CN115429732A - 一种玫瑰花发酵滤液及其发酵工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种玫瑰花发酵滤液，制备原料至少包括：玫瑰花，复合乳酸菌液，碳源，维生素，水，所述复合乳酸菌液，碳源，维生素的重量比为（0.2‑2）：（2‑8）：（0.5‑1）。本发明所述玫瑰花发酵滤液，通过植物乳杆菌、嗜热链球菌、青春双岐杆菌、长双岐杆菌的组合作为复合乳酸菌液，著提升了玫瑰花有益成分的溶出和转化，同时促进益生菌的代谢产物的产生，使功效玫瑰花发酵滤液具有较好的功效性能。玫瑰发酵滤液具有较高的固形物含量、总酚含量、游离氨基酸含量。并且采用33‑40℃的发酵温度和4.5‑6.5的发酵pH，发酵条件温和，植物活性成分结构不被破坏，避免了提取方法造成的活性成分流失。

Description

一种玫瑰花发酵滤液及其发酵工艺
技术领域
本发明涉及一种玫瑰花发酵滤液及其发酵工艺，具体涉及化妆品原料开发及生产领域。
背景技术
玫瑰属于蔷薇科植物分类，玫瑰花中含有多糖，萜类，酚类物质，黄酮类物质，花色苷等组分，可以作为食物具有良好的口感，作为花卉具有欣赏价值，并且还可以做成化妆品，具有收敛肌肤，抗肌肤氧化的效果。目前现有的玫瑰处理多采用提取的方式，会破坏有效成分的分子结构，造成有效成分的提取率降低，有效成分利用率不高的问题。
中国发明专利CN201510639300公开了一种玫瑰发酵原浆及其制备方法与应用，将玫瑰干和酵母菌混合，并进行发酵得到玫瑰发酵原浆，但是发明采用单一菌种进行发酵，制备的发酵原浆中有效成分含量较低，得到的自由基清除效果不佳。中国发明专利CN201810984810公开了一种植物乳杆菌在制备乳酸菌玫瑰花发酵饮料中的应用，采用植物乳杆菌与玫瑰花混合发酵产生大量醇类，酯类物质，能够增加发酵液的香气和风味，改善饮料的营养价值，但是不适合应用于梳妆品领域。
发明内容
为了制备一种有效成分溶出率高，抗氧化效果好的玫瑰发酵滤液，本发明的第一个方面提供了一种玫瑰花发酵滤液，制备原料至少包括：玫瑰花，复合乳酸菌液，碳源，维生素，水，所述复合乳酸菌液，碳源，维生素的重量比为（0.2-2）：（2-8）：（0.5-1），所述复合乳酸菌液为植物乳杆菌、嗜热链球菌、青春双岐杆菌、长双岐杆菌的组合，重量比为（2-6）：（0.2-1）：（2-4）：（0.2-0.5）。
申请人在实验过程中发现复合乳酸菌液，碳源和维生素采用（0.2-2）：（2-8）：（0.5-1）的重量比可以使玫瑰发酵滤液中含有较高的总酚，游离氨基酸，黄酮，花色苷含量，提升玫瑰发酵滤液的抗氧化活性。猜测可能的原因是：在优选的重量比下，复合乳酸菌液中的菌种大量繁殖消耗碳源，为菌种的发酵提供营养物质，低于优选的重量范围菌种繁殖数量较少，发酵效果不佳，超出优选的重量范围，碳源留存较多，反而会带来糖基化效应不利于玫瑰发酵滤液的抗氧化作用。申请人进一步发现在优选的重量比范围内，可以维持复合乳酸菌菌种的最佳发酵条件，有利于植物乳杆菌、嗜热链球菌、青春双岐杆菌、长双岐杆菌和玫瑰花的双向发酵，发酵期间微生物分泌出各种酶，破坏细胞壁，将细胞内的黄酮类物质释放出来，并且发酵会引起抗氧化成分结构上的变化，形成具有更强给电子能力的成分，显著提升抗氧化，清除氧化自由基的能力。并且发酵过程中可以将糖基化酚类组分去糖基化，从而使其抗氧化性进一步增强，更有效地终止自由基反应。
