CN115336553A - 一种开角型青光眼疾病动物模型的构建方法与应用 - Google Patents
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Abstract
一种开角型青光眼疾病动物模型的构建方法与应用，从青光眼致病机理上模拟氧化损伤诱导开角型青光眼的发生，该动物建模方法成功率高，并具有与人类开角型青光眼相似的以下特点：房角开放，小梁网发生氧化损伤，房水流出通道纤维化改变及高眼压。本发明能很好地解决了激素诱导法存在的建模成功率差异较大且涨幅较小的弊端，本发明的动物开角型青光眼模型的建模效果优于目前已有的其他开角型动物模型，具有更加简单、稳定、周期短且重复性高的优点。
Description
技术领域
本发明涉及疾病动物模型技术领域，具体涉及一种开角型青光眼疾病动物模型的构建方法与应用。
背景技术
青光眼是全球首位不可逆致盲性眼病，预计到2040年，患者数量将超过1.1亿。其中原发性开角型青光眼发病较为隐匿,如早期未及时诊治，可导致视野进行性丧失，严重影响患者的生活质量，其原因可能在于房水经小梁网途径流出时阻力增加，引起病理性眼压升高，导致视网膜神经节细胞受损。目前原发性开角型青光眼的发病机制复杂且未完全明晰，但已有诸多研究表明，氧化损伤是导致其主要的危险因素。
现今采用较多的开角型青光眼模型，依据构建方式主要分为基因诱导型和操作干预型。基因诱导型模型动物模型制作技术要求高，价格昂贵，成功率低。目前较为常用的做法是操作诱发高眼压模型，多用化学试剂诱导，如***、苯扎溴铵。使用***造模多模拟激素性青光眼，建模成功率差异较大，而苯扎溴铵应用于眼部则更适用于眼表药物毒性的研究。目前已存在的多种啮齿类动物开角型青光眼动物模型都有一定的缺陷，无法满足目前对开角型青光眼研究的需求，因而寻求一种新的建模方式是十分必要的。
发明内容
为了解决现有开角型青光眼模型的缺陷与不足，本发明提供了一种开角型青光眼疾病动物模型的构建方法与应用，与人类开角型青光眼眼部特征更相似、建立诱导周期短、成功率高且稳定、操作简便，解决了激素诱导法无法完全模拟人类开角型青光眼眼部表现的问题。
本发明采用的技术解决方案是：一种开角型青光眼疾病动物模型的构建方法，通过下述的方法中的任意一种构建：
(1)20μL的0.1％叔丁基过氧化氢(tBHP)滴于动物眼部，使其在眼表停留30-40秒，滴眼频率为一日两次；或
(2)20μL的0.1％叔丁基过氧化氢(tBHP)注射于动物眼表结膜下，注射频率为一周三次，两次注射间隔为1-2天。
所述的动物模型的构建方法的构建期均为1-28天。
所述的动物为C57BL/6J小鼠或SD大鼠。
叔丁基过氧化氢在制备构建开角型青光眼疾病动物模型的诱导药物上的应用。
所述的诱导药物为眼部滴剂或注射剂。
所述的诱导药物中叔丁基过氧化氢的浓度为0.1％。
本发明的有益效果是：本发明提供了一种开角型青光眼疾病动物模型的构建方法与应用，从青光眼致病机理上模拟氧化损伤诱导开角型青光眼的发生，该动物建模方法成功率高，并具有与人类开角型青光眼相似的以下特点：房角开放，小梁网发生氧化损伤，房水流出通道纤维化改变及高眼压。本发明能很好地解决了激素诱导法存在的建模成功率差异较大且涨幅较小的弊端，本发明的动物开角型青光眼模型的建模效果优于目前已有的其他开角型动物模型，具有更加简单、稳定、周期短且重复性高的优点。
附图说明
图1为实施例1C57BL/6J小鼠使用0.1％tBHP滴眼28天内眼压波动图。
图2为实施例2SD大鼠使用0.1％tBHP滴眼28天内眼压波动图。
图3为C57BL/6J小鼠眼前节结构的代表性图；其中图3A为C57BL/6J小鼠PBS滴眼；图3B为C57BL/6J小鼠0.1％tBHP滴眼；图3C为免疫荧光显示C57BL/6J小鼠使用0.1％tBHP滴眼后较对照组TGF-β、α-SMA表达增加。
图4为SD大鼠眼前节结构的代表性图；其中图4A为SD大鼠PBS滴眼；图4B为SD大鼠0.1％tBHP滴眼；图4C为免疫荧光显示SD大鼠使用0.1％tBHP滴眼后较对照组TGF-β、α-SMA表达增加。
具体实施方式
以下结合附图和下述实施方式进一步说明本发明，应理解，附图和下述实施方式仅用于说明本发明，而非限制本发明。
实施例1：C57BL/6J小鼠应用0.1％tBHP滴眼后眼压升高
予C57BL/6J小鼠进行0.1％tBHP滴眼，结果如图1所示，发现小鼠眼压自建模后第2天开始升高，在观察期4-28天内保持稳定。
实施例2：SD大鼠应用0.1％tBHP滴眼后眼压升高
予SD大鼠进行0.1％tBHP滴眼，结果如图2所示，发现大鼠眼压自建模后第2天开始升高，在观察期4-28天保持稳定。
实施例3：C57BL/6J小鼠应用0.1％tBHP滴眼后小梁网硬度增加
予C57BL/6J小鼠进行0.1％tBHP滴眼，结果如图3所示，小鼠的房角开放，其小梁网组织与对照组相比结构更加致密,且纤维化相关蛋白TGF-β、α-SMA表达增加。
实施例4：SD大鼠应用0.1％tBHP滴眼后小梁网硬度增加
予SD大鼠进行0.1％tBHP滴眼，结果如图4所示，大鼠的房角开放，其小梁网组织与对照组相比结构更加致密,且纤维化相关蛋白TGF-β、α-SMA表达增加。
