医学分子探针含有权利要求1至3任项所述的放射性核素标记的多肽。

10.一种显影剂，其特征在于，所述的显影剂是诊断Plectin蛋白高表达所导致疾病的显像剂；所述的显影剂含有权利要求1至3任一项所述的放射性核素标记的多肽。

11.一种药物，其特征在于，所述的药物是治疗Plectin蛋白高表达所导致肿瘤的药物，并且所述的药物含有权利要求1至3任一项所述的放射性核素标记的多肽。