作为一种优选的实施方式，所述玫瑰（rosa）花为玫瑰花花蕾，所述玫瑰花选自紫枝玫瑰、重瓣玫瑰、含苞玫瑰中的一种或几种的组合。
作为一种优选的实施方式，所述玫瑰花的产地选自济南平阴、山东菏泽、河北承德中的一个或几个的组合。
作为一种优选的实施方式，所述玫瑰花花蕾为未开花的花苞。
作为一种优选的实施方式，所述植物乳杆菌、嗜热链球菌、青春双岐杆菌、长双岐杆菌的重量比为（3-5）：（0.5-0.9）：（2.5-3.5）：（0.3-0.4）。
作为一种优选的实施方式，所述碳源选自糖类、油脂、有机酸、有机酸酯、小分子醇、无机碳源中的一种或几种的组合。
作为一种优选的实施方式，其特征在于，所述糖类选自单糖源、双糖源、多糖源中的一种或几种的组合，优选的，所述糖类选自葡萄糖、海藻糖、蔗糖、蜂蜜中的一种或几种的组合。
作为一种优选的实施方式，所述制备原料以重量份计包括：玫瑰花3-6份，复合乳酸菌液0.2-2份，碳源2-8份，维生素0.5-1份，低聚果糖0.5-1份，防腐剂0.5-1.0份，水70-85份。
作为一种优选的实施方式，所述防腐剂为羟基苯乙酮和1,2-己二醇，优选的，对羟基苯乙酮和1,2-己二醇的重量比为（0.01-0.05）：（1-2）。进一步优选，对羟基苯乙酮和1,2-己二醇的重量比为0.01：1。
作为一种优选的实施方式，所述维生素为维生素C。
本发明的第二个方面提供了一种玫瑰花发酵滤液的发酵工艺，包括以下步骤：
（1）将玫瑰花粉碎过筛，得到玫瑰花细粉；
（2）将玫瑰花细粉，碳源，维生素，低聚果糖，水混合均匀，高压灭菌后，得到灭菌培养基；
（3）将复合乳酸菌液扩大培养，得到二级种子液；
（4）将二级种子液转接到灭菌培养基中，恒温培养发酵，在摇床中搅拌混合，得到发酵液；
（5）发酵液高温超声处理并加入活性炭处理后，过滤得澄清液，加热处理加入防腐剂，混合均匀，得到玫瑰花发酵滤液。
作为一种优选的实施方式，所述步骤1中玫瑰花粉碎过40-80目筛。
作为一种优选的实施方式，所述复合乳酸菌液的初始浓度为106-108CFU/ml，二级种子液中复合乳酸菌液的浓度为108-109 CFU/ml。
作为一种优选的实施方式，所述复合乳酸菌液的最终浓度为109-1011CFU/ml。
作为一种优选的实施方式，所述复合乳酸菌液的发酵环境pH为4.5-6.5，发酵温度为33-40℃。
作为一种优选的实施方式，所述步骤3的具体过程如下：将复合乳酸菌液转接入MRS培养基（含1wt%低聚果糖）中，在35±1℃下静置培养，得到一级种子液，再将一级种子液在MRS培养基（含1wt%低聚果糖）中扩大培养，35±1℃下静置培养12-18小时，得到二级种子液。
作为一种优选的实施方式，所述步骤4的具体过程如下：将二级种子液转接到灭菌培养基中，35±1℃条件下恒温培养发酵，120-280r/min的搅拌速度摇床中培养24-72h，得到发酵液。
作为一种优选的实施方式，所述步骤5的具体过程如下：将发酵液加热至60-75℃，超声处理5-10min，加入质量分数为0.2-0.5%活性炭水溶液，300-600r/min的搅拌速度0.5-1.0h，再进行10um孔径滤板过滤去渣，得到澄清液体，澄清液体进行第二次高温80-90℃处理，冷却后加入防腐剂，混合均匀，得到玫瑰花发酵滤液。