结论
本发明从青光眼致病机理上模拟氧化损伤诱导开角型青光眼的发生，其眼部的病理生理改变与人类开角型青光眼类似：房角开放，小梁网发生氧化损伤，纤维化改变增加，导致其硬度增大，眼压升高。通过采用叔丁基过氧化氢(tert-Butylhydroperoxide,tBHP)诱导小鼠小梁网发生氧化损伤，房水流出通道纤维化改变及高眼压，得到的动物开角型青光眼模型具有成功率高，建模周期短，眼压涨幅明显，简单稳定的优点。
各位技术人员须知：虽然本发明已按照上述具体实施方式做了描述，但是本发明的发明思想并不仅限于此发明，任何运用本发明思想的改装，都将纳入本专利专利权保护范围内。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种开角型青光眼疾病动物模型的构建方法，其特征在于，通过下述的方法中的任意一种构建：
(1)20μL的0.1％叔丁基过氧化氢(tBHP)滴于动物眼部，使其在眼表停留30-40秒，滴眼频率为一日两次；或
(2)20μL的0.1％叔丁基过氧化氢(tBHP)注射于动物眼表结膜下，注射频率为一周三次，两次注射间隔为1-2天。
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述的动物模型的构建方法的构建期均为1-28天。
3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述的动物为C57BL/6J小鼠或SD大鼠。
4.叔丁基过氧化氢在制备构建开角型青光眼疾病动物模型的诱导药物上的应用。
5.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的诱导药物为眼部滴剂或注射剂。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的诱导药物中叔丁基过氧化氢的浓度为0.1％。
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|---|---|
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Citations (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102258518A (zh) * | 2010-05-28 | 2011-11-30 | 中国科学院上海药物研究所 | 石杉碱甲在制备治疗青光眼和/或缺血诱发的视神经损伤的药物中的用途 |
| CN102579335A (zh) * | 2012-04-10 | 2012-07-18 | 广东宏盈科技有限公司 | 一种阿奇霉素滴眼液 |
| US20140178308A1 (en) * | 2011-07-29 | 2014-06-26 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Method for increasing the intraocular pressure in an animal |
| CN107530319A (zh) * | 2015-02-26 | 2018-01-02 | 春天生技药品股份有限公司 | 用于治疗眼疾的化合物 |
| CN109045049A (zh) * | 2018-06-15 | 2018-12-21 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | 红景天苷及其衍生物在制备眼科纤维化细胞外基质蛋白异常疾病的抑制剂药物中的应用 |
| KR20190054607A (ko) * | 2017-11-14 | 2019-05-22 | 가톨릭대학교 산학협력단 | 정상안압 녹내장 동물 모델의 제조방법 |
| CN110585196A (zh) * | 2018-06-13 | 2019-12-20 | 郭涛 | 一种治疗及预防眼科疾病的药物及其应用 |
| KR20200030214A (ko) * | 2018-09-12 | 2020-03-20 | 재단법인 대구경북첨단의료산업진흥재단 | 자성 마이크로비드의 안방 내 주입을 통한 토끼의 녹내장 모델 제작방법 |
| CN111135301A (zh) * | 2020-01-16 | 2020-05-12 | 罗辉 | No和/或no供体在制备预防和/或辅助治疗开角型青光眼中的药物中的应用和药物 |
| CN112007044A (zh) * | 2019-09-10 | 2020-12-01 | 四川大学 | 一种预防视网膜神经节细胞氧化应激和湿性黄斑病变的药物 |
| CN113133431A (zh) * | 2021-02-25 | 2021-07-20 | 中南大学 | 慢性高眼压合并长眼轴动物模型的建立方法、模型及应用 |