作为一种优选的实施方式，制备得到的玫瑰花发酵滤液应用于梳妆用的配置品中。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
（1）本发明所述玫瑰花发酵滤液，复合乳酸菌液，碳源和维生素采用（0.2-2）：（2-8）：（0.5-1）的重量比可以使玫瑰发酵滤液中含有较高的总酚，游离氨基酸，黄酮，花色苷含量，提升玫瑰发酵滤液的抗氧化活性。
（2）本发明所述玫瑰花发酵滤液，通过植物乳杆菌、嗜热链球菌、青春双岐杆菌、长双岐杆菌的组合作为复合乳酸菌液，著提升了玫瑰花有益成分的溶出和转化，同时促进益生菌的代谢产物的产生，使功效玫瑰花发酵滤液具有较好的功效性能。玫瑰发酵滤液具有较高的固形物含量、总酚含量、游离氨基酸含量。
（3）本发明所述玫瑰花发酵滤液，采用33-40℃的发酵温度和4.5-6.5的发酵pH，发酵条件温和，植物活性成分结构不被破坏，避免了提取方法造成的活性成分流失。
（4）本发明所述玫瑰花发酵滤液，玫瑰花通过多种复合乳酸菌发酵得到，制备原料安全、环保，制备工艺安全、可控，制备的发酵滤液具有良好的无色或淡黄色澄清透明性能，具有显著的玫瑰花发酵乳香，气味怡人。
（5）本发明所述玫瑰花发酵滤液，应用于梳妆品中具有良好的抗氧化，细致收敛，祛除细纹效果，发酵原液中不添加香精等化学成分，确保产品对人体的安全性。
附图说明
图1为使用后皮肤平滑度变化数据图；
图2为使用后皮肤皱纹数量变化数据图；
图3为使用后皮肤弹性变化数据图；
图4为使用前和使用4周后皮肤皱纹数量变化效果图。
具体实施方式
实施例1
一种玫瑰花发酵滤液，制备原料以重量份计包括：玫瑰花5份，复合乳酸菌液1.2份，碳源7份，维生素0.8份，低聚果糖0.8份，防腐剂1.0份，水85份。
所述玫瑰花为济南平阴紫枝玫瑰花蕾。
所述复合乳酸菌液为植物乳杆菌、嗜热链球菌、青春双岐杆菌、长双岐杆菌的组合，重量比为4：0.8：3：0.3，混合菌群的初始浓度为107CFU/ml。
植物乳杆菌购自陕西中禾泰盛生物工程有限公司，嗜热链球菌、青春双岐杆菌、长双岐杆菌购自广州优科生物科技有限公司。
所述碳源为葡萄糖，所述维生素为维生素C。所述低聚果糖购自山东百龙创园生物科技股份有限公司。
所述防腐剂为羟基苯乙酮和1,2-己二醇，重量比为0.01：1。
一种玫瑰花发酵滤液的发酵工艺，包括以下步骤：
（1）将玫瑰花粉碎过70目筛，得到玫瑰花细粉；
（2）将玫瑰花细粉，碳源，维生素，低聚果糖，水混合均匀，在121℃， 0.1MPa条件下灭菌20min后，得到灭菌培养基；
（3）将复合乳酸菌液扩大培养，得到二级种子液，具体过程为：将复合乳酸菌液转接入MRS培养基（购自北京陆桥技术股份有限公司，含1wt%低聚果糖）中，在35℃下静置培养48h，得到一级种子液，再将一级种子液在MRS培养基（含1wt%低聚果糖）中扩大培养，35℃下静置培养16h，得到二级种子液，其中复合乳酸菌液的浓度为109CFU/ml；
（4）将二级种子液转接到灭菌培养基中，35℃条件下恒温培养发酵，200r/min的搅拌速度摇床中培养48h，得到发酵液；
（5）将发酵液加热至70℃，超声处理8min，加入质量分数为0.3%的活性炭水溶液，400r/min的搅拌速度1h，再进行10um孔径滤板过滤去渣，得到澄清液体，澄清液体进行第二次高温85℃处理，冷却后加入防腐剂，混合均匀，得到玫瑰花发酵滤液。
实施例2
一种玫瑰花发酵滤液，制备原料以重量份计包括：玫瑰花6份，复合乳酸菌液2份，碳源8份，维生素1份，低聚果糖1份，防腐剂1.0份，水85份。所述玫瑰花为山东菏泽重瓣玫瑰花蕾。其余步骤同实施例1。
实施例3
一种玫瑰花发酵滤液，制备原料以重量份计包括：玫瑰花3份，复合乳酸菌液0.2份，碳源2份，维生素0.5份，低聚果糖0.5份，防腐剂0.5份，水70份。所述玫瑰花为河北承德紫枝玫瑰花蕾。其余步骤同实施例1。
实施例4
一种玫瑰花发酵滤液及其发酵工艺，具体步骤同实施例1，不同点在于制备原料以重量份计包括：玫瑰花5份，复合乳酸菌液1.0份，碳源13份，维生素0.3份，低聚果糖0.8份，防腐剂1.0份，水85份。
实施例5
一种玫瑰花发酵滤液及其发酵工艺，具体步骤同实施例1，不同点在于制备原料以重量份计包括：玫瑰花5份，复合乳酸菌液2.2份，碳源1.5份，维生素1.3份，低聚果糖0.8份，防腐剂1.0份，水85份。
实施例6
一种玫瑰花发酵滤液及其发酵工艺，具体步骤同实施例1，不同点在于所述复合乳酸菌液为植物乳杆菌、嗜热链球菌、青春双岐杆菌的组合，重量比为3：0.5：2.5。
实施例7
一种玫瑰花发酵滤液及其发酵工艺，具体步骤同实施例1，不同点在于所述复合乳酸菌液为植物乳杆菌、青春双岐杆菌、长双岐杆菌的组合，重量比为5：3.5：0.4。
实施例8
一种玫瑰花发酵滤液及其发酵工艺，具体步骤同实施例1，不同点在于所述复合乳酸菌液为嗜热链球菌，青春双岐杆菌，长双岐杆菌的组合，重量比为0.9：2.5：0.3。
性能测试
1.有效成分含量测试：参考Folin-Ciocalten法测试实施例1-8的总酚含量。采用分光光度法，测定总黄酮含量。参考GB/T5009.7-2008《食品中还原糖的测定》测定实施例1-8发酵后的总糖含量。参考GB/T8314-2013《茶游离氨基酸总量的测定》，测试游离氨基酸的总量。测试结果见表1。
2.自由基清除率：测试对-OH羟基自由基，DPPH化学自由基，脂质过氧化物的半数清除率，半数清除率IC50表示自由基清除率达到50%时的抗氧化剂使用量，IC50越小说明抗氧化剂的抗氧化能力越强。清除自由基能力的测定：将自由基贮备液稀释至质量浓度为51.54mg/L使用。在试管中依次加入 4.0mL自由基溶液和 1.0mL水混匀后用1cm比色皿在517nm波长处测吸光值（A）记为A0；加入 4.0mL自由基溶液和1.0mL待测试液混匀后在黑暗处静置 20min测定值记为Ai；加入4.0mL无水乙醇溶液和1.0mL待测试液混匀后测定值记为Aj按下式计算自由基清除率。清除率IC50（％）＝［1－（Ai－Aj）/ A0］ ×100％，测试结果见表2。
3.细致收敛肌肤25-55岁女性志愿者（n=30）使用含质量分数5%的实施例1玫瑰花发酵滤液的精华乳，测试4周效果。5%玫瑰花发酵滤液对皮肤肤色有很好的均衡和提亮效果，志愿者面部皮肤皱纹得到舒展的同时，肤色亮度提升10.0-25.0%；纹理更加细腻，非平滑点数量下降显著，平滑度提升45.0-55.0%，肌肤更显年轻。平滑点变化数据图见图1，效果图见图4。
玫瑰花精华乳
Figure DEST_PATH_IMAGE001