| CN113273546A (zh) * | 2021-02-25 | 2021-08-20 | 中南大学 | 聚桂醇在制备慢性高眼压动物模型中的应用及动物模型 |
| CN113519461A (zh) * | 2021-07-06 | 2021-10-22 | 江西中洪博元生物技术有限公司 | 伴刀豆球蛋白a诱导的小鼠干眼症模型的构建方法及应用 |
| CN113632765A (zh) * | 2021-03-31 | 2021-11-12 | 中山大学中山眼科中心 | 视网膜新生血管疾病动物模型、构建方法及其应用 |
-
2022
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Patent Citations (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102258518A (zh) * | 2010-05-28 | 2011-11-30 | 中国科学院上海药物研究所 | 石杉碱甲在制备治疗青光眼和/或缺血诱发的视神经损伤的药物中的用途 |
| US20140178308A1 (en) * | 2011-07-29 | 2014-06-26 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Method for increasing the intraocular pressure in an animal |
| CN102579335A (zh) * | 2012-04-10 | 2012-07-18 | 广东宏盈科技有限公司 | 一种阿奇霉素滴眼液 |
| CN107530319A (zh) * | 2015-02-26 | 2018-01-02 | 春天生技药品股份有限公司 | 用于治疗眼疾的化合物 |
| KR20190054607A (ko) * | 2017-11-14 | 2019-05-22 | 가톨릭대학교 산학협력단 | 정상안압 녹내장 동물 모델의 제조방법 |
| CN110585196A (zh) * | 2018-06-13 | 2019-12-20 | 郭涛 | 一种治疗及预防眼科疾病的药物及其应用 |
| CN109045049A (zh) * | 2018-06-15 | 2018-12-21 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | 红景天苷及其衍生物在制备眼科纤维化细胞外基质蛋白异常疾病的抑制剂药物中的应用 |
| KR20200030214A (ko) * | 2018-09-12 | 2020-03-20 | 재단법인 대구경북첨단의료산업진흥재단 | 자성 마이크로비드의 안방 내 주입을 통한 토끼의 녹내장 모델 제작방법 |
| CN112007044A (zh) * | 2019-09-10 | 2020-12-01 | 四川大学 | 一种预防视网膜神经节细胞氧化应激和湿性黄斑病变的药物 |
| CN111135301A (zh) * | 2020-01-16 | 2020-05-12 | 罗辉 | No和/或no供体在制备预防和/或辅助治疗开角型青光眼中的药物中的应用和药物 |
| CN113133431A (zh) * | 2021-02-25 | 2021-07-20 | 中南大学 | 慢性高眼压合并长眼轴动物模型的建立方法、模型及应用 |
| CN113273546A (zh) * | 2021-02-25 | 2021-08-20 | 中南大学 | 聚桂醇在制备慢性高眼压动物模型中的应用及动物模型 |
| CN113632765A (zh) * | 2021-03-31 | 2021-11-12 | 中山大学中山眼科中心 | 视网膜新生血管疾病动物模型、构建方法及其应用 |
| CN113519461A (zh) * | 2021-07-06 | 2021-10-22 | 江西中洪博元生物技术有限公司 | 伴刀豆球蛋白a诱导的小鼠干眼症模型的构建方法及应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 沈志华等: "灯盏花素抗叔丁基过氧化氢诱导原代大鼠视神经节细胞凋亡", 中华眼视光学与视觉科学杂志, vol. 20, no. 8, pages 454 - 460 * |
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| Shahidullah et al. | Effects of timolol, terbutaline and forskolin on IOP, aqueous humour formation and ciliary cyclic AMP levels in the bovine eye |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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