4.祛除细纹延缓衰老25-55岁女性志愿者（n=30）使用含质量分数5%的实施例1玫瑰花发酵滤液的精华乳，测试4周效果。皱纹数量下降25%-40%，皱纹深度变浅18%-39.5%。眼部肌肤的弹性明显提升。皱纹数量变化数据图见图2；肌肤弹性变化数据图见图3。
表1
Figure DEST_PATH_IMAGE002
表2
Figure DEST_PATH_IMAGE003

Claims (10)

1.一种玫瑰花发酵滤液，其特征在于，制备原料至少包括：玫瑰花，复合乳酸菌液，碳源，维生素，水，所述复合乳酸菌液，碳源，维生素的重量比为（0.2-2）：（2-8）：（0.5-1）；所述复合乳酸菌液为植物乳杆菌、嗜热链球菌、青春双岐杆菌、长双岐杆菌的组合，重量比为（2-6）：（0.2-1）：（2-4）：（0.2-0.5）。
2.根据权利要求1所述玫瑰花发酵滤液，其特征在于，所述玫瑰花为玫瑰花花蕾，所述玫瑰花选自紫枝玫瑰、重瓣玫瑰、含苞玫瑰中的一种或几种的组合。
3.根据权利要求1所述玫瑰花发酵滤液，其特征在于，所述玫瑰花的产地选自济南平阴、山东菏泽、河北承德中的一个或几个的组合。
4.根据权利要求1所述玫瑰花发酵滤液，其特征在于，所述植物乳杆菌、嗜热链球菌、青春双岐杆菌、长双岐杆菌的重量比为（3-5）：（0.5-0.9）：（2.5-3.5）：（0.3-0.4）。
5.根据权利要求1所述玫瑰花发酵滤液，其特征在于，所述碳源选自糖类、油脂、有机酸、有机酸酯、小分子醇、无机碳源中的一种或几种的组合。
6.根据权利要求5所述玫瑰花发酵滤液，其特征在于，所述糖类选自单糖源、双糖源、多糖源中的一种或几种的组合，所述糖类选自葡萄糖、海藻糖、蔗糖、蜂蜜中的一种或几种的组合。
7.根据权利要求1所述玫瑰花发酵滤液，其特征在于，所述制备原料以重量份计包括：玫瑰花3-6份，复合乳酸菌液0.2-2份，碳源2-8份，维生素0.5-1份，低聚果糖0.5-1份，防腐剂0.5-1.0份，水70-85份。
8.一种根据权利要求7所述玫瑰花发酵滤液的发酵工艺，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将玫瑰花粉碎过筛，得到玫瑰花细粉；
（2）将玫瑰花细粉，碳源，维生素，低聚果糖，水混合均匀，0.05-0.1MPa高压灭菌后，得到灭菌培养基；
（3）将复合乳酸菌液扩大培养，得到二级种子液；
（4）将二级种子液转接到灭菌培养基中，恒温培养发酵，在摇床中搅拌混合，得到发酵液；
（5）发酵液60-75℃高温超声处理并加入活性炭处理后，过滤得澄清液，加热处理加入防腐剂，混合均匀，得到玫瑰花发酵滤液。
9.根据权利要求8所述玫瑰花发酵滤液的发酵工艺，其特征在于，所述复合乳酸菌液的初始浓度为106-108CFU/ml，二级种子液中复合乳酸菌液的浓度为108-109 CFU/ml。
10.根据权利要求8所述玫瑰花发酵滤液的发酵工艺，其特征在于，所述步骤5的具体过程如下：将发酵液加热至60-75℃，超声处理5-10min，加入质量分数为0.2-0.5%活性炭，300-600r/min的搅拌速度0.5-1.0h，再进行10um孔径滤板过滤去渣，得到澄清液体，澄清液体进行第二次高温80-90℃处理，冷却后加入防腐剂，混合均匀，得到玫瑰花发酵滤液。
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